Антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных Российский патент 2024 года по МПК A61K31/4412 A61K31/708 A61K31/15 A61K47/32 A61P9/00 A61P39/06 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарной фармации, в частности, к препаратам для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных и может быть использовано в ветеринарии и животноводстве для лечения и профилактики заболеваний сердечно-сосудистой системы у животных.

Уровень техники

Известен состав и способ получения инфузионной лекарственной формы на основе метилэтилпиридинола, содержащей в своем составе метилэтилпиридинола гидрохлорид в количестве 0,45-0,55%, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 12-водный в количестве 0,079-0,081%, натрий сернисто-кислый в количестве 0,018-0,022%, натрия хлорид в количестве 0,723-0,731% и воду для инъекций, а также способа ее получения. Фармацевтическая композиция обладает высокой стабильностью при хранении, применима для парентерального введения в области неврологии и кардиологии. (См. пат. RU № 2455003, кл. A 61 K 31/4412, опубл. 10.07.2012 г.).

Недостатком данного изобретения является отсутствие выраженного кардиопротекторного и кардиотрофического действия.

Известен фармацевтический состав для лечения заболеваний, связанных с эндотелиальной дисфункцией, содержащий в качестве активного ингредиента производное метилпиридина или его фармацевтически приемлемую соль - 1,0-6,0 мас.%; пурин - 10,0-80,0 мас.% и вспомогательные вещества - остальное. В качестве активного вещества используют соединения из группы: 3-(N,N-диметилкарбамоилокси)-2-этил-6-метилпиридина сукцинат, 3-метилпиридина сукцинат, 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина гидрохлорид, 6-трихлорметил-2-хлорпиридин (нитрапирин), 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат. В качестве пурина состав содержит инозин, аденозин, гипоксантин. Фармацевтический состав может быть выполнен в виде инъекций, лиофилизата, твердых капсул, таблеток, суппозиторий. Состав по изобретению обеспечивает создание стабильной лекарственной формы. (См. пат. RU № 2504375, кл. A 61 K 31/44, A 61 K 31/7076, A 61 K 9/08, A 61 K 9/19, A 61 K 9/20, A 61 K 9/48, A 61 P 39/06, A 61 P 3/00, A 61 P 25/00, опубл. 20.01.2014 г.).

Недостатком данного фармацевтического состава является не значительно выраженный кардиопротекторный эффект.

Наиболее близкой по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятой авторами за прототип является стабильная жидкая фармацевтическая композиция комплекса 3-(2,2,2-триметилгидразиний)пропионат-2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина дисукцината, обладающая антигипоксическим, антиоксидантным и адаптогенным действием, включающая 3-(2,2,2-триметилгидразиний)пропионат-2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина дисукцинат в количестве 0,1-50 мас.%, вспомогательные вещества в количестве 0,01-50 мас.% и воду. Изобретение позволяет получать стабильные фармацевтические составы для инъекционного, перрорального и местного применения, обладающие выраженной антигипоксической, антиоксидантной и адаптогенной активностью. (См. пат. RU № 2527347, кл. A 61 K 31/4412, A 61 K 47/00, A 61 K 9/00, C 07 D 213/65, A 61 P 43/00, опубл. 27.08.2014 г.).

Недостатком данной композиции является отсутствие кардиотрофического эффекта.

Краткое описание чертежей и иных материалов

На фиг. 1 дан антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных. Параметры острой токсичности антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, табл. 1.

На фиг. 2, тоже, графическое изображение острой токсичности для белых мышей антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, рис. 1.

На фиг. 3, тоже, графическое изображение острой токсичности для белых крыс антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, рис. 2.

На фиг. 4, тоже, биохимические показатели кошек, которым проводили лечение гипертрофической кардиомиопатии (активность аспартатаминотрансферазы, алланинаминотрансферазы, гаммаглутамилтрансферазы, креатининфосфокиназы, коэффициент де Ритиса), табл. 2.

На фиг. 5, тоже, биохимические показатели кошек, которым проводили лечение гипертрофической кардиомиопатии (уровень холестерина и С-реактивного белка, активность супероксиддисмутазы, концентрация малонового диальдегида), табл. 3.

На фиг. 6, тоже, показатели, характеризующие клинический статус кошек, которым проводили лечение гипертрофической кардиомиопатии, табл. 4.

На фиг. 7, тоже, показатели электрокардиографии кошек, которым проводили лечение гипертрофической кардиомиопатии, табл. 5.

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является разработка антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, обладающего выраженным кардиопротекторным, антиоксидантным и кардиотрофическим действием, низкой токсичностью, стабильностью лекарственной формы, высокой эффективностью в профилактике и лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы у животных, удобством введения и дозировки.

Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к выраженному кардиопротекторному, антиоксидантному и кардиотрофическому действию, низкой токсичности, стабильности лекарственной формы, высокой эффективности в профилактике и лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы у животных, удобству введения и дозировки.

