Способ получения 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов Российский патент 2024 года по МПК C07D275/04 

Изобретение относится к способу получения 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов общей формулы 1,

где R = гетероароматический заместитель (2-тиенил, 2-фурил, 5-метил-2-фурил), представляющих интерес как биоциды [Silva, V., Silva, C., Soares, P., Garrido, E. M., Borges, F., Garrido, J. Isothiazolinone biocides: chemistry, biological, and toxicity profiles // Molecules. 2020. Vol. 25. N 4. 991, https://doi.org/10.3390/molecules25040991] и потенциальные антираковые/ противоопухолевые препараты [Gorsuch, S., Bavetsias, V., Rowlands, M. G., Aherne, G. W., Workman, P., Jarman, M., McDonald, E. Synthesis of isothiazol-3-one derivatives as inhibitors of histone acetyltransferases (HATs) // Bioorg. Med. Chem. 2009. Vol. 17. N 2. P. 467-474. https://doi.org/10.1016/j.bmc.2008.11.079].

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией замещенных 2-меркаптоникотинамидов с горячей концентрированной серной кислотой, выступающей одновременно в роли окислителя и растворителя, с последующим растворением продукта в водном растворе аммиака, отделением нерастворимых примесей фильтрованием и подкислением уксусной кислотой [Furdas, S. D., Shekfeh, S., Bissinger, E. M., Wagner, J. M., Schlimme, S., Valkov, V., Hendzel, M., Jung, M., & Sippl, W. Synthesis and biological testing of novel pyridoisothiazolones as histone acetyltransferase inhibitors // Bioorganic & medicinal chemistry, 2011, Vol. 19, N 12, P. 3678-3689. https://doi.org/10.1016/j.bmc.2011.01.063; T. Zawisza, W. Malinka. Synthesis and properties of some derivatives of 2H-4,6-dimethylpyrido[3,2-d]isothiazolin-3-one // Farmaco, 1985, vol. 40, N 2, p. 124-132; Патент CN109942505 (2019);

https://patents.google.com/patent/CN109942505A/en?oq=+CN109942505]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - горячей концентрированной серной кислотой, длительность процесса, жесткие условия синтеза, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией 3-карбамоилпиридин-2(1Н)-тионов с концентрированной серной кислотой при 100°С [Krauze, A. A., Bomika, Z. A., Pelcher, Y. E., Mazheika, I. B., Dubur, G. Y. Synthesis of 3-oxoisothiazolo[5,4-b] pyridines // Chemistry of Heterocyclic Compounds, 1982, Vol. 18, N 4, P. 385-390 https://link.springer.com/article/10.1007/BF00503559, (Химия гетероциклических соединений, 1982, Т. 18, № 4, С. 508-512; Krause, A. A., Rumler, A., Hagen, F., Jansch, H. J., Shturm, I. G., Dubur, G. Y. Synthesis of 3-(N-R) carbamoyl-5-(pyrid-4′-yl) pyridine-2 (1H)-thiones and their derivatives // Chemistry of Heterocyclic Compounds, 1992, Vol. 28, P. 67-70. https://link.springer.com/article/10.1007/BF00529482; (Химия гетероциклических соединений, 1992, № 1, С. 75-79]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - горячей концентрированной серной кислотой, жесткие условия синтеза, длительность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией 3-цианопиридин-2(1Н)-тионов с концентрированной серной кислотой при 100°С [Krauze, A. A., Bomika, Z. A., Pelcher, Y. E., Mazheika, I. B., Dubur, G. Y. Synthesis of 3-oxoisothiazolo[5,4-b] pyridines // Chemistry of Heterocyclic Compounds, 1982, Vol. 18, N 4, P. 385-390 https://link.springer.com/article/10.1007/BF00503559, (Химия гетероцикли-ческих соединений, 1982, Т. 18, № 4, С. 508-512; T. Zawisza, W. Malinka. Synthesis and properties of some derivatives of 2H-4,6-dimethylpyrido[3,2-d]isothiazolin-3-one // Farmaco, Ed. Sci. 1985, vol. 40, N 2, p. 124-132; Патент WO2012072019A1 2012-06-07, https://worldwide.espacenet.com/patent/search/family/046171205/publication/WO2012072019A1?q=pn%3DWO2012072019A1, Chen, Y. H., Hsu, H. Y., Yeh, M. T., Chen, C. C., Huang, C. Y., Chung, Y. H., Chang, Z. F., Kuo, W. C., Chan, N. L., Weng, J. H., Chung, B. C., Chen, Y. J., Jian, C. B., Shen, C. C., Tai, H. C., Sheu, S. Y., Fang, J. M. Chemical Inhibition of human thymidylate kinase and structural insights into the phosphate binding loop and ligand-induced degradation // Journal of Medicinal Chemistry, 2016, Vol. 59, N 21, P. 9906-9918. https://doi.org/10.1021/acs.jmedchem.6b01280; Ahmed, Gamal A. Some reactions of 3-cyano-4,6-dimethyl-2(1H) pyridinethione. Part-2// J. Ind. Chem. Soc. 1996, vol. 73, N 2-3, pp. 141-143; Deeb, A., Essawy, A., El-Gendy, A. M., Shaban, A. Heterocyclic synthesis with 3-cyano-2(1H) pyridinethione: Synthesis of 3-oxo-2,3-dihydroisothiazolo[5,4-b]pyridine and related compounds // Monatsh. Chem. 1990. Vol. 121, pp. 281-287. https://link.springer.com/article/10.1007/BF00808929]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - горячей концентрированной серной кислотой, длительность процесса, жесткие условия синтеза, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов окислительной циклизацией 2-меркаптоникотинамидов под действием кислорода в присутствии катализатора CuI в ДМФА при нагревании [Stockwell B. R., Zask A., Kaplan A. Neuroprotective pdi modulating small molecules and methods of use thereof. Заявка WO2020113222A1. https://worldwide.espacenet.com/patent/search?q=pn%3DWO2020113222]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования катализатора, жесткие условия синтеза, необходимость работать в атмосфере кислорода, длительность процесса.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов окислительной циклизацией 4,6-дизамещенных 2-меркаптоникотинамидов под действием йода в бензоле при кипячении в течение 5 ч [Deeb, A., Essawy, A., El-Gendy, A. M., Shaban, A. Heterocyclic synthesis with 3-cyano-2(1H) pyridinethione: Synthesis of 3-oxo-2,3-dihydroisothiazolo[5,4-b]pyridine and related compounds // Monatsh. Chem. 1990. Vol. 121, pp. 281-287. https://link.springer.com/article/10.1007/BF00808929; Ahmed, Gamal A. Some Reactions of 3-Cyano-4,6-dimethyl-2(1H) pyridinethione. Part-2// J. Ind. Chem. Soc. 1996, vol. 73, N 2-3, pp. 141-143]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования стехиометрического количества относительно дорогого йода, длительность процесса, относительно жесткие условия синтеза, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией N-замещенных 3-карбамоилпиридин-2(1Н)-тионов с йодом в присутствии триэтиламина [Gorsuch, S., Bavetsias, V., Rowlands, M. G., Aherne, G. W., Workman, P., Jarman, M., McDonald, E. Synthesis of isothiazol-3-one derivatives as inhibitors of histone acetyltransferases (HATs) // Bioorg. Med. Chem. 2009. Vol. 17. N 2. P. 467-474.

