СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ ИЗ ЛИСТЬЕВ ЛОПУХА БОЛЬШОГО Российский патент 2018 года по МПК C08B37/18 

Изобретение относится к фармации и медицинской промышленности, а именно к получению биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья, и может быть использовано для получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого.

Листья лопуха большого используются при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сахарном диабете, мочекаменной болезни, воспалениях слизистых оболочек, ожогах кожных покровов, а фармакологический эффект обусловлен водорастворимыми соединениями, основу которых составляют водорастворимые полисахариды [Л.М. Федосеева, О.А. Ковалев, М.А. Биндюк. Установление оптимальных условий экстракции листьев лопуха большого с использованием методов математического планирования // Химия растительного сырья. - 2011. - №4. - с. 273-276].

Известен способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью, по патенту РФ 2171680 [МПК А61K 35/78, А61Р 29/00, опубл. 10.08.2001], где в качестве растительного сырья используют листья лопуха войлочного (Arctium tomentosum Mill), которые экстрагируют в батарее из 5 перколяторов 40%-ным этанолом с интервалом слива в 17 ч при соотношении сырье-этанол 1:1.

Известен способ получения суммы полисахаридов, обладающих противовоспалительной активностью по патенту РФ 2177793 [МПК А61К 35/78, А61К 31/715, А61Р 29/00, С08В 37/00, опубл. 10.01.2002 г.]. В качестве сырья используют траву или шрот травы мальвы низкой. Сырье экстрагируют водой при нагревании до 95°С при соотношении сырье : экстрагент 1:10 в течение 30 минут. Повторное извлечение и отделение сырья проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. Полисахариды осаждают четырехкратным количеством 96%-ного этанола при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом и высушивают. Причем, выход порошка суммы полисахаридов 13,6% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса.

Наиболее близким к заявленному способу является способ получения водорастворимых полисахаридов, осуществляемый путем экстрагирования растительного сырья горячей водой, упаривания экстракта, осаждения целевого продукта, его промывки и осушки [RU 2232774, МПК С08В 37/00, А61К 35/78, опубл. 20.07.2004 г.]. В качестве исходного сырья используют шрот травы фиалки душистой (Viola odorata L.) после экстракции полифенольных соединений 70%-ным этанолом. Затем шрот экстрагируют водой при нагревании до 95°С при соотношении сырье : экстрагент 1:10 в течение 30 минут, повторное извлечение проводят дважды. Растительный материал отделяют центрифугированием, а объединенные экстракты упаривают. После этого полисахариды осаждают трехкратным количеством 96%-ного этилового спирта при комнатной температуре. Плотный осадок отфильтровывают, промывают 96%-ным этиловым спиртом, ацетоном и затем сушат при температуре 70-75°С. Причем, выход порошка суммы полисахаридов 10,5% от массы используемого шрота.

Недостатком известного способа является длительность процесса и невысокий выход целевого продукта.

Технической задачей настоящего изобретения является разработка эффективного способа получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого.

Технический результат изобретения заключается в увеличении выхода целевого продукта и сокращении длительности процесса извлечения водорастворимых полисахаридов.

Технический результат достигается тем, что в способе получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого, включающем трехкратное экстрагирование растительного сырья очищенной горячей водой, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным количеством этилового спирта, фильтрование осадка, промывание и высушивание, согласно изобретению, в качестве растительного сырья используют листья лопуха большого, измельченные до линейного размера в 0,5-1 мм; экстрагирование проводят при соотношении сырье : экстрагент 1:15 в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 10 мин при температуре воды 80°С; растительный материал отделяют путем фильтрации; осаждение проводят 95% этанолом при температуре -18°С в течение 30 мин; фильтрование осадка проводят через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; промывание осадка на фильтре проводят последовательно 15 мл раствора (3:1) 95% этилового спирта в очищенной воде в соотношении сырье : раствор 1:15 и 10 мл смеси (1:1) этилацетата и 95% этилового спирта в соотношении сырье: раствор 1:10; высушивание фильтра с осадком проводят при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы.

На фиг. 1 представлена таблица 1 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях лопуха большого при варьировании степени измельчения сырья и температуры ультразвуковой бани.

На фиг. 2 представлена таблица 2 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях лопуха большого при варьировании степени кратности экстракции и длительности экстрагирования.

