Область техники, к которой относится настоящее изобретение
Настоящее изобретение относится к аматоксинам, конъюгатам антитела с лекарственным средством (ADC), содержащим аматоксин, композициям, содержащим такие ADC, и способам их применения.
Предшествующий уровень техники настоящего изобретения
Моноклональные антитела (mAb) можно конъюгировать с терапевтическим средством с образованием конъюгата антитела с лекарственным средством (ADC). ADC могут проявлять повышенную эффективность по сравнению с неконъюгированным антителом. Связывание антитела с лекарственным средством может являться прямым или непрямым через линкер. Важным аспектом успешных терапевтических ADC является то, что ADC является не только эффективным, но и хорошо переносится. Часто цитотоксин влияет как на эффективность, так и на переносимость.
ADC были предложены в качестве терапевтических средств для лечения рака. Применение ADC для местной доставки цитотоксических или цитостатических средств, то есть лекарственных средств для уничтожения или ингибирования опухолевых клеток при лечении рака, теоретически позволяет осуществлять направленную доставку фрагмента-лекарственного средства к опухолям и внутриклеточное накопление в них, где системное введение этих неконъюгированных лекарственных средств может привести к неприемлемому уровню токсичности, в том числе и для нормальных клеток.
ADC также были предложены в качестве терапевтической схемы для подготовки пациентов к трансплантации и терапии стволовыми клетками. Посредством кондиционирования пациента клеточноспецифическим ADC, стволовые клетки или иммунные клетки могут быть селективно истощены, при этом остальная иммунная система пациента остается в значительной степени нетронутой. Например, в Palchaudhuri et al. (2016) Nat. Biotechnol. 34, 738-745 описано использование однократной дозы ADC против CD45, в котором антитело к CD45 было конъюгировано с сапорином, и его способность обеспечивать приживление донорских клеток и применение для лечения на модели серповидноклеточной анемии. Сообщалось, что в отличие от лучевой терапии, CD45-SAP ADC позволяет избежать нейтропении и анемии и обеспечивает быстрое восстановление Т- и В-клеток с минимальной общей токсичностью. По-прежнему существует потребность в токсинах, которые можно использовать для негенотоксического нацеленного ADC-кондиционирования, где токсин является сильнодействующим для клеток-мишеней, при этом сводя к минимуму побочные эффекты для пациента.
Краткое раскрытие настоящего изобретения
Настоящее изобретение относится к аматоксинам, которые можно использовать в конъюгатах антитела с лекарственным средством (ADC), например, для доставки аматоксина к целевой клетке. Настоящее изобретение также относится к конкретным модификациям антител, которые можно использовать в конъюгатах антитела с лекарственным средством для доставки аматоксина к целевой клетке. Настоящее изобретение также относится к комбинациям указанных аматоксинов и антител, которые обладают повышенной эффективностью, повышенной переносимостью in vivo и, следовательно, благоприятными терапевтическими окнами.
Краткое описание фигур
На фигуре 1 изображены структуры формул IV (фигура 1А), VI (фигура 1В) и На (фигура 1C). «Ab» на фиг. 1А-1С представляет собой антитело. На фигурах 1А, 1В и 1C представлены конъюгаты А, В и С соответственно, упомянутые в примерах. Конъюгаты А, В и С также обозначаются как ADC A, ADC В и ADC С.
На фигуре 2 графически представлены результаты анализов цитотоксичности in vitro с использованием клеток Kasumi-1 в присутствии ADC с предварительной инкубацией ADC в среде (А) или 50% сыворотке крови человека (В) для оценки стабильности конъюгатов в сыворотке.
На фигуре 3 графически представлены результаты анализов цитотоксичности in vitro с использованием клеток Kasumi-1 в присутствии ADC с повторением времени инкубации с титрованными образцами ADC для оценки различий в кинетике цитотоксичности между расщепляемыми и нерасщепляемыми конъюгатами.
На фигуре 4 графически представлены результаты двух анализов уничтожения клеток in vitro с использованием клеток Kasumi-1 (4А) и клеток CD34+ (4В). Исследуемый ADC представлял собой ADC С против CD117.
На фигуре 5 графически изображена способность ADC С против CD117 сильно истощать CD34+ человека в костном мозге гуманизированных мышей NSG.
Фигура 6 представляет собой графики Каплана-Мейера, отражающие выживаемость гуманизированных мышей NSG с имплантированными Kasumi-1, которые получили лечение указанными дозами конъюгатов или контролей.
На фигуре 7 графически изображена эффективность конъюгата С, оцененная на самцах яванских макак. Доза 2,0 мг/кг (LALA). Проблемы с партией 30.2867 могли привести к снижению чувствительности HSC.
На фигуре 8 графически изображена переносимость ADC, содержащих либо конъюгат А, либо конъюгат С, у самцов яванских макак.
На фигуре 9 графически изображен фармакокинетический анализ конъюгата А и конъюгата С, вводимых самцам яванских макак.
На фигуре 10 графически показано, что ADC С против CD2 и CD5 способны истощать Т-клетки.
На фигуре 11 графически показано, что, хотя ADC А и С против CD2 достигают насыщения к 5 дню, некоторые клетки все еще экспрессируют CD5.
На фигурах 12А и 12В графически представлены результаты, показывающие ADC против CD45 А или С (фигура 14А) или ADC против CD45 А или В (фигура 14В) в анализах уничтожения клеток in vitro.
На фигуре 13 графически представлены результаты, показывающие ADC А или С против CD45 в анализах уничтожения клеток in vitro.
На фигуре 14 графически представлены результаты ADC А или С против CD45 в экспериментах по истощению клеток in vivo.
На фигуре 15 графически представлены результаты введения мышам ADC А или С против CD45 в различных дозах. Показаны уровни периферических лимфоцитов, HSC и лимфоцитов. Все ADC вводили в дозе 1 мг/кг.
На фигуре 16 графически представлены результаты, показывающие ADC А и С против CD137 в анализе уничтожения Т-клеток.
На фигуре 17 графически изображена стабильность в сыворотке линии клеток ADC А и С против CD137 в течение 48 часов.
На фигуре 18 изображены структуры конструкций аманитин-линкер HDP30.2867, 30.0880, 30.2371 и 30.1699 соответственно.
На фигуре 19 показаны структуры конструкций аманитин-линкер HDP30.2115, 30.2060 и 30.2347 соответственно.
На фигуре 20 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC T-D265C-30.2867 и T-D265C-30.0880, соответственно, на клеточные линии (A) SKBR-3, (В) NCI-N87, (С) ВТ474 и (D) JIMT-1 в анализе 96П-BrdU.
На фигуре 21 графически представлены результаты анализа стабильности соединений ADC T-D265C-30.2867 и T-D265C-30.0880, проведенного SDS-PAGE/вестерн-блоттингом, после инкубации в течение 0, 4 и 10 дней соответственно на плазме (А) человека, (В) мыши, (С) яванского макака и (D) PBS (контроль) соответственно.
На фигуре 22 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединения ADC T-D265C-30.2867 на клетках SBR-3 после инкубации в течение 0, 4 и 10 дней соответственно на плазме (А) человека, (В) мыши, (С) яванского макака и (D) PBS (контроль) соответственно.
На фигуре 23 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединения ADC T-D265C-30.2867 на клетках NCI-N87 после инкубации в течение 0, 4 и 10 дней соответственно на плазме (А) человека, (В) мыши, (С) яванского макака и (D) PBS (контроль) соответственно.
На фигуре 24 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединения ADC T-D265C-30.2867 на клетках JIMT-1 после инкубации в течение 0, 4 и 10 дней соответственно на плазме (А) человека, (В) мыши, (С) яванского макака и (D) PBS (контроль) соответственно.
На фигуре 25 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности ADC против Her2 на моделях опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток JIMT-1 на мышах in vivo с использованием соединений ADC T-D265C-30.2867, T-D265C-30.0880 и T-D265C-30.1699.
На фигуре 26 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности ADC против Her2 на моделях опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток NCI-N87 на мышах in vivo с использованием соединений ADC T-D265C-30.2867, T-D265C-30.0880 и T-D265C-30.1699.
На фигуре 27 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC h3/F11-D265C-Var16-30.2867 и h3/F11-D265C-Var16-30.0880 соответственно на клеточные линии (A) LNCap, (В) 22RV1 и (С) РСЗ в анализе 96h-BrdU.
На фигуре 28 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности ADC против PSMA на моделях опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap-клеток на мышах in vivo с использованием соединений ADC h3/F11-D265C-Var16-30.2867, h3/F11-D265C-Var-16-30.0880 и h3/F11-D265C-Var16-30.2060.
На фигуре 29 графически представлены результаты исследования переносимости на обезьянах с использованием соединения ADC против дигоксигенина DIG-D265C-30.2867 в различных дозах от 1 мг/кг до 20 мг/кг. Приведены результаты оценки показателей LDH, AST, ALT.
На фигуре 30 графически представлены результаты исследования переносимости на обезьянах с использованием DIG-D265C-30.2867. Показаны фармакокинетические данные для ADC в сыворотке.
На фигуре 31 графически представлены результаты исследования переносимости на обезьянах с использованием DIG-D265C-30.2867. Показаны фармакокинетические данные для аматоксина в сыворотке крови.
На фигуре 32 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC, содержащих антитело к Her2 с мутацией D265C (T-D265C), конъюгированное со структурно различными производными аманитина на клетках JIMT-1 (А, В).
На фигуре 33 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC, содержащих антитело к Her2 с мутацией D265C (T-D265C), конъюгированное со структурно различными производными аманитина на клетках NCI-N87 (А, В).
На фигуре 34 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC, содержащих антитело к Her2 с мутацией D265C (T-D265C), конъюгированное со структурно различными производными аманитина на клетках SKBR-3 (А, В).
На фигуре 35 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC, содержащих антитело к PSMA с мутацией D265C (h3/F11-D265C-Var16), конъюгированное со структурно различными производными аманитина на клетках LNCap (А, В).
На фигуре 36 графически изображена цитотоксическая активность in vitro соединений ADC, содержащих антитело к PSMA с мутацией D265C (h3/F11-D265C-Var16), конъюгированное со структурно различными производными аманитина на клетках 22RV1 (А, В).
На фигуре 37 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности различных ADC против PSMA, содержащих структурно различные производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap на мышах in vivo. Показаны средние значения +/- SEM для всех групп при 
и 
максимальной переносимой дозы (MTD).
На фигуре 38 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности различных ADC против PSMA, содержащих структурно различные производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap на мышах in vivo. Показаны средние значения +/- SEM для всех групп при максимальной переносимой дозы (MTD).
На фигуре 39 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности различных ADC против PSMA, содержащих структурно различные производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap на мышах in vivo. Показаны средние значения +/- SEM для всех групп при максимальной переносимой дозы (MTD).
На фигуре 40 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности различных ADC против PSMA, содержащих структурно различные производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap на мышах in vivo. Показаны средние значения +/- SEM для ADC с присоединением линкера к аминокислоте 1 аматоксина при и максимальной переносимой дозы (MTD).
На фигуре 41 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности различных ADC против PSMA, содержащих структурно различные производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap на мышах in vivo. Показаны средние значения +/- SEM для ADC с присоединением линкера к аминокислоте 4 аматоксина при и максимальной переносимой дозы (MTD).
На фигуре 42 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности различных ADC против PSMA, содержащих структурно различные производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата клеток LNCap на мышах in vivo. Показаны средние значения +/- SEM для ADC с расщепляемыми линкерами при максимально переносимой дозы (MTD).
На фигуре 43 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности ADC против Her2, содержащих тройные мутации L234A/L235A/D265C и конструкцию анатоксин-линкер HDP30.2060 и HDP30.2867 соответственно (T-LALA-D265C-30.2060, T-LALA-D265C-30.2867 соответственно) на Her2-положительных клетках NCI-N87 в модели CDX на мышах.
На фигуре 44 графически представлены результаты анализа цитотоксической эффективности ADC против PSMA, содержащих тройные мутации L234A/L235A/D265C и конструкцию аматоксин-линкер HDP30.2060 и HDP30.2867 соответственно (h3/F11-LALA-D265C-Var-30.2060, h3/F11-LALA-D265C-Var-30.2867 соответственно) на PSMA-положительных клетках LNCap в модели CDX на мышах.
На фигуре 45 графически представлены результаты 96-часового анализа BrdU для оценки цитотоксического потенциала in vitro Her2-специфических ADC, содержащих антитело, несущее мутации L234A/L235A и/или мутацию D265C, или контрольные мутации, на Her2-положительных клетках SKBR-3 (А, В, С, D).
На фигуре 46 графически представлены результаты 96-часового анализа CTG для оценки цитотоксического потенциала in vitro Her2-специфических ADC, содержащих антитело, несущее мутации L234A/L235A и/или мутацию D265C, или контрольные мутации на Her2-отрицательных клетках ТНР-1 (А, В, С, D).
На фигуре 47 графически представлены результаты 120-часового анализа CTG для оценки цитотоксического потенциала in vitro Her2-специфических ADC, содержащих антитело, несущее мутации L234A/L235A и/или мутацию D265C, или контрольные мутации, на Her2-отрицательных клетках ТНР-1 (А, В, С, D).
Подробное раскрытие настоящего изобретения
Для ясности настоящего раскрытия, а не в целях ограничения, подробное раскрытие настоящего изобретения разделено на следующие подразделы.
Настоящее изобретение относится каматоксину или его производному или аналогу, содержащим структуру формулы (An) или формулы (Bn)
Формула (An)
Формула (Bn)
где n составляет 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или 9,
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к аматоксину или его производному или аналогу, содержащим структуру формулы (А)
или ее энантиомера или диастереомера.
Согласно дополнительному варианту осуществления настоящее изобретение относится к аматоксину или его производному или аналогу; содержащим структуру формулы (В)
или ее энантиомера или диастереомера.
Указанные аматоксины или их производные или аналоги можно использовать при получении конъюгата антитела с лекарственным средством (ADC).
Авторы настоящего изобретения показали, что ADC согласно настоящему изобретению обладают особенно высокой стабильностью и переносимостью в плазме и, следовательно, улучшенным терапевтическим окном.
Настоящее изобретение также относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, конъюгированные с аматоксином через линкер, причем ADC характеризуется структурой формулы (I):
или ее стереоизомера;
где:
Q представляет собой S или сульфоксидную группу;
L представляет собой нерасщепляемый линкер;
Z представляет собой химический фрагмент, образованный реакцией сочетания между реакционноспособным заместителем, присутствующим на L, и реакционноспособным заместителем, присутствующим в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте; и
Ab представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
Указанный ADC может характеризоваться структурой формулы (Ia):
Указанный ADC также может характеризоваться структурой формулы (Ib):
В указанных ADC L может содержать один или несколько из следующего: связь, -(С=O)-, группа -С(O)NH-, группа -OC(O)NH-, C1-C6 алкилен, C1-C6 гетероалкилен, C2-C6 алкенилен, C2-C6 гетероалкенилен, C2-C6 алкинилен, C2-C6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен, гетероарилен, группа -(CH2CH2O)p-, где р представляет собой целое число от 1 до 6, или повышающая растворимость группа;
где каждый C1-C6 алкилен, C1-C6 гетероалкилен, C2-C6 алкенилен, C2-C6 гетероалкенилен, C2-C6 алкинилен, C2-C6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкилгетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, три галоген метил, циано, гидрокси, меркапто и нитро;
или каждый C1-С6 алкилен, C1-C6 гетероалкилен, C2-C6 алкенилен, C2-C6 гетероалкенилен, C2-C6 алкинилен, C2-C6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N.
Указанная усиливающая растворимость группа может характеризоваться формулой -Oa-C(O)NH-SO2-NR1-, где:
а составляет 0 или 1; и
R1 выбран из группы, состоящей из следующего: водород, C1-C24 алкильные группы, С3-С24 циклоалкильные группы, С2-С24 (гетеро)арильные группы, С3-С24 алкил(гетеро)арильные группы и С3-С24 (гетеро)арилалкильные группы, каждый из которых может быть необязательно замещен или необязательно прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и NR3, где R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и C1-C4 алкила.
В указанных ADC L может содержать звено -(СН2)n-, где n представляет собой целое число, составляющее 2-6. Предпочтительно L представляет собой -(СН2)n-, где n составляет 6.
В указанных ADC Ab, Z и L, взятые вместе как Ab-Z-L, могут быть представлены формулой:
где S представляет собой атом серы остатка цистеина, присутствующего в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, конъюгированные с аматоксином через линкер, причем ADC характеризуется структурой формулы (I):
или ее стереоизомера;
где:
Q представляет собой S или сульфоксидную группу;
L представляет собой расщепляемый линкер;
Z представляет собой химический фрагмент, образованный реакцией сочетания между реакционноспособным заместителем, присутствующим на L, и реакционноспособным заместителем, присутствующим в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте; и
Ab представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
Указанный ADC может характеризоваться структурой формулы (Ia):
Указанный ADC может характеризоваться структурой формулы (Ib):
В указанных ADC L содержит один или несколько из следующего: гидразин, дисульфид, простой тиоэфир, аминокислота, пептид, состоящий максимум из 10 аминокислот, пара-аминобензильная (РАВ) группа, гетероциклическая саморасщепляющаяся группа, C1-C6 алкил, C1-C6 гетероалкил, C2-C6 алкенил, С2-С6, гетероалкенил, С2-С6, алкинил, С2-С6, гетероалкинил, С3-С6 циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, группа -(С=O)-, группа -С(O)NH-, группа -OC(O)NH-, группа -(CH2CH2O)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6, или повышающая растворимость группа;
где каждая C1-С6 алкильная, C1-C6 гетероалкильная, C2-C6 алкенильная, C2-С6 гетероалкенильная, C2-C6 алкинильная, C2-C6 гетероалкинильная, С3-С6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть замещена 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, тригалогенметил, циано, гидрокси, меркапто и нитро;
или каждая C1-C6 алкильная, C1-C6 гетероалкильная, C2-C6 алкенильная, C2-C6 гетероалкенильная, C2-C6 алкинильная, C2-C6 гетероалкинильная, С3-С6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть прервана одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N.
Указанная усиливающая растворимость группа может характеризоваться формулой -Oa-C(O)NH-SO2-NR1-, где:
а составляет 0 или 1; и
R1 выбран из группы, состоящей из следующего: водород, C1-C24 алкильные группы, С3-С24 циклоалкильные группы, С2-С24 (гетеро)арильные группы, С3-С24 алкил(гетеро)арильные группы и С3-С24 (гетеро)арилалкильные группы, каждый из которых может быть необязательно замещен или необязательно прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и NR3, где R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и C1-C4 алкила.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения L содержит пептид, выбранный из группы, состоящей из Phe-Lys, Val-Lys, Phe-Ala, Phe-Cit, Val-Ala, Val-Cit и Val-Arg. L может дополнительно содержать группу РАВ.
Согласно одному варианту осуществления L представлен формулой:
Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело, конъюгированное с аматоксином, причем ADC характеризуется структурой формулы (II):
или ее стереоизомера.
Указанный ADC может характеризоваться структурой формулы (IIa):
Указанный ADC может характеризоваться структурой формулы (IIb):
Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности раковой клетки или стволовой клетки человека, в частности гемопоэтической стволовой клетки (HSC), или Т-клетки.
Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с Her2, PSMA, CD37 или CD123 человека.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит область Fc, содержащую по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, состоящей из D265C, D265A, А118С, Н435А, L234A или L235A (согласно индексу EU).
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с PSMA и содержит CDRH1 согласно SEQ ID NO: 378, CDRH2 согласно SEQ ID NO: 379, CDRH3 согласно SEQ ID NO: 380, CDRL1 согласно SEQ ID NO: 381, CDRL2 согласно SEQ ID NO: 382 и CDRL3 согласно SEQ ID NO: 383.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 375 и вариабельную область легкой цепи согласно SEQ ID NO: 377.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения указанное антитело содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 371, SEQ ID NO: 372, SEQ ID NO: 373 или SEQ ID NO: 374 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 376 или их антигенсвязывающий фрагмент.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, конъюгированные с аматоксином или его производным или аналогом, через линкер, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит область Fc, содержащую по меньшей мере две мутации, состоящие из L234A и L235A (согласно индексу EU).
Согласно особенно предпочтительному варианту осуществления указанная область Fc дополнительно содержит мутацию, состоящую из D265C (согласно индексу EU).
Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности раковой клетки, предпочтительно раковой клетки человека.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с простатическим специфическим мембранным антигеном (PSMA), предпочтительно PSMA человека, или с антигеном Her2, CD37 или CD123.
Предпочтительный вариант осуществления относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), в котором указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с PSMA и содержит CDRH1 согласно SEQ ID NO: 378, CDRH2 согласно SEQ ID NO: 379, CDRH3 согласно SEQ ID NO: 380, CDRL1 согласно SEQ ID NO: 381, CDRL2 согласно SEQ ID NO: 382 и CDRL3 согласно SEQ ID NO: 383.
Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения указанное антитело, которое специфически связывается с PSMA, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит вариабельную область тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 375 и вариабельную область легкой цепи согласно SEQ ID NO: 377.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения указанное антитело содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 372, SEQ ID NO: 373 или SEQ ID NO: 374 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 376 или их антигенсвязывающий фрагмент.
Согласно дополнительным предпочтительным вариантам осуществления конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC) содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые конъюгированы с любым соединением, которое выбрано из группы, состоящей из HDP30.2060, HDP30.2115, HDP30.2347, HDP30.1699, HDP30.2371, HDP30.0880 и HDP30.2867.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.2060. Наиболее предпочтительно в указанном ADC соединение HDP30.2060 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела (нумерация EU).
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека, и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.2115. Наиболее предпочтительно в указанном ADC соединение HDP30.2115 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека, и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.2347. Наиболее предпочтительно в указанном ADC соединение HDP30.2347 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека, и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.1699. Наиболее предпочтительно в указанном ADC соединение HDP30.1699 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека, и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.2371. Наиболее предпочтительно в указанном ADC соединение HDP30.2371 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека, и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.0880. Наиболее предпочтительно в указанном ADC соединение HDP30.0880 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела.
Настоящее изобретение дополнительно относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), содержащему антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с PSMA человека, и содержат тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376, и которые конъюгированы с соединением HDP30.2867. Наиболее предпочтительно, в указанном ADC соединение HDP30.2867 напрямую связано с атомом серы цистеина D265C указанного антитела.
В указанных конъюгатах антитела с лекарственным средством (ADC) согласно настоящему изобретению соотношение лекарственного средства к антителу (DAR) составляет приблизительно 1, 2, 3 или 4, предпочтительно DAR составляет 2.
Дополнительный аспект настоящего изобретения относится к указанным ADC для применения при лечении рака у пациента, в частности, при этом рак выбран из группы, состоящей из следующего: рак молочной железы, рак поджелудочной железы, холангиокарцинома, рак толстой и прямой кишки, рак легкого, рак предстательной железы, рак яичников, рак предстательной железы, рак желудка, рак почки, злокачественная меланома, гемобластоз, лейкоз и злокачественная лимфома.
Настоящее изобретение дополнительно относится к применению любого из указанных ADC для лечения рака у пациента, в частности, при этом рак выбран из группы, состоящей из следующего: рак молочной железы, рак поджелудочной железы, холангиокарцинома, рак толстой и прямой кишки, рак легкого, рак предстательной железы, рак яичников, рак предстательной железы, рак желудка, рак почки, злокачественная меланома, гемобластоз, лейкоз и злокачественная лимфома.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения указанный конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC) содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности гемопоэтической стволовой клетки (HSC), предпочтительно HSC человека.
Дополнительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу истощения популяции клеток у субъекта-человека, причем указанный способ предусматривает введение указанного ADC субъекту, причем ADC содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с внеклеточным антигеном, экспрессируемым клетками в популяции клеток.
Дополнительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу кондиционирования субъекта-человека для трансплантации клеток, причем указанный способ предусматривает введение указанного ADC субъекту-человеку таким образом, чтобы эндогенные стволовые или эндогенные иммунные клетки у субъекта-человека истощались, причем ADC специфически связывается с внеклеточным антигеном, экспрессируемым эндогенными стволовыми или эндогенными иммунными клетками.
Дополнительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к указанному способу, дополнительно предусматривающему введение субъекту-человеку аллогенных стволовых клеток или аллогенных иммунных клеток.
Дополнительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к указанному способу, причем ADC специфически связывается с внеклеточным антигеном, экспрессируемым на иммунной клетке, и при этом субъект характеризуется наличием или подвержен риску развития реакции «трансплантат против хозяина» (GVHD).
Настоящее изобретение дополнительно относится к фармацевтической композиции, содержащей любой из указанных ADC или их комбинаций и по меньшей мере фармацевтически приемлемый носитель.
Определения
Если не указано иное, следующие термины и фразы, используемые в настоящем документе, имеют следующие значения.
Используемый в настоящем документе термин «ацил» относится к следующему: -C(=O)R, где R представляет собой водород («альдегид»), C1-C12 алкил, C2-C12 алкенил, C2-C12 алкинил, С3-С7 карбоциклил, C6-C20 арил, 5-10-членный гетероарил или 5-10-членный гетероциклил, как определено в настоящем документе. Неограничивающие примеры включают в себя формил, ацетил, пропаноил, бензоил и акрилоил.
Используемый в настоящем документе термин «C1-C12 алкил» относится к насыщенному углеводороду с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащему 1-12 атомов углерода. Типичные C1-C12 алкильные группы включают в себя без ограничения -метил, -этил, -н-пропил, -н-бутил, -н-пентил и -н-гексил; в то время как разветвленные C1-C12 алкилы включают в себя без ограничения -изопропил, -втор-бутил, -изобутил, -трет-бутил, -изопентил и 2-метилбутил. C1-C12 алкильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе термин «алкенил» относится к C2-C12 углеводороду, содержащему нормальные, вторичные или третичные атомы углерода по меньшей мере с одним участком ненасыщенности, то есть двойной углерод-углеродной связью, sp2. Примеры включают в себя без ограничения: этилен или винил, -аллил, -1-бутенил, -2-бутенил, -изобутиленил, -1-пентенил, -2-пентенил, -3-метил-1-бутенил, -2-метил-2-бутенил, -2,3-диметил-2-бутенил и т.п. Алкенильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе «алкинил» относится к C2-C12 углеводороду, содержащему нормальные, вторичные или третичные атомы углерода по меньшей мере с одним участком ненасыщенности, то есть тройной углерод-углеродной связью sp. Примеры включают в себя без ограничения ацетилен и пропаргил. Алкинильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе «арил» относится к С6-С20 карбоциклической ароматической группе. Примеры арильных групп включают в себя без ограничения фенил, нафтил и антраценил. Арильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе «арилалкил» относится к ациклическому алкильному радикалу, в котором один из атомов водорода, связанных с атомом углерода, как правило, концевым или sp3-атомом углерода, заменен арильным радикалом. Типичные арилалкильные группы включают в себя без ограничения бензил, 2-фенилэтан-1-ил, 2-фенилэтен-1-ил, нафтилметил, 2-нафтилэтан-1-ил, 2-нафтилэтен-1-ил, нафтобензил, 2-нафтофенилэтан-1-ил и т.п. Арилалкильная группа содержит от 6 до 20 атомов углерода, например алкильный фрагмент, включая в себя алканильные, алкенильные или алкинильные группы, арилалкильной группы содержит от 1 до 6 атомов углерода, а арильный фрагмент содержит от 5 до 14 атомов углерода. Алкарильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе термин «циклоалкил» относится к насыщенному карбоциклическому радикалу, который может являться моно- или бициклическим. Циклоалкильные группы включают в себя кольцо, содержащее от 3 до 7 атомов углерода в виде моноцикла или от 7 до 12 атомов углерода в виде бицикла. Примеры моноциклических циклоалкильных групп включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Циклоалкильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе термин «циклоалкенил» относится к ненасыщенному карбоциклическому радикалу, который может являться моно- или бициклическим. Циклоалкенильные группы включают в себя кольцо, содержащее от 3 до 6 атомов углерода в виде моноцикла или от 7 до 12 атомов углерода в виде бицикла. Примеры моноциклических циклоалкенильных групп включают в себя 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, 1-циклогекс-1-енил, 1-циклогекс-2-енил и 1-циклогекс-3-енил. Циклоалкенильная группа может являться незамещенной или замещенной.
Используемый в настоящем документе термин «гетероагалкил» относится к ациклическому алкильному радикалу, в котором один из атомов водорода, связанных с атомом углерода, как правило, концевым или sp3-атомом углерода, заменен гетероарильным радикалом. Типичные гетероарилалкильные группы включают в себя без ограничения 2-бензимидазолилметил, 2-фурилэтил и т.п. Гетероарилалкильная группа содержит 6-20 атомов углерода, например алкильный фрагмент, включая в себя алканильные, алкенильные или алкинильные группы, гетероарилалкильной группы содержит 1-6 атомов углерода, и гетероарильный фрагмент содержит 5-14 атомов углерода и 1-3 гетероатома, выбранных из N, О, Р и S. Гетероарильный фрагмент гетероарилалкильной группы может представлять собой моноцикл, содержащий 3-7 членов кольца (2-6 атомов углерода или бицикл, содержащий 7-10 членов кольца (4-9 атомов углерода и от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из N, О, Р и S), например: бицикло[4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] система.
Используемые в настоящем документе термины «гетероарил» и «гетероциклоалкил» относятся к ароматической или неароматической кольцевой системе, соответственно, в которой один или несколько атомов кольца представляют собой гетероатом, например азот, кислород и сера. Гетероарильный или гетероциклоалкильный радикал содержит 2-20 атомов углерода и 1-3 гетероатома, выбранных из N, О, Р и S. Гетероарил или гетероциклоалкил может представлять собой моноцикл, содержащий 3-7 членов кольца (2-6 атомов углерода и 1-3 гетероатома, выбранных из N, О, Р и S) или бицикл, содержащий 7-10 членов кольца (4-9 атомов углерода и 1-3 гетероатома, выбранных из N, О, Р и S), например: бицикло[4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] система. Гетероарил и гетероциклоалкил может являться незамещенным или замещенным.
Гетероарильные и гетероциклоалкильные группы описаны в Paquette, Leo A.; "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry" (W.A. Benjamin, New York, 1968), особенно главы 1, 3, 4, 6, 7 и 9; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs" (John Wiley & Sons, New York, 1950 по настоящее время), в частности тома 13, 14, 16, 19 и 28; и J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566.
Примеры гетероарильных групп включают в себя в качестве примера, но не ограничиваясь ими, пиридил, тиазолил, тетрагидротиофенил, пиримидинил, фуранил, тиенил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тетразолил, бензофуранил, тианафталинил, индолил, индоленил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, изоксазолил, пиразинил, пиридазинил, индолизинил, изоиндолил, 3Н-индолил, 1H-индазолил, пуринил, 4Н-хинолизинил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолинил, птеридинил, 4аН-карбазолил, карбазолил, фенантридинил, акридинил, пиримидинил, фенантролинил, феназинил, фенотиазинил, фуразанил, феноксазинил, изохроманил, хроманил, имидазолидинил, имидазолинил, пиразолидинил, пиразолинил, бензотриазолил, бензизоксазолил и изатиноил.
Примеры гетероциклоалкилов включают в себя в качестве примера, но не ограничиваясь ими, дигидропиридил, тетрагидропиридил (пиперидил), тетрагидротиофенил, пиперидинил, 4-пиперидонил, пирролидинил, 2-пирролидонил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, бис-тетрагидропиранил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, декагидрохинолинил, октагидроизохинолинил, пиперазинил, хинуклидинил и морфолинил.
В качестве примера, но не ограничиваясь ими, связанные через углерод гетероарилы и гетероциклоалкилы связаны в положении 2, 3, 4, 5 или 6 пиридина, положении 3, 4, 5 или 6 пиридазина, положении 2, 4, 5 или 6 пиримидина, положении 2, 3, 5 или 6 пиразина, положении 2, 3, 4 или 5 фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, положении 2, 4 или 5 оксазола, имидазола или тиазола, положении 3, 4 или 5 изоксазола, пиразола или изотиазола, положении 2 или 3 азиридина, положении 2, 3 или 4 азетидина, положении 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 хинолина или положении 1, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 изохинолина. Еще более типично связанные через углерод гетероциклы включают в себя 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 5-пиридил, 6-пиридил, 3-пиридазинил, 4-пиридазинил, 5-пиридазинил, 6-пиридазинил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-пиримидинил, 6-пиримидинил, 2-пиразинил, 3-пиразинил, 5-пиразинил, 6-пиразинил, 2-тиазолил, 4-тиазолил или 5-тиазолил.
В качестве примера, а не ограничения, связанные через азот гетероарилы и гетероциклоалкилы связаны в положении 1 азиридина, азетидина, пиррола, пирролидина, 2-пирролина, 3-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина, 1H-индазола, положении 2 изоиндола или изоиндолина, положении 4 морфолина и положении 9 карбазола или бета-карболина. Еще более типично связанные через азот гетероциклы включают в себя 1-азиридил, 1-азетедил, 1-пирролил, 1-имидазолил, 1-пиразолил и 1-пиперидинил.
«Замещенный», используемый в настоящем документе и применительно к любому из указанных выше алкила, алкенила, алкинила, арила, арилалкила, циклоалкила, гетероарила, гетероциклила и т.п. означает, что один или несколько атомов водорода независимо заменены заместителем. Если иное не ограничено определением индивидуального заместителя, вышеуказанные химические фрагменты, такие как «алкил», «алкилен», «гетероалкил», «гетероалкилен», «алкенил», «алкенилен», «гетероалкенил», «гетероалкенилен», «алкинил», «алкинилен», «гетероалкинил», «гетероалкинилен», «циклоалкил», «циклоалкилен», «гетероциклоалкил», гетероциклоалкилен», «арил,» «арилен», «гетероарил» и «гетероарилен» группы необязательно могут быть замещены. Типичные заместители включают в себя без ограничения -X, -R, -ОН, -OR, -SH, -SR, NH2, -NHR, -N(R)2, -N+(R)3, -СХ3, -CN, -OCN, -SCN, -NCO, -NCS, -NO, -NO2, -N3, -NC(=O)H, -NC(=O)R, -C(=O)H, -C(=O)R, -C(=O)NH2, -C(=O)N(R)2, -SO3-, -SO3H, -S(=O)2R, -OS(=O)2OR, -S(=O)2NH2, -S(=O)2N(R)2, -S(=O)R, -OP(=O)(OH)2, -OP(=O)(OR)2, -P(=O)(OR)2, -РО3, -РО3Н2, -С(=O)Х, -C(=S)R, -CO2H, -CO2R, -CO2-, -C(=S)OR, -C(=O)SR, -C(=S)SR, -C(=O)NH2, -C(=O)N(R)2, -C(=S)NH2, -C(=S)N(R)2, -C(=NH)NH2, и -C(=NR)N(R)2; где каждый X независимо выбран для каждого случая из F, Cl, Br, и I; и каждый R независимо выбран для каждого случая из следующего: C1-C12 алкил, С6-С20 арил, С3-С14 гетероциклоалкил или гетероарил, защитная группа и фрагмент пролекарственного средства. Везде, где группа описана как «необязательно замещенная», эта группа может быть замещена одним или несколькими из вышеуказанных заместителей независимо для каждого случая.
Следует понимать, что некоторые соглашения об наименовании радикалов могут включать в себя либо монорадикал, либо дирадикал, в зависимости от контекста. Например, если для заместителя требуются две точки присоединения к остальной части молекулы, понятно, что заместитель представляет собой дирадикал. Например, заместитель, идентифицированный как алкил, который требует двух точек присоединения, включает в себя дирадикалы, такие как -СН2-, -СН2СН2-, -СН2СН(СН3)СН2- и т.п. Другие соглашения об наименовании радикалов ясно указывают, что радикал является дирадикалом, такие как «алкилен», «алкенилен», «арилен», «гетероциклоалкилен» и т.п.
Везде, где заместитель изображен как дирадикал (т.е. имеет две точки присоединения к остальной части молекулы), следует понимать, что заместитель может быть присоединен в любой направленной конфигурации, если не указано иное.
«Изомерия» означает соединения, которые имеют идентичные молекулярные формулы, но различаются последовательностью связывания их атомов или расположением их атомов в пространстве. Изомеры, различающиеся расположением атомов в пространстве, называются «стереоизомерами». Стереоизомеры, которые не являются зеркальным отображением друг друга, называются «диастереоизомерами», а стереоизомеры, которые не являются наложенными зеркальными изображениями друг друга, называются «энантиомерами» или иногда «оптическими изомерами».
Атом углерода, связанный с четырьмя неидентичными заместителями, называется «хиральным центром». «Хиральный изомер» означает соединение по меньшей мере с одним хиральным центром. Соединения с более чем одним хиральным центром могут существовать либо в виде индивидуального диастереоизомера, либо в виде смеси диастереоизомеров, называемой «диастереоизомерной смесью». Когда присутствует один хиральный центр, стереоизомер может характеризоваться абсолютной конфигурацией (R или S) этого хирального центра. Абсолютная конфигурация относится к пространственному расположению заместителей, присоединенных к хиральному центру. Заместители, присоединенные к рассматриваемому хиральному центру, ранжируются в соответствии с правилом последовательности Кана, Ингольда и Прелога. (Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; исправления 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn and Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (London), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116). Смесь, содержащая равные количества отдельных энантиомерных форм противоположной хиральности, называется «рацемической смесью».
Соединения, раскрытые в настоящем описании и формуле изобретения, могут содержать один или несколько асимметричных центров, и могут существовать разные диастереоизомеры и/или энантиомеры каждого из соединений. Подразумевается, что описание любого соединения в этом описании и формуле изобретения включает в себя все энантиомеры, диастереоизомеры и их смеси, если не указано иное. Кроме того, описание любого соединения в настоящем описании и формуле изобретения предназначено для включения как индивидуальных энантиомеров, так и любой смеси, рацемической или иной, энантиомеров, если не указано иное. Когда структура соединения изображена как конкретный энантиомер, следует понимать, что настоящее изобретение настоящей заявки не ограничивается этим конкретным энантиомером. Соответственно, в настоящем документе предусмотрены энантиомеры, оптические изомеры и диастереоизомеры каждой из структурных формул настоящего раскрытия. В настоящем описании структурная формула соединения представляет собой определенный изомер для удобства в некоторых случаях, но настоящее раскрытие включает в себя все изомеры, такие как геометрические изомеры, оптические изомеры на основе асимметричного углерода, стереоизомеры, таутомеры и тому подобное, при этом понятно, что не все изомеры могут иметь одинаковый уровень активности. Соединения могут существовать в различных таутомерных формах. Подразумевается, что соединения согласно настоящему раскрытию включают в себя все таутомерные формы, если не указано иное. Когда структура соединения изображена как конкретный таутомер, следует понимать, что настоящее изобретение настоящей заявки не ограничивается этим конкретным таутомером.
Соединения любой формулы, описанные в настоящем документе, включают в себя сами соединения, а также их соли и их сольваты, если это применимо. Соль, например, может быть образована между анионом и положительно заряженной группой (например, аминогруппой) в соединении согласно настоящему раскрытию. Подходящие анионы включают в себя хлорид, бромид, йодид, сульфат, бисульфат, сульфамат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, глутамат, глюкуронат, глутарат, малат, малеат, сукцинат, фумарат, тартрат, тозилат, салицилат, лактат, нафталинсульфонат и ацетат (например, трифторацетат). Термин «фармацевтически приемлемый анион» относится к аниону, подходящему для образования фармацевтически приемлемой соли. Аналогичным образом, соль также может быть образована между катионом и отрицательно заряженной группой (например, карбоксилат) в соединении согласно настоящему раскрытию. Подходящие катионы включают в себя ион натрия, ион калия, ион магния, ион кальция и катион аммония, такой как ион тетраметиламмония. Примерами некоторых подходящих замещенных ионов аммония являются те, которые получены из: этиламина, диэтиламина, дициклогексиламина, триэтиламина, бутиламина, этилендиамина, этаноламина, диэтаноламина, пиперазина, бензиламина, фенилбензиламина, холина, меглумина и трометамина, а также аминокислот, таких как лизин и аргинин.
Соединения согласно настоящему раскрытию также включают в себя соли, содержащие атомы четвертичного азота.
Примеры подходящих неорганических анионов включают в себя без ограничения анионы, полученные из следующих неорганических кислот: соляная, бромистоводородная, йодистоводородная, серная, сернистая, азотная, азотистая, фосфорная и фосфористая. Примеры подходящих органических анионов включают в себя без ограничения анионы, полученные из следующих органических кислот: 2-ацетилоксибензойная, уксусная, аскорбиновая, аспарагиновая, бензойная, камфорсульфоновая, коричная, лимонная, этилендиаминтетрауксусная кислота, этандисульфоновая, этансульфоновая, фумаровая, глюкогептоновая, глюконовая, глутаминовая, гликолевая, гидроксималеиновая, гидроксинафталинкарбоновая, изетионовая, молочная, лактобионовая, лауриновая, малеиновая, яблочная, метансульфоновая, муциновая, олеиновая, щавелевая, пальмитиновая, памоевая, пантотеновая, фенилуксусная, фенилсульфоновая, пропионовая, пировиноградная, салициловая, стеариновая, янтарная, сульфаниловая, винная, толуолсульфоновая и валериановая. Примеры подходящих полимерных органических анионов включают в себя без ограничения анионы, полученные из следующих полимерных кислот: дубильная кислота, карбоксиметилцеллюлоза.
Кроме того, соединения согласно настоящему раскрытию, например соли соединений, могут существовать либо в гидратированной, либо в негидратированной (безводной) форме или в виде сольватов с другими молекулами растворителя. Неограничивающие примеры гидратов включают в себя моногидраты, дигидраты и т.д. Неограничивающие примеры сольватов включают в себя сольваты этанола, сольваты ацетона и т.д. «Сольват» означает формы добавления растворителя, которые содержат стехиометрические или нестехиометрические количества растворителя. Некоторые соединения имеют тенденцию улавливать фиксированное молярное соотношение молекул растворителя в кристаллическом твердом состоянии, образуя таким образом сольват. Если растворителем является вода, образующийся сольват представляет собой гидрат; а если растворителем является спирт, образующийся сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются путем сочетания одной или нескольких молекул воды с одной молекулой вещества, в котором вода сохраняет свое молекулярное состояние как H2O. Гидрат относится, например, к моногидрату, дигидрату, тригидрату и т.д.
Кроме того, кристаллический полиморфизм может присутствовать для соединений или их солей, представленных формулами, раскрытыми в настоящем документе. Следует отметить, что любая кристаллическая форма, смесь кристаллических форм или их ангидрид или гидрат включены в объем настоящего раскрытия.
Используемый в настоящем документе термин «приблизительно» относится к значению, которое находится в пределах 10% выше или ниже описываемого значения. Например, термин «приблизительно 5 нМ» означает диапазон от 4,5 до 5,5 нМ.
Используемый в настоящем документе термин «аматоксин» относится к представителю семейства пептидов аматоксинов, продуцируемых грибами Amanita phalloides, или его варианту или производному, например его варианту или производному, способному ингибировать активность РНК-полимеразы II. Подходящие аматоксины и их производные дополнительно описаны в настоящем документе ниже. Как описано в настоящем документе, аматоксины могут быть конъюгированы с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, например, посредством линкерного фрагмента (L) (таким образом, образуя конъюгат (т.е. ADC)). Примеры способов конъюгации аматоксина и линкеров, применимых для таких процессов, описаны ниже.
В контексте настоящего изобретения термин «аматоксин» включает в себя все циклические пептиды, состоящие из 8 аминокислот, выделенные из рода Amanita и описанные в Wieland, Т. and Faulstich H. (Wieland Т, Faulstich H., CRC Crit Rev Biochem. 5 (1978) 185-260), а также все их химические производные;
дополнительно все его полусинтетические аналоги; дополнительно все их синтетические аналоги, построенные из элементарных звеньев в соответствии с основной структурой природных соединений (циклические, 8 аминокислот), дополнительно все синтетические или полусинтетические аналоги, содержащие негидроксилированные аминокислоты вместо гидроксилированных аминокислот, дополнительно все синтетические или полусинтетические аналоги, в которых сульфоксидный фрагмент заменен сульфоном, тиоэфиром или атомами, отличными от серы, например атомом углерода, как в карбоаналоге аманитина.
Используемый в настоящем документе термин «производное» соединения относится к разновидностям, имеющим химическую структуру, аналогичную соединению, но содержащим по меньшей мере одну химическую группу, не присутствующую в соединении и/или не имеющую по меньшей мере одной химической группы, которая присутствует в соединении. Соединение, с которым сравнивается производное, известно как «исходное» соединение. Как правило, «производное» может быть получено из исходного соединения на одной или нескольких стадиях химической реакции.
