Данная заявка заявляет приоритет согласно предварительной заявке на патент США № 62/405520, поданной 7 октября 2016 года, полное содержание которой включено в данный документ посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение в целом относится к применению Т-клеток или естественных киллерных клеток (NK), сконструированных для экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR) для лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией белка кластера дифференцировки 20 (CD20) или белка кластера дифференцировки 22 (CD22).

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Многих пациентов с B-клеточными злокачественными новообразованиями невозможно вылечить с помощью стандартной терапии. Кроме того, традиционные варианты лечения часто характеризуются тяжелыми побочными эффектами. Были предприняты попытки в области противораковой иммунотерапии, однако некоторые ограничения осложняют достижение клинической эффективности. Хотя были идентифицированы сотни так называемых опухолевых антигенов, они, как правило, являются собственными и, таким образом, являются недостаточно иммуногенными. Кроме того, опухоли используют несколько механизмов, чтобы сделать себя неблагоприятными для инициирования и распространения иммунной атаки.

Последние разработки с использованием терапии аутологичными T-клетками, модифицированными химерным антигенным рецептором (CAR) (CART), которая заключается в перенаправлении Т-клеток на подходящую молекулу клеточной поверхности на раковых клетках, как например, в B-клеточных злокачественных новообразованиях, показывают многообещающие результаты в использовании силы иммунной системы для лечения В-клеточных злокачественных новообразований и других форм рака (см., например, Sadelain et al., Cancer Discovery 3:388-398 (2013)). Клинические результаты для CART19, полученных от мышиных (т. e. "CTL019"), продемонстрировали перспективность в установлении полных ремиссий у пациентов, страдающих CLL, а также детским ALL (см., например, Kalos et al., Sci Transl Med 3:95ra73 (2011), Porter et al., NEJM 365:725-733 (2011), Grupp et al., NEJM 368:1509-1518 (2013)). Помимо способности химерного антигенного рецептора на генетически модифицированных Т-клетках распознавать и разрушать клетки-мишени, успешное терапевтическое средство Т-клеточной терапии должно обладать способностью к пролиферации и персистенции в течение определенного времени для контроля рецидива лейкоза. Изменчивое качество Т-клеток, обусловленное анергией, подавлением или истощением, будет влиять на функциональные характеристики CAR-трансформированных T-клеток, над которыми практикующие специалисты в данной области техники в настоящее время имеют ограниченный контроль. Чтобы быть эффективными, CAR-трансформированные Т-клетки пациента должны персистировать и поддерживать способность к пролиферации в ответ на когнатный антиген. Было показано, что Т-клетки пациента с ALL могут делать это при наличии CART19, содержащих мышиный scFv (см., например, Grupp et al., NEJM 368:1509-1518 (2013)).

Таким образом, существует потребность в дополнительных терапевтических средствах на основе CAR.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится, по меньшей мере частично, к новым антигенсвязывающим доменам и молекулам химерного антигенного рецептора (CAR), направленным на CD20 и CD22, а также к способам применения, например, в качестве монотерапевтических средств или в комбинированных терапевтических средствах. В некоторых вариантах осуществления композиции и способ, описанные в данном документе, могут предусматривать комбинацию молекулы CAR, которая связывает CD20, в комбинации с В-клеточным ингибитором, например, ингибитором CD19, или CD22, или их комбинацией. Также раскрываются нуклеиновые кислоты, кодирующие композиции, клетки-хозяева, векторы, а также способы получения и применения.

Нуклеиновые кислоты, кодирующие CD20-связывающие домены и CAR для CD20

В первом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит антитело или фрагмент антитела, которые включают в себя CD20-связывающий домен (например, мышиный, человеческий или гуманизированный CD20-связывающий домен), трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен). В одном варианте осуществления CAR содержит антитело или фрагмент антитела, которые включают в себя CD20-связывающий домен, описанный в данном документе (например, мышиный, человеческий или гуманизированный CD20-связывающий домен, описанный в данном документе), трансмембранный домен, описанный в данном документе, и внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен).

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен содержит одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (LCDR1), определяющей комплементарность области 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющей комплементарность области 3 легкой цепи (LCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, и/или одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, например, CD20-связывающего домена, содержащего одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) LCDR и одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) HCDR. В варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен содержит CDR тяжелой цепи (например, HCDR1, HCDR2 и/или HCDR3), описанную в данном документе, например, в таблице 1, и кратко описанную в таблице 2. В варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен содержит CDR легкой цепи (например, LCDR1, LCDR2 и/или LCDR3), описанную в данном документе, например, в таблице 1, и кратко описанную в таблице 3.

В определенном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен содержит одну, две, три, четыре, пять или шесть из следующих аминокислотных последовательностей:

HCDR1 содержит или состоит из аминокислотной последовательности (N/S)YN(L/M)H;

HCDR2 содержит или состоит из аминокислотной последовательности AIYPGN(Y/G)DTSYN(Q/P)KFKG;

HCDR3 содержит или состоит из консенсусной аминокислотной последовательности (V/S)(D/Y)F(G/Y)(H/G)S(R/S)(Y/S)WYFDV;

LCDR1 содержит или состоит из аминокислотной последовательности RA(T/S)SSVSSM(N/H);

LCDR2 содержит или состоит из аминокислотной последовательности ATSNLAS; и/или

LCDR3 содержит или состоит из аминокислотной последовательности QQW(T/I)FNPPT.

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен (например, мышиный, человеческий или гуманизированный CD20-связывающий домен) содержит вариабельную область легкой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 1, и кратко описанную в таблице 5), и/или вариабельную область тяжелой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 1, и кратко описанную в таблице 4). В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий легкую цепь и тяжелую цепь, как изложено в таблице 1. В варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит или состоит из аминокислотной последовательности в таблице 1. В варианте осуществления CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит: вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области легкой цепи, представленной в таблице 5, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью из таблицы 5; и/или вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области тяжелой цепи, представленной в таблице 4, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью из таблицы 4.

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен включает в себя линкер (Gly4-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6, предпочтительно 3 или 4 (SEQ ID NO: 23). Вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи scFv могут находиться, например, в любой из следующих ориентаций: вариабельная область легкой цепи-линкер-вариабельная область тяжелой цепи или вариабельная область тяжелой цепи-линкер-вариабельная область легкой цепи.

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CD20-связывающий домен, содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 268, SEQ ID NO: 295, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 349, SEQ ID NO: 376, SEQ ID NO: 403, и SEQ ID NO:, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CD20-связывающий домен, содержит последовательность, изложенную в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты кодирует полипептид CAR, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296, SEQ ID NO: 323, SEQ ID NO: 350, SEQ ID NO: 377, SEQ ID NO: 404 и SEQ ID NO: 431, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней, или аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 30, 20, 10 или 5 модификаций аминокислоты под SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296, SEQ ID NO: 323, SEQ ID NO: 350, SEQ ID NO: 377, SEQ ID NO: 404 и SEQ ID NO: 431, где необязательно полипептид CAR не включает в себя сигнальный пептид MALPVTALLLPLALLLHAARP.

В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты кодирует полипептид CAR, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296, SEQ ID NO: 323, SEQ ID NO: 350, SEQ ID NO: 377, SEQ ID NO: 404 и SEQ ID NO: 431, где необязательно полипептид CAR не включает в себя сигнальный пептид MALPVTALLLPLALLLHAARP.

В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 297, SEQ ID NO: 324, SEQ ID NO: 351, SEQ ID NO: 378, SEQ ID NO: 405 и SEQ ID NO: 432, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней, где необязательно нуклеиновая кислота CAR не включает в себя последовательность сигнального пептида ATGGCCCTCCCTGTCACCGCCCTGCTGCTTCCGCTGGCTCTTCTGCTCCACGCCGCTCGGCCC.

В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 297, SEQ ID NO: 324, SEQ ID NO: 351, SEQ ID NO: 378, SEQ ID NO: 405 и SEQ ID NO: 432, где необязательно нуклеиновая кислота CAR не включает в себя последовательность сигнального пептида ATGGCCCTCCCTGTCACCGCCCTGCTGCTTCCGCTGGCTCTTCTGCTCCACGCCGCTCGGCCC.

В одном варианте осуществления кодируемый CAR включает в себя трансмембранный домен, который содержит трансмембранный домен белка, например белка, описанного в данном документе, например, выбранного из группы, состоящей из альфа-, бета- или дзета-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3 эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD123, CD134, CD137 и CD154. В одном варианте осуществления кодируемый трансмембранный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 801. В одном варианте осуществления кодируемый трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 801, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 801. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая трансмембранный домен, содержит последовательность под SEQ ID NO: 802 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом с помощью шарнирной области, например, шарнирной области, описанной в данном документе. В одном варианте осуществления кодируемая шарнирная область содержит SEQ ID NO: 799 или SEQ ID NO: 814 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая шарнирную область, содержит последовательность под SEQ ID NO: 800 или SEQ ID NO: 815 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В одном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты дополнительно содержит последовательность, кодирующую костимулирующий домен, например, костимулирующий домен, описанный в данном документе.

В вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен. В вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит первичный сигнальный домен. В вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен и первичный сигнальный домен.

В одном варианте осуществления костимулирующий домен представляет собой функциональный сигнальный домен, полученный из белка, например описанного в данном документе, например выбранного из группы, состоящей из OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278) и 4-1BB (CD137). В одном варианте осуществления костимулирующий домен выбран из группы, состоящей из 4-1BB, CD27 или CD28. В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 803, SEQ ID NO: 818 или SEQ ID NO: 809. В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803. В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 803, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 803. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая костимулирующий домен, содержит последовательность под SEQ ID NO: 804 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В вариантах осуществления первичный сигнальный домен включает в себя функциональный сигнальный домен CD3-дзета. В вариантах осуществления функциональный сигнальный домен CD3-дзета содержит SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807.

В одном варианте осуществления кодируемый внутриклеточный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен 4-1BB и/или функциональный сигнальный домен CD3-дзета. В одном варианте осуществления кодируемый внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803 и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 803, и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 803, и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807. В одном варианте осуществления кодируемый внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803 и последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, где последовательности, образующие внутриклеточный сигнальный домен, экспрессируются в одной и той же рамке считывания и в виде одной полипептидной цепи. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая внутриклеточный сигнальный домен, содержит последовательность под SEQ ID NO: 804 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней, и/или последовательность под SEQ ID NO: 806 или SEQ ID NO: 808, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей конструкцию CAR, содержащую лидерную последовательность, например, лидерную последовательность, описанную в данном документе, например под SEQ ID NO: 797, CD20-связывающий домен, описанный в данном документе, например, CD20-связывающий домен, содержащий LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3, описанные в данном документе, например, мышиный, человеческий или гуманизированный CD20-связывающий домен, описанный в таблице 1, или последовательность, на 95-99% идентичную таковому, шарнирную область, описанную в данном документе, например под SEQ ID NO: 799, трансмембранный домен, описанный в данном документе, например, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 801, и внутриклеточный сигнальный домен, например, внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе. В одном варианте осуществления кодируемый внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, например, костимулирующий домен, описанный в данном документе, например, костимулирующий домен 4-1BB, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 803, и/или первичный сигнальный домен, например, первичный сигнальный домен, описанный в данном документе, например, стимулирующий домен CD3-дзета, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 806. В одном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая конструкцию CAR, включает в себя лидерную последовательность, кодируемую последовательностью нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 798, или последовательность, на 95-99% идентичную таковой.

В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит (например, состоит из) нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность CAR, описанную в таблице 1.

В одном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит (например, состоит из) нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность CAR под SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296, SEQ ID NO: 323, SEQ ID NO: 350, SEQ ID NO: 377, SEQ ID NO: 404, и SEQ ID NO: 431, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 80, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 188, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296, SEQ ID NO: 323, SEQ ID NO: 350, SEQ ID NO: 377, SEQ ID NO: 404, и SEQ ID NO: 431,

В некоторых вариантах осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит (например, состоит из) последовательность нуклеиновой кислоты, описанную в таблице 1.

В одном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты содержит (например, состоит из) последовательность нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 297, SEQ ID NO: 324, SEQ ID NO: 351, SEQ ID NO: 378, SEQ ID NO: 405, и SEQ ID NO: 432, или последовательность нуклеиновой кислоты, характеризующуюся 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью последовательности нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 81, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 297, SEQ ID NO: 324, SEQ ID NO: 351, SEQ ID NO: 378, SEQ ID NO: 405, и SEQ ID NO: 432,

В одном аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей CD20-связывающий домен, где CD20-связывающий домен содержит одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (LCDR1), определяющей комплементарность области 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющей комплементарность области 3 легкой цепи (LCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, и одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, например, мышиный, человеческий или гуманизированный CD20-связывающий домен, содержащий одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) LCDR и одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) HCDR.

В некоторых вариантах осуществления CDR тяжелой цепи (например, HCDR1, HCDR2 и/или HCDR3) содержит аминокислотную последовательность, описанную в таблице 2 или изложенную в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления CDR легкой цепи (например, LCDR1, LCDR2 и/или LCDR3) содержит аминокислотную последовательность, описанную в таблице 3 или изложенную в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

(a) SEQ ID NOs: 136, 137, и 138;

(b) SEQ ID NOs: 217, 218, и 219;

(c) SEQ ID NOs: 55, 56, и 57;

(d) SEQ ID NOs: 82, 83, и 84;

(e) SEQ ID NOs: 109, 110, и 111;

(f) SEQ ID NOs: 1, 2, и 3;

(g) SEQ ID NOs: 163, 164, и 165;

(h) SEQ ID NOs: 190, 191, и 192;

(i)SEQ ID NOs: 28, 29, и 30;

(j) SEQ ID NOs: 244, 245, и 246;

(k) SEQ ID NOs: 271, 272, и 273;

(l) SEQ ID NOs: 298, 299, и 300;

(m) SEQ ID NOs: 325, 326, и 327;

(n) SEQ ID NOs: 352, 353, и 354;

(o) SEQ ID NOs: 379, 380, и 381; и

(p) SEQ ID NOs: 406, 407, и 408.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность LCDR1, LCDR2 и LCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

(a) SEQ ID NOs: 147, 148, и 149;

(b) SEQ ID NOs: 228, 229, и 230;

(c) SEQ ID NOs: 66, 67, и 68;

(d) SEQ ID NOs: 93, 94, и 95;

(e) SEQ ID NOs: 120, 121, и 122;

(f) SEQ ID NOs: 12, 13, и 14;

(g) SEQ ID NOs: 174, 175, и 176;

(h) SEQ ID NOs: 201, 202, и 203;

(i) SEQ ID NOs: 39, 40, и 41;

(j) SEQ ID NOs: 255, 256, и 257;

(k) SEQ ID NOs: 282, 283, и 284;

(l) SEQ ID NOs: 309, 310, и 311;

(m) SEQ ID NOs: 336, 337, и 338;

(n) SEQ ID NOs: 363, 364, и 365;

(o) SEQ ID NOs: 390, 391, и 392; и

(p) SEQ ID NOs: 417, 418, и 419.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

(a) SEQ ID NOs: 147, 148, 149, 136, 137, и 138;

(b) SEQ ID NOs: 228, 229, 230, 217, 218, и 219;

(c) SEQ ID NOs: 66, 67, 68, 55, 56, и 57;

(d) SEQ ID NOs: 93, 94, 95, 82, 83, и 84;

(e) SEQ ID NOs: 120, 121, 122, 109, 110, и 111;

(f) SEQ ID NOs: 12, 13, 14, 1, 2, и 3;

(g) SEQ ID NOs: 174, 175, 176, 163, 164, и 165;

(h) SEQ ID NOs: 201, 202, 203, 190, 191, и 192;

(i) SEQ ID NOs: 39, 40, 41, 28, 29, и 30;

(j) SEQ ID NOs: 255, 256, 257, 244, 245, и 246;

(k) SEQ ID NOs: 282, 283, 284, 271, 272, и 273;

(l) SEQ ID NOs: 309, 310, 311, 298, 299, и 300;

(m) SEQ ID NOs: 336, 337, 338, 325, 326, и 327;

(n) SEQ ID NOs: 363, 364, 365, 352, 353, и 354;

(o) SEQ ID NOs: 390, 391, 392, 379, 380, и 381; и

(p) SEQ ID NOs: 417, 418, 419, 406, 407, и 408.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

a) SEQ ID NOs: 139, 140, и 141;

b) SEQ ID NOs: 220, 221, и 222;

c) SEQ ID NOs: 4, 5, и 6;

d) SEQ ID NOs: 31, 32, и 33;

e) SEQ ID NOs: 58, 59, и 60;

f) SEQ ID NOs: 85, 86, и 87;

g) SEQ ID NOs: 112, 113, и 114;

h) SEQ ID NOs: 166, 167, и 168;

i) SEQ ID NOs: 193, 194, и 195;

j) SEQ ID NOs: 247, 248, и 249;

k) SEQ ID NOs: 274, 275, и 276;

l) SEQ ID NOs: 301, 302, и 303;

m) SEQ ID NOs: 328, 329, и 330;

n) SEQ ID NOs: 355, 356, и 357;

o) SEQ ID NOs: 382, 383, и 384; и

p) SEQ ID NOs: 409, 410, и 411.

В некоторых вариантах осуществления кодируемая аминокислотная последовательность LCDR1, LCDR2 и LCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

a) SEQ ID NOs: 150, 151, и 152;

b) SEQ ID NOs: 231, 232, и 233;

c) SEQ ID NOs: 15, 16, и 17;

d) SEQ ID NOs: 42, 43, и 44;

e) SEQ ID NOs: 69, 70, и 71;

f) SEQ ID NOs: 96, 97, и 98;

g) SEQ ID NOs: 123, 124, и 125;

h) SEQ ID NOs: 177; 178, и 179;

i) SEQ ID NOs: 204, 205, и 206;

j) SEQ ID NOs: 258, 259, и 260;

k) SEQ ID NOs: 285, 286, и 287;

l) SEQ ID NOs: 312, 313, и 314;

m) SEQ ID NOs: 339, 340, и 341;

n) SEQ ID NOs: 366, 367, и 368;

o) SEQ ID NOs: 393, 394, и 395; и

p) SEQ ID NOs: 420, 421, и 422.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

a) SEQ ID NOs: 150, 151, 152, 139, 140, и 141;

b) SEQ ID NOs: 231, 232, 233, 220, 221, и 222;

c) SEQ ID NOs: 15, 16, 17, 4, 5, и 6;

d) SEQ ID NOs: 42, 43, 44, 31, 32, и 33;

e) SEQ ID NOs: 69, 70, 71, 58, 59, и 60;

f) SEQ ID NOs: 96, 97, 98, 85, 86, и 87;

g) SEQ ID NOs: 123, 124, 125, 112, 113, и 114;

h) SEQ ID NOs: 177; 178, 179, 166, 167, и 168;

i) SEQ ID NOs: 204, 205, 206, 193, 194, и 195;

j) SEQ ID NOs: 258, 259, 260, 247, 248, и 249;

k) SEQ ID NOs: 285, 286, 287, 274, 275, и 276;

l) SEQ ID NOs: 312, 313, 314, 301, 302, и 303;

m) SEQ ID NOs: 339, 340, 341, 328, 329, и 330;

n) SEQ ID NOs: 366, 367, 368, 355, 356, и 357;

o) SEQ ID NOs: 393, 394, 395, 382, 383, и 384; и

p) SEQ ID NOs: 420, 421, 422, 409, 410, и 411.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

a) SEQ ID NOs: 142, 143, и 144;

b) SEQ ID NOs: 223, 224, и 225;

c) SEQ ID NOs: 7, 8, и 9;

d) SEQ ID NOs: 34, 35, и 36;

e) SEQ ID NOs: 61, 62, и 63;

f) SEQ ID NOs: 88, 89, и 90;

g) SEQ ID NOs: 115, 116, и 117;

h) SEQ ID NOs: 169, 170, и 171;

i) SEQ ID NOs: 196, 197, и 198;

j) SEQ ID NOs: 250, 251, и 252;

k) SEQ ID NOs: 277, 278, и 279;

l) SEQ ID NOs: 304, 305, и 306;

m) SEQ ID NOs: 331, 332, и 333;

n) SEQ ID NOs: 358, 359, и 360;

o) SEQ ID NOs: 385, 386, и 387; и

p) SEQ ID NOs: 412, 413, и 414.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность LCDR1, LCDR2 и LCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

a) SEQ ID NOs: 153, 154, и 155;

b) SEQ ID NOs: 234, 235, и 236;

c) SEQ ID NOs: 18, 19, и 20;

d) SEQ ID NOs: 45, 46, и 47;

e) SEQ ID NOs: 72, 73, и 74;

f) SEQ ID NOs: 99, 100, и 101;

g) SEQ ID NOs: 126, 127, и 128;

h) SEQ ID NOs: 180, 181, и 182;

i) SEQ ID NOs: 207, 208, и 209;

j) SEQ ID NOs: 261, 262, и 263;

k) SEQ ID NOs: 288, 289, и 290;

l) SEQ ID NOs: 315, 316, и 317;

m) SEQ ID NOs: 342, 343, и 344;

n) SEQ ID NOs: 369, 370, и 371;

o) SEQ ID NOs: 396, 397, и 398; и

p) SEQ ID NOs: 423, 424, и 425.

В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

a) SEQ ID NOs: 153, 154, 155, 142, 143, и 144;

b) SEQ ID NOs: 234, 235, 236, 223, 224, и 225;

c) SEQ ID NOs: 18, 19, 20, 7, 8, и 9;

d) SEQ ID NOs: 45, 46, 47, 34, 35, и 36;

e) SEQ ID NOs: 72, 73, 74, 61, 62, и 63;

f) SEQ ID NOs: 99, 100, 101, 88, 89, и 90;

g) SEQ ID NOs: 126, 127, 128, 115, 116, и 117;

h) SEQ ID NOs: 180, 181, 182, 169, 170, и 171;

i) SEQ ID NOs: 207, 208, 209, 196, 197, и 198;

j) SEQ ID NOs: 261, 262, 263, 250, 251, и 252;

k) SEQ ID NOs: 288, 289, 290, 277, 278, и 279;

l) SEQ ID NOs: 315, 316, 317, 304, 305, и 306;

m) SEQ ID NOs: 342, 343, 344, 331, 332, и 333;

n) SEQ ID NOs: 369, 370, 371, 358, 359, и 360;

o) SEQ ID NOs: 396, 397, 398, 385, 386, и 387; и

p) SEQ ID NOs: 423, 424, 425, 412, 413, и 414.

В варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит аминокислотную последовательность, описанную в таблице 1.

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 5), и/или вариабельную область тяжелой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 4). В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий легкую цепь и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, выбранной из таблицы 1.

В варианте осуществления аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи и вариабельной области тяжелой цепи, соответственно, выбрана из нижеследующих a) - p):

(a) SEQ ID NOs: 156 и 145;

(b) SEQ ID NOs: 237 и 226;

(c) SEQ ID NOs: 21 и 10

(d) SEQ ID NOs: 75 и 64;

(e) SEQ ID NOs: 102 и 91;

(f) SEQ ID NOs: 129 и 118;

(g) SEQ ID NOs: 183 и 172;

(h) SEQ ID NOs: 210 и 199;

(i) SEQ ID NOs: 48 и 37;

(j) SEQ ID NOs: 264 и 253;

(k) SEQ ID NOs: 291 и 280;

(l) SEQ ID NOs: 318 и 307;

(m) SEQ ID NOs: 345 и 334;

(n) SEQ ID NOs: 372 и 361;

(o) SEQ ID NOs: 399 и 388; и

(p) SEQ ID NOs: 426 и 415.

В варианте осуществления CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит: вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области легкой цепи, представленной в таблице 5, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью из таблицы 5; и/или вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области тяжелой цепи, представленной в таблице 4, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью в таблице 4.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей, показанных в таблице 2, таблице 3, таблице 4 или таблице 5, или последовательность, на 95-99% идентичную таковым.

В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен представляет собой scFv, и вариабельная область легкой цепи, содержащая аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например, в таблице 1, присоединена к вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например, в таблице 1, посредством линкера, например линкера, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления кодируемый CD20-связывающий домен включает в себя линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6, предпочтительно 4 (SEQ ID NO: 23). Вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи scFv могут находиться, например, в любой из следующих ориентаций: вариабельная область легкой цепи-линкер-вариабельная область тяжелой цепи или вариабельная область тяжелой цепи-линкер-вариабельная область легкой цепи.

Полипептиды, содержащие CD20-связывающие домены и CAR для CD20

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле полипептида, кодируемой молекулой нуклеиновой кислоты. В одном варианте осуществления выделенная молекула полипептида содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность, на 95-99% идентичную таковой.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле химерного антигенного рецептора (CAR), содержащей CD20-связывающий домен (например, мышиное, человеческое или гуманизированное антитело или фрагмент антитела, которые специфически связываются с CD20), трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен). В одном варианте осуществления CAR содержит антитело или фрагмент антитела, которые включают в себя CD20-связывающий домен, описанный в данном документе (например, мышиное, человеческое или гуманизированное антитело или фрагмент антитела, которые специфически связываются с CD20, как описано в данном документе), трансмембранный домен, описанный в данном документе, и внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен, описанный в данном документе).

В вариантах осуществления, предусмотренных в данном документе, представлена выделенная молекула CAR, содержащая CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где CD20-связывающий домен содержит одну или несколько из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (LCDR1), определяющей комплементарность области 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющей комплементарность области 3 легкой цепи (LCDR3) любого CD20-связывающего домена, включенного в таблицу 1, и одну или несколько из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) любого CD20-связывающего домена, включенного в таблицу 1.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (LCDR1), определяющей комплементарность области 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющей комплементарность области 3 легкой цепи (LCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, и одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, например, CD20-связывающего домена, содержащего одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) LCDR и одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) HCDR. В некоторых вариантах осуществления CDR тяжелой цепи (например, HCDR1, HCDR2 и/или HCDR3) содержит аминокислотную последовательность, описанную в таблице 2 или изложенную в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления CDR легкой цепи (например, LCDR1, LCDR2 и/или LCDR3) содержит аминокислотную последовательность, описанную в таблице 3 или изложенную в таблице 1.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 5), и/или вариабельную область тяжелой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 4). В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий легкую цепь и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, включенной в таблицу 4 или таблицу 5. В варианте осуществления CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области легкой цепи, представленной в таблице 5, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, представленной в таблице 5; и/или вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области тяжелой цепи, представленной в таблице 4, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью, представленной в таблице 4. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429 или последовательность, на 95-99% идентичную таковой. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой scFv, и вариабельная область легкой цепи, содержащая аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например в таблице 5, присоединена к вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например в таблице 4, посредством линкера, например линкера, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен включает в себя линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6, предпочтительно 4 (SEQ ID NO: 23). Вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи scFv могут находиться, например, в любой из следующих ориентаций: вариабельная область легкой цепи-линкер-вариабельная область тяжелой цепи или вариабельная область тяжелой цепи-линкер-вариабельная область легкой цепи.

В одном варианте осуществления выделенная молекула CAR содержит трансмембранный домен белка, например белка, описанного в данном документе, например, выбранного из группы, состоящей из альфа-, бета- или дзета-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3-эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD123, CD134, CD137 и CD154. В одном варианте осуществления трансмембранный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 801. В одном варианте осуществления трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 20, 10 или 5 модификаций (например, замен) аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 801 или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 801.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом с помощью шарнирной области, например, шарнирной области, описанной в данном документе. В одном варианте осуществления кодируемая шарнирная область содержит SEQ ID NO: 799 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В одном варианте осуществления выделенная молекула CAR дополнительно содержит последовательность, кодирующую костимулирующий домен, например, костимулирующий домен, описанный в данном документе.

В вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен выделенной молекулы CAR содержит костимулирующий домен. В вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен выделенной молекулы CAR содержит первичный сигнальный домен. В вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен выделенной молекулы CAR содержит костимулирующий домен и первичный сигнальный домен.

В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит функциональный сигнальный домен белка, выбранного из группы, состоящей из OX40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278) и 4-1BB (CD137). В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803. В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 20, 10 или 5 модификаций (например, замен) аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 803 или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 803.

В вариантах осуществления первичный сигнальный домен включает в себя функциональный сигнальный домен CD3-дзета. В вариантах осуществления функциональный сигнальный домен CD3-дзета содержит SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807.

В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен 4-1BB и/или функциональный сигнальный домен CD3-дзета. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803 и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 20, 10 или 5 модификаций (например, замен) аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 803, и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 803, и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803 и/или последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, где последовательности, образующие внутриклеточный сигнальный домен, экспрессируются в одной и той же рамке считывания и в виде одной полипептидной цепи.

В одном варианте осуществления выделенная молекула CAR дополнительно содержит лидерную последовательность, например, лидерную последовательность, описанную в данном документе. В одном варианте осуществления лидерная последовательность содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 797 или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 797.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле CAR, содержащий лидерную последовательность, например, лидерную последовательность, описанную в данном документе, например, лидерную последовательность под SEQ ID NO: 797 или характеризующуюся 95-99% идентичностью таковой, CD20-связывающий домен, описанный в данном документе, например, CD20-связывающий домен, содержащий LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3, описанные в данном документе, например, CD20-связывающий домен, описанный в таблице 1, или последовательность, на 95-99% идентичную таковой, шарнирную область, например, шарнирную область, описанную в данном документе, например, шарнирную область под SEQ ID NO: 799 или характеризующуюся 95-99% идентичностью таковой, трансмембранный домен, например, трансмембранный домен, описанный в данном документе, например, трансмембранный домен, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 801 или последовательность, характеризующуюся 95-99% идентичностью таковой, внутриклеточный сигнальный домен, например, внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе (например, внутриклеточный сигнальный домен, содержащий костимулирующий домен и/или первичный сигнальный домен). В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, например, костимулирующий домен, описанный в данном документе, например, костимулирующий домен 4-1BB, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 803 или характеризующуюся 95-99% идентичностью таковой, и/или первичный сигнальный домен, например, первичный сигнальный домен, описанный в данном документе, например, стимулирующий домен CD3-дзета, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807 или характеризующуюся 95-99% идентичностью таковой. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, например, костимулирующий домен, описанный в данном документе, например, костимулирующий домен 4-1BB, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 803, и/или первичный сигнальный домен, например, первичный сигнальный домен, описанный в данном документе, например, стимулирующий домен CD3-дзета, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807.

В одном варианте осуществления выделенная молекула CAR содержит (например, состоит из) аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять, 10, 15, 20 или 30 модификаций (например, замен), но не более 60, 50 или 40 модификаций (например, замен) аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429,

В одном аспекте настоящее изобретение относится к CD20-связывающему домену, содержащему одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (LCDR1), определяющей комплементарность области 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющей комплементарность области 3 легкой цепи (LCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, и одну или несколько (например, одну или несколько, две или более, или все три) из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, например, CD20-связывающего домена, содержащего одну или несколько, например все три, LCDR и одну или несколько, например все три, HCDR.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 5), и/или вариабельную область тяжелой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 4). В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью из таблицы 5 и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью из таблицы 4. В варианте осуществления CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области легкой цепи, представленной в таблице 5, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью в таблице 5; и/или вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области тяжелой цепи, представленной в таблице 4, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью в таблице 4. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность, на 95-99% идентичную таковой. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой scFv, и вариабельная область легкой цепи, содержащая аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например в таблице 5, присоединена к вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например в таблице 4, посредством линкера, например линкера, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен включает в себя линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6, предпочтительно 4 (SEQ ID NO: 23). Вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи scFv могут находиться, например, в любой из следующих ориентаций: вариабельная область легкой цепи-линкер-вариабельная область тяжелой цепи или вариабельная область тяжелой цепи-линкер-вариабельная область легкой цепи.

Также в данном документе представлен CD20-связывающий домен или полипептид, например, содержащий CD20-связывающий scFv, описанный в данном документе и, например, дополнительно содержащий лидерную последовательность, описанную в данном документе. Например, лидерная последовательность содержит или состоит из SEQ ID NO: 797. В некоторых вариантах осуществления CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429. В некоторых вариантах осуществления CD20-связывающий домен содержит растворимую аминокислотную последовательность scFv, включенную в таблицу 1. В варианте осуществления CD20-связывающий домен кодируется растворимой последовательностью нуклеиновой кислоты scFv, включенной в таблицу 1.

CD22-связывающие домены и CAR CD22

В другом аспекте настоящее изобретение относится к CD22-связывающему домену или молекуле CAR, содержащей аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи (VH) CD22-65sKD, например, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 839; и/или аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи (VL) CD22-65sKD, например, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 840. В вариантах осуществления последовательности VH и VL соединены непосредственно, например без линкера. В вариантах осуществления последовательности VH и VL соединены посредством линкера. В некоторых вариантах осуществления линкером является линкер (Gly4-Ser)n, где n равняется 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH-областью CD22-65sKD и VL-областью CD22-65KD отсутствует, например, n равняется 0. В одном варианте осуществления линкером является линкер (Gly4-Ser)n, где n равняется 1. В некоторых вариантах осуществления CD22-связывающий домен содержит аминокислотную последовательность CD22-65sKD scFv, например, содержащего аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 837.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к CD22-связывающему домену или молекуле CAR, содержащей аминокислотную последовательность scFv CD22-65s (линкер (Gly4-Ser)n, где n равняется 1) или CD22-65ss (без линкера). В некоторых вариантах осуществления CD22-связывающий домен содержит scFv под SEQ ID NO: 835. В некоторых вариантах осуществления CD22-связывающий домен содержит scFv под SEQ ID NO: 836.

Также настоящее изобретение относится к молекулам нуклеиновой кислоты, векторам, клеткам и применениям, предусматривающим любой из вышеупомянутых аспектов или вариантов осуществления.

Линкеры для антигенсвязывающих доменов

Было обнаружено, что молекулы CAR, содержащие короткий линкер или не содержащие линкер между вариабельными доменами (например, VH и VL) антигенсвязывающего домена, проявляли равную или более высокую активность, чем таковые с более длинными версиями линкера. Например, в некоторых вариантах осуществления CD22-65s (имеющая линкер (Gly4-Ser)n, где n равняется 1) демонстрирует сравнимую или более высокую активность и/или эффективность на модели опухоли по сравнению с CD22-65 (имеющей линкер (Gly4-Ser)n, где n равняется 3), см., например, примеры 9 и 12. Следовательно, любой из антигенсвязывающих доменов или молекул CAR, описанных в данном документе, может иметь линкер, соединяющий вариабельные домены антигенсвязывающего домена варьирующей длины, в том числе, например, короткий линкер из приблизительно 3-6 аминокислот, 4-5 аминокислот или приблизительно 5 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления может применяться более длинный линкер, например, приблизительно 6-35 аминокислот, например, 8-32 аминокислот, 10-30 аминокислот, 10-20 аминокислот. Например, может применяться линкер (Gly4-Ser)n, где n равняется 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В одном варианте осуществления вариабельные домены не соединены посредством линкера, например линкера (Gly4-Ser)n, n=0. В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены соединены посредством линкера, например линкера (Gly4-Ser)n, n=1. В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены соединены посредством линкера (Gly4-Ser)n, n=2. В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены соединены посредством линкера (Gly4-Ser)n, n=3. В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены соединены посредством линкера (Gly4-Ser)n, n=4. В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены соединены посредством линкера (Gly4-Ser)n, n=5. В некоторых вариантах осуществления вариабельные домены соединены посредством линкера (Gly4-Ser)n, n=6. Порядок вариабельного домена, например, в котором VL- и VH-домены появляются в антигенсвязывающем домене, например scFv, может варьировать (т. e. ориентация VL-VH или VH-VL). В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен связывается с CD20, например, CD20-антигенсвязывающий домен, как описано в данном документе. В другом варианте осуществления антигенсвязывающий домен связывается с CD22, например, CD22-антигенсвязывающий домен, как описано в данном документе. В другом варианте осуществления антигенсвязывающий домен связывается с CD19, например, CD19-антигенсвязывающий домен, как описано в данном документе.

Также настоящее изобретение относится к молекулам нуклеиновой кислоты, векторам, клеткам и применениям, предусматривающим любой из вышеупомянутых аспектов или вариантов осуществления.

Молекулы полиспецифического антитела и CAR

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела представляет собой молекулу полиспецифического, например биспецифического, антитела, характеризующуюся первой специфичностью связывания для первого антигена, например В-клеточного эпитопа, и второй специфичностью связывания для того же или другого антигена, например В-клеточного эпитопа. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания относятся к молекуле антитела, например, к связывающему домену антитела (например, scFv). В каждой молекуле антитела (например, scFv) молекулы биспецифического антитела VH может находиться выше или ниже VL.

В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₁) расположена выше их VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂), расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации.

В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₁) расположена выше их VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации.

В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₁) расположена выше их VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации.

В следующих вариантах осуществления вышерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₁) расположена выше их VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации.

В любой из вышеупомянутых конфигураций, необязательно, линкер располагается между двумя антителами или фрагментами антител (например, scFv), например, между VL₁ и VL₂, если конструкция организована как VH₁-VL₁-VL₂-VH₂; между VH₁ и VH₂, если конструкция организована как VL₁-VH₁-VH₂-VL₂; между VH₁ и VL₂, если конструкция организована как VL₁-VH₁-VL₂-VH₂; или между VL₁ и VH₂, если конструкция организована как VH₁-VL₁-VH₂-VL₂. Как правило, линкер между двумя scFv должен быть достаточно длинным, чтобы избежать неправильного спаривания между доменами двух scFv. Линкер может представлять собой линкер, описанный в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В любой из вышеупомянутых конфигураций, необязательно, линкер располагается между VL и VH первого scFv. Необязательно, линкер располагается между VL и VH второго scFv. В конструкциях, которые имеют несколько линкеров, любые два или более линкера могут быть одинаковыми или разными. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления биспецифический CAR содержит VL, VH и необязательно один или несколько линкеров, организованные согласно описанному в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления каждая молекула антитела, например каждый антигенсвязывающий домен (например, каждый scFv), содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, содержит первую специфичность связывания с первым B-клеточным эпитопом и вторую специфичность связывания с тем же или другим B-клеточным антигеном. Например, в некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD20 и вторую специфичность связывания с одним или несколькими из CD10, CD19, CD20, CD22, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b, или CD79a. В некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела имеет предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD20. В некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD22.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, характеризующуюся специфичностью связывания, например, первой и/или второй специфичностью связывания, с CD19. В одном варианте осуществления специфичность связывания сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD19 сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD19 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD19 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, характеризующуюся специфичностью связывания, например, первой и/или второй специфичностью связывания, с CD20. В одном варианте осуществления специфичность связывания сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD20 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD20 сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD20 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD20 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD20 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, характеризующуюся специфичностью связывания, например, первой и/или второй специфичностью связывания, с CD22. В одном варианте осуществления специфичность связывания сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD22 сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD22 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например, первая и/или вторая специфичность связывания, с CD22 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD19, например, любую из специфичностей связывания с CD19, описанных в данном документе, и вторую специфичность связывания с CD22, например, любую из специфичностей связывания с CD22, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и вторую специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD22. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 c CD22, и вторую специфичность связывания c CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 c CD19. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK.

Две или более молекулы антитела, например, описанные в данном документе, могут быть связаны с обеспечением полиспецифических молекул антитела, например, би-, три или больше молекулы антитела.

В некоторых вариантах осуществления любая из вышеупомянутых полиспецифических, например биспецифических, молекул антитела, присутствует в молекуле CAR, как описано в данном документе. В вариантах осуществления молекула CAR содержит биспецифический CAR, предусматривающий первую и вторую специфичности связывания, например, как описано в данном документе (например, две молекулы антитела, например два scFv, как описано в данном документе). В некоторых вариантах осуществления биспецифический CAR содержит две молекулы антитела, где первая специфичность связывания, например, первая молекула антитела (например, первый антигенсвязывающий домен, например первый scFv), располагается ближе к трансмембранному домену, также называемому в данном документе проксимальной молекулой антитела (например, проксимальный антигенсвязывающий домен), и вторая специфичность связывания, например, вторая молекула антитела (например, второй антигенсвязывающий домен, например второй scFv) располагается дальше от мембраны и также называется в данном документе дистальной молекулой антитела (например, дистальный антигенсвязывающий домен). Таким образом, от N-конца к C-концу молекула CAR предусматривает дистальную специфичность связывания, например, дистальную молекулу антитела (например, дистальный антигенсвязывающий домен, например дистальный scFv или scFv2), необязательно линкер, а затем проксимальную специфичность связывания, например, проксимальную молекулу антитела (например, проксимальный антигенсвязывающий домен, например проксимальный scFv или scFv1), необязательно через линкер, с трансмембранным доменом и внутриклеточным доменом, например, как описано в данном документе. Схема конфигурации биспецифического CAR изображена на ФИГ. 27.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR включает в себя биспецифический CAR, предусматривающий первую и вторую специфичности связывания. В некоторых вариантах осуществления биспецифический CAR предусматривает первую специфичность связывания с В-клеточным эпитопом и вторую специфичность связывания с тем же или другим B-клеточным антигеном. Например, в некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с одной или несколькими из CD19, CD22, CD10, CD20, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a. В некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD20. В некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD22.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания CD22, как описано в данном документе.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD22. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, необязательно линкер Gly₄-Ser или линкер LAEAAAK. В вариантах осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL CD22, где линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD22. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, необязательно линкер Gly₄-Ser или линкер LAEAAAK. В вариантах осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL CD22, где линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD20. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD20. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK. В некоторых вариантах осуществления линкер состоит из аминокислотной последовательности LAEAAAK.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL2 с CD20.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL2 с CD20.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR дополнительно содержит лидерную последовательность человека, например, последовательность CD8-альфа человека на N-конце.

В некоторых вариантах осуществления молекула полиспецифического антитела содержит аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NOs: 845, 847, 849, 851, 853, 855, 857. 858, 860, 862, 864, 866, 868, 870, 872, или 874, или последовательность, практически идентичную таковой (например, по меньшей мере на 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или больше идентичную таковой).

В некоторых вариантах осуществления полиспецифические молекулы антитела состоят из аминокислотной последовательности под любым из SEQ ID NOs: 845, 847, 849, 851, 853, 855, 857. 858, 860, 862, 864, 866, 868, 870, 872, или 874, или последовательности, практически идентичной таковой (например, по меньшей мере на 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или больше идентичной таковой).

Также настоящее изобретение относится к молекулам нуклеиновой кислоты, векторам, клеткам и применениям, предусматривающим любой из вышеупомянутых аспектов или вариантов осуществления.

Векторы

В другом аспекте настоящее изобретение относится к вектору, содержащему любую из молекул нуклеиновой кислоты, описанных в данном документе, например, молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR, описанный в данном документе. В одном варианте осуществления вектор выбран из группы, состоящей из ДНК, РНК, плазмиды, лентивирусного вектора, аденовирусного вектора или ретровирусного вектора.

В одном варианте осуществления вектор представляет собой лентивирусный вектор. В одном варианте осуществления вектор дополнительно содержит промотор. В одном варианте осуществления промотор представляет собой промотор EF-1-альфа. В одном варианте осуществления промотор EF-1-альфа содержит последовательность под SEQ ID NO: 833.

В одном варианте осуществления вектор является in vitro транскрибируемым вектором, например, вектором, который транскрибирует РНК молекулы нуклеиновой кислоты, описанной в данном документе. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты в векторе дополнительно содержит поли(А)-хвост, например, поли А-хвост, описанный в данном документе, например содержащий приблизительно 150 аденозиновых оснований. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты в векторе дополнительно содержит 3'UTR, например, 3' UTR, описанную в данном документе, например, содержащую по меньшей мере один повтор 3'UTR, полученный из бетаглобина человека. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты в векторе дополнительно содержит промотор, например T2A-промотор.

В варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая расщепляемый пептид, например последовательность P2A или F2А, располагается между последовательностями нуклеиновой кислоты, кодирующими первую молекулу CAR (например, CD20, CD22 или CD19) и вторую молекулу CAR (например, CD20, CD22 или CD19). В варианте осуществления последовательность, кодирующая IRES, например EMCV или EV71 IRES, располагается между последовательностями нуклеиновой кислоты, кодирующими последовательности первой молекулы CAR и второй молекулы CAR. В данных вариантах осуществления первый CAR и второй CAR транскрибируются как одна РНК.

Комбинации CAR

В другом аспекте настоящее изобретение относится к нуклеиновой кислоте кодирующей: (i) молекулу CAR для CD20, например, как описано в данном документе, и (ii) молекулу CAR, которая связывает B-клеточный антиген, например, CD19, CD22, CD10, CD34, CD123, FLT-3, ROR-1, CD79b, CD79a или CD179b.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к нуклеиновой кислоте кодирующей: (i) первую нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу CAR для CD20, например, как описано в данном документе, и (ii) вторую нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу CAR, которая связывает B-клеточный антиген, например, CD19, CD22, CD10, CD34, CD123, FLT-3, ROR-1, CD79b, CD79a или CD179b.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR, которая связывает B-клеточный антиген, представляет собой CD19 или CD22.

В некоторых вариантах осуществления CAR связывается с CD19 и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую CAR для CD19 согласно таблице 11, например CTL-019 или гуманизированный CAR2.

В некоторых вариантах осуществления CAR связывается с CD22 и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую CAR для CD22 согласно таблице 6, например, CAR для CD22-65, CAR для CD22-65KD, CAR для CD22-65s или CAR для CD22-65ss.

В некоторых вариантах осуществления нуклеотидная последовательность, кодирующая расщепляемый пептид, например последовательность P2A или F2А, располагается между молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR для CD20, и молекулой нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, который связывает B-клеточный антиген.

В некоторых вариантах осуществления CAR для CD20 и CAR, который связывает B-клеточный антиген, кодируются единым промотором, например в виде продукта бицистронной транскрипции.

В некоторых вариантах осуществления единый промотор представляет собой промотор EF-1α, где необязательно промотор EF-1α содержит последовательность под SEQ ID NO: 833.

В некоторых вариантах осуществления CAR для CD20 кодируется первым промотором, и CAR, который связывает B-клеточный антиген, кодируется вторым промотором.

В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота предусматривает РНК или ДНК.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к полипептидной молекуле, кодируемой любой из молекул нуклеиновой кислоты, или содержащей таковую, как описано в данном документе.

Клетки

В другом аспекте настоящее изобретение относится к клетке, например, к популяции иммунных эффекторных клеток, содержащих нуклеиновую кислоту, выделенный полипептид или вектор, описанный в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления клетка, например популяция иммунных эффекторных клеток, содержит одну или несколько, например, первую, вторую и/или третью, молекул CAR, где молекула CAR выбрана из CAR для CD19, CAR для CD20 или CAR для CD22, или комбинацию двух или трех из них.

В некоторых вариантах осуществления клетка содержит CAR для CD19 и CAR для CD20 по настоящему изобретению.

В некоторых вариантах осуществления клетка содержит CAR для CD19 и CAR для CD22 по настоящему изобретению.

В некоторых вариантах осуществления клетка содержит CAR для CD20 по настоящему изобретению и CAR для CD22 по настоящему изобретению.

В некоторых вариантах осуществления клетка содержит два CAR, например, CAR для CD22 по настоящему изобретению, CAR для CD20 по настоящему изобретению и CAR для CD19.

В некоторых вариантах осуществления одна или несколько молекул CAR находятся в одной и той же клетке.

В некоторых вариантах осуществления одна или несколько молекул CAR находятся в разных клетках.

В одном варианте осуществления клетка представляет собой клетку, описанную в данном документе, например, T-клетку человека или NK-клетку человека, например, T-клетку человека, описанную в данном документе. В одном варианте осуществления T-клетка человека представляет собой T-клетку CD8+.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к клетке, например, к популяции иммунных эффекторных клеток (например, первой и/или второй популяции иммунных эффекторных клеток), в том числе (i) первой популяции клеток, содержащей нуклеиновую кислоту, выделенную полипептидную молекулу или вектор, описанный в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления CAR, который связывает B-клеточный антиген, представляет собой CD19 или CD22.

В одном варианте осуществления CAR связывается с CD19 и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую CAR для CD19 согласно таблице 11, например CTL-019 или гуманизированный CAR2.

В одном варианте осуществления CAR связывается с CD22 и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую CAR для CD22 согласно таблице 6, например, CAR для CD22-65, CAR для CD22-65KD, CAR для CD22-65s или CAR для CD22-65ss.

В другом варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетка, описанная в данном документе, может дополнительно экспрессировать другое средство, например средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки. Например, в одном варианте осуществления средство может представлять собой средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу. Примеры ингибирующих молекул включают PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и TGF бета. В одном варианте осуществления средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу, содержит первый полипептид, например ингибирующую молекулу, ассоциированный со вторым полипептидом, который передает положительный сигнал в клетку, например, с внутриклеточным сигнальным доменом, описанным в данном документе. В одном варианте осуществления средство содержит первый полипептид, например, ингибирующую молекулу, такую как PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 или TGF бета, или фрагмент любого из них (например, по меньшей мере часть внеклеточного домена любого из них), и второй полипептид, который представляет собой внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе (например, содержащий костимулирующий домен (например, 41BB, CD27 или CD28, например описанные в данном документе) и/или первичный сигнальный домен (например, сигнальный домен CD3-дзета, описанный в данном документе). В одном варианте осуществления средство содержит первый полипептид PD1 или его фрагмент (например, по меньшей мере часть внеклеточного домена PD1) и второй полипептид внутриклеточного сигнального домена, описанный в данном документе (например, сигнальный домен CD28, описанный в данном документе, и/или сигнальный домен CD3-дзета, описанный в данном документе).

Способы получения и применения

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения клетки, предусматривающему трансдуцирование клетки, описанной в данном документе, например T-клетки или NK-клетки, описанной в данном документе, вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую CAR, например CAR, описанный в данном документе.

Настоящее изобретение также относится к способу создания популяции РНК-сконструированных клеток, например клеток, описанных в данном документе, например Т-клеток или NK клеток, временно экспрессирующих экзогенную РНК. Способ предусматривает введение in vitro транскрибируемой РНК или синтетической РНК в клетку, при этом РНК содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу CAR, описанную в данном документе.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу обеспечения противоопухолевого иммунитета у млекопитающего, предусматривающему введение млекопитающему эффективного количества клетки, экспрессирующей молекулу CAR, например клетки, экспрессирующей молекулу CAR, описанную в данном документе, например молекулу CAR для CD20. В одном варианте осуществления клетка представляет собой аутологичную T-клетку или NK-клетку. В одном варианте осуществления клетка представляет собой аллогенную T-клетку или NK-клетку. В одном варианте осуществления млекопитающее является человеком.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к клетке, например, к популяции иммунных эффекторных клеток, в том числе, например, экспрессирующих молекулу CAR, как описано в данном документе, например молекулу CAR для CD20, для применения в способе обеспечения противоопухолевого иммунитета у млекопитающего, при этом способ предусматривает введение млекопитающему эффективного количества клетки.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения млекопитающего, у которого имеется рак или заболевание, ассоциированное с экспрессией B-клеточного антигена, как описано в данном документе, например, CD20, CD19 или CD22, например, дикого типа или мутантного CD20, CD19 или CD22, (например, пролиферативное заболевание, предраковое состояние и не связанное с раком показание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 или CD22), предусматривающему введение млекопитающему эффективного количества клеток, экспрессирующих молекулу CAR, например молекулу CAR, описанную в данном документе, например молекулу CAR для CD20. В некоторых вариантах осуществления клетки, экспрессирующие CAR для CD20, например Т-клетки или NK-клетки, сконструированные для экспрессии CAR для CD20, например, вводят в комбинации с одним или несколькими В-клеточными ингибиторами для лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20. Например, клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят в комбинации с одним или несколькими дополнительными В-клеточными ингибиторами. В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой второй ингибитор CD20. В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой ингибитор одного или нескольких из CD19, CD22, CD20, CD10, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к клетке, например, к популяции иммунных эффекторных клеток, экспрессирующих молекулу CAR, как описано в данном документе, например молекулу CAR для CD20, для применения в способе лечения млекопитающего, у которого имеется рак или заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 или CD22, при этом способ предусматривает введение млекопитающему эффективного количества клетки. В некоторых вариантах осуществления CD20 клетки, например Т-клетки или NK-клетки, сконструированные для экспрессии CAR для CD20, например, вводят в комбинации с одним или несколькими В-клеточными ингибиторами для лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20. Например, клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят в комбинации с одним или несколькими дополнительными В-клеточными ингибиторами. В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой второй ингибитор CD20. В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой ингибитор одного или нескольких из CD19, CD22, CD20, CD10, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a.

В одном варианте осуществления заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 или CD22, выбрано из пролиферативного заболевания, такого как рак или злокачественное или предраковое состояние, такое как миелодисплазия, миелодиспластический синдром или предлейкоз, или представляет собой не связанное с раком показание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 или CD22.

В одном варианте осуществления рак или заболевание, ассоциированное с CD20, CD19 или CD22, представляет собой гематологический рак. Например, гематологический рак представляет собой лейкоз или лимфому. В другом примере гематологический рак выбран из одного или нескольких острых лейкозов, в том числе без ограничения B-клеточного острого лимфоидного лейкоза (BALL), T-клеточного острого лимфоидного лейкоза (TALL), мелкоклеточного лимфоцитарного лейкоза (SLL), острого лимфоидного лейкоза (ALL); одного или нескольких хронических лейкозов, в том числе без ограничения хронического миелогенного лейкоза (CML), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL); дополнительных гематологических форм рака или гематологических состояний, в том числе без ограничения лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), B-клеточного пролимфоцитарного лейкоза, бластного плазмацитоидного дендритного клеточного новообразования, лимфомы Беркитта, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL), фолликулярной лимфомы, лейкоза ворсистых клеток, мелкоклеточной или крупноклеточной фолликулярной лимфомы, злокачественных лимфопролиферативных состояний, MALT-лимфомы, лимфомы маргинальной зоны, множественной миеломы, миелодисплазии и миелодиспластического синдрома, неходжкинской лимфомы, лимфомы Ходжкина, плазмобластной лимфомы, плазмацитоидного дендритного клеточного новообразования, макроглобулинемии Вальденстрема. В некоторых вариантах осуществления заболеванием является "предлейкоз", который представляет собой разнообразную совокупность гематологических состояний, объединенных неэффективным продуцированием (или дисплазией) миелоидных клеток крови.

В некоторых вариантах осуществления рак или заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 или CD22, включает без ограничения атипичные и/или не являющиеся классическими формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, экспрессирующие CD20, CD19 или CD22; и любую их комбинацию.

В некоторых вариантах осуществления рак или заболевание, ассоциированное с CD20, CD19 или CD22, представляет собой B-клеточное злокачественное новообразование, такое как неходжкинские лимфомы, например, DLBCL, фолликулярная лимфома; или CLL.

В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие молекулу CAR, например молекулу CAR, описанную в данном документе, вводят в комбинации со средством, которое повышает эффективность клетки, экспрессирующей молекулу CAR, например, со средством, описанным в данном документе. В вариантах осуществления средством является ингибитор mTOR, например ингибитор mTOR, описанный в данном документе.

В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие молекулу CAR, например молекулу CAR, описанную в данном документе, вводят в комбинации со средством, которое облегчает один или несколько побочных эффектов, ассоциированных с введением клетки, экспрессирующей молекулу CAR, например, со средством, описанным в данном документе.

В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие молекулу CAR, например молекулу CAR, описанную в данном документе, вводят в комбинации со средством, которым лечат заболевание, ассоциированное с CD20, например, со средством, описанным в данном документе.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR по настоящему изобретению, выделенной полипептидной молекуле CAR по настоящему изобретению, вектору, содержащему CAR по настоящему изобретению, клетке (или клеточной популяции), содержащей CAR по настоящему изобретению, для применения в качестве лекарственного препарата, например, как описано в данном документе.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR по настоящему изобретению, выделенной полипептидной молекуле CAR по настоящему изобретению, вектору, содержащему CAR по настоящему изобретению, клетке (или клеточной популяции), содержащей CAR по настоящему изобретению, для применения в лечении заболевания, связанного с экспрессией CD20, CD19 или CD22, например заболевания, связанного с экспрессией CD20, CD19 или CD22, как описано в данном документе.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу или применению клеток, например Т-клеток или NK-клеток, сконструированных для экспрессии CAR для CD20, например, в комбинации с одним или несколькими В-клеточными ингибиторами для лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20. Например, клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят в комбинации с одним или несколькими дополнительными В-клеточными ингибиторами. В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой второй ингибитор CD20. В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой ингибитор одного или нескольких из CD19, CD22, CD20, CD10, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a.

В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой низкомолекулярный ингибитор; полипептид, например, растворимый лиганд, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с B-клеточным антигеном (например, одним или несколькими из CD10, CD19, CD20, CD22, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a); или ингибирующую нуклеиновую кислоту (например, двухнитевую РНК (dsRNA), малую интерферирующую РНК (siRNA) или короткую шпилечную РНК (shRNA)). В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор представляет собой клетку, которая экспрессирует CAR (например, CAR-экспрессирующая иммунная эффекторная клетка), который связывается с B-клеточным антигеном (например, CD19, CD22, CD20, CD10, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a).

В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор вводят до введения клетки, например, популяции иммунных эффекторных клеток, включающих в себя молекулу CAR для CD20.

В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор вводят одновременно с введением клетки, например, популяции иммунных эффекторных клеток, включающих в себя молекулу CAR для CD20.

В некоторых вариантах осуществления В-клеточный ингибитор вводят после введения клетки, например, популяции иммунных эффекторных клеток, включающих в себя молекулу CAR для CD20.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором второго CD20. Вторым ингибитором CD20 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD20; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD20, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD20. В одном варианте осуществления вторым ингибитором CD20 является вторая клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD20, например, NK-клетка, экспрессирующая CART CD20 или CAR для CD20. Типичные ингибиторы CD20 обсуждаются более подробно ниже.

В варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих более чем один CAR для CD20. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую другой, второй CAR для CD20.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD22. Ингибитором CD22 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD22; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD22, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD22. В одном варианте осуществления ингибитором CD22 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD22, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD22 или CAR для CD22. Типичные ингибиторы CD22 обсуждаются более подробно ниже, например в таблице 6.

В варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, содержащих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD22. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD22.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD19. Ингибитором CD19 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD19; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD19, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD19. В одном варианте осуществления ингибитором CD19 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD19, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD19 или CAR для CD19. Типичные ингибиторы CD19 обсуждаются более подробно ниже, например в таблице 11.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD19. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD19.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором ROR1. Ингибитором ROR1 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с ROR1; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для ROR1, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для ROR1. В одном варианте осуществления ингибитором ROR1 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий ROR1, например NK-клетка, экспрессирующая CART ROR1 или ROR1. Типичные ингибиторы ROR1 обсуждаются более подробно ниже.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для ROR1. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для ROR1.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD123. Ингибитором CD123 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD123; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD123, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD123. В одном варианте осуществления ингибитором CD123 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD123, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD123 или CAR для CD123. Типичные ингибиторы CD123 обсуждаются более подробно ниже.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD123. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD123.

В определенном варианте осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD10. Ингибитором CD10 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD10; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD10, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD10. В одном варианте осуществления ингибитором CD10 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD10, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD10 или CAR для CD10. Типичные ингибиторы CD10 обсуждаются более подробно ниже.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD10. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD10.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD34. Ингибитором CD34 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD34; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD34, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD34. В одном варианте осуществления ингибитором CD34 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD34, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD34T или CAR для CD34. Типичные ингибиторы CD34 обсуждаются более подробно ниже.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD34. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD34.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором FLT-3. Ингибитором FLT-3 может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с FLT-3; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для FLT-3, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для FLT-3. В одном варианте осуществления ингибитором FLT-3 является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий FLT-3, например NK-клетка, экспрессирующая CART FLT-3 или CAR для FLT-3. Типичные ингибиторы FLT-3 обсуждаются более подробно ниже.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для FLT-3. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для FLT-3.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD79b. Ингибитором CD79b может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD79b; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD79b, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD79b. В одном варианте осуществления ингибитором CD79b является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD79b, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD79b или CAR для CD79b. Типичные ингибиторы CD79b обсуждаются более подробно ниже.

В варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, содержащих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD79b. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD79b.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD179b. Ингибитором CD179b может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD179b; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD179b, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD179b. В одном варианте осуществления ингибитором CD79b является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD179b, например NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD179b или CAR для CD179b. Типичные ингибиторы CD179b обсуждаются более подробно ниже.

В варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, содержащих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD179b. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD179b.

В определенных вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят с ингибитором CD79a. Ингибитором CD79a может быть, например, малая молекула, антитело или его фрагмент (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент); рекомбинантный белок, например слитый белок, который связывается с CD79a; ингибирующая нуклеиновая кислота или клетка, экспрессирующая CAR для CD79a, например, T-клетка или NK-клетка, экспрессирующая CAR для CD79a. В одном варианте осуществления ингибитором CD79a является клетка, экспрессирующая CAR, связывающий CD79a, например NK-клетка, экспрессирующая CART CD79a или CAR для CD79a. Типичные ингибиторы CD79a обсуждаются более подробно ниже.

В варианте осуществления настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, содержащих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD79a. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD79a.

В одном аспекте CAR (например, CAR для CD19, CAR для ROR1, CAR для CD20, CAR для CD22, CAR для CD123, CAR для CD10, CAR для CD34, CAR для FLT-3, CAR для CD79b, CAR для CD179b или CAR для CD79a) содержит необязательную лидерную последовательность (например, необязательную лидерную последовательность, описанную в данном документе), внеклеточный антигенсвязывающий домен, шарнирный участок (например, шарнирный участок, описанный в данном документе), трансмембранный домен (например, трансмембранный домен, описанный в данном документе) и внутриклеточный стимулирующий домен (например, внутриклеточный стимулирующий домен, описанный в данном документе). В одном аспекте иллюстративная конструкция CAR содержит необязательную лидерную последовательность (например, лидерную последовательность, описанную в данном документе), внеклеточный антигенсвязывающий домен, шарнирный участок, трансмембранный домен, внутриклеточный костимулирующий домен (например, внутриклеточный костимулирующий домен, описанный в данном документе) и внутриклеточный стимулирующий домен.

В вариантах осуществления, предусмотренных в данном документе, представлен способ лечения пациента, который не отвечает, отвечает частично или проявляет рецидив заболевания в ответ на ингибитор CD19, например на CAR-терапию, направленную на CD19, предусматривающий введение пациенту ингибитора CD20.

В некоторых вариантах осуществления, предусмотренных в данном документе, представлен ингибитор CD20 для применения в способе лечения пациента, который не отвечает, отвечает частично или проявляет рецидив заболевания в ответ на ингибитор CD19, например CAR-терапию, направленную на CD19, который предусматривает введение пациенту ингибитора CD20.

В вариантах осуществления пациент содержит CD19-отрицательную раковую клетку и раковую клетку, которая является положительной в отношении CD20. В вариантах осуществления способ дополнительно предусматривает стадию определения того, содержит ли пациент CD19-отрицательную раковую клетку. В вариантах осуществления способ дополнительно предусматривает стадию определения того, содержит ли пациент раковую клетку, которая является положительной в отношении CD20.

Если не определено иное, то все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понятно специалисту обычной квалификации в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Хотя при осуществлении на практике и тестировании настоящего изобретения могут применяться способы и материалы, подобные или эквивалентные таковым, описанным в данном документе, ниже описываются подходящие способы и материалы. Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие литературные источники, упомянутые в данном документе, включены посредством ссылки во всей своей полноте. Кроме того, материалы, способы и примеры являются исключительно иллюстративными и не предполагаются как ограничивающие. Заголовки, подзаголовки или пронумерованные или обозначенные буквами элементы, например, (a), (b), (i) и т. д., представлены исключительно для удобства прочтения. Использование заголовков или пронумерованных или обозначенных буквами элементов в данном документе не требует выполнения стадий или элементов в алфавитном порядке или того, чтобы стадии или элементы обязательно были разделены между собой. Другие признаки, цели и преимущества настоящего изобретения будут очевидными из описания и графических материалов, а также из формулы изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Следующее подробное описание предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения будет более понято при рассмотрении вместе с прилагаемыми графическими материалами. В целях иллюстрации настоящего изобретения на графических материалах показаны варианты осуществления, которые являются предпочтительными в настоящем изобретении. Однако следует понимать, что настоящее изобретение не ограничено точными схемами и средствами из вариантов осуществления, показанных на графических материалах.

На ФИГ. 1A-1E представлены графики, демонстрирующие анализ репортерного гена люциферазы Jurkat NFAT Luciferase (JNL) с тестированием функции CAR для CD20. Т-клетки CAR CD20 JNL культивировали с линией лимфомы Беркитта Raji и линиями диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL) Pfeiffer, HBL-1 и TMD8; при этом K562, линия клеток хронического миелоидного лейкоза (CML), служила в качестве CD20-отрицательного контроля. Считывание люминесценции является прямым измерением стимуляции CAR. Все четыре целевых клеточных линии демонстрируют активацию всех гуманизированных CAR для CD20 (ФИГ. 1A-D). Ни один из гуманизированных CAR мыши не продемонстрировал активации CD20-отрицательной линией K562 (ФИГ. 1E).

На ФИГ. 2 представлен график, демонстрирующий уровень экспрессии CAR для CD20 в отношении первичных Т-клеток человека. Клетки окрашивали растворимым биотинилированным белком L (0,1 мкг/лунка, GenScript, Piscataway, NJ) и стрептавидином-PE (1:300, R-Phycoerythrin Streptavidin, Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) и оценивали с помощью проточной цитометрии. Верхнее число на графиках показывает процентное содержание клеток CAR+, число ниже описывает уровень экспрессии CAR в этой положительной популяции (среднее геометрическое).

На ФИГ. 3A-3B представлены графики, демонстрирующие, как Т-клетки CAR для CD20 секретируют IFN-γ в ответ на стимуляцию целевыми клетками, экспрессирующими CD20. Измеряли IFN-γ в среде совместных культур Т-клеток CAR с линией лимфомы Беркитта Raji и линиями диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL) Pfeiffer, HBL-1 и TMD8; при этом K562, линия клеток хронического миелоидного лейкоза (CML), служила в качестве CD20-отрицательного контроля. CART и целевые клетки совместно культивировали при отношении эффекторных к целевым клеткам 1:1 в течение 24 ч., после чего собирали надосадочные жидкости и определяли количество IFN-γ. CART анализировали в двух отдельных экспериментах (ФИГ. 3A и ФИГ. 3B, соответственно).

На ФИГ. 4 представлен график, демонстрирующий уровень экспрессии CAR для CD22 в отношении первичных Т-клеток человека. Клетки окрашивали растворимым CD22-Fc (0,2 мкг/лунка, R&D Systems, Minneapolis, MN) и вторичным антителом к Fc человека (1:300, R-Phycoerythrin AffiniPure F(ab')₂ Fragment Goat Anti-Human IgG, Fcγ Fragment Specific, Jackson ImmunoResearch, Вест Гроув, Пенсильвания) и анализировали проточной цитометрией. Число на графиках показывает процентное содержание клеток CAR+, число ниже описывает уровень экспрессии CAR в этой положительной популяции (среднее значение).

На ФИГ. 5A-5C представлены графики, демонстрирующие, что Т-клетки CAR для CD22 эффективно уничтожают CD22-экспрессирующие целевые клетки. 20-часовой анализ уничтожения для Т-клеток CAR с линиями острого лимфобластного лейкоза (ALL) Nalm6 (ФИГ. 5A) и SEM (ФИГ. 5B), а также CD22-отрицательной линией CML K562 (C). CART и целевые клетки совместно культивировали при различных отношениях эффекторных к целевым клеткам (E:T) в течение 20 ч., после чего определяли количество экспрессирующих люциферазу целевых клеток с использованием люминесценции.

На ФИГ. 6A-6B представлены графики, демонстрирующие, что Т-клетки CAR для CD22 секретируют IFN-γ в ответ на стимуляцию CD22-экспрессирующими целевыми клетками. Измеряли IFN-γ в среде совместных культур Т-клеток CAR с линией ALL SEM (ФИГ. 6A), а также CD22-отрицательной линией CML K562 (ФИГ. 6B). CART и целевые клетки совместно культивировали при отношении эффекторных к целевым клеткам 1:1 в течение 24 ч., после чего собирали надосадочные жидкости и определяли количество IFN-γ.

На ФИГ. 7A-7B представлены графики, демонстрирующие, что Т-клетки CAR для CD22 пролиферируют в ответ на стимуляцию CD22-экспрессирующими целевыми клетками. Т-клетки CAR совместно культивировали с линией ALL SEM, а также CD22-отрицательной линией CML K562 при отношении эффекторных к целевым клеткам 1:1 в течение 4 дней. Затем CART окрашивали антителом к CD3 и растворимым CD22-Fc для выявления экспрессии CAR с последующим количественным анализом с использованием микрогранул для подсчета с помощью проточной цитометрии. (ФИГ. 7A) число клеток CD3+/3000 гранул; и (ФИГ. 7B) числа клеток CD3+ CAR+/3000 микрогранул.

На ФИГ. 8 представлены графики, демонстрирующие кривые средней биолюминесценции T-клеток CD22 CAR, тестируемых на модели ALL согласно примеру 5.

На ФИГ. 9A-9C представлены графики, демонстрирующие, как Т-клетки CD20-3 CAR и Т-клетки CD22-53 секретируют IFN-γ в ответ на стимуляцию согласно примеру 6. Измеряли IFN-γ в среде совместных культур Т-клеток CAR с линией лимфомы Беркитта Raji (ФИГ. 9A), линией диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL) Pfeiffer (ФИГ. 9B), линией ALL SEM (ФИГ. 9C).

На ФИГ. 10A-10B представлены схемы, демонстрирующие типичные CAR.

На ФИГ. 11 представлен график, демонстрирующий средний объем опухоли (мм³) для мышей NSG, обработанных Т-клетками, экспрессирующими имитационные EGFRvIII CAR, CD20-8aBBZ CAR, CD20-C3H2 CAR, CD20-C5H1 CAR, CD20-Ofa CAR и CD20-3H5k3 CAR, или носителем (PBS).

На ФИГ. 12 представлен график, демонстрирующий уровень экспрессии CD22 65 CAR с цепью CD3-дзета, включающей в себя мутацию Q65K (CD22-65_Zmut), CD22-65 дикого типа CAR (CD22-65_Zwt), CD22-65s_Zwt CAR, m971_Zmut CAR и m971s_Zmut CAR, как определено с использованием анализа проточной цитометрии.

На ФИГ. 13A-C представлены графики, демонстрирующие, что Т-клетки CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut и m971s_Zmut CAR эффективно уничтожают CD22-экспрессирующие целевые клетки. Показан 20 ч. анализ уничтожения для Т-клеток CAR с линией ALL Nalm6 (ФИГ. 13A), линией ALL SEM (ФИГ. 13B) и CD22-отрицательной линией CML K562 (ФИГ. 13C). Также показаны нетрансдуцированные Т-клетки (UTD) и CD19 клетки. CART и целевые клетки совместно культивировали при различных отношениях эффекторных к целевым клеткам (E:T) в течение 20 ч., после чего определяли количество экспрессирующих люциферазу целевых клеток с использованием люминесценции.

На ФИГ. 14 представлен график, демонстрирующий, что Т-клетки CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut, m971s_Zmut, CD19 и UTD CAR секретируют IFN-γ в ответ на стимуляцию CD22-экспрессирующими целевыми клетками. Измеряли IFN-γ в среде совместных культур Т-клеток CAR с линией ALL Nalm6, линией ALL SEM и CD22-отрицательной линией CML. CART и целевые клетки совместно культивировали при отношении эффекторных к целевым клеткам 1:1 в течение 24 ч., после чего собирали надосадочные жидкости и определяли количество IFN-γ.

На ФИГ. 15A-B представлены графики, демонстрирующие пролиферацию Т-клеток CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut, m971s_Zmut, CD19 и UTD CAR, культивируемых совместно с линией ALL Nalm6 и SEM, как оценено с использованием клеточного индикаторного фиолетового красителя. Более низкая флуоресценция говорит о более сильной пролиферации, так как каждое клеточное деление Т-клеток приводит к сохранению половины флуоресценции в каждой дочерней клетке (ФИГ. 15A). Неподеленные клетки демонстрируют высокую флуоресценцию, как показано для UTD. Клеточную пролиферацию определяют количественно и регистрируют как "индекс деления" с использованием программного обеспечения FlowJo (ФИГ. 15B).

На ФИГ. 16 представлен график, демонстрирующий регрессию опухоли, как видно из средней биолюминесценции у мышей Nalm6, обработанных Т-клетками CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmu или m971s_Zmut CAR. Обработка также предусматривает Т-клетки с UTD или PBS.

На ФИГ. 17A-B представлены графики, демонстрирующие рост опухоли у мышей SEM, обработанных Т-клетками CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut или m971s_Zmut CAR, или UTD, или PBS.

На ФИГ. 18 показана схема CAR, связывающего CD22, включающего в себя более длинный линкер (4x(GGGGS); LL) и CAR, связывающего CD22, включающего в себя короткий линкер (1x(GGGGS); SL) между легкой и тяжелой цепями.

На ФИГ. 19 представлен график, демонстрирующий количество ДНК (копии/мкг) CART19 и CART22 клеток у взрослого пациента с ALL, который ранее получал лечение клетками CART19 и обработанного клетками CART22. Второе повторное размножение клеток CART19 после размножения с клетками CART22.

На ФИГ. 20 представлен график, демонстрирующий общую выживаемость мышей NSG с трансплантатом NALM6 или CHP110R, обработанных клетками CART22 с CAR22, включающим короткий линкер (CART22^S) или длинный линкер (CART22^SL).

На ФИГ. 21 представлен график, демонстрирующий, что клетки CART22^SLдемонстрировали более высокую in vivo пролиферацию в день 17 по сравнению с клетками CART22^LL у мышей NSG, как оценено с использованием проточной цитометрии.

На ФИГ. 22 представлен график, демонстрирующий, что клетки CART22^SLобеспечивали более продолжительные взаимодействия Т-клетка:лейкоз по сравнению с клетками CART22^LL у мышей NSG, как оценено с использованием прижизненной 2-фотонной визуализации.

На ФИГ. 23 представлен график, демонстрирующий уровень экспрессии линкера CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt (короткий 1x (GGGGS); SEQ ID NO: 835), CD22-65ss_Zwt (отсутствие линкера между VH- и VL-областями; SEQ ID NO: 836), линкер CD22-65sLH_Zwt (короткий 1x (GGGGS) с VL-областью, ориентированной на N-конце, и VH-областью, ориентированной на С-конце), линкер CD22-65sKD_Zwt (короткий 1x (GGGGS) и мутации в FR-областях VH- и VL-областей; SEQ ID NO: 837) и CD22-m971s_Zmut (контроль) в Т-клетках, как определено с использованием анализа проточной цитометрии.

На ФИГ. 24A-B представлены графики, демонстрирующие, что Т-клетки CAR для CD22, несущие scFv человека, связывающий CD22, с коротким линкером (короткий линкер 1x (GGGGS); SEQ ID NO: 835) или без линкера эффективно уничтожают CD22-экспрессирующие целевые клетки. Показан 20 ч. анализ уничтожения Т-клеток CAR с линиями острого лимфобластного лейкоза (ALL) Nalm6 (ФИГ. 24A) и SEM (ФИГ. 24B).

На ФИГ. 25 представлен график, демонстрирующий, что Т-клетки CAR для CD22, содержащие CAR CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmu, секретируют IFN-γ в ответ на стимуляцию CD22-экспрессирующими целевыми клетками. Измеряли IFN-γ в среде совместных культур Т-клеток CAR с линией ALL Nalm6 и SEM.

На ФИГ. 26 представлен график, демонстрирующий регрессию опухоли, как видно из средней биолюминесценции у мышей Nalm6, обработанных CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmut. Мыши также получали PBS или Т-клетки EGFRvIII.

На ФИГ. 27 представлена схема, демонстрирующая дистальный и проксимальный концы типичной тандемной конструкции CAR.

На ФИГ. 28 представлен график, демонстрирующий % CAR на основании поверхностного окрашивания FACS клеток JNL с использованием реагента, распознающего scFV, направленного на CD19 (темные столбики) или CD22 (серые столбики). Использовали множественность инфекции 1, 0,8 и 2,2 в c171, c172 и c173, соответственно.

На ФИГ. 29 представлен график, демонстрирующий различные линии целевых клеток, используемые для оценивания активации JNL, функционализированных различными CAR, которые показаны в таблице 1, окрашенные по CD19 и CD22 с использованием FACS. Оба окрашивающих реагента мечены фикоэритрином (PE). Показано процентное содержание (%) положительных клеток, а также MFI (средняя интенсивность флуоресценции) для белка, выявляемого на поверхности.

На ФИГ. 30 представлен график, демонстрирующий нетрансдуцированные (UTD) и трансдуцированные JNL, инкубированные с линиями целевых клеток, экспрессирующих либо CD19, либо CD22 при отношении клеток 1:1, в течение 20 часов. Уровень NFAT-индуцированной люциферазы (на оси у показаны произвольные единицы) является мерой активности CAR.

ОПИСАНИЕ

Определения

Если не указано иное, то все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют то же значение, которое обычно понятно специалисту обычной квалификации в области техники, к которой относится настоящее изобретение.

Форма единственного числа относится к одному или нескольким (т. e. по меньшей мере одному) грамматическим объектам настоящей заявки. В качестве примера, "элемент" означает один элемент или несколько элементов.

Термин "приблизительно" в отношении измеримого значения, такого как количество, временная длительность и т. п., подразумевает охват варьирований на ±20%, или в некоторых случаях на ±10%, или в некоторых случаях на ±5%, или в некоторых случаях на ±1%, или в некоторых случаях на ±0,1% от указанного значения, поскольку такие варьирования являются подходящими для осуществления раскрытых способов.

Используемый в данном документе термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к тем солям, которые с медицинской точки зрения являются подходящими для применения в контакте с тканями субъектов без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т. п. и соответствуют разумному отношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны из уровня техники. Например, Berge et al. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66:1-19.

Термин "ингибирование" или "ингибитор" включает уменьшение определенного параметра, например активности, данной молекулы, например, CD20, CD10, CD19, CD22, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a. Например, данный термин включает ингибирование активности, например, активности CD20, CD10, CD19, CD22, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b или CD79a, по меньшей мере на 5%, 10%, 20%, 30%, 40% или больше. Таким образом, ингибирование не должно быть 100%. Активности для ингибиторов могут быть определены, как описано в данном документе, или с помощью анализов, известных из уровня техники.

Термин "химерный антигенный рецептор" или, как альтернатива, "CAR" относится к набору полипептидов, как правило, двух в простейших вариантах осуществления, которые, находясь в иммунной эффекторной клетке, наделяют клетку специфичностью в отношении клетки-мишени, как правило, раковой клетки, и с образованием внутриклеточного сигнала. В некоторых вариантах осуществления CAR содержит по меньшей мере внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и цитоплазматический сигнальный домен (также называемый в данном документе "внутриклеточным сигнальным доменом"), содержащий функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы и/или костимулирующей молекулы, определенных в данном документе ниже. В некоторых аспектах полипептиды из набора являются смежными друг с другом, например, находятся в одной и той же полипептидной цепи, например образуют химерный слитый белок. В некоторых вариантах осуществления полипептиды из набора не являются смежными друг с другом, например, находятся в разных полипептидных цепях. В некоторых вариантах осуществления набор полипептидов включает димеризационный переключатель, который при наличии димеризующей молекулы может связывать полипептиды друг с другом, например, может связывать антигенсвязывающий домен с внутриклеточным сигнальным доменом. В одном аспекте стимулирующая молекула представляет собой дзета-цепь, ассоциированную с Т-клеточным рецепторным комплексом. В одном аспекте цитоплазматический сигнальный домен дополнительно содержит один или несколько функциональных сигнальных доменов, полученных из по меньшей мере одной костимулирующей молекулы, определенной ниже. В одном аспекте костимулирующая молекула выбрана из костимулирующих молекул, описанных в данном документе, например, 4-1BB (т. е. CD137), CD27 и/или CD28 (ФИГ. 10A и таблица 14). В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий функциональный сигнальный домен, полученный из костимулирующей молекулы, и функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий два функциональных сигнальных домена, полученных из одной или нескольких костимулирующих молекул, и функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий по меньшей мере два функциональных сигнальных домена, полученных из одной или нескольких костимулирующих молекул, и функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR содержит необязательную лидерную последовательность на амино-конце (N-конце) слитого белка CAR (ФИГ. 10B и таблица 14). В одном аспекте CAR дополнительно содержит лидерную последовательность на N-конце внеклеточного антигенсвязывающего домена, где лидерная последовательность необязательно отщепляется от антигенсвязывающего домена (например, scFv) в ходе клеточного процессинга и локализации CAR в клеточной мембране.

Термин "сигнальный домен" относится к функциональной части белка, которая действует путем передачи информации внутри клетки для регуляции клеточной активности через определенные сигнальные пути, образуя вторичные мессенджеры или функционируя в качестве эффекторов путем ответа на такие мессенджеры.

Используемый в данном документе термин "CD20" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на В-клетках. CD20 человека также называют представителем 1 подсемейства А белков с 4 пересекающими мембрану доменами (MS4A1). Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотную последовательность CD20 человека можно найти под номерами доступа NP_690605.1 и NP_068769.2, а последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую варианты транскрипта 1 и 3 CD20 человека, можно найти соответственно под номерами доступа NM_152866.2 и NM_021950.3. В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD20. В одном аспекте белок CD20 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD20" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD20 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "ROR1" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на лейкозных клетках-предшественниках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности изоформ 1 и 2 предшественников ROR1 человека можно найти соответственно под номерами доступа NP_005003.2 и NP_001077061.1, а кодирующие их последовательности mRNA можно найти соответственно под номерами доступа NM_005012.3 и NM_001083592.1. В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка ROR1. В одном аспекте белок ROR1 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "ROR1" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного ROR1 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD19" относится к белку кластеру дифференцировки 19, который является антигенной детерминантой, выявляемой на лейкозных клетках-предшественниках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотную последовательность CD19 человека можно найти в UniProt/Swiss-Prot под номером доступа P15391, а последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CD19 человека, можно найти под номером доступа NM_001178098. CD19 экспрессируется в большинстве форм рака из клеток B-клеточной линии дифференцировки, в том числе, например, при остром лимфобластном лейкозе, хроническом лимфоцитарном лейкозе и неходжкинской лимфоме. Другие клетки, экспрессирующие CD19, представлены ниже в определении "заболевания, ассоциированного с экспрессией CD19". Он также представляет собой ранний маркер предшественников B-клеток. См., например, Nicholson et al. Mol. Immun. 34 (16-17): 1157-1165 (1997). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CART распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD19. В одном аспекте белок CD19 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD19" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD19 дикого типа.

Используемые в данном документе термины "CD22" относятся к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на лейкозных клетках-предшественниках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности изоформ 1-5 CD22 человека можно найти соответственно под номерами доступа NP 001762.2, NP 001172028.1, NP 001172029.1, NP 001172030.1 и NP 001265346.1, и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую варианты 1-5 CD22 человека, можно найти соответственно под номерами доступа NM 001771.3, NM 001185099.1, NM 001185100.1, NM 001185101.1 и NM 001278417.1. В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD22. В одном аспекте белок CD22 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD22" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD22 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD123" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на некоторых злокачественных гематологических раковых клетках, например на лейкозных клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности CD123 человека можно найти под номерами доступа NP_002174.1 (предшественник изоформы 1); NP_001254642.1 (предшественник изоформы 2), а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_002183.3 (вариант 1); NM_001267713.1 (вариант 2). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD123. В одном аспекте белок CD123 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD123" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD123 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD10" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на лейкозных клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности CD10 человека можно найти под номерами доступа NP_009218.2; NP_000893.2; NP_009219.2; NP_009220.2, а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_007287.2 (вариант 1bis); NM_000902.3 (вариант 1); NM_007288.2 (вариант 2a); NM_007289.2 (вариант 2b). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD10. В одном аспекте белок CD10 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD10" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD10 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD34" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на гематопоэтических стволовых клетках и некоторых раковых клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности CD34 человека можно найти под номерами доступа NP_001020280.1 (предшественник изоформы а); NP_001764.1 (предшественник изоформы b), а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_001025109.1 (вариант 1); NM_001773.2 (вариант 2). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD34. В одном аспекте белок CD34 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD34" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD34 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "FLT-3" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на гематопоэтических клетках-предшественниках и некоторых раковых клетках, например на лейкозных клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности FLT-3 человека можно найти под номерами доступа NP_004110.2, а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_004119.2. В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка FLT-3. В одном аспекте белок FLT-3 экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "FLT-3" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного FLT-3 дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD79b" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на некоторых злокачественных гематологических раковых клетках, например на лейкозных клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности CD79b человека можно найти под номерами доступа NP_000617.1 (предшественник изоформы 1), NP_067613.1 (предшественник изоформы 2) или NP_001035022.1 (предшественник изоформы 3), а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_000626.2 (вариант 1 транскрипта), NM_021602.2 (вариант 2 транскрипта) или NM_001039933.1 (вариант 3 транскрипта). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD79b. В одном аспекте белок CD79b экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD79b" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD79b дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD79a" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на некоторых злокачественных гематологических раковых клетках, например на лейкозных клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности CD79a человека можно найти под номерами доступа NP_001774.1 (предшественник изоформы 1) или NP_067612.1 (предшественник изоформы 2), а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_001783.3 (вариант 1 транскрипта) или NM_021601.3 (вариант 2 транскрипта). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD79a. В одном аспекте белок CD79a экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD79a" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD79a дикого типа.

Используемый в данном документе термин "CD179b" относится к антигенной детерминанте, которую, как известно, можно выявить на некоторых злокачественных гематологических раковых клетках, например на лейкозных клетках. Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот человека и мыши можно найти в общедоступной базе данных, такой как GenBank, UniProt и Swiss-Prot. Например, аминокислотные последовательности CD179b человека можно найти под номерами доступа NP_064455.1 (предшественник изоформы а) или NP_690594.1 (предшественник изоформы b), а кодирующие их последовательности mRNA можно найти под номерами доступа NM_020070.3 (вариант 1 транскрипта) или NM_152855.2 (вариант 2 транскрипта). В одном аспекте антигенсвязывающая часть CAR распознает и связывает антиген во внеклеточном домене белка CD179b. В одном аспекте белок CD179b экспрессируется на раковой клетке. Как используется в данном документе, "CD179b" охватывает белки, содержащие мутации, например, точечные мутации, фрагменты, вставки, делеции и сплайс-варианты полноразмерного CD179b дикого типа.

Используемый в данном документе термин "связывающий домен" (например, "CD20-связывающий домен") относится к белку, например, к цепи иммуноглобулина или ее фрагменту, содержащему по меньшей мере одну последовательность вариабельного домена иммуноглобулина. Термин "связывающий домен" (также называемый в данном документе "молекулой антитела") охватывает антитела и фрагменты антител. В варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу полиспецифического антитела, например, она содержит множество последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулина, где первая из множества последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулина характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, и вторая из множества последовательностей вариабельных доменов иммуноглобулина характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула полиспецифического антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела. Биспецифическое антитело характеризуется специфичностью не более чем к двум антигенам. Молекула биспецифического антитела характеризуется первой последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, и второй последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом.

Термин "фрагмент антитела" относится к по меньшей мере одной части антитела, которая сохраняет способность специфически взаимодействовать (например, посредством связывания, стерического препятствования, стабилизации/дестабилизации, пространственного распределения) с эпитопом антигена. Примеры фрагментов антител включают без ограничения Fab-, Fab'-, F(ab')₂-, Fv-фрагменты, scFv-фрагменты антител, Fv, стабилизированные дисульфидными связями (sdFv), Fd-фрагмент, состоящий из VH- и CH1-доменов, линейные антитела, однодоменные антитела, такие как sdAb (либо VL, либо VH), VHH-домены верблюдовых, полиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител, таких как бивалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области, и выделенный CDR или другие эпитопсвязывающие фрагменты антитела. Антигенсвязывающие фрагменты также могут быть включены в состав однодоменных антител, максиантител, миниантител, нанотел, внутриклеточных антител, диател, триател, тетрател, v-NAR и бис-scFv (см., например, Hollinger and Hudson, Nature Biotechnology 23:1126-1136, 2005). Антигенсвязывающие фрагменты также могут быть пересажены на каркасные структуры на основе полипептидов, таких как фибронектин III типа (Fn3) (см. патент США № 6703199, в котором описаны миниантитела на основе полипептида фибронектина). Термин "scFv" относится к слитому белку, который содержит по меньшей мере один фрагмент антитела, содержащий вариабельную область легкой цепи, и по меньшей мере один фрагмент антитела, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, где вариабельные области легкой и тяжелой цепей связаны друг с другом, например, посредством синтетического линкера, например короткого гибкого полипептидного линкера, и способны экспрессироваться в виде одноцепочечного полипептида, и где scFv сохраняет специфичность интактного антитела, из которого он получен. Если не указано иное, то используемый в данном документе scFv может иметь вариабельные VL- и VH-области в любом порядке, например, относительно N-конца и С-конца полипептида scFv может содержать VL-линкер-VH или может содержать VH-линкер-VL.

Термин "область, определяющая комплементарность" или "CDR", используемый в данном документе, относится к последовательностям из аминокислот в вариабельных областях антитела, которые придают антигенную специфичность и аффинность связывания. Точные границы аминокислотной последовательности указанной CDR могут быть определены с использованием любой из ряда широко известных схем, в том числе описанных Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (схема нумерации "Kabat"), Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273, 927-948 (схема нумерации "Chothia") и нумерация ImMunoGenTics (IMGT) (Lefranc, M.-P., The Immunologist, 7, 132-136 (1999); Lefranc, M.-P. et al., Dev. Comp. Immunol., 27, 55-77 (2003) (схема нумерации "IMGT"). Например, для классических форматов, согласно Kabat, аминокислотные остатки CDR в домене тяжелой вариабельной цепи (VH) нумеруются 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3); и аминокислотные остатки CDR в домене легкой вариабельной цепи (VL) нумеруются 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3). Согласно Chothia аминокислоты CDR в VH нумеруются 26-32 (HCDR1), 52-56 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3); и аминокислотные остатки в VL нумеруются 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) и 91-96 (LCDR3). Объединяя определения CDR как согласно Kabat, так и согласно Chothia, CDR состоят из аминокислотных остатков 26-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3) в VH человека и аминокислотных остатков 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3) в VL человека. Согласно IMGT, аминокислотные остатки CDR в VH нумеруются примерно 26-35 (CDR1), 51-57 (CDR2) и 93-102 (CDR3), и аминокислотные остатки CDR в VL нумеруются примерно 27-32 (CDR1), 50-52 (CDR2) и 89-97 (CDR3) (нумерация в соответствии с "IMGT"). Согласно IMGT, CDR-области антитела можно определить с применением программы IMGT/DomainGap Align.

Часть CAR по настоящему изобретению, предусматривающая антитело или фрагмент этого антитела, может существовать во множестве форм, в которых антигенсвязывающий домен экспрессируется в виде части непрерывной полипептидной цепи, в том числе, например, в виде фрагмента однодоменного антитела (sdAb), одноцепочечного антитела (scFv), гуманизированного антитела или биспецифического антитела (Harlow et al., 1999, в: Using Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY; Harlow et al., 1989, в: Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, New York; Houston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; Bird et al., 1988, Science 242:423-426). В одном аспекте антигенсвязывающий домен композиции CAR по настоящему изобретению предусматривает фрагмент антитела. В дополнительном аспекте CAR содержит фрагмент антитела, который включает в себя scFv.

Термин "тяжелая цепь антитела" относится к большему из двух типов полипептидных цепей, присутствующих в молекулах антител в их встречающихся в природе конформациях, который обычно определяет класс, к которому принадлежит антитело.

Термин "легкая цепь антитела" относится к меньшему из двух типов полипептидных цепей, присутствующих в молекулах антител в их встречающихся в природе конформациях. Легкие цепи каппа (κ) и лямбда (λ) относятся к двум основным изотипам легких цепей антител.

Термин "рекомбинантное антитело" относится к антителу, создаваемому с использованием технологии рекомбинантных ДНК, такому как, например, антитело, экспрессируемое в бактериофаговой или дрожжевой системе экспрессии. Термин также следует истолковывать как означающий антитело, которое было создано в результате синтеза молекулы ДНК, кодирующей антитело, при этом данная молекула ДНК экспрессирует белковое антитело или аминокислотную последовательность, определяющую антитело, где последовательность ДНК или аминокислотная последовательность были получены с использованием технологии рекомбинантных ДНК или аминокислотных последовательностей, доступной и широко известной в данной области техники.

Термин "антиген" или "Ag" относится к молекуле, которая вызывает иммунный ответ. Этот иммунный ответ может предусматривать выработку антител либо активацию специфических иммунокомпетентных клеток или как то, так и другое. Специалисту в данной области техники будет понятно, что любая макромолекула, в том числе практически все белки или пептиды, может служить в качестве антигена. Кроме того, антигены могут быть получены из рекомбинантной или геномной ДНК. Специалисту в данной области техники будет понятно, что любая ДНК, которая содержит последовательность нуклеиновой кислоты или частичную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, который вызывает иммунный ответ, вследствие этого кодирует "антиген", как этот термин используется в данном документе. Кроме того, специалисту в данной области техники будет понятно, что антиген не должен кодироваться исключительно полноразмерной последовательностью нуклеиновой кислоты гена. Очевидно, что настоящее изобретение охватывает без ограничения применение частичных последовательностей нуклеиновой кислоты более чем одного гена, и что эти последовательности нуклеиновой кислоты расположены в различных комбинациях для кодирования полипептидов, которые вызывают требуемый иммунный ответ. Более того, специалисту в данной области техники будет понятно, что антиген вообще не обязательно должен кодироваться "геном". Очевидно, что антиген может быть образован в результате синтеза, или может быть получен из биологического образца, или может представлять собой макромолекулу помимо полипептида. Такой биологический образец может включать в себя без ограничения образец ткани, образец опухоли, клетку или жидкость с другими биологическими компонентами.

Термин "противораковый эффект" относится к биологическому эффекту, который может проявляться различными способами, в том числе без ограничения, например, в виде уменьшения объема опухоли, уменьшения количества раковых клеток, уменьшения количества метастазов, увеличения ожидаемой продолжительности жизни, уменьшения пролиферации раковых клеток, уменьшения выживаемости раковых клеток или ослабления различных физиологических симптомов, ассоциированных с раковым состоянием. "Противораковый эффект" также может проявляться в виде способности пептидов, полинуклеотидов, клеток и антител по настоящему изобретению в первую очередь предупреждать появление рака. Термин "противоопухолевый эффект" относится к биологическому эффекту, который может проявляться различными способами, в том числе без ограничения, например, в виде уменьшения объема опухоли, уменьшения количества опухолевых клеток, уменьшения пролиферации опухолевых клеток или уменьшения выживаемости опухолевых клеток. Термин "аутологичный" относится к любому материалу, полученному от того же индивидуума, которому он позднее должен быть повторно введен.

Термин "аллогенный" относится к любому материалу, полученному от другого животного того же вида, что и индивидуум, которому данный материал вводят. Говорят, что два или более индивидуума являются аллогенными по отношению друг к другу, если их гены в одном или нескольких локусах не являются идентичными. В некоторых аспектах аллогенные материалы от индивидуумов одного и того же вида могут быть достаточно непохожими генетически, чтобы происходило их антигенное взаимодействие.

Термин "ксеногенный" относится к трансплантату, полученному от животного другого вида.

Термин "комбинация" относится либо к фиксированной комбинации единичной дозированной формы, либо к комбинированному применению, где соединение по настоящему изобретению и комбинационный партнер (например, другое лекарство, как поясняется ниже, также называемое "терапевтическим средством" или "совместно применяемым средством") могут быть введены независимо в одно и то же время или по отдельности через промежутки времени, в частности когда данные промежутки времени дают возможность партнерам по комбинации демонстрировать суммарный, например синергический, эффект. Единичные компоненты могут быть упакованы в набор или по отдельности. Один или оба компонента (например, порошки или жидкости) могут быть разведены или разбавлены до требуемой дозы перед введением. Термин "совместное введение" или "комбинированное применение" или им подобные, используемые в данном документе, означают охват введения выбранного партнера по комбинации одному субъекту, нуждающемуся в этом (например, пациенту), и предназначены для включения схем лечения, в которых средства необязательно вводят тем же путем введения или в то же время. Термин "фармацевтическая комбинация", используемый в данном документе, означает продукт, который получают в результате смешивания или комбинирования более чем одного терапевтического средства, и включает фиксированные и нефиксированные комбинации терапевтических средств. Термин "фиксированная комбинация" означает, что терапевтические средства, например, соединение по настоящему изобретению и партнер по комбинации, оба вводятся пациенту одновременно в форме единого целого или дозировано. Термин "нефиксированная комбинация" означает, что терапевтические средства, например, соединение по настоящему изобретению и партнер по комбинации, оба вводятся пациенту как отдельные объекты либо одновременно, параллельно, либо последовательно без конкретных сроков, при этом такое введение обеспечивает эффективные терапевтические уровни двух соединений в организме пациента. Последнее также применяется в отношении "коктейльной терапии", например, введение трех или более терапевтических средств.

Термин "рак" относится к заболеванию, которое характеризуется быстрым и неконтролируемым ростом аберрантных клеток. Раковые клетки могут распространяться локально или через кровоток и лимфатическую систему в другие части тела. Примеры различных форм рака описаны в данном документе и включают без ограничения рак молочной железы, рак предстательной железы, рак яичника, рак шейки матки, рак кожи, рак поджелудочной железы, колоректальный рак, рак почки, рак печени, рак головного мозга, лимфому, лейкоз, рак легкого и т. п. Термины "опухоль" и "рак" используются в данном документе взаимозаменяемо, например, оба термина охватывают солидные опухоли и опухоли жидких тканей. Используемый в данном документе термин "рак" или "опухоль" охватывает предзлокачественные, а также злокачественные формы рака и опухоли.

Фраза "заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20", используемая в данном документе, включает без ограничения заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20 (например, CD20 дикого типа или мутантного CD20), или состояние, ассоциированное с клетками, которые экспрессируют или в какое-либо время экспрессировали CD20 (например, CD20 дикого типа или мутантный CD20), в том числе, например, пролиферативные заболевания, такие как рак или злокачественное новообразование, или предраковое состояние, такое как миелодисплазия, миелодиспластический синдром или предлейкоз; или показание, не связанное с раком, ассоциированное с клетками, которые экспрессируют CD20 (например, дикого типа или мутантным CD20). Во избежание неоднозначности, заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, может включать в себя состояние, ассоциированное с клетками, которые в настоящее время не экспрессируют CD20, например из-за того, что экспрессия CD20 была подавлена, например вследствие лечения молекулой, нацеливающейся на CD20, например ингибитором CD20, описанным в данном документе, но которые в свое время экспрессировали CD20. В одном аспекте рак, ассоциированный с экспрессией CD20, представляет собой гематологический рак. В одном аспекте гематологический рак включает в себя без ограничения AML, миелодиспластический синдром, ALL, волосатоклеточный лейкоз, пролимфоцитарный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, лимфому Ходжкина, бластическое новообразование из плазмацитоидных дендритных клеток и т. п. Кроме того, заболевания, ассоциированные с экспрессией CD20, включают без ограничения, например, атипичные и/или неклассические формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, ассоциированные с экспрессией CD20. Не связанные с раком показания, ассоциированные с экспрессией CD20, также могут быть включены.

Фраза "заболевание, ассоциированное с экспрессией CD19" охватывает без ограничения заболевание, ассоциированное с экспрессией CD19 (например, CD19 дикого типа или мутантного CD19), или состояние, ассоциированное с клетками, которые экспрессируют или в какое-либо время экспрессировали CD19 (например, CD19 дикого типа или мутантный CD19), в том числе, например, пролиферативные заболевания, такие как рак или злокачественное новообразование, или предраковое состояние, такое как миелодисплазия, миелодиспластический синдром или предлейкоз; или показание, не связанное с раком, ассоциированное с клетками, которые экспрессируют CD19. Во избежание неоднозначности, заболевание, ассоциированное с экспрессией CD19, может включать в себя состояние, ассоциированное с клетками, которые в настоящее время не экспрессируют CD19, например из-за того, что экспрессия CD19 была подавлена, например вследствие лечения молекулой, нацеливающейся на CD19, например CAR для CD19, но которые в свое время экспрессировали CD19. В одном аспекте рак, ассоциированный с экспрессией CD19, представляет собой гематологический рак. В одном аспекте гематологический рак представляет собой лейкоз или лимфому. В одном аспекте рак, ассоциированный с экспрессией CD19, включает в себя формы рака и злокачественные новообразования, в том числе без ограничения, например, одну или несколько форм острого лейкоза, в том числе без ограничения, например, острый B-клеточный лимфоидный лейкоз (BALL), острый T-клеточный лимфоидный лейкоз (TALL), острый лимфоидный лейкоз (ALL); одну или несколько форм хронического лейкоза, в том числе без ограничения, например, хронический миелогенный лейкоз (CML), хронический лимфоидный лейкоз (CLL). Дополнительные формы рака или гематологические состояния, ассоциированные с экспрессией CD19, включают в себя без ограничения, например, В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, бластическое новообразование из плазмацитоидных дендритных клеток, лимфому Беркитта, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, фолликулярную лимфому, волосатоклеточный лейкоз, мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, лимфому MALT, мантийноклеточную лимфому (MCL), лимфому из клеток маргинальной зоны, множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, неходжкинскую лимфому, лимфому Ходжкина, плазмобластную лимфому, новообразование из плазмацитоидных дендритных клеток, макроглобулинемию Вальденстрема и "предлейкоз", который представляет собой разнообразную группу гематологических состояний, объединенных неэффективным образованием (или дисплазией) миелоидных клеток крови, и т. п. Кроме того, заболевания, ассоциированные с экспрессией CD19, включают без ограничения, например, атипичные и/или неклассические формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, ассоциированные с экспрессией CD19. Не связанные с раком показания, ассоциированные с экспрессией CD19, включают без ограничения, например, аутоиммунное заболевание (например, волчанку), воспалительные нарушения (аллергию и астму) и трансплантацию. В некоторых вариантах осуществления клетки, экспрессирующие CD19, экспрессируют или в какое-либо время экспрессировали mRNA, кодирующую CD19. В варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD19, вырабатывают белок CD19 (например, дикого типа или мутантный), и при этом белок CD19 может присутствовать на нормальных уровнях или сниженных уровнях. В варианте осуществления клетки, экспрессирующие CD19, в один момент времени вырабатывали белок CD19 на выявляемых уровнях и впоследствии практически не вырабатывали выявляемый белок CD19.

Термин "консервативные модификации последовательности" относится к аминокислотным модификациям, которые не оказывают значительного влияния на характеристики связывания антитела или фрагмента антитела, содержащего аминокислотную последовательность, или значительно не изменяют их. Такие консервативные модификации включают в себя аминокислотные замены, добавления и делеции. Модификации могут быть введены в антитело или фрагмент антитела по настоящему изобретению с помощью стандартных методик, известных из уровня техники, таких как сайт-направленный мутагенез и ПЦР-опосредованный мутагенез. Консервативные аминокислотные замены представляют собой замены, при которых аминокислотный остаток заменяется аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, были определены в уровне техники. Эти семейства включают в себя аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислыми боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин, триптофан), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин). Таким образом, один или несколько аминокислотных остатков в CAR по настоящему изобретению можно заменить другими аминокислотными остатками из того же семейства боковых цепей, и измененный CAR можно протестировать с использованием функциональных анализов, описанных в данном документе.

Термин "стимуляция" относится к первичному ответу, индуцируемому связыванием стимулирующей молекулы (например, комплекса TCR/CD3 или CAR) со своим когнатным лигандом (или опухолевым антигеном в случае CAR) с опосредованием тем самым события передачи сигнала, такого как, без ограничения, передача сигнала с помощью комплекса TCR/CD3 или передача сигнала с помощью соответствующего рецептора NK или сигнальных доменов CAR. Стимуляция может опосредовать изменение экспрессии определенных молекул.

Термин "стимулирующая молекула" относится к молекуле, экспрессируемой иммунной клеткой, например, Т-клеткой, NK-клеткой, В-клеткой, которая предоставляет цитоплазматическую(-ие) сигнальную(-ые) последовательность(-и), регулирующую(-ие) активацию иммунной клетки стимулирующим образом по меньшей мере в некоторых аспектах сигнального пути иммунной клетки. В одном аспекте сигнал является первичным сигналом, который инициируется, например, при связывании комплекса TCR/CD3 с молекулой МНС, нагруженной пептидом, и который приводит к опосредованию ответа Т-клеток, в том числе без ограничения пролиферации, активации, дифференцировки и т. п. Первичная цитоплазматическая сигнальная последовательность (также называемая "первичным сигнальным доменом"), которая действует стимулирующим образом, может содержать сигнальный мотив, известный как иммунорецепторный тирозиновый активирующий мотив или ITAM. Примеры цитоплазматической сигнальной последовательности, содержащей ITAM, которая является особенно применимой в настоящем изобретении, включают без ограничения последовательности, полученные из CD3-дзета, общей гамма-цепи FcR (FCER1G), Fc-гамма RIIa, FcR-бета (Fc-эпсилон R1b), CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эпсилон, CD79a, CD79b, DAP10 и DAP12. В конкретном CAR по настоящему изобретению внутриклеточный сигнальный домен в любом одном или нескольких CAR по настоящему изобретению содержит внутриклеточную сигнальную последовательность, например, первичную сигнальную последовательность CD3-дзета. В конкретном CAR по настоящему изобретению первичная сигнальная последовательность CD3-дзета представляет собой последовательность, представленную под SEQ ID NO: 805, или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п. В конкретном CAR по настоящему изобретению первичная сигнальная последовательность CD3-дзета представляет собой последовательность, представленную под SEQ ID NO: 807, или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п.

Термин "антигенпрезентирующая клетка" или "APC" относится к клетке иммунной системы, такой как вспомогательная клетка (например, B-клетка, дендритная клетка и т. п.), которая представляет чужеродный антиген в комплексе с молекулами главного комплекса гистосовместимости (MHC) на своей поверхности. Т-клетки могут распознавать эти комплексы с помощью своих T-клеточных рецепторов (TCR). АРС процессируют антигены и презентируют их Т-клеткам.

"Иммунная эффекторная клетка", как этот термин используется в данном документе, относится к клетке, которая участвует в иммунном ответе, например, способствуя иммунному эффекторному ответу. Примеры иммунных эффекторных клеток включают Т-клетки, например, альфа/бета-Т-клетки и гамма/дельта-Т-клетки, В-клетки, естественные киллерные клетки (NK), естественные киллерные T-клетки (NK-T), тучные клетки и фагоциты миелоидного происхождения.

"Иммунная эффекторная функция или иммунный эффекторный ответ", как этот термин используется в данном документе, относится к функции или ответу, например, иммунной эффекторной клетки, которые усиливают иммунную атаку на клетку-мишень или способствуют ей. Например, иммунные эффекторные функция или ответ относятся к свойству T- или NK-клетки, которое способствует уничтожению или ингибированию роста или пролиферации клетки-мишени. В случае с Т-клетками первичная стимуляция и костимуляция являются примерами иммунных эффекторных функции или ответа.

Используемый в данном документе термин "внутриклеточный сигнальный домен" относится к внутриклеточной части молекулы. Внутриклеточный сигнальный домен образует сигнал, который способствует иммунной эффекторной функции CAR-содержащей клетки, например, CAR-экспрессирующей CART-клетки или NK-клетки. Примеры иммунной эффекторной функции, например, в CART-клетке или CAR-экспрессирующей NK-клетке, включают цитолитическую активность и хелперную активность, в том числе секрецию цитокинов.