https://doi.org/10.1016/j.bmc.2008.11.079]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования стехиометрического количества относительно дорогого йода, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией 2-меркаптоникотинамидов с йодом в присутствии NaHCO₃ или NaOH в этаноле [Pagani, G., Pregnolato, M., Ubiali, D., Terreni, M., Piersimoni, C., Scaglione, F., Fraschini, F., Gascón, A. R., Pedraz Muñoz, J. L. Synthesis and in vitro anti-mycobacterium activity of N-alkyl-1,2-dihydro-2-thioxo-3-pyridinecarbothioamides. Preliminary toxicity and pharmacokinetic evaluation // J. Med. Chem. 2000, Vol. 43, N 2, P. 199-204. https://doi.org/10.1021/jm991044p; Pregnolato, M., Terreni, M., Ubiali, D., Pagani, G., Borgna, P., Pastoni, F., & Zampollo, F. (2000). 3H-[1,2]Dithiolo[3,4-b]pyridine-3-thione and its derivatives synthesis and antimicrobial activity // Farmaco, 2000, Vol. 55, N 11-12, P. 669-679. https://doi.org/10.1016/s0014-827x(00)00084-7; Schaper, W. Heterocyclen-Synthesen mit Monothiomalonsäure-Amiden: Synthese von 3-Oxo-2,3-dihydroisothiazolo[5,4-b]pyridinen und 3-Oxo-2,3-dihydroisothiazolo[5,4-d]pyrimidinen // Synthesis, 1985, Vol. 1985, N 09, S. 861-867. DOI: 10.1055/s-1985-31365; Baggaley, K. H., Jennings, L. J. A., & Tyrrell, A. W. R. Synthesis of 2-substituted isothiazolopyridin-3-ones // Journal of Heterocyclic Chemistry, 1982, Vol. 19, N 6, P. 1393-1396. https://doi.org/10.1002/jhet.5570190628]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования стехиометрического количества относительно дорогого йода, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенного 5-аминоизотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она окислительной циклизацией замещенного 5-амино-2-тиоксо-1,2-дигидроникотинамида под действием брома в ССl₄ [Martinez-Merino, V., Gil, M. J., Gonzalez, A., Zabalza, J. M., Navarro, J., Manu, M. A. New 5-substituted derivatives of ethyl 2,3-dihydro-3-oxoisothiazolo[5,4-b]pyridine-2-acetate // Heterocycles, 1994, Vol. 38, N 2, P. 333-344]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования агрессивного реагента - брома, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенного изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она окислительной циклизацией замещенного 2-меркапто-N-фенил-никотинамида под действием брома в кипящем пиридине [Sherif, M., Assy, M., Yousif, N., Galahom, M. Studies on heterocyclization of acetoacetanilide // Journal of the Iranian Chemical Society, 2013, Vol. 10, pp. 85-91; https://link.springer.com/article/10.1007/s13738-012-0128-x]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования агрессивного реагента - брома, труднодоступность исходного 2-меркаптоникотинамида, жесткие условия синтеза и длительность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенного изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она окислительной циклизацией замещенного 2-меркапто-N-фенил-никотинамида под действием хлора в уксусной кислоте [Sherif, M., Assy, M., Yousif, N., Galahom, M. Studies on heterocyclization of acetoacetanilide // Journal of the Iranian Chemical Society, 2013, Vol. 10, pp. 85-91; https://link.springer.com/article/10.1007/s13738-012-0128-x]:

Недостатком данного метода являются необходимость использования агрессивного газообразного реагента - хлора, длительность процесса, труднодоступность исходного 2-меркаптоникотинамида, применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов, а также протекание побочного процесса окисления по атому серы.

