Новые азолы, содержащие монотерпеновые фрагменты, в качестве противогрибковых агентов широкого спектра действия Российский патент 2023 года по МПК C07D403/06 A61K31/496 A61P31/10 

Изобретение относится к области медицинской химии. Описываются новые производные триазола общей формулы I

где X¹, X² – галоген; R может быть 4-(проп-1-ен-2-ил)циклогекс-1-ен-1-ил)метил, 3,7-диметилоктил, 3,7-диметилокт-6-ен-1-ил, 3,7-диметилокт-2,6-диен-1-ил, (6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)метил или (6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)этил, включая их пространственные изомеры, обладающие противогрибковой активностью.

В настоящее время для лечения грибковых инфекций используются четыре класса противогрибковых средств (азолы, эхинокандины, полиены и аналоги пиримидина), которые имеют различные недостатки с точки зрения их токсичности, спектра действия, безопасности и фармакокинетических свойств. Азолы уже давно являются противогрибковыми средствами первой линии в борьбе с микозами (грибковыми инфекциями). Появление штаммов с лекарственной устойчивостью и связанное с этим увеличение смертности от системных микозов привело к разработке нового поколения противогрибковых средств широкого спектра действия на основе триазола и тетразола. Флуконазол, вориконазол, отесеконазол и итраконазол (Фиг. 1) относятся к числу применяемых в настоящее время азольных противогрибковых средств с системной доступностью и широким спектром действия [Clin Microbiol Infect. 2004, Pharmaceutics. 2022].

Задачей настоящего изобретения является разработка и создание новых эффективных противогрибковых средств, сочетающих азольное ядро и монотерпеновый фрагмент, перспективных для применения в клинической практике для терапии и/или профилактики инфекционных заболеваний.

Технический результат: получены новые производные азолов, содержащие монотерпеновый остаток, и показана их высокая противогрибковая активность широкого спектра действия.

Поставленная задача решается использованием в качестве противогрибкового средства новых соединений общей формулы I, у которых выявлена значительная противогрибковая активность широкого противогрибкового спектра действия против как флуканозол-чувствительных, так и флуконазол-устойчивых штаммов (например, эффективны против C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis), значения минимальных ингибирующих концентраций (МИК) для некоторых из соединений (<0.016 мкг/мл) в 100 раз превосходят значения МИК для препарата сравнения флуконазола (1 мкг/мл).

Соединения общей формулы I могут быть синтезированы взаимодействием оксиранов II с монотерпен-пиперазинами III (Фиг.2).

Соединения II могут быть синтезированы, например, из соответствующих кетонов IV по следующей схеме [Org. Biomol. Chem. 2015] Фиг.3.

Кетоны IV могут быть синтезированы из галоген-замещённых альфа-бромацетофенонов V и азолов VI в присутствие карбоната калия по следующей схеме [Org. Biomol. Chem. 2015] Фиг. 4

Соединения III могут быть синтезированы, например, из производных монотерпенов: переллилового альдегида VIIIa, миртеналя VIIIb, цитронеллаля VIIIc, 3,7-диметилоктаналя VIIId, геранилбромида VIIIe, мезилата нопола VIIIf в соответствии со следующей схемой [Journal of Medicinal Chemistry. 2001; European Journal of Medicinal Chemistry. 2009] Фиг.5.

Структура полученных соединений I подтверждена данными ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии высокого разрешения. Для выделения индивидуальных оптических изомеров соединений типа I можно использовать методы препаративной хиральной ВЭЖХ, а также кристаллизации с хиральными реагентами.

Минимальные ингибирующие концентрации соединений были определены согласно рекомендациям Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) [CLSI Document M27-A4. 2017]. Активность соединений была протестирована как минимум дважды против стандартных штаммов (Candida albicans ATCC 90028, Candida krusei ATCC 6258, Candida parapsilosis ATCC 90018) с использованием флуконазола в качестве положительного контроля. Грибковые патогены и инфекции вызывают растущую озабоченность со стороны здравоохранения во всем мире. Наибольшему риску подвержены люди с сопутствующими проблемами со здоровьем, такими как хронические заболевания легких, туберкулез, ВИЧ, рак и диабет или ослабленной иммунной системой. Системные грибковые инфекции имеют высокие показатели смертности — до 50% и ежегодно убивают около 2 миллионов человек [WHO. 2022].

Результаты тестирования соединений общей структуры I на противогрибковую активность приведены в таблице. Все представленные соединения проявили высокую противогрибковую активность в отношении C. albicans, C. krusei, C. parapsilosis, со значениями МИК до 100 раз ниже, чем значения МИК для препарата сравнения флуконазола.