Технический результат достигается с помощью антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, включающего производное 3-оксипиридина и мельдония дигидрат, при этом он дополнительно содержит инозин, поливинилпирролидон и воду для инъекций, а в качестве производного 3-оксипиридина используют метилэтилпиридинола гидрохлорид, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 0,8-1,2 инозин 0,8-1,2 мельдония дигидрат 1,5-2,5 поливинилпирролидон 2,5-4,5 вода для инъекций остальное

Общим с заявленным препаратом является наличие в составе антиоксидантной субстанции из числа производных 3-оксипиридина и мельдония. Отличием от ближайшего аналога, заявляемого антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных является использование в качестве действующего вещества из числа производных 3-оксипиридина метилэтилпиридинола гидрохлорида и мельдония в форме дигидрата и присутствие дополнительно инозина и поливинилпирролидона, что позволяет достигать более выраженных антиоксидантного, кардиопротекторного и кардиотрофического эффектов, повышает стабильность лекарственной формы и дает возможность проводить более эффективно лечение и профилактику кардиологических заболеваний у животных.

Заявляемый антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных представляет собой водный прозрачный раствор с желтоватым оттенком, со специфическим запахом, обладающий выраженными антиоксидантным, кардиопротекторным и кардиотрофическим эффектами, малотоксичен, удобен в применении и дозировании.

Как показывает практика, среди всех незаразных заболеваний собак и кошек ведущее место принадлежит сердечно-сосудистой патологии. По статистике, именно эти заболевания становятся причиной гибели животных в 40% случаев. По классификации, выделяют врождённые и приобретённые патологии сердца. Врождённые патологии сердца встречаются редко, проявляются они, как правило, в раннем возрасте и в 80% случаев приводят к гибели животного. К приобретённым кардиологическим заболеваниям склонны животные среднего и старшего возрастов (См. Жуликова О.А. // Дальневосточный аграрный вестник. - 2016. - №2. С. - 49-56).

Интерес к активным формам кислорода и реакциям с их участием, к антиоксидантам, блокирующим эти реакции, в последнее время быстро растет, поскольку с АФК связывают развитие широкого спектра хронических заболеваний. Избыточная активация реакций свободнорадикального окисления представляет типовой патологический процесс, встречающийся при самых различных заболеваниях и повреждающих воздействиях на организм (См. Собакарь М.С., Ших Е.В. // Биомедицина. - 2010. - №3. - С. 10-21).

Интенсификация свободно-радикальных процессов является также патогенетическим звеном развития сердечно-сосудистых заболеваний. Доказано, что при ишемии происходит нарушение процесса β-окисления жирных кислот в митохондриях, в результате чего накапливаются недоокисленные активированные формы жирных кислот, оказывающие токсическое воздействие на мембраны кардиомиоцитов, способствующие развитию эндотелиальной дисфункции и нарушений микроциркуляции. Наряду с гиперпродукцией активных форм кислорода при сердечно-сосудистой патологии происходит необратимое ингибирование активности антиоксидантных ферментов в ишемизированной ткани. Процессы перекисного окисления при этом приобретают неконтролируемый характер, вызывают прогрессирующее повреждение и последующую гибель кардиомиоцитов (См. Прокофьева Т.В., Полунина О.С. // Вестник современной клинической медицины. - 2023. - Т. 16. - №3. - С. 62-67).

Сформировавшаяся в последние десятилетия прошлого века концепция о важной роли свободнорадикального перекисного окисления липидов в патогенезе основных сердечно-сосудистых заболеваний делает оправданным и перспективным включение в комплексную терапию ишемической болезни сердца и гипертонической болезни антиоксидантов-цитопротекторов. Многочисленные, рандомизированные, двойные слепые, плацебоконтролируемые, клинические исследования, выполненные в 90-е годы XX века на больших контингентах с использованием в ряде случаев ангиографического контроля для документального подтверждения уменьшения стеноза коронарных сосудов, достаточно убедительно продемонстрировали положительный эффект антиоксидантов на течение и исход сердечно-сосудистых заболеваний (См. Голиков А.П., Полумисков В.Ю., Михин В.П., Бойцов С.А., Лукьянов М.М., Давыдов Б.В., Руднев Д.В., Фролов А.А., Богословская Е.Н. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2004. - Т. 3. - №6-2. - С. 66-74).

На сегодняшний день нет сомнений в важности и актуальности поиска новых химических соединений, которые обладают антиоксидантными свойствами и на основе которых могут быть созданы лекарственные препараты, перспективные для применения в лечении таких заболеваний, как атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, нейродегенеративные заболевания, сосудистые осложнения при сахарном диабете (См. Собакарь М.С., Ших Е.В. // Биомедицина. - 2010. - №3. - С. 10-21).

