ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, ПОДХОДЯЩИЕ ДЛЯ СУСТАВНОЙ ДОСТАВКИ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ СУСТАВНОЙ БОЛИ Российский патент 2023 года по МПК A61K9/127 A61K31/573 A61K31/58 A61K31/661 A61K47/24 A61K47/28 A61P19/02 

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Область техники

Настоящее раскрытие относится к фармацевтическим композициям, подходящим для суставной доставки, и способам лечения суставной боли с балансом между повышенной терапевтической эффективностью и минимизированным побочным действием терапевтического агента.

Описание уровня техники

Разработана терапия для регулирования суставной боли для уменьшения воспаления и боли в суставах путем локальной доставки терапевтического агента, в частности противовоспалительного средства, в суставную ткань. Показано, что она эффективна при временном облегчении суставной боли, связанной с остеоартритом и другими воспалительными расстройствами.

Хотя общие способы доставки терапевтических агентов в суставную ткань хорошо описаны в литературе, они, как правило, имеют ограниченную эффективность. Различные факторы могут влиять на фармакокинетику и фармакодинамику терапевтического агента в суставе, включая, но без ограничения, химико-физические свойства выбранных терапевтических агентов, действие очищения частиц носителя макрофагами и характеристики платформы доставки.

Ввиду недостатков, обрисованных выше, существует потребность в улучшенной терапии для лечения суставной боли с пролонгированной терапевтической эффективностью (3-6 месяцев), усиленной терапевтической эффективностью, предпочтительно в сочетании с профилем уменьшенного побочного действия, особенно уменьшением повреждения хряща, повреждения хондроцитов и/или уровня кортизола в плазме. Настоящее изобретение направлено на эту потребность и другие потребности.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно одному воплощению настоящего раскрытия, предоставляется фармацевтическая композиция, подходящая для суставной доставки терапевтического агента, включающая

(а) смесь липидов, включающую один или несколько фосфолипидов, и

(b) эффективное количество терапевтического агента или его фармацевтически приемлемой соли;

причем общее количество одного или нескольких фосфолипидов в указанной фармацевтической композиции составляет примерно 20 мкмоль – примерно 150 мкмоль на 1 мл (миллилитр) фармацевтической композиции.

Также предоставляются способы лечения суставной боли, включающие суставное введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества фармацевтической композиции согласно настоящему раскрытию.

Также предоставляется применение фармацевтической композиции для производства суставной инъекции для лечения суставной боли, причем фармацевтическая композиция включает

(а) смесь липидов, включающую один или несколько фосфолипидов, и

(b) эффективное количество терапевтического агента или его фармацевтически приемлемой соли;

причем общее количество одного или нескольких фосфолипидов на каждую указанную инъекцию составляет примерно 20 мкмоль – равное или меньше примерно 150 мкмоль, и причем эффективность указанной фармацевтической композиции усилена относительно эффективности фармацевтической композиции, имеющей больше примерно 150 мкмоль фосфолипида на каждую суставную инъекцию.

Это краткое изложение не предназначено для идентификации ключевых или существенных особенностей заявляемого предмета изобретения. Предмет изобретения следует понимать путем обращения к соответствующим частям всего описания, любому или всем чертежам и каждому пункту формулы изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1 представляет собой график, показывающий профили высвобождения фармацевтических композиций согласно настоящей заявки с различными количествами фосфолипидов.

Фиг.2 схематично иллюстрирует дизайн исследования.

Фиг.3 схематично иллюстрирует планировку исследования.

Фиг.4А и фиг.4В показывают оценку VAS, связанную с болью у субъекта, и среднее изменение у субъектов, получающих 6 мг и 12 мг DSP в фармацевтических композициях по настоящему раскрытию.

Фиг.5А – фиг.5D представляют собой графики, показывающие средние изменения оценок WOMAC у субъектов, получающих 6 мг и 12 мг DSP в фармацевтических композициях по настоящему раскрытию.

Фиг.6 показывает средние изменения оценок WOMAC у субъектов, получающих 6 мг, 12 мг и 18 мг DSP в фармацевтических композициях по настоящему раскрытию, в неделю 12, а также недели 16, 20 и 24.

Фиг.7 представляет собой график клинической визуальной оценки артрита (VAS) у субъектов, получающих фармацевтическую композицию по настоящему раскрытию, на животной модели, и испытываемые продукты вводили в день 16; и черная стрелка показывает дату лечения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВОПЛОЩЕНИЙ

Определение

При использовании выше и во всем раскрытии следующие далее термины, если не указано иное, следует понимать как имеющие указанные далее значения.

При использовании в настоящем описании формы в единственном числе («а», «an» и «the») включают ссылку на множественное число, если контекст четко не указывает иное.

Все числа в настоящем описании можно понимать как модифицированные термином «примерно». При использовании в настоящем описании термин «примерно» относится к интервалу ±10% от конкретной величины.

Термин «суставная инъекция», используемый в настоящем описании, охватывает локальную инъекцию в место суставной боли или вблизи него, внутрисуставную инъекцию или периартикулярную инъекцию.

Термин «эффективное количество», используемый в настоящем описании, относится к дозе фармацевтической композиции, которая является достаточной для ослабления симптомов и признаков заболевания, вызывающего суставную боль, таких как боль, тугоподвижность и опухание состава, и для ослабления побочного действия, связанного с инъекцией терапевтического агента. Ослабление может составлять 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100% или любую степень снижения в промежутках.

Термины «лечащий», «подвергшийся лечению» или «лечение», используемые в настоящем описании, включают предупреждение (например, профилактику), замедление, остановку или реверсию прогрессирующего структурного повреждения ткани, вызывающего суставную боль. В настоящей заявке лечением называется способ ослабления, облегчения, ингибирования или устранения суставной боли или полного облегчения суставной боли при определении методами, известными в технике. Они включают, но без ограничения, клиническое обследование, визуализацию, анализ сыворотки крови или суставного аспирата (например, на ревматоидные факторы, скорость оседания эритроцитов) – это некоторые из них. Например, раскрытый способ рассматривается как лечение, если имеет место ослабление суставной боли у субъекта на 1%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% по сравнению с болью у субъекта до лечения или у контрольных субъектов. Лечение включает однократную суставную инъекцию или несколько суставных инъекций в пределах желательного интервала.

Термин «субъект» может относиться к позвоночному, имеющему суставную боль, или к позвоночному, считающемуся нуждающимся в лечении суставной боли. Субъекты включают теплокровных животных, таких как млекопитающие, таких как приматы, и предпочтительнее человек. Приматы, не являющиеся человеком, также являются субъектами. Термин «субъект» включает домашних животных, таких как кошки, собаки и т.д., домашний скот (например, крупный рогатый скот, лошадей, свиней, овец, коз и т.д.) и лабораторных животных (например, мышей, кроликов, крыс, песчанок, морских свинок и т.д.). Таким образом, в настоящем описании рассматриваются медицинские препараты и ветеринарные применения.

Термин «суставная боль» относится к нарушению в суставе или состоянию сустава, которое включает воспаление и/или боль в одном или нескольких суставах. Термин «суставная боль» при использовании в настоящем описании охватывает различные типы и подтипы артрита различных этиологий и причин, или известных или неизвестных, включая, но без ограничения, ревматоидный артрит, остеоартрит, инфекционный артрит, псориатический артрит, подагрический артрит и артрит, связанный с красной волчанкой, или болезненность локализованных тканей, пораженных бурситом, теносиновитом, эпикондилитом, синовитом и/или другими расстройствами.

«Фармацевтически приемлемые соли» терапевтического агента по настоящему раскрытию являются солями кислого терапевтического агента, образованными с основаниями, а именно, солями присоединения оснований, такими как соли щелочных и щелочноземельных металлов, таких как натрий, литий, калий, кальций, магний, а также 4-аммониевые соли, такие как соли аммония, триметиламмония, диэтиламмония и трис(гидроксиметил)метиламмония. Подобным образом, соли присоединения кислот, таких как минеральные кислоты, органические карбоновые кислоты и органические сульфоновые кислоты, например, хлороводородной кислоты, метансульфоновой кислоты, малеиновой кислоты, также могут образовываться с щелочным терапевтическим агентом.

Фармацевтическая композиция

В одном аспекте настоящее раскрытие относится к фармацевтической композиции, включающей смесь липидов, включающую один или несколько фосфолипидов, и эффективное количество терапевтического агента или его фармацевтически приемлемой соли, причем общее количество фосфолипидов в каждом мл фармацевтической композиции составляет примерно 20 мкл – примерно 150 мкл на 1 мл.

В одном воплощении фармацевтические композиции, описанные в настоящем описании, поддерживают высвобождение терапевтического агента до 3 месяцев, 4 месяцев, 5 месяцев или шести месяцев, двух недель, трех недель, четырех недель, пяти недель, шести недель, семи недель, восьми недель, девяти недель, десяти недель, одиннадцати недель, двенадцати недель, тринадцати недель, четырнадцати недель, пятнадцати недель, шестнадцати недель, семнадцати недель, восемнадцати недель, девятнадцати недель, двадцати недель, двадцати одной недели, двадцати двух недель и двадцати трех недель.

В другом воплощении эффективность фармацевтической композиции, раскрытой в настоящем описании, является повышенной относительно эффективности фармацевтической композиции, имеющей больше 150 мкмоль фосфолипидов на 1 мл фармацевтической композиции. В еще одном воплощении фармацевтическая композиция, раскрытая в настоящем описании, поддерживает терапевтическую эффективность терапевтического агента и уменьшает побочное действие, связанное с терапевтическим агентом.