Соединения общей формулы I, после проведения углубленных фармакологических исследований, могут использоваться для дальнейшей разработки новых высокоэффективных противогрибковых средств.

Ниже приводятся конкретные примеры реализации заявляемого технического решения.

Спектральные исследования выполнены в Химическом Сервисном Центре коллективного пользования СО РАН.

Пример 1. Синтез 2-(2,4-дифторфенил)-1-(4-(((S)-4-(проп-1-ен-2-ил)циклогекс-1-ен-1-ил)метил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола Ia (Фиг.6)

К 0.305 г (1.3 ммоль) соединения II в 15 мл этанола прибавили 0.354 г (1.6 ммоль) соединения IIIa и 0.320 г (3.2 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 6 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения Ia составил 40%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.12 (с, 1H, H-9), 7.75 (с, 1H, H-10), 7.51 (тд, J = 9.0, 6.6, 1H, H-4), 6.82 – 6.71 (м, 2H, H-1, H-3), 5.54 – 5.47 (м, 1H, H-18), 4.70 – 4.61 (м, 2H, H-24), 4.47 (д, J = 2.4, 2H, H-8), 3.03 (дд, J = 13.5, 1.8, 1H, H-11), 2.80 – 2.64 (м, 2H, H-16), 2.61 (д, J = 13.6, 1H, H-8’), 2.39 – 2.11 (м, 8H, H-12, H-13, H-14, H-15), 2.10 – 1.80 (м, 5H, H-22, H-19, H-20), 1.75 (ддт, J = 12.6, 4.6, 2.5, 1H, H-21), 1.68 (с, 3H, H-25), 1.44 – 1.29 (м, 1H, H-21’).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 163.87, 163.75, 161.39, 161.27, 160.11, 160.00, 157.66, 157.54, (C-2 и C-6), 150.86 (C-10), 149.80 (C-17), 144.52 (C-9), 134.23 (С-23), 129.25, 129.19, 129.16, 129.10, (C-4), 126.33, 126.29, 126.20, 126.16 (C-5), 124.27 (C-18), 111.51, 111.48, 111.31, 111.27 (C-3), 108.39 (C-24), 104.39, 104.12, 103.86 (C-1), 71.59, 71.54 (C-7), 65.21, 65.12 (C-16), 62.08, 62.04 (C-11), 56.34, 56.29 (C-8), 54.25 (C-12, C-14), 52.92 (C-13, C-15), 41.07, 41.10 (C-20, C-20ds), 30.50 (C-19), 27.52, 27.55 (C-22, C-22ds), 27.40, 27.47 (C-21, C-21ds), 20.62 (C-25).

Найдено: m/z=458.274 [М+H]⁺ (C₂₅H₃₄N₅OF₂)⁺. Вычислено: m/z=458.274.

Пример 2. Синтез 2-(2,4-дифторфенил)-1-(4-(((1R,5S)-6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)метил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола Ib (Фиг.7)

К 0.212 г (0.9 ммоль) соединения II в 15 мл этанола прибавили 0.236 г (1.1 ммоль) соединения IIIa и 0.222 г (2.2 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 6 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения Ib составил 50%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.10 и 8.11 : (c, 1H, H-9) и (c, 1H, H-9ds), 7.72 и 7.73 : (c, 1H, H-10) и (c, 1H, H-10ds), 7.49 (тд, J = 9.1, 8.6, 6.5, 1H, H-4), 6.75 (ддт, J = 11.4, 8.6, 2.3, 2H, H-1, H-3), 5.29 – 5.23 (м, 1H, H-18), 4.49 – 4.41 (м, 2H, H-8), 3.01 (ддд, J = 13.5, 4.7, 1.6, 1H, H-11), 2.81 – 2.71 (м, 1H, H-16), 2.69 – 2.57 (м, 2H, H-16’, H-11’), 2.35 – 2.10 (м, 11H, H-23’, H-12, H-13, H-14, H-15, H-19), 2.08 (тд, J = 5.6, 1.4, 1H, H-22), 2.04 – 1.99 (м, 1H, H-20), 1.20 (д, J = 1.6, 3H, H-24), 1.01 и 0.98 : (д, J = 8.6, 1H, H-23) и (д, J = 8.6, 1H, H-23ds), 0.73 и 0.72 : (с, 3H, H-25) и (с, 3H, H-25ds).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 163.37, 163.29, 161.72, 161.64, 159.64, 159.56, 158.00, 157.92 (C-2 и C-6), 150.79 (C-10), 144.87, 144.92 (C-17, C-17ds), 144.46, 144.48 (C-9, C-9ds), 129.17, 129.13, 129.11, 129.07 (C-4), 126.26, 126.24, 126.17 (C-5), 119.83, 119.89 (C-18), 111.40, 111.27 (C-3), 104.25, 104.08, 103.91 (C-1), 71.48, 71.55, 71.51 (C-7, C-7ds), 64.09, 64.04 (C-16), 61.98, 62.01, 62.06, 62.03 (C-11, C-11ds), 56.31, 56.28, 56.25 (C-8, C-8ds), 54.15 (C-12, C-14), 53.14 (C-13, C-15), 44.08, 44.20 (С-22, C-22ds), 40.67 (С-20), 37.74, 37.75 (С-21, C-21ds), 31.50, 31.52 (С-23, C-23ds), 31.13 (С-19), 26.03 (С-24, C-24ds), 20.83, 20.87 (С-25, C-25ds).