Наибольшей эффективностью, отсутствием токсичности и минимальными побочными эффектами характеризуются производные 3-оксипиридина, в частности инъекционные формы Эмоксипина (метилэтилпиридинол), который в свое время стал одним из первых синтетических антиоксидантов, вошедших в широкую клиническую практику. Он ингибирует свободно-радикальное окисление, активно взаимодействует с перекисными радикалами липидов, гидроксильными радикалами пептидов, стабилизирует клеточные мембраны. Кроме того, Эмоксипин снижает агрегацию тромбоцитов и нейтрофилов, уменьшает полимеризацию фибрина, ингибирует фосфодиэстеразу циклических нуклеотидов, благотворно воздействует на энергообменные процессы, нарушенные при ишемии/гипоксии. Опыт парентерального применения Эмоксипина у больных с острым инфарктом миокарда на фоне традиционной терапии показал, что препарат существенно улучшал клиническое течение болезни, снижал частоту фатальных осложнений, увеличивал выживаемость больных в острый и подострый период инфаркта (См. Егоров И.В. // Поликлиника. - 2011. - № 2-1. - С. 40-42).

Эмоксипин подавляет свободнорадикальное окисление липидов, взаимодействует с перекисными радикалами липидов, гидроксильными радикалами пептидов, повышает активность антиоксидантных ферментов, оптимизирует биоэнергетические процессы, стабилизирует клеточные мембраны. Препарат улучшает микроциркуляцию, снижает проницаемость сосудистой стенки, вязкость и свертываемость крови, обладает гиполиподемическим действием, снижает синтез триглицеридов. Он эффективен в отношении гипоксических и ишемических повреждений, является активным цитопротектором. На сегодняшний день препарат рекомендован в кардиологии при ишемической болезни сердца, синдроме слабости синусового узла, в качестве профилактики «синдрома реперфузии» (См. Трегубова И.А., Косолапов В.А., Спасов А.А. // Успехи физиологических наук. - 2012. - Т. 43. - №1. - С. 75-94).

Понятие «метаболическая терапия» объединяет значительное количество препаратов с различным механизмом действия, конечной целью применения которых является обеспечение цитопротекторного эффекта - улучшение энергетического метаболизма кардиомиоцита путем фармакологического управления в нем процессами образования и переноса энергии, реализуемого на уровне самого кардиомиоцита без влияния на перфузию сердечной мышцы (величину коронарного кровотока) и на гемодинамические условия ее функционирования (частоту сокращений сердц, пред- и постнагрузку). Действие метаболических препаратов направлено на коррекцию и профилактику дистрофических процессов в различных органах и тканях, защиту клеточных структур от перекисного и свободнорадикального окисления, оптимизацию нейроэндокринной регуляции, повышение неспецифической иммунорезистентности (См. Курята А.В., Караванская И.Л. // Новости медицины и фармации. - 2012. - №19 (436). - С. 16-18).

Наиболее известным представителем метаболических средств является рибоксин (инозин), отличающийся способностью стимулировать активность ряда ферментов цикла Кребса, синтез нуклеотидов, оказывать положительное влияние на обменные процессы в миокарде, улучшать коронарное кровообращение (См. Василенко Ю.К., Скульте И.В., Сергеева Е.О., Потапова А.А., Додохова М.А. // Современные проблемы науки и образования. - 2017. - №4. - С. 13).

Рибоксин стимулирует энергетический обмен за счет усиления ресинтеза аденозинтрифосфорной кислоты (АТФ) и повышения АТФ-азной активности миозина, уменьшает ацидоз посредством стимуляции окисления молочной кислоты, ускоряет диссоциацию оксигемоглобина, подавляет процессы перекисного окисления липидов на фоне острого инфаркта миокарда, снижает коагуляционную способность крови за счет потенцирования действия гепарина и уменьшение концентрации фибриногена, усиливает синтез протеина в экстремальных условиях, предотвращает иммуносупрессирующие свойства эритроцитов на фоне длительного введения этанола в эксперименте (См. Усеинова А.Н., Сапегин И.Д., Белякова А.Г., Полевик И.В., Иванцова Н.Л., Дмитриевская М.И. // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. - 2015. - Т. 5. - №2 (18). - С. 65-69).

Рибоксин - эффективный адаптоген, по типу действия относящийся к анаболическим веществам. Он может проникать в активно функционирующие клетки и повышать их энергетический баланс. Рибоксин стимулирует активность ферментов цикла Кребса, способствует выработке внутриклеточной энергии. Повышает устойчивость организма к гипоксии, препятствует развитию утомления, предотвращает развитие коронарной недостаточности и улучшает кровообращение (См. Студенцов Е.П., Рамш С.М., Казурова Н.Г., Непорожнева О.В., Гарабаджиу А.В., Кочина Т.А., Воронков М.Г., Кузнецов В.А., Криворотов Д.В. // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2013. - Т. 11. - №4. - С. 3-43).

