СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОГО ПОРАЖЕНИЯ ПОЧЕК, ВЫЗВАННОГО КОНТРАСТНЫМ ВЕЩЕСТВОМ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/4439 A61P13/12 

Область техники, к которой относится изобретение

По настоящей заявке испрашивается преимущество по заявке Кореи № 10-2020-0042899, поданной 8 апреля 2020 г., и по заявке Кореи № 10-2021-0036838, поданной 22 марта 2021 г. в Korean Intellectual Property Office, раскрытия которых во всей их полноте включены в настоящее изобретение в качестве ссылки.

Настоящее изобретение относится к производному пиразола, применимому для защиты почек путем уменьшения вызванной контрастным веществом нефротоксичности или для предупреждения и лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек, способу его получения, и содержащей его фармацевтической композиции.

Уровень техники

Контрастное вещество (CM) является лекарственным средством, которое вводят в желудок, кишечник, кровеносные сосуды, спинномозговую полость, полость сустава и т. п. для увеличения контраста изображений путем искусственного увеличения различия поглощения рентгеновского излучения в каждой ткани, так чтобы ткань или кровеносные сосуды были ясно видны при радиологических исследованиях, таких как визуализация с помощью магнитно-резонансной томографии (MRI) или компьютерной томографии (CT). При использовании контрастного вещества улучшается диагностическая ценность, поскольку можно отличить биологическую структуру или повреждение от окружения.

Контрастное вещество обычно разделяют на негативное и позитивное контрастное вещество, причем негативное контрастное вещество пропускает рентгеновское излучение лучше, чем окружающие ткани и видно изображение. Позитивное контрастное вещество включает содержащее йод контрастное вещество, сульфат бария и т. п. и негативное контрастное вещество включает воздух, газ, диоксид углерода и т. п.

Некоторые люди чувствительны к контрастному веществу и у них может быть вызвана аллергическая реакция, приводящая к сыпи, зуду, лихорадке, тошноте, рвоте, боли в суставе, предрасположенности к кровотечению и т. п.

В качестве побочных эффектов контрастного вещества редко может наблюдаться шок или анафилактическая реакция и могут произойти тяжелые реакции гиперчувствительности, такие как уртикария, гиперемия, сыпь и зуд, может произойти острое поражение почек.

В частности, хотя точный механизм вызванного контрастным веществом острого поражения почек неизвестен, оно происходит после контрастного вещества на основе йода и известно, что это является основной причиной приобретенного в больнице острого поражения почек.

Острое поражение почек вследствие вызванного контрастным веществом острого поражения почек определяется, как увеличение уровня креатинина в крови на 25% или более или 0,5 мг/дл или более по сравнению с имеющимся уровнем в течение 48 ч после применения и в этом случае у пациента не должно быть других причин, которые вызывают поражение, т. е. падение артериального давления, другая нефротоксичность и т. п.

Обычно уровень креатинина в крови достигает максимального значения через 3-5 дней после введения контрастного вещества и затем за 7-10 дней он возвращается к предыдущему значению. Вызванное контрастным веществом острое поражение почек составляет примерно 12% от случаев приобретенного в больнице острого поражения почек и является одной из трех главных причин острого поражения почек у госпитализированных пациентов вместе с ишемическим острым поражением почек (42%) острым поражением почек вследствие непроходимости мочевых путей (18%). Сообщали, что частота вызванного контрастным веществом острого поражения почек у пациентов с нормальной функцией почек является низкой (0-5%), но частота у пациентов с пониженной функцией почек увеличивается до 12-27%. В частности, сообщали, что частота у пациентов с высоким риском, таких как пациенты, у которых наблюдается обезвоживание, диабетическая нефропатия, поражение почек, гиповолемия или застойная сердечная недостаточность, и у пожилых пациентов увеличивается до 50% и сообщали, что диализ необходим для 15%.

Несмотря на эти риски, в особенности для пациентов с высоким риском и пожилых пациентов с серьезными сопутствующими заболеваниями, использование радиографического контрастного вещества для компьютерной томографии и сосудистого вмешательства увеличивается до составляющего более 20% у людей в возрасте 50 лет или старше. Поэтому в случае, когда доля пациентов, подверженных вызванному контрастным веществом поражению почек из числа пожилых пациентов и пациентов с диабетом, из числа проходящих обследование с использованием контрастного вещества увеличивается, весьма важна разработка способов предупреждения и лечения для уменьшения вызванной контрастным веществом нефротоксичности.

Хотя патофизиология вызванного контрастным веществом заболевания почек пока не полностью изучена, предполагается что основными механизмами являются ишемическое поражение, вызванное уменьшением кровотока в почках, и непосредственное поражение клеток почечных канальцев, вызванное контрастным веществом.

В случае ишемического поражения известно, что вследствие изменения в гормонах, которые регулируют поток крови через почки, после введения контрастного вещества увеличивается содержание сосудосуживающих гормонов аденозина и эндотелина и снижается содержание сосудорасширяющих гормонов оксида азота оксид (NO) и простагландина и происходит поражение вследствие сниженного кровотока и гипоксии, в особенности в области мочеотводящей зоны. Обычно известно, что ишемическое поражение и поражение клеток почечных канальцев в конечном счете приводят к усилению синтеза кислородсодержащих свободных радикалов в ткани почек, что вызывает сильный окислительный стресс, который, в свою очередь, приводит к поражению почек вследствие усиления воспаления и апоптоза, вызванного увеличением содержания цитокинов.

