Способ получения очищенного полисахаридного комплекса из листьев лопуха обыкновенного Российский патент 2024 года по МПК C08B37/18 

Изобретение относится к фармации и медицинской промышленности, а именно к способу получения биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья, и касается получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого.

Листья лопуха большого используются при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сахарном диабете, мочекаменной болезни, воспалениях слизистых оболочек, ожогах кожных покровов, а фармакологический эффект обусловлен водорастворимыми соединениями, основу которых составляют водорастворимые полисахариды. При этом надземная часть растения имеет большую биологическую массу, соотношение веса листьев к весу корней составляет 2,5:1. [Л.М. Федосеева, О.А. Ковалев, М.А. Биндюк Установление оптимальных условий экстракции листьев лопуха большого с использованием методов математического планирования // Химия растительного сырья. - 2011. - №4. - с. 273-276].

Известен способ получения суммы полисахаридов [RU 2177793, А61К 35/78, А61К 31/715, А61Р 29/00, С08В 37/00, 10.01.2002 г.]. В качестве сырья используют траву или шрот травы мальвы низкой. Сырье экстрагируют водой при нагревании до 95°С при соотношении сырье : экстрагент 1:10 в течение 30 минут. Повторное извлечение и отделение сырья проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. Полисахариды осаждают четырехкратным количеством 96%-ного этанола при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом и высушивают. Причем, выход порошка суммы полисахаридов 13,6% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса.

Известен способ получения водорастворимых полисахаридов, осуществляемый путем экстрагирования растительного сырья горячей водой, упаривания экстракта, осаждения целевого продукта, его промывки и осушки [RU 2232774, С08В 37/00, А61К 35/78, 20.07.2004 г.]. В качестве исходного сырья используют шрот травы фиалки душистой (Viola odorata L.) после экстракции полифенольных соединений 70%-ным этанолом. Затем шрот экстрагируют водой при нагревании до 95°С при соотношении сырье-экстрагент 1:10 в течение 30 минут, повторное извлечение проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. После этого полисахариды осаждают трехкратным количеством 96%-ного этилового спирта при комнатной температуре. Плотный осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом, ацетоном и затем сушат. Причем, выход порошка суммы полисахаридов - 10,5% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса и невысокий выход целевого продукта.

Известен ряд способов получения инулина из клубней топинамбура [RU 2398779, A23L 1/214, 2009; RU 2148588, С08В 37/00, 1998]. Однако ни в одном из них не приводится выход инулина от содержания его в сырье и степень чистоты полученного продукта от сопутствующих веществ.

Недостатком известных способов является большое количество примесей в готовом продукте, что позволяет его считать техническим или сырым продуктом, не пригодным для использования в медицинских и пищевых целях.

Известен способ получения инулина из измельченных корней одуванчика лекарственного с помощью исчерпывающей экстракции [RU 2351166 CI, A23L 1/236, А61К 36/00, 2009 г.]. В качестве исходного сырья используют корни одуванчика лекарственного, которые промывают, подсушивают и измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм, заливают водой и подвергают исчерпывающей экстракции в течение 3-5 суток. Полученный бесцветный раствор обрабатывают 96%-ным этиловым спиртом и осаждают инулин при температуре ниже минус 15°С.

Недостатком известного способа является длительность процесса, низкий выход целевого продукта и большое количество примесей в готовом продукте.

Разработан способ извлечения водорастворимых полисахаридов из корней лопуха обыкновенного [RU 2604934 МПК С08В 37/18; опубл. 20.11.2016]. Способ включает исчерпывающее экстрагирование исходного сырья водой, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов, их промывку, сушку. В качестве исходного сырья используют измельченные до линейного размера в 0,2-0,5 мм корни лопуха обыкновенного. Проводят трехкратное экстрагирование горячей очищенной водой при соотношении сырья и экстрагента 1:30 при обработке в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 30 мин при температуре 80°С. После чего растительный материал отделяют путем фильтрации, а водорастворимые полисахариды осаждают троекратным количеством 95%-ного этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 1 часа. При этом осадок фильтруют через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре промывают последовательно раствором 95%-ного этилового спирта в очищенной воде (3:1) при соотношении сырья и раствора 1:15 и смесью этилацетата и 95%-ного этилового спирта (1:1) в соотношении сырья и раствора 1:10. Затем сушат фильтр с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы. Предлагаемый способ позволяет интенсифицировать процесс получения водорастворимых полисахаридов и снизить время, расходуемое на него до 3 часов, а также увеличить выход продукта до 39,95% в пересчете на абсолютно сухое сырье. Однако получаемые полисахариды имеют низкую степень чистоты целевого продукта.