В одном воплощении общее количество фосфолипидов составляет от примерно 50 мкмоль до меньше примерно 140 мкмоль на 1 мл фармацевтической композиции. В другом воплощении общее количество фосфолипидов составляет от примерно 45 мкмоль до меньше примерно 135 мкмоль на 1 мл фармацевтической композиции. В другом воплощении общее количество фосфолипидов составляет от примерно 50 мкмоль до меньше примерно 120 мкмоль на 1 мл фармацевтической композиции. В другом воплощении общее количество фосфолипидов составляет от примерно 60 мкмоль до меньше примерно 110 мкмоль на 1 мл фармацевтической композиции.

В одном воплощении фармацевтическая композиция также включает по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель, наполнитель, носитель, среду для активного ингредиента, консервант, криопротектор или их комбинацию.

В одном воплощении фармацевтическую композицию по настоящему раскрытию получают смешиванием одного или нескольких фосфолипидов с холестерином или без него и одного или нескольких буферов с образованием липосом, лиофилизацией липосом с одним или несколькими наполнителями с образованием смеси липидов в форме лепешки и восстанавливая лепешку смеси липидов раствором, содержащим терапевтический агент, с образованием водной суспензии.

В другом воплощении фармацевтическую композицию по настоящему раскрытию получают смешиванием одного или нескольких фосфолипидов с холестерином или без него в растворителе, последующим удалением растворителя с образованием смеси липидов в форме порошка или пленки и восстановлением порошка или пленки смеси липидов раствором, содержащим терапевтический агент, с образованием водной суспензии. В другом воплощении фармацевтическую композицию по настоящему раскрытию получают смешиванием одного или нескольких фосфолипидов с холестерином или без него в растворителе с последующим вводом липидного раствора в водный раствор с образованием липосом. Затем липосомы уменьшают в размере фильтрацией через трековые поликарбонатные мембраны. Растворитель удаляют диафильтрацией против буфера с помощью полуавтоматической системы фильтрации в тангенциальном потоке (TFF). Затем диафильтрованный раствор липосом лиофилизуют до формы порошка, и восстанавливают порошок или пленку смеси липидов раствором, содержащим терапевтический агент. с образованием водной суспензии.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция по настоящему раскрытию включает примерно 10% - примерно 50% липидассоциированного терапевтического агента или примерно 50% - примерно 90% неассоциированного терапевтического агента. Термин «неассоциированная форма» относится к молекулам терапевтического агента, выделенным гель-фильтрацией из фракции фосфолипид/холестерин фармацевтической композиции, и обеспечивающим промежуточный высвобожденный компонент. В других воплощениях массовое отношение комбинации фосфолипида и холестерина к терапевтическому агенту составляет примерно 5-80 к 1. В еще одном воплощении массовое отношение комбинации фосфолипида и холестерина к терапевтическому агенту составляет примерно 5-40 к 1. Например, массовое отношение комбинации фосфолипида и холестерина к терапевтическому агенту может составлять примерно 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 или 80 к 1.

В некоторых воплощениях терапевтический агент фармацевтической композиции по настоящему раскрытию находится в концентрации по меньшей мере или примерно 10 мМ, 11 мМ, 12 мМ, 13 мМ, 14 мМ, 15 мМ, 16 мМ, 17 мМ, 18 мМ, 19 мМ, 20 мМ, 21 мМ, 22 мМ, 23 мМ, 24 мМ, 25 мМ, 26 мМ, 27 мМ, 28 мМ, 29 мМ, 30 мМ, 31 мМ, 32 мМ, 33 мМ, 34 мМ или 35 мМ; и необязательно колеблющейся от примерно 10 мМ до примерно 40 мМ, от примерно 15 мМ до примерно 40 мМ, 20 мМ – примерно 40 мМ, от примерно 15 мМ до примерно 35 мМ, от примерно 15 мМ до примерно 30 мМ, 15 мМ – примерно 25 мМ или от примерно 20 нМ до примерно 25 мМ.

В некоторых воплощениях общее количество фармацевтической композиции для каждого введения колеблется от примерно 0,5 мл до примерно 1,5 мл и необязательно, примерно 1,0 мл.

Смесь липидов

Термин «смесь липидов» фармацевтической композиции в настоящем описании относится к фосфолипиду или смеси фосфолипидов. Смесь липидов до добавления к фармацевтической композиции может находиться, но без ограничения, в форме пленки, лепешки, гранул или порошков.

В одном воплощении фосфолипид или смесь фосфолипидов, с холестерином или без него, предварительно формируют в липосомы перед дальнейшей переработкой в смесь липидов.

В другом воплощении фосфолипид или смесь фосфолипидов, с холестерином или без него, не формируют предварительно в липосомы перед дальнейшей переработкой в смесь липидов.

Липосомы имеют наноразмеры и включают липидный монослой или липидный бислой, окружающий внутренний несущий терапевтический агент водный компонент. Неограничивающие примеры липосом включают мелкие униламеллярные везикулы (SUV), крупные униламеллярные везикулы (LUV), мультивезикулярную липосому (MVL) и мультиламеллярные везикулы (MLV).

Смесь липидов можно получить из ряда липидов, способных или образовывать или внедряться в однослойную или двухслойную структуру. Липиды, используемые в настоящем раскрытии, включают один или несколько фосфолипидов, включая, но без ограничения, фосфатидилхолин (PC), фосфатидилглицерин (PG), фосфатидилэтаноламин (РЕ), фосфатидилсерин (PS), фосфатидную кислоту (РА), фосфатидилинозит (PI) или их комбинации. В некоторых воплощениях смесь липидов включает яичный фосфатидилхолин (ЕPC), яичный фосфатидилглицерин (ЕPG), яичный фосфатидилэтаноламин (ЕРЕ), яичный фосфатидилсерин (ЕPS), яичную фосфатидную кислоту (ЕРА), яичный фосфатидилинозит (ЕPI), соевый фосфатидилхолин (SPC), соевый фосфатидилглицерин (SPG), соевый фосфатидилэтаноламин (SРЕ), соевый фосфатидилсерин (SPS), соевую фосфатидную кислоту (SРА), соевый фосфатидилинозит (SPI) или их комбинации. В других воплощениях смесь липидов включает дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (DОPC), димиристоилфосфатидилхолин (DМPC), дипальмитоилфосфатидилглицерин (DPPG), диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG), димиристоилфосфатидилглицерин (DМPG), гексадецилфосфохолин (НЕРС), гидрогенизированный соевый фосфатидилхолин (HSPC), дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), дистеароилфосфатидилглицерин (DSPG), диолеоилфосфатидилэтаноламин (DOРЕ), пальмитоилстеароилфосфатидилхолин (PSPC), пальмитоилстеароилфосфатидилглицерин (PSPG), моноолеоилфосфатидилэтаноламин (MOPE), 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (РОРС), полиэтиленгликоль-дистеароилфосфатидилэтаноламин (PEG-DSPE), дипальмитоилфосфатидилсерин (DPPS), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилсерин (DOPS), димиристоилфосфатидилсерин (DМPS), дистеароилфосфатидилсерин (DSPS), дипальмитоилфосфатидную кислоту (DPPA), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидную кислоту (DОPA), димиристоилфосфатидную кислоту (DМPA), дистеароилфосфатидную кислоту (DSPA), дипальмитоилфосфатидилинозит (DPPI), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилинозит (DOPI), димиристоилфосфатидилинозит (DМPI), дистеароилфосфатидилинозит (DSPI) или их комбинации.

В некоторых воплощениях смесь липидов включает первый фосфолипид и второй фосфолипид. В некоторых воплощениях первый фосфолипид выбирают из группы, включающей EPC, EPE, SPC, SPE, DPPC, DOPC, DMPC, HEPC, HSPC, DSPC, DOPE, PSPC, MOPE, POPC; и второй фосфолипид выбирают из группы, включающей PG, PS, PA, PI, EPG, EPS, EPA, EPI, SPG, SPE, SPS, SPA, SPI, DPPG, DOPG, DMPG, DSPG, PSPG, DPPS, DOPS, DMPS, DSPS, DPPA, DOPA, DMPA, DSPA, DPPI, DOPI, DMPI, DSPI и гидрофильный полимер с длинной цепью гибкого нейтрального полимера с высокой степенью гидратации, присоединенный к молекуле фосфолипида. Примеры гидрофильного полимера включают, но без ограничения, полиэтиленгликоль (ПЭГ) с молекулярной массой примерно 2000 – примерно 5000 дальтон, метокси-ПЭГ (mPEG), ганглиозид GM₁, полисиаловую кислоту, полимолочную кислоту (также называемую полилактидом), полигликолевую кислоту (также называемую полигликолидом), сополимер полимолочной и полигликолевой кислоты, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, полиметоксазолин, полиэтилоксазолин, полигидроксиэтилоксазолин, полигидроксипропилоксазолин, полиаспартамид, полигидроксипропилметакриламид, полиметакриламид, полиметилакриламид, полидиметилакриламид, поливинилметиловый эфир, полигидроксиэтилакрилат, дериватизированные целлюлозы, такие как гидроксиметилцеллюлоза или гидроксиэтилцеллюлоза, и синтетические полимеры.

