Фармацевтическая композиция на основе N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида Российский патент 2024 года по МПК A61K31/4985 A61K9/20 A61K9/48 A61K47/38 A61K47/58 A61K47/04 A61K47/10 A61P25/22 

Изобретение относится к медицине и фармации, и касается фармацевтической композиции, содержащей в качестве действующего вещества фармацевтическую субстанцию N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида, а также приемлемые в фармацевтической технологии вспомогательные вещества при определенном количественном соотношении компонентов, выполненной в виде твердой лекарственной формы (таблетки, капсулы). Фармацевтическая субстанция N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид обладает выраженной анксиолитической и антидепрессивной активностью.

Невротические расстройства сегодня называют самым частым видом психических заболеваний во всем мире. Согласно данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), распространенность выраженных невротических расстройств в развитых странах находится на уровне примерно 15%, а их скрытые формы встречаются более чем у 50% населения [World Health Statistics 2019. Monitoring Health for the SDGs, WHO: 2019. 120 p.; World Health Statistics 2018. Monitoring Health forthe SDGs, WHO: 2018. 86 р]. Немаловажным является и социально-экономическое значение невротических расстройств (оплата нетрудоспособности, расходы на лечение, снижение работоспособности), а также их психологическая роль (влияние на личностные и социальные контакты) в жизни человека, что делает разрешение этой проблемы особенно актуальным. Одним из характерных клинических проявлений невротических расстройств являются тревожные расстройства.

Анксиолитики и антидепрессанты известны медицине с середины XX века. К этому же времени относится начало поиска новых молекул, обладающих анксиолитическим (транквилизирующим) и антидепрессивным действием, и ведутся разработки лекарственных форм на их основе.

Поиски новых транквилизаторов и антидепрессантов обусловлены необходимостью свести к минимуму побочные эффекты от их применения, устранить эффект привыкания к некоторым из них, добиться быстрого наступления противотревожного эффекта.

В ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» разработана группа лигандов TSPO относящихся к классу пирролопиразинов, а именно к 1-арилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамидам [Патент РФ №2572076], обладающих выраженной анксиолитической активностью.

Среди, лигандов TSPO этого класса, наиболее перспективным является N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид, имеющий преимущество над аналогичными соединениями.

Исследование антидепрессивной активности веществ этой группы с использованием тестов «Подвешивание за хвост» на беспородных мышах-самцах CD-I подтвердило ее наличие у N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в диапазоне доз 0,5-5 мг/кг при однократном и в дозе 0,5 мг/кг при 5-дневном внутрибрюшинном введении проявляет антидепрессивную активность [Яркова М. А., Поварнина П.Ю., Мокров Г.В., и др. Эксп. и клин. фармакология. 2017; Т. 80 (4): 3-7]. Оценка поведения грызунов в тестах «Открытое поле со световой вспышкой» и «Приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ) выявила наличие выраженной анксиолитической активности у N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в интервале доз от 0,1 до 5,0 мг/кг, сопоставимой с активностью диазепама в дозе 1,0 мг/кг при отсутствии седативного, миорелаксантного и амнестического побочных эффектов, характерных для диазепама [Ярков С.А., Мокров Г.В., Гудашева Т.А., и др. Эксп. и клин. фармакология. 2016; Т. 79 (1): 7-11].

Изучение фармакокинетики на крысах при пероральном и внутрибрюшинном введении с использованием метода ВЭЖХ/МС показало, что вещество проникает через ГЭБ.

Предпочтительно получение твердой лекарственной формы (ЛФ), в частности таблетки или капсулы, которые обладают большими преимуществами по сравнению с другими ЛФ, среди которых наиболее важными являются удобство в применении, что обеспечивает комплаенс пациентов, а также длительный срок годности. Однако, исходя из фармацевтико-технологических свойств субстанции существует необходимость в создании фармацевтической композиции. Это позволит с помощью вспомогательных веществ обеспечить оптимальные показатели сыпучести, насыпной плотности, прессуемости и распадаемости.