Раскрыт способ [RU 2712554, МПК С08В 37/18; опубл. 30.01.2020] получения очищенного инулина из растительного сырья, а именно из корней одуванчика лекарственного. Способ по патенту №2712554 включает троекратное экстрагирование очищенной водой, нагретой до температуры кипения, из измельченных корней одуванчика лекарственного, где колбу с сырьем и экстрагентом помещают в ультразвуковую ванну с частотой 35 кГц при температуре 80°С на 40 мин; отделение растительного материала путем фильтрации; осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным количеством 95%-ного этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 1 часа; фильтрование осадка через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; промывание осадка на фильтре, проводимое последовательно раствором 95%-ного этилового спирта в очищенной воде и смесью этилацетата и 95%-ного этилового спирта, высушивание фильтра с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы; перед промывкой проводят очистку инулина от примесей, где полученный после стадии фильтрации под вакуумом осадок растворяют в нагретой до 80°С воде очищенной, к нему добавляют раствор кальция хлорида и мелкодисперсный порошок алюминия оксида, выдерживают 20 мин, затем фильтруют под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; полученный фильтрат последовательно пропускают через ионообменные колонки с анионитом в гидроксильной форме АВ-17-8 и катионитом в водородной форме КУ-2-8 до рН элюата 6,5-7,5 и степени чистоты инулина, равной 97%, после чего для осаждения инулина к элюату вновь добавляют троекратное количество 95%-ного этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 1 часа, затем проводят фильтрование осадка через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Степень чистоты по способу достигает 97±2% при выходе целевого продукта до 22,36% в пересчете на абсолютно сухое сырье.

К недостаткам способа по патенту №2712554 относится низкая степень чистоты целевого продукта.

Известен способ получения инулина из корней лопуха большого [RU 2765503 МПК С08В 37/18, опубл. 31.01.2022], включающий троекратное экстрагирование очищенной водой, нагретой до температуры кипения при соотношении сырье: 1 порция воды 1 г: 20 мл, из измельченного растительного сырья до линейного размера 0,2-0,5 мм, выдерживание колбы с сырьем и экстрагентом в ультразвуковой ванне при температуре 80°С в течение 40 минут; отделение растительного материала путем фильтрации; осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным по отношению к водному извлечению количеством этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 1 часа; фильтрование осадка через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом; очистку инулина от примесей путем растворения полученного после стадии фильтрации под вакуумом осадка в нагретой воде очищенной, добавления к нему 50% раствора кальция хлорида и мелкодисперсного порошка алюминия оксида, затем выдерживания и фильтрации под вакуумом, пропускания полученного фильтрата последовательно через ионообменные колонки с анионитом в гидроксильной форме АВ-17-8 и катионитом в водородной форме КУ-2-8 с учетом емкости ионообменных смол до рН элюата 6,5-7,5; после чего осаждение инулина добавлением вновь к элюату троекратного количества этанола по отношению к водному раствору при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 1 часа; затем фильтрацию осадка через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом; промывание осадка на фильтре, проводимое последовательно раствором этилового спирта в очищенной воде, взятых в объемном соотношении 3:1, при соотношении сырье : раствор 1 г : 15 мл, и смесью этилацетата и этилового спирта, взятых в объемном соотношении 1:1, при соотношении сырье : раствор 1 г : 10 мл; высушивание фильтра с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы, при этом инулин извлекают из корней лопуха большого, колбу с сырьем и экстрагентом выдерживают в ультразвуковой ванне с частотой 25 кГц, при этом соотношение сырье : экстрагент составляет 1 г: 20 мл, на всех стадиях получения инулина используют этанол в концентрации 96%, стадию фильтрации осадка проводят под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,7 атм, полученный после стадии фильтрации под вакуумом осадок растворяют в нагретой до 90°С воде очищенной, при этом 50% раствор кальция хлорида добавляют из расчета 10 капель на 1 г изначально взятого растительного сырья, а масса мелкодисперсного порошка алюминия оксида составляет 0,7 г, время выдерживания равно 40 мин, очистку инулина от примесей путем растворения полученного после стадии фильтрации под вакуумом осадка в нагретой воде очищенной проводят при соотношении сырье : вода 1 г : 12 мл, пропускание полученного фильтрата последовательно через ионообменные колонки с анионитом и катионитом ведут до степени чистоты инулина, равной 98,5%. К недостаткам способа можно отнести малую биомассу корней по отношению к биомассе надземной части растения.

