8-(2,2,2-ТРИХЛОРАЦЕТИЛ)-9-(п-ХЛОРФЕНИЛ)-6,10-ДИОКСОСПИРО[4,5]ДЕК-8-ЕН-7-ОН, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВОМИКРОБНУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 2023 года по МПК C07D319/08 A61K31/357 A61P31/04 A61P31/10 

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса замещенных 4Н-1,3-диоксин-4-онов, а именно к 8-(2,2,2-трихлорацетил)-9-(п-хлорфенил)-6,10-диоксоспиро[4,5]дек-8-ен-7-ону (1), формулы:

,

обладающему противомикробной активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве противомикробного препарата.

Аналогами по структуре заявляемому соединению являются 9-(арил)-8-(3-(арил)хиноксалин-2-ил)-6,10-диоксаспиро[4.5]дек-8-ен-7-он 2а-с [Лисовенко Н.Ю., Масливец А.Н., Алиев З.Г. Пятичленные 2,3-диоксогетероциклы. XLVI. Взаимодействие 5-арил-4-хиноксалинил-2,3-дигидро-2,3-фурандионов с альдегидами и кетонами. Кристаллическая и молекулярная структура замещенного 5-хиноксалинил-4H-1,3-диоксин-2-спиро-2-адамантана / ЖОрХ, 2004, т. 40., вып. 7., с. 1094-1098] формулы:

Противомикробная активность структурных аналогов (2а-с) не известна.

В качестве эталона сравнения противомикробной активности выбран антибактериальный препарат диоксидин [Падейская Е.Н. Антибактериальный препарат диоксидин: особенности биологического действия и значение в терапии различных форм гнойной инфекции // Инфекции и антимикробная терапия. - 2001. - №.5. - С. 105-155] и противогрибковый препарат флуконазол [Shilova I.B., Gus'kova Т.А., Glushkov R.G. Modern drugs for treating der matomycosis // Pharmaceutical Chemistry Journal. - 2004. - T. 38. - №.4. - C. 175-180.], которые широко применяются в лечебной практике и являются аналогами по действию.

Целью предлагаемого изобретения является поиск в ряду замещенных 4H-диоксин-4-онов веществ с выраженной противомикробной активностью. Поставленная задача достигается получением 8-(2,2,2-трихлорацетил)-9-(п-хлорфенил)-6,10-диоксоспиро[4,5]дек-8-ен-7-она 1, который обладает противомикробной активностью.

Заявляемое вещество 1 синтезируют взаимодействием 5-(4-хлорфенил)-4-(2,2,2-трихлорацетил)фуран-2,3-диона 3 [Lisovenko N.Y., Nasibullina E.R., Kharitonova S.S., Myshkina O.A. Simple Synthesis of Substituted 3-Hydroxyfuran-2(5H)-ones Synthesis, 2021, 53(11), pp. 1955-1961] с циклопентаноном при их кипячении в среде безводного n-ксилола с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Технический результат заключается в расширении арсенала средств воздействия на живой организм.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами:

Пример 1. Получение соединения 1.

В колбу помещали 0,002 моль 5-(4-хлорфенил)-4-(2,2,2-трихлорацетил)фуран-2,3-диона и 0,0022 моль циклопентанона, добавляли 10 мл абсолютного n-ксилола и кипятили 30 мин без доступа влаги воздуха. Затем отгоняли 2/3 растворителя, добавляли 1 мл гексана и охлаждали. Выпавший осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этилового спирта.

Выход 0,48 г (69%), бесцветный кристаллический осадок. Т_пл=122-125°С (этанол). ИК спектр, v, см^-1: 1734 (COCCl₃), 1717 (С=O). Спектр ЯМР ¹H, δ, м.д.: 2.10-2.52 (гр.с, 8Н, с-С₅Н₈), 7.58-7.60 (д, 2Н, J=8, С₆Н₄), 7.65-7.67 (д, 2Н, J=8, С₆Н₄), ЯМР ¹³С, δ, м.д.: 181.68, 166.16, 159.26, 139.72, 130.5, 129.5, 128.45, 116.9, 104.24, 96.36, 37.04, 23.35.

Полученное соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, хорошо растворимое в диэтиловом эфире, труднорастворимое в ацетонитриле, толуоле, этаноле.

Пример 2. Противомикробная активность соединения 1.

Для изучения антимикробной активности заявляемого соединения 1 использовали общепринятый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ - М.: И-во Медицина, 2005].

В качестве тест-микроорганизмов использовали Staphylococcus aureus (штамм 906), Escherichia coli (штамм 1257) и Candida albicans, РКПГУ 1353/1277. Культуры выращивали в пробирках на скошенной питательной среде (мясопептонный агар). Для приготовления рабочей взвеси микроорганизмов производили смыв выросшей культуры изотоническим раствором хлорида натрия и устанавливали плотность по стандарту мутности (ОСО) на 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2,5×10⁵ клеток/мл.

В лунках стерильного 96 луночного плоскодонного микропланшета готовили два параллельных ряда двукратных серийных разведений заявляемого соединения 1 в бульоне МПБ, Сабуро. В каждой лунке содержалось 150 мкл определенной концентрации испытуемого вещества и 150 мкл инокулята культуры. В последних рядах содержалась питательная среда и культура в равных объемах (контроль). Максимально испытанная концентрация соответствовала 1000,0 мкг/мл, минимальная - 1,0 мкг/мл. Микропланшет помещали в термостат спектрофотометра Epoch и замеряли оптическую плотности (ОП) при длине волны 540 нм. Через 24 часа и 7 суток вновь регистрировали ОП культуральной жидкости.

Результаты оценивали с помощью программного обеспечения Gen 5 спектрофотометра для микропланшет Epoch. Последняя лунка ряда с задержкой роста и показателями ОП равной оптической плотности контрольной лунки соответствует минимальной подавляющей концентрацией соединения.

Анализ полученных данных показал, что соединение 1 обладает противомикробным действием в отношении всех исследуемых культур. Соединение 1 обладает выраженным бактериостатическим действием в отношении бактерий S. aureus в концентрации 15.6 мкг/мл, бактерицидное действие наступает от концентрации в 31.2 мкг/мл, что активнее препарата сравнения в несколько раз.

Умеренное действие оказывает на культуры Е. coli и С.albicans, ингибирует рост в концентрации 250 мкг/мл и 125 мкг/мл, соответственно, гибель культур наступает от концентрации в 500 мкг/мл и 250 мкг/мл, соответственно.

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса замещенных 4Н-1,3-диоксин-4-онов, а именно к 8-(2,2,2-трихлорацетил)-9-(п-хлорфенил)-6,10-диоксоспиро[4,5]дек-8-ен-7-ону формулы 1. Технический результат изобретения заключается в расширении арсенала средств с противомикробной активностью. 1 табл., 2 пр.

8-(2,2,2-трихлорацетил)-9-(п-хлорфенил)-6,10-диоксоспиро[4,5]дек-8-ен-7-он (1) формулы

,

проявляющий противомикробную активность.