В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен может содержать первичный внутриклеточный сигнальный домен. Иллюстративные первичные внутриклеточные сигнальные домены включают в себя домены, полученные из молекул, отвечающих за первичную стимуляцию или антигензависимую стимуляцию. В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен может содержать костимулирующий внутриклеточный домен. Иллюстративные костимулирующие внутриклеточные сигнальные домены включают в себя домены, полученные из молекул, отвечающих за передачу костимулирующих сигналов или антигеннезависимую стимуляцию. Например, в случае CART первичный внутриклеточный сигнальный домен может содержать цитоплазматическую последовательность Т-клеточного рецептора, и костимулирующий внутриклеточный сигнальный домен может содержать цитоплазматическую последовательность корецептора или костимулирующей молекулы.

Первичный внутриклеточный сигнальный домен может содержать сигнальный мотив, который известен как иммунорецепторный тирозиновый активирующий мотив или ITAM. Примеры первичных цитоплазматических сигнальных последовательностей, содержащих ITAM, включают без ограничения последовательности, полученные из CD3-дзета, общей гамма-цепи FcR (FCER1G), Fc-гамма RIIa, FcR-бета (Fc-эпсилон R1b), CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эпсилон, CD79a, CD79b, DAP10 и DAP12.

Термин "дзета" или, как альтернатива, "дзета-цепь", "CD3-дзета" или "TCR-дзета" определяется как белок, представленный под номером доступа в GenBank BAG36664.1, или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п., и "стимулирующий домен дзета" или, как альтернатива, "стимулирующий домен CD3-дзета" или "стимулирующий домен TCR-дзета" определяется как аминокислотные остатки цитоплазматического домена дзета-цепи или их функциональные производные, которые являются достаточными для функциональной передачи исходного сигнала, необходимого для активации Т-клеток. В одном аспекте цитоплазматический домен дзета содержит остатки 52-164 под № доступа GenBank BAG36664.1 или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п., которые являются его функциональными ортологами. В одном аспекте "стимулирующий домен дзета" или "стимулирующий домен CD3-дзета" представляет собой последовательность, представленную под SEQ ID NO: 805. В одном аспекте "стимулирующий домен дзета" или "стимулирующий домен CD3-дзета" представляет собой последовательность, представленную под SEQ ID NO: 807.

Термин "костимулирующая молекула" относится к когнатному партнеру по связыванию на Т-клетке, который специфично связывается с костимулирующим лигандом, опосредуя тем самым костимулируемый ответ Т-клетки, такой как, без ограничения, пролиферация. Костимулирующие молекулы представляют собой молекулы клеточной поверхности, отличные от антигенных рецепторов или их лигандов, которые способствуют эффективному иммунному ответу. Костимулирующие молекулы включают без ограничения молекулу MHC I класса, белки рецептора TNF, иммуноглобулиноподобные белки, рецепторы цитокина, интегрины, сигнальные молекулы активации лимфоцитов (белки SLAM), активирующие рецепторы NK-клеток, BTLA, лиганд Toll-подобного рецептора, OX40, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1(CD11a/CD18), 4-1BB (CD137), B7-H3, CDS, ICAM-1, ICOS 5 (CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD4, CD8-альфа, CD8-бета, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R-альфа, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a и лиганд, который специфически связывается с CD83.

Костимулирующий внутриклеточный сигнальный домен может представлять собой внутриклеточную часть костимулирующей молекулы. Костимулирующая молекула может быть представлена следующими семействами белков: белки семейства TNF-рецепторов, иммуноглобулиноподобные белки, цитокиновые рецепторы, интегрины, сигнальные молекулы активации лимфоцитов (белки SLAM) и активирующие рецепторы NK-клеток. Примеры таких молекул включают CD27, CD28, 4-1BB (CD137), OX40, GITR, CD30, CD40, ICOS, BAFFR, HVEM, ICAM-1, антиген-1, связанный с функцией лимфоцитов (LFA-1), CD2, CSD, CD7, CD287, LIGHT, NKG2C, NKG2D, SLAMF7, NKp80, NKp30, NKp44, NKp46, CD160, B7-H3 и лиганд, который специфически связывается с CD83, и т. п.

Внутриклеточный сигнальный домен может содержать всю внутриклеточную часть или весь нативный внутриклеточный сигнальный домен молекулы, из которой он получен, или их функциональный фрагмент или производное.

Термин "4-1BB" относится к представителю суперсемейства TNFR с аминокислотной последовательностью, представленной под номером доступа в GenBank AAA62478.2, или эквивалентным остаткам из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п.; и "костимулирующий домен 4-1BB" определяют как аминокислотные остатки 214-255 под номером доступа в GenBank AAA62478.2 или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п. В одном аспекте "костимулирующий домен 4-1BB" представляет собой последовательность, представленную под SEQ ID NO: 803, или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п.

Термин "кодирование" относится к внутренне присущему свойству специфических последовательностей нуклеотидов в полинуклеотиде, таком как ген, кДНК или mRNA, служить в качестве матриц для синтеза в ходе биологических процессов других полимеров и макромолекул, имеющих либо определенную последовательность нуклеотидов (т. е. rRNA, tRNA и mRNA), либо определенную последовательность аминокислот и биологические свойства, обусловленные ей. Таким образом, ген, кДНК или РНК кодирует белок, если в результате транскрипции и трансляции mRNA, соответствующей этому гену, вырабатывается белок в клетке или другой биологической системе. Как кодирующая нить, последовательность нуклеиновой кислоты которой идентична последовательности mRNA и обычно представлена в перечнях последовательностей, так и некодирующая нить, используемая в качестве матрицы для транскрипции гена или кДНК, могут называться как кодирующие белок или другой продукт этого гена или кДНК.

Если не указано иное, то "последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая аминокислотную последовательность" охватывает все последовательности нуклеиновой кислоты, которые являются вырожденными вариантами друг друга и которые кодируют одну и ту же аминокислотную последовательность. Фраза "последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок или РНК", может также охватывать интроны в той мере, в которой последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая белок, может в каком-либо варианте содержать интрон(-ы).

Термины "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" используются в данном документе взаимозаменяемо и относятся к количеству соединения, состава, материала или композиции, описанных в данном документе, эффективным для достижения конкретного биологического результата.

Термин "эндогенный" относится к любому материалу, входящему в состав организма, клетки, ткани или системы или полученному в них.

Термин "экзогенный" относится к любому материалу, введенному в организм, клетку, ткань или систему или полученному вне их.

Термин "экспрессия" относится к транскрипции и/или трансляции конкретной последовательности нуклеиновой кислоты под управлением промотора.

Термин "вектор для переноса" относится к композиции, которая содержит выделенную нуклеиновую кислоту и которая может применяться для доставки выделенной нуклеиновой кислоты внутрь клетки. Из уровня техники известны многочисленные векторы, в том числе без ограничения линейные полинуклеотиды, полинуклеотиды, ассоциированные с ионными или амфифильными соединениями, плазмиды и вирусы. Таким образом, термин "вектор для переноса" охватывает автономно реплицирующуюся плазмиду или вирус. Данный термин также следует толковать так, чтобы он дополнительно охватывал неплазмидные и невирусные соединения, которые облегчают перенос нуклеиновой кислоты в клетки, такие как, например, полилизиновое соединение, липосома и т. п. Примеры вирусных векторов для переноса включают без ограничения аденовирусные векторы, векторы на основе аденоассоциированного вируса, ретровирусные векторы, лентивирусные векторы и т. п.

Термин "экспрессионный вектор" относится к вектору, который содержит рекомбинантный полинуклеотид, содержащий последовательности, контролирующие экспрессию, функционально связанные с последовательностью нуклеиновой кислоты, которая подлежит экспрессированию. Экспрессионный вектор содержит достаточное количество цис-действующих элементов для экспрессии; другие элементы для экспрессии могут предоставляться клеткой-хозяином или в системе экспрессии in vitro. Экспрессионные векторы включают все векторы, известные из уровня техники, в том числе космиды, плазмиды (например, "голые" или содержащиеся в липосомах) и вирусы (например, лентивирусы, ретровирусы, аденовирусы и аденоассоциированные вирусы), в состав которых включен рекомбинантный полинуклеотид.

Термин "лентивирус" относится к роду семейства Retroviridae. Лентивирусы являются уникальными среди ретровирусов в том, что способны инфицировать неделящиеся клетки; они могут доставлять значительное количество генетической информации в ДНК клетки-хозяина, поэтому они в качестве векторов являются одним из наиболее эффективных способов доставки генов. Все из HIV, SIV и FIV являются примерами лентивирусов.

Термин "лентивирусный вектор" относится к вектору, полученному из по меньшей мере части генома лентивируса, в том числе, в частности, к самоинактивирующемуся лентивирусному вектору, представленному в Milone et al., Mol. Ther. 17(8): 1453-1464 (2009). Другие примеры лентивирусных векторов, которые можно использовать в клинической практике, включают без ограничения, например, технологию доставки генов LENTIVECTOR® от Oxford BioMedica, векторную систему LENTIMAX™ от Lentigen и т. п. Неклинические типы лентивирусных векторов также являются доступными и известны специалисту в данной области техники.

Термин "гомологичный" или "идентичность" относится к идентичности последовательностей субъединиц между двумя полимерными молекулами, например, между двумя молекулами нуклеиновой кислоты, такими как две молекулы ДНК или две молекулы РНК, или между двумя молекулами полипептидов. Если положение субъединицы в обеих из двух молекул занимает одна и та же мономерная субъединица, например, если положение в каждой из двух молекул ДНК занято аденином, то они являются гомологичными или идентичными в этом положении. Гомология между двумя последовательностями находится в прямой зависимости от количества совпадающих или гомологичных положений; например, если половина (например, пять положений в полимере длиной десять субъединиц) положений в двух последовательностях является гомологичной, то эти две последовательности являются гомологичными на 50%; если 90% положений (например, 9 из 10) являются совпадающими или гомологичными, то две последовательности являются гомологичными на 90%.

"Гуманизированные" формы антител, отличных от человеческих (например, мышиных), представляют собой химерные иммуноглобулины, цепи иммуноглобулинов или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие антигенсвязывающие подпоследовательности антител), которые содержат минимальную последовательность, полученную из иммуноглобулина, отличного от человеческого. В большинстве случаев гуманизированные антитела и фрагменты этих антител представляют собой иммуноглобулины человека (реципиентное антитело или фрагмент антитела), в которых остатки из области, определяющей комплементарность (CDR), реципиента заменены остатками из CDR отличных от человека видов (донорного антитела), таких как мышь, крыса или кролик, обладающих требуемой специфичностью, аффинностью и емкостью. В некоторых случаях остатки каркасной области (FR) Fv иммуноглобулина человека заменены соответствующими остатками, отличными от человеческих. Кроме того, гуманизированное антитело/фрагмент антитела может содержать остатки, не обнаруживаемые ни в реципиентном антителе, ни в импортированных последовательностях CDR или каркасных областей. С помощью этих модификаций можно дополнительно улучшить и оптимизировать функциональные характеристики антитела или фрагмента антитела. Как правило, гуманизированное антитело или фрагмент этого антитела будут содержать практически все из по меньшей мере одного, и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или практически все CDR-области соответствуют областям иммуноглобулина, отличного от человеческого, и все FR-области или их значительная часть представляют собой области с последовательностью иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело или фрагмент антитела также может содержать по меньшей мере часть константной области (Fc) иммуноглобулина, как правило, иммуноглобулина человека. Дополнительные подробности см. в Jones et al., Nature, 321: 522-525, 1986; Reichmann et al., Nature, 332: 323-329, 1988; Presta, Curr. Op. Struct. Biol., 2: 593-596, 1992.

"Полностью человеческий" относится к иммуноглобулину, такому как антитело или фрагмент антитела, где целая молекула имеет человеческое происхождение или состоит из аминокислотной последовательности, идентичной человеческой форме антитела или иммуноглобулина.

"Мышиный" относится к мышам или крысам. Например, мышиное антитело или его фрагмент содержит последовательность антитела или его фрагмента, которую выделяют из относящегося к мышиным животного, например мыши или крысы.

Термин "выделенный" означает измененный относительно природного состояния или извлеченный из него. Например, нуклеиновая кислота или пептид, в природных условиях присутствующие в живом животном, не являются "выделенными", однако те же нуклеиновая кислота или пептид, частично или полностью отделенные от сосуществующих материалов в своем природном состоянии, являются "выделенными". Выделенные нуклеиновая кислота или белок могут существовать в практически очищенной форме или могут существовать в ненативной среде, такой как, например, клетка-хозяин.

В контексте настоящего изобретения используются следующие сокращения для общераспространенных оснований нуклеиновых кислот. "А" относится к аденозину, "С" относится к цитозину, "G" относится к гуанозину, "Т" относится к тимидину и "U" относится к уридину.

Термин "функционально связанный" или "контроль транскрипции" относится к функциональной связи между регуляторной последовательностью и гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, приводящей к экспрессии последней. Например, первая последовательность нуклеиновой кислоты функционально связана со второй последовательностью нуклеиновой кислоты в тех случаях, когда первая последовательность нуклеиновой кислоты размещена в функциональной взаимосвязи со второй последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, промотор функционально связан с кодирующей последовательностью, если промотор влияет на транскрипцию или экспрессию кодирующей последовательности. Функционально связанные последовательности ДНК могут быть смежными друг с другом и, например, в случае необходимости соединения двух областей, кодирующих белок, находятся в одной и той же рамке считывания.

Термин "парентеральное введение" иммуногенной композиции включает, например, подкожную (s.c.), внутривенную (i.v.), внутримышечную (i.m.) или внутригрудинную инъекцию, методики внутриопухолевого или инфузионного введения.

Термин "нуклеиновая кислота" или "полинуклеотид" относится к дезоксирибонуклеиновым кислотам (ДНК) или рибонуклеиновым кислотам (РНК) и их полимерам в однонитевой или двухнитевой форме. Если специально не ограничено, то данный термин охватывает нуклеиновые кислоты, содержащие известные аналоги природных нуклеотидов, которые обладают свойствами связывания, сходными со свойствами эталонной нуклеиновой кислоты, и превращаются в процессе метаболизма способом, сходным со способом для встречающихся в природе нуклеотидов. Если не указано иное, то конкретная последовательность нуклеиновой кислоты также в неявной форме охватывает ее варианты с консервативными модификациями (например, с заменами вырожденными кодонами), аллели, ортологи, SNP и комплементарные последовательности, а также указанную в явной форме последовательность. В частности, замены вырожденными кодонами можно осуществлять посредством создания последовательностей, в которых в третьем положении одного или нескольких выбранных (или всех) кодонов произведена замена любым из канонических оснований и/или дезоксиинозиновыми остатками (Batzer et al., Nucleic Acid Res. 19:5081 (1991); Ohtsuka et al., J. Biol. Chem. 260:2605-2608 (1985); и Rossolini et al., Mol. Cell. Probes 8:91-98 (1994)).

Термины "пептид", "полипептид" и "белок" используются взаимозаменяемо и относятся к соединению, состоящему из аминокислотных остатков, ковалентно связанных пептидными связями. Белок или пептид должен содержать по меньшей мере две аминокислоты, и не установлено ограничение на максимальное количество аминокислот, которые может содержать последовательность белка или пептида. Полипептиды включают в себя любой пептид или белок, содержащий две или более аминокислоты, соединенные друг с другом пептидными связями. Используемый в данном документе термин относится как к коротким цепям, которые также, как правило, упоминаются в уровне техники, например, как пептиды, олигопептиды и олигомеры, так и к более длинным цепям, которые обычно упоминаются в уровне техники как белки, которых существует множество типов. "Полипептиды" включают, например, среди прочих, биологически активные фрагменты, практически гомологичные полипептиды, олигопептиды, гомодимеры, гетеродимеры, варианты полипептидов, модифицированные полипептиды, производные, аналоги, слитые белки. Полипептид предусматривает природный пептид, рекомбинантный пептид или их комбинацию.

Термин "промотор" относится к последовательности ДНК, распознаваемой синтетическим аппаратом клетки или введенным синтетическим аппаратом, которая необходима для инициации специфической транскрипции полинуклеотидной последовательности.

Термин "промотор/регуляторная последовательность" относится к последовательности нуклеиновой кислоты, которая необходима для экспрессии продукта гена, функционально связанного с промотором/регуляторной последовательностью. В некоторых случаях эта последовательность может являться коровой промоторной последовательностью, а в других случаях эта последовательность может также содержать энхансерную последовательность и другие регуляторные элементы, которые необходимы для экспрессии продукта гена. Промотор/регуляторная последовательность может, например, представлять собой последовательность, которая обеспечивает экспрессию продукта гена тканеспецифическим образом.

Термин "конститутивный промотор" относится к последовательности нуклеиновой кислоты, которая, находясь в функциональной связи с полинуклеотидом, который кодирует или определяет продукт гена, вызывает выработку продукта гена в клетке в большинстве или во всех физиологических условиях клетки.

Термин "индуцируемый промотор" относится к последовательности нуклеиновой кислоты, которая, находясь в функциональной связи с полинуклеотидом, который кодирует или определяет продукт гена, вызывает выработку продукта гена в клетке практически только в случае присутствия в клетке индуктора, который соответствует промотору.

Термин "тканеспецифический промотор" относится к последовательности нуклеиновой кислоты, которая, находясь в функциональной связи с полинуклеотидом, который кодирует или определяет генный продукт, вызывает выработку продукта гена в клетке практически только в том случае, если клетка является клеткой того типа ткани, который соответствует промотору.

Термин "гибкий полипептидный линкер" или "линкер", используемый применительно к scFv, относится к пептидному линкеру, который состоит из аминокислот, таких как глициновые и/или сериновые остатки, используемые в отдельности или в комбинации, для связывания вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи друг с другом. В одном варианте осуществления гибкий полипептид линкер представляет собой линкер Gly/Ser и содержит аминокислотную последовательность (Gly-Gly-Gly-Ser) (SEQ ID NO: 834), повторяющуюся n раз, где n представляет собой положительное целое число, равное или большее 1. Например, n=1, n=2, n=3, n=4, n=5 и n=6, n=7, n=8, n=9 и n=10. В одном варианте осуществления гибкие полипептидные линкеры включают без ограничения (Gly4 Ser)4 (SEQ ID NO: 23) или (Gly4 Ser)3 (SEQ ID NO: 541). В другом варианте осуществления линкеры содержат множественные повторы (Gly2Ser) и (GlySer). В другом варианте осуществления полипептид не включает в себя линкер, например, (n=0). Также в объем настоящего изобретения включены линкеры, описанные в WO2012/138475, включенной в данный документ посредством ссылки.

Как используется в данном документе, 5'-кэп (также называемый РНК-кэпом, 7-метилгуанозиновым РНК-кэпом или РНК-кэпом m⁷G) представляет собой модифицированный гуаниновый нуклеотид, который добавляется к "переднему", или 5'-концу, эукариотической матричной РНК вскоре после начала транскрипции. 5'-кэп состоит из концевой группы, которая связана с первым транскрибированным нуклеотидом. Его присутствие является критически важным для распознавания рибосомой и защиты от РНКаз. Добавление кэпа сопряжено с транскрипцией и происходит совместно с транскрипцией, так что каждое из этих событий влияет на другое. Вскоре после начала транскрипции 5'-конец синтезируемой mRNA связывается кэп-синтезирующим комплексом, ассоциированным с РНК-полимеразой. Этот ферментативный комплекс катализирует химические реакции, которые необходимы для кэпирования mRNA. Синтез протекает в виде многоступенчатой биохимической реакции. Кэпирующий компонент можно модифицировать для модулирования функциональных свойств mRNA, таких как ее стабильность или эффективность трансляции.

Как используется в данном документе, "РНК, транскрибированная in vitro" относится к РНК, предпочтительно mRNA, которая была синтезирована in vitro. Как правило, РНК, транскрибированная in vitro, образуется из вектора транскрипции in vitro. Вектор транскрипции in vitro содержит матрицу, используемую для образования РНК, транскрибированной in vitro.

Как используется в данном документе, "поли(А)" представляет собой серию аденозиновых остатков, присоединенных путем полиаденилирования к mRNA. В предпочтительном варианте осуществления конструкции для временной экспрессии поли(A) составляет от 50 до 5000, предпочтительно более 64, более предпочтительно более 100, наиболее предпочтительно более 300 или 400. Последовательности поли(А) можно модифицировать химическим или ферментативным путем для модулирования функциональных свойств mRNA, таких как локализация, стабильность или эффективность трансляции.

Как используется в данном документе, "полиаденилирование" относится к ковалентной связи полиаденилилового компонента или его модифицированного варианта с молекулой матричной РНК. В эукариотических организмах большинство молекул матричной РНК (mRNA) являются полиаденилированными на 3'-конце. 3'-концевой поли(А)-хвост представляет собой длинную последовательность адениновых нуклеотидов (часто несколько сотен), добавленных к пре-mRNA под действием фермента полиаденилатполимеразы. У высших эукариот поли(А)-хвост добавляется к транскриптам, которые содержат определенную последовательность - сигнал полиаденилирования. Поли(А)-хвост и связанный с ним белок содействуют защите mRNA от разрушения экзонуклеазами. Полиаденилирование также важно для терминации транскрипции, экспорта mRNA из ядра и трансляции. Полиаденилирование происходит в ядре сразу после транскрипции ДНК в РНК, но дополнительно может также происходить позднее в цитоплазме. После завершения транскрипции цепь mRNA расщепляется под действием эндонуклеазного комплекса, ассоциированного с РНК-полимеразой. Сайт расщепления обычно характеризуется наличием последовательности оснований AAUAAA вблизи сайта расщепления. После того, как mRNA была расщеплена, к свободному 3'-концу в сайте расщепления добавляются аденозиновые остатки.

Как используется в данном документе, "транзиентный" относится к экспрессии неинтегрированного трансгена в течение периода нескольких часов, дней или недель, где период времени экспрессии является меньшим, чем период времени для экспрессии гена в случае, если он интегрирован в геном или содержится в стабильном плазмидном репликоне в клетке-хозяине.

Используемые в данном документе термины "лечить", "лечение" и "осуществление лечения" относятся к снижению или ослаблению прогрессирования, тяжести и/или продолжительности пролиферативного нарушения или ослаблению одного или нескольких симптомов (предпочтительно одного или нескольких различимых симптомов) пролиферативного нарушения в результате введения одного или нескольких средств терапии (например, одного или нескольких терапевтических средств, таких как CAR по настоящему изобретению). В конкретных вариантах осуществления термины "лечить", "лечение" и "осуществление лечения" относятся к ослаблению по меньшей мере одного измеряемого физического параметра пролиферативного нарушения, такого как рост опухоли, необязательно различимых для пациента. В некоторых вариантах осуществления термины "лечить", "лечение" и "осуществление лечения" относятся к ингибированию прогрессирования пролиферативного нарушения либо с физической точки зрения, например, посредством стабилизации явного симптома, физиологической точки зрения, например посредством стабилизации физического параметра, либо с обеих. В некоторых вариантах осуществления термины "лечить", "лечение" и "осуществление лечения" относятся к снижению или стабилизации размера опухоли или количества раковых клеток.

Термин "путь передачи сигнала" относится к биохимической взаимосвязи между различными молекулами-переносчиками сигналов, которые играют роль в передаче сигнала от одной части клетки к другой части клетки. Фраза "рецептор клеточной поверхности" охватывает молекулы и комплексы молекул, способные принимать сигнал и передавать сигнал через мембрану клетки.

Термин "субъект" предполагается как включающий живые организмы, у которых можно вызвать иммунный ответ (например, млекопитающих, человека).

Термин "практически очищенная" клетка относится к клетке, которая практически не включает других типов клеток. "Практически очищенная клетка" также относится к клетке, которая была отделена от других типов клеток, с которыми она обычно ассоциирована в своем встречающемся в природе состоянии. В некоторых случаях популяция практически очищенных клеток относится к однородной популяции клеток. В других случаях данный термин просто относится к клетке, которая была отделена от клеток, с которыми она в природных условиях ассоциирована в своем природном состоянии. В некоторых аспектах клетки культивируют in vitro. В других аспектах клетки не культивируют in vitro.

Используемый в данном документе термин "терапевтический" означает лечение. Терапевтический эффект получают при ослаблении, подавлении, ремиссии или устранении болезненного состояния.

Используемый в данном документе термин "профилактика" означает предупреждение или профилактическое лечение заболевания или болезненного состояния.

В контексте настоящего изобретения "опухолевый антиген", или "антиген гиперпролиферативного нарушения", или "антиген, ассоциированный с гиперпролиферативным нарушением" относятся к антигенам, которые являются общими для конкретных гиперпролиферативных нарушений. В определенных аспектах антигены гиперпролиферативного нарушения по настоящему изобретению получены из раковых опухолей, включающих без ограничения первичную или метастатическую меланому, тимому, лимфому, саркому, рак легкого, рак печени, неходжкинскую лимфому, лимфому Ходжкина, формы лейкоза, рак матки, рак шейки матки, рак мочевого пузыря, рак почки и формы аденокарциномы, такие как рак молочной железы, рак предстательной железы, рак яичника, рак поджелудочной железы и т. п.

Термины "трансфицированный", или "трансформированный", или "трансдуцированный" относятся к процессу, в ходе которого экзогенную нуклеиновую кислоту переносят или вводят в клетку-хозяина. "Трансфицированная", или "трансформированная", или "трансдуцированная" клетка представляет собой клетку, которая была трансфицирована, трансформирована или трансдуцирована экзогенной нуклеиновой кислотой. Клетка включает в себя первичную рассматриваемую клетку и ее потомство.

Термин "специфически связывается" относится к антителу или лиганду, которые распознают своего белкового партнера по связыванию (например, стимулирующий опухолевый антиген), присутствующего в образце, и связываются с ним, но при этом эти антитело или лиганд практически не распознают или не связывают другие молекулы в образце.

Как используется в данном документе "резистентный" относится к заболеванию, например раку, которое не отвечает на лечение. В вариантах осуществления резистентный рак может быть устойчивым к лечению до или в начале лечения. В некоторых вариантах осуществления резистентный рак может стать устойчивым во время лечения. Резистентный рак также называют устойчивым раком.

Субъект "отвечает" на лечение, если параметр рака (например, гематологического рака, например, рост раковых клеток, пролиферация и/или выживаемость) у субъекта замедляется или снижается на выявляемое количество, например, на приблизительно 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или больше, как определяется любой подходящей мерой, например, массой, количеством клеток или объемом. В одном примере субъект отвечает на лечение, если продолжительность жизни субъекта увеличивается на приблизительно 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50% или больше по сравнению с прогнозируемой продолжительностью жизни, если лечение не проводится. В другом примере субъект отвечает на лечение, если субъект характеризуется увеличенной безрецидивной выживаемостью, общей выживаемостью или увеличенным временем до прогрессирования. Для определения того, отвечает ли пациент на лечение, могут применяться несколько способов, в том числе, например, критерии, представленные в Руководстве NCCN по клинической практике в онкологии (NCCN Guidelines^®). Например, применительно к B-ALL полный ответ или пациент с полным ответом может предусматривать одно или несколько из следующего: <5% бластных клеток в BM, >1000 нейтрофилов/ANC (/мкл), >100000 тромбоцитов (/мкл) без циркулирующих бластных клеток или экстрамедуллярного заболевания (без лимфаденопатии, спленомегалии, инфильтрации кожи/десен/тестикулярной массы/вовлечения ЦНС), трехлинейный гематопоэз и отсутствие рецидивов в течение 4 недель. Пациент с частичным ответом может предусматривать одно или несколько из >50% снижения количества бластных клеток в BM, >1000 нейтрофилов/ANC (/мкл), >100000 тромбоцитов (/мкл). Пациент, не отвечающий на лечение, может демонстрировать прогрессирование заболевания, например, >25% бластных клеток в BM. В варианте осуществления пациента с полным ответом определяют при наличии 7% или больше CD45RO-клеток CD27+ в популяции CD8+. В варианте осуществления процент клеток CAR+ на уровнях до сбора отличает пациентов с ответом (например, пациентов с полным ответом и пациентов с частичным ответом) от пациентов без ответа (NR).

Используемый в данном документе термин "рецидив" относится к повторному появлению рака после начального периода восприимчивости (например, полного ответа или частичного ответа). Начальный период восприимчивости может предусматривать падение уровня раковых клеток ниже определенного порога, например, ниже 20%, 1%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, или 1%. Повторное появление может предусматривать возрастание уровня раковых клеток выше определенного порога, например, выше 20%, 1%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, или 1%. К примеру, например, применительно к B-ALL повторное появление может предусматривать, например, повторное появление бластных клеток в крови, костном мозге (> 5%) или любом экстрамедуллярном участке после достижения полного ответа. Полный ответ в данном контексте может предусматривать < 5% бластных клеток в BM. В более широком смысле в варианте осуществления ответ (например, полный ответ или частичный ответ) может предусматривать отсутствие выявляемого MRD (минимального остаточного заболевания). В варианте осуществления начальный период восприимчивости длится по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5 или 6 дней; по меньшей мере 1, 2, 3 или 4 недели; по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 или 12 месяцев или по меньшей мере 1, 2, 3, 4 или 5 лет.

"Регулируемый химерный антигенный рецептор (RCAR)", как этот термин используется в данном документе, относится к набору полипептидов, как правило, в простейших вариантах осуществления двух, которые, находясь в клетке RCARX, наделяют клетку RCARX специфичностью в отношении клетки-мишени, как правило раковой клетки, и регулируемым образованием внутриклеточного сигнала или пролиферацией, что может оптимизировать иммуноэффекторное свойство клетки RCARX. Клетка RCARX, по меньшей мере частично, зависит от антигенсвязывающего домена в обеспечении специфичности в отношении клетки-мишени, которая содержит антиген, связываемый антигенсвязывающим доменом. В варианте осуществления RCAR содержит димеризационный переключатель, который при наличии димеризующей молекулы может связывать внутриклеточный сигнальный домен с антигенсвязывающим доменом.

"Мембранный якорь" или "домен прикрепления к мембране", как этот термин используется в данном документе, относится к полипептиду или компоненту, например, к миристоильной группе, достаточному для заякоривания внеклеточного или внутриклеточного домена на плазматической мембране.

"Переключающий домен", как этот термин используется в данном документе, например, в отношении RCAR, относится к объекту, обычно полипептидному объекту, который в присутствии димеризующей молекулы ассоциирует с другим переключающим доменом. Ассоциация приводит к функциональной связи первого объекта, связанного, например слитого, с первым переключающим доменом, и второго объекта, связанного, например слитого, со вторым переключающим доменом. Первый и второй переключающие домены в совокупности называются димеризационным переключателем. В вариантах осуществления первый и второй переключающие домены являются одинаковыми, например, они являются полипептидами, имеющими одинаковую первичную аминокислотную последовательность, и в совокупности называются гомодимеризационным переключателем. В вариантах осуществления первый и второй переключающие домены отличаются друг от друга, например, они являются полипептидами, имеющими разные первичные аминокислотные последовательности, и в совокупности называются гетеродимеризационным переключателем. В вариантах осуществления переключатель является внутриклеточным. В вариантах осуществления переключатель является внеклеточным. В вариантах осуществления переключающий домен представляет собой полипептидный объект, например, объект на основе FKBP или FRB, а димеризующая молекула представляет собой малую молекулу, например рапалог. В вариантах осуществления переключающий домен представляет собой полипептидный объект, например, scFv, который связывает пептид myc, а димеризующая молекула представляет собой полипептид, его фрагмент или мультимер полипептида, например, лиганд myc или мультимеры лиганда myc, которые связываются с одним или несколькими scFv для myc. В вариантах осуществления переключающий домен представляет собой полипептидный объект, например, myc-рецептор, а димеризующая молекула представляет собой антитело или его фрагменты, например антитело к myc.

"Димеризующая молекула", как этот термин используется в данном документе, например, в отношении RCAR, относится к молекуле, которая способствует ассоциации первого переключающего домена со вторым переключающим доменом. В вариантах осуществления димеризующая молекула не встречается у субъекта в природе или не встречается в концентрациях, которые могут привести к значительной димеризации. В вариантах осуществления димеризующая молекула представляет собой малую молекулу, например, рапамицин или рапалог, например, RAD001.

Термин "биоэквивалент" относится к количеству средства, отличного от эталонного соединения (например, RAD001), необходимого для получения эффекта, эквивалентного эффекту, вызываемому эталонной дозой или эталонным количеством эталонного соединения (например, RAD001). В варианте осуществления эффект представляет собой уровень ингибирования mTOR, например, измеряемый по ингибированию киназы P70-S6, например, оцениваемому в анализе in vivo или in vitro, например, измеряемому с помощью анализа, описанного в данном документе, например анализа по Boulay, или измеряемый по уровням фосфорилированного S6 с помощью вестерн-блоттинга. В варианте осуществления эффект представляет собой изменение соотношения PD-1-положительных/PD-1-отрицательных T-клеток, измеряемого с помощью сортировки клеток. В варианте осуществления биоэквивалентное количество или доза ингибитора mTOR представляют собой количество или дозу, которые достигают того же уровня ингибирования киназы P70-S6, что и эталонная доза или эталонное количество эталонного соединения. В варианте осуществления биоэквивалентное количество или доза ингибитора mTOR представляет собой количество или дозу, которые достигают того же уровня изменения соотношения PD-1-положительных/PD-1-отрицательных T-клеток, что и эталонная доза или эталонное количество эталонного соединения.

Термин "низкая доза, усиливающая иммунный ответ" при использовании в отношении ингибитора mTOR, например, аллостерического ингибитора mTOR, например, RAD001 или рапамицина, или каталитического ингибитора mTOR, относится к дозе ингибитора mTOR, которая частично, но не полностью, ингибирует активность mTOR, например, измеряемую по ингибированию активности киназы P70-S6. Способы оценивания активности mTOR, например, по ингибированию киназы P70-S6, обсуждаются в данном документе. Доза является недостаточной, чтобы вызвать полное подавление иммунитета, но достаточной для усиления иммунного ответа. В варианте осуществления низкая доза, усиливающая иммунный ответ, ингибитора mTOR приводит к уменьшению количества PD-1-положительных Т-клеток и/или увеличению количества PD-1-отрицательных Т-клеток или увеличению соотношения PD-1-отрицательные Т-клетки/PD-1-положительные Т-клетки. В варианте осуществления низкая доза, усиливающая иммунный ответ, ингибитора mTOR приводит к увеличению количества наивных Т-клеток. В варианте осуществления низкая доза, усиливающая иммунный ответ, ингибитора mTOR приводит к одному или нескольким из следующего:

увеличению экспрессии одного или нескольких из следующих маркеров: CD62L^{высокий}, CD127^{высокий}, CD27⁺ и BCL2, например, на Т-клетках памяти, например, предшественниках Т-клеток памяти;

уменьшению экспрессии KLRG1, например, на Т-клетках памяти, например, предшественниках Т-клеток памяти; и

увеличению количества предшественников Т-клеток памяти, например, клеток с любой из следующих характеристик или их комбинацией: увеличенным уровнем CD62L^{высокий}, увеличенным уровнем CD127^{высокий}, увеличенным уровнем CD27⁺, уменьшенным уровнем KLRG1 и увеличенным уровнем BCL2;

где любое из изменений, описанных выше, происходит, например, по меньшей мере временно, например, по сравнению с субъектом, не получающим лечение.

Диапазоны: во всем настоящем раскрытии различные аспекты настоящего изобретения могут быть представлены в формате диапазонов. Следует понимать, что описание в формате диапазонов служит лишь для удобства и краткости и не должно рассматриваться как жесткое ограничение объема настоящего изобретения. Соответственно, описание диапазона следует рассматривать как конкретно раскрывающее все возможные поддиапазоны, а также отдельные числовые значения в пределах этого диапазона. Например, описание диапазона, такого как от 1 до 6, следует рассматривать как конкретно раскрывающее поддиапазоны, такие как от 1 до 3, от 1 до 4, от 1 до 5, от 2 до 4, от 2 до 6, от 3 до 6 и т. д., а также отдельные числа в данном диапазоне, например, 1, 2, 2,7, 3, 4, 5, 5,3, и 6. В качестве другого примера, диапазон, такой как 95-99% идентичность, включает что-либо с 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью, а также включает поддиапазоны, такие как 96-99%, 96-98%, 96-97%, 97-99%, 97-98% и 98-99% идентичность. Это применимо независимо от ширины диапазона.

Подробное описание

В данном документе представлены композиции и способы применения для лечения или предупреждения заболевания, такого как рак, с применением CD20 и/или химерных антигенных рецепторов (CAR).

В одном аспекте настоящее изобретение относится к ряду химерных антигенных рецепторов (CAR), содержащих антитело или фрагмент антитела, сконструированных для специфичного связывания с белком CD20, или белком CD22, или их фрагментами. В одном аспекте настоящее изобретение относится к клетке (например, T-клетке или NK-клетке), сконструированной для экспрессии CAR, где клетка (например, "CART") проявляет противоопухолевое свойство. В одном аспекте клетку трансформируют с помощью CAR, и по меньшей мере часть CAR экспрессируется на поверхности клетки. В некоторых вариантах осуществления клетку (например, T-клетку или NK-клетку) трансдуцируют вирусным вектором, кодирующим CAR. В некоторых вариантах осуществления вирусный вектор представляет собой ретровирусный вектор. В некоторых вариантах осуществления вирусный вектор представляет собой лентивирусный вектор. В некоторых таких вариантах осуществления клетка может стабильно экспрессировать CAR. В другом варианте осуществления клетку (например, T-клетку или NK-клетку) трансфицируют нуклеиновой кислотой, например, mRNA, кДНК, ДНК, кодирующей CAR. В некоторых таких вариантах осуществления клетка может временно экспрессировать CAR.

В одном аспекте CD20- или CD22-связывающий домен CAR, например, мышиный, человеческий или гуманизированный CD20-связывающий домен, представляет собой scFv фрагмент антитела. В одном аспекте такие фрагменты антител являются функциональными в том смысле, что они сохраняют эквивалентную аффинность связывания, например, они связывают тот же самый антиген с сопоставимой эффективностью, что и антитело IgG, содержащее те же вариабельные области тяжелой и легкой цепей. В одном аспекте такие фрагменты антитела являются функциональными в том смысле, что они обеспечивают биологический ответ, который может включать без ограничения активацию иммунного ответа, ингибирование начала передачи сигнала от их целевого антигена, ингибирование активности киназы и т. п., как будет понятно специалисту в данной области техники.

В некоторых аспектах антитела по настоящему изобретению включены в химерный антигенный рецептор (CAR). В одном аспекте CAR содержит полипептидную последовательность, представленную в данном документе в таблице 1.

В одном аспекте CD20- или CD22-связывающий домен, например, мышиный, гуманизированный или человеческий CD20- или CD22-связывающий домен, часть CAR по настоящему изобретению кодируются трансгеном, последовательность которого была кодон-оптимизирована для экспрессии в клетке млекопитающего. В одном аспекте целая конструкция CAR по настоящему изобретению кодируется трансгеном, целая последовательность которого была кодон-оптимизирована для экспрессии в клетке млекопитающего. Оптимизация кодонов относится к открытию того, что частота встречаемости синонимичных кодонов (т. е. кодонов, кодирующих одну и ту же аминокислоту) в кодирующей ДНК смещается у разных видов. Такая вырожденность кодонов дает возможность кодировать идентичный полипептид с помощью различных последовательностей нуклеиновой кислоты. Из уровня техники известно множество способов оптимизации кодонов, и они включают, например, способы, раскрытые по меньшей мере в патентах США №№ 5786464 и 6114148.

В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит мышиное (например, крысы или мыши) антитело или фрагмент антитела. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит человеческое антитело или фрагмент антитела к CD20 или CD22. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит гуманизированное антитело или фрагмент антитела к CD20 или CD22. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит мышиный фрагмент антитела к CD20 или CD22, содержащий scFv. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит человеческий фрагмент антитела к CD20 или CD22, содержащий scFv. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR представляет собой человеческий scFv к CD20 или CD22. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит гуманизированный фрагмент антитела к CD20, содержащий scFv. В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR представляет собой гуманизированный scFv к CD20 или CD22.

В одном аспекте связывающий домен CAR20 содержит часть scFv, представленную под SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429.

В одном аспекте связывающий домен CAR22 содержит часть scFv, изложенную в таблице 6.

Кроме того, настоящее изобретение предусматривает композиции с CAR для CD20 или CAR для CD22 и их применение в лекарственных препаратах или способах лечения, среди прочих заболеваний, рака, или любого злокачественного новообразования, или аутоиммунных заболеваний, в которые вовлечены клетки или ткани, экспрессирующие CD20 или CD22.

В одном аспекте CAR по настоящему изобретению может применяться для устранения CD20-экспрессирующих или CD22-экспрессирующих нормальных клеток, что, таким образом, применимо для применения в качестве клеточной кондиционирующей терапии перед трансплантацией клеток. В одном аспекте CD20-экспрессирующая или CD22-экспрессирующая нормальная клетка представляет собой CD20-экспрессирующую или CD22-экспрессирующую экспрессирующую миелоидную клетку-предшественника, а клеточная трансплантация представляет собой трансплантацию стволовых клеток.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к клетке (например, T-клетке или NK-клетке), сконструированной для экспрессии химерного антигенного рецептора (например, CART) по настоящему изобретению, где клетка (например, "CART") проявляет противоопухолевое свойство. Следовательно, настоящее изобретение относится к CD20-CAR, который содержит CD20-связывающий домен, и/или к CD22-CAR, который содержит CD22-связывающий домен, и которые встроены в T-клетку или NK-клетку, а также к способам их применения для адоптивной терапии.

В одном аспекте CD20-CAR или CD22-CAR содержит по меньшей мере один внутриклеточный домен, например, описанный в данном документе, например, выбранный из группы сигнального домена CD137 (4-1BB), сигнального домена CD28, сигнального домена D3-дзета и любой их комбинации. В одном аспекте CD20-CAR или CD22-CAR содержит по меньшей мере один внутриклеточный сигнальный домен из одной или нескольких костимулирующих молекул, отличных от CD137 (4-1BB) или CD28.

Химерный антигенный рецептор (CAR)

Настоящее изобретение охватывает конструкцию рекомбинантной ДНК, содержащую последовательности, кодирующие CAR, где CAR содержит антигенсвязывающий домен (например, антитело, фрагмент антитела), который специфически связывается с CD20 и/или CD22 или его фрагментом, например CD20 или CD22 человека, где последовательность CD20- или CD22-связывающего домена (например, антитела или фрагмента антитела), например, является смежной с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей внутриклеточный сигнальный домен, и находится в той же рамке считывания, что и она. Внутриклеточный сигнальный домен может содержать костимулирующий сигнальный домен и/или первичный сигнальный домен, например, дзета-цепь. Костимулирующий сигнальный домен относится к части CAR, содержащей по меньшей мере часть внутриклеточного домена костимулирующей молекулы.

В определенных аспектах конструкция CAR по настоящему изобретению содержит scFv домен, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, где scFv может предшествовать необязательная лидерная последовательность, такая как представленная под SEQ ID NO: 797, и последующая необязательная шарнирная последовательность, такая как представленная под SEQ ID NO: 799 или SEQ ID NO: 814 или SEQ ID NO: 815, трансмембранная область, такая как представленная под SEQ ID NO: 801, внутриклеточный сигнальный домен, который включает в себя SEQ ID NO: 803 или SEQ ID NO: 804, и последовательность CD3-дзета, которая включает в себя SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, например, где домены являются смежными и находятся в одной и той же рамке считывания, образуя единый слитый белок. Также в настоящее изобретение включена последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид каждого из scFv-фрагментов, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402 и SEQ ID NO: 429.

В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CD20-связывающий домен, содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 268, SEQ ID NO: 295, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 349, SEQ ID NO: 376, SEQ ID NO: 403, и SEQ ID NO: 430. В варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CD20-связывающий домен, содержит последовательность, изложенную в таблице 1.

В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CD22-связывающий домен, содержит последовательность, изложенную в таблице 6.

Дополнительные варианты осуществления включают последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид из таблицы 1 и/или таблицы 6. Дополнительные варианты осуществления включают последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид из любой из таблицы 1 и/или таблицы 6 и каждый из доменов под SEQ ID NOs: 797, 799, 801, 803, 805, и необязательно 818.

В одном аспекте иллюстративные конструкции CD20CAR содержат необязательную лидерную последовательность, внеклеточный антигенсвязывающий домен, шарнирный участок, трансмембранный домен и внутриклеточный стимулирующий домен. В одном аспекте иллюстративная конструкция CD20CAR или CD22CAR содержит необязательную лидерную последовательность, внеклеточный антигенсвязывающий домен, шарнирный участок, трансмембранный домен, внутриклеточный костимулирующий домен и внутриклеточный стимулирующий домен.

В некоторых вариантах осуществления непроцессированные последовательности CAR для CD20 также представлены в данном документе в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления непроцессированные последовательности CAR для CD22 также представлены в данном документе в таблице 6.

Иллюстративная лидерная последовательность представлена под SEQ ID NO: 797. Иллюстративная последовательность шарнирного участка/спейсера представлена под SEQ ID NO: 799, или SEQ ID NO: 814, или SEQ ID NO: 816. Иллюстративная последовательность трансмембранного домена представлена под SEQ ID NO: 801. Иллюстративная последовательность внутриклеточного сигнального домена белка 4-1BB представлена под SEQ ID NO: 803. Иллюстративная последовательность внутриклеточного сигнального домена CD27 представлена под SEQ ID NO: 818. Иллюстративная последовательность домена CD3-дзета представлена под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807.

В одном аспекте настоящее изобретение охватывает конструкцию рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащую молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR, где молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CD20-связывающий домен, например, описанный в данном документе, например, которая является смежной с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей внутриклеточный сигнальный домен, и находится в одной и той же рамке считывания, что и она. В одном аспекте CD20-связывающий домен выбран из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429. В одном аспекте настоящее изобретение охватывает конструкцию рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащую молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR, где молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CD20-связывающий домен, например, где последовательность является смежной с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей внутриклеточный сигнальный домен, и находится в одной и той же рамке считывания, что и она. Иллюстративный внутриклеточный сигнальный домен, который может применяться в CAR, включает без ограничения один или несколько внутриклеточных сигнальных доменов, например, CD3-дзета, CD28, 4-1BB и т. п. В некоторых случаях CAR может содержать любую комбинацию из CD3-дзета, CD28, 4-1BB и т. п.

В одном аспекте последовательность нуклеиновой кислоты конструкции CAR по настоящему изобретению выбрана из одного или нескольких SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 268, SEQ ID NO: 295, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 349, SEQ ID NO: 376, SEQ ID NO: 403, и SEQ ID NO: 430. Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие требуемые молекулы, можно получить с применением рекомбинантных способов, известных из уровня техники, таких как, например, скрининг библиотек из клеток, экспрессирующих ген, путем получения гена из вектора, который, как известно, включает таковой, или путем непосредственного выделения из содержащих их клеток и тканей с применением стандартных методик. В качестве альтернативы, нуклеиновая кислота, представляющая интерес, может быть получена синтетическим путем, а не клонирована.

Настоящее изобретение охватывает ретровирусные и лентивирусные векторные конструкции, экспрессирующие CAR, которые можно вводить путем прямой трансдукции в клетку.

Настоящее изобретение также охватывает РНК-конструкцию, которую можно вводить путем прямой трансфекции в клетку. Способ создания mRNA для применения в трансфекции предусматривает транскрипцию in vitro (IVT) матрицы с использованием специально разработанных праймеров с последующим добавлением полиА с получением конструкции, содержащей 3'- и 5'-нетранслируемые последовательности ("UTR"), 5'-кэп и/или внутренний участок посадки рибосомы (IRES), нуклеиновую кислоту, которая должна экспрессироваться, и полиA-хвост, обычно длиной 50-2000 оснований. С помощью РНК, полученной таким образом, можно эффективно трансфицировать различные типы клеток. В одном варианте осуществления матрица содержит последовательности для CAR. В варианте осуществления вектор на основе РНК CAR вводят путем трансдукции в Т-клетку с помощью электропорации.

Антигенсвязывающий домен

В одном аспекте CAR по настоящему изобретению содержит мишень-специфичный связывающий элемент, иначе называемый антигенсвязывающим доменом. Выбор компонента зависит от типа и количества лигандов, которые определяют поверхность клетки-мишени. Например, антигенсвязывающий домен может быть выбран таким образом, чтобы он распознавал лиганд, который выступает в качестве маркера клеточной поверхности на клетках-мишенях, ассоциированных с конкретным болезненным состоянием.

В одном аспекте CAR-опосредованный T-клеточный ответ может быть направлен на антиген, представляющий интерес, посредством конструирования в CAR антигенсвязывающего домена, который специфически связывает требуемый антиген.

В одном аспекте часть CAR, содержащая антигенсвязывающий домен, содержит антигенсвязывающий домен, который нацеливается на CD20 или его фрагмент. В одном аспекте антигенсвязывающий домен нацеливается на CD20 человека или его фрагмент.

В одном аспекте часть CAR, содержащая антигенсвязывающий домен, содержит антигенсвязывающий домен, который нацеливается на CD22 или его фрагмент. В одном аспекте антигенсвязывающий домен нацеливается на CD22 человека или его фрагмент.

Антигенсвязывающий домен может представлять собой любой домен, который связывается с антигеном, в том числе без ограничения моноклональное антитело, поликлональное антитело, рекомбинантное антитело, антитело мыши, антитело человека, гуманизированное антитело и их функциональный фрагмент, в том числе без ограничения однодоменное антитело, такое как вариабельный домен тяжелой цепи (VH), вариабельный домен легкой цепи (VL) и вариабельный домен (VHH) нанотела, полученного от верблюдовых, а также альтернативную каркасную структуру, которая, как известно из уровня техники, функционирует в качестве антигенсвязывающего домена, такую как рекомбинантный фибронектиновый домен, и т. п. В некоторых случаях целесообразно, чтобы антигенсвязывающий домен был получен из того же вида, в организме которого в конечном итоге будет применяться CAR. Например, для применения у людей может быть целесообразно, чтобы антигенсвязывающий домен CAR содержал человеческие или гуманизированные остатки в антигенсвязывающем домене антитела или фрагмента антитела.

В некоторых случаях целесообразно, чтобы антигенсвязывающий домен был получен из того же вида, в организме которого в конечном итоге будет применяться CAR. Например, для применения у людей может быть целесообразно, чтобы антигенсвязывающий домен CAR содержал человеческие или гуманизированные остатки в антигенсвязывающем домене антитела или фрагмента антитела. Таким образом, в одном аспекте антигенсвязывающий домен включает в себя антитело человека или фрагмент антитела.

В других случаях антигенсвязывающий домен получают из вида (например, мышиных), отличающегося от того, в котором в конечном итоге будет применяться CAR (например, человека).

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит одну или несколько (например, все три) из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (LCDR1), определяющей комплементарность области 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющей комплементарность области 3 легкой цепи (LCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, и/или одну или несколько (например, все три) из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, например, CD20-связывающего домена, содержащего одну или несколько, например все три, LCDR и одну или несколько, например все три, HCDR. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит одну или несколько (например, все три) из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющей комплементарность области 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (HCDR3) CD20-связывающего домена, описанного в данном документе, например, CD20-связывающий домен имеет две вариабельные области тяжелой цепи, при этом каждая содержит HCDR1, HCDR2 и HCDR3, описанные в данном документе.

В одном варианте осуществления LCDR1, LCDR2 и/или LCDR3 содержат (или состоят из) аминокислотной последовательности, включенной в таблицу 3. В одном варианте осуществления HCDR1, HCDR2 и/или HCDR3 содержат (или состоят из) аминокислотной последовательности, включенной в таблицу 2.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 5), и/или вариабельную область тяжелой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 4). В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи, описанную в данном документе (например, в таблице 4), например, по меньшей мере две вариабельные области тяжелой цепи, описанные в данном документе (например, в таблице 4). В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой scFv, содержащий легкую цепь и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью из таблицы 1. В варианте осуществления CD20-связывающий домен (например, scFv) содержит: вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области легкой цепи, представленной в таблице 5, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью из таблицы 5; и/или вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации (например, замены), но не более 30, 20 или 10 модификаций (например, замен), аминокислотной последовательности вариабельной области тяжелой цепи, представленной в таблице 4, или последовательность с 95-99% идентичностью с аминокислотной последовательностью из таблицы 4. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой scFv, и вариабельная область легкой цепи, содержащая аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например в таблице 5, присоединена к вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, описанную в данном документе, например в таблице 4, посредством линкера, например линкера, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен включает в себя линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6, предпочтительно 3 или 4 (SEQ ID NO: 23). Вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи scFv могут находиться, например, в любой из следующих ориентаций: вариабельная область легкой цепи-линкер-вариабельная область тяжелой цепи или вариабельная область тяжелой цепи-линкер-вариабельная область легкой цепи.

Гуманизированное антитело можно получить с помощью различных методик, известных из уровня техники, в том числе без ограничения пересадки CDR (см., например, европейский патент № EP 239400; международную публикацию № WO 91/09967 и патенты США №№ 5225539, 5530101 и 5585089, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте), венирования или изменения поверхности (см., например, европейские патенты №№ EP 592106 и EP 519596; Padlan, 1991, Molecular Immunology, 28(4/5):489-498; Studnicka et al., 1994, Protein Engineering, 7(6):805-814 и Roguska et al., 1994, PNAS, 91:969-973, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте), перетасовки цепей (см., например, патент США № 5565332, включенный в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте) и методик, раскрытых, например, в публикации заявки на патент США № US2005/0042664, публикации заявки на патент США № US2005/0048617, патенте США № 6407213, патенте США № 5766886, международной публикации № WO 9317105, Tan et al., J. Immunol., 169:1119-25 (2002), Caldas et al., Protein Eng., 13(5):353-60 (2000), Morea et al., Methods, 20(3):267-79 (2000), Baca et al., J. Biol. Chem., 272(16):10678-84 (1997), Roguska et al., Protein Eng., 9(10):895-904 (1996), Couto et al., Cancer Res., 55 (23 Supp):5973s-5977s (1995), Couto et al., Cancer Res., 55(8):1717-22 (1995), Sandhu J S, Gene, 150(2):409-10 (1994) и Pedersen et al., J. Mol. Biol., 235(3):959-73 (1994), каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Часто каркасные остатки в каркасных областях будут заменены соответствующим остатком из CDR донорного антитела для изменения, например, улучшения связывания антигена. Эти замены в каркасных областях идентифицируют с помощью способов, хорошо известных из уровня техники, например, путем моделирования взаимодействий CDR и каркасных остатков с идентификацией каркасных остатков, важных для связывания с антигеном, и сравнения последовательностей с идентификацией необычных каркасных остатков в конкретных положениях. (См., например, Queen et al., патент США № 5585089 и Riechmann et al., 1988, Nature, 332:323, которые включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте).

Гуманизированные антитело или фрагмент антитела содержат один или несколько аминокислотных остатков, оставшихся в них из источника, отличного от человеческого. Такие отличные от человеческих аминокислотные остатки часто называют "импортированными" остатками, которые обычно взяты из "импортированного" вариабельного домена. Как предусмотрено в данном документе, гуманизированные антитела или фрагменты антител содержат одну или несколько CDR из молекул иммуноглобулина, отличных от человеческих, и каркасные области, где аминокислотные остатки, составляющие каркас, получены полностью или по большей части из зародышевой линии человека. Множество методик гуманизации антител или фрагментов антител хорошо известны из уровня техники, и их, по сути, можно выполнять в соответствии со способом Winter и коллег (Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988)) путем замены CDR или последовательностей CDR грызунов соответствующими последовательностями антитела человека, т. е. посредством прививки CDR (ЕР 239400; публикация согласно РСТ № WO 91/09967 и патенты США №№ 4816567; 6331415; 5225539; 5530101; 5585089; 6548640, содержание каждого из которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В таких гуманизированных антителах и фрагментах антител значительно меньшая часть, чем интактный вариабельный домен человека, была заменена соответствующей последовательностью из вида, отличного от человека. Гуманизированные антитела часто представляют собой антитела человека, в которых некоторые остатки CDR и, возможно, некоторые остатки каркасной области (FR) заменены остатками из аналогичных участков в антителах грызунов. Гуманизация антител и фрагментов антител также может быть достигнута посредством венирования или изменения поверхности (ЕР 592106; ЕР 519596; Padlan, 1991, Molecular Immunology, 28 (4/5):489-498; Studnicka et al., Protein Engineering, 7(6):805-814 (1994) и Roguska et al., PNAS, 91:969-973 (1994)) или перетасовки цепей (патент США № 5565332), содержание которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Выбор вариабельных доменов человека как легкой, так и тяжелой цепи для использования при создании гуманизированных антител необходим для снижения антигенности. В соответствии с так называемым способом "наилучшего соответствия" последовательность вариабельного домена антитела грызуна подвергают скринингу по всей библиотеке известных последовательностей вариабельных доменов человека. Последовательность человека, которая является наиболее близкой к последовательности грызуна, затем принимают в качестве каркасной области человека (FR) для гуманизированного антитела (Sims et al., J. Immunol., 151:2296 (1993); Chothia et al., J. Mol. Biol., 196:901 (1987), содержание которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В другом способе применяют конкретную каркасную область, полученную из консенсусной последовательности всех антител человека из определенной подгруппы легких или тяжелых цепей. Одну и ту же каркасную область можно использовать для нескольких различных гуманизированных антител (см., например, Nicholson et al. Mol. Immun. 34 (16-17): 1157-1165 (1997); Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol., 151:2623 (1993), содержание которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). В одном варианте осуществления каркасная область может содержать одну, две, три, четыре или пять модификаций, например замен, например аминокислот, в соответствующей последовательности мыши.

В некоторых аспектах часть композиции CAR по настоящему изобретению, которая предусматривает фрагмент антитела, является гуманизированной с сохранением высокой аффинности в отношении целевого антигена и других благоприятных биологических свойств. В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения гуманизированные антитела и фрагменты антител получают с помощью способа, предусматривающего анализ исходных последовательностей и продуктов, гуманизированных различными подходами, с применением трехмерных моделей исходных и гуманизированных последовательностей. Трехмерные модели иммуноглобулинов являются общедоступными и известны специалистам в данной области техники. Доступны компьютерные программы, в которых иллюстрируются и отображаются возможные трехмерные конформационные структуры выбранных кандидатных последовательностей иммуноглобулинов. Рассмотрение этих изображений позволяет проанализировать вероятную роль остатков в функционировании кандидатной последовательности иммуноглобулина, например, проанализировать остатки, которые влияют на способность кандидатного иммуноглобулина связывать целевой антиген. Таким образом, остатки FR можно выбирать и комбинировать из реципиентной и импортированной последовательностей таким образом, чтобы обеспечивались требуемые характеристики антитела или фрагмента антитела, такие как повышенная аффинность к целевому антигену. В целом, остатки CDR непосредственно и в наиболее значительной степени участвуют во влиянии на связывание с антигеном.

Гуманизированное антитело или фрагмент антитела могут сохранять антигенную специфичность, сходную со специфичностью исходного антитела, например, в настоящем изобретении, способность связывать CD20 человека или его фрагмент. В некоторых вариантах осуществления гуманизированное антитело или фрагмент антитела могут иметь улучшенную аффинность и/или специфичность связывания с CD20 человека или его фрагментом.

В одном аспекте часть антигенсвязывающего домена содержит одну или несколько последовательностей, выбранных из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429. В одном аспекте CD20-связывающий домен характеризуется конкретными функциональными особенностями или свойствами антитела или фрагмента антитела. Например, в одном аспекте часть композиции CAR по настоящему изобретению, которая содержит антигенсвязывающий домен, специфически связывает CD20 человека или его фрагмент. В одном аспекте настоящее изобретение относится к антигенсвязывающему домену, содержащему антитело или фрагмент антитела, где связывающий домен антитела специфически связывается с белком CD20 или его фрагментом, где антитело или фрагмент антитела содержит вариабельную легкую цепь и/или вариабельные тяжелую цепь, которая включает в себя аминокислотную последовательность, выбранную из таблицы 1. В одном аспекте антигенсвязывающий домен содержит аминокислотную последовательность scFv, выбранную из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429. В некоторых аспектах scFv является смежным с лидерной последовательностью и находится в той же рамке считывания, что и она. В одном аспекте лидерная последовательность представляет собой полипептидную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 797.

В одном аспекте CD20-связывающий домен представляет собой фрагмент, например, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv). В одном аспекте CD20-связывающий домен представляет собой Fv, Fab, (Fab')2 или бифункциональное (например, биспецифическое) гибридное антитело (например, Lanzavecchia et al., Eur. J. Immunol. 17, 105 (1987)). В одном аспекте антитела и их фрагменты по настоящему изобретению связывают белок CD20 или его часть с аффинностью дикого типа или усиленной аффинностью.

В некоторых случаях scFv человека может быть получен из дисплейной библиотеки. Дисплейная библиотека представляет собой коллекцию объектов; при этом каждый объект включает в себя доступный полипептидный компонент и восстанавливаемый компонент, который кодирует или идентифицирует полипептидный компонент. Полипептидный компонент варьирует так, что представлены разные аминокислотные последовательности. Полипептидный компонент может иметь любую длину, например, от трех аминокислот до более 300 аминокислот. Объект дисплейной библиотеки может включать в себя более чем один полипептидный компонент, например две полипептидные цепи Fab. В одном примере осуществления дисплейная библиотека может применяться для идентификации CD20-связывающего домена человека. При выборе, полипептидный компонент каждого члена библиотеки зондируется CD20 или его фрагментом, и если полипептидный компонент связывается с CD20, то член дисплейной библиотеки идентифицируется, как правило, путем удерживания на подложке.

Удерживаемые члены дисплейной библиотеки извлекаются из подложки и анализируются. Анализ может включать в себя амплификацию и последующий отбор в аналогичных или отличающихся условиях. Например, положительные и отрицательные отборы могут чередоваться. Анализ может также включать определение аминокислотной последовательности полипептидного компонента, т. е. CD20-связывающего домена, и очистку полипептидного компонента для подробной характеризации.

Для дисплейных библиотек могут применяться разнообразные форматы. Примеры включают фаговый дисплей. В фаговой библиотеке белковый компонент, как правило, ковалентно связывается с белком оболочки бактериофага. Связывание является результатом трансляции нуклеиновой кислоты, кодирующей белковый компонент, слитый с белком оболочки. Связывание может включать в себя гибкий пептидный линкер, сайт протеазы или аминокислоту, включенную в результате подавления стоп-кодона. Фаговая библиотека описана, например, в патенте США № 5223409; Smith (1985) Science 228:1315-1317; WO 92/18619; WO 91/17271; WO 92/20791; WO 92/15679; WO 93/01288; WO 92/01047; WO 92/09690; WO 90/02809; de Haard et al. (1999) J. Biol. Chem 274:18218-30; Hoogenboom et al. (1998) Immunotechnology 4:1-20; Hoogenboom et al. (2000) Immunol Today 2:371-8 и Hoet et al. (2005) Nat Biotechnol. 23(3)344-8. Бактериофаг, представляющий белковый компонент, может быть выращен и собран с использованием стандартных способов получения фагов, например, осаждения с помощью PEG из ростовой среды. После отбора отдельных фаговых дисплеев нуклеиновая кислота, кодирующая отобранные белковые компоненты, может быть выделена из клеток, инфицированных отобранными фагами, или из самого фага после амплификации. Отдельные колонии или бляшки могут быть собраны, нуклеиновая кислота выделена и секвенирована.

Другие форматы дисплея включают клеточный дисплей (см., например, WO 03/029456), слияния белок-нуклеиновая кислота (см., например, US 6,207,446), рибосомный дисплей (см., например, Mattheakis et al. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:9022; и Hanes et al. (2000) Nat Biotechnol. 18:1287-92; Hanes et al. (2000) Methods Enzymol. 328:404-30; и Schaffitzel et al. (1999) J Immunol Methods. 231(1-2):119-35) и дисплей периплазмы E. coli (2005 Nov 22; PMID: 16337958).

В некоторых случаях scFv можно получить в соответствии со способом, известным из уровня техники (см., например, Bird et al., (1988) Science 242:423-426 и Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Молекулы scFv можно получить путем связывания VH- и VL-областей друг с другом с помощью гибких полипептидных линкеров. Молекулы scFv содержат линкер (например, линкер Ser-Gly) с оптимизированными длиной и/или аминокислотным составом. Длина линкера может сильно влиять на то, как вариабельные области scFv сворачиваются и взаимодействуют. В действительности, если используют короткий полипептидный линкер (например, 5-10 аминокислот), то внутрицепочечное сворачивание предотвращается. Межцепочечное сворачивание также необходимо для объединения двух вариабельных областей с образованием функционального эпитопсвязывающего участка. Примеры ориентации и размера линкеров см., например, в Hollinger et al. 1993 Proc Natl Acad. Sci. U.S.A. 90:6444-6448, публикациях заявок на патент США №№ 2005/0100543, 2005/0175606, 2007/0014794 и публикациях согласно PCT №№ WO2006/020258 и WO2007/024715, включенных в данный документ посредством ссылки.

ScFv может содержать линкер по меньшей мере из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, или более аминокислотных остатков между его VL- и VH-областями. Линкерная последовательность может содержать любую встречающуюся в природе аминокислоту. В некоторых вариантах осуществления линкерная последовательность содержит аминокислоты глицин и серин. В другом варианте осуществления линкерная последовательность содержит группы глициновых и сериновых повторов, таких как (Gly₄Ser)n, где n представляет собой положительное целое число, равное или большее 1. В одном варианте осуществления линкер может представлять собой (Gly₄Ser)₄ (SEQ ID NO: 23) или (Gly₄Ser)₃(SEQ ID NO: 541). При изменении длины линкера может сохраняться или усиливаться активность, что приводит к улучшению эффективности в исследованиях активности.

Стабильность и мутации

Стабильность CD20-связывающего домена, например молекул scFv (например, растворимого scFv), могут быть оценены в сравнении с биофизическими свойствами (например, термической стабильностью) традиционной контрольной молекулы scFv или непроцессированного антитела. В одном варианте осуществления scFv человека характеризуется термической стабильностью, которая превышает на приблизительно 0,1, приблизительно 0,25, приблизительно 0,5, приблизительно 0,75, приблизительно 1, приблизительно 1,25, приблизительно 1,5, приблизительно 1,75, приблизительно 2, приблизительно 2,5, приблизительно 3, приблизительно 3,5, приблизительно 4, приблизительно 4,5, приблизительно 5, приблизительно 5,5, приблизительно 6, приблизительно 6,5, приблизительно 7, приблизительно 7,5, приблизительно 8, приблизительно 8,5, приблизительно 9, приблизительно 9,5, приблизительно 10 градусов, приблизительно 11 градусов, приблизительно 12 градусов, приблизительно 13 градусов, приблизительно 14 градусов или приблизительно 15 градусов Цельсия таковую контрольной связывающей молекулы (например, традиционной молекулы scFv) в описанных анализах.

Улучшенная термическая стабильность CD20-связывающего домена, например scFv, впоследствии придается всей конструкции CART20, что приводит к улучшению терапевтических свойств конструкции CART20. Термическая стабильность CD20-связывающего домена, например scFv, может быть улучшена по меньшей мере на приблизительно 2°C или 3°C по сравнению с традиционным антителом. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен, например scFv, характеризуется улучшенной на 1°C термической стабильностью по сравнению с традиционным антителом. В другом варианте осуществления CD20-связывающий домен, например scFv, характеризуется улучшенной на 2°C термической стабильностью по сравнению с традиционным антителом. В другом варианте осуществления scFv характеризуется улучшенной на 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15°C термической стабильностью по сравнению с традиционным антителом. Сравнения могут быть выполнены, например, между молекулами scFv, описанными в данном документе, и непроцессированными антителами. Термическая стабильность может быть измерена с использованием способов, известных из уровня техники. Например, в одном варианте осуществления может быть измерена Tm. Способы измерения Tm и другие способы определения стабильности белков обсуждаются более подробно ниже.

Мутации в scFv изменяют стабильность scFv и улучшают общую стабильность конструкции scFv и CART20. Стабильность мышиного, гуманизированного или человеческого scFv определяют с использованием параметров, таких как Tm, температура денатурации и температура агрегации.

В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен, например scFv, содержит по меньшей мере одну мутацию, так что мутантный scFv обеспечивает улучшенную стабильность конструкции CART20. В другом варианте осуществления CD20-связывающий домен, например scFv, содержит по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 мутаций, возникающих в результате процесса гуманизации, так что мутантный scFv обеспечивает улучшенную стабильность конструкции CART20.

Способы оценивания стабильности белков

Стабильность антигенсвязывающего домена может быть оценена с использованием, например, нижеописанных способов. Такие способы позволяют определить множественные тепловые конформационные переходы с разворачиванием, когда наименее стабильный домен либо разворачивается первым, либо ограничивает общий порог стабильности многодоменного элемента, который разворачивается совместно (например, многодоменный белок, который демонстрирует один конформационный переход с разворачиванием). Наименее стабильный домен может быть идентифицирован с помощью нескольких дополнительных способов. Мутагенез может быть выполнен для определения того, какой домен ограничивает общую стабильность. Кроме того, устойчивость к протеазам многодоменного белка может быть достигнута в условиях, когда известно, что наименее стабильный домен по своей природе разворачивается посредством DSC или других спектроскопических способов (Fontana, et al., (1997) Fold. Des., 2: R17-26; Dimasi et al. (2009) J. Mol. Biol. 393: 672-692). После идентификации наименее стабильного домена последовательность, кодирующая этот домен (или его часть), может применяться в способах в качестве тестовой последовательности.

a) Термическая стабильность

Термическую стабильность композиций можно анализировать с использованием рада неограничивающих биофизических или биохимических методик, известных из уровня техники. В определенных вариантах осуществления термическую стабильность оценивают аналитической спектроскопией.

Иллюстративным способом аналитической спектроскопии является дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC). При DSC используют калориметр, который чувствителен к тепловому поглощению, которое сопровождает развертывание большинства белков или белковых доменов (см., например Sanchez-Ruiz, et al., Biochemistry, 27: 1648-52, 1988). Для определения термической стабильности белка образец белка вставляют в калориметр и температуру повышают до тех пор, пока Fab или scFv не развернется. Температура, при которой белок разворачивается, указывает на общую стабильность белка.

Другим примером способа аналитической спектроскопии является спектроскопия кругового дихроизма (CD). CD-спектрометрия измеряет оптическую активность композиции как функцию повышения температуры. Спектроскопия кругового дихроизма (CD) измеряет различия в поглощении левостороннего поляризованного света и правостороннего поляризованного света, которые возникают из-за структурной асимметрии. Разупорядоченная или развернутая структура приводит к тому, что спектр CD очень отличается от спектра упорядоченной или свернутой структуры. Спектр CD отражает чувствительность белков к денатурирующим эффектам повышения температуры, а следовательно указывает на термическую стабильность белка (см. van Mierlo and Steemsma, J. Biotechnol., 79(3):281-98, 2000).

Другим типичным аналитическим способом спектроскопии для измерения термической стабильности является флуоресцентная эмиссионная спектроскопия (см. van Mierlo and Steemsma, выше). Еще одним типичным аналитическим способом спектроскопии для измерения термической стабильности является спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (см., например, van Mierlo and Steemsma, выше).

Термическая стабильность композиции может быть измерена биохимически. Типичным биохимическим способом для оценивания термической стабильности является анализ термической проверки. В ходе "анализа термической проверки" композицию изобретения помещают в условия повышенной температуры на заданный период времени. Например, в соответствии с одним вариантом осуществления исследуемые молекулы scFv или молекулы, включающие молекулы scFv, подвергают действию повышенной температуры, например в течение 1-1,5 часа. Затем активность белка анализируют подходящим биохимическим анализом. Например, если белок представляет собой связывающий белок (например, scFv или scFv-содержащий полипептид), то активность связывания связывающего белка можно определить с помощью функционального или количественного ELISA.

Такой анализ можно выполнять в формате высокопроизводительного скрининга и методов, раскрытых в примерах с использованием E. coli и высокопроизводительного скрининга. Библиотеку CD20-связывающих доменов, например вариантов scFv, можно создать с использованием известных из уровня техники способов. Экспрессию CD20-связывающих доменов, например scFv, можно индуцировать, и CD20-связывающие домены, например scFv, можно подвергнуть термической проверке. Образцы проверочного тестирования можно анализировать на связывание, а те CD20-связывающие домены, например scFv, которые являются стабильными, можно масштабировать и характеризовать дополнительно.

Термическую стабильность оценивают путем измерения температуры плавления (Tm) композиции с использованием любой из вышеупомянутых методик (например, методик аналитической спектроскопии). Температура плавления представляет собой температуру средней точки на кривой температурного перехода, где 50% молекул композиции находится в свернутом состоянии (см., например, Dimasi et al. (2009) J. Mol Biol. 393: 672-692). В одном варианте осуществления значения Tm для CD20-связывающего домена, например scFv, составляют приблизительно 40°C, 41°C, 42°C, 43°C, 44°C, 45°C, 46°C, 47°C, 48°C, 49°C, 50°C, 51°C, 52°C, 53°C, 54°C, 55°C, 56°C, 57°C, 58°C, 59°C, 60°C, 61°C, 62°C, 63°C, 64°C, 65°C, 66°C, 67°C, 68°C, 69°C, 70°C, 71°C, 72°C, 73°C, 74°C, 75°C, 76°C, 77°C, 78°C, 79°C, 80°C, 81°C, 82°C, 83°C, 84°C, 85°C, 86°C, 87°C, 88°C, 89°C, 90°C, 91°C, 92°C, 93°C, 94°C, 95°C, 96°C, 97°C, 98°C, 99°C, 100°C. В одном варианте осуществления значения Tm для IgG составляют приблизительно 40°C, 41°C, 42°C, 43°C, 44°C, 45°C, 46°C, 47°C, 48°C, 49°C, 50°C, 51°C, 52°C, 53°C, 54°C, 55°C, 56°C, 57°C, 58°C, 59°C, 60°C, 61°C, 62°C, 63°C, 64°C, 65°C, 66°C, 67°C, 68°C, 69°C, 70°C, 71°C, 72°C, 73°C, 74°C, 75°C, 76°C, 77°C, 78°C, 79°C, 80°C, 81°C, 82°C, 83°C, 84°C, 85°C, 86°C, 87°C, 88°C, 89°C, 90°C, 91°C, 92°C, 93°C, 94°C, 95°C, 96°C, 97°C, 98°C, 99°C, 100°C. В одном варианте осуществления значения Tm для поливалентного антитела составляют приблизительно 40°C, 41°C, 42°C, 43°C, 44°C, 45°C, 46°C, 47°C, 48°C, 49°C, 50°C, 51°C, 52°C, 53°C, 54°C, 55°C, 56°C, 57°C, 58°C, 59°C, 60°C, 61°C, 62°C, 63°C, 64°C, 65°C, 66°C, 67°C, 68°C, 69°C, 70°C, 71°C, 72°C, 73°C, 74°C, 75°C, 76°C, 77°C, 78°C, 79°C, 80°C, 81°C, 82°C, 83°C, 84°C, 85°C, 86°C, 87°C, 88°C, 89°C, 90°C, 91°C, 92°C, 93°C, 94°C, 95°C, 96°C, 97°C, 98°C, 99°C, 100°C.

Термическую стабильность также оценивают, измеряя специфичное тепло или теплоемкость (Ср) композиции с использованием аналитической калориметрической методики (например, DSC). Специфическое тепло композиции представляет собой энергию (например, выраженную в ккал/моль), требуемую для того, чтобы повысить на 1°С температуру 1 моль воды. Большое Ср является признаком денатурированной или неактивной белковой композиции. Изменение теплоемкости (ΔСр) композиции измеряют, определяя специфичное тепло композиции до и после термического перехода. Термическую стабильность также можно оценить, измеряя и определяя другие параметры термодинамической стабильности, включая свободную энергию Гиббса развертывания (ΔG), энтальпию развертывания (ΔН) или энтропию развертывания (ΔS). Один или несколько вышеописанных биохимических анализов (например, анализ термической проверки) применяют для определения температуры (т. е. значения T_C), при которой 50% композиции сохраняет свою активность (например, активность связывания).

Кроме того, мутации в CD20-связывающем домене, например scFv, изменяют термическую стабильность CD20-связывающего домена, например scFv, по сравнению с немутантным CD20-связывающим доменом, например scFv. При включении мышиного, гуманизированного или человеческого CD20-связывающего домена, например scFv, в конструкцию CART20, CD20-связывающий домен, например, мышиный, гуманизированный или человеческий scFv, обеспечивает термическую стабильность всей конструкции CD20 CART. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен, например scFv, содержит одну мутацию, обеспечивает термическую стабильность CD20-связывающего домена, например scFv. В другом варианте осуществления CD20-связывающий домен, например scFv, содержит множество мутаций, которые обеспечивают термическую стабильность CD20-связывающего домена, например scFv. В одном варианте осуществления множество мутаций в CD20-связывающем домене, например scFv, оказывают аддитивный эффект в отношении термической стабильности CD20-связывающего домена, например scFv.

b) % агрегации

Стабильность композиции может быть определена путем измерения ее склонности к агрегации. Агрегацию можно измерить посредством многих неограничивающих биохимических и биофизических методик. Например, агрегацию композиции можно оценить с использованием хроматографии, такой как эксклюзионная хроматография размеров (SEC). SEC разделяет молекулы на основании их размера. Колонку наполняют полутвердыми микрогранулами полимерного геля, который пропускает через себя ионы и небольшие молекулы, но задерживает большие. В случае если белковую композицию наносят на вершину колонки, - компактно свернутые белки (т. е. неагрегированные белки) распределяются в большем объеме растворителя, чем доступен для больших белковых агрегатов. Соответственно, большие агрегаты быстрее проходят через колонку, и таким способом смесь удается разделить или фракционировать на ее компоненты. Каждую фракцию можно оценить количественно (например, по рассеянию света) по мере ее выхода из геля. Соответственно, % агрегации композиции можно определить, сравнивая концентрацию фракции с общей концентрацией белка, нанесенного на гель. Стабильные композиции элюируются с колонки фактически в виде одной фракции и в профиле элюирования или хроматограмме выглядят в виде одного пика.

c) Аффинность связывания

Стабильность композиции можно оценить путем определения ее аффинности связывания с мишенью. Из уровня техники известно большое количество способов определения аффинности связывания. В типичном способе определения аффинности связывания используют поверхностный плазмонный резонанс. Поверхностный плазмонный резонанс представляет собой оптическое явление, позволяющее анализировать биоспецифические взаимодействия в режиме реального времени путем детекции изменения концентрации белков в биосенсорной матрице, например с помощью системы BIAcore (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden и Piscataway, N.J.). Дополнительную информацию см. в работах Jonsson, U., et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26; Jonsson, U., i (1991) Biotechniques 11:620-627; Johnsson, B., et al. (1995) J. Mol. Recognit. 8:125-131 и Johnnson, B., et al. (1991) Anal. Biochem. 198:268-277.

В одном аспекте антигенсвязывающий домен CAR содержит аминокислотную последовательность, которая гомологична аминокислотной последовательности антигенсвязывающего домена, описанной в данном документе, и при этом антигенсвязывающий домен сохраняет требуемые функциональные свойства фрагментов антитела к CD20, описанных в данном документе. В одном конкретном аспекте композиция CAR по настоящему изобретению содержит фрагмент антитела. В дополнительном аспекте фрагмент антитела предусматривает scFv.

В различных аспектах антигенсвязывающий домен CAR конструируют путем модификации одной или нескольких аминокислот в одной или обеих вариабельных областях (например, VH и/или VL), например, в одной или нескольких CDR-областях и/или в одной или нескольких каркасных областях. В одном конкретном аспекте композиция CAR по настоящему изобретению содержит фрагмент антитела. В дополнительном аспекте фрагмент антитела предусматривает scFv.

Специалисту обычной квалификации в данной в области техники будет понятно, что антитело или фрагмент антитела по настоящему изобретению могут быть дополнительно модифицированы таким образом, что они различаются по аминокислотной последовательности (например, от дикого типа), но не по требуемой активности. Например, дополнительные нуклеотидные замены, приводящие к аминокислотным заменам по "не являющимся незаменимыми" аминокислотным остаткам, могут быть выполнены для белка. Например, не являющийся незаменимым аминокислотный остаток в молекуле может быть заменен другим аминокислотным остатком из того же семейства боковых цепей. В другом варианте осуществления цепь аминокислот может быть замещена структурно подобной цепью, которая отличается по порядку и/или составу представителей семейства боковых цепей, например, может быть выполнена консервативная замена, при которой аминокислотный остаток замещается аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь.

В уровне техники были определены семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, в том числе аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислыми боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).

Процентная идентичность применительно к двум или более нуклеиновым кислотам или полипептидным последовательностям относится к двум или более последовательностям, которые являются одинаковыми. Две последовательности являются "практически идентичными", если две последовательности имеют определенную процентную долю аминокислотных остатков или нуклеотидов, которые являются одинаковыми (например, идентичными на 60%, необязательно идентичными на 70%, 71%. 72%. 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% в определенной области или, если не указано, во всей последовательности) при сравнении и выравнивании для достижения максимального соответствия в окне сравнения или указанной области, измеряемую с использованием одного из следующих алгоритмов сравнения последовательностей или с помощью выравнивания в ручном режиме и визуального осмотра. Необязательно, идентичность существует в области, которая имеет длину по меньшей мере приблизительно 50 нуклеотидов (или 10 аминокислот), или более предпочтительно в области, которая имеет длину 100-500 или 1000 или больше нуклеотидов (или 20, 50, 200 или больше аминокислот).

При сравнении последовательностей обычно одна последовательность выступает в качестве эталонной последовательности, с которой сравнивают тестируемые последовательности. При использовании алгоритма сравнения последовательностей тестируемую и эталонную последовательности вводят в компьютер, если необходимо, устанавливают координаты подпоследовательностей, и устанавливают программные параметры алгоритма для анализа последовательностей. Могут применяться программные параметры по умолчанию или можно устанавливать альтернативные параметры. Алгоритм сравнения последовательностей затем рассчитывает значения процентной идентичности последовательностей для тестируемых последовательностей по сравнению с эталонной последовательностью, исходя из программных параметров. Способы выравнивания последовательностей для сравнения хорошо известны из уровня техники. Оптимальное выравнивание последовательностей для сравнения можно проводить, например, с помощью алгоритма поиска локальной гомологии Смита-Уотермана, (1970) Adv. Appl. Math. 2:482c, с помощью алгоритма выравнивания областей гомологии Нидлмана-Вунша, (1970) J. Mol. Biol. 48:443, с помощью способа поиска сходства Пирсона-Липмана, (1988) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444, с помощью компьютерных реализаций этих алгоритмов (GAP, BESTFIT, FASTA и TFASTA в составе пакета программного обеспечения Wisconsin Genetics, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Мэдисон, Висконсин) или с помощью выравнивания в ручном режиме и визуального осмотра (см., например, Brent et al., (2003) Current Protocols in Molecular Biology).

Двумя примерами алгоритмов, которые являются подходящими для определения процентной идентичности последовательностей и сходства последовательностей, являются алгоритмы BLAST и BLAST 2.0, которые описаны соответственно в Altschul et al., (1977) Nuc. Acids Res. 25:3389-3402 и Altschul et al., (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410. Программное обеспечение для осуществления анализов BLAST является общедоступным от Национального центра биотехнологической информации.

Процентную идентичность между двумя аминокислотными последовательностями также можно определить с помощью алгоритма Миллера-Майерса, (1988) Comput. Appl. Biosci. 4:11-17, который был включен в программу ALIGN (версия 2.0), при использовании таблицы весов замен остатков PAM120, штрафа за продление гэпа 12 и штрафа за открытие гэпа 4. Кроме того, процентную идентичность между двумя аминокислотными последовательностями можно определить с помощью алгоритма Нидлмана-Вунша, (1970) J. Mol. Biol. 48:444-453, который был включен в программу GAP в составе пакета программного обеспечения GCG (доступного на www.gcg.com), с использованием либо матрицы Blossom 62, либо матрицы PAM250, а также штрафа за открытие гэпа, составляющего 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4, и штрафа за продление гэпа, составляющего 1, 2, 3, 4, 5 или 6.

В одном аспекте настоящее изобретение предусматривает модификации аминокислотной последовательности исходного антитела или фрагмента (например, scFv), в результате которых создаются функционально эквивалентные молекулы. Например, VH или VL CD20-связывающего домена, например scFv, содержащегося в CAR, можно модифицировать таким образом, чтобы она сохраняла по меньшей мере приблизительно 70%, 71%. 72%. 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%,81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% идентичность с исходной каркасной VH-областью или VL CD20-связывающего домена, например scFv. Настоящее изобретение предусматривает модификации всей конструкции CAR, например, модификации одной или нескольких аминокислотных последовательностей различных доменов конструкции CAR, для создания функционально эквивалентных молекул. Конструкцию CAR можно модифицировать таким образом, чтобы она сохраняла по меньшей мере приблизительно 70%, 71%. 72%. 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%,81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% идентичность исходной конструкции CAR.

Биспецифические CAR

В варианте осуществления молекула полиспецифического антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела. Биспецифическое антитело характеризуется специфичностью не более чем к двум антигенам. Молекула биспецифического антитела характеризуется первой последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, и второй последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например, на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются. В варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются. В варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на разных антигенах, например, на разных белках (или на разных субъединицах мультимерного белка). В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые характеризуются специфичностью связывания с первым эпитопом, и последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые характеризуются специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит полуантитело, характеризующееся специфичностью связывания с первым эпитопом, и полуантитело, характеризующееся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит полуантитело или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания с первым эпитопом, и полуантитело или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит scFv или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания с первым эпитопом, и scFv или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления первый эпитоп расположен на CD19, а второй эпитоп расположен на CD20, C22 или ROR1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела представляет собой молекулу полиспецифического (например, биспецифического или триспецифического) антитела. Протоколы для создания молекул биспецифического или гетеродимерного антител известны из уровня техники и включают без ограничения, например, подход "выступ во впадину", как описано, например, в US 5731168; спаривание Fc с использованием направленного электростатического взаимодействия, как описано, например, в WO 09/089004, WO 06/106905 и WO 2010/129304; образование гетеродимеров путем конструирования доменов с обменом нитей (SEED), как описано, например, в WO 07/110205; обмен Fab-фрагментами, как описано, например, в WO 08/119353, WO 2011/131746 и WO 2013/060867; двойные конъюгаты антител, например, получаемые путем сшивания антител с созданием биспецифической структуры с помощью гетеробифункционального реагента, содержащего реакционноспособную аминогруппу и реакционноспособную сульфгидрильную группу, как описано, например, в US 4433059; детерминанты биспецифических антител, создаваемые путем рекомбинации полуантител (пары тяжелая-легкая цепь или Fab) из разных антител посредством цикла восстановления и окисления дисульфидных связей между двумя тяжелыми цепями, как описано, например, в US 4444878; трифункциональные антитела, например, три Fab'-фрагмента, сшитые с помощью реакционноспособных сульфгидрильных групп, как описано, например, в US5273743; биосинтетические связывающие белки, например, пары scFv, сшитых на С-концевых хвостах, предпочтительно посредством химической сшивки посредством дисульфидных связей или реакционноспособных аминогрупп, как описано, например, в US5534254; бифункциональные антитела, например, Fab-фрагменты с различной специфичностью связывания, димеризованные с помощью лейциновых "застежек" (например, c-fos и c-jun), заменивших константный домен, как описано, например, в US5582996; биспецифические и олигоспецифические моно- и олиговалентные рецепторы, например, VH-CH1-области двух антител (два Fab-фрагмента), связанные полипептидным спейсером между CH1-областью одного антитела и VH-областью другого антитела, обычно с ассоциированными легкими цепями, как описано, например, в US5591828; биспецифические конъюгаты ДНК-антитело, например, получаемые путем сшивки антител или Fab-фрагментов двухнитевым фрагментом ДНК, как описано, например, в US5635602; биспецифические слитые белки, например, экспрессионную конструкцию, содержащую два scFv с гидрофильным спиральным пептидным линкером между ними и полной константной областью, как описано, например, в US5637481; поливалентные и полиспецифические связывающие белки, например, димер полипептидов, имеющий первый домен со связывающей областью вариабельной области тяжелой цепи Ig и второй домен со связывающей областью вариабельной области легкой цепи Ig, как правило называемые диателами (также охватываются структуры более высокого порядка для создания биспецифических, триспецифических или тетраспецифических молекул, как описано, например, в US5837242; конструкции миниантител со связанными VL- и VH-цепями, дополнительно соединенными пептидными спейсерами с шарнирной областью антитела и СН3-областью, которые могут быть димеризованы с образованием биспецифических/поливалентных молекул, как описано, например, в US5837821; VH- и VL-домены, связанные коротким пептидным линкером (например, из 5 или 10 аминокислот) или вовсе не имеющие линкера, в любой ориентации, которые могут образовывать димеры с образованием биспецифических диател; тримеры и тетрамеры, как описано, например, в US5844094; нить из VH-доменов (или VL-доменов у представителей семейства), соединенных пептидными связями со сшиваемыми группами на С-конце, дополнительно ассоциированных с VL-доменами с образованием последовательно соединенных Fv (или scFv), как описано, например, в US5864019; и одноцепочечные связывающие полипептиды как с VH-, так и с VL-доменами, связанными пептидным линкером, объединенные в поливалентные структуры посредством нековалентной или химической сшивки с образованием, например, гомобивалентных, гетеробивалентных, тривалентных и тетравалентных структур с использованием формата как типа scFv, так и типа диатела, как описано, например, в US5869620. Дополнительные иллюстративные полиспецифические и биспецифические молекулы и способы их получения находятся, например, в US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002004587A1, US2002076406A1, US2002103345A1, US2003207346A1, US2003211078A1, US2004219643A1, US2004220388A1, US2004242847A1, US2005003403A1, US2005004352A1, US2005069552A1, US2005079170A1, US2005100543A1, US2005136049A1, US2005136051A1, US2005163782A1, US2005266425A1, US2006083747A1, US2006120960A1, US2006204493A1, US2006263367A1, US2007004909A1, US2007087381A1, US2007128150A1, US2007141049A1, US2007154901A1, US2007274985A1, US2008050370A1, US2008069820A1, US2008152645A1, US2008171855A1, US2008241884A1, US2008254512A1, US2008260738A1, US2009130106A1, US2009148905A1, US2009155275A1, US2009162359A1, US2009162360A1, US2009175851A1, US2009175867A1, US2009232811A1, US2009234105A1, US2009263392A1, US2009274649A1, EP346087A2, WO0006605A2, WO02072635A2, WO04081051A1, WO06020258A2, WO2007044887A2, WO2007095338A2, WO2007137760A2, WO2008119353A1, WO2009021754A2, WO2009068630A1, WO9103493A1, WO9323537A1, WO9409131A1, WO9412625A2, WO9509917A1, WO9637621A2, WO9964460A1. Содержание вышеупомянутых заявок включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Типичные полиспецифические молекулы

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела представляет собой полиспецифическую, например биспецифическую, молекулу антитела, содержащую одну, две или больше специфичностей связывания, например, первую специфичность связывания для первого антигена, например В-клеточного эпитопа, и вторую специфичность связывания для того же или другого антигена, например В-клеточного эпитопа.

В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания относятся к молекуле антитела, например к антигенсвязывающему домену (например, scFv). В каждой молекуле антитела (например, scFv) молекулы биспецифического антитела VH может находиться выше или ниже VL. В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₁) расположена выше их VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂), расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации.

В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₁) расположена выше их VH (VH₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации.

В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₁) расположена выше их VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации.

В некоторых вариантах осуществления вышерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₁) расположена выше их VL (VL₁), и нижерасположенные антитело или фрагмент антитела (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации.

В любой из вышеупомянутых конфигураций, необязательно, линкер располагается между двумя антителами, или фрагментами антител, или антигенсвязывающими доменами (например, scFv), например, между VL₁ и VL₂, если конструкция организована как VH₁-VL₁-VL₂-VH₂; между VH₁ и VH₂, если конструкция организована как VL₁-VH₁-VH₂-VL₂; между VH₁ и VL₂, если конструкция организована как VL₁-VH₁-VL₂-VH₂; или между VL₁ и VH₂, если конструкция организована как VH₁-VL₁-VH₂-VL₂. Как правило, линкер между двумя фрагментами антител или антигенсвязывающими доменами, например scFv, должен быть достаточно длинным, чтобы избежать неправильного спаривания между доменами двух scFv. Линкер может представлять собой линкер, описанный в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В любой из вышеупомянутых конфигураций, необязательно, линкер располагается между VL и VH первых антигенсвязывающих доменов, например scFv. Необязательно, линкер располагается между VL и VH вторых антигенсвязывающих доменов, например scFv. В конструкциях, которые имеют несколько линкеров, любые два или более линкера могут быть одинаковыми или разными. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления биспецифический CAR содержит VL, VH и необязательно один или несколько линкеров, организованные согласно описанному в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления каждая молекула антитела, например каждый антигенсвязывающий домен (например, каждый scFv), содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В других вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, содержит первую специфичность связывания с первым B-клеточным эпитопом и вторую специфичность связывания с тем же или другим B-клеточным антигеном. Например, в некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD20 и вторую специфичность связывания с одним или несколькими из CD10, CD19, CD20, CD22, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b, или CD79a. В некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела имеет предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD20. В некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD22.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, характеризующуюся специфичностью связывания, например, первой и/или второй специфичностью связывания, с CD19. В одном варианте осуществления специфичность связывания сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающие домены (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD19 сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающие домены (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD19 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD19 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например CTL019 scFv (SEQ ID NO: 765). В некоторых вариантах осуществления специфичность связывания CD19 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 11, например гуманизированный CD19 scFv, например гуманизированный CAR2. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD19 (например, первый и/или второй scFv с CD19) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, характеризующуюся специфичностью связывания, например, первой и/или второй специфичностью связывания, с CD20. В одном варианте осуществления специфичность связывания сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD20 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD20 сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD20 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD20 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD20 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 1, например, VH и VL из C3H2 scFv или C5H1 scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD20 (например, первый и/или второй scFv с CD20) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера.

В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, характеризующуюся специфичностью связывания, например, первой и/или второй специфичностью связывания, с CD22. В одном варианте осуществления специфичность связывания сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD22 сконфигурирована так, что ее VL (VL₁) расположена выше ее VH (VH₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VL₁-VH₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD22 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VL (VL₂) расположена выше их VH (VH₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VL₂-VH₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В другом варианте осуществления специфичность связывания, например первая и/или вторая специфичность связывания, с CD22 сконфигурирована так, что ее VH (VH₁) расположена выше ее VL (VL₁), и нижерасположенные антитело, или фрагмент антитела, или антигенсвязывающий домен (например, scFv) характеризуются такой организацией, при которой их VH (VH₂) расположена выше их VL (VL₂), так что молекула биспецифического антитела в целом характеризуется организацией VH₁-VL₁-VH₂-VL₂ от N- до C-концевой ориентации. В одном варианте осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL, как показано в таблице 6, например, VH и VL из CD22-65 или CD22-65KD scFv. В некоторых вариантах осуществления первая и/или вторая специфичность связывания с CD22 (например, первый и/или второй scFv с CD22) содержит линкер между VH- и VL-областями. В некоторых вариантах осуществления линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В некоторых вариантах осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD19, например, любую из специфичностей связывания с CD19, описанных в данном документе, и вторую специфичность связывания с CD22, например, любую из специфичностей связывания с CD22, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и вторую специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD22. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела предусматривает первую специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 c CD22, и вторую специфичность связывания c CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 c CD19. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

Две или более молекулы антитела, например, описанные в данном документе, могут быть связаны с обеспечением полиспецифических молекул антитела, например, би-, три или больше молекулы антитела.

В некоторых вариантах осуществления любая из вышеупомянутых полиспецифических, например биспецифических, молекул антитела, присутствует в молекуле CAR, как описано в данном документе. В вариантах осуществления молекула CAR содержит биспецифический CAR, предусматривающий первую и вторую специфичности связывания, например, как описано в данном документе (например, две молекулы антитела, например два scFv, как описано в данном документе). В некоторых вариантах осуществления биспецифический CAR содержит две молекулы антитела, где первая специфичность связывания, например, первая молекула антитела (например, первый антигенсвязывающий домен, например первый scFv), располагается ближе к трансмембранному домену, также называемому в данном документе проксимальной молекулой антитела (например, проксимальный антигенсвязывающий домен), и вторая специфичность связывания, например, вторая молекула антитела (например, второй антигенсвязывающий домен, например второй scFv) располагается дальше от мембраны и также называется в данном документе дистальной молекулой антитела (например, дистальный антигенсвязывающий домен). Таким образом, от N-конца к C-концу молекула CAR предусматривает дистальную специфичность связывания, например, дистальную молекулу антитела (например, дистальный антигенсвязывающий домен, например дистальный scFV или scFv2), необязательно линкер, а затем проксимальную специфичность связывания, например, проксимальную молекулу антитела (например, проксимальный антигенсвязывающий домен, например проксимальный scFv или scFv1), необязательно через линкер, с трансмембранным доменом и внутриклеточным доменом, например как описано в данном документе. Схема конфигурации биспецифического CAR изображена на ФИГ. 27.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR включает в себя биспецифический CAR, предусматривающий первую и вторую специфичности связывания. В некоторых вариантах осуществления биспецифический CAR предусматривает первую специфичность связывания с В-клеточным эпитопом и вторую специфичность связывания с тем же или другим B-клеточным антигеном. Например, в некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD20 и вторую специфичность связывания с одним или несколькими из CD10, CD19, CD20, CD22, CD34, CD123, FLT-3, ROR1, CD79b, CD179b, или CD79a. В некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD20. В некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD19 и вторую специфичность связывания с CD22. В некоторых вариантах осуществления биспецифическая молекула CAR предусматривает первую специфичность связывания с CD22 и вторую специфичность связывания с CD20.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания CD19, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания CD19, как описано в данном документе, и дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания CD19, как описано в данном документе, и дистальную специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания CD22, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе, и дистальную специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания CD19, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания CD22, как описано в данном документе, и дистальную специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания CD19, как описано в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания CD22, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания CD22, как описано в данном документе, и дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе, и дистальную специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания CD22, как описано в данном документе.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD22. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, необязательно линкер Gly₄-Ser или линкер LAEAAAK. В вариантах осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL CD22, где линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD22. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, необязательно линкер Gly₄-Ser или линкер LAEAAAK. В вариантах осуществления специфичность связывания CD22 предусматривает VH и VL CD22, где линкер между VH- и VL-областями представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser, например, как в CD22-65s scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3, например, как в CD22-65 scFv. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления VH- и VL-области соединены без линкера, например, как в CD22-65ss scFv.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD20. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD19, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD19, и дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD20. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK. В некоторых вариантах осуществления линкер состоит из аминокислотной последовательности LAEAAAK.

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD22, и проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD20. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит, например, состоит из нее, аминокислотную последовательность LAEAAAK.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную или дистальную специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания CD20, как описано в данном документе. В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает проксимальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD22, например, специфичность связывания VL1-VH1 с CD22, и дистальную по отношению к мембране специфичность связывания с CD20, например, специфичность связывания VL2-VH2 или VH2-VL1 с CD20. В одном варианте осуществления первая и вторая специфичности связывания находятся в непрерывной полипептидной цепи, например в одной цепи. В некоторых вариантах осуществления первая и вторая специфичности связывания необязательно предусматривают линкер, как описано в данном документе. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой линкер (Gly₄-Ser)_n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=1, например, линкер имеет аминокислотную последовательность Gly₄-Ser. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=3 (SEQ ID NO: 841). В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой (Gly₄-Ser)_n, где n=4 (SEQ ID NO: 23). В некоторых вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность LAEAAAK. В некоторых вариантах осуществления линкер состоит из аминокислотной последовательности LAEAAAK.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR дополнительно содержит лидерную последовательность человека, например, последовательность CD8-альфа человека на N-конце.

Трансмембранный домен

Что касается трансмембранного домена, в различных вариантах осуществления CAR можно разработать так, чтобы он содержал трансмембранный домен, присоединенный к внеклеточному домену CAR. Трансмембранный домен может содержать одну или несколько дополнительных аминокислот, прилегающих к трансмембранной области, например, одну или несколько аминокислот, относящихся к внеклеточной области белка, из которого получен трансмембранный домен (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и до 15 аминокислот внеклеточной области), и/или одну или несколько дополнительных аминокислот, относящихся к внутриклеточной области белка, из которого получен трансмембранный домен (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и до 15 аминокислот внутриклеточной области). В одном аспекте трансмембранный домен представляет собой домен, ассоциированный с одним из остальных доменов CAR, например, в одном варианте осуществления трансмембранный домен может быть получен из того же белка, из которого получен сигнальный домен, костимулирующий домен или шарнирный домен. В другом аспекте трансмембранный домен не получен из того же белка, из которого получен любой другой домен CAR. В некоторых случаях трансмембранный домен можно выбрать или модифицировать с помощью аминокислотной замены, чтобы избежать связывания таких доменов с трансмембранными доменами тех же самых или других поверхностных белков мембран, например, чтобы свести к минимуму взаимодействия с другими членами рецепторного комплекса. В одном аспекте трансмембранный домен способен к гомодимеризации с другим CAR на клеточной поверхности CAR-экспрессирующей клетки. В другом аспекте аминокислотную последовательность трансмембранного домена можно модифицировать или подвергнуть замене таким образом, чтобы свести к минимуму взаимодействия со связывающими доменами нативного партнера по связыванию, присутствующего в той же CAR-экспрессирующей клетке.

Трансмембранный домен можно получить либо из природного, либо из рекомбинантного источника. Если источник является природным, домен можно получить из любого мембраносвязанного или трансмембранного белка. В одном аспекте трансмембранный домен способен передавать сигнал внутриклеточному(-ым) домену(-ам) всякий раз, когда CAR связывается с мишенью. Трансмембранный домен, особенно применимый в настоящем изобретении, может включать по меньшей мере трансмембранную(-ые) область(-и), например, альфа-, бета или дзета-цепи Т-клеточного рецептора, CD22, CD28, CD3 эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8 (например, CD8 альфа, CD8 бета), CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154. В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен может включать по меньшей мере трансмембранную(-ые) область(-и), например, KIRDS2, OX40, CD2, CD27, LFA-1 (CD11a, CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD40, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), CD160, CD19, IL2R бета, IL2R гамма, IL7R α, ITGA1, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, PAG/Cbp.

В некоторых случаях трансмембранный домен может быть присоединен к внеклеточной области CAR, например антигенсвязывающему домену CAR, с помощью шарнирного участка, например шарнирного участка из белка человека. Например, в одном варианте осуществления шарнирный участок может представлять собой шарнирный участок Ig (иммуноглобулина) человека, например, шарнирный участок IgG4, шарнирный участок IgD, линкер GS (например, линкер GS, описанный в данном документе), шарнирный участок KIR2DS2 или шарнирный участок CD8a. В одном варианте осуществления шарнирный участок или спейсер содержит (например, состоит из нее) аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 799. В одном аспекте трансмембранный домен предусматривает (например, состоит из него) трансмембранный домен под SEQ ID NO: 801.

В одном аспекте шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок IgG4. Например, в одном варианте осуществления шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 814. В некоторых вариантах осуществления шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 815.

В одном аспекте шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок IgD. Например, в одном варианте осуществления шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 816. В некоторых вариантах осуществления шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 817).

В одном аспекте трансмембранный домен может быть рекомбинантным, и в данном случае он будет содержать главным образом гидрофобные остатки, такие как лейцин и валин. В одном аспекте на каждом конце рекомбинантного трансмембранного домена можно обнаружить триплет из фенилаланина, триптофана и валина.

Необязательно, короткий олиго- или полипептидный линкер длиной от 2 до 10 аминокислот может образовывать связь между трансмембранным доменом и цитоплазматической областью CAR. Глицин-сериновый дублет представляет собой особенно подходящий линкер. Например, в одном аспекте линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGS (SEQ ID NO: 834).

В одном аспекте шарнирный участок или спейсер предусматривает шарнирный участок KIR2DS2.

Цитоплазматический домен

Цитоплазматический домен или область CAR включает в себя внутриклеточный сигнальный домен. Внутриклеточный сигнальный домен способен к активации по меньшей мере одной из нормальных эффекторных функций иммунной клетки, в которую был введен CAR. Термин "эффекторная функция" относится к специализированной функции клетки. Например, эффекторная функция Т-клетки может представлять собой цитолитическую активность или хелперную активность, в том числе секрецию цитокинов. Таким образом, термин "внутриклеточный сигнальный домен" относится к части белка, которая передает сигнал эффекторной функции и направляет клетку на выполнение специализированной функции. Хотя обычно можно использовать весь внутриклеточный сигнальный домен, во многих случаях нет необходимости использовать всю цепь. В той мере, в которой используют усеченную часть внутриклеточного сигнального домена, такую усеченную часть можно использовать вместо интактной цепи, при условии, что она передает сигнал эффекторной функции. Таким образом, термин "внутриклеточный сигнальный домен" подразумевает включение любой усеченной части внутриклеточного сигнального домена, достаточной для передачи сигнала эффекторной функции.

Примеры внутриклеточных сигнальных доменов для применения в CAR по настоящему изобретению включают цитоплазматические последовательности Т-клеточного рецептора (TCR) и корецепторов, которые действуют совместно, инициируя передачу сигнала после привлечения антигенного рецептора, а также любое производное или вариант этих последовательностей и любую рекомбинантную последовательность, которая обладает такими же функциональными возможностями.

Известно, что сигналы, образуемые при участии TCR в отдельности, являются недостаточными для полной активации Т-клетки, и что также необходим вторичный и/или костимулирующий сигнал. Таким образом, можно сказать, что активация Т-клеток опосредуется двумя различными классами цитоплазматических сигнальных последовательностей: теми, которые инициируют антиген-зависимую первичную активацию посредством TCR (первичные внутриклеточные сигнальные домены), и теми, которые действуют антигеннезависимым образом, передавая вторичный или костимулирующий сигнал (вторичный цитоплазматический домен, например, костимулирующий домен).

Первичный сигнальный домен регулирует первичную активацию комплекса TCR либо стимулирующим образом, либо ингибирующим образом. Первичные внутриклеточные сигнальные домены, которые действуют стимулирующим образом, могут содержать сигнальные мотивы, известные как иммунорецепторные тирозиновые активирующие мотивы или ITAM.

Примеры первичных внутриклеточных сигнальных доменов, содержащих ITAM, которые являются особенно применимыми в настоящем изобретении, включают домены CD3-дзета, общей гамма-цепи FcR (FCER1G), Fc-гамма RIIa, FcR-бета (Fc-эпсилон R1b), CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эпсилон, CD79a, CD79b, DAP10 и DAP12. В одном варианте осуществления CAR по настоящему изобретению содержит внутриклеточный сигнальный домен, например первичный сигнальный домен CD3-дзета.

В одном варианте осуществления первичный сигнальный домен содержит модифицированный домен ITAM, например, мутантный домен ITAM, который обладает измененной (например, увеличенной или уменьшенной) активностью по сравнению с нативным доменом ITAM. В одном варианте осуществления первичный сигнальный домен включает в себя модифицированный первичный внутриклеточный сигнальный домен, содержащий ITAM, например, оптимизированный и/или усеченный первичный внутриклеточный сигнальный домен, содержащий ITAM. В варианте осуществления первичный сигнальный домен содержит один, два, три, четыре или более мотива ITAM.

Дополнительные примеры молекул, содержащих первичный внутриклеточный сигнальный домен, являющихся особенно применимыми в настоящем изобретении, включают молекулы DAP10, DAP12 и CD32.