Найдено: m/z=458.272 [М+H]⁺ (C₂₅H₃₄N₅OF₂)⁺. Вычислено: m/z=458.272.

Пример 3. Синтез 2-(2,4-дифторфенил)-1-(4-(3,7-диметилокт-6-ен-1-ил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола Ic (Фиг.8)

К 0.075 г (0.3 ммоль) соединения II в 10 мл этанола прибавили 0.085 г (0.4 ммоль) соединения IIIa и 0.080 г (0.8 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 6 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения Ib составил 30%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.12 (с, 1H, H-9), 7.75 (с, 1H, H-10), 7.51 (тд, J = 9.0, 6.6, 1H, H-4), 6.87 – 6.67 (м, 2H, H-1, H-3), 5.29 (с, 1H, OH), 5.04 (дт, J = 8.8, 4.1, 1H, H-21), 4.57 – 4.38 (м, 2H, H-8), 3.03 (дд, J = 13.5, 1.7, 1H, H-11), 2.62 (д, J = 13.6, 1H, H-11’), 2.47 – 2.13 (м, 10H, H-12, H-13, H-14, H-15, H-16), 1.98 – 1.82 (м, J = 6.9, 2H, H-20), 1.63 (с, 3H, H-23), 1.55 (с, 3H, H-24), 1.47 – 1.04 (м, 5H, H-17, H-18, H-19), 0.82 (д, J = 6.3, 3H, H-25).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 163.86, 163.74, 161.38, 161.26, 160.08, 159.96, 157.63, 157.51 (C-2 и C-6), 150.90 (C-10), 144.52 (C-9), 131.07 (C-22), 129.22, 129.16, 129.13, 129.07 (C-4), 126.23, 126.20, 126.10, 126.07 (C-5), 124.60 (C-21), 111.52, 111.48, 111.31, 111.28 (C-3), 104.42, 104.16, 103.90 (C-1), 71.64, 71.58 (C-7), 62.08, 62.04 (C-11), 56.46 (C-16), 56.26, 56.21 (C-8), 54.22 (C-12, C-14), 53.18 (C-13, C-15), 37.04 (C-19), 33.62 (C-17), 30.88 (C-18), 25.59 (C-23), 25.29 (C-20), 19.53 (C-25), 17.51 (C-24).

Найдено: m/z=462.304 [М+H]⁺ (C₂₅H₃₈N₅OF₂)⁺. Вычислено: m/z=462.304.

Пример 4. Синтез 2-(2,4-дифторфенил)-1-(4-(3,7-диметилоктил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола Id (Фиг.9)