Задачей настоящего изобретения является разработка фармацевтической композиции на основе N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида, характеризующейся высокой анксиолитической и антидепрессивной активностью, обладающей соответствующими технологическими свойствами для получения фармацевтической композиции, в частности таблеток или капсул, критерии качества которых удовлетворяют требованиям ГФ XIV издания.

Данная цель достигается созданием фармацевтической композиции на основе N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в форме таблеток и капсул, с использованием смеси наполнителей, дезинтегрантов, связующих и скользящих веществ, позволяющих получить представленные лекарственные формы.

Техническим результатом изобретения является расширение арсенала лекарственных средств, обладающих анксиолитическим и антидепрессивным действием и улучшение технологических характеристик фармацевтической композиции на основе N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (сыпучесть, насыпная плотность, прессуемость и распадаемость) по сравнению с субстанцией.

Сущность изобретения заключается в разработке фармацевтической композиции, выполненной в твердой лекарственной форме, содержащей терапевтически эффективное количество N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в комбинации со вспомогательными веществами в количествах, находящихся в интервалах, представленных в таблице 1:

В качестве наполнителя фармацевтической композиции может применяться одно или более соединений, обеспечивающие необходимую массу таблетке. Желательно вводить наполнитель в количестве, близком к нижнему пределу интервала массы наполнителя. Предпочтительными наполнителями являются сахара, такие как лактоза, и производные целлюлозы, такие как, микрокристаллическая целлюлоза.

В качестве связующего в данной фармацевтической композиции могут быть использованы производные полимера поливинилпирролидона, предпочтительно поливинилпирролидона с молекулярной массой 28000-34000 или производные целлюлозы, предпочтительно гидроксипропилметилцеллюлоза с типом замещения 2910 или производные поливинилового спирта, предпочтительно сополимер поливинилового спирта и полиэтиленгликоля. В качестве растворителя для приготовления связующего раствора используют растворители, разрешенные для фармацевтического применения.

В качестве дезинтегрирующего вещества, облегчающего диспергирование таблетки в среде организма, используют поперечносшитый поливинилпирролидон (предпочтительно фармакопейный тип А), натрия крахмала гликолят (предпочтительно фармакопейный тип А), кроскармеллозу натрия (предпочтительно из сырья на основе хлопка).

В качестве скользящего вещества, способного устранить проблемы, связанные с формованием таблетки, например налипание таблеточной массы на пуансоны при таблетировании, преимущественно использование производные высших жирных кислот и их соли, в частности магния стеарат.

Фармацевтическая композиция выполнена в виде твердой лекарственной формы, преимущественно в виде таблетки или капсулы, содержащей 0,05 - 5,0 масс. % N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а] пиразин-3-карбоксамида. Для таблеток N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида желательно нанесение покрытия, предпочтительно Opadry® II.

Способы изготовления:

На основе данной фармацевтической композиции получают таблетки или капсулы любым подходящим для этого способом. Предпочтительно изготовление таблеток или капсул с применением технологии влажного или влагоактивизированного гранулирования.

Таблетки или капсулы, полученные из композиций данного изобретения, предпочтительно содержат (на таблетку) от приблизительно 0,05-5,00 масс. % или от приблизительно 0,025 - 10,0 мг N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида. Масса полученной таблетки или капсулы предпочтительно составляет от приблизительно 50,0 мг до приблизительно 200,0 мг. Способы, которые применяются для получения таких композиций, хорошо известны специалистам и могут применяться для приготовления этих лекарственных форм.

Осуществление настоящего изобретения демонстрируется следующими примерами, не ограничивающими его объем. Количество ингредиентов фармацевтической композиции, использованных в примерах, представлено в миллиграммах (мг). Для удобства все приведенные ниже примеры описаны в расчете на одну таблетку/капсулу.

Пример 1.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (50,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (0,025 мг) лактоза (32,725 мг), микрокристаллическая целлюлоза (15,00 мг), натрия крахмала гликолят (1,00 мг), поливинилпирролидон (1,00 мг), магния стеарат (0,25 мг).

Пример 2.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (100,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (1,00 мг) лактоза (45,00 мг), микрокристаллическая целлюлоза (30,00 мг), кроскармеллоза (4,00 мг), поперечносшитый поливинилпирролидон (4,00 мг), поливинилпирролидон (15,00 мг), магния стеарат (1,00 мг).