Внутриклеточный сигнальный домен CAR может содержать первичный сигнальный домен, например сигнальный домен CD3-дзета, в отдельности или в комбинации с любым(-и) другим(-и) требуемым(-и) внутриклеточным(-и) сигнальным(-и) доменом(-ами), применимым(-и) в качестве составной части CAR по настоящему изобретению. Например, внутриклеточный сигнальный домен CAR может содержать первичный сигнальный домен, например часть дзета-цепи CD3, и костимулирующий сигнальный домен. Костимулирующий сигнальный домен относится к части CAR, содержащей внутриклеточный домен костимулирующей молекулы. Костимулирующая молекула представляет собой молекулу клеточной поверхности, отличную от антигенного рецептора или его лигандов, которая необходима для эффективного ответа лимфоцитов на антиген. Примеры таких молекул включают CD27, CD28, 4-1BB (CD137), OX40, CD30, CD40, PD1, ICOS, антиген 1, связанный с функцией лимфоцитов (LFA-1), (CD11a и CD18), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3 и лиганд, который специфически связывается с CD83, и т. п. Например, было продемонстрировано, что костимуляция с помощью CD27 усиливает размножение, эффекторную функцию и выживание CART-клеток человека in vitro и увеличивает персистенцию и противоопухолевую активность T-клеток человека in vivo (Song et al. Blood. 2012; 119(3):696-706). Дополнительные примеры таких костимулирующих молекул включают NKp44, NKp30, NKp46, CDS, ICAM-1, GITR, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), CD160, CD19, CD4, CD16a, CD8-альфа, CD8-бета, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R-альфа, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76 и PAG/Cbp.

Внутриклеточные сигнальные последовательности в цитоплазматической части CAR по настоящему изобретению могут быть связаны друг с другом в случайном или установленном порядке. Короткий олиго- или полипептидный линкер, например длиной от 2 до 10 аминокислот (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10 аминокислот), необязательно может образовывать связь между внутриклеточными сигнальными последовательностями. В одном варианте осуществления в качестве подходящего линкера может применяться глицин-сериновый дублет. В одном варианте осуществления в качестве подходящего линкера может применяться одна аминокислота, например, аланин, глицин.

В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит два или более, например, 2, 3, 4, 5 или больше костимулирующих сигнальных доменов. В варианте осуществления два или более, например, 2, 3, 4, 5 или больше костимулирующих сигнальных доменов разделены молекулой линкера, например, молекулой линкера, описанной в данном документе. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит два костимулирующих сигнальных домена. В некоторых вариантах осуществления молекула линкера представляет собой глициновый остаток. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой аланиновый остаток.

В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен CD28. В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен 4-1BB. В одном аспекте сигнальный домен 4-1BB представляет собой сигнальный домен под SEQ ID NO: 803. В одном аспекте сигнальный домен CD3-дзета представляет собой сигнальный домен под SEQ ID NO: 805.

В одном аспекте внутриклеточный сигнальный домен разработан таким образом, что он содержит сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен CD27. В одном аспекте сигнальный домен CD27 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 818. В одном аспекте сигнальный домен CD27 кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 819.

В одном аспекте CAR-экспрессирующая клетка, описанная в данном документе, может дополнительно содержать второй CAR, например второй CAR, который содержит другой антигенсвязывающий домен, например для той же мишени (CD20) или другой мишени (например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CLL-1, CD34, CD123, FLT3, CD79b, CD179b и CD79a). В одном варианте осуществления второй CAR включает в себя антигенсвязывающий домен для мишени, экспрессируемой на клетках острого миелоидного лейкоза, такой как, например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CLL-1, CD34, CD123, FLT3, CD79b, CD179b и CD79a. В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетка содержит первый CAR, который нацеливается на первый антиген и содержит внутриклеточный сигнальный домен, имеющий костимулирующий сигнальный домен, но не первичный сигнальный домен, и второй CAR, который нацеливается на второй, другой, антиген и содержит внутриклеточный сигнальный домен, имеющий первичный сигнальный домен, но не костимулирующий сигнальный домен. Без ограничения какой-либо теорией, размещение костимулирующего сигнального домена, например, 4-1BB, CD28, CD27 или OX-40, на первом CAR, и первичного сигнального домена, например CD3-дзета, на втором CAR может ограничивать активность CAR до клеток, в которых экспрессируются обе мишени. В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетка содержит первый CAR для CD20, который включает в себя CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и костимулирующий домен, и второй CAR, который нацеливается на антиген, отличный от CD20 (например, антиген, экспрессируемый на клетках AML, например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CLL-1, CD34, CD123, FLT3, CD79b, CD179b или CD79a), и включает в себя антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и первичный сигнальный домен. В другом варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетка содержит первый CAR для CD20, который включает в себя CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и первичный сигнальный домен, и второй CAR, который нацеливается на антиген, отличный от CD20 (например, антиген, экспрессируемый на клетках AML, например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CD123, CLL-1, CD34, FLT3, CD79b, CD179b или CD79a), и включает в себя антигенсвязывающий домен для антигена, трансмембранный домен и костимулирующий сигнальный домен.

В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетка содержит CAR для CD20, описанный в данном документе, и ингибирующий CAR. В одном варианте осуществления ингибирующий CAR содержит антигенсвязывающий домен, который связывает антиген, обнаруживаемый на нормальных клетках, но не на раковых клетках, например, на нормальных клетках, которые также экспрессируют CD20. В одном варианте осуществления ингибирующий CAR содержит антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен ингибирующей молекулы. Например, внутриклеточный домен ингибирующего CAR может представлять собой внутриклеточный домен PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 или TGF бета.

В одном варианте осуществления, в случае если CAR-экспрессирующая клетка содержит два или более различных CAR, то антигенсвязывающие домены различных CAR могут быть такими, что антигенсвязывающие домены не взаимодействуют друг с другом. Например, клетка, экспрессирующая первый и второй CAR, может иметь антигенсвязывающий домен первого CAR, например, в качестве фрагмента, например scFv, который не ассоциирует с антигенсвязывающим доменом второго CAR, например, антигенсвязывающий домен второго CAR представляет собой VHH.

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен включает в себя однодоменные антигенсвязывающие (SDAB) молекулы, в том числе молекулы, в которых области, определяющие комплементарность, являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают без ограничения вариабельные домены тяжелых цепей, связывающие молекулы, в природных условиях лишенные легких цепей, отдельные домены, полученные из традиционных 4-цепочечных антител, сконструированные домены и однодоменные каркасные структуры, отличные от полученных из антител. Молекулы SDAB могут являться любыми молекулами из уровня техники или любыми будущими однодоменными молекулами. Молекулы SDAB могут быть получены из любых видов, в том числе без ограничения из мыши, человека, верблюда, ламы, миноги, рыбы, акулы, козы, кролика и быка. Данный термин также охватывает встречающиеся в природе молекулы однодоменных антител из видов, отличных от Camelidae и акул.

В одном аспекте молекула SDAB может быть получена из вариабельной области иммуноглобулина, обнаруживаемого у рыб, как например та, которая получена из изотипа иммуноглобулина, известного как новый антигенный рецептор (NAR), обнаруживаемого в сыворотке крови акулы. Способы получения однодоменных молекул, получаемых из вариабельной области NAR ("IgNAR"), описаны в WO 03/014161 и Streltsov (2005) Protein Sci. 14:2901-2909.

Согласно другому аспекту молекула SDAB представляет собой встречающуюся в природе однодоменную антигенсвязывающую молекулу, известную как тяжелая цепь, лишенная легких цепей. Такие однодоменные молекулы раскрыты, к примеру, в WO 9404678 и Hamers-Casterman, C. et al. (1993) Nature 363:446-448. В целях ясности этот вариабельный домен, полученный из молекулы тяжелой цепи, в природных условиях лишенной легкой цепи, именуется в данном документе как VHH или нанотело, чтобы отличать его от традиционного VH четырехцепочечных иммуноглобулинов. Такую молекулу VHH можно получить из видов Camelidae, например, из верблюда, ламы, дромадера, альпаки и гуанако. Другие виды, помимо Camelidae, могут вырабатывать молекулы тяжелых цепей, в природных условиях лишенные легкой цепи; такие VHH входят в объем настоящего изобретения.

Молекулы SDAB могут быть рекомбинантными, с пересаженными CDR, гуманизированными, камелизированными, деиммунизированными и/или созданными in vitro (например, отобранными с помощью фагового дисплея).

Также было обнаружено, что в клетках, имеющих множество встроенных в мембрану химерных рецепторов, содержащих антигенсвязывающий домен, взаимодействия между антигенсвязывающими доменами рецепторов могут быть нежелательными, например, поскольку они ингибируют способность одного или нескольких антигенсвязывающих доменов связываться с их когнатными антигенами. Соответственно, в данном документе раскрыты клетки, имеющие первый и второй не встречающиеся в природе химерные рецепторы, встроенные в мембрану, содержащие антигенсвязывающие домены, для которых сведены к минимуму такие взаимодействия. Также в данном документе раскрыты нуклеиновые кислоты, кодирующие первый и второй не встречающиеся в природе химерные рецепторы, встроенные в мембрану, содержащие антигенсвязывающие домены, для которых сведены к минимуму такие взаимодействия, а также способы получения и применения таких клеток и нуклеиновых кислот. В варианте осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого и указанного второго не встречающегося в природе встроенного в мембрану химерного рецептора предусматривает scFv, а другой предусматривает отдельный VH-домен, например, отдельный VH-домен верблюдовых, акулы или миноги или отдельный VH-домен, полученный из последовательности человека или мыши.

В некоторых вариантах осуществления заявляемое изобретение охватывает первый и второй CAR, где антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR не содержит вариабельного домена легкой цепи и вариабельного домена тяжелой цепи. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR представляет собой scFv, а другой не является scFv. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR предусматривает отдельный VH-домен, например, отдельный VH-домен верблюдовых, акулы или миноги или отдельный VH-домен, полученный из последовательности человека или мыши. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR предусматривает нанотело. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR предусматривает VHH-домен верблюдовых.

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR предусматривает scFv, а другой предусматривает отдельный VH-домен, например, отдельный VH-домен верблюдовых, акулы или миноги или отдельный VH-домен, полученный из последовательности человека или мыши. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR предусматривает scFv, а другой предусматривает нанотело. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен одного из указанного первого CAR и указанного второго CAR предусматривает scFv, а другой предусматривает VHH-домен верблюдовых.

В некоторых вариантах осуществления связывание антигенсвязывающего домена указанного первого CAR, при наличии его на поверхности клетки, со своим когнатным антигеном существенно не снижается благодаря наличию указанного второго CAR. В некоторых вариантах осуществления связывание антигенсвязывающего домена указанного первого CAR со своим когнатным антигеном в присутствии указанного второго CAR составляет 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% от связывания антигенсвязывающего домена указанного первого CAR со своим когнатным антигеном в отсутствие указанного второго CAR.

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие домены указанного первого CAR и указанного второго CAR, при наличии их на поверхности клетки, ассоциируют друг с другом в меньшей степени, чем в случае если бы они оба являлись антигенсвязывающими scFv-доменами. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие домены указанного первого CAR, указанного второго CAR ассоциируют друг с другом на 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% меньше, чем в случае если бы они оба являлись антигенсвязывающими scFv-доменами.

В другом аспекте CAR-экспрессирующая клетка, описанная в данном документе, может дополнительно экспрессировать другое средство, например средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки. Например, в одном варианте осуществления средство может представлять собой средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу. Ингибирующие молекулы, например PD1, в некоторых вариантах осуществления могут снижать способность CAR-экспрессирующих клеток вызывать иммунный эффекторный ответ. Примеры ингибирующих молекул включают PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и TGF бета. В одном варианте осуществления средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу, содержит первый полипептид, например ингибирующую молекулу, ассоциированный со вторым полипептидом, который передает положительный сигнал в клетку, например, с внутриклеточным сигнальным доменом, описанным в данном документе. В одном варианте осуществления средство содержит первый полипептид, например ингибирующую молекулу, такую как PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 или TGF бета, или фрагмент любого из них (например, по меньшей мере часть внеклеточного домена любого из них), и второй полипептид, который представляет собой внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе (например, содержащий костимулирующий домен (например, 41BB, CD27 или CD28, например описанные в данном документе) и/или первичный сигнальный домен (например, сигнальный домен CD3-дзета, описанный в данном документе). В одном варианте осуществления средство содержит первый полипептид PD1 или его фрагмент (например, по меньшей мере часть внеклеточного домена PD1) и второй полипептид внутриклеточного сигнального домена, описанный в данном документе (например, сигнальный домен CD28, описанный в данном документе, и/или сигнальный домен CD3-дзета, описанный в данном документе). PD1 является ингибирующим представителем семейства рецепторов CD28, которое также включает CD28, CTLA-4, ICOS и BTLA. PD-1 экспрессируется на активированных B-клетках, T-клетках и миелоидных клетках (Agata et al. 1996 Int. Immunol 8:765-75). Было показано, что два лиганда PD1, PD-L1 и PD-L2 подавляют активацию Т-клеток при связывании с PD1 (Freeman et a. 2000 J Exp Med 192:1027-34; Latchman et al. 2001 Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. 2002 Eur J Immunol 32:634-43). PD-L1 является обильным в раковых опухолях человека (Dong et al. 2003 J Mol Med 81:281-7; Blank et al. 2005 Cancer Immunol. Immunother 54:307-314; Konishi et al. 2004 Clin Cancer Res 10:5094). Подавление иммунитета можно устранить путем ингибирования локального взаимодействия PD1 с PD-L1.

В одном варианте осуществления средство, содержащее внеклеточный домен (ECD) ингибирующей молекулы, например белка 1 запрограммированной смерти клетки (PD1), может быть слито с трансмембранным доменом и внутриклеточными сигнальными доменами, такими как 41BB и CD3-дзета (также называемое в данном документе PD1 CAR). В одном варианте осуществления PD1 CAR, при использовании в комбинации с CAR для CD20, описанным в данном документе, улучшает персистенцию Т-клетки. В одном варианте осуществления CAR представляет собой PD1 CAR, содержащий внеклеточный домен PD1, согласно SEQ ID NO: 820. В одном варианте осуществления PD1 CAR содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 820.

В одном варианте осуществления средство содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую PD1 CAR, например PD1 CAR, описанный в данном документе. В одном варианте осуществления последовательность нуклеиновой кислоты для PD1 CAR представляет собой SEQ ID NO: 821.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает популяцию CAR-экспрессирующих клеток, например, CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток. В некоторых вариантах осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток содержит смесь клеток, экспрессирующих различные CAR. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может содержать первую клетку, экспрессирующую CAR, имеющий CD20-связывающий домен, описанный в данном документе, и вторую CAR-экспрессирующую клетку, имеющую другой CD20-связывающий домен, например, CD20-связывающий домен, описанный в данном документе, который отличается от CD20-связывающего домена в CAR, экспрессируемом первой клеткой. В качестве другого примера, популяция CAR-экспрессирующих клеток может содержать первую клетку, экспрессирующую CAR, который включает в себя CD20-связывающий домен, например, описанный в данном документе, и вторую клетку, экспрессирующую CAR, который содержит антигенсвязывающий домен для мишени, отличной от CD20 (например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CD34, CLL-1, CD123, FLT3, CD79b, CD179b или CD79a). В одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток содержит, например, первую клетку, экспрессирующую CAR, который включает в себя первичный внутриклеточный сигнальный домен, и вторую клетку, экспрессирующую CAR, который включает в себя вторичный сигнальный домен, например костимулирующий сигнальный домен.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает популяцию клеток, в которой по меньшей мере одна клетка в популяции экспрессирует CAR, имеющий CD20-связывающий домен, описанный в данном документе, и вторая клетка экспрессирует другое средство, например средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки. Например, в одном варианте осуществления средство может представлять собой средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу. Ингибирующие молекулы, например, могут в некоторых вариантах осуществления снижать способность CAR-экспрессирующей клетки осуществлять иммунный эффекторный ответ. Примеры ингибирующих молекул включают PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и TGF бета. В одном варианте осуществления средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу, содержит первый полипептид, например ингибирующую молекулу, ассоциированный со вторым полипептидом, который передает положительный сигнал в клетку, например, с внутриклеточным сигнальным доменом, описанным в данном документе. В одном варианте осуществления средство содержит первый полипептид, например ингибирующую молекулу, такую как PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 или TGF бета, или фрагмент любого из них (например, по меньшей мере часть внеклеточного домена любого из них), и второй полипептид, который представляет собой внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе (например, содержащий костимулирующий домен (например, 41BB, CD27 или CD28, например описанные в данном документе) и/или первичный сигнальный домен (например, сигнальный домен CD3-дзета, описанный в данном документе). В одном варианте осуществления средство содержит первый полипептид PD1 или его фрагмент (например, по меньшей мере часть внеклеточного домена PD1) и второй полипептид внутриклеточного сигнального домена, описанный в данном документе (например, сигнальный домен CD28, описанный в данном документе, и/или сигнальный домен CD3-дзета, описанный в данном документе).

В одном аспекте настоящее изобретение предусматривает способы, включающие введение популяции CAR-экспрессирующих клеток, например CAR-экспрессирующих клеток, например смеси клеток, экспрессирующих различные CAR, в комбинации с другим средством, например ингибитором киназы, таким как ингибитор киназы, описанный в данном документе. В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает способы, включающие введение популяции клеток, в которой по меньшей мере одна клетка в популяции экспрессирует CAR, имеющий противораковый ассоциированный антигенсвязывающий домен, как описано в данном документе, и вторая клетка экспрессирует другое средство, например средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки, в комбинации с другим средством, например ингибитором киназы, таким как ингибитор киназы, описанный в данном документе.

Регулируемые химерные антигенные рецепторы

В некоторых вариантах осуществления регулируемый CAR (RCAR), в котором активность CAR может контролироваться, является желательным для оптимизации безопасности и эффективности CAR-терапии. Существует множество путей регуляции активностей CAR. Например, индуцибельный апоптоз с использованием, например, каспазы, слитой с доменом димеризации (см., например, Di Stasa et al., N Egnl. J. Med. 2011 Nov. 3; 365(18):1673-1683), может применяться в качестве безопасного переключателя при CAR-терапии по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления клетки (например, Т-клетки или NK-клетки), экспрессирующие CAR по настоящему изобретению, дополнительно содержат переключатель индуцибельного апоптоза, где каспаза человека (например, каспаза 9) или модифицированная версия слита с модификацией белка FKB человека, который обеспечивает условную димеризацию. В присутствии небольшой молекулы, такой как рапагол (например, AP1903, AP20187), индуцибельная каспаза (например, каспаза 9) активируется и приводит к быстрому апоптозу и смерти клеток (например, Т-клеток или NK-клеток), экспрессирующих CAR по настоящему изобретению. Примеры индуцируемого каспазой апоптозного переключения (или одного или нескольких аспектов такого переключения) описаны, например, в US2004040047; US20110286980; US20140255360; WO1997031899; WO2014151960; WO2014164348; WO2014197638; WO2014197638; все из которых включены в данный документ посредством ссылки.

В одном аспекте RCAR содержит набор полипептидов, как правило в простейших вариантах осуществления два, в которых компоненты стандартного CAR, описанного в данном документе, например, антигенсвязывающий домен и внутриклеточный сигнальный домен, разделены на отдельные полипептиды или представители. В некоторых вариантах осуществления набор полипептидов включает димеризационный переключатель, который при наличии димеризующей молекулы может связывать полипептиды друг с другом, например, может связывать антигенсвязывающий домен с внутриклеточным сигнальным доменом. В одном варианте осуществления в CAR по настоящему изобретению используется переключатель димеризации, как описано, например, в WO2014127261, которая включена в данный документ посредством ссылки.

В одном аспекте RCAR содержит два полипептида или элемента: 1) внутриклеточный сигнальный элемент, содержащий внутриклеточный сигнальный домен, например, первичный внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе, и первый переключающий домен; 2) антигенсвязывающий элемент, содержащий антигенсвязывающий домен, например, который нацеливается на CD19, как описано в данном документе, и второй переключающий домен. Необязательно, RCAR содержит трансмембранный домен, описанный в данном документе. В варианте осуществления трансмембранный домен может быть расположен на внутриклеточном сигнальном элементе, на антигенсвязывающем элементе или на обоих. (Если не указано иное, то при описании в данном документе элементов или компонентов RCAR порядок может быть таким, как предусмотрено, но также включены и другие порядки. Другими словами, в варианте осуществления порядок является таким, как изложено в тексте, но в некоторых вариантах осуществления порядок может быть другим. Например, порядок компонентов на одной стороне трансмембранной области может отличаться от примера, например, размещение переключающего домена относительно внутриклеточного сигнального домена может быть другим, например обратным).

В варианте осуществления первый и второй переключающие домены могут образовывать внутриклеточный или внеклеточный переключатель димеризации. В варианте осуществления переключатель димеризации может представлять собой переключатель гомодимеризации, например, если первый и второй переключающие домены являются одинаковыми, или переключатель гетеродимеризации, например, если первый и второй переключающие домены отличаются друг от друга.

В вариантах осуществления RCAR может содержать "мультипереключатель." Мультипереключатель может содержать переключающие домены гетеродимеризации или переключающие домены гомодимеризации. Мультипереключатель содержит множество, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 переключающих доменов, независимо от первого элемента, например антигенсвязывающего элемента, и второго элемента, например внутриклеточного сигнального элемента. В варианте осуществления первый элемент может содержать множество первых переключающих доменов, например, основанных на FKBP переключающих доменов, и второй элемент может содержать множество вторых переключающих доменов, например, основанных на FRB переключающих доменов. В варианте осуществления первый элемент может содержать первый и второй переключающие домены, например, основанный на FKBP переключающий домен и основанный на FRB переключающий домен, и второй элемент может содержать первый и второй переключающие домены, например, основанный на FKBP переключающий домен и основанный на FRB переключающий домен.

В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный элемент содержит один или несколько внутриклеточных сигнальных доменов, например, первичный внутриклеточный сигнальный домен и один или несколько костимулирующих сигнальных доменов.

В варианте осуществления антигенсвязывающий элемент может содержать один или несколько внутриклеточных сигнальных доменов, например, один или несколько костимулирующих сигнальных доменов. В варианте осуществления антигенсвязывающий элемент содержит множество, например, 2 или 3, костимулирующих сигнальных доменов, описанных в данном документе, например, выбранных из 41BB, CD28, CD27, ICOS и OX40, и в вариантах осуществления первичный внутриклеточный сигнальный домен отсутствует. В варианте осуществления антигенсвязывающий элемент содержит следующие костимулирующие сигнальные домены от внеклеточного к внутриклеточному направлению: 41BB-CD27; 41BB-CD27; CD27-41BB; 41BB-CD28; CD28-41BB; OX40-CD28; CD28-OX40; CD28-41BB или 41BB-CD28. В таких вариантах осуществления внутриклеточный связывающий элемент содержит домен CD3-дзета. В одном таком варианте осуществления RCAR содержит (1) антигенсвязывающий элемент, содержащий антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и два костимулирующих домена, а также первый переключающий домен; и (2) внутриклеточный сигнальный домен, содержащий трансмембранный домен или домен прикрепления к мембране, и по меньшей мере один первичный внутриклеточный сигнальный домен и второй переключающий домен.

В одном варианте осуществления представлены RCAR, где антигенсвязывающий элемент не прикрепляется к поверхности CAR-клетки. Это дает возможность клетке, имеющей внутриклеточный сигнальный элемент, успешно соединяться с одним или несколькими антигенсвязывающими доменами без трансформации клетки последовательностью, которая кодирует антигенсвязывающий элемент. В таких вариантах осуществления RCAR содержит: 1) внутриклеточный сигнальный элемент, содержащий первый переключающий домен, трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, например, первичный внутриклеточный сигнальный домен, и первый переключающий домен; и 2) антигенсвязывающий элемент, содержащий антигенсвязывающий домен и второй переключающий домен, где антигенсвязывающий элемент не содержит трансмембранный домен или домен прикрепления к мембране и необязательно не содержит внутриклеточный сигнальный домен. В некоторых вариантах осуществления RCAR может дополнительно содержать 3) второй антигенсвязывающий элемент, содержащий второй антигенсвязывающий домен, например, второй антигенсвязывающий домен, который связывает антиген, отличный от того, который связывается антигенсвязывающим доменом; и второй переключающий домен.

Также в данном документе представлены RCAR, где антигенсвязывающий элемент обладает биспецифической активацией и способностью нацеливаться. В таком варианте осуществления антигенсвязывающий элемент может содержать множество, например, 2, 3, 4 или 5, антигенсвязывающих доменов, например scFv, где каждый антигенсвязывающий домен связывается с целевым антигеном, например, с отличными антигенами или тем же антигеном, например, по одним и тем же или отличным эпитопам на том же антигене. В варианте осуществления множество антигенсвязывающих доменов находятся в тандеме, и, необязательно, линкер или шарнирная область располагается между каждым из антигенсвязывающих доменов. Подходящие линкеры и шарнирные области описаны в данном документе.

В одном варианте осуществления представлены RCAR, обладающие конфигурацией, которая обеспечивает переключение пролиферации. В таком варианте осуществления RCAR содержит: 1) внутриклеточный сигнальный элемент, необязательно содержащий трансмембранный домен или домен прикрепления к мембране; один или несколько костимулирующих сигнальных доменов, например, выбранных из 41BB, CD28, CD27, ICOS и OX40, и переключающий домен; и 2) антигенсвязывающий элемент, содержащий антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и первичный внутриклеточный сигнальный домен, например домен CD3-дзета, где антигенсвязывающий элемент не содержит переключающий домен или не содержит переключающий домен, который димеризуется с переключающим доменом на внутриклеточном сигнальном элементе. В варианте осуществления антигенсвязывающий элемент не содержит костимулирующий сигнальный домен. В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный элемент содержит переключающий домен из переключателя гомодимеризации. В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный элемент содержит первый переключающий домен переключателя гетеродимеризации, и RCAR содержит второй внутриклеточный сигнальный элемент, который содержит второй переключающий домен переключателя гетеродимеризации. В таких вариантах осуществления второй внутриклеточный сигнальный элемент содержит те же внутриклеточные сигнальные домены, что и внутриклеточный сигнальный элемент. В варианте осуществления переключатель димеризации является внутриклеточным. В варианте осуществления переключатель димеризации является внеклеточным.

В любой из конфигураций RCAR, описанных в данном документе, первый и второй переключающие домены содержат основанный на FKBP-FRB переключатель, как описано в данном документе.

Также в данном документе представлены клетки, содержащие RCAR, описанный в данном документе. Любая клетка, которая сконструирована для экспрессии RCAR, может применяться в качестве клетки RCARX. В варианте осуществления RCARX-клетка представляет собой T-клетку и называется RCART-клеткой. В варианте осуществления RCARX-клетка представляет собой NK-клетку и называется RCARN-клеткой.

Также в данном документе представлены нуклеиновые кислоты и векторы, содержащие последовательности, кодирующие RCAR. Последовательность, кодирующая различные элементы RCAR, может быть расположена в одной и той же молекуле нуклеиновой кислоты, например в одних и тех же плазмиде или векторе, например вирусном векторе, например лентивирусном векторе. В варианте осуществления (i) последовательность, кодирующая антигенсвязывающий элемент, и (ii) последовательность, кодирующая внутриклеточный сигнальный элемент, могут находиться в одной и той же нуклеиновой кислоте, например векторе. Продуцирование соответствующих белков может быть достигнуто, например, с помощью применения отдельных промоторов или с помощью применения продукта бицистронной транскрипции (который может приводить к продуцированию двух белков путем расщепления одного продукта трансляция или путем трансляции двух отдельных белковых продуктов). В варианте осуществления последовательность, кодирующая расщепляемый пептид, например последовательность P2A или F2А, располагается между (i) и (ii). В варианте осуществления последовательность, кодирующая IRES, например IRES EMCV или EV71, располагается между (i) и (ii). В этих вариантах осуществления (i) и (ii) транскрибируются как одна РНК. В варианте осуществления первый промотор функционально связывается с (i), и второй промотор функционально связывается с (ii) так, что (i) и (ii) транскрибируются как отдельные mRNA.

В качестве альтернативы, последовательность, кодирующая различные элементы RCAR, может быть расположена в разных молекулах нуклеиновой кислоты, например в разных плазмидах или векторах, например в вирусном векторе, например в лентивирусном векторе. Например, (i) последовательность, кодирующая антигенсвязывающий элемент, может находиться в первой нуклеиновой кислоте, например в первом векторе, и (ii) последовательность, кодирующая внутриклеточный сигнальный элемент, может находиться во второй нуклеиновой кислоте, например во втором векторе.

Переключатели димеризации

Переключатели димеризации могут быть нековалентными или ковалентными. В нековалентном переключателе димеризации молекула димеризации обеспечивает нековалентное взаимодействие между переключающими доменами. В ковалентном переключателе димеризации молекула димеризации обеспечивает ковалентное взаимодействие между переключающими доменами.

В варианте осуществления RCAR содержит FKBP/FRAP или переключатель димеризации, основанный на FKBP/FRB. FKBP12 (FKBP или FK506-связывающий белок) является широко распространенным цитоплазматическим белком, который служит изначальной внутриклеточной мишенью для полученного из природного продукта иммуносупрессивного лекарственного средства - рапамицина. Рапамицин связывается с FKBP и с большим гомологом PI3K FRAP (RAFT, mTOR). FRB является частью FRAP из 93 аминокислот, которая является достаточной для связывания комплекса FKBP-рапамицин (Chen, J., Zheng, X. F., Brown, E. J. & Schreiber, S. L. (1995) Identification of an 11-kDa FKBP12-rapamycin-binding domain within the 289-kDa FKBP12-rapamycin-associated protein and characterization of a critical serine residue. Proc Natl Acad Sci U S A 92: 4947-51.)

В вариантах осуществления в переключателе, основанном на FKBP/FRAP, например FKBP/FRB, может применяться молекула димеризации, например рапамицин или аналог рапамицина.

Аминокислотная последовательность FKBP представлена под SEQ ID NO: 824.

В вариантах осуществления переключающий домен FKBP может содержать фрагмент FKBP, обладающий способностью связываться с FRB (SEQ ID NO: 825) или его фрагментом или аналогом в присутствии рапамицина или рапалога.

Аминокислотная последовательность FRB представлена под SEQ ID NO: 826.

Используемый в данном документе термин "переключатель, основанный на FKBP/FRAP, например FKBP/FRB" относится к переключателю димеризации, содержащему: первый переключающий домен, который содержит фрагмент FKBP или его аналог, обладающий способностью связываться с FRB, или его фрагментом, или его аналогом в присутствии рапамицина или рапалога, например RAD001, и характеризуется по меньшей мере 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, или 99% идентичностью или отличается не более чем 30, 25, 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2, или 1 аминокислотными остатками от последовательности FKBP под SEQ ID NO: 824 или 825; и второй переключающий домен, который содержит фрагмент FRB или его аналог, обладающий способностью связываться с FRB, или его фрагментом, или его аналогом в присутствии рапамицина или рапалога, и характеризуется по меньшей мере 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, или 99% идентичностью или отличается не более чем 30, 25, 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2, или 1 аминокислотными остатками от последовательности FRB под SEQ ID NO: 826. В варианте осуществления RCAR, описанный в данном документе, содержит один переключающий домен, содержащий аминокислотные остатки, раскрытые под SEQ ID NO: 824 или 825, и один переключающий домен, содержащий аминокислотные остатки, раскрытые под SEQ ID NO: 826.

В вариантах осуществления основанный на FKBP/FRB переключатель димеризации содержит модифицированный основанный на FRB переключающий домен, который демонстрирует измененное, например улучшенное, образование комплекса между основанным на FRB переключающим доменом, например, модифицированным основанным на FRB переключающим доменом, основанным на FKBP переключающим доменом и молекулой димеризации, например рапамицином или рапалогом, например RAD001. В варианте осуществления модифицированный основанный на FRB переключающий домен содержит одну или несколько мутаций, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или больше, выбранных из мутаций по аминокислотному положению(-ям) L2031, E2032, S2035, R2036, F2039, G2040, T2098, W2101, D2102, Y2105 и F2108, где аминокислота дикого типа мутирует в любую другую встречающуюся в природе аминокислоту. В варианте осуществления мутантный FRB содержит мутации по E2032, где E2032 мутирует в фенилаланин (E2032F), метионин (E2032M), аргинин (E2032R), валин (E2032V), тирозин (E2032Y), изолейцин (E2032I), например SEQ ID NO: 827, или лейцин (E2032L), например SEQ ID NO: 828. В варианте осуществления мутантный FRB содержит мутации по T2098, где T2098 мутирует в фенилаланин (T2098F) или лейцин (T2098L), например SEQ ID NO: 829. В варианте осуществления мутантный FRB содержит мутации по E2032 и по T2098, где E2032 мутирует в любую аминокислоту, и где T2098 мутирует в любую аминокислоту, например SEQ ID NO: 830. В варианте осуществления мутант FRB содержит мутацию E2032I и T2098L, например SEQ ID NO: 831. В варианте осуществления мутант FRB содержит мутацию E2032L и T2098L, например SEQ ID NO: 832.

Другие подходящие переключатели димеризации предусматривают основанный на GyrB-GyrB переключатель димеризации, основанный на гиббереллине переключатель димеризации, переключатель димеризации метка/связующее средство и переключатель димеризации галогеновая метка/SNAP-метка. В соответствии с указаниями, представленными в данном документе, такие переключатели и подходящие молекулы димеризации будут очевидны специалисту обычной квалификации в данной области техники.

Молекула димеризации

Связь между переключающими доменами обеспечивается молекулой димеризации. В присутствии молекулы димеризации обеспечивается взаимодействие или связь между переключающими доменами для сигнальной трансдукции между полипептидом, ассоциированным, например слитым, с первым переключающим доменом, и полипептидом, ассоциированным, например слитым, со вторым переключающим доменом. В присутствии неограничивающих уровней молекулы димеризации сигнальная трансдукция усиливается в 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2, 5, 10, 50, 100 раз, например, как измерено в системе, описанной в данном документе.

Рапамицин и аналоги рапамицина (иногда называемые рапалогами), например RAD001, могут применяться в качестве молекул димеризации в основанном на FKBP/FRB переключателе димеризации, описанном в данном документе. В варианте осуществления молекула димеризации может быть выбрана из рапамицина (сиролимус), RAD001 (эверолимус), зотаролимуса, темсиролимуса, AP-23573 (ридафоролимус), биолимуса и AP21967. Дополнительные аналоги рапамицина, подходящие для применения основанных на FKBP/FRB переключателях димеризации, далее описываются в разделе под названием "Комбинированные терапевтические средства" или в подразделе под названием "Типичные ингибиторы mTOR".

Разделенный CAR

В некоторых вариантах осуществления в CAR-экспрессирующей клетке используется разделенный CAR. Подход с разделенным CAR более подробно описан в публикациях согласно PCT WO2014/055442 и WO2014/055657, включенных в данный документ посредством ссылки. Вкратце, система разделенного CAR содержит клетку, экспрессирующую первый CAR, имеющий первый антигенсвязывающий домен и костимулирующий домен (например, 4-1BB), и эта клетка также экспрессирует второй CAR, имеющий второй антигенсвязывающий домен и внутриклеточный сигнальный домен (например, CD3-дзета). Когда клетка встречается с первым антигеном, то активируется костимулирующий домен, и клетка пролиферирует. Когда клетка встречается со вторым антигеном, то активируется внутриклеточный сигнальный домен, и запускается активность уничтожения клеток. Таким образом, CAR-экспрессирующая клетка полностью активируется только в присутствии обоих антигенов.

Трансфекция РНК

В данном документе раскрыты способы получения РНК, транскрибированной in vitro, кодирующей CAR. Настоящее изобретение также охватывает РНК-конструкцию, кодирующую CAR, которую можно вводить путем прямой трансфекции в клетку. Способ создания mRNA для применения в трансфекции может предусматривать транскрипцию in vitro (IVT) матрицы с использованием специально разработанных праймеров с последующим добавлением полиА с получением конструкции, содержащей 3'- и 5'-нетранслируемую последовательность ("UTR"), 5'-кэп и/или внутренний участок посадки рибосомы (IRES), нуклеиновую кислоту, которая должна экспрессироваться, и полиA-хвост, обычно длиной 50-2000 оснований. С помощью РНК, полученной таким образом, можно эффективно трансфицировать различные типы клеток. В одном аспекте матрица содержит последовательности для CAR.

В одном аспекте CAR для CD20 кодируется матричной РНК (mRNA). В одном аспекте mRNA, кодирующую CAR для CD20, вводят в иммунную эффекторную клетку, например T-клетку или NK-клетку, для получения CAR-экспрессирующей клетки, например CART-клетки или NK-клетки с CAR.

В одном варианте осуществления транскрибированная in vitro РНК, кодирующая CAR, может быть введена в клетку в форме временной трансфекции. РНК получают путем транскрипции in vitro с применением полученной посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР) матрицы. ДНК, представляющая интерес, из любого источника может быть непосредственно преобразована с помощью ПЦР в матрицу для синтеза mRNA in vitro с применением соответствующих праймеров и РНК-полимеразы. Источником ДНК может быть, например, геномная ДНК, плазмидная ДНК, фаговая ДНК, кДНК, синтетическая последовательность ДНК или любой другой подходящий источник ДНК. Требуемым шаблоном для in vitro транскрипции является CAR по настоящему изобретению. Например, матрица для РНК CAR содержит внеклеточную область, содержащую одноцепочечный вариабельный домен противоопухолевого антитела; шарнирную область, трансмембранный домен (например, трансмембранный домен CD8a) и цитоплазматическую область, которая включает в себя внутриклеточный сигнальный домен, например, содержащий сигнальный домен CD3-дзета и сигнальный домен 4-1BB.

В одном варианте осуществления ДНК, подлежащая применению в ПЦР, содержит открытую рамку считывания. ДНК может происходить из встречающейся в природе последовательности ДНК из генома организма. В одном варианте осуществления нуклеиновая кислота может содержать некоторые или все 5'- и/или 3'-нетранслируемые области (UTR). Нуклеиновая кислота может содержать экзоны и интроны. В одном варианте осуществления ДНК, подлежащая применению в ПЦР, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты человека. В другом варианте осуществления ДНК, подлежащая применению в ПЦР, представляет собой последовательность нуклеиновой кислоты человека, содержащую 5'- и 3'-UTR. В качестве альтернативы, ДНК может представлять собой искусственную последовательность ДНК, которая обычно не экспрессируется во встречающемся в природе организме. Иллюстративная искусственная последовательность ДНК представляет собой последовательность, которая содержит части генов, которые лигированы вместе с образованием открытой рамки считывания, которая кодирует слитый белок. Части ДНК, которые лигированы вместе, могут происходить из одного организма или из более чем одного организма.

ПЦР применяют для создания матрицы для in vitro транскрипции mRNA, которая применяется для трансфекции. Способы осуществления ПЦР хорошо известны из уровня техники. Праймеры для применения в ПЦР разрабатывают таким образом, что они имеют области, которые практически комплементарны областям ДНК, которые будут использоваться в качестве матрицы для ПЦР. Как используется в данном документе, "практически комплементарный" относится к последовательностям нуклеотидов, где большинство или все основания в последовательности праймера являются комплементарными, или одно или несколько оснований являются некомплементарными или несовпадающими. Практически комплементарные последовательности способны подвергаться отжигу или гибридизоваться с предполагаемой ДНК-мишенью в условиях отжига, применяемых для ПЦР. Праймеры можно разрабатывать таким образом, чтобы они были практически комплементарными любой части ДНК-матрицы. Например, праймеры можно разрабатывать таким образом, чтобы они амплифицировали часть нуклеиновой кислоты, которая обычно транскрибируется в клетках (открытая рамка считывания), включая 5'- и 3'-UTR. Праймеры также можно разрабатывать таким образом, чтобы они амплифицировали часть нуклеиновой кислоты, которая кодирует конкретный домен, представляющий интерес. В одном варианте осуществления праймеры разработаны для амплификации кодирующей области cDNA человека, в том числе всех или частей 5'- и 3'-UTR. Праймеры, применимые для ПЦР, могут быть получены посредством способов синтеза, которые хорошо известны из уровня техники. "Прямые праймеры" представляют собой праймеры, которые содержат область нуклеотидов, практически комплементарных нуклеотидам в ДНК-матрице, которые находятся выше последовательности ДНК, которая должна быть амплифицирована. "Расположенный выше" используется в данном документе для обозначения местоположения 5' в последовательности ДНК, подлежащей амплификации, относительно кодирующей цепи. "Обратные праймеры" представляют собой праймеры, которые содержат область нуклеотидов, которые практически комплементарны матрице двухцепочечной ДНК, которая находится ниже последовательности ДНК, которая должна быть амплифицирована. "Расположенный ниже" используется в данном документе для обозначения местоположения 3' в последовательности ДНК, подлежащей амплификации, относительно кодирующей цепи.

В способах, раскрытых в данном документе, может применяться любая ДНК-полимераза, пригодная для ПЦР. Реагенты и полимераза коммерчески доступны из ряда источников.

Также можно использовать химические структуры, способные обеспечивать стабильность и/или эффективность трансляции. РНК предпочтительно имеет 5'- и 3'-UTR. В одном варианте осуществления длина 5'-UTR составляет от одного до 3000 нуклеотидов. Длина последовательностей 5'- и 3'-UTR, которые должны быть добавлены к кодирующей области, может быть изменена с помощью различных способов, в том числе без ограничения путем разработки праймеров для ПЦР, которые отжигаются с различными областями UTR. Используя данный подход, специалист обычной квалификации в данной области техники может модифицировать длину 5'- и 3'-UTR, необходимую для достижения оптимальной эффективности трансляции после трансфекции транскрибированной РНК.

5'- и 3'-UTR могут представлять собой встречающиеся в природе эндогенные 5'- и 3'-UTR для нуклеиновой кислоты, представляющей интерес. В качестве альтернативы, последовательности UTR, которые не являются эндогенными для представляющей интерес нуклеиновой кислоты, могут быть добавлены путем включения последовательностей UTR в прямой и обратный праймеры или с помощью любых других модификаций матрицы. Применение последовательностей UTR, которые не являются эндогенными для представляющей интерес нуклеиновой кислоты, может быть полезным для изменения стабильности и/или эффективности трансляции РНК. Например, известно, что элементы с высоким содержанием AU в последовательностях 3'-UTR могут снижать стабильность mRNA. Следовательно, 3'-UTR могут быть выбраны или разработаны таким образом, чтобы они увеличивали стабильность транскрибированной РНК на основе свойств UTR, которые хорошо известны из уровня техники.

В одном варианте осуществления 5'-UTR может содержать последовательность Козак эндогенной нуклеиновой кислоты. В качестве альтернативы, когда 5'-UTR, которая не является эндогенной для представляющей интерес нуклеиновой кислоты, добавляют с помощью ПЦР, как описано выше, -консенсусная последовательность Козак может быть изменена путем добавления последовательности 5'-UTR. Последовательности Козак могут увеличивать эффективность трансляции некоторых транскриптов РНК, но, по-видимому, они не являются необходимыми для всех РНК для обеспечения эффективной трансляции. О необходимости последовательностей Козак для многих mRNA известно из уровня техники. В некоторых вариантах осуществления 5'-UTR может представлять собой 5'-UTR РНК вируса, РНК-геном которого стабилен в клетках. В некоторых вариантах осуществления для препятствования разрушению mRNA экзонуклеазой могут применяться различные нуклеотидные аналоги в 3'- или 5'-UTR.

Для обеспечения возможности синтеза РНК из ДНК-матрицы без необходимости клонирования гена, промотор транскрипции должен быть присоединен к ДНК-матрице выше транскрибируемой последовательности. Если последовательность, которая функционирует в качестве промотора для РНК-полимеразы, добавляют к 5'-концу прямого праймера, промотор РНК-полимеразы включается в продукт ПЦР выше открытой рамки считывания, которая должна быть транскрибирована. В одном предпочтительном варианте осуществления промотор представляет собой промотор Т7-полимеразы, как описано в другом месте данного документа. Другие применимые промоторы включают без ограничения промоторы РНК-полимеразы Т3 и SP6. Консенсусные последовательности нуклеиновой кислоты для промоторов T7, T3 и SP6 известны из уровня техники.

В предпочтительном варианте осуществления mRNA имеет как кэп на 5'-конце, так и 3'-поли(А) хвост, которые определяют связывание рибосомы, инициацию трансляции и стабильность mRNA в клетке. На кольцевой ДНК-матрице, например плазмидной ДНК, РНК-полимераза вырабатывает длинный конкатамерный продукт, который не подходит для экспрессии в эукариотических клетках. Транскрипция плазмидной ДНК, линеаризованной на 3'-конце UTR, приводит к образованию mRNA нормального размера, которая не эффективна для эукариотической трансфекции, даже если она полиаденилируется после транскрипции.

На линейной ДНК-матрице РНК-полимераза фага Т7 может вытягивать 3'-конец транскрипта за пределы последнего основания матрицы (Schenborn and Mierendorf, Nuc Acids Res., 13:6223-36 (1985); Nacheva and Berzal-Herranz, Eur. J. Biochem., 270:1485-65 (2003).

Традиционный способ интеграции участков полиА/Т в ДНК-матрицу представляет собой молекулярное клонирование. Однако последовательность полиА/Т, интегрированная в плазмидную ДНК, может вызывать нестабильность плазмиды, поэтому матрицы на основе плазмидной ДНК, полученные из бактериальных клеток, часто сильно испорчены делециями и другими аберрациями. Это делает процедуры клонирования не только трудоемкими и длительными, но зачастую и ненадежными. Поэтому способ, который позволяет конструировать ДНК-матрицы с 3'-участками полиА/Т без клонирования, является крайне желательным.

Сегмент полиA/T транскрипционной ДНК-матрицы может быть получен в ходе ПЦР с использованием обратного праймера, содержащего полиT-хвост, такой как хвост 100T (размер может составлять 50-5000 T), или после ПЦР любым другим способом, в том числе без ограничения лигированием ДНК или in vitro рекомбинацией. Поли(А)-хвосты также обеспечивают стабильность РНК и уменьшают их разрушение. Как правило, длина поли(А)-хвоста положительно коррелирует со стабильностью транскрибированной РНК. В одном варианте осуществления длина поли(А)-хвоста составляет от 100 до 5000 аденозинов.

Поли(А)-хвосты РНК могут быть дополнительно удлинены после транскрипции in vitro с помощью поли(А)-полимеразы, такой как полиА-полимераза Е. coli (E-PAP). В одном варианте осуществления увеличение длины поли(А)-хвоста от 100 нуклеотидов до 300-400 нуклеотидов приводит к приблизительно двукратному повышению эффективности трансляции РНК. Кроме того, присоединение различных химических групп к 3'-концу может увеличить стабильность mRNA. Такое присоединение может содержать модифицированные/искусственные нуклеотиды, аптамеры и другие соединения. Например, аналоги ATP могут быть включены в поли(А)-хвост с помощью поли(А)-полимеразы. Аналоги ATP могут дополнительно увеличить стабильность РНК.

5'-кэпы также обеспечивают стабильность молекул РНК. В предпочтительном варианте осуществления РНК, полученные с помощью способов, раскрытых в данном документе, содержат 5'-кэп. 5'-кэп получают с применением методик, известных из уровня техники и описанных в данном документе (Cougot, et al., Trends in Biochem. Sci., 29:436-444 (2001); Stepinski, et al., RNA, 7:1468-95 (2001); Elango, et al., Biochim. Biophys. Res. Commun., 330:958-966 (2005)).

РНК, полученные с помощью способов, раскрытых в данном документе, также могут содержать последовательность внутреннего участка посадки рибосомы (IRES). Последовательность IRES может являться любой вирусной, хромосомной или искусственно сконструированной последовательностью, которая инициирует независимое от кэпа связывание рибосомы с mRNA и облегчает инициацию трансляции. Могут быть включены любые растворенные вещества, подходящие для электропорации клеток, которые могут содержать факторы, способствующие проницаемости и жизнеспособности клеток, такие как сахара, пептиды, липиды, белки, антиоксиданты и поверхностно-активные вещества.

РНК может быть введена в целевые клетки с использованием любого из ряда различных способов, например, коммерчески доступных способов, которые включают без ограничения электропорацию (Amaxa Nucleofector-II (Amaxa Biosystems, Кельн, Германия)), (ECM 830 (BTX) (Harvard Instruments, Бостон, Массачусетс) или Gene Pulser II (BioRad, Денвер, Колорадо), Multiporator (Eppendort, Гамбург, Германия), трансфекцию, опосредованную катионной липосомой с использованием липофекции, инкапсуляцию полимера, трансфекцию, опосредованную пептидом, или биолистические системы доставки частиц, такие как "генные пушки" (см., например, Nishikawa, et al. Hum Gene Ther., 12 (8):861-70 (2001).

Невирусные способы доставки

В некоторых аспектах можно применять невирусные способы для доставки нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, описанный в данном документе, в клетку, или ткань, или организм субъекта.

В некоторых вариантах осуществления невирусный способ включает применение транспозона (также называемого мобильным генетическим элементом). В некоторых вариантах осуществления транспозон представляет собой фрагмент ДНК, который может вставлять себя в определенное местоположение в геноме, например, фрагмент ДНК, который способен к саморепликации и вставке своей копии в геном, или фрагмент ДНК, который может быть сплайсирован из более длинной нуклеиновой кислоты и вставлен в другое место в геноме. Например, транспозон содержит последовательность ДНК, состоящую из инвертированных повторов, фланкирующих гены для транспозиции.

Иллюстративные способы доставки нуклеиновой кислоты с применением транспозона включают транспозонную систему "спящая красавица" (SBTS) и транспозонную систему piggyBac (PB). См., например, Aronovich et al. Hum. Mol. Genet. 20.R1(2011):R14-20; Singh et al. Cancer Res. 15(2008):2961-2971; Huang et al. Mol. Ther. 16(2008):580-589; Grabundzija et al. Mol. Ther. 18(2010):1200-1209; Kebriaei et al. Blood. 122.21(2013):166; Williams. Molecular Therapy 16.9(2008):1515-16; Bell et al. Nat. Protoc. 2.12(2007):3153-65; и Ding et al. Cell. 122.3(2005):473-83, все из которых включены в данный документ посредством ссылки.

SBTS включает два компонента: 1) транспозон, содержащий трансген, и 2) источник фермента транспозазы. Транспозаза может транспонировать транспозон из плазмиды-носителя (или другой донорной ДНК) в целевую ДНК, такую как хромосома/геном клетки-хозяина. Например, транспозаза связывается с плазмидой-носителем/донорной ДНК, вырезает транспозон (в том числе трансген(-ы)) из плазмиды и вставляет его в геном клетки-хозяина. См., например, Aronovich et al.

Иллюстративные транспозоны включают транспозон на основе pT2. См., например, Grabundzija et al. Nucleic Acids Res. 41.3(2013):1829-47 и Singh et al. Cancer Res. 68.8(2008): 2961-2971, все из которых включены в данный документ посредством ссылки. Иллюстративные транспозазы включают транспозазу типа Tc1/mariner, например транспозазу SB10 или транспозазу SB11 (гиперактивная транспозаза, которая может быть экспрессирована, например, с участием промотора цитомегаловируса). См., например, Aronovich et al.; Kebriaei et al. и Grabundzija et al., все из которых включены в данный документ посредством ссылки.

Применение SBTS обеспечивает эффективную интеграцию и экспрессию трансгена, например, нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, описанный в данном документе. В данном документе представлены способы получения клетки, например T-клетки или NK-клетки, которая стабильно экспрессирует CAR, описанный в данном документе, например, с применением транспозонной системы, такой как SBTS.

В соответствии со способами, описанными в данном документе, в некоторых вариантах осуществления одна или несколько нуклеиновых кислот, например, плазмиды, содержащие компоненты SBTS, доставляются в клетку (например, T- или NK-клетку). Например, нуклеиновую(-ые) кислоту(-ы) доставляют с помощью стандартных способов доставки нуклеиновой кислоты (например, плазмидной ДНК), например, с помощью описанных в данном документе способов, например, электропорации, трансфекции или липофекции. В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота содержит транспозон, содержащий трансген, например, нуклеиновую кислоту, кодирующую CAR, описанный в данном документе. В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота содержит транспозон, содержащий трансген (например, нуклеиновую кислоту, кодирующую CAR, описанный в данном документе), а также последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую фермент транспозазу. В некоторых вариантах осуществления предусмотрена система с двумя нуклеиновыми кислотами, например, система с двумя плазмидами, например, где первая плазмида содержит транспозон, содержащий трансген, и вторая плазмида содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую фермент транспозазу. Например, первая и вторая нуклеиновые кислоты совместно доставляются в клетку-хозяина.

В некоторых вариантах осуществления клетки, например T- или NK-клетки, которые экспрессируют CAR, описанный в данном документе, получают с использованием комбинации вставки гена с помощью SBTS и генетического редактирования с помощью нуклеазы (например, нуклеаз с "цинковыми пальцами" (ZFN), эффекторных нуклеаз, подобных активаторам транскрипции (TALEN), системы CRISPR/Cas или сконструированной мегануклеазы, повторно сконструированной хоуминг-эндонуклеазы).

В некоторых вариантах осуществления применение невирусного способа доставки позволяет перепрограммировать клетки, например Т- или NK-клетки, и управлять инфузией клеток в субъект. Преимущества невирусных векторов включают без ограничения простоту и относительно низкую стоимость производства достаточных количеств, необходимых для удовлетворения требований в отношении популяции пациентов, стабильности при хранении и отсутствия иммуногенности.

Конструкции нуклеиновых кислот, кодирующие CAR

Настоящее изобретение также относится к молекулам нуклеиновой кислоты, кодирующим одну или несколько конструкций CAR, описанных в данном документе. В одном аспекте молекула нуклеиновой кислоты предусмотрена в виде транскрипта матричной РНК. В одном аспекте молекула нуклеиновой кислоты предусмотрена в виде ДНК-конструкции.

Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит CD20-связывающий домен (например, мышиный, гуманизированный или CD20-связывающий домен человека), трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий стимулирующий домен, например, костимулирующий сигнальный домен и/или первичный сигнальный домен, например дзета-цепь. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен представляет собой CD20-связывающий домен, описанный в данном документе, например, CD20-связывающий домен, который содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В одном варианте осуществления трансмембранный домен представляет собой трансмембранный домен белка, например, описанного в данном документе, например, выбранного из группы, состоящей из альфа-, бета- или дзета-цепи Т-клеточного рецептора, CD28, CD3-эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD123, CD134, CD137 и CD154. В одном варианте осуществления трансмембранный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 801 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом с помощью шарнирной области, например, шарнирного участка, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления шарнирная область содержит SEQ ID NO: 799, или SEQ ID NO: 814, или SEQ ID NO: 816, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В одном варианте осуществления выделенная молекула нуклеиновой кислоты дополнительно содержит последовательность, кодирующую костимулирующий домен. В одном варианте осуществления костимулирующий домен представляет собой функциональный сигнальный домен белка, например, описанного в данном документе, например, выбранного из группы, состоящей из OX40, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278) и 4-1BB (CD137). В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен 4-1BB и функциональный сигнальный домен CD3-дзета. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 806 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней, и последовательность под SEQ ID NO: 807 или SEQ ID NO: 808 или последовательность с 95-99% идентичностью с ней, где последовательности, образующие внутриклеточный сигнальный домен, экспрессируются в одной и той же рамке считывания и в виде одной полипептидной цепи.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей конструкцию CAR, содержащую лидерную последовательность под SEQ ID NO: 797, scFv домен, имеющий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429 (или последовательность с 95-99% идентичностью с ней), шарнирную область под SEQ ID NO: 799, или SEQ ID NO: 814, или SEQ ID NO: 814 (или последовательность с 95-99% идентичностью с ней), трансмембранный домен, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 801 (или последовательность с 95-99% идентичностью с ней), костимулирующий домен 4-1BB, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 803, или костимулирующий домен CD27, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 818 (или последовательность с 95-99% идентичностью с ней), и стимулирующий домен CD3-дзета, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807 (или последовательность с 95-99% идентичностью с ней).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к выделенной молекуле полипептида, кодируемой молекулой нуклеиновой кислоты. В одном варианте осуществления выделенная молекула полипептида содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 79, SEQ ID NO: 106, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 214, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 268, SEQ ID NO: 295, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 349, SEQ ID NO: 376, SEQ ID NO: 403, и SEQ ID NO: 430, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей молекулу химерного антигенного рецептора (CAR), которая содержит CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий стимулирующий домен, и где указанный CD20-связывающий домен содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней.

В одном варианте осуществления кодируемая молекула CAR дополнительно содержит последовательность, кодирующую костимулирующий домен. В одном варианте осуществления костимулирующий домен представляет собой функциональный сигнальный домен белка, выбранного из группы, состоящей из OX40, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18) и 4-1BB (CD137). В одном варианте осуществления костимулирующий домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803. В одном варианте осуществления трансмембранный домен представляет собой трансмембранный домен белка, выбранного из группы, состоящей из альфа-, бета- или дзета-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3 эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD123, CD134, CD137, CD154, KIR2DS2, OX40, CD2, CD27, LFA-1 (CD11a и CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD40, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), CD160, CD19, IL2R β, IL2R g (общая гамма), IL7R α, ITGA1, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, DNAM1 (CD226), SLAMF4, (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR и PAG/Cbp.

В одном варианте осуществления трансмембранный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен 4-1BB и функциональный сигнальный домен дзета. В одном варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит последовательность под SEQ ID NO: 803 и последовательность под SEQ ID NO: 804, где последовательности, образующие внутриклеточный сигнальный домен, экспрессируются в одной и той же рамке считывания и в виде одной полипептидной цепи. В одном варианте осуществления CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом с помощью шарнирной области. В одном варианте осуществления шарнирная область содержит SEQ ID NO: 799. В одном варианте осуществления шарнирная область содержит SEQ ID NO: 799, или SEQ ID NO: 814, или SEQ ID NO: 816.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к кодируемой молекуле CAR, содержащей лидерную последовательность под SEQ ID NO: 797, scFv домен, имеющий последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 78, SEQ ID NO: 105, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 213, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294, SEQ ID NO: 321, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 375, SEQ ID NO: 402, и SEQ ID NO: 429, или последовательность с 95-99% идентичностью с ней, шарнирную область под SEQ ID NO: 799, или SEQ ID NO: 814, или SEQ ID NO: 816, трансмембранный домен, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 801, костимулирующий домен 4-1BB, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 803, или костимулирующий домен CD27, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 818, и стимулирующий домен CD3-дзета, имеющий последовательность под SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807.

Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие требуемые молекулы, можно получить с применением рекомбинантных способов, известных из уровня техники, таких как, например, скрининг библиотек из клеток, экспрессирующих ген, путем получения гена из вектора, который, как известно, включает его, или путем непосредственного выделения из клеток и тканей, содержащих их, с применением стандартных методик. В качестве альтернативы, ген, представляющий интерес, может быть получен синтетическим путем, а не клонирован.

В настоящем изобретении также предусмотрены векторы, в которые вставлена ДНК по настоящему изобретению. Векторы, полученные из ретровирусов, таких как лентивирус, являются подходящими инструментами для достижения долгосрочного переноса генов, поскольку они обеспечивают долгосрочную стабильную интеграцию трансгена и его размножение в дочерних клетках. Лентивирусные векторы обладают дополнительным преимуществом по сравнению с векторами, полученными из онкоретровирусов, таких как вирусы лейкоза мышей, в том, что ими можно трансдуцировать непролиферирующие клетки, такие как гепатоциты. Они также обладают дополнительным преимуществом низкой иммуногенности.

В другом варианте осуществления вектор, содержащий нуклеиновую кислоту, кодирующую требуемый CAR по настоящему изобретению, представляет собой аденовирусный вектор (A5/35). В другом варианте осуществления экспрессии нуклеиновых кислот, кодирующих CAR, можно достичь с помощью транспозонов, таких как "спящая красавица", crisper, CAS9 и нуклеазы с "цинковыми пальцами". См. ниже June et al. 2009 Nature Reviews Immunology 9.10: 704-716, включенный в данный документ посредством ссылки.

Вкратце, экспрессия природных или синтетических нуклеиновых кислот, кодирующих CAR, обычно достигается путем образования функциональной связи нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид CAR или его части, с промотором и включения конструкции в состав экспрессионного вектора. Векторы могут подходить для репликации и интеграции у эукариот. Типичные клонирующие векторы содержат терминаторы транскрипции и трансляции, последовательности инициации и промоторы, применимые для регуляции экспрессии требуемой последовательности нуклеиновой кислоты.

Экспрессионные конструкции по настоящему изобретению также можно использовать для иммунизации и генной терапии нуклеиновыми кислотами с использованием стандартных протоколов доставки генов. Способы доставки генов известны из уровня техники. См., например, патенты США №№ 5399346, 5580859, 5589466, включенные в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрен вектор для генной терапии.

Нуклеиновую кислоту можно клонировать в векторы множества типов. Например, нуклеиновую кислоту можно клонировать в вектор, включающий в себя без ограничения плазмиду, фагмиду, производное фага, вирус животных и космиду. Векторы, представляющие особый интерес, включают экспрессионные векторы, репликационные векторы, векторы для создания зондов и векторы для секвенирования.

Кроме того, экспрессионный вектор можно предоставлять клетке в форме вирусного вектора. Технология вирусных векторов хорошо известна из уровня техники и описана, например, в Sambrook et al., 2012, MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, volumes 1-4, Cold Spring Harbor Press, NY) и в других руководствах по вирусологии и молекулярной биологии. Вирусы, применимые в качестве векторов, включают в себя без ограничения ретровирусы, аденовирусы, аденоассоциированные вирусы, герпесвирусы и лентивирусы. Как правило, подходящий вектор содержит точку начала репликации, функционирующую по меньшей мере в одном организме, промоторную последовательность, подходящие сайты для эндонуклеаз рестрикции и один или несколько селектируемых маркеров (например, WO 01/96584; WO 01/29058 и патент США № 6326193).

Ряд вирусных систем был разработан для переноса генов в клетки млекопитающих. Например, ретровирусы представляют собой удобную платформу для систем доставки генов. Выбранный ген можно вставить в вектор и упаковать в ретровирусные частицы с использованием методик, известных из уровня техники. Затем рекомбинантный вирус можно выделить и доставить в клетки субъекта in vivo либо ex vivo. Из уровня техники известен ряд ретровирусных систем. В некоторых вариантах осуществления используют аденовирусные векторы. Из уровня техники известен ряд аденовирусных векторов. В одном варианте осуществления используют лентивирусные векторы.

Дополнительные промоторные элементы, например, энхансеры, регулируют частоту инициации транскрипции. Как правило, они расположены в области на 30-110 п. о. выше сайта начала, хотя было показано, что ряд промоторов также содержит функциональные элементы ниже сайта начала. Расстояние между промоторными элементами часто является гибким, так что функция промотора сохраняется при инверсии элементов или их перемещении друг относительно друга. В промоторе гена тимидинкиназы (tk) расстояние между промоторными элементами можно увеличить до 50 п. н., прежде чем активность начнет снижаться. В зависимости от промотора оказывается, что отдельные элементы могут функционировать для активации транскрипции совместно или независимо. Иллюстративные промоторы предусматривают промоторы генов IE CMV, EF-1α, убиквитина С или фосфоглицерокиназы (PGK).

Примером промотора, который способен обеспечивать экспрессию трансгена CAR в Т-клетке млекопитающего, является промотор EF1-альфа (EF1a). Нативный промотор EF1a управляет экспрессией альфа-субъединицы комплекса фактора элонгации-1, который отвечает за ферментативную доставку аминоацил-tRNA в рибосому. Промотор EF1a широко использовался в экспрессионных плазмидах для млекопитающих, и было показано, что он эффективно управляет экспрессией CAR с трансгенов, клонированных в лентивирусный вектор. См., например, Milone et al., Mol. Ther. 17(8): 1453-1464 (2009). В одном аспекте промотор EF1a содержит последовательность, представленную под SEQ ID NO: 833.

Другим примером промотора является последовательность немедленно-раннего промотора цитомегаловируса (CMV). Эта промоторная последовательность является последовательностью сильного конститутивного промотора, способного управлять экспрессией любой полинуклеотидной последовательности, функционально связанной с ней, на высоких уровнях. Однако можно также использовать последовательности других конститутивных промоторов, в том числе без ограничения раннего промотора вируса обезьян 40 (SV40), промотора вируса опухоли молочной железы мышей (MMTV), промотора длинного концевого повтора (LTR) вируса иммунодефицита человека (HIV), промотора MoMuLV, промотора вируса лейкоза птиц, немедленно-раннего промотора вируса Эпштейна-Барр, промотора вируса саркомы Рауса, а также промоторы генов человека, такие как, без ограничения, промотор гена актина, промотор гена миозина, промотор гена фактора элонгации-1α, промотор гена гемоглобина и промотор гена креатинкиназы. Кроме того, настоящее изобретение не должно ограничиваться применением конститутивных промоторов. Индуцируемые промоторы также рассматриваются как часть настоящего изобретения. Применение индуцируемого промотора обеспечивает молекулярный переключатель, способный включать экспрессию полинуклеотидной последовательности, с которой он функционально связан, если такая экспрессия желательна, или отключать экспрессию, если экспрессия нежелательна. Примеры индуцируемых промоторов включают без ограничения металлотионеин-индуцируемый промотор, глюкокортикоид-индуцируемый промотор, прогестерон-индуцируемый промотор и тетрациклин-индуцируемый промотор.

Для оценки экспрессии полипептида CAR или его частей экспрессионный вектор, который должен быть введен в клетку, также может содержать либо селектируемый маркерный ген или репортерный ген, либо их оба для облегчения идентификации и отбора экспрессирующих клеток из популяции клеток, которые стремились трансфицировать или инфицировать посредством вирусных векторов. В других аспектах селектируемый маркер может нестись отдельным фрагментом ДНК и использоваться в процедуре котрансфекции. Как селектируемые маркеры, так и репортерные гены могут быть фланкированы соответствующими регуляторными последовательностями для обеспечения экспрессии в клетках-хозяевах. Применимые селектируемые маркеры включают в себя, например, гены устойчивости к антибиотикам, такие как neo и т. п.

Репортерные гены используют для идентификации потенциально трансфицированных клеток и для оценивания функциональных возможностей регуляторных последовательностей. Как правило, репортерный ген представляет собой ген, который отсутствует или не экспрессируется в организме- или ткани-реципиенте и который кодирует полипептид, экспрессия которого проявляется в некотором легко выявляемом свойстве, например, ферментативной активности. Экспрессию репортерного гена анализируют в подходящее время после введения ДНК в клетки-реципиенты. Подходящие репортерные гены могут включать в себя гены, кодирующие люциферазу, бета-галактозидазу, хлорамфениколацетилтрансферазу, секретируемую щелочную фосфатазу, или ген зеленого флуоресцентного белка (например, Ui-Tei et al., 2000 FEBS Letters 479: 79-82). Подходящие системы экспрессии хорошо известны и могут быть получены с использованием известных методик или приобретены коммерческим путем. Как правило, конструкцию с минимальной 5'-фланкирующей областью, демонстрирующую наивысший уровень экспрессии репортерного гена, идентифицируют как промотор. Такие промоторные области могут быть связаны с репортерным геном и использоваться для оценивания средств в отношении способности к модулированию транскрипции, управляемой промотором.

В одном варианте осуществления вектор может дополнительно содержать нуклеиновую кислоту, кодирующую второй CAR. В одном варианте осуществления второй CAR включает в себя антигенсвязывающий домен для мишени, экспрессируемой на клетках острого миелоидного лейкоза, такой как, например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CD34, CLL-1, CD123, FLT3, CD79b, CD179b или CD79a. В одном варианте осуществления вектор содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую первый CAR, который нацеливается на первый антиген и содержит внутриклеточный сигнальный домен, имеющий костимулирующий сигнальный домен, но не первичный сигнальный домен, и нуклеиновую кислоту, кодирующую второй CAR, который нацеливается на второй, другой антиген, и содержит внутриклеточный сигнальный домен, имеющий первичный сигнальный домен, но не костимулирующий сигнальный домен. В одном варианте осуществления вектор содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую первый CAR для CD20, который включает в себя CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и костимулирующий домен, и нуклеиновую кислоту, кодирующую второй CAR, который нацеливается на антиген, отличный от CD20 (например, антиген, экспрессируемый на клетках AML, например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CD34, CLL-1, CD123, FLT3, CD79b, CD179b или CD79a), и включает в себя антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и первичный сигнальный домен. В другом варианте осуществления вектор содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую первый CAR для CD20, который включает в себя CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и первичный сигнальный домен, и нуклеиновую кислоту, кодирующую второй CAR, который нацеливается на антиген, отличный от CD20 (например, антиген, экспрессируемый на клетках AML, например, CD22, CD19, ROR1, CD10, CD33, CLL-1, CD34, CD123, FLT3, CD79b, CD179b или CD79a), и включает в себя антигенсвязывающий домен для антигена, трансмембранный домен и костимулирующий сигнальный домен.

В одном варианте осуществления вектор содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую CAR для CD20, описанный в данном документе, и нуклеиновую кислоту, кодирующую ингибирующий CAR. В одном варианте осуществления ингибирующий CAR содержит антигенсвязывающий домен, который связывает антиген, обнаруживаемый на нормальных клетках, но не на раковых клетках, например, на нормальных клетках, которые также экспрессируют CD20. В одном варианте осуществления ингибирующий CAR содержит антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен ингибирующей молекулы. Например, внутриклеточный домен ингибирующего CAR может представлять собой внутриклеточный домен PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 или TGF бета.

Способы введения генов в клетку и обеспечения их экспрессии в ней известны из уровня техники. Что касается экспрессионного вектора, то вектор можно легко ввести в клетку-хозяина, например, клетку млекопитающего, бактериальную, дрожжей или насекомого, любым способом, известным из уровня техники. Например, экспрессионный вектор можно перенести в клетку-хозяина физическим, химическим или биологическим способом.

Физические способы введения полинуклеотида в клетку-хозяина включают осаждение фосфатом кальция, липофекцию, бомбардировку частицами, микроинъекцию, электропорацию и т. п. Способы получения клеток, содержащих векторы и/или экзогенные нуклеиновые кислоты, хорошо известны из уровня техники. См., например, Sambrook et al., 2012, MOLECULAR CLONING: A LABORATORY MANUAL, volumes 1-4, Cold Spring Harbor Press, NY). Предпочтительным способом введения полинуклеотида в клетку-хозяина является трансфекция с использованием фосфата кальция.

Биологические способы введения полинуклеотида, представляющего интерес, в клетку-хозяина включают применение векторов на основе ДНК и РНК. Вирусные векторы, и особенно ретровирусные векторы, стали наиболее широко применяемым способом вставки генов в клетки млекопитающего, например человека. Другие вирусные векторы могут быть получены из лентивируса, поксвирусов, вируса простого герпеса I, аденовирусов и аденоассоциированных вирусов и т. п. См., например, патенты США №№ 5350674 и 5585362.

Химические средства для введения полинуклеотида в клетку-хозяина включают коллоидные дисперсионные системы, такие как макромолекулярные комплексы, нанокапсулы, микросферы, микрогранулы и системы на основе липидов, в том числе эмульсии масло-в-воде, мицеллы, смешанные мицеллы и липосомы. Иллюстративной коллоидной системой для применения в качестве средства для доставки in vitro и in vivo является липосома (например, искусственная мембранная везикула). Из уровня техники доступны другие способы целенаправленной доставки нуклеиновых кислот, такие как доставка полинуклеотидов с помощью нацеливающихся наночастиц или другой подходящей системы доставки субмикронного размера.

В случае использования системы доставки, отличной от вирусной, иллюстративным средством для доставки является липосома. Для введения нуклеиновых кислот в клетку-хозяина (in vitro, ex vivo или in vivo) предполагается применение липидных составов. В другом аспекте нуклеиновая кислота может быть ассоциирована с липидом. Нуклеиновая кислота, ассоциированная с липидом, может быть инкапсулирована в водной внутренней части липосомы, вкраплена в липидный бислой липосомы, присоединена к липосоме посредством связывающей молекулы, которая ассоциирована как с липосомой, так и с олигонуклеотидом, захвачена в липосому, образовывать комплекс с липосомой, диспергирована в растворе, содержащем липид, смешана с липидом, объединена с липидом, содержаться в виде суспензии в липиде, содержаться в мицелле или образовывать комплекс с ней или иным образом быть ассоциированной с липидом. Композиции, связанные с липидом, липидом/ДНК или липидом/экспрессионным вектором, не ограничиваются какой-либо конкретной структурой в растворе. Например, они могут присутствовать в двухслойной структуре, в виде мицелл или в "сжатой" структуре. Они также могут быть просто вкраплены в раствор, возможно, образуя агрегаты, которые не являются однородными по размеру или форме. Липиды представляют собой жирные вещества, которые могут представлять собой встречающиеся в природе или синтетические липиды. Например, липиды включают жировые капли, которые обычно встречаются в цитоплазме, а также класс соединений, которые содержат длинноцепочечные алифатические углеводороды и их производные, такие как жирные кислоты, спирты, амины, аминоспирты и альдегиды.

Подходящие для применения липиды можно получить из коммерческих источников. Например, димиристилфосфатидилхолин ("DMPC") можно получить от Sigma, St. Louis, MO; дицетилфосфат ("DCP") можно получить от K & K Laboratories (Плейнвью, Нью-Йорк); холестерин ("Choi") можно получить от Calbiochem-Behring; димиристилфосфатидилглицерин ("DMPG") и другие липиды можно получить от Avanti Polar Lipids, Inc. (Бирмингем, Алабама). Исходные растворы липидов в хлороформе или хлороформе/метаноле могут храниться при температуре приблизительно -20°C. Хлороформ применяется в качестве уникального растворителя, поскольку он испаряется более легко, чем метанол. "Липосома" представляет собой общий термин, охватывающий множество одно- и мультиламеллярных липидных носителей, образованных в результате образования закрытых липидных бислоев или агрегатов. Липосомы могут быть охарактеризованы как имеющие везикулярные структуры с мембраной, представляющей собой фосфолипидный бислой, и внутренней водной средой. Мультиламеллярные липосомы имеют несколько липидных слоев, разделенных водной средой. Они образуются самопроизвольно, когда фосфолипиды суспендируют в избытке водного раствора. Липидные компоненты подвергаются самоорганизации перед образованием замкнутых структур и захватывают воду и растворенные вещества между липидными бислоями (Ghosh et al., 1991, Glycobiology 5: 505-10). Однако также охватываются композиции, которые имеют другие структуры в растворе, отличные от нормальной везикулярной структуры. Например, липиды могут принимать мицеллярную структуру или просто существовать в виде неоднородных агрегатов молекул липидов. Также предполагаются комплексы липофектамин-нуклеиновая кислота.

Чтобы подтвердить присутствие последовательности рекомбинантной ДНК в клетке-хозяине, можно выполнять различные анализы, независимо от способа, применяемого для введения экзогенных нуклеиновых кислот в клетку-хозяина, или иного воздействия ингибитора по настоящему изобретению в отношении клетки. Такие анализы включают, например, "молекулярно-биологические" анализы, хорошо известные специалистам в данной области техники, такие как саузерн и нозерн-блоттинг, RT-PCR и ПЦР; "биохимические" анализы, такие как выявление присутствия или отсутствия конкретного пептида, например, с помощью иммунологических средств (ELISA и вестерн-блоттинг) или с помощью описанных в данном документе анализов для идентификации средств, попадающих в объем настоящего изобретения.

Настоящее изобретение дополнительно предусматривает вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR. В одном аспекте вектор CAR можно вводить путем прямой трансдукции в клетку, например T-клетку или NK-клетку. В одном аспекте вектор представляет собой клонирующий или экспрессионный вектор, например, вектор, включающий в себя без ограничения одну или несколько плазмид (например, экспрессионные плазмиды, клонирующие векторы, миникольца, минивекторы, двойные микрохромосомы), ретровирусные и лентивирусные векторные конструкции. В одном аспекте вектор способен экспрессировать конструкцию CAR в Т-клетках или NK-клетках млекопитающих. В одном аспекте Т-клетка млекопитающего представляет собой Т-клетку человека.

Источники клеток

Перед размножением и генетической модификацией или другой модификацией, источник клеток, например T-клеток или естественных киллерных клеток (NK), можно получить от субъекта. Термин "субъект" предполагается как включающий живые организмы, у которых можно вызвать иммунный ответ (например, млекопитающих). Примеры субъектов включают людей, обезьян, шимпанзе, собак, кошек, мышей, крыс и их трансгенные формы. Т-клетки можно получить из ряда источников, в том числе из мононуклеарных клеток периферической крови, костного мозга, ткани лимфатических узлов, пуповинной крови, ткани тимуса, ткани из очага инфекции, асцита, плеврального выпота, ткани селезенки и опухолей. В определенных аспектах настоящего изобретения иммунные эффекторные клетки, например Т-клетки, можно получить из единицы крови, собранной у субъекта, с применением любого количества методик, известных специалисту в данной области техники, таких как разделение с помощью Ficoll™. В одном предпочтительном аспекте клетки из циркулирующей крови индивидуума получают путем афереза. Продукт афереза обычно содержит лимфоциты, в том числе Т-клетки, моноциты, гранулоциты, В-клетки, другие ядерные лейкоциты, эритроциты и тромбоциты. В одном аспекте клетки, собранные с помощью афереза, можно промыть, чтобы удалить фракцию плазмы крови и необязательно поместить клетки в соответствующий буфер или среду для последующих стадий обработки. В одном аспекте настоящего изобретения клетки промывают фосфатно-солевым буферным раствором (PBS). В альтернативном аспекте в промывочном растворе отсутствует кальций и может отсутствовать магний или могут отсутствовать многие, если не все, двухвалентные катионы. Начальные стадии активации в отсутствие кальция могут привести к усиленной активации. Специалистам обычной квалификации в данной области техники будет без труда понятно, что стадию промывки можно осуществлять способами, известными специалистам в данной области техники, как например, с помощью полуавтоматической "проточной" центрифуги (например, клеточного процессора Cobe 2991, Baxter CytoMate или Haemonetics Cell Saver 5) в соответствии с инструкциями изготовителя. После промывки клетки можно ресуспендировать в различных биосовместимых буферах, таких как, например, PBS, не содержащий Ca и не содержащий Mg, PlasmaLyte A или другой солевой раствор с буфером или без него. В качестве альтернативы, нежелательные компоненты из аферезного образца можно удалить, и клетки можно непосредственно ресуспендировать в культуральной среде.

В одном аспекте Т-клетки выделяют из лимфоцитов периферической крови путем лизиса эритроцитов и истощения популяции моноцитов, например, посредством центрифугирования в градиенте PERCOLL™ или посредством противоточного элютриационного центрифугирования.

Способы, описанные в данном документе, могут включать, например, отбор конкретной субпопуляции иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток, которая представляет собой популяцию, истощенную по регуляторным Т-клеткам с истощением по клеткам CD25+, с помощью, например, методики отрицательного отбора, например описанного в данном документе. Популяция, истощенная по регуляторным Т-клеткам, предпочтительно содержит менее 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% CD25+ клеток.

В одном варианте осуществления регуляторные T-клетки, например T-клетки CD25+, удаляют из популяции с помощью антитела к CD25 или его фрагмента или CD25-связывающего лиганда IL-2. В одном варианте осуществления антитело к CD25 или его фрагмент или CD25-связывающий лиганд конъюгированы с субстратом, например гранулой, или иным образом нанесены на субстрат, например микрогранулу. В одном варианте осуществления антитело к CD25 или его фрагмент конъюгированы с субстратом, описанным в данном документе.

В одном варианте осуществления регуляторные T-клетки, например, T-клетки CD25+, удаляют из популяции с помощью реагента для истощения по CD25 от Miltenyi™. В одном варианте осуществления соотношение клеток и реагента для истощения по CD25 составляет 1e7 клеток на 20 мкл, или 1e7 клеток на 15 мкл, или 1e7 клеток на 10 мкл, или 1e7 клеток на 5 мкл, или 1e7 клеток на 2,5 мкл, или 1e7 клеток на 1,25 мкл.

В одном варианте осуществления популяция иммунных эффекторных клеток, которая должна быть истощена, содержит приблизительно 6×10⁹ CD25+ T-клеток. В других аспектах популяция иммунных эффекторных клеток, которая должна быть истощена, содержит от приблизительно 1×10⁹до 1×10¹⁰ CD25+ Т-клеток с включением любого целочисленного значения в этом промежутке. В одном варианте осуществления полученная популяция, истощенная по регуляторным T-клеткам, содержит 2×10⁹регуляторных T-клеток, например, CD25+ клеток, или меньше (например, 1×10⁹, 5×10⁸, 1×10⁸, 5×10⁷, 1×10⁷ или меньше CD25+ клеток).

В одном варианте осуществления регуляторные Т-клетки, например, CD25+ клетки, удаляют из популяции с помощью системы CliniMACS с набором трубок для истощения, таким как, например, трубки 162-01. В одном варианте осуществления система CliniMACS работает с установленными параметрами истощения, например такими как DEPLETION2.1.

Способы, описанные в данном документе, могут включать более одной стадии отбора, например, более одной стадии истощения. Обогащение популяции Т-клеток путем отрицательного отбора можно осуществлять, например, с помощью комбинации антител, направленных на поверхностные маркеры, уникальные для клеток, подвергаемых отрицательному отбору. Одним из способов является сортировка и/или отбор клеток с помощью отрицательной магнитной иммуноадгезии или проточной цитометрии, в которой используется коктейль моноклональных антител, направленных на маркеры клеточной поверхности, присутствующие на клетках, подвергаемых отрицательному отбору. Например, для обогащения клетками CD4+ путем отрицательного отбора смесь моноклональных антител может включать антитела к CD14, CD20, CD11b, CD16, HLA-DR и CD8.

Способы, описанные в данном документе, могут дополнительно включать удаление из популяции клеток, экспрессирующих опухолевый антиген, например опухолевый антиген, который не включает CD25, например, CD19, CD30, CD38, CD123, CD20, CD14 или CD11b, с получением тем самым популяции, истощенной по регуляторным Т-клеткам, например истощенной по CD25+, и истощенной по клеткам с опухолевым антигеном, которая подходит для экспрессии CAR, например CAR, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие опухолевый антиген, удаляют одновременно с регуляторными Т-клетками, например клетками CD25+. Например, антитело к CD25 или его фрагмент и антитело к опухолевому антигену или его фрагмент могут быть присоединены к одному и тому же субстрату, например микрогрануле, который можно применять для удаления клеток, или антитело к CD25 или его фрагмент или антитело к опухолевому антигену или его фрагмент могут быть присоединены к отдельным микрогранулам, смесь которых можно применять для удаления клеток. В некоторых вариантах осуществления удаление регуляторных Т-клеток, например клеток CD25+, и удаление клеток, экспрессирующих опухолевый антиген, является последовательным и может происходить, например, в любом порядке.

Также предусмотрены способы, которые включают удаление из популяции клеток, экспрессирующих ингибитор контрольных точек иммунного ответа, например, ингибитор контрольных точек иммунного ответа, описанный в данном документе, например, одного или нескольких из клеток PD1+, LAG3+ клеток и клеток TIM3+, с получением тем самым популяции, истощенной по регуляторным Т-клеткам, например, истощенной по клеткам CD25+ и истощенной по клеткам с ингибитором контрольных точек иммунного ответа, например, истощенной по клеткам PD1+, LAG3+ и/или TIM3+. Иллюстративные ингибиторы контрольных точек иммунного ответа включают B7-H1, B&-1, CD160, P1H, 2B4, PD1, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, TIGIT, CTLA-4, BTLA и LAIR1. В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие ингибитор контрольных точек иммунного ответа, удаляют одновременно с регуляторными Т-клетками, например клетками CD25+. Например, антитело к CD25 или его фрагмент и антитело к ингибитору контрольных точек иммунного ответа или его фрагмент могут быть присоединены к одной и той же микрогрануле, которую можно применять для удаления клеток, или антитело к CD25 или его фрагмент и антитело к ингибитору контрольных точек иммунного ответа или его фрагмент могут быть присоединены к отдельным микрогранулам, смесь которых можно применять для удаления клеток. В некоторых вариантах осуществления удаление регуляторных Т-клеток, например клеток CD25+, и удаление клеток, экспрессирующих ингибитор контрольных точек иммунного ответа, является последовательным и может происходить, например, в любом порядке.

Способы, описанные в данном документе, могут предусматривать стадию положительного отбора. Например, Т-клетки могут быть выделены путем инкубирования с микрогранулами, конъюгированными с антителами к CD3/CD28 (например, 3×28), такими как DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T, в течение периода времени, достаточного для положительного отбора требуемых Т-клеток. В одном аспекте период времени составляет приблизительно 30 минут. В дополнительном аспекте период времени находится в диапазоне от 30 минут до 36 часов или больше и включает все целочисленные значения в этом промежутке. В дополнительном аспекте период времени составляет по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5 или 6 часов. В еще одном предпочтительном аспекте период времени составляет от 10 до 24 часов. В одном аспекте период времени инкубирования составляет 24 часа. Более длительное время инкубирования можно использовать для выделения Т-клеток в любой ситуации, в которой Т-клеток немного по сравнению с другими типами клеток, как, например, при выделении лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль (TIL), из опухолевой ткани или у индивидуумов с ослабленным иммунитетом. Кроме того, при использовании более длительного времени инкубирования может увеличиваться эффективность улавливания Т-клеток CD8+. Таким образом, просто сокращая или удлиняя время, в течение которого Т-клетки имеют возможность связываться с микрогранулами CD3/CD28, и/или увеличивая или уменьшая соотношение микрогранул и Т-клеток (как описано дополнительно в данном документе), можно предпочтительно производить положительный или отрицательный отбор субпопуляций Т-клеток в начале культивирования или в другие моменты времени в ходе процесса. Кроме того, путем увеличения или уменьшения относительного количества антител к CD3 и/или к CD28 на микрогранулах или другой поверхности можно предпочтительно осуществлять положительный или отрицательный отбор субпопуляций Т-клеток в начале культивирования или в другие требуемые моменты времени.

В одном варианте осуществления можно выбрать популяцию Т-клеток, которая экспрессирует один или несколько из IFN-γ, TNFα, IL-17A, IL-2, IL-3, IL-4, GM-CSF, IL-10, IL-13, гранзима В и перфорина или других подходящих молекул, например других цитокинов. Способы скрининга в отношении экспрессии клеток можно определить, например, с помощью способов, описанных в публикации согласно PCT № WO 2013/126712.

Для выделения требуемой популяции клеток путем положительного или отрицательного отбора можно варьировать концентрацию клеток и поверхность (например, частиц, таких как микрогранулы). В определенных аспектах может быть желательно значительно уменьшить объем, в котором микрогранулы и клетки смешиваются друг с другом (например, увеличить концентрацию клеток), чтобы обеспечить максимальный контакт клеток и микрогранул. Например, в одном аспекте используют концентрацию, составляющую приблизительно 10 миллиардов клеток/мл, 9 миллиардов клеток/мл, 8 миллиардов клеток/мл, 7 миллиардов клеток/мл, 6 миллиардов клеток/мл или 5 миллиардов клеток/мл. В одном аспекте используют концентрацию 1 миллиард клеток/мл. В одном аспекте используют концентрацию клеток, составляющую от 75, 80, 85, 90, 95 или 100 миллионов клеток/мл. В дополнительных аспектах можно использовать концентрации, составляющие 125 или 150 миллионов клеток/мл.

Использование высоких концентраций может приводить к увеличению выхода клеток, интенсивности активации клеток и интенсивности размножения клеток. Кроме того, использование высоких концентраций клеток позволяет более эффективно улавливать клетки, которые могут характеризоваться слабой экспрессией антигенов-мишеней, представляющих интерес, такие как CD28-отрицательные Т-клетки, или клетки из образцов, в которых присутствует много опухолевых клеток (например, лейкозной крови, опухолевой ткани и т. д.). Такие популяции клеток могут иметь терапевтическую ценность, и их было бы желательно получить. Например, использование высокой концентрации клеток позволяет проводить более эффективный отбор Т-клеток CD8+, которые обычно характеризуются более слабой экспрессией CD28.

В родственном аспекте может быть желательным использование более низких концентраций клеток. Благодаря значительному разбавлению смеси Т-клеток и поверхности (например, частиц, таких как микрогранулы), взаимодействие между частицами и клетками сводится к минимуму. При этом отбираются клетки, в высоких количествах экспрессирующие требуемые антигены, которые должны будут связываться с частицами. Например, T-клетки CD4+ экспрессируют CD28 на более высоких уровнях и улавливаются в слабых концентрациях более эффективно, чем T-клетки CD8+. В одном аспекте используемая концентрация клеток составляет 5 X 10e6/мл. В других аспектах используемая концентрация может составлять от приблизительно 1 X 10⁵/мл до 1 X 10⁶/мл с включением любого целочисленного значения в этом промежутке.

В других аспектах клетки можно инкубировать на ротаторе в течение различных промежутков времени с различными скоростями при 2-10°C или при комнатной температуре.

Т-клетки для стимуляции также можно замораживать после стадии промывки. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, полагают, что стадия замораживания и последующего размораживания обеспечивает получение более однородного продукта за счет удаления гранулоцитов и в некоторой степени моноцитов из популяции клеток. После стадии промывки, на которой удаляют плазму крови и тромбоциты, клетки можно суспендировать в замораживающем растворе. Хотя многие замораживающие растворы и параметры для замораживания известны из уровня техники и будут применимыми в данном случае, один способ предусматривает использование PBS, содержащего 20% DMSO и 8% человеческий сывороточный альбумин, или культуральной среды, содержащей 10% декстрана 40 в 5% декстрозе, 20% человеческого сывороточного альбумина и 7,5% DMSO или 31,25% PlasmaLyte-А, 31,25% 5% декстрозы в 0,45% NaCl, 10% декстрана 40 в 5% декстрозе, 20% человеческого сывороточного альбумина и 7,5% DMSO, или других подходящих сред для замораживания клеток, содержащих, например, Hespan и PlasmaLyte A, и затем клетки замораживают до -80°C со скоростью 1° в минуту и хранят в паровой фазе в резервуаре для хранения жидкого азота. Можно применять другие способы контролируемого замораживания, а также неконтролируемого замораживания немедленно при -20°C или в жидком азоте.

В определенных аспектах криоконсервированные клетки размораживают и промывают, как описано в данном документе, и оставляют на один час при комнатной температуре перед активацией с помощью способов по настоящему изобретению.

В контексте настоящего изобретения также предусматривается сбор образцов крови или продукта афереза у субъекта в период времени до того, как могут потребоваться размноженные клетки, описанные в данном документе. Ввиду этого, источник клеток, подлежащих размножению, можно собирать в любой момент времени, когда это необходимо, и требуемые клетки, такие как Т-клетки, можно выделять и замораживать для последующего применения в терапии на основе иммунных эффекторных клеток для любого количества заболеваний или состояний, при которых будет наблюдаться благоприятный эффект терапии на основе иммунных эффекторных клеток, таких как описанные в данном документе. В одном аспекте образец крови или аферезный образец берут, как правило, у здорового субъекта. В определенных аспектах образец крови или аферезный образец берут, как правило, у здорового субъекта, который имеет риск развития заболевания, но у которого заболевание еще не развилось, и клетки, представляющие интерес, выделяют и замораживают для последующего применения. В определенных аспектах Т-клетки можно размножать, замораживать и использовать позднее. В определенных аспектах образцы собирают у пациента вскоре после диагностирования конкретного заболевания, описанного в данном документе, однако до проведения какого-либо лечения. В дополнительном аспекте клетки выделяют из образца крови или аферезного образца у субъекта до проведения какого-либо количества соответствующих способов лечения, в том числе без ограничения лечения такими средствами, как натализумаб, эфализумаб, противовирусные средства, химиотерапия, лучевая терапия, иммунодепрессивные средства, такие как циклоспорин, азатиоприн, метотрексат, микофенолят и FK506, антитела или другие иммунодеструктивные средства, такие как CAMPATH, антитела к CD3, цитоксан, флударабин, циклоспорин, FK506, рапамицин, микофеноловая кислота, стероиды, FR901228 и облучение.

В дополнительном аспекте настоящего изобретения Т-клетки получают от пациента непосредственно после лечения, при котором у субъекта остаются функциональные Т-клетки. В данном отношении наблюдалось, что после определенных видов лечения рака, в частности лечения лекарственными средствами, которые повреждают иммунную систему, вскоре после лечения в течение периода, когда пациенты обычно восстанавливаются после лечения, качество полученных Т-клеток может быть оптимальным или улучшенным в отношении их способности размножаться ex vivo. Аналогично, после манипуляций ex vivo с использованием способов, описанных в данном документе, эти клетки могут находиться в состоянии, предпочтительном для усиленного приживления и размножения in vivo. Таким образом, в контексте настоящего изобретения предусматривается сбор клеток крови, в том числе Т-клеток, дендритных клеток или других клеток гематопоэтической линии дифференцировки, во время этой фазы восстановления. Кроме того, в определенных аспектах можно использовать режимы мобилизации (например, мобилизации с помощью GM-CSF) и кондиционирования для создания состояния у субъекта, при котором репопуляция, рециркуляция, регенерация и/или размножение определенных типов клеток являются благоприятными, особенно в течение определенного временного окна после терапии. Иллюстративные типы клеток включают в себя Т-клетки, В-клетки, дендритные клетки и другие клетки иммунной системы.

В одном варианте осуществления иммунные эффекторные клетки, экспрессирующие молекулу CAR, например, молекулу CAR, описанную в данном документе, получают от субъекта, который получал низкую повышающую иммунитет дозу ингибитора mTOR. В варианте осуществления популяцию иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, подлежащую конструированию для экспрессии CAR, собирают спустя достаточное время или после достаточного введения низкой повышающей иммунитет дозы ингибитора mTOR так, что уровень PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, или отношение PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, к PD1-положительным иммунным эффекторным клеткам, например Т-клеткам или NK-клеткам, имеющимся у субъекта или собранным от субъекта, были, по меньшей мере временно, повышенными.

В некоторых вариантах осуществления популяция иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, которые были сконструированы или будут сконструированы для экспрессии CAR, может быть обработана ex vivo путем контакта с количеством ингибитора mTOR, которое повышает число PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток, или повышает отношение PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, к PD1-положительным иммунным эффекторным клеткам, например Т-клеткам или NK клеткам.

В одном варианте осуществления популяция Т-клеток характеризуется дефицитом диацилглицеринкиназы (DGK). Клетки с дефицитом DGK включают в себя клетки, которые не экспрессируют DGK в виде РНК или белка или характеризуются пониженной или ингибированной активностью DGK. Клетки с дефицитом DGK можно получить с помощью генетических подходов, например, путем введения средств для РНК-интерференции, например, siRNA, shRNA, miRNA, для снижения или предупреждения экспрессии DGK. В качестве альтернативы, клетки с дефицитом DGK можно получить путем обработки ингибиторами DGK, описанными в данном документе.

В одном варианте осуществления популяция Т-клеток характеризуется дефицитом Ikaros. Клетки с дефицитом Ikaros включают в себя клетки, которые не экспрессируют Ikaros в виде РНК или белка или характеризуются пониженной или ингибированной активностью Ikaros; клетки с дефицитом Ikaros можно получить с помощью генетических подходов, например, путем введения средств для РНК-интерференции, например, siRNA, shRNA, miRNA, для снижения или предупреждения экспрессии Ikaros. В качестве альтернативы, клетки с дефицитом Ikaros можно получить путем обработки ингибиторами Ikaros, например, леналидомидом.

В вариантах осуществления популяция Т-клеток характеризуется дефицитом DGK и дефицитом Ikaros, например, не экспрессирует DGK и Ikaros или характеризуется пониженной или ингибированной активностью DGK и Ikaros. Такие клетки с дефицитом DGK и Ikaros можно получить любым из способов, описанных в данном документе.

В варианте осуществления NK-клетки получают от субъекта. В другом варианте осуществления NK-клетки представляют собой линию NK-клеток, например, линию клеток NK-92 (Conkwest).

Аллогенный CART

В вариантах осуществления, описанных в данном документе, иммунная эффекторная клетка может представлять собой аллогенную иммунную эффекторную клетку, например Т-клетку или NK-клетку. Например, клетка может представлять собой аллогенную Т-клетку, например аллогенную Т-клетку, в которой отсутствует экспрессия функционального Т-клеточного рецептора (TCR) и/или лейкоцитарного антигена человека (HLA), например HLA I класса и/или HLA II класса.

T-клетку, в которой отсутствует функциональный TCR, можно, например, сконструировать таким образом, чтобы она не экспрессировала какой-либо функциональный TCR на своей поверхности, сконструировать таким образом, чтобы она не экспрессировала одну или несколько субъединиц, которые образуют функциональный TCR, или сконструировать таким образом, чтобы она вырабатывала очень немного функционального TCR на своей поверхности. В качестве альтернативы, Т-клетка может экспрессировать значительно нарушенный TCR, например, посредством экспрессии мутантных или усеченных форм одной или нескольких субъединиц TCR. Термин "значительно нарушенный TCR" означает, что этот TCR не будет вызывать нежелательную иммунную реакцию у хозяина. Такие клетки могут быть созданы посредством применения одной или нескольких систем редактирования гена, описанных в данном документе. В вариантах осуществления система редактирования гена нацеливается на последовательность, кодирующую компонент TCR, например, последовательность в гене константной цепи TCR-альфа (TRAC) или ее регулирующие элементы. В вариантах осуществления система редактирования гена нацеливается на последовательность, кодирующую компонент TCR, например, последовательность в гене константной цепи TCR-бета (TRВC) или ее регулирующие элементы.

Т-клетку, описанную в данном документе, можно, например, сконструировать таким образом, чтобы она не экспрессировала функциональный HLA на своей поверхности. Например, Т-клетку, описанную в данном документе, можно сконструировать таким образом, чтобы экспрессия HLA, например HLA I класса и/или HLA II класса, на клеточной поверхности была подавлена. Такие клетки могут быть созданы посредством применения одной или нескольких систем редактирования гена, описанных в данном документе. В вариантах осуществления система редактирования гена нацеливается на последовательность, кодирующую компонент одной или нескольких молекул HLA. В вариантах осуществления система редактирования гена нацеливается на последовательность, кодирующую фактор, который влияет на экспрессию одной или нескольких молекул HLA. В вариантах осуществления система редактирования гена нацеливается на регулятор экспрессии MHC I класса, например, последовательность, кодирующую бета-2 микроглобулин (B2M). В вариантах осуществления система редактирования гена нацеливается на последовательность, кодирующую регулятор экспрессии молекулы MHC II класса, например CIITA. В вариантах осуществления системы редактирования гена, нацеливающиеся как на регулятор экспрессии MHC I класса (например, B2M), так и на регулятор экспрессии молекулы MHC II (например, CIITA), вводят в клетки так, чтобы подавлять по меньшей мере молекулу MHC I класса и по меньшей мере экспрессию одной молекулы MHC II класса.

В некоторых вариантах осуществления в Т-клетке может отсутствовать функциональный TCR и функциональный HLA, например HLA I класса и/или HLA II класса.

Модифицированные Т-клетки, в которых отсутствует экспрессия функционального TCR и/или HLA, можно получить любым подходящим способом, в том числе путем нокаута или нокдауна одной или нескольких субъединиц TCR или HLA. Например, Т-клетка может предусматривать нокдаун TCR и/или HLA благодаря применению siRNA, shRNA, коротких палиндромных повторов, регулярно расположенных группами (CRISPR), эффекторной нуклеазы, подобной активаторам транскрипции (TALEN), или эндонуклеазы с "цинковыми пальцами" (ZFN).

В некоторых вариантах осуществления аллогенная клетка может представлять собой клетку, которая не экспрессирует или экспрессирует на низких уровнях ингибирующую молекулу, например, благодаря применению любого способа, описанного в данном документе. Например, клетка может представлять собой клетку, которая не экспрессирует или экспрессирует на низких уровнях ингибирующую молекулу, например, молекулу, которая может снижать способность CAR-экспрессирующей клетки осуществлять иммунный эффекторный ответ. Примеры ингибирующих молекул включают PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и TGF бета. Путем ингибирования ингибирующей молекулы, например, путем ингибирования на уровне ДНК, РНК или белка, можно оптимизировать функциональные характеристики CAR-экспрессирующих клеток. В вариантах осуществления можно применять ингибирующую нуклеиновую кислоту, например ингибирующую нуклеиновую кислоту, например dsRNA, например siRNA или shRNA, короткие палиндромные повторы, регулярно расположенные группами (CRISPR), эффекторную нуклеазу, подобную активаторам транскрипции (TALEN), или эндонуклеазу с "цинковыми пальцами" (ZFN), например описанные в данном документе.

siRNA и shRNA для ингибирования, например, TCR или HLA

В некоторых вариантах осуществления экспрессия TCR и/или экспрессия HLA могут быть ингибированы с использованием siRNA или shRNA, которая нацеливается на нуклеиновую кислоту, кодирующую TCR и/или HLA в T-клетке.

Экспрессия siRNA и shRNA в Т-клетках может быть достигнута с использованием любой традиционной экспрессирующей системы, например, такой как лентивирусная экспрессирующая система.

Типичные shRNA, которые подавляют экспрессию компонентов TCR, описаны, например, в публикации США № 2012/0321667. Типичные siRNA и shRNA, которые подавляют экспрессию генов HLA I класса и/или HLA II класса, описаны, например, в публикации США № 2007/0036773.

CRISPR для ингибирования, например, TCR или HLA

Как используется в данном документе, "CRISPR", или "CRISPR для TCR и/или HLA", или "CRISPR для ингибирования TCR и/или HLA" относится к набору коротких палиндромных повторов, регулярно расположенных группами, или к системе, содержащей такой набор повторов. Как используется в данном документе, "Cas" относится к CRISPR-ассоциированному белку. Система "CRISPR/Cas" относится к системе, полученной из CRISPR и Cas, которые могут применяться для сайленсинга или мутации гена TCR и/или HLA.

Встречающиеся в природе системы CRISPR/Cas находят в приблизительно 40% секвенированных геномов эубактерий и в 90% секвенированных геномов Archaea. Grissa et al. (2007) BMC Bioinformatics 8: 172. Эта система является типом прокариотической иммунной системы, которая обеспечивает устойчивость к чужеродным генным элементам, таким как плазмиды и фаги, и обеспечивает форму адаптивного иммунитета. Barrangou et al. (2007) Science 315: 1709-1712; Marragini et al. ( 2008) Science 322: 1843-1845.

Система CRISPR/Cas была модифицирована для применения в редактировании генома (сайленсинга, усиления или изменения определенных генов) в эукариотах, таких как мыши или приматы. Wiedenheft et al. (2012) Nature 482: 331-8. Это достигается путем введения в эукариотическую клетку плазмиды, содержащей специально сконструированный CRISPR и один или несколько подходящих Cas.

Последовательность CRISPR, иногда называемая локусом CRISPR, содержит перемежающиеся повторы и спейсеры. Во встречающихся в природе CRISPR спейсеры обычно содержат последовательности, чужеродные для бактерии, такие как плазмидная или фаговая последовательность; в системе TCR и/или HLA CRISPR/Cas спейсеры получены из последовательности гена TCR или HLA.

РНК из локуса CRISPR конститутивно экспрессируется и процессируется белками Cas в малые РНК. Они содержат спейсер, фланкированный последовательностью повтора. РНК направляют другие белки Cas для сайленсинга экзогенных генных элементов на уровне РНК или ДНК. Horvath et al. (2010) Science 327: 167-170; Makarova et al. (2006) Biology Direct 1: 7. Таким образом, спейсеры служат матрицами для молекул РНК, аналогично siRNA. Pennisi (2013) Science 341: 833-836.

Поскольку они встречаются в природе у многих различных типов бактерий, точное расположение CRISPR и структура, функция и количество генов Cas и их продукт несколько различаются от вида к виду. Haft et al. (2005) PLoS Comput. Biol. 1: e60; Kunin et al. (2007) Genome Biol. 8: R61; Mojica et al. (2005) J. Mol. Evol. 60: 174-182; Bolotin et al. (2005) Microbiol. 151: 2551-2561; Pourcel et al. (2005) Microbiol. 151: 653-663 и Stern et al. (2010) Trends. Genet. 28: 335-340. Например, белки Cse (подтип Cas, E. coli) (например, CasA) образуют функциональный комплекс Cascade, который процессирует транскрипты РНК CRISPR в спейсер-единицы повтора, которые сохраняет Cascade. Brouns et al. (2008) Science 321: 960-964. В других прокариотах Cas6 процессирует транскрипт CRISPR. Для основанной на CRISPR фаговой инактивации у E. coli необходимы Cascade и Cas3, но не Cas1 или Cas2. Белки Cmr (модуль RAMP Cas) у Pyrococcus furiosus и других прокариот формируют функциональный комплекс с малыми РНК CRISPR, который распознает и расщепляет комплементарные целевые РНК. Более простая система CRISPR основывается на белке Cas9, который представляет собой нуклеазу с двумя активными сайтами разрезания, по одному на каждую нить двойной спирали. Объединение Cas9 и модифицированной РНК локуса CRISPR может применяться в системе для редактирования гена. Pennisi (2013) Science 341: 833-836.

Таким образом, система CRISPR/Cas может применяться для редактирования гена TCR и/или HLA (добавления или делеции одной или нескольких пар оснований) или для введения преждевременной остановки, которая таким образом уменьшает экспрессию целевого гена, или хромосомной последовательности, такой как TCR и/или HLA. В качестве альтернативы можно использовать систему CRISPR/Cas, например РНК-интерференцию, обратимым образом отключая ген TCR и/или HLA. Например, в клетке млекопитающего РНК может направлять белок Cas, например, белок Cas, лишенный нуклеазной активности (например, dCas9), к промотору TCR и/или HLA, стерически блокируя РНК-полимеразы.

Могут быть созданы искусственные системы CRISPR/Cas, которые ингибируют, например, TCR и/или HLA, с использованием технологии, известной из уровня техники, например, которая описана в публикации США № 20140068797. Системы CRISPR, которые могут быть применимы в настоящем изобретении, описанном в данном документе, включают описанные, например, в публикации заявки согласно PCT WO2017/093969, содержание которой включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

TALEN для ингибирования, например, TCR и/или HLA

"TALEN" или "TALEN для HLA и/или TCR" или "TALEN для ингибирования HLA и/или TCR" относятся к эффекторной нуклеазе, подобной активаторам транскрипции, искусственной нуклеазе, которая может применяться для редактирования гена HLA и/или TCR.

TALEN получают искусственно путем слияния связывающего домена РНК эффектора TAL с доменом расщепления ДНК. Подобные активаторам транскрипции эффекторы (TALE) могут быть сконструированы для связывания любой требуемой последовательности ДНК, в том числе части гена HLA или TCR. Путем объединения сконструированного TALE с доменом расщепления ДНК может быть получен рестрикционный фермент, который является специфичным по отношению к любой требуемой последовательности ДНК, в том числе части HLA или TCR. Затем он может быть введен в клетку, где может применяться для редактирования генома. Boch (2011) Nature Biotech. 29: 135-6 и Boch et al. (2009) Science 326: 1509-12; Moscou et al. (2009) Science 326: 3501.

TALE представляют собой белки, секретируемые бактериями Xanthomonas. ДНК-связывающий домен содержит повторную, высоко консервативную последовательность аминокислот 33-34, за исключением 12-ой и 13-ой аминокислот. Эти две позиции сильно варьируют, демонстрируя сильную корреляцию с распознаванием специфичных нуклеотидов. Таким образом, они могут быть сконструированы так, чтобы связываться с требуемой последовательностью ДНК.

Чтобы получить TALEN, белок TALE сливают с нуклеазой (N), которая представляет собой эндонуклеазу FokI дикого типа или мутированную. Несколько мутаций в FokI были сделаны для его использования в TALEN; например, они улучшают специфичность или активность расщепления. Cermak et al. (2011) Nucl. Acids Res. 39: e82; Miller et al. (2011) Nature Biotech. 29: 143-8; Hockemeyer et al. (2011) Nature Biotech. 29: 731-734; Wood et al. (2011) Science 333: 307; Doyon et al. (2010) Nature Methods 8: 74-79; Szczepek et al. (2007) Nature Biotech. 25: 786-793 и Guo et al. (2010) J. Mol. Biol. 200: 96.