В одном воплощении смесь липидов также включает стерол. Стерол, используемый в настоящем раскрытии, особо не ограничивается, но его примеры включают холестерин, фитостерол (ситостерол, стигмастерол, фукостерол, спинастерол, брассикастерол и т.п.), эргостерол, холестанон, холестенон, копростенол, холестерил-2'-гидроксиэтиловый эфир и холестерил-4'-гидроксибутиловый эфир. Стерольный компонент смеси липидов, когда он присутствует, может представлять собой любой из тех стеролов, которые обычно используют в области получения липосом, липидных везикул или липидных частиц. В другом воплощении смесь липидов включает примерно 10% - примерно 33% холестерина, от примерно 15 до менее примерно 30 мол.% холестерина, примерно 18 – примерно 28 мол.% холестерина или примерно 20 – примерно 25 мол.% холестерина.

В одном примере воплощения смесь липидов включает первый фосфолипид, второй фосфолипид и стерол в отношении, в мол.%, 29,5% к 90%:3% к 37,5%:10% к 33%.

В других воплощениях первый фосфолипид представляет собой DOPC, POPC, SPC или ЕРС, и второй фосфолипид представляет собой PEG-DSPE или DOPG.

В одном воплощении смесь липидов не включает жирную кислоту или катионный липид (т.е., липид, несущий чистый положительный заряд физиологического рН).

В некоторых воплощениях смесь липидов также может включать конъюгат липида с антителом или пептидом, который действует как таргетирующая частица, чтобы вследствие этого дать возможность липосомам специфически связываться с клеткой-мишенью, несущей молекулу-мишень. Неограничивающие примеры молекул-мишеней включают, но без ограничения, TNF-α и поверхностный антиген В-клеток, такой как CD20. Также можно использовать другие антигены, такие как CD19, HER-3, GD2, Gp75, белок CS1, мезотелин, еМус, CD22, CD4, CD44, CD45, CD28, CD3, CD123, CD138, CD52, CD56, CD74, CD30, Gp75, CD38, CD33, GD2, VEGF или TGF.

Липосомы, полученные в настоящем раскрытии, можно генерировать обычными методами, используемыми для получения везикул. Эти методы включают метод инъекции простого эфира (Deamer et al., Acad. Sci. (1978), 308: 250), метод с поверхностно-активными веществами (Brunner et al., Biochim. Biophys. Acta (1976), 455: 322), метод замораживания-оттаивания (Pick et al., Arc. Biochim. Biophys. (1981), 212: 186), метод испарения с обращением фаз (Szoka et al., Biochim. Biophys. Acta (1980), 601: 559, 71), метод обработки ультразвуком (Huang et al., Biochemistry (1969), 8: 344), метод впрыскивания этанола (Kremer et al., Biochemistry (1977), 16: 3932), метод экструзии (Hope et al., Biochim. Biophys. Acta (1985), 812: 55 65), метод с использованием пресса Френча (Barenholz et al., FEBS Lett. (1979), 99:120) и методы, подробно описанные в Szoka F.,Jr., et al., Ann. Rev. Biophys. Biogen., 9: 467 (1980). Все указанные выше способы являются базовыми технологиями для образования везикул, и эти способы включены в настоящее описание в качестве ссылок. После стерилизации предварительно сформированные липосомы помещают асептически в контейнер и затем лиофилизуют с образованием порошка или лепешки. В воплощении, где смесь липидов включает предварительно сформированные липосомы, указанные липосомы получают методом впрыскивания растворителя и последующей лиофилизацией с образованием смеси липидов. Смесь липидов включает один или несколько наполнителей. В одном воплощении смесь липидов также включает один или несколько буферирующих агентов.

Наполнители включают, но без ограничения, полиолы или сахарные спирты, такие как маннит, глицерин, сорбит, декстроза, сахароза и/или трегалоза; аминокислоты, такие как гистидин, глицин. Одним из предпочтительных наполнителей является маннит.

Буферирующие агенты включают, но без ограничения, дигидрат одноосновного фосфата натрия и безводный двухосновный фосфат натрия.

В одном воплощении, где смесь липидов включает липиды, которые предварительно не формируют в липосомы, смесь липидов можно получить путем растворения в подходящем органическом растворителе, включая, но без ограничения, этанол, метанол, трет-бутиловый спирт, простой эфир и хлороформ, и сушки нагреванием, выпариванием в вакууме, выпариванием в токе азота, лиофилизацией или другими известными способами удаления растворителя.

Конкретные примеры получения смеси липидов в поддержку настоящего раскрытия будут описаны ниже.

Терапевтический агент

Терапевтический агент может представлять собой стероид, нестероидное протвовоспалителное средство (NSAID), такое как индометацин, болезнь-модифицирующее антиревматическое средство (DMARD) или комбинацию двух или больше вышеуказанных средств, а также комбинацию одного или нескольких вышеуказанных средств с другими ингредиентами или соединениями, не перечисленными в настоящем документе. DMARD включает низкомолекулярные агенты, такие как метотрексат, лефлуномид, сульфасалазин, циклофосфамид, азатиоприн, циклоспорин А, d-пеницилламин, противомалярийные лекарства (например, гидроксихлорохин). DMARD также включает биологические вещества, такие как антагонист фактора некроза опухоли α (TNF-α) (например, этанерцепт, торговое наименование Энбрел, коммерчески доступен от Wyeth Pharmaceuticals, Inc., Collegeville, USA, адалимумаб, торговое наименование HUMIRA, коммерчески доступен от Abbott Laboratories, Abbott Park, Illinois, USA), антагонист рецептора интерлейкина-1, антагонист рецептора интерлейкина-6, анти-CD20 моноклональное антитело, CTLA-4-Ig, пептид RGD и т.п..

В одном примере воплощения терапевтический агент представляет собой хорошо растворимый в воде стероид, такой как дексаметазона натрия фосфат (DSP), в форме раствора. В другом примере воплощения терапевтический агент представляет собой хорошо растворимый в воде NSAID, такой как приемлемая соль индометацина. В еще одном примере воплощения терапевтический агент представляет собой хорошо растворимый в воде DMARD, такой как приемлемая соль метотрексата или антагонист TNF-α. В еще одном примере воплощения терапевтический агент не связан ковалентно с фосфолипидом или жирной кислотой, такой как пальмитат.

Терапевтический агент по настоящему раскрытию можно смешать с ddH₂O или подходящим буфером в виде раствора, содержащего терапевтический агент, для суспендирования смеси липидов и получения фармацевтической композиции согласно настоящему раскрытию. В некоторых воплощениях терапевтический агент не связан ковалентно с липидом, таким как фосфолипид, или жирной кислотой, такой как пальмитат.

Терапевтический агент или агенты можно комбинировать с фармацевтически приемлемыми эксципиентами и другими ингредиентами, подходящими для фармацевтических препаратов (которые включают препараты для применения людьми и для животных, и препараты для исследовательских, экспериментальных и родственных применений). В некоторых воплощениях используют цитратный буфер, предпочтительно цитрат натрия. В других воплощениях используют хелатообразователь, предпочтительно ЭДТК.

Терапевтический агент в фармацевтической композиции, описанной в настоящем описании, включает терапевтический агент, подходящий для суставной инъекции, или его фармацевтически приемлемую соль. В одном воплощении терапевтический агент подходит для внутрисуставной (IA) инъекции. Внутрисуставная инъекция включает следующие стадии: 1) идентификация и маркировка соответствующего места для инъекции в суставе, который лечат; 2) стерилизация места инъекции с использованием асептического метода и, необязательно, предоставление местной анестезии; 3) введение иглы в место инъекции в области сустава и 4) инъекция лекарственного средства в сустав. В некоторых воплощениях введение иглы необязательно может быть выполнено под ультразвуковым контролем. Аспирируют небольшое количество синовиальной жидкости для того, чтобы убедиться, что кончик иглы находится в суставе.

Стероид, используемый в настоящем раскрытии, включает любые встречающиеся в природе стероидные гормоны, синтетические стероиды и их производные. Примеры стероида включают, но без ограничения, кортизон, гидрокортизон, ацетат гидрокортизона, тиксокортола пивалат, флуоцинолон, преднизолон, метилпреднизолон, триамцинолона ацетонид, триамцинолон, мометазон, амцинонид, будезонид, дезонид, флуоцинонид, флуоцинолона ацетонид, галцинонид, бетаметазон, бетаметазона натрия фосфат, дексаметазон, дексаметазона натрия фосфат (DSP), флуокортолон, гидрокортизона 17 бутират, гидрокортизона 17 валерат, алкометазона дипропионат, бетаметазона валерат, бетаметазона дипропионат, предникарбат, клобетазона 17 бутират, клобетазона 17 пропионат, флуокортолона капроат, флуокортолона пивалат, флупреднидена ацетат, дифлупреднат, лотепреднол, флуорометолон, медризон, римексолон, беклометазон, клопреднол, кортивазол, дезоксикортон, дифлуорокортолон, фуклоролон, флуорокортизон, флуметазон, флунизолид, флуорокортолон, флурандренолон, мепреднизон, метилпреднизолон, параметазон или их смесь. В примере воплощения стероид является растворимым в воде стероидом. Растворимые в воде стероиды включают любые встречающиеся в природе стероидные гормоны, синтетические стероиды и их производные. Растворимые в воде стероиды включают, но без ограничения, кортизон, гидрокортизон, преднизолон, метилпреднизолон, преднизон, DSP, гидрокортизона 17 валерат, флуорокортизон, флудрокортизон, параметазон и плеренон. В одном примере в качестве раствора, содержащего терапевтический агент, можно использовать раствор DSP примерно 2 – примерно 100 мг/мл, примерно 4 – примерно 80 мг/мл, примерно 5 – примерно 60 мг/мл, примерно 6 – примерно 40 мг/мл, примерно 8 – примерно 20 мг/ мл, примерно 10 – примерно 16 мг/мл, как указано выше, для восстановления смеси липидов в форме лепешки, и получить фармацевтическую композицию по настоящему раскрытию. В другом примере воплощения стероид выбирают из стероидов группы В и группы С согласно классификации Coopman Classification (S. Coopman et al., “Identification of cross-reaction patterns in allergic contact dermatitis from topical corticosteroids”, Br. J. Dermatol., Jul: 121(1): 27-34).