Пример 3.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (200,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (10,00 мг) лактоза (68,00 мг), микрокристаллическая целлюлоза (60,00 мг), поперечносшитый поливинилпирролидон (20,00 мг), поливинилпирролидон (40,00 мг), магния стеарат (2,00 мг).

Пример 4.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (100,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (0,05 мг), лактоза (65,95 мг), микрокристаллическая целлюлоза (30,00 мг), натрия крахмала гликолят (2,0 мг), гидроксипропилметилцеллюлоза (1,50 мг), магния стеарат (0,50 мг).

Пример 5.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (100,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (1,00 мг) лактоза (64,50 мг), микрокристаллическая целлюлоза (30,00 мг), кроскармеллоза (2,00 мг), гидроксипропилметилцеллюлоза (1,50 мг), магния стеарат (1,00 мг).

Пример 6.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (100,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (1,00 мг) лактоза (52,00 мг), микрокристаллическая целлюлоза (30,00 мг), кроскармеллоза (6,00 мг), гидроксипропилметилцеллюлоза (10,00 мг), магния стеарат (1,00 мг).

Пример 7.

Таблетки или капсулы получают любым подходящим для этого способом из расчета на одну таблетку (100,00 мг): N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (1,00 мг) лактоза (52,00 мг), микрокристаллическая целлюлоза (30,00 мг), кроскармеллозы (6,00 мг), сополимер поливинилового спирта и полиэтиленгликоля (Kollicoat IR) (10,00 мг), магния стеарат (1,00 мг).

Пример 8.

По представленным примерам (таблица 2) проведены исследования технологических характеристик полученных таблеток в соответствии с ГФ XIV (таблица 3 и 4).

Об улучшении технологических свойств субстанции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а] пиразин-3-карбоксамид в составе фармацевтической композиции свидетельствует увеличение степени сыпучести и уменьшение угла естественного откоса, а также оптимизация показателя насыпной плотности. На основе данных насыпной плотности рассчитаны безразмерные показатели Карра и Хауснера, значения которых позволяют наглядно судить об улучшении технологических характеристик новой фармацевтической композиции, содержащей N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид, а именно, сыпучести таблеточной массы и ее прессуемости.

В таблицах 3 и 4 приведены средние значения технологических характеристик субстанции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид, таблеточных смесей и таблеток, выполненных на их основе. Технологические характеристики измерялись согласно методикам, указанным в ГФ XIV издания, выпуск 1.

Таким образом, фармацевтические композиции, описанные в примерах 1-7, обладают улучшенными технологическими характеристиками относительно субстанции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида и твердая лекарственная форма, на их основе, соответствует нормам ГФ XIV издания (вып.2).

Пример 9.

Возможно нанесение пленочного покрытия на таблетки для улучшения органолептических показателей таблеток. Таблетки, покрытые пленочной оболочкой, получают любым подходящим для этого способом. Предпочтительно в качестве покрытия использовать Opadry® II в количестве 5-20% от изначальной массы таблетки. Предпочтительно наносить 8% покрытия Opadry® II белый на основе гидроксипропилметилцеллюлозы для обеспечения улучшения органолептических показателей (удобство применения).

Пример 10.

Влияние фармацевтической композиции в твердой лекарственной форме N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (ЛФ ГМЛ-3) на поведение мышей в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт».

В качестве исследуемого состава использовались таблетки, полученные по примеру 2, так как они обладают наилучшими показателями сыпучести, прессуемости, распадаемости, истираемости и прочности на раскол в сравнении с остальными составами, представленными выше, при этом фармакологическая активность всех составов сравнима.

С целью доказательства наличия у ЛФ ГМЛ-3 при интрагастральном введении анксиолитического эффекта использовались два вида лабораторных животных: беспородные крысы-самцы и мыши-самцы ICR и методика оценки их поведения согласно Lister R.G. (1987) [Lister R.G. Psychopharmacology. 1987; 92 (1), 180-185] и Pellow и соавт.(1985) [Pellow S., Chopin P., Pile S., Briley M. Validation of open: closed arm entries in elevated plas-maze as a nuasure of anxiety in the rat. Neurosci. Meth J. 1985, №14, p.149-167] в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ).

