СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ МИКРОБИОТЫ ПОЛОСТИ РТА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ МАТЕРИАЛА НЕСЪЕМНЫХ ОРТОПЕДИЧЕСКИХ КОНСТРУКЦИЙ Российский патент 2024 года по МПК G01N33/48 G01N1/28 C12N5/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и микробиологии и может быть использовано для сбора биоматериала для оценки микробиоты полости рта в зависимости от материала несъемных ортопедических конструкций.

Уровень техники

В настоящее время проблема оказания качественной стоматологической помощи является актуальным вопросом. При протезировании пациентов с дефектами зубов наиболее часто применяются несъемные ортопедические конструкции в виде коронок и мостовидных конструкций.

Несмотря на то, что данные конструкции в наибольшей мере отвечают возросшим эстетическим и функциональным требованиям, в ряде случаев не удается предупредить развитие осложнений, которые негативно отражаются на общей оценке качества ортопедического лечения.

У пациентов с ортопедическими конструкциями нередко возникает протезный стоматит, это заболевание относится к группе наиболее часто встречающихся патологий слизистой оболочки полости рта воспалительного характера. Большое значение в возникновении данной патологии играет состояние здоровья пациента, уровень гигиены полости рта, соблюдение правил ухода за ортопедическими конструкциями. Важная роль отводится гомеостазу и микробиоценозу полости рта. При длительном нахождении ортопедических конструкций в полости рта очень важной является проблема негативного взаимного влияния микробиоты на материалы и материалов на микробиоту полости рта. Известно, что у разных видов микроорганизмов, населяющих полость рта, способность адгезии к стоматологическим базисным полимерам варьирует в зависимости от их физико-химических параметров. Наличие биопленки является основополагающим фактором в развитии воспалительных заболеваний мягкотканного пародонта. Данный факт связан с тем, что только 20-25% микроорганизмов располагаются на поверхности зубов, остальная часть фиксируется на слизистой оболочке и на конструкционных материалах, из которых изготовлены ортопедические конструкции.

При возникновении данного вида осложнений врач, выполняя всю полноту необходимых диагностических и лечебных ортопедических мероприятий в соответствии с установленными нормами на изготовление конструкций, может столкнуться с прецендентом конфликтной ситуации вне зависимости от качества изготовленного протеза. В настоящее время отсутствуют научно обоснованные врачебные стандарты отнесения пациентов к группе риска развития осложнений и методики подбора конструкционных материалов.

Все это обуславливает необходимость в разработке унифицированного подхода к выбору материалов при ортопедическом лечении пациентов, обусловленных такими индивидуальными особенностями, как количественный и качественный состав микробиоты полости рта.

Известен Способ оценки обсемененности пародонта патогенными бактериями с применением полимеразной цепной реакции в реальном времени (патент РФ 2607046 С2 от 29.05.2015).

Смывы пародонтальных карманов получают, отбирая содержимое из наиболее глубоких участков с помощью стерильных бумажных эндодонтических штифтов (размер №25), которые затем помещают в пробирку с реактивом «Проба-Рапид» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) объемом 0,5 мл и транспортируют в лабораторию в охлажденном состоянии, в течение 6 часов. Забор проводят в двух повторностях от каждого пациента, на стадии выделения ДНК и проведения ПЦР-анализа каждая повторность обрабатывается отдельно.

Недостатком данного метода является отсутствие данных изменениях патогенных микроорганизмов в зависимости от наличия ортопедических конструкций. Перечень микроорганизмов, выявляемых при данном способе ограничен набором праймеров, которые используются в тест-системе.