Наиболее близким к заявленному изобретению является [RU 2656398 МПК С08В 37/18; опубл. 05.06.2018] способ получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого, включающий экстрагирование растительного сырья очищенной горячей водой, нагретой до температуры кипения, двукратное проведение повторного экстрагирования, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов, фильтрование осадка, промывание и высушивание, согласно изобретению в качестве растительного сырья используют листья лопуха большого, измельченные до линейного размера в 0,5-1 мм; экстрагирование проводят при соотношении сырье : экстрагент 1:15 при обработке в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 10 мин при температуре 80°С; повторные экстрагирования проводят при соотношении сырье : экстрагент 1:15; растительный материал отделяют путем фильтрации; водорастворимые полисахариды осаждают троекратным количеством 95%-ного этанола при температуре -18°С в течение 30 мин; фильтрование осадка проводят через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; промывание осадка на фильтре проводят последовательно 15 мл раствора 95%-ного этилового спирта в очищенной воде (3:1) в соотношении сырье : раствор 1:15 и 10 мл смеси этилацетата и 95%-ного этилового спирта (1:1) в соотношении сырье : раствор 1:10, высушивание фильтра с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы.

Выход по способу составил до 11,63% в пересчете на абсолютно сухое сырье. Недостатком методики по прототипу относится низкая доля основного вещества в готовом продукте, а также загрязненность готового продукта различными примесями, в частности пектиновыми веществами.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа извлечения комплекса водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого с высокой степенью чистоты целевого продукта при получении комплекса водорастворимых полисахаридов в отсутствии использования опасных и токсичных веществ.

Поставленная задача в изобретении решена тем, что в способе получения комплекса водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого извлечение биологически активных веществ из сырья проводится трехкратно горячей водой очищенной в ультразвуковой ванне, что позволяет значительно ускорить процесс экстракции, а также увеличить выход полисахаридов из сырья; после чего проводится осаждение смеси водорастворимых полисахаридов спиртом этиловым, осадок растворяют и приступают к очистке алюминия оксидом (от пигментных веществ) и на ионообменных смолах (для более глубокой очистки от прочих примесей), после чего проводят осаждение комплекса водорастворимых полисахаридов спиртом этиловым и сушат до постоянной массы.

Технический результат изобретения заключается в извлечении очищенного водорастворимого полисахаридного комплекса из растительного сырья, а именно из листьев лопуха большого с достижением степени чистоты, равной 98,5±0,5%, при выходе целевого продукта до 10,05% в пересчете на абсолютно сухое сырье, в отсутствии использования опасных и токсичных веществ.

Технический результат достигается тем, что в способе получения очищенного комплекса водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого, включающий троекратное экстрагирование из измельченного до линейного размера 0,5 мм растительного сырья - листьев лопуха большого очищенной водой, нагретой до температуры кипения, путем выдерживания колбы с сырьем и экстрагентом в ультразвуковой ванне при температуре 80°С в течение 10 минут; объединение извлечений, отделение растительного материала путем фильтрации; осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным по отношению к водному извлечению количеством водного раствора этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут; фильтрование полученного осадка через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом; промывание осадка на фильтре, проводимое последовательно смешанным раствором этилового спирта и очищенной воды, взятых в объемном соотношении 3:1, соответственно, при соотношении сырье : раствор этанола, равном 1 г : 10 мл, соответственно, и смесью этилацетата и этилового спирта, взятых в объемном соотношении 1:1, при соотношении сырье : раствор этилацетата и этанола, равном 1 г : 10 мл. соответственно; высушивание фильтра с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы, согласно изобретению, экстракцию ведут при соотношении воздушно-сухое сырье : 1 порция экстрагента, равном 1 г : 10 мл, колбу с сырьем и экстрагентом выдерживают в ультразвуковой ванне с частотой 30 кГц, перед стадией промывания осадка на фильтре раствором этилового спирта и очищенной воды, также смесью этилацетата и этилового спирта, осадок, полученный после фильтрования через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом, очищают в от примесей путем растворения данного осадка в нагретой до 90°С воде очищенной при соотношении сырье : вода 1 г : 10 мл, последующего добавления к полученному раствору мелкодисперсного порошка алюминия оксида при массовом соотношении сырье : оксид алюминия, равном 1:0,5, а затем выдерживания смеси в течение 30 мин и фильтрации под вакуумом, после чего осуществляют пропускание полученного фильтрата последовательно через ионообменные колонки с анионитом в гидроксильной форме АВ-17-8 и катионитом в водородной форме КУ-2-8-С учетом емкости ионообменных смол до рН элюата 6,5-7,5 и до степени чистоты полисахаридного комплекса, равной 98,5%; после чего ведут осаждение комплекса водорастворимых полисахаридов добавлением вновь к элюату троекратного количества этанола по отношению к водному раствору элюата при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут; затем полученный осадок фильтруют через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом, при этом на всех стадиях фильтрации осадка проводят под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,6 атм., на всех стадиях получения комплекса водорастворимых полисахаридов используют водный раствор этанола в концентрации 96%.