Методика ПКЛ основана на врожденном страхе открытого пространства и высоты у грызунов. Сущность метода заключается в анализе соотношения реакции страха животных в незнакомом пространстве и высоты с одной стороны и поисковой активности в новой обстановке с другой. В соответствии с характеристиками для лабораторных крыс и мышей формами поведения реакция страха определяется стремлением животных находиться в закрытых рукавах лабиринта, снижением двигательной активности. Поисковая активность определяет пребывание животных в открытых рукавах, увеличением двигательной активности.

Эксперимент проводился в условиях дневного освещения. В начале тестирования животное помещалось в центр лабиринта, что давало возможность переместиться в темные, либо светлые рукава лабиринта - в зависимости от преобладания тревоги (боязнь высоты, открытого пространства) или исследовательской активности (что побуждало животное выходить из «защищенных» рукавов).

Исследуемые соединения вводили интрагастрально (per os) в виде суспензии с Твин-80 и дистиллированной водой из расчета 0,1 мл на 10 г веса мыши. Животные случайным образом были разделены на группы по 8 особей в группе. Субстанция N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид (ГМЛ-3) и ЛФ ГМЛ-3 были использованы в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг; в качестве препарата сравнения использована субстанция диазепама в дозе 1 мг/кг.

Оценку поведения грызунов в тесте ПКЛ проводили через 60 мин после введения соединений. Фиксировали следующие показатели поведения животных в ПКЛ в течение 5 мин: время нахождения в открытых рукавах, время нахождения в закрытых рукавах, число заходов в открытые рукава, число заходов в закрытые рукава, пребывание (в %) животных в открытых рукавах по отношению к суммарному времени в открытых и закрытых рукавах лабиринта и число заходов (в %) в открытые рукава по отношению к суммарному числу заходов в открытые и закрытые рукава лабиринта.

Статистическую обработку полученных результатов проводили, используя однофакторный дисперсионный анализ (критерий Краскела-Уоллиса) и непараметрический анализ для независимых переменных (U-критерий Манна-Уитни).

Установлено, что в тесте ПКЛ ЛФ ГМЛ-3 в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг статистически значимо увеличила время пребывания мышей ICR в открытых рукавах лабиринта, число заходов в открытые рукава, время (%) пребывания в открытых рукавах по отношению к суммарному времени в открытых и закрытых рукавах (Т_OP/Т_Общ) и число (%) заходов в открытые рукава по отношению к суммарному числу заходов в открытые и закрытые рукава лабиринта (N_ОР/N_Общ) по сравнению с группой «плацебо», что считается основным критерием проявления анксиолитической активности (таблица 5).

Субстанция ГМЛ-3 в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг проявила выраженную анксиолитическую активность (таблица 5).

Препарат сравнения диазепам (субстанция) в дозе 1,0 мг/кг проявлял выраженный противотревожный эффект через 1 час после введения по сравнению с группой «Контроль» (таблица 5).

Таким образом, таблетированная лекарственная форма фармацевтической композиции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг при интрагастральном введении проявляла высокую анксиолитическую активность у аутбредных мышей ICR, сравнимую с активностью субстанции и препарата сравнения.

Пример 11.

Влияние фармацевтической композиции в твердой лекарственной форме N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (ЛФ ГМЛ-3) на поведение крыс в тесте ПКЛ.

В качестве исследуемого состава использовались таблетки, полученные по примеру 2, так как они обладают наилучшими показателями сыпучести, прессуемости, распадаемости, истираемости и прочности на раскол в сравнении с остальными составами, представленными выше примерами, при этом фармакологическая активность всех составов сравнима.

Вещества вводили per os, за 60 минут до тестирования. Контрольные животные получали плацебо. Растворы субстанции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (ГМЛ-3) и суспензии ЛФ ГМЛ-3 готовились с дистиллированной водой и твин-80 в день проведения эксперимента и хранились при 22±3°С не более часа.