Используемый в настоящем документе термин «аналог» соединения структурно родственен, но не идентичен этому соединению, и проявляет по меньшей мере одну активность соединения. Соединение, с которым сравнивается аналог, известно как «исходное» соединение. Вышеупомянутые активности включают в себя без ограничения: активность связывания с другим соединением; ингибирующая активность, например ингибирующая активность ферментов; токсические эффекты; активирующая активность, например активирующая фермент активность. Не требуется, чтобы аналог проявлял такую активность в той же степени, что и исходное соединение. Соединение рассматривается как аналог в контексте настоящей заявки, если оно проявляет релевантную активность до степени по меньшей мере 1% (более предпочтительно по меньшей мере 5%, более предпочтительно по меньшей мере 10%, более предпочтительно по меньшей мере 20%, более предпочтительно по меньшей мере 30%, более предпочтительно по меньшей мере 40% и более предпочтительно по меньшей мере 50%) активности исходного соединения. Таким образом, «аналог аматоксина», как он используется в настоящем документе, относится к соединению, которое структурно связано с любым из следующего: α-аманитин, β-аманитин, γ-аманитин, ε-аманитин, аманин, аманинамид, амануллин и амануллиновая кислота, и которое проявляет по меньшей мере 1% (более предпочтительно по меньшей мере 5%, более предпочтительно по меньшей мере 10%, более предпочтительно по меньшей мере 20%, более предпочтительно по меньшей мере 30%, более предпочтительно по меньшей мере 40% и более предпочтительно по меньшей мере 50%) ингибирующей активности против РНК-полимеразы II млекопитающих по сравнению с по меньшей мере одним из α-аманитина, β-аманитина, γ-аманитина, ε-аманитина, аманина, аманинамида, амануллина и амануллиновой кислоты. «Аналог аматоксина», подходящий для использования в настоящем изобретении, может даже проявлять более высокую ингибирующую активность против РНК-полимеразы II млекопитающих, чем любой из α-аманитина, β-аманитина, γ-аманитина, ε-аманитина, аманина, аманинамида, амануллина или амануллиновой кислоты. Ингибирующая активность может быть измерена путем определения концентрации, при которой происходит 50% ингибирование (значение IC50). Ингибирующая активность против РНК-полимеразы II млекопитающих может быть определена косвенно путем измерения ингибирующей активности в отношении пролиферации клеток.
«Полусинтетический аналог» относится к аналогу, который был получен путем химического синтеза с использованием соединений из природных источников (например, растительных материалов, бактериальных культур, грибных культур или клеточных культур) в качестве исходного материала. Как правило, «полусинтетический аналог» согласно настоящему изобретению синтезируют, используя в качестве исходного материала соединение, выделенное из грибов семейства Amanitaceae. Напротив, «синтетический аналог» относится к аналогу, синтезированному путем так называемого полного синтеза из небольших (как правило, нефтехимических) элементарных звеньев. Как правило, этот полный синтез осуществляют без помощи биологических процессов.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения аматоксин может быть выбран из группы, состоящей из α-аманитина, β-аманитина, аманина, аманинамида и их аналогов, производных и солей.
Функционально аматоксины определяются как пептиды или депсипептиды, которые ингибируют РНК-полимеразу II млекопитающих. Предпочтительными аматоксинами являются те, которые имеют функциональную группу (например, карбоксильную группу, аминогруппу, гидроксигруппу, тиольную группу или группу, улавливающую тиол), которые могут реагировать с линкерными молекулами или фрагментами, связывающими мишень, как определено ниже.
В контексте настоящего изобретения термин «аманитины», в частности, относится к бициклической структуре, которая основана на остатке аспарагиновой кислоты или аспарагина в положении 1, остатке пролина, в частности, остатке гидроксипролина в положении 2, остатке изолейцина, гидроксиизолейцина или дигидроксиизолейцина в положении 3, остатке триптофана или гидрокситриптофана в положении 4, остатках глицина в положениях 5 и 7, остатке изолейцина в положении 6 и остатке цистеина в положении 8, в частности, производного цистеина, которое окисляется до сульфоксида или производного сульфона (нумерацию и репрезентативные примеры аманитинов см. на фиг. 1) и, кроме того, включает в себя все ее химические производные; дополнительно все ее полусинтетические аналоги; дополнительно все ее синтетические аналоги, построенные из элементарных звеньев в соответствии с основной структурой природных соединений (циклические, 8 аминокислот), дополнительно все синтетические или полусинтетические аналоги, содержащие негидроксилированные аминокислоты вместо гидроксилированных аминокислот, дополнительно все синтетические или полусинтетические аналоги, в каждом случае в которых любое такое производное или аналог является функционально активным путем ингибирования РНК-полимеразы II млекопитающих.
Используемый в настоящем документе термин «антитело» относится к молекуле иммуноглобулина, которая специфически связывается с конкретным антигеном или иммунологически реагирует с ним, и включает в себя моноклональные, генно-инженерные и иным образом модифицированные формы антител, включая в себя без ограничения химерные антитела, гуманизированные антитела, гетероконъюгированные антитела (например, би-, три- и четыре-специфические антитела, диатела, триатела и тетратела) и антигенсвязывающие фрагменты антител, включая в себя, например, фрагменты Fab', F(ab')2, Fab, Fv, rIgG и scFv. Если не указано иное, термин «моноклональное антитело» (mAb) предназначен для включения как интактных молекул, так и фрагментов антител (включая в себя, например, фрагменты Fab и F(ab')2), которые способны специфически связываться с целевым белком. Используемые в настоящем документе фрагменты Fab и F(ab')2 относятся к фрагментам антитела, в которых отсутствует фрагмент Fc интактного антитела. Примеры этих фрагментов антител описаны в настоящем документе.
Используемый в настоящем документе термин «моноклональное антитело» относится к антителу, которое получено из одного клона, включая в себя любой эукариотический, прокариотический или фаговый клон, а не к способу, с помощью которого оно получено.
Антитела согласно настоящему изобретению, как правило, являются выделенными или рекомбинантными. Используемый в настоящем документе термин «выделенный» относится к полипептиду, например, антителу, который был отделен и/или извлечен из клетки или клеточной культуры, из которой он был экспрессирован. Таким образом, «выделенное антитело» относится к антителу, которое по существу не содержит других антител, имеющих другую антигенную специфичность. Например, выделенное антитело, которое специфически связывается с CD117, по существу не содержит антител, специфически связывающих антигены, отличные от CD117.
Используемый в настоящем документе термин «антигенсвязывающий фрагмент» относится к фрагменту антитела, которое сохраняет способность специфически связываться с целевым антигеном. Антигенсвязывающая функция антитела может выполняться фрагментами полноразмерного антитела. Фрагмент антитела может представлять собой, например. Fab, F(ab')2, scFv, диатело, триатело, аффитело, нанотело, аптамер или доменное антитело. Примеры связывающих фрагментов, охватываемых термином «антигенсвязывающий фрагмент» антитела, включают в себя без ограничения: (i) фрагмент Fab, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, vh, CL и Сн1; (ii) фрагмент F(ab')2, двухвалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных с помощью дисульфидного мостика в шарнирной области; (iii) фрагмент Fd, состоящий из доменов vh и Сн1; (iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и vh одного плеча антитела, (v) dAb, включая в себя домены vh и VL; (vi) фрагмент dAb, который состоит из домена vh (см., например. Ward et al.. Nature 341:544-546, 1989); (vii) dAb, который состоит из домена vh или VL; (viii) выделенная определяющая комплементарность область (CDR); и (ix) комбинация двух или более (например, двух, трех, четырех, пяти или шести) выделенных CDR, которые необязательно могут быть соединены синтетическим линкером. Кроме того, хотя два домена фрагмента Fv, VL и vh, кодируются отдельными генами, они могут быть соединены с помощью рекомбинантных методов с помощью линкера, который позволяет получить их в виде единой белковой цепи, в которой области vL и vh спариваются с образованием одновалентных молекул (известных как одноцепочечный Fv (scFv); см., например. Bird et al.. Science 242:423-426, 1988 и Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883, 1988). Фрагменты антител могут быть получены с использованием общепринятых методов, известных специалистам в настоящей области техники, и фрагменты могут быть проверены на пригодность таким же образом, как и интактные антитела. Антигенсвязывающие фрагменты могут быть получены методами рекомбинантной ДНК, ферментативным или химическим расщеплением интактных иммуноглобулинов или, в определенных случаях, методами химического синтеза пептидов, известными в настоящей области техники.
Используемый в настоящем документе термин «антитело к CD117» или «антитело, которое связывается с CD117» относится к антителу, которое способно связывать CD117, например CD117 человека, с достаточной аффинностью, так что антитело может быть использовано в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеленного на CD117. Аминокислотные последовательности двух основных изоформ CD117 человека представлены в SEQ ID NO: 145 (изоформа 1) и SEQ ID NO: 146 (изоформа 2). «ADC против CD117» относится к adc, где антитело представляет собой антитело KCD117.
Используемый в настоящем документе термин «антитело к CD45» или «антитело, которое связывается с CD45» относится к антителу, которое способно связывать CD45, например CD45 человека, с достаточной аффинностью, так что антитело может быть использовано в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеленного на CD45. «ADC против CD45» относится к ADC, где антитело представляет собой антитело к CD45.
Используемый в настоящем документе термин «антитело к CD137» или «антитело, которое связывается с CD137» относится к антителу, которое способно связывать CD137, например CD137 человека, с достаточной аффинностью, так что антитело может быть использовано в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеленного на CD137. «ADC против CD137» относится к ADC, где антитело представляет собой антитело к CD137.
Используемый в настоящем документе термин «антитело к CD2» или «антитело, которое связывается с CD2» относится к антителу, которое способно связывать CD2, например CD2 человека, с достаточной аффинностью, так что антитело может быть использовано в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеленного на CD2. «ADC против CD2» относится к ADC, где антитело представляет собой антитело к CD2.
Используемый в настоящем документе термин «антитело к CD5» или «антитело, которое связывается с CD5» относится к антителу, которое способно связывать CD5, например CD5 человека, с достаточной аффинностью, так что антитело может быть использовано в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеленного на CD5. «ADC против CD5» относится к ADC, где антитело представляет собой антитело к CD5.
Используемый в настоящем документе термин «биспецифическое антитело» относится, например, к моноклональному, часто человеческому или гуманизированному антителу, которое способно связывать по меньшей мере два разных антигена. Например, одна из специфичностей связывания может быть направлена на поверхностный антиген гемопоэтических стволовых клеток, CD117 (например, GNNK+ CD117), а другая может специфически связываться с другим поверхностным антигеном гемопоэтических стволовых клеток или другим поверхностным белком клетки, таким как рецептор или субъединица рецептора, участвующая в пути передачи сигнала, который, среди прочего, потенцирует рост клеток.
Используемый в настоящем документе термин «определяющая комплементарность область» (CDR) относится к гипервариабельной области, обнаруженной как в вариабельных доменах легкой цепи, так и в вариабельных доменах тяжелой цепи антитела. Более высококонсервативные части вариабельных доменов называются каркасными областями (FR). Положения аминокислот, которые определяют гипервариабельную область антитела, могут варьироваться в зависимости от контекста и различных определений, известных в настоящей области техники. Некоторые положения в вариабельном домене можно рассматривать как гибридные гипервариабельные положения в том смысле, что эти положения могут считаться находящимися в пределах гипервариабельной области согласно одному набору критериев, в то время как они могут считаться находящимися вне гипервариабельной области согласно другому набору критериев. Одно или несколько из этих положений также можно найти в расширенных гипервариабельных областях. Описанные в настоящем документе антитела могут содержать модификации в этих гибридных гипервариабельных положениях. Каждый из вариабельных доменов нативных тяжелых и легких цепей содержит четыре каркасные области, которые в основном принимают конфигурацию β-складок, соединенных тремя CDR, которые образуют петли, которые соединяют, а в некоторых случаях образуют часть структуры β-складок. CDR в каждой цепи удерживаются вместе в непосредственной близости каркасными областями в порядке FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4 и, вместе с CDR из других цепей антитела, способствуют образованию целевого сайта связывания антител (см. Kabat et al.. Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institute of Health, Bethesda, MD, 1987). Согласно определенным вариантам осуществления нумерация аминокислотных остатков иммуноглобулинов выполняется в соответствии с системой нумерации аминокислотных остатков иммуноглобулинов согласно Kabat с соавт., если не указано иное (хотя может использоваться любая схема нумерации антител, включая в себя без ограничения IMGT и Chothia).
Используемые в настоящем документе термины «проводить кондиционирование» и «кондиционирование» относятся к процессам, с помощью которых пациента готовят к получению трансплантата, например трансплантата, содержащего гемопоэтические стволовые клетки. Такие процедуры способствуют приживлению трансплантата гемопоэтических стволовых клеток (например, как следует из устойчивого увеличения количества жизнеспособных гемопоэтических стволовых клеток в образце крови, выделенном от пациента после процедуры кондиционирования и последующей трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. С помощью описанных в настоящем документе способов пациент может быть подготовлен к терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток путем введения пациенту ADC, способного связывать антиген, экспрессируемый гемопоэтическими стволовыми клетками, такой как CD117 (например, GNNK+ CD117). Введение ADC, способного связывать антиген HSC, пациенту, нуждающемуся в терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток, может способствовать приживлению трансплантата гемопоэтических стволовых клеток, например, путем селективного истощения эндогенных гемопоэтических стволовых клеток, тем самым создавая вакансию, заполняемую трансплантатом экзогенных гемопоэтических стволовых клеток.
Используемый в настоящем документе термин «конъюгат» относится к соединению, образованному химическим связыванием реакционноспособной функциональной группы одной молекулы, такой как антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, с соответственно реакционноспособной функциональной группой другой молекулы, такой как цитотоксин, описанный в настоящем документе. Конъюгаты могут включать в себя линкер между двумя молекулами, связанными друг с другом. Примеры линкеров, которые можно использовать для образования конъюгата, включают в себя пептидсодержащие линкеры, такие как линкеры, которые содержат встречающиеся в природе или не встречающиеся в природе аминокислоты, такие как D-аминокислоты. Линкеры могут быть получены с использованием множества стратегий, описанных в настоящем документе и известных в настоящей области техники. В зависимости от содержащихся в нем реакционноспособных компонентов линкер может быть расщеплен, например, ферментативным гидролизом, фотолизом, гидролизом в кислых условиях, гидролизом в основных условиях, окислением, дисульфидным восстановлением, нуклеофильным расщеплением или металлорганическим расщеплением (см., например, Leriche et al., Bioorg. Med. Chem., 20:571-582, 2012). Примечательно, что термин «конъюгат» (когда он относится к соединению) также обозначается в настоящем документе взаимозаменяемо как «конъюгат лекарственного средства», «конъюгат антитела с лекарственным средством» или «ADC».
Используемый в настоящем документе термин «реакция сочетания» относится к химической реакции, в которой два или более заместителей, подходящих для реакции друг с другом, реагируют с образованием химического фрагмента, который соединяет (например, ковалентно) молекулярные фрагменты, связанные с каждым заместителем. Реакции сочетания включают в себя реакции, в которых реакционноспособный заместитель, связанный с фрагментом, который представляет собой цитотоксин, такой как цитотоксин, известный в настоящей области техники или описанный в настоящем документе, реагирует с подходящим реакционноспособным заместителем, связанным с фрагментом, который является антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, таким как антитело, его антигенсвязывающий фрагмент или специфическое антитело к CD117, которое связывает CD117 (такое как GNNK+ CD117), известное в настоящей области техники или описанное в настоящем документе. Примеры подходящих реакционноспособных заместителей включают в себя пару нуклеофил/электрофил (например, пару тиол/галогеналкил, пару амин/карбонил или пару тиол/α,β-ненасыщенный карбонил, среди прочего), пару диен/диенофил (например, пару азид/алкин, среди прочих) и тому подобное. Реакции сочетания включают в себя без ограничения алкилирование тиола, алкилирование гидроксила, алкилирование амина, конденсацию амина, амидирование, эстерификацию, образование дисульфида, циклоприсоединение (например, [4+2] циклоприсоединение Дильса-Альдера, [3+2] циклоприсоединение Хьюисгена, среди прочего), нуклеофильное ароматическое замещение, электрофильное ароматическое замещение и другие реакционные способы, известных в настоящей области техники или описанных в настоящем документе.
Используемый в настоящем документе термин «CRU (конкурентная репопуляционная единица)» относится к единице измерения долгосрочных прививающихся стволовых клеток, которые могут быть обнаружены после трансплантации in vivo.
Используемый в настоящем документе термин «донор» относится к человеку или животному, из организма которых одна или несколько клеток выделяются перед введением клеток или их потомства реципиенту. Одна или несколько клеток могут представлять собой, например, популяцию гемопоэтических стволовых клеток.
Используемый в настоящем документе термин «диатело» относится к двухвалентному антителу, содержащему две полипептидные цепи, в котором каждая полипептидная цепь включает в себя домены vh и vl, соединенные слишком коротким линкером (например, линкером, состоящим из пяти аминокислот), чтобы позволить произойти внутримолекулярной ассоциации доменов vh и vl на одной и той же пептидной цепи. Эта конфигурация вынуждает каждый домен спариваться с комплементарным доменом на другой полипептидной цепи с образованием гомодимерной структуры. Соответственно, термин «триатело» относится к трехвалентным антителам, содержащим три пептидные цепи, каждая из которых содержит один домен vh и один домен vl, соединенные чрезвычайно коротким линкером (например, линкером, состоящим из 1-2 аминокислот), чтобы позволить произойти внутримолекулярной ассоциации доменов vh и vl в пределах одной и той же пептидной цепи. Чтобы сворачиваться в свои нативные структуры, пептиды, сконфигурированные таким образом, как правило, тримеризируются таким образом, чтобы расположить домены vh и vl соседних пептидных цепей пространственно проксимально друг к другу (см., например, Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-48, 1993).
Используемый в настоящем документе термин «отношение лекарственного средства к антителу» или «DAR» относится к количеству лекарственных средств, например аматоксина, прикрепленных к антителу в конъюгате. DAR ADC может варьироваться от 1 до 8, хотя возможны и более высокие нагрузки в зависимости от количества сайтов связывания на антителе. Согласно некоторым вариантам осуществления конъюгат характеризуется значением DAR, составляющим 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8.
Используемый в настоящем документе термин «эндогенный» описывает вещество, такое как молекула, клетка, ткань или орган (например, гемопоэтическая стволовая клетка или клетка гемопоэтического происхождения, такая как мегакариоцит, тромбоцит, эритроцит, тучная клетка, миелобласт, базофил, нейтрофил, эозинофил, микроглиальная клетка, гранулоцит, моноцит, остеокласт, антигенпрезентирующая клетка, макрофаг, дендритная клетка, клетка - естественный киллер, Т-лимфоцит или В-лимфоцит), которые естественным образом встречаются в конкретном организме, например, человеке-пациенте.
Используемый в настоящем документе термин «потенциал приживления» используется для обозначения способности гемопоэтических стволовых клеток и клеток-предшественников повторно заселять ткань, независимо от того, циркулируют ли такие клетки в естественных условиях или получены путем трансплантации. Термин охватывает все события, связанные с приживлением трансплантата или ведущие к нему, такие как хоминг клеток в ткань и колонизация клеток в пределах представляющей интерес ткани. Эффективность приживления или скорость приживления могут быть оценены или количественно определены с использованием любого клинически приемлемого параметра, известного специалистам в настоящей области техники, и могут включать в себя, например, оценку конкурентных единиц репопуляции (CRU); включение или экспрессию маркера в ткани(ях), в которой(ых) стволовые клетки подверглись хомингу, колонизировались или прижились; или путем оценки прогресса субъекта через прогрессирование заболевания, выживаемости гемопоэтических стволовых клеток и клеток-предшественников или выживаемости реципиента. Приживление также можно определить путем измерения количества лейкоцитов в периферической крови в посттрансплантационный период. Приживление также можно оценить путем измерения восстановления клеток костного мозга донорскими клетками в образце аспирата костного мозга.
Используемый в настоящем документе термин «экзогенный» описывает вещество, такое как молекула, клетка, ткань или орган (например, гемопоэтическая стволовая клетка или клетка гемопоэтического происхождения, такая как мегакариоцит, тромбоцит, эритроцит, тучная клетка, миелобласт, базофил, нейтрофил, эозинофил, микроглиальная клетка, гранулоцит, моноцит, остеокласт, антигенпрезентирующая клетка, макрофаг, дендритная клетка, клетка - естественный киллер, Т-лимфоцит или В-лимфоцит), которые не встречаются в природе в определенном организме, таком как человек-пациент.Экзогенные вещества включают в себя вещества, поступающие из внешнего источника в организм или извлеченные из него культивированные вещества.
Используемые в настоящем документе термины «Fc», «область Fc» и «домен Fc» относятся к части антитела IgG, которая коррелирует с кристаллизующимся фрагментом, полученным путем обработки молекулы IgG папаином. Область Fc содержит С-концевую половину двух тяжелых цепей молекулы IgG, которые связаны дисульфидными связями. Она не обладает антигенсвязывающей активностью, но содержит углеводный фрагмент и сайты связывания для комплемента и рецепторов Fc, включая в себя рецептор FcRn. Область Fc содержит второй константный домен СН2 (например, остатки в положениях EU 231-340 IgG1) и третий константный домен СН3 (например, остатки в положениях EU 341-447 IgG1 человека). Используемый в настоящем документе термин область Fc включает в себя «нижнюю шарнирную область» (например, остатки в положениях EU 233-239 IgGl). Fc может относиться к этой области отдельно или к этой области в контексте антитела, фрагмента антитела или слитого белка Fc. Полиморфизмы наблюдались в ряде положений в доменах Fc, включая в себя без ограничения положения EU 270, 272, 312, 315, 356 и 358, и, таким образом, могут существовать небольшие различия между последовательностями, представленными в настоящей заявке, и последовательностями, известными в настоящей области техники. Таким образом, «домен Fc IgG дикого типа» или «домен Fc IgG WT» относится к любой встречающейся в природе области Fc IgG (т.е. любому аллелю). Последовательности тяжелых цепей человеческого IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 можно найти в ряде баз данных последовательностей, например, в базе данных Uniprot (www.uniprot.org) под регистрационными номерами Р01857 (IGHG1_JHUMAN), Р01859 (IGHG2_JHUMAN), Р01860 (IGHG3_JHUMAN) и Р01861 (IGHG1_HUMAN) соответственно. Пример области Fc «WT» представлен в SEQ ID NO: 122 (который представляет константную область тяжелой цепи, содержащую область Fc).
Используемые в настоящем документе термины «модифицированная область Fc» или «вариантная область Fc» относятся к домену Fc IgG, содержащему одну или несколько аминокислотных замен, делеций, вставок или модификаций, введенных в любое положение в области Fc.
Термины «полноразмерное антитело» и «интактное антитело» используются в настоящем документе взаимозаменяемо для обозначения антитела в его по существу интактной форме, а не фрагмента антитела, как определено в настоящем документе. Согласно одному варианту осуществления описанный в настоящем документе ADC содержит интактное антитело. Таким образом, для антитела IgG интактное антитело содержит две тяжелые цепи, каждая из которых содержит вариабельную область, константную область и область Fc, и две легкие цепи, каждая из которых содержит вариабельную область и константную область. Более конкретно, интактный IgG содержит две легкие цепи, каждая из которых содержит вариабельную область легкой цепи (VL) и константную область легкой цепи (CL), и содержит две тяжелые цепи, каждая из которых содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и три константные области тяжелой цепи (CH1, СН2 и СН3). СН2 и СН3 представляют собой область Fc тяжелой цепи.
Используемый в настоящем документе термин «каркасная область» или «область FW» включает в себя аминокислотные остатки, которые примыкают к CDR антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Остатки области FW могут присутствовать, например, в человеческих антителах, гуманизированных антителах, моноклональных антителах, фрагментах антител, фрагментах Fab, фрагментах одноцепочечных антител, фрагментах scFv, доменах антител и биспецифических антителах, среди прочего.
Используемый в настоящем документе термин «гемопоэтические стволовые клетки» («HSC») относится к незрелым клеткам крови, обладающим способностью к самообновлению и дифференцировке в зрелые клетки крови, содержащие различные линии дифференцировки, включая в себя без ограничения гранулоциты (например, промиелоциты, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы), эритроциты (например, ретикулоциты, эритроциты), тромбоциты (например, мегакариобласты, мегакариоциты, продуцирующие тромбоциты, тромбоциты), моноциты (например, моноциты, макрофаги), дендритные клетки, микроглию, остеокласты и лимфоциты (например, NK-клетки, В-клетки и Т-клетки). Такие клетки могут включать в себя клетки CD34+. Клетки CD34+ представляют собой незрелые клетки, которые экспрессируют поверхностный маркер CD34. Считается, что у человека клетки CD34+ включают в себя субпопуляцию клеток со свойствами стволовых клеток, определенными выше, тогда как у мышей HSC представляют собой CD34-. Кроме того, HSC также относятся HSC с длительной репопуляцией (LT-HSC) и HSC с краткосрочной репопуляцией (ST-HSC). LT-HSC и ST-HSC дифференцируются на основе функционального потенциала и экспрессии маркеров клеточной поверхности. Например, HSC человека представляют собой CD34+, CD38-, CD45RA-, CD90+, CD49F+ и lin- (отрицательные в отношении маркеров зрелой линии дифференцировки, включая в себя CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD10, CD11B, CD19, CD20, CD56, CD235A). У мышей LT-HSC костного мозга представляют собой CD34-, SCA-1+, C-kit+, CD135-, Slamfl/CD150+, CD48- и lin- (отрицательные в отношении маркеров зрелой линии дифференцировки, включая в себя Тег119, CD11b, Grl, CD3, CD4, CD8, В220, IL7ra), тогда как ST-HSC представляют собой CD34+, SCA-1+, C-kit+, CD135-, Slamfl/CD150+ и lin- (отрицательные в отношении маркеров зрелой линии дифференцировки, включая в себя Ter119, CD11b, Gr1, CD3, CD4, CD8, В220, IL7ra). Кроме того, ST-HSC менее неподвижны и более пролиферативны, чем LT-HSC в гомеостатических условиях. Однако LT-HSC обладают большим потенциалом самообновления (т.е. они выживают на протяжении всей взрослой жизни и могут быть серийно трансплантированы посредством последовательных реципиентов), тогда как ST-HSC имеют ограниченное самообновление (т.е. они выживают только в течение ограниченного периода времени и не обладают потенциалом для серийной трансплантации). Любую из этих HSC можно использовать в описанных в настоящем документе способах. ST-HSC являются особенно применимыми, потому что они являются в высокой степени пролиферативными и, таким образом, могут быстрее дать начало дифференцированному потомству.
Используемый в настоящем документе термин «функциональный потенциал гемопоэтических стволовых клеток» относится к функциональным свойствам гемопоэтических стволовых клеток, которые включают в себя следующее: 1) мультипотентность (что относится к способности дифференцироваться в несколько различных линий клеток крови, включая в себя без ограничения гранулоциты (например, промиелоциты, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы), эритроциты (например, ретикулоциты, эритроциты), тромбоциты (например, мегакариобласты, мегакариоциты, продуцирующие тромбоциты, тромбоциты), моноциты (например, моноциты, макрофаги), дендритные клетки, микроглию, остеокласты и лимфоциты (например, NK-клетки, В-клетки и Т-клетки), 2) самообновление (которое относится к способности гемопоэтических стволовых клеток давать дочерние клетки, которые обладают таким же потенциалом, что и материнская клетка, и, кроме того, эта способность может повторяться на протяжении всей жизни человека без истощения) и 3) способность гемопоэтических стволовых клеток или их потомства повторно вводиться реципиенту трансплантата, после чего происходит их хоминг в нишу гемопоэтических стволовых клеток, и они восстанавливают продуктивный и устойчивый гемопоэз.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин «антитело человека» включает в себя антитела, содержащие вариабельные и константные области, происходящие из последовательностей иммуноглобулинов зародышевой линии человека. Антитело человека может включать в себя аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулина зародышевой линии человека (например, мутации, введенные случайным или сайт-специфическим мутагенезом in vitro, или во время реаранжировки генов, или посредством соматической мутации in vivo). Однако используемый в настоящем документе термин «антитело человека» не предназначен для включения антител, в которых последовательности CDR, происходящие из зародышевой линии другого вида млекопитающих, такого как мышь, были привиты к каркасным последовательностям человека. Антитело человека может продуцироваться в клетке человека (например, путем рекомбинантной экспрессии) или животным, не являющимся человеком, или прокариотической или эукариотической клеткой, которая способна экспрессировать функционально реаранжированные гены иммуноглобулина человека (такие как гены тяжелой цепи и/или легкой цепи). Когда антитело человека представляет собой одноцепочечное антитело, оно может включать в себя линкерный пептид, который не обнаруживается в нативных антителах человека. Например, Fv может содержать линкерный пептид, такой как от двух до приблизительно восьми остатков глицина или других аминокислот, который соединяет вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи. Считается, что такие линкерные пептиды имеют человеческое происхождение. Антитела человека можно получить множеством способов, известных в настоящей области техники, включая в себя методы фагового дисплея с использованием библиотек антител, происходящих из последовательностей иммуноглобулинов человека. Антитела человека также могут быть получены с использованием трансгенных мышей, которые неспособны экспрессировать функциональные эндогенные иммуноглобулины, но которые могут экспрессировать гены иммуноглобулинов человека (см., например, публикации РСТ №WO 1998/24893; WO 1992/01047; WO 1996/34096; WO 1996/33735; патенты США №№5413923; 5625126; 5633425; 5569825; 5661016; 5545806; 5814318; 5885793; 5916771 и 5939598).
«Гуманизированное» антитело относится к антителу, которое содержит минимальные последовательности, происходящие из не относящегося к человеку иммуноглобулина. Таким образом, «гуманизированные» формы не относящихся к человеку (например, мышиных) антител представляют собой химерные антитела, которые содержат минимальную последовательность, происходящую из не относящегося к человеку антитела. Все или по существу все области FW также могут представлять собой области из последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело может также содержать по меньшей мере часть константной области иммуноглобулина (Fc), как правило, часть консенсусной последовательности иммуноглобулина человека. Способы гуманизации антител известны в настоящей области техники и описаны, например, в PJechmann et al., Nature 332:323-7, 1988; патентах США №№5530101; 5585089; 5693761; 5693762; и 6180370.
Используемый в настоящем документе термин «антителоподобный белок» относится к белку, который был сконструирован (например, путем мутагенеза петель Ig) для специфического связывания с целевой молекулой. Как правило, такой антителоподобный белок содержит по меньшей мере одну вариабельную пептидную петлю, прикрепленную на обоих концах к белковому каркасу. Это двойное структурное ограничение значительно увеличивает аффинность связывания антителоподобного белка до уровней, сравнимых с уровнем аффинности связывания антитела. Длина вариабельной пептидной петли, как правило, составляет от 10 до 20 аминокислот. Белком каркаса может являться любой белок, обладающий хорошими свойствами растворимости. Предпочтительно белок каркаса представляет собой небольшой глобулярный белок. Антителоподобные белки включают в себя без ограничения аффитела, антикалины и белки с сконструированными анкириновыми повторами (Binz etal., 2005). Антителоподобные белки могут быть получены из больших библиотек мутантов, например путем пэннинга из больших библиотек фаговых дисплеев и могут быть выделены по аналогии с обычными антителами. Кроме того, антителоподобные связывающие белки могут быть получены комбинаторным мутагенезом экспонированных на поверхности остатков в глобулярных белках.
Используемый в настоящем документе термин «Fab» относится к фрагменту IgG, содержащему антигенсвязывающую область, причем указанный фрагмент состоит из одного константного и одного вариабельного домена от каждой тяжелой и легкой цепи антитела.
Используемый в настоящем документе термин «F(ab)2» относится к фрагменту IgG, состоящему из двух фрагментов Fab, связанных друг с другом дисульфидными связями.
Используемый в настоящем документе термин «scFv» относится к одноцепочечному вариабельному фрагменту, представляющему собой слияние вариабельных областей тяжелой и легкой цепей иммуноглобулинов, связанных вместе коротким линкером, как правило, содержащим остатки серина (S) и/или глицина (G). Эта химерная молекула сохраняет специфичность исходного иммуноглобулина, несмотря на удаление константных областей и введение линкерного пептида.
Согласно одному аспекту настоящего изобретения настоящее изобретение относится к указанному конъюгату или фармацевтической композиции, как описано, для применения при лечении рака.
Согласно одному аспекту настоящего изобретения настоящее изобретение относится к указанному конъюгату или фармацевтической композиции, как описано, для применения при лечении злокачественных новообразований, связанных с В-лимфоцитами, или аутоиммунных заболеваний, опосредованных В-клетками, в частности для применения при лечении следующего: неходжкинская лимфома, фолликулярная лимфома, диффузная крупноклеточная неходжкинская лимфома, хронический лимфолейкоз, ревматоидный артрит, гранулематоз с полиангиитом и микроскопический полиангиит и вульгарная пузырчатка.
В настоящем документе пациенты, которые «нуждаются» в трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, включают в себя пациентов, у которых обнаружен дефект или дефицит одного или нескольких типов клеток крови, а также пациентов, страдающих нарушением со стороны стволовых клеток, аутоиммунным заболеванием, раком или другой патологией, описанной в настоящем документе. Гематопоэтические стволовые клетки, как правило, проявляются следующее: 1) мультипотентность и, таким образом, могут дифференцироваться в несколько различных линий клеток крови, включая в себя без ограничения гранулоциты (например, промиелоциты, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы), эритроциты (например, ретикулоциты, эритроциты), тромбоциты (например, мегакариобласты, мегакариоциты, продуцирующие тромбоциты, тромбоциты), моноциты (например, моноциты, макрофаги), дендритные клетки, микроглию, остеокласты и лимфоциты (например, NK-клетки, В-клетки и Т-клетки), 2) самообновление, и, таким образом, могут давать дочерние клетки, которые обладают таким же потенциалом, что и материнская клетка, и 3) способность повторно вводиться реципиенту трансплантата, после чего происходит их хоминг в нишу гемопоэтических стволовых клеток, и они восстанавливают продуктивный и устойчивый гемопоэз. Таким образом, гемопоэтические стволовые клетки можно вводить пациенту с дефектом или дефицитом одного или нескольких типов клеток гемопоэтической линии дифференцировки для воссоздания дефектной или недостаточной популяции клеток in vivo. Например, пациент может страдать от рака, и дефицит может быть вызван введением химиотерапевтического агента или другого лекарственного средства, которое селективно или неспецифично истощает популяцию раковых клеток. Дополнительно или альтернативно, пациент может страдать гемоглобинопатией (например, незлокачественной гемоглобинопатией), такой как серповидноклеточная анемия, талассемия, анемия Фанкони, апластическая анемия и синдром Вискотта-Олдрича. Субъект может представлять собой субъекта, страдающего тяжелым комбинированным иммунодефицитом аденозиндезаминазы (ADA SCID), ВИЧ/СПИД, метахроматической лейкодистрофией, анемией Даймонда-Блэкфана и синдромом Швахмана-Даймонда. Субъект может иметь или может быть поражен наследственным заболеванием крови (например, серповидноклеточной анемией) или аутоиммунным заболеванием. Дополнительно или альтернативно, субъект может характеризоваться наличием или может быть поражен злокачественным новообразованием, таким как нейробластома или гематологический рак. Например, у субъекта может быть лейкоз, лимфома или миелома. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект страдает острым миелоидным лейкозом, острым лимфоидным лейкозом, хроническим миелоидным лейкозом, хроническим лимфоидным лейкозом, множественной миеломой, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомой или неходжкинской лимфомой. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием миелодиспластического синдрома. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием аутоиммунного заболевания, такого как склеродермия, рассеянный склероз, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, диабет 1 типа или другая аутоиммунная патология, описанная в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект нуждается в терапии с помощью химерных антигенных рецепторов Т-клеток (CART). Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием или иным образом поражен метаболическим нарушением накопления. Субъект может страдать или может быть иным образом поражен метаболическим расстройством, выбранным из группы, состоящей из болезней накопления гликогена, мукополисахаридозов, болезни Гоше, болезни Гурлера, сфинголипидозов, метахроматической лейкодистрофии или любых других заболеваний или нарушений, которые могут получить благоприятный эффект от описанных в настоящем документе методов лечения и терапии, и включая в себя без ограничения тяжелый комбинированный иммунодефицит, синдром Вискотта-Олдрича, гипериммуноглобулин М-синдром (IgM), болезнь Чедиака-Хигаши, наследственный лимфогистиоцитоз, остеопетроз, незавершенный остеогенез, болезни накопления, большую талассемию, серповидно-клеточную анемию, системный склероз, системную красную волчанку, рассеянный склероз, ювенильный ревматоидный артрит и те заболевания или нарушения, описанные в "Bone Marrow Transplantation for Non-Malignant Disease," ASH Education Book, 1:319-338 (2000), раскрытие которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку этот документ относится к патологиям, которые можно лечить путем введения терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток. Дополнительно или альтернативно, пациент, «нуждающийся» в трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, может представлять собой пациента, который страдает или не страдает одной из вышеупомянутых патологий, но тем не менее демонстрирует пониженный уровень (например, по сравнению с таковым у здорового в других отношениях субъекта) одного или нескольких типов эндогенных клеток в пределах гемопоэтической линии дифференцировки, таких как мегакариоциты, тромбоциты, эритроциты, тучные клетки, миелобласты, базофилы, нейтрофилы, эозинофилы, микроглия, гранулоциты, моноциты, остеокласты, антигенпрезентирующие клетки, макрофаги, дендритные клетки, клетки - естественные киллеры, Т-лимфоциты и В-лимфоциты. Специалист в настоящей области техники может легко определить, снижен ли у пациента уровень одного или нескольких из вышеуказанных типов клеток или другого типа клеток крови по сравнению с в остальном здоровым субъектом, например, с помощью методов проточной цитометрии и активируемой флуоресценцией сортировки (FACS), среди других процедур, известных в настоящей области техники.
Используемый в настоящем документе термин «нейтральное антитело» относится к антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые не способны в значительной степени нейтрализовать, блокировать, ингибировать, отменять, снижать или препятствовать активности конкретной или указанной мишени (например, CD117), включая в себя связывание рецепторов слигандами или взаимодействия ферментов с субстратами. Согласно одному варианту осуществления нейтральное антитело к CD117 или его фрагмент представляет собой антитело к CD117, которое по существу не ингибирует SCF-зависимую пролиферацию клеток и перекрестно не блокирует связывание SCF с CD117. Примером нейтрального антитела является Ab67 (или антитело, содержащее области связывания Ab67). Напротив, «антагонистическое» антитело к CD117 ингибирует SCF-зависимую пролиферацию и способно перекрестно блокировать связывание SCF с CD117. Примером антагонистического антитела является Ab55 (или антитело, содержащее области связывания Ab55).
Используемый в настоящем документе термин «реципиент» относится к пациенту, который получает трансплантат, такой как трансплантат, содержащий популяцию гемопоэтических стволовых клеток. Трансплантированные клетки, вводимые реципиенту, могут являться, например, аутологичными, сингенными или аллогенными клетками.
Используемый в настоящем документе термин «образец» относится к образцу (например, крови, компоненту крови (например, сыворотке или плазме), моче, слюне, амниотической жидкости, спинномозговой жидкости, ткани (например, плацентарной или дермальной), жидкости поджелудочной железы, образцу ворсинок хориона и клеткам), взятому у субъекта.
Используемый в настоящем документе термин «scFv» относится к одноцепочечному Fv-антителу, в котором вариабельные домены тяжелой цепи и легкой цепи антитела соединены с образованием одной цепи. Фрагменты scFv содержат одну полипептидную цепь, которая включает в себя вариабельную область легкой цепи (VL) антитела (например, CDR-L1, CDR-L2 и/или CDR-L3) и вариабельную область тяжелой цепи антитела (VH) (например, CDR-H1, CDR-H2 и/или CDR-H3), разделенные линкером. Линкер, который соединяет области VL и VH фрагмента scFv, может являться пептидным линкером, состоящим из протеиногенных аминокислот. Альтернативные линкеры можно использовать для увеличения устойчивости фрагмента scFv к протеолитическому разложению (например, линкеры, содержащие D-аминокислоты), чтобы повысить растворимость фрагмента scFv (например, гидрофильные линкеры, такие как полиэтиленгликоль-содержащие линкеры или полипептиды, содержащие повторяющиеся остатки глицина и серина), для улучшения биофизической стабильности молекулы (например, линкер, содержащий остатки цистеина, которые образуют внутримолекулярные или межмолекулярные дисульфидные связи), или для ослабления иммуногенности фрагмента scFv (например, линкеры, содержащие сайты гликозилирования). Специалисту в настоящей области техники также будет понятно, что вариабельные области молекул scFv, описанных в настоящем документе, могут быть модифицированы таким образом, чтобы они отличались по аминокислотной последовательности от молекулы антитела, из которой они были получены. Например, нуклеотидные или аминокислотные замены, приводящие к консервативным заменам или изменениям в аминокислотных остатках (например, в остатках CDR и/или каркасной области), могут быть выполнены, чтобы сохранить или усилить способность scFv связываться с антигеном, распознаваемым посредством соответствующего антитела.
Используемые в настоящем документе термины «специфическое связывание» или «специфически связывающее» относятся к способности антитела распознавать и связываться с конкретной структурой белка (эпитопом), а не с белками в целом. Если антитело является специфическим по отношению к эпитопу «А», присутствие молекулы, содержащей эпитоп А (или свободного немеченого А), в реакционной среде, содержащей меченный «А» и антитело, снизит количество меченого А, связанного с антителом. Например, антитело «специфически связывается» с мишенью, если антитело, когда оно помечено, может быть выведено из конкуренции с его мишенью соответствующим немеченым антителом. Согласно одному варианту осуществления антитело специфически связывается с мишенью, например, CD117, CD45, CD2, CD5, CD137, CD134 или CD252, если антитело характеризуется значением KD для мишени, составляющее по меньшей мере приблизительно 10-4 М, 10-5 М, 10-6 М, 10-7 М, 10-8 М, 10-9 М, 10-10 М, 10-11 М, 10-12 М или меньше (меньше означает число, которое меньше 10-12, например 10-13). Согласно одному варианту осуществления используемый в настоящем документе термин «специфическое связывание с CD117» или «специфически связывается с CD117» относится к антителу, которое связывается с CD117 и имеет константу диссоциации (KD), составляющую 1,0 × 107 М или менее, что определяется поверхностным плазмонным резонансом. Согласно одному варианту осуществления KD (М) определяют согласно стандартной интерферометрии биослоя (BLI). Согласно одному варианту осуществления Koff (1/с) определяют согласно стандартной интерферометрии биослоя (BLI). Однако следует понимать, что антитело может быть способно специфически связываться с двумя или более антигенами, которые связаны друг с другом последовательно. Например, согласно одному варианту осуществления антитело может специфически связываться с человеческими и не относящимися к человеку (например, мыши или не относящихся к человеку приматов) ортологами CD117, CD45, CD2, CD5, CD137, CD134 или CD252.
Используемые в настоящем документе термины «субъект» и «пациент» относятся к организму, такому как человек, который получает лечение от конкретного заболевания или состояния, как описано в настоящем документе. Например, пациент, такой как пациент-человек, может получать лечение до терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток, чтобы способствовать приживлению экзогенных гемопоэтических стволовых клеток.
Используемая в настоящем документе фраза «по существу выводится из крови» относится к моменту времени после введения терапевтического агента, например ADC, содержащего аматоксин, пациенту, когда концентрация терапевтического агента в образце крови, выделенном из пациент такова, что терапевтический агент не может быть обнаружен обычными средствами (например, такова, что терапевтический агент не обнаруживается выше шумового порога устройства или анализа, используемого для обнаружения терапевтического агента). Для обнаружения антител или фрагментов антител можно использовать различные методы, известные в настоящей области техники, такие как анализы обнаружения на основе ELISA, известные в настоящей области техники или описанные в настоящем документе. Дополнительные анализы, которые можно использовать для обнаружения антител или фрагментов антител, включают в себя, среди прочего, методы иммунопреципитации и иммуноблоттинг, известные в настоящей области техники.
Используемая в настоящем документе фраза «нарушение со стороны стволовых клеток» в широком смысле относится к любому заболеванию, нарушению или состоянию, которое можно лечить или вылечить путем кондиционирования тканей-мишеней субъекта и/или путем удаления популяции эндогенных стволовых клеток в ткани-мишени (например, удаление эндогенных гемопоэтических стволовых клеток или популяции клеток-предшественников из ткани костного мозга субъекта) и/или путем приживления или трансплантации стволовых клеток в ткани-мишени субъекта. Например, было показано, что диабет I типа излечивается трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток и может получить благоприятный эффект от кондиционирования в соответствии с описанными в настоящем документе композициями и способами. Дополнительные нарушения, которые можно лечить с использованием описанных в настоящем документе композиций и способов, включают в себя без ограничения серповидно-клеточную анемию, талассемии, анемию Фанкони, апластическую анемию, синдром Вискотта-Олдрича, ADA SCID, ВИЧ/СПИД, метахроматическую лейкодистрофию, анемию Даймонда-Блэкфана, и синдром Швахмана-Даймонда. Дополнительные заболевания, которые можно лечить с использованием описанных в настоящем документе способов кондиционирования пациента и/или трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, включают в себя наследственные заболевания крови (например, серповидно-клеточную анемию) и аутоиммунные нарушения, такие как склеродермия, рассеянный склероз, неспецифический язвенный колит и болезнь Крона. Дополнительные заболевания, которые можно лечить с использованием описанных в настоящем документе способов кондиционирования и/или трансплантации, включают в себя злокачественные новообразования, такие как нейробластома, или гемобластоз, такой как лейкоз, лимфома и миелома.
Например, рак может представлять собой острый миелоидный лейкоз, острый лимфоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, хронический лимфоидный лейкоз, множественную миелому, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому или неходжкинскую лимфому. Дополнительные заболевания, поддающиеся лечению с использованием описанных в настоящем документе способов кондиционирования и/или трансплантации, включают в себя миелодиспластический синдром. Согласно некоторым вариантам осуществления субъект характеризуется наличием или иным образом поражен нарушением метаболического накопления. Например, субъект может страдать или может быть иным образом поражен метаболическим нарушением, выбранным из группы, состоящей из болезней накопления гликогена, мукополисахаридозов, болезни Гоше, болезни Гурлера, сфинголипидозов, метахроматической лейкодистрофии или любых других заболеваний или нарушений, которые могут получить благоприятный эффект от методов лечения и терапии, раскрытых в настоящем документе, и включая в себя без ограничения тяжелый комбинированный иммунодефицит, синдром Вискотта-Олдрича, гипериммуноглобулин М-синдром (IgM), болезнь Чедиака-Хигаши, наследственный лимфогистиоцитоз, остеопетроз, незавершенный остеогенез, болезни накопления, большую талассемию, серповидно-клеточную анемию, системный склероз, системную красную волчанку, рассеянный склероз, ювенильный ревматоидный артрит и те заболевания или нарушения, которые описаны в "Bone Marrow Transplantation for Non-Malignant Disease," ASH Education Book, 1:319-338 (2000), описание которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к патологиям, которые можно лечить с помощью трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.