Известен способ исследования состояния пародонта (патент РФ 2299437 С1). Сущность данного метода заключается в получении биологического материала путем забора десневой жидкости, помещение проб на предметные стекла, высушивание, окрашивание их, многократное увеличение формата исследуемого изображения, исследование клеточного состава десневой жидкости, оценку по ним значимых параметров, по которым судят о наличии патологии, отличающийся тем, что забор десневой жидкости осуществляют из десневых карманов с помощью полоски из высокогигроскопичного поролона с развитой впитывающей поверхностью и имеющей следующие размеры: длина 7-10 мм, ширина 1,8 -2,2 мм, толщина 0,8-1,5 мм, при этом захват поролоновых полосок осуществляют пинцетом стоматологическим, содержащим две пружинящие бранши с захватными губками в виде округлых пластинок на их рабочих концах и имеющих продолжение бранш в виде шеек с поперечными размерами, меньшими поперечных размеров бранш, и ориентированием обеих шеек в одну сторону под углом, величина которого ограничена величинами от 100 до 145° по отношению к горизонтальному направлению бранш, на предметные стекла помещают несколько нативных проб десневой жидкости, фиксируют цитограммы отпечатков в нескольких полях зрения и обеспечивают сохранность их изображений для последующих сравнений с образцами из библиотеки эталонов ЭВМ.

Недостатками данного способа является отсутствие данных о динамических изменениях микрофлоры до протезирования и после, трудоемкость исследования, необходимость наличия библиотек эталонов.

Известен способ сбора биоматериала для микробиологического исследования при проведении стоматологического обследования пациентов с муковисцидозом (патент РФ 2779689 С1 от 12.09.2022).

Сущность способа заключается сборе биоматериала с поверхностей слизистой оболочки щеки, с поверхности спинки языка, с щечной поверхности первых моляров верхней челюсти и язычной поверхности центральных резцов нижней челюсти.

Недостатком данного метода является в том, что сбор материала для оценки микроорганизмов проводится только с поверхности слизистых оболочек полости рта, а не с поверхности ортопедической конструкции, что исключает оценку микробиоты на поверхности самого материала и оценку влияния материала конструкции на микробиоту прилежащих тканей десны. Принимается за прототип.

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является разработка способа сбора биоматериала для оценки микробиоты полости рта в зависимости от материала несъемных ортопедических конструкций для улучшения результатов его микробиологического исследования.

Это достигается тем, что в отличие от известных способов сбора биоматериала для оценки микробиоты полости рта проводится сбор биоматериала для микробиологического исследования из десневой борозды и с поверхности зуба непосредственно до установки ортопедической конструкции, проведение ортопедического лечения с установкой конструкции на временный цемент, повторный сбор биоматериала для микробиологического исследования из десневой борозды через один месяц после установки ортопедической конструкции, с последующим извлечением ортопедической конструкции из полости рта, погружением ее в 4 мл жидкой питательной тиогликолевой среды, добавлением в среду дорназы альфа в количестве 1 мл, вортексированием в течение 5 минут и последующим микробиологическим исследованием полученной микробной суспензии.

Технический результат предполагаемого изобретения направлен на получение точных данных изменения микробиоты полости рта в тканях прилегающей десны и на изготовленной ортопедической конструкции в зависимости от степени выраженности адгезии микроорганизмов к исследуемым конструкционным материалам используемых при протезировании пациентов.

Осуществление предлагаемого способа можно продемонстрировать на следующих примерах:

Пример 1

Пациент Р. Обратилась в стоматологическую поликлинику с жалобами на отсутствие зубов. Пациент имеет дефект зубного ряда, отсутствуют зубы 2.4, 2.6. зуб 2.5 R. По согласованию с пациентом было принято решение провести протезирование металлокерамическими коронками.

Лечение: до препарирования произведен сбор материала для микробиологического исследования по предлагаемому способу (таблица 1). 2.5 изготовление культевой штифт вкладки, изготовление мостовидного протеза из металлокерамики с опорой на зубы 2.3-2.5-2.7 с фиксацией на временный цемент. Через месяц, произведено снятие мостовидного протеза (замена его на временную конструкцию) со сбором материала для микробиологического исследования по предлагаемому способу (таблица 2).

Таблица 1 Вид микроорганизма Посев из десневой борозды Посев с поверхности зуба Streptococcus oralis 10⁵ 10² Streptococcus mitis 10⁵ 10⁶ Streptococcus gordonii 10⁵ 10⁶ Eikenella corrodens 10⁷ 10⁵ Prevotella intermedia 10⁵ 10⁵ Fusobacterium nucleatum 10⁴ 10⁴ Veilonella parvula 10⁶ 10⁶ Actinomyces odontolyticus 10⁴ 10⁵ Porphyromonas gingivalis 10⁵ 10⁴

