Способ моделирования токсического гепатита с использованием фталевого ангидрида Российский патент 2024 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к медицине и ветеринарной медицине, а именно к экспериментальной биологии, токсикологии, и может быть использовано для изучения формирования и прогрессирования изменений печени, возникающих под действием токсико-химических повреждающих факторов.

В последние годы непрерывно совершенствуются методы моделирования различных видов гепатопатий, которые используются для проверки фармацевтической активности новых медикаментов. Эти методы позволяют оценить эффективность лекарственных средств в лечении заболеваний гепатобилиарной системы и выбрать оптимальное лечение для животных.

Известен способ моделирования токсического гепатита формалином и этиловым спиртом в токсикологическом эксперименте (RU 2564758 C1). Недостатком данного метода является длительность моделирования (21 сутки).

Также известен способ моделирования токсического гепатита с использованием 50%-ного раствора четыреххлористого углерода на оливковом масле (SU 1469516 A1). Недостатком данного метода является инъекционная форма, что может повлечь за собой патологические процессы в других органах и тканях, что может исказить результаты моделирования, а также длительность моделирования (8 недель).

Техническим результатом является решение задачи по моделированию токсического гепатита с использованием фталевого ангидрида. Преимущества данной модели заключаются в том, что она является легковоспроизводимой, более короткой по времени по сравнению с прототипом (в течение суток), более удобной в отношении использования по сравнению с инъекционной формой в аналоге.

Технический результат достигается способом моделирования токсического поражения печени, включающим воздействие токсическим средством, которое вводят крысам- самцам перорально шприцем, отличающимся тем, что в качестве токсического средства используется фталевый ангидрид, который вводят перорально однократно в дозировке 80 мг/кг в виде раствора, состоящего из фталевого ангидрида и этиленгликоля в соотношении 1:15.

На фиг. 1 представлен гистологический срез печени интактной крысы первой подопытной группы. Окраска - гемотоксилин-эозин, окуляр увеличения ×10.

На фиг. 2 представлен гистологический срез печени крысы второй подопытной группы. Окраска - гемотоксилин-эозин, окуляр увеличения ×10.

Способ проиллюстрирован следующим примером.

Пример. Для достижения адекватности предлагаемой модели изучено 20 беспородных крыс-самцов массой тела 180-200 г, разделенных на две подопытные группы. Первую подопытную группу представляли 10 интактных животных, вторую подопытную группу - 10 крыс-самцов, которым однократно перорально с помощью шприца вводили раствор, состоящий фталевого ангидрида и этиленгликоля в соотношении 1:15 в дозировке 80 мг/кг (приготовленный смешиванием вышеуказанного токсиканта с органическим растворителем (этиленгликолем) согласно Государственной фармакопее XV по фармакопейной статье ОФС.1.4.1.0011.15 Растворы). Спустя сутки животных эвтаназировали по принципам биоэтики для гистологического исследования состояния печени.

При использовании вышеуказанного метода были получены следующие результаты: 1) в гистологических срезах печени интактных крыс первой подопытной группы, печень снаружи имеет соединительнотканную капсулу. Отходящие от капсулы тяжи соединительной ткани делят паренхиму печени на дольки. Классические печеночные дольки крыс имеют форму шестигранных призм, они не имеют четких границ. В междольковой ткани у ребер долек находятся триады - междольковая вена, междольковая артерия, желчный проток. Желчный проток выстлан кубическим эпителием. В центре дольки находится центральная вена, от которой расходятся печеночные балки. Печеночные балки образованы гепатоцитами. Гепатоциты крысы имеют неправильную многоугольную форму и составляют 60% всех клеточных элементов печени. Многие из них в норме содержат два или больше ядер. Внутри долек находятся синусоидные капилляры. В гистосрезах печени интактных крыс наблюдается умеренное кровенаполнение синусоидных капилляров, центральных вен и портальных трактов. Балочно-радиарное строение печеночных долек четко прослеживается. Портальные тракты не расширены без признаков склероза и воспаления, что соответствует морфо-функциональному строению печени без патологий. На фиг. 1 представлен гистологический срез печени интактной крысы первой подопытной группы. Окраска - гемотоксилин-эозин, окуляр увеличения ×10.

2) При гистологическом исследовании печени крыс после применения токсиканта выявлено, что балочно-радиарное строение печени нарушено, наблюдается перивенулярный склероз (от слабо выраженного до выраженного циркулярного разрастания фиброзной ткани вокруг центральной вены). Большая часть гепатоцитов подверглось мелко-, средне- и крупнокапельной жировой дистрофии. В строме долек присутствуют очаги полиморфноклеточной инфильтрации (лимфогистиоцитарная инфильтрация + сегментоядерные нейтрофильные лейкоциты). Выраженное венозно-капиллярное полнокровие сосудов печени, неравномерное расширение (отек) перисинусоидальных пространств Диссе, варьирующее от слабого до выраженного. В цитоплазме гепатоцитов присутствуют гиалиноподобные включения (тельца Мэллори). Портальные тракты с фиброзом, расширены, с лимфоидной инфильтрацией. Междольковые желчные протоки печени имеют различный диаметр. В желчных протоках наблюдается холестаз. Данная гистологическая картина характерна для токсического гепатита (на фиг. 2).

Изобретение относится к медицине и ветеринарной медицине, а именно к экспериментальной биологии, токсикологии, и может быть использовано для моделирования токсического гепатита. Используют фталевый ангидрид, который вводят крысам перорально однократно в дозировке 80 мг/кг в виде раствора, состоящего из фталевого ангидрида и этиленгликоля в соотношении 1:15. Изобретение обеспечивает легковоспроизводимый и короткий по времени способ моделирования токсического гепатита. 2 ил., 1 пр.

Способ моделирования токсического гепатита, включающий воздействие токсическим средством, которое вводят крысам-самцам перорально шприцем, отличающийся тем, что в качестве токсического средства используется фталевый ангидрид, который вводят перорально однократно в дозировке 80 мг/кг в виде раствора, состоящего из фталевого ангидрида и этиленгликоля в соотношении 1:15.