Фармацевтически приемлемые соли терапевтического агента включают нетоксичные соли, образованные с нетоксичными неорганическими или органическими основаниями. Например, нетоксичные соли могут образоваться с неорганическими основаниями, такими как гидроксид щелочного или щелочноземельного металла, например, калия, натрия, лития, кальция или магния; и органическими основаниями, такими как амин, и т.п.

Фармацевтически приемлемые соли терапевтического агента также включают нетоксичные соли, образованные с нетоксичными неорганическими или органическими кислотами. Примерами органических и неорганических кислот являются, например, хлороводородная, серная, фосфорная, уксусная, янтарная, лимонная, молочная, малеиновая, фумаровая, пальмитиновая, холевая, памовая, слизевая, D-глутаминовая, глутаровая, гликолевая, фталевая, винная, лауриновая, стеариновая, салициловая, сорбиновая, бензойная кислоты и подобные соединения.

Терапевтический агент можно вводить в эффективном количестве суставной инъекцией для ослабления симптомов или признаков артрита. В одном воплощении терапевтический агент относится к стероиду, в частности, внутрисуставному кортикостероиду (такому как кортикостероиды, включая, но без ограничения, гидрокортизона ацетат, метилпреднизолона ацетат, дексаметазона натрия ацетат, бетаметазона ацетат, преднизолон, триамицинолона ацетонид, триамицинолона гексацетонид), который может быть введен в дозе, колеблющейся от примерно 0,1 мг до примерно 300 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 100 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 20 мг, от примерно 0,1 мг до примерно 18 мг, от примерно 1 мг до примерно 300 мг, от примерно 1 мг до примерно 100 мг, от примерно 1 мг до примерно 20 мг, от примерно 1 мг до примерно 18 мг, от примерно 4 мг до примерно 300 мг, от примерно 4 мг до примерно 100 мг, от примерно 4 мг до примерно 20 мг, от примерно 4 мг до примерно 18 мг, от примерно 6 мг до примерно 18 мг, от примерно 6 мг до примерно 16 мг, от примерно 8 мг до примерно 16 мг, от примерно 6 мг до примерно 12 мг, от примерно 6 мг до примерно 16 мг на мл фармацевтической композиции.

Эффективная дозировка терапевтического средства для человека может быть выше рекомендованной или стандартной дозировки, известной в технике; например, см. The Orthopaedic Journal of Sports Medicine, 3(5), 2325967115581163 (DOI: 10.1177/2325967115581163), включенный в настоящее описание в качестве ссылки. Например, в то время как рекомендованная эффективная и переносимая дозировка триамцинолона гексацетонида как терапевтического средства составляет 20 мг, дозировка терапевтического средства в композициях и способах по настоящему изобретению может составлять по меньшей мере 20 мг или выше.

Дозировка вводимого терапевтического средства также будет зависеть от тяжести состояния, от которого лечат, определенного препарата и других клинических факторов, таких как масса и общее состояние реципиента и тяжесть побочного действия.

Применение фармацевтической композиции

Фармацевтическую композицию можно вводить при лечении одной дозой или лечении несколькими дозами, в течение периода времени, соответствующего состоянию, от которого лечат. Фармацевтическую композицию можно удобно вводить в соответствующие интервалы, например, один раз в неделю, две недели, шесть недель, месяц, два месяца, по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев или до тех пор, пока симптомы и признаки состояния (т.е., суставная боль) не будут устранены.

В классах воплощений при лечении несколькими дозами по меньшей мере две суставные инъекции вводят с интервалом дозирования, выбранным из группы, включающей две недели, три недели, четыре недели, пять недель, шесть недель, семь недель, восемь недель, девять недель, десять недель, одиннадцать недель, двенадцать недель, тринадцать недель, четырнадцать недель, пятнадцать недель, шестнадцать недель, семнадцать недель, восемнадцать недель, девятнадцать недель, двадцать недель, двадцать одну неделю, двадцать две недели и двадцать три недели.

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию вводят в количестве, колеблющемся от примерно 0,5 мл до примерно 1,5 мл, от примерно 0,6 мл до примерно 1,2 мл, от примерно 0,8 мл до примерно 1,2 мл или примерно 1,0 мл на суставную инъекцию.

Способ лечения суставной боли

Один аспект раскрытия относится к способу лечения суставной боли у субъекта, включающему введение эффективного количества фармацевтической композиции, описанной в настоящем описании, субъекту, нуждающемуся в этом, в соответствии с чем побочное действие, вызываемое терапевтическим агентом, ослабляется по сравнению с побочным действием у субъекта после введения стандартного препарата или препарата с немедленным высвобождением терапевтического средства, и/или эффективность и скорость высвобождения терапевтического средства из фармацевтической композиции повышается по сравнению с эффективностью и скоростью высвобождения из фармацевтической композиции с более, чем 150 мкмоль фосфолипида на каждый мл фармацевтической композиции. В одном воплощении субъект имеет артрит, такой как остеоартрит, ревматоидный артрит, острый подагрический артрит, псориатический артрит, реактивный артрит, артрит, вызванный синдромом Элерса-Данлоса, гемохроматозом, гепатитом, болезнью Лайма, болезнью Шегрена, тиреоидитом Хасимото, целиакией, нецелиакийной чувствительностью к глютену, воспалительным заболеванием кишечника, пурпурой Геноха-Шенлейна, гипериммуноглобулинемией D с возвратной лихорадкой, саркоидозом, болезнью Уиппла, периодическим синдромом, ассоциированным с TNF-рецептором, грануломатозом с полиангиитом, семейной средиземноморской лихорадкой или системной красной волчанкой.

Эффективность относят к способности терапевтического средства вызывать благоприятную клиническую реакцию при заболевании. Эффективность также относят к ослаблению клинического признака, такого как боль в суставах, болезненность, преходящая утренняя скованность и крепитация при движении сустава, что приводит к неустойчивости и физической нетрудоспособности. В одном воплощении эффективность терапевтического средства определяется показателем WOMAC OA, оценкой VAS или подобным образом. В некоторых воплощениях пролонгированное стационарное высвобождение терапевтического агента из фармацевтической композиции, описанной в настоящем описании, не будет вызывать побочного действия, включая, но без ограничения, повреждение или разрушение суставного хряща, такое как апоптоз хондроцитов, потеря протеогликана, кисты в суставном хряще, повреждение или разрушение суставного хряща. Ослабление побочного действия у субъекта, описанное в настоящем описании, может колебаться от 1%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% при сравнении с субъектом, получившим инъекцию терапевтического средства, не включенного в препарат с фармацевтическими композициями, описанными в настоящем описании, т.е., без смеси липидов. Это неожиданно, так как хорошо известно, что воздействие терапевтического агента, такого как триамцинолона ацетат (ТСА), вызывает повреждение или разрушение суставного хряща.

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно использовать в комбинации с любым из различных дополнительных химических компонентов, включая, но без ограничения, аналгетики (например, бупивакаин, ропивакаин или лидокаин) или препараты гиалуроновой кислоты (например, Synvise One). В некоторых воплощениях заявленная фармацевтическая композиция и дополнительные химические компоненты включены в единую терапевтическую композицию, и заявленную фармацевтическую композицию и дополнительные химические компоненты вводят одновременно. С другой стороны, заявленная фармацевтическая композиция и дополнительные химические компоненты отделены друг от друга, например, включены в отдельную фармацевтическую композицию, и заявленную фармацевтическую композицию и дополнительные химические компоненты в схеме лечения вводят одновременно или в различное время, одним и тем же путем или различными путями, в виде одной дозы или нескольких доз.

Приведенные далее примеры дополнительно поясняют настоящее раскрытие. Эти примеры предназначены только для пояснения настоящего раскрытия и не рассматриваются как ограничивающие.

Пример 1. Получение смеси липидов

Липиды, включая DOPC, DOPG и холестерин, объединяют в соотношении, в мольных процентах, 67,5:7,5:25 и растворяют в 99,9% этаноле при примерно 40°С в колбе с образованием липидного раствора. Для растворения липидов используют настольную ультразвуковую ванну.

Раствор липидов добавляют к 1,0 мМ раствору фосфата натрия при 100 мл/мин с помощью перистальтического насоса для образования пролипосомной суспензии. Затем пролипосомную суспензию пропускают 6-10 раз через поликарбонатную мембрану с порами размером 0,2 мкм. Получают липосомную смесь, и липосомы имеют средний размер везикул примерно 120-140 нм (измеренный с помощью Malvern ZetaSizer Nano ZS-90, Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK).

