Изобретение относится к области органической химии, а именно к биологически активным (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((Е)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-дионам формулы:
где R=Н (а), СН3 (b)
обладающим противотуберкулезной активностью, что позволяет предположить их использование в фармакологии и в медицине в качестве лекарственных средств с противотуберкулезным эффектом.
Из уровня техники известны гибридные аналоги заявленных соединений - спиро-производные тиазолов, пирролов и пиридинов, обладающие противотуберкулезной активностью (P. Prasanna et al. / A regio- and stereoselective 1,3-dipolar cycloaddition for the synthesis of novel spiro-pyrrolothiazolyloxindoles and their antitubercular evaluation // European Journal of Medicinal Chemistry. - 2010. - №45. - 5653-5661).
Эталоном сравнения противотуберкулезной эффективности был выбран противотуберкулезный препарат пиразинамид (Y. Zhang, W.W. Yew / Механизмы развития лекарственной устойчивости у Mycobacterium tuberculosis // Международный журнал «Туберкулез и легочные заболевания». - 2011. - №1. 7-19), широко применяющийся в лечебной практике.
Задачей изобретения является поиск в ряду производных (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((Е)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-дионов веществ с выраженным противотуберкулезным действием и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача достигается получением (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((Е)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-дионов, которые обладают противотуберкулезной активностью.
Заявляемые соединения синтезируют путем взаимодействия 3-ароил-2,4-дигидро-1H-пирроло[2,1-с][1,4]бензоксазин-1,2,4-трионов (I а,b) с тиосемикарбазоном никотинового альдегида в соотношении 1:1 в среде безводного растворителя с выделением целевых продуктов (II а,b) по представленной схеме:
где R=Н(а), СН3 (b).
Процесс ведут при t=65°C при перемешивании в течение суток, а в качестве растворителя используют безводный 1,4-диоксан.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Получение (Z)-9-бензоил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((E)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-диона (IIa).
К раствору 1.0 ммоль 3-бензоил-1H-бензо[b]пирроло[1,2-d][1,4]оксазин-1,2,4-триона (Ia) в 10 мл безводного 1,4-диоксана добавляли 1.0 ммоль тиосемикарбазона никотинового альдегида. Реакционную массу перемешивали при t=65°C в течение 24 часов, образовавшийся осадок отфильтровывали. Выход 79%, т.пл. 208-210 С.Соединение (IIa) C25H17N5O5S.
Найдено, %: С, 60.53; N, 14.11; О, 16.16; S, 6.35
Вычислено, %: С, 60.11; N, 14.02; О, 16.01; S, 6.42
Соединение (IIa) - светло-желтое кристаллическое вещество, легкорастворимое в ДМСО, ДМФА, растворимое в дихлорметане, хлороформе, ацетоне, спиртах, нерастворимое в воде и алканах. Устойчиво при хранении в обычных условиях
В ИК спектре соединения (IIa), записанном в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний двух гидроксильных и одной амидной групп (3560, 3427 и 3186 см-1), двух лактамных и одной ароильной карбонильных групп (1746, 1707, 1637 см-1).
Спектр ЯМР 1Н (400 МГц, DM80-d6, δ, м.д.): 12.50 с (1Н), 9.71 с (1Н), 8.81 с (1Н), 8,65-8.55 м (1Н), 8,41 с (1H), 8.1.2-8.02 м (1Н), 7.87-7.73 м (2Н), 7.66-7.59 м (1Н), 7.54-7.42 м (3Н), 7.28 тд (J=8.2, 7.3, 1.7 Гц, 1Н), 7.02 дд (J=7.8, 1.7 Гц, 1Н), 6.96 дд (J=8.2, 1.3 Гц, 1H), 6.87 тд (J=7.6, 1.4 Гц, 1Н). Одна из ОН-групп невидима в спектре ЯМР 1Н.
Пример 2. Получение (Z)-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-9-(4-метилбензоил)-2-(((Е)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-диона (IIb).
К раствору 1.0 ммоль 3-(4-метилбензоил)-1Н-бензо[b]пирроло[1,2-d][1,4]оксазин-1,2,4-триона (Ib) в 10 мл безводного 1,4-диоксана добавляли 1.0 ммоль тиосемикарбазона никотинового альдегида. Реакционную массу перемешивали при t=65°C в течение 24 часов, образовавшийся осадок отфильтровывали. Выход 88%, т.пл. 206-208 С, Соединение (IIb) C26H19N5O5S.