Домен FokI функционирует как димер, что требует двух конструкций с уникальными ДНК-связывающими доменами для сайтов в целевом геноме с надлежащей ориентацией и расстоянием. Как количество аминокислотных остатков между ДНК-связывающим доменом TALE и доменом расщепления FokI, так и количество оснований между двумя отдельными сайтами связывания TALEN, по-видимому, являются важными параметрами для достижения высоких уровней активности. Miller et al. (2011) Nature Biotech. 29: 143-8.

TALEN HLA или TCR может применяться внутри клетки для создания двухнитевого разрыва (DSB). Мутация может быть введена в сайт разрыва, если репаративные механизмы неправильно репарируют разрыв посредством негомологичного соединения концов. Например, неправильная репарация может привести к мутации сдвига рамки. В качестве альтернативы, чужеродная ДНК может быть введена в клетку вместе с TALEN; в зависимости от последовательностей чужеродной ДНК и хромосомной последовательности, данный процесс можно применять для исправления дефекта в гене HLA или TCR или для введения такого дефекта в ген wt HLA или TCR, уменьшая тем самым экспрессию HLA или TCR.

TALEN, специфичные для последовательностей в HLA или TCR, могут быть сконструированы с использованием любого способа, известного из уровня техники, предусматривающего различные схемы с использованием модульных компонентов. Zhang et al. (2011) Nature Biotech. 29: 149-53; Geibler et al. (2011) PLoS ONE 6: e19509.

Нуклеаза с "цинковыми пальцами" для ингибирования, например, HLA и/или TCR

"ZFN", или "нуклеаза с цинковыми пальцами", или "ZFN для HLA и/или TCR", или "ZFN для ингибирования HLA и/или TCR" относятся к нуклеазе с цинковыми пальцами, искусственной нуклеазе, которая может применяться для редактирования гена HLA и/или TCR.

Подобно TALEN, ZFN содержит домен нуклеазы FokI (или его производное), слитый с ДНК-связывающим доменом. В случае ZFN ДНК-связывающий домен содержит один или несколько цинковых пальцев. Carroll et al. (2011) Genetics Society of America 188: 773-782 и Kim et al. (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 1156-1160.

Цинковый палец представляет собой небольшой белковый структурный мотив, стабилизированный одним или несколькими ионами цинка. Цинковый палец может содержать, например, Cys2His2, и может распознавать последовательность из приблизительно 3 п. о. Разные цинковые пальцы с известной специфичностью могут быть объединены с получением многопальцевых полипептидов, которые распознают последовательности из приблизительно 6, 9, 12, 15 или 18 п. о. Доступны различные методики отбора и модульной сборки для создания цинковых пальцев (и их комбинаций), распознающих специфичные последовательности, в том числе фаговый дисплей, дрожжевые одногибридные системы, бактериальные одногибридные и двухгибридные системы и клетки млекопитающих.

Как и TALEN, ZFN должен димеризоваться, чтобы расщепить ДНК. Таким образом, пара ZFN необходима для нацеливания на непалиндромные сайты ДНК. Два отдельных ZFN должны связывать противоположные нити ДНК с их нуклеазами, правильно расположенными друг от друга. Bitinaite et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 10570-5.

Также как TALEN, ZFN может создавать двухнитевой разрыв в ДНК, который может создавать мутацию со сдвигом рамки при неправильной репарации, что приведет к снижению экспрессии и количества HLA и/или TCR в клетке. ZFN также можно использовать с гомологичной рекомбинацией для мутации в гене HLA или TCR.

Специфичность ZFN по отношению к последовательностям в HLA и/или TCR может быть создана с использованием любого способа, известного из уровня техники. Cathomen et al. (2008) Mol. Ther. 16: 1200-7 и Guo et al. (2010) J. Mol. Biol. 400: 96.

Активация и размножение иммунных эффекторных клеток (например, T-клеток)

Иммунные эффекторные клетки, такие как Т-клетки, можно активировать и размножать, как правило с использованием способов, описанных, например, в патентах США №№ 6352694; 6534055; 6905680; 6692964; 5858358; 6887466; 6905681; 7144575; 7067318; 7172869; 7232566; 7175843; 5883223; 6905874; 6797514; 6867041 и публикации заявки на патент США № 20060121005.

Как правило, популяцию иммунных эффекторных клеток по настоящему изобретению можно размножать путем приведения их в контакт с поверхностью, к которой присоединено средство, стимулирующее передачу сигнала, ассоциированного с комплексом CD3/TCR, и лиганд, стимулирующий костимулирующую молекулу на поверхности Т-клеток. В частности, популяции Т-клеток можно стимулировать согласно описанному в данном документе, как например, путем приведения их в контакт с антителом к CD3 или его антигенсвязывающим фрагментом или антителом к CD2, иммобилизованным на поверхности, или путем приведения их в контакт с активатором протеинкиназы С (например, бриостатином) совместно с ионофором кальция. Для костимуляции вспомогательной молекулы на поверхности Т-клеток используют лиганд, который связывает вспомогательную молекулу. Например, популяцию Т-клеток можно привести в контакт с антителом к CD3 и антителом к CD28 в условиях, подходящих для стимуляции пролиферации Т-клеток. Для стимуляции пролиферации CD4+ T-клеток либо CD8+ T-клеток используют антитело к CD3 и антитело к CD28. Примеры антитела к CD28 включают 9.3, B-T3, XR-CD28 (Diaclone, Безансон, Франция), и их можно использовать, равно как и другие способы, общеизвестные из уровня техники (Berg et al., Transplant Proc. 30(8):3975-3977, 1998; Haanen et al., J. Exp. Med. 190(9):1319-1328, 1999; Garland et al., J. Immunol Meth. 227(1-2):53-63, 1999).

В определенных аспектах первичный стимулирующий сигнал и костимулирующий сигнал для Т-клетки можно передавать с помощью различных протоколов. Например, средства, передающие каждый сигнал, могут находиться в растворе или быть связаны с поверхностью. В случае, когда они связаны с поверхностью, средства могут быть связаны с одной и той же поверхностью (то есть в "цис"-порядке) или с отдельными поверхностями (то есть в "транс"-порядке). В качестве альтернативы, одно средство может быть связано с поверхностью, а другое средство может находиться в растворе. В одном аспекте средство, передающее костимулирующий сигнал, связано с поверхностью клетки, а средство, передающее первичный сигнал активации, находится в растворе или связано с поверхностью. В определенных аспектах оба средства могут находиться в растворе. В одном аспекте средства могут находиться в растворимой форме, а затем сшиваться с поверхностью, такой как клетка, экспрессирующая Fc-рецепторы, или антитело или другое связывающее средство, которое будет связываться с данными средствами. В данном отношении см., например, публикации заявок на патент США №№ 20040101519 и 20060034810 в том, что касается искусственных антигенпрезентирующих клеток (aAPC), которые предусматриваются для применения в активации и размножении Т-клеток в настоящем изобретении.

В одном аспекте два средства иммобилизованы на микрогранулах - на одной и той же микрогрануле, т. е. по "цис"-типу, либо на отдельных микрогранулах, т. е. по "транс"-типу. В качестве примера, средство, передающее первичный сигнал активации, представляет собой антитело к CD3 или его антигенсвязывающий фрагмент, а средство, передающее костимулирующий сигнал, представляет собой антитело к CD28 или его антигенсвязывающий фрагмент; и оба средства совместно иммобилизованы на одной и той же микрогрануле в эквивалентных молекулярных количествах. В одном аспекте для размножения CD4+ T-клеток и роста T-клеток используют соотношение 1:1 для каждого антитела, связанного с микрогранулами. В определенных аспектах настоящего изобретения используют такое соотношение антител к CD3 и CD28, связанных с микрогранулами, при котором наблюдается увеличение интенсивности размножения Т-клеток по сравнению с размножением, наблюдаемым при использовании соотношения 1:1. В одном конкретном аспекте наблюдается увеличение, составляющее от приблизительно 1- до приблизительно 3 раз по сравнению с размножением, наблюдаемым при использовании соотношения 1:1. В одном аспекте соотношение антител к CD3 и CD28, связанных с микрогранулами, находится в диапазоне от 100:1 до 1:100 и включает все целочисленные значения в этом промежутке. В одном аспекте настоящего изобретения с частицами связано больше антител к CD28, чем антител к CD3, т. е. соотношение антител к CD3 и CD28 составляет меньше единицы. В определенных аспектах настоящего изобретения соотношение антител к CD28 и антител к CD3, связанных с микрогранулами, составляет более 2:1. В одном конкретном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 1:100. В одном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 1:75. В дополнительном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 1:50. В одном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 1:30. В одном предпочтительном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 1:10. В одном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 1:3. В еще одном аспекте антитела к CD3 и CD28, связанные с микрогранулами, используют в соотношении 3:1.

Для стимуляции Т-клеток или других клеток-мишеней можно использовать соотношения частиц и клеток от 1:500 до 500:1 с включением любых целочисленных значений в этом промежутке. Как без труда будет понятно специалисту обычной квалификации в данной области техники, соотношение частиц и клеток может зависеть от размера частиц относительно клетки-мишени. Например, мелкие микрогранулы могут связывать только несколько клеток, тогда как более крупные микрогранулы могут связывать много. В определенных аспектах соотношение клеток и частиц находится в диапазоне от 1:100 до 100:1 и включает любые целочисленные значения в этом промежутке, а в дополнительных аспектах соотношение составляет от 1:9 до 9:1 и включает любые целочисленные значения в этом промежутке, и его также можно использовать для стимуляции Т-клеток. Соотношение частиц, связанных с антителами к CD3 и антителами к CD28, и Т-клеток, которое приводит к стимуляции Т-клеток, может варьироваться, как отмечено выше, однако определенные предпочтительные значения включают 1:100, 1:50, 1:40, 1:30, 1:20, 1:10, 1:9, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, 10:1, и 15:1, при этом одно предпочтительное соотношение составляет по меньшей мере 1:1 для частиц на Т-клетку. В одном аспекте используют соотношение частиц и клеток 1:1 или меньше. В одном конкретном аспекте предпочтительное соотношение частицы:клетки составляет 1:5. В дополнительных аспектах соотношение частиц и клеток может варьироваться в зависимости от дня стимуляции. Например, в одном аспекте соотношение частиц и клеток составляет от 1:1 до 10:1 в первый день, и после этого к клеткам ежедневно или раз в два дня добавляют дополнительные частицы в течение до 10 дней при конечных соотношениях от 1:1 до 1:10 (исходя из числа клеток в день добавления). В одном конкретном аспекте соотношение частиц и клеток составляет 1:1 в первый день стимуляции и доводится до 1:5 в третий и пятый дни стимуляции. В одном аспекте частицы добавляют ежедневно или раз в два дня до конечного соотношения 1:1 в первый день и 1:5 в третий и пятый дни стимуляции. В одном аспекте соотношение частиц и клеток составляет 2:1 в первый день стимуляции и доводится до 1:10 в третий и пятый дни стимуляции. В одном аспекте частицы добавляют ежедневно или раз в два дня до конечного соотношения 1:1 в первый день и 1:10 в третий и пятый дни стимуляции. Специалисту в данной области техники будет понятно, что множество других соотношений могут подходить для применения в настоящем изобретении. В частности, соотношения будут варьироваться в зависимости от размера частиц, а также от размера и типа клеток. В одном аспекте наиболее типичные соотношения для применения составляют примерно 1:1, 2:1 и 3:1 в первый день.

В дополнительных аспектах настоящего изобретения клетки, такие как Т-клетки, объединяют с микрогранулами, покрытыми средством, микрогранулы и клетки впоследствии разделяют, а затем клетки культивируют. В альтернативном аспекте микрогранулы, покрытые средством, и клетки перед культивированием не разделяют, а культивируют вместе. В дополнительном аспекте микрогранулы и клетки сначала концентрируют путем приложения силы, такой как магнитная сила, что приводит к увеличению интенсивности лигирования маркеров клеточной поверхности с индуцированием тем самым стимуляции клеток.

Например, белки клеточной поверхности можно лигировать, позволяя парамагнитным микрогранулам, к которым присоединены антитела к CD3 и антитела к CD28 (микрогранулам 3×28), вступать в контакт с Т-клетками. В одном аспекте клетки (например, от 10⁴ до 10⁹ T-клеток) и микрогранулы (например, парамагнитные микрогранулы DYNABEADS® M-450 CD3/CD28 T в соотношении 1:1) объединяют в буфере, например, PBS (без двухвалентных катионов, таких как кальций и магний). В данном случае специалисты обычной квалификации в данной области техники также могут легко оценить любую концентрацию клеток, которая может применяться. Например, клетка-мишень может быть очень редкой в образце и составлять только 0,01% образца, или весь образец (т. е. 100%) может содержать клетку-мишень, представляющую интерес. Соответственно, любое количество клеток находится в контексте настоящего изобретения. В определенных аспектах может быть желательно значительно уменьшить объем, в котором частицы и клетки смешиваются друг с другом (т. е. увеличить концентрацию клеток), чтобы обеспечить максимальный контакт клеток и частиц. Например, в одном аспекте используют концентрацию, составляющую приблизительно 10 миллиардов клеток/мл, 9 миллиардов клеток/мл, 8 миллиардов клеток/мл, 7 миллиардов клеток/мл, 6 миллиардов клеток/мл или 5 миллиардов клеток/мл. В одном аспекте используют более 100 миллионов клеток/мл. В дополнительном аспекте используют концентрацию клеток, составляющую 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 или 50 миллионов клеток/мл. В еще одном аспекте используют концентрацию клеток, составляющую от 75, 80, 85, 90, 95 или 100 миллионов клеток/мл. В дополнительных аспектах можно использовать концентрации, составляющие 125 или 150 миллионов клеток/мл. Использование высоких концентраций может приводить к увеличению выхода клеток, интенсивности активации клеток и интенсивности размножения клеток. Кроме того, использование высоких концентраций клеток позволяет более эффективно улавливать клетки, которые могут характеризоваться слабой экспрессией антигенов-мишеней, представляющих интерес, такие как CD28-отрицательные Т-клетки. В определенных аспектах такие популяции клеток могут иметь терапевтическую ценность, и их было бы желательно получить. Например, использование высокой концентрации клеток позволяет проводить более эффективный отбор Т-клеток CD8+, которые обычно характеризуются более слабой экспрессией CD28.

В одном варианте осуществления клетки, трансдуцированные нуклеиновой кислотой, кодирующей CAR, например CAR, описанный в данном документе, размножают, например, с помощью способа, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления клетки размножают в культуре в течение периода от нескольких часов (например, приблизительно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 18, 21 часа) до приблизительно 14 дней (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 или 14 дней). В одном варианте осуществления клетки размножают в течение периода от 4 до 9 дней. В одном варианте осуществления клетки размножают в течение периода 8 дней или меньше, например, 7, 6 или 5 дней. В одном варианте осуществления клетки, например, клетку, экспрессирующую CAR для CD19, CAR для CD20, CAR для CD22 или CAR для ROR1, описанную в данном документе, размножают в культуре в течение 5 дней, и полученные клетки являются более активными, чем те же клетки, размножаемые в культуре в течение 9 дней при тех же условиях культивирования. Активность можно определить, например, по различным Т-клеточным функциям, например, пролиферации, уничтожению клеток-мишеней, выработке цитокинов, активации, миграции или их комбинациям. В одном варианте осуществления клетки, например, клетка с CAR для CD19, описанная в данном документе, размножаемые в течение 5 дней, демонстрируют по меньшей мере одно-, двух-, трех- или четырехкратное увеличение интенсивности удвоения клеток при стимуляции антигеном по сравнению с теми же клетками, размножаемыми в культуре в течение 9 дней при тех же условиях культивирования. В одном варианте осуществления клетки, например, клетки, экспрессирующие CAR для CD19, CAR для CD20, CAR для CD22 или CAR для ROR1, описанный в данном документе, размножают в культуре в течение 5 дней, и полученные клетки демонстрируют более высокие уровни выработки провоспалительных цитокинов, например уровни IFN-γ и/или GM-CSF, по сравнению с теми же клетками, размножаемыми в культуре в течение 9 дней при тех же условиях культивирования. В одном варианте осуществления клетки, например, клетка, экспрессирующая CAR для CD19, CAR для CD20, CAR для CD22 или CAR для ROR1, описанная в данном документе, размножаемые в течение 5 дней, демонстрируют по меньшей мере одно-, двух-, трех-, четырех-, пяти-, десятикратное или большее увеличение уровней выработки провоспалительных цитокинов в пг/мл, например уровней IFN-γ и/или GM-CSF, по сравнению с теми же клетками, размножаемыми в культуре в течение 9 дней при тех же условиях культивирования.

В одном аспекте настоящего изобретения смесь можно культивировать в течение периода, составляющего от нескольких часов (приблизительно 3 часов) до приблизительно 14 дней или имеющего любое целочисленное значение в часах в данном промежутке. В одном аспекте смесь можно культивировать в течение 21 дня. В одном аспекте настоящего изобретения микрогранулы и Т-клетки культивируют вместе в течение приблизительно восьми дней. В одном аспекте микрогранулы и Т-клетки культивируют вместе в течение 2-3 дней. Также могут быть желательными несколько циклов стимуляции, так что время культивирования Т-клеток может составлять 60 дней или больше. Условия, подходящие для культивирования Т-клеток, включают подходящие среды (например, минимальную питательную среду, или среду RPMI 1640, или X-vivo 15 (Lonza)), которые могут содержать факторы, необходимые для пролиферации и жизнеспособности, в том числе сыворотку крови (например, фетальную бычью или человеческую сыворотку крови), интерлейкин-2 (IL-2), инсулин, IFN-γ, IL-4, IL-7, GM-CSF, IL-10, IL-12, IL-15, TGFβ и TNF-α или любые другие добавки для роста клеток, известные специалисту в данной области техники. Другие добавки для роста клеток включают в себя без ограничения поверхностно-активное вещество, плазманат и восстановители, такие как N-ацетилцистеин и 2-меркаптоэтанол. Среда может включать в себя RPMI 1640, AIM-V, DMEM, MEM, α-MEM, F-12, X-Vivo 15 и X-Vivo 20, Optimizer с добавлением аминокислот, пирувата натрия и витаминов, не содержащую сыворотки крови либо дополненную подходящим количеством сыворотки (или плазмы) крови или определенным набором гормонов и/или количеством цитокина(-ов), достаточным для роста и размножения Т-клеток. Антибиотики, например пенициллин и стрептомицин, содержатся только в экспериментальных культурах, но не в культурах клеток, которые предназначены для инфузии субъекту. Клетки-мишени выдерживают в условиях, необходимых для поддержания роста, например, при соответствующей температуре (например, 37°C) и атмосфере (например, воздух с 5% CO₂).

В одном варианте осуществления клетки размножают в подходящей среде (например, среде, описанной в данном документе), содержащей один или несколько интерлейкинов, которые приводят к по меньшей мере 200-кратному (например, к 200-кратному, 250-кратному, 300-кратному, 350-кратному) увеличению количества клеток в течение 14-дневного периода размножения, например, при измерении с помощью способа, описанного в данном документе, такого как проточная цитометрия. В одном варианте осуществления клетки размножают в присутствии IL-15 и/или IL-7 (например, IL-15 и IL-7).

Т-клетки, которые подвергались стимуляции в течение разных периодов времени, могут демонстрировать разные характеристики. Например, типичные препараты крови или продукты афереза мононуклеарных клеток периферической крови имеют популяцию Т-клеток-хелперов (TH, CD4+), большую, чем популяция цитотоксических Т-клеток или Т-клеток-супрессоров (TC, CD8+). Размножение Т-клеток ex vivo путем стимуляции рецепторов CD3 и CD28 приводит к образованию популяции Т-клеток, которая до приблизительно дней 8-9 состоит главным образом из ТН-клеток, тогда как после приблизительно дней 8-9 популяция Т-клеток содержит все более многочисленную популяцию TC-клеток. Соответственно, в зависимости от цели лечения инфузия субъекту популяции Т-клеток, содержащей главным образом ТН-клетки, может быть преимущественной. Аналогично, если была выделена антигенспецифичная субпопуляция TC-клеток, то может быть благоприятным размножение этой субпопуляции до большего размера.

Кроме того, в дополнение к маркерам CD4 и CD8, уровни других фенотипических маркеров варьируются значительно, но по большей части воспроизводимо в ходе процесса размножения клеток. Таким образом, подобная воспроизводимость дает возможность адаптировать активированный Т-клеточный продукт для конкретных целей.

После конструирования CAR, например CAR для CD20, можно применять различные анализы для оценивания активности молекулы, как например, без ограничения, способность Т-клеток размножаться после стимуляции антигеном, устойчивое размножение Т-клеток в отсутствие повторной стимуляции и противораковая активность, в соответствующих моделях in vitro и животных моделях. Анализы для оценивания эффектов CAR, например CAR для CD20, описаны более подробно ниже.

Анализ вестерн-блоттинга экспрессии CAR в первичных Т-клетках может применяться для определения присутствия мономеров и димеров. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Вкратце, Т-клетки (смесь Т-клеток CD4⁺ и CD8⁺ 1:1), экспрессирующих CAR, размножают in vitro в течение более 10 суток, а затем лизируют и подвергают SDS-PAGE в восстанавливающих условиях. CAR, содержащий непроцессированный цитоплазматический домен TCR-ζ и эндогенную цепь TCR-ζ, выявляют путем вестерн-блоттинга с использованием антитела к цепи TCR-ζ. Ту же подгруппу T-клеток применяют для анализа SDS-PAGE в невосстанавливающих условиях для обеспечения оценки образования ковалентных димеров.

In vitro размножение Т-клеток CAR⁺ после стимуляции антигеном может быть измерено проточной цитометрией. Например, смесь Т-клеток CD4⁺ и CD8⁺ стимулируют с αCD3/αCD28 aAPC, а затем трансдуцируют лентивирусными векторами, экспрессирующими GFP, под контролем промоторов, подлежащих анализу. Иллюстративные промоторы предусматривают промоторы генов IE CMV, EF-1α, убиквитина С или фосфоглицерокиназы (PGK). Флуоресценцию GFP оценивают проточной цитометрией в день 6 культивирования в подгруппе T-клеток CD4⁺ и/или CD8⁺. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). В качестве альтернативы, смесь Т-клеток CD4⁺ и CD8⁺ стимулируют покрытыми αCD3/αCD28 магнитными микрогранулами в день 0 и трансдуцируют с помощью CAR в день 1 с использованием бицистронного лентивирусного вектора, экспрессирующего CAR, вместе с eGFP с использованием 2A-последовательности "рибосомного перепрыгивания". Культуры повторно стимулируют либо клетками K562 CD19⁺ (K562-CD19), клетками K562 дикого типа (K562 дикого типа), либо клетками K562, экспрессирующими hCD32 и 4-1BBL, в присутствии антитела к CD3 и к CD28 (K562-BBL-3/28) после промывания. Экзогенный IL-2 добавляют в культуры через день при 100 МЕ/мл. Т-клетки GFP⁺ подсчитывают проточной цитометрией с использованием подсчета с помощью микрогранул. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Подобные анализы могут быть выполнены с использованием связывающих Т-клеток CD20 (см., например Gill et al Blood 2014;123:2343) или связывающих CARТ-клеток CD20.

Также можно измерять длительное размножение T-клеток CAR⁺ в отсутствие повторного стимулирования. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Вкратце, измеряют средний объем Т-клеток (фл) в день 8 культивирования с использованием счетчика частиц Coulter Multisizer III, Nexcelom Cellometer Vision или Millipore Scepter после стимулирования покрытыми αCD3/αCD28 магнитными микрогранулами в день 0 и трансдукции указанным CAR в день 1.

Также можно использовать животные модели для измерения активности CART. Например, можно использовать ксенотрансплантатную модель с использованием CD19-специфичных Т-клеток CAR⁺ человека для лечения первичного пре-B ALL человека у иммунодефицитных мышей. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Вкратце, после установки ALL мышей рандомизируют на группы обработки. Различное число сконструированных Т-клеток αCD19-ζ и αCD19-BB-ζ совместно вводят инъекцией в отношении 1:1 мышам NOD-SCID-γ^-/-, несущим B-ALL. Оценивают число копий вектора αCD19-ζ и αCD19-BB-ζ в ДНК селезенки из мышей в разные моменты времени после инъекции Т-клеток. Животных оценивают на лейкемию с недельными интервалами. Число B-ALL бластных клеток CD19⁺ в периферической крови измеряют у мышей, которым вводят инъекцией Т-клетки CAR⁺ αCD19-ζ или имитационно-трансдуцированные Т-клетки. Кривые выживания для групп сравнивают с использованием логарифмического рангового критерия. Кроме того, можно также анализировать абсолютное количество T-клеток CD4⁺ и CD8⁺ периферической крови через 4 недели после инъекции Т-клеток мышам NOD-SCID-γ^-/-. Мышам вводят инъекцией лейкозные клетки и через 3 недели вводят инъекцией Т-клетки, сконструированные для экспрессии CAR с помощью бицистронного лентивирусного вектора, который кодирует CAR, связанный с eGFP. Т-клетки нормализуют до 45-50% входящих Т-клеток GFP⁺ путем смешивания с имитационно-трансдуцированными клетками перед инъекцией и подтверждают проточной цитометрией. Животных оценивают на лейкемию с интервалами 1 неделя. Кривые выживания для групп, получавших T-клетки CAR⁺, сравнивают с использованием логарифмического рангового критерия. Подобные эксперименты могут быть проведены с CART CD20.

Можно оценивать дозозависимый ответ на обработку CAR. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Например, получают периферическую кровь через 35-70 дней после установки лейкоза у мышей, получавших в день 21 инъекцию Т-клеток CAR, эквивалентное число имитационно-трансдуцированных Т-клеток или без Т-клеток. У мышей из каждой группы рандомно отбирают кровь для определения числа бластных клеток периферической крови CD19⁺ ALL, а затем их умерщвляют в дни 35 и 49. Остальных животных оценивают в дни 57 и 70. Подобные эксперименты могут быть проведены с CART CD20.

Оценка клеточной пролиферации и продуцирования цитокинов была описана ранее, например, в Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Вкратце, оценивание CAR-опосредованной пролиферации выполняют в микротитровальных планшетах путем смешивания отмытых Т-клеток с клетками K562, экспрессирующими CD19 (K19) или CD32 и CD137 (KT32-BBL), до конечного отношения T-клеток к клеткам K562, составляющего 2:1. Перед использованием клетки K562 облучают гамма-излучением. Моноклональные антитела к CD3 (клон OKT3) и к CD28 (клон 9.3) добавляют в культуры с клетками KT32-BBL, которые служат положительным контролем, для стимуляции T-клеточной пролиферации, поскольку эти сигналы поддерживают длительное размножение T-клеток CD8⁺ ex vivo. Т-клетки подсчитывают в культурах с использованием флуоресцентных микрогранул CountBright ™ (Invitrogen, Carlsbad, CA) и проточной цитометрии, как описано изготовителем. Т-клетки CAR⁺ идентифицируют посредством экспрессии GFP с использованием T-клеток, которые сконструированы со связанными с eGFP-2A CAR-экспрессирующими лентивирусными векторами. Для Т-клеток CAR+, не экспрессирующих GFP, Т-клетки CAR+ выявляют с помощью биотинилированного рекомбинантного белка CD19 и вторичного конъюгата авидин-РЕ. Экспрессию CD4+ и CD8⁺ на Т-клетках также одновременно выявляют с помощью специфичных моноклональных антител (BD Biosciences). Измерения цитокинов выполняют в надосадочных жидкостях, собранных через 24 часа после повторной стимуляции с использованием набора Cytometric Bead Array (BD Biosciences, San Diego, CA) для определения цитокина TH1/TH2 человека согласно инструкциям изготовителя или с использованием набора Luminex 30-plex (Invitrogen). Флуоресценцию оценивают с использованием проточного цитометра BD Fortessa и данные анализируют в соответствии с инструкциями изготовителя. Подобные эксперименты могут быть проведены с CART CD20.

Цитотоксичность может быть оценена стандартным анализом высвобождения 51Cr. См., например, Milone et al., Molecular Therapy 17(8): 1453-1464 (2009). Вкратце, целевые клетки (линий K562 и первичные клетки про-B-ALL) загружают с 51Cr (в виде NaCrO4, New England Nuclear, Бостон, Массачусетс) при 37°C в течение 2 часов с энергичным взбалтыванием, дважды промывают полной RPMI и выращивают в микротитровальных планшетах. Эффекторные Т-клетки смешивают с целевыми клетками в лунках в полной RPMI при различных отношениях эффекторной клетки к целевой клетке (E:T). Также готовят дополнительные лунки, содержащие только среду (спонтанное высвобождение, SR) или 1% раствор поверхностно-активного вещества тритон-X 100 (суммарное высвобождение, TR). После 4 часов инкубации при 37°C собирают надосадочную жидкость из каждой лунки. Затем измеряют высвобожденный 51Cr с использованием счетчика гамма-частиц (Packard Instrument Co., Уолтем, Массачусетс). Каждое условие выполняют в по меньшей мере в трех повторностях и вычисляют процентное отношение лизиса с использованием формулы: % лизиса=(ER-SR)/(TR-SR), где ER представляет собой среднее значение 51Cr, высвобожденного при каждом экспериментальном условии.

Могут использоваться технологии визуализации для оценки специфичной миграции и пролиферации CAR на животных моделях, несущих опухоль. Такие анализы были описаны, например, в Barrett et al., Human Gene Therapy 22:1575-1586 (2011). Вкратце, мышам NOD/SCID/γc^-/- (NSG) вводят инъекцией IV клетки Nalm-6, а спустя 7 дней - Т-клетки через 4 часа после электропорации с помощью конструкций CAR. Т-клетки стабильно трансфицируют лентивирусной конструкцией для экспрессии люциферазы светлячка, а мышей фотографируют для визуализации биолюминесценции. В качестве альтернативы, терапевтическую эффективность и специфичность однократной инъекции Т-клеток CAR⁺ на ксенотрансплантатной модели Nalm-6 можно измерять следующим образом. Мышам NSG вводят инъекцией Nalm-6, трансдуцированные для стабильной экспрессии люциферазы светлячка, а затем через 7 дней однократную инъекцию в хвостовую вену Т-клеток, электропорированных с CAR. Животных визуализируют в разные моменты времени после инъекции. Например, тепловые карты плотности фотонов люцифераза-положительного светлячка лейкоза у типичных мышей в день 5 (за 2 дня до лечения) и в день 8 (через 24 часа после PBL CAR⁺).

Другие анализы, в том числе анализы, описанные в разделе "Примеры" в данном документе, а также анализы, которые известны из уровня техники, также можно применять для оценки конструкций CAR для CD20 или CAR для CD22, описанных в данном документе.

Терапевтическое применение

Связанные с CD20, CD19 и/или CD22 заболевания и/или нарушения

Настоящее изобретение относится, среди прочего, к композициям и способам лечения рака или заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22, или состояния, ассоциированного с клетками, которые экспрессируют CD20, CD19 и/или CD22. В некоторых вариантах осуществления рак или заболевание включает, например, пролиферативное заболевание, такое как рак или злокачественное новообразование, или предраковое состояние, такое как миелодисплазия, миелодиспластический синдром или предлейкоз; или не связанное с раком показание, ассоциированное с клетками, которые экспрессируют CD20, CD19 и/или CD22. В одном аспекте рак или заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, представляет собой гематологический рак. В одном аспекте гематологического рак включает в себя без ограничения B-клеточное злокачественное новообразование. В одном аспекте гематологический рак представляет собой лейкоз или лимфому. В одном аспекте рак, например рак, ассоциированный с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22, включает раковые заболевания и злокачественные новообразования, включающие без ограничения, например, одно или несколько из острых лейкозов, в том числе без ограничения B-клеточный острый лимфоидный лейкоз (BALL), T-клеточный острый лимфоидный лейкоз (TALL), мелкоклеточный лимфоцитарный лейкоз (SLL), острый лимфоидный лейкоз (ALL); одно или несколько из хронических лейкозов, в том числе без ограничения хронический миелогенный лейкоз (CML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL); дополнительные гематологические формы рака или гематологические состояния, в том числе без ограничения лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), B-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, бластное плазмацитоидное дендритное клеточное новообразование, лимфому Беркитта, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, фолликулярную лимфому, лейкоз ворсистых клеток, мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, MALT-лимфому, лимфому маргинальной зоны, множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, неходжкинскую лимфому, лимфому Ходжкина, плазмобластную лимфому, плазмацитоидное дендритное клеточное новообразование, макроглобулинемии Вальденстрема и "предлейкоз", которые представляют собой различную совокупность гематологических состояний, объединенных неэффективным образованием (или дисплазией) миелоидных клеток крови. В некоторых вариантах осуществления заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22, включает без ограничения атипичные и/или не являющиеся классическими формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, экспрессирующие CD20, CD19 и/или CD22, и любую их комбинацию.

Не связанные с раком показания, ассоциированные с экспрессией CD20, также могут быть включены. Не связанные с раком показания, ассоциированные с экспрессией CD20, включают без ограничения, например, аутоиммунное заболевание (например, волчанку, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, аутоиммунную гемолитическую анемию, истинную эритроцитарную аплазию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, синдром Эванса, васкулит, буллезные кожные нарушения, сахарный диабет 1 типа, синдром Шегрена, энцефалит с антителами к NMDA-рецепторам и болезнь Девича, офтальмопатия Грейвса и аутоиммунный панкреатит), воспалительные заболевания (аллергия и астма) и трансплантацию.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22. В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения заболевания, где часть опухоли является отрицательной в отношении CD20, CD19 и/или CD22, а часть опухоли является положительной в отношении CD20, CD19 и/или CD22. Например, CAR по настоящему изобретению применим для лечения субъектов, которые подвергались лечению заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22, где субъект, который подвергался лечению заболевания, ассоциированного с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22, проявляет заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, CD19 и/или CD22.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к вектору, содержащему CAR, как описано в данном документе, функционально связанному с промотором, для экспрессии в Т-клетках или NK-клетках млекопитающего. В одном аспекте настоящее изобретение относится к рекомбинантной T-клетке, экспрессирующей CAR, для применения в лечении опухолей, экспрессирующих CD20, CD19 и/или CD22, где рекомбинантную T-клетку, экспрессирующую CAR для CD20, CAR для CD19 или CAR для CD22, называют CART CD20, CART CD19 или CART CD22, соответственно. В одном аспекте CART CD19 или CART CD22 по настоящему изобретению способны контактировать с опухолевой клеткой по меньшей мере с одним CAR для CD20, CAR для CD19 или CAR для CD22 по настоящему изобретению, экспрессируемым на ее поверхность, так, что CART нацеливается на опухолевую клетку, и рост опухоли ингибируется.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования роста опухолевой клетки, экспрессирующей CD20, CD19 и/или CD22, предусматривающему введение в контакт опухолевой клетки с T-клеткой CD20, CD19- и/или CD22-CAR или NK-клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, CD19 и/или CD22 по настоящему изобретению, так, что CAR-экспрессирующая клетка активируется в ответ на антиген и нацеливается на раковую клетку, при этом рост опухоли ингибируется.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака у субъекта. Способ предусматривает введение субъекту клетки, экспрессирующей CAR для CD20, CD19 и/или CD22 по настоящему изобретению так, что у субъекта лечится рак. Примером рака, который лечится с помощью клетки, экспрессирующей CAR для CD20, CD19 и/или CD22 по настоящему изобретению, является рак, ассоциированный с экспрессией CD20. Пример рака, который лечится с помощью клетки, экспрессирующей CAR для CD20, CD19 и/или CD22 по настоящему изобретению, включает без ограничения гематологический рак, описанный в данном документе. Настоящее изобретение охватывает тип клеточной терапии, при которой клетки генетически модифицируют таким образом, что они экспрессируют химерный антигенный рецептор (CAR), и при этом CAR-экспрессирующую клетку вводят посредством инфузии реципиенту, нуждающемуся в этом. Введенная посредством инфузии клетка способна уничтожать опухолевые клетки у реципиента. В отличие от средств терапии на основе антитела, CAR-модифицированные клетки способны реплицироваться in vivo, что приводит в результате к долгосрочной персистенции, которая может приводить к длительному контролю опухоли. В различных аспектах T-клетки, вводимые пациенту, или их потомство, персистируют у пациента в течение по меньшей мере четырех месяцев, пяти месяцев, шести месяцев, семи месяцев, восьми месяцев, девяти месяцев, десяти месяцев, одиннадцати месяцев, двенадцати месяцев, тринадцати месяцев, четырнадцати месяцев, пятнадцати месяцев, шестнадцати месяцев, семнадцати месяцев, восемнадцати месяцев, девятнадцати месяцев, двадцати месяцев, двадцати одного месяца, двадцати двух месяцев, двадцати трех месяцев, двух лет, трех лет, четырех лет или пяти лет после введения T-клетки пациенту.

Настоящее изобретение также предусматривает тип клеточной терапии, при которой иммунные эффекторные клетки, например NK-клетки или T-клетки, модифицируют, например, с помощью транскрибированной in vitro РНК, для временной экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR), и CAR-экспрессирующую клетку (например, CART или CAR-экспрессирующую NK), вводят посредством инфузии реципиенту, нуждающемуся в этом. Введенная посредством инфузии клетка способна уничтожать раковые клетки у реципиента. Таким образом, в различных аспектах CAR-экспрессирующая клетка, например T- или NK-клетка, вводимая пациенту, присутствует в течение менее одного месяца, например, трех недель, двух недель, одной недели после введения CAR-экспрессирующей клетки, например T- или NK-клетки, пациенту.

Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, противоопухолевый иммунный ответ, вызванный CAR-модифицированными клетками T-клетками или NK-клетками, может являться активным или пассивным иммунным ответом, или, как альтернатива, может быть обусловлен прямым или непрямым иммунным ответом. В одном аспекте CAR-трансдуцированные Т-клетки или NK-клетки характеризуются специфической секрецией провоспалительных цитокинов и выраженной цитолитической активностью в ответ на опухолевые клетки человека, экспрессирующие CD20, противодействуют ингибированию со стороны растворимого CD20, опосредуют неспецифический цитолиз и опосредуют регрессию развившейся опухоли у человека. Например, не содержащие антигена опухолевые клетки в гетерогенной области CD20-экспрессирующей опухоли могут быть восприимчивы к непрямому разрушению CD20-перенаправленными Т-клетками или NK-клетками, которые ранее вступали в реакцию против прилегающих антиген-положительных раковых клеток.

В одном аспекте CAR-модифицированные клетки по настоящему изобретению, например полностью CAR-экспрессирующие клетки человека, могут представлять собой тип вакцины для иммунизации ex vivo и/или терапии in vivo у млекопитающего. В одном аспекте млекопитающее представляет собой человека.

Что касается иммунизации ex vivo, то перед введением клетки млекопитающему происходит по меньшей мере одно из следующих событий in vitro: i) размножение клеток, ii) введение нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, в клетки или iii) криоконсервация клеток.

Процедуры ex vivo хорошо известны из уровня техники и более подробно обсуждаются ниже. Вкратце, клетки выделяют из млекопитающего (например, человека) и генетически модифицируют (т. е. трансдуцируют или трансфицируют in vitro) с помощью вектора, экспрессирующего CAR, раскрытого в данном документе. CAR-модифицированную клетку можно вводить реципиенту-млекопитающему для обеспечения терапевтического эффекта. Реципиентом-млекопитающим может быть человек, и CAR-модифицированная клетка может быть аутологичной по отношению к реципиенту. В качестве альтернативы, клетки могут быть аллогенными, сингенными или ксеногенными по отношению к реципиенту.

Процедуру размножения ex vivo гематопоэтических стволовых клеток и клеток-предшественников, описанную в патенте США № 5199942, включенном в данный документ посредством ссылки, можно применять по отношению к клеткам по настоящему изобретению. Другие подходящие способы известны из уровня техники, поэтому настоящее изобретение не ограничивается каким-либо конкретным способом размножения клеток ex vivo. Вкратце, культивирование и размножение Т-клеток ex vivo предусматривает: (1) сбор гематопоэтических стволовых клеток CD34+ и клеток-предшественников у млекопитающего из образца периферической крови или эксплантатов костного мозга; и (2) размножение таких клеток ex vivo. В дополнение к клеточным факторам роста, описанным в патенте США № 5199942, для культивирования и размножения клеток можно применять другие факторы, такие как flt3-L, IL-1, IL-3 и лиганд c-kit.

В дополнение к применению клеточной вакцины с целью иммунизации ex vivo, настоящее изобретение также предусматривает композиции и способы для иммунизации in vivo для вызывания иммунного ответа, направленного против антигена у пациента.

Как правило, клетки, активированные и размноженные, как описано в данном документе, можно использовать в лечении и предупреждении заболеваний, возникающих у индивидуумов с ослабленным иммунитетом. В частности, модифицированные CAR клетки по настоящему изобретению применяют в лечении заболеваний, нарушений и состояний, ассоциированных с экспрессией CD20. В некоторых аспектах клетки по настоящему изобретению применяют в лечении пациентов с риском развития заболеваний, нарушений и состояний, ассоциированных с экспрессией CD20. Таким образом, настоящее изобретение относится к способам лечения или предупреждения заболеваний, нарушений и состояний, ассоциированных с экспрессией CD20, предусматривающим введение субъекту, при необходимости, этого терапевтически эффективного количества CAR-модифицированных клеток по настоящему изобретению.

В одном аспекте CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению можно применять для лечения пролиферативного заболевания, такого как рак или злокачественное новообразование, или которое представляет собой предраковое состояние, такое как миелодисплазия, миелодиспластический синдром или предлейкоз. В одном аспекте рак, связанный с экспрессией CD20, представляет собой гематологический рак, предлейкоз, гиперпролиферативное нарушение, гиперплазию или дисплазию, которая характеризуется аномальным ростом клеток.

В одном аспекте CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению применяют для лечения рака, где рак представляет собой гематологический рак. Состояния, связанные с гематологическими формами рака, представляют собой типы рака, такие как лейкоз и злокачественные лимфопролиферативные состояния, при которых поражается кровь, костный мозг и лимфатическая система.

Лейкоз может быть классифицирован как острый лейкоз и хронический лейкоз. Острый лейкоз может быть дополнительно классифицирован как острый миелогенный лейкоз (AML) и острый лимфоидный лейкоз (ALL). Хронический лейкоз включает хронический миелогенный лейкоз (CML) и хронический лимфоидный лейкоз (CLL). Другие родственные состояния включают миелодиспластические синдромы (MDS, ранее известные как "предлейкемия"), которые представляют собой разнообразную совокупность гематологических состояний, объединенных неэффективным образованием (или дисплазией) миелоидных клеток крови и риском трансформации в AML.

Лимфома представляет собой группу опухолей клеток крови, которые развиваются из лимфоцитов. Иллюстративные лимфомы включают неходжкинскую лимфому и лимфому Ходжкина.

В одном аспекте композиции и CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению являются особенно пригодными для лечения злокачественных новообразований B-клеток, таких как неходжкинские лимфомы, например, DLBCL, фолликулярная лимфома или CLL.

Неходжкинская лимфома (NHL) представляет собой группу злокачественных опухолей лимфоцитов, образованных либо из B-, либо из T-клеток. NHL возникают в любом возрасте и часто характеризуются лимфатическими узлами, которые больше, чем нормальные, потерей веса и лихорадкой. Различные типы NHL классифицируются как агрессивные (быстро растущие) и вялотекущие (медленно растущие) типы. B-клеточные неходжкинские лимфомы включают лимфому Беркитта, хронический лимфоцитарный лейкоз/мелкоклеточную лимфоцитарную лимфому (CLL/SLL), диффузную крупноклеточную B-лимфому (DLBCL), фолликулярную лимфому, иммунобластную крупноклеточную лимфому, В-лимфобластную лимфому из клеток-предшественников и лимфому из клеток мантийной зоны. Примеры T-клеточных неходжкинских лимфом включают фунгоидную гранулему, анапластическую крупноклеточную лимфому и T-лимфобластную лимфому из клеток-предшественников. Лимфомы, которые возникают после трансплантации костного мозга или стволовых клеток, как правило, представляют собой B-клеточные неходжкинские лимфомы. См., например, Maloney. NEJM. 366,21(2012):2008-16.

Диффузная крупноклеточная B-лимфома (DLBCL) представляет собой форму NHL, которая развивается из B-клеток. DLBCL представляет собой агрессивную лимфому, которая может возникать в лимфатических узлах или за пределами лимфатической системы, например, в желудочно-кишечном тракте, семенниках, щитовидной железе, коже, молочной железе, кости или головном мозге. При DLBCL обычно наблюдаются три варианта клеточной морфологии: центробластный, иммунобластный и анапластический. Центробластная морфология является наиболее распространенной и характеризуется внешним видом лимфоцитов от среднего до крупного размера с минимальной цитоплазмой. Существует несколько подтипов DLBCL. Например, первичная лимфома центральной нервной системы представляет собой тип DLBCL, который поражает только головной мозг и лечится отлично от DLBCL, которая влияет на области за пределами головного мозга. Другой тип DLBCL представляет собой первичную медиастинальную B-клеточную лимфому, которая часто возникает у более молодых пациентов и быстро растет в грудной клетке. Симптомы DLBCL включают безболезненную быструю отечность в области шеи, подмышек или паха, которая вызвана увеличением лимфатических узлов. Для некоторых субъектов отечность может быть болезненной. Другие симптомы DLBCL включают ночную потливость, необъяснимую лихорадку и потерю веса. Несмотря на то, что большинство пациентов с DLBCL являются взрослыми, это заболевание иногда встречается у детей. Лечение DLBCL включает химиотерапию (например, циклофосфамид, доксорубицин, винкристин, преднизон, этопозид), антитела (например, ритуксан), облучение или трансплантации стволовых клеток.

Фолликулярная лимфома, тип неходжкинской лимфомы, представляет собой лимфому В-клеток центра фолликула (центроцитов и центробластов), которая характеризуется по меньшей мере частичным фолликулярным паттерном. Клетки фолликулярной лимфомы экспрессируют B-клеточные маркеры CD10, CD19, CD20 и CD22. Клетки фолликулярной лимфомы обычно являются отрицательными в отношении CD5. Морфологически опухоль на основе фолликулярной лимфомы состоит из фолликулов, содержащих смесь центроцитов (также называемых рассеченными клетками или мелкими клетками центрального фолликула) и центробластов (также называемых крупными нерассеченными клетками или крупными клетками центрального фолликула). Фолликулы окружены клетками, не являющимися злокачественными, преимущественно T-клетками. Фолликулы содержат главным образом центроциты с незначительным количеством центробластов. Морфологические степени в соответствии с Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) являются следующими: степень 1 (<5 центробластов в поле зрения при большом увеличении (hpf); степень 2 (6-15 центробластов/hpf); степень 3 (>15 центробластов/hpf). Степень 3 дополнительно подразделяют на следующие степени: степень 3A (центроциты все еще присутствуют); степень 3B (фолликул состоит почти целиком из центробластов). Лечение фолликулярной лимфомы включает химиотерапию, например, алкилирующие средства, нуклеозидные аналоги, схемы лечения, включающие антрациклин, например, комбинированная терапия, называемая CHOP - циклофосфамид, доксорубицин, винкристин, преднизон/преднизолон, антитела (например, ритуксимаб), радиоиммунотерапию и трансплантацию гематопоэтических стволовых клеток.

CLL представляет собой злокачественное новообразование B-клеток, характеризующееся пролиферацией и накоплением неопластических клеток в костном мозге, крови, лимфатических узлах и селезенке. Среднее значение возраста во время диагностирования CLL составляет приблизительно 65 лет. Современные виды лечения включают химиотерапию, лучевую терапию, биологическую терапию или трансплантацию костного мозга. Иногда симптомы лечат путем хирургического вмешательства (например, спленэктомическое удаление увеличенной селезенки) или с помощью лучевой терапии (например, циторедукция набухших лимфатических узлов). Химиотерапевтические средства для лечения CLL включают, например, флударабин, 2-хлордеоксиаденозин (кладрибин), хлорамбуцил, винкристин, пентостатин, циклофосфамид, алемтузумаб (кампат-1H), доксорубицин и преднизон. Биологическая терапия CLL включает антитела, например, алемтузумаб, ритуксимаб и офатумумаб; а также средства терапии на основе ингибиторов тирозинкиназы. Ряд критериев может быть использован для классификации стадии CLL, например, система Rai или Binet. В системе Rai описано, что CLL характеризуется наличием пяти стадий: стадия 0, при которой присутствует только лимфоцитоз; стадия I, при которой присутствует лимфаденопатия; стадия II, при которой присутствуют спленомегалия, лимфаденопатия или обе; стадия III, при которой присутствуют анемия, органомегалия или обе (прогрессирование определяется по потере веса, усталости, лихорадке, массивной органомегалии и быстро возрастающем содержании лимфоцитов); и стадия IV, при которой присутствуют анемия, тромбоцитопения, органомегалия или их комбинация. В соответствии с системой стадирования Binet существуют три категории: стадия A, при которой присутствует лимфоцитоз и увеличены менее трети лимфатических узлов (эта стадия включает всех пациентов со стадией 0 в соответствии с Rai, половину пациентов со стадией I в соответствии с Rai и треть пациентов со стадией II в соответствии с Rai); стадия B, при которой вовлечены три или более лимфатических узла; и стадия C, при которой присутствуют анемия или тромбоцитопения или обе. Эти системы классификации можно комбинировать с измерениями мутации генов иммуноглобулинов для получения более точной характеризации состояния заболевания. Наличие подвергнутых мутации генов иммуноглобулинов коррелирует с улучшенным прогнозом.

В другом варианте осуществления CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению применяют для лечения форм рака или лейкозов, например, с помощью лейкозных стволовых клеток. Например, лейкозные стволовые клетки представляют собой лейкозные клетки CD34⁺/CD38^-.

Настоящее изобретение относится, среди прочего, к композициям и способам лечения рака. В одном аспекте рак представляет собой гематологический рак, в том числе без ограничения одно или несколько из острых лейкозов, в том числе без ограничения B-клеточного острого лимфоидного лейкоза (BALL), T-клеточного острого лимфоидного лейкоза (TALL), мелкоклеточного лимфоцитарного лейкоза (SLL), острого лимфоидного лейкоза (ALL); одного или нескольких хронических лейкозов, в том числе без ограничения хронического миелогенного лейкоза (CML), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL); дополнительных гематологических форм рака или гематологических состояний, в том числе без ограничения лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), B-клеточного пролимфоцитарного лейкоза, бластного плазмацитоидного дендритного клеточного новообразования, лимфомы Беркитта, диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы, фолликулярной лимфомы, лейкоза ворсистых клеток, мелкоклеточной или крупноклеточной фолликулярной лимфомы, злокачественных лимфопролиферативных состояний, MALT-лимфомы, лимфомы маргинальной зоны, множественной миеломы, миелодисплазии и миелодиспластического синдрома, неходжкинской лимфомы, лимфомы Ходжкина, плазмобластной лимфомы, плазмацитоидного дендритного клеточного новообразования, макроглобулинемии Вальденстрема и "предлейкоза", которые представляют собой различную совокупность гематологических состояний, объединенных неэффективным образованием (или дисплазией) миелоидных клеток крови, а также заболевание, ассоциированное с экспрессией CD20, в том числе без ограничения атипичные и/или неклассические формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, экспрессирующие CD20; и любая их комбинация.

Модифицированные CAR клетки по настоящему изобретению можно вводить как в отдельности, так и в виде фармацевтической композиции в комбинации с разбавителями и/или другими компонентами, такими как IL-2 или другие цитокины или популяции клеток.

В другом аспекте CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению могут применяться для лечения субъекта, ранее получавшего лечение клеткой, экспрессирующей CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления CAR-экспрессирующую клетку по настоящему изобретению вводят после рецидива рака или другого состояния, которое ранее лечили клеткой, экспрессирующей CAR для CD19.

В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние является экспрессирующим CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние является экспрессирующим CD20. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние является экспрессирующим CD19 и CD20.

В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние ранее не отвечали на клетку, экспрессирующую CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние у субъекта отвечает на лечение клеткой, экспрессирующей CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние лучше отвечали на лечение клеткой, экспрессирующей CAR для CD19, чем в настоящее время. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние отвечали на лечение клеткой, экспрессирующей CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние отвечали на лечение клеткой, экспрессирующей CAR для CD19, и больше не отвечают на клетку, экспрессирующую CAR для CD19.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD19, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно. В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD19, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления терапия на основе клетки, экспрессирующей CAR для CD19, была прекращена. В некоторых вариантах осуществления CAR-терапия, направленная на CD19, была прекращена из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD19.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD19, и клетку, экспрессирующую CAR для CD22 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно. В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD19, и клетку, экспрессирующую CAR для CD22 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления терапия на основе клетки, экспрессирующей CAR для CD19, была прекращена. В некоторых вариантах осуществления CAR-терапия, направленная на CD19, была прекращена из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD19.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD22, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно. В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD22, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD22. В некоторых вариантах осуществления терапия на основе клетки, экспрессирующей CAR для CD22, была прекращена. В некоторых вариантах осуществления CAR-терапия, направленная на CD22, была прекращена из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD22.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD22, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно. В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD22, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20 (например, как описано в данном документе), вводят одновременно из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD20. В некоторых вариантах осуществления терапия на основе клетки, экспрессирующей CAR для CD20, была прекращена. В некоторых вариантах осуществления CAR-терапия, направленная на CD20, была прекращена из-за снижения или потери отвечаемости на клетку, экспрессирующую CAR для CD20.

Настоящее изобретение также относится к способам ингибирования пролиферации или снижения популяции CD20-экспрессирующих клеток, при этом способы предусматривают введение в контакт популяции клеток, содержащей CD20-экспрессирующую клетку, с клеткой, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой. В определенном аспекте настоящее изобретение относится к способам ингибирования пролиферации или снижения популяции раковых клеток, экспрессирующих CD20, при этом способы предусматривают введение в контакт популяции CD20-экспрессирующих раковых клеток с клеткой, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам ингибирования пролиферации или снижения популяции раковых клеток, экспрессирующих CD20, при этом способы предусматривают введение в контакт популяции CD20-экспрессирующих раковых клеток с клеткой, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой. В некоторых аспектах клетка, экспрессирующая CAR для CD20 по настоящему изобретению, снижает количество, число, численность или процентное содержание клеток и/или раковых клеток на по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 99% у субъекта с B-клеточным злокачественным новообразованием или другим раком, ассоциированного с CD20-экспрессирующими клетками, или у животной модели B-клеточного злокачественного новообразования или другого рака, ассоциированного с CD20-экспрессирующими клетками, по сравнению с отрицательным контролем. В одном аспекте субъектом является человек.

Настоящее изобретение также относится к способам предупреждения, лечения и/или контроля заболевания, ассоциированного с CD20-экспрессирующими клетками (например, гематологического рака или атипичного рака, экспрессирующего CD20), при этом способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, клетки, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте субъектом является человек. Неограничивающие примеры нарушений, ассоциированных с CD20-экспрессирующими клетками, включают аутоиммунные заболевания (например, волчанку, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, аутоиммунную гемолитическую анемию, истинную эритроцитарную аплазию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, синдром Эванса, васкулит, буллезные кожные нарушения, сахарный диабет 1 типа, синдром Шегрена, энцефалит с антителами к NMDA-рецепторам и болезнь Девича, офтальмопатия Грейвса и аутоиммунный панкреатит), воспалительные заболевания (аллергию и астму), трансплантацию и раковые заболевания (такие как гематологические формы рака или атипичные формы рака, экспрессирующие CD20).

Настоящее изобретение также относится к способам предупреждения, лечения и/или контроля заболевания, ассоциированного с CD20-экспрессирующими клетками, при этом способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, клетки, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте субъектом является человек.

Настоящее изобретение относится к способам предупреждения рецидива рака, связанного с CD20-экспрессирующими клетками, при этом способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, клетки, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества клетки, экспрессирующей CAR для CD20, описанной в данном документе, которая связывается с CD20-экспрессирующей клеткой, в комбинации с эффективным количеством другого терапевтического средства.

В некоторых вариантах осуществления CD20-экспрессирующая клетка экспрессирует CD19, CD123, FLT-3, ROR-1, CD79b, CD179b, CD79a, CD10, CD34 и/или CD22. В определенных вариантах осуществления CD20-экспрессирующая клетка экспрессирует CD19. В некоторых вариантах осуществления CD20-экспрессирующая клетка не экспрессирует CD19.

В некоторых вариантах осуществления субъект не отвечает на CAR-терапию, направленную на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект отвечает частично на CAR-терапию, направленную на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект полностью отвечает на CAR-терапию, направленную на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект не проявляет рецидива заболевания при CAR-терапии, направленной на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект проявляет рецидив заболевания при CAR-терапии, направленной на CD19.

В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние, которые ранее отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19, не экспрессируют CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние, которые ранее отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19, демонстрируют 10%, 20%, 30%, 40%, 50% или большее снижение уровней экспрессии CD19 по сравнению с тем, когда рак или другое состояние отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние, которые ранее отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19, экспрессируют CD22 и/или CD123.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD20 по настоящему изобретению, вводят после рецидива рака или другого состояния, которое ранее лечили клеткой, экспрессирующей CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD19, и клетку, экспрессирующую CAR для CD20, вводят одновременно, как описано в данном документе.

Абляция костного мозга

В одном аспекте настоящее изобретение относится к композициям и способам для абляции костного мозга. Например, в одном аспекте настоящее изобретение относится к композициям и способам для эрадикации по меньшей мере части имеющегося костного мозга у субъекта. В данном документе описано, что в некоторых случаях CD20-экспрессирующие клетки, содержащие CAR для CD20 по настоящему изобретению, эрадицируют CD20-положительные миелоидные клетки-предшественники костного мозга.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу абляции костного мозга, предусматривающему введение клетки, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению, субъекту, нуждающемуся в абляции костного мозга. Например, способ по настоящему изобретению может применяться для эрадикации некоторой части или всего имеющегося костного мозга субъекта с заболеванием или нарушением, при котором трансплантация костного мозга или рекондиционирование костного мозга является стратегией благоприятного лечения. В одном аспекте способ абляции костного мозга по настоящему изобретению, предусматривающий введение клетки, экспрессирующей CAR для CD20, описанной где-либо в данном документе, осуществляют у субъекта перед трансплантацией костного мозга. Таким образом, в одном аспекте способ по настоящему изобретению обеспечивает режим клеточного кондиционирования перед трансплантацией костного мозга или стволовых клеток. В одном аспекте трансплантация костного мозга включает трансплантацию стволовой клетки. Трансплантация костного мозга может включать трансплантацию аутологичных или аллогенных клеток.

Настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения, предусматривающему введение CD20-экспрессирующей клетки по настоящему изобретению для эрадикации по меньшей мере части имеющегося костного мозга. Способ может применяться как по меньшей мере часть режима лечения для лечения любого заболевания или нарушения, при котором полезна трансплантация костного мозга. То есть способ по настоящему изобретению может применяться у любого субъекта, нуждающегося в трансплантате костного мозга. В одном аспекте абляция костного мозга, предусматривающая введение CD20-экспрессирующей клетки, применима в лечении AML. В некоторых аспектах абляция костного мозга с помощью способа по настоящему изобретению применима в лечении гематологического рака, солидной опухоли, гематологического заболевания, метаболического нарушения, HIV, HTLV, лизосомальной болезни накопления и иммунодефицита.

Композиции и способы, описанные в данном документе, могут применяться для эрадикации по меньшей мере части имеющегося костного мозга с целью лечения гематологических форм рака, в том числе без ограничения форм рака, описанных в данном документе, например, лейкоза, лимфомы, миеломы, ALL, AML, CLL, CML, лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы (например, DLBCL или фолликулярной лимфомы) и множественной миеломы.

Композиции и способы, описанные в данном документе, могут применяться для лечения гематологических заболеваний, включая без ограничения, среди прочих, миелодисплазию, анемию, пароксизмальную ночную гемоглобинурию, апластическую анемию, приобретенную истинную эритроцитарную аплазию, анемию Диамона-Блэкфана, анемию Фанкони, цитопению, амегакариоцитарную тромбоцитопению, миелопролиферативные нарушения, полицитемию вера, эссенциальный тромбоцитоз, миелофиброз, гемоглобинопатии, серповидно-клеточное заболевание, большую β-талассемию.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака, предусматривающему кондиционирование костного мозга, где по меньшей мере часть костного мозга субъекта эрадицируют с помощью клетки, экспрессирующей CAR для CD20 по настоящему изобретению. Например, в некоторых случаях костный мозг субъекта содержит злокачественную клетку-предшественника, на которую можно нацелиться и элиминировать с помощью активности клетки, экспрессирующей CAR для CD20. В одном аспекте терапия кондиционирования костного мозга предусматривает введение трансплантата костного мозга или стволовых клеток субъекту после эрадикации нативного костного мозга. В одном аспекте терапию рекондиционирования костного мозга объединяют с одним или несколькими другими противораковыми терапевтическими средствами, в том числе без ограничения с противоопухолевыми терапевтическими средствами на основе CAR, химиотерапией, облучением и т. п.

В одном аспекте эрадикация вводимой клетки, экспрессирующей CAR для CD20, может требоваться перед инфузией трансплантата костного мозга или стволовых клеток. Эрадикацию клетки, экспрессирующей CAR для CD20, можно осуществлять с использованием любых подходящих стратегии или лечения, в том числе без ограничения применения "суицидального" гена, ограниченной персистенции CAR с использованием CAR, кодированных РНК, или методов против T-клеток, в том числе антител или химиотерапии.

Заболевания и/или нарушения, связанные с CD22

Настоящее изобретение относится, среди прочего, к композициям и способам лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией CD22, или состояния, ассоциированного с клетками, которые экспрессируют CD22, в том числе, например, пролиферативного заболевания, такого как рак, или злокачественного новообразования, или предракового состояния; или не связанного с раком показания, ассоциированного с клетками, которые экспрессируют CD22. В одном аспекте рак, ассоциированный с экспрессией CD22, представляет собой гематологический рак. В одном аспекте гематологический рак включает в себя без ограничения B-клеточное злокачественное новообразование. В одном аспекте гематологический рак представляет собой лейкоз или лимфому. В одном аспекте рак, ассоциированный с экспрессией CD22, включает раковые заболевания и злокачественные новообразования, в том числе без ограничения, например, одно или несколько из острых лейкозов, в том числе без ограничения B-клеточный острый лимфоидный лейкоз (BALL), T-клеточный острый лимфоидный лейкоз (TALL), мелкоклеточный лимфоцитарный лейкоз (SLL), острый лимфоидный лейкоз (ALL); одно или несколько из хронических лейкозов, в том числе без ограничения хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL); дополнительные гематологические формы рака или гематологические состояния, в том числе без ограничения лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), B-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, бластное плазмацитоидное дендритное клеточное новообразование, лимфому Беркитта, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, фолликулярную лимфому, лейкоз ворсистых клеток, мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, MALT-лимфому, лимфому маргинальной зоны, неходжкинскую лимфому, лимфому Ходжкина, плазмобластную лимфому, плазмацитоидное дендритное клеточное новообразование и макроглобулинемии Вальденстрема. В другом варианте осуществления заболевание, ассоциированное с экспрессией CD22, включает без ограничения атипичные и/или не являющиеся классическими формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, экспрессирующие CD22; и любую их комбинацию.

Не связанные с раком показания, ассоциированные с экспрессией CD22, также могут быть включены. Не связанные с раком показания, ассоциированные с экспрессией CD22, включают без ограничения, например, аутоиммунное заболевание (например, волчанку, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, аутоиммунную гемолитическую анемию, истинную эритроцитарную аплазию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, синдром Эванса, васкулит, буллезные кожные нарушения, сахарный диабет 1 типа, синдром Шегрена, энцефалит с антителами к NMDA-рецепторам и болезнь Девича, офтальмопатия Грейвса и аутоиммунный панкреатит), воспалительные заболевания (аллергия и астма) и трансплантацию твердого органа или гематопоэтических клеток.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения заболевания, ассоциированного с экспрессией CD22. В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения заболевания, где часть опухоли является отрицательной в отношении CD22, а часть опухоли является положительной в отношении CD22. Например, CAR по настоящему изобретению применим для лечения субъектов, которые подвергались лечению заболевания, ассоциированного с экспрессией CD22, где субъект, который подвергался лечению заболевания, ассоциированного с экспрессией CD22, демонстрирует заболевание, ассоциированное с экспрессией CD22.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к вектору, содержащему CAR для CD22, функционально связанному с промотором, для экспрессии в клетках млекопитающих (например, Т-клетках или NK клетках). В одном аспекте настоящее изобретение относится к рекомбинантной T-клетке, экспрессирующей CAR для CD22, для применения в лечении CD22-экспрессирующих опухолей, где рекомбинантную T-клетку, экспрессирующую CAR для CD22, называют CART CD22. В одном аспекте NK-клетка, экспрессирующая CART CD22 или CAR для CD22 по настоящему изобретению, способна контактировать с опухолевой клеткой с по меньшей мере одним CAR для CD22 по настоящему изобретению, экспрессируемым на ее поверхности так, что NK-клетка, экспрессирующая CART или CAR для CD22, нацеливается на опухолевую клетку, и рост опухоли ингибируется.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования роста CD22-экспрессирующей опухолевой клетки, предусматривающему введение в контакт опухолевой клетки с клеткой CAR CD22 (например, T-клеткой или NK-клеткой) по настоящему изобретению, так, что CART активируется в ответ на антиген и нацеливается на раковую клетку, при этом рост опухоли ингибируется.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака у субъекта. Способ предусматривает введение субъекту клетки, экспрессирующей CAR для CD22 (например, T-клетки или NK-клетки) по настоящему изобретению, так, что у субъекта лечится рак. Примером рака, который лечится с помощью клетки, экспрессирующей CAR для CD22 (например, T-клетки или NK-клетки) по настоящему изобретению, является рак, ассоциированный с экспрессией CD22. Пример рака, который лечится с помощью клетки, экспрессирующей CAR для CD22 (например, T-клетки или NK-клетки) по настоящему изобретению, включает без ограничения гематологический рак, описанный в данном документе.

Настоящее изобретение включает тип клеточной терапии, при которой клетки (например, Т-клетки или NK клетки) генетически модифицируют для экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR), и CAR-экспрессирующую клетку (например, T-клетку или NK-клетки) вводят посредством инфузии реципиенту, нуждающемуся в этом. Введенная посредством инфузии клетка способна уничтожать опухолевые клетки у реципиента. В отличие от терапевтических средств на основе антитела, CAR-модифицированные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки) способны реплицироваться in vivo, что приводит в результате к долгосрочной персистенции, которая может приводить к длительному контролю опухоли. В различных аспектах клетки (например, T-клетки или NK-клетки), вводимые пациенту, или их потомство, персистируют у пациента в течение по меньшей мере четырех месяцев, пяти месяцев, шести месяцев, семи месяцев, восьми месяцев, девяти месяцев, десяти месяцев, одиннадцати месяцев, двенадцати месяцев, тринадцати месяцев, четырнадцати месяцев, пятнадцати месяцев, шестнадцати месяцев, семнадцати месяцев, восемнадцати месяцев, девятнадцати месяцев, двадцати месяцев, двадцати одного месяца, двадцати двух месяцев, двадцати трех месяцев, двух лет, трех лет, четырех лет или пяти лет после введения T-клетки пациенту.

Настоящее изобретение также предусматривает тип клеточной терапии, при котором иммунные эффекторные клетки, например NK-клетки или T-клетки, модифицируют, например, с помощью транскрибированной in vitro РНК, для временной экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR), и CAR-экспрессирующую клетку (например, NK-клетку, экспрессирующую CART или CAR), вводят посредством инфузии реципиенту, нуждающемуся в этом. Введенная посредством инфузии клетка способна уничтожать раковые клетки у реципиента. Таким образом, в различных аспектах CAR-экспрессирующие клетки, например Т-клетки или NK-клетки, вводимые пациенту, присутствуют в течение менее одного месяца, например, в течение трех недель, двух недель, одной недели после введения пациенту CAR-экспрессирующей клетки, например Т-клетки или NK-клетки.

Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, противоопухолевый иммунный ответ, вызванный CAR-модифицированными клетками (например, T-клетками или NK-клетками), может являться активным или пассивным иммунным ответом, или, как альтернатива, может быть обусловлен прямым или непрямым иммунным ответом. В одном аспекте CAR-трансдуцированные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки) характеризуются специфической секрецией провоспалительных цитокинов и выраженной цитолитической активностью в ответ на опухолевые клетки человека, экспрессирующие CD22, противодействуют ингибированию со стороны растворимого CD22, опосредуют неспецифический цитолиз и опосредуют регрессию развившейся опухоли у человека. Например, не содержащие антигена опухолевые клетки в гетерогенной области CD22-экспрессирующей опухоли могут быть восприимчивы к непрямому разрушению CD22-перенаправленными Т-клетками, которые ранее вступали в реакцию против прилегающих антиген-положительных раковых клеток.

В одном аспекте CAR-модифицированные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки) по настоящему изобретению, например, полностью CAR-экспрессирующие клетки человека, могут представлять собой тип вакцины для иммунизации ex vivo и/или терапии in vivo у млекопитающего. В одном аспекте млекопитающее представляет собой человека.

Что касается иммунизации ex vivo, то перед введением клетки млекопитающему происходит по меньшей мере одно из следующих событий in vitro: i) размножение клеток, ii) введение нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR, в клетки или iii) криоконсервация клеток.

Процедуры ex vivo хорошо известны из уровня техники и более подробно обсуждаются ниже. Вкратце, клетки выделяют из млекопитающего (например, человека) и генетически модифицируют (т. е. трансдуцируют или трансфицируют in vitro) с помощью вектора, экспрессирующего CAR, раскрытого в данном документе. CAR-модифицированную клетку можно вводить реципиенту-млекопитающему для обеспечения терапевтического эффекта. Реципиентом-млекопитающим может быть человек, и CAR-модифицированная клетка может быть аутологичной по отношению к реципиенту. В качестве альтернативы, клетки могут быть аллогенными, сингенными или ксеногенными по отношению к реципиенту.

Процедуру размножения ex vivo гематопоэтических стволовых клеток и клеток-предшественников, описанную в патенте США № 5199942, включенном в данный документ посредством ссылки, можно применять в отношении клеток по настоящему изобретению. Другие подходящие способы известны из уровня техники, поэтому настоящее изобретение не ограничивается каким-либо конкретным способом размножения клеток ex vivo. Вкратце, культивирование и размножение Т-клеток ex vivo предусматривает: (1) сбор гематопоэтических стволовых клеток CD34+ и клеток-предшественников у млекопитающего из образца периферической крови или эксплантатов костного мозга; и (2) размножение таких клеток ex vivo. В дополнение к клеточным факторам роста, описанным в патенте США № 5199942, для культивирования и размножения клеток можно применять другие факторы, такие как flt3-L, IL-1, IL-3 и лиганд c-kit.

В дополнение к применению клеточной вакцины с целью иммунизации ex vivo, настоящее изобретение также предусматривает композиции и способы для иммунизации in vivo для вызывания иммунного ответа, направленного против антигена у пациента.

Как правило, клетки, активированные и размноженные, как описано в данном документе, можно использовать в лечении и предупреждении заболеваний, возникающих у индивидуумов с ослабленным иммунитетом. В частности, CAR-модифицированные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки) по настоящему изобретению применяют в лечении заболеваний, нарушений и состояний, ассоциированных с экспрессией CD22. В некоторых аспектах клетки по настоящему изобретению применяют в лечении пациентов с риском развития заболеваний, нарушений и состояний, ассоциированных с экспрессией CD22. Таким образом, настоящее изобретение относится к способам лечения или предупреждения заболеваний, нарушений и состояний, ассоциированных с экспрессией CD22, предусматривающим введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества CAR-модифицированных клеток (например, Т-клеток или NK-клеток) по настоящему изобретению.

В одном аспекте CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению можно применять для лечения пролиферативного заболевания, такого как рак, или злокачественное новообразование, или предраковое состояние. В одном аспекте рак, связанный с экспрессией CD22, представляет собой гематологический рак, предлейкоз, гиперпролиферативное нарушение, гиперплазию или дисплазию, которая характеризуется аномальным ростом клеток.

В одном аспекте CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению применяют для лечения рака, где рак представляет собой гематологический рак. Состояния, связанные с гематологическими формами рака, представляют собой типы рака, такие как лейкоз и злокачественные лимфопролиферативные состояния, при которых поражается кровь, костный мозг и лимфатическая система.

Лейкоз может быть классифицирован как острый лейкоз и хронический лейкоз. Острый лейкоз может быть дополнительно классифицирован как острый миелогенный лейкоз (AML) и острый лимфоидный лейкоз (ALL). Хронический лейкоз включает хронический миелогенный лейкоз (CML) и хронический лимфоидный лейкоз (CLL). Другие родственные состояния включают миелодиспластические синдромы (MDS, ранее известные как "предлейкемия"), которые представляют собой разнообразную совокупность гематологических состояний, объединенных неэффективным образованием (или дисплазией) миелоидных клеток крови и риском трансформации в AML.

Лимфома представляет собой группу опухолей клеток крови, которые развиваются из лимфоцитов. Иллюстративные лимфомы включают неходжкинскую лимфому и лимфому Ходжкина.

В одном аспекте композиции и CART-клетки или NK-клетки, экспрессирующие CAR по настоящему изобретению, являются особенно пригодными для лечения злокачественных новообразований B-клеток, таких как неходжкинские лимфомы, например, DLBCL, фолликулярная лимфома или CLL.

Неходжкинская лимфома (NHL) представляет собой группу злокачественных опухолей лимфоцитов, образованных либо из B-, либо из T-клеток. NHL возникают в любом возрасте и часто характеризуются лимфатическими узлами, которые больше, чем нормальные, потерей веса и лихорадкой. Различные типы NHL классифицируются как агрессивные (быстро растущие) и вялотекущие (медленно растущие) типы. B-клеточные неходжкинские лимфомы включают лимфому Беркитта, хронический лимфоцитарный лейкоз/мелкоклеточную лимфоцитарную лимфому (CLL/SLL), диффузную крупноклеточную B-лимфому (DLBCL), фолликулярную лимфому, иммунобластную крупноклеточную лимфому, В-лимфобластную лимфому из клеток-предшественников и лимфому из клеток мантийной зоны. Примеры T-клеточных неходжкинских лимфом включают фунгоидную гранулему, анапластическую крупноклеточную лимфому и T-лимфобластную лимфому из клеток-предшественников. Лимфомы, которые возникают после трансплантации костного мозга или стволовых клеток, как правило, представляют собой B-клеточные неходжкинские лимфомы. См., например, Maloney. NEJM. 366,21(2012):2008-16.

Диффузная крупноклеточная B-лимфома (DLBCL) представляет собой форму NHL, которая развивается из B-клеток. DLBCL представляет собой агрессивную лимфому, которая может возникать в лимфатических узлах или за пределами лимфатической системы, например, в желудочно-кишечном тракте, семенниках, щитовидной железе, коже, молочной железе, кости или головном мозге. При DLBCL обычно наблюдаются три варианта клеточной морфологии: центробластный, иммунобластный и анапластический. Центробластная морфология является наиболее распространенной и характеризуется внешним видом лимфоцитов от среднего до крупного размера с минимальной цитоплазмой. Существует несколько подтипов DLBCL. Например, первичная лимфома центральной нервной системы представляет собой тип DLBCL, который поражает только головной мозг и лечится отлично от DLBCL, которая влияет на области за пределами головного мозга. Другой тип DLBCL представляет собой первичную медиастинальную B-клеточную лимфому, которая часто возникает у более молодых пациентов и быстро растет в грудной клетке. Симптомы DLBCL включают безболезненную быструю отечность в области шеи, подмышек или паха, которая вызвана увеличением лимфатических узлов. Для некоторых субъектов отечность может быть болезненной. Другие симптомы DLBCL включают ночную потливость, необъяснимую лихорадку и потерю веса. Несмотря на то, что большинство пациентов с DLBCL являются взрослыми, это заболевание иногда встречается у детей. Лечение DLBCL включает химиотерапию (например, циклофосфамид, доксорубицин, винкристин, преднизон, этопозид), антитела (например, ритуксан), облучение или трансплантации стволовых клеток.

Фолликулярная лимфома, тип неходжкинской лимфомы, представляет собой лимфому В-клеток центра фолликула (центроцитов и центробластов), которая характеризуется по меньшей мере частичным фолликулярным паттерном. Клетки фолликулярной лимфомы экспрессируют B-клеточные маркеры CD10, CD19, CD20 и CD22. Клетки фолликулярной лимфомы обычно являются отрицательными в отношении CD5. Морфологически опухоль на основе фолликулярной лимфомы состоит из фолликулов, содержащих смесь центроцитов (также называемых рассеченными клетками или мелкими клетками центрального фолликула) и центробластов (также называемых крупными нерассеченными клетками или крупными клетками центрального фолликула). Фолликулы окружены клетками, не являющимися злокачественными, преимущественно T-клетками. Фолликулы содержат главным образом центроциты с незначительным количеством центробластов. Морфологические степени в соответствии с Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) являются следующими: степень 1 (<5 центробластов в поле зрения при большом увеличении (hpf); степень 2 (6-15 центробластов/hpf); степень 3 (>15 центробластов/hpf). Степень 3 дополнительно подразделяют на следующие степени: степень 3A (центроциты все еще присутствуют); степень 3B (фолликул состоит почти целиком из центробластов). Лечение фолликулярной лимфомы включает химиотерапию, например, алкилирующие средства, нуклеозидные аналоги, схемы лечения, включающие антрациклин, например, комбинированная терапия, называемая CHOP - циклофосфамид, доксорубицин, винкристин, преднизон/преднизолон, антитела (например, ритуксимаб), радиоиммунотерапию и трансплантацию гематопоэтических стволовых клеток.

CLL представляет собой злокачественное новообразование B-клеток, характеризующееся пролиферацией и накоплением неопластических клеток в костном мозге, крови, лимфатических узлах и селезенке. Среднее значение возраста во время диагностирования CLL составляет приблизительно 65 лет. Современные виды лечения включают химиотерапию, лучевую терапию, биологическую терапию или трансплантацию костного мозга. Иногда симптомы лечат путем хирургического вмешательства (например, спленэктомическое удаление увеличенной селезенки) или с помощью лучевой терапии (например, циторедукция набухших лимфатических узлов). Химиотерапевтические средства для лечения CLL включают, например, флударабин, 2-хлордеоксиаденозин (кладрибин), хлорамбуцил, винкристин, пентостатин, циклофосфамид, алемтузумаб (кампат-1H), доксорубицин и преднизон. Биологическая терапия CLL включает антитела, например, алемтузумаб, ритуксимаб и офатумумаб; а также средства терапии на основе ингибиторов тирозинкиназы. Ряд критериев может быть использован для классификации стадии CLL, например, система Rai или Binet. В системе Rai описано, что CLL характеризуется наличием пяти стадий: стадия 0, при которой присутствует только лимфоцитоз; стадия I, при которой присутствует лимфаденопатия; стадия II, при которой присутствуют спленомегалия, лимфаденопатия или обе; стадия III, при которой присутствуют анемия, органомегалия или обе (прогрессирование определяется по потере веса, усталости, лихорадке, массивной органомегалии и быстро возрастающем содержании лимфоцитов); и стадия IV, при которой присутствуют анемия, тромбоцитопения, органомегалия или их комбинация. В соответствии с системой стадирования Binet существуют три категории: стадия A, при которой присутствует лимфоцитоз и увеличены менее трети лимфатических узлов (эта стадия включает всех пациентов со стадией 0 в соответствии с Rai, половину пациентов со стадией I в соответствии с Rai и треть пациентов со стадией II в соответствии с Rai); стадия B, при которой вовлечены три или более лимфатических узла; и стадия C, при которой присутствуют анемия или тромбоцитопения или обе. Эти системы классификации можно комбинировать с измерениями мутации генов иммуноглобулинов для получения более точной характеризации состояния заболевания. Наличие подвергнутых мутации генов иммуноглобулинов коррелирует с улучшенным прогнозом.

В другом варианте осуществления CAR-экспрессирующие клетки по настоящему изобретению применяют для лечения форм рака или лейкозов, например, с помощью лейкозных стволовых клеток. Например, лейкозные стволовые клетки представляют собой лейкозные клетки CD34⁺/CD38^-.

Настоящее изобретение относится, среди прочего, к композициям и способам лечения рака. В одном аспекте рак представляет собой гематологический рак, в том числе без ограничения одно или несколько из острых лейкозов, в том числе без ограничения B-клеточный острый лимфоидный лейкоз (BALL), T-клеточный острый лимфоидный лейкоз (TALL), мелкоклеточный лимфоцитарный лейкоз (SLL), острый лимфоидный лейкоз (ALL); одно или несколько из хронических лейкозов, в том числе без ограничения хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL); дополнительные гематологические формы рака или гематологические состояния, в том числе без ограничения лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), B-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, бластное плазмацитоидное дендритное клеточное новообразование, лимфому Беркитта, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, фолликулярную лимфому, лейкоз ворсистых клеток, мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, MALT-лимфому, лимфому маргинальной зоны, неходжкинскую лимфому, лимфому Ходжкина, плазмобластную лимфому, плазмацитоидное дендритное клеточное новообразование, макроглобулинемии Вальденстрема и заболевание, ассоциированное с экспрессией CD22, в том числе без ограничения атипичные и/или неклассические формы рака, злокачественные новообразования, предраковые состояния или пролиферативные заболевания, экспрессирующие CD22; и любая их комбинация.

CAR-модифицированные клетки по настоящему изобретению можно вводить как в отдельности, так и в виде фармацевтической композиции в комбинации с разбавителями и/или другими компонентами, такими как IL-2 или другие цитокины или популяции клеток.

Настоящее изобретение также относится к способам ингибирования пролиферации или снижения популяции CD22-экспрессирующих клеток, при этом способы предусматривают введение в контакт популяции клеток, содержащей CD22-экспрессирующую клетку, с клеткой, экспрессирующей CAR для CD22 по настоящему изобретению, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой. В определенном аспекте настоящее изобретение относится к способам ингибирования пролиферации или снижения популяции раковых клеток, экспрессирующих CD22, при этом способы предусматривают введение в контакт популяции CD22-экспрессирующих раковых клеток с клеткой, экспрессирующей CAR для CD22 по настоящему изобретению, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте настоящее изобретение относится к способам ингибирования пролиферации или снижения популяции раковых клеток, экспрессирующих CD22, при этом способы предусматривают введение в контакт популяции CD22-экспрессирующих раковых клеток с CART CD22 по настоящему изобретению, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой. В некоторых аспектах клетка, экспрессирующая CAR для CD22 по настоящему изобретению, снижает количество, число, численность или процентное содержание клеток и/или раковых клеток на по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 99% у субъекта с B-клеточным злокачественным новообразованием или другим раком, ассоциированным с CD22-экспрессирующими клетками, по сравнению с отрицательным контролем. В одном аспекте субъектом является человек.

Настоящее изобретение также относится к способам предупреждения, лечения и/или контроля заболевания, ассоциированного с CD22-экспрессирующими клетками (например, гематологического рака или атипичного рака, экспрессирующего CD22), при этом способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, клетки, экспрессирующей CAR для CD22 по настоящему изобретению, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте субъектом является человек. Неограничивающие примеры нарушений, ассоциированных с CD22-экспрессирующими клетками, включают аутоиммунные заболевания (например, волчанку, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, аутоиммунную гемолитическую анемию, истинную эритроцитарную аплазию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, синдром Эванса, васкулит, буллезные кожные нарушения, сахарный диабет 1 типа, синдром Шегрена, энцефалит с антителами к NMDA-рецепторам и болезнь Девича, офтальмопатия Грейвса и аутоиммунный панкреатит), воспалительные заболевания (аллергию и астму), трансплантацию и раковые заболевания (такие как гематологические формы рака или атипичные формы рака, экспрессирующие CD22).

Настоящее изобретение также относится к способам предупреждения, лечения и/или контроля заболевания, ассоциированного с CD22-экспрессирующими клетками, при этом способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, клетки, экспрессирующей CAR для CD22 по настоящему изобретению, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте субъектом является человек.

Настоящее изобретение относится к способам предупреждения рецидива рака, связанного с CD22-экспрессирующими клетками, при этом способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, клетки, экспрессирующей CAR для CD22 по настоящему изобретению, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой. В одном аспекте способы предусматривают введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества клетки, экспрессирующей CAR для CD22, описанной в данном документе, которая связывается с CD22-экспрессирующей клеткой, в комбинации с эффективным количеством другого терапевтического средства.

В некоторых вариантах осуществления CD22-экспрессирующая клетка экспрессирует CD19, CD123, FLT-3, ROR-1, CD79b, CD179b, CD79a, CD10, CD34 и/или CD20. В определенных вариантах осуществления CD22-экспрессирующая клетка экспрессирует CD19. В некоторых вариантах осуществления CD22-экспрессирующая клетка не экспрессирует CD19.

В некоторых вариантах осуществления субъект не отвечает на CAR-терапию, направленную на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект отвечает частично на CAR-терапию, направленную на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект полностью отвечает на CAR-терапию, направленную на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект не проявляет рецидива заболевания при CAR-терапии, направленной на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект проявляет частичный рецидив заболевания при CAR-терапии, направленной на CD19. В некоторых вариантах осуществления субъект проявляет полный рецидив заболевания при CAR-терапии, направленной на CD19.

В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние, которые ранее отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19, не экспрессируют CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние, которые ранее отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19, демонстрируют 10%, 20%, 30%, 40%, 50% или большее снижение уровней экспрессии CD19 по сравнению с тем, когда рак или другое состояние отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления рак или другое состояние, которые ранее отвечали на лечение клетками, экспрессирующими CAR для CD19, экспрессируют CD22 и/или CD123.

В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD22 по настоящему изобретению, вводят после рецидива рака или другого состояния, которое ранее лечили клеткой, экспрессирующей CAR для CD19. В некоторых вариантах осуществления клетку, экспрессирующую CAR для CD19, и клетку, экспрессирующую CAR для CD22, вводят одновременно, как описано в данном документе.

Т-клетки CAR для CD19 для применения в лечении множественной миеломы

Даже при современных режимах химиотерапии, целенаправленно воздействующих терапевтических средств и трансплантации аутологичных стволовых клеток миелома считается неизлечимым заболеванием. В одном исследовании (не раскрыто) описано лечение множественной миеломы (ММ) аутологичными Т-клетками, направленными на CD19, с помощью химерного антигенного рецептора (лентивирус/CD19:4-1BB:CD3-дзета; также известными как "CART19" или CTL019). Данный пример демонстрирует, что CD19-направленные терапевтические средства на основе CAR обладают потенциалом для установления глубоких, долговременных ремиссий на основе нацеливания на миеломные стволовые клетки и/или опухолевые клетки, которые экспрессируют очень низкие (не выявляемые большинством способов) уровни CD19.

Терапия на основе T-клеток CAR19 для лимфомы Ходжкина

Терапия на основе T-клеток CAR19 также может применяться для лечения лимфомы Ходжкина (HL). Лимфома Ходжкина характеризуется наличием злокачественных клеток Ходжкина-Рид-Штернберга (HRS), которые происходят из клональных B-клеток зародышевого центра. Имеется несколько факторов, которые указывают на терапевтическую эффективность терапии на основе T-клеток CAR19 для HL. Окрашивание CD19 опухолей HL демонстрирует CD19-экспрессирующие (CD19⁺) клетки в опухоли и микроокружении опухоли. Исследование показало, что клональная популяция B-клеток (CD20⁺CD27⁺ALDH⁺), которые экспрессируют CD19, отвечает за создание и поддержание линий клеток лимфомы Ходжкина, а также циркулирует в крови большинства пациентов с HL (Jones et al., Blood, 2009, 113(23):5920-5926). Предполагается также, что эта популяция клональных В-клеток вызывает или способствует образованию злокачественных клеток HRS. Таким образом, терапия на основе CART19 истощает эту популяцию В-клеток, которая способствует онкогенезу или поддержанию опухолевых клеток. Другое исследование показало, что истощение В-клеток замедляет рост солидных опухолей на многочисленных мышиных моделях (Kim et al., J Immunotherapy, 2008, 31(5):446-57). В поддержку идеи о том, что истощение В-клеток в микроокружении опухоли HL приводит к некоторому противоопухолевому эффекту, современные терапевтические средства, такие как ритуксан, проходят клинические испытания в отношении нацеливания и истощения опухолевых В-клеток при HL (Younes et al., Blood, 2012, 119(18):4123-8). Также было показано, что канцерогенез de novo, связанный с хроническим воспалением, зависит от В-клеток (de Visser, et al., Cancer Cell, 2005, 7(5):411-23). Результаты этих исследований показывают, что нацеливание на популяцию В-клеток, особенно в микроокружении опухоли HL, было бы полезно для лечения HL путем снижения или ингибирования прогрессирования заболевания или роста опухоли.

Подгруппа пациентов, не отвечающих на лечение, среди пациентов с CLL проявляла повышенную экспрессию молекул ингибиторов контрольных точек иммунного ответа

В одном исследовании (данные не показаны) клетки CART19, полученные в результате производства для клинических исследований от 34 пациентов с CLL, оценивали в отношении экспрессии молекул ингибиторов контрольных точек иммунного ответа, таких как PD-1, LAG3 и TIM3. Ответ этой когорты на CART19 был известен, и поэтому можно было оценивать корреляцию между ответом и паттернами экспрессии биомаркера.

Эффекты ингибирования mTOR на "старение" иммунной системы в старшем возрасте

Эффективность ингибирования mTOR в отношении "старения" иммунной системы описана, например, в примере 1 Международной заявки WO/2015/073644, и эта заявка полностью включена в данный документ посредством ссылки.

Усиление иммунного ответа на вакцину у субъектов старшего возраста

Эффективность ингибирования mTOR в отношении усиления иммунного ответа описана, например, в примере 2 Международной заявки WO/2015/073644, и эта заявка полностью включена в данный документ посредством ссылки.

Ингибирование mTOR при низкой дозе усиливает энергию и физическую активность

Эффект ингибирования mTOR в отношении энергии и физической активности описана, например, в примере 3 из 20 Международной заявки WO/2015/073644, и эта заявка полностью включена в данный документ посредством ссылки.

Ингибирование киназы P70 S6 с помощью RAD001

Эффект ингибирования mTOR в отношении ингибирования киназы P70 S6 описана, например, в примере 4 из Международной заявки WO/2015/073644, и эта заявка полностью включена в данный документ посредством ссылки.

Экзогенный IL-7 усиливает функцию T-клеток CAR

После адоптивного переноса T-клеток CAR у некоторых пациентов сохраняется ограниченная персистенция T-клеток CAR, что может привести к субоптимальным уровням противоопухолевой активности. В данном примере эффекты от введения экзогенного IL-7 человека оценивают на моделях ксенотрансплантатов мыши, где наблюдается первоначальный субоптимальный ответ на T-клетки CAR.

Виды комбинированной терапии

Описанная в данном документе CAR-экспрессирующая клетка может применяться в комбинации с другими известными средствами и видами терапии. Как используется в данном документе, "вводимый в комбинации" означает, что два (или более) различных средства лечения доставляют субъекту в то время, когда субъект страдает нарушением, например, два или более средства лечения доставляют после того, как у субъекта было диагностировано нарушение, и до того, как нарушение будет излечено или устранено или лечение будет прекращено по другим причинам. В некоторых вариантах осуществления доставка одного средства лечения по-прежнему происходит, когда начинается доставка второго, так что с точки зрения введения имеет место перекрывание. Это иногда упоминается в данном документе как "одновременная" или "параллельная" доставка. В некоторых вариантах осуществления доставка одного средства лечения заканчивается до начала доставки другого средства лечения. В некоторых вариантах осуществления в любом случае вследствие комбинированного введения лечение является более эффективным. Например, второе средство лечения является более эффективным, например, эквивалентный эффект наблюдается при меньшем количестве второго средства лечения, или второе средство лечения снижает интенсивность симптомов в большей степени, чем наблюдалось бы при введении второго средства лечения в отсутствие первого средства лечения, или аналогичная ситуация наблюдается с первым средством лечения. В некоторых вариантах осуществления доставка является такой, при которой снижение интенсивности симптома или другого параметра, связанного с нарушением, является большим, чем то, которое наблюдалось бы при доставке одного средства лечения в отсутствие другого. Эффект двух средств лечения может быть частично аддитивным, полностью аддитивным или превышающим аддитивный. Доставка может являться такой, что эффект от первого доставленного средства лечения все еще можно выявить при доставке второго.

Описанную в данном документе CAR-экспрессирующую клетку и по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство можно вводить одновременно в одной и той же, или в отдельных композициях, или последовательно. В случае последовательного введения CAR-экспрессирующую клетку, описанную в данном документе, можно вводить первой, а дополнительное средство можно вводить вторым, или порядок введения может быть обратным.

Средство CAR-терапии и/или другие терапевтические средства, процедуры или способы можно применять в периоды активного проявления нарушения или в период ремиссии или менее активного проявления заболевания. Средство CAR-терапии можно вводить перед другим средством лечения, параллельно со средством лечения, после средства лечения или во время ремиссии нарушения.

При введении в комбинации, средство CAR-терапии и дополнительное средство (например, второе или третье средство) или все из них можно вводить в количестве или дозе, которые выше, ниже или такими же по сравнению с количеством или дозировкой каждого средства, используемого отдельно, например в качестве монотерапии. В определенных вариантах осуществления вводимое количество или дозировка средства CAR-терапии, дополнительного средства (например, второго или третьего средства) или их всех ниже (например, на по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40% или по меньшей мере 50%), чем количество или дозировка каждого средства, используемого отдельно, например в качестве монотерапии. В некоторых вариантах осуществления количество или дозировка средства CAR-терапии, дополнительного средства (например, второго или третьего средства) или их всех, которое приводит к требуемому эффекту (например, лечению рака), ниже (например, ниже на по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40% или по меньшей мере 50%), чем количество или дозировка каждого средства, используемого отдельно, например в качестве монотерапии, необходимое для достижения того же терапевтического эффекта.

В дополнительных аспектах описанную в данном документе CAR-экспрессирующую клетку можно применять в схеме лечения в комбинации с хирургическим вмешательством, цитокинами, облучением или химиотерапевтическим средством, таким как цитоксан, флударабин, ингибиторы гистондеацетилазы, деметилирующие средства или пептидная вакцина, как описано в Izumoto et al. 2008 J Neurosurg 108:963-971.

В определенных случаях соединения по настоящему изобретению комбинируют с другими терапевтическими средствами, такими как другие противораковые средства, противоаллергические средства, средства против тошноты (или противорвотные средства), обезболивающие средства, цитопротекторные средства и их комбинации.

Основные химиотерапевтические средства, рассматриваемые для применения в видах комбинированной терапии, включают анастрозол (Arimidex®), бикалутамид (Casodex®), блеомицина сульфат (Blenoxane®), бусульфан (Myleran®), бусульфан для инъекций (Busulfex®), капецитабин (Xeloda®), N4-пентоксикарбонил-5-дезокси-5-фторцитидин, карбоплатин (Paraplatin®), кармустин (BiCNU®), хлорамбуцил (Leukeran®), цисплатин (Platinol®), кладрибин (Leustatin®), циклофосфамид (Cytoxan® или Neosar®), цитарабин, цитозинарабинозид (Cytosar-U®), липосомный цитарабин для инъекций (DepoCyt®), дакарбазин (DTIC-Dome®), дактиномицин (актиномицин D, Cosmegan), даунорубицина гидрохлорид (Cerubidine®), липосомальный даунорубицина цитрат для инъекций (DaunoXome®), дексаметазон, доцетаксел (Taxotere®), доксорубицина гидрохлорид (Adriamycin®, Rubex®), этопозид (Vepesid®), флударабина фосфат (Fludara®), 5-фторурацил (Adrucil®, Efudex®), флутамид (Eulexin®), тезацитибин, гемцитабин (дифтордезоксицитидин), гидроксимочевина (Hydrea®), идарубицин (Idamycin®), ифосфамид (IFEX®), иринотекан (Camptosar®), L-аспарагиназу (ELSPAR®), лейковорин кальция, мелфалан (Alkeran®), 6-меркаптопурин (Purinethol®), метотрексат (Folex®), митоксантрон (Novantrone®), милотарг, паклитаксел (Taxol®), наб-паклитаксел (Abraxane®), феникс (иттрий-90/MX-DTPA), пентостатин, полифепрозан 20 с кармустином для имплантации (Gliadel®), цитрат тамоксифена (Nolvadex®), тенипозид (Vumon®), 6-тиогуанин, тиотепу, тирапазамин (Tirazone®), топотекана гидрохлорид для инъекций (Hycamptin®), винбластин (Velban®), винкристин (Oncovin®) и винорелбин (Navelbine®).

Противораковые средства, представляющие особый интерес для комбинаций с соединениями по настоящему изобретению, включают: противоопухолевые антибиотики; ингибиторы тирозинкиназы; алкилирующие средства; антимикротубулиновые или антимитотические средства или онколитические вирусы.

Типичные ингибиторы тирозинкиназы включают без ограничения эрлотиниб гидрохлорид (Tarceva®); линифаниб (N-[4-(3-амино-1H-индазол-4-ил)фенил]-N'-(2-фтор-5-метилфенил)мочевина, также известный как ABT 869, доступный от Genentech); сунитиниб малат (Sutent®); босутиниб (4-[(2,4-дихлор-5-метоксифенил)амино]-6-метокси-7-[3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси]хинолин-3-карбонитрил, также известный как SKI-606, и описанный в патенте США № 6780996); дазатиниб (Sprycel®); пазопаниб (Votrient®); сорафениб (Nexavar®); зактима (ZD6474) и иматиниб или иматиниб мезилат (Gilvec® и Gleevec®).

Иллюстративные алкилирующие средства включают без ограничения оксалиплатин (Eloxatin®); темозоломид (Temodar® и Temodal®); дактиномицин (также известный как актиномицин-D, Cosmegen®); мелфалан (также известный как L-PAM, L-сарколизин и фенилаланиновый иприт, Alkeran®); алтретамин (также известный как гексаметилмеламин (HMM), Hexalen®); кармустин (BiCNU®); бендамустин (Treanda®); бусульфан (Busulfex® и Myleran®); карбоплатин (Paraplatin®); ломустин (также известный как CCNU, CeeNU®); цисплатин (также известный как CDDP, Platinol® и Platinol®-AQ); хлорамбуцил (Leukeran®); циклофосфамид (Cytoxan® и Neosar®); дакарбазин (также известный как DTIC, DIC и имидазолкарбоксамид, DTIC-Dome®); алтретамин (также известный как гексаметилмеламин (HMM), Hexalen®); ифосфамид (Ifex®); преднумустин; прокарбазин (Matulane®); мехлорэтамин (также известный как азотистый иприт, мустин и гидрохлорид мехлорэтамина, Mustargen®); стрептозоцин (Zanosar®); тиотепа (также известный как тиофосфоамид, TESPA и TSPA, Thioplex®); циклофосфамид (Endoxan®, Cytoxan®, Neosar®, Procytox®, Revimmune®) и бендамустин HCl (Treanda®).

Иллюстративные противораковые антибиотики включают, например, доксорубицин (Adriamycin® и Rubex®); блеомицин (lenoxane®); даунорубицин (даунорубицина гидрохлорид, дауномицина и рубидомицина гидрохлорид, Cerubidine®); липосомальный даунорубицин (липосомальный даунорубицина цитрат, DaunoXome®); митоксантрон (DHAD, Novantrone®); эпирубицин (Ellence™); идарубицин (Idamycin®, Idamycin PFS®); митомицин C (Mutamycin®); гельданамицин; гербимицин; равидомицин и дезацетилравидомицин.

Типичные антимикротубулиновые или антимитотические средства включают без ограничения алкалоиды барвинка (такие как винорелбин тартрат (Navelbine®), винкристин (Oncovin®) и виндезин (Eldisine®)); таксаны (такие как паклитаксел и доцектаксел); а также эстрамустин (Emcyl® или Estracyt®).

В некоторых вариантах осуществления CAR-экспрессирующую клетку, описанную в данном документе, вводят в комбинации с онколитическим вирусом. В вариантах осуществления онколитические вирусы способны избирательно реплицироваться в раковой клетке и вызывать ее гибель или замедление ее роста. В некоторых случаях онколитические вирусы не оказывают эффекта или оказывают минимальный эффект в отношении клеток, отличных от раковых. Онколитический вирус включает без ограничения онколитический аденовирус, онколитические вирусы простого герпеса, онколитические ретровирусы, онколитические парвовирусы, онколитический вирус осповакцины, онколитический вирус Синдбис, онколитический вирус гриппа или онколитический РНК-содержащий вирус (например, онколитический реовирус, онколитический вирус болезни Ньюкасла (NDV), онколитический вирус кори или онколитический вирус везикулярного стоматита (VSV)).

В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус представляет собой вирус, например, рекомбинантный онколитический вирус, описанный в US2010/0178684 A1, который включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления рекомбинантный онколитический вирус содержит последовательность нуклеиновой кислоты (например, гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты), кодирующей ингибитор иммунного или воспалительного ответа, например, описанный в US2010/0178684 A1, включенный в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления рекомбинантный онколитический вирус, например, онколитический вирус NDV, содержит проапоптический белок (например, апоптин), цитокин (например, GM-CSF, интерферон гамма, интерлейкин 2 (IL-2), фактор некроза опухоли альфа), иммуноглобулин (например, антитело к фибронектину ED-B), опухолеассоциированный антиген, биспецифический адапторный белок (например, биспецифическое антитело или фрагмент антитела, направленные против белка HN NDV, T-клеточный костимуляторный рецептор, такой как CD3 или CD28; или слитый белок на основе IL-2 человека и одноцепочечного антитела, направленного против белка HN NDV). См., например, Zamarin et al. Future Microbiol. 7.3(2012):347-67, включенную в данный документ посредством ссылке во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус представляет собой химерный онколитический NDV, описанный в US 8591881 B2, US 2012/0122185 A1 или US 2014/0271677 A1, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус включает условно-репликативный аденовирус (CRAd), который разработан для репликации исключительно в раковых клетках. См., например, Alemany et al. Nature Biotechnol. 18(2000):723-27. В некоторых вариантах осуществления онколитический аденовирус представляет собой таковой, описанный в таблице 1 на странице 725 в Alemany et al., включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Иллюстративные онколитические вирусы включают без ограничения следующие:

онколитический аденовирус группы B (ColoAd1) (PsiOxus Therapeutics Ltd.) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT02053220);

ONCOS-102 (ранее называемый CGTG-102), который представляет собой аденовирус, содержащий гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF) (Oncos Therapeutics) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01598129);

VCN-01, который представляет собой генетически модифицированный онколитический аденовирус человека, кодирующий гиалуронидазу PH20 человека (VCN Biosciences, S.L.) (см., например, клинические испытание с идентификационными номерами NCT02045602 и NCT02045589);

условно-репликативный аденовирус ICOVIR-5, который представляет собой вирус, полученный из аденовируса дикого типа человека серотипа 5 (Had5), который был модифицирован для избирательной репликации в раковых клетках с нарушенной регуляцией пути ретинобластома/E2F (Institut Català d'Oncologia) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01864759);

Celyvir, который содержит аутологичные мезенхимальные стволовые клетки, полученные из костного мозга (MSC), инфицированные ICOVIR5, онколитический аденовирус (Hospital Infantil Universitario Мадрид, Испания/Ramon Alemany) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01844661);

CG0070, который представляет собой условно-репликативный онколитический аденовирус серотипа 5 (Ad5), в котором промотор E2F-1 человека регулирует экспрессию важного гена вируса E1a, за счет чего обеспечивается ограничение вирусной репликации и цитотоксичности в дефектных в отношении Rb-пути опухолевых клетках (Cold Genesys, Inc.) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT02143804); или

DNX-2401 (ранее называемый Delta-24-RGD), который представляет собой аденовирус, который был сконструирован для избирательной репликации в дефектных в отношении пути ретинобластомы (Rb) клетках и для более эффективного инфицирования клеток, которые экспрессируют определенные связывающиеся с RGD интегрины (Clinica Universidad de Navarra, Universidad de Navarra/DNAtrix, Inc.) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01956734).

В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус, описанный в данном документе, вводят с помощью инъекции, например, подкожной, внутриартериальной, внутривенной, внутримышечной, интратекальной или интраперитонеальной инъекций. В вариантах осуществления онколитический вирус, описанный в данном документе, вводят внутрь опухоли, трансдермально, трансмукозально, перорально, интраназально или посредством ингаляционного введения.

В некоторых вариантах осуществления CAR-экспрессирующую клетку, описанную в данном документе, вводят в комбинации со (например, до, одновременно и/или после) вторым ингибитором CD20, например, антителом к CD20 или конъюгатом антитела к CD20 с лекарственным средством.

Типичные антитела к CD20 включают без ограничения ритуксимаб (Riuxan® и MabThera®); тозитумомаб (Bexxar®) и офатумумаб (Arzerra®).

Типичные конъюгаты антитела к CD20 с лекарственным средством включают без ограничения ибритумомаб тиуксетан (Zevalin®) и тозитумомаб.

В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетку, описанную в данном документе, вводят субъекту в комбинации с молекулой, нацеливающейся на GITR и/или модулирующей функции GITR, например, агонистом GITR и/или антителом к GITR, которое истощает регуляторные Т-клетки (Treg). В одном варианте осуществления молекулы, связывающие GITR, и/или молекулы, модулирующие функции GITR (например, агонист GITR и/или истощающие Treg антитела к GITR), вводят до введения CAR-экспрессирующей клетки. Например, в одном варианте осуществления агонист GITR можно вводить до афереза клеток. В одном варианте осуществления субъект имеет CLL. Иллюстративные агонисты GITR включают, например, слитые белки GITR и антитела к GITR (например, бивалентные антитела к GITR), такие как, например, слитый белок GITR, описанный в патенте США № 6111090, европейском патенте № 090505B1, патенте США № 8586023, публикациях согласно PCT №№ WO 2010/003118 и 2011/090754, или антитело к GITR описанное, например, в патенте США № 7025962, европейском патенте № 1947183B1, патенте США № 7812135, патенте США № 8388967, патенте США № 8591886, европейском патенте № EP 1866339, публикации согласно PCT № WO 2011/028683, публикации согласно PCT № WO 2013/039954, публикации согласно PCT № WO 2005/007190, публикации согласно PCT № WO 2007/133822, публикации согласно PCT № WO 2005/055808, публикации согласно PCT № WO 99/40196, публикации согласно PCT № WO 2001/03720, публикации согласно PCT № WO 99/20758, публикации согласно PCT № WO 2006/083289, публикации согласно PCT № WO 2005/115451, патенте США № 7618632 и публикации согласно PCT № WO 2011/051726.

В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующую клетку, описанную в данном документе, вводят субъекту в комбинации с ингибитором mTOR, например, ингибитором mTOR, описанным в данном документе, например рапалогом, таким как эверолимус. В одном варианте осуществления ингибитор mTOR вводят до введения CAR-экспрессирующей клетки. Например, в одном варианте осуществления ингибитор mTOR можно вводить до афереза клеток.

В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующую клетку, описанную в данном документе, вводят субъекту в комбинации с агонистом GITR, например, агонистом GITR, описанным в данном документе. В одном варианте осуществления агонист GITR вводят до CAR-экспрессирующей клетки, например клеток, экспрессирующих CAR для CD20. Например, в одном варианте осуществления агонист GITR можно вводить до афереза клеток.

В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующую клетку, описанную в данном документе, вводят субъекту в комбинации с ингибитором протеинтирозинфосфатазы, например, ингибитором протеинтирозинфосфатазы, описанным в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор протеинтирозинфосфатазы представляет собой ингибитор SHP-1, например, ингибитор SHP-1, описанный в данном документе, такой как, например, стибоглюконат натрия. В одном варианте осуществления ингибитор протеинтирозинкиназы представляет собой ингибитор SHP-2.

В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующая клетка, описанная в данном документе, может применяться в комбинации с ингибитором киназы.