Липосомную смесь диализуют и концентрируют с помощью системы фильтрации в тангециальном потоке с минимодулем ультрафильтрации Millipore Pellicon 2 Mini Ultrafiltration Module Biomax-100C (0,1 м²) (Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) и затем стерилизуют с использованием стерильного фильтра 0,2 мкм.

Концентрацию липидов в фильтрованной липосомной смеси определяют количественно анализом с фосфором, и фильтрованную липосомную смесь соединяют с маннитом в концентрации 2% маннита и затем снова стерилизуют с использованием стерильного фильтра 0,2 мкм. Затем стерильную липосомную смесь подвергают лиофилизации, и получают смесь липидов в виде лепешки.

Пример 2. Получение фармацевтической композиции

Фармацевтическую композицию согласно настоящему раскрытию получают, смешивая смесь липидов, описанную в примере 1, с раствором DSP, который включает 13,2 мг/мл дексаметазона натрия фосфата (DSP) (C₂₂H₂₈FNa₂O₈P; молекулярная масса 516,41 г/л) и 4 мг/мл цитрата натрия, используя впоследствие как фармацевтическую композицию с DSP, в соответствии с чем каждый мл фармацевтической композиции включает примерно 12,0 мг/мл DSP и 90 мкмоль фосфолипида.

Пример 3. Регулируемое высвобождение из фармацевтической композиции

Проводят клинические испытания для исследования высвобождения in vitro в фазе II в интервале доз, фармацевтические композиции примера 2 с различными дозами DSP инъецируют в синтетическую синовиальную жидкость человека (hsSF), и в различные моменты времени измеряют количество высвобожденного DSP.

Синтетические синовиальные жидкости человека (hsSF)

Композиция синтетической синовиальной жидкости человека приводится в таблице 1. Коротко, бычий сывороточный альбумин (BSA) растворяют в 0,9% обычном физиологическом растворе до концентрации 30 мг/мл. К раствору BSA добавляют 1% гиалуроновой кислоты (НА, Mw=1,35x10⁶ Да), и смесь осторожно перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов для того, чтобы убедиться в полном растворении НА. Величина рН раствора 7,3. Синтетические синовиальные жидкости человека содержат 0,2% азида натрия для ингибирования роста бактерий.

Таблица 1. Синтетическая синовиальная жидкость человека (hsSF)

Материал НА (1,35x10⁶ Да) BSA 0,9% обычный физиол.р-р Qty (единица:г) 1 3 96

Высвобождение DSP из фармацевтических композиций in vitro

Высвобождение DSP из липосом фармацевтической композиции с DSP измеряют путем обнаружения изменений в изменении эффективности захвата в различные временные интервалы. Коротко, различные количества фармацевтической композиции с DSP суспендируют с синтетическими синовиальными жидкостями при заданной температуре (37°С) и перемешивают с помощью стержня для перемешивания при 150 об/мин (таблица 2). Через соответствующие временные интервалы суспензию собирают, и собирают свободный DSP, элюируя суспензию через колонку SPE, следуя процедурам, описанным ниже для измерения интенсивности захвата.

Таблица 2

Группа № Фармацевтическая композиция с DSP (12 мг/мл DSP) Синтетичкская синовиальная жидкость (мл) мл Количества DSP (мг) 1 2 24 7 2 1,5 18 3 1 12 4 0,67 8 5 0,5 6

Эффективность захвата

Интенсивность поглощения эффективности захвата собранных образцов определяют после выделения свободного DSP из липосом с использованием картриджа SPE. Колонку SPE подготавливают для использования, смачивая содержимое 1 мл метанола и затем 1 мл дистиллированной воды. Затем колонку уравновешивают 1 мл обычного физиологического раствора перед загрузкой собранных суспензий. После загрузки суспензий колонку SPE промывают 3 мл дистиллированной воды, и элюируют свободный DSP 2 мл буфера для элюирования (содержащего 2 М NH₄OAc/MeOH/CAN = 2/9/9 (об./об.). Элюированную фракцию, содержащую свободный DSP, контролируют с использованием UV-vis спетрофотометра при 240 нм. Эффективность захвата (%) вычисляют как [1-(Ifree/12)]×100, где 12 представляет собой теоретическую величину (мг/мл) DSP в растворе образца, и Ifree представляет собой концентрацию свободного DSP.

Результаты показывают, что регулирование количества фосфолипидов может регулировать высвобождение DSP (таблица 3 и фиг.1). Без желания привязываться к какой-либо теории, полагают, что относительно высокая доза DSP с высоким количеством липидов в фармацевтической композиции (композиция №5 в таблице 3) вызывает медленное высвобождение небольших количеств DSP в среду сустава, в то время как более низкая доза DSP с меньшим количеством липидов не может продуцировать достаточно устойчивый уровень свободного DSP со временем. В сочетании с наблюдением в клиническом испытании в фазе II с интервалом доз, желательной для регулируемого высвобождения терапевтического агента для применения при лечении суставной боли считается фармацевтическая композиция с подходящим количеством фосфолипидов в фармацевтической композиции. На основании того, что объем синовиальной жидкости обычно колеблется от 1 мл до 70 мл, для достижения желательной эффективной концентрации липидов около 90 мкмоль на 7 мл синовиальной жидкости практическая концентрация фосфолипидов на каждый мл фармацевтической композиции колеблется от 20 мкмоль до 150 мкмоль.

Таблица 3. Профиль высвобождения in vitro фармацевтической композиции согласно настоящей заявки

№ Все фосфолип. (мкмоль) Весь DSP (мг) Концентрация фосфолип. в синтетических синовиальных жидкостях человека (мМ) Высвобождение DSP из липосомы (процент) Высвобождение DSP из липосомы (мг/мл) День 0 День 1 День 3 День 0 День 1 День 3 5 180,62 24 20,07 0,0% 0,0% -0,7% 0,000 0,000 -0,019 4 135,37 18 15,94 0,0% -0,4% 1,1% 0,000 -0,008 0,023 3 90,31 12 11,29 0,0% 3,0% 4,4% 0,000 0,045 0,067 2 60,51 8 7,89 0,0% 4,1% 6,9% 0,000 0,043 0,073 1 45,16 6 6,02 0,0% 7,1% 13,5% 0,000 0,057 0,108

Пример 4. Рандомизированное открытое исследование эффективности и безопасности фармацевтической композиции с дексаметазона натрия фосфатом (DSP) на пациентах с остеоартритом коленных суставов

Метод

Проводят 12-недельное рандомизированное открытое, параллельное испытание в фазе I/II с введением однократной дозы в 3 исследовательских пунктах в Тайбэе, Тайвань. Схема дизайна исследования показана на фиг.2. Это исследование перед регистрацией любого субъекта одобрено местным Институциональным наблюдательным советом в каждом исследовательском пункте. Это исследование выполняется в соответствии с принципами руководства для клинических исследований, определенными в U.S. 21 CFR Part 312.20, Хельсинской декларации и Международной конференцией по гармонизации технических требований к фармацевтической продукции для применения человеком (ICH), согласовавшей трехстороннее руководство по надлежащей клинической практике. Протокол исследования зарегистрирован в ClinicalTrial.gov (NCT02803307). От всех пациентов получено письменное согласие на участие в этом испытании.

В исследование набирают пациентов в возрасте по меньшей мере 20 лет и имеющих задокументированный диагноз остеоартрит (ОА) коленных суставов в течение по меньшей мере 6 месяцев до скринингового визита. Диагноз ОА основывается на клинических и радиологических критериях American College of Rheumatology for Classification of Idiopathic OA of the knee (Arthritis Rheum., 1986; 29: 1039-49). Кроме того, в исследовании коленных суставов требуются подходящие пациенты, имеющие по меньшей мере 2 степень тяжести в исследуемом колене на основании шкалы оценки Келлгрена-Лоуренса (KL) (Br. J. Ind. Med., 1952; 9: 197-207), связанную с пациентом оценку боли по визуальной аналоговой шкале (VAS) ≥4 вначале и способность понимать протокол исследования и согласие для участия. Пациентов исключают, если они используют системные кортикостероиды в течение 30 дней до начала или аналгетики NSAID или реабилитационную терапию в пределах 7 дней до начала; имеют в истории болезни синдром Рейтера, системную красную волчанку, синдром Шегрена, системный склероз, воспалительный миозит, смешанное заболевание соединительной ткани, палиндромный ревматизм, ревматоидный артрит, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, болезнь Бехчета, артрит, связанный с воспалительным заболеванием кишечника, саркоидоз, васкулит, криоглобулинемию или амилоидоз; или имеют перед введением дозы клинические признаки и симптомы острой инфекции или связанное с инфекцией воспаление в другом колене.

В целом скринируют 46 пациентов с ОА в коленном суставе, из которых 40 пациентов имеют критерии для включения и произвольно распределяются в 2 группы. Скрининговый визит выполняется в пределах 14 дней до начала испытания. Отбирают только 1 колено как исследуемое колено для получения исследуемого лекарственного средства и последующей оценки. Введение исследуемого лекарственного средства прекращают, если происходит основное острое воспаление или инфекция в другом колене. Подходящих субъектов рандомизируют 1:1 для однократной дозы фармацевтической композиции с DSP, полученной способом, описанным в примере 2, при уровнях доз (1) 6 мг DSP с примерно 45 мкмоль фосфолипида (группа А) или (2) 12 мг DSP с примерно 90 мкмоль фосфолипида (группа В). Фармацевтическую композицию с DSP, используемую в этом исследовании, получают способом, описанным в предыдущих примерах, и предоставляют как в быстро(немедленно), так и длительно действующих формах DSP после восстановления. Каждого субъекта оценивают в течение 12 недель после однократной внтурисуставной инъекции.