Вещества вводили из расчета 0,2 мл на 100 г веса крысы. Субстанция и ЛФ ГМЛ-3 были использованы в дозах 0,1, 0,5 и 1,0 мг/кг. В качестве препарата сравнения использована субстанция диазепама в дозе 1 мг/кг.

Животные случайным образом были разделены на группы по 8-9 особей в группе.

Показано, что при однократном введении субстанции ГМЛ-3 в дозе 0,5 мг/кг статистически значимо увеличивалось время пребывания крыс в открытых рукавах лабиринта, время (%) пребывания в открытых рукавах по отношению к суммарному времени в открытых и закрытых рукавах и число заходов в открытые рукава лабиринта по сравнению с группой «контроль», что считается основным критерием проявления анксиолитической активности. Также увеличивается число (%) заходов в открытые рукава по отношению к суммарному числу заходов в открытые и закрытые рукава лабиринта по сравнению с контрольной группой, но полученные результаты не достоверны (таблица 6).

Субстанция ГМЛ-3 в дозе 1,0 мг/кг статистически значимо увеличила время пребывания крыс в открытых рукавах ПКЛ, время (%) пребывания в открытых рукавах по отношению к суммарному времени нахождения в открытых и закрытых рукавах по сравнению с группой «Контроль».

В дозе 0,1 мг/кг субстанция ГМЛ-3 не оказала влияние на поведение крыс в тесте ПКЛ (таблица 6).

Однократное введение ЛФ ГМЛ-3 в дозе 0,5 мг/кг оказывало анксиолитическое действие на поведение животных, что выразилось в статистически значимом отличии по всем исследуемым показателям от группы «Плацебо», регистрируемым в тесте ПКЛ (таблица 6).

В дозе 1,0 мг/кг ЛФ ГМЛ-3 достоверно снизила время пребывания крыс в закрытых рукавах лабиринта, увеличило число заходов в открытые рукава, а также общее число заходов в открытые и закрытые рукава.

ЛФ ГМЛ-3 в дозе 0,1 мг/кг достоверно увеличила только показатель времени (%) пребывания в открытых рукавах по отношению к суммарному времени в открытых и закрытых рукавах в сравнении с группой «Плацебо» (таблица 6).

Препарат сравнения диазепам (субстанция) в дозе 1,0 мг/кг достоверно увеличил число заходов и время пребывания крыс в открытых рукавах лабиринта, время (%) пребывания в открытых рукавах по отношению к суммарному времени в открытых и закрытых рукавах лабиринта по сравнению с группой «Контроль» (таблица 6).

Таким образом, таблетированная лекарственная форма фармацевтической композиции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида при однократном введении проявляет анксиолитическую активность у крыс в тесте ПКЛ, наиболее выраженную в дозе 0,5 мг/кг.

Пример 12.

Влияние лекарственной формы N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (ЛФ ГМЛ-3) на поведение крыс в тесте «Вынужденного плавания по Порсолту».

Основным показателем выраженности депрессивно-подобного состояния по тесту вынужденного плавания является длительность неподвижности, т.е. сумма эпизодов иммобильности у каждого животного в течение периода наблюдения. Тест «Вынужденного плавания по Порсолту» основан на том, что животные при помещении в прозрачный цилиндр наполненный водой, начинают проявлять бурную двигательную активность, направленную на поиск выхода из аверсивной ситуации. Затем животные довольно быстро прекращают попытки выбраться из сосуда и замирают в характерной позе, оставаясь неподвижными (иммобильность). В этом тесте, неподвижность животного интерпретируется как пассивный стресс, депрессия, т.е. как поведение отчаяния. Установка для создания депрессивно-подобного состояния (поведенческого отчаяния) по методу Porsolt у крыс представляет собой сосуд цилиндрической формы диаметром 20 см и высотой 45 см (ООО «НПК Открытая Наука»). Цилиндр наполняют на 2/3 водой, температура которой поддерживается на уровне 25°С±1°С. Смена воды осуществлялась после каждой группы животных. Предварительно, за сутки до тестирования каждое животное опускают в сосуд с водой для адаптации. В день эксперимента животное помещают в цилиндр с водой таким образом, чтобы оно не могло ни выбраться из сосуда, ни найти в нем опору, т.е. касаться лапами дна. Попадая в воду, животные начинают проявлять бурную двигательную активность, направленную на поиск выхода из аверсивной стрессорной ситуации, но затем оставляют эти попытки и зависают в воде в характерной позе, оставаясь неподвижными или совершая незначительные движения, необходимые для поддержания головы над поверхностью воды. Это поведение расценивается как проявление отчаяния, подавленности, депрессивно-подобного состояния. Основным показателем выраженности депрессивно-подобного состояния по данному тесту является длительность неподвижности, т.е. сумма эпизодов иммобильности у каждого животного в течение 6 минут наблюдения [Porsolt R.D., Pichon M.Le, Jalfre M. Depression: a new animal models ensitive to antidepressant treatments. Nature. 1977. V. 266. P. 730-732; Андреева Н.И. Методические указания по изучению антидепрессантной активности фармакологических веществ. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, под ред. член-корр. РАМН Р.У. Хабриева. М., 2005. С.244-253].