В варианте осуществления данный подход может применяться для оптимизации у субъекта характеристики CAR-клеток, описанных в данном документе. Без ограничения какой-либо теорией, предполагается, что в варианте осуществления характеристика эндогенных, немодифицированных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, улучшается. Без ограничения какой-либо теорией, предполагается, что в варианте осуществления характеристика клетки, экспрессирующей CAR для CD20, улучшается. В некоторых вариантах осуществления клетки, например Т-клетки или NK-клетки, которые были сконструированы или будут сконструированы для экспрессии CAR, могут быть обработаны ex vivo путем контакта с количеством ингибитора mTOR, которое повышает число PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток/NK-клеток, или повышает отношение PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, к PD1-положительным иммунным эффекторным клеткам, например Т-клеткам или NK клеткам.

В варианте осуществления введение низкой, повышающей иммунитет дозы ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, или каталитического ингибитора, начинают до введения CAR-экспрессирующей клетки, описанной в данном документе, например Т-клеток или NK-клеток. В варианте осуществления CAR-клетки вводят через достаточное время или достаточным введением дозы ингибитора mTOR так, чтобы уровень PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, или отношение PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, к PD1 положительным иммунным эффекторным клеткам, например Т-клеткам или NK-клеткам, был, по меньшей мере временно, повышенным.

В варианте осуществления клетку, например T-клетку или NK-клетку, подлежащую конструированию для экспрессии CAR, собирают спустя достаточное время или после достаточного введения низкой, повышающей иммунитет дозы ингибитора mTOR так, чтобы уровень PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, или отношение PD1-отрицательных иммунных эффекторных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, к PD1-положительным иммунным эффекторным клеткам, например Т-клеткам или NK-клеткам, имеющимся у субъекта или собранным от субъекта, был, по меньшей мере временно, повышенным.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR вводят в течение времени, достаточного для снижения пропорции PD-1-положительных Т-клеток, повышения доли PD-1-отрицательных Т-клеток или повышения отношения PD-1-отрицательных Т-клеток/PD-1-положительных Т-клеток в периферической крови субъекта или в препарате Т-клеток, выделенных из субъекта.

В некоторых вариантах осуществления доза ингибитора mTOR связана с ингибитором mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 90%, например, как измерено с помощью ингибирования p70 S6K. В некоторых некоторых вариантах осуществленияосуществления доза ингибитора mTOR связана с ингибитором mTOR по меньшей мере на 10%, но не более чем на 40%, например, как измерено с помощью ингибирования p70 S6K.

В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор CDK4, например, ингибитор CDK4, описанный в данной документе, например ингибитор CD4/6, такой как 6-ацетил-8-циклопентил-5-метил-2-(5-пиперазин-1-илпиридин-2-иламино)-8H-пиридо[2,3-d]пиримидин-7-она, гидрохлорид (также называемый палбоциклибом или PD0332991). В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор BTK, например, ингибитор BTK, описанный в данном документе, такой как, например, ибрутиниб. В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор mTOR, например, ингибитор mTOR, описанный в данном документе, такой как, например, рапамицин, аналог рапамицина, OSI-027. Ингибитор mTOR может представлять собой, например, ингибитор mTORC1 и/или ингибитор mTORC2, например, ингибитор mTORC1 и/или ингибитор mTORC2, описанные в данной документе. В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор MNK, например, ингибитор MNK, описанный в данном документе, такой как, например, 4-амино-5-(4-фторанилино)пиразоло[3,4-d]пиримидин. Ингибитор MNK может представлять собой, например, ингибитор MNK1a, MNK1b, MNK2a и/или MNK2b. В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор DGK, например, ингибитор DGK, описанный в данном документе, такой как, например, DGKinh1 (D5919) или DGKinh2 (D5794). В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор CDK4, выбранный из алоизина A; флавопиридола или HMR-1275, 2-(2-хлорфенил)-5,7-дигидрокси-8-[(3S,4R)-3-гидрокси-1-метил-4-пиперидинил]-4-хроменона; кризотиниба (PF-02341066; 2-(2-хлорфенил)-5,7-дигидрокси-8-[(2R,3S)-2-(гидроксиметил)-1-метил-3-пирролидинил]-4H-1-бензопиран-4-он, гидрохлорида (P276-00); 1-метил-5-[[2-[5-(трифторметил)-1H-имидазол-2-ил]-4-пиридинил]окси]-N-[4-(трифторметил)фенил]-1H-бензиамидазол-2-амина (RAF265); индисулама (E7070); росковитина (CYC202); палбоциклиба (PD0332991); динациклиба (SCH727965); N-[5-[[(5-трет-бутилоксазол-2-ил)метил]тио]тиазол-2-ил]пиперидин-4-карбоксамида (BMS 387032); 4-[[9-хлор-7-(2,6-дифторфенил)-5H-пиримидо[5,4-d][2]бензазепин-2-ил]амино]бензойной кислоты (MLN8054); 5-[3-(4,6-дифтор-1H-бензиамидазол-2-ил)-1H-индазол-5-ил]-N-этил-4-метил-3-пиридинметанамина (AG-024322); 4-(2,6-дихлорбензоиламино)-1H-пиразол-3-карбоновой кислоты N-(пиперидин-4-ил)амида (AT7519); 4-[2-метил-1-(1-метилэтил)-1H-имидазол-5-ил]-N-[4-(метилсульфонил)фенил]-2-пиримидинамина (AZD5438) и XL281 (BMS908662).

В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор CDK4, например, палбоциклиб (PD0332991), и палбоциклиб вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 мг, 60 мг, 70 мг, 75 мг, 80 мг, 90 мг, 100 мг, 105 мг, 110 мг, 115 мг, 120 мг, 125 мг, 130 мг, 135 мг (например, 75 мг, 100 мг или 125 мг) ежедневно в течение периода времени, например, ежедневно в течение 14-21 дня 28-дневного цикла или в течение 7-12 дней 21-дневного цикла. В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов палбоциклиба.

В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор BTK, выбранный из ибрутиниба (PCI-32765); GDC-0834; RN-486; CGI-560; CGI-1764; HM-71224; CC-292; ONO-4059; CNX-774 и LFM-A13.

В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор BTK, например ибрутиниб (PCI-32765), и ибрутиниб вводят в дозе, составляющей приблизительно 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 420 мг, 440 мг, 460 мг, 480 мг, 500 мг, 520 мг, 540 мг, 560 мг, 580 мг, 600 мг (например, 250 мг, 420 мг или 560 мг) ежедневно в течение периода времени, например, ежедневно в течение 21-дневного цикла или ежедневно в течение 28-дневного цикла. В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов ибрутиниба.

В одном варианте осуществления ингибитором киназы является ингибитор mTOR, выбранный из темсиролимуса; ридафоролимуса (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2-[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R, 23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-дигидрокси-19,30-диметокси-15,17,21,23,29,35-гексаметил-2,3,10,14,20-пентаоксо-11,36-диокса-4-азатрицикло[30,3,1.0^4,9]гексатриаконта-16,24,26,28-тетраен-12-ил]пропил]-2-метоксициклогексил-диметилфосфината, также известного как AP23573 и MK8669; эверолимуса (RAD001); рапамицина (AY22989); симапимода; (5-{2,4-бис[(3S)-3-метилморфолин-4-ил]пиридо[2,3-d]пиримидин-7-ил}-2-метоксифенил)метанола (AZD8055); 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-6-(6-метокси-3-пиридинил)-4-метил-пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8H)-она (PF04691502); N²-[1,4-диоксо-4-[[4-(4-оксо-8-фенил-4H-1-бензопиран-2-ил)морфолиний-4-ил]метокси]бутил]-L-аргинилглицил-L-α-аспартил-серин-, внутренней соли (SF1126) и XL765.

В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор mTOR, например, рапамицин, и рапамицин вводят в дозе, составляющей приблизительно 3 мг, 4 мг, 5 мг, 6 мг, 7 мг, 8 мг, 9 мг, 10 мг (например, 6 мг) ежедневно в течение периода времени, например, ежедневно в течение 21-дневного цикла или ежедневно в течение 28-дневного цикла. В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов рапамицина. В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор mTOR, например, эверолимус, и эверолимус вводят в дозе, составляющей приблизительно 2 мг, 2,5 мг, 3 мг, 4 мг, 5 мг, 6 мг, 7 мг, 8 мг, 9 мг, 10 мг, 11 мг, 12 мг, 13 мг, 14 мг, 15 мг (например, 10 мг) ежедневно в течение периода времени, например, ежедневно в течение 28-дневного цикла. В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов эверолимуса.

В одном варианте осуществления ингибитор киназы представляет собой ингибитор MNK, выбранный из CGP052088; 4-амино-3-(п-фторфениламино)пиразоло[3,4-d]пиримидина (CGP57380); церкоспорамида; ETC-1780445-2 и 4-амино-5-(4-фторанилино)пиразоло[3,4-d]пиримидина.

Также могут применяться лекарственные средства, которые ингибируют как кальцийзависимую фосфатазу кальцинейрин (циклоспорин и FK506), так и киназу p70S6, которая является важной для передачи сигнала, индуцированной фактором роста (рапамицин). (Liu et al., Cell 66:807-815, 1991; Henderson et al., Immun. 73:316-321, 1991; Bierer et al., Curr. Opin. Immun. 5:763-773, 1993). В дополнительном аспекте композиции на основе клеток по настоящему изобретению можно вводить пациенту в сочетании с (например, до, одновременно или после) трансплантацией костного мозга, Т-клеточной абляционной терапией с помощью химиотерапевтических средств, таких как флударабин, наружной дистанционной лучевой терапией (XRT), циклофосфамидом и/или антителами, такими как OKT3 или CAMPATH. В одном аспекте композиции на основе клеток по настоящему изобретению вводят после B-клеточной абляционной терапии, такой как средства, которые вступают в реакцию с CD20, например ритуксан. Например, в одном варианте осуществления субъекты могут подвергаться стандартному лечению посредством высокодозной химиотерапии с последующей трансплантацией стволовых клеток периферической крови. В определенных вариантах осуществления после трансплантата субъекты получают инфузию размноженных иммунных клеток по настоящему изобретению. В дополнительном варианте осуществления размноженные клетки вводят до или после хирургического вмешательства.

Некоторые пациенты могут испытывать аллергические реакции на соединения по настоящему изобретению и/или другое(-ие) противораковое(-ые) средство(-а) во время или после введения; в связи с этим для сведения риска аллергической реакции к минимуму часто вводят противоаллергические средства. Подходящие противоаллергические средства включают кортикостероиды, такие как дексаметазон (например, Decadron®), беклометазон (например, Beclovent®), гидрокортизон (также известный как кортизон, гидрокортизона сукцинат натрия, гидрокортизона фосфат натрия, и продаваемый под торговыми марками Ala-Cort®, гидрокортизонфосфат, Solu-Cortef®, Hydrocort Acetate® и Lanacort®), преднизолон (продаваемый под торговыми марками Delta-Cortel®, Orapred®, Pediapred® и Prelone®), преднизон (продаваемый под торговыми марками Deltasone®, Liquid Red®, Meticorten® и Orasone®), метилпреднизолон (также известный как 6-метилпреднизолон, метилпреднизолона ацетат, метилпреднизолона сукцинат натрия, продаваемый под торговыми марками Duralone®, Medralone®, Medrol®, M-Prednisol® и Solu-Medrol®); антигистаминные средства, такие как дифенгидрамин (например, Benadryl®), гидроксизин и ципрогептадин; и бронхолитические средства, такие как агонисты бета-адренергического рецептора, альбутерол (например, Proventil®) и тербуталин (Brethine®).

Некоторые пациенты могут испытывать тошноту во время и после введения соединения по настоящему изобретению и/или другого(-их) противоракового(-ых) средства(-ств); в связи с этим для предупреждения тошноты (верхняя часть желудка) и рвоты применяют противорвотные средства. Пригодные противорвотные средства включают апрепитант (Emend®), ондансетрон (Zofran®), гранисетрон HCl (Kytril®), лоразепам (Ativan®), дексаметазон (Decadron®), прохлорперазин (Compazine®), казопитант (Rezonic® и Zunrisa®) и их комбинации.

Лекарственные препараты для облегчения боли, возникающей в период лечения, часто прописывают для облегчения состояния пациента. Часто используют такие обычные доступные без рецепта анальгетики, как Tylenol®. Однако, опиоидные аналгезирующие лекарственные средства, такие как гидрокодон/парацетамол или гидрокодон/ацетаминофен (например, Vicodin®), морфин (например, Astramorph® или Avinza®), оксикодон (например, OxyContin® или Percocet®), оксиморфона гидрохлорид (Opana®) и фентанил (например, Duragesic®) также пригодны в случаях умеренной или сильной боли.

С целью защиты нормальных клеток от токсичности, обусловленной лечением, и ограничения токсичности по отношению к органам, можно использовать цитопротекторные средства (такие как нейропротекторы, поглотители свободных радикалов, кардиопротекторы, нейтрализаторы антрациклина, вызывающего кровоизлияния, питательные вещества и т. п.) в качестве вспомогательной терапии. Подходящие цитопротекторные средства включают амифостин (Ethyol®), глутамин, димесну (Tavocept®), месну (Mesnex®), дексразоксан (Zinecard® или Totect®), ксалипроден (Xaprila®) и лейковорин (также известный как лейковорин кальция, цитроворум-фактор и фолиновая кислота).

Структура активных соединений, определяемая кодовыми номерами, общими или торговыми марками, может быть взята из фактического издания стандартного сборника "The Merck Index" или из баз данных, например, Patents International (например, IMS World Publications).

Вышеупомянутые соединения, которые могут применяться в комбинации с соединением по настоящему изобретению, могут быть получены и введены, как описано в данной области техники, например, в документах, упомянутых выше.

В одном варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению (например, соединение по настоящему изобретению) или его фармацевтически приемлемую соль совместно с фармацевтически приемлемым носителем, подходящим для введения субъекту-человеку или субъекту-животному либо в отдельности, либо совместно с другими противораковыми средствами.

В одном варианте осуществления в настоящем изобретении предусмотрены способы лечения субъектов-людей или субъектов-животных, страдающих клеточным пролиферативным заболеванием, таким как рак. В настоящем изобретении предусмотрены способы лечения субъекта-человека или субъекта-животного, нуждающихся в таком лечении, предусматривающие введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению (например, соединения по настоящему изобретению) или его фармацевтически приемлемой соли либо в отдельности, либо в комбинации с другими противораковыми средствами.

В частности, композиции будут либо составлены вместе в виде комбинированного терапевтического средства, либо вводиться отдельно.

При комбинированной терапии соединение по настоящему изобретению и другое(-ие) противораковое(-ые) средство(-а) можно вводить либо одновременно, параллельно, либо последовательно без особых временных ограничений, при этом такое введение обеспечивает терапевтически эффективные уровни двух соединений в организме пациента.

В предпочтительном варианте осуществления соединение по настоящему изобретению и другое(-ие) противораковое(-ые) средство(-а), как правило, вводят последовательно в любом порядке с помощью инфузии или перорально. Схема дозирования может варьироваться в зависимости от стадии заболевания, физического состояния пациента, профилей безопасности отдельных лекарственных средств и переносимости отдельных лекарственных средств, а также от других критериев, хорошо известных лечащему врачу и медицинскому(-им) работнику(-ам), вводящему(-им) эту комбинацию. Соединение по настоящему изобретению и другое(-ие) противораковое(-ые) средство(-а) можно вводить в пределах минут друг от друга, с интервалом, составляющим часы, дни или даже недели, в зависимости от определенного цикла, используемого для лечения. Кроме того, цикл может включать более частое введение одного лекарственного средства по сравнению с другим в ходе цикла лечения и в различных дозах на одно введение лекарственного средства.

В другом аспекте настоящего изобретения предусмотрены наборы, которые включают одно или несколько соединений по настоящему изобретению и партнер по комбинации, раскрытый в данном документе. Иллюстративные наборы включают (a) соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, (b) по меньшей мере один партнер по комбинации, например, указанный выше, при этом такой набор может содержать листок-вкладыш или другую этикетку, включая инструкции по введению.

Соединение по настоящему изобретению также может применяться с получением преимущества в комбинации с известными терапевтическими процессами, например, введением гормонов или, особенно, облучением. Соединение по настоящему изобретению, в частности, может применяться в качестве радиосенсибилизатора, в частности для лечения опухолей, которые характеризуются слабой чувствительностью к лучевой терапии.

В одном варианте осуществления субъекту можно вводить средство, которое ослабляет или уменьшает тяжесть побочного эффекта, ассоциированного с введением CAR-экспрессирующей клетки. Побочные эффекты, ассоциированные с введением CAR-экспрессирующей клетки, включают без ограничения CRS и гематологический лимфогистиоцитоз (HLH), также называемый синдромом активации макрофагов (MAS). Симптомы CRS включают высокую температуру, тошноту, преходящую гипотензию, гипоксию и т. п. CRS может включать клинические системные признаки и симптомы, такие как лихорадка, усталость, виды миалгии, виды артралгии, тошнота, рвота и головная боль. CRS может включать клинические признаки и симптомы со стороны кожи, такие как сыпь. CRS может включать клинические признаки и симптомы со стороны желудочно-кишечного тракта, такие как тошнота, рвота и диарея. CRS могут включать клинические признаки и симптомы со стороны дыхательной системы, такие как тахипноэ и гипоксемия. CRS могут включать клинические признаки и симптомы со стороны сердечно-сосудистой системы, такие как тахикардия, пульсовое давление в расширенном диапазоне, гипотензия, повышенный сердечный выброс (ранний) и потенциально сниженный сердечный выброс (поздний). CRS может включать признаки и симптомы клинического свертывания крови, такие как повышенное содержание d-димера, гипофибриногенемия с кровотечением и без такового. CRS может включать клинические признаки и симптомы со стороны почек, такие как азотемия. CRS может включать клинические признаки и симптомы со стороны печени, такие как трансаминит и гипербилирубинемия. CRS может включать клинические признаки и симптомы со стороны нервной системы, такие как головная боль, изменения психического состояния, спутанность, делирий, затруднения с подбором слов или явная афазия, галлюцинации, тремор, дисметрия, нарушение походки и судороги. Соответственно, способы, описанные в данном документе, могут предусматривать введение CAR-экспрессирующей клетки, описанной в данном документе, субъекту и дополнительное введение одного или нескольких средств для контроля повышенных уровней растворимого фактора, образующегося в результате лечения CAR-экспрессирующей клеткой. В одном варианте осуществления повышенный растворимый фактор у субъекта представляет собой одно или несколько из IFN-γ, TNFα, IL-2 и IL-6. В варианте осуществления повышенный фактор у субъекта представляет собой одно или несколько из IL-1, GM-CSF, IL-10, IL-8, IL-5 и фракталкина. Таким образом, средство, вводимое для лечения этого побочного эффекта, может представлять собой средство, которое нейтрализует один или несколько из этих растворимых факторов. В одном варианте осуществления средство, которое нейтрализует одну или несколько из этих растворимых форм, представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Примеры таких средств включают без ограничения стероид (например, кортикостероид), ингибитор TNFα и ингибитор IL-6. Примером ингибитора TNFα является молекула антитела к TNFα, такая как инфликсимаб, адалимумаб, цертолизубам пегол и голимумаб. Другим примером ингибитора TNFα является слитый белок, такой как этанерцепт. Низкомолекулярный ингибитор TNFα включает без ограничения производные ксантина (например пентоксифиллин) и бупропион. Примером ингибитора IL-6 является молекула антитела к IL-6, такая как тоцилизумаб (toc), сарилумаб, элсилимомаб, CNTO 328, ALD518/BMS-945429, CNTO 136, CPSI-2364, CDP6038, VX30, ARGX-109, FE301 и FM101. В одном варианте осуществления молекула антитела к IL-6 представляет собой тоцилизумаб. Примером ингибитора на основе IL-1R является анакинра.

В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят кортикостероид, такой как, например, метилпреднизолон, гидрокортизон, среди прочего.

В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят сосудосуживающее средство, такое как, например, норэпинефрин, дофамин, фенилэфрин, эпинефрин, вазопрессин или их комбинация.

В варианте осуществления субъекту могут вводить жаропонижающее средство. В варианте осуществления субъекту могут вводить аналгезирующее средство.

В одном варианте осуществления субъекту можно вводить средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки. Например, в одном варианте осуществления средство может представлять собой средство, которое ингибирует ингибирующую молекулу. Ингибирующие молекулы, например, запрограммированной смерти 1 (PD1), в некоторых вариантах осуществления могут снижать способность CAR-экспрессирующей клетки вызывать иммунный эффекторный ответ. Примеры ингибирующих молекул включают PD1, PD-L1, CTLA4, TIM3, CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5), LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и TGF бета. Путем ингибирования ингибирующей молекулы, например, путем ингибирования на уровне ДНК, РНК или белка, можно оптимизировать функциональные характеристики CAR-экспрессирующих клеток. В вариантах осуществления для ингибирования экспрессии ингибирующей молекулы в CAR-экспрессирующей клетке можно применять ингибирующую нуклеиновую кислоту, например ингибирующую нуклеиновую кислоту, например dsRNA, например siRNA или shRNA, или короткие палиндромные повторы, регулярно расположенные группами (CRISPR), эффекторную нуклеазу, подобную активаторам транскрипции (TALEN), или эндонуклеазу с "цинковыми пальцами" (ZFN). В варианте осуществления ингибитор представляет собой shRNA. В одном варианте осуществления ингибирующая молекула ингибируется в экспрессирующей CAR-экспрессирующей клетке. В этих вариантах осуществления молекула dsRNA, которая ингибирует экспрессию ингибирующей молекулы, связана с нуклеиновой кислотой, которая кодирует компонент, например все компоненты, CAR. В одном варианте осуществления ингибитором ингибирующего сигнала может быть, например, антитело или фрагмент антитела, которые связываются с ингибирующей молекулой. Например, средство может представлять собой антитело или фрагмент антитела, которые связываются с PD1, PD-L1, PD-L2 или CTLA4 (например, ипилимумаб (также обозначаемый как MDX-010 и MDX-101, и доступный на рынке как Yervoy®; Bristol-Myers Squibb; тремелимумаб (моноклональное антитело IgG2, доступное от Pfizer, ранее известное как тицилимумаб, CP-675,206)). В варианте осуществления средство представляет собой антитело или фрагмент антитела, которые связываются с TIM3. В варианте осуществления средство представляет собой антитело или фрагмент антитела, которые связываются с LAG3. В варианте осуществления средство представляет собой антитело или фрагмент антитела, которые связываются с CEACAM (например, CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5).

PD1 является ингибирующим представителем семейства рецепторов CD28, которое также включает CD28, CTLA-4, ICOS и BTLA. PD1 экспрессируется на активированных B-клетках, T-клетках и миелоидных клетках (Agata et al. 1996 Int. Immunol 8:765-75). Было показано, что два лиганда PD1, PD-L1 и PD-L2 подавляют активацию Т-клеток при связывании с PD1 (Freeman et a. 2000 J Exp Med 192:1027-34; Latchman et al. 2001 Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. 2002 Eur J Immunol 32:634-43). PD-L1 является обильным в раковых опухолях человека (Dong et al. 2003 J Mol Med 81:281-7; Blank et al. 2005 Cancer Immunol. Immunother 54:307-314; Konishi et al. 2004 Clin Cancer Res 10:5094). Подавление иммунитета можно устранить путем ингибирования локального взаимодействия PD1 с PD-L1. Антитела, фрагменты антител и другие ингибиторы PD1, PD-L1 и PD-L2 доступны из уровня техники и могут применяться в комбинации с CAR для CD20, описанным в данном документе. Например, ниволумаб (также называемый BMS-936558 или MDX1106; Bristol-Myers Squibb) представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело IgG4, которое специфически блокирует PD1. Ниволумаб (клон 5C4) и другие моноклональные антитела человека, которые специфически связываются с PD1, раскрыты в US 8008449 и WO2006/121168. Пидилизумаб (CT-011; Cure Tech) представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgG1k, которое связывается с PD1. Пидилизумаб и другие гуманизированные моноклональные антитела к PD1 раскрыты в WO2009/101611. Пембролизумаб (ранее известный как ламбролизумаб и также называемый Keytruda, MK03475; Merck) представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgG4, которое связывается с PD1. Пембролизумаб и другие гуманизированные антитела к PD-1 раскрыты в US 8354509 и WO2009/114335. MEDI4736 (Medimmune) представляет собой моноклональное антитело человека, которое связывается с PDL1 и ингибирует взаимодействие лиганда с PD1. MDPL3280A (Genentech/Roche) представляет собой человеческое Fc-оптимизированное моноклональное антитело IgG1, которое связывается с PD-L1. MDPL3280A и другие моноклональные антитела человека к PD-L1 раскрыты в патенте США № 7943743 и публикации США № 20120039906. Другие средства, связывающие PD-L1, включают YW243.55.S70 (вариабельные области тяжелой и легкой цепей показаны в SEQ ID NO: 20 и 21 в WO2010/077634) и MDX-1 105 (также называемое как BMS-936559, и, например, средства, связывающие PD-L1, раскрытые в WO2007/005874). AMP-224 (B7-DCIg; Amplimmune; например, раскрытый в WO2010/027827 и WO2011/066342), представляет собой растворимый рецептор на основе продукта слияния PD-L2 и Fc, который блокирует взаимодействие между PD1 и B7-H1. Другие антитела к PD1 включают AMP 514 (Amplimmune), среди прочих, например, антитела к PD1, описанные в US 8609089, US 2010028330 и/или US 20120114649.

TIM3 (T-клеточный иммуноглобулин 3) также отрицательно регулирует Т-клеточную функцию, в частности, в секретирующих IFN-g CD4+ T-хелперных 1 и CD8+ T-цитотоксических 1 клетках, и играет основную роль в истощении T-клеток. Ингибирование взаимодействия между TIM3 и его лигандами, например, галектином-9 (Gal9), фосфатидилсерином (PS) и HMGB1, может повышать иммунный ответ. Антитела, фрагменты антител и другие ингибиторы TIM3 и его лигандов, доступны из уровня техники и могут применяться в комбинации с CAR, например, CAR для CD20, описанным в данном документе. Например, антитела, фрагменты антител, малые молекулы или пептидные ингибиторы, которые нацеливаются на TIM3, связываются с доменом IgV TIM3 для ингибирования взаимодействия с его лигандами. Антитела и пептиды, которые ингибируют TIM3, раскрыты в WO2013/006490 и US20100247521. Другие антитела к TIM3 включают гуманизированные варианты RMT3-23 (раскрытые в Ngiow et al., 2011, Cancer Res, 71:3540-3551) и клон 8B.2C12 (раскрытый в Monney et al., 2002, Nature, 415:536-541). Биспецифические антитела, которые ингибируют TIM3 и PD-1, раскрыты в US20130156774.

В некоторых вариантах осуществления средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки, представляет собой ингибитор CEACAM (например, ингибитор CEACAM-1, CEACAM-3 и/или CEACAM-5). В одном варианте осуществления ингибитор CEACAM представляет собой молекулу антитела к CEACAM. Иллюстративные антитела к CEACAM-1 описаны в WO 2010/125571, WO 2013/082366 WO 2014/059251 и WO 2014/022332, например, моноклональное антитело 34B1, 26H7 и 5F4; или ее рекомбинантная форма, описанные, например, в US 2004/0047858, US 7132255 и WO 99/052552. В некоторых вариантах осуществления антитело к CEACAM связывается с CEACAM-5, как описано, например, в Zheng et al. PLoS One. 2010 Sep 2;5(9). pii: e12529 (DOI:10:1371/journal.pone.0021146), или перекрестно реагирует с CEACAM-1 и CEACAM-5, как описано, например, в WO 2013/054331 и US 2014/0271618.

Не ограничиваясь какой-либо теорией, считается, что молекулы клеточной адгезии, относящиеся к раково-эмбриональному антигену (CEACAM), такие как CEACAM-1 и CEACAM-5, опосредуют, по меньшей мере частично, ингибирование противоопухолевого иммунного ответа (см., например, Markel et al. J Immunol. 2002 Mar 15;168(6):2803-10; Markel et al. J Immunol. 2006 Nov 1;177(9):6062-71; Markel et al. Immunology. 2009 Feb;126(2):186-200; Markel et al. Cancer Immunol Immunother. 2010 Feb;59(2):215-30; Ortenberg et al. Mol Cancer Ther. 2012 Jun;11(6):1300-10; Stern et al. J Immunol. 2005 Jun 1;174(11):6692-701; Zheng et al. PLoS One. 2010 Sep 2;5(9). pii: e12529). Например, CEACAM-1 была описана в качестве гетерофильного лиганда TIM-3, а также она играет роль в опосредованной TIM-3 T-клеточной толерантности и истощении (см., например, WO 2014/022332; Huang, et al. (2014) Nature doi:10.1038/nature13848). В вариантах осуществления было показано, что совместная блокада CEACAM-1 и TIM-3 усиливает противоопухолевый иммунный ответ в моделях трансплантата колоректального рака (см., например, WO 2014/022332; Huang, et al. (2014) выше). В некоторых вариантах осуществления совместная блокада CEACAM-1 и PD-1 снижает T-клеточную толерантность, как описано, например, в WO 2014/059251. Таким образом, ингибиторы CEACAM могут применяться с другими иммуномодуляторами, описанными в данном документе (например, ингибиторами PD-1 и/или TIM-3), для усиления иммунного ответа против рака, например, меланомы, рака легкого (например, NSCLC), рака мочевого пузыря, рака толстой кишки, рака яичников и других форм рака, описанных в данном документе.

LAG3 (ген активации лимфоцитов 3 или CD223) представляет собой молекулу клеточной поверхности, экспрессируемую на активированных T-клетках и B-клетках, которая, как было показано, играет роль в истощении CD8+ T-клеток. Антитела, фрагменты антител и другие ингибиторы LAG3 и его лигандов, доступны из уровня техники и могут применяться в комбинации с CAR, например, CAR для CD20, описанным в данном документе. Например, BMS-986016 (Bristol-Myers Squib) представляет собой моноклональное антитело, которое нацеливается на LAG3. IMP701 (Immutep) представляет собой антагонистическое антитело к LAG3, а IMP731 (Immutep и GlaxoSmithKline) представляет собой истощающее антитело к LAG3. Другие ингибиторы LAG3 включают IMP321 (Immutep), который представляет собой рекомбинантный слитый белок растворимой части LAG3 и Ig, который связывается с молекулами MHC класса II и активирует антигенпрезентирующие клетки (APC). Другие антитела раскрыты, например, в WO2010/019570.

В некоторых вариантах осуществления средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки, может представлять собой, например, слитый белок, содержащий первый домен и второй домен, при этом первый домен представляет собой ингибирующую молекулу или ее фрагмент, а второй домен представляет собой полипептид, который ассоциирован с положительным сигналом, например, полипептидом, содержащим внутриклеточный сигнальный домен, описанный в данном документе. В некоторых вариантах осуществления полипептид, который ассоциирован с положительным сигналом, может содержать костимулирующий домен CD28, CD27, ICOS, например, внутриклеточный сигнальный домен CD28, CD27 и/или ICOS, и/или первичный сигнальный домен, например, CD3 зета, например, описанный в данном документе. В одном варианте осуществления слитый белок экспрессируется той же клеткой, которая экспрессирует CAR. В другом варианте осуществления слитый белок экспрессируется клеткой, например T-клеткой или NK-клеткой, которая не экспрессирует CAR для CD20.

В одном варианте осуществления средство, которое усиливает активность CAR-экспрессирующей клетки, описанной в данном документе, представляет собой miR-17-92.

Комбинация с низкой дозой ингибитора mTOR

В одном варианте осуществления клетки, экспрессирующие молекулу CAR, например, молекулу CAR, описанную в данном документе, вводят в комбинации с низкой, повышающей иммунитет дозой ингибитора mTOR.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 30, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 40, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 50, но не более чем на 90%, по меньшей мере на 60, но не более чем на 90% или по меньшей мере на 70, но не более чем на 90%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 80%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 80%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 80%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 80%, по меньшей мере на 30, но не более чем на 80%, по меньшей мере на 40, но не более чем на 80%, по меньшей мере на 50, но не более чем на 80% или по меньшей мере на 60, но не более чем на 80%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 70%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 70%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 70%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 70%, по меньшей мере на 30, но не более чем на 70%, по меньшей мере на 40, но не более чем на 70% или по меньшей мере на 50, но не более чем на 70%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 60%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 60%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 60%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 60%, по меньшей мере на 30, но не более чем на 60% или по меньшей мере на 40, но не более чем на 60%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 50%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 50%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 50%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 50%, по меньшей мере на 30, но не более чем на 50% или по меньшей мере на 40, но не более чем на 50%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 40%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 40%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 40%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 40%, по меньшей мере на 30, но не более чем на 40% или по меньшей мере на 35, но не более чем на 40%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 5, но не более чем на 30%, по меньшей мере на 10, но не более чем на 30%, по меньшей мере на 15, но не более чем на 30%, по меньшей мере на 20, но не более чем на 30% или по меньшей мере на 25, но не более чем на 30%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 1, 2, 3, 4 или 5, но не более чем на 20%, по меньшей мере на 1, 2, 3, 4 или 5, но не более чем на 30%, по меньшей мере на 1, 2, 3, 4 или 5, но не более чем на 35%, по меньшей мере на 1, 2, 3, 4 или 5, но не более чем на 40% или по меньшей мере на 1, 2, 3, 4 или 5, но не более чем на 45%.

В варианте осуществления доза ингибитора mTOR ассоциируется с или обеспечивает ингибирование mTOR по меньшей мере на 1, 2, 3, 4 или 5, но не более чем на 90%.

Как обсуждается в данном документе, степень ингибирования mTOR может быть выражена в виде степени ингибирования киназы P70 S6, например, степень ингибирования mTOR может быть определена с помощью снижения уровня активности киназы P70 S6, например, с помощью снижения фосфорилирования субстрата киназы P70 S6. Уровень ингибирования mTOR может быть оценен способом, описанным в данном документе, например, с помощью анализа методом Булэй или измерением уровней фосфорилированного S6 путем вестерн-блоттинга.

Типичные ингибиторы mTOR

Используемый в данном документе термин "ингибитор mTOR" относится к соединению или лиганду или их фармацевтически приемлемой соли, которая ингибирует киназу mTOR в клетке. В варианте осуществления ингибитор mTOR представляет собой аллостерический ингибитор. В варианте осуществления ингибитор mTOR представляет собой каталитический ингибитор.

Аллостерические ингибиторы mTOR включают нейтральное трициклическое соединение рапамицин (сиролимус), родственные с рапамицином соединения, т. е. соединения, имеющие структурное и функциональное сходства с рапамицином, в том числе, например, производные рапамицина, аналоги рапамицина (также называемые рапалогами) и другие макролидные соединения, которые ингибируют активность mTOR.

Рапамицин является известным макролидным антибиотиком, продуцируемым Streptomyces hygroscopicus и имеющим структуру, показанную в формуле A.

См., например, McAlpine, J.B., et al., J. Antibiotics (1991) 44: 688; Schreiber, S.L., et al., J. Am. Chem. Soc. (1991) 113: 7433; патент США № 3929992. Существуют различные схемы нумерации, предложенные для рапамицина. Чтобы избежать недоразумений, когда в данном документе названы конкретные аналоги рапамицина, наименования даются со ссылкой на рапамицин с использованием схемы нумерации формулы А.

Аналоги рапамицина, применимые в настоящем изобретении, представляют собой, например, О-замещенные аналоги, в которых гидроксильная группа в циклогексильном кольце рапамицина заменена на OR₁, в которой R₁ представляет собой гидроксиалкил, гидроксиалкоксиалкил, ациламиноалкил или аминоалкил; например RAD001, также известный как эверолимус, описанный в патенте США № 5665772 и WO94/09010, содержание которых включено посредством ссылки. Другие подходящие аналоги рапамицина включают аналоги, замещенные по 26- или 28-положению. Аналог рапамицина может представлять собой эпимер аналога, указанного выше, в частности эпимер аналога, замещенного в положении 40, 28 или 26, и может необязательно быть дополнительно гидрированным, например, как описано в патенте США № 6015815, WO95/14023 и WO99/15530, содержание которых включено посредством ссылки, например, АВТ578, также известный как зотаролимус, или аналог рапамицина, описанный в патенте США 7091213, WO98/02441 и WO01/14387, содержание которых включено посредством ссылки, например, АР23573, также известный как ридафоролимус.

Примеры аналогов рапамицина, подходящие для применения в настоящем изобретении, из патента США № 5665772 включают без ограничения 40-O-бензил-рапамицин, 40-O-(4'-гидроксиметил)бензил-рапамицин, 40-O-[4'-(1,2-дигидроксиэтил)]бензил-рапамицин, 40-O-аллил-рапамицин, 40-O-[3'-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4(S)-ил)-проп-2'-ен-1'-ил]-рапамицин, (2'E,4'S)-40-O-(4',5'-дигидроксипент-2'-ен-1'-ил)-рапамицин, 40-O-(2-гидрокси)этоксикарбонилметил-рапамицин, 40-O-(2-гидрокси)этил-рапамицин, 40-O-(3-гидрокси)пропил-рапамицин, 40-O-(6-гидрокси)гексил-рапамицин, 40-O-[2-(2-гидрокси)этокси]этил-рапамицин, 40-O-[(3S)-2,2-диметилдиоксолан-3-ил]метил-рапамицин, 40-O-[(2S)-2,3-дигидроксипроп-1-ил]-рапамицин, 40-O-(2-ацетокси)этил-рапамицин, 40-O-(2-никотиноилокси)этил-рапамицин, 40-O-[2-(N-морфолинo)ацетокси]этил-рапамицин, 40-O-(2-N-имидазолилацетокси)этил-рапамицин, 40-O-[2-(N-метил-N'-пиперазинил)ацетокси]этил-рапамицин, 39-O-дезметил-39,40-O,O-этилен-рапамицин, (26R)-26-дигидро-40-O-(2-гидрокси)этил-рапамицин, 40-O-(2-аминоэтил)-рапамицин, 40-O-(2-ацетаминоэтил)-рапамицин, 40-O-(2-никотинамидоэтил)-рапамицин, 40-O-(2-(N-метил-имидазо-2'-илкарбетоксамидо)этил)-рапамицин, 40-O-(2-этоксикарбониламиноэтил)-рапамицин, 40-O-(2-толилсульфонамидоэтил)-рапамицин и 40-O-[2-(4',5'-дикарбоэтокси-1',2',3'-триазол-1'-ил)-этил]-рапамицин.

Известные другие аналоги рапамицина, применимые в настоящем изобретении, представляют собой аналоги, где гидроксильная группа в циклогексильном кольце рапамицина и/или гидроксигруппа в положении 28 заменена на гидроксисложноэфирную группу, например, аналоги рапамицина, находящиеся в US RE44768, например темсиролимус.

Другие аналоги рапамицина, применимые в настоящем изобретении, включают аналоги, где метоксигруппа в положении 16 заменена на другой заместитель, предпочтительно (необязательно гидрокси-замещенные) алкинилокси, бензил, ортометоксибензил или хлорбензил, и/или где метоксигруппу в положении 39 удаляют вместе с углеродом 39 таким образом, что циклогексильное кольцо рапамицина становится циклопентильным кольцом, в котором отсутствует метоксигруппа в положении 39; например, как описано в WO95/16691 и WO96/41807, содержание которых включено посредством ссылки. Аналоги могут быть дополнительно модифицированы таким образом, что гидрокси в положении 40 рапамицина является алкилированной и/или карбонил в положении 32 является восстановленным.

Аналоги рапамицина из WO95/16691 включают без ограничения 16-деметокси-16-(пент-2-инил)окси-рапамицин, 16-деметокси-16-(бут-2-инил)окси-рапамицин, 16-деметокси-16-(пропаргил)окси-рапамицин, 16-деметокси-16-(4-гидрокси-бут-2-инил)окси-рапамицин, 16-деметокси-16-бензилокси-40-O-(2-гидроксиэтил)-рапамицин, 16-деметокси-16-бензилокси-рапамицин, 16-деметокси-16-орто-метоксибензил-рапамицин, 16-деметокси-40-O-(2-метоксиэтил)-16-пент-2-инил)окси-рапамицин, 39-деметокси-40-дезокси-39-формил-42-нор-рапамицин, 39-деметокси-40-дезокси-39-гидроксиметил-42-нор-рапамицин, 39-деметокси-40-дезокси-39-карбокси-42-нор-рапамицин, 39-деметокси-40-дезокси-39-(4-метил-пиперазин-1-ил)карбонил-42-нор-рапамицин, 39-деметокси-40-дезокси-39-(морфолин-4-ил)карбонил-42-нор-рапамицин, 39-деметокси-40-дезокси-39-[N-метил, N-(2-пиридин-2-ил-этил)]карбамоил-42-нор-рапамицин и 39-деметокси-40-дезокси-39-(п-толуолсульфонилгидразонометил)-42-нор-рапамицин.

Аналоги рапамицина из WO96/41807 включают без ограничения 32-дезоксо-рапамицин, 16-O-пент-2-инил-32-дезоксо-рапамицин, 16-O-пент-2-инил-32-дезоксо-40-O-(2-гидрокси-этил)-рапамицин, 16-O-пент-2-инил-32-(S)-дигидро-40-O-(2-гидроксиэтил)-рапамицин, 32(S)-дигидро-40-O-(2-метокси)этил-рапамицин и 32(S)-дигидро-40-O-(2-гидроксиэтил)-рапамицин.

Другой подходящий аналог рапамицина представляет собой умиролимус, описанный в US2005/0101624, содержание которой включено посредством ссылки.

RAD001, также называемый эверолимусом (Afinitor®), имеет химическое название (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-дигидрокси-12-{(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-гидроксиэтокси)-3-метоксициклогексил]-1-метилэтил}-19,30-диметокси-15,17,21,23,29,35-гексаметил-11,36-диокса-4-аза-трицикло[30.3.1.04.9]гексатриаконта-16,24,26,28-тетраен-2,3,10,14,20-пентаон.

Дополнительные примеры аллостерических ингибиторов mTOR включают сиролимус (рапамицин, AY-22989), 40-[З-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропаноат]-рапамицин (также называемый темсиролимусом или CCI-779) и ридафоролимус (АР-23573/МК-8669). Другие примеры аллостерических ингибиторов mTOR включают зотаролимус (ABT578) и умиролимус.

Как альтернатива или дополнительно, обнаружено, что каталитические АТФ-конкурентные ингибиторы mTOR целенаправленно воздействуют на домен киназы mTOR непосредственно и целенаправленно воздействуют как на mTORCl, так и mTORC2. Они также являются более эффективными ингибиторами mTORCl, чем такие аллостерические ингибиторы mTOR, как рапамицин, так как они модулируют рапамицин-резистентные выходные процессы mTORCl, такие как фосфорилирование 4ЕВР1-Т37/46 и кэп-зависимая трансляция.

Каталитические ингибиторы включают в себя: BEZ235 или 2-метил-2-[4-(3-метил-2-оксо-хинолин-2,3-дигидро-имидазо]хинолин-фенил]-пропионитрил или форму монотозилатной соли, при этом синтез BEZ235 описан в WO2006/122806; CCG168 (также известный как AZD-8055, Chresta, C.M., et al., Cancer Res, 2010, 70(1), 288-298), который имеет химическое название {5-[2,4-бис-((S)-3-метил-морфолин-4-ил)-пиридо[2,3d]пиримидин-7-ил]-2-метокси-фенил}-метанол; 3-[2,4-бис[(3S)-3-метилморфолин-4-ил]пиридо[2,3-d]пиримидин-7-ил]-N-метилбензамид (WO09104019); 3-(2-аминобензо[d]оксазол-5-ил)-1-изопропил-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (WO10051043 и WO2013023184); A N-(3-(N-(3-((3,5-диметоксифенил)амино)хиноксалин-2-ил)сульфамоил)фенил)-3-метокси-4-метилбензамид (WO07044729 и WO12006552); PKI-587 (Venkatesan, A.M., J. Med.Chem., 2010, 53, 2636-2645), который имеет химическое название 1-[4-[4-(диметиламино)пиперидин-1-карбонил]фенил]-3-[4-(4,6-диморфолинo-1,3,5-триазин-2-ил)фенил]мочевина; GSK-2126458 (ACS Med. Chem. Lett., 2010, 1, 39-43), который имеет химическое название 2,4-дифтор-N-{2-метокси-5-[4-(4-пиридазинил)-6-хинолинил]-3-пиридинил}бензолсульфонамид; 5-(9-изопропил-8-метил-2-морфолинo-9H-пурин-6-ил)пиримидин-2-амин (WO10114484); (E)-N-(8-(6-амино-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-1-(6-(2-цианопропан-2-ил)пиридин-3-ил)-3-метил-1H-имидазо[4,5-c]хинолин-2(3H)-илиден)цианамид (WO12007926).

Дополнительные примеры каталитических ингибиторов mTOR включают 8-(6-метокси-пиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметил-фенил)-1,3-дигидро-имидазо[4,5-c]хинолин-2-он (WO2006/122806) и Ku-0063794 (Garcia-Martinez JM, et al., Biochem J., 2009, 421(1), 29-42. Ku-0063794 представляет собой специфичный ингибитор мишени рапамицина в клетках млекопитающих (mTOR). WYE-354 представляет собой один другой пример каталитического ингибитора mTor (Yu K, et al. (2009). Biochemical, Cellular, and In vivo Activity of Novel ATP-Competitive and Selective Inhibitors of the Mammalian Target of Rapamycin. Cancer Res. 69(15): 6232-6240).

Ингибиторы mTOR, применимые в соответствии с настоящим изобретением, также включают пролекарства, производные, фармацевтически приемлемые соли или их аналоги любых из вышеприведенных соединений.

Ингибиторы mTOR, такие как RAD001, могут быть составлены для доставки на основании хорошо установленных в уровне техники способов, основанных на конкретных дозировках, описанных в данном документе. В частности, в патенте США № 6004973 (включенном в данный документ посредством ссылки) представлены примеры составов, применимых вместе с ингибиторами mTOR, описанными в данном документе.

Оценка ингибирования mTOR

mTOR фосфорилирует киназу Р70 S6, активируя тем самым киназу Р70 S6K и обеспечивая ей фосфорилирование ее субстрата. Степень ингибирования mTOR может быть выражена в виде степени ингибирования киназы P70 S6, например, степень ингибирования mTOR может быть определена с помощью снижения уровня активности киназы P70 S6, например, с помощью снижения фосфорилирования субстрата киназы P70 S6. Можно определить уровень ингибирования mTOR по измерению активности киназы Р70 S6K (способности киназы Р70 S6K фосфорилировать субстрат) в отсутствие ингибитора, например перед введением ингибитора, и в присутствии ингибитора, или после введения ингибитора. Уровень ингибирования киназы Р70 S6K дает уровень ингибирования mTOR. Таким образом, если киназа Р70 S6K ингибируется на 40%, то активность mTOR, измеренная по активности киназы Р70 S6K, ингибируется на 40%. Степень или уровень ингибирования, указанные в данном документе, представляют собой средний уровень ингибирования в интервале дозирования. В качестве примера, если ингибитор дается один раз в неделю, то уровень ингибирования определяют по среднему уровню ингибирования в данном интервале, а именно, за неделю.

В Boulay et al., Cancer Res, 2004, 64:252-61, включенном в данный документ посредством ссылки, описан аналитический тест, который может применяться для оценки уровня ингибирования mTOR (именуемый в данном документе как анализ методом Булэй). В варианте осуществления анализ основан на измерении активности киназы Р70 S6 из биологических образцов до и после введения ингибитора mTOR, например RAD001. Образцы могут быть взяты в заранее выбранные моменты времени после обработки с использованием ингибитора mTOR, например, через 24, 48 и 72 часа после обработки. Могут применяться биологические образцы, например, из кожи или мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC). Экстракты общего белка получают из образцов. Киназу Р70 S6 выделяют из белковых экстрактов посредством иммунопреципитации с использованием антитела, которое специфически распознает киназу Р70 S6. Активность выделенной киназы Р70 S6 можно измерить анализом киназы in vitro. Выделенную киназу можно инкубировать с субстратами 40S рибосомальной субъединицы (которая является эндогенным субстратом киназы Р70 S6K) и гамма-³²Р при условиях, которые обеспечивают фосфорилирование субстрата. Затем реакционную смесь можно разделить на геле SDS-PAGE, и сигнал от ³²Р анализируют с использованием PhosphorImager. Сигнал ³²P, соответствующий размеру 40S рибосомальной субъединицы, показывает фосфорилированный субстрат и активность киназы Р70 S6K. Увеличения и уменьшения киназной активности могут быть рассчитаны по количественной оценке площади и интенсивности сигнала ³²Р от фосфорилированного субстрата (например, с использованием ImageQuant, Molecular Dynamics) с присвоением значений в условных единицах количественно оцениваемому сигналу и посредством сравнения значений от значений после введения со значениями перед введением или с эталонным значением. Например, процент ингибирования киназной активности может быть рассчитан по следующей формуле: 1-(значение, полученное после введения/значение, полученное до введения) X 100. Как описано выше, степень или уровень ингибирования, указанная в настоящем описании, представляет собой средний уровень ингибирования в интервале дозирования.

Способы оценки активности киназы, например активности киназы Р70 S6, также представлены в патенте США 7727950, включенном в данный документ посредством ссылки.

Уровень ингибирования mTOR можно также оценить по изменению отношения PD1-отрицательных Т-клеток к PD1-положительным Т-клеткам. Т-клетки периферической крови могут быть идентифицированы как PD1-отрицательные или положительные посредством известных из уровня техники способов.

Низкодозовые ингибиторы mTOR

В способах, описанных в данном документе, применяют низкую повышающую иммунитет дозу ингибиторов mTOR, дозы ингибиторов mTOR, например, аллостерических ингибиторов mTOR, включающих рапалоги, такие как RAD001. Напротив, уровни ингибитора, которые полностью или почти полностью ингибируют путь mTOR, являются иммуносупрессивными и применяются, например, чтобы предупредить отторжение пересаженного органа. В дополнение, высокие дозы рапалогов, которые полностью ингибируют mTOR, также ингибируют рост опухолевых клеток и применяются для лечения различных форм рака (см., например, Antineoplastic effects of mammalian target of rapamycine inhibitors. Salvadori M. World J Transplant. 2012 Oct 24;2(5):74-83; Current and Future Treatment Strategies for Patients with Advanced Hepatocellular Carcinoma: Role of mTOR Inhibition. Finn RS. Liver Cancer. 2012 Nov;1(3-4):247-256; Emerging Signaling Pathways in Hepatocellular Carcinoma. Moeini A, Cornellà H, Villanueva A. Liver Cancer. 2012 Sep;1(2):83-93; Targeted cancer therapy - Are the days of systemic chemotherapy numbered? Joo WD, Visintin I, Mor G. Maturitas. 2013 Sep 20.; Role of natural and adaptive immunity in renal cell carcinoma response to VEGFR-TKIs and mTOR inhibitor. Santoni M, Berardi R, Amantini C, Burattini L, Santini D, Santoni G, Cascinu S. Int J Cancer. 2013 Oct 2).

Настоящее изобретение основано, по меньшей мере частично, на неожиданном открытии того, что дозы ингибиторов mTOR, значительно более низкие, чем дозы, применяемые в действующих клинических установках, имели превосходящий эффект при усилении иммунного ответа у субъекта и увеличении отношения PD-1-отрицательные Т-клетки/PD-1-положительные Т-клетки. Было неожиданным, что низкие дозы ингибиторов mTOR, производящие только частичное ингибирование активности mTOR, были способны эффективно улучшать иммунные ответы у субъектов-людей и увеличивать отношение PD-1-отрицательные Т-клетки/PD-1-положительные Т-клетки.

Как альтернатива или в дополнение, без ограничения какой-либо теорией полагают, что низкая иммуностимулирующая доза ингибитора mTOR может увеличивать количества нативных Т-клеток, например по меньшей мере временно, например, в сравнении с субъектом, не подвергавшимся лечению. Как альтернатива или в дополнение, опять-таки без ограничения какой-либо теорией, полагают, что лечение ингибитором mTOR через достаточное количество времени или после достаточного введения дозы приводит в результате к одному или нескольким из следующего:

увеличению экспрессии одного или нескольких из следующих маркеров: CD62L^{высокий}, CD127^{высокий}, CD27⁺ и BCL2, например, на Т-клетках памяти, например, предшественниках Т-клеток памяти;

уменьшению экспрессии KLRG1, например, на Т-клетках памяти, например, предшественниках Т-клеток памяти; и

увеличению количества предшественников Т-клеток памяти, например, клеток с любой из следующих характеристик или их комбинацией: увеличенным уровнем CD62L^{высокий}, увеличенным уровнем CD127^{высокий}, увеличенным уровнем CD27⁺, уменьшенным уровнем KLRG1 и увеличенным уровнем BCL2;

и где любое из вышеописанных изменений происходит, например по меньшей мере временно, например, по сравнению с субъектом, не получающим лечение (Araki, K et al. (2009) Nature 460:108-112). Предшественники Т-клеток памяти представляют собой Т-клетки памяти, которые являются ранними в программе дифференцировки. Например, Т-клетки памяти имеют одну или несколько из следующих характеристик: увеличенный CD62L^{высокий}, увеличенный CD127^{высокий}, увеличенный CD27⁺, уменьшенный KLRG1 и/или увеличенный BCL2.

В варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции или дозированной форме ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например, рапалога, рапамицина или RAD001, или каталитического ингибитора mTOR, которая, когда ее вводят в выбранном режиме введения дозы, например, однократно ежедневно или однократно еженедельно, ассоциирована с уровнем ингибирования mTOR, который не является ассоциированным с полной или значительной иммунной супрессией, однако ассоциирован с усилением иммунного ответа.

Ингибитор mTOR, например аллостерический ингибитор mTOR, например, рапалог, рапамицин или RAD001, или каталитический ингибитор mTOR может быть предусмотрен в составе с замедленным высвобождением. Любая из композиций или стандартных лекарственных форм, описанных в данном документе, может быть предусмотрена в составе с замедленным высвобождением. В некоторых вариантах осуществления состав с замедленным высвобождением будет иметь более низкую биодоступность, чем состав с немедленным высвобождением. Например, в вариантах осуществления, чтобы достичь сходного терапевтического эффекта состава с немедленным высвобождением, состав с замедленным высвобождением будет содержать от приблизительно 2 до приблизительно 5, от приблизительно 2,5 до приблизительно 3,5 или приблизительно 3-кратное количество ингибитора, предусмотренного в составе с немедленным высвобождением.

В варианте осуществления представлены формы с немедленным высвобождением, например RAD001, как правило, используемые для одного введения в неделю, содержащие 0,1-20, 0,5-10, 2,5-7,5, 3-6 или приблизительно 5 мг на стандартную лекарственную форму. Для введений один раз в неделю эти составы с немедленным высвобождением соответствуют формам с замедленным высвобождением, содержащим соответственно 0,3-60, 1,5-30, 7,5-22,5, 9-18 или приблизительно 15 мг ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например рапамицина или RAD001. В вариантах осуществления обе формы вводят на основании базиса один раз в день/неделю.

В варианте осуществления представлены составы с немедленным высвобождением, например RAD001, обычно применяемые для одного введения в день, содержащие от 0,005 до 1,5, от 0,01 до 1,5, от 0,1 до 1,5, от 0,2 до 1,5, от 0,3 до 1,5, от 0,4 до 1,5, от 0,5 до 1,5, от 0,6 до 1,5, от 0,7 до 1,5, от 0,8 до 1,5, от 1,0 до 1,5, от 0,3 до 0,6 или приблизительно 0,5 мг на стандартную лекарственную форму. Для введений один раз в день эти составы с немедленным высвобождением соответствуют формам с замедленным высвобождением, содержащим соответственно от 0,015 до 4,5, от 0,03 до 4,5, от 0,3 до 4,5, от 0,6 до 4,5, от 0,9 до 4,5, от 1,2 до 4,5, от 1,5 до 4,5, от 1,8 до 4,5, от 2,1 до 4,5, от 2,4 до 4,5, от 3,0 до 4,5, от 0,9 до 1,8 или приблизительно 1,5 мг ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например рапамицина или RAD001. Для введений один раз в неделю эти составы с немедленным высвобождением соответствуют формам с замедленным высвобождением, содержащим соответственно от 0,1 до 30, от 0,2 до 30, от 2 до 30, от 4 до 30, от 6 до 30, от 8 до 30, от 10 до 30, от 1,2 до 30, от 14 до 30, от 16 до 30, от 20 до 30, от 6 до 12 или приблизительно 10 мг ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например рапамицина или RAD001.

В варианте осуществления представлены составы с немедленным высвобождением, например RAD001, обычно применяемые для одного введения в день, содержащие от 0,01 до 1,0 мг на стандартную лекарственную форму. Для введений один раз в день эти составы с немедленным высвобождением соответствуют формам с замедленным высвобождением, содержащим соответственно от 0,03 до 3 мг ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например рапамицина или RAD001. Для введений один раз в неделю эти составы с немедленным высвобождением соответствуют формам с замедленным высвобождением, содержащим соответственно от 0,2 до 20 мг ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например рапамицина или RAD001.

В варианте осуществления представлены составы с немедленным высвобождением, например RAD001, обычно применяемые для одного введения в неделю, содержащие от 0,5 до 5,0 мг на стандартную лекарственную форму. Для введений один раз в день эти составы с немедленным высвобождением соответствуют формам с замедленным высвобождением, содержащим соответственно от 1,5 до 15 мг ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора mTOR, например рапамицина или RAD001.

Как описано выше, одной мишенью пути mTOR является киназа Р70 S6. Таким образом, дозы ингибиторов mTOR, которые являются применимыми в способах и композициях, описанных в данном документе, представляют собой дозы, которые являются достаточными для достижения не более чем 80% ингибирования активности киназы Р70 S6 относительно активности киназы Р70 S6 в отсутствие ингибитора mTOR, например, измеренной посредством анализа, описанного в данном документе, например анализа методом Булэй. В следующем аспекте настоящее изобретение относится к количеству ингибитора mTOR, достаточному для достижения не более чем 38% ингибирования активности киназы Р70 S6 относительно активности киназы Р70 S6 в отсутствие ингибитора mTOR.

В одном аспекте доза ингибитора mTOR, применимая в способах и композициях по настоящему изобретению, является достаточной для достижения, например, когда ее вводят субъекту-человеку, 90 +/-5% (т. e. 85-95%), 89+/-5%, 88+/-5%, 87+/-5%, 86+/-5%, 85+/-5%, 84+/-5%, 83+/-5%, 82+/-5%, 81+/-5%, 80+/-5%, 79+/-5%, 78+/-5%, 77+/-5%, 76+/-5%, 75+/-5%, 74+/-5%, 73+/-5%, 72 +/-5%, 71 +/-5%, 70 +/-5%, 69 +/-5%, 68 +/-5%, 67 +/-5%, 66 +/-5%, 65 +/-5%, 64 +/-5%, 63 +/-5%, 62 +/-5%, 61 +/-5%, 60 +/-5%, 59 +/-5%, 58 +/-5%, 57 +/-5%, 56 +/-5%, 55 +/-5%, 54 +/-5%, 54 +/-5%, 53 +/-5%, 52 +/-5%, 51 +/-5%, 50 +/-5%, 49 +/-5%, 48 +/-5%, 47 +/-5%, 46 +/-5%, 45 +/-5%, 44 +/-5%, 43 +/-5%, 42 +/-5%, 41 +/-5%, 40 +/-5%, 39 +/-5%, 38 +/-5%, 37 +/-5%, 36 +/-5%, 35 +/-5%, 34 +/-5%, 33 +/-5%, 32 +/-5%, 31 +/-5%, 30 +/-5%, 29 +/-5%, 28 +/-5%, 27 +/-5%, 26 +/-5%, 25 +/-5%, 24 +/-5%, 23 +/-5%, 22 +/-5%, 21 +/-5%, 20 +/-5%, 19 +/-5%, 18 +/-5%, 17 +/-5%, 16 +/-5%, 15 +/-5%, 14 +/-5%, 13 +/-5%, 12 +/-5%, 11 +/-5%, или 10 +/-5%, ингибирования активности киназы Р70 S6, например, измеренной посредством анализа, описанного в данном документе, например анализа методом Булэй.

Активность киназы Р70 S6 у субъекта можно измерять, используя способы, известные из уровня техники, например, в соответствии со способами, описанными в патенте США № 7727950, посредством анализа методом иммуноблоттинга уровней фосфоР70 S6K и/или уровней фосфоР70 S6 или посредством анализов киназной активности in vitro.

Используемый в данном документе термин "приблизительно" при ссылке на дозу ингибитора mTOR означает до +/-10% вариабельности в количестве ингибитора mTOR, однако может предусматривать отсутствие вариабельности около установленной дозы.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способам, предусматривающим введение субъекту ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке в пределах целевого минимального уровня. В некоторых вариантах осуществления минимальный уровень существенно ниже минимальных уровней, ассоциированных с режимами введения дозы, применяемыми при трансплантации органов и для раковых пациентов. В варианте осуществления ингибитор mTOR, например RAD001 или рапамицин, вводят, чтобы получить в результате минимальный уровень, который составляет менее чем 1/2, 1/4, 1/10 или 1/20 от минимального уровня, который приводит к иммуносупрессии или противораковому эффекту. В варианте осуществления ингибитор mTOR, например RAD001 или рапамицин, вводят, чтобы получить в результате минимальный уровень, который составляет менее чем 1/2, 1/4, 1/10 или 1/20 от минимального уровня, одобренного FDA, представленного на вкладыше в упаковке, для применения при иммуносупрессии или противораковых назначениях.

В варианте осуществления способ, описанный в данном документе, предусматривает введение субъекту ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке, которая обеспечивает целевой минимальный уровень от 0,1 до 10 нг/мл, от 0,1 до 5 нг/мл, от 0,1 до 3 нг/мл, от 0,1 до 2 нг/мл или от 0,1 до 1 нг/мл.

В варианте осуществления способ, описанный в данном документе, предусматривает введение субъекту ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке, которая обеспечивает целевой минимальный уровень от 0,2 до 10 нг/мл, от 0,2 до 5 нг/мл, от 0,2 до 3 нг/мл, от 0,2 до 2 нг/мл или от 0,2 до 1 нг/мл.

В варианте осуществления способ, описанный в данном документе, предусматривает введение субъекту ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке, которая обеспечивает целевой минимальный уровень от 0,3 до 10 нг/мл, от 0,3 до 5 нг/мл, от 0,3 до 3 нг/мл, от 0,3 до 2 нг/мл или от 0,3 до 1 нг/мл.

В варианте осуществления способ, описанный в данном документе, предусматривает введение субъекту ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке, которая обеспечивает целевой минимальный уровень от 0,4 до 10 нг/мл, от 0,4 до 5 нг/мл, от 0,4 до 3 нг/мл, от 0,4 до 2 нг/мл или от 0,4 до 1 нг/мл.

В варианте осуществления способ, описанный в данном документе, предусматривает введение субъекту ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке, которая обеспечивает целевой минимальный уровень от 0,5 до 10 нг/мл, от 0,5 до 5 нг/мл, от 0,5 до 3 нг/мл, от 0,5 до 2 нг/мл или от 0,5 до 1 нг/мл.

В варианте осуществления способ, описанный в данном документе, предусматривает введение субъект ингибитора mTOR, например аллостерического ингибитора, например RAD001, при дозировке, которая обеспечивает целевой минимальный уровень от 1 до 10 нг/мл, от 1 до 5 нг/мл, от 1 до 3 нг/мл или от 1 до 2 нг/мл.

Используемый в данном документе термин "минимальный уровень" относится к концентрации лекарственного средства в плазме непосредственно перед следующей дозой или минимальной концентрации лекарственного средства между двумя дозами.

В некоторых вариантах осуществления целевой минимальный уровень RAD001 находится в диапазоне от приблизительно 0,1 до 4,9 нг/мл. В варианте осуществления целевой минимальный уровень ниже 3 нг/мл, например, от 0,3 или меньше до 3 нг/мл. В варианте осуществления целевой минимальный уровень ниже 3 нг/мл, например, от 0,3 или меньше до 1 нг/мл.

В дополнительном аспекте в настоящем изобретении может применяться ингибитор mTOR, отличный от RAD001, в количестве, которое ассоциировано с целевым минимальным уровнем, биоэквивалентным установленному целевому минимальному уровню для RAD001. В варианте осуществления целевой минимальный уровень для ингибитора mTOR, отличного от RAD001, представляет собой уровень, который дает такой же уровень ингибирования mTOR (например, измеренный способом, описанным в данном документе, например ингибирование Р70 S6K), который ответствует минимальному уровню RAD001, описанному в данном документе.

Фармацевтические композиции: ингибиторы mTOR

В одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим ингибитор mTOR, например, ингибитор mTOR, описанный в данном документе, составленный для применения в комбинации с CAR-клетками, описанными в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR составляют для введения в комбинации с дополнительным средством, например, описанным в данном документе.

Обычно соединения по настоящему изобретению будут вводиться в терапевтически эффективных количествах, как описано выше, посредством любого из обычных и приемлемых режимов, известных из уровня техники, либо по отдельности, либо в комбинации с одним или несколькими терапевтическими средствами.

Фармацевтические составы можно получать, используя обычные процедуры растворения и смешивания. Например, нерасфасованное лекарственное вещество (например, ингибитор mTOR или стабилизированную форму соединения (например, комплекс с производным циклодекстрина или другим известным средством комплексообразования) растворяют в подходящем растворителе в присутствии одного или нескольких из вспомогательных средств, описанных в данном документе. Ингибитор mTOR обычно составляют в фармацевтические лекарственные формы, чтобы обеспечить легко управляемое дозирование лекарственного средства и предоставить пациенту простой и оформленный продукт, с которым удобно обращаться.

Соединения по настоящему изобретению могут вводиться в виде фармацевтических композиций посредством любого общепринятого пути, в частности энтерально, например перорально, например в форме таблеток или капсул, или парентерально, например в форме растворов для инъекций или суспензий, местно, например, в форме лосьонов, гелей, мазей или кремов, или в назальной форме, или форме суппозитория. Если ингибитор mTOR вводят в комбинации (либо одновременно или раздельно) с еще одним средством, описанным в данном документе, то в одном аспекте оба компонента могут вводиться посредством одного и того же пути (например, парентерально). В качестве альтернативы, еще одно средство может вводиться посредством пути, отличающегося от пути в отношении ингибитора mTOR. Например, ингибитор mTOR может вводиться перорально, а другое средство может вводиться парентерально.

Замедленное высвобождение

Ингибиторы mTOR, например, аллостерические ингибиторы mTOR или каталитические ингибиторы mTOR, описанные в данном документе, могут быть предоставлены как фармацевтические составы в виде твердых пероральных лекарственных форм, содержащих ингибитор mTOR, описанные в данном документе, например рапамицин или RAD001, которые соответствуют требованиям стабильности продукта и/или характеризуются благоприятными фармакокинетическими свойствами по сравнению с таблетками с немедленным высвобождением (IR), такими как сниженная средняя пиковая концентрация в плазме, уменьшенная вариабельность между пациентами и у одного и того же пациента по степени всасывания лекарственного средства и по пиковой концентрации в плазме, пониженное отношение C_max/C_min и/или пониженные пищевые эффекты. Представленные фармацевтические составы могут обеспечивать более точное регулирование дозы и/или уменьшать частоту возникновения неблагоприятных явлений, обеспечивая тем самым более безопасные методы лечения для пациентов с применением ингибитора mTOR, описанного в данном документе, например рапамицина или RAD001.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к стабильным составам с длительным высвобождением ингибитора mTOR, описанного в данном документе, например рапамицина или RAD001, которые являются системами, состоящими из множества частиц, и могут иметь функциональные слои и покрытия.

Термин "состав с длительным высвобождением из множества частиц", используемый в данном документе, относится к составу, который обеспечивает высвобождение ингибитора mTOR, описанному в данном документе, например рапамицина или RAD001, в течение длительного периода времени, например, в течение по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5 или 6 часов. Состав с длительным высвобождением может содержать матрицы и покрытия, изготовленные из специальных вспомогательных средств, например, описанных в данном документе, которые составляют таким образом, чтобы сделать активный ингредиент доступным в течение длительного периода времени после приема внутрь.

Термин "длительное высвобождение" может применяться взаимозаменяемо с терминами "замедленное высвобождение" (SR) или "пролонгированное высвобождение". Термин "длительное высвобождение" относится к фармацевтическому составу, который не обеспечивает высвобождение активного лекарственного вещества немедленно после перорального введения дозы, но в течение продолжительного времени в соответствии с определением в монографии фармакопей Ph. Eur. (7^-е издание) для таблеток и капсул и общей главе USP <1151> для фармацевтических лекарственных форм. Термин "немедленное высвобождение" (IR), используемый в данном документе, относится к фармацевтическому составу, который обеспечивает высвобождение 85% активного лекарственного вещества в интервале менее 60 минут в соответствии с определением из "Guidance for Industry: "Dissolution Testing of Immediate Release Solid Oral Dosage Forms" (FDA CDER, 1997). В некоторых вариантах осуществления термин "немедленное высвобождение" означает высвобождение лекарственного средства, например ингибитора mTOR, например эверолимуса, из таблеток в пределах интервала времени 30 минут, например, как измерено в анализе на растворение, описанном в данном документе.

Стабильные составы с длительным высвобождением ингибитора mTOR, описанного в данном документе, например рапамицина или RAD001, могут характеризоваться профилем высвобождения in vitro с использованием анализов, известных из уровня техники, таких как анализ на растворение, описанный в данном документе: сосуд для растворения заполняют 900 мл фосфатного буфера с pH 6,8, содержащего 0,2% додецилсульфата натрия при 37°С, и осуществляют растворение с использованием метода перемешивания с лопастной мешалкой при 75 об/мин. согласно USP, в соответствии с монографией USP по тестированию 711 и монографией по тестированию Ph. Eur. 2.9.3., соответственно.

В некоторых вариантах осуществления стабильные составы с длительным высвобождением ингибитора mTOR, описанного в данном документе, например рапамицина или RAD001, высвобождают ингибитор mTOR в анализе на высвобождение in vitro в соответствии со следующими спецификациями высвобождения:

0,5 ч.: <45% или <40, например <30%;

1 ч.: 20-80%, например 30-60%;

2 ч.: >50% или >70%, например >75%;

3 ч.: >60% или >65%, например >85%, например >90%.

В некоторых вариантах осуществления стабильные составы с длительным высвобождением ингибитора mTOR, описанного в данном документе, например рапамицина или RAD001, высвобождают 50% ингибитора mTOR не ранее чем за 45, 60, 75, 90, 105 ми. или 120 мин в анализе на растворение in vitro.

Ингибиторы ROR1

Также в данном документе представлены ингибиторы ROR1 и комбинированные терапевтические средства, например, комбинации клетки, экспрессирующей CAR для CD20, описанной в данном документе, с ингибитором ROR1. Ингибиторы ROR1 включают в себя без ограничения клетки, экспрессирующие CAR, связывающий ROR1, например CART, и антитела к ROR (например, моно- или биспецифическое антитело к ROR1) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы ROR1 могут применяться для лечения заболевания, описанного в данном документе.

Типичный ингибитор ROR1 описан в Hudecek, et al. Clin. Cancer Res. 19,12(2013):3153-64, включенной в данный документ посредством ссылки. Например, ингибитор ROR1 включает в себя CART ROR1, описанные у Hudecek et al. (например, созданные, как описано у Hudecek et al. на странице 3155, первый полный параграф, включенный в данный документ посредством ссылки). В других примерах ингибитор ROR1 включает в себя антитело или его фрагмент, содержащие последовательности VH и/или VL моноклональных антител 2A2 и R12 к ROR1, описанных у Hudecek et al. в параграфе, приведенном на страницах 3154-55; Baskar et al. MAbs 4(2012):349-61 и Yang et al. PLoS ONE 6(2011):e21018, включенных в данный документ посредством ссылки.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор ROR1 включает в себя антитело или его фрагмент (например, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv)), которые нацеливаются на ROR1, в том числе описанные в US 2013/0101607, например, SEQ ID NO: 1 или 2 из US 2013/0101607, включенной в данный документ посредством ссылки. В некоторых вариантах осуществления фрагменты антител к ROR1 (например, scFv) конъюгируются или сливаются с биологически активной молекулой, например, с образованием химерного антигенного рецептора (CAR), который направляет иммунные клетки, например Т-клетки или NK-клетки, для ответа на ROR1-экспрессирующие клетки.

В некоторых вариантах осуществления типичный ингибитор ROR1 включает в себя моноклональное антитело к ROR1, называемое UC-961 (цирмтузумаб). См., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT02222688. Цирмтузумаб может применяться для лечения форм рака, таких как хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), рак яичника и меланома. См., например, Hojjat-Farsangi et al. PLoS One. 8(4): e61167 и NCT02222688.

В некоторых вариантах осуществления цирмтузумаб вводят внутривенно, например в виде внутривенной инфузии. Например, каждая инфузия предусматривает приблизительно 700-7000 мкг (например, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000-1500, 1500-2000, 2000-2500, 2500-3000, 3000-3500, 3500-4000, 4000-4500, 4500-5000, 5000-5500, 5500-6000, 6000-6500, или 6500-7000 мкг) цирмтузумаба. В некоторых вариантах осуществления цирмтузумаб вводят в дозе, составляющей 10-100 мкг/кг веса тела, например, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, 35-40, 40-45, 45-50, 50-55, 55-60, 60-65, 65-70, 70-75, 75-80, 80-85, 85-90, 90-95, или 95-100 мкг/кг веса тела. В одном варианте осуществления цирмтузумаб вводят при стартовой дозе 15 мкг/кг веса тела.

В некоторых вариантах осуществления цирмтузумаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, цирмтузумаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления цирмтузумаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 1 недели, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, цирмтузумаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 2 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых вариантах осуществления антитело к ROR1 конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор ROR1 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий ROR1, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую ROR1, или кодирующую ROR1-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий ROR1, например CART, создают путем конструирования ROR1-CAR (который содержит ROR1-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для ROR1. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для ROR1. В одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает, например, первую клетку, экспрессирующую CAR (например, CAR для CD19, CAR для ROR1, CAR для CD20 или CAR для CD22), который включает в себя первичный внутриклеточный сигнальный домен, и вторую клетку, экспрессирующую CAR (например, CAR для CD19, CAR для ROR1, CAR для CD20 или CAR для CD22)), который включает в себя вторичный сигнальный домен.

Ингибиторы CD22

В данном документе представлены ингибиторы CD22 и комбинированные терапевтические средства, например, комбинации ингибиторов CD22 с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе (например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, описанной в данном документе).

В одном варианте осуществления ингибитор CD22 представляет собой ингибитор CD22, описанный в данном документе. Ингибитор CD22 может представлять собой, например, антитело к CD22 (например, моно- или биспецифическое антитело к CD22) или CART CD22, описанные в таблице 6. В некоторых вариантах осуществления антитело к CD22 конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством. Типичные терапевтические средства включают, например, разрушающие микротрубки средства (например, монометилауристатин E) и токсины (например, дифтерийный токсин или экзотоксин-A Pseudomonas, рицин).

В варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой конъюгат моноклональное антитело к CD22-MMAE (например, DCDT2980S). В варианте осуществления антитело представляет собой scFv антитела к CD22, например scFv антитела RFB4. scFv может быть слитым с полным экзотоксином-A Pseudomonas или с его фрагментом (например, BL22). В варианте осуществления антитело является гуманизированным моноклональным антителом к CD22 (например, эпратузумаб). В варианте осуществления антитело или его фрагмент содержит Fv-часть антитела к CD22, которая необязательно ковалентно слита с полным или фрагментом или (например, фрагмент 38 кДа) экзотоксином-A Pseudomonas (например, моксетумомаб пасудотокс). В варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой биспецифическое антитело к CD19/CD22, необязательно конъюгированное с токсином. Например, в одном варианте осуществления антитело к CD22 содержит биспецифическую часть к CD19/CD22 (например, два лиганда scFv, распознающих CD19 и CD22 человека), необязательно связанную с полным или частью дифтерийного токсина (DT), например, первыми 389 аминокислотами дифтерийного токсина (DT), DT 390, например, лиганд-управляемого токсина, такого как DT2219ARL). В другом варианте осуществления биспецифическая часть (например, к CD19/к CD22) связана с токсином, таким как дегликозилированная цепь рицина А (например, комботокс).

В одном варианте осуществления антитело к CD22 выбрано из биспецифического к CD19/CD22 лиганд-управляемого токсина (например, два лиганда scFv, распознающих CD19 и CD22 человека), связанного с первыми 389 аминокислотами дифтерийного токсина (DT), DT 390, например DT2219ARL); конъюгата моноклональное антитело к CD22-MMAE (например, DCDT2980S); scFv из антитела к CD22 RFB4, слитого с фрагментом экзотоксина-A Pseudomonas (например, BL22); конъюгированного с дегликозилированной цепью рицина А антитела к CD19/к CD22 (например, комботокс); гуманизированного моноклонального антитела к CD22 (например, эпратузумаб) или части Fv из антитела к CD22, ковалентно слитой с фрагментом 38 кДа экзотоксина-A Pseudomonas (например, моксетумомаб пасудотокс).

В одном варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой биспецифический к CD19/CD22 лиганд-управляемый токсин (например, DT2219ARL), и биспецифический к CD19/CD22 лиганд-управляемый токсин вводят в дозе, составляющей приблизительно 1 мкг/кг, 2 мкг/кг, 3 мкг/кг, 4 мкг/кг, 5 мкг/кг, 6 мкг/кг, 7 мкг/кг, 8 мкг/кг, 9 мкг/кг, 10 мкг/кг, 11 мкг/кг, 12 мкг/кг, 13 мкг/кг, 14 мкг/кг,15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 25 мкг/кг, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, 60 мкг/кг, 80 мкг/кг, 100 мкг/кг, 120 мкг/кг, 140 мкг/кг, 160 мкг/кг, 180 мкг/кг, 200 мкг/кг, 220 мкг/кг, 250 мкг/кг, 300 мкг/кг, 350 мкг/кг, 400 мкг/кг, 450 мкг/кг, 500 мкг/кг, 600 мкг/кг, 700 мкг/кг, 800 мкг/кг, 900 мкг/кг, 1 мг.кг (например, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, 60 мкг/кг, или 80 мкг/кг) в течение периода времени, например, каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше дней. В некоторых вариантах осуществления биспецифический к CD19/CD22 лиганд-управляемый токсин вводят путем внутривенной инфузии.

В одном варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой BL22, и BL22 вводят в дозе, составляющей приблизительно 1 мкг/кг, 2 мкг/кг, 3 мкг/кг, 4 мкг/кг, 5 мкг/кг, 6 мкг/кг, 7 мкг/кг, 8 мкг/кг, 9 мкг/кг, 10 мкг/кг, 11 мкг/кг, 12 мкг/кг, 13 мкг/кг, 14 мкг/кг,15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 25 мкг/кг, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, 60 мкг/кг, 80 мкг/кг, 100 мкг/кг, 120 мкг/кг, 140 мкг/кг, 160 мкг/кг, 180 мкг/кг, 200 мкг/кг, 220 мкг/кг, 250 мкг/кг, 300 мкг/кг, 350 мкг/кг, 400 мкг/кг, 450 мкг/кг, 500 мкг/кг, 600 мкг/кг, 700 мкг/кг, 800 мкг/кг, 900 мкг/кг, 1 мг.кг (например, 3 мкг/кг, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, или 50 мкг/кг) в течение периода времени, например, каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше дней. В некоторых вариантах осуществления BL22 вводят ежедневно, через день, каждый третий день или каждый четвертый день в течение периода времени, например, на протяжении 4-дневного цикла, 6-дневного цикла, 8-дневного цикла, 10-дневного цикла, 12-дневного цикла или 14-дневного цикла. В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов BL22. В некоторых вариантах осуществления BL22 вводят путем внутривенной инфузии.

В одном варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой конъюгированное с дегликозилированной цепью рицина А антитело к CD19/к CD22 (например, комботокс), и конъюгированное с дегликозилированной цепью рицина А антитело к CD19/к CD22 вводят в дозе, составляющей приблизительно 500 мкг/м², 600 мкг/м², 700 мкг/м², 800 мкг/м², 900 мкг/м², 1 мг/м², 2 мг/м², 3 мг/м², 4 мг/м², 5 мг/м², 6 мг/м² или 7 мг/м² в течение периода времени, например, каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше дней. В некоторых вариантах осуществления конъюгированное с дегликозилированной цепью рицина А антитело к CD19/к CD22 вводят ежедневно, через день, каждый третий день или каждый четвертый день в течение периода времени, например, на протяжении 4-дневного цикла, 6-дневного цикла, 8-дневного цикла, 10-дневного цикла, 12-дневного цикла или 14-дневного цикла (например, через день в течение 6 дней). В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов конъюгированного с дегликозилированной цепью рицина А антитела к CD19/к CD22. В некоторых вариантах осуществления конъюгированное с дегликозилированной цепью рицина А антитело к CD19/к CD22 вводят путем внутривенной инфузии.

В одном варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело к CD22 (например, эпратузумаб), и при этом гуманизированное моноклональное антитело к CD22 вводят в дозе, составляющей приблизительно 10 мг/м²/неделя, 20 мг/м²/неделя, 50 мг/м²/неделя, 100 мг/м²/неделя, 120 мг/м²/неделя, 140 мг/м²/неделя, 160 мг/м²/неделя, 180 мг/м²/неделя, 200 мг/м²/неделя, 220 мг/м²/неделя, 250 мг/м²/неделя, 260 мг/м²/неделя, 270 мг/м²/неделя, 280 мг/м²/неделя, 290 мг/м²/неделя, 300 мг/м²/неделя, 305 мг/м²/неделя, 310 мг/м²/неделя, 320 мг/м²/неделя, 325 мг/м²/неделя, 330 мг/м²/неделя, 335 мг/м²/неделя, 340 мг/м²/неделя, 345 мг/м²/неделя, 350 мг/м²/неделя, 355 мг/м²/неделя, 360 мг/м²/неделя, 365 мг/м²/неделя, 370 мг/м²/неделя, 375 мг/м²/неделя, 380 мг/м²/неделя, 385 мг/м²/неделя, 390 мг/м²/неделя, 400 мг/м²/неделя, 410 мг/м²/неделя, 420 мг/м²/неделя, 430 мг/м²/неделя, 440 мг/м²/неделя, 450 мг/м²/неделя, 460 мг/м²/неделя, 470 мг/м²/неделя, 480 мг/м²/неделя, 490 мг/м²/неделя, 500 мг/м²/неделя, 600 мг/м²/неделя, 700 мг/м²/неделя, 800 мг/м²/неделя, 900 мг/м²/неделя, 1 г/м²/неделя или 2 г/м²/неделя (например, 360 мг/м²/неделя или 480 мг/м²/неделя) в течение периода времени, например, каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше недель. В некоторых вариантах осуществления первая доза ниже последующих доз (например, первая доза составляет 360 мг/м²/неделя, а последующие дозы составляют 370 мг/м²/неделя). В некоторых вариантах осуществления гуманизированное моноклональное антитело к CD22 вводят путем внутривенной инфузии.

В одном варианте осуществления антитело к CD22 представляет собой моксетумомаб пасудотокс, и моксетумомаб пасудотокс вводят в дозе, составляющей приблизительно 1 мкг/кг, 2 мкг/кг, 3 мкг/кг, 4 мкг/кг, 5 мкг/кг, 6 мкг/кг, 7 мкг/кг, 8 мкг/кг, 9 мкг/кг, 10 мкг/кг, 11 мкг/кг, 12 мкг/кг, 13 мкг/кг, 14 мкг/кг,15 мкг/кг, 20 мкг/кг, 25 мкг/кг, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, 60 мкг/кг, 80 мкг/кг, 100 мкг/кг, 120 мкг/кг, 140 мкг/кг, 160 мкг/кг, 180 мкг/кг, 200 мкг/кг, 220 мкг/кг, 250 мкг/кг, 300 мкг/кг, 350 мкг/кг, 400 мкг/кг, 450 мкг/кг, 500 мкг/кг (например, 5 мкг/кг, 10 мкг/кг, 20 мкг/кг, 30 мкг/кг, 40 мкг/кг, или 50 мкг/кг) в течение периода времени, например, каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше дней. В некоторых вариантах осуществления моксетумомаб пасудотокс вводят ежедневно, через день, каждый третий день или каждый четвертый день в течение периода времени, например, на протяжении 4-дневного цикла, 6-дневного цикла, 8-дневного цикла, 10-дневного цикла, 12-дневного цикла или 14-дневного цикла (например, через день в течение 6 дней). В одном варианте осуществления вводят 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или больше циклов моксетумомаб пасудотокса. В некоторых вариантах осуществления моксетумомаб пасудотокс вводят путем внутривенной инфузии.

В одном варианте осуществления ингибитор CD22 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR для CD22, например CART CD22, или например CD22-CAR, который содержит CD22-связывающий домен и сконструирован в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), для введения в комбинации с CART CD20 и в способах их применения для адоптивной терапии. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD22 включает в себя клетку, экспрессирующую конструкцию CAR для CD22, или кодирующую CAR для CD22, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR для CD22, например CART, создают путем конструирования CD22-CAR (который содержит CD22-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CD20 CART, описанной в данном документе.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к популяции CAR-экспрессирующих клеток, например, CAR-экспрессирующей клетке, содержащей смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD22. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD22. В одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает, например, первую клетку, экспрессирующую CAR (например, CAR для CD20 или CAR для CD22), который включает в себя первичный внутриклеточный сигнальный домен, и вторую клетку, экспрессирующую CAR (например, CAR для CD20 или CAR для CD22), который включает в себя вторичный сигнальный домен. В одном варианте осуществления CAR для CD20 содержит или состоит из последовательностей согласно таблице 1. В одном варианте осуществления CAR для CD22 содержит или состоит из последовательностей согласно таблице 6.

Ингибиторы CD19

В данном документе представлены ингибиторы CD19 и комбинированные терапевтические средства, например, комбинации ингибиторов CD19 с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе (например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, описанной в данном документе, или клеткой, экспрессирующей CAR для CD22, описанной в данном документе). Ингибитор CD19 включает в себя без ограничения клетку, экспрессирующую CAR для CD19, например клетку, экспрессирующую CAR для CD19, или антитело к CD19 (например, моно- или биспецифическое антитело к CD19, которое может содержать или состоять из последовательностей согласно таблице 11) или его фрагмент или конъюгат. В варианте осуществления ингибитор CD19 вводят в комбинации с ингибитором CD20, CD22 или ROR1, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, CD22 или ROR1, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе.

Иллюстративные антитела к CD19 или их фрагменты или конъюгаты включают без ограничения блинатумомаб, SAR3419 (Sanofi), MEDI-551 (MedImmune LLC), комботокс, DT2219ARL (Masonic Cancer Center), MOR-208 (также называемый XmAb-5574; MorphoSys), XmAb-5871 (Xencor), MDX-1342 (Bristol-Myers Squibb), SGN-CD19A (Seattle Genetics) и AFM11 (Affimed Therapeutics). См., например, Hammer. MAbs. 4,5(2012): 571-77.

В некоторых аспектах антитело к CD19 или его фрагмент или конъюгат содержит блинатумомаб. Блинатумомаб представляет собой биспецифическое антитело, состоящее из двух scFv, один из которых связывается с CD19, а другой связывается с CD3. Блинатумомаб направляет Т-клетки на атаку раковых клеток. См., например, Hammer et al.; клиническое испытание с идентификационным номером NCT00274742 и NCT01209286. В некоторых вариантах осуществления блинатумомаб может применяться для лечения NHL (например, DLBCL) или ALL.

В некоторых вариантах осуществления блинатумомаб вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления блинатумомаб вводят в дозе, составляющей приблизительно 0,5-120 мкг/м²/24 часа, например, приблизительно 0,5-1 мкг/м²/24 часа, 1-5 мкг/м²/24 часа, 5-15 мкг/м²/24 часа, 15-30 мкг/м²/24 часа, 30-60 мкг/м²/24 часа или 60-120 мкг/м²/24 часа.

В некоторых вариантах осуществления блинатумомаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 4 дня, например, 4, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, блинатумомаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 0,5 недели, например, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 недель или больше. В некоторых вариантах осуществления блинатумомаб вводят путем непрерывной внутривенной инфузии на протяжении 2-8 недель на цикл, например, на протяжении 2-3, 3-4, 4-5, 5-6, 6-7, или 7-8 недель на цикл.

В некоторых вариантах осуществления блинатумомаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 недель или больше. Например, блинатумомаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD19 содержит MEDI-551. MEDI-551 представляет собой гуманизированное антитело к CD19 с Fc, сконструированным таким образом, что он обладает усиленной антителозависимой клеточноопосредованной цитотоксичностью (ADCC). См., например, Hammer et al. и клиническое испытание с идентификационным номером NCT01957579. В некоторых вариантах осуществления MEDI-551 может применяться для лечения B-клеточных злокачественных новообразований (например, NHL, CLL, DLBCL и множественной миеломы), множественного склероза и склеродермии.

В некоторых вариантах осуществления MEDI-551 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых случаях MEDI-551 вводят в дозе, составляющей приблизительно 0,5-12 мг/кг, например, 0,5-1 мг/кг, 1-2 мг/кг, 2-4 мг/кг, 4-8 мг/кг или 8-12 мг/кг.

В некоторых вариантах осуществления MEDI-551 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше. В некоторых вариантах осуществления MEDI-551 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше.

В некоторых вариантах осуществления MEDI-551 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 1 недели, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, MEDI-551 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 2 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD19 или его фрагмент или конъюгат содержит комботокс. Комботокс представляет собой смесь иммунотоксинов, которые связывают CD19 и CD22. Иммунотоксины состоят из scFv-фрагментов антител, слитых с дегликозилированной А-цепью рицина. См., например, Hammer et al.; а также Herrera et al. J. Pediatr. Hematol. Oncol. 31.12(2009):936-41; Schindler et al. Br. J. Haematol. 154,4(2011):471-6. В некоторых вариантах осуществления комботокс может применяться для лечения B-клеточного лейкоза, например ALL.

В некоторых вариантах осуществления комботокс вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых случаях комботокс вводят в дозе, составляющей приблизительно 1-10 мг/м², например, приблизительно 1-2 мг/м², 2-3 мг/м², 3-4 мг/м², 4-5 мг/м², или 5-6 мг/м², 6-7 мг/м², 7-8 мг/м², 8-9 мг/м² или 9-10 мг/м².

В некоторых вариантах осуществления комботокс вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 2 дня, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. В некоторых вариантах осуществления комботокс вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 1 недели, например, по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, комботокс вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD19 или его фрагмент или конъюгат содержит DT2219ARL. DT2219ARL представляет собой биспецифический иммунотоксин, нацеленный на CD19 и CD22, содержащий два scFv и усеченный дифтерийный токсин. См., например, Hammer et al. и клиническое испытание с идентификационным номером NCT00889408. В некоторых вариантах осуществления DT2219ARL может применяться для лечения B-клеточных злокачественных новообразований, например, B-клеточных лейкозов и лимфом.

В некоторых вариантах осуществления DT2219ARL вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления DT2219ARL вводят в дозе, составляющей приблизительно 20-100 мкг/кг, например, приблизительно 20-40 мкг/кг, 40-60 мкг/кг, 60-80 мкг/кг или 80-100 мкг/кг.

В некоторых вариантах осуществления DT2219ARL вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 2 дня, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. В некоторых вариантах осуществления DT2219ARL вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, DT2219ARL вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD19 или его фрагмент или конъюгат содержит SGN-CD19A. SGN-CD19A представляет собой конъюгат антитела и лекарственного средства (ADC), состоящий из гуманизированного моноклонального антитела к CD19, связанного с синтетическим цитотоксическим средством, уничтожающим клетки, монометилауристатином F (MMAF). См., например, Hammer et al. и клиническое испытание с идентификационным номером NCT01786096 и NCT01786135. В некоторых вариантах осуществления SGN-CD19A может применяться для лечения B-клеточного ALL, NHL (например, DLBCL, лимфомы из клеток мантийной зоны или фолликулярной лимфомы), лимфомы Беркитта, или лейкоза, или В-клеточной лимфобластной лимфомы (B-LBL).

В некоторых вариантах осуществления SGN-CD19A вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления SGN-CD19A вводят в дозе, составляющей приблизительно 0,1-10 мг/кг, например, приблизительно 0,1-0,3 мг/кг, 0,3-0,6 мг/кг, 0,6-1 мг/кг, 1-2 мг/кг, 2-3 мг/кг, 3-4 мг/кг, 4-5 мг/кг, 5-6 мг/кг, 6-7 мг/кг, 7-8 мг/кг, 8-9 мг/кг, или 9-10 мг/кг.

В некоторых вариантах осуществления SGN-CD19A вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, SGN-CD19A вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления SGN-CD19A вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, SGN-CD19A вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD19 содержит MOR-208 (также называемый XmAb-5574). MOR-208 представляет собой Fc-сконструированное гуманизированное моноклональное антитело к CD19 с усиленным связыванием FcγRIIIA, что дает в результате улучшенную активность ADCC. См., например, клинические испытания с идентификационными номерами NCT01685008, NCT01685021, NCT02005289 и NCT01161511; Hammer et al.; Woyach et al. Blood 124.24(2014). В некоторых вариантах осуществления MOR-208 может применяться для лечения NHL (например, FL, MCL, DLBCL), CLL, мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы, пролимфоцитарного лейкоза или В-клеточного острого лимфобластного лейкоза (B-ALL).

В некоторых вариантах осуществления MOR-208 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления MOR-208 вводят в дозе, составляющей приблизительно 0,3-12 мг/кг, например, приблизительно 0,3-0,5 мг/кг, 0,5-1 мг/кг, 1-2 мг/кг, 2-4 мг/кг, 3-6 мг/кг, 6-9 мг/кг или 9-12 мг/кг.

В некоторых вариантах осуществления MOR-208 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 2 дня, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, MOR-208 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например,., 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления MOR-208 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 1 недели, например, по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, MOR-208 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некотором аспекте антитело к CD19 или его фрагмент или конъюгат содержит SAR3419. SAR3419 представляет собой конъюгат антитела к CD19 и лекарственного средства (ADC), содержащий гуманизированное моноклональное антитело к CD19, конъюгированное с производным майтанзина с помощью расщепляемого линкера. См., например, Younes et al. J. Clin. Oncol. 30.2(2012): 2776-82; Hammer et al.; клиническое испытание с идентификационным номером NCT00549185 и Blanc et al. Clin Cancer Res. 2011;17:6448-58. В некоторых вариантах осуществления SAR3419 может применяться для лечения NHL (диффузной крупноклеточной B-клеточной лимфомы (DLBCL) и фолликулярной мелкоклеточной лимфомы, с расщепленными ядрами) или B-клеточного ALL.

В некоторых вариантах осуществления SAR3419 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления SAR3419 вводят в дозе, составляющей приблизительно 10-270 мг/м², например, приблизительно 10-25 мг/м², 25-50 мг/м², 50-75 мг/м², 75-100 мг/м², 100-125 мг/м², 125-150 мг/м², 150-175 мг/м², 175-200 мг/м², 200-225 мг/м², 225-250 мг/м² или 250-270 мг/м².

В некоторых вариантах осуществления SAR3419 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, SAR3419 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления SAR3419 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, SAR3419 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD19 содержит XmAb-5871. XmAb-5871 представляет собой гуманизированное антитело к CD19 со сконструированным Fc. В некоторых вариантах осуществления XmAb-5871 может применяться для лечения аутоиммунных заболеваний, таких как волчанка. См., например, Hammer et al.

В некоторых аспектах антитело к CD19 содержит MDX-1342, который представляет собой Fc-сконструированное антитело человека к CD19 с усиленной ADCC. В некоторых вариантах осуществления MDX-1342 может применяться для лечения CLL и ревматоидного артрита. См., например, Hammer et al.

В некоторых аспектах антитело к CD19 содержит AFM11. AFM11 представляет собой биспецифическое антитело, нацеливающееся на CD19 и CD3. В некоторых вариантах осуществления AFM11 может применяться для лечения NHL (например, DLBCL), ALL или CLL. См., например, Hammer et al. и клиническое испытание с идентификационным номером NCT02106091. В некоторых вариантах осуществления AFM11 вводят в виде внутривенной инфузии.

В некоторых вариантах осуществления антитело к CD19, описанное в данном документе, конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством, например, химиотерапевтическим средством (например, химиотерапевтическим средством, описанным в данном документе), пептидной вакциной (такой как описанная в Izumoto et al. 2008 J Neurosurg 108:963-971), иммуносупрессивным средством (например, иммуносупрессивным средством, описанным в данном документе) или иммунодеструктивным средством (например, иммунодеструктивным средством, описанным в данном документе), например, циклоспорином, азатиоприном, метотрексатом, микофенолятом, FK506, CAMPATH, антителом к CD3, цитоксином, флударабином, рапамицином, микофеноловой кислотой, стероидом, FR901228 или цитокином.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD19 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD19, например CART, например, клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD19. В варианте осуществления конструкция CAR, связывающая CD19, содержит мышиную последовательность scFv. Например, конструкция CAR, связывающая CD19, содержащая мышиную последовательность scFv, представляет собой конструкцию CAR19, представленную в публикации согласно PCT WO2012/079000; конструкцию CAR19, представленную в US 7446190; конструкцию CAR19, представленную в WO2014/031687 или конструкцию CAR19, представленную в GenBank под номером доступа HM852952, а также представленную в данном документе под SEQ ID NO: 223. В одном варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой scFv, описанный в WO2012/079000. В одном варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой scFv, описанный в US 7446190. В одном варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой scFv, описанный в WO2014/031687. В одном варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой scFv, описанный в GenBank под номером доступа HM852952, или последовательность по меньшей мере на 95%, например 95-99%, идентичную таковому. В варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой часть конструкции CAR, представленной в публикации согласно PCT WO2012/079000. В варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой часть конструкции CAR, представленной в US 7446190. В варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой часть конструкции CAR, представленной в WO2014/031687. В варианте осуществления CD19-связывающий домен представляет собой часть конструкции CAR, представленную в GenBank под номером доступа HM852952. В некоторых случаях антигенсвязывающий домен CAR, связывающий CD19, представляет собой scFv-фрагмент антитела, которое является гуманизированным по сравнению с мышиной последовательностью scFv, из которого он происходит. Например, антигенсвязывающий домен CAR, связывающий CD19, представляет собой гуманизированный scFv-фрагмент антитела, например, как описано в публикации согласно PCT WO2014/153270, включенной в данный документ посредством ссылки. В варианте осуществления CD19-связывающий домен содержит по меньшей мере одну (например, 2, 3, 4, 5 или 6) последовательность из таблицы 11.

Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD19, например CART, создают путем конструирования CD19-CAR (который содержит CD19-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например, CAR-экспрессирующих клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD19. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD19.

Ингибиторы CD123

CD123 также называется альфа-цепью рецептора интерлейкина-3 (IL-3RA). Рецептор IL-3 (IL-3R) представляет собой гетеродимер, состоящий из цепей альфа и бета. IL-3R является мембранным рецептором. Цепь IL-3Rα представляет собой гликопротеин из 360 аминокислотных остатков. Аномалии CD123 часто наблюдаются при некоторых лейкозных нарушениях. CD123 сверхэкспрессируется при многих гематологических злокачественных новообразованиях, например, при остром миелоидном и B-лимфоидном лейкозах, бластных опухолях из плазмоцитоидных дендритных клеток (BPDCN) и волосатоклеточном лейкозе.

В данном документе представлены ингибиторы CD123 и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы CD123 включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий CD123, например CART, и антитела к CD123 (например, моно- или биспецифическое антитело к CD123) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы CD123 могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор CD123 вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В одном варианте осуществления ингибитор CD123 представляет собой рекомбинантный белок, например, содержащий природный лиганд (или фрагмент) рецептора CD123. Например, рекомбинантным белком является SL-401 (также называемый DT388IL3; University of Texas Southwestern Medical Center), который представляет собой слитый белок, содержащий IL-3 человека, слитый с усеченным дифтерийным токсином. См., например, Testa et al. Biomark Res. 2014; 2: 4 и клиническое испытание с идентификационным номером NCT00397579.

В другом варианте осуществления ингибитор CD123 представляет собой антитело к CD123 или его фрагмент. В одном варианте осуществления антитело к CD123 или его фрагмент предусматривает моноклональное антитело, например, моноспецифическое или биспецифическое антитело, или его фрагмент. Например, антитело к CD123 или его фрагмент содержит CSL360 (CSL Limited). CSL360 представляет собой рекомбинантное химерное моноклональное антитело, которое связывается с CD123. В некоторых вариантах осуществления CSL360 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. Например, CSL360 вводят в дозе, составляющей 0,1-10 мг/кг, например, 0,1-0,5 мг/кг, 0,5-1 мг/кг, 1-5 мг/кг или 5-10 мг/кг. См., например, клиническое исследование с идентификационным номером NCT01632852 и Testa et al.

В другом варианте осуществления CD123 антитело или его фрагмент содержит CSL362 (CSL Limited). CSL362 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, которое нацеливается на CD123 и является оптимизированным для усиления активации антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC). В некоторых вариантах осуществления CSL362 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых примерах CSL362 вводят в дозе, составляющей 0,1-12 мг/кг, например, 0,1-0,2 мг/кг, 0,2-0,5 мг/кг, 0,5-1 мг/кг, 1-6 мг/кг или 6-12 мг/кг. См., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01632852.

В одном варианте осуществления CD123 антитело или его фрагмент предусматривает биспецифическое антитело, например MGD006 (MacroGenics). MGD006 представляет собой биспецифическое антитело, нацеливающееся на CD123 и CD3. См., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT02152956.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD123 конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD123 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD123, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD123, или ген, кодирующий CD123-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD123, например CART, создают путем конструирования CD123-CAR (который содержит CD123-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. В варианте осуществления конструкция CAR, связывающего CD123, содержит последовательность scFv, например, последовательность scFv, представленную в US 2014/0322212 A1, включенной в данный документ посредством ссылки. В одном варианте осуществления домен, связывающий CD123, представляет собой scFv, описанный в US 0322212. В варианте осуществления домен, связывающий CD123, представляет собой часть конструкции CAR, представленной в US 2014/0322212 A1. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD123. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD123.

Ингибиторы CD10

Кластер дифференцировки 10 (CD10) также называют неприлизином, мембранной металлоэндопептидазой (MME), нейтральной эндопептидазой (NEP) и общим антигеном острого лимфобластного лейкоза (CALLA). CD10 является ферментом, кодируемым геном мембранной металлоэндопептидазы (MME). CD10 экспрессируется на лейкозных клетках пре-B-клеточного фенотипа и представляет собой общий антиген острого лимфоцитарного лейкоза.

Также в данном документе представлены ингибиторы CD10 и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы CD10 включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий CD10, например CART, и антитела к CD10 (например, моно- или биспецифическое антитело к CD10) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы CD10 могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор CD10 вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В варианте осуществления ингибитор CD10 включает в себя малую молекулу, такую как сакубитрил (Novartis), валсартан/сакубитрил (Novartis), омапатрилат (Bristol-Myers Squibb), RB-101, UK-414,495 (Pfizer) или их фармацевтически приемлемую соль или производное.

В варианте осуществления ингибитор CD10 содержит сакубитрил (AHU-377; Novartis) (4-{[(2S,4R)-1-(4-бифенилил)-5-этокси-4-метил-5-оксо-2-пентанил]амино}-4-оксобутановая кислота) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Структура сакубитрила показана ниже.

В другом варианте осуществления ингибитор CD10 содержит валсартан/сакубитрил (LCZ696; Novartis) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Валсартан/сакубитрил представляет собой комбинированное лекарственное средство, содержащее смесь 1:1 валсартана и сакубитрила. Структура валсартана ((S)-3-метил-2-(N-{[2'-(2H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил}пентамидо)бутановая кислота) показана ниже.

В варианте осуществления ингибитор CD10 содержит омапатрилат (Bristol-Myers Squibb) ((4S,7S,10aS)-5-оксо-4-{[(2S)-3-фенил-2-сульфанилпропаноил]амино}-2,3,4,7,8,9,10,10a-окстагидропиридо[6,1-b][1,3]тиазепин-7-карбоновая кислота) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Структура омапатрилата показана ниже.

В варианте осуществления ингибитор CD10 содержит RB-101 (бензил-N-(3-{[(2S)-2-амино-4-(метилтио)бутил]дитио}-2-бензилпропаноил)-L-фенилаланинат) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Структура RB-101 показана ниже.

В варианте осуществления ингибитор CD10 содержит UK-414,495 (Pfizer) ((R)-2-({1-[(5-этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)карбамоил]циклопентил}метил)валериановую кислоту) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Структура UK-414,495 показана ниже.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD10 конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD10 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD10, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD10, или кодирующую CD10-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD10, например CART, создают путем конструирования CD10-CAR (который содержит CD10-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD10. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD10.

Ингибиторы CD34

Кластер дифференцировки 34 (CD34) также называется антигеном гематопоэтической клетки-предшественника CD34 и представляет собой гликопротеин клеточной поверхности, который функционирует как фактор межклеточной адгезии. CD34 иногда экспрессируется при некоторых формах рака/опухолях, например, при альвеолярной саркоме мягких тканей, пре-B-ALL, AML, AML-M7, возвышающейся дерматофибросаркоме, гастроинтестинальной стромальной опухоли, гигантоклеточной фибробластоме, гранулоцитарной саркоме, саркоме Капоши, липосаркоме, злокачественной метастатической фиброзной гистиоцитоме, злокачественных опухолях оболочек периферических нервов, менингеальных гемангиоперицитомах, менингиомах, нейробластомах, шванномах и папиллярной карциноме щитовидной железы.

Также в данном документе представлены ингибиторы CD34 и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы CD34 включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий CD34, например CART, и антитела к CD34 (например, моно- или биспецифическое антитело к CD34) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы CD34 могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор CD34 вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В варианте осуществления ингибитор CD34 включает в себя моноклональное антитело или его фрагмент, которые нацеливаются на CD34, или иммунолипосому, содержащую моноклональное антитело к CD34 или его фрагмент.

В варианте осуществления ингибитор CD34 включает в себя антитело или его фрагмент, например, моноклональное антитело My-10, или иммунолипосому, содержащую моноклональное антитело My-10, как описано в Mercadal et al. Biochim. Biophys. Acta. 1371,1(1998):17-23. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD34 включает в себя иммунолипосому, содержащую противораковое лекарственное средство, например доксорубицин, которое нацеливается на CD34-экспрессирующие клетки, как описано в Carrion et al. Life Sci. 75.3(2004):313-28. В варианте осуществления ингибитор CD34 включает в себя моноклональное антитело к CD34, как описано в Maleki et al. Hum. Antibodies. 22(2013):1-8. В другом варианте осуществления ингибитор CD34 включает в себя моноклональное антитело, который нацеливается на CD34, как описано в Maleki et al. Cell J. 16.3(2014):361-66.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD34 конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD34 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD34, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD34, или кодирующую CD34-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD34, например CART, создают путем конструирования CD34-CAR (который содержит CD34-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD34. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD34.

Ингибиторы FLT-3

Fms-подобная тирозинкиназа 3 (FLT-3), также называемая антигеном кластера дифференцировки 135 (CD135), тирозинпротеинкиназой рецепторного типа FLT3 или эмбриональной киназой 2 печени (Flk2), представляет собой рецепторную тирозинкиназу. FLT-3 является цитокиновым рецептором для лиганда, цитокинового лиганда Flt3 (FLT3L). FLT-3 экспрессируется на поверхности многих гематопоэтических клеток-предшественников и важен для развития лимфоцитов. Ген FLT3 обычно мутирует при лейкозе, например, остром миелоидном лейкозе (AML).