Мельдоний (триметилгидразиния пропионат) - аналог гамма-бутиробетаина, подавляет гамма-бутиробетаингидроксиназу, снижает синтез карнитина и транспорт длинноцепочечных жирных кислот через оболочки клеток, препятствует накоплению в клетках активированных форм неокисленных жирных кислот — производных ацилкарнитина и ацилкоэнзима А. В условиях ишемии восстанавливает равновесие процессов доставки кислорода и его потребления в клетках, предупреждает нарушение транспорта АТФ; одновременно с этим активирует гликолиз, который протекает без дополнительного потребления кислорода. Механизму действия препарата в полной мере соответствуют его клинические эффекты - антиангинальный, противоишемический, кардиотонический (См. Сиренко Ю.Н., Радченко А.Д., Михеева К.В., Рековец О.Л., Бабич П.Н. // Новости медицины и фармации. - 2011. - №17 (386). - С. 6-10).

Мельдоний уменьшает интенсивность бетаокисления свободных жирных кислот посредством предотвращения поступления их в митохондрии: ограничивает транспорт через мембраны митохондрий только длинноцепочечных жирных кислот, в то время как короткоцепочечные могут свободно проникать в митохондрии и окисляться там, при этом не происходит накопления недоокисленных жирных кислот внутри митохондрий. Являясь одним из сильнейших обратимых ингибиторов гамма-бутиробетаингидроксилазы, которая катализирует конверсию гамма-бутиробетаина в карнитин, мельдоний тем самым снижает карнитин-зависимый транспорт жирных кислот в митохондрии мышечной ткани. Это означает, что он практически не способен оказывать токсическое действие на дыхание митохондрий, так как блокирует окисление не всех жирных кислот. Установлены и другие положительные эффекты мельдония, и, прежде всего, антиоксидантный. Мельдоний уменьшает интенсивность перекисного окисления липидов и повышает активность эндогенных антиоксидантов, нивелируя последствия окислительного стресса (Стаценко М.Е., Туркина С.В. // Лечащий врач. - 2012. - №7. - С. 62).

Высокая антиишемическая эффективность мельдония показана при многих сердечно-сосудистых заболеваниях, в том числе при хронической сердечной недостаточности. Установлено его положительное влияние на тяжесть проявлений данной патологии: препарат увеличивает сократимость миокарда, фракцию выброса и систолический объем, повышает толерантность к физической нагрузке, улучшает самочувствие и качество жизни (См. Стаценко М.Е., Туркина С.В., Фабрицкая С.В., Тыщенко И.А., Полетаева Л.В. // Медицинский совет. - 2017. - №5. - С. 20-22).

Согласно аннотации производителей мельдоний используется в составе комплексной терапии ишемической болезни сердца (стенокардия, инфаркт миокарда), хронической сердечной недостаточности, дисгормональной кардиомиопатии, острых и хронических нарушений мозгового кровообращения (инсульты и цереброваскулярная недостаточность), при пониженной работоспособности, в послеоперационный п ериод для ускорения реабилитации (См. Самородская И.В. // РМЖ. Медицинское обозрение. - 2013. - Т. 21. - №36. - С. 1818-1822).

Поливинилпирролидон - первичный продукт полимеризации N-винилпирролидона, относится к высокомолекулярным линейным полимерам с молекулами линейной структуры длиной около 100 мкм, которые в низких концентрациях способны снижать гидролитическое сопротивление. При введении в кровоток поливинилпирролидон благоприятно воздействует на системную гемодинамику и микроциркуляцию. По своим физиологическим свойствам поливинилпирролидон аналогичен альбумину и способен заменять его. В фармацевтической практике нашли применение как растворимые, так и нерастворимые марки поливинилпирролидона (См. Николаева Л.Л., Гулякин И.Д., Оборотова Н.А., Бунятян Н.Д. // Фармация и фармакология. - 2016. - Т. 4. - №2. - С. 88-94).

Поливинилпирролидон широко применяется в медицине, во-первых как мощное дезинтоксикационное средство для лечения ряда патологических процессов, сопровождающихся интоксикацией организма, во-вторых, как плазмозаменитель - в виде иньекционных растворов, в-третьих, его высокомолекулярные фракции служат пролонгатором действия других лекарственных веществ (См. Краснюк (мл.) И.И., Беляцкая А.В., Краснюк И.И., Степанова О.И., Овсянникова Л.В., Грих В.В., Алленова Т.М., Одинцова Е.Б. // Фармация. - 2016. - Т. 65. - №6. - С. 7-11).

Сущность получения антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных заключается в следующем: исходные вещества в мас. %, а именно производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид - 0,8-1,2; инозин - 0,8-1,2; мельдония дигидрат - 1,5-2,5; поливинилпирролидон - с 2,5-4,5; вода для инъекций - остальное смешивают в асептических условиях и упаковывают.