К 0.090 г (0.4 ммоль) соединения II в 10 мл этанола прибавили 0.079 г (0.3 ммоль) соединения IIId и 0.040 г (0.4 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 6 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения Id составил 30%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.12 (с, 1H, H-9), 7.75 (с, 1H, H-10), 7.56 – 7.46 (м, 1H, H-4), 6.81 – 6.73 (м, 2H, H-1, H-3), 4.53 – 4.43 (м, 2H, H-8), 3.03 (дд, J = 13.6, 1.7, 1H, H-11), 2.62 (д, J = 13.6, 1H, H-11’), 2.48 – 2.16 (м, 10H, H-12, H-13, H-14, H-15, H-16), 1.53 – 1.29 (м, 3H, H-18, H-19, H-22), 1.28 – 0.99 (м, 7H, H-19’, H-17, H-20, H-21), 0.81 (d, J = 6.6, 6H, H-23, H-24) 0.80 (d, J = 6.5, 3H, H-25).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 163.89, 163.77, 161.41, 161.29, 160.11, 160.00, 157.66, 157.54 (C-2 и C-6), 150.89 (C-10), 144.52 (C-9), 129.25, 129.19, 129.15, 129.09 (C-4), 126.25, 126.21, 126.12, 126.08 (C-5), 111.52, 111.49, 111.32, 111.29 (C-3), 104.42, 104.16, 103.90 (C-1), 71.72, 71.67 (C-7), 62.14, 62.10 (C-11), 56.53 (C-16), 56.30, 56.25 (C-8), 54.21 (C-12, C-14), 53.17 (C-13, C-15), 39.12 (C-21), 37.23 (C-20), 33.71 (C-19), 31.27 (C-18), 27.81 (C-22), 24.52 (C-17), 22.56 (C-24), 22.46 (C-23), 19.66, 19.64 (C-25 и С-25ds).

Найдено: m/z=464.321 [М+H]⁺ (C₂₅H₄₀N₅OF₂)⁺. Вычислено: m/z=464.321.

Пример 5. Синтез 2-(2,4-дифторфенил)-1-(4-(3,7-диметилокта-2,6-диен-1-ил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола Ie (Фиг.10)

К 0.058 г (0.25 ммоль) соединения II в 10 мл этанола прибавили 0.066 г (0.3 ммоль) соединения IIIe и 0.060 г (0.6 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 6 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения Id составил 68%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.10 (с, 1H, H-9), 7.73 (с, 1H, H-10), 7.49 (тд, J = 9.0, 6.6, 1H, H-4), 6.79 – 6.71 (м, 2H, H-1, H-3), 5.15 – 5.08 (м, 1H, H-17), 5.01 – 4.95 (м, 1H, H-21), 4.50 – 4.41 (м, 2H, H-8), 3.02 (дд, J = 13.5, 1.7, 1H, H-11), 2.90 – 2.80 (м, 2H, H-16), 2.61 (д, J = 13.6, 1H, H-11’), 2.43 – 2.12 (м, 8H, H-12, H-13, H-14, H-15), 2.06 – 1.87 (м, 4H, H-19, H-20), 1.58 (с, 3H, H-23), 1.55 (с, 3H, H-24), 1.52 (с, 3H, H-25).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 163.52, 163.43, 161.54, 161.44, 159.75, 159.65, 157.78, 157.69 (C-2 и C-6), 150.78 (C-10), 144.43 (C-9), 139.03 (C-18), 131.32 (C-22), 129.12, 129.08, 129.05, 129.00 (C-4), 126.12, 126.09, 126.01, 125.99 (C-5), 123.83 (C-21), 120.07 (C-17), 111.40, 111.38, 111.24, 111.21 (C-3), 104.28, 104.07, 103.86 (C-1), 71.60, 71.56 (C-7), 62.00, 61.97 (C-11), 56.17 (C-16), 56.17, 56.13 (C-8), 55.52 (C-12, C-14), 52.75 (C-13, C-15), 39.52 (C-19), 26.10 (C-20), 25.46 (C-23), 17.45 (C-25), 16.13 (C-24).

Найдено: m/z=460.289 [М+H]⁺ (C₂₅H₃₆N₅OF₂)⁺. Вычислено: m/z=460.289.

Пример 6. Синтез 2-(2,4-дифторфенил)-1-(4-(2-((1R,5S)-6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола If (Фиг.11)