Эксперименты были проведены на беспородных крысах-самцах, полученных из филиала «Столбовая» ФГБУН «НЦБМТ» ФМБА России, массой 180-200 г. Животные содержались в лабораторном виварии на постоянном доступе к корму и воде при использовании полного рациона экструдированного брикетированного корма и питьевой воды при температурном режиме 20-22 градуса по Цельсию, при световом цикле - 12 часов светлый и 12 часов темный периоды, в пластмассовых клетках с верхней крышкой из нержавеющей стали с подстилкой, обеспыленной из деревянной стружки, по 10 крыс в каждой клетке.

Вещества вводили per os (однократно), за 60 минут до тестирования. Контрольные животные получали дистиллированную воду, дистиллированную воду с твин-80 и плацебо. Растворы субстанции и суспензии ЛФ ГМЛ-3 готовились с дистиллированной водой и твин-80 в день проведения эксперимента и хранились при 22±3°С не более часа.

Вещества вводили из расчета 0,2 мл на 100 г веса крысы. Субстанция и ЛФ ГМЛ-3 были использованы в дозах 0,1; 0,5 мг/кг. В качестве препарата сравнения был использован классический антидепрессант амитриптилин в дозе 10 мг/кг.

Обработку результатов экспериментов ЛФ ГМЛ-3 крыс проводили с помощью программы статистического анализа "StatPlus Pro 6.2", используя однофакторный дисперсионный анализ (критерий Краскела-Уоллиса) и непараметрический анализ для независимых переменных (U-критерий Манна-Уитни). Различия считали статистически значимыми при р<0,05. Данные представлены в виде медианы и верхнего и нижнего квартилей.

Показано, что при однократном введении субстанции ГМЛ-3 в дозе 0,1 и 0,5 мг/кг у крыс наблюдалось достоверно значимое снижение времени иммобильности в тесте «Вынужденного плавания по Порсолту» по сравнению с контрольной группой животных, получавшим воду (таблица 7).

В дозе 1,0 мг/кг субстанция ГМЛ-3 не оказывала влияние на поведение крыс в тесте «Вынужденного плавания по Порсолту» (таблица 7).

Препарат сравнения амитриптилин в дозе 10 мг/кг значимо снижал время иммобильности в тесте «Вынужденного плавания по Порсолту» в сравнении с контролем (таблица 7).

Однократное введение ЛФ ГМЛ-3 в дозе 0,5 мг/кг вызывало статистически значимое снижение времени иммобильности в сравнении с группой «Плацебо» (таблица 7).

В дозах 0,1 и 1,0 мг/кг однократно ЛФ ГМЛ-3 не влияла на время иммобильности крыс в тесте «Вынужденного плавания по Порсолту».

Таким образом, таблетированная лекарственная форма фармацевтической композиции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в дозе 0,5 мг/кг при однократном введении проявляет антидепрессивную активность, достоверно уменьшая время иммобильности у крыс в тесте вынужденного плавания по Порсолту.

Пример 13.