Используемый в настоящем документе термин «трансфекция» относится к любому из широкого разнообразия методов, обычно используемых для введения экзогенной ДНК в прокариотическую или эукариотическую клетку-хозяина, таких как электропорация, липофекция, осаждение фосфатом кальция, трансфекция DEAE-декстраном и т.п.
Используемые в настоящем документе термины «лечить» или «лечение» относятся к уменьшению тяжести и/или частоты возникновения симптомов заболевания, устранению симптомов заболевания и/или основной причины указанных симптомов, снижению частоты или вероятности симптомов заболевания и/или их основной причины, а также улучшению или устранению ущерба, прямо или косвенно причиненного заболеванием. Благоприятные или желаемые клинические результаты включают в себя без ограничения стимулирование приживления экзогенных гематопоэтических клеток у пациента после терапии кондиционирующими антителами, как описано в настоящем документе, и последующей терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток. Дополнительные положительные результаты включают в себя увеличение количества клеток или относительной концентрации гемопоэтических стволовых клеток у пациента, нуждающегося в трансплантации гемопоэтических стволовых клеток после кондиционирующей терапии и последующего введения пациенту трансплантата экзогенных гемопоэтических стволовых клеток. Положительные результаты терапии, описанной в настоящем документе, могут также включать в себя увеличение количества клеток или относительной концентрации одной или нескольких клеток гемопоэтического происхождения, таких как мегакариоцит, тромбоцит, эритроцит, тучная клетка, миелобласт, базофил, нейтрофил, эозинофил, микроглиальная клетка, гранулоцит, моноцит, остеокласт, антигенпрезентирующая клетка, макрофаг, дендритная клетка, клетка - естественный киллер, Т-лимфоцит или В-лимфоцит после кондиционирующей терапии и последующей терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток. Дополнительные положительные результаты могут включать в себя уменьшение количества болезнетворной популяции клеток, такой как популяция раковых клеток (например, лейкемических клеток CD117+) или аутоиммунных клеток (например, аутоиммунных лимфоцитов CD117+, таких как Т-лимфоциты CD117+, которые экспрессируют рецептор Т-клеток, который перекрестно реагирует с аутоантигеном). Поскольку способы согласно настоящему изобретению направлены на предотвращение нарушений, понятно, что термин «предотвращать» не требует полного предотвращения болезненного состояния. Скорее, используемый в настоящем документе термин «профилактика» относится к способности квалифицированного специалиста идентифицировать популяцию, восприимчивую к нарушениям, так чтобы введение соединений согласно настоящему изобретению могло произойти до начала заболевания. Этот термин не означает, что болезненное состояние полностью избегается.
Используемые в настоящем документе термины «вариант» и «производное» используются взаимозаменяемо и относятся к встречающимся в природе, синтетическим и полусинтетическим аналогам соединения, пептида, белка или другого вещества, описанного в настоящем документе. Вариант или производное соединения, пептида, белка или другого вещества, описанного в настоящем документе, может сохранять или улучшать биологическую активность исходного материала.
Используемый в настоящем документе термин «вектор» включает в себя вектор нуклеиновой кислоты, такой как плазмида, вектор ДНК, плазмида, вектор РНК, вирус или другой подходящий репликон. Описанные в настоящем документе экспрессионные векторы могут содержать полинуклеотидную последовательность, а также, например, дополнительные элементы последовательности, используемые для экспрессии белков и/или интеграции этих полинуклеотидных последовательностей в геном клетки млекопитающего. Некоторые векторы, которые можно использовать для экспрессии антител и фрагментов антител согласно настоящему изобретению, включают в себя плазмиды, которые содержат регуляторные последовательности, такие как промоторные и энхансерные области, которые управляют транскрипцией генов. Другие применимые векторы для экспрессии антител и фрагментов антител содержат полинуклеотидные последовательности, которые увеличивают скорость трансляции этих генов или улучшают стабильность или ядерный экспорт мРНК, которая является результатом транскрипции гена. Эти элементы последовательности могут включать в себя, например, 5' и 3' нетранслируемые области и сайт сигнала полиаденилирования, чтобы управлять эффективной транскрипцией гена, переносимого в экспрессионном векторе. Описанные в настоящем документе экспрессионные векторы могут также содержать полинуклеотид, кодирующий маркер для отбора клеток, которые содержат такой вектор. Примеры подходящего маркера включают в себя гены, кодирующие устойчивость к антибиотикам, таким как ампициллин, хлорамфеникол, канамицин и ноурсетрицин.
Конъюгаты антитела с лекарственным средством (ADC)
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, как описано в настоящем документе, могут быть конъюгированы (связаны) с цитотоксической молекулой (т.е. цитотоксином), таким образом образуя конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC). Используемые в настоящем документе термины «цитотоксин», «цитотоксический фрагмент» и «лекарственное средство» используются взаимозаменяемо.
В частности, описанные в настоящем документе ADC включают в себя антитело (включая в себя его антигенсвязывающий фрагмент), конъюгированное с аматоксином, например аматоксином, приведенным в формуле (V), где цитотоксический фрагмент, когда он не конъюгирован с антителом, обладает цитотоксическим или цитостатическим эффектом. Согласно различным вариантам осуществления цитотоксический фрагмент проявляет пониженную цитотоксичность или ее отсутствие, когда он связан в конъюгате, но возобновляет цитотоксичность после отщепления от линкера. Согласно различным вариантам осуществления цитотоксический фрагмент сохраняет цитотоксичность без отщепления от линкера. Согласно некоторым вариантам осуществления цитотоксическая молекула конъюгирована с антителом, интернализирующим клетку, или его антигенсвязывающим фрагментом, как раскрыто в настоящем документе, так что после клеточного поглощения антитела или его фрагмента цитотоксин может достигать своей внутриклеточной мишени и, например, опосредуют гибель гемопоэтических клеток. Следовательно, ADC согласно настоящему раскрытию могут характеризоваться общей формулой
Ab-(Z-L-Cy)n,
где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (Ab) конъюгированы (ковалентно связаны) с линкером (L) через химический фрагмент (Z) с цитотоксическим фрагментом (Су).
Соответственно, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент можно конъюгировать с рядом фрагментов лекарственного средства, как указано целым числом n, которое представляет среднее количество цитотоксинов на антитело, которое может варьироваться, например, от приблизительно 1 до приблизительно 20. Любое количество цитотоксинов могут быть конъюгированы с антителом, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8. Согласно некоторым вариантам осуществления n составляет от 1 до 4. Согласно некоторым вариантам осуществления n равно 1. Среднее число фрагментов лекарственного средства на антитело в препаратах ADC из реакций конъюгации можно охарактеризовать общепринятыми методами, такими как масс-спектроскопия, анализ ELISA и ВЭЖХ. Также можно определить количественное распределение ADC по п. В некоторых случаях разделение, очистка и определение характеристик гомогенного ADC, где n представляет собой определенное значение из ADC с другими нагрузками лекарственного средства, могут быть достигнуты с помощью таких средств, как ВЭЖХ с обращенной фазой или электрофорез.
Для некоторых конъюгатов антитела с лекарственным средством n может быть ограничено количеством сайтов прикрепления на антителе. Например, если прикрепление представляет собой тиол цистеина, антитело может содержать только одну или несколько тиольных групп цистеина или может иметь только одну или несколько достаточно реакционноспособных тиольных групп, через которые может быть прикреплен линкер. Как правило, антитела не содержат много свободных и реакционноспособных тиольных групп цистеина, которые могут быть связаны с фрагментом лекарственного средства; в первую очередь, остатки тиола цистеина в антителах существуют как дисульфидные мостики. Согласно определенным вариантам осуществления антитело можно восстановить с помощью восстанавливающего агента, такого как дитиотреитол (DTT) или трикарбонилэтилфосфин (ТСЕР), в условиях частичного или полного восстановления для образования реакционноспособных тиольных групп цистеина. Согласно определенным вариантам осуществления более высокая нагрузка лекарственным средством, например n>5, может вызывать агрегацию, нерастворимость, токсичность или потерю клеточной проницаемости некоторых конъюгатов антитела с лекарственным средством.
Согласно определенным вариантам осуществления меньшее, чем теоретический максимум, фрагментов лекарственного средства конъюгируется с антителом во время реакции конъюгации. Антитело может содержать, например, остатки лизина, которые не реагируют с промежуточным соединением лекарственное средство-линкер или линкерным реагентом, как обсуждается ниже. Только наиболее реакционноспособные лизиновые группы могут реагировать с амино-реактивным линкерным реагентом. Согласно определенным вариантам осуществления антитело подвергают денатурирующим условиям для выявления реактивных нуклеофильных групп, таких как лизин или цистеин.
Нагрузку (соотношение лекарственное средство/антитело) ADC можно контролировать различными способами, например: (i) ограничение молярного избытка промежуточного соединения лекарственное средство-линкер или линкерного реагента относительно антитела, (ii) ограничение времени реакции конъюгации или температуры, (iii) частичные или ограничивающие восстановительные условия для модификации тиола цистеина, (iv) конструирование с помощью рекомбинантных методов аминокислотной последовательности антитела таким образом, чтобы количество и положение остатков цистеина изменялось для контроля количества и/или положения прикреплений линкера-лекарственного средства.
Цитотоксины
Цитотоксин описанных в настоящем документе конъюгатов антитела с лекарственным средством представляет собой аматоксин или его производное.
Аматоксины являются мощными и селективными ингибиторами РНК-полимеразы II и, таким образом, также ингибируют транскрипцию и биосинтез белка пораженных клеток. Используемый в настоящем документе термин «аматоксин» относится к представителю семейства пептидов аматоксинов, продуцируемых грибами Amanita phalloides, или его варианту или производному, например его варианту или производному, способному ингибировать активность РНК-полимеразы II. Аматоксины представляют собой жесткие бициклические октапептиды, характеризующиеся основной последовательностью Ile-Trp-Gly-Ile-Gly-Cys-Asn (или Asp)-Pro, сшитой за счет прикрепления серы Cys к положению 2 индольного кольца Trp, образуя триптатионин. В зависимости от конкретного аматоксина, определенные аминокислотные заместители меняются посттрансляционной модификацией (например, Pro на Hyp; Ile на DHIle; и Trp на 5-ОН Trp).
Аматоксины могут быть выделены из различных видов грибов (например, Amanita phalloides, Galerina marginata, Lepiota brunneo-incarnata) или могут быть получены полусинтетическим или синтетическим путем. Различные виды грибов содержат разное количество разных представителей семейства аматоксинов. Представитель этого семейства, α-аманитин, как известно, является чрезвычайно мощным ингибитором эукариотической РНК-полимеразы II и, в меньшей степени, РНК-полимеразы III, тем самым подавляя транскрипцию и биосинтез белка. Wieland, Int. J. Pept. Protein Res. 1983, 22(3):257-276.
Структуры различных встречающихся в природе аматоксинов представлены формулой (III) и в прилагаемой таблице 1 и раскрыты, например, в Zanotti etal., Int. J. Пептид Protein Res. 30, 1987, 450-459, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.
Антитела или их антиген связывающие фрагменты., которые распознают и связываются с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности человеческой стволовой клетки или Т-клетки, могут быть конъюгированы с аматоксином, таким как α-аманитин или его производное, как описано в, например, патентах США №№9233173 и 9399681 и публикациях заявок на выдачу патента США №№2016/0089450, 2016/0002298, 2015/0218220, 2014/0294865, причем раскрытие каждого из документов включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно имеет отношение, например, с аматоксинами, такими как α-аманитин, а также с ковалентными линкерами, которые можно использовать для ковалентной конъюгации. В настоящем документе описаны иллюстративные способы конъюгации аматоксина и линкеры, применимые для таких способов. Примеры содержащих линкер аматоксинов, применимых для конъюгации с антителом или антиген связывающим фрагментом, в соответствии с композициями и способами, также описаны в настоящем документе.
Используемый в настоящем документе термин «производное аматоксина» или «производное аманитина» относится к аматоксину, который был химически модифицирован в одном или нескольких положениях относительно встречающегося в природе аматоксина, такого как α-аманитин, β-аманитин, γ-аманитин, ε-аманитин, аманин, аманинамид, амануллин, амануллиновая кислота или проамануллин. В каждом случае производное может быть получено путем химической модификации встречающегося в природе соединения («полусинтетическое») или может быть получено из полностью синтетического источника. Пути синтеза различных производных аматоксина раскрыты, например, в патенте США №9676702 и в Perrin et al., J. Am. Chem. Soc. 2018, 140, p. 6513-6517, каждый из которых полностью включен в настоящий документ посредством ссылки в отношении синтетических способов получения и дериватизации аматоксинов.
Согласно некоторым вариантам осуществления аматоксин или его производное представлены формулой (V):
или ее энантиомером или диастереомером.
Согласно некоторым вариантам осуществления Q представляет собой S. Согласно некоторым вариантам осуществления Q представляет собой сульфоксидную группу.
Согласно одному варианту осуществления аматоксин или его производное представлены формулой (Va):
Согласно некоторым вариантам осуществления Q представляет собой S. Согласно некоторым вариантам осуществления Q представляет собой сульфоксидную группу.
Согласно этому конкретному варианту осуществления аматоксин или его производное представлены формулой (Vb):
Согласно некоторым вариантам осуществления Q представляет собой S. Согласно некоторым вариантам осуществления Q представляет собой сульфоксидную группу.
Дополнительные аматоксины, которые можно использовать для конъюгации с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, в соответствии с описанными в настоящем документе композициями и способами, описаны, например, в WO 2016/142049; WO 2016/071856; WO 2017/149077; WO 2018/115466; и WO 2017/046658, описания которых полностью включены в настоящий документ посредством ссылки.
Линкеры
Используемый в настоящем документе термин «линкер» означает двухвалентный химический фрагмент, содержащий ковалентную связь или цепочку атомов, которая ковалентно присоединяет антитело или его фрагмент (Ab) к аматоксину, как описано в настоящем документе, например аматоксину формул (IV), (IVa), (IVb), (V), (Va) или (Vb), с образованием конъюгата антитела с лекарственным средством (ADC).
Ковалентное присоединение антитела и аматоксина требует, чтобы линкер имел две реакционноспособные функциональные группы, т.е. двухвалентность в реактивном смысле. Двухвалентные линкерные реагенты, которые можно использовать для присоединения двух или более функциональных или биологически активных фрагментов, таких как пептиды, нуклеиновые кислоты, лекарственные средства, токсины, антитела, гаптены и репортерные группы, являются известными, и описаны способы получения их конъюгатов (Hermanson, G.Т. (1996) Bioconjugate Techniques; Academic Press: New York, p. 234-242).
Соответственно, линкеры согласно настоящему изобретению характеризуются двумя реакционноспособными концами, один для конъюгации с антителом, а другой для конъюгации с аматоксином. Реакционноспособный конец линкера для конъюгирования с антителом (реакционноспособный фрагмент, определяемый в настоящем документе как Z'), как правило, представляет собой химический фрагмент, который способен конъюгировать с антителом, например, через цистеиновую тиольную или лизиновую аминогруппу на антителе, и поэтому, как правило, представляет собой следующее: группа, реагирующая с тиолом, такая как акцептор Михаэля (как в малеимиде), уходящая группа, такая как хлор, бром, йод или R-сульфанильная группа, или группа, реагирующая с амином, такая как карбоксильная группа. Конъюгирование линкера с антителом более полно описано в настоящем документе ниже.
Реакционноспособный конец линкера для конъюгирования с аматоксином, как правило, представляет собой химический фрагмент, который способен конъюгировать с аматоксином посредством образования связи с реакционноспособным заместителем в молекуле аматоксина. Неограничивающие примеры включают в себя, например, образование амидной связи с основным амином или карбоксильной группой на аматоксине через карбоксильную или основную аминогруппу на линкере, соответственно, или образование простого эфира или тому подобного путем алкилирования группы ОН на аматоксине, например, через уходящую группу на линкере.
Когда термин «линкер» используется для описания линкера в конъюгированной форме, один или оба реакционноспособных конца будут отсутствовать (например, реакционноспособный фрагмент Z', преобразованный в химический фрагмент Z, как описано в настоящем документе ниже) или являться неполным (например, являясь только карбонилом карбоновой кислоты) из-за образования связей между линкером и/или аматоксином, а также между линкером и/или антителом или его антигенсвязывающим фрагментом. Такие реакции конъюгации дополнительно описаны в настоящем документе ниже.
Для конъюгирования описанных антител, антигенсвязывающих фрагментов и лигандов с цитотоксической молекулой можно использовать различные линкеры. Как правило, линкеры, подходящие для настоящего раскрытия, могут являться по существу стабильными в кровотоке, но позволяют высвобождать аматоксин внутри или в непосредственной близости от целевых клеток. Согласно некоторым вариантам осуществления определенные линкеры, подходящие для настоящего раскрытия, можно разделить на «расщепляемые» или «нерасщепляемые». Как правило, расщепляемые линкеры содержат одну или несколько функциональных групп, которые расщепляются в ответ на физиологическую среду. Например, расщепляемый линкер может содержать ферментный субстрат (например, валин-аланин), который разлагается в присутствии внутриклеточного фермента (например, катепсина В), расщепляемую кислотой группу (например, гидрозон), которая разлагается в кислой среде клеточного компартмента или восстанавливаемую группу (например, дисульфид), которая разлагается во внутриклеточной восстанавливающей среде. Напротив, как правило нерасщепляемые линкеры высвобождаются из ADC во время разложения (например, лизосомного разложения) антитела - фрагмента ADC внутри целевой клетки.
Нерасщепляемые линкеры
Нерасщепляемые линкеры, подходящие для применения в настоящем документе, могут дополнительно включать в себя одну или несколько групп, выбранных из следующего: связь, -(С=O)-, C1-C6 алкилен, C1-C6 гетероалкилен, С2-С6 алкенилен, С2-С6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен, гетероарилен и их комбинации, каждый из которых может быть необязательно замещен и/или может включать в себя один или несколько гетероатомов (например, S, N или О) вместо одного или нескольких атомов углерода. Неограничивающие примеры таких групп включают в себя звенья (СН2)p, (С=O)(СН2)p, и полиэтиленгликоль (PEG; (CH2CH2O)р), где р представляет собой целое число от 1 до 6, независимо выбранные для каждого случая.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L содержит один или несколько из следующего: связь, -(С=O)-, группа -C(O)NH-, группа -OC(O)NH-, C1-С6 алкилен, C1-C6 гетероалкилен, C2-C6 алкенилен, C2-C6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен, гетероарилен, группа -(CH2CH2O)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6, или повышающая растворимость группа;
где каждый C1-C6 алкилен, C1-C6 гетероалкилен, C2-C6 алкенилен, C2-C6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, три галоген метил, циано, гидрокси, меркапто и нитро;
Согласно некоторым вариантам осуществления каждый C1-C6 алкилен, C1-С6 гетероалкилен, С2-С6 алкенилен, С2-С6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N.
Согласно некоторым вариантам осуществления каждый C1-C6 алкилен, C1-С6 гетероалкилен, С2-С6 алкенилен, С2-С6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N, и необязательно может быть замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, три галоген метил, циано, гидрокси, меркапто и нитро.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L содержит усиливающую растворимость группу согласно формуле -Oa-C(O)NH-SO2-N(R1)-, где:
а составляет 0 или 1;
R1 выбран из группы, состоящей из следующего: водород, С1-С24 алкильные группы, С3-С24 циклоалкильные группы, С2-С24 (гетеро)арильные группы, С3-С24 алкил(гетеро)арильные группы и С3-С24 (гетеро)арилалкильные группы, каждый из которых может быть необязательно замещен или необязательно прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и NR3, где R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1-С4 алкила. Такие усиливающие растворимость группы описаны, например, в патенте США №9636421 и публикации заявки на выдачу патента США №2017/0298145, причем раскрытие каждого документа полностью включены в настоящий документ посредством ссылки.
Согласно некоторым вариантам осуществления усиливающая растворимость группа согласно формуле -Oa-C(O)NH-SO2-N(R1)- дополнительно содержит C1-С6 алкилен или группу -(CH2CH2O)p-, где р представляет собой целое число от 1 до 6. Неограничивающие примеры таких усиливающих растворимость групп включают в себя группы, представленные в таблице 2 ниже.
Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер содержит звено -(СН2)n-, где n представляет собой целое число, составляющее 2-12, например, 2-6. Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер содержит -(СН2)n-, где n составляет 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер представляет собой звено -(СН2)n-, где n составляет 6, представленное формулой:
Расщепляемые линкеры
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер, конъюгированный с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом и аматоксином, расщепляется во внутриклеточных условиях, так что расщепление линкера высвобождает звено - лекарственное средство от антитела во внутриклеточной среде. Расщепляемые линкеры предназначены для использования различий в локальных средах, например, внеклеточных и внутриклеточных средах, включая в себя, например, рН, восстановительный потенциал или концентрацию фермента, для запуска высвобождения аматоксина в целевой клетке. Как правило, расщепляемые линкеры относительно стабильны в кровотоке, но особенно чувствительны к расщеплению во внутриклеточной среде посредством одного или нескольких механизмов (например, включая в себя без ограничения активность протеаз, пептидаз и глюкуронидаз). Используемые в настоящем документе расщепляемые линкеры по существу стабильны в циркулирующей плазме и/или вне целевой клетки и могут расщепляться с некоторой эффективной скоростью внутри целевой клетки или в непосредственной близости от целевой клетки.
Подходящие расщепляемые линкеры включают в себя те, которые можно расщеплять, например, ферментативным гидролизом, фотолизом, гидролизом в кислых условиях, гидролизом в основных условиях, окислением, восстановлением дисульфида, нуклеофильным расщеплением или металлорганическим расщеплением (см., например, Leriche et al., Bioorg. Med. Chem., 20:571-582, 2012, описание которой включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к линкерам, подходящим для ковалентной конъюгации). Подходящие расщепляемые линкеры могут включать в себя, например, химические фрагменты, такие как гидразин, дисульфид, простой тиоэфир или дипептид.
Линкеры, гидролизуемые в кислых условиях, включают в себя, например, гидразоны, семикарбазоны, тиосемикарбазоны, цис-аконитовые амиды, ортоэфиры, ацетали, кетали и т.п. (См., например, патенты США №№5122368; 5824805; 5622929; Dubowchik and Walker, 1999, Pharm. Therapeutics 83:67-123; Neville et al., 1989, Biol. Chem. 264:14653-14661, раскрытие каждого из которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится клинкерам, подходящим для ковалентной конъюгации. Такие линкеры относительно стабильны в условиях нейтрального рН, например, в крови, но нестабильны при рН ниже 5,5 или 5,0, приблизительным значением рН лизосомы.
Линкеры, расщепляемые в восстанавливающих условиях, включают в себя, например, дисульфид. В настоящей области техники известны различные дисульфидные линкеры, включая в себя, например, те, которые могут быть образованы с использованием SATA N-сукцинимидил-S-ацетилтиоацетат), SPDP (N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионат), SPDB N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)бутират) и SMPT (N-сукцинимидилоксикарбонил-альфа-метил-альфа-(2-пиридилдитио)толуол), SPDB и SMPT (см., например, Thorpe et al., 1987, Cancer Res. 47:5924-5931; Wawrzynczak et al., в Immunoconjugates: Antibody Conjugates in Radioimagery and Therapy of Cancer (C. W. Vogel ed., Oxford U. Press, 1987. См. также патент США №4880935, раскрытие каждого из которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку относится клинкерам, подходящим для ковалентной конъюгации.
Линкеры, чувствительные к ферментативному гидролизу, могут представлять собой, например, пептидсодержащий линкер, который расщепляется ферментом внутриклеточной пептидазой или протеазой, включая в себя без ограничения лизосомную или эндосомную протеазу. Одним из преимуществ использования внутриклеточного протеолитического высвобождения терапевтического агента является то, что агент, как правило, ослабляется при конъюгировании, и стабильность конъюгатов в сыворотке, как правило, является высокой. Согласно некоторым вариантам осуществления пептидильный линкер состоит по меньшей мере из двух аминокислот или по меньшей мере трех аминокислот. Иллюстративные аминокислотные линкеры включают в себя дипептид, трипептид, тетрапептид или пентапептид. Примеры подходящих пептидов включают в себя пептиды, содержащие аминокислоты, такие как валин, аланин, цитруллин (Cit), фенилаланин, лизин, лейцин и глицин. Аминокислотные остатки, которые содержат аминокислотный линкерный компонент, включают в себя встречающиеся в природе, а также минорные аминокислоты и не встречающиеся в природе аналоги аминокислот, такие как цитруллин. Иллюстративные дипептиды включают в себя валин-цитруллин (vc или val-cit) и аланин-фенилаланин (af или ala-phe). Иллюстративные трипептиды включают в себя глицин-валин-цитруллин (gly-val-cit) и глицин-глицин-глицин (gly-gly-gly). Согласно некоторым вариантам осуществления линкер включает в себя дипептид, такой как Val-Cit, Ala-Val, или Phe-Lys, Val-Lys, Ala-Lys, Phe-Cit, Leu-Cit, Ile-Cit, Phe-Arg или Trp-Cit. Линкеры, содержащие дипептиды, такие как Val-Cit или Phe-Lys, раскрыты, например, в патенте США №6214345, описание которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку относится к линкерам, подходящим для ковалентной конъюгации. Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит дипептид, выбранный из Val-Ala и Val-Cit.
Линкеры, подходящие для конъюгирования антител, антигенсвязывающих фрагментов, описанных в настоящем документе, с цитотоксической молекулой, включают в себя линкеры, способные высвобождать аматоксин посредством процесса 1,6-элиминирования. Химические фрагменты, способные к этому процессу элиминирования, включают в себя п-аминобензильную (РАВ) группу, 6-малеимидогексановую кислоту, рН-чувствительные карбонаты и другие реагенты, как описано в Jain et al., Pharm. Res. 32:3526-3540, 2015, раскрытие которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится клинкерам, подходящим для ковалентной конъюгации.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер включает в себя «саморасщепляющуюся» группу, такую как упомянутые выше РАВ или РАВС (пара-аминобензилоксикарбонил), которые раскрыты, например, в Carl et al., J. Med. Chem. (1981) 24:479-480; Chakravarty et al (1983) J. Med. Chem. 26:638-644; US6214345; US20030130189; US20030096743; US6759509; US20040052793; US6218519; US6835807; US6268488; US20040018194; W098/13059; US20040052793; US6677435; US5621002; US20040121940; W02004/032828). Другие такие химические фрагменты, способные к этому процессу («саморасщепляющиеся линкеры»), включают в себя метиленкарбаматы и гетероарильные группы, такие как аминотиазолы, аминоимидазолы, аминопиримидины и тому подобное. Линкеры, содержащие такие гетероциклические саморасщепляющиеся группы, раскрыты, например, в патентных публикациях США №20160303254 и 20150079114 и патенте США №7754681; Hay et al. (1999) Bioorg. Med. Chem. Lett. 9:2237; US 2005/0256030; de Groot et al (2001) J. Org. Chem. 66:8815-8830; и патенте США №7223837. Согласно некоторым вариантам осуществления дипептид используется в комбинации с саморасщепляющимся линкером.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L содержит один или несколько из следующего: гидразин, дисульфид, простой тиоэфир, аминокислота, пептид, состоящий максимум из 10 аминокислот, п-аминобензильная (РАВ) группа, гетероциклическая саморасщепляющаяся группа, C1-С6алкил, C1-C6 гетероалкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 гетероалкенил, С2-С6 алкинил, С2-С6 гетероалкинил, С3-С6 циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, группа -(С=O)-, группа -C(O)NH-, группа -OC(O)NH-, группа -(CH2CH2O)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6, или повышающая растворимость группа;
где каждая C1-С6 алкильная, C1-С6 гетероалкильная, С2-С6 алкенильная, С2-С6 гетероалкенильная, С2-С6 алкинильная, С2-С6 гетероалкинильная, С3-С6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть замещена 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, тригалогенметил, циано, гидрокси, меркапто и нитро.
Согласно некоторым вариантам осуществления каждая C1-C6 алкильная, C1-C6 гетероалкильная, С2-С6 алкенильная, С2-С6 гетероалкенильная, С2-С6 алкинильная, С2-С6 гетероалкинильная, С3-С6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть прервана одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N.
Согласно некоторым вариантам осуществления каждая C1-C6 алкильная, C1-С6 гетероалкильная, С2-С6 алкенильная, С2-С6 гетероалкенильная, С2-С6 алкинильная, C2-C6 гетероалкинильная, C3-C6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть прервана одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N и необязательно может быть замещена 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, тригалогенметил, циано, гидрокси, меркапто и нитро.
Специалисту в настоящей области будет понятно, что одна или несколько из перечисленных групп могут присутствовать в форме двухвалентных (бирадикальных) соединений, например, C1-C6 алкилен и т.п.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L содержит усиливающую растворимость группу согласно формуле -Oa-C(O)NH-SO2-N(R1)-, где:
а составляет 0 или 1;
R1 выбран из группы, состоящей из следующего: водород, C1-C24 алкильные группы, C3-C24 циклоалкильные группы, C2-C24 (гетеро)арильные группы, С3-С24 алкил(гетеро)арильные группы и C3-C24 (гетеро)арилалкильные группы, каждый из которых может быть необязательно замещен или необязательно прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и NR3, где R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и C1-C4 алкила. Такие усиливающие растворимость группы описаны, например, в патенте США №9636421 и публикации заявки на выдачу патента США №2017/0298145, причем раскрытия каждого из документов полностью включены в настоящий документ посредством ссылки.
Согласно некоторым вариантам осуществления усиливающая растворимость группа согласно формуле -Oa-C(O)NH-SO2-N(R1)- дополнительно содержит C1-C6 алкилен или группу -(СН2СН2О)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6. Неограничивающие примеры таких усиливающих растворимость групп включают в себя группы, представленные в таблице 2, выше.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер включает в себя п-аминобензильную группу (РАВ). Согласно одному варианту осуществления п-аминобензильная группа расположена между цитотоксическим лекарственным средством и сайтом расщепления протеазой в линкере. Согласно одному варианту осуществления п-аминобензильная группа является частью п-аминобензилоксикарбонильного звена. Согласно одному варианту осуществления п-аминобензильная группа является частью п-аминобензиламидо-звена.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит дипептид, выбранный из группы, состоящей из Phe-Lys, Val-Lys, Phe-Ala, Phe-Cit, Val-Ala, Val-Cit и Val-Arg. Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит один или несколько из РАВ, Val-Cit-PAB, Val-Ala-PAB, Val-Lys(Ac)-PAB, Phe-Lys-PAB, Phe-Lys(Ac)-PAB, D-Val-Leu-Lys, Gly-Gly-Arg, Ala-Ala-Asn-PAB или Ala-PAB.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит комбинацию одного или нескольких из пептида, олигосахарида, -(СН2)p-, -(CH2CH2O)p, РАВ, Val-Cit-PAB, Val-Ala-PAB, Val-Lys(Ac)-PAB, Phe-Lys-PAB, Phe-Lys(Ac)-PAB, D-Val-Leu-Lys, Gly-Gly-Arg, Ala-Ala-Asn-PAB или Ala-PAB.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит звено -(С=O)(СН2)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит РАВ-Ala-Val-пропионил, представленный формулой:
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер содержит PAB-Cit-Val-пропионил, представленный формулой:
Такие линкеры РАВ-дипептид-пропионил раскрыты, например, в международной публикации патентной заявки №WO2017/149077, которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки. Кроме того, цитотоксины, раскрытые в WO2017/149077, включены в настоящий документ посредством ссылки.
Специалисту в настоящей области техники будет понятно, что любая одна или несколько химических групп, фрагментов и признаков, раскрытых в настоящем документе, могут быть объединены множеством способов с образованием линкеров, применимых для конъюгации антител и аматоксинов, как раскрыто в настоящем документе. Дополнительные линкеры, применимые в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, описаны, например, в публикации заявки на выдачу патента США №2015/0218220, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Конъюгация линкер-аматоксин и линкер-антитело
Согласно определенным вариантам осуществления линкер реагирует с аматоксином или его производным согласно любой из формул (V), (Va) или (Vb) в соответствующих условиях с образованием конъюгата линкер-аматоксин. Согласно определенным вариантам осуществления реакционноспособные группы используются на аматоксине или линкере для образования ковалентной связи.
Конъюгат аматоксин-линкер впоследствии реагирует с антителом, дериватизированным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом в соответствующих условиях с образованием ADC. Альтернативно, линкер может сначала реагировать с антителом, дериватизированным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом с образованием конъюгата линкер-антитело, а затем реагировать с аматоксином с образованием ADC. Теперь такие реакции конъюгации будут описаны более полно.
Доступен ряд различных реакций для ковалентного присоединения линкеров или конъюгатов аматоксин-линкер к антителу или его антигенсвязывающему фрагменту. Подходящие точки присоединения на молекуле антитела включают в себя без ограничения аминогруппы лизина, группы свободных карбоновых кислот глутаминовой кислоты и аспарагиновой кислоты, сульфгидрильные группы цистеина и различные фрагменты ароматических аминокислот. Например, неспецифическое ковалентное присоединение может быть выполнено с использованием карбодиимидной реакции для связывания карбокси- (или амино-) группы на линкере с амино-(или карбокси-) группой на фрагменте антитела. Кроме того, бифункциональные агенты, такие как диальдегиды или сложные имидоэфиры, также могут быть использованы для связывания аминогруппы линкера с аминогруппой фрагмента антитела. Кроме того, для присоединения аматоксинов к фрагментам антител доступна реакция основания Шиффа. Этот способ включает в себя периодатное окисление гликоля или гидроксигруппы на антителе или линкере с образованием, таким образом, альдегида, который затем реагирует с линкером или антителом соответственно. Образование ковалентной связи происходит через образование основания Шиффа между альдегидом и аминогруппой. Изотиоцианаты также можно использовать в качестве агентов сочетания для ковалентного присоединения аматоксинов или фрагментов антител к линкерам. Другие методики известны квалифицированному специалисту и находятся в пределах объема настоящего раскрытия.
Линкеры, используемые для конъюгации с антителами или антигенсвязывающими фрагментами, как описано в настоящем документе, включают в себя без ограничения линкеры, содержащие химический фрагмент Z, образованный реакцией сочетания между антителом и реакционноспособным химическим фрагментом (называемым в настоящем документе реакционноспособным заместителем, Z') на линкере, как показано в таблице 3 ниже. Волнистые линии обозначают точки присоединения к антителу или антигенсвязывающему фрагменту и цитотоксической молекуле соответственно.
Специалисту в настоящей области техники будет понятно, что реакционноспособный заместитель Z', присоединенный к линкеру, и реакционноспособный заместитель на антителе или его антигенсвязывающем фрагменте вовлечены в реакцию ковалентного сочетания с образованием химического фрагмента Z, и он сможет распознать реакционноспособный заместитель Z'. Следовательно, конъюгаты антитела с лекарственным средством, применимые в сочетании с описанными в настоящем документе способами, могут быть образованы реакцией антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с линкером или конъюгатом аматоксин-линкер, как описано в настоящем документе, линкером или конъюгатом аматоксин-линкер, включая в себя реакционноспособный заместитель Z', подходящий для реакции с реакционноспособным заместителем на антителе или его антигенсвязывающим фрагментом, с образованием химического фрагмента Z.
Как показано в таблице 3, примеры подходящих реакционноспособных заместителей Z' на линкере и реакционноспособных заместителей на антителе или его антигенсвязывающем фрагменте включают в себя пару нуклеофил/электрофил (например, пару тиол/галогеналкил, пару амин/карбонил или пара тиол/ α,β-ненасыщенный карбонил и т.п.), пара диен/диенофил (например, пара азид/алкин или пара диен/-α,β-ненасыщенный карбонил, среди прочего) и т.п. Реакции сочетания между реакционноспособными заместителями с образованием химического фрагмента Z включают в себя без ограничения алкилирование тиола, гидроксилалкирование, алкилирование амина, конденсацию амина или гидроксиламина, образование гидразина, амидирование, эстерификацию, образование дисульфида, циклоприсоединение (например, [4+2] циклоприсоединение Дильса-Альдера, [3+2] циклоприсоединение Хьюисгена, среди прочего), нуклеофильное ароматическое замещение, электрофильное ароматическое замещение и другие реакционные способы, известные в настоящей области техники или описанные в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособный заместитель Z' представляет собой электрофильную функциональную группу, подходящую для реакции с нуклеофильной функциональной группой на антителе или его антигенсвязывающем фрагменте.
Реакционноспособные заместители, которые могут присутствовать в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, как раскрыто в настоящем документе, включают в себя без ограничения нуклеофильные группы, такие как (i) N-концевые аминогруппы, (ii) аминогруппы боковой цепи, например лизин, (iii) тиольные группы боковой цепи, например цистеин и (iv) гидроксильные или аминогруппы сахара, где антитело гликозилировано. Реакционноспособные заместители, которые могут присутствовать в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, как раскрыто в настоящем документе, включают в себя без ограничения гидроксильные фрагменты остатков серина, треонина и тирозина; амино-фрагменты остатков лизина; карбоксильные фрагменты остатков аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты; и тиольные фрагменты остатков цистеина, а также пропаргильные, азидо, галоарильные (например, фторарильные), галогетероарильные (например, фторгетероарильные), галогеналкильные и галогетероалкильные фрагменты не встречающихся в природе аминокислот. Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособные заместители, присутствующие в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, как раскрыто в настоящем документе, включают в себя аминовые или тиольные фрагменты. Некоторые антитела содержат восстанавливаемые дисульфиды между цепями, то есть цистеиновые мостики. Антитела можно сделать реакционноспособными для конъюгации с линкерными реагентами путем обработки восстанавливающим агентом, таким как DTT (дитиотреитол). Таким образом, каждый цистеиновый мостик теоретически образует два реакционноспособных тиольных нуклеофила. Дополнительные нуклеофильные группы могут быть введены в антитела посредством реакции лизинов с 2-иминотиоланом (реагент Траута), приводящей к превращению амина в тиол. Реакционноспособные тиольные группы могут быть введены в антитело (или его фрагмент) путем введения одного, двух, трех, четырех или более остатков цистеина (например, получения мутантных антител, содержащих один или несколько ненативных аминокислотных остатков цистеина). В патенте США №7521541 описано конструирование антител путем введения реакционноспособных аминокислот - цистеина.
Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособный заместитель Z', присоединенный клинкеру, представляет собой нуклеофильную группу, которая реагирует с электрофильной группой, присутствующей на антителе. Применимые электрофильные группы в антителе включают в себя без ограничения карбонильные группы альдегида и кетона. Нуклеофильная группа (например, ее гетероатом) может реагировать с электрофильной группой на антителе и образовывать ковалентную связь с антителом. Применимые нуклеофильные группы включают в себя без ограничения гидразид, оксим, амино, гидроксил, гидразин, тиосемикарбазон, гидразинкарбоксилат и арилгидразид.
Согласно некоторым вариантам осуществления химический фрагмент Z является продуктом реакции между реакционноспособными нуклеофильными заместителями, присутствующими в антителах или их антиген связывающих фрагментах, такими как аминные и тиольные фрагменты, и реакционноспособными электрофильным заместителем Z', присоединенным к линкеру. Например, Z' может, среди прочего, представлять собой акцептор Михаэля (например, малеимид), активированный сложный эфир, электронодефицитное карбонильное соединение или альдегид.
Несколько репрезентативных и неограничивающих примеров реакционноспособных заместителей Z' и полученных химических фрагментов Z представлены в таблице 4.
Например, линкеры, подходящие для синтеза конъюгатов линкер-антитело и ADC, включают в себя без ограничения реакционноспособные заместители Z', присоединенные к линкеру, такие как малеимидная или галогеналкильная группа. Они могут быть присоединены к линкеру, например, с помощью таких реагентов, как сукцинимидил-4-(N-малеимидометил)-циклогексан-L-карбоксилат (SMCC), N-сукцинимидилйодацетат (SIA), сульфо-SMCC, м-малеимидобензоил-1М-гидроксисукцинимидиловый эфир (MBS), сульфо- MBS и сукцинимидилйодацетат, среди прочего, описанные, например, в Liu et al., 18:690-697, 1979, описание которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к линкерам для химической конъюгации.
Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособный заместитель Z', присоединенный к линкеру L, представляет собой малеимид, азид или алкин. Примером содержащего малеимид линкера является нерасщепляемый линкер на основе малеимидокапроила, который является особенно применимым для конъюгации агентов, разрушающих микротрубочки, таких как ауристатины. Такие линкеры описаны Doronina et al., Bioconjugate Chem. 17:14-24, 2006, описание которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к линкерам для химической конъюгации.
Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособный заместитель Z' представляет собой -(С=O)- или -NH(C=O)-, так что линкер может быть присоединен к антителу или его антигенсвязывающему фрагменту с помощью фрагмента амида или мочевины соответственно, возникающего в результате реакции группы -(С=O)- или -NH(C=O)- с аминогруппой антитела или его антигенсвязывающего фрагмента.
Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособный заместитель Z' представляет собой N-малеимидильную группу, галоген ированную N-алкиламидогруппу, сульфонилокси-N-алкиламидогруппу, карбонатную группу, сульфонилгалогенидную группу, тиольную группу или их производное, алкинильную группу, содержащую внутреннюю тройную углерод-углеродную связь, (гетеро)циклоалкинильную группу, бицикло[6.1.0]нон-4-ин-9-ильную группу, алкенильную группу, содержащую внутреннюю двойную углерод-углеродную связь, циклоалкенильную группу, тетразинильную группу, азидогруппу, фосфиновую группу, нитрилоксидную группу, нитронную группу, нитрилиминную группу, диазогруппу, кетонную группу, (О-алкил)гидроксиламиногруппу, гидразиновую группу, галогенированную N-малеимидильную группу, 1,1-бис(сульфонилметил)метилкарбонильную группу или их производные элиминирования, карбонилгалогенидную группу или алленамидную группу, каждая из которых может быть необязательно замещена. Согласно некоторым вариантам осуществления реакционноспособный заместитель содержит циклоалкеновую группу, циклоалкиновую группу или необязательно замещенную (гетеро)циклоалкинильную группу.
Согласно некоторым вариантам осуществления химический фрагмент Z выбран из таблицы 3 или таблицы 4. Согласно некоторым вариантам осуществления химический фрагмент Z представляет собой:
где S представляет собой атом серы, который представляет собой реакционноспособный заместитель, присутствующий в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, которые специфически связываются с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности стволовой клетки или Т-клетки человека (например, из -SH группы остатка цистеина).
Согласно некоторым вариантам осуществления группа линкер-реакционноспособный заместитель, взятый вместе как L-Z', перед конъюгацией с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, характеризуется структурой:
где волнистая линия указывает на точку присоединения к заместителю на аматоксине. Эта группа линкер-реакционноспособный заместитель L-Z' может альтернативно называться N-бета-малеимидопропил-Val-Ala-пара-аминобензил (BMP-Val-Ala-PAB). Волнистая линия на конце линкера указывает на точку присоединения к аматоксину. Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L и химический фрагмент Z после конъюгации с антителом, взятые вместе как L-Z-Ab, характеризуется структурой:
где S представляет собой атом серы, который представляет собой реакционноспособный заместитель, присутствующий в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, которые специфически связываются с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности стволовой клетки или Т-клетки человека (например, из -SH группы остатка цистеина). Волнистая линия на конце линкера указывает на точку присоединения к аматоксину.
Согласно некоторым вариантам осуществления группа линкер-реакционноспособный заместитель, взятый вместе как L-Z', перед конъюгацией с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, характеризуется структурой:
Эта группа линкер-реакционноспособный заместитель может альтернативно называться 1-н-гексилмалеимидом, который представляет собой нерасщепляемый линкер. Волнистая линия на конце линкера указывает на точку присоединения к аматоксину.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L и химический фрагмент Z, после конъюгации с антителом, взятые вместе как L-Z-Ab, характеризуются структурой:
где S представляет собой атом серы, который представляет собой реакционноспособный заместитель, присутствующий в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте, которые специфически связываются с антигеном, экспрессируемым на клеточной поверхности клетки, например, опухолевой клетки или стволовой клетки или Т-клетки человека (например, из группы -SH остатка цистеина). Волнистая линия на конце линкера указывает на точку присоединения к аматоксину. Специалисту в настоящей области техники будет понятно, что согласно этому варианту осуществления структура группы линкер-реакционноспособный заместитель L-Z' до конъюгации с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом включает в себя малеимид в качестве группы Z'. Вышеупомянутые линкерные фрагменты и конъюгаты аматоксин-линкер, среди прочего, применимые в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, описаны, например, в публикации заявки на выдачу патента США №2015/0218220 и публикации заявки на патент № WO 2017/149077, раскрытие каждой из которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Согласно одному аспекту цитотоксин в ADC, как раскрыто в настоящем документе, представляет собой аматоксин или его производное, представленное любой из формул (V), (Va) или (Vb). Специалисту в настоящей области техники будет понятно, что такие аматоксины предоставляют множество возможностей для точек присоединения к линкеру.
Согласно некоторым вариантам осуществления аматоксин характеризуется структурой формулы (V), и линкер присоединен простой эфирной связью к ОН-группе остатка гидроксилтриптофана. Согласно таким вариантам осуществления ADC может быть представлен формулой (I):
или ее стереоизомером;
где:
Q представляет собой S;
L представляет собой линкер;
Z представляет собой химический фрагмент, образованный реакцией сочетания между реакционноспособным заместителем, присутствующим на L, и реакционноспособный заместителем, присутствующим в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте; и
Ab представляет собой антитело,
каждый является таким, как раскрыто в настоящем документе.