К 0.123 г (0.5 ммоль) соединения II в 15 мл этанола прибавили 0.145 г (0.6 ммоль) соединения IIIf и 0.121 г (1.2 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 6 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения If составил 40%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.10 (д, J = 2.6, 1H, H-9), 7.73 (д, J = 1.4, 1H, H-10), 7.54 – 7.44 (м, 1H, H-4), 6.80 – 6.71 (м, 2H, H-1, H-3), 5.16 – 5.11 (м, 1H, H-19), 4.51 – 4.40 (м, 2H, H-8), 3.01 (ддд, J = 13.5, 4.7, 1.6, 1H, H-11), 2.60 (д, J = 13.6, 1H, H-11’), 2.41 – 1.97 (м, 16H, H-12, H-13, H-14, H-15, H-16, H-17, H-20, H-21, H-24’), 1.92 (тд, J = 5.6, 1.5, 1H, H-23), 1.20 (с, 3H, H-25), 1.06 (д, J = 8.5, 1H, H-24’), 0.74 (с, 3H, H-26).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 163.84, 163.72, 161.35, 161.23, 160.06, 159.94, 157.60, 157.49 (C-2 и C-6), 150.84 (C-10), 145.97 (C-18), 144.47 (C-9), 129.20, 129.14, 129.11, 129.05 (C-4), 126.19, 126.15, 126.06, 126.02 (C-5), 116.96 (C-19), 111.44, 111.24 (C-3), 104.38, 104.12, 103.86 (C-1), 71.68, 71.63 (C-7), 62.08, 62.04 (C-11), 56.36 (C-16), 56.22, 56.17 (C-8), 54.17 (C-12, C-14), 52.92 (C-13, C-15), 45.73 (С-23), 40.55 (С-21), 37.79 (С-22), 34.08 (C-17), 31.47 (С-24), 31.10 (С-20), 26.13 (С-25), 21.06 (С-26).

Найдено: m/z=472.289 [М+H]⁺ (C₂₆H₃₆N₅OF₂)⁺. Вычислено: m/z=472.289.

Пример 7. Синтез 2-(2,4-дихлорфенил)-1-(4-(2-((1R,5S)-6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)этил)пиперазин-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ола If-C (Фиг.12)

К 0.50 г (0.56 ммоль) соединения II-C в 10 мл этанола прибавили 0.170 г (0.72 ммоль) соединения IIIf и 0.14 г (1.4 ммоль) NEt₃. Реакционную смесь кипятили в течение 10 часов. После этого реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaCl (3x10 мл), органическую фазу сушили над Na₂SO₄. После растворитель отгоняли на ротационном испарителе. Целевое соединение было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле, в качестве элюента использовалась смесь гексан-этилацетат. Выход соединения If-C составил 48%. ЯМР спектры записаны для смеси диастереомеров (1:1), для отличающихся сигналов используется обозначение (H-1, H-1ds) и (C-1, C-1ds).

Спектр ЯМР ¹Н (400 Мгц, CDCl₃, δ, м.д., J/Гц): 8.12 (с, 1H, H-9), 7.76 (с, 1H, H-10), 7.69 (д, J = 8.5, 1H, H-1), 7.34 (д, J = 2.1, 1H, Н-4), 7.15 (дд, J = 8.6, 2.2, 1H, Н-3), 5.17 – 5.12 (м, 1H, H-19), 4.73 – 4.62 (м, 2H, H-8), 3.41 (д, J = 13.7, 1H, H-11), 2.64 (д, J = 13.7, 1H, H-11’), 2.40 – 2.18 (м, 11H, H-12, H-13, H-14, H-15, Н-16, H-24’), 2.18 – 2.10 (m, 2H, Н-20), 2.10 – 1.98 (m, 3H, Н-17, Н-21), 1.93 (тд, J = 5.6, 1.5, 1H, H-23), 1.20 (с, 3H, H-25), 1.07 (д, J = 8.5, 1H, H-24’), 0.75 (с, 3H, H-26).

Спектр ЯМР ¹³С (101 МГц, CDC1₃, δ, м.д.): 134.29, 130.90 (C-2 и C-6), 150.89 (C-10), 145.89 (C-18), 144.57 (C-9), 130.62 (C-4), 145.89 (C-5), 117.03 (C-19), 127.38 (C-3), 129.89 (C-1), 72.46 (C-7), 60.42 (C-11), 56.33 (C-16), 55.46 (C-8), 53.90 (C-12, C-14), 52.86 (C-13, C-15), 45.69 (С-23), 40.52 (С-21), 37.80 (С-22), 34.04 (C-17), 31.48 (С-24), 31.11 (С-20), 26.13 (С-25), 21.08 (С-26).

Найдено: m/z=504.232 [М+H]⁺ (C₂₆H₃₆N₅OCl₂)⁺. Вычислено: m/z=504.232.

Пример 8. Определение минимальной ингибирующей концентрации (МИК) в тесте микроразведений.