Также в данном документе представлены ингибиторы FLT-3 и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы FLT-3 включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий FLT-3, например CART, и антитела к FLT-3 (например, моно- или биспецифическое антитело к FLT-3) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы FLT-3 могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор FLT-3 вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя малую молекулу, такую как квизартиниб (Ambit Biosciences), мидостаурин (Technische Universitat Dresden), сорафениб (Bayer and Onyx Pharmaceuticals), сунитиниб (Pfizer), лестауртиниб (цефалон) или их фармацевтически приемлемую соль или производное.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя квизартиниб (AC220; Ambit Biosciences) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Квизартиниб представляет собой низкомолекулярный ингибитор рецепторной тирозинкиназы. Структура квизартиниба (1-(5-(трет-бутил)изоксазол-3-ил)-3-(4-(7-(2-морфолинoэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил)мочевина) показана ниже.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя мидостаурин (PKC412; Technische Universität Dresden) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Мидостаурин является ингибитором протеинкиназы, который представляет собой полусинтетическое производное стауроспорина, алкалоида из бактерии Streptomyces staurosporeus.

Структура мидостаурина ((9S,10R,11R,13R)-2,3,10,11,12,13-гексагидро-10-метокси-9-метил-11-(метиламино)-9,13-эпокси-1H,9H-дииндоло[1,2,3-gh:3',2',1'-lm]пирроло[3,4-j][1,7]бензодиамзонин-1-он) показана ниже.

В некоторых вариантах осуществления мидостаурин вводят перорально, например в дозе, составляющей приблизительно 25-200 мг, например, приблизительно 25-50 мг, 50-100 мг, 100-150 мг или 150-200 мг. Например, мидостаурин вводят, например перорально, в дозе, составляющей приблизительно 25-200 мг два раза в день, например, приблизительно 25-50 мг, 50-100 мг, 100-150 мг или 150-200 мг два раза в день. См., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01830361.

В варианте осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя сорафениб (Bayer and Onyx Pharmaceuticals) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Сорафениб представляет собой низкомолекулярный ингибитор многих тирозинпротеинкиназ (например, VEGFR и PDGFR), Raf киназ (например, C-Raf и B-Raf) и некоторых внутриклеточных серин/треонинкиназ (например, C-Raf, B-Raf дикого типа и мутантной B-Raf). См., например, labeling.bayerhealthcare.com/html/products/pi/Nexavar_PI.pdf. Структура сорафениба (4-[4-[[4-хлор-3-(трифторметил)фенил]карбамоиламино]

фенокси]-N-метил-пиридин-2-карбоксамид) показана ниже.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя сунитиниб (ранее назывался SU11248; Pfizer) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Сунитиниб представляет сбой низкомолекулярное пероральное лекарственное средство, которое ингибирует множество рецепторных тирозинкиназ, в том числе FLT3. Сунитиниб был одобрен Управлением по контролю пищевых продуктов и лекарственных средств (FDA) для лечения почечноклеточной карциномы (RCC) и устойчивой к иматинибу гастроинтестинальной стромальной опухоли (GIST). Структура сунитиниба (N-(2-диэтиламиноэтил)-5-[(Z)-(5-фтор-2-оксо-1H-индол-3-илиден)метил]-2,4-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамид) показана ниже.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя лестауртиниб (CEP-701; цефалон) или его фармацевтически приемлемую соль или производное. Лестауртиниб является ингибитором тирозинкиназы, структурно родственным стауроспорину. Структура лестауртиниба ((9S,10S,12R)-2,3,9,10,11,12-гексакгидро-10-гидрокси-10-(гидроксиметил)-9-метил-9,12-эпокси-1H-дииндоло[1,2,3-fg:3',2',1'-kl]пирроло[3,4-i][1,6]бензодиазоцин-1-он) показана ниже.

В некоторых вариантах осуществления лестауртиниб вводят перорально, например в дозе, составляющей приблизительно 40-100 мг два раза в день, например, приблизительно 40-60 мг, 50-70 мг, 60-80 мг, 70-90 мг или 80-100 мг два раза в день. См., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT00079482 или NCT00030186.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор FLT-3 включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий FLT-3, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую FLT-3, или кодирующую FLT-3-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий FLT-3, например CART, создают путем конструирования FLT-3-CAR (который содержит FLT-3-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для FLT-3. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для FLT-3.

Ингибиторы CD79b

CD79b также называют ассоциированным с иммуноглобулином бета, который является компонентом B-лимфоцитарного антигенного рецепторного мультимерного комплекса. CD79b образует гетеродимер с другим акцессорным белком, называемым CD79a (ассоциированным с иммуноглобулином альфа), и гетеродимерными комплексами с поверхностными иммуноглобулинами на B-клетках. CD79b важен для сборки и поверхностной экспрессии B-лимфоцитарного антигенного рецептора. CD79b и CD79a важны для пре-B-клеточного и B-клеточного развития. Мутации и аберрантная экспрессия CD79b происходят во многих клетках B-CLL и могут коррелировать с потерей поверхностной экспрессии и/или дефектной передачей сигналов B-лимфоцитарного антигенного рецептора в B-CLL. См., например, Thompson et al. Blood 90.4(1997):1387-94. В некоторых случаях сверхэкспрессия мутантной формы или сплайсированного варианта CD79b коррелировала с пониженным B-лимфоцитарным антигенным рецептором в B-CLL и других лимфоидных злокачественных новообразованиях. См., например, Cragg et al. Blood 100.9(2002):3068-76.

В данном документе представлены ингибиторы CD79b и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы CD79b включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий CD79b, например CART, и антитела к CD79b (например, моно- или биспецифическое антитело к CD79b) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы CD79b могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор CD79b вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В варианте осуществления CD79b ингибитор представляет собой антитело к CD79b или его фрагмент. В одном варианте осуществления антитело к 79b или его фрагмент предусматривает моноклональное антитело, например, моноспецифическое или биспецифическое антитело, или его фрагмент. Например, антитело к CD79b или его фрагмент предусматривает полатузумаб ведитин (Roche), конъюгат антитела к CD79b и лекарственного средства. В вариантах осуществления полатузумаб ведитин применяют для лечения рака, например NHL, например фолликулярной лимфомы или DLBCL, например, рецидивной или рефрактерной фолликулярной лимфомы или DLBCL. См., например, NCT02257567. В вариантах осуществления антитело кCD79b или его фрагмент предусматривает MGD010 (MacroGenics), который представляет собой биспецифическое антитело, содержащее компоненты, которые связываются с CD32B и D79B. См., например, NCT02376036.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD79b конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD79b включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD79b, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD79b, или кодирующую CD79b-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD79b, например CART, создают путем конструирования CD79b-CAR (который содержит CD79b-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD79b. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD79b.

Ингибиторы CD79a

CD79a также называют ассоциированным с иммуноглобулином альфа. CD79a гетеродимеризуется с CD79b с образованием компонента B-лимфоцитарного антигенного рецепторного мультимерного комплекса. CD79a экспрессируется при многих гематологических видах рака, например, при острых лейкозах (например, AML), B-клеточных лимфомах и миеломах.

В данном документе представлены ингибиторы CD79a и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы CD79a включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий CD79a, например CART, и антитела к CD79a (например, моно- или биспецифическое антитело к CD79a) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы CD79a могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор CD79a вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В варианте осуществления CD79a ингибитор представляет собой антитело к CD79a или его фрагмент. В одном варианте осуществления антитело к CD79a или его фрагмент предусматривает моноклональное антитело, например, моноспецифическое или биспецифическое антитело, или его фрагмент. Например, антитело к CD79a или его фрагмент предусматривает антитело к CD79a или его фрагмент, описанные в Polson et al. Blood 110.2(2007):616-23, включенной в данный документ посредством ссылки. Например, антитело к CD79a или его фрагмент предусматривает антитело 7H7, 15E4 или 16C11 или его фрагмент, описанные в Polson et al. Cм. Id.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD79a конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD79a включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD79a, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD79a, или кодирующую CD79a-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD79a, например CART, создают путем конструирования CD79a-CAR (который содержит CD79a-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD79a. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD79a.

Ингибиторы CD179b

CD179b также называют полипептидом 1, подобным иммуноглобулину лямбда (IGLL1). CD179b представляет собой субъединицу гетеродимерной легкой цепи, которая образует комплекс с мембраносвязанной тяжелой цепью Ig мю. Вместе, легкая цепь и тяжелая цепь образуют рецептор пре-В-клетки. Мутации в CD179b коррелировали с дефицитом B-клеток и агаммаглобулинемией. CD179b экспрессируется в некоторых раковых клетках, например, В-клетках-предшественниках лимфобластной лимфомы.

В данном документе представлены ингибиторы CD179b и комбинированные терапевтические средства. Ингибиторы CD179b включают в себя без ограничения малые молекулы, рекомбинантные белки, клетки, экспрессирующие CAR, связывающий CD179b, например CART, и антитела к CD179b (например, моно- или биспецифическое антитело к CD179b) и их фрагменты. В некоторых вариантах осуществления ингибиторы CD179b могут применяться для лечения B-клеточного злокачественного новообразования, описанного в данном документе. В варианте осуществления ингибитор CD179b вводят в комбинации с ингибитором CD20, например, клеткой, экспрессирующей CAR для CD20, например, CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе, например, CAR-экспрессирующей клеткой, содержащей связывающий домен антитела, которое является мышиным, человеческим или гуманизированным.

В варианте осуществления ингибитор CD179b представляет собой антитело к CD179b или его фрагмент. В одном варианте осуществления антитело к 179b или его фрагмент предусматривает моноклональное антитело, например, моноспецифическое или биспецифическое антитело, или его фрагмент.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD179b конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор CD179b включает в себя клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD179b, например CART, например клетку, экспрессирующую конструкцию CAR, связывающую CD179b, или кодирующую CD179b-связывающий CAR, содержащий scFv, CDR или цепи VH и VL. Например, клетку, экспрессирующую CAR, связывающий CD179b, например CART, создают путем конструирования CD179b-CAR (который содержит CD179b-связывающий домен) в клетке (например, T-клетке или NK-клетке), например, для введения в комбинации с CAR-экспрессирующей клеткой, описанной в данном документе. Также в данном документе представлены способы применения CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, для адоптивной терапии.

В другом аспекте настоящего документа представлена популяция CAR-экспрессирующих клеток, например CART-клеток или CAR-экспрессирующих NK-клеток, включающих смесь клеток, экспрессирующих CAR для CD20 и CAR для CD179b. Например, в одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток может включать первую клетку, экспрессирующую первый CAR для CD20, и вторую клетку, экспрессирующую CAR для CD179b.

Ингибиторы CD20

В данном документе представлены ингибиторы CD20 и комбинированные терапевтические средства, например, один или несколько ингибиторов CD20. В некоторых вариантах осуществления способы и композиции (например, клетки, экспрессирующие CAR для CD20), описанные в данном документе, дополнительно включают в себя второй ингибитор CD20. Например, клетки-экспрессирующие CAR для CD20, описанные в данном документе, вводят в комбинации со вторым ингибитором CD20. Ингибитор CD20 включает в себя без ограничения клетку, экспрессирующую CAR для CD20, например, клетку CD20 CART, NK-клетку, экспрессирующую CAR для CD20, или антитело к CD20 (например, моно- или биспецифическое антитело к CD20) или его фрагмент.

В одном варианте осуществления второй ингибитор CD20 представляет собой антитело к CD20 или его фрагмент. В варианте осуществления антитело представляет собой моноспецифическое антитело, и в другом варианте осуществления антитело представляет собой биспецифическое антитело. В варианте осуществления ингибитор CD20 представляет собой химерное моноклональное антитело мыши/человека, например ритуксимаб. В варианте осуществления ингибитор CD20 представляет собой моноклональное антитело человека, такое как офатумумаб. В варианте осуществления ингибитор CD20 представляет собой гуманизированное антитело, такое как окрелизумаб, велтузумаб, обинутузумаб, окаратузумаб или PRO131921 (Genentech). В варианте осуществления ингибитор CD20 представляет собой слитый белок, содержащий часть антитела к CD20, такого как TRU-015 (Trubion Pharmaceuticals).

Например, антитело к CD20 выбрано из ритуксимаба, офатумумаба, окрелизумаба, велтузумаба, обинутузумаба, TRU-015 (Trubion Pharmaceuticals), окаратузумаба или Pro131921 (Genentech). См., например, Lim et al. Haematologica. 95.1(2010):135-43.

В некоторых вариантах осуществления антитело к CD20 содержит ритуксимаб. Ритуксимаб представляет собой химерное моноклональное антитело мыши/человека IgG1 каппа, которое связывается с CD20 и вызывает цитолиз клетки, экспрессирующей CD20, например, описанной в www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2010/103705s5311lbl.pdf.

В некоторых вариантах осуществления ритуксимаб вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. Например, каждая инфузия предусматривает приблизительно 500-2000 мг (например, приблизительно 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000-1100, 1100-1200, 1200-1300, 1300-1400, 1400-1500, 1500-1600, 1600-1700, 1700-1800, 1800-1900, или 1900-2000 мг) ритуксимаба.

В некоторых вариантах осуществления ритуксимаб вводят в дозе, составляющей от 150 мг/м² до 750 мг/м², например, приблизительно 150-175 мг/м², 175-200 мг/м², 200-225 мг/м², 225-250 мг/м², 250-300 мг/м², 300-325 мг/м², 325-350 мг/м², 350-375 мг/м², 375-400 мг/м², 400-425 мг/м², 425-450 мг/м², 450-475 мг/м², 475-500 мг/м², 500-525 мг/м², 525-550 мг/м², 550-575 мг/м², 575-600 мг/м², 600-625 мг/м², 625-650 мг/м², 650-675 мг/м² или 675-700 мг/м², где м² указывает площадь поверхности тела субъекта.

В некоторых вариантах осуществления ритуксимаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 4 дня, например, 4, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, ритуксимаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 0,5 недели, например, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления ритуксимаб вводят в дозе и с интервалом дозирования, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 недель или больше. Например, ритуксимаб вводят в дозе и с интервалом дозирования, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит офатумумаб. Офатумумаб представляет собой моноклональное антитело IgG1κ человека к CD20 с молекулярной массой примерно 149 кДа. Например, офатумумаб получают с помощью трансгенной мыши и технологии гибридомы и экспрессируют и очищают из линии рекомбинантных клеток мыши (NS0). См., например, www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2009/125326lbl.pdf; а также клиническое испытание с идентификационными номерами NCT01363128, NCT01515176, NCT01626352 и NCT01397591.

В некоторых вариантах осуществления офатумумаб вводят в виде внутривенной инфузии. Например, каждая инфузия предусматривает приблизительно 150-3000 мг (например, приблизительно 150-200, 200-250, 250-300, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000-1200, 1200-1400, 1400-1600, 1600-1800, 1800-2000, 2000-2200, 2200-2400, 2400-2600, 2600-2800, или 2800-3000 мг) офатумумаба.

В некоторых вариантах осуществления офатумумаб вводят с интервалом дозирования, составляющий по меньшей мере 4 дня, например, 4, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, офатумумаб вводят с интервалом дозирования, составляющий по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления офатумумаб вводят в дозе и с интервалом дозирования, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 1 недели, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, офатумумаб вводят в дозе и с интервалом дозирования, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 2 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит окрелизумаб. Окрелизумаб представляет собой моноклональное антитело к CD20, например, описанное в клинических испытаниях с идентификационными номерами NCT00077870, NCT01412333, NCT00779220, NCT00673920, NCT01194570 и в Kappos et al. Lancet. 19.378(2011):1779-87.

В некоторых вариантах осуществления окрелизумаб вводят в виде внутривенной инфузии. Например, каждая инфузия предусматривает приблизительно 50-2000 мг (например, приблизительно 50-100, 100-150, 150-200, 200-250, 250-300, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000-1100, 1100-1200, 1200-1300, 1300-1400, 1400-1500, 1500-1600, 1600-1700, 1700-1800, 1800-1900, или 1900-2000 мг) окрелизумаба.

В некоторых вариантах осуществления окрелизумаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, окрелизумаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления окрелизумаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, окрелизумаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит велтузумаб. Велтузумаб представляет собой гуманизированное моноклональное антитело к CD20. См., например, клиническое испытание с идентификационными номерами NCT00547066, NCT00546793, NCT01101581 и Goldenberg et al. Leuk Lymphoma. 51(5)(2010):747-55.

В некоторых вариантах осуществления велтузумаб вводят подкожно или внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления велтузумаб вводят в дозе, составляющей 50-800 мг/м², например, приблизительно 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190, 190-200, 200-225, 225-250, 250-275, 275-300, 300-325, 325-350, 350-375, 375-400, 400-425, 425-450, 450-475, 475-500, 500-525, 525-550, 550-575, 575-600, 600-625, 625-650, 650-675, 675-700, 700-725, 725-750, 750-775, или 775-800 мг/м². В некоторых вариантах осуществления велтузумаб вводят дозой, составляющей 50-400 мг, например, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, или 400 мг.

В некоторых вариантах осуществления велтузумаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, велтузумаб вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше.

В некоторых вариантах осуществления велтузумаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 2 недель, например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, велтузумаб вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 4 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит GA101. GA101 (также называемое обинутузумаб или RO5072759) представляет собой гуманизированное и полученное с помощью гликоинженерии моноклональное антитело к CD20. См., например, Robak. Curr. Opin. Investig. Drugs. 10.6(2009):588-96; клинические испытания с идентификационными номерами NCT01995669, NCT01889797, NCT02229422 и NCT01414205 и www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2013/125486s000lbl.pdf.

В некоторых вариантах осуществления GA101 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. Например, каждая инфузия предусматривает приблизительно 100-3000 мг (например, приблизительно 100-150, 150-200, 200-250, 250-500, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000-1200, 1200-1400, 1400-1600, 1600-1800, 1800-2000, 2000-2200, 2200-2400, 2400-2600, 2600-2800, или 2800-3000 мг) GA101.

В некоторых вариантах осуществления GA101 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 7 дней, например, 7, 14, 21, 28, 35 дней или больше. Например, GA101 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 неделю, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 24, 26, 28, 20, 22, 24, 26, 28, 30 недель или больше. Например, GA101 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 месяц, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, или больше месяцев. В некоторых вариантах осуществления GA101 вводят с интервалом дозирования, составляющим 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, или 14 дней.

В некоторых вариантах осуществления GA101 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в течение периода времени, например, по меньшей мере 1 недели, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 недель или больше, или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 40, 50, 60 месяцев или больше, или 1, 2, 3, 4, 5 лет или больше. Например, GA101 вводят в дозе и с интервалом введения дозы, описанными в данном документе, в общей сложности по меньшей мере в 2 дозах на цикл лечения (например, по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 20, или больше доз на цикл лечения).

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит AME-133v. AME-133v (также называемое LY2469298 или окаратузумаб) представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgG1 к CD20 с повышенной аффинностью в отношении рецептора FcγRIIIa и повышенной антителозависимой клеточной цитотоксической (ADCC) активностью по сравнению с ритуксимабом. См., например, Robak et al. BioDrugs 25.1(2011):13-25 и Forero-Torres et al. Clin Cancer Res. 18.5(2012):1395-403.

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит PRO131921. PRO131921 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело к CD20, сконструированное для обеспечения более эффективного связывания с FcγRIIIa и повышенной ADCC по сравнению с ритуксимабом. См., например, Robak et al. BioDrugs 25.1(2011):13-25; Casulo et al. Clin Immunol. 154.1(2014):37-46; клиническое испытание с идентификационным номером NCT00452127. В некоторых вариантах осуществления PRO131921 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления PRO131921 вводят в дозе, составляющей от 15 мг/м² до 1000 мг/м², например, приблизительно 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, 35-40, 40-45, 45-50, 50-55, 55-60, 60-65, 65-70, 70-75, 75-80, 80-85, 85-90, 90-95, 95-100, 100-125, 125-150, 150-175, 175-200, 200-226, 225-250, 250-300, 300-325, 325-350, 350-375, 375-400, 400-425, 425-450, 450-475, 475-500, 500-525, 525-550, 550-575, 575-600, 600-625, 625-650, 650-675, 675-700, 700-725, 725-750, 750-775, 775-800, 800-825, 825-850, 850-875, 875-900, 900-925, 925-950, 950-975, или 975-1000 мг/м², где м² означает площадь поверхности тела субъекта.

В некоторых аспектах антитело к CD20 содержит TRU-015. TRU-015 представляет собой слитый белок, действующий в отношении CD20, полученный из доменов антитела к CD20. TRU-015 является меньшим, чем моноклональные антитела, однако сохраняет Fc-опосредованные эффекторные функции. См., например, Robak et al. BioDrugs 25.1(2011):13-25. TRU-015 содержит одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), связывающий CD20, связанный с шарнирным участком IgG1 человека, доменами CH2 и CH3, однако не содержит доменов CH1 и CL. В некоторых случаях TRU-015 вводят внутривенно, например, в виде внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления TRU-015 вводят в дозе, составляющей 0,01-30 мг/кг, например, 0,01-0,015, 0,015-0,05, 0,05-0,15, 0,15-0,5, 0,5-1, 1-1,5, 1,5-2,5, 2,5-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, или 25-30 мг/кг веса тела. В некоторых вариантах осуществления TRU-015 вводят с интервалом дозирования, составляющим по меньшей мере 1 день, например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, или 14 дней. См., например, Burge et al. Clin Ther. 30,10(2008):1806-16.

В некоторых вариантах осуществления антитело к CD20, описанное в данном документе, конъюгируется или иным образом связывается с терапевтическим средством, например, химиотерапевтическим средством (например, химиотерапевтическим средством, описанным в данном документе, например, цитоксаном, флударабином, ингибитором гистондеацетилазы, деметилирующим средством, пептидной вакциной, противоопухолевым антибиотиком, ингибитором тирозинкиназы, алкилирующим средством, ингибитором образования микротрубочек или антимитотическим средством, антителом к CD20 или конъюгатом антитела к CD20 с лекарственным средством, описанным в данном документе), противоаллергическим средством, средством против тошноты (или противорвотным средством), обезболивающим средством или цитопротекторным средством, описанными в данном документе.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен CAR (например, антигенсвязывающий домен CD19, ROR1, CD20, CD22, CD123, CD10, CD34, FLT-3, CD79b, CD179b или CD79a) содержит часть scFv, например, человеческую, гуманизированную или мышиную часть scFv. scFv может предшествовать необязательная лидерная последовательность, такая как представленная под SEQ ID NO: 797, и последующая необязательная шарнирная последовательность, такая как представленная под SEQ ID NO: 799, или SEQ ID NO: 814, или SEQ ID NO: 816, трансмембранная область, такая как представленная под SEQ ID NO: 801, внутриклеточный сигнальный домен, который включает в себя SEQ ID NO: 803, и последовательность CD3-дзета, которая включает в себя SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, например, где домены являются смежными и находятся в одной и той же рамке считывания, образуя единый слитый белок.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение охватывает конструкцию рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащую молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR (например, CAR для CD19, CAR для ROR1, CAR для CD20, CAR для CD22, CAR для CD123, CAR для CD10, CAR для CD34, CAR для FLT-3, CAR для CD79b, CAR для CD179b или CAR для CD79a), где молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антигенсвязывающий домен, например, описанный в данном документе, например, который является смежным с последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей внутриклеточный сигнальный домен, и находится в той же самой рамкой считывания, что и она. Иллюстративный внутриклеточный сигнальный домен, который может применяться в CAR, включает без ограничения один или несколько внутриклеточных сигнальных доменов, например, CD3-дзета, CD28, 4-1BB и т. п. В некоторых случаях CAR может содержать любую комбинацию из CD3-дзета, CD28, 4-1BB и т. п.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен (например, антигенсвязывающий домен CD19, ROR1, CD20, CD22, CD123, CD10, CD34, FLT-3, CD79b, CD179b или CD79a) характеризуется конкретными функциональными особенностями или свойствами антитела или фрагмента антитела. Например, в одном варианте осуществления часть композиции CAR по настоящему изобретению, которая содержит антигенсвязывающий домен, специфически связывает B-клеточный антиген человека (например, CD19, ROR1, CD20, CD22, CD123, CD10, CD34, FLT-3, CD79b, CD179b или CD79a) или его фрагмент. В определенных вариантах осуществления scFv является смежным с лидерной последовательностью и находится в той же рамке считывания, что и она. В одном аспекте лидерная последовательность представляет собой полипептидную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 797.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой фрагмент, например, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv). В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен представляет собой Fv, Fab, (Fab')2 или бифункциональное (например, биспецифическое) гибридное антитело (например, Lanzavecchia et al., Eur. J. Immunol. 17, 105 (1987)). В одном аспекте антитела и их фрагменты по настоящему изобретению связывают белок В-клетки или его часть с аффинностью дикого типа или усиленной аффинностью. В некоторых случаях scFv человека может быть получен из дисплейной библиотеки.

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен, например scFv, содержит по меньшей мере одну мутацию, так что мутантный scFv обеспечивает улучшенную стабильность для конструкции CAR. В другом варианте осуществления антигенсвязывающий домен, например scFv, содержит по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 мутаций, возникающих в результате процесса гуманизации, так что мутантный scFv обеспечивает улучшенную стабильность для конструкции CAR.

В одном варианте осуществления популяция CAR-экспрессирующих клеток включает, например, первую клетку, экспрессирующую CAR (например, CAR для CD19, CAR для ROR1, CAR для CD20, CAR для CD22, CAR для CD123, CAR для CD10, CAR для CD34, CAR для FLT-3, CAR для CD79b, CAR для CD179b или CAR для CD79a), который включает в себя первичный внутриклеточный сигнальный домен, и вторую клетку, экспрессирующую CAR (например, CAR для CD19, CAR для ROR1, CAR для CD20, CAR для CD22, CAR для CD123, CAR для CD10, CAR для CD34, CAR для FLT-3, CAR для CD79b, CAR для CD179b или CAR для CD79a), которая включает в себя вторичный сигнальный домен.

В некоторых вариантах осуществления первая и вторая молекулы CAR экспрессируются в разных клетках, например, в первой и второй клетках.

В некоторых вариантах осуществления первая и вторая молекулы CAR экспрессируются в одной и той же клетке, например, в одной и той же иммунной эффекторной клетке.

В одном варианте осуществления первая молекула CAR представляет собой CAR для CD19, и вторая молекула CAR представляет собой CAR для CD22. В одном варианте осуществления первая молекула CAR представляет собой CAR для CD19, и вторая молекула CAR представляет собой CAR для CD20. В одном варианте осуществления первая молекула CAR представляет собой CAR для CD20, и вторая молекула CAR представляет собой CAR для CD22. В некоторых вариантах осуществления одна клетка или разные клетки экспрессируют два CAR (например, CAR для CD19 и CAR для CD20, описанные в данном документе; CAR для CD19 и CAR для CD22, описанные в данном документе; CAR для CD20, описанный в данном документе, и CAR для CD22, описанный в данном документе; или больше двух CAR, например, CAR для CD22, описанный в данном документе, CAR для CD20, описанный в данном документе, и CAR для CD19, описанный в данном документе. В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота, кодирующая более чем одну молекулу CAR, может быть введена в клетку в одном векторе, например, с сайтом 2A или IRES, расположенным между нуклеиновой кислотой, кодирующей первую и вторую молекулы CAR, или может быть введена более чем в одном векторе, например, первом векторе, содержащем последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую первый CAR, и втором векторе, содержащем последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую второй CAR.

Фармацевтические композиции и средства для лечения

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать CAR-экспрессирующую клетку, несколько клеток, экспрессирующих CAR, описанных в данном документе, в комбинации с одним или несколькими фармацевтически или физиологически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. Такие композиции могут содержать буферы, такие как нейтральный буферный солевой раствор, фосфатный буферный солевой раствор и т. п.; углеводы, такие как глюкоза, манноза, сахароза или декстраны, маннит; белки; полипептиды или аминокислоты, такие как глицин; антиоксиданты; хелатирующие средства, такие как EDTA или глутатион; вспомогательные средства (например, гидроксид алюминия) и консерванты. Композиции по настоящему изобретению в одном аспекте составляют для внутривенного введения.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить с помощью способа, подходящего для заболевания, подлежащего лечению (или предупреждению). Количество и частота введения будут определяться на основании таких факторов, как состояние пациента, а также тип и тяжесть заболевания пациента, хотя подходящие дозы могут быть определены путем клинических испытаний.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция практически не содержит, например, в ней отсутствуют выявляемые уровни заражающего вещества, например, выбранного из группы, состоящей из эндотоксина, микоплазмы, способного реплицироваться лентивируса (RCL), p24, нуклеиновой кислоты VSV-G, gag HIV, микрогранул, покрытых остаточными антителами к CD3/антителами к CD28, антител мыши, объединенной сыворотки человека, альбумина бычьей сыворотки, бычьей сыворотки, компонентов культуральных сред, клеточных или плазмидных компонентов для упаковки векторов, бактерии и гриба. В одном варианте осуществления бактерия представляет по меньшей мере таковую, выбранную из группы, состоящей из Alcaligenes faecalis, Candida albicans, Escherichia coli, Haemophilus influenza, Neisseria meningitides, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumonia и Streptococcus pyogenes группы A.

В случае если указано "иммунологически эффективное количество", "противоопухолевое эффективное количество", "эффективное для ингибирования опухоли количество" или "терапевтическое количество", - точное количество композиций по настоящему изобретению, подлежащих введению, может быть определено врачом с учетом индивидуальных различий в возрасте, весе, размере опухоли, степени инфекции или метастазирования и состояния пациента (субъекта). В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, содержащая клетки, например, Т-клетки или NK-клетки, описанные в данном документе, может быть введена в дозе, составляющей от 10⁴ до 10⁹ клеток/кг веса тела, в некоторых случаях от 10⁵ до 10⁶ клеток/кг веса тела, включая все целочисленные значения в пределах этих диапазонов. В некоторых вариантах осуществления клетки, например, Т-клетки или NK-клетки, описанные в данном документе, могут быть введены при 3×10⁴, 1×10⁶, 3×10⁶ или 1×10⁷ клеток/кг веса тела. Композиции на основе клеток можно также вводить множество раз в этих дозах. Клетки можно вводить с помощью инфузионных методик, которые являются общеизвестными в иммунотерапии (см., например, Rosenberg et al., New Eng. J. of Med. 319:1676, 1988).

В некоторых аспектах может потребоваться введение субъекту активированных клеток, например Т-клеток или NK-клеток, а затем последовательный повторный отбор крови (или осуществление афереза), активирование из нее клеток в соответствии с настоящим изобретением и осуществление повторной инфузии этих активированных и размноженных клеток пациенту. Этот процесс можно осуществлять несколько раз каждые несколько недель. В некоторых аспектах клетки, например Т-клетки или NK-клетки, можно активировать из образцов крови объемом от 10 куб. см до 400 куб. см. В некоторых аспектах клетки, например Т-клетки или NK-клетки, активируют из образцов крови объемом 20 куб. см, 30 куб. см, 40 куб. см, 50 куб. см, 60 куб. см, 70 куб. см, 80 куб. см, 90 куб. см или 100 куб. см.

Введение заявленных композиций можно осуществлять с помощью любого подходящего способа, в том числе аэрозольной ингаляции, инъекции, приема внутрь, трансфузии, имплантации или трансплантации. Композиции, описанные в данном документе, можно вводить пациенту трансартериально, подкожно, внутрикожно, внутрь опухоли, интранодально, интрамедуллярно, внутримышечно, с помощью внутривенной (i.v.) инъекции или интраперитонеально. В одном аспекте композиции на основе клеток, например, композиции на основе T-клеток или NK-клеток по настоящему изобретению, вводят пациенту посредством внутрикожной или подкожной инъекции. В одном аспекте композиции на основе клеток, например, композиции на основе T-клеток или NK-клеток по настоящему изобретению, вводят пациенту посредством i.v. инъекции. Композиции на основе клеток, например, композиции на основе клетки T-клеток или NK-клеток, можно инъецировать непосредственно в опухоль, лимфатический узел или участок инфекции.

В определенном иллюстративном аспекте субъект может подвергаться лейкаферезу, при этом лейкоциты собирают, обогащают или истощают ex vivo для отбора и/или выделения клеток, представляющих интерес, например T-клеток или NK-клеток. Такие изоляты, например изоляты T-клеток или NK-клеток, можно размножать с помощью способов, известных из уровня техники, и обрабатывать таким образом, чтобы можно было ввести одну или несколько конструкций CAR по настоящему изобретению, за счет чего обеспечивается создание CAR-экспрессирующей клетки, например, T-клетки CAR или CAR-экспрессирующей NK-клетки по настоящему изобретению. Субъекты, нуждающиеся в этом, могут затем подвергаться стандартному лечению посредством высокодозной химиотерапии с последующей трансплантацией стволовых клеток периферической крови. В определенных аспектах, после или параллельно с трансплантатом субъекты получают инфузию размноженных CAR-экспрессирующих клеток по настоящему изобретению. В дополнительном аспекте размноженные клетки вводят до или после хирургического вмешательства.

В вариантах осуществления выполняют лимфодеплецию у субъекта, например, перед введением одной или нескольких клеток, которые экспрессируют CAR, описанный в данном документе, например, CD20-связывающий CAR, описанный в данном документе. В вариантах осуществления лимфодеплеция предусматривает введение одного или нескольких из мелфалана, цитоксана, циклофосфамида и флударабина.

Дозировка вышеуказанных средств для лечения, подлежащих введению пациенту, будет варьировать в зависимости от точной природы состояния, лечение которого осуществляют, и реципиента лечения. Определение доз для введения человеку можно осуществлять в соответствии с принятыми в данной области техники практическими подходами. Доза для терапевтического средства, например антитела, например CAMPATH, например, может находиться, как правило, например, в диапазоне от 1 до приблизительно 100 мг для взрослого пациента, например, при введении ежедневно в течение периода от 1 до 30 дней. Подходящая суточная доза составляет от 1 до 10 мг в день, хотя в некоторых случаях могут применяться более высокие дозы, составляющие до 40 мг в день (описанные в патенте США № 6120766).

В одном варианте осуществления CAR вводят в клетки, например Т-клетки или NK-клетки, например, с использованием in vitro транскрипции, и субъект (например, человек) получает начальное введение CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток по настоящему изобретению, и одно или несколько последующих введений CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток по настоящему изобретению, где одно или несколько из последующих введений вводят менее чем через 15 дней, например, через 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, или 2 дня после предыдущего введения. В одном варианте осуществления субъекту (например, человеку) осуществляют более чем одно введение CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток по настоящему изобретению, в неделю, например, осуществляют 2, 3 или 4 введения CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток по настоящему изобретению, в неделю. В одном варианте осуществления субъект (например, субъект-человек) получает более чем одно введение CAR-экспрессирующих клеток, например Т-клеток CAR, в неделю или CAR-экспрессирующих NK-клеток (например, 2, 3 или 4 введения в неделю) (также называемые в данном документе циклом), с последующим отсутствием в течение недели введений CAR-экспрессирующей клетки, например T-клетки CAR, или введений CAR-экспрессирующей NK-клетки, а затем осуществляют одно или несколько дополнительных введений субъекту CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток (например, более чем одно введение CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток, в неделю). В другом варианте осуществления субъект (например, человек) получает более чем один цикл CAR-экспрессирующих клеток, например, Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток, и время между каждым циклом составляет менее 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, или 3 дня. В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующие клетки, например, T-клетки CAR или CAR-экспрессирующие NK-клетки, вводят через день для обеспечения 3 введений в неделю. В одном варианте осуществления CAR-экспрессирующие клетки, например, T-клетки CAR или CAR-экспрессирующие NK-клетки по настоящему изобретению, вводят в течение по меньшей мере двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми или больше недель.

В некоторых вариантах осуществления субъекты могут быть взрослыми субъектами (т. e. возрастом 18 лет и старше). В определенных вариантах осуществления субъекты могут быть возрастом от 1 года до 30 лет. В некоторых вариантах осуществления субъекты являются 16-летними или старше. В определенных вариантах осуществления субъекты имеют возраст от 16 до 30 лет. В некоторых вариантах осуществления субъекты являются субъектами детского возраста (т. e. возрастом от 1 года до 18 лет).

В одном аспекте CAR-экспрессирующие клетки, например CD20 CART, получают с помощью лентивирусных вирусных векторов, таких как лентивирус. CAR-экспрессирующие клетки, например CART, полученные таким путем, будут характеризоваться стабильной экспрессией CAR.

В одном аспекте CAR-экспрессирующие клетки, например CART, временно экспрессируют векторы CAR в течение 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 дней после трансдукции. Временная экспрессия CAR может осуществляться с помощью доставки вектора на основе РНК CAR. В одном аспекте РНК CAR трансдуцируют в клетку, например NK-клетку или T-клетку, с помощью электропорации.

Потенциальной проблемой, которая может возникать у пациентов, лечение которых осуществляют с помощью временно экспрессирующих Т-клеток CAR или CAR-экспрессирующих NK-клеток (в частности, CAR-экспрессирующих клеток, несущих мышиный scFv), является анафилаксия после нескольких лечений.

Не ограничиваясь данной теорией, считается, что такой анафилактический ответ может быть вызван в результате того, что пациент проявляет гуморальный ответ в отношении CAR, т. е. антитела к CAR, имеющие изотип антитела к IgE. Считается, что клетки пациента, вырабатывающие антитела, подвергаются переключению классов с изотипа IgG (который не вызывает анафилаксии) к изотипу IgE, когда существует перерыв от десяти до четырнадцати дней от воздействия антигена.

Если у пациента имеется высокий риск образования ответа на антитело к CAR во время курса временной CAR-терапии (такого как те, что образуются в результате трансдукций РНК), то перерывы между инфузиями CART не должны длиться более десяти - четырнадцати дней.

Способы доставки с помощью биополимера

В некоторых вариантах осуществления одну или несколько CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе, можно вводить или доставлять субъекту посредством биополимерного каркаса, например биополимерного имплантата. Биополимерные каркасы могут поддерживать или усиливать доставку, размножение и/или дисперсию CAR-экспрессирующих клеток, описанных в данном документе. Биополимерный каркас содержит биосовместимый (например, который практически не вызывает воспаление или иммунный ответ) и/или биоразрушаемый полимер, который может быть встречающимся в природе или синтетическим.

Примеры подходящих биополимеров включают без ограничения агар, агарозу, альгинат, альгинатный/цемент на основе фосфата кальция (CPC), бета-галактозидазу (β-GAL), (1,2,3,4,6-пентаацетил-D-галактозу), целлюлозу, хитин, хитозан, коллаген, эластин, желатин, гиалуроновую кислоту с коллагеном, гидроксиапатит, сополимер 3-гидроксибутирата и 3-гидроксигексаноата (PHBHHx), поли(лактид), поли(капролактон) (PCL), сополимер лактида и гликолида (PLG), полиэтиленоксид (PEO), сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты (PLGA), полипропиленоксид (PPO), поливиниловый спирт (PVA), шелк, соевый белок и изолят соевого белка, отдельно или в комбинации с любой другой полимерной композицией, в любой концентрации и в любом отношении. Биополимер может быть дополнен или модифицирован молекулами, способствующими адгезии или миграции, например, пептидами, имитирующими коллаген, которые связываются с коллагеновым рецептором лимфоцитов, и/или стимулирующими молекулами для усиления доставки, размножения или функции, например противораковой активности, клеток, которые подлежат доставке. Биополимерный каркас может быть инъецируемым, например, гелем, или полутвердым веществом, или твердой композицией.

В некоторых вариантах осуществления CAR-экспрессирующие клетки, описанные в данном документе, высевают в биополимерный каркас перед доставкой субъекту. В вариантах осуществления биополимерный каркас дополнительно содержит одно или несколько дополнительных терапевтических средств, описанных в данном документе (например, другую CAR-экспрессирующую клетку, антитело или малую молекулу), или средств, которые усиливают активность CAR-экспрессирующей клетки, например, встроенные биополимеры каркаса или конъюгированные с ним. В вариантах осуществления биополимерный каркас вводят инъекцией, например внутрь опухоли, или хирургическим путем имплантируют в опухоль или в непосредственной близости от опухоли, достаточной для опосредования противоопухолевого эффекта. Дополнительные примеры биополимерный композиций и способов их доставки описаны в Stephan et al., Nature Biotechnology, 2015, 33:97-101; и WO2014/110591.

Конструкции CAR для CD20

Последовательности, применимые для осуществления настоящего изобретения, раскрыты в таблице 1, таблице 6, таблице 11 и таблице 14. По всему тексту данной заявки может быть несоответствие между текстом описания (например, таблица 1) и перечнем последовательностей, при этом текст описания имеет преимущественную силу.

Выделяли одноцепочечные вариабельные фрагменты, связывающие CD20. См. таблицу 1. scFv, связывающие CD20, клонировали в лентивирусные экспрессионные векторы CAR, содержащие CD3-дзета цепь и костимулирующую молекулу 4-1BB. См. таблицу 14. Способ клонирования дополнительно описан в разделе Примеры. Последовательности CAR для CD20 представлены ниже в таблице 1. Каждая полная аминокислотная последовательность CAR в таблице 1 включает в себя необязательную последовательность сигнального пептида из 21 аминокислоты, соответствующую аминокислотной последовательности MALPVTALLLPLALLLHAARP. Каждая полная нуклеотидная последовательность CAR в таблице 1 включает в себя необязательную нуклеотидную последовательность сигнального пептида, соответствующую первым 63 нуклеотидам, соответствующим нуклеотидной последовательности atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccc.

Таблица 1. Конструкции CAR для CD20

Номер SEQ ID Область Ab Последовательность CD20-C3H2 SEQ ID NO: 136 (Kabat) HCDR1 NYNLH SEQ ID NO: 137 (Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 138 (Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 139 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 140 (Chothia) HCDR2 YPGNYD SEQ ID NO: 141 (Chothia) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 142 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYN SEQ ID NO: 143 (IMGT) HCDR2 IYPGNYDT SEQ ID NO: 144 (IMGT) HCDR3 ARVDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 926 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYNLH SEQ ID NO: 927 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 928 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 145 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 146 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAACCTGGAGCATCCGTGAAAGTGTCTTGCAAAGCCTCCGGCTACACCTTCACCAACTACAACCTCCATTGGGTCAGACAGGCCCCCGGACAAGGACTCGAATGGATGGGAGCGATCTACCCGGGAAACTACGACACCAGCTACAACCAGAAGTTCAAGGGCCGCGTGACTATGACCGCCGATAAGAGCACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCGCTGAGGTCCGAGGACACTGCGGTGTACTACTGCGCCCGCGTGGACTTCGGACACTCACGGTATTGGTACTTCGACGTCTGGGGACAGGGCACTACCGTGACCGTGTCGAGC SEQ ID NO: 147 (Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 148 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 149 (Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 150 (Chothia) LCDR1 TSSVSS SEQ ID NO: 151 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 152 (Chothia) LCDR3 WTFNPP SEQ ID NO: 153 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 154 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 155 (IMGT) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 929 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 930 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 931 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 156 VL DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRATSSVSSMNWYQQKPGKAPKPLIHATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 157 ДНК VL GATATCCAGCTGACTCAGTCCCCGTCATTCCTGTCCGCCTCCGTGGGAGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCACTTCCTCCGTGTCAAGCATGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAGGCCCCAAAGCCGCTGATTCACGCGACGTCCAACCTGGCTTCCGGCGTGCCGAGCCGGTTCTCCGGCTCGGGGAGCGGGACTGAGTACACCCTGACTATTTCCTCGCTTCAACCCGAGGACTTTGCTACCTACTACTGCCAACAGTGGACCTTCAATCCTCCGACATTCGGACAGGGTACCAAGTTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 158 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 159 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRATSSVSSMNWYQQKPGKAPKPLIHATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 160 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaacctggagcatccgtgaaagtgtcttgcaaagcctccggctacaccttcaccaactacaacctccattgggtcagacaggcccccggacaaggactcgaatggatgggagcgatctacccgggaaactacgacaccagctacaaccagaagttcaagggccgcgtgactatgaccgccgataagagcacctccaccgcctacatggaactgtcctcgctgaggtccgaggacactgcggtgtactactgcgcccgcgtggacttcggacactcacggtattggtacttcgacgtctggggacagggcactaccgtgaccgtgtcgagcggcggaggaggttcgggagggggcggatcagggggcggcggcagcggtggagggggctcggatatccagctgactcagtccccgtcattcctgtccgcctccgtgggagacagagtgaccatcacctgtcgggccacttcctccgtgtcaagcatgaactggtatcagcagaagcccgggaaggccccaaagccgctgattcacgcgacgtccaacctggcttccggcgtgccgagccggttctccggctcggggagcgggactgagtacaccctgactatttcctcgcttcaacccgaggactttgctacctactactgccaacagtggaccttcaatcctccgacattcggacagggtaccaagttggaaatcaag SEQ ID NO: 161 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRATSSVSSMNWYQQKPGKAPKPLIHATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 162 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaacctggagcatccgtgaaagtgtcttgcaaagcctccggctacaccttcaccaactacaacctccattgggtcagacaggcccccggacaaggactcgaatggatgggagcgatctacccgggaaactacgacaccagctacaaccagaagttcaagggccgcgtgactatgaccgccgataagagcacctccaccgcctacatggaactgtcctcgctgaggtccgaggacactgcggtgtactactgcgcccgcgtggacttcggacactcacggtattggtacttcgacgtctggggacagggcactaccgtgaccgtgtcgagcggcggaggaggttcgggagggggcggatcagggggcggcggcagcggtggagggggctcggatatccagctgactcagtccccgtcattcctgtccgcctccgtgggagacagagtgaccatcacctgtcgggccacttcctccgtgtcaagcatgaactggtatcagcagaagcccgggaaggccccaaagccgctgattcacgcgacgtccaacctggcttccggcgtgccgagccggttctccggctcggggagcgggactgagtacaccctgactatttcctcgcttcaacccgaggactttgctacctactactgccaacagtggaccttcaatcctccgacattcggacagggtaccaagttggaaatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C5H1 SEQ ID NO: 217 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 218 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 219 (Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 220 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 221 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 222 (Chothia) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 223 (IMGT) HCDR1 GYTFTSYN SEQ ID NO: 224 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 225 (IMGT) HCDR3 ARSYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 941 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTSYNMH SEQ ID NO: 942 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 943 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 226 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTMTADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 227 ДНК VH CAAGTGCAGCTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAACCCGGTGCTTCAGTGAAAGTGTCCTGCAAGGCCTCCGGTTACACCTTCACCTCCTACAACATGCACTGGGTCCGCCAAGCCCCGGGCCAGGGACTCGAATGGATGGGAGCCATCTACCCTGGCAACGGGGACACCTCATACAACCCTAAGTTCAAGGGCAGAGTGACCATGACTGCGGACAAGTCCACTAGAACAGCGTACATGGAGCTGAGCAGCCTGCGGTCCGAGGATACTGCCGTGTACTACTGCGCCCGCTCCTACTTCTACGGAAGCTCGTCGTGGTACTTCGATGTCTGGGGACAGGGCACCACTGTGACTGTGTCCTCC SEQ ID NO: 228 (Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 229 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 230 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 231 (Chothia) LCDR1 SSSVSS SEQ ID NO: 232 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 233 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 234 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 235 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 236 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 944 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 945 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 988 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 237 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSSMHWYQQKPGQAPRPLIFATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 238 ДНК VL GAAATTGTGCTGACTCAGAGCCCCGCCACCCTGAGCTTGTCCCCCGGGGAAAGGGCAACGCTGTCATGCCGCGCCTCGTCATCCGTGTCCTCCATGCATTGGTACCAGCAGAAGCCGGGACAGGCCCCTCGGCCGCTGATCTTCGCCACCTCCAATCTCGCTTCCGGCATTCCGGCCCGGTTCTCGGGAAGCGGGTCGGGGACCGACTATACCCTGACCATCTCTAGCCTTGAACCTGAGGACGCCGCGGTGTACTATTGTCAACAGTGGATCTTTAACCCCCCAACCTTCGGTGGAGGCACCAAAGTGGAGATTAAG SEQ ID NO: 239 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 240 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTMTADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSSMHWYQQKPGQAPRPLIFATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 241 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtgcagctcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaacccggtgcttcagtgaaagtgtcctgcaaggcctccggttacaccttcacctcctacaacatgcactgggtccgccaagccccgggccagggactcgaatggatgggagccatctaccctggcaacggggacacctcatacaaccctaagttcaagggcagagtgaccatgactgcggacaagtccactagaacagcgtacatggagctgagcagcctgcggtccgaggatactgccgtgtactactgcgcccgctcctacttctacggaagctcgtcgtggtacttcgatgtctggggacagggcaccactgtgactgtgtcctccggtggcggaggctcgggcggaggcggaagcggcggcgggggatcgggaggaggagggtccgaaattgtgctgactcagagccccgccaccctgagcttgtcccccggggaaagggcaacgctgtcatgccgcgcctcgtcatccgtgtcctccatgcattggtaccagcagaagccgggacaggcccctcggccgctgatcttcgccacctccaatctcgcttccggcattccggcccggttctcgggaagcgggtcggggaccgactataccctgaccatctctagccttgaacctgaggacgccgcggtgtactattgtcaacagtggatctttaaccccccaaccttcggtggaggcaccaaagtggagattaag SEQ ID NO: 242 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTMTADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSSMHWYQQKPGQAPRPLIFATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 243 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtgcagctcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaacccggtgcttcagtgaaagtgtcctgcaaggcctccggttacaccttcacctcctacaacatgcactgggtccgccaagccccgggccagggactcgaatggatgggagccatctaccctggcaacggggacacctcatacaaccctaagttcaagggcagagtgaccatgactgcggacaagtccactagaacagcgtacatggagctgagcagcctgcggtccgaggatactgccgtgtactactgcgcccgctcctacttctacggaagctcgtcgtggtacttcgatgtctggggacagggcaccactgtgactgtgtcctccggtggcggaggctcgggcggaggcggaagcggcggcgggggatcgggaggaggagggtccgaaattgtgctgactcagagccccgccaccctgagcttgtcccccggggaaagggcaacgctgtcatgccgcgcctcgtcatccgtgtcctccatgcattggtaccagcagaagccgggacaggcccctcggccgctgatcttcgccacctccaatctcgcttccggcattccggcccggttctcgggaagcgggtcggggaccgactataccctgaccatctctagccttgaacctgaggacgccgcggtgtactattgtcaacagtggatctttaaccccccaaccttcggtggaggcaccaaagtggagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C2H1 SEQ ID NO: 1 (Kabat) HCDR1 NYWMH SEQ ID NO: 2 (Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 3 (Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 4 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 5 (Chothia) HCDR2 TPTTGY SEQ ID NO: 6 (Chothia) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 7 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYW SEQ ID NO: 8 (IMGT) HCDR2 ITPTTGYP SEQ ID NO: 9 (IMGT) HCDR3 ARRKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 896 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYWMH SEQ ID NO: 897 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 898 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 10 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 11 ДНК VH CAAGTGCAACTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAACCAGGCGCATCCGTGAAAGTCTCCTGCAAAGCCTCCGGCTACACATTCACTAACTATTGGATGCATTGGGTGCGCCAGGCCCCGGGACAGGGGCTGGAGTGGATGGGGTTCATTACCCCTACCACCGGCTACCCTGAGTACAACCAGAAGTTCAAGGATAGGGTCACCATGACCGCTGACAAGTCCACCTCCACCGCGTACATGGAACTGTCATCGCTCCGGTCCGAGGATACCGCGGTGTACTACTGCGCCCGGAGAAAAGTCGGAAAGGGAGTGTATTACGCCTTGGACTACTGGGGACAGGGGACTACCGTGACCGTGTCGAGC SEQ ID NO: 12 (Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 13 (Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 15 (Chothia) LCDR1 SGNIHNY SEQ ID NO: 16 (Chothia) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR3 FWSSPW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR1 GNIHNY SEQ ID NO: 19 (IMGT) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 899 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 900 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 901 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 21 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPGKVPKLLIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 22 ДНК VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCGTCAAGCCTTAGCGCCTCCGTGGGCGACCGCGTGACCATTACTTGTCGGGCGTCGGGAAACATCCACAACTACCTCGCCTGGTACCAGCAGAAGCCGGGAAAGGTCCCCAAGCTGCTGATCTACAATACCAAGACTCTGGCCGACGGAGTGCCTTCCCGCTTTTCCGGTTCGGGAAGCGGGACTGACTACACCCTGACTATCTCCTCGCTGCAACCCGAAGATGTGGCTACGTACTACTGCCAGCACTTCTGGTCCTCTCCCTGGACCTTCGGCGGTGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 23 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 24 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPGKVPKLLIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 25 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaaccaggcgcatccgtgaaagtctcctgcaaagcctccggctacacattcactaactattggatgcattgggtgcgccaggccccgggacaggggctggagtggatggggttcattacccctaccaccggctaccctgagtacaaccagaagttcaaggatagggtcaccatgaccgctgacaagtccacctccaccgcgtacatggaactgtcatcgctccggtccgaggataccgcggtgtactactgcgcccggagaaaagtcggaaagggagtgtattacgccttggactactggggacaggggactaccgtgaccgtgtcgagcggtggaggcggctccggcggaggaggaagcgggggaggcggttcagggggcggaggaagcgacatccagatgacccagtccccgtcaagccttagcgcctccgtgggcgaccgcgtgaccattacttgtcgggcgtcgggaaacatccacaactacctcgcctggtaccagcagaagccgggaaaggtccccaagctgctgatctacaataccaagactctggccgacggagtgccttcccgcttttccggttcgggaagcgggactgactacaccctgactatctcctcgctgcaacccgaagatgtggctacgtactactgccagcacttctggtcctctccctggaccttcggcggtggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 26 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPGKVPKLLIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 27 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaaccaggcgcatccgtgaaagtctcctgcaaagcctccggctacacattcactaactattggatgcattgggtgcgccaggccccgggacaggggctggagtggatggggttcattacccctaccaccggctaccctgagtacaaccagaagttcaaggatagggtcaccatgaccgctgacaagtccacctccaccgcgtacatggaactgtcatcgctccggtccgaggataccgcggtgtactactgcgcccggagaaaagtcggaaagggagtgtattacgccttggactactggggacaggggactaccgtgaccgtgtcgagcggtggaggcggctccggcggaggaggaagcgggggaggcggttcagggggcggaggaagcgacatccagatgacccagtccccgtcaagccttagcgcctccgtgggcgaccgcgtgaccattacttgtcgggcgtcgggaaacatccacaactacctcgcctggtaccagcagaagccgggaaaggtccccaagctgctgatctacaataccaagactctggccgacggagtgccttcccgcttttccggttcgggaagcgggactgactacaccctgactatctcctcgctgcaacccgaagatgtggctacgtactactgccagcacttctggtcctctccctggaccttcggcggtggcactaaggtcgagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C2H2 SEQ ID NO: 28 (Kabat) HCDR1 NYWMH SEQ ID NO: 29 (Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 30 (Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 31 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 32 (Chothia) HCDR2 TPTTGY SEQ ID NO: 33 (Chothia) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 34 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYW SEQ ID NO: 35 (IMGT) HCDR2 ITPTTGYP SEQ ID NO: 36 (IMGT) HCDR3 ARRKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 902 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYWMH SEQ ID NO: 903 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 904 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 37 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 38 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAATCAGGAGCAGAAGTCAAGAAGCCCGGAAGCTCTGTCAAAGTGTCCTGCAAGGCCTCCGGTTACACCTTCACCAACTATTGGATGCACTGGGTCAGACAGGCCCCGGGACAGGGCTTGGAATGGATGGGTTTCATCACTCCAACCACCGGTTACCCGGAGTACAACCAGAAGTTTAAGGACCGCGTGACCATTACTGCCGACAAGTCCACGAGCACCGCTTACATGGAACTTAGCAGCCTGCGGTCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGCGCGCGGAGGAAGGTCGGAAAGGGAGTGTACTACGCACTGGACTACTGGGGCCAGGGAACCACCGTGACTGTGTCCTCC SEQ ID NO: 39 (Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 40 (Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 41 (Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 42 (Chothia) LCDR1 SGNIHNY SEQ ID NO: 43 (Chothia) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 44 (Chothia) LCDR3 FWSSPW SEQ ID NO: 45 (IMGT) LCDR1 GNIHNY SEQ ID NO: 46 (IMGT) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 47 (IMGT) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 905 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 906 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 907 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 48 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPGKVPKLLIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 49 ДНК VL GATATTCAGATGACCCAGTCCCCTTCATCCCTGAGCGCCTCAGTGGGCGATAGAGTGACCATCACTTGTCGCGCCTCGGGCAATATCCACAACTACCTCGCCTGGTACCAGCAGAAGCCGGGAAAAGTGCCTAAGCTGCTGATCTACAACACTAAGACCCTGGCGGATGGAGTGCCCAGCCGGTTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACAGACTACACCCTCACCATCTCCTCGCTGCAACCAGAGGACGTGGCTACCTACTACTGCCAGCATTTCTGGTCGTCCCCCTGGACTTTCGGAGGGGGGACCAAAGTGGAGATTAAG SEQ ID NO: 50 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 51 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPGKVPKLLIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 52 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccaatcaggagcagaagtcaagaagcccggaagctctgtcaaagtgtcctgcaaggcctccggttacaccttcaccaactattggatgcactgggtcagacaggccccgggacagggcttggaatggatgggtttcatcactccaaccaccggttacccggagtacaaccagaagtttaaggaccgcgtgaccattactgccgacaagtccacgagcaccgcttacatggaacttagcagcctgcggtccgaggacactgccgtgtattactgcgcgcggaggaaggtcggaaagggagtgtactacgcactggactactggggccagggaaccaccgtgactgtgtcctccggtggcggagggtcgggaggggggggctcgggaggaggagggtccgggggcggtggctcagatattcagatgacccagtccccttcatccctgagcgcctcagtgggcgatagagtgaccatcacttgtcgcgcctcgggcaatatccacaactacctcgcctggtaccagcagaagccgggaaaagtgcctaagctgctgatctacaacactaagaccctggcggatggagtgcccagccggttctccggctccggcagcggcacagactacaccctcaccatctcctcgctgcaaccagaggacgtggctacctactactgccagcatttctggtcgtccccctggactttcggaggggggaccaaagtggagattaag SEQ ID NO: 53 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPGKVPKLLIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDVATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 54 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccaatcaggagcagaagtcaagaagcccggaagctctgtcaaagtgtcctgcaaggcctccggttacaccttcaccaactattggatgcactgggtcagacaggccccgggacagggcttggaatggatgggtttcatcactccaaccaccggttacccggagtacaaccagaagtttaaggaccgcgtgaccattactgccgacaagtccacgagcaccgcttacatggaacttagcagcctgcggtccgaggacactgccgtgtattactgcgcgcggaggaaggtcggaaagggagtgtactacgcactggactactggggccagggaaccaccgtgactgtgtcctccggtggcggagggtcgggaggggggggctcgggaggaggagggtccgggggcggtggctcagatattcagatgacccagtccccttcatccctgagcgcctcagtgggcgatagagtgaccatcacttgtcgcgcctcgggcaatatccacaactacctcgcctggtaccagcagaagccgggaaaagtgcctaagctgctgatctacaacactaagaccctggcggatggagtgcccagccggttctccggctccggcagcggcacagactacaccctcaccatctcctcgctgcaaccagaggacgtggctacctactactgccagcatttctggtcgtccccctggactttcggaggggggaccaaagtggagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C2H3 SEQ ID NO: 55 (Kabat) HCDR1 NYWMH SEQ ID NO: 56 (Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 57 (Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 58 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 59 (Chothia) HCDR2 TPTTGY SEQ ID NO: 60 (Chothia) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 61 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYW SEQ ID NO: 62 (IMGT) HCDR2 ITPTTGYP SEQ ID NO: 63 (IMGT) HCDR3 ARRKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 908 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYWMH SEQ ID NO: 909 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 910 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 64 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 65 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAACCCGGAGCTTCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCCTCCGGTTACACCTTTACGAACTACTGGATGCATTGGGTGCGCCAGGCCCCGGGACAGGGGCTGGAATGGATGGGCTTCATTACCCCCACCACCGGATACCCCGAGTACAATCAGAAGTTCAAGGACCGGGTCACCATGACCGCCGACAAGTCAACCTCTACTGCTTACATGGAGCTGTCCAGCCTGCGGTCGGAAGATACCGCCGTGTATTACTGCGCGAGAAGGAAAGTCGGAAAGGGAGTGTACTATGCCCTGGACTACTGGGGACAGGGGACCACTGTGACTGTGTCAAGC SEQ ID NO: 66 (Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 67 (Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 68 (Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 69 (Chothia) LCDR1 SGNIHNY SEQ ID NO: 70 (Chothia) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 71 (Chothia) LCDR3 FWSSPW SEQ ID NO: 72 (IMGT) LCDR1 GNIHNY SEQ ID NO: 73 (IMGT) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 74 (IMGT) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 911 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 912 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 913 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 75 VL AIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 76 ДНК VL GCGATCCGCATGACCCAGAGCCCGTTCTCCCTGTCCGCGTCCGTGGGGGACCGCGTGACTATCACGTGTCGGGCCTCCGGGAACATCCACAACTACCTCGCATGGTACCAGCAGAAGCCGGCCAAGGCCCCTAAGTTGTTCATCTACAACACCAAGACTCTTGCCGACGGAGTGCCGTCCCGGTTTAGCGGAAGCGGTTCCGGCACCGACTACACCCTGACTATCTCGAGCCTGCAACCAGAAGATTTCGCCACTTACTACTGCCAGCACTTCTGGTCGTCCCCTTGGACATTCGGCGGCGGCACCAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 77 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 78 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 79 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaacccggagcttccgtgaaagtgtcctgcaaagcctccggttacacctttacgaactactggatgcattgggtgcgccaggccccgggacaggggctggaatggatgggcttcattacccccaccaccggataccccgagtacaatcagaagttcaaggaccgggtcaccatgaccgccgacaagtcaacctctactgcttacatggagctgtccagcctgcggtcggaagataccgccgtgtattactgcgcgagaaggaaagtcggaaagggagtgtactatgccctggactactggggacaggggaccactgtgactgtgtcaagcggaggcggaggctcggggggcggaggttcgggcggaggaggatcagggggcggcggttccgcgatccgcatgacccagagcccgttctccctgtccgcgtccgtgggggaccgcgtgactatcacgtgtcgggcctccgggaacatccacaactacctcgcatggtaccagcagaagccggccaaggcccctaagttgttcatctacaacaccaagactcttgccgacggagtgccgtcccggtttagcggaagcggttccggcaccgactacaccctgactatctcgagcctgcaaccagaagatttcgccacttactactgccagcacttctggtcgtccccttggacattcggcggcggcaccaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 80 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 81 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaacccggagcttccgtgaaagtgtcctgcaaagcctccggttacacctttacgaactactggatgcattgggtgcgccaggccccgggacaggggctggaatggatgggcttcattacccccaccaccggataccccgagtacaatcagaagttcaaggaccgggtcaccatgaccgccgacaagtcaacctctactgcttacatggagctgtccagcctgcggtcggaagataccgccgtgtattactgcgcgagaaggaaagtcggaaagggagtgtactatgccctggactactggggacaggggaccactgtgactgtgtcaagcggaggcggaggctcggggggcggaggttcgggcggaggaggatcagggggcggcggttccgcgatccgcatgacccagagcccgttctccctgtccgcgtccgtgggggaccgcgtgactatcacgtgtcgggcctccgggaacatccacaactacctcgcatggtaccagcagaagccggccaaggcccctaagttgttcatctacaacaccaagactcttgccgacggagtgccgtcccggtttagcggaagcggttccggcaccgactacaccctgactatctcgagcctgcaaccagaagatttcgccacttactactgccagcacttctggtcgtccccttggacattcggcggcggcaccaaggtcgagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C2H4 SEQ ID NO: 82 (Kabat) HCDR1 NYWMH SEQ ID NO: 83 (Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 84 (Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 85 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 86 (Chothia) HCDR2 TPTTGY SEQ ID NO: 87 (Chothia) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 88 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYW SEQ ID NO: 89 (IMGT) HCDR2 ITPTTGYP SEQ ID NO: 90 (IMGT) HCDR3 ARRKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 914 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYWMH SEQ ID NO: 915 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 FITPTTGYPEYNQKFKD SEQ ID NO: 916 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 RKVGKGVYYALDY SEQ ID NO: 91 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 92 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAAAGCGGTGCAGAAGTCAAGAAGCCCGGTTCCTCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCCTCGGGCTACACCTTCACTAATTACTGGATGCATTGGGTCCGCCAGGCGCCCGGACAGGGATTGGAATGGATGGGGTTCATCACGCCGACCACCGGATACCCGGAGTACAACCAGAAGTTCAAGGACAGAGTGACCATTACCGCCGATAAGTCCACCTCCACCGCTTACATGGAGCTCTCCTCACTGCGGTCCGAAGATACAGCCGTGTACTATTGTGCTCGCCGGAAAGTCGGAAAGGGAGTGTACTACGCCCTGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCG SEQ ID NO: 93 (Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 94 (Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 95 (Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 96 (Chothia) LCDR1 SGNIHNY SEQ ID NO: 97 (Chothia) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 98 (Chothia) LCDR3 FWSSPW SEQ ID NO: 99 (IMGT) LCDR1 GNIHNY SEQ ID NO: 100 (IMGT) LCDR2 NTK SEQ ID NO: 101 (IMGT) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 917 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASGNIHNYLA SEQ ID NO: 918 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 NTKTLAD SEQ ID NO: 919 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QHFWSSPWT SEQ ID NO: 102 VL AIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 103 ДНК VL GCCATTAGGATGACTCAGTCCCCTTTCTCCCTCTCCGCGAGCGTGGGCGACCGCGTGACGATCACTTGCCGGGCCTCGGGGAACATTCACAACTACCTGGCCTGGTACCAGCAGAAGCCGGCCAAGGCCCCTAAGCTGTTCATCTACAACACCAAGACCCTTGCGGACGGAGTGCCATCGAGATTTTCCGGCTCGGGCTCTGGGACCGATTACACTCTGACTATCTCAAGCCTGCAACCTGAGGACTTCGCCACTTACTACTGCCAGCACTTCTGGAGCAGCCCCTGGACTTTCGGTGGCGGGACCAAGGTCGAAATCAAG SEQ ID NO: 104 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 105 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 106 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccaaagcggtgcagaagtcaagaagcccggttcctccgtgaaagtgtcctgcaaagcctcgggctacaccttcactaattactggatgcattgggtccgccaggcgcccggacagggattggaatggatggggttcatcacgccgaccaccggatacccggagtacaaccagaagttcaaggacagagtgaccattaccgccgataagtccacctccaccgcttacatggagctctcctcactgcggtccgaagatacagccgtgtactattgtgctcgccggaaagtcggaaagggagtgtactacgccctggactattggggccagggcaccaccgtgaccgtgtcctcgggaggagggggttcgggcggaggcggctccggtggaggcggaagcggagggggcggatcagccattaggatgactcagtcccctttctccctctccgcgagcgtgggcgaccgcgtgacgatcacttgccgggcctcggggaacattcacaactacctggcctggtaccagcagaagccggccaaggcccctaagctgttcatctacaacaccaagacccttgcggacggagtgccatcgagattttccggctcgggctctgggaccgattacactctgactatctcaagcctgcaacctgaggacttcgccacttactactgccagcacttctggagcagcccctggactttcggtggcgggaccaaggtcgaaatcaag SEQ ID NO: 107 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 108 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccaaagcggtgcagaagtcaagaagcccggttcctccgtgaaagtgtcctgcaaagcctcgggctacaccttcactaattactggatgcattgggtccgccaggcgcccggacagggattggaatggatggggttcatcacgccgaccaccggatacccggagtacaaccagaagttcaaggacagagtgaccattaccgccgataagtccacctccaccgcttacatggagctctcctcactgcggtccgaagatacagccgtgtactattgtgctcgccggaaagtcggaaagggagtgtactacgccctggactattggggccagggcaccaccgtgaccgtgtcctcgggaggagggggttcgggcggaggcggctccggtggaggcggaagcggagggggcggatcagccattaggatgactcagtcccctttctccctctccgcgagcgtgggcgaccgcgtgacgatcacttgccgggcctcggggaacattcacaactacctggcctggtaccagcagaagccggccaaggcccctaagctgttcatctacaacaccaagacccttgcggacggagtgccatcgagattttccggctcgggctctgggaccgattacactctgactatctcaagcctgcaacctgaggacttcgccacttactactgccagcacttctggagcagcccctggactttcggtggcgggaccaaggtcgaaatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C3H1 SEQ ID NO: 109 (Kabat) HCDR1 NYNLH SEQ ID NO: 110 (Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 111 (Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 112 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 113 (Chothia) HCDR2 YPGNYD SEQ ID NO: 114 (Chothia) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 115 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYN SEQ ID NO: 116 (IMGT) HCDR2 IYPGNYDT SEQ ID NO: 117 (IMGT) HCDR3 ARVDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 920 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYNLH SEQ ID NO: 921 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 922 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 118 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 119 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAATCCGGTGCAGAAGTCAAGAAACCCGGTGCATCCGTGAAAGTGTCATGCAAAGCCTCCGGGTACACCTTCACTAACTACAACCTCCACTGGGTCCGCCAGGCCCCGGGACAGGGACTGGAGTGGATGGGGGCCATCTACCCGGGAAACTACGACACTTCATACAACCAGAAGTTCAAGGGCAGAGTGACCATGACTGCCGACAAGAGCACATCGACCGCCTACATGGAACTCAGCTCCCTGCGCTCCGAGGATACTGCCGTCTACTACTGTGCCCGGGTGGACTTCGGCCACTCCCGGTATTGGTATTTCGATGTCTGGGGACAGGGAACCACCGTGACTGTGTCCAGC SEQ ID NO: 120 (Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 121 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 122 (Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 123 (Chothia) LCDR1 TSSVSS SEQ ID NO: 124 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 125 (Chothia) LCDR3 WTFNPP SEQ ID NO: 126 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 127 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 128 (IMGT) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 923 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 924 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 925 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 129 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRATSSVSSMNWYQQKPGQAPRPLIHATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 130 ДНК VL GAAATCGTGCTGACCCAGTCCCCTGCGACTCTGAGCCTGAGCCCTGGGGAACGCGCCACTTTGTCATGCCGGGCCACCTCCTCCGTGTCCTCCATGAACTGGTACCAGCAGAAGCCCGGACAGGCTCCGCGGCCGCTGATCCATGCCACCTCCAACCTGGCCAGCGGCATTCCCGCGAGGTTTTCCGGCTCGGGCTCTGGTACCGACTACACCCTGACCATCTCGAGCCTTGAGCCAGAAGATGCTGCGGTGTACTACTGCCAACAGTGGACCTTCAATCCGCCTACGTTCGGACAGGGGACCAAGCTGGAGATTAAG SEQ ID NO: 131 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 132 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRATSSVSSMNWYQQKPGQAPRPLIHATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 133 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccaatccggtgcagaagtcaagaaacccggtgcatccgtgaaagtgtcatgcaaagcctccgggtacaccttcactaactacaacctccactgggtccgccaggccccgggacagggactggagtggatgggggccatctacccgggaaactacgacacttcatacaaccagaagttcaagggcagagtgaccatgactgccgacaagagcacatcgaccgcctacatggaactcagctccctgcgctccgaggatactgccgtctactactgtgcccgggtggacttcggccactcccggtattggtatttcgatgtctggggacagggaaccaccgtgactgtgtccagcgggggcggaggatcgggtggcggaggttcggggggaggaggatcaggcggcggcggatcggaaatcgtgctgacccagtcccctgcgactctgagcctgagccctggggaacgcgccactttgtcatgccgggccacctcctccgtgtcctccatgaactggtaccagcagaagcccggacaggctccgcggccgctgatccatgccacctccaacctggccagcggcattcccgcgaggttttccggctcgggctctggtaccgactacaccctgaccatctcgagccttgagccagaagatgctgcggtgtactactgccaacagtggaccttcaatccgcctacgttcggacaggggaccaagctggagattaag SEQ ID NO: 134 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRATSSVSSMNWYQQKPGQAPRPLIHATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 135 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccaatccggtgcagaagtcaagaaacccggtgcatccgtgaaagtgtcatgcaaagcctccgggtacaccttcactaactacaacctccactgggtccgccaggccccgggacagggactggagtggatgggggccatctacccgggaaactacgacacttcatacaaccagaagttcaagggcagagtgaccatgactgccgacaagagcacatcgaccgcctacatggaactcagctccctgcgctccgaggatactgccgtctactactgtgcccgggtggacttcggccactcccggtattggtatttcgatgtctggggacagggaaccaccgtgactgtgtccagcgggggcggaggatcgggtggcggaggttcggggggaggaggatcaggcggcggcggatcggaaatcgtgctgacccagtcccctgcgactctgagcctgagccctggggaacgcgccactttgtcatgccgggccacctcctccgtgtcctccatgaactggtaccagcagaagcccggacaggctccgcggccgctgatccatgccacctccaacctggccagcggcattcccgcgaggttttccggctcgggctctggtaccgactacaccctgaccatctcgagccttgagccagaagatgctgcggtgtactactgccaacagtggaccttcaatccgcctacgttcggacaggggaccaagctggagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C3H3 SEQ ID NO: 163 (Kabat) HCDR1 NYNLH SEQ ID NO: 164 (Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 165 (Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 166 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 167 (Chothia) HCDR2 YPGNYD SEQ ID NO: 168 (Chothia) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 169 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYN SEQ ID NO: 170 (IMGT) HCDR2 IYPGNYDT SEQ ID NO: 171 (IMGT) HCDR3 ARVDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 172 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 173 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCGGGAGCAGAAGTCAAGAAGCCCGGATCATCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCCTCAGGCTACACCTTTACCAACTACAACTTGCACTGGGTCAGACAGGCCCCGGGACAGGGCCTGGAGTGGATGGGCGCCATCTACCCCGGAAACTATGACACCTCGTACAACCAGAAGTTCAAGGGTCGCGTGACTATCACGGCTGACAAGTCCACTAGCACCGCGTACATGGAACTTTCCTCACTGCGGTCCGAGGATACTGCGGTGTACTACTGCGCCCGGGTGGACTTCGGACACTCGAGATATTGGTACTTCGATGTCTGGGGACAGGGGACCACCGTGACTGTGTCCTCC SEQ ID NO: 174 (Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 175 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 176 (Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 177 (Chothia) LCDR1 TSSVSS SEQ ID NO: 178 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 179 (Chothia) LCDR3 WTFNPP SEQ ID NO: 180 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 181 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 182 (IMGT) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 932 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 933 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 934 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 183 VL AIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 184 ДНК VL GAAATTGTGCTGACCCAGTCTCCCGCAACCCTGTCCCTGAGCCCTGGAGAGCGCGCCACCCTGTCCTGCCGGGCCACATCCTCCGTGTCGTCCATGAACTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCCAAGCCCCGAGGCCTCTGATTCATGCTACCTCAAATCTGGCCAGCGGAATCCCGGCGCGCTTCTCCGGCTCGGGCAGCGGTACTGACTACACTCTCACCATCTCGTCCCTCGAACCGGAGGACGCCGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTGGACCTTCAACCCACCTACTTTCGGACAAGGGACCAAGCTGGAGATCAAG SEQ ID NO: 185 Линкер GGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 186 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWMHWVRQAPGQGLEWMGFITPTTGYPEYNQKFKDRVTMTADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSAIRMTQSPFSLSASVGDRVTITCRASGNIHNYLAWYQQKPAKAPKLFIYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQHFWSSPWTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 187 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccagtcgggagcagaagtcaagaagcccggatcatccgtgaaagtgtcctgcaaagcctcaggctacacctttaccaactacaacttgcactgggtcagacaggccccgggacagggcctggagtggatgggcgccatctaccccggaaactatgacacctcgtacaaccagaagttcaagggtcgcgtgactatcacggctgacaagtccactagcaccgcgtacatggaactttcctcactgcggtccgaggatactgcggtgtactactgcgcccgggtggacttcggacactcgagatattggtacttcgatgtctggggacaggggaccaccgtgactgtgtcctccgggggcggtggcagcgggggaggcggaagcggcggagggggttccgggggtggaggaagcgaaattgtgctgacccagtctcccgcaaccctgtccctgagccctggagagcgcgccaccctgtcctgccgggccacatcctccgtgtcgtccatgaactggtaccagcagaagcccggccaagccccgaggcctctgattcatgctacctcaaatctggccagcggaatcccggcgcgcttctccggctcgggcagcggtactgactacactctcaccatctcgtccctcgaaccggaggacgccgccgtctactactgtcagcagtggaccttcaacccacctactttcggacaagggaccaagctggagatcaag SEQ ID NO: 188 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRATSSVSSMNWYQQKPGQAPRPLIHATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 189 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccagtcgggagcagaagtcaagaagcccggatcatccgtgaaagtgtcctgcaaagcctcaggctacacctttaccaactacaacttgcactgggtcagacaggccccgggacagggcctggagtggatgggcgccatctaccccggaaactatgacacctcgtacaaccagaagttcaagggtcgcgtgactatcacggctgacaagtccactagcaccgcgtacatggaactttcctcactgcggtccgaggatactgcggtgtactactgcgcccgggtggacttcggacactcgagatattggtacttcgatgtctggggacaggggaccaccgtgactgtgtcctccgggggcggtggcagcgggggaggcggaagcggcggagggggttccgggggtggaggaagcgaaattgtgctgacccagtctcccgcaaccctgtccctgagccctggagagcgcgccaccctgtcctgccgggccacatcctccgtgtcgtccatgaactggtaccagcagaagcccggccaagccccgaggcctctgattcatgctacctcaaatctggccagcggaatcccggcgcgcttctccggctcgggcagcggtactgactacactctcaccatctcgtccctcgaaccggaggacgccgccgtctactactgtcagcagtggaccttcaacccacctactttcggacaagggaccaagctggagatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C3H4 SEQ ID NO: 190 (Kabat) HCDR1 NYNLH SEQ ID NO: 191 (Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 192 (Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 193 (Chothia) HCDR1 GYTFTNY SEQ ID NO: 194 (Chothia) HCDR2 YPGNYD SEQ ID NO: 195 (Chothia) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 196 (IMGT) HCDR1 GYTFTNYN SEQ ID NO: 197 (IMGT) HCDR2 IYPGNYDT SEQ ID NO: 198 (IMGT) HCDR3 ARVDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 935 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTNYNLH SEQ ID NO: 936 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNYDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 937 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 VDFGHSRYWYFDV SEQ ID NO: 199 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 200 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCGGGAGCAGAAGTCAAGAAGCCCGGATCATCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCCTCAGGCTACACCTTTACCAACTACAACTTGCACTGGGTCAGACAGGCCCCGGGACAGGGCCTGGAGTGGATGGGCGCCATCTACCCCGGAAACTATGACACCTCGTACAACCAGAAGTTCAAGGGTCGCGTGACTATCACGGCTGACAAGTCCACTAGCACCGCGTACATGGAACTTTCCTCACTGCGGTCCGAGGATACTGCGGTGTACTACTGCGCCCGGGTGGACTTCGGACACTCGAGATATTGGTACTTCGATGTCTGGGGACAGGGGACCACCGTGACTGTGTCCTCC SEQ ID NO: 201 (Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 202 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 203 (Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 204 (Chothia) LCDR1 TSSVSS SEQ ID NO: 205 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 206 (Chothia) LCDR3 WTFNPP SEQ ID NO: 207 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 208 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 209 (IMGT) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 938 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RATSSVSSMN SEQ ID NO: 939 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 940 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWTFNPPT SEQ ID NO: 210 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRATSSVSSMNWYQQKPGQAPRPLIHATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 211 ДНК VL GAAATTGTGCTGACCCAGTCTCCCGCAACCCTGTCCCTGAGCCCTGGAGAGCGCGCCACCCTGTCCTGCCGGGCCACATCCTCCGTGTCGTCCATGAACTGGTACCAGCAGAAGCCCGGCCAAGCCCCGAGGCCTCTGATTCATGCTACCTCAAATCTGGCCAGCGGAATCCCGGCGCGCTTCTCCGGCTCGGGCAGCGGTACTGACTACACTCTCACCATCTCGTCCCTCGAACCGGAGGACGCCGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTGGACCTTCAACCCACCTACTTTCGGACAAGGGACCAAGCTGGAGATCAAG SEQ ID NO: 212 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 213 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRATSSVSSMNWYQQKPGQAPRPLIHATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 214 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccaatccggcgcagaagtcaagaaaccaggatcgtccgtgaaagtgtcctgcaaggcgtccgggtacaccttcactaattacaacctccactgggtcagacaggccccaggacagggcctggaatggatgggcgccatctaccctggaaactacgatacctcgtacaaccagaagttcaagggccgcgtgactattaccgccgacaagagcacctccaccgcctatatggaactgtcgtccctgcggtccgaggacactgccgtgtactactgtgcaagggtggacttcggtcactcccggtattggtacttcgacgtctggggacaggggaccactgtgaccgtgtcgtcgggaggcggtggaagcggcggtggcggaagcggaggcggcggatcagggggcggaggaagcgacattcagcttacccagtcaccgtccttcctgagcgcctccgtgggagatcgcgtgaccatcacatgccgcgccacttcctcggtgtcctccatgaactggtaccagcagaagcccggaaaggctcctaagcctctgatccatgcgacctccaacttggcttccggggtgccgtcacggttcagcggcagcggttcaggaactgagtacaccctgactattagctctctccaacccgaggacttcgccacctactactgccagcagtggaccttcaacccgcccacgtttgggcagggtaccaagctggagatcaag SEQ ID NO: 215 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTNYNLHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNYDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARVDFGHSRYWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRATSSVSSMNWYQQKPGKAPKPLIHATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWTFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 216 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccaatccggcgcagaagtcaagaaaccaggatcgtccgtgaaagtgtcctgcaaggcgtccgggtacaccttcactaattacaacctccactgggtcagacaggccccaggacagggcctggaatggatgggcgccatctaccctggaaactacgatacctcgtacaaccagaagttcaagggccgcgtgactattaccgccgacaagagcacctccaccgcctatatggaactgtcgtccctgcggtccgaggacactgccgtgtactactgtgcaagggtggacttcggtcactcccggtattggtacttcgacgtctggggacaggggaccactgtgaccgtgtcgtcgggaggcggtggaagcggcggtggcggaagcggaggcggcggatcagggggcggaggaagcgacattcagcttacccagtcaccgtccttcctgagcgcctccgtgggagatcgcgtgaccatcacatgccgcgccacttcctcggtgtcctccatgaactggtaccagcagaagcccggaaaggctcctaagcctctgatccatgcgacctccaacttggcttccggggtgccgtcacggttcagcggcagcggttcaggaactgagtacaccctgactattagctctctccaacccgaggacttcgccacctactactgccagcagtggaccttcaacccgcccacgtttgggcagggtaccaagctggagatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C5H2 SEQ ID NO: 244 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 245 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 246 (Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 247 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 248 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 249 (Chothia) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 250 (IMGT) HCDR1 GYTFTSYN SEQ ID NO: 251 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 252 (IMGT) HCDR3 ARSYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 946 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTSYNMH SEQ ID NO: 947 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 948 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 253 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTMTADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 254 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCAGGAGCAGAAGTCAAGAAACCTGGAGCTTCCGTGAAAGTGTCGTGCAAGGCCTCCGGCTACACCTTCACCTCTTACAACATGCACTGGGTCAGACAGGCCCCTGGTCAAGGACTGGAATGGATGGGAGCGATCTACCCGGGCAACGGAGACACTTCGTACAACCCCAAGTTCAAGGGACGGGTCACTATGACCGCCGATAAGAGCACGCGCACCGCGTACATGGAACTGAGCAGCCTGCGCTCCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGCGCGAGGAGCTACTTCTACGGATCATCGTCGTGGTACTTCGACGTCTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCATCC SEQ ID NO: 255 (Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 256 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 257 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 258 (Chothia) LCDR1 SSSVSS SEQ ID NO: 259 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 260 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 261 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 262 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 263 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 949 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 950 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 951 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 264 VL DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVSSMHWYQQKPGKAPKPLIFATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 265 ДНК VL GATATTCAGCTGACCCAGAGCCCGTCATTCCTGTCCGCCTCCGTGGGAGACAGAGTGACCATCACTTGTCGGGCCAGCTCCTCGGTGTCCTCCATGCATTGGTATCAGCAGAAGCCTGGGAAGGCTCCCAAGCCCCTCATCTTCGCCACATCAAATCTTGCCTCCGGGGTGCCAAGCCGGTTCTCCGGGAGCGGCTCCGGTACTGAGTACACTCTGACCATTTCCTCCTTGCAACCCGAGGACTTTGCCACCTACTACTGCCAGCAGTGGATCTTTAACCCGCCGACCTTCGGAGGAGGAACCAAAGTGGAGATCAAG SEQ ID NO: 266 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 267 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTMTADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVSSMHWYQQKPGKAPKPLIFATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 268 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccagtcaggagcagaagtcaagaaacctggagcttccgtgaaagtgtcgtgcaaggcctccggctacaccttcacctcttacaacatgcactgggtcagacaggcccctggtcaaggactggaatggatgggagcgatctacccgggcaacggagacacttcgtacaaccccaagttcaagggacgggtcactatgaccgccgataagagcacgcgcaccgcgtacatggaactgagcagcctgcgctccgaggacactgccgtgtattactgcgcgaggagctacttctacggatcatcgtcgtggtacttcgacgtctggggccagggcaccaccgtgaccgtgtcatccggtggcggaggatcggggggcggaggaagcggcggggggggctccggcggtggaggctcggatattcagctgacccagagcccgtcattcctgtccgcctccgtgggagacagagtgaccatcacttgtcgggccagctcctcggtgtcctccatgcattggtatcagcagaagcctgggaaggctcccaagcccctcatcttcgccacatcaaatcttgcctccggggtgccaagccggttctccgggagcggctccggtactgagtacactctgaccatttcctccttgcaacccgaggactttgccacctactactgccagcagtggatctttaacccgccgaccttcggaggaggaaccaaagtggagatcaag SEQ ID NO: 269 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTMTADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVSSMHWYQQKPGKAPKPLIFATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 270 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccagtcaggagcagaagtcaagaaacctggagcttccgtgaaagtgtcgtgcaaggcctccggctacaccttcacctcttacaacatgcactgggtcagacaggcccctggtcaaggactggaatggatgggagcgatctacccgggcaacggagacacttcgtacaaccccaagttcaagggacgggtcactatgaccgccgataagagcacgcgcaccgcgtacatggaactgagcagcctgcgctccgaggacactgccgtgtattactgcgcgaggagctacttctacggatcatcgtcgtggtacttcgacgtctggggccagggcaccaccgtgaccgtgtcatccggtggcggaggatcggggggcggaggaagcggcggggggggctccggcggtggaggctcggatattcagctgacccagagcccgtcattcctgtccgcctccgtgggagacagagtgaccatcacttgtcgggccagctcctcggtgtcctccatgcattggtatcagcagaagcctgggaaggctcccaagcccctcatcttcgccacatcaaatcttgcctccggggtgccaagccggttctccgggagcggctccggtactgagtacactctgaccatttcctccttgcaacccgaggactttgccacctactactgccagcagtggatctttaacccgccgaccttcggaggaggaaccaaagtggagatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C5H3 SEQ ID NO: 271 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 272 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 273 (Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 274 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 275 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 276 (Chothia) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 277 (IMGT) HCDR1 GYTFTSYN SEQ ID NO: 278 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 279 (IMGT) HCDR3 ARSYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 952 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTSYNMH SEQ ID NO: 953 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 954 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 280 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTITADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 281 ДНК VH CAAGTGCAACTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAGCCTGGTTCATCGGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCGTCGGGCTACACCTTCACCTCGTACAACATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCCGGACAAGGACTGGAATGGATGGGTGCTATCTACCCCGGAAACGGAGATACCAGCTACAACCCCAAGTTCAAGGGACGCGTGACCATTACTGCCGACAAGTCCACAAGAACCGCCTACATGGAACTGTCCAGCCTGAGATCCGAGGACACTGCGGTGTACTACTGTGCGAGGTCCTACTTCTACGGGTCCTCCTCTTGGTACTTCGACGTCTGGGGACAGGGCACTACTGTGACCGTGTCCAGC SEQ ID NO: 282 (Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 283 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 284 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 285 (Chothia) LCDR1 SSSVSS SEQ ID NO: 286 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 287 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 288 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 289 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 290 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 955 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 956 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 957 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 291 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSSMHWYQQKPGQAPRPLIFATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 292 ДНК VL GAGATCGTGCTGACGCAGTCGCCGGCCACCCTGAGCCTTTCACCGGGAGAACGCGCCACTCTGTCATGCCGGGCCAGCAGCTCCGTGTCCTCCATGCATTGGTACCAGCAGAAGCCGGGGCAGGCCCCGCGGCCTCTCATCTTCGCCACCTCCAATCTGGCCTCCGGCATCCCTGCTCGGTTTAGCGGAAGCGGCAGCGGAACTGACTATACCTTGACCATCTCCTCGCTGGAACCAGAGGATGCAGCCGTGTACTATTGCCAGCAGTGGATCTTCAACCCGCCAACCTTCGGCGGCGGCACCAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 293 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 294 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTITADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSSMHWYQQKPGQAPRPLIFATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 295 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaagcctggttcatcggtgaaagtgtcctgcaaagcgtcgggctacaccttcacctcgtacaacatgcactgggtccgccaggcccccggacaaggactggaatggatgggtgctatctaccccggaaacggagataccagctacaaccccaagttcaagggacgcgtgaccattactgccgacaagtccacaagaaccgcctacatggaactgtccagcctgagatccgaggacactgcggtgtactactgtgcgaggtcctacttctacgggtcctcctcttggtacttcgacgtctggggacagggcactactgtgaccgtgtccagcgggggaggcggtagcggggggggtggatcgggcggcggcggatcaggaggaggagggtccgagatcgtgctgacgcagtcgccggccaccctgagcctttcaccgggagaacgcgccactctgtcatgccgggccagcagctccgtgtcctccatgcattggtaccagcagaagccggggcaggccccgcggcctctcatcttcgccacctccaatctggcctccggcatccctgctcggtttagcggaagcggcagcggaactgactataccttgaccatctcctcgctggaaccagaggatgcagccgtgtactattgccagcagtggatcttcaacccgccaaccttcggcggcggcaccaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 296 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTITADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASSSVSSMHWYQQKPGQAPRPLIFATSNLASGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLEPEDAAVYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 297 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaagcctggttcatcggtgaaagtgtcctgcaaagcgtcgggctacaccttcacctcgtacaacatgcactgggtccgccaggcccccggacaaggactggaatggatgggtgctatctaccccggaaacggagataccagctacaaccccaagttcaagggacgcgtgaccattactgccgacaagtccacaagaaccgcctacatggaactgtccagcctgagatccgaggacactgcggtgtactactgtgcgaggtcctacttctacgggtcctcctcttggtacttcgacgtctggggacagggcactactgtgaccgtgtccagcgggggaggcggtagcggggggggtggatcgggcggcggcggatcaggaggaggagggtccgagatcgtgctgacgcagtcgccggccaccctgagcctttcaccgggagaacgcgccactctgtcatgccgggccagcagctccgtgtcctccatgcattggtaccagcagaagccggggcaggccccgcggcctctcatcttcgccacctccaatctggcctccggcatccctgctcggtttagcggaagcggcagcggaactgactataccttgaccatctcctcgctggaaccagaggatgcagccgtgtactattgccagcagtggatcttcaacccgccaaccttcggcggcggcaccaaggtcgagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C5H4 SEQ ID NO: 298 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 299 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 300 (Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 301 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 302 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 303 (Chothia) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 304 (IMGT) HCDR1 GYTFTSYN SEQ ID NO: 305 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 306 (IMGT) HCDR3 ARSYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 958 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTSYNMH SEQ ID NO: 959 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYNPKFKG SEQ ID NO: 960 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SYFYGSSSWYFDV SEQ ID NO: 307 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTITADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 308 ДНК VH CAAGTGCAACTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAGCCAGGTTCCTCGGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCCTCGGGTTACACCTTCACCTCGTACAATATGCACTGGGTCCGCCAAGCTCCGGGACAAGGCCTGGAATGGATGGGAGCGATCTACCCCGGAAACGGCGACACGTCCTACAACCCGAAGTTCAAGGGAAGAGTGACCATCACCGCCGACAAGTCCACCCGCACCGCGTACATGGAGCTTAGCAGCCTGCGGAGCGAGGACACTGCCGTGTATTACTGCGCCCGGTCCTACTTCTATGGATCATCCTCGTGGTACTTCGATGTCTGGGGCCAGGGGACCACCGTGACCGTGTCCAGC SEQ ID NO: 309 (Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 310 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 311 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 312 (Chothia) LCDR1 SSSVSS SEQ ID NO: 313 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 314 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 315 (IMGT) LCDR1 SSVSS SEQ ID NO: 316 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 317 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 961 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVSSMH SEQ ID NO: 962 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 963 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 318 VL DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVSSMHWYQQKPGKAPKPLIFATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 319 ДНК VL GATATCCAGCTGACCCAGAGCCCTTCCTTCCTGTCCGCTTCCGTGGGAGACAGAGTCACTATTACTTGTCGGGCCTCCTCATCCGTGTCATCCATGCACTGGTACCAGCAGAAGCCGGGAAAGGCCCCAAAGCCCTTGATCTTTGCCACTTCCAACCTGGCATCCGGCGTGCCCTCGAGGTTCTCCGGGAGCGGTTCAGGGACCGAGTACACTCTGACCATTAGCAGCCTCCAGCCTGAGGACTTTGCCACCTACTACTGCCAGCAGTGGATTTTCAACCCGCCTACATTCGGAGGGGGCACTAAGGTCGAAATCAAG SEQ ID NO: 320 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 321 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTITADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVSSMHWYQQKPGKAPKPLIFATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 322 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaagccaggttcctcggtgaaagtgtcctgcaaagcctcgggttacaccttcacctcgtacaatatgcactgggtccgccaagctccgggacaaggcctggaatggatgggagcgatctaccccggaaacggcgacacgtcctacaacccgaagttcaagggaagagtgaccatcaccgccgacaagtccacccgcaccgcgtacatggagcttagcagcctgcggagcgaggacactgccgtgtattactgcgcccggtcctacttctatggatcatcctcgtggtacttcgatgtctggggccaggggaccaccgtgaccgtgtccagcggtggcggaggcagcggcggaggagggtctggaggaggcggctcggggggagggggctcggatatccagctgacccagagcccttccttcctgtccgcttccgtgggagacagagtcactattacttgtcgggcctcctcatccgtgtcatccatgcactggtaccagcagaagccgggaaaggccccaaagcccttgatctttgccacttccaacctggcatccggcgtgccctcgaggttctccgggagcggttcagggaccgagtacactctgaccattagcagcctccagcctgaggactttgccacctactactgccagcagtggattttcaacccgcctacattcggagggggcactaaggtcgaaatcaag SEQ ID NO: 323 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNPKFKGRVTITADKSTRTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVSSMHWYQQKPGKAPKPLIFATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGGGTKVEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 324 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaagccaggttcctcggtgaaagtgtcctgcaaagcctcgggttacaccttcacctcgtacaatatgcactgggtccgccaagctccgggacaaggcctggaatggatgggagcgatctaccccggaaacggcgacacgtcctacaacccgaagttcaagggaagagtgaccatcaccgccgacaagtccacccgcaccgcgtacatggagcttagcagcctgcggagcgaggacactgccgtgtattactgcgcccggtcctacttctatggatcatcctcgtggtacttcgatgtctggggccaggggaccaccgtgaccgtgtccagcggtggcggaggcagcggcggaggagggtctggaggaggcggctcggggggagggggctcggatatccagctgacccagagcccttccttcctgtccgcttccgtgggagacagagtcactattacttgtcgggcctcctcatccgtgtcatccatgcactggtaccagcagaagccgggaaaggccccaaagcccttgatctttgccacttccaacctggcatccggcgtgccctcgaggttctccgggagcggttcagggaccgagtacactctgaccattagcagcctccagcctgaggactttgccacctactactgccagcagtggattttcaacccgcctacattcggagggggcactaaggtcgaaatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C8H1 SEQ ID NO: 325 (Kabat) HCDR1 RYNMH SEQ ID NO: 326 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 327 (Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 328 (Chothia) HCDR1 GYTFTRY SEQ ID NO: 329 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 330 (Chothia) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 331 (IMGT) HCDR1 GYTFTRYN SEQ ID NO: 332 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 333 (IMGT) HCDR3 ARSFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 964 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTRYNMH SEQ ID NO: 965 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 966 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 334 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQRLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 335 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCAGGAGCAGAAGTCAAGAAACCAGGAGCATCCGTGAAAGTGTCGTGCAAAGCCTCTGGCTACACCTTCACCCGGTACAACATGCACTGGGTCAGACAGGCCCCGGGACAGCGGCTCGAGTGGATGGGTGCCATCTACCCCGGCAACGGGGACACCTCCTACTCCCAAAAGTTCAAGGGTCGCGTGACCATCACGGCGGATAAGTCGGCCAGCACTGCGTACATGGAATTGTCATCCCTGCGCTCCGAGGATACCGCCGTGTATTACTGCGCGCGGTCCTTCTTCTACGGCTCCTCCGATTGGTACTTCGACGTCTGGGGACAGGGAACTACCGTGACCGTGTCCTCC SEQ ID NO: 336 (Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 337 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 338 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 339 (Chothia) LCDR1 SSSVNN SEQ ID NO: 340 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 341 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 342 (IMGT) LCDR1 SSVNN SEQ ID NO: 343 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 344 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 967 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 968 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 969 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 345 VL EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASSSVNNMHWYQQKPDQSPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTINSLEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 346 ДНК VL GAAATCGTGCTGACTCAGTCGCCGGACTTCCAAAGCGTGACCCCAAAGGAGAAGGTCACCATCACCTGTAGAGCCTCATCGTCCGTGAACAATATGCACTGGTACCAGCAGAAGCCGGACCAGTCCCCTAAGCCCCTGATCTACGCCACTTCCAACCTGGCCTCCGGCGTGCCGTCGAGGTTCAGCGGCTCGGGCAGCGGGACCGACTACACCCTGACCATCAACAGCCTTGAAGCTGAGGACGCCGCTACCTACTACTGCCAGCAGTGGATTTTCAACCCTCCCACATTTGGACAGGGCACTAAGCTGGAGATTAAG SEQ ID NO: 347 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 348 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQRLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASSSVNNMHWYQQKPDQSPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTINSLEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 349 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaactcgtccagtcaggagcagaagtcaagaaaccaggagcatccgtgaaagtgtcgtgcaaagcctctggctacaccttcacccggtacaacatgcactgggtcagacaggccccgggacagcggctcgagtggatgggtgccatctaccccggcaacggggacacctcctactcccaaaagttcaagggtcgcgtgaccatcacggcggataagtcggccagcactgcgtacatggaattgtcatccctgcgctccgaggataccgccgtgtattactgcgcgcggtccttcttctacggctcctccgattggtacttcgacgtctggggacagggaactaccgtgaccgtgtcctccgggggtggcgggagcggagggggcggaagcgggggtggaggatcaggaggcggaggctccgaaatcgtgctgactcagtcgccggacttccaaagcgtgaccccaaaggagaaggtcaccatcacctgtagagcctcatcgtccgtgaacaatatgcactggtaccagcagaagccggaccagtcccctaagcccctgatctacgccacttccaacctggcctccggcgtgccgtcgaggttcagcggctcgggcagcgggaccgactacaccctgaccatcaacagccttgaagctgaggacgccgctacctactactgccagcagtggattttcaaccctcccacatttggacagggcactaagctggagattaag SEQ ID NO: 350 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQRLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASSSVNNMHWYQQKPDQSPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTINSLEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 351 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccagtcaggagcagaagtcaagaaaccaggagcatccgtgaaagtgtcgtgcaaagcctctggctacaccttcacccggtacaacatgcactgggtcagacaggccccgggacagcggctcgagtggatgggtgccatctaccccggcaacggggacacctcctactcccaaaagttcaagggtcgcgtgaccatcacggcggataagtcggccagcactgcgtacatggaattgtcatccctgcgctccgaggataccgccgtgtattactgcgcgcggtccttcttctacggctcctccgattggtacttcgacgtctggggacagggaactaccgtgaccgtgtcctccgggggtggcgggagcggagggggcggaagcgggggtggaggatcaggaggcggaggctccgaaatcgtgctgactcagtcgccggacttccaaagcgtgaccccaaaggagaaggtcaccatcacctgtagagcctcatcgtccgtgaacaatatgcactggtaccagcagaagccggaccagtcccctaagcccctgatctacgccacttccaacctggcctccggcgtgccgtcgaggttcagcggctcgggcagcgggaccgactacaccctgaccatcaacagccttgaagctgaggacgccgctacctactactgccagcagtggattttcaaccctcccacatttggacagggcactaagctggagattaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C8H2 SEQ ID NO: 352 (Kabat) HCDR1 RYNMH SEQ ID NO: 353 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 354 (Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 355 (Chothia) HCDR1 GYTFTRY SEQ ID NO: 356 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 357 (Chothia) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 358 (IMGT) HCDR1 GYTFTRYN SEQ ID NO: 359 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 360 (IMGT) HCDR3 ARSFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 970 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTRYNMH SEQ ID NO: 971 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 972 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 361 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQRLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 362 ДНК VH CAAGTGCAACTCGTCCAATCCGGCGCGGAAGTCAAAAAGCCTGGAGCCTCCGTCAAAGTGTCCTGCAAGGCCTCCGGTTACACTTTCACTCGCTACAACATGCATTGGGTGCGGCAGGCCCCGGGACAGCGCCTGGAATGGATGGGCGCAATCTACCCCGGCAACGGAGACACCTCCTATTCCCAAAAGTTCAAGGGAAGGGTCACAATCACGGCCGACAAGAGCGCCTCAACTGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTCAGATCCGAAGATACCGCGGTGTACTACTGCGCCCGGAGCTTCTTCTACGGTTCGTCTGATTGGTACTTTGACGTCTGGGGCCAGGGAACCACCGTGACCGTGTCGTCC SEQ ID NO: 363 (Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 364 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 365 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 366 (Chothia) LCDR1 SSSVNN SEQ ID NO: 367 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 368 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 369 (IMGT) LCDR1 SSVNN SEQ ID NO: 370 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 371 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 973 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 974 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 975 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 372 VL DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVNNMHWYQQKPGKAPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 373 ДНК VL GACATCCAGCTTACCCAGTCGCCATCATTCCTGTCCGCATCAGTGGGTGATCGCGTGACCATTACCTGTCGGGCGTCCTCCTCCGTGAACAACATGCACTGGTACCAGCAGAAGCCGGGGAAGGCTCCCAAGCCTCTGATCTACGCCACTAGCAATTTGGCCAGCGGCGTGCCTTCGAGATTCTCGGGGTCGGGCTCAGGAACCGAGTATACCCTGACCATTTCCTCCCTCCAACCGGAGGACTTTGCTACTTACTACTGCCAGCAGTGGATTTTCAACCCCCCGACTTTCGGACAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAG SEQ ID NO:374 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 375 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQRLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVNNMHWYQQKPGKAPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 376 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtgcaactcgtccaatccggcgcggaagtcaaaaagcctggagcctccgtcaaagtgtcctgcaaggcctccggttacactttcactcgctacaacatgcattgggtgcggcaggccccgggacagcgcctggaatggatgggcgcaatctaccccggcaacggagacacctcctattcccaaaagttcaagggaagggtcacaatcacggccgacaagagcgcctcaactgcctacatggagctgagcagcctcagatccgaagataccgcggtgtactactgcgcccggagcttcttctacggttcgtctgattggtactttgacgtctggggccagggaaccaccgtgaccgtgtcgtccggtggcggagggagcggtggaggaggctccgggggaggaggcagcggcgggggaggcagcgacatccagcttacccagtcgccatcattcctgtccgcatcagtgggtgatcgcgtgaccattacctgtcgggcgtcctcctccgtgaacaacatgcactggtaccagcagaagccggggaaggctcccaagcctctgatctacgccactagcaatttggccagcggcgtgccttcgagattctcggggtcgggctcaggaaccgagtataccctgaccatttcctccctccaaccggaggactttgctacttactactgccagcagtggattttcaaccccccgactttcggacagggcaccaagctggaaatcaag SEQ ID NO: 377 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQRLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVNNMHWYQQKPGKAPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 378 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtgcaactcgtccaatccggcgcggaagtcaaaaagcctggagcctccgtcaaagtgtcctgcaaggcctccggttacactttcactcgctacaacatgcattgggtgcggcaggccccgggacagcgcctggaatggatgggcgcaatctaccccggcaacggagacacctcctattcccaaaagttcaagggaagggtcacaatcacggccgacaagagcgcctcaactgcctacatggagctgagcagcctcagatccgaagataccgcggtgtactactgcgcccggagcttcttctacggttcgtctgattggtactttgacgtctggggccagggaaccaccgtgaccgtgtcgtccggtggcggagggagcggtggaggaggctccgggggaggaggcagcggcgggggaggcagcgacatccagcttacccagtcgccatcattcctgtccgcatcagtgggtgatcgcgtgaccattacctgtcgggcgtcctcctccgtgaacaacatgcactggtaccagcagaagccggggaaggctcccaagcctctgatctacgccactagcaatttggccagcggcgtgccttcgagattctcggggtcgggctcaggaaccgagtataccctgaccatttcctccctccaaccggaggactttgctacttactactgccagcagtggattttcaaccccccgactttcggacagggcaccaagctggaaatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C8H3 SEQ ID NO: 379 (Kabat) HCDR1 RYNMH SEQ ID NO: 380 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 381 (Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 382 (Chothia) HCDR1 GYTFTRY SEQ ID NO: 383 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 384 (Chothia) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 385 (IMGT) HCDR1 GYTFTRYN SEQ ID NO: 386 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 387 (IMGT) HCDR3 ARSFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 976 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTRYNMH SEQ ID NO: 977 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 978 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 388 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 389 ДНК VH CAAGTGCAACTCGTCCAGTCCGGTGCAGAAGTCAAGAAGCCTGGTTCCTCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCGTCTGGCTACACCTTCACCCGGTACAATATGCACTGGGTCAGACAGGCGCCCGGACAGGGCCTGGAGTGGATGGGGGCCATCTACCCTGGGAACGGCGACACTAGCTACTCCCAAAAGTTCAAGGGCCGCGTGACGATTACCGCCGACAAGTCAACCAGCACTGCCTATATGGAGCTGAGCTCGCTTCGGAGCGAAGATACCGCCGTGTACTACTGCGCTCGGAGCTTCTTCTACGGGTCCTCGGATTGGTACTTCGACGTCTGGGGCCAGGGGACTACTGTGACCGTGTCCTCC SEQ ID NO: 390 (Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 391 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 392 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 393 (Chothia) LCDR1 SSSVNN SEQ ID NO: 394 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 395 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 396 (IMGT) LCDR1 SSVNN SEQ ID NO: 397 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 398 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 979 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 980 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 981 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 399 VL EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASSSVNNMHWYQQKPDQSPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTINSLEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 400 ДНК VL GAAATCGTGCTGACCCAGTCCCCGGACTTTCAGTCAGTGACTCCCAAGGAGAAGGTCACCATTACTTGTCGCGCCTCCTCCTCGGTGAACAACATGCACTGGTACCAGCAGAAGCCGGACCAGTCCCCGAAGCCCCTGATCTATGCTACCTCCAACTTGGCGTCCGGCGTGCCGTCAAGGTTCAGCGGATCGGGTTCCGGGACAGACTACACCCTGACTATTAACTCACTCGAGGCCGAGGATGCCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTGGATCTTCAACCCTCCAACCTTCGGACAAGGAACCAAGCTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 401 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 402 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASSSVNNMHWYQQKPDQSPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTINSLEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 403 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaagcctggttcctccgtgaaagtgtcctgcaaagcgtctggctacaccttcacccggtacaatatgcactgggtcagacaggcgcccggacagggcctggagtggatgggggccatctaccctgggaacggcgacactagctactcccaaaagttcaagggccgcgtgacgattaccgccgacaagtcaaccagcactgcctatatggagctgagctcgcttcggagcgaagataccgccgtgtactactgcgctcggagcttcttctacgggtcctcggattggtacttcgacgtctggggccaggggactactgtgaccgtgtcctccgggggaggaggatcgggcggaggcggttcgggaggcggcggaagcggaggcggaggttcagaaatcgtgctgacccagtccccggactttcagtcagtgactcccaaggagaaggtcaccattacttgtcgcgcctcctcctcggtgaacaacatgcactggtaccagcagaagccggaccagtccccgaagcccctgatctatgctacctccaacttggcgtccggcgtgccgtcaaggttcagcggatcgggttccgggacagactacaccctgactattaactcactcgaggccgaggatgccgccacctactactgccagcagtggatcttcaaccctccaaccttcggacaaggaaccaagctggaaatcaag SEQ ID NO: 404 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASSSVNNMHWYQQKPDQSPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTDYTLTINSLEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 405 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtgcaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaagcctggttcctccgtgaaagtgtcctgcaaagcgtctggctacaccttcacccggtacaatatgcactgggtcagacaggcgcccggacagggcctggagtggatgggggccatctaccctgggaacggcgacactagctactcccaaaagttcaagggccgcgtgacgattaccgccgacaagtcaaccagcactgcctatatggagctgagctcgcttcggagcgaagataccgccgtgtactactgcgctcggagcttcttctacgggtcctcggattggtacttcgacgtctggggccaggggactactgtgaccgtgtcctccgggggaggaggatcgggcggaggcggttcgggaggcggcggaagcggaggcggaggttcagaaatcgtgctgacccagtccccggactttcagtcagtgactcccaaggagaaggtcaccattacttgtcgcgcctcctcctcggtgaacaacatgcactggtaccagcagaagccggaccagtccccgaagcccctgatctatgctacctccaacttggcgtccggcgtgccgtcaaggttcagcggatcgggttccgggacagactacaccctgactattaactcactcgaggccgaggatgccgccacctactactgccagcagtggatcttcaaccctccaaccttcggacaaggaaccaagctggaaatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C8H4 SEQ ID NO: 406 (Kabat) HCDR1 RYNMH SEQ ID NO: 407 (Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 408 (Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 409 (Chothia) HCDR1 GYTFTRY SEQ ID NO: 410 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 411 (Chothia) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 412 (IMGT) HCDR1 GYTFTRYN SEQ ID NO: 413 (IMGT) HCDR2 IYPGNGDT SEQ ID NO: 414 (IMGT) HCDR3 ARSFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 982 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GYTFTRYNMH SEQ ID NO: 983 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 AIYPGNGDTSYSQKFKG SEQ ID NO: 984 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 SFFYGSSDWYFDV SEQ ID NO: 415 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 416 ДНК VH CAAGTCCAACTCGTCCAGTCTGGCGCAGAAGTCAAGAAGCCCGGAAGCTCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCGTCGGGTTACACTTTCACCCGGTACAACATGCACTGGGTCAGACAGGCCCCTGGACAAGGACTGGAGTGGATGGGTGCCATCTACCCTGGAAACGGAGATACCTCCTACTCCCAAAAGTTCAAGGGGAGAGTGACCATTACCGCCGACAAGTCAACTTCCACCGCTTACATGGAGCTCAGCTCCCTGCGGTCCGAAGATACTGCGGTGTACTATTGCGCTCGCTCATTTTTCTACGGCTCATCGGATTGGTACTTCGACGTCTGGGGACAGGGAACTACCGTGACCGTGTCCTCG SEQ ID NO: 417 (Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 418 (Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 419 (Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 420 (Chothia) LCDR1 SSSVNN SEQ ID NO: 421 (Chothia) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 422 (Chothia) LCDR3 WIFNPP SEQ ID NO: 423 (IMGT) LCDR1 SSVNN SEQ ID NO: 424 (IMGT) LCDR2 ATS SEQ ID NO: 425 (IMGT) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 985 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 RASSSVNNMH SEQ ID NO: 986 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 ATSNLAS SEQ ID NO: 987 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 QQWIFNPPT SEQ ID NO: 426 VL DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVNNMHWYQQKPGKAPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 427 ДНК VL GACATCCAGCTGACTCAGTCCCCGTCCTTCCTGTCCGCCTCCGTGGGGGACCGCGTGACGATTACTTGTCGGGCCTCCTCATCCGTGAACAACATGCATTGGTACCAGCAGAAGCCAGGAAAGGCACCGAAGCCGCTTATCTATGCCACCTCGAATCTGGCCAGCGGAGTGCCTTCGAGGTTTAGCGGCTCCGGCTCCGGCACCGAGTACACTTTGACCATTAGCAGCCTCCAGCCGGAGGACTTCGCCACATACTACTGCCAGCAGTGGATCTTCAACCCCCCCACCTTCGGCCAAGGAACCAAGCTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 428 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 429 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVNNMHWYQQKPGKAPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 430 scFv ДНК (VH-линкер-VL) CAAGTCCAACTCGTCCAGTCTGGCGCAGAAGTCAAGAAGCCCGGAAGCTCCGTGAAAGTGTCCTGCAAAGCGTCGGGTTACACTTTCACCCGGTACAACATGCACTGGGTCAGACAGGCCCCTGGACAAGGACTGGAGTGGATGGGTGCCATCTACCCTGGAAACGGAGATACCTCCTACTCCCAAAAGTTCAAGGGGAGAGTGACCATTACCGCCGACAAGTCAACTTCCACCGCTTACATGGAGCTCAGCTCCCTGCGGTCCGAAGATACTGCGGTGTACTATTGCGCTCGCTCATTTTTCTACGGCTCATCGGATTGGTACTTCGACGTCTGGGGACAGGGAACTACCGTGACCGTGTCCTCGgggggaggaggatcgggcggaggcggttcgggaggcggcggaagcggaggcggaggttcaGACATCCAGCTGACTCAGTCCCCGTCCTTCCTGTCCGCCTCCGTGGGGGACCGCGTGACGATTACTTGTCGGGCCTCCTCATCCGTGAACAACATGCATTGGTACCAGCAGAAGCCAGGAAAGGCACCGAAGCCGCTTATCTATGCCACCTCGAATCTGGCCAGCGGAGTGCCTTCGAGGTTTAGCGGCTCCGGCTCCGGCACCGAGTACACTTTGACCATTAGCAGCCTCCAGCCGGAGGACTTCGCCACATACTACTGCCAGCAGTGGATCTTCAACCCCCCCACCTTCGGCCAAGGAACCAAGCTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 431 Полная аминокислотная последовательность CAR MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTRYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYSQKFKGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASSSVNNMHWYQQKPGKAPKPLIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTEYTLTISSLQPEDFATYYCQQWIFNPPTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 432 Полная последовательность нуклеиновой кислоты CAR atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccaagtccaactcgtccagtctggcgcagaagtcaagaagcccggaagctccgtgaaagtgtcctgcaaagcgtcgggttacactttcacccggtacaacatgcactgggtcagacaggcccctggacaaggactggagtggatgggtgccatctaccctggaaacggagatacctcctactcccaaaagttcaaggggagagtgaccattaccgccgacaagtcaacttccaccgcttacatggagctcagctccctgcggtccgaagatactgcggtgtactattgcgctcgctcatttttctacggctcatcggattggtacttcgacgtctggggacagggaactaccgtgaccgtgtcctcggggggaggggggagcggcggagggggctcgggcggtggaggaagcggaggcggcggttcggacatccagctgactcagtccccgtccttcctgtccgcctccgtgggggaccgcgtgacgattacttgtcgggcctcctcatccgtgaacaacatgcattggtaccagcagaagccaggaaaggcaccgaagccgcttatctatgccacctcgaatctggccagcggagtgccttcgaggtttagcggctccggctccggcaccgagtacactttgaccattagcagcctccagccggaggacttcgccacatactactgccagcagtggatcttcaacccccccaccttcggccaaggaaccaagctggaaatcaagaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD20-C2 SEQ ID NO: 433 VH QVHLQQSGAELAKPGASVKMSCKASGYTFTNYWMHWVKQRPGQGLEWIGFITPTTGYPEYNQKFKDKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARRKVGKGVYYALDYWGQGTSVTVSS SEQ ID NO: 434 ДНК VH caagtgcatctgcagcagtcgggggccgaactggcaaagccaggcgccagcgtgaagatgagctgcaaggcctccgggtacaccttcaccaactactggatgcactgggtcaagcagcgcccgggccagggactcgagtggatcgggttcatcacgccgactaccggctacccggagtataaccagaagttcaaggacaaggccactctgactgccgacaagtcctcgtctaccgcgtacatgcaactgtcctcactgacttcggaggattccgctgtgtactactgcgcgcggaggaaagtcggaaagggagtgtactatgccctggactactggggccagggtaccagcgtcactgtgtcctcc SEQ ID NO: 435 VL DILMTQSPASLSASVGETVTITCRASGNIHNYLAWYQQKQGNSPQLLVYNTKTLADGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQTEDFGTYYCQHFWSSPWTFGGGTKLEIK SEQ ID NO: 436 ДНК VL gacattctgatgacccagtcccctgcatcactctccgcgtccgtgggagaaaccgtgaccatcacgtgtagagcctccggcaacatccacaactacctggcctggtaccagcagaagcagggaaactcgccccaactgcttgtgtacaacaccaagaccttggctgacggagtgccttcccggttctcgggttcgggatcaggcacacagtactccctgaaaatcaatagcctccagaccgaagattttggaacctactactgccaacacttctggagctccccctggactttcggaggcggtaccaagctcgagattaag CD20-C3 SEQ ID NO: 437 VH QVQLQQPGAELVKPGASVKMSCKASGYTFTNYNLHWVKQTPGQGLEWIGAIYPGNYDTSYNQKFKGKATLTADKSSSTAYMLLSSLTSEDSAVYFCARVDFGHSRYWYFDVWGAGTTVTVSS SEQ ID NO: 438 ДНК VH caagtgcagctgcagcagcctggtgccgagctcgtgaagccgggagcgtccgtgaagatgagctgcaaagcctcgggctacaccttcaccaattacaacttgcattgggtcaagcagaccccgggccagggcctcgaatggatcggagcgatctaccccgggaactacgatactagctacaaccagaagttcaagggaaaggccaccctgaccgccgataagtcctcatccaccgcctacatgctgctgtcctcgctgacttccgaggactccgctgtgtacttctgcgcccgcgtggacttcggacacagcagatattggtattttgacgtctggggcgccgggactaccgtgactgtgtcgtcc SEQ ID NO: 439 VL QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRATSSVSSMNWYQQKPGSFPRPWIHATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWTFNPPTFGAGAKLELK SEQ ID NO: 440 ДНК VL caaattgtcctgagccagagcccggctatcctgtccgcctcaccgggcgaaaaggtcaccatgacttgtcgggccacttcctccgtgtcatccatgaactggtaccagcagaagcctggcagcttccctcggccatggattcacgccacgtcaaacctggcatcgggagtgcccgcaaggttctccgggtccggcagcggaacatcctactccctcaccatctcgcgcgtggaagcggaggacgctgccacctactactgccaacagtggaccttcaacccccccacctttggagcgggagccaagctggaacttaag CD20-C5 SEQ ID NO: 441 VH QVQLQQPGAELVKPGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVKQTPGQGLEWIGAIYPGNGDTSYNPKFKGKATLTADKSSRTAYIHLSSLTSEDSVVYYCARSYFYGSSSWYFDVWGAGTTVTVSS SEQ ID NO: 442 ДНК VH caagtgcagctgcagcagccgggagcagagctcgtgaagcctggagcctcagtgaagatgagctgcaaggcctccggttacaccttcacctcctacaacatgcactgggtcaagcagacccccggacaaggcctggaatggatcggcgccatctacccgggaaacggggacacctcctataaccccaagttcaagggaaaagcaaccctgaccgcggacaagtccagcagaactgcctacatccatctttcctcgctgacgtccgaggattccgtggtgtactactgtgcccgctcctacttctacgggtcatcctcgtggtacttcgatgtctggggcgctggaaccaccgtgactgtgtcctcc SEQ ID NO: 443 VL QIILSQSPAILSASPGEKVTLTCRASSSVSSMHWYQQKPGSSPKPWIFATSNLASGVPARFTGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGGGTSLEIK SEQ ID NO: 444 ДНК VL cagatcattctgagccagagcccggccattctgtctgcctcgcctggagaaaaagtcaccctcacttgccgggccagctcctccgtgtcctcaatgcactggtaccagcagaagcctggctcaagcccgaagccctggatcttcgccacctccaatctggcgtcaggagtgcccgcgaggttcactggatcggggtccggcacatcgtattcgctcaccatttcccgggtggaggccgaggacgccgctacttactactgccaacagtggatcttcaacccaccgacctttggcggagggacttccttggaaatcaag CD20-C6 SEQ ID NO: 445 VH QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKTSGYTFTSHGINWVKQAPRKGLKWMGWINTYTGEPTYGDDFKGRFAFSLETSARTAYLQINNLKNEDTATYFCARYGNYEEPYAMDYWGQGTSVTVSS SEQ ID NO: 446 ДНК VH caaattcagctggtgcagtcgggacctgagctcaagaagcccggagaaaccgtgaagatctcctgcaagacttccgggtacacttttacttcccacggcatcaactgggtcaagcaggcaccaaggaaggggcttaagtggatgggctggattaacacctacaccggcgaacccacctatggcgatgacttcaaaggacggttcgcgttctccctcgaaacctcagcaagaaccgcgtatttgcaaatcaacaacctgaagaacgaggacaccgccacctacttctgcgcccgctacggaaattacgaggaaccttacgctatggactactggggccagggcacttccgtgactgtgtcgtcc SEQ ID NO: 447 VL QIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRATSSVSSMNWYQQKPGSFPRPWIHATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWTFNPPTFGAGAKLELK SEQ ID NO: 448 ДНК VL cagatcgtgctgagccagagccccgccatcctgagcgcttccccgggagaaaaggtcaccatgacttgccgggccactagcagcgtgtcctccatgaactggtaccagcagaagccgggctccttccctcgcccctggattcatgccacctcaaacctggccagcggagtgccagccagattctcgggatctggatcggggacgtcctactccctcaccatctcgcgggtggaggccgaagatgccgccacatactactgtcaacagtggaccttcaacccgccgacctttggagcgggggccaagctggagctgaaa CD20-C7 SEQ ID NO: 449 VH QVQLQQPGAELVKPGASVKMSCKASGYTFTSYNIHWVKQTPGQGLEWIGAIYPGNGDTSYNQKFKGKATLTADKSSTTAFIHFSSLTSEDSVVYYCARSYFYGSDSWYFDVWGAGTTVTVSS SEQ ID NO: 450 ДНК VH caagtgcagcttcagcagcctggggccgaactcgtgaagccaggagcctccgtgaagatgtcatgcaaagcctccggctacacttttacctcctacaacattcattgggtcaagcagacacctggccagggcctggaatggattggtgcaatctacccgggcaacggagacacctcgtacaaccagaagtttaaggggaaggccaccctgaccgcggacaagtcaagcactaccgcgttcattcacttctcgtccttgacctccgaggatagcgtggtgtactactgcgcccgctcctatttctacggctccgattcgtggtacttcgacgtctggggagccggaactaccgtgaccgtgtcctcc SEQ ID NO: 451 VL QIILSQSPAILSASPGEKVTLTCRASSGVPSLHWYQQKPGSSPKPWIFATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGGGTSLEIK SEQ ID NO: 452 ДНК VL caaatcatcctgagccagagcccggccatcctgtcggcttcacccggggaaaaggtcacgctgacttgccgggcctcctccggcgtgccaagcctccactggtaccagcaaaagcctggctcgtcccccaaaccctggattttcgccacctccaacctggctagcggagtgccggccagattctcgggttccgggtccggcaccagctattctctcaccatctcccgggtcgaggcggaggacgcagcgacttactactgtcaacagtggatcttcaatccgcccaccttcggcggaggaacttccctggaaatcaag CD20-C8 SEQ ID NO: 453 VH QVQLLQPGAELVKPGASVKMSCKASGYTFTRYNMHWVKQTPGQGLEWIGAIYPGNGDTSYSQKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARSFFYGSSDWYFDVWGAGTTVSVSS SEQ ID NO: 454 ДНК VH caagtgcagctgctgcagcccggagccgaactcgtgaagccgggcgcatccgtgaaaatgagctgcaaggcgtccggttacaccttcactcgctacaacatgcactgggtcaagcagacccctggacaaggcctggagtggattggtgctatctacccgggaaacggagacactagctactcgcagaaattcaagggaaaggccacgctgaccgccgataagtcctcctccactgcctacatgcaactcagctcactgacctcagaggactcggccgtgtactactgcgcgaggtccttcttctacgggtcctcggattggtacttcgacgtctggggcgccggtaccaccgtgtccgtgtcatcc SEQ ID NO: 455 VL QIVLSQSPAILSTSPGEKVTLTCRASSSVNNMHWYQQKPGSSPKPWIYATSNLASGVPSRFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWIFNPPTFGAGTKLELK SEQ ID NO: 456 ДНК VL cagatcgtgctgagccagtccccggcgattctgtccacctcgcctggggaaaaggtcaccctgacatgtagagcctcctcctccgtgaacaatatgcattggtatcagcagaagccaggatcaagccccaagccctggatctatgccacttcgaaccttgcctctggagtgccctcacggttctccggctcgggatcggggaccagctacagcttgactatctcccgggtggaggctgaggacgccgcaacctactactgccagcaatggatcttcaaccctccgacttttggggccggaaccaagctggaactcaag CD20-3m SEQ ID NO: 457 VH QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFRDYYMAWVRQAPGKGLEWVASISYEGNPYYGDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMSSLRAEDTAVYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTV SEQ ID NO: 458 ДНК VH caagtgcagttggtggaatcaggaggaggtgtcgtgcaaccaggaagatcattgaggctctcatgcgccgccagcggattcacctttcgggattactacatggcctgggtccgccaggccccggggaagggactggaatgggtggcatccatctcgtacgaagggaacccctactatggggactccgtgaagggacggttcaccatctcccgggacaacgccaagtccaccctgtaccttcaaatgtcctcgctgagggcggaggatactgctgtctactactgtgcccgccacgaccataacaacgtggactggttcgcctactggggccagggaaccctcgtcaccgtgtcctcg SEQ ID NO: 459 VL DIVMTQTPLSLSVTPGQPVSMSCKSSQSLLYSENKKNYLAWYLQKPGQSPQLLIFWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 460 ДНК VL gacattgtgatgacgcagactcccctgtcgctctccgtgacccctggccagcccgtgtcgatgtcgtgcaagagctcccagtccctgctgtattccgagaacaagaagaattaccttgcgtggtacctccagaagccggggcagagcccgcagctgctgattttctgggcgtccactagagagtctggagtgcctgaccggtttagcggaagcggctccggtactgatttcaccctgaaaatctcgcgcgtggaagctgaggacgtgggcgtgtactactgccagcagtactacaacttccctactttcggacaaggaaccaagctggaaatcaag SEQ ID NO: 461 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 462 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFRDYYMAWVRQAPGKGLEWVASISYEGNPYYGDSVKGRFTISRDNAKSTLYLQMSSLRAEDTAVYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQTPLSLSVTPGQPVSMSCKSSQSLLYSENKKNYLAWYLQKPGQSPQLLIFWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK CD20-3J SEQ ID NO: 463 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFRDYYMAWVRQAPGQRLEWMGSISYEGNPYYGDSVKGRVTITRDNSASTLYMELSSLRSEDTAVYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 464 ДНК VH caagtccaactcgtccagtccggtgcagaagtcaagaaaccaggagcttccgtgaaagtgtcgtgcaaagcttcaggcttcaccttccgcgactattacatggcctgggtccgccaagcgcccggacagcggctggagtggatggggtccatttcctacgaggggaacccctactatggagattccgtgaagggcagagtgacgatcactcgggataactccgcctccactctctacatggaactgtcctcgcttcggagcgaagataccgcggtgtactactgcgcccgccacgaccataacaacgtggactggttcgcctactggggacaggggaccctcgtgaccgtgtcctct SEQ ID NO: 465 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGKVPKLLIFWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 466 ДНК VL gacattcagatgacccagtccccgagctcgctgtccgcctccgtgggagacagagtgacaatcacttgcaagagcagccagtcactgttgtactccgagaacaagaagaactacctcgcctggtaccagcagaagccgggaaaggtccctaagctgctgatcttctgggccagcactagggagtcgggagtgccgtcacggttcagcggatcgggatcgggtaccgacttcaccctgactatctcctccctgcaacctgaggacgtggccacctactactgtcagcagtactacaattttcccaccttcggccagggtaccaagctggaaatcaag SEQ ID NO: 467 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 468 scFv (VH-линкер-VL) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTFRDYYMAWVRQAPGQRLEWMGSISYEGNPYYGDSVKGRVTITRDNSASTLYMELSSLRSEDTAVYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGKVPKLLIFWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK CD20-3H5k1 SEQ ID NO: 469 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGFTFRDYYMAWVRQMPGKGLEWMGSISYEGNPYYGDSVKGQVTISRDNSISTLYLQWSSLKASDTAMYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 470 ДНК VH gaagtccaactggtgcagtcaggagcagaagtcaaaaaaccaggagaaagcctcaagatcagctgcaagggctcgggtttcaccttccgggactactatatggcctgggtcagacagatgccgggaaagggactggaatggatggggtcaatcagctacgagggcaacccctactacggagactccgtgaagggacaggtcacaatctcccgggacaactcgatttccactctgtatctgcaatggagctccctcaaggcctccgacactgcgatgtactactgtgcgcggcatgaccacaacaatgtggattggttcgcctactggggacagggaaccctcgtgaccgtgtccagc SEQ ID NO: 471 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGKVPKLLIFWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 472 ДНК VL gatatccaaatgacccagtcgccctcctcactctccgcctccgtgggagatcgcgtgaccattacttgcaagagctcgcagtccctgctgtactccgagaacaagaagaactacttggcctggtaccagcagaagcccggcaaagtgccgaagctgcttatcttttgggcctcgaccagggaaagcggagtgccgtcacgcttctccggctccgggtctggcaccgacttcactctgactatttcctccctgcaacctgaggacgtggctacctactactgccagcagtactacaacttccctaccttcggccaagggacgaagctggagatcaag SEQ ID NO: 473 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 474 scFv (VH-линкер-VL) EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGFTFRDYYMAWVRQMPGKGLEWMGSISYEGNPYYGDSVKGQVTISRDNSISTLYLQWSSLKASDTAMYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSDIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGKVPKLLIFWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK CD20-3H5k3 SEQ ID NO: 475 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGFTFRDYYMAWVRQMPGKGLEWMGSISYEGNPYYGDSVKGQVTISRDNSISTLYLQWSSLKASDTAMYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 476 ДНК VH gaagtgcagttggtccaatcaggcgcagaagtgaagaaacccggagaatcattgaagatttcgtgcaaaggaagcgggttcacattccgcgattactacatggcgtgggtcagacagatgccgggaaagggactcgagtggatggggtccatcagctacgaaggaaacccttactacggggactccgtgaagggccaggtcaccatctcccgcgacaactcaatctccactctgtatctgcaatggtcgagcctcaaggcctctgatactgcgatgtactactgcgctcggcatgaccacaacaacgtggactggttcgcttactggggacagggtacccttgtgaccgtgtcctcc SEQ ID NO: 477 VL EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGQAPRLLIFWASTRESGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLAVYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 478 ДНК VL gagatcgtgatgactcagtcccctgccaccctctcgctgtcccccggggagagggccacgctgtcctgcaagagctcccagtcactgctgtattccgaaaacaagaagaactacctcgcctggtaccaacagaagccgggacaggccccgcggcttctgatcttctgggcctccactcgggagtccggcattccggcccgcttctccggctcggggagcggaactgacttcaccctgaccatcagcagcctgcagccagaggacctcgcagtgtactactgtcaacagtactacaatttccccacctttggccagggtaccaagctggagattaag SEQ ID NO: 479 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 480 scFv (VH-линкер-VL) EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGFTFRDYYMAWVRQMPGKGLEWMGSISYEGNPYYGDSVKGQVTISRDNSISTLYLQWSSLKASDTAMYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGQAPRLLIFWASTRESGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDLAVYYCQQYYNFPTFGQGTKLEIK CD20-Ofa SEQ ID NO: 481 (Kabat) HCDR1 DYAMH SEQ ID NO: 482 (Kabat) HCDR2 TISWNSGSIGYADSVKG SEQ ID NO: 483 (Kabat) HCDR3 DIQYGNYYYGMDV SEQ ID NO: 484 (Chothia) HCDR1 GFTFNDY SEQ ID NO: 485 (Chothia) HCDR2 SWNSGS SEQ ID NO: 486 (Chothia) HCDR3 DIQYGNYYYGMDV SEQ ID NO: 487 (IMGT) HCDR1 GFTFNDYA SEQ ID NO: 488 (IMGT) HCDR2 ISWNSGSI SEQ ID NO: 489 (IMGT) HCDR3 AKDIQYGNYYYGMDV SEQ ID NO: 490 VH EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFNDYAMHWVRQAPGKGLEWVSTISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKKSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKDIQYGNYYYGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 491 ДНК VH Gaggtgcagctggtcgagtcggggggaggattggtgcagccgggcagaagcctgcggctctcatgtgccgcctccggcttcacctttaacgactacgcaatgcactgggtcagacaggctcctgggaagggcctggaatgggtgtccaccatttcctggaactccgggagcatcggctacgctgactccgtgaagggccgcttcacgattagccgcgataacgcgaaaaagagcctgtacctccaaatgaactccctgcgggccgaagataccgccctttactactgcgcgaaggacattcagtatggaaactactactacggaatggacgtctggggacaggggaccacagtgaccgtgtcaagc SEQ ID NO: 492 (Kabat) LCDR1 RASQSVSSYLA SEQ ID NO: 493 (Kabat) LCDR2 DASNRAT SEQ ID NO: 494 (Kabat) LCDR3 QQRSNWPIT SEQ ID NO: 495 (Chothia) LCDR1 SQSVSSY SEQ ID NO: 496 (Chothia) LCDR2 DAS SEQ ID NO: 497 (Chothia) LCDR3 RSNWPI SEQ ID NO: 498 (IMGT) LCDR1 QSVSSY SEQ ID NO: 499 (IMGT) LCDR2 DAS SEQ ID NO: 500 (IMGT) LCDR3 QQRSNWPIT SEQ ID NO: 501 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPITFGQGTRLEIK SEQ ID NO: 502 ДНК VL Gaaatcgtgctgacccagagcccagccactttgtcactgtcccccggcgaaagagccactctgtcctgccgggcatcgcagtccgtgtcgtcctacctggcctggtaccagcaaaagcccggacaagcccctcgccttctcatctacgacgcctccaatcgcgcgaccggaatcccggccaggttctccgggagcggttcaggcactgacttcaccctgaccatctcgtccctggagccggaggatttcgccgtgtattactgccagcagcggtccaactggcccatcaccttcggccaagggactcggctcgaaatcaag SEQ ID NO: 503 Линкер GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 504 scFv (VH-линкер-VL) EVQLVESGGGLVQPGRSLRLSCAASGFTFNDYAMHWVRQAPGKGLEWVSTISWNSGSIGYADSVKGRFTISRDNAKKSLYLQMNSLRAEDTALYYCAKDIQYGNYYYGMDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPITFGQGTRLEIK SEQ ID NO: 505 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaggtgcagctggtcgagtcggggggaggattggtgcagccgggcagaagcctgcggctctcatgtgccgcctccggcttcacctttaacgactacgcaatgcactgggtcagacaggctcctgggaagggcctggaatgggtgtccaccatttcctggaactccgggagcatcggctacgctgactccgtgaagggccgcttcacgattagccgcgataacgcgaaaaagagcctgtacctccaaatgaactccctgcgggccgaagataccgccctttactactgcgcgaaggacattcagtatggaaactactactacggaatggacgtctggggacaggggaccacagtgaccgtgtcaagcggcggtggaggatctggcggaggaggttccggtggcggtggatcgggagggggaggatcggaaatcgtgctgacccagagcccagccactttgtcactgtcccccggcgaaagagccactctgtcctgccgggcatcgcagtccgtgtcgtcctacctggcctggtaccagcaaaagcccggacaagcccctcgccttctcatctacgacgcctccaatcgcgcgaccggaatcccggccaggttctccgggagcggttcaggcactgacttcaccctgaccatctcgtccctggagccggaggatttcgccgtgtattactgccagcagcggtccaactggcccatcaccttcggccaagggactcggctcgaaatcaag CD20-3 SEQ ID NO: 506 VH EVQLVESGGGLVQPGRSLKLSCAASGFTFRDYYMAWVRQAPKKGLEWVASISYEGNPYYGDSVKGRFTISRNNAKSTLYLQMNSLRSEDTATYYCARHDHNNVDWFAYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 507 ДНК VH SEQ ID NO: 508 VL DIVMTQTPSSQAVSAGEKVTMSCKSSQSLLYSENKKNYLAWYQQKPGQSPKLLIFWASTRESGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQQYYNFPTFGSGTKLEIK SEQ ID NO: 509 ДНК VL SEQ ID NO: 510 Линкер ggggsggggsggggsggggs SEQ ID NO: 511 scFv (VH-линкер-VL) evqlvesggglvqpgrslklscaasgftfrdyymawvrqapkkglewvasisyegnpyygdsvkgrftisrnnakstlylqmnslrsedtatyycarhdhnnvdwfaywgqgtlvtvssggggsggggsggggsggggsdivmtqtpssqavsagekvtmsckssqsllysenkknylawyqqkpgqspkllifwastresgvpdrfigsgsgtdftltissvqaedlavyycqqyynfptfgsgtkleik CD20-8aBBz SEQ ID NO: 512 VH EVQLQQSGAELVKPGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVKQTPGQGLEWIGAIYPGNGDTSYNQKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSADYYCARSNYYGSSYWFFDVWGAGTTVTVSS SEQ ID NO: 513 ДНК VH gaggtgcaactgcagcagtcaggagcagaactggtcaagccgggcgcatccgtcaagatgagctgcaaggcctcaggatacaccttcacttcatacaacatgcactgggtcaagcagacgcctgggcaggggctggagtggatcggtgccatctaccccggaaacggcgacacctcctacaaccagaagttcaagggaaaggccaccctcaccgctgataagtccagcagcaccgcctacatgcaactgtcgtccctgacttcggaggacagcgctgactactattgcgcccgctctaattactacggttcctcctactggttcttcgacgtgtggggcgcgggtaccactgtgactgtctccagc SEQ ID NO: 514 VL DIVLTQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVNYMDWYQKKPGSSPKPWIYATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSFNPPTFGGGTKLEIK SEQ ID NO: 515 ДНК VL gacatcgtgctcactcagtcgcccgccattctgagcgctagccccggcgaaaaggtcaccatgacctgtagagcgtcatcctcggtgaactacatggactggtaccagaagaagccgggatcgagccctaagccatggatctacgccacatccaatctggcgtccggcgtgccggcccggttcagcgggagcggctcaggcacctcctattccctcaccatctcgagagtggaggctgaggatgcagccacgtactactgtcagcagtggtcgttcaaccccccaacctttggtggtggaaccaagctggaaatcaag SEQ ID NO: 516 Линкер GSTSGGGSGGGSGGGGSS SEQ ID NO: 517 scFv (VH-линкер-VL) DIVLTQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVNYMDWYQKKPGSSPKPWIYATSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSFNPPTFGGGTKLEIKGSTSGGGSGGGSGGGGSSEVQLQQSGAELVKPGASVKMSCKASGYTFTSYNMHWVKQTPGQGLEWIGAIYPGNGDTSYNQKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSEDSADYYCARSNYYGSSYWFFDVWGAGTTVTVSS SEQ ID NO: 518 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gacatcgtgctcactcagtcgcccgccattctgagcgctagccccggcgaaaaggtcaccatgacctgtagagcgtcatcctcggtgaactacatggactggtaccagaagaagccgggatcgagccctaagccatggatctacgccacatccaatctggcgtccggcgtgccggcccggttcagcgggagcggctcaggcacctcctattccctcaccatctcgagagtggaggctgaggatgcagccacgtactactgtcagcagtggtcgttcaaccccccaacctttggtggtggaaccaagctggaaatcaagggaagcacctccggcggaggttccggaggagggtccggaggcggaggcagctccgaggtgcaactgcagcagtcaggagcagaactggtcaagccgggcgcatccgtcaagatgagctgcaaggcctcaggatacaccttcacttcatacaacatgcactgggtcaagcagacgcctgggcaggggctggagtggatcggtgccatctaccccggaaacggcgacacctcctacaaccagaagttcaagggaaaggccaccctcaccgctgataagtccagcagcaccgcctacatgcaactgtcgtccctgacttcggaggacagcgctgactactattgcgcccgctctaattactacggttcctcctactggttcttcgacgtgtggggcgcgggtaccactgtgactgtctccagc