Согласно некоторым вариантам осуществления аматоксин характеризуется структурой формулы (Va), и линкер присоединен простой эфирной связью к ОН-группе остатка гидроксилтриптофана. Согласно таким вариантам осуществления ADC может быть представлен формулой (Ia):
Согласно некоторым вариантам осуществления аматоксин характеризуется структурой формулы (Vb), и линкер присоединен простой эфирной связью к ОН-группе остатка гидроксилтриптофана. Согласно таким вариантам осуществления ADC может быть представлен формулой (Ib):
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L в ADC согласно формуле (I), (Ia) или (Ib) представляет собой нерасщепляемый линкер. Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер L содержит одно или несколько из следующего: связь, -(С=O)-, группа -C(O)NH-, группа -OC(O)NH-, C1-C6 алкилен, С1-С6 гетероалкилен, С2-С6 алкенилен, С1-С6 гетероалкенилен, С1-С6 алкинилен, С1-C6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен, гетероарилен, группа -(CH2CH2O)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6, или повышающая растворимость группа;
где каждый С1-C6 алкилен, С1-C6 гетероалкилен, С2-С6 алкенилен, С2-С6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть замещен 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, три галоген метил, циано, гидрокси, меркапто и нитро; или
каждый C1-C6 алкилен, С1-C6 гетероалкилен, С2-С6 алкенилен, С2-С6 гетероалкенилен, С2-С6 алкинилен, С2-С6 гетероалкинилен, С3-С6 циклоалкилен, гетероциклоалкилен, арилен или гетероарилен необязательно может быть прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N.
Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер L содержит усиливающую растворимость группу согласно формуле -Oa-C(О)NH-SO2-NR1-, где:
а составляет 0 или 1; и
R1 выбран из группы, состоящей из следующего: водород, C1-C24 алкильные группы, С3-С24 циклоалкильные группы, С2-С24 (гетеро)арильные группы, С3-С24 алкил(гетеро)арильные группы и С3-С24 (гетеро)арилалкильные группы, каждый из которых необязательно может быть замещен, необязательно прерван, или и замещен, и прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и NR3, где R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1-С4 алкила.
Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер L содержит звено -(СН2)n-, где n представляет собой целое число от 2 до 6.
Согласно некоторым вариантам осуществления нерасщепляемый линкер L представляет собой -(СН2)n-, где n составляет 6.
Согласно некоторым вариантам осуществления Ab, Z и нерасщепляемый линкер L, взятые вместе как Ab-Z-L, представлены формулой:
где S представляет собой атом серы, который представляет собой реакционноспособный заместитель, присутствующий в антителе или его антигенсвязывающим фрагменте, которые специфически связываются с антигеном, экспрессируемым на клетке, например, поверхности стволовой клетки или Т-клетки человека (например, из группы -SH остатка цистеина). Волнистая линия на конце линкера указывает на точку присоединения к аматоксину.
Согласно некоторым вариантам осуществления ADC согласно формуле (I) представлен формулой (II):
ее стереоизомером или его фармацевтически приемлемой солью.
Согласно некоторым вариантам осуществления ADC согласно формуле (II) представлен формулой (IIa):
ее стереоизомером или его фармацевтически приемлемой солью.
Согласно некоторым вариантам осуществления ADC согласно формуле (II) представлен формулой (IIb):
ее стереоизомером или его фармацевтически приемлемой солью.
Неожиданно, согласно настоящему раскрытию, было обнаружено, что ADC, содержащие аматоксин и нерасщепляемый линкер, конъюгирующий аматоксин с фрагментом антитела ADC, обладают улучшенной переносимостью по сравнению с ADC, содержащим аматоксин и расщепляемый линкер. Например, согласно некоторым вариантам осуществления улучшенная переносимость может представлять собой увеличенный терапевтический индекс.Согласно некоторым вариантам осуществления улучшенная переносимость может представлять собой меньшее повышение или отсутствие повышения содержания одного или нескольких ферментов печени в крови (например, AST, ALT, ADH или общего билирубина) при конкретной дозе ADC, содержащего нерасщепляемый линкер по сравнению с ADC, содержащим расщепляемый линкер.
Согласно некоторым вариантам осуществления линкер L в ADC согласно формуле (I), (Ia) или (Ib) представляет собой расщепляемый линкер. Согласно некоторым вариантам осуществления расщепляемый линкер L содержит одно или несколько из следующего: гидразин, дисульфид, простой тиоэфир, аминокислота, пептид, состоящий максимум из 10 аминокислот, п-аминобензильная (РАВ) группа, гетероциклическая саморасщепляющаяся группа, C1-С6алкил, С1-C6 гетероалкил, С2-С6 алкенил, С2-С6 гетероалкенил, С2-С6 алкинил, С2-С6 гетероалкинил, С3-С6 циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, группа -(С=О)-, группа -C(О)NH-, группа -OC(О)NH-, группа -(СН2СН2О)р-, где р представляет собой целое число от 1 до 6, или повышающая растворимость группа;
где каждая C1-С6алкильная, С1-C6 гетероалкильная, С2-С6 алкенильная, С2-С6 гетероалкенильная, С2-С6 алкинильная, С2-С6 гетероалкинильная, С3-С6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть замещена 1-5 заместителями, независимо выбранными для каждого случая из группы, состоящей из следующего: алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, алкарил, алкил гетероарил, амино, аммоний, ацил, ацилокси, ациламино, аминокарбонил, алкоксикарбонил, уреидо, карбамат, арил, гетероарил, сульфинил, сульфонил, гидроксил, алкокси, сульфанил, гелоген, карбокси, тригалогенметил, циано, гидрокси, меркапто и нитро;
или каждая C1-C6 алкильная, C1-C6 гетероалкильная, С2-С6 алкенильная, С2-С6 гетероалкенильная, С2-С6 алкинильная, С2-С6 гетероалкинильная, С3-С6 циклоалкильная, гетероциклоалкильная, арильная или гетероарильная группа необязательно может быть прервана одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и N.
Согласно некоторым вариантам осуществления расщепляемый линкер L содержит усиливающую растворимость группу согласно формуле -Oa-C(О)NH-SO2-NR1-, где:
а составляет 0 или 1; и
R1 выбран из группы, состоящей из следующего: водород, С1-C24 алкильные группы, С3-С24 циклоалкильные группы, С2-С24 (гетеро)арильные группы, С3-С24 алкил(гетеро)арильные группы и С3-С24 (гетеро)арилалкильные группы, каждый из которых может быть необязательно замещен или необязательно прерван одним или несколькими гетероатомами, выбранными из О, S и NR3, где R3 независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1-С4 алкила.
Согласно некоторым вариантам осуществления расщепляемый линкер L содержит пептид, выбранный из группы, состоящей из Phe-Lys, Val-Lys, Phe-Ala, Phe-Cit, Val-Ala, Val-Cit и Val-Arg.
Согласно некоторым вариантам осуществления расщепляемый линкер L дополнительно содержит группу РАВ.
Согласно некоторым вариантам осуществления расщепляемый линкер L представлен формулой:
Получение конъюгатов антитела с лекарственным средством
В ADC согласно формуле Ab-(Z-L-Cy)n, как раскрыто в настоящем документе, таком как ADC согласно любой из формул (I), (Ia), или (Ib), (II), (IIa) или (IIb), антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (Ab) конъюгированы с одним или несколькими фрагментами цитотоксического лекарственного средства (Су; например, аматоксин), например, приблизительно 1 - приблизительно 20 цитотоксических фрагментов на антитело, посредством линкера L и химического фрагмента Z, каждый из которых раскрыт в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам осуществления п составляет 1. Согласно некоторым вариантам осуществления п составляет приблизительно 1 -приблизительно 5, приблизительно 1 - приблизительно 4, приблизительно 1 -приблизительно 3 или приблизительно 3 - приблизительно 5. Согласно некоторым вариантам осуществления п составляет приблизительно 1, приблизительно 2, приблизительно 3 или приблизительно 4.
ADC согласно настоящему раскрытию могут быть получены несколькими способами с использованием реакций органической химии, условий и реагентов, известных специалистам в настоящей области техники, включая в себя следующее: (1) реакция реакционноспособного заместителя антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с двухвалентным линкерным реагентом с образованием Ab-Z-L, как описано в настоящем документе выше, с последующей реакцией с цитотоксическим фрагментом Су; или (2) реакция реакционноспособного заместителя цитотоксического фрагмента с двухвалентным линкерным реагентом с образованием Cy-L-Z' с последующей реакцией с реакционноспособным заместителем антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, как описано в настоящем документе выше, с образованием ADC формулы Ab-(Z-L-Cy)n. В настоящем документе описаны дополнительные способы получения ADC.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент может содержать одну или несколько углеводных групп, которые могут быть химически модифицированы, чтобы содержать одну или несколько сульфгидрильных групп.Затем ADC образуется путем конъюгации через атом серы сульфгидрильной группы, как описано в настоящем документе выше.
Согласно другому варианту осуществления антитело может содержать одну или несколько углеводных групп, которые могут быть окислены с образованием альдегидной группы (-СНО) (см., например, Laguzza, et al., J. Med. Chem. 1989, 32(3), 548-55). Затем ADC образуется конъюгацией через соответствующий альдегид, как описано в настоящем документе выше. Другие протоколы модификации белков для присоединения или ассоциации цитотоксинов описаны в Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, vol. 2, John Wiley & Sons (2002), включенном в настоящий документ посредством ссылки.
Способы конъюгации линкер-фрагменты лекарственного средства с нацеленными на клетки белками, такими как антитела, иммуноглобулины или их фрагменты, можно найти, например, в патенте США №5208020; патенте США №6441163; WO 2005037992; WO 2005081711; и WO 2006/034488, все из которых полностью включены в настоящий документ посредством ссылки.
Альтернативно, слитый белок, содержащий антитело и цитотоксический агент, может быть получен, например, с помощью рекомбинантных методов или пептидного синтеза. Длина ДНК может включать в себя соответствующие области, кодирующие две части конъюгата, либо смежные друг с другом, либо разделенные областью, кодирующей линкерный пептид, который не нарушает требуемых свойств конъюгата.
Согласно некоторым вариантам осуществления ADC согласно формуле (IIa) можно получить путем конъюгирования тиольной группы на антителе с конъюгатом аматоксин-линкер Cy-L-Z', представленным структурой:
Этот конъюгат аматоксин-линкер можно получить согласно схемам 1-3, начиная с коммерчески доступного 6-гидрокситриптофана (1). Соединение 1 может быть защищено трет-бутилоксикарбонилангидридом ((ВОС)2О). Гексагидропирролоиндол 3 можно получить в виде смеси цис- и транс-изомеров при облучении защищенного гидрокситриптофана 2 в присутствии кислорода и сенсибилизатора (бенгальский розовый). Получение соединения 3 (а также процедура получения соединений от 2 до Va) описано в публикации международной патентной заявки № WO 2019/030173, описание которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Коммерческий защищенный 9-флуоренилметоксикарбонилом (FMOC) 4-гидроксипролин (4) может быть алкилирован аллилбромидом и впоследствии присоединен к тетрагидропиранил (ТНР)-полистирольной смоле в мягких кислых условиях (пара-толуолсульфонат пиридиния; PPTS) с получением связанного со смолой сложного аллилового эфира 5, с которого можно снять защитную группу с помощью тетракистрифенилфосфинпалладия и диметилбарбитуровой кислоты с получением промежуточного соединения 6. Защищенную аминокислоту 7 можно получить в соответствии со способом, описанным в публикации международной патентной заявки № WO 2014/009025, описание которой полностью включено в настоящий документ.Затем защищенный амин 7 можно сочетать со связанным со смолой гидроксипролином 6 с получением пептида 8.
Затем пептид 8 можно подвергнуть множественным реакциям сочетания и снятия защитных групп с получением моноциклического промежуточного соединения 9 (схема 2). Аминокислоты FmocAsn(Trt)OH, FmocCys(OTrt)OH, FmocGlyOH, FmodleOH, FmocGlyOH и гексагидропирролоиндол 3 можно использовать в последовательных реакциях твердофазного сочетания с получением промежуточного соединения 9. Каждую аминокислоту можно сочетать с использованием РуВОР/НОВТ в дихлорметане и диметилформамиде (DMF) в присутствии диизопропилэтиламина (DIEA), Снятие защитной группы можно выполнить с помощью 20% пиперидина в DMF.
После окончательной реакции сочетания промежуточное соединение 9 можно отщепить от твердофазной смолы-носителя трифторуксусной кислотой в присутствии триизопропилсилана с получением пептида 10. Обработка 10 дифенилфосфорилазидом (DPPA) и DIEA-индуцированная макроциклизация и снятие защитной группы аммиачным метанолом обеспечили получение производного аматоксин а 11 (т.е. формула Va, где Q=S).
Конъюгат малеимидсгексил-аматоксин 14 можно получить из соединения 11 согласно схеме 3. Аддукт Дильса-Альдера 12 можно получить из малеимида и 2,5-диметилфурана, а затем алкилировать 1,6-дибромгексаном с получением защищенного линкера 13. Соединение 11 можно алкилировать соединением 13 в диметилсульфоксиде (DMSO) в присутствии гидроксида натрия с последующим нагреванием до 100°С в DMSO с получением конъюгата аматоксин-линкер 14, Процедуры получения соединений 12 и 13, а также О-алкилирования родственного аматоксина (α-аманитина) ранее описаны в публикации заявки на выдачу патента США №2018/0043033, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Антитела
Композиции и способы ADC, раскрытые в настоящем документе, содержат агент для облегчения селективной доставки таких ADC к популяции клеток в целевых тканях (например, раковых или опухолевых клеток или гемопоэтических стволовых клеток ниши стволовых клеток костного мозга), Специфичность ADC в отношении клеточной мишени определяется антиген связывающим белком, таким как антитело или его антигенсвязывающая часть.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение включает в себя ADC, содержащие антитела и их антиген связывающие фрагменты, которые специфически связываются со следующим: человеческий CD45, CD49d (VLA-4), CD49f(VLA-6), CD51, CD84, CD90, CD117, CD133, CD134, CD184(CXCR4), HLA-DR, CD11a, CD18, CD34, CD41/61, CD43, CD58, CD71, CD97, CD162, CD 166, CD205 и CD361, CD13, CD33, CD34, CD44, CD 4, CD59, CD84/CD150, CD90Ahyl, CD93, CD105/эндоглин, CD123/IL-3R, CD126/IL-6R, CD133, рецептор CD135/Flt3, CD166/ALCAM, проминин 2, эритропоэтин R, молекула селективной адгезии эндотелиальных клеток, CD244, Tie1, Tie2, MPL, G-CSFR, CSF3R, IL-1R, gp130, рецептор фактора ингибирования лейкоза, рецептор онкостатина М, эмбигин и IL-18R, Другие примеры антигенов, которые могут быть связаны ADC, раскрытыми в настоящем документе, включают в себя без ограничения CD7, CDw12, CD13, CD15, CD19, CD21, CD22, CD29, CD30, CD33, CD34, CD36, CD38, CD40, CD41, CD42a, CD42b, CD42c, CD42d, CD43, CD45RA, CD45RB, CD45RC, CD45RO, CD48, CD49b, CD49d, CD49e, CD49f, CD50, CD53, CD55, CD64a, CD68, CD71, CD72, CD73, CD81, CD82, CD85A, CD85K, CD90, CD99, CD104, CD105, CD109, CD110, CD111, CD112, CD114, CD115, CD123, CD124, CD126, CD127, CD130, CD131, CD133, CD135, CD138, CD151, CD157, CD162, CD164, CD168, CD172a, CD173, CD174, CD175, CD175s, CD176, CD183, CD191, CD200, CD201, CD205, CD217, CD220, CD221, CD222, CD223, CD224, CD225, CD226, CD227, CD228, CD229, CD230, CD235a, CD235b, CD236, CD236R, CD238, CD240, CD242, CD243, CD277, CD292, CDw293, CD295, CD298, CD309, CD318, CD324, CD325, CD338, CD344, CD349 или CD350. Другие примеры антигенов, которые могут быть связаны ADC, раскрытыми в настоящем документе, включают в себя без ограничения CD11a, CD18, CD37, CD47, CD52, CD58, CD62L, CD69, CD74, CD97, CD103, CD132, CD156a, CD179a, CD79b, CD184, CD232, CD244, CD252, CD302, CD305, CD317 и CD361.
Согласно определенным вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в описанном в настоящем документе ADC характеризуется определенной скоростью диссоциации, которая является особенно благоприятной при использовании в качестве части конъюгата. Например, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 характеризуется константой скорости диссоциации (Koff) для CD117 человека и/или CD117 макака-резуса, составляющей 1×10-2 - 1×10-3, 1×10-3 - 1×10-4, 1×10-5 - 1×10-6, 1×10-6 - 1×10-7 или 1×10-7 - 1×10-8, как измерено с помощью биослойной интерферометрии (BLI). Согласно некоторым вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывают антиген клеточной поверхности (например, CD117 человека и/или CD117 макака-резуса) с KD, составляющей приблизительно 100 нМ или меньше, приблизительно 90 нМ или меньше, приблизительно 80 нМ или меньше, приблизительно 70 нМ или меньше, приблизительно 60 нМ или меньше, приблизительно 50 нМ или меньше, приблизительно 40 нМ или меньше, приблизительно 30 нМ или меньше, приблизительно 20 нМ или меньше, приблизительно 10 нМ или меньше, приблизительно 8 нМ или меньше, приблизительно 6 нМ или меньше, приблизительно 4 нМ или меньше, приблизительно 2 нМ или меньше, приблизительно 1 нМ или меньше, как определено анализом биослойной интерферометрии (BLI).
Антитела к CD117
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение предусматривает ADC, содержащие антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с CD117, таким как GNNK+ CD117. Такие ADC можно использовать в качестве терапевтических агентов, например, (i) для лечения рака и аутоиммунных заболеваний, характеризующихся клетками CD117+, и (И) для стимулирования приживления трансплантированных гемопоэтических стволовых клеток у пациента, нуждающегося в трансплантационной терапии. Эти терапевтические активности могут быть вызваны, например, связыванием выделенных антител к CD117, их антигенсвязывающих фрагментов, которые связываются с CD117 (например, GNNK+ CD117), экспрессируемым на поверхности клетки, такой как раковая клетка, аутоиммунная клетка или гемопоэтическая стволовая клетка, и впоследствии вызывая гибель клеток. Истощение эндогенных гемопоэтических стволовых клеток может обеспечить нишу, в которую могут попасть трансплантированные гемопоэтические стволовые клетки и впоследствии установить продуктивный гемопоэз. Таким образом, трансплантированные гемопоэтические стволовые клетки могут успешно приживаться у пациента, такого как пациент-человек, страдающий заболеванием стволовых клеток, описанным в настоящем документе.
Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, способные связывать CD117 человека (также называемые c-Kit, эталонная последовательность мРНК NCBI: NM_000222.2, эталонная последовательность белка NCBI: NP_000213.1), включая в себя те, которые способны связывать GNNK+ CD117, можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, чтобы подготовить пациента к терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток. Полиморфизмы, влияющие на кодирующую область или внеклеточный домен CD117 у значительного процента населения, в настоящее время малоизвестны при неонкологических показаниях. Идентифицировано по меньшей мере четыре изоформы CD117 с потенциалом дополнительных изоформ, экспрессируемых в опухолевых клетках. Две изоформы CD117 расположены во внутриклеточном домене белка, а две присутствуют во внешней прилегающей к мембране области. Две внеклеточные изоформы, GNNK+ и GNNK-, различаются наличием (GNNK+) или отсутствием (GNNK-) 4-х аминокислотной последовательности. Сообщается, что эти изоформы обладают одинаковой аффинностью к лиганду (SCF), но, как сообщается, связывание лиганда с изоформой GNNK- увеличивает интернализацию и деградацию. Изоформу GNNK+можно использовать в качестве иммуногена для создания антител, способных связывать CD117, поскольку антитела, генерируемые против этой изоформы, будут охватывать белки GNNK+ и GNNK-. Аминокислотные последовательности изоформ 1 и 2 CD117 человека описаны в SEQ ID NO: 145 и 146 соответственно. Согласно определенным вариантам осуществления антитела к CD117 человека (hCD117), раскрытые в настоящем документе, способны связываться как с изоформой 1, так и с изоформой 2 CD117 человека.
Как описано ниже, был проведен скрининг дрожжевой библиотеки антител человека для идентификации новых антител к CD117 и их фрагментов, имеющих диагностическое и терапевтическое применение. Антитело 54 (Ab54), антитело 55 (Ab5), антитело 56 (Ab56), антитело 57 (Ab57), антитело 58 (Ab58), антитело 61 (Ab61), антитело 66 (Ab66), антитело 67 (Ab67), антитело 68 (Ab68) и антитело 69 (Ab69) представляли собой антитела человека, которые были идентифицированы в этом скрининге. Эти антитела перекрестно реагируют с CD117 человека и CD117 макака-резуса. Кроме того, эти описанные в настоящем документе антитела способны связываться с обеими изоформами CD117 человека, то есть с изоформой 1 (SEQ ID NO: 145) и изоформой 2 (SEQ ID NO: 146).
Аминокислотные последовательности для различных областей связывания антител к CD117, включая в себя Ab54, Ab55, Ab56, Ab57, Ab58, Ab61, Ab66, Ab67, Ab68 и Ab69, описаны в таблице последовательностей ниже. В настоящее изобретение включены ADC, содержащие человеческие антитела к CD117, содержащие CDR, как указано в таблице последовательностей ниже, а также человеческие антитела к CD117, содержащие вариабельные области, указанные в таблице последовательностей ниже.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 55. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 55 (т.е. Ab55) представлена в SEQ ID NO: 19 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 55 представлены в SEQ ID NO: 21 (VH CDR1); SEQ ID NO: 22 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 23 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 55 описана в SEQ ID NO: 20 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 55 представлены в SEQ ID NO: 24 (VL CDR1); SEQ ID NO: 25 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 26 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 55 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 55 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 21, 22 и 23, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 24, 25 и 26. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 20, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 19.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 54. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 54 (т.е. Ab54) представлена в SEQ ID NO: 29 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 54 представлены в SEQ ID NO: 31 (VH CDR1); SEQ ID NO: 32 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 33 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 54 описана в SEQ ID NO: 30 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 54 представлены в SEQ ID NO: 34 (VL CDR1); SEQ ID NO: 35 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 36 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 54 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 54 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 31, 32 и 33, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 34, 35 и 36. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 30, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 29.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 56. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 56 (т.е. Ab56) представлена в SEQ ID NO: 39 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 56 представлены в SEQ ID NO: 41 (VH CDR1); SEQ ID NO: 42 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 43 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 56 описана в SEQ ID NO: 40 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 56 представлены в SEQ ID NO: 44 (VL CDR1); SEQ ID NO: 45 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 46 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 56 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 56 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 41, 42 и 43, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 44, 45 и 46. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 40, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 39.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 57. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 57 (т.е. Ab57) представлена в SEQ ID NO: 49 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 57 представлены в SEQ ID NO: 51 (VH CDR1); SEQ ID NO: 52 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 53 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 57 описана в SEQ ID NO: 50 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 57 представлены в SEQ ID NO: 54 (VL CDR1); SEQ ID NO: 55 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 56 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 57 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 57 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 51, 52 и 53, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 54, 55 и 56. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 50, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 49.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 58. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 58 (т.е. Ab58) представлена в SEQ ID NO: 59 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 58 представлены в SEQ ID NO: 61 (VH CDR1); SEQ ID NO: 62 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 63 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 58 описана в SEQ ID NO: 60 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 58 представлены в SEQ ID NO: 64 (VL CDR1); SEQ ID NO: 65 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 66 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 58 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 58 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 61, 62 и 63, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 64, 65 и 66. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 60, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 59.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 61. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 61 (т.е. Ab61) представлена в SEQ ID NO: 69 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 61 представлены в SEQ ID NO: 71 (VH CDR1); SEQ ID NO: 72 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 73 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 61 описана в SEQ ID NO: 70 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 61 представлены в SEQ ID NO: 74 (VL CDR1); SEQ ID NO: 75 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 76 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 61 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 61 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 71, 72 и 73, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 74, 75 и 76. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 70, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 69.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 66. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 66 (т.е. Ab66) представлена в SEQ ID NO: 79 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 66 представлены в SEQ ID NO: 81 (VH CDR1); SEQ ID NO: 82 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 83 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 66 описана в SEQ ID NO: 80 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 66 представлены в SEQ ID NO: 84 (VL CDR1); SEQ ID NO: 85 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 86 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 66 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 66 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 81, 82 и 83, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 84, 85 и 86. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 80, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 79.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 67. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 67 представлена в SEQ ID NO: 9 (см. таблицу 2). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 67 представлены в SEQ ID NO 11 (VH CDR1); SEQ ID NO: 12 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 13 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 67 описана в SEQ ID NO: 10 (см. таблицу 2). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 67 представлены в SEQ ID NO 14 (VL CDR1); SEQ ID NO: 15 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 16 (VL CDR3). Полноразмерная тяжелая цепь (НС) антитела 67 представлена в SEQ ID NO: 110, и константная область полноразмерной тяжелой цепи антитела 67 представлена в SEQ ID NO: 122. Легкая цепь (LC) антитела 67 представлена в SEQ ID NO: 109. Константная область легкой цепи антитела 67 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 11, 12 и 13, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 14, 15 и 16. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 10. Согласно дополнительным вариантам осуществления антитело к CD117 содержит тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 110, и легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 109.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 68. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 68 (т.е. Ab68) представлена в SEQ ID NO: 89 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 68 представлены в SEQ ID NO: 91 (VH CDR1); SEQ ID NO: 92 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 93 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 68 описана в SEQ ID NO: 90 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 68 представлены в SEQ ID NO: 94 (VL CDR1); SEQ ID NO: 95 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 96 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 68 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 68 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 91, 92 и 93, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 94, 95 и 96. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 90, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 89.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 69. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 69 (т.е. Ab69) представлена в SEQ ID NO: 99 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 69 представлены в SEQ ID NO: 101 (VH CDR1); SEQ ID NO: 102 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 103 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 69 описана в SEQ ID NO: 100 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 69 представлены в SEQ ID NO: 104 (VL CDR1); SEQ ID NO: 105 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 106 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 69 представлена в SEQ ID NO: 122. Константная область легкой цепи антитела 69 представлена в SEQ ID NO: 121. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 101, 102 и 103, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 104, 105 и 106. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 100, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 99.
Кроме того, аминокислотные последовательности для различных областей связывания антител к CD117 Ab77, Ab79, Ab81, Ab85, Ab86, Ab87, Ab88 и Ab89 описаны в таблице последовательностей, представленной ниже. Антитела к CD117, характеризующиеся этими последовательностями, также можно использовать в ADC, описанных в настоящем документе.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 77. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 77 (т.е. Ab77) представлена в SEQ ID NO: 147 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 77 представлены в SEQ ID NO: 263 (VH CDR1); SEQ ID NO: 2 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 3 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 77 описана в SEQ ID NO: 231 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 77 представлены в SEQ ID NO: 264 (VL CDR1); SEQ ID NO: 265 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 266 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 77 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 77 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 263, 2 и 3, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 264, 265 и 266. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 231, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 147.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 79. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 79 (т.е. Ab79) представлена в SEQ ID NO: 147 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 79 представлены в SEQ ID NO: 263 (VH CDR1); SEQ ID NO: 2 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 3 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 79 описана в SEQ ID NO: 233 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 79 представлены в SEQ ID NO: 267 (VL CDR1); SEQ ID NO: 265 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 266 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 79 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 79 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 263, 2 и 3, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 267, 265 и 266. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 233, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 147.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 81. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 81 (т.е. Ab81) представлена в SEQ ID NO: 147 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 81 представлены в SEQ ID NO: 263 (VH CDR1); SEQ ID NO: 2 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 3 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 81 описана в SEQ ID NO: 235 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 81 представлены в SEQ ID NO: 264 (VL CDR1); SEQ ID NO: 268 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 266 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 81 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 81 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 263, 2 и 3, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 264, 268 и 266. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 235, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 147.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 85. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 85 (т.е. Ab86) представлена в SEQ ID NO: 243 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 85 представлены в SEQ ID NO: 245 (VH CDR1); SEQ ID NO: 246 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 247 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 85 описана в SEQ ID NO: 242 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 85 представлены в SEQ ID NO: 248 (VL CDR1); SEQ ID NO: 249 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 250 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 85 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 85 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 245, 246 и 247, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 248, 249 и 250. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 244, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 243.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 86. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 86 (т.е. Ab86) представлена в SEQ ID NO: 251 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 86 представлены в SEQ ID NO: 245 (VH CDR1); SEQ ID NO: 253 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 3 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 86 описана в SEQ ID NO: 252 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 86 представлены в SEQ ID NO: 254 (VL CDR1); SEQ ID NO: 249 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 255 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 86 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 86 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 245, 253 и 3, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 254, 249 и 255. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 252, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 251.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 87. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 87 (т.е. Ab87) представлена в SEQ ID NO: 243 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 87 представлены в SEQ ID NO: 245 (VH CDR1); SEQ ID NO: 246 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 247 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 87 описана в SEQ ID NO: 256 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 87 представлены в SEQ ID NO: 257 (VL CDR1); SEQ ID NO: 5 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 255 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 87 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 87 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 245, 246 и 247, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 257, 5 и 255. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 256, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 243.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 88. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 88 (т.е. Ab88) представлена в SEQ ID NO: 258 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 88 представлены в SEQ ID NO: 245 (VH CDR1); SEQ ID NO: 259 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 3 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 88 описана в SEQ ID NO: 256 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 88 представлены в SEQ ID NO: 257 (VL CDR1); SEQ ID NO: 5 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 255 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 88 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 88 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 245, 259 и 3, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 257, 5 и 255. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 256, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 258.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 89. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 89 (т.е. Ab89) представлена в SEQ ID NO: 260 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 89 представлены в SEQ ID NO: 245 (VH CDR1); SEQ ID NO: 2 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 3 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 89 описана в SEQ ID NO: 252 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 89 представлены в SEQ ID NO: 254 (VL CDR1); SEQ ID NO: 249 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 255 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 89 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 89 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 245, 2 и 3, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 254, 249 и 255. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 252, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 260.
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к ADC, содержащему антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие области связывания, например, CDR, вариабельные области, соответствующие таковым антитела 249. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) антитела 249 (т.е. Ab249) представлена в SEQ ID NO: 238 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VH CDR антитела 249 представлены в SEQ ID NO: 286 (VH CDR1); SEQ ID NO: 2 (VH CDR2) и SEQ ID NO: 287 (VH CDR3). Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) антитела 249 описана в SEQ ID NO: 242 (см. таблицу последовательностей). Аминокислотные последовательности домена VL CDR антитела 249 представлены в SEQ ID NO: 288 (VL CDR1); SEQ ID NO: 249 (VL CDR2) и SEQ ID NO: 289 (VL CDR3). Константная область тяжелой цепи антитела 249 представлена в SEQ ID NO: 269. Константная область легкой цепи антитела 249 представлена в SEQ ID NO: 283. Таким образом, согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит набор CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDR1, CDR2 и CDR3), как представлено в SEQ ID NO: 286, 2 и 287, и набор CDR вариабельной области легкой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 288, 249 и 289. Согласно другим вариантам осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотные остатки, представленные в SEQ ID NO: 242, и вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в SEQ ID NO: 238.
Кроме того, в настоящее раскрытие включены конъюгаты антитела к CD117 с лекарственным средством (ADC), содержащие области связывания (CDR тяжелой и легкой цепей или вариабельные области), как представлено в SEQ ID NO: 147 - 168. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 148. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 149. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 150. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 151. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 152. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 153. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 154. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 155. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 156. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 157. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 158. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 159. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 160. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 161. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 162. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 163. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 164, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 165. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 166, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 167. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 168, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 169. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 170, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 171. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 172, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 173. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 174, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 175. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 176, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 177. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 178, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 179. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 180, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 181. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 172, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 182. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 183, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 184. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 185, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 186. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 187, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 188. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 189, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 190. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 191, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 192. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 193, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 194. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 195, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 196. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 197, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 198. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 199, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 200. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 201, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 190. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 202, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 203. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 204, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 205. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 206, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 207. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 208, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 209. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 210, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 211. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 212, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 213. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 214, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 215. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 216, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 217. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 218, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 219. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 220, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 221. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 222, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 223. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 224, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 225. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 226, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 227. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 228. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 229. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 230. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 231. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 232. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 233. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 234. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 235. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 236.
Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть ADC, описанного в настоящем документе, содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 237. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 243, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 244. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 251, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 252. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 243, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 256. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 258, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 256. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 260, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 252. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 238, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 239. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 239. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 147, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 240. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 238, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 241. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающая часть содержит вариабельную область тяжелой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 238, и вариабельную область легкой цепи, как представлено в аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NO: 242.
Некоторые из антител к CD117, описанных в настоящем документе, являются нейтральными антителами, поскольку эти антитела существенно не ингибируют активность CD117 в клетке, экспрессирующей CD117. Нейтральные антитела могут быть идентифицированы, например, с использованием in vitro анализа пролиферации клеток, зависимой от фактора стволовых клеток (SCF). В анализе SCF-зависимой пролиферации клеток нейтральное антитело к CD117 не будет убивать клетки CD34+, которые зависят от SCF для деления, поскольку нейтральное антитело не будет блокировать связывание SCF с CD117, например, для ингибирования активности CD117.
Нейтральные антитела можно использовать для диагностических целей, учитывая их способность специфически связываться с CD117 человека, но они также эффективны для уничтожения экспрессирующих CD117 клеток при конъюгировании с цитотоксином, таким как описанные в настоящем документе. Как правило, антитела, используемые в конъюгатах, обладают агонистической или антагонистической активностью, уникальной для антитела. Однако в настоящем документе описан уникальный подход к конъюгатам, особенно в контексте, когда конъюгат используется в качестве кондиционирующего агента перед трансплантацией стволовых клеток. Хотя антагонистические антитела сами по себе или в комбинации с цитотоксином в качестве конъюгата могут быть эффективными, учитывая уничтожающую способность антитела отдельно в дополнение к цитотоксину, кондиционирование конъюгатом, содержащим нейтральное антитело к CD117, представляет собой альтернативную стратегию, при которой активность антитело является вторичной по отношению к действию цитотоксина, но характеристики интернализации и аффинности, например скорость диссоциации, антитела важны для эффективной доставки цитотоксина.
Примеры нейтральных антител к CD117 включают в себя Ab58, Ab61, Ab66, Ab67, Ab68 и Ab69. Сравнение аминокислотных последовательностей CDR нейтральных антител к CD117 выявляет консенсусные последовательности между двумя группами идентифицированных нейтральных антител. Ab58 и Ab61 имеют одни и те же CDR легкой цепи и CDR3 НС с небольшими вариациями в НС CDR1 и НС CDR2. Консенсусные последовательности для НС CDR1 и CDR2 описаны в SEQ ID NO: 133 и 134. Ab66, Ab67, Ab68 и Ab69 также являются нейтральными антителами. Хотя Ab66, Ab67, Ab68 и Ab69 имеют одни и те же CDR легкой цепи и одни и те же НС CDR3, эти антитела имеют вариабельность в пределах их областей НС CDR1 и НС CDR2. Консенсусные последовательности для этих антител в областях НС CDR1 и НС CDR2 представлены в SEQ ID NO: 139 и 140 соответственно.
В настоящем документе также представлены антагонистические антитела, включая в себя Ab54, Ab55, Ab56 и Ab57. Хотя Ab54, Ab55, Ab56 и Ab57 имеют одни и те же CDR легкой цепи и одни и те же НС CDR3, эти антитела обладают вариабельностью в пределах их областей НС CDR1 и НС CDR2. Консенсусные последовательности для этих антител в областях НС CDR1 и НС CDR2 представлены в SEQ ID NO: 127 и 128 соответственно.
Согласно одному варианту осуществления антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельные области с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере на 95%, 96%, 97% или 99% идентична SEQ ID NO, раскрытым в данном документе. Альтернативно, антитело к CD117 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат CDR, содержащие SEQ ID NO, раскрытые в настоящем документе, с каркасными областями вариабельных областей, описанных в настоящем документе, с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере на 95%, 96%, 97% или 99% идентична SEQ ID NO, раскрытым в настоящем документе.
Описанные в настоящем документе антитела к CD117 могут быть в форме полноразмерных антител, биспецифических антител, антител с двумя вариабельными доменами, многоцепочечных или одноцепочечных антител и/или связывающих фрагментов, которые специфически связывают CD117 человека, включая в себя без ограничения Fab, Fab', (Fab')2, Fv), scFv (одноцепочечный Fv), сурротела (включая в себя конструкцию суррогатной легкой цепи), однодоменные антитела, верблюжьи антитела и тому подобное. Они также могут относиться или быть производными любого изотипа, включая в себя, например, IgA (например, IgA1 или IgA2), IgD, IgE, IgG (например, IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4) или IgM. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD117 представляет собой IgG (например, IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4).
Антитела для использования в сочетании с описанными в настоящем документе способами включают в себя варианты этих антител, описанных выше, такие как фрагменты антител, которые содержат или не содержат домен Fc, а также гуманизированные варианты не относящихся к человеку антител, описанных в настоящем документе, и антителоподобные белковые каркасы (например, домены 10Fn3), содержащие одну или несколько, или все CDR или их эквивалентные области антитела или фрагмента антитела, описанных в настоящем документе. Иллюстративные антигенсвязывающие фрагменты вышеуказанных антител включают в себя двойной вариабельный домен иммуноглобулина, одноцепочечную молекулу Fv (scFv), диатело, триатело, нанотело, антителоподобный белковый каркас, фрагмент Fv, фрагмент Fab, молекула F(ab')2 и тандемный ди-scFv, среди прочих.
Согласно одному варианту осуществления предусмотрены антитела к CD117, содержащие одну или несколько радиоактивно меченных аминокислот. Радиоактивно меченые антитела к CD117 можно использовать как для диагностических, так и для терапевтических целей (еще одна возможная особенность - конъюгация с радиоактивно меченными молекулами). Неограничивающие примеры меток для полипептидов включают в себя без ограничения 3Н, 14С, 15N, 35S, 90Y, 99Тс и 125I, 131I и 186Re. Способы получения радиоактивно меченных аминокислот и родственных производных пептидов известны в настоящей области техники (см., например, Junghans et al., в Cancer Chemotherapy and Biotherapy 655-686 (2-е изд., Chafner and Longo, eds., Lippincott Raven (1996)) и патент США №4681581, патент США №4735210, патент США №5101827, патент США №5102990 (US RE35500), патент США №5648471 и патент США №5697902. Например, радиоизотоп можно конъюгировать с помощью метода с использованием хлорамина Т.
Антитела к CD45
Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение предусматривает ADC, содержащие антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с полипептидом CD45, например полипептидом CD45 человека, и их применения. Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с полипептидом CD45, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи.
CD45 представляет собой специфическую для гемопоэтических клеток трансмембранную протеинтирозинфосфатазу, необходимую для передачи сигналов, опосредованной рецептором антигена Т- и В-клеток. CD45 включает в себя большой внеклеточный домен и цитозольный домен, содержащий фосфатазу. CD45 может действовать как положительный, так и отрицательный регулятор в зависимости от природы стимула и типа задействованных клеток. Хотя существует большое количество возможных пермутаций в гене CD45, у людей традиционно идентифицируются только шесть изоформ. Изоформы представляют собой RA, RO, RB, RAB, RBC и RABC (Hermiston et al. 2003 «CD45: a critical regulator of signaling thresholds in immune cells.» Annu Rev Immunol. 2: 107-137). CD45RA экспрессируется на наивных Т-клетках, a CD45RO экспрессируется на активированных Т-клетках и Т-клетках памяти, некоторых субпопуляциях В-клеток, активированных моноцитах/макрофагах и гранулоцитах. CD45RB экспрессируется на периферических В-клетках, наивных Т-клетках, тимоцитах, слабо - на макрофагах и дендритных клетках.
Согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD45 выбрано из апамистамаба (также известного 90Y-BC8, Iomab-B, ВС8; как описано, например, в US 20170326259, WO 2017155937 и Orozco et al. Blood. 127.3 (2016): 352-359) или BC8-B10 (как описано, например, в Li et al. PloS one 13.10 (2018): e0205135), каждый из которых включен посредством ссылки. Другие антитела к CD45 описаны, например, в WO 2003048327, WO 2016016442, US 20170226209, US 20160152733, US 9701756; US 20110076270 или US 7825222, причем каждый из документов включен посредством ссылки.
Антитела к CD137
Настоящее изобретение предусматривает ADC, содержащие антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с полипептидом CD137, например полипептидом CD137 человека, и их применения. Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с полипептидом CD137, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи.
Было показано, что Т-клетки экспрессируют CD137, поскольку этот антиген является суперсемейством трансмембранных рецепторов TNF костимулирующих молекул и экспрессируется на различных гемопоэтических клетках, способствует активации Т-клеток и регулирует пролиферацию и выживание Т-клеток (см., например, Cannons et al., J. Immunol. 167: 1313-1324, 2001, описание которой включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к экспрессии CD137 Т-клетками). CD137 альтернативно называют представителем суперсемейства рецепторов фактора некроза опухолей 9 (TNFRSF9), 4-1ВВ или он индуцируется активацией лимфоцитов (ILA).
Согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD137 выбрано из следующего: ADG106 (как описано, например, в US 20190055314, WO 2019037711, WO 2019036855); AGEN2373 (как описано, например, в WO 2018191502, US 20180344870); ATOR-1017 (как описано, например, в WO 2018091740, US 20180118841) РЕ0166 (как описано, например, в Song et al. AACR 2019, реферат 2397/21), урелумаб (также известный как BMS-663513; как описано, например, в WO 2004010947, WO 2005035584, US 20090068192, US 7659384, US 8475790, US 8137667, US 20100183621, US 8716452, US 20120141494, US 9382328, US 20140193422, WO 2016029073, US 20160368998, WO 2017181034, US 20190062445, Chin et al. Nature communications. 9.1 (2018): 4679.; Segal et al. Clinical Cancer Research. 23.8 (2017): 1929-1936); и утомилумаб (также известный как PF-05082566, MOR-7480; как описано, например, в WO 2012032433, US 20120237498, US 20140178368, WO 2012145183, WO 2015119923, WO 2015179236, US 20160152722, US 20190031765, WO 2017130076, Chin et al. Nature communications. 9.1 (2018): 4679.; Segal et al. Clinical Cancer Research. 24.8 (2018): 1816-1823; Fisher et al. Cancer Immunology, Immunotherapy. 61.10 (2012): 1721-1733), причем каждый из документов включен посредством ссылки.
Другие антитела в CD137 были описаны, например, в WO 2018134787, WO 2019020774, WO 2017077085, US 20180327504, US 20190099488, US 2019006045, US 20190015508, WO 2019014328, US 20190071510, WO 2018127787, US 20180258177, US 10174122, WO 2016110584, WO 2018017761, WO 2018098370, US 20130149301, WO 2019027754, WO 2018156740, US 20160244528, WO 2016134358, US 10233251, US 20170226215, US 20160083474, WO 2017049452, US 20180282422, WO 2015188047, WO 2010132389, US 20120076722, US 20110177104, WO 2011031063, US 20080305113, US 20080008716, US 7829088, US 20090041763, WO 2006126835, Soderstromet al. Circulation J. 81.12 (2017): 1945-1952; Makkouk, et al. Annals of Oncology 28.2 (2016): 415-420; Martinez-Forero et al. J. of Immunology. 190.12 (2013): 6694-6706; Dubrotetal. Cancer immunology, immunotherapy. 59.8 (2010): 1223-1233; причем каждый из документов включен посредством ссылки.
Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с антителом к CD137 в настоящем документе, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с антителом к CD137 в настоящем документе. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит модифицированную вариабельную область тяжелой цепи (НС), содержащую вариабельный домен НС антитела к CD137 в настоящем документе или его варианта, причем вариант (i) отличается от антитела к CD137 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от антитела к CD137 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от антитела к CD137 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичной антителу к CD137, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область тяжелой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью тяжелой цепи антитела к CD137, при сохранении специфичности связывания CD137 антитела.
Согласно одному варианту осуществления антитело к CD137, которое можно использовать в способах и композициях (включая в себя ADC), описанных в настоящем документе, представляет собой мышиное антитело к CD137 BBK2 (Thermo Fisher; MS621PABX) или антитело к CD137, содержащее антигенсвязывающие области, соответствующие антителу BBK2. Антитело BBK2 (которое также может называться антителом BBK-2 или антителом к 4-1ВВ) представляет собой мышиное моноклональное антитело (IgG1, каппа), которое связывается с эктодоменом рекомбинантного белка 4-1ВВ человека (4-1ВВ также известен как CD137). Согласно определенным вариантам осуществления способы и композиции согласно настоящему раскрытию включают в себя антитело к CD137, содержащее области связывания (например, CDR) антитела BBK2. Согласно другому варианту осуществления способы и композиции согласно настоящему раскрытию содержат антитело, которое конкурентно ингибирует связывание антитела BBK2 с его эпитопом на CD137. Согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD137 представляет собой гуманизированный BBK2 или химерный BBK2.
Согласно одному варианту осуществления описанные в настоящем документе способы и композиции включают в себя химерное антитело к CD137 (ch-BBK2), содержащее вариабельные области тяжелой и легкой цепи BBK2. Согласно определенным вариантам осуществления химерное антитело BBK2 представляет собой антитело IgG1, содержащее константные области человека. Аминокислотная последовательность тяжелой цепи ch-BBK2 описана в SEQ ID NO: 290, а аминокислотная последовательность легкой цепи ch-BBK2 описана в SEQ ID NO: 291. Области CDR (CDR1, CDR2 и CDR3) каждой из последовательностей тяжелой и легкой цепей описаны ниже жирным шрифтом. Области CDR BBK2 могут быть определены согласно нумерации Kabat. CDR, как определено согласно нумерации Kabat, описаны ниже для каждой из последовательностей тяжелой и легкой цепи (выделены жирным шрифтом ниже). Вариабельные области BBK2 выделены курсивом.