Известен способ получения замещенного изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она обработкой замещенного 2-меркапто-N-фенилникотинамида раствором гипохлорита натрия в присутствии аммиака в воде [Sherif, M., Assy, M., Yousif, N., Galahom, M. Studies on heterocyclization of acetoacetanilide // Journal of the Iranian Chemical Society, 2013, Vol. 10, pp. 85-91; https://link.springer.com/article/10.1007/s13738-012-0128-x]:

Недостатком данного метода является труднодоступность исходного 2-меркаптоникотинамида, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения функционально замещенных изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов окислительной циклизацией 2-меркаптоникотинамидов под действием красной кровяной соли в присутствии NaOH в воде [Ahmed, Gamal A. // J. Ind. Chem. Soc. 1996, vol. 73, N 2-3, pp. 141-143; Hussain S. M., Sherif S. M., Youssef M. M. New Synthesis of Polyfunctionally Substituted 2-Mercaptopyridines and Fused Pyridines // Gazzetta Chimica Italiana, 1994, vol. 124, N 2, p. 97-102; Deeb, A., Essawy, A., El-Gendy, A. M., Shaban, A. Heterocyclic synthesis with 3-cyano-2(1H) pyridinethione: Synthesis of 3-oxo-2,3-dihydroisothiazolo[5,4-b]pyridine and related compounds // Monatsh. Chem. 1990. Vol. 121, pp. 281-287. https://link.springer.com/article/10.1007/BF00808929]:

Недостатком данного метода являются необходимость очистки продуктов от неорганических примесей (желтой кровяной соли), а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения функционально замещенных изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов окислительной циклизацией 3-карбамоилпиридин-2(1Н)-тионов под действием красной кровяной соли в присутствии NaOH в воде [Schaper, W. Heterocyclen-Synthesen mit Monothiomalonsäure-Amiden: Synthese von 3-Oxo-2, 3-dihydroisothiazolo[5,4-b]pyridinen und 3-Oxo-2,3-dihydroisothiazolo[5,4-d]pyrimidinen // Synthesis, 1985, Vol. 1985, N 9, S. 861-867. DOI: 10.1055/s-1985-31365]:

Недостатком данного метода являются необходимость очистки продуктов от неорганических примесей (желтой кровяной соли), а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией N-замещенных 3-карбамоилпиридин-2(1Н)-тионов с тионилхлоридом и пиридином в хлористом метилене [Monge, A., Martinez-Merino, V., Fernandez-Alvarez, E. Synthesis of 2-substituted 3-oxoisothiazolo[5,4-b]pyridines // J. Heterocycl. Chem. 1985, Vol. 22, N 5. P. 1353-1356. https://doi.org/10.1002/jhet.5570220543]:

Недостатком данного метода являются необходимость работы с агрессивным реагентом - тионилхлоридом, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенного изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она 4 реакцией 2-(бензилтио)-4,6-диметилникотинамида или 2-(бензилтио)-4,6-диметилникотинонитрила с горячей концентрированной серной кислотой [T. Zawisza, W. Malinka. Synthesis and properties of some derivatives of 2H-4,6-dimethylpyrido[3,2-d]isothiazolin-3-one // Farmaco, 1985, vol. 40, N 2, p. 124-132]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - горячей концентрированной серной кислотой, необходимость предварительного получения исходных S-бензильных производных, низкая атом-экономность процесса, жесткие условия синтеза, длительность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенных изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов окислением 2-(бензилтио)никотинамидов сульфурилхлоридом при нагревании [Wright, S. W., Petraitis, J. J., Abelman, M. M., Batt, D. G., Bostrom, L. L., Corbett, R. L., Decicco, C. P., Di Meo, S. V., Freimark, B., Giannaras, J. V. Heteroaryl-fused 2-phenylisothiazolone inhibitors of cartilage breakdown // Journal of Medicinal Chemistry, 1994, Vol. 37, N 19, pp 3071-3078. https://doi.org/10.1021/jm00045a012; Furdas, S. D., Shekfeh, S., Bissinger, E. M., Wagner, J. M., Schlimme, S., Valkov, V., Hendzel, M., Jung, M., Sippl, W. Synthesis and biological testing of novel pyridoisothiazolones as histone acetyltransferase inhibitors // Bioorganic & medicinal chemistry, 2011, Vol. 19, N 12, P. 3678-3689. https://doi.org/10.1016/j.bmc.2011.01.063]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - сульфурилхлоридом, необходимость предварительного получения исходных S-бензильных производных, низкая атом-экономность процесса, относительно жесткие условия синтеза, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенных изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов взаимодействием 2-(бензилтио)никотинамид-S-оксидов с ангидридом трихлоруксусной кислоты по модифицированной реакции Пуммерера [Wright, S. W., Petraitis, J. J., Abelman, M. M., Batt, D. G., Bostrom, L. L., Corbett, R. L., Decicco, C. P., Di Meo, S. V., Freimark, B., Giannaras, J. V. Heteroaryl-fused 2-phenylisothiazolone inhibitors of cartilage breakdown // Journal of medicinal chemistry, 1994, 37(19), pp 3071-3078. https://doi.org/10.1021/jm00045a012; Wright, S. W., Abelman, M. M., Bostrom, L. L., Corbett, R. L. Benzyl and t-butyl sulfoxides as sulfenyl halide equivalents: a convenient preparation of benzisothiazolones // Tetrahedron letters, 1992, Vol. 33, N 2, P. 153-156. https://doi.org/10.1016/0040-4039(92)88037-6; Furdas, S. D., Shekfeh, S., Bissinger, E. M., Wagner, J. M., Schlimme, S., Valkov, V., Hendzel, M., Jung, M., Sippl, W. Synthesis and biological testing of novel pyridoisothiazolones as histone acetyltransferase inhibitors // Bioorganic & medicinal chemistry, 2011, Vol. 19, N 12, P. 3678-3689. https://doi.org/10.1016/j.bmc.2011.01.063]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - ангидридом трихлоруксусной кислоты, необходимость предварительного получения исходных бензил-S-оксидов, низкая атом-экономность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенного изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она окислением N-изопропил-2-(трет-бутилтио)никотинамида метахлорпербензойной кислотой (mCPBA) с последующей обработкой пиридином в кипящем толуоле [Gangireddy, P., Patro, V., Lam, L., Morimoto, M., Liebeskind, L. S. Mechanism of Acylative Oxidation-Reduction-Condensation Reactions Using Benzoisothiazolones as Oxidant and Triethylphosphite as Stoichiometric Reductant // J. Org. Chem., 2017, Vol. 82, N 7, P. 3513-3529. https://doi.org/10.1021/acs.joc.7b00020]:

Недостатком данного метода являются многостадийность процесса, необходимость предварительного получения исходного N-изопропил-2-(трет-бутилтио)никотинамида, жесткие условия синтеза на последней стадии, длительность процесса, низкая атом-экономность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенных изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией 2-(трет-бутилтио)никотинамид-S-оксидов с пиридином в кипящем толуоле [Wright, S. W., Abelman, M. M., Bostrom, L. L., Corbett, R. L. Benzyl and t-butyl sulfoxides as sulfenyl halide equivalents: a convenient preparation of benzisothiazolones // Tetrahedron letters, 1992, Vol. 33, N 2, P. 153-156. https://doi.org/10.1016/0040-4039(92)88037-6; Liebeskind, L. S., Gangireddy, P., Lindale, M. G. Benzoisothiazolone Organo/Copper-Cocatalyzed Redox Dehydrative Construction of Amides and Peptides from Carboxylic Acids using (EtO)₃P as the Reductant and O₂ in Air as the Terminal Oxidant // J. Am. Chem. Soc., 2016, Vol. 138, N 21, P. 6715-6718. https://doi.org/10.1021/jacs.6b031684; Wright, S. W., Petraitis, J. J., Abelman, M. M., Batt, D. G., Bostrom, L. L., Corbett, R. L., Decicco, C. P., Di Meo, S. V., Freimark, B., Giannaras, J. V. Heteroaryl-fused 2-phenylisothiazolone inhibitors of cartilage breakdown // Journal of medicinal chemistry, 1994, 37(19), pp 3071-3078. https://doi.org/10.1021/jm00045a012]:

Недостатком данного метода являются необходимость предварительного получения исходных сульфоксидов, жесткие условия синтеза, низкая атом-экономность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией замещенных бис(3-карбамоилпирид-2-ил)дисульфидов с тионилхлоридом и пиридином в хлороформе [Monge, A., Martinez-Merino, V., Fernandez-Alvarez, E. Synthesis of 2-substituted 3-oxoisothiazolo[5,4-b]pyridines // J. Heterocycl. Chem. 1985, Vol. 22, N 5. P. 1353-1356. https://doi.org/10.1002/jhet.5570220543]:

Недостатком данного метода являются необходимость работы с агрессивным реагентом - тионилхлоридом, многостадийность синтеза в связи с необходимостью получения исходных бис(3-карбамоилпирид-2-ил)дисульфидов, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией замещенных бис(3-карбамоилпирид-2-ил)дисульфидов с триэтиламином в дихлорметане [Monge A., Martinez-Merino V., Fernández-Alvarez E. Synthesis of 2,2′-dithiobis- and 2,2′-trithiobis-3-pyridinecarboxylic acid derivatives as new potential radiosensitizers/ radioprotectors // J. Heterocycl. Chem. 1988. Vol. 25. № 1. P. 23-28. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/jhet.5570250103]:

Недостатком данного метода являются многостадийность синтеза в связи с необходимостью получения исходных бис(3-карбамоилпирид-2-ил)дисульфидов, низкие выходы целевых продуктов, образование побочных продуктов и связанная с этим фактом необходимость очистки/выделения целевого изотиазолопиридина, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения 4,6-дифенилизотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-она реакцией замещенного бис(4,6-дифенил-3-цианопирид-2-ил)дисульфида с концентрированной серной кислотой при 100°С [Krauze, A. A., Bomika, Z. A., Pelcher, Y. E., Mazheika, I. B., Dubur, G. Y. Synthesis of 3-oxoisothiazolo[5,4-b] pyridines // Chemistry of Heterocyclic Compounds, 1982, Vol. 18, N 4, P. 385-390 https://link.springer.com/article/10.1007/BF00503559, (Химия гетероциклических соединений, 1982, Т. 18, № 4, С. 508-512]:

Недостатком данного метода являются необходимость работать агрессивным реагентом - горячей концентрированной серной кислотой, многостадийность синтеза в связи с необходимостью получения исходного бис(4,6-дифенил-3-цианопирид-2-ил)дисульфида, длительность процесса, жесткие условия синтеза, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Известен способ получения замещенных изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов реакцией 2-(бензгидрилсульфинил)никотинамидов действием HCl в метаноле [Terauchi, H., Tanitame, A., Tada, K., & Nishikawa, Y. A Convenient Synthesis of N-Substituted 2,3-Dihydro-3-oxoisothiazolo(5,4-b) pyridines in Acidic Conditions // Heterocycles, 1996, Vol. 43, N 8, P. 1719-1734. DOI: 10.3987/COM-96-7505]:

Недостатком данного метода являются необходимость предварительного получения исходных сульфоксидов, низкая атом-экономность процесса, а также применимость вышеуказанного подхода к ограниченному кругу гетероароматических субстратов.