Обзор идентификаций последовательностей CDR (Kabat) последовательностей scFv-доменов CD20 из таблицы 1 показан в таблице 2 для вариабельных доменов тяжелой цепи и в таблице 3 для вариабельных доменов легкой цепи. SEQ ID NO относятся к находящимся в таблице 1.

Таблица 2. SEQ ID NO CDR вариабельных доменов тяжелой цепи (Kabat) молекул антител к CD20

Кандидат HCDR1 HCDR2 HCDR3 CD20-C3H2 136 137 138 CD20-C5H1 217 218 219 CD20-C2H1 1 2 3 CD20-C2H2 28 29 30 CD20-C2H3 55 56 57 CD20-C2H4 82 83 84 CD20-C3H1 109 110 111 CD20-C3H3 163 164 165 CD20-C3H4 190 191 192 CD20-C5H2 244 245 246 CD20-C5H3 271 272 273 CD20-C5H4 298 299 300 CD20-C8H1 325 326 327 CD20-C8H2 352 353 354 CD20-C8H3 379 380 381 CD20-C8H4 406 407 408

Таблица 3. SEQ ID NO CDR вариабельных доменов легкой цепи (Kabat) молекул антител к CD20

Кандидат LCDR1 LCDR2 LCDR3 CD20-C3H2 147 148 149 CD20-C5H1 228 229 230 CD20-C2H1 12 13 14 CD20-C2H2 39 40 41 CD20-C2H3 66 67 68 CD20-C2H4 93 94 95 CD20-C3H1 120 121 122 CD20-C3H3 174 175 176 CD20-C3H4 201 202 203 CD20-C5H2 255 256 257 CD20-C5H3 282 283 284 CD20-C5H4 309 310 311 CD20-C8H1 336 337 338 CD20-C8H2 363 364 365 CD20-C8H3 390 391 392 CD20-C8H4 417 418 419

Таблица 4. SEQ ID NO вариабельной области тяжелой цепи молекул антител к CD20

Кандидат Вариабельная область тяжелой цепи CD20-C3H2 145 CD20-C5H1 226 CD20-C2H1 10 CD20-C2H2 37 CD20-C2H3 64 CD20-C2H4 91 CD20-C3H1 118 CD20-C3H3 172 CD20-C3H4 199 CD20-C5H2 253 CD20-C5H3 280 CD20-C5H4 307 CD20-C8H1 334 CD20-C8H2 361 CD20-C8H3 388 CD20-C8H4 415

Таблица 5. SEQ ID NO вариабельной области легкой цепи молекул антител к CD20

Кандидат Вариабельная область легкой цепи CD20-C3H2 156 CD20-C5H1 237 CD20-C2H1 21 CD20-C2H2 48 CD20-C2H3 75 CD20-C2H4 102 CD20-C3H1 129 CD20-C3H3 183 CD20-C3H4 210 CD20-C5H2 264 CD20-C5H3 291 CD20-C5H4 318 CD20-C8H1 345 CD20-C8H2 372 CD20-C8H3 399 CD20-C8H4 426

Затем фрагменты scFv CAR клонировали в лентивирусные векторы для создания полноразмерной конструкции CAR в одной кодирующей рамке считывания с использованием промотора EF1-альфа для экспрессии (SEQ ID NO: 833). Способ клонирования дополнительно описан в примерах.

Порядок, в котором VL- и VH-домены появляются в scFv, варьировал (т. e. VL-VH или VH-VL ориентация), и где либо три, либо четыре копии субъединицы "G4S", при этом каждая субъединица содержит последовательность GGGGS (SEQ ID NO: 834) (например, (G4S)₃ или (G4S)₄), соединены с вариабельными доменами с образованием полного scFv-домена, как показано, например, в таблице 1.

Конструкции CAR для CD22

Выделяли одноцепочечные вариабельные фрагменты, связывающие CD22. См. таблицу 6. scFv, связывающие CD22, клонировали в лентивирусные экспрессионные векторы CAR, содержащие CD3-дзета цепь и костимулирующую молекулу 4-1BB. Способ клонирования дополнительно описан в разделе Примеры. Последовательности CAR для CD22 представлены ниже в таблице 6.

Таблица 6. Конструкции CAR для CD22

Номер SEQ ID Область Ab Последовательность CD22-65s, ss или KD SEQ ID NO: 834 Линкер GGGGS CD22-65s
SEQ ID NO: 835 scFv (VH-линкер-VL) CD22-65s
(линкер показан курсивом и подчеркиванием) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL CD22-65ss
SEQ ID NO: 836 scFv (VH -VL) CD22-65ss
(линкер между VH-VL отсутствует) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL CD22-65sKD
SEQ ID NO: 837 scFv (VH-линкер-VL) CD22-65 sKD EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRKSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQDHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 839 VH CD22-65 sKD EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRKSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 840 VL CD22-65 sKD QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQDHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL CD22-57 SEQ ID NO: 519 (Kabat) HCDR1 NNNAAWN SEQ ID NO: 520 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYNDYVGSVKS SEQ ID NO: 521 (Kabat) HCDR3 ETDYGDYGAFDI SEQ ID NO: 522 (Chothia) HCDR1 GDSVSNNNA SEQ ID NO: 523 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 524 (Chothia) HCDR3 ETDYGDYGAFDI SEQ ID NO: 525 (IMGT) HCDR1 GDSVSNNNAA SEQ ID NO: 526 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYN SEQ ID NO: 527 (IMGT) HCDR3 ARETDYGDYGAFDI SEQ ID NO: 988 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVSNNNAAWN SEQ ID NO: 989 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYNDYVGSVKS SEQ ID NO: 990 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 ETDYGDYGAFDI SEQ ID NO: 528 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSNNNAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYNDYVGSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARETDYGDYGAFDIWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 529 ДНК VH GAAGTCCAATTGCAACAATCAGGTCCCGGACTCGTGAAACCTTCCCAAACCCTCTCCCTCACTTGCGCGATCAGCGGAGACTCCGTGTCCAACAACAATGCTGCCTGGAACTGGATTAGGCAGAGCCCTTCAAGAGGACTGGAATGGCTGGGACGGACTTACCACCGCTCCACCTGGTACAACGATTACGTGGGGTCCGTCAAGTCCCGGATCACCATTAACCCGGACACTTCCAAGAATCAGTTCAGCCTGCAACTTAACAGCGTGACTCCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGTGCCCGGGAAACCGACTACGGGGATTACGGAGCCTTCGACATCTGGGGACAGGGAACCACCGTGACCGTGTCCTCG SEQ ID NO: 530 (Kabat) LCDR1 TGSRNDIGAYESVS SEQ ID NO: 531 (Kabat) LCDR2 GVNNRPS SEQ ID NO: 532 (Kabat) LCDR3 SSHTTTSTLYV SEQ ID NO: 533 (Chothia) LCDR1 SRNDIGAYES SEQ ID NO: 534 (Chothia) LCDR2 GVN SEQ ID NO: 535 (Chothia) LCDR3 HTTTSTLY SEQ ID NO: 536 (IMGT) LCDR1 RNDIGAYES SEQ ID NO: 537 (IMGT) LCDR2 GVN SEQ ID NO: 538 (IMGT) LCDR3 SSHTTTSTLYV SEQ ID NO: 991 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGSRNDIGAYESVS SEQ ID NO: 992 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 GVNNRPS SEQ ID NO: 993 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSHTTTSTLYV SEQ ID NO: 539 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSRNDIGAYESVSWYQQHPGNAPKLIIHGVNNRPSGVFDRFSVSQSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSHTTTSTLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 540 ДНК VL CAGTCGGCCCTGACTCAGCCGGCCTCCGTGTCCGGAAGCCCGGGCCAGTCCATCACCATTTCGTGCACTGGGTCGCGCAACGACATCGGCGCCTACGAATCCGTGTCGTGGTACCAGCAGCACCCCGGCAACGCCCCGAAGCTGATCATCCATGGCGTCAACAACAGACCATCCGGAGTGTTCGACCGGTTCAGCGTGTCCCAGTCGGGAAACACCGCATCCCTGACCATTAGCGGCCTGCAGGCGGAGGACGAGGCTGACTATTACTGCTCCTCACACACCACCACCTCTACGCTCTATGTGTTTGGGACTGGCACCAAGGTCACAGTGCTGGGA SEQ ID NO: 541 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 542 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSNNNAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYNDYVGSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARETDYGDYGAFDIWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSRNDIGAYESVSWYQQHPGNAPKLIIHGVNNRPSGVFDRFSVSQSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSHTTTSTLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 543 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtccaattgcaacaatcaggtcccggactcgtgaaaccttcccaaaccctctccctcacttgcgcgatcagcggagactccgtgtccaacaacaatgctgcctggaactggattaggcagagcccttcaagaggactggaatggctgggacggacttaccaccgctccacctggtacaacgattacgtggggtccgtcaagtcccggatcaccattaacccggacacttccaagaatcagttcagcctgcaacttaacagcgtgactcccgaggataccgccgtgtactactgtgcccgggaaaccgactacggggattacggagccttcgacatctggggacagggaaccaccgtgaccgtgtcctcgggcggtggtggttcgggcggcgggggatcagggggcggaggaagccagtcggccctgactcagccggcctccgtgtccggaagcccgggccagtccatcaccatttcgtgcactgggtcgcgcaacgacatcggcgcctacgaatccgtgtcgtggtaccagcagcaccccggcaacgccccgaagctgatcatccatggcgtcaacaacagaccatccggagtgttcgaccggttcagcgtgtcccagtcgggaaacaccgcatccctgaccattagcggcctgcaggcggaggacgaggctgactattactgctcctcacacaccaccacctctacgctctatgtgtttgggactggcaccaaggtcacagtgctggga CD22-58 SEQ ID NO: 544 (Kabat) HCDR1 SNSAAWN SEQ ID NO: 545 (Kabat) HCDR2 RTFYRSKWYNDYAVSVKG SEQ ID NO: 546 (Kabat) HCDR3 GDYYYGLDV SEQ ID NO: 547 (Chothia) HCDR1 GDSVSSNSA SEQ ID NO: 548 (Chothia) HCDR2 FYRSKWY SEQ ID NO: 549 (Chothia) HCDR3 GDYYYGLDV SEQ ID NO: 550 (IMGT) HCDR1 GDSVSSNSAA SEQ ID NO: 551 (IMGT) HCDR2 TFYRSKWYN SEQ ID NO: 552 (IMGT) HCDR3 AGGDYYYGLDV SEQ ID NO: 994 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVSSNSAAWN SEQ ID NO: 995 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTFYRSKWYNDYAVSVKG SEQ ID NO: 996 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 GDYYYGLDV SEQ ID NO: 553 VH EVQLQQSGPGLVNPSQTLSITCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTFYRSKWYNDYAVSVKGRITISPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCAGGDYYYGLDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 554 ДНК VH GAAGTCCAGTTGCAACAGTCAGGTCCCGGCCTCGTCAACCCATCCCAAACCCTTTCCATTACCTGTGCCATTAGCGGGGACAGCGTGTCCTCCAACTCGGCCGCTTGGAACTGGATCAGACAGAGCCCCAGCCGGGGTCTGGAGTGGCTGGGACGGACCTTCTACCGCTCAAAGTGGTACAACGACTACGCGGTGTCCGTGAAGGGAAGGATTACCATCTCCCCGGATACATCGAAGAATCAGTTCTCCCTGCAACTGAACTCTGTGACCCCTGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCGGGAGGAGACTACTACTATGGGCTGGACGTCTGGGGCCAGGGAACCACCGTGACTGTGTCAAGC SEQ ID NO: 555 (Kabat) LCDR1 TGSSSDVGGYNSVS SEQ ID NO: 556 (Kabat) LCDR2 EVINRPS SEQ ID NO: 557 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTYV SEQ ID NO: 558 (Chothia) LCDR1 SSSDVGGYNS SEQ ID NO: 559 (Chothia) LCDR2 EVI SEQ ID NO: 560 (Chothia) LCDR3 YTSSSTY SEQ ID NO: 561 (IMGT) LCDR1 SSDVGGYNS SEQ ID NO: 562 (IMGT) LCDR2 EVI SEQ ID NO: 563 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTYV SEQ ID NO: 997 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGSSSDVGGYNSVS SEQ ID NO: 998 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 EVINRPS SEQ ID NO: 999 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTYV SEQ ID NO: 564 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGGYNSVSWYQQHPGKAPKLMIYEVINRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 565 ДНК VL CAGAGCGCCCTGACCCAGCCGGCCAGCGTGTCCGGGTCGCCGGGCCAGTCGATCACCATCAGCTGCACTGGGTCATCCTCCGACGTGGGAGGCTACAACTCCGTGTCGTGGTACCAGCAGCACCCGGGGAAGGCTCCTAAGCTGATGATCTACGAAGTGATCAACCGGCCCTCCGGAGTCTCGCATCGCTTTTCCGGTTCAAAGTCCGGAAACACGGCCTCCCTGACCATCTCCGGACTCCAAGCCGAGGATGAAGCAGACTATTACTGCTCCTCGTACACTAGCTCATCCACTTACGTGTTCGGAACTGGCACCAAAGTCACTGTGCTC SEQ ID NO: 566 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 567 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVNPSQTLSITCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTFYRSKWYNDYAVSVKGRITISPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCAGGDYYYGLDVWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDVGGYNSVSWYQQHPGKAPKLMIYEVINRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 568 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtccagttgcaacagtcaggtcccggcctcgtcaacccatcccaaaccctttccattacctgtgccattagcggggacagcgtgtcctccaactcggccgcttggaactggatcagacagagccccagccggggtctggagtggctgggacggaccttctaccgctcaaagtggtacaacgactacgcggtgtccgtgaagggaaggattaccatctccccggatacatcgaagaatcagttctccctgcaactgaactctgtgacccctgaggataccgccgtgtactactgcgcgggaggagactactactatgggctggacgtctggggccagggaaccaccgtgactgtgtcaagcggagggggcggctccggtggaggaggctcgggtggcggcggaagccagagcgccctgacccagccggccagcgtgtccgggtcgccgggccagtcgatcaccatcagctgcactgggtcatcctccgacgtgggaggctacaactccgtgtcgtggtaccagcagcacccggggaaggctcctaagctgatgatctacgaagtgatcaaccggccctccggagtctcgcatcgcttttccggttcaaagtccggaaacacggcctccctgaccatctccggactccaagccgaggatgaagcagactattactgctcctcgtacactagctcatccacttacgtgttcggaactggcaccaaagtcactgtgctc CD22-59 SEQ ID NO: 569 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 570 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 571 (Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 572 (Chothia) HCDR1 GDSVLSNSD SEQ ID NO: 573 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 574 (Chothia) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 575 (IMGT) HCDR1 GDSVLSNSDT SEQ ID NO: 576 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 577 (IMGT) HCDR3 ARDRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1000 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVLSNSDTWN SEQ ID NO: 1001 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1002 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 578 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 579 ДНК VH GAAGTCCAATTGCAACAGTCCGGTCCTGGCCTCGTCAAGCCCTCCCAAACCCTCTCCCTGACTTGCGCCATCTCCGGGGATTCCGTGCTGAGCAACTCCGACACCTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGCCTGGAGTGGCTGGGCAGGACCTACCACCGGAGCACTTGGTACGACGACTACGCCAGCTCCGTGCGCGGACGCGTGTCAATCAATGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACAGCCTGCAACTTAACGCTGTGACTCCCGAGGATACTGGAGTGTACTATTGTGCCCGCGACCGGCTGCAGGATGGAAACAGCTGGTCCGATGCCTTCGATGTCTGGGGACAGGGTACCATGGTCACAGTGTCCAGC SEQ ID NO: 580 (Kabat) LCDR1 TGSSSDIGGFNYVS SEQ ID NO: 581 (Kabat) LCDR2 EVTNRPS SEQ ID NO: 582 (Kabat) LCDR3 SSYASGSPLYV SEQ ID NO: 583 (Chothia) LCDR1 SSSDIGGFNY SEQ ID NO: 584 (Chothia) LCDR2 EVT SEQ ID NO: 585 (Chothia) LCDR3 YASGSPLY SEQ ID NO: 586 (IMGT) LCDR1 SSDIGGFNY SEQ ID NO: 587 (IMGT) LCDR2 EVT SEQ ID NO: 588 (IMGT) LCDR3 SSYASGSPLYV SEQ ID NO: 1003 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGSSSDIGGFNYVS SEQ ID NO: 1004 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 EVTNRPS SEQ ID NO: 1005 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYASGSPLYV SEQ ID NO: 589 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDIGGFNYVSWYQQHAGEAPKLMIYEVTNRPSGVSDRFSGSKSDNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYASGSPLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 590 ДНК VL CAGTCCGCGCTGACCCAGCCCGCCTCTGTGTCCGGATCACCGGGACAGTCGATCACGATCTCCTGCACTGGCTCATCGTCCGACATTGGAGGTTTTAACTACGTGTCGTGGTACCAGCAGCATGCAGGAGAAGCCCCGAAGCTCATGATCTACGAAGTGACCAACCGGCCTTCGGGGGTGTCAGACAGATTCTCGGGCTCCAAGTCCGACAATACCGCATCCCTGACCATTAGCGGCCTGCAGGCGGAGGACGAAGCCGACTACTATTGCTCCTCGTACGCTTCGGGCTCCCCTCTGTACGTGTTCGGCACTGGGACCAAAGTCACCGTGCTC SEQ ID NO: 591 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 592 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGSSSDIGGFNYVSWYQQHAGEAPKLMIYEVTNRPSGVSDRFSGSKSDNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYASGSPLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 593 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtccaattgcaacagtccggtcctggcctcgtcaagccctcccaaaccctctccctgacttgcgccatctccggggattccgtgctgagcaactccgacacctggaactggattcggcagagcccgtccagaggcctggagtggctgggcaggacctaccaccggagcacttggtacgacgactacgccagctccgtgcgcggacgcgtgtcaatcaatgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcaacttaacgctgtgactcccgaggatactggagtgtactattgtgcccgcgaccggctgcaggatggaaacagctggtccgatgccttcgatgtctggggacagggtaccatggtcacagtgtccagcggggggggcggatcaggcggcggtggctccggaggagggggttcccagtccgcgctgacccagcccgcctctgtgtccggatcaccgggacagtcgatcacgatctcctgcactggctcatcgtccgacattggaggttttaactacgtgtcgtggtaccagcagcatgcaggagaagccccgaagctcatgatctacgaagtgaccaaccggccttcgggggtgtcagacagattctcgggctccaagtccgacaataccgcatccctgaccattagcggcctgcaggcggaggacgaagccgactactattgctcctcgtacgcttcgggctcccctctgtacgtgttcggcactgggaccaaagtcaccgtgctc CD22-60 SEQ ID NO: 594 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 595 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 596 (Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 597 (Chothia) HCDR1 GDSVLSNSD SEQ ID NO: 598 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 599 (Chothia) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 600 (IMGT) HCDR1 GDSVLSNSDT SEQ ID NO: 601 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 602 (IMGT) HCDR3 ARDRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1006 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVLSNSDTWN SEQ ID NO: 1007 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1008 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 603 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 604 ДНК VH GAAGTCCAATTGCAACAGTCCGGTCCTGGCCTCGTCAAGCCCTCCCAAACCCTCTCCCTGACTTGCGCCATCTCCGGGGATTCCGTGCTGAGCAACTCCGACACCTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGCCTGGAGTGGCTGGGCAGGACCTACCACCGGAGCACTTGGTACGACGACTACGCCAGCTCCGTGCGCGGACGCGTGTCAATCAATGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACAGCCTGCAACTTAACGCTGTGACTCCCGAGGATACTGGAGTGTACTATTGTGCCCGCGACCGGCTGCAGGATGGAAACAGCTGGTCCGATGCCTTCGATGTCTGGGGACAGGGTACCATGGTCACAGTGTCCAGC SEQ ID NO: 605 (Kabat) LCDR1 TGTSSDIGGYNYVS SEQ ID NO: 606 (Kabat) LCDR2 EVSNRPS SEQ ID NO: 607 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 608 (Chothia) LCDR1 TSSDIGGYNY SEQ ID NO: 609 (Chothia) LCDR2 EVS SEQ ID NO: 610 (Chothia) LCDR3 YTSSSTLY SEQ ID NO: 611 (IMGT) LCDR1 SSDIGGYNY SEQ ID NO: 612 (IMGT) LCDR2 EVS SEQ ID NO: 613 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 1009 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGTSSDIGGYNYVS SEQ ID NO: 1010 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 EVSNRPS SEQ ID NO: 1011 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 614 VL QSALTQPASVSGSPGQSITFSCTGTSSDIGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGTKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTKLTVL SEQ ID NO: 615 ДНК VL CAGTCCGCGCTGACCCAGCCCGCCTCTGTGTCCGGATCACCGGGACAGTCGATCACGTTTTCCTGCACTGGCACCTCGTCCGACATCGGAGGTTACAACTACGTGTCGTGGTACCAGCAGCATCCAGGAAAGGCCCCGAAGCTCATGATCTACGAAGTGTCAAACCGGCCTTCGGGGGTGTCAAACAGATTCTCGGGCACCAAGTCCGGAAATACCGCATCCCTGACCATTAGCGGCCTGCAGGCGGAGGACGAAGCCGACTACTATTGCTCCTCGTACACCTCGAGCTCCACTCTGTACGTGTTCGGCACTGGGACCAAACTTACCGTGCTC SEQ ID NO: 616 Линкер GGGGSGGGGSGSGGS SEQ ID NO: 617 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGSGGSQSALTQPASVSGSPGQSITFSCTGTSSDIGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGTKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTKLTVL SEQ ID NO: 618 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtccaattgcaacagtccggtcctggcctcgtcaagccctcccaaaccctctccctgacttgcgccatctccggggattccgtgctgagcaactccgacacctggaactggattcggcagagcccgtccagaggcctggagtggctgggcaggacctaccaccggagcacttggtacgacgactacgccagctccgtgcgcggacgcgtgtcaatcaatgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcaacttaacgctgtgactcccgaggatactggagtgtactattgtgcccgcgaccggctgcaggatggaaacagctggtccgatgccttcgatgtctggggacagggtaccatggtcacagtgtccagcggggggggcggatcaggcggcggtggctccggatcggggggttcccagtccgcgctgacccagcccgcctctgtgtccggatcaccgggacagtcgatcacgttttcctgcactggcacctcgtccgacatcggaggttacaactacgtgtcgtggtaccagcagcatccaggaaaggccccgaagctcatgatctacgaagtgtcaaaccggccttcgggggtgtcaaacagattctcgggcaccaagtccggaaataccgcatccctgaccattagcggcctgcaggcggaggacgaagccgactactattgctcctcgtacacctcgagctccactctgtacgtgttcggcactgggaccaaacttaccgtgctc CD22-61 SEQ ID NO: 619 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 620 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 621 (Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 622 (Chothia) HCDR1 GDSVLSNSD SEQ ID NO: 623 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 624 (Chothia) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 625 (IMGT) HCDR1 GDSVLSNSDT SEQ ID NO: 626 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 627 (IMGT) HCDR3 ARDRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1012 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVLSNSDTWN SEQ ID NO: 1013 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1014 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 628 VH QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 629 ДНК VH CAAGTCCAATTGCAAGAATCCGGTCCTGGCCTCGTCAAGCCCTCCCAAACCCTCTCCCTGACTTGCGCCATCTCCGGGGATTCCGTGCTGAGCAACTCCGACACCTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGCCTGGAGTGGCTGGGCAGGACCTACCACCGGAGCACTTGGTACGACGACTACGCCAGCTCCGTGCGCGGACGCGTGTCAATCAATGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACAGCCTGCAACTTAACGCTGTGACTCCCGAGGATACTGGAGTGTACTATTGTGCCCGCGACCGGCTGCAGGATGGAAACAGCTGGTCCGATGCCTTCGATGTCTGGGGACAGGGTACCATGGTCACAGTGTCCAGC SEQ ID NO: 630 (Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 631 (Kabat) LCDR2 EVSNRPS SEQ ID NO: 632 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 633 (Chothia) LCDR1 TSSDVGGYNY SEQ ID NO: 634 (Chothia) LCDR2 EVS SEQ ID NO: 635 (Chothia) LCDR3 YTSSSTLY SEQ ID NO: 636 (IMGT) LCDR1 SSDVGGYNY SEQ ID NO: 637 (IMGT) LCDR2 EVS SEQ ID NO: 638 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 1015 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 1016 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 EVSNRPS SEQ ID NO: 1017 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 639 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 640 ДНК VL CAGTCCGCGCTGACCCAGCCCGCCTCTGTGTCCGGATCACCGGGACAGTCGATCACGATCTCCTGCACTGGCACCTCGTCCGACGTGGGAGGTTACAACTACGTGTCGTGGTACCAGCAGCATCCAGGAAAGGCCCCGAAGCTCATGATCTACGAAGTGTCAAACCGGCCTTCGGGGGTGTCAAACAGATTCTCGGGCTCCAAGTCCGGAAATACCGCATCCCTGACCATTAGCGGCCTGCAGGCGGAGGACGAAGCCGACTACTATTGCTCCTCGTACACCTCGAGCTCCACTCTGTACGTGTTCGGCACTGGGACCAAAGTCACCGTGCTC SEQ ID NO: 641 Линкер GGGGSGGGGSGSGGS SEQ ID NO: 642 scFv (VH-линкер-VL) QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGSGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 643 scFv ДНК (VH-линкер-VL) caagtccaattgcaagaatccggtcctggcctcgtcaagccctcccaaaccctctccctgacttgcgccatctccggggattccgtgctgagcaactccgacacctggaactggattcggcagagcccgtccagaggcctggagtggctgggcaggacctaccaccggagcacttggtacgacgactacgccagctccgtgcgcggacgcgtgtcaatcaatgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcaacttaacgctgtgactcccgaggatactggagtgtactattgtgcccgcgaccggctgcaggatggaaacagctggtccgatgccttcgatgtctggggacagggtaccatggtcacagtgtccagcggggggggcggatcaggcggcggtggctccggatcggggggttcccagtccgcgctgacccagcccgcctctgtgtccggatcaccgggacagtcgatcacgatctcctgcactggcacctcgtccgacgtgggaggttacaactacgtgtcgtggtaccagcagcatccaggaaaggccccgaagctcatgatctacgaagtgtcaaaccggccttcgggggtgtcaaacagattctcgggctccaagtccggaaataccgcatccctgaccattagcggcctgcaggcggaggacgaagccgactactattgctcctcgtacacctcgagctccactctgtacgtgttcggcactgggaccaaagtcaccgtgctc CD22-62 SEQ ID NO: 644 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 645 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 646 (Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 647 (Chothia) HCDR1 GDSVLSNSD SEQ ID NO: 648 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 649 (Chothia) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 650 (IMGT) HCDR1 GDSVLSNSDT SEQ ID NO: 651 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 652 (IMGT) HCDR3 ARDRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1018 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVLSNSDTWN SEQ ID NO: 1019 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1020 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 653 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 654 ДНК VH GAAGTCCAATTGCAACAGTCCGGTCCTGGCCTCGTCAAGCCCTCCCAAACCCTCTCCCTGACTTGCGCCATCTCCGGGGATTCCGTGCTGAGCAACTCCGACACCTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGCCTGGAGTGGCTGGGCAGGACCTACCACCGGAGCACTTGGTACGACGACTACGCCAGCTCCGTGCGCGGACGCGTGTCAATCAATGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACAGCCTGCAACTTAACGCTGTGACTCCCGAGGATACTGGAGTGTACTATTGTGCCCGCGACCGGCTGCAGGATGGAAACAGCTGGTCCGATGCCTTCGATGTCTGGGGACAGGGTACCATGGTCACAGTGTCCAGC SEQ ID NO: 655 (Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 656 (Kabat) LCDR2 DVSNRPS SEQ ID NO: 657 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 658 (Chothia) LCDR1 TSSDVGGYNY SEQ ID NO: 659 (Chothia) LCDR2 DVS SEQ ID NO: 660 (Chothia) LCDR3 YTSSSTLY SEQ ID NO: 661 (IMGT) LCDR1 SSDVGGYNY SEQ ID NO: 662 (IMGT) LCDR2 DVS SEQ ID NO: 663 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 1021 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 1022 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 DVSNRPS SEQ ID NO: 1023 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 664 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 665 ДНК VL CAGTCCGCGCTGACCCAGCCCGCCTCTGTGTCCGGATCACCGGGACAGTCGATCACGATCTCCTGCACTGGCACCTCGTCCGACGTGGGAGGTTACAACTACGTGTCGTGGTACCAGCAGCATCCAGGAAAGGCCCCGAAGCTCATGATCTACGACGTGTCAAACCGGCCTTCGGGGGTGTCAAACAGATTCTCGGGCTCCAAGTCCGGAAATACCGCATCCCTGACCATTAGCGGCCTGCAGGCGGAGGACGAAGCCGACTACTATTGCTCCTCGTACACCTCGAGCTCCACTCTGTACGTGTTCGGCACTGGGACCAAAGTCACCGTGCTC SEQ ID NO: 666 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 667 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 668 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtccaattgcaacagtccggtcctggcctcgtcaagccctcccaaaccctctccctgacttgcgccatctccggggattccgtgctgagcaactccgacacctggaactggattcggcagagcccgtccagaggcctggagtggctgggcaggacctaccaccggagcacttggtacgacgactacgccagctccgtgcgcggacgcgtgtcaatcaatgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcaacttaacgctgtgactcccgaggatactggagtgtactattgtgcccgcgaccggctgcaggatggaaacagctggtccgatgccttcgatgtctggggacagggtaccatggtcacagtgtccagcggggggggcggatcaggcggcggtggctccggaggagggggttcccagtccgcgctgacccagcccgcctctgtgtccggatcaccgggacagtcgatcacgatctcctgcactggcacctcgtccgacgtgggaggttacaactacgtgtcgtggtaccagcagcatccaggaaaggccccgaagctcatgatctacgacgtgtcaaaccggccttcgggggtgtcaaacagattctcgggctccaagtccggaaataccgcatccctgaccattagcggcctgcaggcggaggacgaagccgactactattgctcctcgtacacctcgagctccactctgtacgtgttcggcactgggaccaaagtcaccgtgctc CD22-63 SEQ ID NO: 669 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 670 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 671 (Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 672 (Chothia) HCDR1 GDSVLSNSD SEQ ID NO: 673 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 674 (Chothia) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 675 (IMGT) HCDR1 GDSVLSNSDT SEQ ID NO: 676 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 677 (IMGT) HCDR3 ARDRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1024 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVLSNSDTWN SEQ ID NO: 1025 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1026 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 DRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 678 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 679 ДНК VH GAAGTCCAATTGCAACAGTCCGGTCCTGGCCTCGTCAAGCCCTCCCAAACCCTCTCCCTGACTTGCGCCATCTCCGGGGATTCCGTGCTGAGCAACTCCGACACCTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGCCTGGAGTGGCTGGGCAGGACCTACCACCGGAGCACTTGGTACGACGACTACGCCAGCTCCGTGCGCGGACGCGTGTCAATCAATGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACAGCCTGCAACTTAACGCTGTGACTCCCGAGGATACTGGAGTGTACTATTGTGCCCGCGACCGGCTGCAGGATGGAAACAGCTGGTCCGATGCCTTCGATGTCTGGGGACAGGGTACCATGGTCACAGTGTCCAGC SEQ ID NO: 680 (Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 681 (Kabat) LCDR2 EVSNRPS SEQ ID NO: 682 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYI SEQ ID NO: 683 (Chothia) LCDR1 TSSDVGGYNY SEQ ID NO: 684 (Chothia) LCDR2 EVS SEQ ID NO: 685 (Chothia) LCDR3 YTSSSTLY SEQ ID NO: 686 (IMGT) LCDR1 SSDVGGYNY SEQ ID NO: 687 (IMGT) LCDR2 EVS SEQ ID NO: 688 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTLYI SEQ ID NO: 1027 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 1028 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 EVSNRPS SEQ ID NO: 1029 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYI SEQ ID NO: 689 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYIFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 690 ДНК VL CAGTCCGCGCTGACCCAGCCCGCCTCTGTGTCCGGATCACCGGGACAGTCGATCACGATCTCCTGCACTGGCACCTCGTCCGACGTGGGAGGTTACAACTACGTGTCGTGGTACCAGCAGCATCCAGGAAAGGCCCCGAAGCTCATGATCTACGAAGTGTCAAACCGGCCTTCGGGGGTGTCAAACAGATTCTCGGGCTCCAAGTCCGGAAATACCGCATCCCTGACCATTAGCGGCCTGCAGGCGGAGGACGAAGCCGACTACTATTGCTCCTCGTACACCTCGAGCTCCACTCTGTACATTTTCGGCACTGGGACCAAAGTCACCGTGCTC SEQ ID NO: 691 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 692 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARDRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYIFGTGTKVTVL SEQ ID NO: 693 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtccaattgcaacagtccggtcctggcctcgtcaagccctcccaaaccctctccctgacttgcgccatctccggggattccgtgctgagcaactccgacacctggaactggattcggcagagcccgtccagaggcctggagtggctgggcaggacctaccaccggagcacttggtacgacgactacgccagctccgtgcgcggacgcgtgtcaatcaatgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcaacttaacgctgtgactcccgaggatactggagtgtactattgtgcccgcgaccggctgcaggatggaaacagctggtccgatgccttcgatgtctggggacagggtaccatggtcacagtgtccagcggggggggcggatcaggcggcggtggctccggaggagggggttcccagtccgcgctgacccagcccgcctctgtgtccggatcaccgggacagtcgatcacgatctcctgcactggcacctcgtccgacgtgggaggttacaactacgtgtcgtggtaccagcagcatccaggaaaggccccgaagctcatgatctacgaagtgtcaaaccggccttcgggggtgtcaaacagattctcgggctccaagtccggaaataccgcatccctgaccattagcggcctgcaggcggaggacgaagccgactactattgctcctcgtacacctcgagctccactctgtacattttcggcactgggaccaaagtcaccgtgctc CD22-64 SEQ ID NO: 694 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 695 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 696 (Kabat) HCDR3 VRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 697 (Chothia) HCDR1 GDSVLSNSD SEQ ID NO: 698 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 699 (Chothia) HCDR3 VRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 700 (IMGT) HCDR1 GDSVLSNSDT SEQ ID NO: 701 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 702 (IMGT) HCDR3 ARVRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1030 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSVLSNSDTWN SEQ ID NO: 1031 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1032 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 VRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 703 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLPLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 704 ДНК VH GAAGTGCAGCTTCAACAATCAGGACCCGGACTCGTCAAACCATCGCAGACCCTCCCTCTCACTTGCGCCATCTCCGGGGACTCCGTGCTGTCCAACTCCGACACTTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGATTGGAATGGCTGGGAAGGACCTATCACCGGTCCACTTGGTACGACGATTACGCCTCGTCCGTGCGCGGTCGGGTGTCCATCAACGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACTCCCTGCAACTGAACGCCGTGACCCCTGAGGACACTGGGGTGTACTACTGTGCGAGAGTGCGGCTGCAGGATGGGAACTCTTGGTCCGACGCCTTCGATGTCTGGGGCCAGGGCACCATGGTCACTGTGTCATCC SEQ ID NO: 705 (Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 706 (Kabat) LCDR2 DVSNRPS SEQ ID NO: 707 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 708 (Chothia) LCDR1 TSSDVGGYNY SEQ ID NO: 709 (Chothia) LCDR2 DVS SEQ ID NO: 710 (Chothia) LCDR3 YTSSSTLY SEQ ID NO: 711 (IMGT) LCDR1 SSDVGGYNY SEQ ID NO: 712 (IMGT) LCDR2 DVS SEQ ID NO: 713 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 1033 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 1034 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 DVSNRPS SEQ ID NO: 1035 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 714 VL QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 715 ДНК VL CAGTCGGCACTGACCCAGCCTGCCTCAGCCTCCGGGAGCCCGGGACAGTCCGTGACCATTTCCTGCACCGGGACCTCCTCCGACGTGGGAGGCTACAACTACGTGTCATGGTACCAGCAGCACCCCGGAAAGGCACCGAAGCTGATGATCTACGACGTGTCCAACCGCCCGAGCGGGGTGTCAAATCGCTTCTCGGGCTCGAAGTCGGGAAACACAGCGAGCCTGACGATCTCGGGACTGCAAGCCGAAGATGAGGCTGACTACTACTGCTCGTCCTACACTAGCTCCAGCACCCTCTACGTGTTCGGTACTGGTACCCAGCTGACCGTCCTG SEQ ID NO: 716 Линкер GGGGSGGGGSGGGGP SEQ ID NO: 717 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLPLTCAISGDSVLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGPQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 718 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtgcagcttcaacaatcaggacccggactcgtcaaaccatcgcagaccctccctctcacttgcgccatctccggggactccgtgctgtccaactccgacacttggaactggattcggcagagcccgtccagaggattggaatggctgggaaggacctatcaccggtccacttggtacgacgattacgcctcgtccgtgcgcggtcgggtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtactccctgcaactgaacgccgtgacccctgaggacactggggtgtactactgtgcgagagtgcggctgcaggatgggaactcttggtccgacgccttcgatgtctggggccagggcaccatggtcactgtgtcatccggcggtggtggcagcggcggaggcggcagcggaggcggaggaccccagtcggcactgacccagcctgcctcagcctccgggagcccgggacagtccgtgaccatttcctgcaccgggacctcctccgacgtgggaggctacaactacgtgtcatggtaccagcagcaccccggaaaggcaccgaagctgatgatctacgacgtgtccaaccgcccgagcggggtgtcaaatcgcttctcgggctcgaagtcgggaaacacagcgagcctgacgatctcgggactgcaagccgaagatgaggctgactactactgctcgtcctacactagctccagcaccctctacgtgttcggtactggtacccagctgaccgtcctg CD22-65 SEQ ID NO: 719 (Kabat) HCDR1 SNSDTWN SEQ ID NO: 720 (Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 721 (Kabat) HCDR3 VRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 722 (Chothia) HCDR1 GDSMLSNSD SEQ ID NO: 723 (Chothia) HCDR2 YHRSTWY SEQ ID NO: 724 (Chothia) HCDR3 VRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 725 (IMGT) HCDR1 GDSMLSNSDT SEQ ID NO: 726 (IMGT) HCDR2 TYHRSTWYD SEQ ID NO: 727 (IMGT) HCDR3 ARVRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 1036 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR1 GDSMLSNSDTWN SEQ ID NO: 1037 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR2 RTYHRSTWYDDYASSVRG SEQ ID NO: 1038 (объединенные Chothia и Kabat) HCDR3 VRLQDGNSWSDAFDV SEQ ID NO: 728 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 729 ДНК VH GAAGTGCAGCTTCAACAATCAGGACCCGGACTCGTCAAACCATCGCAGACCCTCAGCCTCACTTGCGCCATCTCCGGGGACTCCATGCTGTCCAACTCCGACACTTGGAACTGGATTCGGCAGAGCCCGTCCAGAGGATTGGAATGGCTGGGAAGGACCTATCACCGGTCCACTTGGTACGACGATTACGCCTCGTCCGTGCGCGGTCGGGTGTCCATCAACGTGGACACCTCCAAGAACCAGTACTCCCTGCAACTGAACGCCGTGACCCCTGAGGACACTGGGGTGTACTACTGTGCGAGAGTGCGGCTGCAGGATGGGAACTCTTGGTCCGACGCCTTCGATGTCTGGGGCCAGGGCACCATGGTCACTGTGTCATCC SEQ ID NO: 730 (Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 731 (Kabat) LCDR2 DVSNRPS SEQ ID NO: 732 (Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 733 (Chothia) LCDR1 TSSDVGGYNY SEQ ID NO: 734 (Chothia) LCDR2 DVS SEQ ID NO: 735 (Chothia) LCDR3 YTSSSTLY SEQ ID NO: 736 (IMGT) LCDR1 SSDVGGYNY SEQ ID NO: 737 (IMGT) LCDR2 DVS SEQ ID NO: 738 (IMGT) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 1039 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 1040 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR2 DVSNRPS SEQ ID NO: 1041 (объединенные Chothia и Kabat) LCDR3 SSYTSSSTLYV SEQ ID NO: 739 VL QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 740 ДНК VL CAGTCGGCACTGACCCAGCCTGCCTCAGCCTCCGGGAGCCCGGGACAGTCCGTGACCATTTCCTGCACCGGGACCTCCTCCGACGTGGGAGGCTACAACTACGTGTCATGGTACCAGCAGCACCCCGGAAAGGCACCGAAGCTGATGATCTACGACGTGTCCAACCGCCCGAGCGGGGTGTCAAATCGCTTCTCGGGCTCGAAGTCGGGAAACACAGCGAGCCTGACGATCTCGGGACTGCAAGCCGAAGATGAGGCTGACTACTACTGCTCGTCCTACACTAGCTCCAGCACCCTCTACGTGTTCGGTACTGGTACCCAGCTGACCGTCCTG SEQ ID NO: 741 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 742 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 743 scFv ДНК (VH-линкер-VL) gaagtgcagcttcaacaatcaggacccggactcgtcaaaccatcgcagaccctcagcctcacttgcgccatctccggggactccatgctgtccaactccgacacttggaactggattcggcagagcccgtccagaggattggaatggctgggaaggacctatcaccggtccacttggtacgacgattacgcctcgtccgtgcgcggtcgggtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtactccctgcaactgaacgccgtgacccctgaggacactggggtgtactactgtgcgagagtgcggctgcaggatgggaactcttggtccgacgccttcgatgtctggggccagggcaccatggtcactgtgtcatccggcggtggtggcagcggcggaggcggcagcggaggcggaggaagccagtcggcactgacccagcctgcctcagcctccgggagcccgggacagtccgtgaccatttcctgcaccgggacctcctccgacgtgggaggctacaactacgtgtcatggtaccagcagcaccccggaaaggcaccgaagctgatgatctacgacgtgtccaaccgcccgagcggggtgtcaaatcgcttctcgggctcgaagtcgggaaacacagcgagcctgacgatctcgggactgcaagccgaagatgaggctgactactactgctcgtcctacactagctccagcaccctctacgtgttcggtactggtacccagctgaccgtcctg SEQ ID NO: 744 Полная аминокислотная последовательность MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 745 Полная последовательность нуклеиновой кислоты atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaagtgcagcttcaacaatcaggacccggactcgtcaaaccatcgcagaccctcagcctcacttgcgccatctccggggactccatgctgtccaactccgacacttggaactggattcggcagagcccgtccagaggattggaatggctgggaaggacctatcaccggtccacttggtacgacgattacgcctcgtccgtgcgcggtcgggtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtactccctgcaactgaacgccgtgacccctgaggacactggggtgtactactgtgcgagagtgcggctgcaggatgggaactcttggtccgacgccttcgatgtctggggccagggcaccatggtcactgtgtcatccggcggtggtggcagcggcggaggcggcagcggaggcggaggaagccagtcggcactgacccagcctgcctcagcctccgggagcccgggacagtccgtgaccatttcctgcaccgggacctcctccgacgtgggaggctacaactacgtgtcatggtaccagcagcaccccggaaaggcaccgaagctgatgatctacgacgtgtccaaccgcccgagcggggtgtcaaatcgcttctcgggctcgaagtcgggaaacacagcgagcctgacgatctcgggactgcaagccgaagatgaggctgactactactgctcgtcctacactagctccagcaccctctacgtgttcggtactggtacccagctgaccgtcctgaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctacaagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CD22-53 SEQ ID NO: 746 (Kabat) HCDR1 SNSAAWN SEQ ID NO: 747 (Kabat) HCDR2 RTYYRSKWYSDYAVSVKS SEQ ID NO: 748 (Kabat) HCDR3 DPYDFWSGYPDAFDI SEQ ID NO: 749 (Chothia) HCDR1 GDSVSSNSA SEQ ID NO: 750 (Chothia) HCDR2 YYRSKWY SEQ ID NO: 751 (Chothia) HCDR3 DPYDFWSGYPDAFDI SEQ ID NO: 752 VH EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYSDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDPYDFWSGYPDAFDIWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 753 ДНК VH gaggtacagctgcagcagtcaggtccaggactggtgaagccctcgcagaccctctcactcacctgtgccatctccggggacagtgtctctagcaacagtgctgcttggaactggatcaggcagtccccatcgagaggccttgagtggctgggaaggacatactacaggtccaagtggtatagtgattatgcagtatctgtgaaaagtcgaataaccatcaacccagacacatccaagaaccagttctccctgcagctgaactctgtgactcccgaggacacggctgtgtattactgtgcaagagatccttacgatttttggagtggttatcctgatgcttttgatatctggggccaagggacaatggtcaccgtctcttca SEQ ID NO: 754 (Kabat) LCDR1 TGTSSDVGGYNYVS SEQ ID NO: 755 (Kabat) LCDR2 EVNNRPS SEQ ID NO: 756 (Kabat) LCDR3 SSYTSGRTLYV SEQ ID NO: 757 (Chothia) LCDR1 TSSDVGGYNY SEQ ID NO: 758 (Chothia) LCDR2 EVN SEQ ID NO: 759 (Chothia) LCDR3 YTSGRTLY SEQ ID NO: 760 VL QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKVIISEVNNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYFCSSYTSGRTLYVFGTGSKVTVLG SEQ ID NO: 761 ДНК VL cagtctgccctgactcagcctgcctccgtgtctgggtctcctggacagtcgatcaccatctcctgcactggaaccagcagtgacgttggtggttacaactatgtctcctggtaccaacagcacccaggcaaagcccccaaggtcataatttctgaggtcaataatcggccctcaggggtttctcatcgcttctctgggtccaagtctggcaacacggcctccctgaccatctctgggctccaggctgaggacgaggctgattatttctgcagctcatatacaagtggcaggactctttatgtcttcggaactgggagcaaggtcaccgtcctaggt SEQ ID NO: 762 Линкер GGGGSGGGGSGGGGS SEQ ID NO: 763 scFv (VH-линкер-VL) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYSDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARDPYDFWSGYPDAFDIWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKVIISEVNNRPSGVSHRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYFCSSYTSGRTLYVFGTGSKVTVLG

Обзор идентификаций последовательностей CDR (Kabat) последовательностей scFv-доменов CD22 из таблицы 6 показан в таблице 7 для вариабельных доменов тяжелой цепи и в таблице 8 для вариабельных доменов легкой цепи. SEQ ID NO относятся к находящимся в таблице 6.

Таблица 7. SEQ ID NO CDR вариабельных доменов тяжелой цепи (Kabat) молекул антител к CD22

Кандидат HCDR1 HCDR2 HCDR3 CD22-57 519 520 521 CD22-58 544 545 546 CD22-59 569 570 571 CD22-60 594 595 596 CD22-61 619 620 621 CD22-62 644 645 646 CD22-63 669 670 671 CD22-64 694 695 696 CD22-65 719 720 721

Таблица 8. CDR вариабельных доменов легкой цепи (Kabat) молекул антител к CD22

Кандидат LCDR1 LCDR2 LCDR3 CD22-57 530 531 532 CD22-58 555 556 557 CD22-59 580 581 582 CD22-60 605 606 607 CD22-61 630 631 632 CD22-62 655 656 657 CD22-63 680 681 682 CD22-64 705 706 707 CD22-65 730 731 732

Таблица 9. Вариабельные области тяжелой цепи молекул антител к CD22

Кандидат Вариабельная область тяжелой цепи CD22-57 528 CD22-58 553 CD22-59 578 CD22-60 603 CD22-61 628 CD22-62 653 CD22-63 678 CD22-64 703 CD22-65 728

Таблица 10. Вариабельные области легкой цепи молекул антител к CD22

Кандидат Вариабельная область легкой цепи CD22-57 539 CD22-58 564 CD22-59 589 CD22-60 614 CD22-61 639 CD22-62 664 CD22-63 689 CD22-64 714 CD22-65 739

В некоторых вариантах осуществления CAR для CD22 содержит короткий линкер Gly-Ser (например, линкер GGGGS) между последовательностями VH и VL в scFv, как показано в конструкции CD22-65s, например в таблице 6.

В следующем варианте осуществления CAR для CD22 содержит одну или несколько мутаций относительно аминокислотной последовательности CD22-65s, например, одну или несколько мутаций в FR-области VH и/или VL. В одном варианте осуществления CAR для CD22 содержит мутацию по аминокислоте 41 CD22-65s VH-области (например, замену Q в положении 41 VH CD22-65s, например на K); и/или мутацию аминокислоты 40 VL CD22-65s (например, замена Q в положении 40 VL CD22-65s, например на D). В одном варианте осуществления CAR для CD22 содержит аминокислотную последовательность CD22-65sKD, показанную ниже. Выравнивание CD22-65s и CD22-65sKD показано ниже.

Конструкции CAR для CD19

В одном варианте осуществления антигенсвязывающий домен к CD19 конструкции CAR представляет собой антигенсвязывающую часть, например CDR, CAR, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных, например, в публикации согласно РСТ WO2012/079000; публикации согласно РСТ WO2014/153270; Kochenderfer, J.N. et al., J. Immunother. 32 (7), 689-702 (2009); Kochenderfer, J.N., et al., Blood, 116 (20), 4099-4102 (2010); публикации согласно PCT WO2014/031687; Bejcek, Cancer Research, 55, 2346-2351, 1995; или патенте США № 7446190, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления CAR для CD19 содержит аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 12 в публикации согласно PCT WO2012/079000. В варианте осуществления аминокислотная последовательность представляет собой

или последовательность, практически гомологичную ей. Необязательная последовательность сигнального пептида показана заглавными буквами и круглыми скобками.

В одном варианте осуществления аминокислотная последовательность представляет собой

diqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvsstttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr (SEQ ID NO: ), или последовательность, практически гомологичную ей.

В одном варианте осуществления CAR для CD19 имеет обозначение согласно USAN TISAGENLECLEUCEL-T. В вариантах осуществления CTL019 получают посредством генной модификации T-клеток, опосредованной стабильной вставкой путем трансдукции с помощью самоинактивирующегося лентивирусного (LV) вектора, дефектного по репликации, содержащего трансген CTL019 под контролем промотора EF-1 альфа. CTL019 может представлять собой смесь положительных и отрицательных по трансгену Т-клеток, которые доставляют субъекту из расчета процентного количества положительных по трансгену Т-клеток.

В некоторых вариантах осуществления CAR для CD19 содержит антигенсвязывающий домен (например, гуманизированный антигенсвязывающий домен) согласно таблице 3 из WO2014/153270, включенной в данный документ посредством ссылки.

Гуманизация мышиного антитела к CD19 требуется в клинических условиях, когда специфические для мышей остатки могут индуцировать ответ с образованием антител человека к антигену мыши (HAMA) у пациентов, которые получают лечение с помощью CART19, т. е. лечение с помощью T-клеток, трансдуцированных конструкцией CAR19. Получение, характеризация и эффективность гуманизированных последовательностей CAR для CD19 описаны в Международной заявке WO2014/153270, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте, включая примеры 1-5 (стр. 115-159), например, таблицы 3, 4 и 5 (стр. 125-147). В одном варианте осуществления CAR для CD19 включает в себя молекулу CAR или антигенсвязывающий домен (например, гуманизированный антигенсвязывающий домен) согласно таблице 3 из WO2014/153270, включенной в данный документ посредством ссылки. Аминокислотные последовательности молекул CAR для CD19 и антигенсвязывающих доменов (например, содержащих одну, две, три CDR VH и одну, две, три CDR VL согласно Kabat или Chothia) и нуклеотидные последовательности, кодирующие их, указаны в WO2014/153270. В вариантах осуществления CAR для CD19 или антигенсвязывающий домен содержит аминокислоту или имеет нуклеотидную последовательность, показанную в WO2014/153270, включенной в данный документ посредством ссылки, или последовательность, практически идентичную любой из вышеупомянутых последовательностей (например, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или больше идентичную любой из вышеупомянутых последовательностей).

В некоторых вариантах осуществления конструкции CAR для CD19 описаны в публикации согласно PCT WO 2012/079000, включенной в данный документ посредством ссылки, и аминокислотная последовательность мышиного CAR для CD19 и конструкции scFv показаны в таблице 11 ниже, или последовательность, практически идентичная любой из вышеупомянутых последовательностей (например, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или больше идентичная любой из последовательностей, описанных в данном документе).

Таблица 11. Конструкции CAR для CD19

Номер SEQ ID Область Последовательность CTL019 SEQ ID NO: 764 Полная аминокислотная последовательность CTL019 MALPVTALLLPLALLLHAARPdiqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvsstttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr Полная нуклеотидная последовательность CTL019 atggccttaccagtgaccgccttgctcctgccgctggccttgctgctccacgccgccaggccggacatccagatgacacagactacatcctccctgtctgcctctctgggagacagagtcaccatcagttgcagggcaagtcaggacattagtaaatatttaaattggtatcagcagaaaccagatggaactgttaaactcctgatctaccatacatcaagattacactcaggagtcccatcaaggttcagtggcagtgggtctggaacagattattctctcaccattagcaacctggagcaagaagatattgccacttacttttgccaacagggtaatacgcttccgtacacgttcggaggggggaccaagctggagatcacaggtggcggtggctcgggcggtggtgggtcgggtggcggcggatctgaggtgaaactgcaggagtcaggacctggcctggtggcgccctcacagagcctgtccgtcacatgcactgtctcaggggtctcattacccgactatggtgtaagctggattcgccagcctccacgaaagggtctggagtggctgggagtaatatggggtagtgaaaccacatactataattcagctctcaaatccagactgaccatcatcaaggacaactccaagagccaagttttcttaaaaatgaacagtctgcaaactgatgacacagccatttactactgtgccaaacattattactacggtggtagctatgctatggactactggggccaaggaacctcagtcaccgtctcctcaaccacgacgccagcgccgcgaccaccaacaccggcgcccaccatcgcgtcgcagcccctgtccctgcgcccagaggcgtgccggccagcggcggggggcgcagtgcacacgagggggctggacttcgcctgtgatatctacatctgggcgcccttggccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgcaaacggggcagaaagaaactcctgtatatattcaaacaaccatttatgagaccagtacaaactactcaagaggaagatggctgtagctgccgatttccagaagaagaagaaggaggatgtgaactgagagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtacaagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgc SEQ ID NO: 765 scFv-домен CTL019 Diqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvss mCAR1 SEQ ID NO: 766 mCAR1 scFv QVQLLESGAELVRPGSSVKISCKASGYAFSSYWMNWVKQRPGQGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGQATLTADKSSSTAYMQLSGLTSEDSAVYSCARKTISSVVDFYFDYWGQGTTVTGGGSGGGSGGGSGGGSELVLTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKPLIYSATYRNSGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSKDLADYFCQYNRYPYTSFFFTKLEIKRRS SEQ ID NO: 767 Полная аминокислотная последовательность mCAR1 QVQLLESGAELVRPGSSVKISCKASGYAFSSYWMNWVKQRPGQGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGQATLTADKSSSTAYMQLSGLTSEDSAVYSCARKTISSVVDFYFDYWGQGTTVTGGGSGGGSGGGSGGGSELVLTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKPLIYSATYRNSGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSKDLADYFCQYNRYPYTSFFFTKLEIKRRSKIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR mCAR2 SEQ ID NO: 768 mCAR2 scFv DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSE SEQ ID NO: 769 Аминокислотная последовательность mCAR2 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSESKYGPPCPPCPMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRL SEQ ID NO: 770 Полная аминокислотная последовательность mCAR2 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSESKYGPPCPPCPMFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPRLEGGGEGRGSLLTCGDVEENPGPRMLLLVTSLLLCELPHPAFLLIPRKVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPVAFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAVVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVSCRNVSRGRECVDKCNLLEGEPREFVENSECIQCHPECLPQAMNITCTGRGPDNCIQCAHYIDGPHCVKTCPAGVMGENNTLVWKYADAGHVCHLCHPNCTYGCTGPGLEGCPTNGPKIPSIATGMVGALLLLLVVALGIGLFM mCAR3 SEQ ID NO: 771 mCAR3 scFv DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSS SEQ ID NO: 772 Полная аминокислотная последовательность mCAR3 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SSJ25-C1 Последовательность SSJ25-C1 VH QVQLLESGAELVRPGSSVKISCKASGYAFSSYWMNWVKQRPGQGLEWIGQIYPGDGDTNYNGKFKGQATLTADKSSSTAYMQLSGLTSEDSAVYSCARKTISSVVDFYFDYWGQGTTVT SSJ25-C1 VL ELVLTQSPKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVGTNVAWYQQKPGQSPKPLIYSATYRNSGVPDRFTGSGSGTDFTLTITNVQSKDLADYFYFCQYNRYPYTSGGGTKLEIKRRS Гуманизированный CAR1 scFv-домен CAR1 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS CAR 1 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR2 scFv-домен CAR2 - a.к. (линкер подчеркнут) EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS scFv-домен CAR2 - н.к. atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagccaccaccatcatcaccatcaccat CAR 2 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR CAR 2 - полный - н.к. atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctacaagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcgg CAR2 - растворимый scFv - а. к. MALPVTALLLPLALLLHAARP eivmtqspatlslspgeratlscrasqdiskylnwyqqkpgqaprlliyhtsrlhsgiparfsgsgsgtdytltisslqpedfavyfcqqgntlpytfgqgtkleikggggsggggsggggsqvqlqesgpglvkpsetlsltctvsgvslpdygvswirqppgkglewigviwgsettyyqsslksrvtiskdnsknqvslklssvtaadtavyycakhyyyggsyamdywgqgtlvtvsshhhhhhhh Гуманизированный CAR3 scFv-домен CAR3 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK CAR 3 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR4 scFv-домен CAR4 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK CAR 4 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR5 scFv-домен CAR5 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS CAR 5 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR6 CAR6,
scFv-домен EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS CAR6 -
полный - а. к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR7 scFv-домен CAR7 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK CAR 7 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYSSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR8 scFv-домен CAR8 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK CAR 8 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR9 scFv-домен CAR9 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS CAR 9 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR10 scFv-домен CAR10 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK CAR 10 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR11 scFv-домен CAR11 EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS CAR 11 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Гуманизированный CAR12 CAR12
scFv-домен QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIK CAR 12 - полный - а.к. MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYNSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR Мышиный CART19 SEQ ID NO: 773 HCDR1 (Kabat) DYGVS SEQ ID NO: 774 HCDR2 (Kabat) VIWGSETTYYNSALKS SEQ ID NO: 775 HCDR3 (Kabat) HYYYGGSYAMDY SEQ ID NO: 776 LCDR1 (Kabat) RASQDISKYLN SEQ ID NO: 777 LCDR2 (Kabat) HTSRLHS SEQ ID NO: 778 LCDR3 (Kabat) QQGNTLPYT Гуманизированный CART19 a SEQ ID NO: 779 HCDR1 (Kabat) DYGVS SEQ ID NO: 780 HCDR2 (Kabat) VIWGSETTYYSSSLKS SEQ ID NO: 781 HCDR3 (Kabat) HYYYGGSYAMDY SEQ ID NO: 782 LCDR1 (Kabat) RASQDISKYLN SEQ ID NO: 783 LCDR2 (Kabat) HTSRLHS SEQ ID NO: 784 LCDR3 (Kabat) QQGNTLPYT Гуманизированный CART19 b SEQ ID NO: 785 HCDR1 (Kabat) DYGVS SEQ ID NO: 786 HCDR2 (Kabat) VIWGSETTYYQSSLKS SEQ ID NO: 787 HCDR3 (Kabat) HYYYGGSYAMDY SEQ ID NO: 788 LCDR1 (Kabat) RASQDISKYLN SEQ ID NO: 789 LCDR2 (Kabat) HTSRLHS SEQ ID NO: 790 LCDR3 (Kabat) QQGNTLPYT Гуманизированный CART19 c SEQ ID NO: 791 HCDR1 (Kabat) DYGVS SEQ ID NO: 792 HCDR2 (Kabat) VIWGSETTYYNSSLKS SEQ ID NO: 793 HCDR3 (Kabat) HYYYGGSYAMDY SEQ ID NO: 794 LCDR1 (Kabat) RASQDISKYLN SEQ ID NO: 795 LCDR2 (Kabat) HTSRLHS SEQ ID NO: 796 LCDR3 (Kabat) QQGNTLPYT

Конструкции CAR для CD19, содержащие гуманизированные scFv-домены, связывающие CD19, описаны в публикации согласно PCT WO 2014/153270, включенной в данный документ посредством ссылки.

Последовательности мышиных и гуманизированных последовательностей scFv-доменов CDR, связывающих CD19, показаны в таблице 12 для вариабельных доменов тяжелой цепи и в таблице 13 для вариабельных доменов легкой цепи. SEQ ID NO относятся к находящимся в таблице 11. В некоторых вариантах осуществления HCDR1 мышиного или гуманизированного CD19-связывающего домена представляет собой GVSLPDYGVS.

Таблица 12. SEQ ID NO CDR вариабельных доменов тяжелой цепи (Kabat) антител к CD19

Кандидат HCDR1 HCDR2 HCDR3 Мышиный_CART19 773 774 775 Гуманизированный CART19 a 779 780 781 Гуманизированный CART19 b 785 786 787 Гуманизированный CART19 c 791 792 793

Таблица 13. SEQ ID NO CDR вариабельных доменов легкой цепи (Kabat) антител к CD19

Кандидат LCDR1 LCDR2 LCDR3 Мышиный_CART19 776 777 778 Гуманизированный CART19 a 782 783 784 Гуманизированный CART19 b 788 789 790 Гуманизированный CART19 c 794 795 796

Общие последовательности CAR

Последовательности, применимые для образования CAR, представлены ниже в таблице 14.

Таблица 14. Последовательности компонентов CAR

Номер SEQ ID Область Последовательность SEQ ID NO: 797 Лидерная аминокислотная последовательность MALPVTALLLPLALLLHAARP SEQ ID NO: 798 Лидерная последовательность нуклеиновой кислоты atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccc SEQ ID NO: 799 Шарнирная аминокислотная последовательность CD8 TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACD SEQ ID NO: 800 Шарнирная последовательность нуклеиновой кислоты CD8 ACCACGACGCCAGCGCCGCGACCACCAACACCGGCGCCCACCATCGCGTCGCAGCCCCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCGTGCCGGCCAGCGGCGGGGGGCGCAGTGCACACGAGGGGGCTGGACTTCGCCTGTGAT SEQ ID NO: 801 Трансмембранная область CD8 (аминокислотная последовательность) IYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC SEQ ID NO: 802 Трансмембранный CD8 (последовательность нуклеиновой кислоты) atctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgt Трансмембранный CD8 (последовательность нуклеиновой кислоты) ATCTACATCTGGGCGCCCTTGGCCGGGACTTGTGGGGTCCTTCTCCTGTCACTGGTTATCACCCTTTACTGC SEQ ID NO: 803 Внутриклеточный домен 4-1BB (аминокислотная последовательность) KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL SEQ ID NO: 804 Внутриклеточный домен 4-1BB (последовательность нуклеиновой кислоты) aagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactg Внутриклеточный домен 4-1BB (последовательность нуклеиновой кислоты) AAACGGGGCAGAAAGAAACTCCTGTATATATTCAAACAACCATTTATGAGACCAGTACAAACTACTCAAGAGGAAGATGGCTGTAGCTGCCGATTTCCAGAAGAAGAAGAAGGAGGATGTGAACTG SEQ ID NO: 805 CD3-дзета домен (аминокислотная последовательность) RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 806 CD3-дзета (последовательность нуклеиновой кислоты) CGCGTGAAATTCAGCCGCAGCGCAGATGCTCCAGCCTACAAGCAGGGGCAGAACCAGCTCTACAACGAACTCAATCTTGGTCGGAGAGAGGAGTACGACGTGCTGGACAAGCGGAGAGGACGGGACCCAGAAATGGGCGGGAAGCCGCGCAGAAAGAATCCCCAAGAGGGCCTGTACAACGAGCTCCAAAAGGATAAGATGGCAGAAGCCTATAGCGAGATTGGTATGAAAGGGGAACGCAGAAGAGGCAAAGGCCACGACGGACTGTACCAGGGACTCAGCACCGCCACCAAGGACACCTATGACGCTCTTCACATGCAGGCCCTGCCGCCTCGG CD3-дзета (н. к.)
(мутант Q/K) AGAGTGAAGTTCAGCAGGAGCGCAGACGCCCCCGCGTACAAGCAGGGCCAGAACCAGCTCTATAACGAGCTCAATCTAGGACGAAGAGAGGAGTACGATGTTTTGGACAAGAGACGTGGCCGGGACCCTGAGATGGGGGGAAAGCCGAGAAGGAAGAACCCTCAGGAAGGCCTGTACAATGAACTGCAGAAAGATAAGATGGCGGAGGCCTACAGTGAGATTGGGATGAAAGGCGAGCGCCGGAGGGGCAAGGGGCACGATGGCCTTTACCAGGGTCTCAGTACAGCCACCAAGGACACCTACGACGCCCTTCACATGCAGGCCCTGCCCCCTCGC SEQ ID NO: 807 Домен CD3-дзета (аминокислотная последовательность; эталонная последовательность NCBI NM_000734.3) RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 808 CD3-дзета (последовательность нуклеиновой кислоты; эталонная последовательность NCBI NM_000734.3) agagtgaagttcagcaggagcgcagacgcccccgcgtaccagcagggccagaaccagctctataacgagctcaatctaggacgaagagaggagtacgatgttttggacaagagacgtggccgggaccctgagatggggggaaagccgagaaggaagaaccctcaggaaggcctgtacaatgaactgcagaaagataagatggcggaggcctacagtgagattgggatgaaaggcgagcgccggaggggcaaggggcacgatggcctttaccagggtctcagtacagccaccaaggacacctacgacgcccttcacatgcaggccctgccccctcgc SEQ ID NO: 809 Домен CD28 (аминокислотная последовательность) RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS SEQ ID NO: 810 Домен CD28 (последовательность нуклеиновой кислоты) AGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCACGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCC SEQ ID NO: 811 Домен ICOS дикого типа (аминокислотная последовательность) TKKKYSSSVHDPNGEYMFMRAVNTAKKSRLTDVTL SEQ ID NO: 812 Домен ICOS дикого типа (нуклеотидная последовательность) ACAAAAAAGAAGTATTCATCCAGTGTGCACGACCCTAACGGTGAATACATGTTCATGAGAGCAGTGAACACAGCCAAAAAATCCAGACTCACAGATGTGACCCTA SEQ ID NO: 813 Домен ICOS с мутацией Y на F (аминокислотная последовательность) TKKKYSSSVHDPNGEFMFMRAVNTAKKSRLTDVTL SEQ ID NO: 814 Шарнирный участок IgG4 (аминокислотная последовательность) ESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKM SEQ ID NO: 815 Шарнирный участок IgG4 (последовательность нуклеиновой кислоты) GAGAGCAAGTACGGCCCTCCCTGCCCCCCTTGCCCTGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCCGGACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCCGGGAGGAGCAGTTCAATAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAATACAAGTGTAAGGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCAGCAGCATCGAGAAAACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTCGGGAGCCCCAGGTGTACACCCTGCCCCCTAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGCCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCTGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCCGGCTGACCGTGGACAAGAGCCGGTGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGCAAGATG SEQ ID NO: 816 Шарнирный участок IgD (аминокислотная последовательность) RWPESPKAQASSVPTAQPQAEGSLAKATTAPATTRNTGRGGEEKKKEKEKEEQEERETKTPECPSHTQPLGVYLLTPAVQDLWLRDKATFTCFVVGSDLKDAHLTWEVAGKVPTGGVEEGLLERHSNGSQSQHSRLTLPRSLWNAGTSVTCTLNHPSLPPQRLMALREPAAQAPVKLSLNLLASSDPPEAASWLLCEVSGFSPPNILLMWLEDQREVNTSGFAPARPPPQPGSTTFWAWSVLRVPAPPSPQPATYTCVVSHEDSRTLLNASRSLEVSYVTDH SEQ ID NO: 817 Шарнирный участок IgD (последовательность нуклеиновой кислоты) AGGTGGCCCGAAAGTCCCAAGGCCCAGGCATCTAGTGTTCCTACTGCACAGCCCCAGGCAGAAGGCAGCCTAGCCAAAGCTACTACTGCACCTGCCACTACGCGCAATACTGGCCGTGGCGGGGAGGAGAAGAAAAAGGAGAAAGAGAAAGAAGAACAGGAAGAGAGGGAGACCAAGACCCCTGAATGTCCATCCCATACCCAGCCGCTGGGCGTCTATCTCTTGACTCCCGCAGTACAGGACTTGTGGCTTAGAGATAAGGCCACCTTTACATGTTTCGTCGTGGGCTCTGACCTGAAGGATGCCCATTTGACTTGGGAGGTTGCCGGAAAGGTACCCACAGGGGGGGTTGAGGAAGGGTTGCTGGAGCGCCATTCCAATGGCTCTCAGAGCCAGCACTCAAGACTCACCCTTCCGAGATCCCTGTGGAACGCCGGGACCTCTGTCACATGTACTCTAAATCATCCTAGCCTGCCCCCACAGCGTCTGATGGCCCTTAGAGAGCCAGCCGCCCAGGCACCAGTTAAGCTTAGCCTGAATCTGCTCGCCAGTAGTGATCCCCCAGAGGCCGCCAGCTGGCTCTTATGCGAAGTGTCCGGCTTTAGCCCGCCCAACATCTTGCTCATGTGGCTGGAGGACCAGCGAGAAGTGAACACCAGCGGCTTCGCTCCAGCCCGGCCCCCACCCCAGCCGGGTTCTACCACATTCTGGGCCTGGAGTGTCTTAAGGGTCCCAGCACCACCTAGCCCCCAGCCAGCCACATACACCTGTGTTGTGTCCCATGAAGATAGCAGGACCCTGCTAAATGCTTCTAGGAGTCTGGAGGTTTCCTACGTGACTGACCATT SEQ ID NO: 818 Сигнальный домен CD27 (аминокислота) QRRKYRSNKGESPVEPAEPCRYSCPREEEGSTIPIQEDYRKPEPACSP SEQ ID NO: 819 Сигнальный домен CD27 (последовательность нуклеиновой кислоты) AGGAGTAAGAGGAGCAGGCTCCTGCACAGTGACTACATGAACATGACTCCCCGCCGCCCCGGGCCCACCCGCAAGCATTACCAGCCCTATGCCCCACCACGCGACTTCGCAGCCTATCGCTCC SEQ ID NO: 820 Внеклеточный домен PD1 (аминокислотная последовательность) pgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlv SEQ ID NO: 821 Внеклеточный домен PD1 (последовательность нуклеиновой кислоты) cccggatggtttctggactctccggatcgcccgtggaatcccccaaccttctcaccggcactcttggttgtgactgagggcgataatgcgaccttcacgtgctcgttctccaacacctccgaatcattcgtgctgaactggtaccgcatgagcccgtcaaaccagaccgacaagctcgccgcgtttccggaagatcggtcgcaaccgggacaggattgtcggttccgcgtgactcaactgccgaatggcagagacttccacatgagcgtggtccgcgctaggcgaaacgactccgggacctacctgtgcggagccatctcgctggcgcctaaggcccaaatcaaagagagcttgagggccgaactgagagtgaccgagcgcagagctgaggtgccaactgcacatccatccccatcgcctcggcctgcggggcagtttcagaccctggtc SEQ ID NO: 822 Аминокислотная последовательность CAR PD1 pgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlvtttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr SEQ ID NO: 823 PD1 CAR (последовательность нуклеиновой кислоты) cccggatggtttctggactctccggatcgcccgtggaatcccccaaccttctcaccggcactcttggttgtgactgagggcgataatgcgaccttcacgtgctcgttctccaacacctccgaatcattcgtgctgaactggtaccgcatgagcccgtcaaaccagaccgacaagctcgccgcgtttccggaagatcggtcgcaaccgggacaggattgtcggttccgcgtgactcaactgccgaatggcagagacttccacatgagcgtggtccgcgctaggcgaaacgactccgggacctacctgtgcggagccatctcgctggcgcctaaggcccaaatcaaagagagcttgagggccgaactgagagtgaccgagcgcagagctgaggtgccaactgcacatccatccccatcgcctcggcctgcggggcagtttcagaccctggtcacgaccactccggcgccgcgcccaccgactccggccccaactatcgcgagccagcccctgtcgctgaggccggaagcatgccgccctgccgccggaggtgctgtgcatacccggggattggacttcgcatgcgacatctacatttgggctcctctcgccggaacttgtggcgtgctccttctgtccctggtcatcaccctgtactgcaagcggggtcggaaaaagcttctgtacattttcaagcagcccttcatgaggcccgtgcaaaccacccaggaggaggacggttgctcctgccggttccccgaagaggaagaaggaggttgcgagctgcgcgtgaagttctcccggagcgccgacgcccccgcctataagcagggccagaaccagctgtacaacgaactgaacctgggacggcgggaagagtacgatgtgctggacaagcggcgcggccgggaccccgaaatgggcgggaagcctagaagaaagaaccctcaggaaggcctgtataacgagctgcagaaggacaagatggccgaggcctactccgaaattgggatgaagggagagcggcggaggggaaaggggcacgacggcctgtaccaaggactgtccaccgccaccaaggacacatacgatgccctgcacatgcaggcccttccccctcgc FKBP SEQ ID NO: 824 Полная аминокислотная последовательность FKBP DVPDYASLGGPSSPKKKRKVSRGVQVETISPGDGRTFPKRGQTCVVHYTGMLEDGKKFDSSRDRNKPFKFMLGKQEVIRGWEEGVAQMSVGQRAKLTISPDYAYGATGHPGIIPPHATLVFDVELLKLETSY SEQ ID NO: 825 Фрагмент аминокислотной последовательности FKBP VQVETISPGDGRTFPKRGQTCVVHYTGMLEDGKKFDSSRDRNKPFKFMLGKQEVIRGWEEGVAQMSVGQRAKLTISPDYAYGATGHPGIIPPHATLVFDVELLKLETS SEQ ID NO: 826 FRB ILWHEMWHEGLEEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLTQAWDLYYHVFRRISK Мутанты FRB SEQ ID NO: 827 Мутант E2032I ILWHEMWHEGLIEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLTQAWDLYYHVFRRISKTS SEQ ID NO: 828 Мутант E2032L ILWHEMWHEGLLEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLTQAWDLYYHVFRRISKTS SEQ ID NO: 829 Мутант T2098L ILWHEMWHEGLEEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLLQAWDLYYHVFRRISKTS SEQ ID NO: 830 Мутант E2032, T2098 ILWHEMWHEGLXEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLXQAWDLYYHVFRRISKTS SEQ ID NO: 831 Мутант E2032I, T2098L ILWHEMWHEGLIEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLLQAWDLYYHVFRRISKTS SEQ ID NO: 832 Мутант E2032L,
T2098L ILWHEMWHEGLLEASRLYFGERNVKGMFEVLEPLHAMMERGPQTLKETSFNQAYGRDLMEAQEWCRKYMKSGNVKDLLQAWDLYYHVFRRISKTS Промотор EF1-альфа SEQ ID NO: 833 Последовательность нуклеиновой кислоты промотора EF1-альфа CGTGAGGCTCCGGTGCCCGTCAGTGGGCAGAGCGCACATCGCCCACAGTCCCCGAGAAGTTGGGGGGAGGGGTCGGCAATTGAACCGGTGCCTAGAGAAGGTGGCGCGGGGTAAACTGGGAAAGTGATGTCGTGTACTGGCTCCGCCTTTTTCCCGAGGGTGGGGGAGAACCGTATATAAGTGCAGTAGTCGCCGTGAACGTTCTTTTTCGCAACGGGTTTGCCGCCAGAACACAGGTAAGTGCCGTGTGTGGTTCCCGCGGGCCTGGCCTCTTTACGGGTTATGGCCCTTGCGTGCCTTGAATTACTTCCACCTGGCTGCAGTACGTGATTCTTGATCCCGAGCTTCGGGTTGGAAGTGGGTGGGAGAGTTCGAGGCCTTGCGCTTAAGGAGCCCCTTCGCCTCGTGCTTGAGTTGAGGCCTGGCCTGGGCGCTGGGGCCGCCGCGTGCGAATCTGGTGGCACCTTCGCGCCTGTCTCGCTGCTTTCGATAAGTCTCTAGCCATTTAAAATTTTTGATGACCTGCTGCGACGCTTTTTTTCTGGCAAGATAGTCTTGTAAATGCGGGCCAAGATCTGCACACTGGTATTTCGGTTTTTGGGGCCGCGGGCGGCGACGGGGCCCGTGCGTCCCAGCGCACATGTTCGGCGAGGCGGGGCCTGCGAGCGCGGCCACCGAGAATCGGACGGGGGTAGTCTCAAGCTGGCCGGCCTGCTCTGGTGCCTGGCCTCGCGCCGCCGTGTATCGCCCCGCCCTGGGCGGCAAGGCTGGCCCGGTCGGCACCAGTTGCGTGAGCGGAAAGATGGCCGCTTCCCGGCCCTGCTGCAGGGAGCTCAAAATGGAGGACGCGGCGCTCGGGAGAGCGGGCGGGTGAGTCACCCACACAAAGGAAAAGGGCCTTTCCGTCCTCAGCCGTCGCTTCATGTGACTCCACGGAGTACCGGGCGCCGTCCAGGCACCTCGATTAGTTCTCGAGCTTTTGGAGTACGTCGTCTTTAGGTTGGGGGGAGGGGTTTTATGCGATGGAGTTTCCCCACACTGAGTGGGTGGAGACTGAAGTTAGGCCAGCTTGGCACTTGATGTAATTCTCCTTGGAATTTGCCCTTTTTGAGTTTGGATCTTGGTTCATTCTCAAGCCTCAGACAGTGGTTCAAAGTTTTTTTCTTCCATTTCAGGTGTCGTGA Линкер SEQ ID NO: 834 Субъединица G4S GGGGS SEQ ID NO: 838 Линкер LAEAAAK

Тандемные конструкции CAR для CD19 и CD22

Создавали тандемные CAR, содержащие два разных scFv, которые нацеливаются на CD19 и CD22. Созданные конструкции scFv, связывающего CD19, и scFv, связывающего CD22, включали в себя два разных линкера: LAEAAAK (SEQ ID NO: 838) и GGGGS. Создание и оценивание тандемных CAR далее описываются в примере 13. Последовательности одиночных CAR, нацеливающихся на CD22 и CD19, представлены ниже в таблице 15.