Таким образом, согласно одному варианту осуществления аминокислотные последовательности VH CDR антитела к CD137 BBK2 (включая в себя ch-BBK2) являются следующими: SYWIN (VH CDR1; SEQ ID NO: 292); NIYPSDSYTNYNQKFKD (VH CDR2; SEQ ID NO: 293) и NGVEGYPHYYAMEY (VH CDR3; SEQ ID NO: 294), и аминокислотные последовательности VL CDR антитела к CD137 BBK2 (включая в себя ch-BBK2) являются следующими: RASQDLSNHLY (VL CDR1; SEQ ID NO: 295); YTSRLHS (VL CDR2; SEQ ID NO: 296) и QQGYTLPYT (VL CDR3; SEQ ID NO: 297).
Вариабельная область тяжелой цепи BBK2 представлена в SEQ ID NO: 298 как
. Легкая цепь вариабельный область ВВК2 представлена в SEQ ID NO: 299 как 
Антитела к CD137 (включая в себя ADC против CD137) могут содержать аминокислотные последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, как представлено в SEQ ID NO: 298 и 299 соответственно.
Согласно одному варианту осуществления антитело к CD137, например, химерное антитело (ch-BBK2) или гуманизированное антитело BBK2, содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 292, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 293, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 294; и содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 295, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 296, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 297.
Согласно одному варианту осуществления антитело к CD137, например, химерное антитело (ch-BBK2) или гуманизированное антитело BBK2, содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 292, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 293, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 294; и содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 295, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 296, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 297.
Таким образом, антитела BBK2, гуманизированные антитела BBK2 или химерные антитела BBK2 можно использовать в ADC против CD137 и в способах, описанных в настоящем документе. Каждое из этих антител может быть конъюгировано с любым цитотоксином, описанным ниже, с использованием способов, известных в настоящей области техники, и тех, которые описаны в настоящем документе.
Антитела к CD5
Согласно определенным вариантам осуществления описанные в настоящем документе композиции и способы включают в себя ADC, содержащий антитело или его фрагмент, которые специфически связываются с CD5 человека. CD5 человека также обозначается как LEU1 или T1. CD5 человека представляет собой трансмембранный гликопротеин типа I, обнаруженный на поверхности тимоцитов, Т-лимфоцитов и подгруппы В-лимфоцитов. Идентифицированы две изоформы CD5 человека. Изоформа 1 содержит 438 аминокислот и описана у Jones, et al. (1988) Nature 323 (6086), 346-349 и ниже (эталонная последовательность NCBI: NP_001333385.1):
Было показано, что Т-клетки экспрессируют CD5, который представляет собой молекулу клеточной адгезии и участвует как в пролиферативном ответе активированных Т-клеток, так и в хелперной функции Т-клеток. Также было показано, что он действует как рецептор, доставляя костимулирующие сигналы к Т-клеткам, взаимодействуя с CD72, белком клеточной поверхности, уникальным для В-клеток. Антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают CD5, могут подавлять активацию Т-клеток и опосредованные Т-клетками иммунные ответы против трансплантатов гемопоэтических стволовых клеток, например, путем ингибирования взаимодействия между CD5 и CD72. Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают CD5, также могут быть использованы для прямого уничтожения CD5+ Т-клеток, например, путем конъюгирования антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с цитотоксином (таким как цитотоксин, описанный в настоящем документе или известный в настоящей области техники) или с использованием неконъюгированного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, способного мобилизовать белки комплемента к Т-клетке.
Кроме того, было показано, что субпопуляции активированных В-клеток экспрессируют CD5, и этот паттерн экспрессии особенно распространен среди аутореактивных В-клеток (Werner-Favre et al., European Journal of Immunology 19: 1209-1231 (1989), раскрытие которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки). Было также показано, что CD5 экспрессируется субпопуляциями NK-клеток; особенно среди пациентов с множественной миеломой было показано, что они содержат популяции NK-клеток низкой плотности CD5+ (CD5LOW+), и этот поверхностный антиген участвует в активации NK-клеток (Ishiyama et al., Anticancer Research 14: 725-730 (1994), раскрытие которого полностью включено в настоящий документ посредством ссылки). Таким образом, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связывают CD5, можно использовать для ослабления активации В-клеток и NK-клеток. Антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают CD5, также можно использовать для уничтожения CD5+ В-клеток и NK-клеток напрямую, например, путем конъюгирования антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с цитотоксином (таким как описанный в настоящем документе цитотоксин или известный в настоящей области техники) или с использованием неконъюгированного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, способного мобилизовать белки комплемента к В-клетке или NK-клетке.
Настоящее изобретение предусматривает ADC, содержащие антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с полипептидом CD5, например, полипептидом CD5 человека, и их применения. Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с полипептидом CD5, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи.
Согласно одному варианту осуществления ADC содержит антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 341. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 342. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 343. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 341, SEQ ID NO: 342 и SEQ ID NO: 343. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит две или более VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 341, SEQ ID NO: 342 и SEQ ID NO: 343. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 341, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 342, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 343.
Согласно одному варианту осуществления ADC содержит антитело, содержащее вариабельную область легкой цепи, содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 344. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 345. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 346. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит одну или несколько VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 344, SEQ ID NO: 345 и SEQ ID NO: 346. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит две или более VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 344, SEQ ID NO: 345 и SEQ ID NO: 346. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 344, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 345, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 346.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 341, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 342, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 343, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 344, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 345, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 346.
Согласно определенным вариантам осуществления одна или несколько CDR (т.е. одна или несколько CDR тяжелой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 341-343, и/или одна или несколько CDR легкой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 344-346) могут содержать консервативную аминокислотную замену (или 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен) при сохранении CD5-специфичности антитела (т.е. специфичности, аналогичной антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые содержат CDR тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 341-343, и CDR легкой цепи согласно SEQ ID NO: 344 -346).
Согласно определенным вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой мышиное антитело 5D7 или его гуманизированную версию. Мышиное антитело 5D7 связывается с CD5 человека и описано в патентной публикации США №20008/0245027, содержание которой, относящееся к последовательностям антитела, раскрытым в ней, включено в настоящий документ посредством ссылки. SEQ ID NO: 353-358, описанные в сводной таблице последовательностей, соответствуют CDR мышиного антитела к CD5, 5D7. Гуманизированная версия антитела к CD5, 5D7, описана в SEQ ID NO: 359 (гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи) и SEQ ID NO: 360 (гуманизированная вариабельная область легкой цепи). Согласно одному варианту осуществления ADC и их применения, описанные в настоящем документе, включают в себя антитело, содержащее CDR, представленные в SEQ ID NO: 353-358. Согласно одному варианту осуществления ADC и их применения, описанные в настоящем документе, включают в себя антитело, содержащее вариабельные области тяжелой и легкой цепей, как представлено в SEQ ID NO: 359 и 360 соответственно.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 359. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 359, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 359. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит модифицированную вариабельную область тяжелой цепи (НС), содержащую вариабельный домен НС, содержащий SEQ ID NO: 359, или вариант SEQ ID NO: 359, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 359 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 359 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 359 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO: 359, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область тяжелой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 359, при сохранении специфичности связывания CD5 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 359.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 360. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 360, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 360. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит модифицированную вариабельную область легкой цепи (LC), содержащую вариабельный домен LC, содержащий SEQ ID NO: 360, или вариант SEQ ID NO: 360, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 360 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 360 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 360 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO: 360, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область легкой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью легкой цепи согласно SEQ ID NO: 360, при сохранении специфичности связывания CD5 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 360.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 359, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 359, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 360, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 360. Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 359, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 360.
Согласно другому варианту осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент может содержать вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 353. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 354. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 355. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 353, SEQ ID NO: 354 и SEQ ID NO: 355. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит две или более VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 353, SEQ ID NO: 354 и SEQ ID NO: 355. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 353, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 354, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 355.
Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 356. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 357. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 358. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит одну или несколько VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 356, SEQ ID NO: 357 и SEQ ID NO: 358. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит две или более VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 356, SEQ ID NO: 357 и SEQ ID NO: 358. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 356, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 357, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 358.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 353, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 354, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 355, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 356, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 357, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 358.
Согласно определенным вариантам осуществления одна или несколько CDR (т.е. одна или несколько CDR тяжелой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 353-355, и/или одна или несколько CDR легкой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 356-358) могут содержать консервативную аминокислотную замену (или 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен) при сохранении CD5-специфичности антитела (т.е. специфичности, аналогичной антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые содержат CDR тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 353-355, и CDR легкой цепи согласно SEQ ID NO: 356-358).
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, способные связывать антиген CD5, могут быть идентифицированы с использованием методов, известных в настоящей области техники и описанных в настоящем документе, таких как иммунизация, методы компьютерного моделирования и методы отбора in vitro, такие как платформы фагового дисплея и клеточного дисплея, описанные ниже.
Антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя антитела, которые содержат одну или обе из следующих вариабельных областей или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% идентичности последовательности по отношению к ним (например, аминокислотную последовательность, характеризующуюся 85%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичности последовательности по отношению к ним):
VL с аминокислотной последовательностью
VH с аминокислотной последовательностью
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности VL и VH, описаны, например, в патенте США №5869619, раскрытие которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам, таким как антитело he1. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя цепи VL и VH согласно SEQ ID NO: 325 и SEQ ID NO: 326. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя CDR, содержащиеся в цепях VL и VH SEQ ID NO: 325 и SEQ ID NO: 326. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя CDR, содержащиеся в цепях VL и VH SEQ ID NO: 325 и SEQ ID NO: 326, и остальные части последовательностей VL и VH характеризуются по меньшей мере 85% идентичности последовательности (например, 85%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% или больше идентичности последовательности) с последовательностями VL и VH согласно SEQ ID NO: 325 и SEQ ID NO: 326.
Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя следующие CDR:
CDR-H1 с аминокислотной последовательностью GYTFTNY (SEQ ID NO: 327);
CDR-H2 с аминокислотной последовательностью NTHTGE (SEQ ID NO: 328);
CDR-H3 с аминокислотной последовательностью RGYDWYFDV (SEQ ID NO: 329);
CDR-L1 с аминокислотной последовательностью RASQDINSYLS (SEQ ID NO: 330);
CDR-L2 с аминокислотной последовательностью RANRLVD (SEQ ID NO: 331); и
CDR-L3 с аминокислотной последовательностью QQYDESPWT (SEQ ID NO: 332);
Дополнительные антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя антитела, которые содержат одну или обе из следующих вариабельных областей или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% идентичности последовательности по отношению к ним (например, аминокислотную последовательность, характеризующуюся 85%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичности последовательности по отношению к ним):
VL с аминокислотной последовательностью
VH с аминокислотной последовательностью
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности VL и VH, описаны, например, в патенте США №5869619, раскрытие которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам, таким как антитело he3. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя CDR, содержащиеся в цепях VL и VH антитела, которое включает в себя цепи VL и VH SEQ ID NO: 327 и SEQ ID NO: 328. Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя CDR, содержащиеся в цепях VL и VH SEQ ID NO: 327 и SEQ ID NO: 328, и остальные части последовательностей VL и VH характеризуются по меньшей мере 85% идентичности последовательности (например, 85%, 90%, 95%, 97%, 98%, 99% или больше идентичности последовательности) с последовательностями VL и VH согласно SEQ ID NO: 327 и SEQ ID NO: 328.
Согласно некоторым вариантам осуществления антитело к CD5 или его антигенсвязывающий фрагмент включает в себя следующие CDR:
CDR-H1 с аминокислотной последовательностью GYTFTNY (SEQ ID NO: 335);
CDR-H2 с аминокислотной последовательностью NTHYGE (SEQ ID NO: 336);
CDR-H3 с аминокислотной последовательностью RRGYDWYFDV (SEQ ID NO: 337);
CDR-L1 с аминокислотной последовательностью RASQDINSYLS (SEQ ID NO: 338);
CDR-L2 с аминокислотной последовательностью RANRLES (SEQ ID NO: 339); и
CDR-L3 с аминокислотной последовательностью QQYDESPWT (SEQ ID NO: 340).
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности CDR, описаны, например, в патенте США №5869619, раскрытие которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Другие антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя, например, антитела к CD5, которые описаны в патентах США №№5821123; 5766886; 5770196; 7153932; 5621083; 6649742; 6146631; 5756699; 5744580; 6376217; 5837491 и 6146850, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Другие антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя, например, антитела, продуцируемые линией клеток гибридомы, депонированной как АТСС CRL 8000 (мышиное антитело к CD5 OKT1). Такие антитела описаны в патентах США №4515894; 4657760; и 4363799, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя те, которые содержат одну или несколько, или все из следующих CDR:
CDR-H1 с аминокислотной последовательностью GYSITSGYY (SEQ ID NO: 341);
CDR-H2 с аминокислотной последовательностью ISYSGFT (SEQ ID NO: 342);
CDR-H3 с аминокислотной последовательностью AGDRTGSWFAY (SEQ ID NO: 343);
CDR-L1 с аминокислотной последовательностью QDISNY (SEQ ID NO: 344);
CDR-L2 с аминокислотной последовательностью ATS (SEQ ID NO: 345); и
CDR-L3 с аминокислотной последовательностью LQYASYPFT (SEQ ID NO: 346).
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности CDR, описаны, например, в патенте США №8679500, раскрытие которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя те, которые содержат одну или несколько, или все из следующих CDR:
CDR-H1 с аминокислотной последовательностью GYIFTNYG (SEQ ID NO: 347);
CDR-H2 с аминокислотной последовательностью INTYNGEP (SEQ ID NO: 348);
CDR-H3 с аминокислотной последовательностью ARGDYYGYEDY (SEQ ID NO: 349);
CDR-L1 с аминокислотной последовательностью QGISNY (SEQ ID NO: 350);
CDR-L2 с аминокислотной последовательностью YTS (SEQ ID NO: 351); и
CDR-L3 с аминокислотной последовательностью QQYSKLPWT (SEQ ID NO: 352).
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности CDR, описаны, например, в патенте США №8679500.
Антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя те, которые содержат одну или несколько, или все из следующих CDR:
CDR-H1 с аминокислотной последовательностью FSLSTSGMG (SEQ ID NO: 353);
CDR-H2 с аминокислотной последовательностью WWDDD (SEQ ID NO: 354);
CDR-H3 с аминокислотной последовательностью RRATGTGFDY (SEQ ID NO: 354
CDR-L1 с аминокислотной последовательностью QDVGTA (SEQ ID NO: 356);
CDR-L2 с аминокислотной последовательностью WTSTRHT (SEQ ID NO: 357); и
CDR-L3 с аминокислотной последовательностью YNSYNT (SEQ ID NO: 358).
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности CDR, описаны, например, в публикации заявки на выдачу патента США №2008/0254027, раскрытие которой включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Другие антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя, например, антитела к CD5, которые описаны в публикации заявки РСТ № WO 1992/014491, такие как антитела к CD5, продуцируемые линией гибридомных клеток, депонированной в Институте Пастера под №1-1025 10 января 1991 г. Раскрытие публикации заявки РСТ № WO 1992/014491 включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Другие антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя, например, антитела к CD5, которые описаны в патентах США №№6010902 и 7192736, публикациях заявок на выдачу патента США №№2011/0250203 и 2017/0129128 и публикации заявок РСТ № WO 2016/172606; WO 1994/023747; и WO 1996/041608; причем раскрытия каждого из документов включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Согласно некоторым вариантам осуществления антитела к CD5, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя те, которые содержат комбинацию областей CDR-H1, CDR-H2, CDR-H3, CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, как представлено в таблице ниже.
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности CDR из приведенной выше таблицы, описаны, например, в публикации заявки на выдачу патента США №2011/0250203, раскрытие которой включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD5 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Антитела к CD2
Описанные в настоящем документе композиции и способы включают в себя согласно определенным вариантам осуществления антитело или его фрагмент, которые специфически связываются с CD2 человека. CD2 человека также называют Т-клеточным поверхностным антигеном T11/Leu-5, T11, антигеном CD2 (р50) и рецептором эритроцитов овцы (SRBC). CD2 экспрессируется на Т-клетках. Идентифицированы две изоформы CD2 человека. Изоформа 1 содержит 351 аминокислоту, как описано в Seed, В. et al. (1987) 84: 3365-69 (см. также Sewell et al. (1986) 83: 8718-22) и ниже (эталонная последовательность NCBI: NP_001758.2):
Вторая изоформа CD2 состоит из 377 аминокислот и обозначена в настоящем документе как эталонная последовательность NCBI: NP_001315538.1.
Было показано, что Т-клетки и NK-клетки экспрессируют CD2, который представляет собой молекулу клеточной адгезии и специфический маркер для таких лимфоцитов. Например, CD2 взаимодействует с другими молекулами адгезии, такими как антиген-3, ассоциированный с функцией лимфоцитов (LFA-3/CD58), для усиления активации Т-клеток. Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, способные связывать CD2, могут подавлять активацию Т-клеток и опосредованные Т-клетками иммунные ответы против трансплантатов гемопоэтических стволовых клеток, например, путем ингибирования взаимодействия между CD2 и LFA-3. Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые связываются с этим антигеном клеточной поверхности, могут быть идентифицированы с использованием методов, известных в настоящей области техники и описанных в настоящем документе, включая в себя иммунизацию, методы компьютерного моделирования и методы отбора in vitro, такие как платформы фагового дисплея и клеточного дисплея, описанные ниже.
Согласно определенным вариантам осуществления настоящее изобретение предусматривает ADC, содержащий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с полипептидом CD2, например, полипептидом CD2 человека, и их применения.
Согласно одному варианту осуществления ADC содержит антитело к CD2, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 300. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 301. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 302. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 300, SEQ ID NO: 301 и SEQ ID NO: 302. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит две или более VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 300, SEQ ID NO: 301 и SEQ ID NO: 302. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 300, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 301, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 302.
Согласно одному варианту осуществления ADC содержит антитело к CD2, содержащее вариабельная область легкой цепи, которая содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 303. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 304. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 305. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит одну или несколько VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 303, SEQ ID NO: 304 и SEQ ID NO: 305. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит две или более VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 303, SEQ ID NO: 304 и SEQ ID NO: 305. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 303, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 304, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 305.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело к CD2 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 300, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 301, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 302, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 303, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 304, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 305.
Согласно определенным вариантам осуществления одна или несколько CDR (т.е. одна или несколько CDR тяжелой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 300-302, и/или одна или несколько CDR легкой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 303-305) могут содержать консервативную аминокислотную замену (или 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен) при сохранении CD2-специфичности антитела (т.е. специфичности, аналогичной антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые содержат CDR тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 300-302, и CDR легкой цепи согласно SEQ ID NO: 303-305).
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 306. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 306, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 306. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит а модифицированную вариабельную область тяжелой цепи (НС), содержащую вариабельный домен НС, содержащий SEQ ID NO: 306, или вариант SEQ ID NO: 306, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 306 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 306 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 306 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO: 306, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область тяжелой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 306, при сохранении специфичности связывания CD2 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 306. Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая отличается от аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 306 одной, двумя, тремя или четырьмя аминокислотами. Например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент может содержать вариабельную область тяжелой цепи, которая отличается от аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 306, в одном, двух, трех или четырех положениях 12, 13, 28 и/или 48. Согласно одному варианту осуществления вариабельную область тяжелой цепи отличается от аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 306, в положениях 12, 13, 28 и 48. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну, две, три или четыре из следующих замен относительно последовательности, представленной в SEQ ID NO: 306: K12Q; K13R; T28I и M48V. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит замены K12Q; K13R; T28I; и M48V по отношению к SEQ ID NO: 306.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 307. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 307, например, по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 307. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит модифицированную вариабельную область легкой цепи (LC), содержащую вариабельный домен LC, содержащий SEQ ID NO: 307, или вариант SEQ ID NO: 307, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 307 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 307 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 307 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO: 307, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область легкой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью легкой цепи согласно SEQ ID NO: 307, при сохранении специфичности связывания CD2 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 307.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 306, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 306, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 307, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 307. Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 306, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 307. Согласно одному варианту осуществления антитело представляет собой Ab1 антитело который содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 306, и вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 307.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 308. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 308, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 308. Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 308, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 308, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 309, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 309. Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 308, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 309. Согласно одному варианту осуществления антитело представляет собой антитело Ab1a, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 308, и вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 309.
Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 3131. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 314. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 315. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 313, SEQ ID NO: 314 и SEQ ID NO: 315. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит две или более VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 313, SEQ ID NO: 314 и SEQ ID NO: 315. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 313, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 314, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 315.
Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 313. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 314. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 316. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит одну или несколько VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 313, SEQ ID NO: 314 и SEQ ID NO: 316. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит две или более VH CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 313, SEQ ID NO: 314 и SEQ ID NO: 316. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область тяжелой цепи содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 313, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 314, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 316.
Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит одну или несколько определяющих комплементарность областей (CDR). Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 317. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 318. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность согласно SEQ ID NO: 319. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит одну или несколько VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 317, SEQ ID NO: 318 и SEQ ID NO: 319. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит две или более VL CDR, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 317, SEQ ID NO: 318 и SEQ ID NO: 319. Согласно одному варианту осуществления вариабельная область легкой цепи содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 317, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 318, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 319.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 313, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 314, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 315, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 317, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 318, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 319.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит VH CDR1, содержащую SEQ ID NO: 313, VH CDR2, содержащую SEQ ID NO: 314, и VH CDR3, содержащую SEQ ID NO: 316, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит VL CDR1, содержащую SEQ ID NO: 317, VL CDR2, содержащую SEQ ID NO: 318, и VL CDR3, содержащую SEQ ID NO: 319.
Согласно определенным вариантам осуществления одна или несколько CDR (т.е. одна или несколько CDR тяжелой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 313-316, и/или одна или несколько CDR легкой цепи, характеризующиеся SEQ ID NO: 317-318) могут содержать консервативную аминокислотную замену (или 2, 3, 4 или 5 аминокислотных замен) при сохранении CD2-специфичности антитела (т.е. специфичности, аналогичной антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые содержат CDR тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 313-315, и CDR легкой цепи согласно SEQ ID NO: 18- 20; или которые содержат CDR тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 313, 314, 316, и CDR легкой цепи согласно SEQ ID NO: 317-319).
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 320. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 320, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 320. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит а модифицированную вариабельную область тяжелой цепи (НС), содержащую вариабельный домен НС, содержащий SEQ ID NO: 320, или вариант SEQ ID NO: 320, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 320 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 320 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 320 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% идентичной SEQ ID NO: 320, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область тяжелой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 320, при сохранении специфичности связывания CD2 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 320.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 321. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 321, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 321. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит а модифицированную вариабельную область тяжелой цепи (НС), содержащую вариабельный домен НС, содержащий SEQ ID NO: 320, или вариант SEQ ID NO: 321, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 321 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 321 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 321 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% идентичной SEQ ID NO: 321, где в любом из (i)-(iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область тяжелой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 321, при сохранении специфичности связывания CD2 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 321.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 322. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 322, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 322. Согласно определенным вариантам осуществления антитело содержит модифицированную вариабельную область легкой цепи (LC), содержащую вариабельный домен LC, содержащий SEQ ID NO: 322, или вариант SEQ ID NO: 322, причем вариант (i) отличается от SEQ ID NO: 322 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (ii) отличается от SEQ ID NO: 322 не более чем 5, 4, 3, 2 или 1 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями; (iii) отличается от SEQ ID NO: 322 1-5, 1-3, 1-2, 2-5 или 3-5 аминокислотными заменами, добавлениями или делециями и/или (iv) содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере приблизительно на 75%, приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% идентичной SEQ ID NO: 322, где в любом из (i) - (iv) аминокислотная замена может представлять собой консервативную аминокислотную замену или неконсервативную аминокислотную замену; и где модифицированная вариабельная область легкой цепи может обладать повышенной биологической активностью по сравнению с вариабельной областью легкой цепи согласно SEQ ID NO: 322, при сохранении специфичности связывания CD2 антитела, т.е. характеризуется специфичностью связывания, аналогичной специфичности связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат SEQ ID NO: 322.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичности с SEQ ID NO: 320, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 320, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 322, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 322. Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 320, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 322.
Согласно иллюстративному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 321, например, по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99%, от 100% идентичности с SEQ ID NO: 321, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 95% идентичности с SEQ ID NO: 322, например,., по меньшей мере приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98% или приблизительно 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO: 322. Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 321, и вариабельную область легкой цепи, которая содержит SEQ ID NO: 322.
Антитела к CD2, которые можно использовать в сочетании с описанными в настоящем документе композициями и способами, включают в себя те, которые содержат одну или несколько, или все из следующих CDR:
a. CDR-H1 с аминокислотной последовательностью EYYMY (SEQ ID NO: 300);
b. CDR-H2 с аминокислотной последовательностью RIDPEDGSIDYVEKFKK (SEQ ID NO: 301);
c. CDR-H3 с аминокислотной последовательностью GKFNYRFAY (SEQ ID NO: 302);
d. CDR-L1 с аминокислотной последовательностью RSSQSLLHSSGNTYLN (SEQ ID NO: 303);
e. CDR-L2 с аминокислотной последовательностью LVSKLES (SEQ ID NO: 304); и
f. CDR-L3 с аминокислотной последовательностью MQFTHYPYT (SEQ ID NO: 305).
Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие вышеуказанные последовательности CDR, описаны, например, в патенте США №6849258, раскрытие которого включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD2 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Антитела и их фрагменты, раскрытые в патентах США №5730979; 5817311; 5951983 и 7592006; такие как LO-CD2a, BTI-322, и антитела, продуцируемые линией гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС НВ 11423 (например, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие одну или несколько, или все, последовательности CDR антитела LO-CD2a, выделенного из линии гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС НВ 11423), можно использовать в сочетании с композициями и способами, раскрытыми в настоящем документе. Иллюстративные антитела, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя гуманизированные антитела, содержащие одну или несколько, или все последовательности CDR антитела, выделенного из линии гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС НВ 11423, такого как MEDI-507. MEDI-507 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело к CD2, которое содержит последовательности CDR-H и CDR-L из (а) - (f) выше, и описано в Branco et al., Transplantation 68:1588-1596 (1999). MEDI-507 дополнительно описано в WO 99/03502 A1 и WO 1994/020619 A1; патентах США №№ US 7592006, US 6849258, US 5951983, US 5817311 и US 5730979; и патентных публикациях США №№ US 2011/0280868, US 2004/0265315 и 2011/0091453, причем раскрытия каждого из документов включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD2 и их антигенсвязывающим фрагментам, таким как антитело к CD2 MEDI-507. Согласно одному варианту осуществления антитело к CD2 представляет собой сиплизумаб или его антигенсвязывающий фрагмент.
Другие антитела к CD2, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя, например, антитела к CD2, которые описаны в патентах США №№6541611 и 7250167, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD2 и их антигенсвязывающим фрагментам, таким как антитело к CD2 LO-CD2b и антитела, продуцируемые линией гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС РТА-802. Иллюстративные антитела, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя гуманизированные антитела, содержащие одну или несколько, или все последовательности CDR антитела, выделенного из линии гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС РТА-802.
Другие антитела к CD2, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя, например, антитела к CD2, которые описаны в патентах США №№5795572 и 5807734, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD2 и их антигенсвязывающим фрагментам, таким как антитело к CD2, продуцируемое линией гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС НВ 69277. Например, антитела к CD2 и их антигенсвязывающие фрагменты, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя те, которые содержат шарнирную область, характеризующуюся аминокислотной последовательностью EPKSSDKTHTSPPSP (SEQ ID NO: 316), такие как фрагменты scFv, содержащие шарнирную область, характеризующуюся аминокислотной последовательностью EPKSSDKTHTSPPSP (SEQ ID NO: 316). Включение шарнирной области с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 316, может быть благоприятным, поскольку этот шарнирный мотив был мутирован относительно последовательностей шарнирной области дикого типа, чтобы устранить потенциально реакционноспособные остатки цистеина, которые могут способствовать нежелательной окислительной димеризации одноцепочечного фрагмента антитела, такого как фрагмент scFv.
Другие антитела к CD2, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя, например, антитела к CD2, которые описаны в патенте США №6764688, такие как антитело к CD2 TS2/18 и антитела, продуцируемые линией гибридомных клеток, депонированной под депозитарным номером АТСС НВ-195. Раскрытие патента США №6764688 включено в настоящий документ посредством ссылки, поскольку оно относится к антителам к CD2 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Другие антитела к CD2, которые можно использовать в сочетании с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя, например, антитела к CD2, которые описаны в патентах США №№6162432, 6558662, 7408039, 7332157, 7638121, 7939062 и 7115259, публикациях заявок на выдачу патента США №№2006/0084107, 2014/0369974, 2002/0051784 и 2013/0183322 и публикации РСТ № WO 1992/016563, причем раскрытия каждого из документов включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к антителам к CD2 и их антигенсвязывающим фрагментам.
Антитела к Her2
Антитела, специфические к антигену Her2, известны специалисту в настоящей области техники, например трастузумаб.
Антитела к PSMA
Антитела, специфические к простатическому специфическому мембранному антигену (PSMA), содержащиеся в ADC согласно настоящему изобретению, были раскрыты в WO 2020/025564 A1, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Мутации Fc
Антитела или связывающие фрагменты, описанные в настоящем документе, могут также включать в себя модификации и/или мутации, которые изменяют свойства антител и/или фрагментов, такие как свойства, которые увеличивают период полужизни, увеличивают или уменьшают ADCC и т.д., как известно в настоящей области техники.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его связывающий фрагмент содержит вариант области Fc, где указанный вариант области Fc содержит по меньшей мере одну модификацию аминокислоты относительно области Fc дикого типа, так что указанная молекула обладает измененной аффинностью к FcgammaR. Из кристаллографических исследований известно, что определенные аминокислотные положения в области Fc находятся в прямом контакте с FcγR. В частности, аминокислоты 234-239 (шарнирная область), аминокислоты 265-269 (петля В/С), аминокислоты 297-299 (петля С'/Е) и аминокислоты 327-332 (петля F/G) (см. Sondermann et al., 2000 Nature, 406: 267-273). Таким образом, описанные в настоящем документе антитела (например, антитела к CD117, CD45, CD137, CD2, CD5, CD262 или CD134) могут содержать вариантные области Fc, содержащие модификацию по меньшей мере одного остатка, который вступает в прямой контакт с FcγR на основе структурного и кристаллографического анализа. Согласно одному варианту осуществления область Fc антитела (или его фрагмента) содержит аминокислотную замену в аминокислоте 265 в соответствии с индексом EU, как в Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд. Public Health Service, NH1, MD (1991), явным образом включенной в настоящий документ посредством ссылок. «Индекс EU согласно Kabat» относится к нумерации человеческого антитела IgG1 EU. «Индекс EU» или «индекс EU согласно Kabat» или «схема нумерации EU» относится к нумерации антитела EU (Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63:78-85, полностью включена в настоящий документ посредством ссылки). Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию D265A. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию D265C. Согласно некоторым вариантам осуществления область Fc антитела (или ее фрагмент) содержит аминокислотную замену в аминокислоте 234 в соответствии с индексом EU согласно Kabat. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию L234A. Согласно некоторым вариантам осуществления область Fc антитела (или ее фрагмент) содержит аминокислотную замену в аминокислоте 235 в соответствии с индексом EU согласно Kabat. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию L235A. Согласно другому варианту осуществления область Fc содержит мутацию L234A и L235A. Согласно дополнительному варианту осуществления область Fc антитела ADC, описанного в настоящем документе, содержит мутацию D265C, L234A и L235A.
Согласно определенным аспектам вариантный домен Fc IgG содержит одну или несколько аминокислотных замен, приводящих к уменьшению или устранению аффинности связывания по отношению к Fc.gamma.R и/или C1q по сравнению с доменом Fc дикого типа, не содержащим одну или несколько аминокислотных замен. Взаимодействия связывания Fc необходимы для множества эффекторных функций и нижележащих сигнальных событий, включая в себя без ограничения антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC) и комплементзависимую цитотоксичность (CDC). Соответственно, согласно определенным аспектам антитело, содержащее модифицированную область Fc (например, содержащую мутации L234A, L235A и D265C), существенно снижает или отменяет эффекторные функции.
Аффинность к области Fc можно определить с использованием различных методов, известных в настоящей области техники, например, но не ограничиваясь ими, равновесные способы (например, иммуноферментный анализ (ELISA); KinExA, Rathanaswami et al. Analytical Biochemistry, Vol. 373:52-60, 2008; или радиоиммуноанализ (RIA)), или анализ поверхностного плазмонного резонанса, или другой механизм анализа на основе кинетики (например, анализ BIACORE™ или анализ OctetTM (forteBIO)) и другие способы, такие как непрямые анализы связывания, анализы конкурентного связывания, флуоресцентный резонансный перенос энергии (FRET), гель-электрофорез и хроматография (например, гель-фильтрация). Эти и другие способы могут использовать метку на одном или нескольких исследуемых компонентах и/или использовать различные способы обнаружения, включая в себя без ограничения хромогенные, флуоресцентные, люминесцентные или изотопные метки. Подробное описание аффинностей связывания и кинетики можно найти в книге Paul, W.Е., ed., Fundamental Immunology, 4-е изд., Lippincott-Raven, Philadelphia (1999), в которой основное внимание уделяется взаимодействиям антитело-иммуноген. Одним из примеров анализа конкурентного связывания является радиоиммуноанализ, предусматривающий инкубацию меченого антигена с представляющим интерес антителом в присутствии возрастающих количеств немеченого антигена и обнаружение антитела, связанного с меченым антигеном. Аффинность представляющего интерес антитела к конкретному антигену и скорости диссоциации связывания могут быть определены из данных с помощью анализа графика Скэтчарда. Конкуренцию со вторым антителом также можно определить с помощью радиоиммуноанализа. В этом случае антиген инкубируют с представляющим интерес антителом, конъюгированным с меченым соединением, в присутствии возрастающих количеств немеченого второго антитела.
Антитела могут быть дополнительно сконструированы для дополнительной модуляции периода полужизни антитела путем введения дополнительных мутаций Fc, таких как описанные, например, в (Dall'Acqua et al. (2006) J Biol Chem 281: 23514-24), (Zalevsky et al. (2010) Nat Biotechnol 28: 157-9), (Hinton et al. (2004) J Biol Chem 279: 6213-6), (Hinton et al. (2006) J Immunol 176: 346-56), (Shields et al. (2001) J Biol Chem 276: 6591-604), (Petkova et al. (2006) Int Immunol 18: 1759-69), (Datta-Mannan et al. (2007) Drug Metab Dispos 35: 86-94), (Vaccaro et al. (2005) Nat Biotechnol 23: 1283-8), (Yeung et al. (2010) Cancer Res 70: 3269-77) и (Kim et al. (1999) Eur J Immunol 29: 2819-25), и включают в себя положения 250, 252, 253, 254, 256, 257, 307, 376, 380, 428, 434 и 435. Иллюстративные мутации, которые могут быть сделаны по отдельности или в комбинации, представляют собой мутации T250Q, M252Y, 1253А, S254T, Т256Е, Р2571, Т307А, D376V, Е380А, M428L, Н433К, N434S, N434A, N434H, N434F, Н435А и H435R
Таким образом, согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию, приводящую к уменьшению периода полужизни. Антитело, характеризующееся коротким периодом полужизни, может быть полезным в некоторых случаях, когда ожидается, что антитело будет действовать как краткосрочное терапевтическое средство, например, на стадии кондиционирования, описанной в настоящем документе, где антитело вводят с последующими HSC. В идеале антитело должно быть по существу очищено до доставки HSC, которые также, как правило, экспрессируют антиген, на который нацелен описанный в настоящем документе ADC, например, CD117, но не являются мишенью для ADC, в отличие от эндогенных стволовых клеток. Согласно одному варианту осуществления области Fc содержат мутацию в положении 435 (индекс EU согласно Kabat). Согласно одному варианту осуществления мутация представляет собой мутацию Н435А.
Согласно одному варианту осуществления описанное в настоящем документе антитело характеризуется периодом полужизни, равным или составляющим меньше чем 24 ч, равным или составляющим меньше чем 22 ч, равным или составляющим меньше чем 20 ч, равным или составляющим меньше чем 18 ч, равным или составляющим меньше чем 16 ч, равным или составляющим меньше чем 14 ч, равным или составляющим меньше чем 13 ч, равным или составляющим меньше чем 12 ч или равным или составляющим меньше чем 11 ч. Согласно одному варианту осуществления период полужизни антитела составляет 11 ч - 24 ч; 12 ч - 22 ч; 10 ч - 20 ч; 8 ч- 18 ч или 14 ч - 24 ч.
Согласно некоторым аспектам область Fc содержит две или более мутаций, которые приводят к уменьшению периода полужизни и значительно уменьшают или полностью отменяют эффекторную функцию антитела. Согласно некоторым вариантам осуществления область Fc содержит мутацию, приводящую к уменьшению периода полужизни, и мутацию по меньшей мере одного остатка, который может вступать в прямой контакт с FcγR (например, на основании структурного и кристаллографического анализа). Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию Н435А, мутацию L234A и мутацию L235A. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию Н435А и мутацию D265C. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию Н435А, мутацию L234A, мутацию L235A и мутацию D265C.
Согласно некоторым вариантам осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент конъюгирован с цитотоксином (например, аматоксином) посредством остатка цистеина в домене Fc антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно некоторым вариантам осуществления остаток цистеина вводят путем мутации в домене Fc антитела или его антигенсвязывающем фрагменте. Например, остаток цистеина может быть выбран из группы, состоящей из Cys118, Cys239 и Cys265. Согласно одному варианту осуществления область Fc антитела к CD117 (или его фрагмента) содержит аминокислотную замену в аминокислоте 265 в соответствии с индексом EU согласно Kabat. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию D265C. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию D265C и Н435А. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию D265C, L234A и L235A. Согласно одному варианту осуществления область Fc содержит мутацию D265C, L234A, L235A и Н435А.
Согласно некоторым вариантам осуществления этих аспектов остаток цистеина встречается в природе в домене Fc антитела или его антигенсвязывающем фрагменте. Например, домен Fc может представлять собой домен Fc IgG, такой как домен Fc IgG1 человека, и остаток цистеина может быть выбран из группы, состоящей из Cys261, Csy321, Cys367 и Cys425.
Например, согласно одному варианту осуществления область Fc антитела 67 модифицирована для включения мутации D265C (например, SEQ ID NO: 111). Согласно другому варианту осуществления область Fc антитела 67 модифицирована для включения мутации D265C, L234A и L235A (например, SEQ ID NO: 112). Согласно еще одному варианту осуществления область Fc антитела 67 модифицирована для включения мутации D265C и Н435А (например, SEQ ID NO: 113). Согласно дополнительному варианту осуществления область Fc антитела 67 модифицирована для включения мутации D265C, L234A, L235A и Н435А (например, SEQ ID NO: 114).
Что касается антитела 55, согласно одному варианту осуществления область Fc антитела 55 модифицирована для включения мутации D265C (например, SEQ ID NO: 117). Согласно другому варианту осуществления область Fc антитела 55 модифицирована для включения мутации D265C, L234A и L235A (например, SEQ ID NO: 118). Согласно еще одному варианту осуществления область Fc антитела 55 модифицирована для включения мутации D265C и Н435А (например, SEQ ID NO: 119). Согласно дополнительному варианту осуществления область Fc антитела 55 модифицирована для включения мутации D265C, L234A, L235A и Н435А (например, SEQ ID NO: 120).
Области Fc любого из антитела 54, антитела 55, антитела 56, антитела 57, антитела 58, антитела 61, антитела 66, антитела 67, антитела 68 или антитела 69 могут быть модифицированы для включения мутации D265C (например, как в SEQ ID NO: 123); мутации D265C, L234A и L235A (например, как в SEQ ID NO: 124); мутации D265C и Н435А (например, как в SEQ ID NO: 125); или мутации D265C, L234A, L235A и Н435А (например, как в SEQ ID NO: 126).
Описанные в настоящем документе вариантные домены Fc определены в соответствии с модификациями аминокислот, которые их составляют. Для всех обсуждаемых в настоящем документе аминокислотных замен в отношении области Fc нумерация всегда соответствует индексу EU. Таким образом, например, D265C представляет собой вариант Fc с аспарагиновой кислотой (D) в положении 265 EU, замещенной цистеином (С) относительно исходного домена Fc. Аналогичным образом, например, D265C/L234A/L235A определяет вариантный вариант Fc с заменами в положениях EU 265 (D на С), 234 (L на А) и 235 (L на А) относительно исходного домена Fc. Вариант также может быть обозначен в соответствии с его конечным аминокислотным составом в мутантных аминокислотных положениях EU. Например, мутант L234A/L235A может называться LALA. Следует отметить, что порядок, в котором представлены замены, является произвольным.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельные области, характеризующиеся аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 95%, 96%, 97% или 99% идентичной SEQ ID No, раскрытым в настоящем документе. Альтернативно, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит CDR, содержащие SEQ ID No, раскрытые в настоящем документе с каркасными областями вариабельных областей, описанных в настоящем документе, с аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 95%, 96%, 97% или 99% идентичной SEQ ID No, раскрытым в настоящем документе.
Согласно одному варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи и константную область тяжелой цепи с аминокислотной последовательностью, которая раскрыта в настоящем документе. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи и константную область легкой цепи с аминокислотной последовательностью, которая раскрыта в настоящем документе. Согласно другому варианту осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит тяжелую цепь вариабельный область, вариабельную область легкой цепи, константную область тяжелой цепи и константную область легкой цепи с аминокислотной последовательностью, которая раскрыта в настоящем документе.
Способы идентификации антител
В настоящем документе представлены новые ADC, которые можно использовать, например, в способах кондиционирования для трансплантации стволовых клеток. С учетом раскрытия в настоящем документе могут быть идентифицированы другие антитела, которые можно использовать в ADC и способах согласно настоящему изобретению.
Способы высокопроизводительного скрининга антител или библиотек фрагментов антител в отношении молекул, способных связывать антиген клеточной поверхности (например, CD117, CD45, CD2, CD5, CD134, CD252, CD137), можно использовать для идентификации и выявления антител со зрелой аффинностью, применимых для лечения форм рака, аутоиммунных заболеваний и кондиционирования пациента (например, пациента-человека), нуждающегося в терапии гемопоэтическими стволовыми клетками, как описано в настоящем документе. Такие способы включают в себя методы дисплея in vitro, известные в настоящей области техники, такие как, среди прочего, фаговый дисплей, бактериальный дисплей, дрожжевой дисплей, дисплей клеток млекопитающих, рибосомный дисплей, дисплей мРНК и дисплей кДНК. Использование фагового дисплея для выделения лигандов, связывающих биологически релевантные молекулы, было рассмотрено, например, в Felici et al., Biotechnol. Annual Rev. 1:149-183, 1995; Katz, Annual Rev. Biophys. Biomol. Struct. 26:27-45, 1997; и Hoogenboom et al., Immunotechnology 4:1-20, 1998, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к методам дисплея in vitro. Были созданы рандомизированные комбинаторные пептидные библиотеки для отбора полипептидов, которые связывают антигены клеточной поверхности, как описано в Kay, Perspect. Drug Discovery Des. 2:251-268, 1995 и Kay et al., Mol. Divers. 1:139-140, 1996, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к открытию антигенсвязывающих молекул. Белки, такие как мультимерные белки, были успешно представлены фагами как функциональные молекулы (см., например, ЕР 0349578; ЕР 4527839 и ЕР 0589877, а также Chiswell and McCafferty, Trends Biotechnol. 10:80-84 1992, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к использованию методов дисплея in vitro для открытия антигенсвязывающих молекул). Кроме того, функциональные фрагменты антител, такие как фрагменты Fab и scFv, были экспрессированы в форматах дисплея in vitro (см., например, McCafferty et al., Nature 348:552- 554, 1990; Barbas et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:7978-7982, 1991; и Clackson et al., Nature 352:624-628, 1991, раскрытия каждого из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к платформам дисплея in vitro для открытие антигенсвязывающих молекул). Эти методы, среди прочего, можно использовать для идентификации и повышения аффинности антител, которые связываются, например, CD117, CD45, CD2, CD5, CD134, CD252, CD137 (например, GNNK+ CD117), которые, в свою очередь, можно использовать для истощения эндогенных гемопоэтические стволовые клетки у пациента (например, пациента-человека), нуждающегося в терапии трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток.
В дополнение к методам дисплея in vitro, методы компьютерного моделирования можно использовать для конструирования и идентификации антител и фрагментов антител in silico, которые связывают антиген клеточной поверхности (например, CD117, CD45, CD2, CD5, CD134, CD252, CD137). Например, с использованием методов компьютерного моделирования, специалист в настоящей области техники может провести скрининг библиотек антител и фрагментов антител in silico в отношении молекул, способных связывать специфические эпитопы, такие как внеклеточные эпитопы этого антигена. Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, идентифицированные этими вычислительными методами, можно использовать в сочетании с терапевтическими способами, описанными в настоящем документе, такими как способы лечения рака и аутоиммунного заболевания, описанными в настоящем документе, и процедурами кондиционирования пациента, описанными в настоящем документе.