В случае вызванного контрастным веществом заболевания почек, поскольку способ блокирования прогрессирования поражения почек, которое уже произошло, неясен, и индукционный период известен, как в случае другого острого поражения почек, усилия в основном направлены на блокирование его возникновения путем активного предупреждения и несколько исследований направлены на уменьшение вызванного контрастным веществом поражения почек.

Известно, что общий способ лечения для предупреждения вызванной контрастным веществом нефротоксичности представляет собой попытку предупреждения нарушения баланса электролитов при обеспечении достаточного снабжения кровью, но отсутствует оптимальный способ предупреждения или лечения для предупреждения прогрессирования поражения почек и в некоторых случаях необходим диализ и поэтому необходимы дополнительные исследования для разработки способа предупреждения для исключения его развития на ранней стадии.

Недавно сообщали, что по данным лабораторных исследований ингибиторы эндопептидазы или некоторые ароматические катионогенные пептиды могут предупредить вызванное контрастным веществом острое поражение почек.

Однако большинство исследований являются экспериментальными в лаборатории или с использованием небольшого количества пациентов и поэтому вывод о том, можно ли эффективно предупредить вызванное контрастным веществом поражение почек путем использования этих лекарственных средств является необоснованным и отсутствует специфический способ лечения вызванного контрастным веществом поражения почек.

Поэтому авторы настоящего изобретения завершили настоящее изобретение путем определения того, что, несмотря на различные исследования все еще необходима разработка предупреждающего и терапевтического средства для вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

С другой стороны, ни в одном из документов предшествующего уровня техники не раскрыто, что соединение на основе пиразола, предлагаемое в настоящем изобретении, эффективно для предупреждения и лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

[Документы предшествующего уровня техники]

(Патентный документ 1) Korean Patent No. 10-1280160

(Патентный документ 2) Korean Patent No. 10-1886894

(Патентный документ 3) U.S. Laid-Open Patent Publication No. US 2019-0388492

(Непатентный документ 1) Persson PB, Hansell P, Liss P. Pathophysiology of contrast medium-induced nephropathy. Kidney Int 2005;68:14-22.

(Непатентный документ 2) Heyman SN, Reichman J, Brezis M. Pathophysiology of radiocontrast nephropathy: a role for medullary hypoxia. Invest Radiol 1999;34:685-691.

Раскрытие

Техническая задача

Задачей настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль.

Другой задачей настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции для защиты почек путем уменьшения вызванной контрастным веществом нефротоксичности, содержащей соединение формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль.

Другой задачей настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции для лечения и предупреждения вызванного контрастным веществом острого поражения почек, содержащей соединение формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль.

Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение эффекта уменьшения вызванного контрастным веществом поражения почек, эффекта улучшения уровня креатинина в крови и эффекта уменьшения поражения почечных канальцев путем применения соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли.

Другой задачей настоящего изобретения является разработка способа защиты почек путем уменьшения вызванной контрастным веществом нефротоксичности, или способа предупреждения или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек путем введения индивидууму соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли.

Другой задачей настоящего изобретения является разработка применения соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли для предупреждения или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

Техническое решение

Для решения указанных выше задач настоящее изобретение относится к композиции для защиты почек путем уменьшения вызванной контрастным веществом нефротоксичности или фармацевтической композиции для применения и улучшения протекания или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек, содержащей соединение на основе пиразола, описывающееся следующей формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

<Формула1>

где R означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 10 атомов углерода.

Полезные эффекты

Соединение на основе пиразола, предлагаемое в настоящем изобретении, и его фармацевтически приемлемая соль может эффективно облегчать симптомы острого поражения почек, вызванного введением контрастного вещества, и таким образом может эффективно применяться для защиты почек путем уменьшения вызванной контрастным веществом нефротоксичности или для предупреждения или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

Описание чертежей

На фиг. 1 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 2 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на улучшение уровня азота мочевины в крови (BUN) в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 3 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на улучшение уровня креатинина в крови в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 4 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на снижение содержания маркеров поражения почек NGAL, KIM-1 и микропротеинурии (альбумина) в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 5 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на уменьшение поражения почечных канальцев в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 6 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на уменьшение воспаления ткани почек в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 7 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на уменьшение инфильтрации воспалительных клеток в ткань в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 8 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на уменьшение содержания активированного кислорода, который является индикатором окислительного стресса, в ткани почек в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

На фиг. 9 приведены результаты анализа влияния соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, на уменьшение содержания нитротирозина, который является маркером окислительного стресса, в ткани почек в модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек.

Наилучший вариант осуществления

Ниже настоящее изобретение подробнее описано со ссылкой на варианты осуществления.

Однако настоящее изобретение не ограничивается вариантами осуществления, которые приведены в качестве примера, и настоящее изобретение определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Кроме того, даже если имеется положение, существенное для практического осуществления настоящего изобретения, опущено специальное описание этого положения, которое может легко осуществить специалист в данной области техники.