Наиболее близким аналогом (прототипом) к предлагаемому техническому решению является способ получения изотиазоло[5,4-b]пиридинов 2 реакцией N-арил-2-тиоксоникотинамидов 3 в диметилсульфоксиде (ДМСО) в присутствии водной соляной кислоты при кратковременном кипячении в течение 1 минуты [Доценко В. В., Кривоколыско С. Г. Окисление тиоамидов системой ДМСО-HCl: удобный и эффективный метод синтеза 1,2,4-тиадиазолов, изотиазоло[5,4-b]пиридинов и гетероциклических дисульфидов // Химия гетероциклических соединений. 2013. № 4. С. 682-690; http://hgs.osi.lv/index.php/hgs/article/view/561; V. V. Dotsenko and S. G. Krivokolysko. Оxidation of thioamides with the DMSO-HCl system: a convenient and efficient method for the synthesis of 1,2,4-thiadiazoles, isothiazolo[5,4-b]pyridines, and heterocyclic disulfides // Chemistry of Heterocyclic Compounds. 2013. Vol. 49. № 4. P. 636-644. https://link.springer.com/article/10.1007/s10593-013-1291-4]:

Преимуществами метода являются высокие (81-89%) выходы целевых продуктов, высокая атом-экономность синтеза, высокая скорость протекания процесса, отсутствие необходимости использования агрессивных реагентов, доступность исходных реагентов, одностадийность процесса окисления. Также преимуществом процесса являются мягкие условия реакции при высокой эффективности окисления - система ДМСО+активный электрофил (HCl, SOCl₂, I₂ и др.) широко используется в органическом синтезе для проведения мягкого окисления широкого круга субстратов [Mancuso A. J., Swern D. Activated dimethyl sulfoxide: useful reagents for synthesis // Synthesis. 1981. Vol. 1981. № 3. P. 165-185. DOI: 10.1055/s-1981-29377; Epstein W. W., Sweat F. W. Dimethyl sulfoxide oxidations // Chem. Rev. 1967. Vol. 67. № 3. P. 247-260. https://doi.org/10.1021/cr60247a001; Tojo G., Fernández M. Activated Dimethyl Sulfoxide. In: Oxidation of Alcohols to Aldehydes and Ketones: A Guide to Current Common Practice. Springer, 2006. P. 97-179. https://link.springer.com/chapter/10.1007/0-387-25725-X_2; Monga A., Bagchi S., Sharma A. Iodine/DMSO oxidations: a contemporary paradigm in C-N bond chemistry // New Journal of Chemistry. 2018. Vol. 42. № 3. P. 1551-1576. DOI https://doi.org/10.1039/C7NJ04513A].

Однако недостатком прототипа является применимость данного процесса только к синтезу ароматических субстратов, а также невозможность значительной модификации молекулы за счет появления в ходе реакции новых функциональных групп.

Задачей изобретения является расширение арсенала способов получения изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-онов с использованием неароматических субстратов и проведение одновременной функционализации молекулы в ходе реакции окисления.

Техническим результатом предлагаемого способа является получение ранее не описанных частично насыщенных 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов 1.

Для достижения технического результата предлагается проводить обработку доступных [Родиновская Л.А., Шестопалов А.М., Нестеров В.Н. // ХГС. 1996. № 10. С. 1376; Rodinovskaya L.A., Shestopalov A.M., Nesterov V.N. // Chem. Heterocycl. Compds. 1996. Vol. 32. N 10. P. 1182. doi: 10.1007/BF01169231] 6-амино-4-гетарил-3-карбамоил-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолатов триэтиламмония 4 системой ДМСО-водная соляная кислота при 25°С в течение непродолжительного времени (5-15 минут):

где R = гетероароматический заместитель (2-тиенил, 2-фурил, 5-метил-2-фурил).

В прототипе N-арил-2-тиоксоникотинамиды 3 подвергаются мягкому окислению под действием ДМСО в присутствии водной соляной кислоты при кратковременном нагревании, что приводит к образованию изотиазоло[5,4-b]пиридинов 2, содержащих ароматический пиридиновый цикл.