Дополнительные методы можно использовать для идентификации антител и их антигенсвязывающих фрагментов, которые связывают антиген клеточной поверхности (например, CD117) на поверхности клетки (например, раковой клетки, аутоиммунной клетки или гемопоэтической стволовой клетки) и которые интернализуются клеткой, например, посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза. Например, описанные выше методы дисплея in vitro могут быть адаптированы для скрининга антител и их антигенсвязывающих фрагментов, которые связывают антиген клеточной поверхности (например, CD117) на поверхности раковой клетки, аутоиммунной клетки или гемопоэтической стволовой клетки и которые впоследствии интернализуются. Фаговый дисплей представляет собой один из таких методов, который можно использовать в сочетании с этой парадигмой скрининга. Чтобы идентифицировать антитела и их фрагменты, которые связывают антиген клеточной поверхности (например, CD117) и впоследствии интернализуются раковыми клетками, аутоиммунными клетками или гемопоэтическими стволовыми клетками, специалист в настоящей области техники может адаптировать методы фагового дисплея, описанные например, в Williams et al., Leukemia 19:1432-1438, 2005, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Например, с использованием методов мутагенеза, известных в настоящей области техники, могут быть получены рекомбинантные фаговые библиотеки, которые кодируют антитела, фрагменты антител, такие как фрагменты scFv, фрагменты Fab, диатела, триатела и домены 10Fn3, среди прочего, или лиганды, которые содержат рандомизированные аминокислотные кассеты (например, в одной или нескольких или всех CDR или их эквивалентных областях или антителе или фрагменте антитела). Каркасные области, шарнирная область, домен Fc и другие области антител или фрагментов антител могут быть сконструированы так, чтобы они не были иммуногенными для человека, например, благодаря наличию последовательностей антител зародышевой линии человека или последовательностей, которые демонстрируют лишь незначительные вариации относительно антител зародышевой линии человека.
Используя методы фагового дисплея, описанные в настоящем документе или известные в настоящей области техники, фаговые библиотеки, содержащие рандомизированные антитела или фрагменты антител, ковалентно связанные с фаговыми частицами, можно инкубировать с целевым антигеном клеточной поверхности (например, CD117), например, путем первой инкубации фаговой библиотеки с блокирующими агентами (такими как, например, молочный белок, бычий сывороточный альбумин и/или IgG, чтобы удалить фаг, кодирующий антитела или их фрагменты, которые проявляют неспецифическое связывание с белками, и фаг, кодирующий антитела или их фрагменты, которые связывают домены Fc, и затем инкубации фаговой библиотеки с популяцией гемопоэтических стволовых клеток. Фаговую библиотеку можно инкубировать с целевыми клетками, такими как раковые клетки, аутоиммунные клетки или гемопоэтические стволовые клетки, в течение времени, достаточного для того, чтобы позволить специфическим для антигена клеточной поверхности антителам или их антигенсвязывающим фрагментам (например, CD117-специфическим антителам или их антигенсвязывающим фрагментам) связаться с антигеном клеточной поверхности (например, CD117 клеточной поверхности) и затем подвергнуться интернализации раковыми клетками, аутоиммунными клетками или гемопоэтическими стволовыми клетками (например, от 30 минут до 6 часов при 4°С, например, 1 час при 4°С). Фаг, содержащий антитела или их фрагменты, которые не проявляют достаточной аффинности к одному или нескольким из этих антигенов, чтобы обеспечить связывание и интернализацию раковыми клетками, аутоиммунными клетками или гемопоэтическими стволовыми клетками, впоследствии можно удалить промыванием клеток, например, холодным (4°С) 0,1 М глициновым буфером при рН 2,8. Фаг, связанный с антителами или их фрагментами, которые были интернализованы раковыми клетками, аутоиммунными клетками или гемопоэтическими стволовыми клетками, можно идентифицировать, например, путем лизирования клеток и выделения интернализованного фага из среды для культивирования клеток. Затем фаг можно амплифицировать в бактериальных клетках, например, путем инкубации бактериальных клеток с выделенным фагом в среде 2xYT с использованием способов, известных в настоящей области техники. Фаг, выделенный из этой среды, затем можно охарактеризовать, например, путем определения последовательности нуклеиновой кислоты гена(ов), кодирующего(их) антитела или их фрагменты, встроенные в геном фага. Кодируемые антитела или их фрагменты могут быть впоследствии получены de novo химическим синтезом (например, фрагментов антител, таких как фрагменты scFv) или рекомбинантной экспрессией (например, полноразмерных антител).
Иллюстративный способ in vitro развития антител к антигену клеточной поверхности (например, антитела к CD117) для использования с композициями и способами, описанными в настоящем документе, представляет собой фаговый дисплей. Библиотеки фагового дисплея могут быть созданы путем создания разработанной серии мутаций или вариаций в кодирующей последовательности для CDR антитела или аналогичных областей антителоподобного каркаса (например, петель ВС, CD и DE доменов 10Fn3). Последовательность, кодирующая матричное антитело, в которую введены эти мутации, может представлять собой, например, последовательность наивной зародышевой линии человека. Эти мутации могут быть выполнены с использованием стандартных методов мутагенеза, известных в настоящей области техники. Таким образом, каждая мутантная последовательность кодирует антитело, соответствующее матрице, за исключением одной или нескольких аминокислотных вариаций. Ретровирусные векторы и векторы фагового дисплея могут быть сконструированы с использованием стандартных методов конструирования векторов, известных в настоящей области техники. Векторы фагового дисплея Р3 вместе с совместимыми векторами экспрессии белков можно использовать для создания векторов фагового дисплея для расширения разнообразия антител.
Мутированная ДНК обеспечивает разнообразие последовательностей, и каждый фаг-трансформант отображает один вариант исходной матричной аминокислотной последовательности, кодируемой ДНК, что приводит к фаговой популяции (библиотеке), отображающей огромное количество различных, но структурно связанных аминокислотных последовательностей. Ожидается, что из-за четко определенной структуры гипервариабельных областей антитела вариации аминокислот, вводимые на экране фагового дисплея, изменят связывающие свойства связывающего пептида или домена без значительного изменения его общей молекулярной структуры.
В типичном скрининге с фаговой библиотекой может контактировать и иметь возможность связаться один из вышеупомянутых антигенов или их эпитоп. Чтобы облегчить разделение связующих и не связующих, удобно иммобилизовать мишень на твердой подложке. Фаг, несущий фрагмент, связывающийся с клеточной поверхностью, может образовывать комплекс с мишенью на твердой подложке, тогда как не связывающийся фаг остается в растворе и может быть смыт избытком буфера. Связанный фаг можно затем высвободить из мишени, изменив буфер до крайнего значения рН (рН 2 или рН 10), изменив ионную силу буфера, добавив денатуранты или другими известными способами.
Выделенный фаг затем можно амплифицировать путем инфицирования бактериальных клеток, и процесс скрининга можно повторить с новым пулом, который теперь исчерпан по не связывающим антителам и обогащен антителами, которые связываются с целевым антигеном (например, CD117). Извлечения даже нескольких связывающих фагов достаточно для амплификации фага для последующей итерации скрининга. После нескольких раундов отбора последовательности генов, кодирующие антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, полученные из выбранных клонов фага в связывающем пуле, определяют общепринятыми способами, таким образом выявляя пептидную последовательность, которая придает аффинность связывания фага с мишенью. Во время процесса пэннинга разнообразие последовательностей популяции уменьшается с каждым раундом отбора до тех пор, пока не останутся желательные пептид-связывающие антитела. Последовательности могут конвергировать на небольшом количестве родственных антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Увеличение количества фагов, извлеченных в каждом раунде отбора, является показателем того, что на экране произошла конвергенция библиотеки.
Другой способ идентификации антител включает в себя использование гуманизированных не относящихся к человеку антител, которые связывают целевой антиген клеточной поверхности (например, CD117), например, в соответствии со следующей процедурой. Консенсусные последовательности тяжелых и легких цепей антител человека известны в настоящей области техники (см., например, базу данных последовательностей зародышевой линии человека «VBASE»; Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд., U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242, 1991; Tomlinson et al., J. Mol. Biol. 227:776-798, 1992; и Cox et al.. Eur. J. Immunol. 24:827-836, 1994, раскрытия каждый из которых включены в настоящий документ посредством ссылки, поскольку они относятся к консенсусным последовательностям тяжелой цепи и легкой цепи антитела человека. Используя установленные процедуры, специалист в настоящей области техники может идентифицировать каркасные остатки вариабельного домена и CDR консенсусной последовательности антитела (например, путем выравнивания последовательностей). Можно заменить одну или несколько CDR вариабельных доменов тяжелой цепи и/или легкой цепи консенсусной последовательности антитела человека одной или несколькими соответствующими CDR не относящегося к человеку антитела, которое связывает антиген клеточной поверхности (например, CD117), как описано в настоящем документе, чтобы произвести гуманизированное антитело. Этот обмен CDR можно выполнить с использованием методик редактирования генов, описанных в настоящем документе или известных в настоящей области техники.
Для получения гуманизированных антител можно рекомбинантно экспрессировать полинуклеотид, кодирующий вышеуказанную консенсусную последовательность, в которой одна или несколько CDR вариабельной области были заменены одной или несколькими последовательностями CDR вариабельной области не относящегося к человеку антитела, которое связывает целевой антиген клеточной поверхности (например, CD117). Поскольку аффинность антитела к антигену гемопоэтических стволовых клеток определяется в первую очередь последовательностями CDR, ожидается, что полученное гуманизированное антитело будет проявлять аффинность к антигену гемопоэтических стволовых клеток, которая является приблизительно такой же, как у не относящегося к человеку антитела, из которого было получено гуманизированное антитело. Способы определения аффинности антитела к целевому антигену включают в себя, например, методы на основе ELISA, описанные в настоящем документе и известные в настоящей области техники, а также, среди прочего, поверхностный плазмонный резонанс, анизотропию флуоресценции и изотермическую титрационную калориметрию.
Способность антитела или его фрагмента к интернализации можно оценить, например, с использованием анализов интернализации радионуклидов, известных в настоящей области техники. Например, антитела или их фрагменты, идентифицированные с использованием описанных в настоящем документе или известных в настоящей области техники способов дисплея in vitro, могут быть функционализированы путем включения радиоактивного изотопа, такого как 18F, 75Br, 77Br, 122I, 123I, 124I, 125I, 129I, 131I, 211At, 67Ga, 111In, 99Тс, 169Yb, 186Re, 64Cu, 67Cu, 177Lu, 77As, 72As, 86Y, 90Y, 89Zr, 212Bi, 213Bi или 225Ac. Например, радиоактивные галогены, такие как 18F, 75Br, 77Br, 122I, 123I, 124I, 125I, 129I, 131I, 211At, могут быть включены в антитела или их фрагменты с использованием гранул, таких как гранулы полистирола, содержащих электрофильные галогеновые реагенты (например, Iodination Beads, Thermo Fisher Scientific, Inc., Кембридж, Массачусетс). Радиоактивно меченые антитела или их фрагменты можно инкубировать с раковыми клетками, аутоиммунными клетками или гемопоэтическими стволовыми клетками в течение времени, достаточного для интернализации (например, от 30 минут до 6 часов при 4°С, например, 1 час при 4°С). Затем клетки можно промыть для удаления неинтернализованных антител или их фрагментов (например, с использованием холодного (4°С) 0,1 М глицинового буфера при рН 2,8). Интернализованные антитела или их фрагменты можно идентифицировать путем обнаружения испускаемого излучения (например, γ-излучения) полученных раковых клеток, аутоиммунных клеток или гемопоэтических стволовых клеток по сравнению с испускаемым излучением (например, γ-излучением) извлеченного промывочного буфера.
Антитела можно получить с использованием рекомбинантных способов и композиций, например, как описано в патенте США №4816567. Согласно одному варианту осуществления предусмотрена выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело, описанное в настоящем документе. Такая нуклеиновая кислота может кодировать аминокислотную последовательность, содержащую VL, и/или аминокислотную последовательность, содержащую VH антитела (например, легкую и/или тяжелую цепи антитела). Согласно дополнительному варианту осуществления предусмотрен один или несколько векторов (например, экспрессионных векторов), содержащих такую нуклеиновую кислоту. Согласно дополнительному варианту осуществления предусмотрена клетка-хозяин, содержащая такую нуклеиновую кислоту. Согласно одному такому варианту осуществления клетка-хозяин содержит (например, была трансформирована с помощью следующего): (1) вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность, содержащую VL антитела, и аминокислотную последовательность, содержащую VH антитела, или (2) первый вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность, содержащую VL антитела, и второй вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, которая кодирует аминокислотную последовательность, содержащую VH антитела. Согласно одному варианту осуществления клетка-хозяин является эукариотической, например клетка яичника китайского хомячка (СНО) или лимфоидная клетка (например, клетка Y0, NS0, Sp20). Согласно одному варианту осуществления предусмотрен способ получения антитела к CLL-1, причем способ предусматривает культивирование клетки-хозяина, содержащей нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, как указано выше, в условиях, подходящих для экспрессии антитела, и необязательно выделение антитела из клетки-хозяина (или среды для культивирования клеток-хозяев).
Для рекомбинантной продукции антитела нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, например, как описано выше, выделяют и вставляют в один или несколько векторов для дальнейшего клонирования и/или экспрессии в клетке-хозяине. Такую нуклеиновую кислоту можно легко выделить и секвенировать с использованием общепринятых процедур (например, с использованием олигонуклеотидных зондов, которые способны специфически связываться с генами, кодирующими тяжелую и легкую цепи антитела).
Подходящие клетки-хозяева для клонирования или экспрессии векторов, кодирующих антитела, включают в себя прокариотические или эукариотические клетки, описанные в настоящем документе. Например, антитела могут продуцироваться в бактериях, в частности, когда гликозилирование и эффекторная функция Fc не нужны. Относительно экспрессии фрагментов антител и полипептидов в бактериях см., например, патенты США №№5648237, 5789199 и 5840523. (См. также Charlton, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (BKC Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003), pp. 245-254, где описана экспрессия фрагментов антител в Е. coli.) После экспрессии антитело можно выделить из пасты бактериальных клеток в растворимой фракции и можно дополнительно очистить.
Клетки позвоночных также можно использовать в качестве хозяев. Например, можно использовать клеточные линии млекопитающих, адаптированные для роста в суспензии. Другими примерами применимых линий клеток-хозяев млекопитающих являются линия CV1 почек обезьяны, трансформированная SV40 (COS-7); линия мезонефроса человека (клетки 293 или 293, как описано, например, у Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)); клетки почки новорожденного хомяка (BHK); клетки сертоли мыши (клетки ТМ4, как описано, например, в Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)); клетки почек обезьяны (CV1); клетки почек африканской зеленой обезьяны (VERO-76); клетки карциномы шейки матки человека (HELA); клетки почек собаки (MDCK; клетки печени крысы Buffalo (BRL 3А); клетки легких человека (W138); клетки печени человека (Hep G2); опухоль молочной железы мыши (ММТ 060562); клетки TRI, как описано, например, в Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-68 (1982); клетки MRC 5 и клетки FS4. Другие применимые линии клеток-хозяев млекопитающих включают в себя клетки яичника китайского хомячка (СНО), включая в себя клетки DHFR-CHO (Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216 (1980)); и линии клеток миеломы, такие как Y0, NS0 и Sp2/0. Для обзора некоторых линий клеток-хозяев млекопитающих, подходящих для продукции антител, см., например, Yazaki and Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, N.J.), pp. 255-268 (2003).
Фармацевтические композиции
Согласно одному аспекту настоящего изобретения настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей указанный конъюгат, как описано.
Указанная фармацевтическая композиция может содержать один или несколько фармацевтически приемлемых буферов, поверхностно-активных веществ, разбавителей, носителей, вспомогательных веществ, наполнителей, связующих, смазывающих веществ, способствующих скольжению веществ, разрыхлителей, адсорбентов и/или консервантов.
В водной форме указанный фармацевтический состав может быть готов для введения, тогда как в лиофилизированной форме указанный состав может быть переведен в жидкую форму перед введением, например, путем добавления воды для инъекций, которая может содержать или не содержать консервант, такой как, например, без ограничения, бензиловый спирт, антиоксиданты, такие как витамин А, витамин Е, витамин С, ретинилпальмитат и селен, аминокислоты цистеин и метионин, лимонная кислота и цитрат натрия, синтетические консерванты, такие как парабены метилпарабен и пропилпарабен.
Указанный фармацевтический состав может дополнительно содержать один или несколько стабилизаторов, которые могут представлять собой, например, аминокислоту, сахарный полиол, дисахарид и/или полисахарид. Указанный фармацевтический состав может дополнительно содержать одно или несколько поверхностно-активных веществ, один или несколько изотонизирующих агентов, и/или один или несколько хелаторов ионов металлов, и/или один или несколько консервантов.
Описанный в настоящем документе фармацевтический состав может подходить по меньшей мере для внутривенного, внутримышечного или подкожного введения. Альтернативно, указанный конъюгат согласно настоящему изобретению может быть предоставлен в виде депо-состава, который обеспечивает замедленное высвобождение биологически активного агента в течение определенного периода времени.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предусмотрена первичная упаковка, такая как предварительно заполненный шприц или ручка, флакон или пакет для инфузий, которая содержит указанный состав в соответствии с предыдущим аспектом настоящего изобретения.
Предварительно заполненный шприц или ручка может содержать состав либо в лиофилизированной форме (которая затем должна быть солюбилизирована, например, водой для инъекций, перед введением), либо в водной форме. Указанный шприц или ручка часто представляет собой одноразовое изделие только для одноразового использования и может иметь объем от 0,1 до 20 мл. Однако шприц или ручка также могут представлять собой шприц или ручку для многоразового использования или многодозовый шприц или ручку.
Указанный флакон может также содержать состав в лиофилизированной форме или в водной форме и может служить устройством для одноразового или многоразового использования. Как устройство многоразового использования, указанный флакон может иметь больший объем. Указанный пакет для инфузий, как правило, содержит состав в водной форме и может иметь объем от 20 до 5000 мл.
Описанные в настоящем документе ADC можно вводить пациенту (например, пациенту-человеку, страдающему иммунным заболеванием или раком) в различных лекарственных формах. Например, описанные в настоящем документе ADC можно вводить пациенту, страдающему иммунным заболеванием или раком, в форме водного раствора, такого как водный раствор, содержащий один или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. Подходящие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества для использования с композициями и способами, описанными в настоящем документе, включают в себя агенты, модифицирующие вязкость. Водный раствор можно стерилизовать с использованием методик, известных в настоящей области техники.
Фармацевтические составы, содержащие ADC, как описано в настоящем документе, получают смешиванием такого ADC с одним или несколькими необязательными фармацевтически приемлемыми носителями (Remington's Pharmaceutical Sciences, 16-е издание, Osol, A. Ed. (1980)) в форме лиофилизированных составов или водных растворов. Фармацевтически приемлемые носители, как правило, являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях и включают в себя без ограничения следующее: буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая в себя аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония; хлорид бензетония; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехол; резорцин; циклогексанол; 3-пентанол и м-крезол); полипептиды с низкой молекулярной массой (менее приблизительно 10 остатков); белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая в себя глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как EDTA; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, комплексы Zn-белок); и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как полиэтиленгликоль (PEG).
Способы применения
Описанные в настоящем документе ADC можно вводить различными путями, такими как перорально, трансдермально, подкожно, интраназально, внутривенно, внутримышечно, внутриглазным способом или парентерально. Наиболее подходящий путь введения в любом конкретном случае будет зависеть от конкретного вводимого антитела или антигенсвязывающего фрагмента, пациента, способов составления фармацевтического состава, способов введения (например, времени введения и пути введения), возраста пациента, массы тела, пола, тяжести заболевания, диеты пациента и скорости выведения из организма пациента.
Эффективная доза ADC, антитела или их антигенсвязывающего фрагмента, описанных в настоящем документе, может варьироваться, например, от приблизительно 0,001 до приблизительно 100 мг/кг массы тела на одно (например, болюсное) введение, многократное введение или непрерывное введение или для достижения оптимальной концентрации в сыворотке (например, концентрации в сыворотке 0,0001-5000 мкг/мл) антитела, его антигенсвязывающего фрагмента. Дозу можно вводить один или несколько раз (например, 2-10 раз) в день, неделю или месяц субъекту (например, человеку), страдающему от рака, аутоиммунного заболевания или проходящему кондиционирующую терапию при подготовке к получению трансплантата гемопоэтических стволовых клеток. В случае процедуры кондиционирования перед трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток, ADC, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент можно вводить пациенту в такое время, которое оптимально способствует приживлению экзогенных гемопоэтических стволовых клеток, например, от 1 ч до 1 недели (например, за приблизительно 1 ч, приблизительно 2 ч, приблизительно 3 ч, приблизительно 4 ч, приблизительно 5 ч, приблизительно 6 ч, приблизительно 7 ч, приблизительно 8 ч, приблизительно 9 ч, приблизительно 10 ч, приблизительно 11 ч, приблизительно 12 ч, приблизительно 13 ч, приблизительно 14 ч, приблизительно 15 ч, приблизительно 16 ч, приблизительно 17 ч, приблизительно 18 ч, приблизительно 19 ч, приблизительно 20 ч, приблизительно 21 ч, приблизительно 22 ч, приблизительно 23 ч, приблизительно 24 ч, приблизительно 2 дня, приблизительно 3 дня, приблизительно 4 дня, приблизительно 5 дней, приблизительно 6 дней или приблизительно 7 дней) или более до введения трансплантата экзогенных гемопоэтических стволовых клеток.
ПРИМЕРЫ
Следующие ниже примеры представлены для того, чтобы предоставить средним специалистам в настоящей области техники описание того, как композиции и способы, описанные в настоящем документе, можно использовать, получить и оценить, и предназначены для использования исключительно в качестве примеров настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема того, что авторы настоящего изобретения считают своим изобретением.
Пример 1: Сравнительное исследование аманитинов
Три разных аманитина испытывали параллельно, чтобы определить их кинетику и переносимость в качестве токсинов. На фигуре 1 представлены структуры трех конъюгатов аманитин/линкер. На фигуре 1А представлен конъюгат аманитин/линкер, представленный формулой (IV) (также называемый «Конъюгат А» или «ADC А»), где аманитин содержит расщепляемый линкер (BMP-Val-Ala-PAB) на АА1 (Asn). Аманитин в формуле (IV) основан на аматоксине, содержащем тиотриптофановый фрагмент. На фигуре 1 В представлен конъюгат аманитин/линкер, представленный формулой (VI) (также называемый «Конъюгатом В» или «ADC В», где аманитин конъюгирован с нерасщепляемым линкером на 6' атоме кислорода индола. Аманитин, описанный в формуле (VI), основан на аматоксине, содержащем 6-гидрокситриптофансульфоксидный фрагмент. На фигуре 1С представлен конъюгат аманитин/линкер, описанный в настоящем документе формулой (IIa) (также называемый «Конъюгат С» или «ADC С», включая в себя неасщепляемый линкер на 6' атоме кислорода индола, где аманитин основан на аматоксине, содержащем 6-гидрокситиотриптофановый фрагмент.
Конъюгаты А, В и С испытывали параллельно на их эффективность на экспрессирующих CD117 клетках с предварительной инкубацией в сыворотке человека или без нее. ADC А, В и С либо предварительно инкубировали в среде для культивирования клеток без сыворотки человека либо в 50% сыворотке человека при 37°С в течение 48 часов. Затем титрованный ADC добавляли к клеткам Kasumi-1 и инкубировали в течение 3 дней при 37°С и определяли гибель клеток с помощью CellTiter-Glo. Как показано на фигуре 2, в отсутствие инкубации сыворотки расщепляемый конъюгат А и нерасщепляемый конъюгат С достигли аналогичной эффективности к 3-му дню, при этом нерасщепляемый конъюгат В демонстрировал снижение максимального уничтожения при более высоких концентрациях. Каждый конъюгат ADC демонстрировал пикомолярное уничтожение IC50. Когда ADC предварительно инкубировали в течение 48 часов в присутствии сыворотки человека, эффективность нерасщепляемого конъюгата В значительно снижалась, но сохранялась для расщепляемого конъюгата А и нерасщепляемого конъюгата С. Таким образом, расщепляемые и нерасщепляемые конъюгаты А и С были стабильными в сыворотке, в то время как нерасщепляемый конъюгат В был инактивирован в присутствии сыворотки человека, как было измерено с помощью цитотоксичности in vitro.
Для определения различий в кинетике ADC-опосредованной цитотоксичности клетки Kasumi-1 инкубировали с титрованием расщепляемого конъюгата А или нерасщепляемого конъюгата С в течение 3-7 дней при 37°С, а жизнеспособность клеток измеряли на 3, 4, 5, 6 и 7 день с помощью CellTiter-Glo. Как показано на фигуре 3, наблюдались значительные различия в максимальном уничтожении клеток при высоких концентрациях для расщепляемых и нерасщепляемых ADC. Когда клетки инкубировали в течение 6 дней при 37°С с ADC, как расщепляемый конъюгат А, так и нерасщепляемый конъюгат С были способны достичь почти полного уничтожения клеток при высоких концентрациях. Уничтожение более 80% клеток Kasumi-1 в культуре с 160 пМ нерасщепляемого конъюгата С могло быть достигнуто только после инкубации клеток Kasumi-1 в течение 5 дней или дольше, в то время как аналогичный порог был достигнут для расщепляемого конъюгата А через 3 дня инкубации или дольше.
В целом, расщепляемый ферментом аманитин на фигуре 1А (конъюгат А) и нерасщепляемый аманитин (конъюгат С на фигуре 1С) показали долгосрочную стабильность в сыворотке, в то время как аманитин/линкер В показал нестабильность и инактивацию в сыворотке. Нерасщепляемый конъюгат С продемонстрировал расширенную кинетику цитотоксичности, измеренную в анализе in vitro, по сравнению с аналогичным расщепляемым конъюгатом аманитина (конъюгат А).
Пример 2: ADC против CD117 демонстрирует сильное уничтожение клеток AML и клеток CD34+ человека in vitro, селективно истощает клетки CD34+ человека у гуманизированных мышей и демонстрирует активность против AML на моделях ксенотрансплантатов
Антитело к CD117 (Ab85 с модификациями Fc L234A, L235A, D265C и Н435А) конъюгировали с конъюгатом С, образуя ADC С против CD117. ADC С против CD117 испытывали как in vitro, так и in vivo на его способность нацеливаться и уничтожать клетки, экспрессирующие CD117 и HSC человека.
Два анализа in vitro выполнили с использованием ADC С против CD117. В первом тестировали способность ADC уничтожать клетки Kasumi-1 (линия клеток AML), которые экспрессируют CD117 человека. Как описано на фиг. 4А, ADC С против CD117 (обозначенный как «анти-CD117-АМ» на фиг. 4А) титровали и инкубировали с клетками Kasumi-1 в течение 6 дней при 37°С, а жизнеспособность оценивали с помощью CellTiter-Glo. Контролем был неспецифический ADC С, соответствующий изотипу. Нерасщепляемый конъюгат С демонстрировал сильное уничтожение клеток Kasumi-1 с IC50, равным 6,4 пМ. На фигуре 4В проведен аналогичный анализ цитотоксичности с использованием собранных CD34+ клеток костного мозга человека. Клетки CD34+ костного мозга человека инкубировали с нерасщепляемым конъюгатом С или соответствующим ADC изотипического контроля в течение 6 дней. Уничтожение клеток определяли методом проточной цитометрии. Нерасщепляемый конъюгат С продемонстрировал сильное уничтожение первичных CD34+ CD90+ клеток человека с IC50 5,1 пМ.
Также провели анализ in vivo для проверки способности ADC С против CD117 избирательно истощать CD34+ клетки человека. Разовую дозу 0,1, 0,3 или 1,0 мг/кг ADC С против CD117 вводили гуманизированным мышам NSG. Контроли включали в себя дозу 1 мг/кг неконъюгированного антитела, которая включала в себя часть обработки нерасщепляемым конъюгатом С и носителем (PBS). На 21 день количество CD34+ клеток человека определяли анализом проточной цитометрии костного мозга, взятого из бедренной кости получивших лечение гуманизированных мышей NSG. Как показано на фиг. 5, ADC С против CD117 был способен эффективно истощать CD34+ клетки человека, достигая более 95% истощения по сравнению с PBS как для доз 0,3, так и 1 мг/кг. Неконъюгированные антитела не демонстрировали истощения по сравнению с контролем носителем.
Чтобы оценить in vivo противоопухолевую активность ADC, гуманизированным мышам NSG имплантировали клетки Kasumi-1, а затем они получали лечение с помощью носителем, 30 мг/кг цитарабина QDx5 (ARA-C), расщепляемого конъюгата А (1 мг/кг 1×, 1 мг/кг QODx2) или 10 мг/кг изотипа, конъюгированного с расщепляемым аманитином (фиг. 1А). Кроме того, мышам с имплантированными Kasumi-1 вводили нерасщепляемый конъюгат С (1 мг/кг 1×, 3 мг/кг 1×, 10 мг/кг 1×) или изотип 10 мг/кг, конъюгированный с нерасщепляемым аманитином (фиг. 1С). Кривые Каплана-Мейера, демонстрирующие выживаемость животных, получавших лечение, как указано, изображены на фигуре 6. Мыши, которым имплантировали Kasumi-1, получившие лечение расщепляемым конъюгатом А, демонстрируют медианное выживание выше 50% на 130 день для групп, получавших 1 мг/кг или 1 мг/кг QODx2, по сравнению с животными, получившими лечение изотипом, ARA-C или носителем. Мыши, получавшие 3 мг/кг или 10 мг/кг нерасщепляемого конъюгата С, демонстрируют полную выживаемость на 130 день по сравнению с животными, получившими лечение изотипом, ARA-C, нерасщепляемым конъюгатом С 1 мг/кг или носителем.
Таким образом, нерасщепляемый конъюгат С демонстрирует сильное уничтожение клеток in vitro клеток Kasumi-1, линии клеток AML и первичных человеческих CD34+ CD90+ клеток костного мозга. Конъюгат С способен истощать более 95% CD34+ клеток человека из костного мозга гуманизированных мышей NSG. Как расщепляемые, так и нерасщепляемые конъюгаты продемонстрировали сильную противоопухолевую активность in vivo.
Пример 3: Эффективность и переносимость ADC С у не относящихся к человеку приматов (NHP)
Для определения эффективности нерасщепляемого конъюгата С у не относящихся к человеку приматов самцов яванских макак лечили однократной дозой нерасщепляемого конъюгата С в дозах 0,5, 1,0 и 2,0 мг/кг. Дозы 0,5 и 1,0 мг/кг были с Ab85 со следующими модификациями Fc: D265C Н435А (нумерация EU), конъюгированное с нерасщепляемым аманитином С (фиг. 1С). Доза 2,0 мг/кг включала в себя Ab85 со следующими модификациями Fc: L234A L235A D265C Н435А (нумерация EU), конъюгированное с нерасщепляемым аманитином С (фиг. 1С). Аспираты костного мозга собирали у получивших лечение животных на 7 день, и эффективность оценивали количественным определением популяций CD34+ CD90+ CD45RA- с помощью проточной цитометрии. Значительное истощение наблюдалось при дозах 0,5 и 1,0 мг/кг. Образцы периферической крови собирали в течение 28-дневного исследования. Количество ретикулоцитов у животных, получавших 0,5, 1,0 и 2,0 мг/кг, значительно снизилось, начиная со 2-го дня, при этом восстановление количества ретикулоцитов происходил дозозависимым образом. Это ожидается в фармакологии нацеленного воздействия, поскольку ретикулоциты недолговечны, а популяции предшественников в этой гемопоэтической линии сильно экспрессируют CD117. Истощение нейтрофилов наблюдалось начиная с 18-го дня для всех групп лечения. Это также ожидается в фармакологии нацеленного воздействия, поскольку нейтрофилы зависят от дифференцировки гемопоэтических стволовых клеток для регенерации.
В дополнение к эффективности, переносимость ADC, содержащих либо ADC А против CD117, либо ADC С против CD117, протестировали в NHP. Как показано на фигуре 8, лечение яванских макак дозой 0,3 мг/кг расщепляемого конъюгата А, конъюгированного с антителом CK6 (модификации Fc D265C и Н435А), приводило кумеренному временному и обратимому повышению уровней аспартатаминотрансферазы (AST) без повышения выше нормы для аланинаминотрансферазы (ALT), лактатдегидрогеназы (LDH) или общего билирубина (TBIL) в ходе исследования. Лечение животных дозой конъюгата А 0,6 мг/кг приводило к более значительному повышению AST, ALT, LDH и TBIL.
У яванских макак, получавших 0,5 и 1,0 мг/кг нерасщепляемого конъюгата С, Ab85 со следующими модификациями Fc: D265C Н435А (нумерация EU), конъюгированного с нерасщепляемым аманитином С (фиг. 1С), продемонстрировала умеренное временное и обратимое повышение уровня AST без повышения уровней ALT, LDH и TBIL выше нормы на протяжении всего исследования. У животных, получавших 2,0 мг/кг нерасщепляемого конъюгата С, Ab85 со следующими модификациями Fc: L234A L235A D265C Н435А (нумерация EU), конъюгированного с нерасщепляемым аманитином С (фиг. 1С), наблюдалось более значительное повышение для AST и ALT.
Фармакокинетические характеристики также изучали в ADC А против CD117 по сравнению с ADC С.Как показано на фиг. 9, хорошо переносимые дозы конъюгата С ADC обеспечивали взрывное насыщение в NHP по сравнению с конъюгатом A ADC. Фармакокинетические данные также анализировали для конъюгата С ADC с различными мутациями Fc. Как для ADC А против CD117, так и для ADC С против CD117, анализы цитотоксичности ex vivo показали, что для обоих ADC наблюдается потеря эффективности при концентрациях в плазме ниже 100 нг/мл (данные не показаны).
В целом, ADC С против CD117 продемонстрировал эффективность при таких низких дозах, как 0,5 мг/кг, и переносился при однократной дозе 2,0 мг/кг у яванских макак, в то время как расщепляемый конъюгат А был эффективен при такой низкой дозе, как 0,3 мг/кг. кг, но не переносится при однократной дозе 0,6 мг/кг, что подтверждает вывод о том, что нерасщепляемый аманитин (фиг. 1С) лучше переносится.
Пример 4: Уничтожение первичных Т-клеток человека с помощью ADC С против CD2 и ADC С против CD5
Провели исследование, чтобы определить, были ли антитела к CD2 и к CD5 D265C Н435А, используемые в ADC С (как описано выше и на фиг. 1), столь же эффективными, как конъюгат А для уничтожения первичных Т-клеток. Таким образом, использовали анализ уничтожения клеток in vitro. Протокол исследования представлен ниже:
ADC А и С против CD2 включали в себя антитело к CD2 RPA с модификациями FC D265C/H435A. Голое RPA использовали в качестве контроля.
Анти-CD5 ADC А и С включали анти-CD5-антитело 5D7 с модификациями Fc D265C/H435A. Голое 5D7 использовали в качестве контроля. Как показано на фиг. 12, конъюгат С продемонстрировал истощение Т-клеток, сравнимое с конъюгатом А. Результаты эффективности также представлены в таблице ниже.
На фигуре 13 представлены результаты, показывающие, что CD2 насыщается к 5-му дню, тогда как некоторые клетки все еще экспрессируют CD5.
Результаты выше и на фигурах 12 и 13 показывают, что ADC С как против CD2, так и против CD5 (D265C Н435А) были столь же эффективны, как конъюгат А, на первичных Т-клетках человека in vitro.
Пример 5: Эффективность ADC С против CD45
Помимо CD2, CD5 и CD117, конъюгат С протестировали по сравнению с конъюгатом А в контексте антител к CD45. Химерное антитело к CD45, 3D6, использовали в нижеприведенных экспериментах (вариабельные области 3D6 мыши и каркасная область человеческого IgG1 с модификациями Fc D265C и Н435А).
Провели анализ уничтожения клеток in vitro для сравнения ADC А против CD45 и ADC С против CD45. Как показано на фиг. 14А, оба ADC А и С были способны уничтожать клетки CD34+ костного мозга человека, а также РВМС. Также протестировали отрицательный изотипический контроль. Как описано в таблице, представленной на фиг. 14А, оба ADC А и С против CD45 были эффективны при уничтожении CD34+ костного мозга и клеток РВМС. Этот анализ повторили с ADC А и В против CD45. Как показано на фиг. 14В, ADC А против CD45 показал более высокую эффективность в отношении уничтожения CD34+ клеток костного мозга по сравнению с ADC В против CD45. Обе молекулы были эффективны аналогичным образом при уничтожении РВМС человека и яванского макака.
Второй анализ уничтожения клеток in vitro также проводили с использованием ADC А и С против CD45, изучая способность каждого ADC уничтожать клетки, экспрессирующие либо SKNO-1, либо REH. Результаты представлены на фигуре 13 (левая панель представляет собой количество живых клеток SKNO-1 после воздействия ADC А или С против CD45; правая панель представляет собой количество живых клеток REH после воздействия ADC А или С против CD45). Эффективность каждой молекулы в этих анализах описана в таблице на фиг. 13.
ADC А и С против CD45 дополнительно тестировали на способность каждого ADC истощать CD45+ клетки in vivo. Как ADC А (расщепляемый), так и ADC С (нерасщепляемый) были способны эффективно истощать CD45+ клетки в модели на гуманизированных мышах NSG. Результаты исследования представлены на фиг. 14. Как показано на фиг. 16, оба ADC были способны истощать периферические CD45+ клетки, а также CD34+ клетки костного мозга (ВМ). Максимальная общая доза у мышей для ADC А против CD45 составляла 3 мг/кг, тогда как гораздо более высокая доза ADC С являлась переносимой для ADC С против CD45 в дозе более 51 мг/кг. Таким образом, эффективность наблюдалась для обоих ADC против CD45, но ADC С переносился мышами при более высоких дозах.
ADC А и С против CD45 также тестировали на их способность истощать периферические лимфоциты, HSC костного мозга (ВМ) и лимфоциты у гуманизированных мышей NSG. Каждый ADC против CD45 А и С доставляли мышам в дозе 1 мг/кг. Результаты этих исследований описаны на фиг. 15 и показывают, что ADC А и С против CD45 характеризовались сопоставимым истощением периферических лимфоцитов, HSC и лимфоцитов ВМ на 7 день после инъекции в дозе 1 мг/кг. ADC А против CD45 продемонстрировал умеренное, временное обратимое повышение уровня печеночных ферментов в дозе 1 мг/кг, в то время как повышение уровня печеночных ферментов практически не наблюдалось при использовании ADC С против CD45 с той же дозой 1 мг/кг.
Пример 6: Определение характеристик ADC А и С против CD137
ADC А и ADC С против CD137 протестировали на их способность уничтожать Т-клетки, а также на стабильность в сыворотке. В этом примере использовали антитело к CD137 BBK2. Провели анализ уничтожения Т-клеток in vitro, где результаты, показанные на фигуре 16, продемонстрировали, что как ADC А, так и С против CD137 были способны уничтожать активированные Т-клетки по сравнению с изотипическим контролем ADC А и С. Кроме того, стабильность клеточной линии в сыворотке протестировали как для ADC А против CD137, так и для ADC С против CD137 в течение 48 часов, как описано на фигуре 17.
Пример 7: Синтез S-дезокси-5'-гидроксиаманинамида
Описанные в настоящем документе ADC формулы (На) получали из соответствующих конъюгатов линкер-аматоксин стандартными способами, известными специалисту в настоящей области техники. Предпоследний конъюгат аматоксин-линкер для ADC формулы (IIa) (соединение 14; схема 3) можно получить из производного аматоксина 11 в соответствии с общей процедурой О-алкилирования родственного аматоксина (α-аманитина), описанной в публикации заявки на выдачу патента США №2018/0043033, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Производное аматоксина 11 можно получить в соответствии с процедурами, раскрытыми в публикации международной патентной заявки № WO 2019/030173, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки. Соединение 7 (схема 1) можно получить в соответствии со способами, описанными в публикации международной патентной заявки № WO 2014/009025, раскрытие которой полностью включено в настоящий документ.
Пример 8: Производные аманитина
Для конъюгации со специфическими для мишеней антителами использовали различные производные аманитина (фиг. 18, фиг. 19). Их получали в соответствии со способами, раскрытыми в WO 2018/115466 и WO 2019/197654, раскрытия которых полностью включены в настоящий документ.
Пример 9: Способ конъюгации
Антитела, направленные на Her2 или простатическому специфическому мембранному антигену (PSMA), конъюгировали с конъюгатами аматоксин-линкер с помощью так называемой технологии Thiornab. Б этом подходе конъюгация происходит путем конъюгации малеимидного остатка конструкции токсин-линкер со свободной SH-группой сконструированного остатка цистеина в антителе, как показано на следующей схеме реакции:
Принципы этого способа конъюгации раскрыты в Junutula с соавт. (2008), содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки,
Антитела, направленные на Her2 (трастузумаб) или простатический специфический мембранный антиген (PSMA), используемые в настоящих экспериментах, содержат замену D265C в обоих доменах Fc, чтобы обеспечить остаток цистеина, который содержит такую свободную SH-группу. Соответствующая технология раскрыта в WO 2016142049 А1, переуступленной настоящему заявителю, содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки и обеспечивает получение гомогенного продукта с фиксированным соотношением лекарственного средства к антителу («DAR»), равным 2, и сайт-специфической конъюгацией.
Пример 10: Анализ цитотоксичности с ADC против Her2 in vitro
Цитотоксическую активность аматоксиновых конъюгатов против Her2 оценивали in vitro с использованием положительных по мишени линий опухолевых клеток и хемилюминесцентного анализа включения BrdU (Roche Diagnostics). Жизнеспособность клеток определяли после 96 ч инкубации с различными концентрациями конъюгатов при 37°С и 5% СО2 путем измерения фиксированных и пермеабилизированных клеток с помощью антитела к BrdU-HRP считывающем устройстве для микропланшетов BMG Labtech Optima. Значение EC50 кривой зависимости ответа от дозы рассчитывали с помощью программного обеспечения Graphpad Prism 4.0.
Цитотоксическая активность трастузумаба, несущего мутацию D265C (Т-D265C), конъюгированного с соединением 30.2867 (формула (А)) и соединением 30.0880 (формула (В)), соответственно, через его остаток D265C, протестировали на клеточных линиях SKBR-3, NCI-N87, ВТ474 и JIMT-1 (фиг. 20). T-D265C-30.2867 немного превзошел T-D265C-30.0880 на всех протестированных клеточных линиях.
Пример 11: Стабильность ADC против Her2 в плазме человека, мыши и яванского макака
Конъюгаты ADC T-D265C-30.2867 и T-D265C-30.0880 соответственно, направленные на антиген Her2, инкубировали с плазмой человека, мыши и яванского макака, а также с фосфатно-солевым буфером (PBS, контроль) соответственно, в течение 0, 4 и 10 дней. Образцы подвергали электрофорезу в полиакриламидном (РАА) геле с додецилсульфатом натрия (SDS) и (SDS-PAGE), и молекулы тяжелой цепи антитела определяли с помощью аманитин специфической поликлональной антисыворотки с помощью вестерн-блоттинга (фиг. 21).
Конъюгат ADC T-D265C-30.2867 показал более высокую стабильность в плазме по сравнению со всеми тестируемыми видами по сравнению с конъюгатом ADC T-D265C-30.0880. T-D265C-30.2867 показал более низкую стабильность в MP, чем в HP и CP соответственно.
Для дальнейшей оценки стабильности цитотоксическая активность in vitro соединения ADC T-D265C-30.2867 после инкубации в течение 0, 4 и 10 дней, соответственно, в плазме человека, плазме мыши, плазме яванского макака и PBS (фосфатно-солевой буфер, контроль) соответственно, анализировали на клетках SKBR-3 (фиг. 22), на клетках NCI-N87 (фиг. 23) и на клетках JIMT-1 (фиг. 24).
После 4-дневной инкубации в плазме человека, плазме мышей и плазме яванского макака соответственно, цитотоксический потенциал T-D265C-30.2867 на клетках SKBR-3 снизился лишь незначительно. После 10-дневной инкубации в плазме человека и плазме яванского макака цитотоксический потенциал снизился в 20 раз, однако в плазме мышей наблюдалось снижение в 33 раза. Инкубация в PBS при 37°С почти не влияла на цитотоксический потенциал Т-D265C-30.2867 на клетках SKBR-3 (фиг. 22, таблица 7).
После 4-дневной инкубации в плазме человека, плазме мышей и плазме яванского макака соответственно, цитотоксический потенциал T-D265C-30.2867 на клетках NCI-N87 снизился лишь незначительно. После 10-дневной инкубации в плазме человека и плазме яванского макака цитотоксический потенциал снизился в 15 раз, однако приблизительно 50% остаточная жизнеспособность клеток наблюдалась после 10-дневной инкубации в плазме яванского макака. После 10-дневной инкубации в плазме мышей наблюдалось снижение в 67 раз. Инкубация в PBS при 37°С имела низкий эффект на цитотоксический потенциал T-D265C-30.2867 на клетках NCI-N87 (фиг. 23).
После 4-дневной инкубации в плазме человека и плазме яванского макака цитотоксический потенциал T-D265C-30.2867 на клетках JIMT-1 снизился лишь незначительно. После 4-дневной инкубации в плазме мышей T-D265C-30.2867 вообще не показал цитотоксического потенциала на клетках JIMT-1. После 10-дневной инкубации в плазме человека, плазме мышей и плазме яванского макака вообще не наблюдалось цитотоксического потенциала на клетках JIMT-1. Инкубация в PBS при 37°С почти не влияла на цитотоксический потенциал Т-D265C-30.2867 на клетках JIMT-1 (фиг. 24).
Пример 12: Эффективность ADC против Her2 на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата у мышей in vivo
В модели ксенотрансплантата JIMT-1 у мышей самкам бестимусных мышей NMRI инокулировали 5×106 клеток рака молочной железы JIMT-1 на мышь подкожно в правый бок. При среднем объеме опухоли ~120 мм3, животных разделяли на три группы в день 0. В тот же день животные получали однократную внутривенную дозу конъюгатов антитела к Her2 и лекарственного средства на основе аманитина (ADC). Объем опухоли и массу тела определяли дважды в неделю.