Термины и слова, использующиеся в настоящем описании и формуле изобретения не следует считать ограниченными обычными или приведенными в словарях значениями, а следует считать согласующимися со значениями и понятиями технической идеи настоящего изобретения, основанной на принципе, которым автор настоящего изобретения может надлежащим образом определить понятие термина для наилучшего описания его собственного изобретения.

Термины, использующиеся в настоящем изобретении, предназначены только для описания конкретного варианта осуществления и не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Термины в единственном числа включают термины во множественном числа, если из контекста явно не следует иное. В настоящем изобретении такие термины, как "включает" и "содержит" предназначены для указания того, что имеется признак, количество, стадия, операция, компонент, часть или их комбинация, описанные в описании, и следует понимать, что термины заранее не исключают возможность наличия или добавления одного или большего количества других признаков, количеств, стадий, операций, компонентов, частей или их комбинации.

По мере роста количества диагностических методик с использованием контрастного вещества расширяется применение контрастного вещества и одновременно возникают затруднения в связи с побочными эффектами, вызванными контрастным веществом. В дополнение к реакциям гиперчувствительности, таким как аллергия, обусловленная контрастным веществом, также может возникнуть тяжелое острое поражение почек. Кроме того, известно, что увеличивающееся количество пожилых пациентов с сопутствующими тяжелыми заболеваниями, такими как диабет и гипертензия, и расширяющееся применение радиоконтрастных средств для этих пациентов также являются одной из важных причин приобретенного в больнице острого поражения почек.

Однако в качестве способа лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек описано только введение достаточного количеств жидкости и лечение для предупреждения нарушения баланса электролитов и способ или установившееся лечение для предупреждения вызванного контрастным веществом острого поражения почек специально не описан.

Соответственно, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, способной предупреждать или лечить вызванное контрастным веществом острое поражение почек, содержащей одно или большее количество соединений, выбранное из группы, включающей соединение на основе пиразола, описывающееся формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль.

Соединение на основе пиразола, применяющееся в настоящем изобретении, описывается следующей формулой 1:

<Формула 1>

где R означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 10 атомов углерода.

Фармацевтически приемлемая соль соединения на основе пиразола, включенная в фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и характеристики исходного соединения и не вредны биологически или в другом отношении при введении в разовой дозе. Кроме того, она означает соль, обычно использующуюся в фармацевтической промышленности.

В частности, фармацевтически приемлемые соли присоединения с основанием можно получить из неорганических и органических оснований. Соли, образованные из неорганических оснований, могут включать, но не ограничиваются только ими, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция и магния. Соли, образованные из органических оснований, включают, но не ограничиваются только ими, соли первичных, вторичных и третичных аминов; замещенных аминов, включая природные замещенные амины; и изопропиламина, триметиламина, диэтиламина, триэтиламина, трипропиламина, этаноламина, 2-диметиламиноэтанола, трометамина, лизина, аргинина, гистидина, кофеина, прокаина, гидрабамина, холина, бетаина, этилендиамина, глюкозамина, N-алкилглюкамина, теобромина, пурина, пиперазина, пиперидина и/или циклических аминов, включая N-этилпиперидин.

Также следует понимать, что другие производные карбоновых кислот, в частности, амиды карбоновых кислот, включая карбоксамиды, низшие алкилкарбоксамиды, ди(низший алкил)карбоксамиды и т. п., также применимы при практическом осуществлении настоящего изобретения.

Кроме того, фармацевтически приемлемые соли присоединения с кислотами можно получить из неорганических и органических кислот. Соли, образованные из неорганических кислот, включают соли хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты, фосфорной кислоты, хрорной кислоты, йодной кислоты, винной кислоты и т. п. Соли, образованные из органических кислот могут включать, но не ограничиваются только ими, соли уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, пропионовой кислоты, гликолевой кислоты, глюконовой кислоты, галактуроновой кислоты, глутаминовой кислоты, глутаровой кислоты, глюкуроновой кислоты, аспарагиновой кислоты, аскорбиновой кислоты, угольной кислоты, ванильной кислоты, йодистоводородной кислоты, пировиноградной кислоты, щавелевой кислоты, яблочной кислоты, малоновой кислоты, молочной кислоты, янтарной кислоты, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, бензойной кислоты, коричной кислоты, миндальной кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, нафталинсульфоновой кислоты и/или салициловой кислоты и т. п.

Фармацевтически приемлемой солью может быть гидрохлорид.

Примером соединения на основе пиразола, описывающегося формулой 1, или его фармацевтически приемлемой соли, включенного в фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, являются следующие:

3-фенил-4-метил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-этил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-изопропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-бутил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-трет-бутил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-пентил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-гексил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид.

В частности, соединением на основе пиразола, включенным в фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, может быть 3-фенил-4-н-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид.

Соединение формулы 1, предлагаемое в настоящем изобретении, может подавлять образование реакционноспособных кислородсодержащих частиц в ткани почек.