В предлагаемом изобретении в реакцию с ДМСО и HCl при комнатной температуре вводятся 6-амино-4-гетарил-3-карбамоил-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолаты триэтиламмония 4, содержащие 1,4-дигидропиридиновый цикл. При этом, в отличие от прототипа, в ходе реакции окисления достигается новая функционализация, так как в кислой среде наряду с окислением происходит одновременный гидролиз енаминонитрильного фрагмента NH₂-C=C-C≡N с образованием фрагмента NC-CH-C(O)-, что в итоге приводит к появлению в конечном продукте тетрагидропиридинового фрагмента. Следует указать, что частично насыщенные по пиридиновому фрагменту изотиазоло[5,4-b]пиридин-3(2H)-оны ранее описаны не были. Вероятный механизм процесса образования соединений 1 представлен на схеме ниже. Механизм предполагает первоначальное образование 2-тиоксоникотинамидов 5 в кислой среде, и дальнейшее окисление последних системой ДМСО-HCl. Известно, что ДМСО способен реагировать с HCl с образованием солей оксисульфония и хлордиметилсульфония [Madesclaire M. // Tetrahedron. 1988. Vol. 44. N 21. P. 6537. doi: 10.1016/S0040-4020(01)90096-1]. Соль хлордиметилсульфония может существовать в равновесии с хлором и диметилсульфидом. Промежуточно образующийся 3-карбамоил-2-тиоксопиридин 5 подвергается окислению либо хлором Cl₂, либо хлоридом хлордиметилсульфония [Me₂S-Cl]⁺ Cl^-, при этом формируется изотиазол-3(2Н)-оновый цикл. Образовавшиеся изотиазолопиридиновые интермедиаты 6 могут существовать либо в форме 6-амино-таутомера (6-А), либо 6-иминотаутомера (6-Б). Вероятно, далее протонированная форма иминотаутомера (структура 7) претерпевает быстрый гидролиз в кислой среде с образованием 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов 1. Поскольку в молекуле появляется еще один хиральный центр (атом С-5), продукты 1 представляют собой смеси цис- и транс-диастереомеров с близкими физико-химическими характеристиками, затрудняющими разделение. Соотношение цис/транс-изомеров установлено на основании данных ЯМР спектроскопии и предопределяется строением исходного субстрата 4. Доминирование транс-диастереомеров в смеси задается, вероятно, на стадии гидролиза, и обуславливается фактором большей пространственной затрудненности цис-формы и термодинамическими соображениями.

Общими признаками предлагаемого способа и прототипа являются:

- использование системы ДМСО - водная HCl в качестве растворителя и реагента-окислителя;

- образование производных изотиазоло[5,4-b]пиридина в качестве конечных продуктов;

- одностадийность процесса окисления.

Отличительными признаками являются:

- проведение реакции в более мягких условиях (25°С против нагревания в прототипе);

- протекание параллельного окислению процесса гидролиза енаминонитрильного фрагмента, который приводит к новой функционализации и появлению в продукте структурного фрагмента N≡C-CH-C(O)-;

- возникновение нового хирального центра в продукте;

- использование 6-амино-4-гетарил-3-карбамоил-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолатов триэтиламмония, содержащих частично насыщенный 1,4-дигидропиридиновый фрагмент, в качестве исходных реагентов.

Пример 1. Получение 3,6-диоксо-4-(2-тиенил)-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрила

К раствору 6-амино-3-карбамоил-4-(2-тиенил)-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолата триэтиламмония 4а (0,8 ммоль) в 1,0 мл ДМСО по каплям при перемешивании добавляют избыток (0,3 мл) 37%-ной соляной кислоты (наблюдается выделение газа и образование осадка). Смесь перемешивают 10 минут при 25°С (контроль по результатам тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах Сорбфил-А, элюент - этилацетат : гексан = 2 : 1), разбавляют 7 мл 96%-ного этанола и оставляют на 24 ч. Осадок отфильтровывают, промывают этанолом, высушивают при 60°С. Светло-желтый мелкокристаллический порошок, выход 63%. ИК-спектр, ν, см^-1: 3639 ср, 3481 cр (N-H), 2260 сл (С≡N), 1695 с, ш (C=O). По данным ЯМР-спектроскопии, соединение существует в виде смеси цис- и транс-изомеров в соотношении ~1 : 9. Сигналы транс-изомерных форм, спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 4.79 д (1H, H⁴, ³J = 6.6 Гц), 5.12 д (1H, H⁵, ³J = 6.6 Гц), 6.96-7.01 м (2Н, 2-тиенил), 7.42-7.43 м (1Н, 2-тиенил), 11.40 с (1Н, N⁷H), 11.59 уш. с (1Н, N²H). Наблюдаемые сигналы минорных цис-форм, спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 4.54 д (1H, H⁴, ³J = 6.0 Гц), 4.85 д (1H, H⁵, ³J = 6.0 Гц), 11.49 с (1Н, N⁷H). Сигналы транс-изомерных форм, спектр ЯМР ¹³С (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 33.9 (C⁴), 41.9 (C⁵), 105.4 (C^3a), 115.8 (C≡N), 125.9 (C⁵ тиенил), 126.1 (C³ тиенил), 127.3 (C⁴ тиенил), 140.5 (C² тиенил), 156.7 (С^7а), 161.6 (С⁶=О), 163.8 (С²=О). Наблюдаемые сигналы минорных цис-форм, спектр ЯМР ¹³С (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 35.6 (C⁴), 40.4 (C⁵), 103.7 (C^3a), 116.3 (C≡N), 125.7 (C⁵ тиенил), 126.1 (C³ тиенил), 127.2 (C⁴ тиенил), 141.2 (C² тиенил), 156.7 (С^7а), 160.9 (С⁶=О), 164.7 (С²=О). HRMS (ESI-TOF): 278.0061 [M+H]⁺, 299.9882 [M+Na]⁺.

Пример 2. Получение 4-(5-метил-2-фурил)-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрила

К раствору 6-амино-3-карбамоил-4-(5-метил-2-фурил)-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолата триэтиламмония 4б (0,8 ммоль) в 1,0 мл ДМСО по каплям при перемешивании добавляют избыток (0,3 мл) 37%-ной соляной кислоты (наблюдается выделение газа и образование осадка). Смесь перемешивают 5 минут при 25°С (контроль по результатам тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах Сорбфил-А, элюент - этилацетат : гексан = 2 : 1), разбавляют 7 мл 96%-ного этанола и оставляют на 24 ч. Осадок отфильтровывают, промывают этанолом, высушивают при 60°С. Светло-желтый мелкокристаллический порошок, выход 71%. ИК-спектр, ν, см^-1: 3558 ш, ср, 3456 ш, cр (N-H), 2260 сл (С≡N), 1699 с (C=O). По данным ЯМР-спектроскопии, соединение существует в виде смеси цис- и транс-изомеров в соотношении ~15 : 85. Сигналы транс-изомерных форм, спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 2.15 с (3Н, Ме), 4.50 д (1H, H⁴, ³J = 7.0 Гц), 5.02 д (1H, H⁵, ³J = 7.0 Гц), 5.97-5.98 м (1Н, H Ar), 6.10-6.11 м (1Н, H Ar), 11.28 с (1Н, N⁷H), 11.51 уш. с (1Н, N²H). Наблюдаемые сигналы минорных цис-форм, спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 4.59 АВ-кв (2H, H⁴, Н^{5 3}J = 8.1 Гц), 11.37 с (1Н, N⁷H). Сигналы транс-изомерных форм, спектр ЯМР ¹³С DEPTQ (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 13.38* (Me), 32.7* (C⁴), 39.6* (C⁵), 102.6 (C^3a), 106.7* (CН Ar), 108.5* (CН Ar), 115.7 (C≡N), 148.9 (С Ar), 151.8 (С Ar), 157.2 (С^7а), 161.8 (С⁶=О), 163.9 (С²=О). *Здесь и далее: сигналы в противофазе. Наблюдаемые сигналы минорных цис-форм, спектр ЯМР ¹³С DEPTQ (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 13.42* (Me), 34.5* (C⁴), 39.0* (C⁵), 108.8* (CН Ar), 116.4 (C≡N), 148.3 (С Ar), 151.5 (С Ar), 161.2 (С⁶=О), 164.3 (С²=О). HRMS (ESI-TOF): 276.0442 [M+H]⁺, 298.0263 [M+Na]⁺.

Пример 3. Получение 3,6-диоксо-4-(2-фурил)-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрила

К раствору 6-амино-3-карбамоил-4-(2-фурил)-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолата триэтиламмония 4в (0,8 ммоль) в 1,0 мл ДМСО по каплям при перемешивании добавляют избыток (0,3 мл) 37%-ной соляной кислоты (наблюдается выделение газа и образование осадка). Смесь перемешивают 15 минут при 25°С (контроль по результатам тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах Сорбфил-А, элюент - этилацетат : гексан = 2 : 1), разбавляют 7 мл 96%-ного этанола и оставляют на 24 ч. Осадок отфильтровывают, промывают этанолом, высушивают при 60°С. Светло-желтый мелкокристаллический порошок, выход 41%. ИК-спектр, ν, см^-1: 3647 ср, 3483 ш, cр (N-H), 2262 сл (С≡N), 1699 с (C=O). По данным ЯМР-спектроскопии, соединение существует в виде смеси цис- и транс-изомеров в соотношении ~1 : 9. Сигналы транс-изомерных форм, спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 4.60 д (1H, H⁴, ³J = 7.1 Гц), 5.06 д (1H, H⁵, ³J = 7.1 Гц), 6.27-6.28 м (1Н, H³ 2-фурил), 6.38-6.39 м (1Н, H⁴ 2-фурил), 7.58-7.59 м (1Н, H⁵ 2-фурил), 11.29 с (1Н, N⁷H), 11.53 уш. с (1Н, N²H). Наблюдаемые сигналы минорных цис-форм, спектр ЯМР ¹Н (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 4.48 АВ-кв (2H, H⁴, Н^{5 3}J = 8.4 Гц), 7.60-7.61 м (1Н, H⁵ 2-фурил), 11.37 с (1Н, N⁷H). Сигналы транс-изомерных форм, спектр ЯМР ¹³С DEPTQ (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 32.6* (C⁴), 39.4* (C⁵), 102.3 (C^3a), 107.8* (C³Н 2-фурил), 110.6* (C⁴Н 2-фурил), 115.6 (C≡N), 143.4* (C⁵Н 2-фурил), 150.7 (C² 2-фурил), 157.2 (С^7а), 161.8 (С⁶=О), 163.9 (С²=О). Наблюдаемые сигналы минорных цис-форм, спектр ЯМР ¹³С DEPTQ (ДМСО-d₆), δ, м. д.: 34.5* (C⁴), 108.0* (CН 2-фурил), 116.3 (C≡N), 143.0* (C⁵Н 2-фурил), 161.2 (С⁶=О). HRMS (ESI-TOF): 262.0294 [M+H]⁺, 284.0113 [M+Na]⁺.

Как видно из приведенных примеров конкретного выполнения, использование 6-амино-4-гетарил-3-карбамоил-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолатов триэтиламмония вместо ароматических 2-меркаптоникотинамидов в качестве исходных реагентов в реакции с ДМСО-HCl при 25°С приводит к качественно новому результату - образованию 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов. При проведении реакции протекает параллельный процесс гидролиза енаминонитрильного фрагмента NH₂-C=C-C≡N, приводящий к появлению в продуктах реакции нового хирального центра в составе нового структурного фрагмента N≡C-CH-C(O)-.

На основании изложенного следует вывод, что предлагаемое техническое решение является новым, обладает изобретательским уровнем, обладает отличительными признаками и может быть масштабировано для использования в тонком органическом синтезе.