Основной целью этого исследования является оценка безопасности и переносимости доз фармацевтических композиций с DSP двух различных уровней. Оценки безопасности производят по вредным событиям (АЕ), тяжелым АЕ (SAE), жизненным показателям, изменениям при физикальном обследовании, электрокардиографии и клиническим лабораторным тестам. Другой целью исследования является оценка эффективности фармацевтических композиций с DSP путем измерения изменений оценок боли субъектом и врачом (VAS), оценки индекса артрита университетов Western Ontario и MeMaster (WOMAC) и глобальной оценки исследователя ответа на терапию (IGART) исследуемого колена. В недели 0, 1, 4, 8 и 12 оценивают по VAS и WOMAC. В недели 1, 4, 8 и 12 оценивают по IGART. Оценка боли для исследуемого колена ставится с использованием шкалы VAS (колеблющейся от 0 [нет боли/болезненности] до 10 [очень сильная боль/боль при самом легком прикосновении]). Индекс WOMAC включает 3 субшкалы, причем оценка колеблется от 0 до 4 в каждой субшкале: боль (5 пунктов), скованность (2 пункта) и физическая функция (17 пунктов). Реакцию пациента на введение исследуемого лекарственного средства определяет исследователь по оценке IGART с 1 или 5 рейтингами (нет, слабая, ощутимая, сильная и очень сильная), выбранными в каждый из визитов по схеме лечения (исключая начальный).

Статистический анализ

Размер выборки для этого испытания не определяется заранее с помощью поддерживающих допущений. Все 40 пациентов с ОА коленного сустава включены в план как зарегистрированные участники в этом испытании. Все статистические допущения являются двусторонними и оцениваются на уровне значимости 0,05. Недостающие данные (в том числе из-за ранних прекращений) не приписываются. Для непрерывных конечных точек (оценка безопасности кортизола в плазме, индекс WOMAC и VAS) предоставляются описательные статистические данные, включая число наблюдений, среднее, медиану, стандартное отклонение, минимум и максимум для необработанных данных, а также изменение от исходного уровня. Также анализируют непрерывные переменные с помощью критерия суммы рангов Вилкоксона для сравнения различия между лечебными группами, и критерий знаковых рангов Вилкоксона используют для сравнения изменения от исходного уровня. Для категориальных конечных точек (IGART, число пациентов, достигающих 30% и 50% или большего снижения от исходного уровня по WOMAC и VAS) используют подсчеты и проценты. Выполняют тест хи-квадрат для сравнения различия между группами, в то время как, когда данные разрежены, применяют точный критерий Фишера. Все статистические анализы проводят с использованием программы SAS^®, версия 9.3 системы SAS для Windows 7. В этом исследовании для анализа безопасности используют популяцию для оценки безопасности, в то время как для анализа эффективности используют intent-to-treat (ITT) популяцию и популяцию по протоколу (РР). Популяцию для оценки безопасности определяют как всех субъектов, кто получал любую дозу фармацевтической композиции с DSP. ITT популяцию определяют как всех субъектов, кто получал по меньшей мере 1 полную дозу фармацевтической композиции с DSP и имеет по меньшей мере 1 оценку эффективности после исходного уровня. Популяцию РР определяют как всех субъектов в ITT популяции, кто не имеет какого-либо существенного отклонения/противоречия от протокола. Все 40 субъектов включены в популяцию для оценки безопасности и ITT популяцию. Тринадцать субъектов, включая 6 субъектов из группы А и 7 субъектов из группы В, включены в РР популяцию. Основные выводы основаны на РР популяции.

Результаты

В настоящем исследовании скринируют в целом 46 субъектов, из которых 6 скрининг не прошли. В исследовании зарегистрированы сорок субъектов, из которых 39 удовлетворяют критериям приемлемости. Зачислен один субъект, у которого ОА коленного сустава диагностирован за меньше, чем 6 месяцев до скринигового визита. Субъектов произвольно распределяют в группу А и группу В по 20 субъектов в каждую, получающих 6 мг DSP с 45 мкмоль фосфолипида в фармацевтической композиции на каждую внутрисуставную инъекцию, и 12 мг DSP с 90 мкмоль фосфолипида в фармацевтической композиции на каждую внутрисуставную инъекцию, соответственно. Краткое изложение расположения субъектов показано на фиг.3, и демографическая информация об исследуемых субъектах представлена в таблице 4.

Таблица 4. Суммарные результаты демографии на исходном уровне

Переменная Статус/Статистика Популяция для оценки безопасности Группа А (6 мг) (N=20) Группа B (12 мг) (N=20) Всего (N=40) Раса Восточная Азия 20 (100%) 20 (100%) 40 (100%) Возраст N 20 20 40 Средний (SD) 66,7 (10,04) 68,10 (8,03) 67,40 (9) Медиана (мин, макс) 67,5 (49, 89) 69,5 (52, 84) 68,50 (49, 89) Пол Мужчины 2 (10%) 6 (30%) 8 (20%) Женщины 18 (90%) 14 (70%) 32 (80%) Было ли подтверждение остеоартрита при скрининговом визите? Да 20 (100%) 20 (100%) 40 (100%) Нет 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) Поставлена ли оценка по Келлгрену-Лоуренсу (KL) при скрининговом визите? Да 20 (100%) 20 (100%) 40 (100%) Нет 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) Оценка KL Уровень 0: рентгенографических признаков остеоартрита нет 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) Уровень 1: спорное сужение суставного пространства (JSN) и возможное образование остеофита 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) Уровень 2: определенные остеофиты и возможное JSN на переднезадней весовой рентгенограмме 7 (35%) 5 (25%) 12 (30%) Уровень 3: множественные остеофиты, определенное JSN, склероз, возможна костная деформация 10 (50%) 10 (50%) 20 (50%) Уровень 4: крупные остеофиты, заметное JSN, тяжелый склероз и определенная костная деформация 3 (15%) 5 (25%) 8 (20%)

Все 40 субъектов являются выходцами из Восточной Азии. Средний возраст составляет 67,4 лет, и 8 человек (20%) мужчины. Субъектов располагают по шкале уровней KL как соответствующих уровню 2 (n=12), уровню 3 (n=20) и уровню 4 (n=8).

В этом исследовании не происходит никаких SAE, важных АЕ или АЕ, ведущих к отмене или смерти. Так как длительное применение кортикостероидов может привести к повышению уровня сахара в крови или даже диабету, измеряют изменение HbA1c. Не наблюдают статистически важного различия в средних изменениях HbA1c от исходного уровня (неделя 0) до недели 12 в группе A или группе B.

Временное снижение кортизола является хорошо описанной физиологической реакцией у пациентов, которые получают IA инъекции кортикостероидов. Средние величины кортизола показывают снижение от исходного уровня после инъекции, но остаются в интервале нормы, и никто из субъектов не сообщает о признаках или симптомах недостаточности надпочечников.

В РР популяции средние величины оценок боли субъектом и врачом (VAS) показывают продолжающееся снижение от исходного уровня как в группе А, так и в группе В при каждом плановом визите до окончания исследования в неделю 12 (фиг.4А и фиг.4В). Средние изменения оценки боли субъектом и врачом в группе А от исходного уровня до недель 1, 4, 8 и 12 составляют −2,45, −1,90, −1,80 и −1,95, соответственно. В группе В средние изменения оценки боли субъектом и врачом от исходного уровня до недель 1, 4, 8 и 12 составляют −3,90, −3,23, −3,33 и −3,14, соответственно. Статистическая значимость (p<0,05) достигается только для средних изменений от исходного уровня для каждого запланированного повторного визита в группе B. Средние изменения оценки боли врачом в группе А от исходного уровня до недель 1, 4, 8 и 12 составляют −2,95, −4,33, −3,22 и −4,90, соответственно. В группе B средние изменения оценки боли врачом от исходного уровня до недель 1, 4, 8 и 12 составляют −3,41, −3,03, −3,80 и −4,33, соответственно. Все средние изменения от исходного уровня являются статистически значимыми за исключением среднего изменения от исходного уровня до недели 8 в группе A (−3,22±1,78, p=0,0625). Подобные тренды также наблюдаются в ITT популяции.

В группе В по сравнению с группой А наблюдается большее снижение оценок по субшкалам WOMAC боли, скованности и физической функции от исходного уровня до каждого планового визита (фиг. 5A – 5D). Средняя величина общей оценки WOMAC на исходном уровне (неделя 0) в группе А и группе В PP популяции составляет 37,83±19,90 и 43,29±15,16 (среднее±SD), соответственно. Эти величины уменьшаются при каждом визите после однократного введения исследуемого лекарственного средства как в группе А, так и в группе В. Среднее изменение общей оценки WOMAC от исходного уровня до недель 1, 4, 8 и 12 составляет −12,17, −8,33, −9,00 и −10,83, соответственно, в группе A, и −19,00, −22,29, −20,71 и −20,14, соответственно, в группе B. Подобный тренд также наблюдается в ITT популяции.

Как для ITT популяции, так и РР популяции статистической значимости в рейтинге IGART между группой А и группой В в недели 1, 4, 8 и 12 не наблюдается. В PP популяции (n=13) реакция 33-67% пациентов в группе А и реакция 43-100% пациентов в группе В оценивается исследователем как хорошая от недели 1 до недели 12. В ITT population (n=20) реакция 50-65% пациентов в группе А и реакция 45-60% пациентов в группе B оценивается исследователем как хорошая от недели 1 до недели 12.