В настоящем изобретении окислительный стресс означает поражение тканей, вызванное относительно избыточным образованием реакционноспособных кислородсодержащих частиц, поскольку нарушается баланс между образованием реакционноспособных кислородсодержащих частиц (ROS) и антиоксидантным защитным механизмом для биомолекул, клеток и тканей. В этом случае "реакционноспособные кислородсодержащие частицы" могут означать активированный кислород, активный кислород и активированные кислородсодержащие частицы, что означает одно и то же вещество.

"Контрастное вещество", предлагаемые в настоящем изобретении, известно специалистам в данной области техники. Контрастное вещество позволяет отличить конкретную часть организма от периферии аналогичной плотности. Предпочтительное контрастное вещество в контексте настоящего изобретения представляет собой непрозрачное или позитивное контрастное вещество, т. е. контрастное вещество, которое обладает более сниженной плотностью, чем окружающая ткань и поэтому увеличивает поглощение рентгеновских лучей.

Позитивное контрастное вещество хорошо известно в данной области техники и представляет собой контрастное вещество не на основе йода, контрастное вещество на основе йода, т. е. йодированное контрастное вещество. Примеры контрастного вещества не на основе йода и на основе йода известны специалистам в данной области техники.

Мономерные контрастные вещества разделяются на ионогенные и неионогенные и конкретное ионогенное мономерное контрастное вещество включает иогликат (Rayvist), йодамид (Uromiro), ацетризоат (Diaginol, Urokon), диатризоат (Angiografin; Hypaque; Renografin; Urografin; Urovison) и метризоат (Isopaque; Triosil).

Конкретное неионогенное мономерное контрастное вещество включает метризамид (Amipaque), иогексол (Omnipaque), йопамидол (Iopamiro), йопентол (Imagopaque), йопромид (Ultravist) и йоверсол (Optiray).

Димерное контрастное вещество на основе йода предпочтительно содержит два трийодированных бензольных кольца. Их можно разделить на ионогенное внутривенное холеографическое контрастное вещество, однозамещенное кислое ионогенное контрастное вещество и неионогенное контрастное вещество. Димерным йодированным контрастным веществом предпочтительно является иоксагловая кислота (Hexabrix), йотролан (Isovist) и йодиксанол (Visipaque; Optiprep).

Контрастное вещество не на основе йода часто содержит барий, преимущественно в виде нерастворимого сульфата бария. Его предпочтительно вводят для обследования желудочно-кишечного тракта.

Контрастное вещество можно вводить по любой подходящей методике. Специалистам в данной области техники известно, что то, какая методика выбрана для введения, может зависеть от цели обследования, для которого вводят контрастное вещество и/или контрастные вещества. В частности, контрастное вещество на основе бария вводят путем проглатывания или в виде клизмы. Контрастное вещество на основе йода предпочтительно вводят с помощью инъекции в вену, позвоночный канал или артерию. Для введения контрастного вещества на основе йода можно использовать катетер.

Введение контрастного вещества на основе йода предназначено для проведения компьютерной томографии и наиболее предпочтительно ангиографии. Введение контрастного вещества, подходящего для ультразвуковой эхографии или магнитно-резонансной томографии (MRI) также рассмотрено в настоящем изобретении.

"Острое поражение почек" или "AKI", или "острая почечная недостаточность (ARF)", указанные в настоящем изобретении, хорошо известны в данной области техники. При использовании в настоящем изобретении эти термины относятся к быстрой потере функции почек. Быстрая потеря функции почек вызвано поражением почки (почек). Критерии диагностики и классификации AKI основаны на изменении уровней креатинина в сыворотке и мочевыделении. Термины определены в публикации KDIGO Guidelines (KDIGO, Kidney International Supplements(2012) 2, 69-88), которая во всей своей полноте включена в настоящее изобретение в качестве ссылки.

Вызванное контрастным веществом острое поражение почек определяется, как увеличение уровня креатинина в крови на 25% или более или 0,5 мг/дл или более по сравнению с имеющимся уровнем не более, чем через 48 ч после введения контрастного вещества, но не снижение функции почек по другим причинам, таким как гипотензия, применение других нефротоксичных лекарственных средств, непроходимость мочевых путей и эмболия.

Обычно контрастное вещество может приводить к побочным эффектам, таким как снижение функции почек, в некоторых случаях даже при введении лицу с нормальной функцией почек, но чаще может приводить к нарушению функции почек и ухудшению сниженной функции почек, в особенности при введении лицам со сниженной функции почек.

Хотя точный механизм вызванного контрастным веществом острого поражения почек изучен не полностью, известно, что контрастное вещество снижает осмотическое давление, уменьшает кровоток в почках и вызывает сужение почечной артерии. Кроме того, известно, что причиной вызванного контрастным веществом острого поражения почек является некроз почечных канальцев или сниженная почечная перфузия. Известно, что в этом состоянии активировано образование реакционноспособных кислородсодержащих частиц происходит ишемическое поражение почечных канальцев, что может быть прямой причиной канальцевой токсичности. Кроме того, одной из известных причин является воспаление.

Поэтому для предупреждения или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек, хотя сообщали о защитном воздействии на почки достаточного поступления жидкости и лечения антиоксидантами, такими как бикарбонат, N-ацетилцистеин или аскорбиновая кислота, для снижения количества реакционноспособных кислородсодержащих частиц, в настоящее время нет установленного способа лечения и единственным способом лечения является предупреждение.

Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, в частности, все следующие: 3-фенил-4-этил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол, 3-фенил-4-н-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол и 3-фенил-4-н-бутил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол оказывают подавляющее действие на образование реакционноспособных кислородсодержащих частиц.

Как подтверждено экспериментами на животных в примерах в настоящем изобретении, концентрация креатинина в сыворотке, которая является индикатором вызванного контрастным веществом острого поражения почек, значительно снижена и также снижена степень поражения почечных канальцев. Кроме того, снижено содержание липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов (NGAL), молекулы-1 поражения почек (KIM-1) и степень микропротеинурий, которые являются маркерами поражения почек, и снижена инфильтрация воспалительных клеток в ткань почек и содержание активированного кислорода и нитротирозина, которые являются индикаторами окислительного стресса.

Поэтому в модели вызванного контрастным веществом острого поражения почек подтвержден эффект предупреждения или облегчения острого поражения почек путем подавления образования активного кислорода в ткани почек для снижения воспалительного ответа.

Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, в дополнение к соединению формулы 1 или его соли может дополнительно содержать бикарбонат и/или антиоксидант для удаления реакционноспособных кислородсодержащих частиц.

Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может содержать фармацевтически приемлемый носитель в количестве, не ухудшающем эффекты настоящего изобретения.

"Фармацевтически приемлемый носитель" включает любые и все типы растворителей, дисперсионных сред, покрытий, поверхностно-активных веществ, антиоксидантов, консервантов (антибактериальных или фунгицидных средств), изотонических агентов, разбавителей, агентов, задерживающих всасывание, солей, консервантов, стабилизаторов, связующих, инертных наполнителей, разрыхлителей, смазывающих веществ, подсластителей, вкусовых добавок, красителей и т. п. и их комбинации, известные специалистам в данной области техники.

Разбавитель можно выбрать из группы, состоящей из следующих, но не ограничивается только ими, микрокристаллическая целлюлоза, моногидрат лактозы, лактоза ангидрид, лактоза, крахмал, маннит, карбоксиметилцеллюлоза, сорбит и их комбинации.

Разрыхлитель можно выбрать из группы, состоящей из следующих, но не ограничивается только ими, гидроксипропилцеллюлоза низкой степени замещения, кросповидон, натриевая соль кроскармеллозы, натриевая соль гликолята крахмала, F-melt и их комбинации.

Связующее можно выбрать из группы, состоящей из следующих, но не ограничивается только ими, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гипромеллоза, поливинилуксусная кислота, повидон, поливинилпирролидон, коповидон, макрогол, лаурилсульфат натрия, легкая безводная кремниевая кислота, синтетический силикат алюминия, производные силикатов, такие как силикат кальция или метасиликат-алюминат магния, фосфаты, такие как гидрофосфат кальция, карбонаты, такие как карбонат кальция, предварительно желатинизированные крахмалы, камеди, такие как камедь акации, желатин, производные целлюлозы, такие как этилцеллюлоза, и их смеси.

Смазывающее вещество можно выбрать из группы, состоящей из следующих, но не ограничивается только ими, стеарат магния, диоксид кремния, тальк, легкая безводная кремниевая кислота, стеарилфумарат натрия и их комбинации.

В качестве агента, регулирующего pH, можно использовать подкисляющий агент, такой как уксусная кислота, адипиновая кислота, аскорбиновая кислота, аскорбат натрия, эфират натрия, яблочная кислота, янтарная кислота, винная кислота, фумаровая кислота и лимонная кислота, и подщелачивающий агент, такой как водный раствор аммиака, карбонат натрия, оксид магния, карбонат магния, цитрат натрия и трехосновной фосфат кальция.

В качестве антиоксиданта можно использовать дибутилгидрокситолуол, бутилированный гидроксианизол, токоферолацетат, токоферол, пропилгаллат, гидросульфит натрия, пиросульфит натрия и т. п.

Кроме того, агенты, предлагаемые в настоящем изобретении, можно приготовить путем выборочного использования разных добавок, выбранных из числа красителей и вкусовых добавок в качестве фармацевтически приемлемых добавок.

В настоящем изобретении на количество добавок не налагаются ограничения и их можно включать в количестве, находящемся в нормальном диапазоне, путем выборочного использования добавок.

Фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно приготовить и использовать в виде пероральных препаратов, таких как порошки, гранулы, таблетки, капсулы, суспензии, эмульсии, сиропы и аэрозоли, наружные препараты, суппозитории или стерильные растворы для инъекции, полученные по обычной методике.

Одним объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для предупреждения, улучшения протекания или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек, содержащая активный ингредиент в диапазоне от 0,00001 до 100 мас.%, от 0,0001 до 95 мас.% или от 0,001 до 90 мас.% в пересчете на полную массу фармацевтической композиции.

В терапевтическим средстве для предупреждения или лечения вызванного контрастным веществом острого поражения почек, предлагаемом в настоящем изобретении, доза соединения на основе пиразола, описывающегося формулой 1, или его фармацевтически приемлемой соли может быть надлежащим образом изменена в зависимости от возраста и массы тела пациента, симптомов, пути введения и т. п.