На фиг. 1 представлены результаты выделения комплекса водорастворимых полисахаридов (выход продукта, %) из листьев лопуха большого при варьировании степенью измельчения сырья и температурой ультразвуковой бани (при трехкратной экстракции по 10 минут при частоте ультразвука 30 кГц с соотношением сырья и экстрагента 1 г на 10 мл).

На фиг. 2 представлены результаты выделения комплекса водорастворимых полисахаридов (выход продукта, %) из листьев лопуха большого при варьировании частотой ультразвука и длительностью экстрагирования (при трехкратной экстракции при температуре 80°С сырья измельченностью 0,5 мм с соотношением сырья и экстрагента 1 г на 10 мл).

На фиг. 3 представлены результаты выделения комплекса водорастворимых полисахаридов (выход продукта, %) из листьев лопуха большого при варьировании кратностью и соотношением сырья и экстрагента (при экстракции по 10 минут при температуре 80°С, частоте ультразвука 30 кГц и измельченности сырья 0,5 мм).

Пример 1. Для получения комплекса водорастворимых полисахаридов аналитическую пробу сырья измельчают до частиц размера 0,5 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного воздушно-сухого сырья помещают в колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл воды очищенной, нагретой до температуры кипения, помещают в ультразвуковую ванну с частотой 30 кГц при температуре 80°С, экстрагируют 10 мин. Экстракцию повторяют еще 2 раза, прибавляя по 10 мл воды, очищенной, нагретой до температуры кипения.

Водные извлечения объединяют и фильтруют через 3 слоя марли с подложенным тампоном ваты, вложенных в стеклянную воронку диаметром 5 см. Осаждение проводят троекратным по отношению к водному извлечению количеством 90 мл 96%-ного этилового спирта, перемешивают, охлаждают в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут. Затем содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,6 атм. Полученный осадок растворяют в 10 мл, нагретой до 90°С, воде очищенной, добавляют 0,5 г мелкодисперсного порошка алюминия оксида, выдерживают 30 мин, затем фильтруют под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,6 атм. Полученный фильтрат последовательно пропускают со скоростью 50 мл/мин через две ионообменные колонки объемом 50 мл, заполненные предварительно кондиционированными анионитом в гидроксильной форме АВ-17-8 и катионитом в водородной форме КУ-2-8 с учетом емкости ионообменных смол до рН элюата 6,5-7,5 и степени чистоты полисахаридного комплекса, равной 98,5%. Для осаждения полисахаридов к элюату вновь добавляют троекратное по отношению к водному раствору количество 30 мл 96%-ного этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 мин, фильтрование осадка проводят через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,6 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 10 мл раствора 96%-ного этилового спирта в очищенной воде при их объемном соотношении 3:1 соответственно, 10 мл смеси этилацетата и 96%-ного этилового спирта при их объемном соотношении 1:1 соответственно. Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°С до постоянной массы.