В текущей фазе испытания I/II внутрисуставная инъекция фармацевтических композиций с DSP хорошо переносится всеми субъектами с коленным ОА. Другие АЕ, упомянутые в этом исследовании, не связаны с лечением, и большинство этих АЕ являются умеренными по тяжести. Никаких SAE, важных АЕ (связанная с инъекцией местная реакция) или АЕ, ведущих или к отмене или смерти, не происходит.

Микроскопические исследования на кроликах и собаках фармацевтических композиции с DSP не показывают каких-либо таких данных, как потеря протогликана. Однократное или повторное внутрисуставное введение доз фармацевтических композиций с DSP при исследовании не вызывает какого-либо повреждения хряща или хондротоксичность у животных, хотя имеются сообщения о повреждении хряща при повторных внутрисуставных инъекциях свободного дексаметазона, триамцинолона и других стероидов.

Дексаметазон показывает ослабление боли и улучшения при артрите, сравнимые с кортикостероидом длительного действия триамцинолоном. Это предполагает, что фармацевтическая композиция с DSP с профилем пролонгированного высвобождения вероятно будет усиливать терапевтическую пользу дексаметазона в течение гораздо более длительного времени, чем другие лекарства этого класса.

Текущая фаза исследования I/II является первым испытанием введения субъектам с коленным ОА фармацевтической композиции с DSP с фосфолипидом в промежутке от 20 мкмоль до 150 мкмоль на мл или общим количеством 80 мкмоль – 110 мкмоль в виде внутрисуставной инъекции. Исследование показывает благоприятное терапевтическое действие 6 мг – 12 мг фармацевтической композиции с DSP в течение по меньшей мере 12 недель, что показывает ее более длительное действие, чем других кортикостероидов. Тренд пролонгированного смягчения боли, определенного оценкой боли по VAS, и смягчения симптомов, определенного индексом ОА по WOMAC, наблюдают в течение 12 недель после получения однократной дозы фармацевтической композиции с DSP.

Пример 5. Сравнительный анализ эффективности фармацевтической композиции с DSP у пациентов с остеоартритом коленного сустава

Многоцентровое двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое испытание фазы II для исследования безопасности и эффективности лечения двумя различными уровнями дозы фармацевтической композиции по настоящему раскрытию на пациентах с ОА коленного сустава завершено в августе 2018. В этом клиническом испытании 75 пациентов среднего возраста 63,9 лет с умеренным разрушением колена при ОА и оценками VAS 5-9 рандомизируют в три различные экспериментальные группы, причем каждая получает однократное внутрисуставное введение (а) фармацевтической композиции, включающей 12 мг DSP и 90 мкмоль фосфолипида (обозначенной далее как TLC599 12 мг), (b) фармацевтической композиции, включающей 18 мг DSP и 135 мкмоль фосфолипида (обозначенной далее как TLC599 18 мг), или (c) контроль плацебо (физиологический раствор) (обозначенный далее как плацебо).

Первичной конечной точкой является оценка среднего изменения от исходного уровня оценок боли по WOMAC до недели 12. Другие анализы, такие как изменение от исходного уровня боли по WOMAC, физической функции по WOMAC и оценок VAS до и в различные моменты времени до недели 24, так же, как пропорции клинически надежных респондеров, включают во вторичные конечные точки. Безопасность и эффективность оценивают в день 3, неделю 1 и каждые четыре недели до 24 недель.

С использованием результата измерения боли по WOMAC, TLC599 12 мг показывает статистически значимое улучшение в смягчении боли по сравнению с плацебо от дня 3 до недели 12, соответствуя первичной конечной точке. Кроме того, TLC599 12 мг показывает непрерывное и статистически значимое улучшение в смягчении боли при сравнении с плацебо от дня 3 до недели 16, недели 20 и недели 24, как показано на фиг.6 и в таблице 5, отражающей непрерывную длительность регулирования боли в течение по меньшей мере 24 недель. TLC599 12 мг также показывает статистически значимое улучшение в смягчении боли при сравнении с плацебо в неделю 12, неделю 16, неделю 20 и неделю 24.

Подобные результаты наблюдают с использованием физической функции по WOMAC как результата измерения. Пациенты, которых лечили TLC599 12 мг, показывают значимо большее улучшение в физической функции по WOMAC, чем плацебо, от дня 3 до недели 12, недели 16, недели 20 и недели 24 (р<0,05)

Подобные результаты также наблюдают с использованием оценок VAS как результата измерения. TLC599 12 мг показывает статистически значимое улучшение смягчения боли при сравнении с плацебо от дня 3 до недели 12, недели 16, недели 20 и недели 24, снова отражая непрерывную длительность регулирования боли в течение по меньшей мере шести месяцев. TLC599 12 мг также показывает статистически значимое улучшение смягчения боли при сравнении с плацебо в неделю 12, неделю 16, неделю 20 и неделю 24.

Временное снижение кортизола является хорошо описанной физиологической реакцией у пациентов, кто получает IA инъекции кортикостероидов. Таким образом, снижение кортизола, заметное в этом исследовании, является ожидаемой фармакодинамической реакцией на IA инъекцию кортикостероида, которая тщательно контролируется. Лабораторные аномальности уровня кортизола в крови приводятся как легкие по интенсивности с 2 исключениями (1 умеренно сниженный кортизол, 1 тяжелая недостаточность глюкокортикоида). Ни одно из этих лабораторных проявлений кортизола не зарегистрировано с сопутствующими признаками или симптомами, которые можно отнести к гипокортизолизму, и все разрешаются без лечения или последствий. Большинство из этих проявлений отмечается вначале в день 3, и это большинство разрешается в следующем плановом визите в неделю 1.

Количество (приблизительно 40%) свободного дексаметазона в TLC599 12 мг несколько выше типичной дозы высвобождаемого немедленно DSP (4 мг), используемой для IA инъекции.

TEAE, видные в этом исследовании, ожидаемы в исследуемых популяциях. TLC599 вообще безопасна и хорошо переносится. Кроме того, частота общих TEAE, связанных с лекарством AE и связанных с кортизолом AE, с TLC599 12 мг ниже, чем с TLC599 18 мг.

В настоящем исследовании при каждом визите проверяют глюкозу в крови натощак. Один пациент в группе TLC599 12 мг оценен с TEAE возрастания глюкозы в крови (с 2 отдельными случаями – 1 слабое и 1 умеренное), и другой пациент в группе TLC599 18 мг оценен с АЕ ухудшения глюкозы натощак (слабое). Возрастание глюкозы в крови (оба события) оценено как не связанное с изучаемым лечением.

Примечательно, что эта пациенты не отображают анормальность HbA1c во время испытания. Следовательно, любые возрастания уровня глюкозы в крови являются вероятно временными и умеренными.

Пример 6. Оценка влияния содержания липидов в фармацевтической композиции с DSP на животной модели остеоартрита

Для того, чтобы оценить изменения содержания липидов, а также взаимодействие между лекарственным средством и липидами в фармацевтической композиции, подходящей для доставки в сустав in vivo, получают фармацевтические композиции с DSP с большим и небольшим количествами липидов и оценивают на возможное действие, появляющееся в указанных условиях, как описано ниже.

Используют крысиную модель вызванного коллагеном типа II артрита (CIA) для определения влияния содержания липидов в фармацевтической композиции с DSP на терапевтическую активность DSP. В целом артрит вызывают у 30 крыс Lewis коллагеном типа II, эмульгированным в неполном адъюванте Фрейнда (FIA), в день 1 и последующей бустердозой в день 8 интрадермальной инъекцией в хвост. Клинические визуальные оценки (клиническая оценка), показывающие тяжесть артрита, располагают по степеням, используя суставной индекс, колеблющийся от 0 до 4 (см. таблицу 6). Общую оценку для каждой крысы вычисляют, суммируя оценки для обеих задних лап с максимальной возможной оценкой 8, для каждой отдельной крысы. В день 17 заболевание успешно вызывается с общей клинической оценкой артрита 8, испытываемые изделия вводят в обе лапы крыс. Фармацевтические композиции с DSP с различными количествами липидов получают согласно способу, описанному в примере 2, за исключением того, что итоговое содержание липидов в каждой такое, какое указано ниже в таблице 7. Для контрольных групп используют физиологический раствор и раствор 12 мг/мл дексаметазона фосфата в отсутствие липидов [инъекция дексаметазона фосфата (DP)] (несформулированное лекарство).

Таблица 6. Ступени клинической визуальной оценки артрита

Оценка тяжести Описание 0 Нет явной эритемы и опухания 1 Эритема и легкая припухлость, ограниченная предплюсневым или голеностопным суставом 2 Эритема и легкий отек, распространяющийся от лодыжки до предплюсны 3 Эритема и умеренный отек, распространяющийся от голеностопного до плюсневых суставов 4 Эритема и сильный отек охватывают лодыжку, стопу и пальцы, или анкилоз конечности

Таблица 7. Составы фармацевтических композиций с DSP с различными содержаниями липидов и используемые контроли

Номер группы/Испытываемое изделие на крысиной модели CIA Содержание фосфолипида мкмоль/мл) Концентрация DSP
(мг/мл) Дозировка
(мг/лапа) Объем инъекции
(мл/лапа) 1/Физиолог. раствор - - - 0,05 2/TLC599CQA_L01 119 11,5 0,6 мг/лапа
1,2 мг/животное 0,05 3/TLC599CQA_L08 67 12,2 0,05 4/TLC599CQA_L09 90 11,9 0,05 6/Инъекция DP - 13,2 0,04

Результаты показывают, что корреляция между содержанием липидов в фармацевтической композиции, подходящей для доставки в сустав, и противоартритной эффективностью основана на клинической оценке (фиг.7).