Доза соединения на основе пиразола, описывающегося формулой 1, или его фармацевтически приемлемой соли, предлагаемого в настоящем изобретении, может равняться от 0,00001 мг/кг/сутки до 2000 мг/кг/сутки, от 0,0001 мг/кг/сутки до 1000 мг/кг/сутки, от 0,001 мг/кг/сутки до 800 мг/кг/сутки, от 0,001 мг/кг/сутки до 500 мг/кг/сутки, от 0,001 мг/кг/сутки до 100 мг/кг/сутки, от 0,001 мг/кг/сутки до 80 мг/кг/сутки или от 0,01 мг/кг/сутки до 70 мг/кг/сутки.

Содержание соединения на основе пиразола, описывающегося формулой 1, или его фармацевтически приемлемой соли, предлагаемого в настоящем изобретении, в разовой дозированной форме может равняться от 0,00001 до 100 мас.%, от 0,0001 до 95 мас.%, от 0,0001 до 90 мас.%, от 0,001 до 70 мас.% или от 0,001 до 50 мас.%.

При введении концентрация соединения на основе пиразола, описывающегося формулой 1, или его фармацевтически приемлемой соли, предлагаемого в настоящем изобретении, может равняться от 0,0001 до 500 мкМ, от 0,001 до 300 мкМ, от 0,001 до 150 мкМ, от 0,001 до 130 мкМ, от 0,001 до 100 мкМ, 0,001 до 80 мкМ или от 0,01 до 70 мкМ.

Фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно вводить вместе с контрастным веществом или отдельно от него обычным путем и ее можно специально приготовить для внутримышечного, интратекального, проводимого в пищеварительный тракт, внутрисердечно-сосудистого, внутрипочечного или внутривенного введения. В качестве методик приготовления используются обычные методики, известные специалистам в данной области техники.

Обычная композиция для внутримышечного или интратекального введения может состоять из следующих, но не ограничивается только ими, например, активный ингредиент и стерильный изотонический водный раствор, содержащий декстрозу, хлорид натрия или и декстрозу, и хлорид натрия. Другие примеры включают, но не ограничиваются только ими, лактат Рингера для инъекции, лактат Рингера для инъекции+декстроза для инъекции, Normosol-M и декстроза, Isolyte E, активированный раствор Рингера для инъекции и т. п. Предлагаемый препарат необязательно может содержать, но не ограничивается только ими, сорастворитель, такой как полиэтиленгликоль; хелатные агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота; и антиоксиданты, такие как метабисульфит натрия. Необязательно без наложения ограничений раствор можно лиофилизировать и затем непосредственно перед введением восстановить с помощью подходящего растворителя.

Предпочтительные примеры приведены для лучшего понимания настоящего изобретения. Следующие примеры приведены не для ограничения настоящего изобретения, а для облегчения понимания настоящего изобретения.

Вариант осуществления изобретения

<Примеры синтеза>

<Пример синтеза 1> Синтез 3-фенил-4-этил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ола

В круглодонной колбе этиловый эфир 2-этил-3-оксо-3-фенилпропионовой кислоты (10,7 г, 49 ммоля) и 2-гидразинопиридин (5,6 г, 51,4 ммоля) кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота без растворителя в течение 1 дня. Полученное твердое вещество очищали гексаном и этилацетатом и затем сушили в вакууме и получали искомое соединение с выходом 70%.

1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 8,25-8,24(1H, d), 8,00-7,97(1H, d), 7,84-7,82(1H, t), 7,73-7,71(2H, m), 7,46-7,37(3H, m) 7,12-7,11(1H, t), 2,62-2,57(2H, m), 1,23-1,17(3H, m); ESI(m/z) 266,1[M+H]⁺

<Пример синтеза 2> Синтез 3-фенил-4-бутил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ола

В круглодонной колбе этиловый эфир 2-бутил-3-оксо-3-фенилпропионовой кислоты (12,1 г, 49 ммоля) и 2-гидразинопиридин (5,6 г, 51,4 ммоля) кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота без растворителя в течение 1 дня. Полученное твердое вещество очищали гексаном и этилацетатом и затем сушили в вакууме и получали искомое соединение с выходом 75%.

1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 8,25-8,24(1H, d), 8,03-8,02(1H, d), 7,85-7,83(1H, t), 7,70-7,69(2H, m), 7,44-7,35(3H, m) 7,12-7,11(1H, t), 2,56-2,53(2H, t), 1,58-1,52(2H, m), 1,38-1,24(2H, m), 0,89-0,86(3H, t); ESI(m/z) 294,0[M+H]⁺

<Пример синтеза 3> Синтез 3-фенил-4-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ола

Этиловый эфир 2-пропил-3-оксо-3-фенилпропионовой кислоты (2,52 г, 10,7 ммоля) и 10 мл этанола помещали в круглодонную колбу и затем медленно по каплям к нему при 0°C добавляли раствор 2-гидразинопиридина (1,29 г, 1,18 ммоля), в 3 мл этанола. Его кипятили с обратным холодильником при 100°C в течение 3 дней. Растворитель удаляли путем отгонки при пониженном давлении и полученное твердое вещество промывали гексаном и этилацетатом и затем сушили в вакууме и получали искомое соединение с выходом 82%.