Влияние лекарственной формы N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (ЛФ ГМЛ-3) на поведение мышей в тесте «Подвешивание за хвост».

Антидепрессивная активность ЛФ ГМЛ-3 при однократном введении была изучена в тесте «Подвешивание за хвост» на аутбредных мышах-самцах ICR. Этот тест является стандартным методом оценки депрессивного поведения грызунов. [Stem L., Chermat R., Thierry В., Simon P. The tail suspension test: a new method for screening antidepressants in mice. Psychopharmacology (Berl). 1985; V. 85(3): 367-370].

В работе использована установка фирмы PanLab (камера 51 см × 25 см × 15 см, разделенная на три отсека), позволяющая обеспечить стандартные условия выполнения теста одновременно для трех животных. Животное подвешивают за хвост, после чего датчики-преобразователи в течение 6 минут регистрируют суммарное время неподвижности мыши, пытающейся избежать подвешивания. Снижение длительности иммобильности у животных опытных групп по сравнению с контролем расценивалось как наличие антидепрессивных свойств у вещества.

Субстанцию и ЛФ ГМЛ-3 вводили в дозах 0,1, 0,5 и 1,0 мг/кг однократно интрагастрально за 60 минут до эксперимента.

ЛФ ГМЛ-3 в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг статистически значимо по сравнению с группой «Плацебо» снижал время неподвижности мышей ICR (таблица 8).

Субстанция ГМЛ-3 в аналогичных дозах 0,5 и 1,0 мг/кг также значимо снижало время неподвижности мышей по сравнению с контрольной группой (таблица 8).

Препарат сравнения Амитриптилин в дозе 10 мг/кг при аналогичном режиме введения выражено уменьшал время неподвижности лабораторных животных (таблица 8).

Таким образом, в тесте «Подвешивание за хвост» показано, что таблетированная лекарственная форма фармацевтической композиции N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида в дозах 0,5 и 1,0 мг/кг оказывает достоверный антидепрессивный эффект при однократном введении.

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармации, и раскрывает фармацевтическую композицию в виде твердой лекарственной формы, обладающую анксиолитической и антидепрессивной активностью, содержащую N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид и вспомогательные вещества: наполнитель - лактозу и микрокристаллическую целлюлозу, дезинтегрант - поперечносшитый поливинилпирролидон (кросповидон) и/или кроскармелозу натрия или натрия крахмала гликолят, связующее вещество - поливинилпирролидон с молекулярной массой 28000-34000 или гидроксипропилметилцеллюлозу с типом замещения 2910 или сополимер поливинилового спирта и полиэтиленгликоля и скользящее - магния стеарат в следующем соотношении, мас.%: N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид 0,05-5,0; наполнитель 64,00-95,95; дезинтегрант 2,00-10,00; связующее 1,50-20,00; скользящее 0,50-1,00. Техническим результатом изобретения является расширение арсенала лекарственных средств, обладающих анксиолитическим и антидепрессивным действием и улучшение технологических характеристик фармацевтической композиции на основе N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамида (сыпучесть, насыпная плотность, прессуемость и распадаемость) по сравнению с субстанцией. 1 з.п. ф-лы, 8 табл., 13 пр.

1. Фармацевтическая композиция в виде твердой лекарственной формы, обладающая анксиолитической и антидепрессивной активностью, содержащая N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид и вспомогательные вещества: наполнитель - лактозу и микрокристаллическую целлюлозу, дезинтегрант - поперечносшитый поливинилпирролидон (кросповидон) и/или кроскармелозу натрия или натрия крахмала гликолят, связующее вещество - поливинилпирролидон с молекулярной массой 28000-34000 или гидроксипропилметилцеллюлозу с типом замещения 2910 или сополимер поливинилового спирта и полиэтиленгликоля и скользящее - магния стеарат в следующем соотношении, мас.%:

N-бутил-N-метил-1-фенилпирроло[1,2-а]пиразин-3-карбоксамид 0,05-5,0 Наполнитель 64,00-95,95 Дезинтегрант 2,00-10,00 Связующее 1,50-20,00 Скользящее 0,50-1,00

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, предназначенная для формования таблеток или заполнения капсул.