Результаты исследования эффективности in vivo показывают, что независимо от низкого или высокого содержания липида (больше 67 мкмоль фосфолипидов на мл фармацевтической композиции с DSP) в препарате TLC599, продолжительность прологнированной эффективности возрастает по меньшей мере в 2,5 раза по сравнению с несформулированным лекарством. Однако более длительная продолжительность противоартритной эффективности предполагается в интервале содержания липидов (больше 67 мкмоль фосфолипидов на мл фармацевтической композиции с DSP, такое как примерно 70 мкмоль/мл – примерно 120 мкмоль/мл) в фармацевтической композиции с DSP согласно данному примеру в сочетании с приведенным выше примером 3. Соответственно, фармацевтическая композиция согласно настоящему раскрытию действительно обеспечивает пролонгированное высвобождение DSP в присутствии указанного содержания липидов для достижения равновесия между усиленной терапевтической эффективностью и минимизированным побочным действием терапевтического агента, особенно в указанном интервале дозировки.

Группа изобретений относится к области фармацевтической промышленности, предназначена для лечения суставной боли. Фармацевтическая композиция, подходящая для суставной доставки, для лечения боли в суставах, включающая смесь липидов, включающую первый фосфолипид, второй фосфолипид и холестерин в мол.%: от 29,5 до 87 : от 3 до 37,5 : от 10 до 33 соответственно, и эффективное количество стероида или его фармацевтически приемлемой соли; причем первый фосфолипид представляет собой 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (DОPC), 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (РОРС), соевый фосфатидилхолин (SPC) или яичный фосфатидилхолин (ЕPC), а второй фосфолипид - полиэтиленгликоль-дистеароилфосфатидилэтаноламин (PEG-DSPE) или диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG), и общее количество фосфолипидов колеблется от 90 мкмоль до 150 мкмоль на 1 мл указанной фармацевтической композиции. Применение фармацевтической композиции в производстве суставной инъекции для лечения боли в суставах, причем фармацевтическая композиция имеет вышеуказанный состав. Способ лечения суставной боли, включающий внутрисуставное введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества фармацевтической композиции, включающей вышеуказанный состав. Использование группы изобретений обеспечивает баланс между повышенной терапевтической эффективностью и минимизированием побочного действия терапевтического агента, а именно стероида, с подходящим общим количеством фосфолипидов в диапазоне от 90 мкмоль до 150 мкмоль на 1 мл указанной фармацевтической композиции. 3 н. и 27 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 табл., 6 пр.

1. Фармацевтическая композиция, подходящая для суставной доставки, для лечения боли в суставах, включающая

(а) смесь липидов, включающую первый фосфолипид, второй фосфолипид и холестерин в мол.%: от 29,5 до 87 : от 3 до 37,5 : от 10 до 33 соответственно, и

(b) эффективное количество стероида или его фармацевтически приемлемой соли;

причем первый фосфолипид представляет собой 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (DОPC), 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (РОРС), соевый фосфатидилхолин (SPC) или яичный фосфатидилхолин (ЕPC), а второй фосфолипид - полиэтиленгликоль-дистеароилфосфатидилэтаноламин (PEG-DSPE) или диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG), и

общее количество фосфолипидов колеблется от 90 мкмоль до 150 мкмоль на 1 мл указанной фармацевтической композиции.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой стероид представляет собой внутрисуставной кортикостероид.

3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой стероид или его фармацевтически приемлемая соль представляет собой дексаметазона натрия фосфат, дексаметазон, бетаметазон, бетаметазона натрия фосфат, бетаметазона ацетат, бетаметазона дипропионат, бетаметазона валерат, мометазона фуронат, триамцинолона ацетонид, триамцинолона гексацетонид, триамцинолона диацетат, метилпреднизолона натрия сукцинат, метилпреднизолона ацетат, преднизолона тебутат, гидрокортизона ацетат, алклометазона дипропионат, галцинонид, флуорокортолон, флуоцинолона ацетонид или их комбинацию.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой стероид представляет собой дексаметазона натрия фосфат.

5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой дексаметазона натрия фосфат присутствует в количестве, колеблющемся от примерно 6 мг до примерно 18 мг на мл фармацевтической композиции.

6. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой дексаметазона натрия фосфат присутствует в количестве, колеблющемся от примерно 6 мг до примерно 12 мг на мл фармацевтической композиции.

7. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой дексаметазона натрия фосфат присутствует в количестве примерно 12 мг на мл фармацевтической композиции.

8. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой первый фосфолипид является DOPC, а второй фосфолипид - DOPG.

9. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-8, в которой количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 140 мкмоль на мл фармацевтической композиции.

10. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-8, в которой количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 135 мкмоль на мл фармацевтической композиции.

11. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-8, в которой количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 120 мкмоль на мл фармацевтической композиции.

12. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-8, в которой количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 110 мкмоль на мл фармацевтической композиции.

13. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-8, в которой количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 100 мкмоль на мл фармацевтической композиции.

14. Применение фармацевтической композиции в производстве суставной инъекции для лечения боли в суставах, причем фармацевтическая композиция включает

(а) смесь липидов, включающую первый фосфолипид, второй фосфолипид и холестерин в мол.% от 29,5 до 87 : от 3 до 37,5 : от 10 до 33 соответственно, и

(b) эффективное количество стероида или его фармацевтически приемлемой соли;

причем первый фосфолипид представляет собой 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (DОPC), 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицеро-3-фосфатидилхолин (РОРС), соевый фосфатидилхолин (SPC) или яичный фосфатидилхолин (ЕPC), а второй фосфолипид - полиэтиленгликоль-дистеароилфосфатидилэтаноламин (PEG-DSPE) или диолеоилфосфатидилглицерин (DOPG), и

общее количество фосфолипидов колеблется от 90 мкмоль до 150 мкмоль на каждую суставную инъекцию.

15. Применение по п.14, в котором стероид представляет собой внутрисуставной кортикостероид.

16. Применение по п.14, в котором стероид или его фармацевтически приемлемая соль представляет собой дексаметазона натрия фосфат, дексаметазон, бетаметазон, бетаметазона натрия фосфат, бетаметазона ацетат, бетаметазона дипропионат, бетаметазона валерат, мометазона фуронат, триамцинолона ацетонид, триамцинолона гексацетонид, триамцинолона диацетат, метилпреднизолона натрия сукцинат, метилпреднизолона ацетат, преднизолона тебутат, гидрокортизона ацетат, алклометазона дипропионат, галцинонид, флуорокортолон, флуоцинолона ацетонид или их комбинацию.

17. Применение по п.14, в котором стероид представляет собой дексаметазона натрия фосфат.

18. Применение по п.17, в котором дексаметазона натрия фосфат присутствует в количестве, колеблющемся от примерно 6 мг до примерно 18 мг на суставную инъекцию.

19. Применение по п.17, в котором дексаметазона натрия фосфат присутствует в количестве примерно 12 мг на суставную инъекцию.

20. Применение по любому из пп. 14-19, в котором первый фосфолипид является DOPC, а второй фосфолипид - DOPG.

21. Применение по любому из пп.14-19, в котором количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 140 мкмоль на суставную инъекцию.

22. Применение по любому из пп.14-19, в котором количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 135 мкмоль на суставную инъекцию.

23. Применение по любому из пп.14-19, в котором количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 120 мкмоль на суставную инъекцию.

24. Применение по любому из пп.14-19, в котором количество фосфолипидов колеблется от примерно 90 мкмоль до примерно 110 мкмоль на суставную инъекцию.

25. Применение по любому из пп.14-19, в котором количество фосфолипидов составляет примерно 90 мкмоль на суставную инъекцию.

26. Применение по любому из пп.14-19, где фармацевтическую композицию вводят посредством суставной инъекции один раз в неделю, две недели, шесть недель, месяц, два месяца, по меньшей мере 3 месяца или по меньшей мере 6 месяцев до тех пор, пока суставная боль не пройдет.

27. Способ лечения суставной боли, включающий

внутрисуставное введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 1-13.

28. Способ по п.27, в котором суставная боль является болью из-за артрита.

29. Способ по п.28, в котором артрит представляет собой псориатический, реактивный артрит или артрит, вызванный синдромом Элерса-Данлоса, гемохроматозом, гепатитом, болезнью Лайма, болезнью Шегрена, тиреоидитом Хасимото, целиакией, нецелиакийной чувствительностью к глютену, воспалительным заболеванием кишечника, пурпурой Геноха-Шенлейна, гипериммуноглобулинемией D с возвратной лихорадкой, саркоидозом, болезнью Уиппла, периодическим синдромом, ассоциированным с TNF-рецептором, грануломатозом с полиангиитом, семейной средиземноморской лихорадкой или системной красной волчанкой.

30. Способ по п.27, в котором фармацевтическую композицию вводят один раз в неделю, две недели, шесть недель, месяц, два месяца, по меньшей мере 3 месяца или по меньшей мере 6 месяцев до тех пор, пока суставная боль не пройдет.