Как показано на фиг. 25, эффективность T-D265C-30.2867 in vivo была лучше, чем у T-D265C-30.0880. Через 113 дней после лечения 0/10 животных, получивших дозу 2 мг/кг, и 4/10 животных, получивших дозу 6 мг/кг T-D265C-30.2867, были живы; в последней группе 1/4 животных не имели опухолей. Напротив, через 113 дней после лечения 0/10 животных, получивших дозу 2 мг/кг, и 0/10 животных, получивших дозу 6 мг/кг T-D265C-30.0880, были живы. Через 113 дней после лечения 4/10 животных, получивших дозу 1 мг/кг Т-Р265С-30.1699, были живы, а у 1/4 животных опухоли не было.
С соответствующей моделью опухоли с использованием ксенотрансплантата NCI-N87 у мыши, как показано на фиг. 26, снова цитотоксическая эффективность T-D265C-30.2867 in vivo была лучше, чем у Т-D265C-30.0880. Через 141 день после лечения 0/10 животных, получивших дозу 2 мг/кг, и 3/10 животных, получивших дозу 6 мг/кг T-D265C-30.2867, были живы; однако в последней группе 0/3 животных не имели опухолей. Напротив, через 141 день после лечения 0/10 животных, получивших дозу 2 мг/кг, и 0/10 животных, получивших дозу 6 мг/кг T-D265C-30.0880, были живы. Через 141 день после лечения 0/10 животных, получивших дозу 1 мг/кг T-D265C-30.1699, также были живы.
Пример 13: Анализ цитотоксичности с ADC против PSMA in vitro
Цитотоксическую активность in vitro антитела к PSMA, несущего мутацию D265C (h3/F11-D265C-Var16), конъюгированного с соединением 30.2867 (формула (А)) и соединением 30.0880 (формула (В)) соответственно, через его остаток D265C, испытывали на клеточных линиях LNCap-, 22RV1- (обе PSMA-положительные) и РС3 (PSMA-отрицательная) (фиг. 27). Соединение h3/F11-D265C-Var16-30.2867 немного превзошло h3/F11-D265C-Var16-30.0880 на одной из двух протестированных клеточных линий. На PSMA-отрицательной клеточной линии РС3 цитотоксического потенциала не наблюдалось.
Пример 14: Стабильность ADC против PSMA в плазме человека, мыши и яванского макака
Конъюгаты ADC h3/F11-D265C-Var16-30.2867 и h3/F11-D265C-Var16-30.0880 соответственно, направленные на антиген PSMA, инкубировали в плазме человека, мыши и яванского макака и фосфатно-солевом буфере (PBS, контроль) соответственно в течение 0, 4 и 10 дней. Образцы подвергали электрофорезу в полиакриламидном (РАА) геле с додецилсульфатом натрия (SDS) (SDS-PAGE), и молекулы тяжелой цепи антитела определяли с помощью аманитин-специфической поликлональной антисыворотки с помощью вестерн-блоттинга.
h3/F11-D265C-Var16-30.2867 показал более высокую стабильность в плазме во всех протестированных видах плазмы по сравнению с h3/F11-D265C-Var16-30.0880. h3/F11-D265C-Var16-30.2867 показал более низкую стабильность в плазме мышей, чем в плазме человека и плазме яванского макака соответственно.
Пример 15: Эффективность ADC против PSMA на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата у мышей in vivo
В модели опухоли с использованием ксенотрансплантата LNCap у мышей самцам мышей SCID СВ17 инокулировали 2,5 × 106 клеток карциномы предстательной железы LNCap на мышь подкожно в правый бок. При среднем объеме опухоли ~150 мм3, животных распределяли по группам в день 0. В тот же день животные получали однократную внутривенную дозу конъюгатов антител к PSMA с лекарственным средством на основе аманитина (ADC). Объем опухоли и массу тела определяли дважды в неделю.
Как показано на фиг. 28, эффективность h3/F11-D265C-Var16-30.2867 in vivo была лучше, чем эффективность h3/F11-D265C-Var16-30.0880.
Пример 16: Исследование переносимости на обезьянах
Провели исследование переносимости на обезьянах с не связывающимся ADC против дигоксигенина (DIG-D265C-30.2867) с использованием возрастающих доз от 1 мг/кг до 20 мг/кг. Результаты оценки показателей LDH, AST, ALT показали хорошую переносимость (фиг. 29). Фармакокинетические данные для ADC и аматоксина в сыворотке крови показаны на фиг. 30 и фиг. 31 соответственно. Оба животных умерли через 15 и 19 дней соответственно после последней дозы (20 мг/кг). Максимально переносимая доза (MTD) составила 15 мг/кг <MTD <20 мг/кг.
Пример 17: Анализ цитотоксичности in vitro с использованием различных по структуре производных аманитина
Цитотоксическую активность in vitro ADC, перечисленных в таблице 8, которые содержат антитело к Her2, несущее мутацию D265C (T-D265C, анти-Her2-D265C), конъюгированное со структурно различными производными аманитина через его остаток D265C, протестировали на клетках ЛМТ-1, клетках NCI-N87 и клетках SKBR-3.
Цитотоксические эффективности соответствующих ADC в отношении клеток JIMT-1 (фиг. 32), клеток NCI-N87 (фиг. 33) и клеток SKBR-3 (фиг. 34) соответственно показаны в таблице 9.
Цитотоксическую активность in vitro ADC, перечисленных в таблице 10, которые содержат антитело к PSMA, несущее мутацию D265C (h3/F11-D265C-Var16, анти-PSMA-D265C), конъюгированное со структурно различными производными аманитина через его остаток D265C, протестировали на клеточных линиях LNCap- и 22RV1 (обе PSMA-положительные).
Цитотоксические эффективности соответствующих ADC на клетках LNCap (фиг. 35) и 22RV1 (фиг. 36) соответственно показаны в таблице 11.
Пример 18: Эффективность ADC против PSMA, содержащих различные по структуре производные аманитина, на модели опухоли с использованием ксенотрансплантата у мышей in vivo
В модели опухоли с использованием ксенотрансплантата LNCap у мышей самцам мышей SCID СВ17 инокулировали 2,5 × 106 клеток карциномы предстательной железы LNCap на мышь подкожно в правый бок. При среднем объеме опухоли ~ 150 мм3 животных распределяли по группам в день 0. В тот же день животные получили однократную внутривенную дозу одного из структурно различных конъюгатов антител к PSMA с лекарственным средством на основе аманитина (ADC), перечисленных в таблице 6. Опухоль объем и массу тела определяли дважды в неделю.
Результаты для ADC, содержащих производные аманитина с различной структурой, показаны на фигурах 37-42 и в таблице 12. Было показано, что ADC, содержащие нерасщепляемые линкеры, конъюгированные с 6'-гидроксигруппой триптофана (аминокислота 4) аматоксина, в частности h3/F11-D265C-Var16-30.2867 с тиоэфирным мостиком между Trp и Cys обладают высокой цитотоксической эффективностью in vivo по сравнению с ADC, содержащими расщепляемые линкеры, конъюгированные либо с аминокислотой 4, либо с аминокислотой 1 аматоксина.
Пример 19: Эффективность ADC, содержащих антитела с мутацией LALA и/ил и D265C
Эффективность ADC, содержащих антитела, содержащие как L234A, так и L235A мутации и мутацию D265C, тестировали на моделях с использование мышей с ксенотрансплантатом опухоли (CDX), полученным из клеточной линии. ADC против Her2, содержащие тройные мутации L234A/L235A/D265C и конструкцию аматоксин-линкер HDP30.2060 и HDP30.2867 соответственно (Т-LALA-D265C-30.2060 и T-LALA-D265C-30.2867 соответственно), протестировали на Her2-положительных клетках NCI-N87. Результаты показаны на фиг. 43. ADC против PSMA, содержащие тройные мутации L234A/L235A/D265C и конструкцию аматоксин-линкер HDP30.2060 и HDP30.2867, соответственно (h3/F11-LALA-D265C-Var16-30.2060 и h3/F11-LALA-D265C-Var16-30.2867 соответственно) тестировали на PSMA-положительных клетках LNCap. Результаты показаны на фиг. 44. В обоих исследованиях было показано, что ADC, несущие тройную мутацию, эффективны в уменьшении объемов опухоли на соответствующих моделях CDX у мышей.
По сравнению с ADC без мутаций L234A/L235A/D265C с использованием ADC, содержащих антитела, характеризующиеся мутации L234A/L235A и мутацию D265C, был получен такой же диапазон выходов продукции. Кроме того, мутации не влияли на выходы конъюгации, полученные с соответствующими антителами, по сравнению с антителами без мутаций.
Пример 20: Анализ цитотоксичности in vitro на целевых клетках по сравнению с нецелевыми клетками
Как показано на фиг. 45, цитотоксический потенциал in vitro Her2-специфических ADC, содержащих антитело, несущее мутации L234A/L235A и/или мутацию D265C, по сравнению с ADC без мутации и с контрольными ADC, содержащими то же антитело, несущее другие мутации (А118С, D265A), оцененный в 96-часовом анализе BrdU на Her2-положительных клетках SKBR-3, был сопоставим; полная цитотоксичность наблюдалась для всех мутантов и контрольных ADC.
Напротив, когда цитотоксический потенциал in vitro Her2-специфических ADC, содержащих антитело, несущее мутации L234A/L235A и/или мутацию D265C, оценивали в 96-часовом анализе CTG (фиг. 46) и в 120-часовом анализе CTG (фиг. 47) на Her2-отрицательной клеточной линии макрофагов ТНР-1 по сравнению с соответствующим ADC без мутаций в том же каркасе антитела, неспецифическая токсичность наблюдалась с ADC без мутации в антителе (Т-30.1699, фиг. 46А, С; фиг. 47С) при концентрациях ADC выше чем 10-10-10-9 М. С использованием ADC, содержащим антитело, несущее мутации L234A/L235A («LALA») (T-LALA-30.1699), или мутацию D265C (T-D265C) или все три мутации (T-LALA-D265C-30.1699), такой неспецифической токсичности для нецелевых клеток ТНР-1 не наблюдалось в 96-часовом анализе CTG (фиг. 46А, В) даже при концентрации ADC в 10-100 раз выше. С использованием ADC, содержащим антитело, несущее мутацию D265A (T-D265A-30.1699), также не наблюдали неспецифической токсичности для нецелевых клеток ТНР-1. В 120-часовом анализе CTG эти данные были по существу подтверждены; неспецифическая токсичность ADC без мутации в антителе была значительно выше, чем у ADC, содержащих антитело, несущее единственную или тройную мутацию (фиг. 47С). Комбинация мутаций LALA и D265C (или D265A), по-видимому, оказывает аддитивный или даже синергетический эффект с точки зрения снижения неспецифической токсичности для нецелевых клеток (фиг. 47С, D). Было показано, что неспецифическая цитотоксичность в отношении клеток ТНР-1 опосредована рецептором Fcγ, что подтверждает, что те АТАС, которые не проявляют цитотоксичности в отношении клеток ТНР-1 (варианты LALA, D265C и D265A), обладают сниженным взаимодействием с рецептором Fcγ и, в свою очередь, уменьшенным опосредованным FcγR поглощением.
Таким образом, мутации L234A/L235A и D265A/C устраняют неспецифическую токсичность ADC для клеток ТНР-1 в испытанных условиях.
Пример 21: Влияние мутаций LALA и/или D265C в ADC на связывание FcgR
Взаимодействие ADC с FcgR тестировали с помощью биослойной интерферометрии (BLI). Результаты этих исследований связывания показаны в таблице 13.
Как показано в таблице 13, введение мутаций LALA, D265A или D265C в антитело, входящее в состав ADC, значительно снижает аффинность к FcgRI, а также снижает связывание с FcgRIIa и FcgRIIIa. Комбинация с мутацией D265 (D265C, D265A) дополнительно резко снижает связывание с FcgRI.
Пример 22: Влияние мутаций LALA и/или D265C в ADC на переносимость in vivo
Переносимость ADC, содержащих, соответственно, Her2- или PSMA-специфические антитела, несущие мутации, оценивали на мышах. Результаты показаны в таблице 14. Все использованные антитела характеризовались одним и тем же каркасом и не обладали перекрестной реактивностью у мышей.
Как показано в таблице 14, с ADC, содержащими соединение аматоксин/линкер HDP 30.2060, и антитела, несущие мутации LALA и D265C, максимальная переносимая доза была значительно выше, чем для ADC, содержащих указанное соединение аматоксин/линкер, и антитела, несущие только мутацию D265C. С ADC, содержащими соединение аматоксин/линкер HDP 30.2867 и антитела, несущие мутации LALA и D265C, переносимость была еще выше.
Переносимость ADC, содержащих антитела, несущие соответствующие мутации, также оценивали на не относящихся к человеку приматах. Все использованные антитела характеризовались одним и тем же каркасом и не связывались в организме не относящихся к человеку приматов. ADC против PSMA h3/F11-LALA-D265C-Var16-30.2060 (несущий мутации LALA и D265C), h3/F11-D265C-Var16-30.2060 (несущий только мутацию D265C) и ADC против дигоксигенина DIG-D265C-30.2060 и DIG-D265C-30.2867 (несущие только мутацию D265C) оценивали для исследования переносимости с увеличением дозы на яванских макаках.
Группам из 2 самок животных вводили инъекцию h3/F11-LALA-D265C-Var16-30.2060 в дни 1 (1 мг/кг), 23 (3 мг/кг), 44 (5 мг/кг), 65 (6 мг/кг), 86 (7,5 мг/кг), 128 (10 мг/кг), h3/F11-D265C-Var16-30.2060 в дни 1 (1 мг/кг), 23 (3 мг/кг) и 44 (5 мг/кг), DIG-D265C-30.2060 в дни 1 (1 мг/кг), 22 (3 мг/кг), 43 (5 мг/кг), 64 (7,5 мг/кг) или DIG-D265C-30.2867 в дни 1 (1 мг/кг), 22 (3 мг/кг), 43 (5 мг/кг), 64 (7,5 мг/кг), 106 (10 мг/кг), 148 (15 мг/кг) и 196 (20 мг/кг). За животными наблюдали с течением времени на предмет биохимических и гематологических параметров крови, массы тела, потребления пищи, клинических признаков и смертности. Кроме того, собирали образцы крови для фармакокинетических исследований. В конце экспериментов образцы тканей использовали для гистопатологических исследований.
Дозы вплоть до 7,5 мг/кг h3/F11-LALA-D265C-Var16-30.2060 (с мутациями LALA и D265C), 3 мг/кг h3/F11-D265C-Var16-30.2060 (только с мутацией D265C), 5 мг/кг DIG-D265C-30.2060 и 15 мг/кг DIG-D265C-30.2867 (только с мутацией D265C) хорошо переносились без признаков повреждения почек по параметрам сыворотки и без изменения массы тела и потребления пищи. Дозы 10 мг/кг h3/F11-LALA-D265C-Var16-30.2060, 5 мг/кг h3/F11-D265C-Var16-30.2060, 7,5 мг/кг DIG-D265C-30.2060 и 20 мг/кг DIG-D265C-30.2867 привели к гибели животных. Результаты представлены в таблице 15.
Данные на не относящихся к человеку приматах подтвердили, что для ADC, содержащих антитела, несущие мутации LALA и D265C, максимально переносимая доза была значительно выше, чем для ADC, содержащих антитела, несущие только мутацию D265C. С использованием ADC, содержащими соединение аматоксин/линкер HDP 30.2867 и антитела, несущие мутации LALA и D265C, переносимость была особенно высокой.
Другие варианты осуществления
Все публикации, патенты и заявки на выдачу патентов, упомянутые в настоящем описании, включены в настоящий документ посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая независимая публикация или заявка на выдачу патента была специально и индивидуально указана для включения посредством ссылки.
Хотя настоящее изобретение было описано в связи с его конкретными вариантами осуществления, следует понимать, что оно допускает дальнейшие модификации, и подразумевается, что настоящая заявка охватывает любые вариации, применения или адаптации настоящего изобретения, следуя, в целом, принципам настоящего изобретения и включая в себя такие отклонения от настоящего изобретения, которые входят в известную или обычную практику в области техники, к которой относится настоящее изобретение, и могут быть применены к существенным признакам, изложенным в настоящем документе выше, и подпадают под объем формулы изобретения.
Другие варианты осуществления находятся в пределах формулы изобретения.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Гейдельберг Фарма Рисерч ГмбХ
<120> АМАТОКСИНОВЫЕ КОНЪЮГАТЫ АНТИТЕЛА С ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВОМ
И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> HD 40727
<160> 564
<170> PatentIn версии 3.5
<210> 1
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 1
Ser Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 2
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 2
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 3
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 3
His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 4
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 4
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Ala Leu Ala
1 5 10
<210> 5
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 5
Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser
1 5
<210> 6
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 6
Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5 10
<210> 7
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Glu Asn Gly Ser Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Gly Ala Val Ser Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 8
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 8
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
100 105
<210> 9
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 9
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ala
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 10
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 10
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 11
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 11
Phe Thr Phe Ser Asp Ala Asp Met Asp
1 5
<210> 12
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 12
Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 13
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 13
Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 14
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 14
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 15
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 15
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 16
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 16
Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr Thr
1 5
<210> 17
<211> 363
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 17
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggagggtc cctgagactc
60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gacgccgaca tggactgggt ccgccaggct
120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt actagaaaca aagcaggaag ttacaccaca
180
gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattc aaagaactca
240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga
300
gagcctaaat actggatcga cttcgaccta tgggggagag gtaccttggt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 18
<211> 321
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 18
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agctacatcg ccccttacac ttttggcgga
300
gggaccaagg ttgagatcaa a
321
<210> 19
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 19
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 20
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 20
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 21
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 21
Gly Thr Phe Arg Ile Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 22
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 22
Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 23
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 23
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 24
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 24
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 25
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 25
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 26
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 26
Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
1 5
<210> 27
<211> 357
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 27
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc
60
tcctgcaagg cttctggagg caccttccga atctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc
120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatccctg acttcggtgt agcaaactac
180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac
240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggtgga
300
ttggacacag acgagttcga cctatggggg agaggtacct tggtcaccgt ctcctca
357
<210> 28
<211> 318
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 28
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattaac agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa ggagtcagtg acatcacttt tggcggaggg
300
accaaggttg agatcaaa
318
<210> 29
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 29
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 30
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 30
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 31
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 31
Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 32
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 32
Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 33
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 33
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 34
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 34
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 35
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 35
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 36
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 36
Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
1 5
<210> 37
<211> 357
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 37
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc
60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc
120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac
180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac
240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggtgga
300
ttggacacag acgagttcga cctatggggg agaggtacct tggtcaccgt ctcctca
357
<210> 38
<211> 318
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 38
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattaac agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa ggagtcagtg acatcacttt tggcggaggg
300
accaaggttg agatcaaa
318
<210> 39
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 39
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Leu Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ala Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 40
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 40
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 41
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 41
Gly Thr Phe Ser Leu Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 42
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 42
Gly Ile Ile Pro Ala Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 43
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 43
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 44
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 44
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 45
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 45
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 46
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 46
Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
1 5
<210> 47
<211> 357
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 47
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc
60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc ctctatgcta tctcctgggt gcgacaggcc
120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatccctg ccttcggtac cgcaaactac
180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac
240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggtgga
300
ttggacacag acgagttcga cctatggggg agaggtacct tggtcaccgt ctcctca
357
<210> 48
<211> 318
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 48
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattaac agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa ggagtcagtg acatcacttt tggcggaggg
300
accaaggttg agatcaaa
318
<210> 49
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 49
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Leu Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro His Phe Gly Leu Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 50
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 50
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 51
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 51
Gly Thr Phe Ser Leu Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 52
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 52
Gly Ile Ile Pro His Phe Gly Leu Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 53
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 53
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 54
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 54
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 55
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 55
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 56
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 56
Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
1 5
<210> 57
<211> 357
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 57
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc
60
tcctgcaagg cttctggagg caccttctcc ctctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc
120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatccctc acttcggtct cgcaaactac
180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac
240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggtgga
300
ttggacacag acgagttcga cctatggggg agaggtacct tggtcaccgt ctcctca
357
<210> 58
<211> 318
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 58
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattaac agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa ggagtcagtg acatcacttt tggcggaggg
300
accaaggttg agatcaaa
318
<210> 59
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 59
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr His Thr Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 60
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 60
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn Ser Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 61
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 61
Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser
1 5
<210> 62
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 62
Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 63
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 63
Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr His Thr Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 64
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 64
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 65
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 65
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 66
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 66
Gln Gln Thr Asn Ser Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 67
<211> 369
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 67
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagctgggt ccgccaggct
120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac
180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat
240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc caagggccct
300
cctacatacc acacaaacta ctactacatg gacgtatggg gcaagggtac aactgtcacc
360
gtctcctca
369
<210> 68
<211> 321
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 68
gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc gtgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgtc gggcgagtca gggtattagc agctggttag cctggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct
240
gaagattttg caacttatta ctgtcagcaa acaaatagtt tcccttacac ttttggcgga
300
gggaccaagg ttgagatcaa a
321
<210> 69
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 69
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Val Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Asp Ser Val Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr His Thr Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 70
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 70
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn Ser Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 71
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 71
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Val Met Ile
1 5
<210> 72
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 72
Ser Ile Ser Gly Asp Ser Val Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 73
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 73
Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr His Thr Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 74
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 74
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 75
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 75
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 76
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 76
Gln Gln Thr Asn Ser Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 77
<211> 369
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 77
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc
60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgtca tgatctgggt ccgccaggct
120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaagc attagtggtg acagcgtaac aacatactac
180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat
240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc caagggccct
300
cctacatacc acacaaacta ctactacatg gacgtatggg gcaagggtac aactgtcacc
360
gtctcctca
369
<210> 78
<211> 321
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 78
gacatccaga tgacccagtc tccatcttcc gtgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgtc gggcgagtca gggtattagc agctggttag cctggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct
240
gaagattttg caacttatta ctgtcagcaa acaaatagtt tcccttacac ttttggcgga
300
gggaccaagg ttgagatcaa a
321
<210> 79
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 79
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp His
20 25 30
Tyr Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Ser Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 80
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 80
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 81
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 81
Phe Thr Phe Ser Asp His Tyr Met Asp
1 5
<210> 82
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 82
Arg Thr Arg Asn Lys Ala Ser Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 83
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 83
Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 84
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 84
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 85
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 85
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 86
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 86
Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr Thr
1 5
<210> 87
<211> 363
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 87
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggagggtc cctgagactc
60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gaccactaca tggactgggt ccgccaggct
120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt actagaaaca aagctagtag ttacaccaca
180
gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattc aaagaactca
240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga
300
gagcctaaat actggatcga cttcgaccta tgggggagag gtaccttggt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 88
<211> 321
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 88
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agctacatcg ccccttacac ttttggcgga
300
gggaccaagg ttgagatcaa a
321
<210> 89
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 89
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp His
20 25 30
Asp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Ala Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 90
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 90
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 91
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 91
Phe Thr Phe Ser Asp His Asp Met Asn
1 5
<210> 92
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 92
Arg Thr Arg Asn Ala Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 93
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 93
Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 94
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 94
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 95
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 95
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 96
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 96
Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr Thr
1 5
<210> 97
<211> 363
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 97
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc cagggcggtc cctgagactc
60
tcctgtacag cttctggatt caccttcagt gaccacgaca tgaactgggt ccgccaggct
120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt actagaaacg ccgctggaag ttacaccaca
180
gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattc aaagaactca
240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga
300
gagcctaaat actggatcga cttcgaccta tgggggagag gtaccttggt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 98
<211> 321
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 98
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agctacatcg ccccttacac ttttggcgga
300
gggaccaagg ttgagatcaa a
321
<210> 99
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 99
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Val Asp His
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Leu Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 100
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 100
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 101
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 101
Phe Thr Phe Val Asp His Asp Met Asp
1 5
<210> 102
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 102
Arg Thr Arg Asn Lys Leu Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 103
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 103
Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 104
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 104
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 105
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 105
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 106
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 106
Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr Thr
1 5
<210> 107
<211> 363
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 107
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggagggtc cctgagactc
60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcgta gaccacgaca tggactgggt ccgccaggct
120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggccgt actagaaaca aactaggaag ttacaccaca
180
gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattc aaagaactca
240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga
300
gagcctaaat actggatcga cttcgaccta tgggggagag gtaccttggt caccgtctcc
360
tca
363
<210> 108
<211> 321
<212> DNA
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полинуклеотид"
<400> 108
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca
120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca
180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct
240
gaagattttg caacttacta ctgtcagcaa agctacatcg ccccttacac ttttggcgga
300
gggaccaagg ttgagatcaa a
321
<210> 109
<211> 214
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 109
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 110
<211> 451
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 110
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ala
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 111
<211> 451
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 111
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ala
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 112
<211> 451
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 112
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ala
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 113
<211> 451
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 113
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ala
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 114
<211> 451
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 114
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ala
20 25 30
Asp Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Thr Arg Asn Lys Ala Gly Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Ser
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala
130 135 140
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val
145 150 155 160
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala
165 170 175
Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val
180 185 190
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His
195 200 205
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys
210 215 220
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly
225 230 235 240
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
245 250 255
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His
260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
275 280 285
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
290 295 300
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
305 310 315 320
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
325 330 335
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
340 345 350
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
355 360 365
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
370 375 380
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
385 390 395 400
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
405 410 415
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
420 425 430
His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
435 440 445
Pro Gly Lys
450
<210> 115
<211> 213
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 115
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 116
<211> 449
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 116
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 117
<211> 449
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 117
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 118
<211> 449
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 118
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 119
<211> 449
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 119
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 120
<211> 449
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 120
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Ile Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Asp Phe Gly Val Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 121
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 121
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 122
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 122
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 123
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 123
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 124
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 124
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 125
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 125
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 126
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 126
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 127
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (4)..(4)
<223> /заменить="Arg"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (5)..(5)
<223> /заменить="Ile" или "Leu"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(9)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 127
Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 128
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (5)..(5)
<223> /заменить="Asp" или "Ala" или "His"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (8)..(8)
<223> /заменить="Val" или "Leu"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(17)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 128
Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 129
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 129
Ala Arg Gly Gly Leu Asp Thr Asp Glu Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 130
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 130
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 131
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 131
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 132
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 132
Gln Gln Gly Val Ser Asp Ile Thr
1 5
<210> 133
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (5)..(5)
<223> /заменить="Ser"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (7)..(7)
<223> /заменить="Val"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (9)..(9)
<223> /заменить="Ile"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(9)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 133
Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met Ser
1 5
<210> 134
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (1)..(1)
<223> /заменить="Ser"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (5)..(5)
<223> /заменить="Asp"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (6)..(6)
<223> /заменить="Ser"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (7)..(7)
<223> /заменить="Val"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (8)..(8)
<223> /заменить="Thr"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(17)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 134
Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 135
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 135
Ala Lys Gly Pro Pro Thr Tyr His Thr Asn Tyr Tyr Tyr Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 136
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 136
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 137
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 137
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 138
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 138
Gln Gln Thr Asn Ser Phe Pro Tyr Thr
1 5
<210> 139
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (4)..(4)
<223> /заменить="Val"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (6)..(6)
<223> /заменить="Ala"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (7)..(7)
<223> /заменить="Asp"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (9)..(9)
<223> /заменить="Asn"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(9)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 139
Phe Thr Phe Ser Asp His Tyr Met Asp
1 5
<210> 140
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (5)..(5)
<223> /заменить="Ala"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (6)..(6)
<223> /заменить="Leu"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (7)..(7)
<223> /заменить="Gly"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(19)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 140
Arg Thr Arg Asn Lys Ala Ser Ser Tyr Thr Thr Glu Tyr Ala Ala Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 141
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 141
Ala Arg Glu Pro Lys Tyr Trp Ile Asp Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 142
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 142
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 143
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 143
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 144
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 144
Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Tyr Thr
1 5
<210> 145
<211> 976
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 145
Met Arg Gly Ala Arg Gly Ala Trp Asp Phe Leu Cys Val Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Arg Val Gln Thr Gly Ser Ser Gln Pro Ser Val Ser Pro Gly
20 25 30
Glu Pro Ser Pro Pro Ser Ile His Pro Gly Lys Ser Asp Leu Ile Val
35 40 45
Arg Val Gly Asp Glu Ile Arg Leu Leu Cys Thr Asp Pro Gly Phe Val
50 55 60
Lys Trp Thr Phe Glu Ile Leu Asp Glu Thr Asn Glu Asn Lys Gln Asn
65 70 75 80
Glu Trp Ile Thr Glu Lys Ala Glu Ala Thr Asn Thr Gly Lys Tyr Thr
85 90 95
Cys Thr Asn Lys His Gly Leu Ser Asn Ser Ile Tyr Val Phe Val Arg
100 105 110
Asp Pro Ala Lys Leu Phe Leu Val Asp Arg Ser Leu Tyr Gly Lys Glu
115 120 125
Asp Asn Asp Thr Leu Val Arg Cys Pro Leu Thr Asp Pro Glu Val Thr
130 135 140
Asn Tyr Ser Leu Lys Gly Cys Gln Gly Lys Pro Leu Pro Lys Asp Leu
145 150 155 160
Arg Phe Ile Pro Asp Pro Lys Ala Gly Ile Met Ile Lys Ser Val Lys
165 170 175
Arg Ala Tyr His Arg Leu Cys Leu His Cys Ser Val Asp Gln Glu Gly
180 185 190
Lys Ser Val Leu Ser Glu Lys Phe Ile Leu Lys Val Arg Pro Ala Phe
195 200 205
Lys Ala Val Pro Val Val Ser Val Ser Lys Ala Ser Tyr Leu Leu Arg
210 215 220
Glu Gly Glu Glu Phe Thr Val Thr Cys Thr Ile Lys Asp Val Ser Ser
225 230 235 240
Ser Val Tyr Ser Thr Trp Lys Arg Glu Asn Ser Gln Thr Lys Leu Gln
245 250 255
Glu Lys Tyr Asn Ser Trp His His Gly Asp Phe Asn Tyr Glu Arg Gln
260 265 270
Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser Ala Arg Val Asn Asp Ser Gly Val Phe
275 280 285
Met Cys Tyr Ala Asn Asn Thr Phe Gly Ser Ala Asn Val Thr Thr Thr
290 295 300
Leu Glu Val Val Asp Lys Gly Phe Ile Asn Ile Phe Pro Met Ile Asn
305 310 315 320
Thr Thr Val Phe Val Asn Asp Gly Glu Asn Val Asp Leu Ile Val Glu
325 330 335
Tyr Glu Ala Phe Pro Lys Pro Glu His Gln Gln Trp Ile Tyr Met Asn
340 345 350
Arg Thr Phe Thr Asp Lys Trp Glu Asp Tyr Pro Lys Ser Glu Asn Glu
355 360 365
Ser Asn Ile Arg Tyr Val Ser Glu Leu His Leu Thr Arg Leu Lys Gly
370 375 380
Thr Glu Gly Gly Thr Tyr Thr Phe Leu Val Ser Asn Ser Asp Val Asn
385 390 395 400
Ala Ala Ile Ala Phe Asn Val Tyr Val Asn Thr Lys Pro Glu Ile Leu
405 410 415
Thr Tyr Asp Arg Leu Val Asn Gly Met Leu Gln Cys Val Ala Ala Gly
420 425 430
Phe Pro Glu Pro Thr Ile Asp Trp Tyr Phe Cys Pro Gly Thr Glu Gln
435 440 445
Arg Cys Ser Ala Ser Val Leu Pro Val Asp Val Gln Thr Leu Asn Ser
450 455 460
Ser Gly Pro Pro Phe Gly Lys Leu Val Val Gln Ser Ser Ile Asp Ser
465 470 475 480
Ser Ala Phe Lys His Asn Gly Thr Val Glu Cys Lys Ala Tyr Asn Asp
485 490 495
Val Gly Lys Thr Ser Ala Tyr Phe Asn Phe Ala Phe Lys Gly Asn Asn
500 505 510
Lys Glu Gln Ile His Pro His Thr Leu Phe Thr Pro Leu Leu Ile Gly
515 520 525
Phe Val Ile Val Ala Gly Met Met Cys Ile Ile Val Met Ile Leu Thr
530 535 540
Tyr Lys Tyr Leu Gln Lys Pro Met Tyr Glu Val Gln Trp Lys Val Val
545 550 555 560
Glu Glu Ile Asn Gly Asn Asn Tyr Val Tyr Ile Asp Pro Thr Gln Leu
565 570 575
Pro Tyr Asp His Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asn Arg Leu Ser Phe Gly
580 585 590
Lys Thr Leu Gly Ala Gly Ala Phe Gly Lys Val Val Glu Ala Thr Ala
595 600 605
Tyr Gly Leu Ile Lys Ser Asp Ala Ala Met Thr Val Ala Val Lys Met
610 615 620
Leu Lys Pro Ser Ala His Leu Thr Glu Arg Glu Ala Leu Met Ser Glu
625 630 635 640
Leu Lys Val Leu Ser Tyr Leu Gly Asn His Met Asn Ile Val Asn Leu
645 650 655
Leu Gly Ala Cys Thr Ile Gly Gly Pro Thr Leu Val Ile Thr Glu Tyr
660 665 670
Cys Cys Tyr Gly Asp Leu Leu Asn Phe Leu Arg Arg Lys Arg Asp Ser
675 680 685
Phe Ile Cys Ser Lys Gln Glu Asp His Ala Glu Ala Ala Leu Tyr Lys
690 695 700
Asn Leu Leu His Ser Lys Glu Ser Ser Cys Ser Asp Ser Thr Asn Glu
705 710 715 720
Tyr Met Asp Met Lys Pro Gly Val Ser Tyr Val Val Pro Thr Lys Ala
725 730 735
Asp Lys Arg Arg Ser Val Arg Ile Gly Ser Tyr Ile Glu Arg Asp Val
740 745 750
Thr Pro Ala Ile Met Glu Asp Asp Glu Leu Ala Leu Asp Leu Glu Asp
755 760 765
Leu Leu Ser Phe Ser Tyr Gln Val Ala Lys Gly Met Ala Phe Leu Ala
770 775 780
Ser Lys Asn Cys Ile His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Ile Leu Leu
785 790 795 800
Thr His Gly Arg Ile Thr Lys Ile Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp
805 810 815
Ile Lys Asn Asp Ser Asn Tyr Val Val Lys Gly Asn Ala Arg Leu Pro
820 825 830
Val Lys Trp Met Ala Pro Glu Ser Ile Phe Asn Cys Val Tyr Thr Phe
835 840 845
Glu Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Ile Phe Leu Trp Glu Leu Phe Ser
850 855 860
Leu Gly Ser Ser Pro Tyr Pro Gly Met Pro Val Asp Ser Lys Phe Tyr
865 870 875 880
Lys Met Ile Lys Glu Gly Phe Arg Met Leu Ser Pro Glu His Ala Pro
885 890 895
Ala Glu Met Tyr Asp Ile Met Lys Thr Cys Trp Asp Ala Asp Pro Leu
900 905 910
Lys Arg Pro Thr Phe Lys Gln Ile Val Gln Leu Ile Glu Lys Gln Ile
915 920 925
Ser Glu Ser Thr Asn His Ile Tyr Ser Asn Leu Ala Asn Cys Ser Pro
930 935 940
Asn Arg Gln Lys Pro Val Val Asp His Ser Val Arg Ile Asn Ser Val
945 950 955 960
Gly Ser Thr Ala Ser Ser Ser Gln Pro Leu Leu Val His Asp Asp Val
965 970 975
<210> 146
<211> 972
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 146
Met Arg Gly Ala Arg Gly Ala Trp Asp Phe Leu Cys Val Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Arg Val Gln Thr Gly Ser Ser Gln Pro Ser Val Ser Pro Gly
20 25 30
Glu Pro Ser Pro Pro Ser Ile His Pro Gly Lys Ser Asp Leu Ile Val
35 40 45
Arg Val Gly Asp Glu Ile Arg Leu Leu Cys Thr Asp Pro Gly Phe Val
50 55 60
Lys Trp Thr Phe Glu Ile Leu Asp Glu Thr Asn Glu Asn Lys Gln Asn
65 70 75 80
Glu Trp Ile Thr Glu Lys Ala Glu Ala Thr Asn Thr Gly Lys Tyr Thr
85 90 95
Cys Thr Asn Lys His Gly Leu Ser Asn Ser Ile Tyr Val Phe Val Arg
100 105 110
Asp Pro Ala Lys Leu Phe Leu Val Asp Arg Ser Leu Tyr Gly Lys Glu
115 120 125
Asp Asn Asp Thr Leu Val Arg Cys Pro Leu Thr Asp Pro Glu Val Thr
130 135 140
Asn Tyr Ser Leu Lys Gly Cys Gln Gly Lys Pro Leu Pro Lys Asp Leu
145 150 155 160
Arg Phe Ile Pro Asp Pro Lys Ala Gly Ile Met Ile Lys Ser Val Lys
165 170 175
Arg Ala Tyr His Arg Leu Cys Leu His Cys Ser Val Asp Gln Glu Gly
180 185 190
Lys Ser Val Leu Ser Glu Lys Phe Ile Leu Lys Val Arg Pro Ala Phe
195 200 205
Lys Ala Val Pro Val Val Ser Val Ser Lys Ala Ser Tyr Leu Leu Arg
210 215 220
Glu Gly Glu Glu Phe Thr Val Thr Cys Thr Ile Lys Asp Val Ser Ser
225 230 235 240
Ser Val Tyr Ser Thr Trp Lys Arg Glu Asn Ser Gln Thr Lys Leu Gln
245 250 255
Glu Lys Tyr Asn Ser Trp His His Gly Asp Phe Asn Tyr Glu Arg Gln
260 265 270
Ala Thr Leu Thr Ile Ser Ser Ala Arg Val Asn Asp Ser Gly Val Phe
275 280 285
Met Cys Tyr Ala Asn Asn Thr Phe Gly Ser Ala Asn Val Thr Thr Thr
290 295 300
Leu Glu Val Val Asp Lys Gly Phe Ile Asn Ile Phe Pro Met Ile Asn
305 310 315 320
Thr Thr Val Phe Val Asn Asp Gly Glu Asn Val Asp Leu Ile Val Glu
325 330 335
Tyr Glu Ala Phe Pro Lys Pro Glu His Gln Gln Trp Ile Tyr Met Asn
340 345 350
Arg Thr Phe Thr Asp Lys Trp Glu Asp Tyr Pro Lys Ser Glu Asn Glu
355 360 365
Ser Asn Ile Arg Tyr Val Ser Glu Leu His Leu Thr Arg Leu Lys Gly
370 375 380
Thr Glu Gly Gly Thr Tyr Thr Phe Leu Val Ser Asn Ser Asp Val Asn
385 390 395 400
Ala Ala Ile Ala Phe Asn Val Tyr Val Asn Thr Lys Pro Glu Ile Leu
405 410 415
Thr Tyr Asp Arg Leu Val Asn Gly Met Leu Gln Cys Val Ala Ala Gly
420 425 430
Phe Pro Glu Pro Thr Ile Asp Trp Tyr Phe Cys Pro Gly Thr Glu Gln
435 440 445
Arg Cys Ser Ala Ser Val Leu Pro Val Asp Val Gln Thr Leu Asn Ser
450 455 460
Ser Gly Pro Pro Phe Gly Lys Leu Val Val Gln Ser Ser Ile Asp Ser
465 470 475 480
Ser Ala Phe Lys His Asn Gly Thr Val Glu Cys Lys Ala Tyr Asn Asp
485 490 495
Val Gly Lys Thr Ser Ala Tyr Phe Asn Phe Ala Phe Lys Glu Gln Ile
500 505 510
His Pro His Thr Leu Phe Thr Pro Leu Leu Ile Gly Phe Val Ile Val
515 520 525
Ala Gly Met Met Cys Ile Ile Val Met Ile Leu Thr Tyr Lys Tyr Leu
530 535 540
Gln Lys Pro Met Tyr Glu Val Gln Trp Lys Val Val Glu Glu Ile Asn
545 550 555 560
Gly Asn Asn Tyr Val Tyr Ile Asp Pro Thr Gln Leu Pro Tyr Asp His
565 570 575
Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asn Arg Leu Ser Phe Gly Lys Thr Leu Gly
580 585 590
Ala Gly Ala Phe Gly Lys Val Val Glu Ala Thr Ala Tyr Gly Leu Ile
595 600 605
Lys Ser Asp Ala Ala Met Thr Val Ala Val Lys Met Leu Lys Pro Ser
610 615 620
Ala His Leu Thr Glu Arg Glu Ala Leu Met Ser Glu Leu Lys Val Leu
625 630 635 640
Ser Tyr Leu Gly Asn His Met Asn Ile Val Asn Leu Leu Gly Ala Cys
645 650 655
Thr Ile Gly Gly Pro Thr Leu Val Ile Thr Glu Tyr Cys Cys Tyr Gly
660 665 670
Asp Leu Leu Asn Phe Leu Arg Arg Lys Arg Asp Ser Phe Ile Cys Ser
675 680 685
Lys Gln Glu Asp His Ala Glu Ala Ala Leu Tyr Lys Asn Leu Leu His
690 695 700
Ser Lys Glu Ser Ser Cys Ser Asp Ser Thr Asn Glu Tyr Met Asp Met
705 710 715 720
Lys Pro Gly Val Ser Tyr Val Val Pro Thr Lys Ala Asp Lys Arg Arg
725 730 735
Ser Val Arg Ile Gly Ser Tyr Ile Glu Arg Asp Val Thr Pro Ala Ile
740 745 750
Met Glu Asp Asp Glu Leu Ala Leu Asp Leu Glu Asp Leu Leu Ser Phe
755 760 765
Ser Tyr Gln Val Ala Lys Gly Met Ala Phe Leu Ala Ser Lys Asn Cys
770 775 780
Ile His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Ile Leu Leu Thr His Gly Arg
785 790 795 800
Ile Thr Lys Ile Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp Ile Lys Asn Asp
805 810 815
Ser Asn Tyr Val Val Lys Gly Asn Ala Arg Leu Pro Val Lys Trp Met
820 825 830
Ala Pro Glu Ser Ile Phe Asn Cys Val Tyr Thr Phe Glu Ser Asp Val
835 840 845
Trp Ser Tyr Gly Ile Phe Leu Trp Glu Leu Phe Ser Leu Gly Ser Ser
850 855 860
Pro Tyr Pro Gly Met Pro Val Asp Ser Lys Phe Tyr Lys Met Ile Lys
865 870 875 880
Glu Gly Phe Arg Met Leu Ser Pro Glu His Ala Pro Ala Glu Met Tyr
885 890 895
Asp Ile Met Lys Thr Cys Trp Asp Ala Asp Pro Leu Lys Arg Pro Thr
900 905 910
Phe Lys Gln Ile Val Gln Leu Ile Glu Lys Gln Ile Ser Glu Ser Thr
915 920 925
Asn His Ile Tyr Ser Asn Leu Ala Asn Cys Ser Pro Asn Arg Gln Lys
930 935 940
Pro Val Val Asp His Ser Val Arg Ile Asn Ser Val Gly Ser Thr Ala
945 950 955 960
Ser Ser Ser Gln Pro Leu Leu Val His Asp Asp Val
965 970
<210> 147
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 147
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Ala Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Gly Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 148
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 148
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Ser Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 149
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 149
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Thr Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 150
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 150
Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 151
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 151
Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 152
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 152
Asn Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ala Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 153
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 153
Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ile Ile Ala Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Gly Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro Lys Val Leu Val
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 154
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 154
Asp Ile Ala Met Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Ser Ala Phe Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ile Ser Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 155
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 155
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Ala Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Ser Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 156
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 156
Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 157
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 157
Asn Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Thr Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Pro Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Leu Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn Ser Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 158
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 158
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Asp Tyr
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Pro Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Val Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 159
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 159
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Arg Ser Thr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 160
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 160
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 161
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 161
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Phe
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Ala Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 162
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 162
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ile Gly Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 163
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 163
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Thr Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Glu Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 164
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 164
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Arg Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Tyr Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Lys Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Glu Ala Ser Ala Asn Thr Ala Asn
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Arg Gly Leu Val Asp Asp Tyr Val Met Asp Ala Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 165
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 165
Ser Tyr Glu Leu Ile Gln Pro Pro Ser Ala Ser Val Thr Leu Gly Asn
1 5 10 15
Thr Val Ser Leu Thr Cys Val Gly Asp Glu Leu Ser Lys Arg Tyr Ala
20 25 30
Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Lys Thr Ile Val Ser Val Ile Tyr
35 40 45
Lys Asp Ser Glu Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Thr Thr Ala Thr Leu Thr Ile His Gly Thr Leu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Ser Thr Tyr Ser Asp Asp Asn Leu
85 90 95
Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 166
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 166
Glu Val Gln Leu Gln Gln Tyr Gly Ala Glu Leu Gly Lys Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Arg Leu Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Asn Ile Arg Asn Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Asn Gln Arg Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Thr Asn Gly Asn Thr Ile Ser Ala Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Thr Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser His Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Phe Ser Gln Leu Lys Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Leu Asn Tyr Glu Gly Tyr Ala Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met
100 105 110
Val Thr Gly Ser Ser
115
<210> 167
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 167
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Asn Lys Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Val Gly Glu Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Phe Lys Thr Asn Ser Leu Gln Thr Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Thr
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Phe Gln Tyr Asn Ile Gly Tyr Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys
100 105
<210> 168
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 168
Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Arg Trp Asn Trp Ile Arg Lys Phe Pro Gly Asn Lys Val Glu Trp
35 40 45
Met Gly Tyr Ile Asn Ser Ala Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu
50 55 60
Lys Ser Arg Ile Ser Met Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe
65 70 75 80
Leu Gln Val Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Leu Arg Gly Tyr Ile Thr Asp Tyr Ser Gly Phe Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 169
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 169
Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp Ile Phe Ser Asp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Arg Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Lys Asn Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 170
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 170
Glu Val Gln Leu Gln Gln Tyr Gly Ala Glu Leu Gly Lys Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Arg Leu Ser Cys Lys Leu Ser Gly Tyr Lys Ile Arg Asn Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Asn Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Ile Tyr Ala Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Gln Leu Lys Ser Asp Asp Thr Ala Leu Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Met Asn Tyr Glu Gly Tyr Glu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 171
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 171
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Ser Val Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Asn Lys Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Leu Gly Glu Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
His Lys Thr Asp Ser Leu Gln Thr Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Phe Gln Tyr Lys Ser Gly Phe Met
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 172
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 172
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Val Tyr Trp Val Ile Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Lys Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Asn
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ala Gly Met Thr Lys Asp Tyr Val Met Asp Ala Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Val Leu Val Thr Val Ser
115 120
<210> 173
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 173
Ser Tyr Glu Leu Ile Gln Pro Pro Ser Ala Ser Val Thr Leu Gly Asn
1 5 10 15
Thr Val Ser Leu Thr Cys Val Gly Asp Glu Leu Ser Lys Arg Tyr Ala
20 25 30
Gln Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Lys Thr Ile Val Ser Val Ile Tyr
35 40 45
Lys Asp Ser Glu Arg Pro Ser Asp Ile Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Thr Thr Ala Thr Leu Thr Ile His Gly Thr Leu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Ser Thr Tyr Ser Asp Asp Asn Leu
85 90 95
Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 174
<211> 116
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 174
Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr
20 25 30
Leu Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Thr Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Leu Met Trp Asn Asp Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Ser Ala Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Leu Ser Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu
65 70 75 80
Lys Met His Ser Leu Gln Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Glu Ser Asn Leu Gly Phe Thr Tyr Trp Gly His Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 175
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 175
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Leu Glu
1 5 10 15
Glu Ile Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Gly Ile Asp Asp Asp
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Val Thr Arg Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Ser Arg Pro Gln Val
65 70 75 80
Ala Asp Ser Gly Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 176
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 176
Glu Val Gln Leu Gln Gln Tyr Gly Ala Glu Leu Gly Lys Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Arg Leu Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Asn Ile Arg Asn Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val His Gln Arg Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Thr Asn Gly Asn Thr Ile Ser Ala Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Phe Ser Gln Leu Lys Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Met Asn Tyr Glu Gly Tyr Ala Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 177
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 177
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Leu Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Asn Lys Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Leu Gly Glu Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Phe Lys Thr Asn Ser Leu Gln Thr Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Phe Gln Tyr Asn Ile Gly Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 178
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 178
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ser Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Thr Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Asn Tyr Asp Gly Ser Thr Thr Tyr His Arg Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Asp Tyr Gly Tyr His Tyr Gly Ala Tyr Tyr Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 179
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 179
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Leu Ala Val Ser Leu Gly Gln
1 5 10 15
Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Ser Leu Ser Gly
20 25 30
Tyr Asn Leu Ile His Trp Tyr Gln Gln Arg Thr Gly Gln Gln Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Ala Pro Gly Ile Pro Ala Arg
50 55 60
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Pro
65 70 75 80
Val Gln Ser Asp Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg Glu
85 90 95
Ser Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Asn Leu Glu Met Lys
100 105
<210> 180
<211> 116
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 180
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Ala Ile His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Arg Trp Met
35 40 45
Ala Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Lys Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Glu Ala Ser Ala Ser Thr Ala His
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Phe Phe Cys
85 90 95
Ala Gly Gly Ser His Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 181
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 181
Ser Tyr Glu Leu Ile Gln Pro Pro Ser Ala Ser Val Thr Leu Glu Asn
1 5 10 15
Thr Val Ser Ile Thr Cys Ser Gly Asp Glu Leu Ser Asn Lys Tyr Ala
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Lys Thr Ile Leu Glu Val Ile Tyr
35 40 45
Asn Asp Ser Glu Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Thr Thr Ala Ile Leu Thr Ile Arg Asp Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Ser Thr Phe Ser Asp Asp Asp Leu
85 90 95
Pro Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 182
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 182
Ser Tyr Glu Leu Ile Gln Pro Pro Ser Thr Ser Val Thr Leu Gly Asn
1 5 10 15
Thr Val Ser Leu Thr Cys Val Gly Asn Glu Leu Pro Lys Arg Tyr Ala
20 25 30
Tyr Trp Phe Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Ile Val Arg Leu Ile Tyr
35 40 45
Asp Asp Asp Arg Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Thr Thr Ala Thr Leu Thr Ile Arg Asp Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Tyr Tyr Tyr Cys His Ser Thr Tyr Thr Asp Asp Lys Val
85 90 95
Pro Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 183
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 183
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Met Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Asp Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Thr Arg Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Tyr Asp Gly Ile Thr Ala Tyr Tyr Arg Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Val Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Thr Glu Gly Gly Tyr Val Tyr Ser Gly Pro His Tyr Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Val Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 184
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 184
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Gly Ile Phe
20 25 30
Val Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ser Pro Arg Arg Met Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Ser Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Asp Tyr His Cys Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 185
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 185
Glu Val Gln Leu Gln Gln Tyr Gly Ala Glu Leu Gly Lys Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Arg Leu Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Lys Ile Arg Asn Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Asn Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Ile Tyr Ala Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Gln Leu Lys Ser Asp Asp Thr Ala Leu Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Met Asn Tyr Glu Gly Tyr Glu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Val Met
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 186
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 186
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Ser Val Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asn Ile Asn Lys Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Leu Gly Glu Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
His Lys Thr Asn Ser Leu Gln Pro Gly Phe Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Ala Tyr Phe Cys Phe Gln Tyr Asn Ser Gly Phe Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys
100 105
<210> 187
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 187
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Met Asn Pro His Ser Gly Asp Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 188
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 188
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Asn Glu
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 189
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 189
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 190
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 190
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 191
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 191
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 192
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 192
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Glu Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 193
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 193
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Leu Asn Pro Ser Gly Gly Gly Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asp Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 194
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 194
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 195
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 195
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Lys Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 196
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 196
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asp Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Gly Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 197