Противогрибковую активность соединений оценивали путем определения значений МИК (мкг/мл), самой низкой концентрации для полного ингибирования роста микроорганизмов, определяемой визуально, в отношении штаммов из Американской коллекции типовых культур (ATCC). C. albicans (ATCC 90028), C. krusei (ATCC 6258) и C. parapsilosis (ATCC 90018). Для этой цели был применен метод микроразведения в соответствии с протоколом Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) [CLSI Document M27-A4. 2017] с использованием флуконазола в качестве положительного контроля [Humphries et al. 2018]. Первоначально штаммы, которые хранились при температуре – 80 °C в глицерине, размораживали и дважды пересевали на декстрозный агар (RPMI 1640 broth), в буферном растворе 3-N-морфолинопропансульфоновой кислоты с pH 7.0). Конечная тестовая концентрация грибков составила 0.5 до 2.5 × 10³ КОЕ/мл. Флуконазол растворяли в стерильной деионизированной дистиллированной воде в концентрации 64–0.0625 мкг/мл. Исследуемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде и разбавляли дистиллированной водой так, чтобы конечные двукратные концентрации соединений, приготовленных в титрационном микропланшете, находились в пределах 1024–0.25 мкг/мл. Планшеты инкубировали при 35°С в течение 48 ч, а значения МИК определяли при визуальном осмотре роста грибков, значения МИК для соединений были определены из трех независимых экспериментов.

Литература

Maertens, J.A. History of the development of azole derivatives. Clin Microbiol Infect. 2004, 10, Suppl 1:1-10. doi: 10.1111/j.1470-9465.2004.00841.x.

Benedetto, Tiz D., Bagnoli, L., Rosati, O., Marini, F., Santi, C., Sancineto, L. FDA-Approved Small Molecules in 2022: Clinical Uses and Their Synthesis. Pharmaceutics. 2022, 14(11), 2538. doi: 10.3390/pharmaceutics14112538

Pore, V.S., Agalave, S.G., Singh, P., Shukla, P.K., Kumar, V., Siddiqi, M.I. Design and Synthesis of New Fluconazole Analogues. Org. Biomol. Chem. 2015, 13(23), 6551–6561. doi: 10.1039/C5OB00590F

Delarue, S., Girault, S., Maes, L., Debreu-Fontaine, M.-A., Labaeïd, M., Grellier, P., Sergheraert, C. Synthesis and in Vitro and in Vivo Antimalarial Activity of New 4-Anilinoquinolines. Journal of Medicinal Chemistry. 2001 44(17), 2827–2833. doi: 10.1021/jm010842o

Onajole, O.K., Govender, K., Govender, P., van Helden, P.D., Kruger, H.G., Maguire, G.E.M., Muthusamy, K., Pillay, M., Wiid, I., Govender, T. Pentacyclo-undecane derived cyclic tetra-amines: Synthesis and evaluation as potent anti-tuberculosis agents. European Journal of Medicinal Chemistry. 2009, 44(11), 4297–4305. doi: 10.1016/j.ejmech.2009.07.015

Clinical and Laboratory Standards Institute. Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts. Approved Standard. CLSI Document M27-A4. 2017, 4th ed. CLSI, Wayne, PA.

World Health Organization. (2022, October 25). WHO fungal priority pathogens list to guide research, development and public health action.

Таблица. Значения МИК для предлагаемых соединений в отношении грибов рода Candida.

Шифр Соединение МИК, мкг/мл C. albicans
(ATCC 90028) *C. krusei
(ATCC 6258) C. parapsilosis
(ATCC 90018) Ia 0.031 0.5 0.031 Ib <0.016 0.5 <0.016 Ic ≤0.03 2 0.06 Id ≤0.03 2 ≤0.03 Ie ≤0.03 4 0.06 If ≤0.03 0.5 ≤0.03 If-C ≤0.03 0.06 ≤0.03 Флуконазол 1 32 1

*флуконазол-устойчивый штамм

Изобретение относится к области медицинской химии и включает производное триазола общей формулы I или его пространственные изомеры. Где в формуле I X¹ и X² представляют собой галоген; R выбран из 4-(проп-1-ен-2-ил)циклогекс-1-ен-1-ил)метила, 3,7-диметилоктила, 3,7-диметилокт-6-ен-1-ила, 3,7-диметилокт-2,6-диен-1-ила, (6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)метил или (6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)этила. Технический результат - производные триазола, обладающие высокой противогрибковой активностью широкого спектра действия. 12 ил., 1 табл., 8 пр.

Соединение, представляющее собой производное триазола общей формулы I

,

где X¹, X² – галоген; R – 4-(проп-1-ен-2-ил)циклогекс-1-ен-1-ил)метил, 3,7-диметилоктил, 3,7-диметилокт-6-ен-1-ил, 3,7-диметилокт-2,6-диен-1-ил, (6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)метил, (6,6-диметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен-2-ил)этил, или его пространственные изомеры, обладающее противогрибковой активностью.