1H NMR(300 MHz, CDCl₃) δ 12,50(1H, s), 8,27-8,25(1H, m), 8,01(1H, d, J=8,5 Hz), 7,81(1H, m), 7,69(2H, m), 7,48-7,34(3H, m), 7,12-7,10(1H, m), 2,54(2H, d, J=7,5 Hz), 1,64(2H, m), 0,93(3H, t, J=7,3 Hz); EIMS(70 эВ) m/z(rel intensity) 279(M+, 37), 250(100)

<Пример синтеза 4> Синтез гидрохлорида 3-фенил-4-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ола (соединение 1)

3-Фенил-4-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол (280 мг, 1,0 ммоля), полученный выше в примере синтеза 3, растворяли в 4 мл этилового эфира в круглодонной колбе и затем к нему медленно по каплям добавляли при 0°C 0,55 мл этилового эфира, растворенного в 2 M HCl. Твердое вещество, образовавшееся из раствора реакционной смеси, отфильтровывали при пониженном давлении, растворитель удаляли, промывали гексаном и этилацетатом и затем сушили в вакууме и получали искомое соединение (270 мг, 0,85 ммоля).

1H NMR(300 MHz, CDCl₃) δ 8,44(1H, d, J=4,2 Hz), 8,0-8,03(2H, m), 7,66-7,64(2H, m), 7,48-7,42(3H, m), 7,34-7,30(1H, m), 2,49(2H, brs), 2,43(2H, t, J=7,5 Hz), 1,48(2H, m), 0,48(3H, t, J=7,3 Hz)

<Пример> Исследование эффективности модели на животных для вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей

Использующихся в качестве экспериментальных животных самцов мышей C57BL/6 в возрасте 6 недель приобретали у LionBio. Всех мышей держали при стандартных условиях. После разведения в течение примерно 2 недель, в возрасте 8 недель соединение 1 (гидрохлорид 3-фенил-4-н-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ола) перорально вводили в дозе 60 мг/кг/сутки за 5 дней до введения контрастного вещества.

Для образования острого поражения почек после голодания в течение 16 ч противовоспалительный анальгетик индометацин (10 мг/кг) и блокатор NO N-нитро-L-аргинин (L-NAME, 10 мг/кг) внутрибрюшинно вводили за 15 мин до введения контрастного вещества и через 15 мин внутрибрюшинно вводили контрастное вещество (иогексол, 4000 мг йод/кг). После приема пищи и воды в течение 24 ч животных, которым вводили исследуемое вещество, разделяли на три группы: группа с введением разбавителя (контрольная), группа с введением контрастного вещества (иогексол) и группа с введением контрастного вещества и соединения 1 одновременно (иогексол+соединение 1).

После завершения исследования животных анестезировали, у каждого индивидуума извлекали почечную ткань и кровь для исследования. Ткани фиксировали в 10% забуференном нейтральном растворе формалина. Фиксированные ткани нарезали с некоторой толщиной и включали в парафин по общей методике обработки тканей с получением срезов тканей толщиной от 4 до 5 мкм и затем проводили окрашивание гематоксилином и эозином (окрашивание с помощью H&E), что является общей методикой окрашивания, для гистопатологического исследования степени поражения почек в области коркового вещества почки и мочеотводящей зоны, и проводили окрашивание с помощью F4/80, с помощью Tunel, с помощью DHE и нитротирозином для изучения эффектов воспаления и окислительного стресса в пораженной ткани почек.

Отбирали кровь и центрифугировали при 3000 об/мин, 4°C в течение 10 мин и отбирали верхний слой сыворотки и уровень азота мочевины в крови (BUN) и креатинина измеряли с помощью автоматического биохимического анализатора крови (AU480, Beckman Coulter, USA) для подтверждения индикатора поражения почек. Результаты гистологического исследования степени поражения почек определяли, как 0 баллов при отсутствии поражения почечных канальцев, 1 балл при умеренном поражении, 2 балла для внтриканальцевых вакуолярных поражений на 25-60% и 3 балла для внтриканальцевых вакуолярных поражений на 60% или более, и таким образом определяли среднее значение степени поражения почечных канальцев в поле зрения микроскопа.

На фиг. 1 приведены фотографии, показывающие влияние снижения поражения почечных канальцев в ткани почек в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей. Как показано на фиг. 1, в результате сбора ткани почек и подтверждения степени поражения почек в области коркового вещества почки и мочеотводящей зоны установлено, что наблюдалось изменение вакуолей вследствие поражения клеток почечных канальцев и тяжелого поражения ткани почечных канальцев вследствие утраты кисточковой каемки в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы и поражение почек в области коркового вещества почки и мочеотводящей зоны значительно уменьшалось в группе с введением соединения 1.

На фиг. 2 и 3 приведены зависимости, показывающие эффект уменьшения поражения почек по данным исследования крови в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей. Как показано на фиг. 2 и 3, установлено, что концентрации BUN и креатинина (Cr сыворотки) значительно увеличивались в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы, и концентрации BUN и креатинина уменьшались в группе с введением соединения 1, в частности, концентрация креатинина уменьшалась, что уменьшало поражение почек.