Осуществление изобретения

Примеры конкретного выполнения получения и испытания антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных.

Пример 1.

Антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных готовят путем смешения компонентов в асептических условиях и растворения в воде для инъекций при следующем соотношении компонентов, мас. %:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 0,6 инозин 0,6 мельдония дигидрат 1,0 поливинилпирролидон 1,5 вода для инъекций остальное

Данный препарат вводили белым лабораторным крысам, у которых была экспериментально смоделирована ишемическая болезнь сердца. Моделирование ишемической болезни сердца выполнялось в соответствии с методикой, описанной Д.А. Абашидзе с соавторами (См. Арешидзе Д.А., Макарцева Л.А., Кучер С.А., Седов А.А., Грицюнайте А.А., Сахнова К.А. // В сборнике: Академическая наука - проблемы и достижения. Материалы XVIII международной научно-практической конференции. - 2019. - С. 1-7.), и предполагало введение самцам белых лабораторных крыс ежедневно на протяжении семи суток подкожно 0,1 мл 0,1% раствора адреналина и 1 мл 2,5% суспензии гидрокортизона. Подопытные животные были разделены на две группы: первая - служила контролем, и в ней выполнялось моделирование ишемической болезни сердца по указанной схеме, во второй группе (опытная) выполняли тоже, но дополнительно вводили полученный препарат. На восьмые сутки эксперимента от подопытных крыс получали кровь для биохимического исследования, после проведенной эвтаназии отбирали сердце для гистологического исследования. Результаты анализа данных, полученных в ходе биохимического исследования крови, показали, что у животных из первой группы активность аспартатаминотрансферазы (АсАт) была на 37,2% выше по сравнению со второй группой, а уровень активности алланинаминотрансферазы (АлАт) - на 26,6%, соответственно. При этом коэффициент де Ритиса в первой группе в среднем составлял 2,91, а во второй группе - 2,19, что на 24,7% меньше. Уровень лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в сыворотке крови крыс из первой группы был выше на 31,4% по сравнению с аналогичным показателем второй группы, а концентрация С-реактивного белка, у крыс которым не применяли антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, превышала на 26,2% значения данного показателя во второй группе. Концентрация малонового диальдегида (МДА) в крови крыс из первой группы была выше на 46,1%, а активность супероксиддисмутазы (СОД) - ниже на 38,2%, по сравнению со второй группой. Анализ результатов микроскопического исследования микропрепаратов миокарда крыс показал наличие ишимизированных участков у всех подопытных животных из обеих групп, но при этом их суммарная площадь в первой группе на 32,7% превышала таковую во второй группе. Также отмечено, что в препаратах, приготовленных из сердечной мышцы крыс из первой группы, было меньше количество ядер кардиомиоцитов на 28,5%, меньшая суммарная площадь ядер кардиомиоцитов на 14,3%, а также более высокий апоптический индекс на 13,9%, соответственно, по сравнению со второй группой.

Пример 2.

Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов, мас. %:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 0,8 инозин 0,8 мельдония дигидрат 1,5 поливинилпирролидон 2,5 вода для инъекций остальное

После применения полученного препарата белым лабораторным крысам установлено, что у животных из первой группы активность АсАт была на 42,1% выше по сравнению со второй группой, а уровень активности АлАт - на 28,0%, соответственно. Коэффициент де Ритиса во второй группе был на 28,3% меньше по сравнению с первой группой. Уровень ЛДГ в сыворотке крови крыс из первой группы был выше на 35,2% по сравнению с аналогичным показателем второй группы, а концентрация С-реактивного белка - на 30,4%, соответственно. Концентрация МДА в крови крыс из первой группы была выше на 49,9%, а активность СОД - ниже на 43,1%, по сравнению со второй группой. Анализ результатов микроскопического исследования микропрепаратов миокарда крыс показал наличие ишимизированных участков у всех подопытных животных из обеих групп, но при этом их суммарная площадь в первой группе на 36,1% превышала таковую во второй группе. Также отмечено, что в препаратах, приготовленных из сердечной мышцы крыс из первой группы, было меньше количество ядер кардиомиоцитов на 32,2%, меньшая суммарная площадь ядер кардиомиоцитов на 26,1%, а также более высокий апоптический индекс на 15,3%, соответственно, по сравнению со второй группой.

Пример 3.

Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов, мас. %:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 1,0 инозин 1,0 мельдония дигидрат 2,0 поливинилпирролидон 3,5 вода для инъекций остальное

После применения полученного препарата белым лабораторным крысам установлено, что у животных из первой группы активность АсАт была на 48,4% выше по сравнению со второй группой, а уровень активности АлАт - на 30,6%, соответственно. Коэффициент де Ритиса во второй группе был на 32,2% меньше по сравнению с первой группой. Уровень ЛДГ в сыворотке крови крыс из первой группы был выше на 39,7% по сравнению с аналогичным показателем второй группы, а концентрация С-реактивного белка - на 36,2%, соответственно. Концентрация МДА в крови крыс из первой группы была выше на 56,2 %, а активность СОД - ниже на 48,4%, по сравнению со второй группой. Анализ результатов микроскопического исследования микропрепаратов миокарда крыс показал наличие ишимизированных участков у всех подопытных животных из обеих групп, но при этом их суммарная площадь в первой группе на 41,1% превышала таковую во второй группе. Также отмечено, что в препаратах, приготовленных из сердечной мышцы крыс из первой группы, было меньше количество ядер кардиомиоцитов на 37,8%, меньшая суммарная площадь ядер кардиомиоцитов на 30,5%, а также более высокий апоптический индекс на 19,7%, соответственно, по сравнению со второй группой.

Пример 4.

Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов, мас. %:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 1,2 инозин 1,2 мельдония дигидрат 2,5 поливинилпирролидон 4,5 вода для инъекций остальное

После применения полученного препарата белым лабораторным крысам установлено, что у животных из первой группы активность АсАт была на 44,3% выше по сравнению со второй группой, а уровень активности АлАт - на 31,2%, соответственно. Коэффициент де Ритиса во второй группе был на 30,3% меньше по сравнению с первой группой. Уровень ЛДГ в сыворотке крови крыс из первой группы был выше на 37,6% по сравнению с аналогичным показателем второй группы, а концентрация С-реактивного белка - на 31,8%, соответственно. Концентрация МДА в крови крыс из первой группы была выше на 53,8%, а активность СОД - ниже на 45,6%, по сравнению со второй группой. Анализ результатов микроскопического исследования микропрепаратов миокарда крыс показал наличие ишимизированных участков у всех подопытных животных из обеих групп, но при этом их суммарная площадь в первой группе на 38,4% превышала таковую во второй группе. Также отмечено, что в препаратах, приготовленных из сердечной мышцы крыс из первой группы, было меньше количество ядер кардиомиоцитов на 33,1%, меньшая суммарная площадь ядер кардиомиоцитов на 28,7%, а также более высокий апоптический индекс на 16,6%, соответственно, по сравнению со второй группой.

Пример 5.

Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов, мас. %:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 1,4 инозин 1,4 мельдония дигидрат 3,5 поливинилпирролидон 5,5 вода для инъекций остальное

После применения полученного препарата белым лабораторным крысам установлено, что у животных из первой группы активность АсАт была на 39,0% выше по сравнению со второй группой, а уровень активности АлАт - на 27,1%, соответственно. Коэффициент де Ритиса во второй группе был на 26,9% меньше по сравнению с первой группой. Уровень ЛДГ в сыворотке крови крыс из первой группы был выше на 34,2% по сравнению с аналогичным показателем второй группы, а концентрация С-реактивного белка - на 28,7%, соответственно. Концентрация МДА в крови крыс из первой группы была выше на 52,7%, а активность СОД - ниже на 39,5%, по сравнению со второй группой. Анализ результатов микроскопического исследования микропрепаратов миокарда крыс показал наличие ишимизированных участков у всех подопытных животных из обеих групп, но при этом их суммарная площадь в первой группе на 34,4% превышала таковую во второй группе. Также отмечено, что в препаратах, приготовленных из сердечной мышцы крыс из первой группы, было меньше количество ядер кардиомиоцитов на 29,6%, меньшая суммарная площадь ядер кардиомиоцитов на 25,2%, а также более высокий апоптический индекс на 14,5%, соответственно, по сравнению со второй группой.

Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 2, 3, 4, поскольку, в результате применения антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных в соответствии с ними, получают больший положительный эффект, заключающийся в снижении активность АсАт на 42,1 - 48,4%, а активности АлАт - на 28,0 - 31,2, коэффициента де Ритиса - на 28,3 - 32,2%, уровня ЛДГ - на 35,2 - 39,7%, концентрации С-реактивного белка - на 30,4 - 36,2%, концентрации МДА - на 49,9 - 56,2%, суммарной площади ишимизированных участков миокарда - на 36,1-41,1%, апоптического индекса на 15,3 - 19,7%, а также увеличению активности СОД - на 48,4 - 56,2%, количества ядер кардиомиоцитов - на 32,2 - 37,8% и их суммарной площади - на 26,1 - 30,5%, по сравнению с контрольной группой, соответственно.

Пример 6.

Для проведения оценки антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных на острую токсичность берут следующее соотношение компонентов, мас. %:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 1,0 инозин 1,0 мельдония дигидрат 2,0 поливинилпирролидон 3,5 вода для инъекций остальное

Исследования по изучению острой токсичности антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных проводят на белых лабораторных мышах и лабораторных крысах при однократном внутрижелудочном введении, что позволяет определить летальные дозы, классифицировать препарат по ГОСТ 12.1.007-76 и отнести его к 4 классу опасности «Вещества малоопасные» (фиг. 1,2,3).