Таблица 2 Вид микроорганизма Посев из десневой борозды Посев с поверхности коронки Streptococcus oralis 10⁴ 10³ Streptococcus mitis 10³ 10⁴ Streptococcus vestibularis 10⁵ 10⁶ Rothia dentocariosa 10⁴ 10⁶ Lactobacillus salivarius 10⁶ 10⁶ Eikenella corrodens 10² 10² Veilonella parvula 10⁴ 10³ Actinomyces odontolyticus 10² 10² Porphyromonas gingivalis 10⁴ 10⁵

Пример 2

Пациент Т. Обратилась в стоматологическую поликлинику с жалобами на отсутствие зубов вследствие травмы. Пациент имеет дефект зубного ряда, отсутствуют зубы 1.1, 2.1. По согласованию с пациентом было принято решение провести протезирование металлокерамическими коронками.

Лечение: до препарирования произведен сбор материала для микробиологического исследования по предлагаемому способу (таблица 3). Изготовление мостовидного протеза с опорой на зубы 1.2-2.1 с фиксацией на временный цемент. Через месяц, произведено снятие мостовидного протеза (замена его на временную конструкцию со сбором материала для микробиологического исследования по предлагаемому способу (таблица 4).

Таблица 3 Вид микроорганизма Посев из десневой борозды Посев с поверхности зуба Streptococcus vestibularis 10² 10³ Streptococcus oralis 10⁴ 10⁴ Streptococcus mitis 10⁵ 10⁵ Streptococcus intermedius 10³ 10³ Streptococcus gordonii 10³ 10³ Actinomyces odontolyticus 10⁴ 10⁵ Fusobacterium nucleatum 10⁴ 10⁴ Porphyromonas gingivalis 10⁴ 10⁵ Veilonella parvula 10⁶ 10⁷

Таблица 4 Вид микроорганизма Посев из десневой борозды Посев с поверхности коронки Streptococcus oralis 10⁵ 10⁵ Streptococcus mitis 10⁴ 10⁵ Streptococcus vestibularis 10⁶ 10⁷ Rothia dentocariosa 10⁵ 10⁶ Lactobacillus fermentum 10⁶ 10⁶ Neisseria flavescens 10⁴ 10³ Neisseria subflava 10² 10² Streptococcus parasanguinis 10⁵ 10⁶ Gemella sanguinis 10⁴ 10⁴

Таким образом, в первом примере выявлено сохранение на конструкции пародонтопатогенных микроорганизмов, имеющих клиническое значение. Во втором примере установленная конструкция не колонизирована пародонтопатогенными микроорганизмами, которые также отсутствуют и в десневой борозде.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и микробиологии, и может быть использовано для исследования микробиоты полости рта. Производят сбор биоматериала для микробиологического исследования из десневой борозды и с поверхности зуба непосредственно до установки ортопедической конструкции, проводят ортопедическое лечение с установкой конструкции на временный цемент. Повторно собирают биоматериал для микробиологического исследования из десневой борозды через один месяц после установки ортопедической конструкции с последующим извлечением ортопедической конструкции из полости рта, погружением ее в 4 мл жидкой питательной тиогликолевой среды, добавлением в среду дорназы альфа в количестве 1 мл, вортексированием в течение 5 минут и последующим микробиологическим исследованием полученной микробной суспензии. Изобретение обеспечивает получение точных данных изменения микробиоты полости рта в тканях прилегающей десны и на изготовленной ортопедической конструкции в зависимости от степени выраженности адгезии микроорганизмов к исследуемым конструкционным материалам, используемым при протезировании пациентов. 4 табл., 2 пр.

Способ исследования микробиоты полости рта, отличающийся тем, что производят сбор биоматериала для микробиологического исследования из десневой борозды и с поверхности зуба непосредственно до установки ортопедической конструкции, проводят ортопедическое лечение с установкой конструкции на временный цемент, повторный сбор биоматериала для микробиологического исследования из десневой борозды через один месяц после установки ортопедической конструкции, с последующим извлечением ортопедической конструкции из полости рта, погружением ее в 4 мл жидкой питательной тиогликолевой среды, добавлением в среду дорназы альфа в количестве 1 мл, вортексированием в течение 5 минут и последующим микробиологическим исследованием полученной микробной суспензии.