На фиг. 3 представлена таблица 3 результатов количественного определения водорастворимых полисахаридов (%) в листьях лопуха большого при варьировании соотношением сырья и экстрагента.

Пример 1. Для получения водорастворимых полисахаридов аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметром 0,5-1 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 15 мл воды очищенной, нагретой до температуры кипения, помещают в ультразвуковую ванну с частотой 35 КГц при температуре 80°С, экстрагируют 10 мин. Экстракцию повторяют еще 2 раза, прибавляя по 15 мл воды.

Водные извлечения объединяют и фильтруют через 3 слоя марли с подложенным тампоном ваты, вложенных в стеклянную воронку. Осаждение проводят троекратным количеством 95%-ного этилового спирта, перемешивают, охлаждают в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 мин. Затем содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 15 мл раствора 95%-ного этилового спирта в очищенной воде (3:1), 10 мл смеси этилацетата и 95%-ного этилового спирта (1:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°С до постоянной массы.

Пример 2. Для количественного определения содержания полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье проводят экстрагирование согласно примеру 1, все водные извлечения объединяют в колбе на 50 мл, фильтруют и доводят объем раствора до метки (раствор А).

25 мл раствора А помещают в коническую колбу на 100 мл, прибавляют 75 мл 95% этилового спирта, перемешивают, охлаждают в морозильной камере при температуре -18°С в течение 30 мин. Затем содержимое колбы фильтруют через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр, проложенный в стеклянный фильтр ПОР 16 с диаметром 40 мм, под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре последовательно промывают 15 мл раствора 95% этилового спирта в воде очищенной (3:1), 10 мл смеси этилацетата и 95% этилового спирта (1:1). Фильтр с осадком высушивают сначала на воздухе, затем при температуре 100-105°С до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по стандартной формуле:

где m₁ - масса высушенного фильтра, г; m₂ - масса высушенного фильтра с осадком, г; m - навеска сырья, г; W - потеря в массе сырья при высушивании, %.

Предлагаемый способ позволяет интенсифицировать процесс получения водорастворимых полисахаридов и снизить время, расходуемое на него до 1,5 часов, а также увеличить выход продукта до 11,63% в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Изобретение относится к получению биологически активных веществ из лекарственного растительного сырья и может быть использовано для получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого. Способ предусматривает трехкратное экстрагирование растительного сырья очищенной горячей водой, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным количеством этилового спирта, фильтрование осадка, промывание и высушивание. Причем в качестве растительного сырья используют листья лопуха большого, измельченные до линейного размера в 0,5-1 мм. Экстрагирование проводят при соотношении сырье : экстрагент 1:15 в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 10 мин при температуре воды 80°С. Растительный материал отделяют путем фильтрации. Осаждение проводят 95% этанолом при температуре -18°С в течение 30 мин. Осадок фильтруют через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм. Осадок на фильтре промывают последовательно 15 мл раствора (3:1) 95% этилового спирта в очищенной воде в соотношении сырье : раствор 1:15 и 10 мл смеси (1:1) этилацетата и 95% этилового спирта в соотношении сырье : раствор 1:10; высушивание фильтра с осадком проводят при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы. Изобретение позволяет увеличить выход целевого продукта и сократить длительность процесса извлечения водорастворимых полисахаридов. 3 табл., 2 пр.

Способ получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого, включающий трехкратное экстрагирование растительного сырья очищенной горячей водой, отделение растительного материала, осаждение водорастворимых полисахаридов троекратным количеством этилового спирта, фильтрование осадка, промывание и высушивание, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют листья лопуха большого, измельченные до линейного размера в 0,5-1 мм; экстрагирование проводят при соотношении сырье : экстрагент 1:15 в ультразвуковой ванне с частотой 35 КГц в течение 10 мин при температуре воды 80°С; растительный материал отделяют путем фильтрации; осаждение проводят 95% этанолом при температуре -18°С в течение 30 мин; фильтрование осадка проводят через предварительно высушенный беззольный бумажный фильтр под вакуумом при остаточном давлении 0,4-0,8 атм; промывание осадка на фильтре проводят последовательно 15 мл раствора (3:1) 95% этилового спирта в очищенной воде в соотношении сырье : раствор 1:15 и 10 мл смеси (1:1) этилацетата и 95% этилового спирта в соотношении сырье : раствор 1:10; высушивание фильтра с осадком проводят при температуре от 100 до 105°С до постоянной массы.