Пример 7.

Эффективность антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных изучают на кошках согласно примера 3, являющимся наиболее эффективным, который включает следующее соотношение компонентов в мас. %: производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид - 1,0; инозин - 1,0; мельдония дигидрат - 2,0; поливинилпирролидон - 3,5; вода для инъекций - остальное.

Суть эксперимента заключается в том, что используют две группы кошек возрастом 6-10 лет больных гипертрофической кардиомиопатией (ГКМП), по шесть особей в каждой. Первая группа животных выступает в качестве контроля и им применяется стандартная схема терапии, включающая пероральное введение препарата «Вазотоп Р» («Intervet GesmbH», Австрия) в дозе 0,2 мг/кг в 1-14 сутки лечения 1 раз в день, препарата «Фуросемид» (АО «Биннофарм, Россия) внутривенно в 1-5 сутки лечения в дозе 1,6 мг/кг 1 раз вдень и препарата «Верошпирон» («Gedeon Richter, Plc.», Венгрия) перорально в 6-14 сутки лечения в дозе 2,0 мг/кг 1 раз вдень. Во второй группе лечение проводят аналогично контроля, но дополнительно в 1-10 сутки вводят внутривенно капельно в комбинации с 25 мл 0,9% раствора натрия хлорида антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных в дозе 37,5 мг/кг 1 раз вдень. Ежедневно регистрируют клинические показатели у больных кошек, а также выполняют электрокардиографию и получают кровь для лабораторного исследования на момент начала лечения, на седьмые и четырнадцатые сутки лечения, при котором определяют биохимические показатели.

При анализе биохимических показателей (фиг. 4,5) установлено, что у всех больных ГКМП животных уровень активности аспартатаминотрансферазы (АсАт) значительно превышал референсные значения для данного вида. Примененные схемы лечения в обеих группах способствовали изменению данного показателя в сторону его оптимизации. Так, к четырнадцатым суткам проводимой терапии в первой группе снижение активности АсАт в первой группе составило 12%, а во второй группе статистически достоверное снижение составило 24,3% по сравнению с данными, зафиксированными перед началом лечения. Активность алланинаминотрансферазы (АлАт) в среднем в обеих группах находилась в пределах нормативных справочных значений, характерных для кошек данного возраста. Но при этом, за четырнадцать суток наблюдения отмечено снижение ее уровня в первой группе на 6,6%, а во второй - на 17,8%. Коэффициент де Ритиса (КдР) до начала лечения существенно превышал физиологические значения, характерные для кошек. Поскольку назначенное лечение способствовало изменению динамики ферментов переаминирования, то поменялись и значения КдР, но уменьшение в обеих группах было не значительным и составило в первой - 5,9%, во второй - 7,7% относительно первоначальных, определенных до начала лечения.

Уровень активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ) у кошек с ГКМ до начала терапии в среднем превышал верхнюю границу физиологической нормы более чем на 20%. В процессе проводимого лечения, к четырнадцатым суткам установлено, что активность ЛДГ снизилась в первой группе на 15,8%, а во второй группе - статистически достоверно снизилась на 21%. Активность креатининфосфокиназы (КФК) характеризовалась повышенным уровнем у больных животных, а назначенное лечение в обеих группах способствовало изменению динамики в сторону уменьшения. При этом в первой группе за четырнадцать суток наблюдения оно составило 11,9%, а во второй - 14,5%, соответственно.

Концентрация холестерина в сыворотке крови кошек в начале лечения значительно превышала уровень, приняты за нормативный для здоровых животных данного вида, а в процессе лечения в обеих группах выявлена положительная динамика. В первой группе за время наблюдения снижение составило 9,3%, а во второй - 18,4%, при этом данные на четырнадцатые сутки лечения статистически достоверно отличались между опытными и контрольными животными в среднем на 22,5%. Уровень С-реактивного белка (СРБ), также был повышен в начале лечения, а его реализация позволила нормализоваться этому маркеру уже к седьмым суткам. За четырнадцать дней осуществляемой терапии концентрация СРБ уменьшалась в первой группе на 39,5%, а во второй группе - на 44,9%. Следует отметить, что наблюдалась статистически достоверная разница между группами по данному показателю, при которой в первой он был выше на седьмые сутки на 26,7%, а на четырнадцатые - на 26,1%, по сравнению со второй.

