Способ лечения генитального микоплазмоза крупного рогатого скота Российский патент 2023 года по МПК A61D99/00 A61K35/26 A61K31/365 A61P31/04 A61P37/02 

Изобретение относится к ветеринарии, а в частности к способу лечения микоплазмоза крупного рогатого скота путем сочетанного применения антибиотика и иммуномодулятора на основе комплекса пептидов.

Генитальная форма микоплазмоза крупного рогатого скота - заболевание, вызываемое возбудителем Mycoplasma bovigenitalium, поражающим органы репродуктивного тракта коров (влагалище, матку, яйцеводы), что со временем приводит к бесплодию. Данное заболевание наносит существенный экономический ущерб животноводческим хозяйствам, складывающийся из недополучения приплода, увеличения расходов на проведение искусственного осеменения и затрат на лечение больных животных.

Для лечения животных, больных микоплазмозом, с точки зрения этиотропной терапии основная роль принадлежит антибиотикам. Известны способы лечения микоплазмоза крупного рогатого скота с применением антибиотиков следующих групп: тетрациклины, макролиды (Микоплазмозы животных / Под ред. Я.Р. Коваленко// М, «Колос», 1976. - 304 с).

Однако применение только этиотропной терапии, на практике, далеко не всегда дает ожидаемый эффект. С одной стороны, это связано с повышением устойчивости микоплазм к применяемым антибиотикам (Zbinden С. The immune response of bovine mammary epithelial cells to live or heat-inactivated Mycoplasma bovis / C. Zbinden, P. Pilo, J. Frey [et. al.] // Veterinary Microbiology Vol.179. - 2015. - P. 336). С другой стороны, причиной является биология микоплазм, позволяющая им эффективно уклоняться от некоторых факторов иммунитета. Так, вариабельность поверхностных антигенов позволяет* микоплазмам быстро ускользать от специфических антител (Razin, S. Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas. / S. Razin, D. Yogev, Y. Naot // Microbiol. Mol. Biol. Rev. Vol.62. - 1998. - P. 1094 - 1156), являясь мембранными паразитами они маскируются от макрофагов, а будучи фагоцитированными, могут длительно в них персистировать. Кроме того, небольшой размер микоплазм, позволяет им укрываться от фагоцитоза в складках цитоплазматической мембраны клетки (Борхсениус С.Н. Микоплазмы / С.Н. Борхсениус, О.А. Чернова // Л.: Наука, 1989. - С.48-104). Отдельные исследования указывают на способность микоплазм выделять иммуносупрессивные метаболиты (Pilo P. A metabolic enzyme as a primary virulence factor of Mycoplasma mycoides subsp.mycoides small colony/ P. Pilo, E.M. Vilei, E. Peterhans [et. al.] // J. Bacteriol. Vol.187. - 2005. - P. 6824 - 6831). Учитывая эти особенности влияния микоплазм на иммунную систему хозяина наиболее логичным решением является введение в схему лечения препаратов, модулирующих иммунологические реакции. С этой целью применялись препараты индукторы интерферона и лимфокины (Патент - 1838419 SU), стимуляторы фактора некроза опухоли в сочетании с индукторами интерферона (Патент RU 2219915 С1). Применение вышеуказанных препаратов вызывает стимуляцию только отдельных звеньев формирования иммунологической реакции в отношении микоплазм, тогда как остальные звенья остаются в угнетенном состоянии, что не обеспечивает развития полноценного иммунного ответа.

Наиболее широкое модулирующее воздействие на иммунную систему оказывают пептидные препараты, одним из которых является тималин. Тималин восстанавливает иммунитет, регулирует количество и соотношение Т- и Влимфоцитов и их субпопуляций, стимулирует реакции клеточного иммунитета, усиливает фагоцитоз, стимулирует процессы регенерации, а также улучшает течение процессов клеточного метаболизма (Хавинсон В.Х. Мета-анализ иммуномодулирующей активности лекарственного пептидного препарата тималина /В.Х. Хавинсон, А.А. Корнеенков, И.Г. Попович и др.// Современные проблемы здравоохранения и медицинской статистики. - 2020. -№4.-С.108-124).