Полученные соединения ряда изотиазоло[5,4-b]пиридина представляют интерес как потенциальные средства для борьбы с онкологическими заболеваниями [Zee-Fen Chang, Chun-mei Hu, Jim-Min Fang, Ming-Tyng Yeh, Targeting human thymidylate kinase induces dna repair toxicity in malignant tumor cells. Pat. WO2012072019A1 (2012) https://patents.google.com/patent/WO2012072019A1/en; Gorsuch, S., Bavetsias, V., Rowlands, M. G., Aherne, G. W., Workman, P., Jarman, M., McDonald, E. Synthesis of isothiazol-3-one derivatives as inhibitors of histone acetyltransferases (HATs) // Bioorg. Med. Chem. 2009. Vol. 17. N 2. P. 467-474. https://doi.org/10.1016/j.bmc.2008.11.079; Furdas, S. D., Shekfeh, S., Bissinger, E. M., Wagner, J. M., Schlimme, S., Valkov, V., Hendzel, M., Jung, M., & Sippl, W. (2011). Synthesis and biological testing of novel pyridoisothiazolones as histone acetyltransferase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. 19(12), 3678-3689. https://doi.org/10.1016/j.bmc.2011.01.063; Swiatek, P., Malinka, W. (2004). Anticancer activity of some isothiazolo[5,4-b]pyridine derivatives. Acta poloniae pharmaceutica, 61 Suppl, 98-100].

Изотиазоло[5,4-b]пиридины близкого строения обнаруживают антибактериальное действие [Świątek P., Strzelecka M. // Adv. Clin. Exp. Med. 2019. Vol. 28. N 7. P. 967. doi: 10.17219/acem/99310], противотуберкулезную/антимикобактериальную активность [Malinka W., Świątek P., Śliwińska M., Szponar B., Gamian A., Karczmarzyk Z., Fruziński A. // Bioorg. Med. Chem. 2013. Vol. 21. N 17. P. 5282. doi: 10.1016/j.bmc.2013.06.027; Malinka, W., Ryng, S., Sieklucka-Dziuba, M., Rajtar, G., Głowniak, A., Kleinrok, Z. (1998). 2-Substituted-3-oxoisothiazolo[5,4-b]pyridines as potential central nervous system and antimycobacterial agents // Il Farmaco, 53(7), 504-512. https://doi.org/10.1016/s0014-827x(98)00056-1], а также являются ингибиторами циклооксигеназы ЦОГ-1 и обладают анальгетическим эффектом [Świątek P., Strzelecka M., Urniaz R., Gębczak K., Gębarowski T., Gąsiorowski K., Malinka W. // Bioorg. Med. Chem. 2017. Vol. 25. N 1. P. 316. doi: 10.1016/j.bmc.2016.10.036; Malinka W., Świątek P., Filipek B., Sapa J., Jezierska A., Koll A. // Il Farmaco. 2005. Vol. 60. N 11-12. P. 961. doi: 10.1016/j.farmac.2005.08.005].

Полученные соединения также перспективны как потенциальные биоциды [Silva, V., Silva, C., Soares, P., Garrido, E. M., Borges, F., Garrido, J. Isothiazolinone biocides: chemistry, biological, and toxicity profiles // Molecules. 2020. V. 25. N 4. 991, https://doi.org/10.3390/molecules25040991; Świątek, P., Strzelecka, M. (2019). Isothiazolopyridine Mannich bases and their antibacterial effect // Adv. Clin. Exp. Med., 28(7), 967-972. https://doi.org/10.17219/acem/99310; ].

По данным работы [Stephen W. Wright, Joseph J. Petraitis, Matthew M. Abelman, Douglas G. Batt, Lori L. Bostrom, Ronald L. Corbett, Carl P. Decicco, Susan V. Di Meo, Bruce Freimark, John V. Giannaras, Alicia M. Green, James W. Jetter, David J. Nelson, Michael J. Orwat, Donald J. Pinto, Michael A. Pratta, Susan R. Sherk, Jean M. Williams, Ronald L. Magolda, and Elizabeth C. Arner, Heteroaryl-Fused 2-Phenylisothiazolone Inhibitors of Cartilage Breakdown // J. Med. Chem. 1994, 37, 3071-3078, https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jm00045a012], 3-оксоизотиазоло[5,4-b]пиридины обнаруживают сильное дозозависимое ингибирование IL-1β-индуцированного разрушения протеогликана в хрящевой культуре, связанное с ингибированием активации матриксных металлопротеиназ, и потенциально представляют собой простые непептидные агенты для лечения артритных заболеваний.

Изобретение относится к области тонкого органического синтеза, конкретно к методу получения 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов общей формулы 1, где R представляет собой 2-тиенил, 2-фурил или 5-метил-2-фурил, представляющих интерес в качестве биоцидов и потенциальных противоопухолевых препаратов. Способ получения заключается в обработке 6-амино-4-гетарил-3-карбамоил-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолатов триэтиламмония в качестве исходных соединений, и характеризуется тем, что реакцию проводят в системе диметилсульфоксид – водная 37% соляная кислота при 25°С в течение 5-15 минут. Техническим результатом изобретения является получение ранее не описанных, частично насыщенных целевых продуктов, и обеспечение способа с использованием неароматических субстратов и проведением одновременной функционализации молекулы соединения 1 в ходе реакции окисления. 3 пр.

Способ получения 4-гетарил-3,6-диоксо-2,3,4,5,6,7-гексагидроизотиазоло[5,4-b]пиридин-5-карбонитрилов общей формулы 1:

где R = 2-тиенил, 2-фурил, 5-метил-2-фурил, основанный на обработке 6-амино-4-гетарил-3-карбамоил-5-циано-1,4-дигидропиридин-2-тиолатов триэтиламмония в качестве исходных соединений, и отличающийся тем, что реакцию проводят в системе диметилсульфоксид – водная 37% соляная кислота при 25°С в течение 5-15 минут.