Активность супероксиддисмутазы (СОД) у животных с ГКМП была ниже оптимальных значений в начале лечения. Отмечено, что в динамике данного маркера были значительные отличия между группами. Так, в первой группе на четырнадцатые сутки наблюдения выявлено уменьшение активности СОД на 3%. В это время в группе, в которой дополнительно использовали антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных к седьмым суткам зафиксирован прирост на 35,6%, в целом через четырнадцать суток после начала лечения активность СОД была выше на 26% относительно первоначальных значений. Этим обусловлена значительная статистически достоверная разница между группами по данному показателю, при которой он в первой был выше на седьмые сутки на 41,4%, а на четырнадцатые - на 43,7%, по сравнению со второй. Концентрация малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови больных кошек, кратно превышала референсный уровень. Изменения, зафиксированные в процессе наблюдения, также имели существенные различия между группами в динамике. В первой группе за время проведения эксперимента снижение составило 19,8%, а во второй статистически достоверное снижение составило 38,5%. Статистически достоверная разница между первой и второй группой по уровню МДА на равнялась 28,7% на седьмые сутки и на 32,6% на четырнадцатые сутки наблюдения, соответственно.

Оценивая клинические показатели кошек больных ГКМП (фиг. 6) в процессе их лечения пришли к выводу, что у животных из второй группы наблюдалась более положительная их динамика. В частности: у животных, которым дополнительно применяли антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных статистически достоверно быстрее на 24,2% происходило исчезновение цианоза видимых слизистых оболочек, а также в среднем на 0,39 суток (9,5%) раньше устранялись признаки одышки, на 0,72 суток (11,5%) раньше достигалось отсутствие кашля, на 0,33 суток (6,5%) раньше исчезали периферические отеки и на 1,27 суток (15,1%) раньше наступала ремиссия.

По результатам проведения электрокардиографии (фиг. 7) у кошек больных ГКМП установлено, что у животных до начала лечения частота сердечных сокращений (ЧСС) значительно превышала верхнюю границу референсного интервала. При этом в первой группе изначально данный показатель в среднем составлял 212,8 ударов в минуту, а во второй - 196,6 ударов в минуту. В процессе лечения отмечена стабилизация данного показателя и статистически достоверное уменьшение к четырнадцатым суткам ЧСС в первой группе до 156,7 ударов в минуту (на 26,4%), а во второй группе - до 141,3 ударов в минуту (28,1%), соответственно. Время регистрации зубца Р, которое до начала терапии было замедлено, к четырнадцатым суток увеличилось в первой группе на 21,2% и достоверно увеличилось во второй группе на 38,7%. Аналогичное увеличение было отмечено для интервала PQ в первой группе составило 66,7%, во второй группе - 62,5%, интервала QRS, соответственно, в первой группе -на 27,6%, во второй группе - на 52,1%, интервала QT в первой группе - на 25,8%, во второй группе - на 32,6%.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что применение антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных в составе комплексных схем лечения ГКМП значительно повышает их эффективность и способствует улучшению динамики биохимических и клинических показателей.

Преимущества предлагаемого антиоксидантного препарата для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных в том, что он содержит в комплексе производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид, инозин, мельдония дигидрат, поливинилпирролидон и воду для инъекций, что значительно повышает его эффективность, а стабильный водный раствор и концентрация действующего вещества в нем, делает его удобным в дозировании и применении животным.

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие технические преимущества:

- повышенный антиоксидантный эффект;

- повышенный кардиопротекторный эффект;

- наличие кардиотрофического эффекта;

- комплексное действие;

- повышение терапевтической эффективности;

- снижение токсичности;

- стабильность лекарственной формы;

- удобство введения и дозирования.

Изобретение относится к ветеринарной фармации, в частности к препаратам для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных и может быть использовано в ветеринарии и животноводстве для лечения и профилактики заболеваний сердечно-сосудистой системы у животных. Предложен антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, включающий производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид, мельдония дигидрат, инозин, поливинилпирролидон и воду для инъекций, при следующем соотношении компонентов, мас.%: метилэтилпиридинола гидрохлорид - 0,8-1,2; инозин - 0,8-1,2; мельдония дигидрат - 1,5-2,5; поливинилпирролидон - 2,5-4,5; вода для инъекций - остальное. Препарат обеспечивает выраженное кардиопротекторное, антиоксидантное и кардиотрофическое действие, обладает низкой токсичностью, обеспечивает высокую эффективность профилактики и лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы у животных, удобство введения и дозировки. 7 ил., 7 пр.

Антиоксидантный препарат для лечения и профилактики кардиологических патологий у животных, включающий производное 3-оксипиридина, мельдония дигидрат и воду для инъекций, отличающийся тем, что он дополнительно содержит инозин и поливинилпирролидон, а в качестве производного 3-оксипиридина используют метилэтилпиридинола гидрохлорид, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

производное 3-оксипиридина, в качестве которого используют метилэтилпиридинола гидрохлорид 0,8-1,2 инозин 0,8-1,2 мельдония дигидрат 1,5-2,5 поливинилпирролидон 2,5-4,5 вода для инъекций остальное