В последние годы в качестве этиотропного лечения генитального микоплазмоза с высокой эффективностью применяют антибиотики группы макролидов - фармазин, тилмовет (Лещинский И.И. Макролиды - препараты выбора для борьбы с микоплазмозами животных / И.И. Лещинский // РВЖ СХЖ, 2009. - №1. - С.44-45), а также группы фторхинолонов -ципрофлоксацин, норфлокс.ацин (Красиков, А. П. Микоплазмозы человека и животных и их эпидемиологическое и эпизоотологическое значение /А.П. Красиков, Н.В. Рудаков. - Омск: ООО ИЦ «Омский научный вестник», 2015 -С.206-216).

Известны работы Васильева P.M. об использовании макролидного антибиотика траксовет (тулатромицин) при генитальном микоплазмозе у коров (Васильев P.M. Динамика показателей клеточного иммунитета у коров с генитальным микоплазмозом на фоне применения тулатромицина /P.M. Васильев// Актуальные вопросы ветеринарной медицины, материалы международной научной конференции, посвященной 100-летию кафедр клинической диагностики, внутренних болезней животных им. Синева А.В., акушерства и оперативной хирургии. СПб. - 2022. - С.26-28., Васильев P.M. Динамика показателей неспецифической резистентности коров больных генитальным микоплазмозом на фоне терапии тулатромицином /P.M. Васильев// Нормативно-правовое регулирование в ветеринарии. - 2022. №2. -С.42-44), который и был выбран в качестве прототипа.

К недостаткам применения только антибиотика траксовет у коров с генитальным микоплазмозом, следует отнести его незначительное влияние на нормализацию функциональной активности иммунной системы, а в частности на классовый состав иммуноглобулинов и содержание Т- и В-лимфоцитов. Сохраняющееся после применения антибиотика иммунодефицитное состояние способствует возникновению рецидивов заболевания.

Техническим результатом является увеличение процента выздоровления животных и нормализация показателей, отражающих функциональную активность иммунной системы.

Технический результат достигается тем, что наряду с использованием этиотропного препарата траксовет (тулатромицин) дополнительно вводится пептидный иммуномодулятор широкого спектра действия - тималин.

Сущность изобретения заключается в том, что в качестве этиотропного препарата используется антибиотик траксовет 100 (100 мг препарата в 1 мл) из расчета 2,5 мг на 1 кг массы тела животного, подкожно, однократно, отличающийся тем, что животным дополнительно вводят иммуномодулятор тималин в дозе 0,1 мг на 1 кг массы тела животного, внутримышечно, дважды с интервалом 72 часа.

Траксовет (тулатромицин) - полусинтетический антибиотик группы макролидов широкого спектра действия, активен в отношении гамположительных, грамотрицательных бактерий и микоплазм.

Тималин - представляет собой комплекс пептидов, выделенных из тимуса крупного рогатого скота, способен восстанавливать нарушенную иммунологическую реактивность (регулирует количество и соотношение Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций, стимулирует реакции клеточного иммунитета, усиливает фагоцитоз).

Пример осуществления способа.

Для оценки эффективности предлагаемой схемы лечения на базе ЗАО «Осьминское» Сланцевского района Ленинградской области был проведен следующий эксперимент. Из крупного рогатого скота в возрасте 4-6 лет было сформировано 3 группы по 8 голов в каждой.

Первая группа - больные генитальным микоплазмозом коровы, для лечения которых использовали траксовет 100 в дозе 2,5 мг на 1 кг массы тела животного, подкожно, однократно.

Вторая группа - больные генитальным микоплазмозом коровы, для лечения которых использовали траксовет 100 в дозе 2,5 мг на 1 кг массы тела ^ животного, подкожно, однократно, и тималин из расчета 0,1 мг на 1 кг массы тела животного, внутримышечно, дважды с интервалом 72 часа.

Диагностика микоплазмоза проводилась путем взятия цитопрепарата с верхнего свода слизистой оболочки влагалища и выявления в нем генетического материала микоплазм методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с электрофоретической детекцией (Mycoplasma spp.). Серологическая типизация микоплазм осуществлялась в реакции непрямой гемагглютинации - установлена Mycoplasma bovigenitalium.