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 197
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Ala Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 198
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 198
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Val Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 199
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 199
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Thr Val Gly Gly Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Glu Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 200
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 200
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 201
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 201
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Leu Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Asn Gly Ala Gly Thr Asn Phe Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 202
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 202
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Thr Gly Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 203
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 203
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Ser Gly Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 204
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 204
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Met Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Asp Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 205
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 205
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asp Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Glu Ala Ser Asn Leu Glu Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 206
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 206
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Ser Ala Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Arg Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Gly Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Asp Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 207
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 207
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Asp Tyr
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 208
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 208
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Asp Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Asn Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 209
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 209
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Tyr Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ala Ser Phe Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 210
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 210
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Ser Ser Phe Pro Asn Ser
20 25 30
Trp Ile Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 211
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 211
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 212
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 212
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Asp Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Met Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Ala Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 213
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 213
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Asn Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Phe Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Leu Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 214
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 214
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Trp
20 25 30
Ile Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met Gly
35 40 45
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Glu Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
50 55 60
Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg His Gly Arg Gly Tyr Tyr Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120
<210> 215
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 215
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asp Asn
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Ile Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 216
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 216
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Tyr Pro Asp Asp Ser Glu Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 217
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 217
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Asp Ile Arg Asp Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 218
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 218
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Asn Thr Tyr
20 25 30
Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met Gly
35 40 45
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Gly Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
50 55 60
Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ala Ile Ser Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg His Ser Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120
<210> 219
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 219
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Val
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 220
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 220
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile His Pro Ala Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 221
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 221
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Gln Gly Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 222
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 222
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Asp Asn Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asp Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 223
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 223
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ser Asp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 224
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 224
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Ala Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Thr Tyr Pro Gly Asp Ser Glu Thr Arg Tyr Asn Pro Ser Gln
50 55 60
Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg His Gly Arg Gly Tyr Gly Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120
<210> 225
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 225
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 226
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 226
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
115 120 125
<210> 227
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 227
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Asn Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Asn Ser Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 228
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 228
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Ile Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 229
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 229
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 230
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 230
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 231
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 231
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Ile Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 232
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 232
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 233
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 233
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 234
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 234
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 235
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 235
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Ile Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 236
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 236
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 237
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 237
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 238
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 238
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Thr Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Leu Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 239
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 239
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 240
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 240
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Gly Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 241
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 241
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 242
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 242
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 243
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 243
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Ile Ile Asn Pro Arg Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Arg Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 244
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 244
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Gly Ile Arg Ser Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Gly Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 245
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 245
Asn Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 246
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 246
Ile Ile Asn Pro Arg Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Arg Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 247
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 247
His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 248
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 248
Arg Ser Ser Gln Gly Ile Arg Ser Asp Leu Gly
1 5 10
<210> 249
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 249
Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr
1 5
<210> 250
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 250
Gln Gln Ala Asn Gly Phe Pro Leu Thr
1 5
<210> 251
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 251
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Ile Arg Tyr Ser Pro Ser Leu
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Asn Ser Leu Lys Pro Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 252
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 252
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Asp Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 253
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 253
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Ile Arg Tyr Ser Pro Ser Leu Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 254
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 254
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Asp Ser Leu Ala
1 5 10
<210> 255
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 255
Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Ile Thr
1 5
<210> 256
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 256
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 257
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 257
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly
1 5 10
<210> 258
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 258
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Leu Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 259
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 259
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Leu Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 260
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 260
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 261
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 261
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Ala Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Gly Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 262
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 262
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 263
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 263
Thr Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 264
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 264
Arg Ala Ser Gln Gly Val Ile Ser Ala Leu Ala
1 5 10
<210> 265
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 265
Asp Ala Ser Ile Leu Glu Ser
1 5
<210> 266
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 266
Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 267
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 267
Arg Ala Ser Gln Gly Val Gly Ser Ala Leu Ala
1 5 10
<210> 268
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 268
Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser
1 5
<210> 269
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 269
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 270
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 270
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 271
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 271
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 272
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 272
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 273
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 273
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 274
<211> 330
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 274
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Cys Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 275
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 275
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Ile Ile Asn Pro Arg Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Arg Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 276
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 276
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Ile Ile Asn Pro Arg Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Arg Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
225 230 235 240
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 277
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 277
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Ile Ile Asn Pro Arg Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Arg Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
225 230 235 240
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 278
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 278
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Ile Ile Asn Pro Arg Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Arg Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Arg Gly Tyr Glu Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
225 230 235 240
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 279
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 279
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Thr Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Leu Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 280
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 280
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Thr Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Leu Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
225 230 235 240
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 281
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 281
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Thr Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Leu Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
225 230 235 240
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 282
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 282
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Arg Phe Thr Thr Ser
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Gly Leu Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala
225 230 235 240
Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 283
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 283
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105
<210> 284
<211> 214
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 284
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Gly Ile Arg Ser Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Gly Phe Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 285
<211> 214
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 285
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Ala
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 286
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 286
Thr Ser Trp Ile Gly
1 5
<210> 287
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 287
His Gly Leu Gly Tyr Asn Gly Tyr Glu Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 288
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 288
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Gly Ser Ala Leu Ala
1 5 10
<210> 289
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 289
Cys Gln Gln Leu Asn Gly Tyr Pro Leu Thr
1 5 10
<210> 290
<211> 453
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 290
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Asn Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Asn Gly Val Glu Gly Tyr Pro His Tyr Tyr Ala Met Glu Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly
115 120 125
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly
130 135 140
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
145 150 155 160
Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
165 170 175
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val
180 185 190
Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val
195 200 205
Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys
210 215 220
Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu
225 230 235 240
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
245 250 255
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
260 265 270
Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
275 280 285
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser
290 295 300
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
305 310 315 320
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala
325 330 335
Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
340 345 350
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln
355 360 365
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
370 375 380
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
385 390 395 400
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
405 410 415
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
420 425 430
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
435 440 445
Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 291
<211> 214
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 291
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ala Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Gly Cys Arg Ala Ser Gln Asp Leu Ser Asn His
20 25 30
Leu Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Arg Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Tyr Thr Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 292
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 292
Ser Tyr Trp Ile Asn
1 5
<210> 293
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 293
Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 294
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 294
Asn Gly Val Glu Gly Tyr Pro His Tyr Tyr Ala Met Glu Tyr
1 5 10
<210> 295
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 295
Arg Ala Ser Gln Asp Leu Ser Asn His Leu Tyr
1 5 10
<210> 296
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 296
Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser
1 5
<210> 297
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 297
Gln Gln Gly Tyr Thr Leu Pro Tyr Thr
1 5
<210> 298
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 298
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Asn Ile Tyr Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Asn Ser Pro Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Arg Asn Gly Val Glu Gly Tyr Pro His Tyr Tyr Ala Met Glu Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 299
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 299
Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ala Leu Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Gly Cys Arg Ala Ser Gln Asp Leu Ser Asn His
20 25 30
Leu Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Arg Asn Leu Glu Gln
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Tyr Thr Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 300
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 300
Glu Tyr Tyr Met Tyr
1 5
<210> 301
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 301
Arg Ile Asp Pro Glu Asp Gly Ser Ile Asp Tyr Val Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Lys
<210> 302
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 302
Gly Lys Phe Asn Tyr Arg Phe Ala Tyr
1 5
<210> 303
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 303
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Asn
1 5 10 15
<210> 304
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 304
Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser
1 5
<210> 305
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 305
Met Gln Phe Thr His Tyr Pro Tyr Thr
1 5
<210> 306
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 306
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Glu Tyr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Leu Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Glu Asp Gly Ser Ile Asp Tyr Val Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Lys Lys Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Lys Phe Asn Tyr Arg Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 307
<211> 112
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 307
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Leu Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Pro Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Gly Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Phe
85 90 95
Thr His Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 308
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 308
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Gln Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Glu Tyr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Leu Val
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Glu Asp Gly Ser Ile Asp Tyr Val Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Lys Lys Val Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Lys Phe Asn Tyr Arg Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 309
<211> 112
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 309
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Pro Ser Leu Leu Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Pro Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Gly Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Phe
85 90 95
Thr His Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 310
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 310
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Glu Asn Gly Ser Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Gly Ala Val Ser Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 311
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 311
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
100 105
<210> 312
<211> 351
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 312
Met Ser Phe Pro Cys Lys Phe Val Ala Ser Phe Leu Leu Ile Phe Asn
1 5 10 15
Val Ser Ser Lys Gly Ala Val Ser Lys Glu Ile Thr Asn Ala Leu Glu
20 25 30
Thr Trp Gly Ala Leu Gly Gln Asp Ile Asn Leu Asp Ile Pro Ser Phe
35 40 45
Gln Met Ser Asp Asp Ile Asp Asp Ile Lys Trp Glu Lys Thr Ser Asp
50 55 60
Lys Lys Lys Ile Ala Gln Phe Arg Lys Glu Lys Glu Thr Phe Lys Glu
65 70 75 80
Lys Asp Thr Tyr Lys Leu Phe Lys Asn Gly Thr Leu Lys Ile Lys His
85 90 95
Leu Lys Thr Asp Asp Gln Asp Ile Tyr Lys Val Ser Ile Tyr Asp Thr
100 105 110
Lys Gly Lys Asn Val Leu Glu Lys Ile Phe Asp Leu Lys Ile Gln Glu
115 120 125
Arg Val Ser Lys Pro Lys Ile Ser Trp Thr Cys Ile Asn Thr Thr Leu
130 135 140
Thr Cys Glu Val Met Asn Gly Thr Asp Pro Glu Leu Asn Leu Tyr Gln
145 150 155 160
Asp Gly Lys His Leu Lys Leu Ser Gln Arg Val Ile Thr His Lys Trp
165 170 175
Thr Thr Ser Leu Ser Ala Lys Phe Lys Cys Thr Ala Gly Asn Lys Val
180 185 190
Ser Lys Glu Ser Ser Val Glu Pro Val Ser Cys Pro Glu Lys Gly Leu
195 200 205
Asp Ile Tyr Leu Ile Ile Gly Ile Cys Gly Gly Gly Ser Leu Leu Met
210 215 220
Val Phe Val Ala Leu Leu Val Phe Tyr Ile Thr Lys Arg Lys Lys Gln
225 230 235 240
Arg Ser Arg Arg Asn Asp Glu Glu Leu Glu Thr Arg Ala His Arg Val
245 250 255
Ala Thr Glu Glu Arg Gly Arg Lys Pro His Gln Ile Pro Ala Ser Thr
260 265 270
Pro Gln Asn Pro Ala Thr Ser Gln His Pro Pro Pro Pro Pro Gly His
275 280 285
Arg Ser Gln Ala Pro Ser His Arg Pro Pro Pro Pro Gly His Arg Val
290 295 300
Gln His Gln Pro Gln Lys Arg Pro Pro Ala Pro Ser Gly Thr Gln Val
305 310 315 320
His Gln Gln Lys Gly Pro Pro Leu Pro Arg Pro Arg Val Gln Pro Lys
325 330 335
Pro Pro His Gly Ala Ala Glu Asn Ser Leu Ser Pro Ser Ser Asn
340 345 350
<210> 313
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 313
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
1 5
<210> 314
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 314
Ser Gly Gly Gly Phe
1 5
<210> 315
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 315
Ser Ser Tyr Gly Glu Ile Met Asp Tyr
1 5
<210> 316
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 316
Ser Ser Tyr Gly Glu Leu Met Asp Tyr
1 5
<210> 317
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 317
Arg Ala Ser Gln Arg Ile Gly Thr Ser Ile His
1 5 10
<210> 318
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 318
Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser
1 5
<210> 319
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 319
Gln Gln Ser His Gly Trp Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 320
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 320
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Gly Gly Gly Phe Leu Tyr Tyr Leu Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
His Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Ser Ser Tyr Gly Glu Ile Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 321
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 321
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Gly Gly Gly Phe Leu Tyr Tyr Leu Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu
65 70 75 80
His Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Ser Ser Tyr Gly Glu Leu Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 322
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 322
Asp Ile Leu Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Ser Phe Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Ile Gly Thr Ser
20 25 30
Ile His Trp Tyr Gln Gln Arg Thr Thr Gly Ser Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser His Gly Trp Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Glu
100 105
<210> 323
<211> 324
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 323
Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala
1 5 10 15
Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro
100 105 110
Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu
115 120 125
Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser
130 135 140
Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu
145 150 155 160
Val His Thr Ala Gln Thr Gln Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
165 170 175
Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn
180 185 190
Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro
195 200 205
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gln
210 215 220
Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val
225 230 235 240
Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val
245 250 255
Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln
260 265 270
Pro Ile Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn
275 280 285
Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
290 295 300
Leu His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His
305 310 315 320
Ser Pro Gly Lys
<210> 324
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 324
Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg
35 40 45
Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu
65 70 75 80
Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser
85 90 95
Pro Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
100 105
<210> 325
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 325
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Ser Ala Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Tyr
65 70 75 80
Glu Asp Phe Gly Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Glu Ser Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 326
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 326
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Gly Leu Lys Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Val Arg Ile Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Arg Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr His Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Phe Ser Leu Asp Thr Ser Lys Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Thr Arg Arg Gly Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 327
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 327
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
1 5
<210> 328
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 328
Asn Thr His Thr Gly Glu
1 5
<210> 329
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 329
Arg Gly Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val
1 5
<210> 330
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 330
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 331
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 331
Arg Ala Asn Arg Leu Val Asp
1 5
<210> 332
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 332
Gln Gln Tyr Asp Glu Ser Pro Trp Thr
1 5
<210> 333
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 333
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Thr Leu Ile
35 40 45
Tyr Arg Ala Asn Arg Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Tyr
65 70 75 80
Glu Asp Phe Gly Ile Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Glu Ser Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 334
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 334
Glu Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Val Arg Ile Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr His Tyr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Ser Phe
50 55 60
Lys Gly Thr Arg Thr Phe Ser Leu Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Thr Arg Arg Gly Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 335
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 335
Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
1 5
<210> 336
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 336
Asn Thr His Tyr Gly Glu
1 5
<210> 337
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 337
Arg Arg Gly Tyr Asp Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10
<210> 338
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 338
Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 339
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 339
Arg Ala Asn Arg Leu Glu Ser
1 5
<210> 340
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 340
Gln Gln Tyr Asp Glu Ser Pro Trp Thr
1 5
<210> 341
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 341
Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Tyr
1 5
<210> 342
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 342
Ile Ser Tyr Ser Gly Phe Thr
1 5
<210> 343
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 343
Ala Gly Asp Arg Thr Gly Ser Trp Phe Ala Tyr
1 5 10
<210> 344
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 344
Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
1 5
<210> 345
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 345
Ala Thr Ser
1
<210> 346
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 346
Leu Gln Tyr Ala Ser Tyr Pro Phe Thr
1 5
<210> 347
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 347
Gly Tyr Ile Phe Thr Asn Tyr Gly
1 5
<210> 348
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 348
Ile Asn Thr Tyr Asn Gly Glu Pro
1 5
<210> 349
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 349
Ala Arg Gly Asp Tyr Tyr Gly Tyr Glu Asp Tyr
1 5 10
<210> 350
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 350
Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
1 5
<210> 351
<211> 3
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 351
Tyr Thr Ser
1
<210> 352
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 352
Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 353
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 353
Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly
1 5
<210> 354
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 354
Trp Trp Asp Asp Asp
1 5
<210> 355
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 355
Arg Arg Ala Thr Gly Thr Gly Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 356
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 356
Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 357
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 357
Trp Thr Ser Thr Arg His Thr
1 5
<210> 358
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 358
Tyr Asn Ser Tyr Asn Thr
1 5
<210> 359
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 359
Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Val Lys Pro Thr Glu
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Val Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Val Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Thr Lys Asp Ala Ser Lys Asp Gln Val
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Val Arg Arg Arg Ala Thr Gly Thr Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 360
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 360
Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Thr Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys His Gln Tyr Asn Ser Tyr Asn Thr
85 90 95
Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 361
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 361
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Glu Asn Gly Ser Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Gly Ala Val Ser Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 362
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 362
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Leu Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
100 105
<210> 363
<211> 438
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 363
Met Val Cys Ser Gln Ser Trp Gly Arg Ser Ser Lys Gln Trp Glu Asp
1 5 10 15
Pro Ser Gln Ala Ser Lys Val Cys Gln Arg Leu Asn Cys Gly Val Pro
20 25 30
Leu Ser Leu Gly Pro Phe Leu Val Thr Tyr Thr Pro Gln Ser Ser Ile
35 40 45
Ile Cys Tyr Gly Gln Leu Gly Ser Phe Ser Asn Cys Ser His Ser Arg
50 55 60
Asn Asp Met Cys His Ser Leu Gly Leu Thr Cys Leu Glu Pro Gln Lys
65 70 75 80
Thr Thr Pro Pro Thr Thr Arg Pro Pro Pro Thr Thr Thr Pro Glu Pro
85 90 95
Thr Ala Pro Pro Arg Leu Gln Leu Val Ala Gln Ser Gly Gly Gln His
100 105 110
Cys Ala Gly Val Val Glu Phe Tyr Ser Gly Ser Leu Gly Gly Thr Ile
115 120 125
Ser Tyr Glu Ala Gln Asp Lys Thr Gln Asp Leu Glu Asn Phe Leu Cys
130 135 140
Asn Asn Leu Gln Cys Gly Ser Phe Leu Lys His Leu Pro Glu Thr Glu
145 150 155 160
Ala Gly Arg Ala Gln Asp Pro Gly Glu Pro Arg Glu His Gln Pro Leu
165 170 175
Pro Ile Gln Trp Lys Ile Gln Asn Ser Ser Cys Thr Ser Leu Glu His
180 185 190
Cys Phe Arg Lys Ile Lys Pro Gln Lys Ser Gly Arg Val Leu Ala Leu
195 200 205
Leu Cys Ser Gly Phe Gln Pro Lys Val Gln Ser Arg Leu Val Gly Gly
210 215 220
Ser Ser Ile Cys Glu Gly Thr Val Glu Val Arg Gln Gly Ala Gln Trp
225 230 235 240
Ala Ala Leu Cys Asp Ser Ser Ser Ala Arg Ser Ser Leu Arg Trp Glu
245 250 255
Glu Val Cys Arg Glu Gln Gln Cys Gly Ser Val Asn Ser Tyr Arg Val
260 265 270
Leu Asp Ala Gly Asp Pro Thr Ser Arg Gly Leu Phe Cys Pro His Gln
275 280 285
Lys Leu Ser Gln Cys His Glu Leu Trp Glu Arg Asn Ser Tyr Cys Lys
290 295 300
Lys Val Phe Val Thr Cys Gln Asp Pro Asn Pro Ala Gly Leu Ala Ala
305 310 315 320
Gly Thr Val Ala Ser Ile Ile Leu Ala Leu Val Leu Leu Val Val Leu
325 330 335
Leu Val Val Cys Gly Pro Leu Ala Tyr Lys Lys Leu Val Lys Lys Phe
340 345 350
Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Trp Ile Gly Pro Thr Gly Met Asn Gln
355 360 365
Asn Met Ser Phe His Arg Asn His Thr Ala Thr Val Arg Ser His Ala
370 375 380
Glu Asn Pro Thr Ala Ser His Val Asp Asn Glu Tyr Ser Gln Pro Pro
385 390 395 400
Arg Asn Ser His Leu Ser Ala Tyr Pro Ala Leu Glu Gly Ala Leu His
405 410 415
Arg Ser Ser Met Gln Pro Asp Asn Ser Ser Asp Ser Asp Tyr Asp Leu
420 425 430
His Gly Ala Gln Arg Leu
435
<210> 364
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 364
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 365
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 365
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 366
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 366
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 367
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 367
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 368
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 368
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 369
<211> 214
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 369
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 370
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 370
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 371
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 371
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 372
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 372
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 373
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 373
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 374
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 374
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 375
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 375
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 376
<211> 218
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 376
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Thr Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Thr Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115 120 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130 135 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145 150 155 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180 185 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 377
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 377
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Thr Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Thr Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 378
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 378
Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
1 5
<210> 379
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 379
Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
17
<210> 380
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 380
Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser
1 5 10
<210> 381
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 381
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Ser Gly Gln Thr Tyr Leu His
1 5 10 15
<210> 382
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 382
Thr Val Ser Asn Arg Ala Ser
1 5
<210> 383
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 383
Ser Gln Ser Thr His Val Pro Thr
1 5
<210> 384
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 384
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 385
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 385
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 386
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 386
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 387
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 387
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 388
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 388
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 389
<211> 214
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 389
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 390
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 390
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 391
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 391
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 392
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 392
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 393
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 393
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 394
<211> 450
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 394
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Cys Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly Lys
450
<210> 395
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 395
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ile Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 396
<211> 218
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 396
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Thr Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Thr Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115 120 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130 135 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145 150 155 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180 185 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215
<210> 397
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
полипептид"
<400> 397
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Gln Thr Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Thr Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 398
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 398
Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr Phe
1 5
<210> 399
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 399
Gly Ile Ser Pro Gly Asp Ser Asn Val Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 400
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 400
Asp Gly Asn Phe Pro Tyr Tyr Ala Met Asp Ser
1 5 10
<210> 401
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 401
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Ser Gly Gln Thr Tyr Leu His
1 5 10 15
<210> 402
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 402
Thr Val Ser Asn Arg Ala Ser
1 5
<210> 403
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 403
Ser Gln Ser Thr His Val Pro Thr
1 5
<210> 404
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 404
Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Ser Pro Pro Ser Pro
1 5 10 15
<210> 405
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<220>
<221> ВАРИАНТ
<222> (7)..(7)
<223> /заменить="Asp"
<220>
<221> САЙТ
<222> (1)..(8)
<223> /примеч.="Вариантные остатки, приведенные в последовательности,
не имеют предпочтения по сравнению с остатками в аннотациях
для вариантных положений"
<400> 405
Ile Trp Gly Ile Gly Cys Asn Pro
1 5
<210> 406
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 406
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr Thr Met
1 5 10
<210> 407
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 407
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr Thr Met
1 5 10
<210> 408
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 408
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met
1 5 10
<210> 409
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 409
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met
1 5 10
<210> 410
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 410
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ala Tyr Asn Ile
1 5 10
<210> 411
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 411
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ala Tyr Ser Met
1 5 10
<210> 412
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 412
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Phe Ala Ile
1 5 10
<210> 413
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 413
Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr Tyr Met
1 5 10
<210> 414
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 414
Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr Trp Met
1 5 10
<210> 415
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 415
Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asn Tyr Asp Val
1 5 10
<210> 416
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 416
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 417
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 417
Ser Gly Tyr Ile Phe Ala Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 418
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 418
Ser Gly Tyr Asn Phe Thr Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 419
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 419
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 420
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 420
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile
1 5 10
<210> 421
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 421
Ser Gly Asn Thr Phe Thr Asn Phe Tyr Leu
1 5 10
<210> 422
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 422
Ser Glu Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met
1 5 10
<210> 423
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 423
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Arg Met
1 5 10
<210> 424
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 424
Ser Gly Tyr Met Phe Thr Asn His Gly Met
1 5 10
<210> 425
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 425
Ser Gly Tyr Met Phe Thr Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 426
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 426
Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 427
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 427
Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Tyr Tyr Ile
1 5 10
<210> 428
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 428
Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asn Tyr Gly Met
1 5 10
<210> 429
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 429
Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Phe Ile
1 5 10
<210> 430
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 430
Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Gly Tyr Asn Ile
1 5 10
<210> 431
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 431
Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Thr
1 5 10
<210> 432
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 432
Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Met
1 5 10
<210> 433
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 433
Ser Ile Ser Ser Gly Gly Asn Thr Phe
1 5
<210> 434
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 434
Ser Ile Ser Ser Gly Gly Ser Thr Tyr
1 5
<210> 435
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 435
Ser Ile Asp Pro Tyr Tyr Gly Asp Thr Lys
1 5 10
<210> 436
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 436
Leu Ile Ser Ser Asn Ser Gly Asp Val Ser
1 5 10
<210> 437
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 437
Leu Ile Ser Thr Ser Ser Gly Asp Val Ser
1 5 10
<210> 438
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 438
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr Lys
1 5 10
<210> 439
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 439
Met Ile His Pro Ser Asp Ser Glu Thr Arg
1 5 10
<210> 440
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 440
Val Ile Trp Ser Gly Gly Asn Thr Asp
1 5
<210> 441
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 441
Ala Ile Asn Ser Asn Gly Asp Ile Thr Tyr
1 5 10
<210> 442
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 442
Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Arg
1 5 10
<210> 443
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 443
Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr
1 5 10
<210> 444
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 444
Trp Ile Tyr Pro Gly Gly Gly Asn Thr Arg
1 5 10
<210> 445
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 445
Cys Ile Tyr Pro Gly Asn Val Lys Thr Lys
1 5 10
<210> 446
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 446
Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr
1 5 10
<210> 447
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 447
Arg Ile Asp Pro Tyr Asp Ser Gly Thr His
1 5 10
<210> 448
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 448
Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Arg Thr Glu
1 5 10
<210> 449
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 449
Glu Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Asn Thr Tyr
1 5 10
<210> 450
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 450
Ala Val Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser
1 5 10
<210> 451
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 451
Cys Ala Arg Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Pro Asp Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 452
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 452
Cys Ala Arg Asp Asn Tyr Gly Ser Ser Pro Asp Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 453
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 453
Cys Ala Arg Asp Asn Tyr Gly Ser Ser Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 454
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 454
Cys Val Arg Tyr Tyr Tyr Gly Val Thr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10 15
<210> 455
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 455
Cys Val Arg Tyr Tyr Tyr Gly Ile Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10 15
<210> 456
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 456
Cys Ala Arg Arg Met Ile Thr Met Gly Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10 15
<210> 457
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 457
Cys Ala Arg Arg Met Ile Thr Thr Gly Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10 15
<210> 458
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 458
Cys Ala Arg His Tyr Gly Ala His Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 459
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 459
Cys Ala Arg His Tyr Gly Ala Asn Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 460
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 460
Cys Ala Arg Glu Glu Asn Tyr Tyr Gly Thr Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 461
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 461
Cys Ala Arg Trp Gly Asp His Asp Asp Ala Met Asp Phe Trp
1 5 10
<210> 462
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 462
Cys Ala Arg Asn His Gly Asp Gly Tyr Phe Asn Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10 15
Trp
<210> 463
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 463
Cys Ala Arg Asn His Gly Asp Gly Tyr Tyr Asn Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10 15
Trp
<210> 464
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 464
Cys Ala Arg Gly Thr Ala Trp Phe Thr Tyr Trp
1 5 10
<210> 465
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 465
Cys Ala Arg Asp Gly Asp Asp Gly Trp Asp Ile Asp Val Trp
1 5 10
<210> 466
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 466
Cys Ala Arg Arg Gly Thr Tyr Trp His Phe Asp Val Trp
1 5 10
<210> 467
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 467
Cys Ala Arg Arg Gly Ser Tyr Trp His Phe Asp Val Trp
1 5 10
<210> 468
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 468
Cys Ala Arg Arg Ser Thr Leu Val Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 469
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 469
Cys Ala Arg Asn Gly Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10
<210> 470
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 470
Cys Ala Lys Glu Gly Asp Tyr Asp Gly Thr Ala Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 471
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 471
Cys Ala Arg Arg Arg Asp Gly Asn Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 472
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 472
Cys Val Arg His Gly Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10
<210> 473
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 473
Cys Ala Phe Tyr Asp Gly Ala Tyr Trp
1 5
<210> 474
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 474
Cys Ala Ser Tyr Asp Pro Asp Tyr Trp
1 5
<210> 475
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 475
Cys Ala Arg Asp Thr Thr Ala Thr Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 476
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 476
Cys Ala Arg Arg Val Ala Thr Tyr Phe Asp Val Trp
1 5 10
<210> 477
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 477
Cys Thr Arg Arg Ser His Ile Thr Leu Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 478
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 478
Cys Ala Arg Arg Arg Thr Thr Ala Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 479
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 479
Cys Asn Asn Gly Asn Tyr Val Arg His Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10 15
<210> 480
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 480
Cys Thr Arg Arg Arg Glu Ile Thr Phe Asp Tyr Trp
1 5 10
<210> 481
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 481
Cys Ala Arg Ser Gly Ile Ser Pro Phe Thr Tyr Trp
1 5 10
<210> 482
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 482
Cys Ala Lys Tyr Asp Arg Phe Phe Ala Ser Trp
1 5 10
<210> 483
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 483
Ser Gln Gly Ile Ser Asn His Leu
1 5
<210> 484
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 484
Ser Gln Gly Ile Arg Asn Tyr Leu
1 5
<210> 485
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 485
Ser Gln Gly Ile Asn Asn Tyr Leu
1 5
<210> 486
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 486
Ser Gln Ser Val Asp His Asp Gly Asp Ser Tyr Met
1 5 10
<210> 487
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 487
Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Ser Tyr Met
1 5 10
<210> 488
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 488
Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu
1 5
<210> 489
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 489
Ser Gln Asp Ile Ser Thr Tyr Leu
1 5
<210> 490
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 490
Thr Ser Ser Ile Ser Ser Ser Tyr Leu
1 5
<210> 491
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 491
Asn Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu
1 5
<210> 492
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 492
Ser Glu Asn Ile Tyr Tyr Asn Leu
1 5
<210> 493
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 493
Ser Glu Asn Ile Tyr Gly Tyr Phe
1 5
<210> 494
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 494
Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr Ile
1 5
<210> 495
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 495
Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr Ile
1 5
<210> 496
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 496
Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr Leu
1 5
<210> 497
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 497
Ser Gln Asp Val Arg Thr Asp Val
1 5
<210> 498
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 498
Ser Gln Asp Val Ile Thr Ala Val
1 5
<210> 499
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 499
Ser Gln Ser Ile Gly Thr Ser Ile
1 5
<210> 500
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 500
Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Gln Lys Asn Tyr Leu
1 5 10
<210> 501
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 501
Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu
1 5
<210> 502
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 502
Ser Gln Thr Ile Gly Thr Ser Ile
1 5
<210> 503
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 503
Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Ser Asp Gln Lys Asn Tyr Leu
1 5 10
<210> 504
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 504
Asn Ser Ser Val Ser Tyr Met
1 5
<210> 505
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 505
Ser Ser Ser Leu Ser Tyr Met
1 5
<210> 506
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 506
Ser Gln Arg Ile Gly Thr Ser Met
1 5
<210> 507
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 507
Ser Gln Asn Ile Gly Thr Ser Ile
1 5
<210> 508
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 508
Ile Ser Ser Val Ser Tyr Met
1 5
<210> 509
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 509
Ser Gln Thr Ile Ala Thr Ser Ile
1 5
<210> 510
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 510
Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu
1 5 10
<210> 511
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 511
Asn Glu Ser Val Glu Tyr Ser Gly Thr Ser Leu Met
1 5 10
<210> 512
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 512
Tyr Phe Thr Ser Ser
1 5
<210> 513
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 513
Tyr Tyr Thr Ser Ser
1 5
<210> 514
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 514
Tyr Ala Ala Ser Asn
1 5
<210> 515
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 515
Tyr Tyr Thr Ser Arg
1 5
<210> 516
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 516
Phe Tyr Thr Ser Arg
1 5
<210> 517
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 517
Tyr Gly Thr Ser Asn
1 5
<210> 518
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 518
Tyr Asn Ala Asn Ser
1 5
<210> 519
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 519
Tyr Asn Ala Lys Thr
1 5
<210> 520
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 520
His Tyr Thr Ser Thr
1 5
<210> 521
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 521
Tyr His Thr Ser Thr
1 5
<210> 522
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 522
Tyr Ser Ala Ser Phe
1 5
<210> 523
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 523
Tyr Ser Ala Ser Tyr
1 5
<210> 524
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 524
Lys Ser Ala Ser Glu
1 5
<210> 525
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 525
Tyr Trp Ala Ser Thr
1 5
<210> 526
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 526
Tyr Ser Thr Ser Asn
1 5
<210> 527
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 527
Lys Asn Ala Ser Glu
1 5
<210> 528
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 528
Tyr Asp Thr Ser Lys
1 5
<210> 529
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 529
Tyr Asp Thr Ser Asn
1 5
<210> 530
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 530
Lys Asp Ala Ser Glu
1 5
<210> 531
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 531
Tyr Ala Thr Ser Asn
1 5
<210> 532
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 532
Tyr Lys Val Ser Asn
1 5
<210> 533
<211> 5
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 533
Ser Ala Ala Ser Asn
1 5
<210> 534
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 534
Cys Gln Gln Tyr Ser Asn Leu Pro Tyr Thr Phe
1 5 10
<210> 535
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 535
Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Ile Pro Tyr Thr Cys
1 5 10
<210> 536
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 536
Cys Gln Gln Asn Tyr Glu Asp Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 537
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 537
Cys Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 538
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 538
Cys Gln Gln Gly Asp Ala Leu Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 539
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 539
Cys Gln Gln Gly Asn Ser Leu Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 540
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 540
Cys Gln Gln Trp Ser Ser Arg Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 541
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 541
Cys Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 542
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 542
Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Tyr Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 543
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 543
Cys Gln Gln Arg Ser Tyr Phe Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 544
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 544
Cys Lys Gln Val Tyr Asp Val Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 545
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 545
Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 546
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 546
Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 547
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 547
Cys Gln His His Tyr Gly Tyr Pro Tyr Thr Phe
1 5 10
<210> 548
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 548
Cys Gln Gln Tyr Ser Asn Leu Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 549
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 549
Cys Gln Gln His Tyr Thr Ser Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 550
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 550
Cys Gln Gln His Tyr Ser Thr Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 551
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 551
Cys Gln Gln Ser Asn Arg Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 552
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 552
Cys Gln Asn Asp Tyr Asp Tyr Pro Tyr Thr Phe
1 5 10
<210> 553
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 553
Cys His Gln Tyr His Arg Ser Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 554
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 554
Cys Gln Gln Thr Phe Asp Val Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 555
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 555
Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr Tyr
1 5 10
<210> 556
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 556
Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Tyr Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 557
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 557
Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Phe Thr Phe
1 5 10
<210> 558
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 558
Cys Lys Gln Ala Tyr Asp Val Pro Trp Thr Phe
1 5 10
<210> 559
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 559
Cys Gln Gln Trp Ser Ser Phe Pro Pro Thr Phe
1 5 10
<210> 560
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 560
Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 561
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 561
Cys Gln Gln Ser Asp Ser Trp Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<210> 562
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 562
Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Arg Thr Phe
1 5 10
<210> 563
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 563
Cys Trp Gln Asn Thr His Phe Pro Gln Thr Phe
1 5 10
<210> 564
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примеч.="Описание искусственной последовательности:
Синтетический
пептид"
<400> 564
Cys Gln Gln Ser Arg Gln Val Pro Leu Thr Phe
1 5 10
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ИНДУЦИРУЮЩИЙ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ АГЕНТ | 2015 |
|
RU2743464C2 |
| АНТИТЕЛА К ТАУ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2018 |
|
RU2787779C2 |
| МУЛЬТИВАЛЕНТНЫЕ И МУЛЬТИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ 41BB-СВЯЗЫВАЮЩИЕ СЛИТЫЕ БЕЛКИ | 2017 |
|
RU2789648C2 |
| АНТИТЕЛО К TIGIT И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ | 2019 |
|
RU2786434C2 |
| ЛЕЧЕНИЕ И ИНГИБИРОВАНИЕ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЛЕГКИХ У ПАЦИЕНТОВ С АЛЛЕЛЯМИ РИСКА В ГЕНАХ, КОДИРУЮЩИХ IL33 И IL1RL1 | 2018 |
|
RU2776241C2 |
| АНТИТЕЛА К МИОСТАТИНУ, ПОЛИПЕПТИДЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ВАРИАНТЫ FC-ОБЛАСТЕЙ, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2015 |
|
RU2799522C2 |
| АНТИТЕЛА К С5 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2015 |
|
RU2746356C2 |
| АНТИ-СЕАСАМ6 АНТИТЕЛА И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2016 |
|
RU2739163C2 |
| КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ НА ОСНОВЕ АКТИВИРУЮЩИХ Т-КЛЕТКИ БИСПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИХ МОЛЕКУЛ ПРОТИВ CD3 И ФОЛАТНОГО РЕЦЕПТОРА 1 (FOLR1) И АНТАГОНИСТОВ, СВЯЗЫВАЮЩИХСЯ С ОСЬЮ PD-1 | 2015 |
|
RU2753902C2 |
| МУЛЬТИВАЛЕНТНЫЕ И МУЛЬТИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ГИБРИДНЫЕ БЕЛКИ, СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С DR5 | 2016 |
|
RU2748620C2 |
Изобретение относится к аматоксинам, представленным общей формулой (An), где n составляет 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или 9. Также изобретение относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), состоящему из антитела, конъюгированного с аматоксином через линкер, причем ADC имеет структурную формулу (Ia), где Q представляет собой S; L представляет собой -(CH2)n, причем n представляет собой целое число от 1до 6; Z представляет собой малеимидную группу; и Ab представляет собой антитело, которое специфически связывается с Her2 или PSMA. Также изобретение относится к конъюгату антитела с лекарственным средством (ADC), причем антитело специфически связывается с PSMA человека и содержит тяжелую и легкую цепь аминокислотных последовательностей и которое конъюгировано с соединением HDP30.2867. Также изобретение относится к применению ADC для лечения рака. Технический результат - обеспечение аматоксинов, которые можно использовать в конъюгатах антитела с лекарственным средством (ADC) для доставки аматоксина к целевой клетке, которые обладают высокими стабильностью в плазме и переносимостью in vivo. 4 н. и 12 з.п ф-лы, 15 табл., 48 ил., 22 пр.
1. Аматоксин, представляющий собой структуру формулы (An)
Формула (An),
где n составляет 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или 9, с высокими стабильностью в плазме и переносимостью in vivo.
2. Аматоксин по п. 1, представляющий собой структуру формулы (A)
Формула (A) (HDP 30.2867).
3. Аматоксин по п. 1 или 2 для применения при получении конъюгата антитела с лекарственным средством (ADC).
4. Конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC) с высокими стабильностью в плазме и переносимостью in vivo, состоящий из антитела, конъюгированного с аматоксином через линкер, причем ADC имеет структуру формулы (Ia)
(Ia),
где Q представляет собой S;
L представляет собой -(CH2)n-, причем n представляет собой целое число от 1 до 6;
Z представляет собой малеимидную группу; и
Ab представляет собой антитело, которое специфически связывается с Her2 или PSMA.
5. ADC по п. 4, где L представляет собой -(CH2)n-, где n составляет 6.
6. ADC по п. 4, представляющий собой структуру формулы (IIa)
(IIa).
7. ADC по любому из пп. 4-6, в котором антитело содержит область Fc, содержащую по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, состоящей из D265C, D265A, A118C, L234A или L235A (согласно индексу EU).
8. ADC по любому из пп. 4-7, в котором указанное антитело специфически связывается с PSMA и содержит CDRH1 согласно SEQ ID NO: 378, CDRH2 согласно SEQ ID NO: 379, CDRH3 согласно SEQ ID NO: 380, CDRL1 согласно SEQ ID NO: 381, CDRL2 согласно SEQ ID NO: 382 и CDRL3 согласно SEQ ID NO: 383.
9. ADC по п. 8, в котором указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 375 и вариабельную область легкой цепи согласно SEQ ID NO: 377.
10. ADC по п. 9, в котором указанное антитело содержит тяжелую цепь согласно SEQ ID NO: 371, SEQ ID NO: 372, SEQ ID NO: 373 или SEQ ID NO: 374 и легкую цепь согласно SEQ ID NO: 376 или их антигенсвязывающий фрагмент.
11. Конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC), причем указанный конъюгат антитела с лекарственным средством содержит антитело, которое специфически связывается с PSMA человека и содержит тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 374 и легкую цепь с аминокислотной последовательностью согласно SEQ ID NO: 376 и которое конъюгировано с соединением
HDP30.2867.
12. Конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC) по п. 11, в котором соотношение лекарственного средства к антителу (DAR) составляет 1, 2, 3 или 4.
13. ADC по п. 12, в котором DAR составляет 2.
14. Применение ADC по любому из пп. 4-13 для лечения рака.
15. Применение по п. 14, при котором рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака поджелудочной железы, холангиокарциномы, рака толстой и прямой кишки, рака легкого, рака яичников, рака предстательной железы, рака желудка, рака почки, злокачественной меланомы, гемобластоза, лейкоза и злокачественной лимфомы.
16. Применение по п. 15, при котором рак представляет собой рак предстательной железы.
| WO 2016142049 A1, 15.09.2016 | |||
| WO 2018115466 A1, 28.06.2018 | |||
| WO 2019030173 A1, 14.02.2019 | |||
| WO 2010115629 A2, 14.10.2010 | |||
| WO 2017210288 A1, 07.12.2017 | |||
| WO 2018134787 A3, 04.10.2018 | |||
| КОНЪЮГАТЫ АМАТОКСИНОВ С УЛУЧШЕННЫМИ ЛИНКЕРАМИ | 2011 |
|
RU2601411C2 |
| RU 2015142093 A, 07.04.2017 | |||
| СПОСОБЫ СИНТЕЗА АМАТОКСИНОВОГО СТРУКТУРНОГО БЛОКА И АМАТОКСИНОВ | 2013 |
|
RU2637924C2 |