Предлагаемый способ позволяет получить полисахаридный комплекс из лопуха большого со степенью чистоты, равной 98,5±0,5% при выходе целевого продукта до 10,05% в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Способ получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого осуществляют с помощью троекратной экстракции измельченного до 0,5 мм сырья очищенной водой, нагретой до температуры кипения при соотношении 1 г сырья: 10 мл экстрагента. Экстрагирование проводят в ультразвуковой ванне с частотой 30 кГц в течение 10 минут при температуре 80°С. Извлечения объединяют, отделяют растительный материал путем фильтрации, осаждают водорастворимых полисахаридов троекратным по отношению к водному извлечению количеством водного раствора этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут. Фильтруют полученный осадок через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом, промывание осадка на фильтре проводят последовательно смешанным раствором этилового спирта и очищенной воды, взятых в объемном соотношении 3:1, соответственно, при соотношении сырье : раствор этанола, равном 1 г : 10 мл, соответственно, и смесью этилацетата и этилового спирта, взятых в объемном соотношении 1:1, при соотношении сырье : раствор этилацетата и этанола, равном 1 г : 10 мл, соответственно. Высушивают фильтр с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы. При этом перед стадией промывания осадок очищают от примесей путем растворения данного осадка в нагретой до 90°С воде очищенной при соотношении сырье : вода 1 г : 10 мл, последующего добавления к полученному раствору мелкодисперсного порошка алюминия оксида при массовом соотношении сырье : оксид алюминия, равном 1:0,5, выдерживания смеси в течение 30 мин и фильтрации под вакуумом. После чего пропускают полученный фильтрат последовательно со скоростью 50 мл/мин через ионообменные колонки с анионитом в гидроксильной форме АВ-17-8 и катионитом в водородной форме КУ-2-8 с учетом емкости ионообменных смол до рН элюата 6,5-7,5 и до степени чистоты полисахаридного комплекса, равной 98,5%. Далее осаждают комплекс водорастворимых полисахаридов добавлением вновь к элюату троекратного количества этанола по отношению к водному раствору элюата при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут. Затем полученный осадок фильтруют через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом. При этом на всех стадиях фильтрации осадка фильтрацию проводят под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,6 атм, а на всех стадиях получения комплекса водорастворимых полисахаридов используют водный раствор этанола в концентрации 96%. Изобретение направлено на извлечение очищенного водорастворимого полисахаридного комплекса из листьев лопуха большого с достижением степени чистоты, равной 98,5%, при выходе целевого продукта до 10,05% в пересчете на абсолютно сухое сырье в отсутствии использования опасных и токсичных веществ. 3 ил., 1 пр.

Способ получения очищенного комплекса водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого, включающий троекратное экстрагирование из измельченного до линейного размера 0,5 мм воздушно-сухого растительного сырья - листьев лопуха большого очищенной водой, нагретой до температуры кипения, путем выдерживания колбы с сырьем и экстрагентом в ультразвуковой ванне при температуре 80°С в течение 10 минут; извлечения объединяют, отделение растительного материала путем фильтрации; осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным по отношению к водному извлечению количеством водного раствора этанола при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут; фильтрование полученного осадка через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом; промывание осадка на фильтре, проводимое последовательно смешанным раствором этилового спирта и очищенной воды, взятых в объемном соотношении 3:1, соответственно, при соотношении сырье : раствор этанола, равном 1 г : 10 мл, соответственно, и смесью этилацетата и этилового спирта, взятых в объемном соотношении 1:1, при соотношении сырье : раствор этилацетата и этанола, равном 1 г : 10 мл, соответственно; высушивание фильтра с осадком при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы, отличающийся тем, что экстракцию ведут при соотношении сырье : 1 порция экстрагента, равном 1 г : 10 мл, колбу с сырьем и экстрагентом выдерживают в ультразвуковой ванне с частотой 30 кГц, перед стадией промывания осадка на фильтре раствором этилового спирта и очищенной воды, также смесью этилацетата и этилового спирта, осадок, полученный после фильтрования через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом, очищают в от примесей путем растворения данного осадка в нагретой до 90°С воде очищенной при соотношении сырье : вода 1 г : 10 мл, последующего добавления к полученному раствору мелкодисперсного порошка алюминия оксида при массовом соотношении сырье : оксид алюминия, равном 1:0,5, а затем выдерживания смеси в течение 30 мин и фильтрации под вакуумом, после чего осуществляют пропускание полученного фильтрата последовательно со скоростью 50 мл/мин через ионообменные колонки с анионитом в гидроксильной форме АВ-17-8 и катионитом в водородной форме КУ-2-8 с учетом емкости ионообменных смол до рН элюата 6,5-7,5 и до степени чистоты полисахаридного комплекса, равной 98,5%; после чего ведут осаждение комплекса водорастворимых полисахаридов добавлением вновь к элюату троекратного количества этанола по отношению к водному раствору элюата при перемешивании, охлаждая в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 минут; затем полученный осадок фильтруют через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом, при этом на всех стадиях фильтрации осадка проводят под вакуумом при остаточном давлении 0,3-0,6 атм, на всех стадиях получения комплекса водорастворимых полисахаридов используют водный раствор этанола в концентрации 96%.