Третья группа - клинически здоровые коровы с отрицательным ПЦР тестом на Mycoplasma spp.служила для сравнения степени восстановления иммунологических показателей крови.

Контроль терапевтической эффективности схем лечения осуществлялся путем повторного тестирования экспериментальных животных методом ПЦР через 14 дней после начала терапии.

Контроль состояния иммунной системы осуществлялся по следующим показателям: содержание в сыворотке крови иммуноглобулинов классов G, М, А и их общее количество; абсолютное и относительное содержание в крови Т-и В-лимфоцитов; бактерицидная активность сыворотки крови; активность лизоцима сыворотки крови, фагоцитарная активность нейтрофилов. Перечисленные показатели у животных опытных групп определяли через 14 дней от начала введения препаратов.

На основании повторного ПЦР теста, проведенного через 14 дней от начала применения препаратов установлено, что в группе коров, для лечения которых использовали траксовет положительный тест на Mycoplasma spp.был у 2 коров из 8 (терапевтическая эффективность - 75%); в группе коров, где применяли траксовет в сочетании с тималином положительных тестов на Mycoplasma spp.не было (терапевтическая эффективность - 100%).

Эффективность восстановления иммунного статуса больных микоплазмозом коров при использовании различных схем лечения по классовому составу иммуноглобулинов (Таблица 1).

Эффективность восстановления иммунного статуса больных микоплазмозом коров при использовании различных схем лечения по абсолютному и относительному содержанию Т- и В-лимфоцитов (Таблица 2).

Эффективность восстановления иммунного статуса больных микоплазмозом коров при использовании различных схем лечения по показателям неспецифической резистентности (Таблица 3).

Таким образом, по сравнению с применением только траксовета больным генитальным микоплазмозом коровам, сочетанное применение траксовета и тималина повышает терапевтическую эффективность на 25%, и она достигает 100%.

Сочетанное применение траксовета и тималина приводит к повышению уровня Ig G на 66%, Ig М - на 40% и снижению повышенного количества Ig А - на 22% по сравнению с коровами, получавшими для лечения только траксовет. Следует отметить, что в группе коров получавших траксовет и тималин изучаемые показатели достигали уровня здоровых животных или даже несколько превышали его.

По сравнению с применением для лечения генитального микоплазмоза траксовета, сочетанное применение траксовета и тималина приводит к значительному улучшению показателей клеточного иммунитета. Так, относительное содержание Т-лимфоцитов увеличивается на 18%, а абсолютное содержание на. 36%; относительное содержание В-лимфоцитов -на 52%, абсолютное содержание - на 79%. Причем относительное и абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов у коров, которым применяли траксовет в сочетании с тималином эти показатели было даже выше, чем у клинически здоровых коров.

Применение траксовета в сочетании с тималином по сравнению с терапией только траксоветом оказывает более выраженное положительное влияние на показатели неспецифической резистентности. При сочетанной терапии бактерицидная активность сыворотки была выше на 14%, активность лизоцима сыворотки крови - на 26%, фагоцитарная активность нейтрофилов - на 14%, причем все изучаемые показатели достигали уровня клинически здоровых коров.

На основании проведенного эксперимента установлено, что предлагаемая схема лечения генитального микоплазмоза крупного рогатого скота обладает большей терапевтической эффективностью и способствует полному восстановлению функций иммунной системы.

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, терапии. Вводят антибиотик траксовет 100 в дозе 2,5 мг на 1 кг массы тела животного, подкожно, однократно. Дополнительно вводят иммуномодулятор тималин в дозе 0,1 мг на 1 кг массы тела животного, внутримышечно, дважды с интервалом 72 часа. Способ обладает большей терапевтической эффективностью и способствует полному восстановлению основных показателей, характеризующих функциональную активность иммунной системы, за счет комплексного применения траксовета 100 и тималина. 3 табл., 1 пр.

Способ лечения генитального микоплазмоза крупного рогатого скота, включающий введение антибиотика траксовет 100 в дозе 2,5 мг на 1 кг массы тела животного, подкожно, однократно, отличающийся тем, что животным дополнительно вводят иммуномодулятор тималин в дозе 0,1 мг на 1 кг массы тела животного, внутримышечно, дважды с интервалом 72 часа.