Найдено, %: С, 60.62; N, 13.70; О, 15.51; S, 6.27
Вычислено, %; С, 60.81; N. 13.64; О, 15.58; S, 6.24
Соединение (IIb) - желтое кристаллическое вещество, легкорастворимое в ДМСО, ДМФА, растворимое в дихлорметане, хлороформе, ацетоне, спиртах, нерастворимое в воде и алкинах. Устойчиво при хранении в обычных условиях
В ИК спектре соединения (IIb), записанном в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний двух гидроксильных и одной амидной групп (3550, 3439 и 3200 см-1), двух лактамных и одной ароильной карбонильных групп (1732, 1708, 16344 см--1).
Спектр ЯМР 1Н (400 МГц, DMSO-d6, δ, м.д.): 12.53 с (1Н), 9.73 с (1Н), 8.81 с (1Н), 8,63-8.56 м (1Н), 8.40 с (1Н), 8.1.2-8.01 м (1Н), 7.76-7.69 м (2Н), 7.48-7.41 м (1Н), 7.35-7.25 м (3Н), 6.99 дд (J=23.2, 8.1, 1.5 Гц, 2Н), 6.87 тд (J=8.0, 7.4, 1.4 Гц, 1H), 2,39 с (3Н). Одна из ОН-групп невидима, в спектре ЯМР 1H.
Пример 3. Фармакологическое исследование (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((Е)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-д ионов.
Оценка туберкулостатической активности исследуемого вещества, проводилась методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде с использованием индикатора роста резазурина натриевой соли (J.-C. Palomino, A. Martin, М. Camacho, et al. / Resazurin Microtiter Assay Plate: Simple and Inexpensive Method for Detection of Drug Resistance in Mycobacterium tuberculosis // Antimicrobial. Agents and Chemotherapy. - 2002. - №8. 2720-2722).
В качестве тест-микроорганизма использовали штамм М. tuberculosis H37Rv АТСС 25618, полученного в ФБУН ГНЦ ПМБ «Государственная коллекция патогенных микроорганизмов и клеточных культур».
В лунках стерильного 96-луночного плоскодонного микропланшета готовили два параллельных ряда двукратных серийных разведений заявляемого соединения в питательной жидкой среде Мидлбрук 7Н, содержащую обогатительную добавку ВАСТЕС MGIT OADC (олеиновая кислота, альбумин, декстроза и каталаза). В каждой лунке содержалось 150 мкл определенной концентрации испытуемого вещества.
Из 21 дневной культуры М. tuberculosis H37Rv готовили бактериальную суспензию, которая была стандартизирована по оптическому стандарту мутности Фарланда №1 с использованием денситометра, после чего инокулят разводили 1:20 в питательной среде Мидлбрук 7Н9 и вносили в каждую лунку планшета по 150 мкл.
В последних рядах содержалась питательная среда и культура в равных объемах (контроль). Максимально испытанная концентрация соответствовала 1000 мкг/мл, минимальная - 1 мкг/мл.
Планшеты запечатывали в полиэтиленовые пакеты и инкубировали при 37°С в течение 8 суток. После чего в каждую лунку добавляли 30 мкл 0,01% раствора натрия резазурината, приготовленного в стерильной дистиллированной воде и культивировали еще 24 часа при 37°С, затем оценивали визуально изменение окраски резазурина. Изменение от синего до розового цвета указывает на снижение резазурина и, следовательно, рост микобактерий. МИК - минимальная ингибирующая концентрация химических веществ, при которой не происходило изменение цвета.
Анализ полученных данных показал, что соединения IIa, IIb обладают туберкулостатическим действием в отношении исследуемой культуры в концентрациях 500.0-1000.0 мкг/мл.
Заявляемые (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((Е)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-дионы могут найти применение в фармакологии в качестве потенциальных лекарственных средств с противотуберкулезными свойствами.
Изобретение относится к области органической химии и фармацевтики, а именно к применению соединений класса (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((E)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-дионов формулы
,
где R=H (a), CH3 (b), в качестве противотуберкулезного средства. Изобретение обеспечивает выраженный противотуберкулезный эффект. 1 табл., 3 пр.
Применение (Z)-9-ароил-8-гидрокси-6-(2-гидроксифенил)-2-(((E)-пиридин-3-илметилен)гидразоно)-1-тиа-3,6-диазоспиро[4.4]нон-8-ен-4,7-дионов общей формулы
,
где R=H (a), CH3 (b),
в качестве противотуберкулезного средства.
| P | |||
| Prasanna et al., A regio- and stereoselective 1,3-dipolar cycloaddition for the synthesis of novel spiro-pyrrolothiazolyloxindoles and their antitubercular evaluation | |||
| European Journal of Medicinal Chemistry, 2010, no.45, p.5653-5661 | |||
| Lukmanova, D | |||
| N | |||
| et al., Antinociceptive and antimicrobial activity of products from reactions of |