На фиг. 4 приведены зависимости, показывающие эффект уменьшения уровней маркеров поражения почек NGAL, KIM-1 и степени микропротеинурии (альбумин) в моче в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей. Как показано на фиг. 4, установлено, что концентрации NGAL, KIM-1 и микропротеинурия (альбумин) значительно увеличивались в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы и концентрации NGAL, KIM-1 и микропротеинурия (альбумин) уменьшались в группе с введением соединения 1, что уменьшало поражение почек.

На фиг. 5 приведена зависимость, показывающая эффект уменьшения поражения почечных канальцев по данным биопсии в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей. На фиг. 5 приведены результаты сбора ткани почек и сопоставления уменьшения степени поражения почечных канальцев и установлено, что показатель поражения почечных канальцев значительно увеличивался в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы и показатель поражения почечных канальцев значительно уменьшался в группе с введением соединения 1.

На фиг. 6 приведена зависимость, показывающая эффект уменьшения воспаления ткани почек в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей. На фиг. 6 приведены результаты анализа уровня экспрессии гена моноцитарного хемотаксического белка-1 (MCP-1), который является индикатором воспаления ткани почек, и установлено, что экспрессия MCP-1 увеличивалась в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы, тогда как воспаление (MCP-1) значительно уменьшалось в группе с введением соединения 1.

На фиг. 7 приведены результаты анализа степени инфильтрации воспалительных клеток (макрофаги, F4/80-позитивные клетки) в ткань почек в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей, установлено, что инфильтрация воспалительных клеток значительно увеличивались в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы и инфильтрация воспалительных клеток значительно уменьшалась в группе с введением соединения 1 по сравнению с данными для группы с введением контрастного вещества.

На фиг. 8 приведены результаты анализа содержания реакционноспособных кислородсодержащих частиц (окрашивание с помощью DHE), которые являются индикатором окислительного стресса в ткани почек, в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей, установлено, что содержание активированного кислорода значительно увеличивалось в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы и содержание активированного кислорода значительно уменьшалось в группе с введением соединения 1 по сравнению с данными для группы с введением контрастного вещества.

На фиг. 9 приведены результаты анализа содержания нитротирозина, который является индикатором окислительного стресса в ткани почек, в группе с введением соединения 1 по 60 мг/кг один раз в сутки в течение 5 суток при исследовании с использованием модели на животных вызванного контрастным веществом острого поражения почек у мышей, установлено, что содержание нитротирозина значительно увеличивались в группе с введением контрастного вещества по сравнению с данными для нормальной контрольной группы и содержание нитротирозина значительно уменьшалось в группе с введением соединения 1 по сравнению с данными для группы с введением контрастного вещества.

Поэтому, было подтверждено, что соединение, предлагаемое в настоящей заявке, оказывает значительное воздействие на почки в модели острого поражения почек, вызванного контрастным веществом.

Изобретение относится к области медицины, а именно к применению фармацевтической композиции для защиты почек. Предлагается применение фармацевтической композиции для защиты почек путем уменьшения нефротоксичности, вызванной контрастным веществом, или для предупреждения, или лечения острого поражения почек, вызванного контрастным веществом, содержащей соединение следующей формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль, где острое поражение почек вызвано некрозом почечных канальцев, или сниженной почечной перфузией, или окислительным стрессом, или воспалением:

где R означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 10 атомов углерода. Вышеописанное применение обеспечивает уменьшение вызванного контрастным веществом поражения почек. 8 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 пр.

1. Применение фармацевтической композиции для защиты почек путем уменьшения нефротоксичности, вызванной контрастным веществом, или для предупреждения, или лечения острого поражения почек, вызванного контрастным веществом, содержащей соединение следующей формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль, где острое поражение почек вызвано некрозом почечных канальцев, или сниженной почечной перфузией, или окислительным стрессом, или воспалением:

где R означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 10 атомов углерода.

2. Применение по п. 1, где в формуле 1 R означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода.

3. Применение по п. 2, где соединением формулы 1 является:

3-фенил-4-метил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-этил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-изопропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-бутил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-трет-бутил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид;

3-фенил-4-н-пентил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид; или

3-фенил-4-н-гексил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид.

4. Применение по п. 3, где соединением формулы 1 является 3-фенил-4-н-пропил-1-(пиридин-2-ил)-1H-пиразол-5-ол или его гидрохлорид.

5. Применение по любому из пп. 1-4, где контрастное вещество выбрано из ионогенного мономерного контрастного вещества или неионогенного мономерного контрастного вещества.

6. Применение по п. 5, где ионогенное мономерное контрастное вещество выбрано из иогликата, йодамида, ацетризоата, диатризоата и метризоата.

7. Применение по п. 5, где неионогенное мономерное контрастное вещество выбрано из метризамида, иогексола, йопамидола, йопентола, йопромида и йоверсола.

8. Применение по п. 7, где неионогенное мономерное контрастное вещество представляет собой иогексол.

9. Применение по любому из пп. 1-4, где фармацевтическая композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель или инертный наполнитель.