Таблица 15. Последовательности аминокислот и нуклеиновых кислот одиночных CAR, нацеливающихся на CD22 и CD19

SEQ ID NO: Конструкция CAR для CD19/CD22 Последовательность SEQ ID NO: 844 Конструкция 171 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcttggcagaagccgccgcgaaagaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctgggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 845 Конструкция 171 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSLAEAAAKEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 846 Конструкция 172 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcggagggggagggagtgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctgggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 847 Конструкция 172 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* SEQ ID NO: 848 Конструкция 173 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcttggcagaagccgccgcgaaagaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggcggaggaggctcccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 849 Конструкция 173 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSLAEAAAKEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 850 Конструкция 174 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcggagggggagggagtgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggcggaggaggctcccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 851 Конструкция 174 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 852 Конструкция 177 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcttggcagaagccgccgcgaaacagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctggggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 853 Конструкция 177 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSLAEAAAKQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSGGGGSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* SEQ ID NO: 854 Конструкция 178 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcggagggggagggagtcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctggggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 855 Конструкция 178 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSGGGGSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 856 Конструкция 179 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcttggcagaagccgccgcgaaacagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggcggaggaggctccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 857 Конструкция 179 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSLAEAAAKQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 895 Конструкция 180 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcggagggggagggagtcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggcggaggaggctccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 858 Конструкция 180 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* SEQ ID NO: 859 Конструкция 181 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctgggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgttggcagaagccgccgcgaaagaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 860 Конструкция 181 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLLAEAAAKEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 861 Конструкция 182 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctgggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggagggggagggagtgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 862 Конструкция 182 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 863 Конструкция 183 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggcggaggaggctcccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgttggcagaagccgccgcgaaagaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 864 Конструкция 183 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLLAEAAAKEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 865 Конструкция 184 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggcccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggcggaggaggctcccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggagggggagggagtgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 866 Конструкция 184 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 867 Конструкция 185 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctggggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctttggcagaagccgccgcgaaagaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 868 Конструкция 185 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSGGGGSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSLAEAAAKEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 869 Конструкция 186 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctggggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggagggggagggagtgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 870 Конструкция 186 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSGGGGSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 871 Конструкция 187 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggcggaggaggctccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctttggcagaagccgccgcgaaagaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 872 Конструкция 187 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSLAEAAAKEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR SEQ ID NO: 873 Конструкция 188 (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggcggaggaggctccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggagggggagggagtgaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagcaccactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgtaagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactgcgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 874 Конструкция 188 (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARPQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSEIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSSTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCKRGRKKLLYIFKQPFMRPVQ
TTQEEDGCSCRFPEEEEGGCELRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR* SEQ ID NO: CD19/CD22 CAR Компонент Последовательность SEQ ID NO: 875 Линкер (аминокислотная последовательность) GGGGS SEQ ID NO: 876 Альтернативный линкер (аминокислотная последовательность) LAEAAAK SEQ ID NO: 877 Сигнальный пептид (последовательность нуклеиновой кислоты) atggccctccctgtcaccgccctgctgcttccgctggctcttctgctccacgccgctcggccc SEQ ID NO: 878 Сигнальный пептид (аминокислотная последовательность) MALPVTALLLPLALLLHAARP SEQ ID NO: 879 scFv CD19 (последовательность нуклеиновой кислоты) gaaattgtgatgacccagtcacccgccactcttagcctttcacccggtgagcgcgcaaccctgtcttgcagagcctcccaagacatctcaaaataccttaattggtatcaacagaagcccggacaggctcctcgccttctgatctaccacaccagccggctccattctggaatccctgccaggttcagcggtagcggatctgggaccgactacaccctcactatcagctcactgcagccagaggacttcgctgtctatttctgtcagcaagggaacaccctgccctacacctttggacagggcaccaagctcgagattaaaggtggaggtggcagcggaggaggtgggtccggcggtggaggaagccaggtccaactccaagaaagcggaccgggtcttgtgaagccatcagaaactctttcactgacttgtactgtgagcggagtgtctctccccgattacggggtgtcttggatcagacagccaccggggaagggtctggaatggattggagtgatttggggctctgagactacttactaccaatcatccctcaagtcacgcgtcaccatctcaaaggacaactctaagaatcaggtgtcactgaaactgtcatctgtgaccgcagccgacaccgccgtgtactattgcgctaagcattactattatggcgggagctacgcaatggattactggggacagggtactctggtcaccgtgtccagc SEQ ID NO: 880 scFV CD19 (аминокислотная последовательность; линкер показан курсивом и подчеркиванием) EIVMTQSPATLSLSPGERATLSCRASQDISKYLNWYQQKPGQAPRLLIYHTSRLHSGIPARFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFAVYFCQQGNTLPYTFGQGTKLEIKGGGGSGGGGSGGGGSQVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPGKGLEWIGVIWGSETTYYQSSLKSRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 881 scFv CD22 в ориентации тяжелая цепь/легкая цепь (последовательность нуклеиновой кислоты) gaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctgggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctcagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctg SEQ ID NO: 882 scFv CD22 в ориентации тяжелая цепь/легкая цепь (аминокислотная последовательность; линкер показан курсивом и подчеркиванием) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 883 scFv CD22 в ориентации тяжелая цепь/легкая цепь с более коротким (GGGGS) линкером между тяжелой/легкой цепями (последовательность нуклеиновой кислоты) gaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtctggcggaggaggctcccagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctg SEQ ID NO: 884 scFv CD22 в ориентации тяжелая цепь/легкая цепь с более коротким (GGGGS) линкером между тяжелой/легкой цепями (аминокислотная последовательность; линкер показан курсивом и подчеркиванием) EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSSGGGGSQSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVL SEQ ID NO: 885 scFV CD22 в ориентации легкая цепь/тяжелая цепь (последовательность нуклеиновой кислоты) cagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctggggggcggtggatcgggtggcgggggttcggggggcggcggctctgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtct SEQ ID NO: 886 scFV CD22 в ориентации легкая цепь/тяжелая цепь (аминокислотная последовательность; линкер показан курсивом и подчеркиванием) QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSGGGGSGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 887 scFv CD22 в ориентации легкая цепь/тяжелая цепь с более коротким линкером (GGGGS) между легкой и тяжелой цепями (последовательность нуклеиновой кислоты) cagtccgctcttacccaaccggcctcagcctcggggagccccggccagagcgtgaccatttcctgcaccggcacttcatccgacgtgggcggctacaactacgtgtcctggtaccaacagcacccgggaaaggcccccaagctcatgatctacgacgtgtccaacaggccctcgggagtgtccaaccggttctcgggttcgaaatcgggaaacacagccagcctgaccatcagcggactgcaggctgaagatgaagccgactactactgctcctcctacacctcgtcatccacgctctacgtgttcggcactggaactcagctgactgtgctgggcggaggaggctccgaagtgcagcttcaacaatcaggaccaggactcgtcaaaccatcacagaccctctccctcacatgtgccatctccggggactccatgttgagcaattccgacacttggaattggattagacaaagcccgtcccggggtctggaatggttgggacgcacctaccaccggtctacttggtacgacgactacgcgtcatccgtgcggggaagagtgtccatcaacgtggacacctccaagaaccagtacagcctgcagcttaatgccgtgactcctgaggatacgggcgtctactactgcgcccgcgtccgcctgcaagacgggaacagctggagcgatgcattcgatgtctggggccagggaactatggtcaccgtgtcgtct SEQ ID NO: 888 scFv CD22 в ориентации легкая цепь/тяжелая цепь с более коротким линкером (GGGGS) между легкой и тяжелой цепями (аминокислотная последовательность; линкер показан курсивом и подчеркиванием) QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTLYVFGTGTQLTVLGGGGSEVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSMLSNSDTWNWIRQSPSRGLEWLGRTYHRSTWYDDYASSVRGRVSINVDTSKNQYSLQLNAVTPEDTGVYYCARVRLQDGNSWSDAFDVWGQGTMVTVSS SEQ ID NO: 889 Шарнирный участок и трансмембранный домен (последовательность нуклеиновой кислоты) accactaccccagcaccgaggccacccaccccggctcctaccatcgcctcccagcctctgtccctgcgtccggaggcatgtagacccgcagctggtggggccgtgcatacccggggtcttgacttcgcctgcgatatctacatttgggcccctctggctggtacttgcggggtcctgctgctttcactcgtgatcactctttactgt SEQ ID NO: 890 Шарнирный участок и трансмембранный домен (аминокислотная последовательность) TTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVHTRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYC SEQ ID NO: 891 4-1BB (последовательность нуклеиновой кислоты) aagcgcggtcggaagaagctgctgtacatctttaagcaacccttcatgaggcctgtgcagactactcaagaggaggacggctgttcatgccggttcccagaggaggaggaaggcggctgcgaactg SEQ ID NO: 892 4-1BB (аминокислотная последовательность) KRGRKKLLYIFKQPFMRPVQTTQEEDGCSCRFPEEEEGGCEL SEQ ID NO: 893 CD3zeta (последовательность нуклеиновой кислоты) cgcgtgaaattcagccgcagcgcagatgctccagcctaccagcaggggcagaaccagctctacaacgaactcaatcttggtcggagagaggagtacgacgtgctggacaagcggagaggacgggacccagaaatgggcgggaagccgcgcagaaagaatccccaagagggcctgtacaacgagctccaaaaggataagatggcagaagcctatagcgagattggtatgaaaggggaacgcagaagaggcaaaggccacgacggactgtaccagggactcagcaccgccaccaaggacacctatgacgctcttcacatgcaggccctgccgcctcggtaa SEQ ID NO: 894 CD3zeta (аминокислотная последовательность) RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR*

ПРИМЕРЫ

Настоящее изобретение дополнительно подробно описано посредством ссылки на следующие экспериментальные примеры. Эти примеры предусмотрены лишь в целях иллюстрации и не предусматривают ограничительный характер, если не указано иное. Таким образом, настоящее изобретение не следует воспринимать как ограниченное следующими примерами, а, наоборот, необходимо воспринимать как охватывающее любые и все вариации, которые становятся очевидными, исходя из идеи, предусмотренной в данном документе.

Без дополнительного описания предполагается, что специалист обычной квалификации в данной области техники может с использованием предыдущего описания и последующих иллюстративных примеров получать и применять соединения по настоящему изобретению и осуществлять на практике заявленные способы. Следующие рабочие примеры конкретно указывают на различные аспекты настоящего изобретения и не должны быть истолкованы как ограничивающие каким-либо образом остальную часть настоящего раскрытия.

Пример 1. Создание моноклональных антител мыши к CD20 человека

Создавали панель моноклональных антител, нацеленных на CD20 человека, и отбирали с помощью подхода иммунизации на основе клеток (Proetzel G, Ebersbach H and Zhang C., Methods Mol Biol, 901:1-10, 2012). CD20 человека трансфицировали и экспрессировали на поверхности клеток 300-19 линии пре-В-клеток мыши. Трансфицированные CD20 клетки 300-19 использовали в качестве антигенов для иммунизации мышей и для последующего скрининга специфических гибридомных антител после слияния клеток.

Иммунизацию животных и сбор образцов выполняли в соответствии с одобренными IACUC стандартными протоколами использования животных (12 NBC 059). Вкратце, самок мышей Balb/c VAF возрастом 5-6 недель (Charles River Laboratories) иммунизировали трансфицированными CD20 человека клетками 300-19. Мышей подкожно иммунизировали 4 раза приблизительно 5×10⁶ клетками в 100 мкл фосфатно-солевого буферного раствора (PBS) на животное. Инъекцию осуществляли каждые 2-3 недели для развития иммунных ответов у животных. За три дня до слияния клеток для создания гибридомы мышей интраперитонеально стимулировали той же дозой клеточных антигенов и умерщвляли для сбора селезенок в стерильных хирургических условиях в день слияния клеток.

Селезенки от иммунизированных мышей использовали для получения одноклеточной суспензии в среде RPMI-1640. Клетки селезенки осаждали центрифугированием и дважды промывали средой RPMI-1640. Для слияний клеток с целью создания гибридомных клонов спленоциты смешивали и сливали с мышиными клетками миеломы P3X63Ag8.653 (Kearney J.F. et al., 1979. J. Immunol., 123:1548-1550) с использованием полиэтиленгликоля-1500 в качестве средства, способствующего слиянию клеток, согласно собственным стандартным протоколам слияния (Zhang C., Methods Mol. Biol. 901:117-135, 2012). После слияния клеток и центрифугирования клетки суспендировали в полной культуральной среде RPMI-1640 (200 мл/селезенка), содержащей добавку гипоксантин-аминоптерин-тимидин (HAT) (Sigma H-0262) и высевали в 96-луночные плоскодонные планшеты (Corning-Costar 3596) при 200 мкл клеточной суспензии на лунку.

После инкубации при 37°C, 5% CO₂ в течение 3-4 дней 100 мкл культуральной надосадочной жидкости удаляли из каждой лунки планшетов и заменяли равным объемом полной культуральной среды RPMI-1640, содержащей добавку гипоксантин-тимидин (HT) (Sigma H-0137). Планшеты продолжали инкубировать в атмосфере 5% CO₂ при 37°C, пока гибридомные клоны не вырастали достаточно большими колониями для скрининга антител.

Скрининг, субклонирование и отбор гибридом

На 2-ю неделю после слияния, когда гибридомные клетки вырастали до слияния наполовину в лунках планшета, и цвет культуральной надосадочной жидкости менялся на оранжевый, образцы гибридомных надосадочных жидкостей отбирали из культуральных планшетов для скрининга антител посредством иммунофлуоресценции проточной цитометрии. Для первичного скрининга гибридомные надосадочные жидкости анализировали посредством проточной цитометрии с использованием трансфицированных CD20 человека клеток 300-19 при сравнении с нетрансфицированными клетками 300-19. Вкратце, трансфицированные CD20 человека клетки 300-19 или нетрансфицированные клетки, соответственно, инкубировали с 50 мкл гибридомной надосадочной жидкости, а затем метили конъюгатом флуоресцеин-AffiniPure Fab-фрагмент антитела козы к IgG (H+L) мыши и анализировали посредством проточной цитометрии с Becton Dickinson FACSCalibur в автоматическом режиме.

С помощью анализа проточной цитометрии гибридомные клоны, которые реагировали с трансфицированными CD20 человека клетками 300-19, но не с нетрансфицированными клетками 300-19, идентифицировали и отбирали из культуральных планшетов. Требуемые гибридомные клоны размножали в планшетах T12 для дополнительного определения характеристик. Представляющий интерес гибридомный клон субклонировали путем предельного разведения и путем выделения отдельных колоний с помощью системы визуализации Cellavista для получения моноклональной популяции, которая продуцирует специфическое в отношении CD20 антитело. Отобранные гибридомные субклоны размножали на планшетах T12 и замораживали для криоконсервации или использовали для получения моноклональных антител. Изотип специфических моноклональных антител, полученных из гибридомных клонов, тестировали с использованием коммерчески доступных реагентов для изотипирования для определения свойства антитела.

На основании результатов скрининга идентифицировали панель 19 специфических в отношении CD20 человека гибридомных клонов и отбирали из иммунизации мышей антигеном CD20 человека (данные не показаны). Гибридомные антитела дополнительно тестировали на опухолевых тканях или клеточных линиях человека с целью идентификации лучших клонов для секвенирования и гуманизации антитела на основании его профиля связывания и биологического свойства.

Пример 2. Гуманизация scFv мыши

Лучшие клоны гуманизировали согласно стандартным способам, хорошо известным специалисту в данной области техники (Jones et al., Nature, 321: 522-525, 1986; Reichmann et al., Nature, 332: 323-329, 1988; Presta, Curr. Op. Struct. Biol., 2: 593-596, 1992).

Антигенсвязывающий сайт содержит определяющие комплементарность области (CDR) и положения за пределами CDR, т. е. в каркасной области вариабельных доменов (VL и VH), которые непосредственно или опосредованно влияют на связывание. Остатки каркасных областей, которые могут непосредственно влиять на связывание, можно найти, например, в так называемой области "внешней" петли, расположенной между CDR2 и CDR3. Остатки, которые опосредованно влияют на связывание, находили, например, в так называемых зонах Вернье (Foote and Winter 1992). Считается, что они поддерживают конформацию CDR. Такие положения за пределами CDR принимали во внимание при осуществлении выбора подходящего акцепторного каркаса для сведения к минимуму количества отклонений конечного гуманизированного антитела к последовательности акцептора зародышевой линии человека в каркасных областях.

Пример 3. Анализ и активность in vitro несущих гуманизированный scFv, связывающий CD20, CART

Гуманизированные, мышиные одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv), специфические в отношении CD20, созданные, как описано в вышеприведенных примерах, клонировали в лентивирусные векторы экспрессии CAR, содержащие цепь CD3-дзета и стимулирующие молекулы 4-1BB; CD20-C2H1, -C2H2, -C2H3, -C2H4, -C3H1, -C3H2, -C3H3, -C3H4, -C5H1, -C5H2, -C5H3, -C5H4, -C8H1, -C8H2, -C8H3 и -C8H4. Полученный из scFv крысы CAR CD20-3 и его гуманизированные производные -CD20-3m, -3J, -3H5k1 и -3H5k3, а также CD20-8aBBz CAR, основанный на scFv опубликованного CAR (Jensen et al., Mol. Ther., 2000, включенный в данный документ посредством ссылки), включали в качестве контролей. Кроме того, конструировали CAR, который основывался на вариабельных областях моноклонального антитела офатумумаб (CD20-Ofa) (регистрационный номер CAS: 679818-59-8, номер доступа в банк лекарственных средств: DB06650). Все CAR для CD20 изложены в таблице 1. Отбирали оптимальные конструкции на основании количества и качества ответов эффекторных T-клеток таких трансдуцированных CD20 CAR Т-клеток ("CD20 CART" или "CD20 CAR Т-клеток") в ответ на экспрессирующие CD20 ("CD20+" или "CD20-положительные") мишени. Ответы эффекторных T-клеток включают без ограничения клеточное размножение, пролиферацию, удвоение, продуцирование цитокина и уничтожение целевых клеток или цитолитическую активность (дегрануляцию).

Создание лентивирусного CAR для CD20

Гуманизированные кодирующие scFv лентивирусные векторы переноса использовали для получения геномного материала, упакованного в VSVg псевдотипированные лентивирусные частицы. ДНК лентивирусного вектора переноса, кодирующую CAR, смешивали с тремя компонентами упаковки VSVg, gag/pol и rev в комбинации с реагентом липофектамин для трансфекции клеток Lenti-X 293T (Clontech), с последующей заменой среды через 12-18 ч. Через 30 часов после замены среды среду собирали, фильтровали и хранили при -80°C.

В качестве альтернативы, лентивирус, кодирующий CAR для CD20, создавали в автоматизированном, мелкомасштабном режиме в 96-луночных планшетах, при этом содержащую вирус надосадочную жидкость использовали в свежем виде, без замораживания, для трансдукции линии репортерных Т-клеток Jurkat.

Создание CD20 CAR клеток JNL

Линия репортерных клеток Jurkat NFAT Luciferase (JNL) основывается на линии Т-клеток острого лейкоза Jurkat (RRID: CVCL_0367). Линию модифицировали для экспрессии люциферазы под контролем элемента ответа ядерного фактора активированных Т-клеток (NFAT). Для трансдукции с CAR для CD20 10000 клеток JNL/лунка 96-луночного планшета трансдуцировали с 50 мкл свежей надосадочной жидкости, содержащей отфильтрованный через фильтр 45 мкм вирус. Планшеты центрифугировали в течение 3 мин при 2000 об/мин. и культивировали в течение 4 дней.

Оценка эффективности CAR для CD20-перенаправленных клеток JNL

Для оценки функциональной способности CAR для CD20 активировать клетки JNL их совместно культивировали с целевыми раковыми клетками для считывания их активации путем количественного определения экспрессии люциферазы. Гуманизированные основанные на scFv CAR CD20-C2H1, -C2H2, -C2H3, -C2H4, -C3H1, -C3H2, -C3H3, -C3H4, -C5H1, -C5H2, -C5H3, -C5H4, -C8H1, -C8H2, -C8H3 и -C8H4 сравнивали с CD20-8aBBz и CD20-3, -3m, -3J, -3H5k3 и -3H5k1. Использовали контрольные CAR CD20-3 и CD20-8aBBz во всех анализах для сравнения вариаций анализа и/или действия в качестве контроля. EGFRvIII CAR Т-клетки (CAR 2174, Johnson et al., Science Translational Medicine 2015) использовали в качестве нецелевого контроля.

CART клетки JNL совместно культивировали с линией клеток лимфомы Беркитта Raji (RRID: CVCL_0511) и линиями диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL) Pfeiffer (RRID: CVCL_3326), HBL-1 (RRID: CVCL_4213) и TMD8 (RRID: CVCL_A442); при этом K562 (RRID: CVCL_0004), линия клеток хронического миелоидного лейкоза (CML) служила в качестве CD20-отрицательного контроля. Совместные культуры получали в 384-луночных планшетах при отношениях эффектора к мишени (E:T) 4:1, 2:1, 1:1 и 0,5:1 и инкубировали в течение 24 ч., после чего количественно определяли экспрессию люциферазы с помощью активированных CAR Т-клеток JNL с помощью Britelite plus Reporter Gene Assay System (PerkinElmer, Уолтем, Массачусетс). Количество света, испускаемого из каждой лунки (люминесценция), было прямым считыванием активации JNL соответствующим CAR. Все четыре CD20-положительные целевые линии клеток демонстрировали активацию всех гуманизированных CAR для CD20 (ФИГ. 1A-D). Гуманизация scFv мыши не приводила к потере связывания с CD20. Некоторые из гуманизированных scFv, которые были слиты с трансмембранным и сигнальным доменами CAR, по-видимому, улучшили эффективность CAR для активации T-клеток JNL. Ими были CD20-C2H1, -C2H3, -C5H1, -C5H2 и -C8H3. Ни один из гуманизированных CAR мыши не продемонстрировал активации CD20-отрицательной линией K562 (ФИГ. 1E).

Создание CD20 CAR Т-клеток

На основании результатов анализа по репортерам JNL, описанного выше, выбирали следующие CAR для анализа эффективности в первичных Т-клетках: CD20-C2H1, -C2H3, -C3H2, -C3H3, -C5H1, -C5H2 и -C8H2. Кроме того, добавляли CD20-Ofa и контроли CD20-8aBBz и CD20-3H5k3. Создавали CD20 CAR Т-клетки, исходя из крови от здоровых подвергнутых аферезу доноров, не подвергнутые воздействию Т-клетки которых получали путем негативного отбора Т-клеток, CD4+ и CD8+ лимфоцитов. Эти клетки активировали путем добавления гранул CD3/CD28 (Dynabeads® Human T-Expander CD3/CD28, Thermo Fisher Scientific) при отношении 1:3 (T-клетки к грануле) в T-клеточной среде (RPMI-1640, 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сыворотки (FCS), 2 мM L-глутамина, 1x пенициллин/стрептомицин, 100 мкM не являющихся незаменимыми аминокислот, 1 мM пирувата натрия, 10 мM Hepes и 55 мкM 2-меркаптоэтанола). T-клетки культивировали при 0,5×10⁶ Т-клеток в 1 мл среды на лунку 24-луночного планшета при 37°C, 5% CO₂. Через 24 часа, когда Т-клетки разрушались, добавляли 0,5 мл неконцентрированной или меньшие объемы концентрированной вирусной надосадочной жидкости; Т-клетки трансдуцировали при множественности инфекции (MOI) 5. Т-клетки начинали делиться с паттерном логарифмического роста, который контролировали путем измерения количества клеток на мл, и Т-клетки разбавляли свежей средой каждые два дня. Т-клетки начинали переходить в фазу покоя примерно через 10 дней; комбинация замедления скорости роста и уменьшения размера Т-клеток (приближается к 350 фл) определяет состояние Т-клеток, подлежащих криоконсервации для последующего анализа. Все CD20 CAR T-клетки получали в производственных условиях исследовательского уровня (т. е. не клинического уровня).

Перед криоконсервацией процентное содержание трансдуцированных клеток (экспрессирующих специфический в отношении CD20 CAR на клеточной поверхности) определяли посредством анализа проточной цитометрии на FACS Fortessa (BD). Вирусная трансдукция показала сравнимые уровни экспрессии, что указывает на сходную эффективность трансдукции (процент трансдуцированных клеток, ФИГ. 2), а также на поверхностную экспрессию соответствующих CAR (средняя интенсивность флуоресценции, MFI); при этом CD20-Ofa CAR показывал самые низкие уровни экспрессии (MFI 1370 относительно 2200-4420). Подсчет клеток культур CAR Т-клеток показал, что не обнаружено обнаруживаемого отрицательного эффекта scFv человека, несущего CAR-CD20, в отношении способности клеток нормально размножаться по сравнению с нетрансдуцированными Т-клетками ("UTD").

Оценивание эффективности CAR для CD20-перенаправленных Т-клеток

Для оценки функциональных способностей CD20 CAR T-клеток клетки, полученные, как описано выше, размораживали, подсчитывали и совместно культивировали с целевыми раковыми клетками для считывания их способности к уничтожению, секреции цитокинов, а также пролиферации. В дополнение к несущим гуманизированный scFv CAR CD20-C2H1, -C2H3, -C3H2, -C3H3, -C5H1, -C5H2 и -C8H2, CD20-Ofa CAR, а также контроли CD20-8aBBz и CD20-3H5k3 использовали в качестве контролей. CAR EGFRvIII и нетрансдуцированные Т-клетки (UTD) использовали в качестве контрольных нецелевых Т-клеток.

Для измерения продуцирования цитокинов CD20 CAR Т-клеток в ответ на экспрессирующие CD20 целевые клетки CAR Т-клетки совместно культивировали с линией лимфомы Беркитта Raji и линиями диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL) Pfeiffer, HBL-1 и TMD8; при этом K562, линия клеток хронического миелоидного лейкоза (CML), служила в качестве CD20-отрицательного контроля. Клетки культивировали при соотношении эффектор:мишень 1:1 и 25000 клеток на лунку 96-луночного планшета в течение 24 ч., после чего среду удаляли для анализа цитокинов с использованием набора V-PLEX Human IFN-γ (Meso Scale Diagnostics, Роквилл, Мэриленд) для количественного определения цитокинов. Данные показывают, что большинство гуманизированных CD20 CART мыши, а также CD20-8aBBz, CD20-Ofa и CD20-3H5k3 CART продуцировали IFN-γ при культивировании с CD20-положительными целевыми линиями клеток Raji, Pfeiffer, HBL1 и TMD8 (ФИГ. 3A и B). CD20-C3H2 и -C3H3 продуцировали самые высокие уровни цитокина, которые были подобными или более высокими, чем у CD20-8aBBz. Уровни цитокинов, продуцируемых CD20 CART после воздействия контрольных клеток K562, не выявлялись (ФИГ. 3A и B), что указывает на отсутствие неспецифической активации CAR для CD20.

Заключения

Все гуманизированные специфические в отношении CD20 CAR, тестируемые в данном документе, были одинаково хорошо экспрессированы на клеточной поверхности первичных T-клеток человека. CD20-C2H1, -C2H3, -C3H2, -C3H3, -C5H1, -C5H2 и -C8H2 были экспрессированы аналогично контрольным CD20-8aBBz и CD20-3H5k; только CD20-Ofa показывал более низкие уровни экспрессии. В анализе по репортерам T-клеток JNL все CD20 CAR T-клетки показывали сходную CD20-специфичную реактивность. CD20-C3H2 и CD20-C3H3 показывали немного лучшую или по меньшей мере одинаковую функцию по сравнению с CD20-8aBBz в отношении продуцирования IFN-γ первичными Т-клетками человека. В целом, перенос CAR для CD20 индуцировал реактивность связывания CD20, но не выявляли внецелевую функцию, что контролировалось с помощью CD20-отрицательной линии клеток K562.

Пример 4. Анализ и in vitro активности несущих scFv человека, связывающий CD22, CART

Одноцепочечные вариабельные фрагменты для антител к CD22 клонировали в лентивирусные векторы экспрессии CAR, содержащие CD3-дзета цепь, и стимулирующие молекулы 4-1BB; CD22-57, CD22-58, CD22-59, CD22-60, CD22-61, CD22-62, CD22-63, CD22-64 и CD22-65 сравнивали с CD22-53. Все CAR для CD22 изложены в таблице 6. Отбирали оптимальные конструкции на основании количества и качества ответов эффекторных T-клеток таких трансдуцированных CD22 CAR T-клеток ("CD22 CART" или "CD22 CAR Т-клеток") в ответ на экспрессирующие CD22 ("CD22+") мишени. Ответы эффекторных T-клеток включают без ограничения клеточное размножение, пролиферацию, удвоение, продуцирование цитокина и уничтожение целевых клеток или цитолитическую активность (дегрануляцию).

Создание CD22 CAR Т-клеток

Кодирующие scFv человека лентивирусные векторы переноса использовали для получения геномного материала, упакованного в VSVg псевдотипированные лентивирусные частицы. ДНК лентивирусного вектора переноса, кодирующую CAR, смешивали с тремя компонентами упаковки VSVg, gag/pol и rev в комбинации с реагентом липофектамин для трансфекции клеток Lenti-X 293T (Clontech), с последующей заменой среды через 12-18 ч. Через 30 часов после замены среды среду собирали, фильтровали и хранили при -80°C.

Создавали CD22 CAR Т-клетки, исходя из крови от здоровых подвергнутых аферезу доноров, не подвергнутые воздействию Т-клетки которых получали путем негативного отбора Т-клеток, CD4+ и CD8+ лимфоцитов. Эти клетки активировали путем добавления гранул CD3/CD28 (Dynabeads® Human T-Expander CD3/CD28, Thermo Fisher Scientific) при отношении 1:3 (T-клетки к грануле) в T-клеточной среде (RPMI1640, 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сыворотки (FCS), 2 мM L-глутамина, 1x пенициллин/стрептомицин, 100 мкM не являющихся незаменимыми аминокислот, 1 мM пирувата натрия, 10 мM Hepes и 55 мкM 2-меркаптоэтанола) при 37°C, 5% CO₂. T-клетки культивировали при 0,5×10⁶ Т-клеток в 1 мл среды на лунку 24-луночного планшета. Через 24 часа, когда Т-клетки разрушались, добавляли 0,5 мл неконцентрированной или меньшие объемы концентрированной вирусной надосадочной жидкости; Т-клетки трансдуцировали при множественности инфекции (MOI) 5. Т-клетки начали делиться с паттерном логарифмического роста, который контролировали путем измерения количества клеток на мл, и Т-клетки разбавляли свежей средой каждые два дня. Как только Т-клетки начинали переходить в фазу покоя примерно через 10 дней, логарифмический рост уменьшался. Комбинация замедления скорости роста и уменьшения размера Т-клеток (приближается к 350 фл) определяет состояние Т-клеток, подлежащих криоконсервации для последующего анализа. Все CD22 CAR T-клетки получали в производственных условиях исследовательского уровня (т. е. не клинического уровня).

Перед криоконсервацией процентное содержание трансдуцированных клеток (экспрессирующих специфический в отношении CD22 CAR на клеточной поверхности) определяли посредством анализа проточной цитометрии на FACS Fortessa (BD). Вирусная трансдукция показала сравнимые уровни экспрессии, что указывает на сходную эффективность трансдукции (процент трансдуцированных клеток, ФИГ. 4), а также на поверхностную экспрессию соответствующих CAR (средняя интенсивность флуоресценции, MFI). Только CD22-58 показывал самые низкие уровни экспрессии (MFI= 5700, по сравнению с >20000 для других CAR). Подсчет клеток культур CAR Т-клеток показал, что не обнаружено обнаруживаемого отрицательного эффекта scFv человека, несущего CAR-CD22, в отношении способности клеток нормально размножаться по сравнению с нетрансдуцированными Т-клетками ("UTD").

Оценивание эффективности CAR для CD22-перенаправленных Т-клеток

Для оценки функциональных способностей CD22 CAR T-клеток клетки, полученные, как описано выше, размораживали, подсчитывали и совместно культивировали с целевыми раковыми клетками для считывания их способности к уничтожению, секреции цитокинов, а также пролиферации. Кроме несущих scFv человека CAR использовали CD22-57, CD22-58, CD22-59, CD22-60, CD22-61, CD22-62, CD22-63, CD22-64 и CD22-65, CAR CD22-53 в качестве контроля. Использовали контрольный CAR CD22-53 во всех анализах для сравнения вариаций анализа и/или действия в качестве контроля. CAR EGFRvIII и нетрансдуцированные Т-клетки (UTD) использовали в качестве контрольных нецелевых Т-клеток.

T-клеточное уничтожение направляли на линии острого лимфобластного лейкоза (ALL) Nalm6 (RRID: CVCL_0092) и SEM (RRID: CVCL_0095); при этом K562 (RRID: CVCL_0004), линия клеток хронического миелоидного лейкоза (CML) служила в качестве CD20-отрицательного контроля. Все линии клеток трансдуцировали для экспрессии люциферазы в качестве репортера для жизнеспособности/уничтожения клеток. Цитолитические активности CD22 CART измеряли при титровании соотношений эффектор:целевая клетка (E:T) 20:1, 10:1, 5:1, 2,5:1, 1,25:1 0,63:1 и 0,31:1. Анализы начинали путем смешивания соответствующего числа Т-клеток с постоянным числом целевых клеток (25000 клеток на лунку 96-луночного планшета). Через 20 часов оставшиеся клетки в лунках лизировали путем добавления реагента Bright-Glo™ Luciferase Assay System (Promega Corp., Мэдисон, Висконсин) для количественного определения оставшихся клеток в каждой лунке. "% уничтожения" рассчитывали в отношении лунок, содержащих только целевые клетки. Данные показывают, что трансдукция с помощью лентивирусов, кодирующих CD22 CART, передает уничтожающую активность в отношении CD22 Т-клеткам (Nalm6 (ФИГ. 5A) и SEM (фиг. 5B)). UTD и EGFRvIII CAR-экспрессирующие Т-клетки показывают только фоновое уничтожение. Аналогично, ни один из CAR для CD22 не показывает уничтожение CD22-отрицательной контрольной линии K562 (ФИГ. 5C). CD22-64 и CD22-65 показывали наибольшее уничтожение целевых линий клеток как Nalm6, так и SEM.

Чтобы измерить продуцирование цитокинов CD22 CAR T-клетками в ответ на экспрессирующие CD22 целевые клетки, CAR T-клетки совместно культивировали с линией ALL SEM; при этом K562, линия CML, служила в качестве CD22-отрицательного контроля. Клетки культивировали при соотношении эффектор:мишень 1:1 и 25000 клеток на лунку 96-луночного планшета в течение 24 ч., после чего среду удаляли для анализа цитокинов с использованием набора V-PLEX Human IFN-γ (Meso Scale Diagnostics, Роквилл, Мэриленд) для количественного определения цитокинов. Данные показывают, что большинство новых CD22 CART, а также CD22-53 CART продуцировали IFN-γ при культивировании SEM (ФИГ. 6A). CD22-63, -64 и -65 продуцировали самые высокие уровни цитокина. Уровни цитокинов, продуцируемых CD22 CART после воздействия контрольных клеток K562 были низкими (ФИГ. 6B), что указывает на отсутствие неспецифических эффектов CAR для CD22.

В последнем анализе эффективности Т-клеток оценивали пролиферативную способность CD22 CAR Т-клеток. Снова, размороженные CAR Т-клетки совместно культивировали с линией ALL SEM, тогда как K562, линия CML, служила в качестве CD22-отрицательного контроля. Целевые линии клеток облучали перед совместным культивированием для предотвращения чрезмерного роста в лунках, затем их культивировали при соотношении эффектор:мишень 1:1 и 30000 клеток на лунку 96-луночного планшета в течение 4 дней. Дополнительными контролями служили гранулы CD3/CD28 (положительный контроль, Dynabeads® Human T-Expander CD3/CD28, Thermo Fisher Scientific), а также среда отдельно (отрицательный контроль). Клетки окрашивали в день 4 антителом к CD3, а также растворимым CD22-Fc для выявления экспрессии CAR. Перед приобретением на BD Fortessa к каждому образцу добавляли 20 мкл CountBright™ Absolute Counting Beads (Thermo Fisher Scientific) для количественного анализа числа клеток. На ФИГ. 7A показано число CD3+ Т-клеток на 3000 гранул для подсчета, тогда как на ФИГ. 7B показано число CD3+ CAR+ CART на 3000 гранул для подсчета, как определяли путем связывания CD22-Fc. Данные показывают наиболее сильную CD22-индуцированную пролиферацию CD22-64, -65, а также контрольных CD22-53 CAR T-клеток, за которыми следует CD22-63. Ни одна из CART не показывала пролиферацию в ответ на CD22-отрицательную линию K562 в результате какой-либо внутренней стимуляции клеток CAR, например путем агрегации.

Заключения

Большинство специфических в отношении CD22 CAR одинаково хорошо экспрессировались на клеточной поверхности первичных T-клеток человека: CD22-57, CD22-59, CD22-60, CD22-61, CD22-62, CD22-63, CD22-64 и CD22-65 были сопоставимы с контрольными CAR CD22-53; только CD22-58 показывал более низкие уровни экспрессии. В функциональных Т-клеточных анализах CD22-57 и -58 были наименее функциональными CAR, в то время как CD22-64 и -65 были одинаково (продуцирование IFN-γ и пролиферация) или более функциональными (уничтожение) по сравнению с CD22-53. В целом, перенос CAR для CD22 индуцировал реактивность связывания CD22, но не выявляли внецелевую функцию.

Пример 5. CD22 CART в ALL

Противоопухолевую активность набора CD22 CAR T-клеток оценивали in vivo на модели ксенотрансплантата NALM6. CAR Т-клетки с конструкциями CAR CD22-60, CD22-63 и CD22-65 оценивали в сравнении с положительным контролем (CD22-53 и CD19) и имитационными CAR Т-клетками (EGFRvIII).

Материалы и способы

Линия клеток. NALM6 (RRID: CVCL_0092) представляет собой линию клеток лейкоза человека, которая была получена из периферической крови 19-летнего мужчины с острым лимфобластным лейкозом (ALL) с рецидивом в 1976 году. Клетки выращивали в среде RMPI, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки. Эта линия клеток растет в суспензии в колбах для тканевых культур. Эта линия клеток поддерживается и размножается у мышей при внутривенной имплантации. Клетки NALM6 были модифицированы для экспрессии люциферазы так, что рост опухолевых клеток также можно контролировать путем визуализации мышей.

Мыши. Мышей NSG возрастом 6 недель (NOD.Cg-Prkdc^scidIl2rg^tm1Wjl/SzJ) получали от Jackson Laboratory (номенклатурный номер 005557). Обеспечивали акклиматизацию животных в виварии Novartis NIBR в течение по меньшей мере 3 дней до эксперимента. С животными обращались в соответствии с правилами и руководствами Novartis ACUC. Электронные транспондеры для идентификации животных имплантировали в левый бок за один день до имплантации опухоли.

Имплантация опухоли. Клетки NALM6 в логарифмической фазе роста собирали и промывали в пробирках Falcon объемом 50 мл при 1200 об/мин. в течение 5 минут, один раз в питательной среде и затем два раза в холодном стерильном PBS. Клетки ресуспендировали в PBS при концентрации 5×10⁶ на мл, помещали на лед и немедленно вводили инъекцией мышам. Раковые клетки вводили инъекцией внутривенно при 200 мкл через хвостовую вену. Модель NALM6 эндогенно экспрессирует CD22 и, таким образом, может быть использована для тестирования эффективности in vivo CD22-направленных CAR T-клеток. Эта модель хорошо растет при имплантации мышам внутривенно и может быть визуализирована для измерения опухолевой нагрузки. После инъекции 1×10⁶ раковых клеток в PBS опухоли устанавливаются и могут быть точно измерены в пределах 3 дней. Базовые измерения составляют 4-6×10⁵ фотонов/секунда (ф./с). В пределах 7 дней среднее измерение биолюминесценции составляет 2-4×10⁶ ф./с, а необработанные опухоли достигают конечной точки измерения (2-3×10⁹) к 21-26 дням. Противоопухолевые активности терапевтических средств часто тестируют после полного приживления опухолей. Таким образом, существует большое окно с этой моделью, во время которого можно наблюдать противоопухолевую активность CAR Т-клеток.

Дозирование CAR T-клеток. Мышам вводили дозу 5×10⁶ CAR Т-клеток (всего 12,3×10⁶ Т-клеток) через 7 дней после имплантации опухоли. Клетки частично размораживали на водяной бане при 37°C, а затем полностью размораживали путем добавления 1 мл нагретой питательной среды в пробирку, содержащую клетки. Размороженные клетки переносили в пробирку Falcon объемом 50 мл и доводили до конечного объема 12 мл питательной средой. Клетки дважды промывали и центрифугировали при 300 g в течение 10 минут, а затем подсчитывали с помощью гемоцитометра. Затем T-клетки ресуспендировали при концентрации 61,7×10⁶ клеток на мл в холодном PBS и держали на льду до введения дозы мышам. Мышам вводили инъекцией внутривенно через хвостовую вену 200 мкл Т-клеток для получения дозы 5×10⁶ CAR Т-клеток (всего 12,3×10⁶ Т-клеток) на мышь. По 5 мышей на группу обрабатывали посредством 200 мкл любого из PBS отдельно (PBS), Т-клеток, трансдуцированных имитационным EGFRvIII CAR, CD19 CAR Т-клеток, CD22-53 CAR Т-клеток, а также новых CD22-60, CD22-63 или CD22-65 CAR Т-клеток. Все клетки получали от одного и того же донора параллельно.

Контроль животных. Состояние здоровья мышей контролировали ежедневно, в том числе дважды в неделю измеряли вес тела. Процентное изменение веса тела рассчитывали как (BW_{текущий} - BW_{исходный})/(BW_{исходный}) × 100%. Опухоли контролировали 2 раза в неделю путем визуализации мышей.

Результаты

Противоопухолевую активность CD22 CAR T-клеток оценивали на модели ксенотрансплантата B-клеточного острого лимфобластного лейкоза (Luo et al., Cancer Research 1989). После имплантации опухолевых клеток в день 0 несущих опухоли мышей рандомизировали в получавшие обработку группы и вводили им 5×10⁶ CAR Т-клетки (всего 12,3×10⁶ Т-клеток) внутривенно через латеральную хвостовую вену в день 7 после имплантации опухоли. Рост опухоли и здоровье животных контролировали до достижения животными конечной точки. Мышей, которые получали PBS или имитационные EGFRvIII CAR Т-клетки, умерщвляли в дни 23 и 30, соответственно, когда опухоли вызывали снижение подвижности задних конечностей. Все другие группы умерщвляли в день 43.

Среднюю биолюминесценцию для всех получавших обработку групп наносили на график, показанный на ФИГ. 8. Получавшая обработку посредством PBS группа, которая не получала никаких Т-клеток, демонстрировала исходные кинетические показатели роста опухоли NALM6 у внутривенно инъецированных мышей NSG. Получавшая обработку посредством EGFRvIII группа получала Т-клетки, трансдуцированные контрольным CAR. Эти клетки служат в качестве T-клеточного контроля для демонстрации неспецифического ответа Т-клеток человеческих доноров в данной модели. И получавшие обработку посредством как PBS, так и получавшие имитационную обработку группы демонстрировали продолжительное прогрессирование опухолей на протяжении данного исследования. Получавшая EGFRvIII группа демонстрировала слегка более медленный рост опухоли из-за фоновой активности донорских Т-клеток. Все CD22-60, CD22-63, а также CD22-53 демонстрировали заметно более медленный рост опухоли по сравнению с EGFRvIII. CD22-65 демонстрировал регрессию опухоли и был сравнимым с положительным контрольным CD19.

Обсуждение

Данное исследование показало, что специфические в отношении CD22 CAR Т-клетки CD22-65 способны приводить к регрессии опухолей NALM6. В то время как другие конструкции показывали замедление роста опухоли, ни одна из них не была настолько полной или долговечной, как эффекты CD22-65.

Пример 6. Сравнительный анализ активности in vitro несущих scFv, связывающий CD20 и связывающий CD22, CART

Для сравнения активности нацеленных на CD22 или CD20 CAR Т-клеток in vitro создавали контрольные CAR Т-клеток CD20-3 и CD22-53, как описывается в примерах 3 и 4, соответственно. Выполняли совместное культивирование CAR Т-клеток и линий раковых клеток, как описывается в примерах 3 и 4. Активацию CAR Т-клеток измеряли с помощью секреции IFN-γ (ФИГ. 9). Интересно, что CAR CD20-3 приводит к большей секреции цитокинов при культивировании с линией лимфомы Беркитта Raji (ФИГ. 9A) и линией DLBCL Pfeiffer (ФИГ. 9B) по сравнению с CD22-53 CAR T-клетками. Наоборот, линия ALL SEM стимулировала CD22-53 в большей степени по сравнению с CD20-3, хотя и на более низком общем уровне (ФИГ. 9C).

Это сравнение продемонстрировало общий ответ CAR как для CD20, так и для CD22 на В-клеточные злокачественные новообразования в целом. Смещение активации CAR T коррелировало с уровнями экспрессии CD20 и CD22 на соответствующих целевых линиях клеток.

Пример 7. Активность CART, несущих гуманизированные scFv, связывающие CD20, in vivo

Противоопухолевую активность набора CD20 CAR T-клеток оценивали in vivo на модели ксенотрансплантата TMD8. Оценивали CAR Т-клетки с конструкциями CAR CD20-C3H2, CD20-C5H1, CD20-3H5k3, CD20-Ofa и CD20-8aBBZ. CD20-C3H2, CD20-C5H1, CD20-3H5k3 CAR основаны на гуманизированных мышиных (C3H2 и C5H1) и крысиных (3H5k3) специфических в отношении CD20 scFv. CD20-8aBBZ основан на опубликованном нацеливающемся на CD20 CAR (Jensen et al., Mol. Ther., 2000, включенный в данный документ посредством ссылки).

Линии клеток. TMD8 (RRID: CVCL_A442) представляет собой линию клеток диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (DLBCL) человека подтипа активированных B-клеток (ABC). Клетки выращивали в суспензии в среде MEM, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки, 1x HEPES, пенициллин/стрептомицин, L-Glut и NEAA. TMD8 поддерживается и размножается у мышей при подкожной (s.c.) имплантации.

Мыши. Мышей NSG возрастом 6 недель (NOD.Cg-Prkdc^scidIl2rg^tm1Wjl/SzJ) получали от Jackson Laboratory (номенклатурный номер 005557). Обеспечивали акклиматизацию животных в виварии Novartis NIBR в течение по меньшей мере 3 дней до эксперимента. С животными обращались в соответствии с правилами и руководствами Novartis ACUC. Электронные транспондеры для идентификации животных имплантировали в левый бок за один день до имплантации опухоли.

Имплантация опухоли. Клетки в логарифмической фазе роста собирали и промывали в пробирках Falcon объемом 50 мл при 1200 об/мин. в течение 5 минут, один раз в питательной среде и затем два раза в холодном стерильном PBS. Клетки ресуспендировали в PBS при концентрации 25×10⁶ на мл, помещали на лед и вводили инъекцией мышам. Раковые клетки вводили инъекцией s.c. при 200 мкл. Модель TMD8 эндогенно экспрессирует CD20 и, таким образом, может быть использована для тестирования эффективности in vivo CD20-направленных CAR T-клеток. Данная модель хорошо растет при s.c. имплантации у мышей, что можно измерить путем измерений штангенциркулем. После инъекции 5×10⁶ раковых клеток опухоли устанавливаются и могут быть точно измерены в пределах 3-4 дней. Объемы опухоли определяли путем измерения штангенциркулем (2-3 раза в неделю) и рассчитывали следующим образом:

Объем опухоли=(max⁡(X опухоли, Y опухоли)*〖min(X опухоли, Y опухоли)〗^2*π)/6.

В пределах 9 дней измерение объема опухоли составляло 200 мм³, а необработанные опухоли достигают конечной точки измерения (>1200 мм³) к 15-18 дням. Противоопухолевые активности терапевтических средств часто тестируют после полного приживления опухолей. Таким образом, существует приемлемое окно с этой моделью, во время которого можно наблюдать противоопухолевую активность CAR Т-клеток.

Дозирование CAR T-клеток. Мышам вводили дозу через 9 дней после имплантации опухоли при 3×10⁶ CAR Т-клеток. Клетки частично размораживали на водяной бане при 37°C, а затем полностью размораживали путем добавления 1 мл нагретой питательной среды. Размороженные клетки переносили в пробирку Falcon объемом 50 мл и доводили до конечного объема 12 мл питательной средой. Клетки дважды промывали и центрифугировали при 300 g в течение 10 минут, а затем подсчитывали с помощью гемоцитометра. Затем T-клетки ресуспендировали при соответствующих концентрациях в холодном PBS и держали на льду до введения дозы мышам. CART вводили инъекцией внутривенно через хвостовую вену при 200 мкл для получения дозы 3×10⁶ CAR Т-клеток. По 5 мышей на группу обрабатывали посредством 200 мкл любого из PBS отдельно (PBS), специфических в отношении EGFRvIII, имитационных CAR Т-клеток, а также CD20-C3H2, CD20-C5H1, CD20-3H5k3, CD20-Ofa и CD20-8aBBZ. Все клетки получали от одного и того же донора параллельно.

Контроль животных. Состояние здоровья мышей контролировали ежедневно, в том числе дважды в неделю измеряли вес тела. Процентное изменение веса тела рассчитывали как (BW_{текущий} - BW_{исходный})/(BW_{исходный}) x 100%.

Противоопухолевую активность CD20 CAR T-клеток оценивали на модели ксенотрансплантата лейкоза DLBCL (ФИГ. 11). После имплантации опухолевых клеток несущих опухоли мышей рандомизировали в получавшие обработку группы и вводили им CAR Т-клетки внутривенно через латеральную хвостовую вену в день 9 после имплантации опухоли. Рост опухоли и здоровье животных контролировали до достижения животными конечной точки. Мышей в группах отрицательного контроля, которые получали PBS или имитационные специфические в отношении EGFRvIII CAR Т-клетки, умерщвляли в день 17. Также группы, которые получали CD20-Ofa и CD20-3H5k3, не демонстрировали эффективность соответствующих CART и были умерщвлены в день 17. Другие группы умерщвляли в день 24.

Получавшая обработку посредством PBS группа, которая не получала никаких Т-клеток, демонстрировала исходные кинетические показатели роста опухоли TMD8. Получавшая обработку посредством EGFRvIII группа получала имитационные CAR-трансдуцированные Т-клетки и служила в качестве T-клеточного контроля для демонстрации неспецифического ответа Т-клеток человеческих доноров в данной модели. И получавшие обработку посредством как PBS, так и EGFRvIII группы демонстрировали продолжительное прогрессирование опухолей на протяжении данного исследования. CD20-Ofa и CD20-3H5k3 демонстрировали подобные кинетические показатели роста, что свидетельствует об отсутствии противоопухолевой эффективности при этих CART. CD20-C3H2, CD20-C5H1 и контрольные CD20-8aBBZ CAR T-клетки показывали значительно более медленный рост опухоли, с самой сильной и самой быстрой регрессией, наблюдаемой для CD20-C3H2, за которым следует CD22-C5H1.

Данное исследование показало, что специфические в отношении CD20 CAR Т-клетки CD22-C3H2 и CD22-C5H1 способны приводить к регрессии опухолей TMD8. Эффективность превосходила CD20-8aBBZ, опубликованный эталонный CAR.

Пример 8. Активность CART, несущих scFv человека, связывающий CD22, с короткими линкерами, in vitro

Гены, кодирующие одноцепочечные вариабельные фрагменты для антител к CD22 (CD22-65, CD22-65s, положительные контрольные CD22 CAR m971 (m971) и m971s) клонировали в лентивирусные векторы экспрессии CAR с CD3-дзета цепью и стимулирующими молекулами 4-1BB. CD3-дзета цепь либо была дикого типа (Zwt), либо несла мутацию Q65K (Zmut). Конструкции классифицировали на основании количества и качества ответов эффекторных T-клеток таких трансдуцированных CD22 CAR T-клеток ("CD22 CART" или "CD22 CAR Т-клеток") в ответ на экспрессирующие CD22 ("CD22+") мишени. Ответы эффекторных T-клеток включают без ограничения клеточное размножение, пролиферацию, удвоение, продуцирование цитокина и уничтожение целевых клеток или цитолитическую активность (дегрануляцию).

Создание CD22 CAR Т-клеток. Кодирующие scFv человека лентивирусные векторы переноса использовали для получения геномного материала, упакованного в VSVg псевдотипированные лентивирусные частицы. ДНК лентивирусного вектора переноса, кодирующую CAR, смешивали с тремя компонентами упаковки VSVg, gag/pol и rev в комбинации с реагентом липофектамин для трансфекции клеток Lenti-X 293T (Clontech), с последующей заменой среды через 12-18 ч. Через 30 часов после замены среды среду собирали, фильтровали и хранили при -80°C.

Создавали CD22 CAR Т-клетки, исходя из крови от здоровых подвергнутых аферезу доноров, Т-клетки которых обогащали путем негативного отбора Т-клеток, CD4+ и CD8+ лимфоцитов (Pan T cell isolation, Miltenyi). Т-клетки активировали путем добавления гранул CD3/CD28 (Dynabeads® Human T-Expander CD3/CD28, Thermo Fisher Scientific) при отношении 1:3 (T-клетки к грануле) в T-клеточной среде (RPMI1640, 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сыворотки (FCS), 2 мM L-глутамина, 1x пенициллин/стрептомицин, 100 мкM не являющихся незаменимыми аминокислот, 1 мM пирувата натрия, 10 мM Hepes и 55 мкM 2-меркаптоэтанола) при 37°C, 5% CO2. T-клетки культивировали при 0,5×10⁶ Т-клеток в 1 мл среды на лунку 24-луночного планшета. Через 24 часа, когда Т-клетки разрушались, добавляли неконцентрированную или концентрированную вирусную надосадочную жидкость; Т-клетки трансдуцировали при множественности инфекции (MOI) 5. Т-клетки начали пролиферироваться, что контролировали путем измерения концентрации клеток (в виде количества на мл), и Т-клетки разбавляли свежей Т-клеточной средой каждые два дня. Как только Т-клетки начинали переходить в фазу покоя примерно через 10 дней, логарифмический рост уменьшался. Комбинация замедления скорости роста и уменьшения размера Т-клеток (приближается к 350 фл) определяет состояние Т-клеток, подлежащих криоконсервации для последующего анализа. Все CD22 CAR T-клетки получали в производственных условиях исследовательского уровня (т. е. не клинического уровня).

Перед криоконсервацией процентное содержание трансдуцированных клеток (экспрессирующих специфический в отношении CD22 CAR на клеточной поверхности) определяли посредством анализа проточной цитометрии на FACS Fortessa (BD) (ФИГ. 12). Вирусная трансдукция демонстрировала сравнимые уровни экспрессии, что указывает на подобную эффективность трансдукции, а также поверхностную экспрессию соответствующих CAR. Подсчет клеток культур CAR Т-клеток показал, что не обнаружено обнаруживаемого отрицательного эффекта CD22 человека CAR в отношении способности клеток нормально размножаться по сравнению с нетрансдуцированными Т-клетками ("UTD").

Оценивание эффективности CAR для CD22-перенаправленных Т-клеток. Для оценки функциональных способностей CD22 CAR T-клеток клетки, полученные, как описано выше, размораживали, подсчитывали и совместно культивировали с раковыми клетками для считывания их способности к уничтожению, секреции цитокинов, а также пролиферации. Несущие scFv человека CAR CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut и m971s_Zmut использовали и сравнивали с CAR для CD19, а также с нетрансдуцированными Т-клетками (UTD), которые использовали в качестве контроля нецелевых Т-клеток.

T-клеточное уничтожение направляли на линии острого лимфобластного лейкоза (ALL) Nalm6 (RRID: CVCL_0092) и SEM (RRID: CVCL_0095); при этом K562 (RRID: CVCL_0004), линия клеток хронического миелоидного лейкоза (CML) служила в качестве CD22-отрицательного/низкого контроля. Все линии клеток трансдуцировали для экспрессии люциферазы в качестве репортера для жизнеспособности/уничтожения клеток. Цитолитические активности CD22 CART измеряли при титровании соотношений эффектор:целевая клетка (E:T) 10:1, 5:1, 2,5:1, 1,25:1 0,63:1 и 0,31:1. Анализы начинали путем смешивания соответствующего числа Т-клеток с постоянным числом целевых клеток (25000 клеток на лунку 96-луночного планшета). Через 20 часов оставшиеся клетки в лунках лизировали путем добавления реагента Bright-Glo™ Luciferase Assay System (Promega) для количественного определения оставшихся Luc-экспрессирующих раковых клеток в каждой лунке. "% уничтожения" рассчитывали в отношении лунок, содержащих только целевые клетки (0%, максимальный Luc сигнал). Данные показывают, что трансдукция с помощью лентивирусов, кодирующих CD22 CART, передает уничтожающую активность в отношении CD22 Т-клеткам в Nalm6 (ФИГ. 13A) и SEM (ФИГ. 13B). Т-клетки UTD показывают только фоновое уничтожение. Аналогично, ни один из CAR для CD22 не показывает уничтожение CD22-отрицательной контрольной линии K562 (ФИГ. 13C). Все CAR демонстрировали высокую степень уничтожения целевых линий клеток как Nalm6, так и SEM, при этом 3 лучшими являлись m971s_Zmut, CD22-65s_Zwt и CD22-65_Zwt.

Чтобы измерить продуцирование цитокинов CD22 CAR T-клетками в ответ на экспрессирующие CD22 целевые клетки, CAR T-клетки совместно культивировали с теми же линиями ALL, что и указанные выше, плюс K562, которая служила в качестве CD22-отрицательного/низкого контроля. Клетки культивировали при соотношении эффектор:мишень 1: 1 и 25000 клеток на лунку 96-луночного планшета в течение 24 ч., после чего среду удаляли для анализа цитокинов с использованием набора V-PLEX Human IFN-γ (Meso Scale Diagnostics). Эти данные показывают, что все CD22 CART, а также CD19 CART продуцировали IFN-γ при культивировании с Nalm6 или SEM (ФИГ. 14). m971s_Zmut, CD22-65s_Zwt и CD22-65_Zwt продуцировали самые высокие уровни цитокина. Уровни цитокинов, продуцируемых CD22 CART после воздействия контрольных клеток K562, были низкими, что указывает на отсутствие неспецифических эффектов CAR для CD22.

В последнем анализе эффективности Т-клеток оценивали пролиферативную способность CD22 CAR Т-клеток. Снова, размороженные CAR Т-клетки совместно культивировали с линиями ALL Nalm6 и SEM. CART окрашивали с помощью красителя CellTracer Violet (ThermoFisher Scientific) и целевые линии клеток облучали перед совместным культивированием для предотвращения чрезмерного роста в лунках. Затем их культивировали при соотношении эффектор:мишень 1:1 и 30000 клеток на лунку в 96-луночном планшете в течение 4 дней. В день 4 клетки окрашивали антителом к CD3, а также растворимым CD22-Fc для выявления экспрессии CAR. От интенсивности фиолетового красителя всех CD3+ Т-клеток; чем ниже флуоресценция, тем сильнее пролиферация, поскольку каждое клеточное деление Т-клеток приводит к удержанию половины флуоресценции в каждой дочерней клетке (ФИГ. 15A). Неподеленные клетки демонстрируют высокую флуоресценцию, как показано для UTD. Клеточную пролиферацию определяют количественно и регистрируют как "индекс деления" с использованием программного обеспечения FlowJo (ФИГ. 15B). В данном случае CD22-65s_Zwt был одним из лучших пролиферирующих CART в ответ на Nalm6 и показал наибольшую пролиферацию в ответ на SEM.

Все специфические в отношении CD22 CAR в данном эксперименте одинаково хорошо экспрессировались на клеточной поверхности первичных T-клеток человека: CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut и m971s_Zmut. Тогда как все CD22 CART демонстрировали эффективность в T-клеточных функциональных анализах, 3 лучшими CART являлись m971s_Zmut, CD22-65s_Zwt и CD22-65_Zwt во всех 3 анализах. В целом, перенос CAR для CD22 индуцировал реактивность связывания CD22, но не выявляли внецелевую функцию.

Пример 9. Активность CART, несущих scFv человека, связывающий CD22, с короткими линкерами, in vivo

Противоопухолевую активность набора CD22 CAR T-клеток оценивали in vivo на модели ксенотрансплантата NALM6 и SEM. Оценивали CAR Т-клетки с конструкциями CAR CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut и m971s_Zmut.

Линии клеток. Как Nalm6 (RRID: CVCL_0092), так и SEM (RRID: CVCL_0095) представляют собой линии клеток острого лимфобластного лейкоза (ALL) человека. Клетки выращивали в среде RMPI, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки, и обе росли в суспензии. Обе линии клеток поддерживаются и размножаются у мышей при внутривенной имплантации. Клетки были модифицированы для экспрессии люциферазы так, что рост опухолевых клеток также можно контролировать путем визуализации мышей после введения им инъекцией субстрата, представляющего собой люциферин.

Мыши. Мышей NSG возрастом 6 недель (NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ) получали от Jackson Laboratory (номенклатурный номер 005557). Обеспечивали акклиматизацию животных в виварии Novartis NIBR в течение по меньшей мере 3 дней до эксперимента. С животными обращались в соответствии с правилами и руководствами Novartis ACUC. Электронные транспондеры для идентификации животных имплантировали в левый бок за один день до имплантации опухоли.

Имплантация опухоли. Клетки в логарифмической фазе роста собирали и промывали в пробирках Falcon объемом 50 мл при 1200 об/мин. в течение 5 минут, один раз в питательной среде и затем два раза в холодном стерильном PBS. Клетки ресуспендировали в PBS при концентрации 5×10⁶ на мл, помещали на лед и вводили инъекцией мышам. Раковые клетки вводили инъекцией внутривенно при 200 мкл через хвостовую вену. Обе модели Nalm6 и SEM эндогенно экспрессируют CD22 и, таким образом, могут быть использованы для тестирования эффективности in vivo CD22-направленных CAR T-клеток. Эти модели хорошо растут при имплантации внутривенно мышам, которые могут быть визуализированы для измерения опухолевой нагрузки. После инъекции 1×10⁶ раковых клеток опухоли устанавливаются и могут быть точно измерены в пределах 3 дней. Базовые измерения составляют 4-6×10⁵ фотонов/секунда (ф./с). В пределах 7 дней среднее измерение биолюминесценции составляет 2-4×10⁶ ф./с, а необработанные опухоли достигают конечной точки измерения (2-3×10⁹) к 21-26 дням. Противоопухолевые активности терапевтических средств часто тестируют после полного приживления опухолей. Таким образом, существует большое окно с этими моделями, во время которого можно наблюдать противоопухолевую активность CAR Т-клеток.

Дозирование CAR T-клеток. Мышам вводили дозу через 7 дней после имплантации опухоли с 1×10⁶ CAR Т-клеток для обработки Nalm6 и 3×10⁶ CAR Т-клеток для обработки SEM. Клетки частично размораживали на водяной бане при 37°C, а затем полностью размораживали путем добавления 1 мл нагретой питательной среды. Размороженные клетки переносили в пробирку Falcon объемом 50 мл и доводили до конечного объема 12 мл питательной средой. Клетки дважды промывали и центрифугировали при 300 g в течение 10 минут, а затем подсчитывали с помощью гемоцитометра. Затем T-клетки ресуспендировали при соответствующих концентрациях в холодном PBS и держали на льду до введения дозы мышам. CART вводили инъекцией внутривенно через хвостовую вену при 200 мкл для получения дозы 1 или 3×10⁶ CAR Т-клеток мышам, несущим Nalm6 и SEM, соответственно. По 5 мышей на группу обрабатывали посредством 200 мкл любого из PBS отдельно (PBS), нетрансдуцированных Т-клеток (UTD), CD19 CAR Т-клеток, а также новых CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut или m971s_Zmut CAR Т-клеток. Все клетки получали от одного и того же донора параллельно.

Контроль животных. Состояние здоровья мышей контролировали ежедневно, в том числе дважды в неделю измеряли вес тела. Процентное изменение веса тела рассчитывали как (BW_{текущий} - BW_{исходный})/(BW_{исходный}) × 100%. Опухоли контролировали 2 раза в неделю путем визуализации мышей.

Противоопухолевую активность CD22 CAR T-клеток оценивали на двух моделях ксенотрансплантата B-клеточного острого лимфобластного лейкоза. После имплантации опухолевых клеток в день 0 несущих опухоли мышей рандомизировали в получавшие обработку группы и вводили им CAR Т-клетки внутривенно через латеральную хвостовую вену в день 7 после имплантации опухоли. Рост опухоли и здоровье животных контролировали до достижения животными конечной точки.

На модели Nalm6 мышей, которые получали PBS или UTD Т-клетки, умерщвляли в день 22, когда опухоли вызывали сниженную подвижность задних конечностей. Все другие группы умерщвляли в день 40. Получавшая обработку посредством PBS группа, которая не получала никаких Т-клеток, демонстрировала исходные кинетические показатели роста опухоли Nalm6 у внутривенно инъецированных мышей NSG. Получавшая обработку посредством UTD группа получала нетрансдуцированные Т-клетки и служила в качестве T-клеточного контроля для демонстрации неспецифического ответа Т-клеток человеческих доноров в данной модели. И получавшие обработку посредством как PBS, так и UTD группы демонстрировали продолжительное прогрессирование опухолей на протяжении данного исследования. Все CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut и m971s_Zmut CAR Т-клетки демонстрировали значительно более медленный рост опухоли. CD22-65s_Zwt и m971_Zmut демонстрировали полную регрессию опухоли, на что указывает средняя биолюминесценция (ФИГ. 16).

На модели SEM мышей, которые получали PBS или UTD Т-клетки, умерщвляли в день 27, когда опухоли вызывали сниженную подвижность задних конечностей. Все другие группы умерщвляли в день 45. Получавшая обработку посредством PBS группа, которая не получала никаких Т-клеток, демонстрировала исходные кинетические показатели роста опухоли SEM у внутривенно инъецированных мышей NSG. Получавшая обработку посредством UTD группа получала нетрансдуцированные Т-клетки и служила в качестве T-клеточного контроля для демонстрации неспецифического ответа Т-клеток человеческих доноров в данной модели. И получавшие обработку посредством как PBS, так и UTD группы демонстрировали продолжительное прогрессирование опухолей на протяжении данного исследования.

Все CD22-65_Zmut, CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, m971_Zmut, m971s_Zmut и CD19 CAR Т-клетки демонстрировали значительно более медленный рост опухоли. CD19 CART демонстрировали самую быструю регрессию опухоли, после чего следовали CD22-65s_Zwt и m971s_Zmut (ФИГ. 17A). Также строили кривые биолюминесценции для одиночных мышей в соответствующих группах, подчеркивающие более высокую эффективность CD22-65s_Zwt и m971s_Zmut по сравнению с вариантами CAR с более длинными линкерами в пределах scFv (CD22-65_Zwt и m971_Zmut, соответственно (ФИГ. 17B).

Данное исследование показало, что специфические в отношении CD22 CAR Т-клетки CD22-65s_Zwt способны приводить к регрессии опухолей как NALM6, так и SEM. Эффективность была сопоставима с вариантами CAR m971 и была выше по сравнению с вариантами CD22-65 с длинным линкером.

Пример 10. Клиническая эффективность связывающих CD22 CAR T-клеток в отношении B-клеточного острого лимфобластного лейкоза коррелирует с длиной линкера scFv и может быть предсказана с использованием модели ксенотрансплантата

Пациенты и способы. Создавали CAR, связывающий CD22 ("CAR для CD22"), включающий более длинный линкер (4x(GGGGS); LL) по сравнению с CAR, связывающим CD22, включающим короткий линкер (1x(GGGGS); SL) между легкой и тяжелой цепями scFv (фиг. 18). Конструкцию CAR для CD22 LL тестировали в двух пилотных клинических испытаниях на взрослых (NCT02588456) и детях с r/r-ALL (NCT02650414). Создавали CART22^LL Т-клетки с использованием лентивирусной трансдукции. Указанная в протоколе доза CART22, вводимая путем инфузии после лимфоистощающей терапии, составляла 2×10⁶-1×10⁷ клеток/кг для педиатрических пациентов < 50 кг и 1-5×10⁸ для педиатрических пациентов ≥ 50 кг и взрослых пациентов. Характеристики пациентов описываются в таблице 16.

Таблица 16. Характеристики пациентов, получавших инфузию CART22^LL Т-клеток

Педиатрические с ALL (n=6) Взрослые с ALL (n=3) Характеристика Значение (диапазон, %) Среднее значение возраста (диапазон) 14 лет (4-25) 47 лет (28-64) Пол (%) 3 M (50%)/3 F (50%) 2 M (66,6%)/1 F (33,3%) Раса 5 европеоидов/1 азиат 3 европеоида Перед аллогенной трансплантацией (%) 5/6 (83,3%) 1/3 (33,3%) Перед блинатумомабом или CART19 (%) 5/6 (83,3%) CART19
1/6 (16,6%) блинатумомаб 1/3 (33,3%) CART19
3/3 (100%) блинатумомаб Бластные клетки в BM перед CART22
% (диапазон) 77,5% (0,6-95)
5/6 (83,3%) CD19- рецидив 1/6 (16,6%) CD19+ рецидив 95% (0-97)
1/3 (33,3%) CD19- рецидив 2/3 (66,6%) CD19+ рецидив Доза CART22
Среднее значение (диапазон) 3,55×10⁸ (3,96×10⁷-5×10⁸) 2×10⁸ (5×10⁷-5×10⁸) Экспрессия CAR 36,4% (15-49,7) 25,8% (25-30)

Для испытания со взрослыми осуществляли скрининг 5 пациентов, включали 4 (1 пациент отказался дать согласие) и 3 вводили инфузию (1 неудача изготовления). Для педиатрического испытания осуществляли скрининг 9 пациентов, включали 8 (1 неудача скрининга) и 6 вводили инфузию (двум пациентам не вводили инфузию для прогрессирования заболевания).

Для доклинических исследований создавали CART22^LLи CART22^SL и тестировали in vivo с использованием моделей ксенотрансплантата. Мышам NSG приживляли либо стандартную люцифераза+ линию клеток B-ALL (NALM6), либо первичные клетки B-ALL, полученные от пациента, рецидивирующего после CART19 (CHP110R). Кроме того, использовали 2-фотонную визуализацию для изучения поведения in vivo и образования иммунного синапса, а также для проточной цитометрии с целью оценки активации Т-клеток.

Успешно изготовляли CART22 клетки для 10 из 12 пациентов. Во взрослой когорте у 3/3 пациентов развился CRS (ст. 1-3), и нейротоксичность не наблюдали; в педиатрической когорте из 5 поддающихся оценке пациентов (1 выведен из исследования из-за трансдифференцировки в AML в костном мозге перед инфузией) у 3/5 развивался синдром высвобождения цитокинов (CRS) (у всех 2 степень), и у 1 пациента была энцефалопатия (ст. 1). CART22 клетки размножали в PB с медианным пиком 1977 (18-40314) копий/мкг ДНК в день 11-18. У взрослого пациента, который ранее получал CART19, повторное размножение CART19 наблюдали после размножения CART22 (ФИГ. 19). В день 28 во взрослой когорте пациент, которому вводили морфологический CR, сохранял CR, в то время как два других не проявляли ответ (NR). В педиатрической когорте двое из пяти пациентов имели CR, один пациент имел частичную ремиссию (PR), которая затем переходила в CR с неполным выздоровлением через 2 месяца, а двое имели NR. Не наблюдали прогрессирование CD22-отрицательного лейкоза.

Затем осуществляли прямое сравнение двух различных конструкций CAR22 (CART22^Sи CART22^SL). В моделях ксенотрансплантата CART22^SL значительно превосходила CART22^LL(фиг. 20) с улучшенной общей выживаемостью. Более того, CART22^SL демонстрировала более высокую пролиферацию in vivo в день 17 (фиг. 21). В отношении механизма, прижизненная 2-фотонная томография показала, что CART22^SL обеспечивала более продолжительные взаимодействия Т-клетка:лейкоз, чем CART22^LL, что предполагает установление продуктивных синапсов (фиг. 22). Более того, in vivo через 24 часа наблюдали более высокую T-клеточную активацию (CD69, PD-1) в CART22^SL из BM несущих NALM-6 мышей.

Несмотря на осуществимость и контролируемую токсичность CART22^LL приводила к незначительным клиническим ответам у пациентов с r/r B-ALL. Доклиническая оценка позволила нам сделать вывод, что укорочение линкера на 15 аминокислот значительно повышает противолейкозную активность CART22, возможно, за счет более эффективных взаимодействий между Т-клетками и их мишенями. Наконец, с учетом сравнения результатов различных испытаний, эти данные позволяют предположить, что модели ксенотрансплантата могут прогнозировать клиническую эффективность продуктов CART и обосновывать использование моделей in vivo для отбора потенциальных кандидатов.

Пример 11. Активность CART, несущих scFv человека, связывающий CD22, с вариантами линкеров, in vitro

Гены, кодирующие одноцепочечные вариабельные фрагменты для антител к CD22 клонировали в лентивирусные векторы экспрессии CAR с CD3-дзета цепью и стимулирующими молекулами 4-1BB. Оценивали следующие конструкции CAR, связывающих CD22: CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt (короткий 1x (GGGGS) линкер; SEQ ID NO: 835), CD22-65ss_Zwt (отсутствие линкера между VH- и VL-областями; SEQ ID NO: 836), линкер CD22-65sLH_Zwt (короткий 1x (GGGGS) с VL-областью, ориентированной на N-конце, и VH-областью, ориентированной на С-конце), линкер CD22-65sKD_Zwt (короткий 1x (GGGGS), и мутации в FR-областях VH- и VL-областей; SEQ ID NO: 837), и оценивали CD22-m971s_Zmut (контроль). За исключением CD22-65sLH_Zwt все конструкции CAR, связывающих CD22, имеют область VH, ориентированную на N-конце.

CD3-дзета цепь либо была дикого типа (Zwt), либо несла мутацию Q65K (Zmut). Конструкции классифицировали на основании количества и качества ответов эффекторных T-клеток таких трансдуцированных CD22 CAR T-клеток ("CD22 CART" или "CD22 CAR Т-клеток") в ответ на экспрессирующие CD22 ("CD22+") мишени. Ответы эффекторных T-клеток включают без ограничения клеточное размножение, пролиферацию, удвоение, продуцирование цитокина и уничтожение целевых клеток или цитолитическую активность (дегрануляцию).

Создание CD22 CAR Т-клеток. Кодирующие scFv человека лентивирусные векторы переноса использовали для получения геномного материала, упакованного в VSVg псевдотипированные лентивирусные частицы. ДНК лентивирусного вектора переноса, кодирующую CAR, смешивали с тремя компонентами упаковки VSVg, gag/pol и rev в комбинации с реагентом липофектамин для трансфекции клеток Lenti-X 293T (Clontech), с последующей заменой среды через 12-18 ч. Через 30 часов после замены среды среду собирали, фильтровали и хранили при -80°C.

Создавали CD22 CAR Т-клетки, исходя из крови от здоровых подвергнутых аферезу доноров, Т-клетки которых обогащали путем негативного отбора Т-клеток, CD4+ и CD8+ лимфоцитов (Pan T cell isolation, Miltenyi). Т-клетки активировали путем добавления гранул CD3/CD28 (Dynabeads® Human T-Expander CD3/CD28, Thermo Fisher Scientific) при отношении 1:3 (T-клетки к грануле) в T-клеточной среде (RPMI1640, 10% инактивированной нагреванием эмбриональной телячьей сыворотки (FCS), 2 мM L-глутамина, 1x пенициллин/стрептомицин, 100 мкM не являющихся незаменимыми аминокислот, 1 мM пирувата натрия, 10 мM Hepes и 55 мкM 2-меркаптоэтанола) при 37°C, 5% CO2. T-клетки культивировали при 0,5×10⁶ Т-клеток в 1 мл среды на лунку 24-луночного планшета. Через 24 часа, когда Т-клетки разрушались, добавляли неконцентрированную или концентрированную вирусную надосадочную жидкость; Т-клетки трансдуцировали при множественности инфекции (MOI) 5. Т-клетки начали пролиферироваться, что контролировали путем измерения концентрации клеток (в виде количества на мл), и Т-клетки разбавляли свежей Т-клеточной средой каждые два дня. Как только Т-клетки начинали переходить в фазу покоя примерно через 10 дней, логарифмический рост уменьшался. Комбинация замедления скорости роста и уменьшения размера Т-клеток (приближается к 350 фл) определяет состояние Т-клеток, подлежащих криоконсервации для последующего анализа. Все CD22 CAR T-клетки получали в производственных условиях исследовательского уровня (т. е. не клинического уровня).

Перед криоконсервацией процентное содержание трансдуцированных клеток (экспрессирующих специфический в отношении CD22 CAR на клеточной поверхности) определяли посредством анализа проточной цитометрии на FACS Fortessa (BD) (ФИГ. 23). Вирусная трансдукция демонстрировала сравнимые уровни экспрессии, что указывает на подобную эффективность трансдукции, а также поверхностную экспрессию соответствующих CAR. Подсчет клеток культур CAR Т-клеток показал, что не обнаружено обнаруживаемого отрицательного эффекта CD22 человека CAR в отношении способности клеток нормально размножаться по сравнению с нетрансдуцированными Т-клетками ("UTD").

Оценивание эффективности CAR для CD22-перенаправленных Т-клеток. Для оценки функциональных способностей CD22 CAR T-клеток клетки, полученные, как описано выше, размораживали, подсчитывали и совместно культивировали с раковыми клетками для считывания их способности к уничтожению и секреции цитокинов. Сравнивали несущие scFv человека CAR CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sLH_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmut и EGFRvIII CAR Т-клетки, а также использовали нетрансдуцированные Т-клетки (UTD) в качестве контроля нецелевых Т-клеток.

T-клеточное уничтожение направляли на линии острого лимфобластного лейкоза (ALL) Nalm6 (RRID: CVCL_0092) и SEM (RRID: CVCL_0095). Обе линии клеток трансдуцировали для экспрессии люциферазы в качестве репортера для жизнеспособности/уничтожения клеток. Цитолитические активности CD22 CART измеряли при титровании соотношений эффектор:целевая клетка (E:T) 10:1, 5:1, 2,5:1, 1,25:1 0,63:1 и 0,31:1. Анализы начинали путем смешивания соответствующего числа Т-клеток с постоянным числом целевых клеток (25000 клеток на лунку 96-луночного планшета). Через 20 часов оставшиеся клетки в лунках лизировали путем добавления реагента Bright-Glo™ Luciferase Assay System (Promega) для количественного определения оставшихся Luc-экспрессирующих раковых клеток в каждой лунке. "% уничтожения" рассчитывали в отношении лунок, содержащих только целевые клетки (0%, максимальный Luc сигнал). Данные показывают, что трансдукция с помощью лентивирусов, кодирующих CD22 CART, передает уничтожающую активность в отношении CD22 Т-клеткам (Nalm6 и SEM (ФИГ. 24A-B)). UTD и EGFRvIII CAR Т-клетки показывают только фоновое уничтожение. Все CAR, за исключением CD22-65sLH_Zwt, показывали высокую степень уничтожения целевых линий клеток как Nalm6, так и SEM.

Чтобы измерить продуцирование цитокинов CD22 CAR T-клетками в ответ на экспрессирующие CD22 целевые клетки, CAR T-клетки совместно культивировали с теми же линиями ALL, что и указанные выше. Клетки культивировали при соотношении эффектор:мишень 1: 1 и 25000 клеток на лунку 96-луночного планшета в течение 24 ч., после чего среду удаляли для анализа цитокинов с использованием набора V-PLEX Human IFN-γ (Meso Scale Diagnostics). Эти данные показывают, что все CD22 CART, за исключением CD22-65sLH_Zwt, продуцировали IFN-γ при культивировании Nalm6 или SEM (ФИГ. 25).

Все специфические в отношении CD22 CAR в данном эксперименте одинаково хорошо экспрессировались на клеточной поверхности первичных T-клеток человека: CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sLH_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmut. Кроме того, все CD22 CART показывали эффективность в T-клеточных функциональных анализах, за исключением CD22-65sLH_Zwt.

Пример 12. Активность CART, несущих scFv человека, связывающий CD22, с вариантами линкеров, in vivo

Противоопухолевую активность набора CD22 CAR T-клеток оценивали in vivo на модели ксенотрансплантата NALM6. Оценивали CAR Т-клетки с конструкциями CAR CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sLH_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmut (контроль).

Линия клеток. Nalm6 (RRID: CVCL_0092) представляет собой линию клеток острого лимфобластного лейкоза (ALL) человека. Клетки выращивали в среде RMPI, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки, и обе росли в суспензии. Клетки поддерживаются и размножаются у мышей при внутривенной имплантации. Клетки были модифицированы для экспрессии люциферазы так, что рост опухолевых клеток также можно контролировать путем визуализации мышей после введения им инъекцией субстрата, представляющего собой люциферин.

Мыши. Мышей NSG возрастом 6 недель (NOD.Cg-Prkdc^scidIl2rg^tm1Wjl/SzJ) получали от Jackson Laboratory (номенклатурный номер 005557). Обеспечивали акклиматизацию животных в виварии Novartis NIBR в течение по меньшей мере 3 дней до эксперимента. С животными обращались в соответствии с правилами и руководствами Novartis ACUC. Электронные транспондеры для идентификации животных имплантировали в левый бок за один день до имплантации опухоли.

Имплантация опухоли. Клетки в логарифмической фазе роста собирали и промывали в пробирках Falcon объемом 50 мл при 1200 об/мин. в течение 5 минут, один раз в питательной среде и затем два раза в холодном стерильном PBS. Клетки ресуспендировали в PBS при концентрации 5×10⁶ на мл, помещали на лед и вводили инъекцией мышам. Раковые клетки вводили инъекцией внутривенно при 200 мкл через хвостовую вену. Клетки Nalm6 эндогенно экспрессируют CD22 и, таким образом, могут быть использованы для тестирования эффективности in vivo CD22-направленных CAR T-клеток. Эта модель хорошо растет при имплантации мышам внутривенно, которые могут быть визуализированы для измерения опухолевой нагрузки. После инъекции 1×10⁶ раковых клеток опухоли устанавливаются и могут быть точно измерены в пределах 3 дней. Базовые измерения составляют 4-6×10⁵ фотонов/секунда (ф./с). В пределах 7 дней среднее измерение биолюминесценции составляет 2-4×10⁶ ф./с, а необработанные опухоли достигают конечной точки измерения (2-3×10⁹) к 20-30 дням. Противоопухолевые активности терапевтических средств часто тестируют после полного приживления опухолей. Таким образом, существует большое окно с этими моделями, во время которого можно наблюдать противоопухолевую активность CAR Т-клеток.

Дозирование CAR T-клеток. Мышам вводили дозу через 7 дней после имплантации опухоли при 1×10⁶ CAR Т-клеток для обработки Nalm6. Клетки частично размораживали на водяной бане при 37°C, а затем полностью размораживали путем добавления 1 мл нагретой питательной среды. Размороженные клетки переносили в пробирку Falcon объемом 50 мл и доводили до конечного объема 12 мл питательной средой. Клетки дважды промывали и центрифугировали при 300 g в течение 10 минут, а затем подсчитывали с помощью гемоцитометра. Затем T-клетки ресуспендировали при соответствующих концентрациях в холодном PBS и держали на льду до введения дозы мышам. CART вводили инъекцией внутривенно через хвостовую вену при 200 мкл для получения дозы 1×10⁶ CAR Т-клеток. По 5 мышей на группу обрабатывали посредством 200 мкл любого из PBS отдельно (PBS), EGFRvIII-трансдуцированных Т-клеток, а также новых CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sLH_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmut CAR Т-клеток. Все клетки получали от одного и того же донора параллельно.

Контроль животных. Состояние здоровья мышей контролировали ежедневно, в том числе дважды в неделю измеряли вес тела. Процентное изменение веса тела рассчитывали как (BW_{текущий} - BW_{исходный})/(BW_{исходный}) x 100%. Опухоли контролировали 2 раза в неделю путем визуализации мышей.

Противоопухолевую активность CD22 CAR T-клеток оценивали на модели ксенотрансплантата B-клеточного острого лимфобластного лейкоза. После имплантации опухолевых клеток в день 0 несущих опухоли мышей рандомизировали в получавшие обработку группы и вводили им CAR Т-клетки внутривенно через латеральную хвостовую вену в день 7 после имплантации опухоли. Рост опухоли и здоровье животных контролировали до достижения животными конечной точки.

На этой модели Nalm6 мышей, которые получали PBS или EGFRvIII Т-клетки, умерщвляли в день 23, когда опухоли вызывали сниженную подвижность задних конечностей. Все другие группы умерщвляли в день 37. Затем определяли среднюю биолюминесценцию для всех получавших обработку групп (ФИГ. 26). Получавшая обработку посредством PBS группа, которая не получала никаких Т-клеток, демонстрировала исходные кинетические показатели роста опухоли Nalm6 у внутривенно инъецированных мышей NSG. Получавшая обработку посредством EGFRvIII группа получала имитационные трансдуцированные Т-клетки и служила в качестве T-клеточного контроля для демонстрации неспецифического ответа Т-клеток человеческих доноров в данной модели. И получавшие обработку посредством как PBS, так и UTD группы демонстрировали продолжительное прогрессирование опухолей на протяжении данного исследования. Все CD22-65_Zwt, CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt, CD22-65sKD_Zwt и CD22-m971s_Zmut CAR Т-клетки демонстрировали значительно более медленный рост опухоли. CD22-65s_Zwt, CD22-65ss_Zwt демонстрировали самый сильный ответ.

Эти данные показывают, что специфические в отношении CD22 CAR Т-клетки CD22-65s_Zwt и CD22-65ss_Zwt способны сильно подавлять развитие рака NALM6 при низкой дозе 1×10⁶CAR Т-клеток. Эффективность превосходила контрольный m971 CAR.

Пример 13. Создание, экспрессия и антигенная активацию CART, включающих тандемные связывающий CD19 и связывающие CD22 scFV

Для тестирования того, может ли одна клетка CART, функционализированная двумя различными scFV, быть активирована любым из антигенов, которые распознаются CART, создавали CART, содержащие два различных scFV, связанных вместе, с scFV, нацеленными на CD19 и CD22 (таблицы 15 и 17 и ФИГ. 27). Эти конструкции различаются по положению фрагмента распознавания CD19 относительно мембраны Т-клеток (проксимального или дистального: ближе или дальше от мембраны Т-клеток, соответственно).

В созданных конструкции исследовали два различных линкера, соединяющих два scFV: LAEAAAK и GGGGS. LAEAAAK является более жестким линкером, в то время как линкер GGGGS является более гибким линкером. Также исследовали влияние ориентации легкой (L) и тяжелой (H) цепей на активацию связывающего CD22 scFV. Связывающий CD19 scFV был ориентирован как L/H (в ориентации от N- к C-концу) во всех конструкциях. Также исследовали два линкера, соединяющих цепи H и L в связывающем CD22 scFV: GGGGSGGGGSGGGGS и GGGGS (записанные как "sh" в таблицах 17 и 18). Также создавали контрольные конструкции, сконструированные с отдельными scFV (связывающими CD19 или связывающими CD22) (таблица 18).

Таблица 17. Конструкции, созданные в контексте одиночной CART, нацеливающейся на CD22 и CD19

Таблица 18. Контроли конструкции CAR, созданные для нацеливания на CD19 или CD20

Оценка экспрессии CAR. Последовательности, кодирующие конструкции, включенные в таблицы 17 и 18, клонировали в вектор с лентивирусным остовом. Все конструкции содержали лидерную последовательность CD8-альфа человека на их N-конце, которая, как ожидали, расщеплялась котрансляционно и исключалась из конечного белкового продукта. Экспрессия трансгена управлялась промотором EF1-альфа. Полученные ДНК использовали для трансфекции клеток HEK-293 для получения вируса. Иллюстративные вирусные титры приведены в таблице 19. Вирусные титры определяли на основании поверхностной экспрессии различных конструкций в клетках SupT1 с помощью FACS с использованием двух различных окрашивающих реагентов. Использовали антитело к идиотипу, распознающее scFv, направленный на CD19 и CD22-FC, для окрашивания scFV, направленного на CD22. Окрашивание осуществляли индивидуально.

Таблица 19. Вирусные титры, полученные для некоторых конструкций, тестируемых в контексте нацеливания на CD19 и CD22

Для каждой конструкции усредняли вирусные титры, полученные с двумя окрашивающими реагентами и вирусы оценивали по их способности трансдуцировать клетки JNL. Клетки Jurkat предварительно трансдуцировали конструкцией NFAT-люциферазный репортер. Использовали множественность инфекции 3. Определяли процент клеток, положительных по CAR, в JNL после трансдукции указанными конструкциями (ФИГ. 28). Определяли экспрессию CAR через 7 дней после трансдукции с помощью FACS с использованием тех же окрашивающих реагентов для проверки экспрессии CAR в инфицированных клетках SupT1. Окрашивание осуществляли индивидуально без совместного добавления двух реагентов во избежание помехи.

Эти данные показывают, что scFV в различных конструкциях выявляли на клеточной поверхности, что указывает на экспрессию и миграцию на клеточную поверхность для конструкций, нацеленных как на CD19, так и на CD22. Использование окрашивающего реагента, который сам является антигеном (CD22-Fc), указывает на то, что scFV, направленный на CD22, приобрел правильно свернутую структуру, которая совместима с распознаванием антигена в белке CD22. Этот результат наблюдали независимо от того, было ли сконструировано плечо связывающего CD22 scFV выше или ниже плеча связывающего CD19 scFV.

Оценка активации CAR. Чтобы оценить, может ли CAR, содержащий два различных scFV, быть активирован одним из целевых антигенов, совместно культивировали нетрансдуцированные (UTD) и трансдуцированные JNL с целевыми линиями клеток, экспрессирующими либо CD19 (K562-CD19), либо CD22 (K562-CD22). Если CAR распознал антиген CD19 или CD22, вовлечение CAR приводило к последующей активации NFAT. NFAT-люциферазный репортер в клетках JNL представлял показатель для считывания активации CAR. Показаны уровни экспрессии CD19 и CD22 в различных целевых линиях клеток (ФИГ. 29).

Показан уровень NFAT-индуцированной люциферазы в качестве показателя активности CAR (ФИГ. 30). Количество клеток JNL, добавленных в анализ, нормализовали до самой низкой экспрессии CAR на основании данных, показанных на ФИГ. 28. Все конструкции, содержащие два scFV, один, связывающий CD19, а другой, связывающий CD22, были активированы обеими мишенями, независимо от ориентации scFV относительно мембраны Т-клеток. МоноCAR были активированы только антигеном, который распознает их scFV (CD19 или CD22).

Эквиваленты

Раскрытия каждого в отдельности патента, заявки на патент и публикации, упоминаемых в данном документе, включены тем самым в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Несмотря на то, что настоящее изобретение было раскрыто со ссылкой на конкретные аспекты, очевидно, что другие аспекты и вариации настоящего изобретения могут быть разработаны другими специалистами в данной области техники без отступления от фактической сути и объема настоящего изобретения. Прилагаемая формула изобретения предусмотрена истолковать включение всех таких аспектов и эквивалентных вариаций.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> NOVARTIS AG

THE TRUSTEES OF THE UNIVERSITY OF PENNSYLVANIA

<120> ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА

<130> N2067-7121WO

<140> PCT/US2017/055627

<141> 2017-10-06

<150> 62/405,520

<151> 2016-10-07

<160> 1103

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1

Asn Tyr Trp Met His

1 5

<210> 2

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 2

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 3

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 3

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 4

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 4

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 5

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 5

Thr Pro Thr Thr Gly Tyr

1 5

<210> 6

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 6

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 7

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 7

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp

1 5

<210> 8

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 8

Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro

1 5

<210> 9

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 9

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 10

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 10

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 11

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 11

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac caggcgcatc cgtgaaagtc

60

tcctgcaaag cctccggcta cacattcact aactattgga tgcattgggt gcgccaggcc

120

ccgggacagg ggctggagtg gatggggttc attaccccta ccaccggcta ccctgagtac

180

aaccagaagt tcaaggatag ggtcaccatg accgctgaca agtccacctc caccgcgtac

240

atggaactgt catcgctccg gtccgaggat accgcggtgt actactgcgc ccggagaaaa

300

gtcggaaagg gagtgtatta cgccttggac tactggggac aggggactac cgtgaccgtg

360

tcgagc

366

<210> 12

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 12

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 13

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 13

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 14

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 14

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 15

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 15

Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 16

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 16

Asn Thr Lys

1

<210> 17

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 17

Phe Trp Ser Ser Pro Trp

1 5

<210> 18

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 18

Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 19

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 19

Asn Thr Lys

1

<210> 20

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 20

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 21

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 21

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 22

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 22

gacatccaga tgacccagtc cccgtcaagc cttagcgcct ccgtgggcga ccgcgtgacc

60

attacttgtc gggcgtcggg aaacatccac aactacctcg cctggtacca gcagaagccg

120

ggaaaggtcc ccaagctgct gatctacaat accaagactc tggccgacgg agtgccttcc

180

cgcttttccg gttcgggaag cgggactgac tacaccctga ctatctcctc gctgcaaccc

240

gaagatgtgg ctacgtacta ctgccagcac ttctggtcct ctccctggac cttcggcggt

300

ggcactaagg tcgagattaa g

321

<210> 23

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 23

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 24

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 24

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

165 170 175

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asn

180 185 190

Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp

210 215 220

Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr Phe

225 230 235 240

Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 25

<211> 747

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 25

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac caggcgcatc cgtgaaagtc

60

tcctgcaaag cctccggcta cacattcact aactattgga tgcattgggt gcgccaggcc

120

ccgggacagg ggctggagtg gatggggttc attaccccta ccaccggcta ccctgagtac

180

aaccagaagt tcaaggatag ggtcaccatg accgctgaca agtccacctc caccgcgtac

240

atggaactgt catcgctccg gtccgaggat accgcggtgt actactgcgc ccggagaaaa

300

gtcggaaagg gagtgtatta cgccttggac tactggggac aggggactac cgtgaccgtg

360

tcgagcggtg gaggcggctc cggcggagga ggaagcgggg gaggcggttc agggggcgga

420

ggaagcgaca tccagatgac ccagtccccg tcaagcctta gcgcctccgt gggcgaccgc

480

gtgaccatta cttgtcgggc gtcgggaaac atccacaact acctcgcctg gtaccagcag

540

aagccgggaa aggtccccaa gctgctgatc tacaatacca agactctggc cgacggagtg

600

ccttcccgct tttccggttc gggaagcggg actgactaca ccctgactat ctcctcgctg

660

caacccgaag atgtggctac gtactactgc cagcacttct ggtcctctcc ctggaccttc

720

ggcggtggca ctaaggtcga gattaag

747

<210> 26

<211> 493

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 26

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr

115 120 125

Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile

180 185 190

His Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys

195 200 205

Leu Leu Ile Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg

210 215 220

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser

225 230 235 240

Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser

245 250 255

Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln

275 280 285

Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala

290 295 300

Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala

305 310 315 320

Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr

325 330 335

Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln

340 345 350

Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser

355 360 365

Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys

370 375 380

Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln

385 390 395 400

Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu

405 410 415

Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg

420 425 430

Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met

435 440 445

Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly

450 455 460

Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp

465 470 475 480

Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 27

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 27

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtgc aactcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga aaccaggcgc atccgtgaaa

120

gtctcctgca aagcctccgg ctacacattc actaactatt ggatgcattg ggtgcgccag

180

gccccgggac aggggctgga gtggatgggg ttcattaccc ctaccaccgg ctaccctgag

240

tacaaccaga agttcaagga tagggtcacc atgaccgctg acaagtccac ctccaccgcg

300

tacatggaac tgtcatcgct ccggtccgag gataccgcgg tgtactactg cgcccggaga

360

aaagtcggaa agggagtgta ttacgccttg gactactggg gacaggggac taccgtgacc

420

gtgtcgagcg gtggaggcgg ctccggcgga ggaggaagcg ggggaggcgg ttcagggggc

480

ggaggaagcg acatccagat gacccagtcc ccgtcaagcc ttagcgcctc cgtgggcgac

540

cgcgtgacca ttacttgtcg ggcgtcggga aacatccaca actacctcgc ctggtaccag

600

cagaagccgg gaaaggtccc caagctgctg atctacaata ccaagactct ggccgacgga

660

gtgccttccc gcttttccgg ttcgggaagc gggactgact acaccctgac tatctcctcg

720

ctgcaacccg aagatgtggc tacgtactac tgccagcact tctggtcctc tccctggacc

780

ttcggcggtg gcactaaggt cgagattaag accactaccc cagcaccgag gccacccacc

840

ccggctccta ccatcgcctc ccagcctctg tccctgcgtc cggaggcatg tagacccgca

900

gctggtgggg ccgtgcatac ccggggtctt gacttcgcct gcgatatcta catttgggcc

960

cctctggctg gtacttgcgg ggtcctgctg ctttcactcg tgatcactct ttactgtaag

1020

cgcggtcgga agaagctgct gtacatcttt aagcaaccct tcatgaggcc tgtgcagact

1080

actcaagagg aggacggctg ttcatgccgg ttcccagagg aggaggaagg cggctgcgaa

1140

ctgcgcgtga aattcagccg cagcgcagat gctccagcct accagcaggg gcagaaccag

1200

ctctacaacg aactcaatct tggtcggaga gaggagtacg acgtgctgga caagcggaga

1260

ggacgggacc cagaaatggg cgggaagccg cgcagaaaga atccccaaga gggcctgtac

1320

aacgagctcc aaaaggataa gatggcagaa gcctatagcg agattggtat gaaaggggaa

1380

cgcagaagag gcaaaggcca cgacggactg taccagggac tcagcaccgc caccaaggac

1440

acctatgacg ctcttcacat gcaggccctg ccgcctcgg

1479

<210> 28

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 28

Asn Tyr Trp Met His

1 5

<210> 29

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 29

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 30

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 30

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 31

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 31

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 32

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 32

Thr Pro Thr Thr Gly Tyr

1 5

<210> 33

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 33

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 34

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 34

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp

1 5

<210> 35

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 35

Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro

1 5

<210> 36

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 36

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 37

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 37

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 38

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 38

caagtccaac tcgtccaatc aggagcagaa gtcaagaagc ccggaagctc tgtcaaagtg

60

tcctgcaagg cctccggtta caccttcacc aactattgga tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagg gcttggaatg gatgggtttc atcactccaa ccaccggtta cccggagtac

180

aaccagaagt ttaaggaccg cgtgaccatt actgccgaca agtccacgag caccgcttac

240

atggaactta gcagcctgcg gtccgaggac actgccgtgt attactgcgc gcggaggaag

300

gtcggaaagg gagtgtacta cgcactggac tactggggcc agggaaccac cgtgactgtg

360

tcctcc

366

<210> 39

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 39

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 40

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 40

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 41

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 41

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 42

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 42

Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 43

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 43

Asn Thr Lys

1

<210> 44

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 44

Phe Trp Ser Ser Pro Trp

1 5

<210> 45

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 45

Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 46

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 46

Asn Thr Lys

1

<210> 47

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 47

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 48

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 48

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 49

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 49

gatattcaga tgacccagtc cccttcatcc ctgagcgcct cagtgggcga tagagtgacc

60

atcacttgtc gcgcctcggg caatatccac aactacctcg cctggtacca gcagaagccg

120

ggaaaagtgc ctaagctgct gatctacaac actaagaccc tggcggatgg agtgcccagc

180

cggttctccg gctccggcag cggcacagac tacaccctca ccatctcctc gctgcaacca

240

gaggacgtgg ctacctacta ctgccagcat ttctggtcgt ccccctggac tttcggaggg

300

gggaccaaag tggagattaa g

321

<210> 50

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 50

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 51

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 51

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

165 170 175

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asn

180 185 190

Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp

210 215 220

Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr Phe

225 230 235 240

Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 52

<211> 747

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 52

caagtccaac tcgtccaatc aggagcagaa gtcaagaagc ccggaagctc tgtcaaagtg

60

tcctgcaagg cctccggtta caccttcacc aactattgga tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagg gcttggaatg gatgggtttc atcactccaa ccaccggtta cccggagtac

180

aaccagaagt ttaaggaccg cgtgaccatt actgccgaca agtccacgag caccgcttac

240

atggaactta gcagcctgcg gtccgaggac actgccgtgt attactgcgc gcggaggaag

300

gtcggaaagg gagtgtacta cgcactggac tactggggcc agggaaccac cgtgactgtg

360

tcctccggtg gcggagggtc gggagggggg ggctcgggag gaggagggtc cgggggcggt

420

ggctcagata ttcagatgac ccagtcccct tcatccctga gcgcctcagt gggcgataga

480

gtgaccatca cttgtcgcgc ctcgggcaat atccacaact acctcgcctg gtaccagcag

540

aagccgggaa aagtgcctaa gctgctgatc tacaacacta agaccctggc ggatggagtg

600

cccagccggt tctccggctc cggcagcggc acagactaca ccctcaccat ctcctcgctg

660

caaccagagg acgtggctac ctactactgc cagcatttct ggtcgtcccc ctggactttc

720

ggagggggga ccaaagtgga gattaag

747

<210> 53

<211> 493

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 53

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr

115 120 125

Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile

180 185 190

His Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys

195 200 205

Leu Leu Ile Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg

210 215 220

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser

225 230 235 240

Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser

245 250 255

Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln

275 280 285

Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala

290 295 300

Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala

305 310 315 320

Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr

325 330 335

Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln

340 345 350

Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser

355 360 365

Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys

370 375 380

Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln

385 390 395 400

Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu

405 410 415

Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg

420 425 430

Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met

435 440 445

Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly

450 455 460

Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp

465 470 475 480

Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 54

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 54

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca atcaggagca gaagtcaaga agcccggaag ctctgtcaaa

120

gtgtcctgca aggcctccgg ttacaccttc accaactatt ggatgcactg ggtcagacag

180

gccccgggac agggcttgga atggatgggt ttcatcactc caaccaccgg ttacccggag

240

tacaaccaga agtttaagga ccgcgtgacc attactgccg acaagtccac gagcaccgct

300

tacatggaac ttagcagcct gcggtccgag gacactgccg tgtattactg cgcgcggagg

360

aaggtcggaa agggagtgta ctacgcactg gactactggg gccagggaac caccgtgact

420

gtgtcctccg gtggcggagg gtcgggaggg gggggctcgg gaggaggagg gtccgggggc

480

ggtggctcag atattcagat gacccagtcc ccttcatccc tgagcgcctc agtgggcgat

540

agagtgacca tcacttgtcg cgcctcgggc aatatccaca actacctcgc ctggtaccag

600

cagaagccgg gaaaagtgcc taagctgctg atctacaaca ctaagaccct ggcggatgga

660

gtgcccagcc ggttctccgg ctccggcagc ggcacagact acaccctcac catctcctcg

720

ctgcaaccag aggacgtggc tacctactac tgccagcatt tctggtcgtc cccctggact

780

ttcggagggg ggaccaaagt ggagattaag accactaccc cagcaccgag gccacccacc

840

ccggctccta ccatcgcctc ccagcctctg tccctgcgtc cggaggcatg tagacccgca

900

gctggtgggg ccgtgcatac ccggggtctt gacttcgcct gcgatatcta catttgggcc

960

cctctggctg gtacttgcgg ggtcctgctg ctttcactcg tgatcactct ttactgtaag

1020

cgcggtcgga agaagctgct gtacatcttt aagcaaccct tcatgaggcc tgtgcagact

1080

actcaagagg aggacggctg ttcatgccgg ttcccagagg aggaggaagg cggctgcgaa

1140

ctgcgcgtga aattcagccg cagcgcagat gctccagcct accagcaggg gcagaaccag

1200

ctctacaacg aactcaatct tggtcggaga gaggagtacg acgtgctgga caagcggaga

1260

ggacgggacc cagaaatggg cgggaagccg cgcagaaaga atccccaaga gggcctgtac

1320

aacgagctcc aaaaggataa gatggcagaa gcctatagcg agattggtat gaaaggggaa

1380

cgcagaagag gcaaaggcca cgacggactg taccagggac tcagcaccgc caccaaggac

1440

acctatgacg ctcttcacat gcaggccctg ccgcctcgg

1479

<210> 55

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 55

Asn Tyr Trp Met His

1 5

<210> 56

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 56

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 57

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 57

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 58

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 58

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 59

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 59

Thr Pro Thr Thr Gly Tyr

1 5

<210> 60

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 60

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 61

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 61

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp

1 5

<210> 62

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 62

Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro

1 5

<210> 63

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 63

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 64

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 64

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 65

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 65

caagtccaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac ccggagcttc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctccggtta cacctttacg aactactgga tgcattgggt gcgccaggcc

120

ccgggacagg ggctggaatg gatgggcttc attaccccca ccaccggata ccccgagtac

180

aatcagaagt tcaaggaccg ggtcaccatg accgccgaca agtcaacctc tactgcttac

240

atggagctgt ccagcctgcg gtcggaagat accgccgtgt attactgcgc gagaaggaaa

300

gtcggaaagg gagtgtacta tgccctggac tactggggac aggggaccac tgtgactgtg

360

tcaagc

366

<210> 66

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 66

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 67

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 67

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 68

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 68

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 69

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 69

Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 70

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 70

Asn Thr Lys

1

<210> 71

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 71

Phe Trp Ser Ser Pro Trp

1 5

<210> 72

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 72

Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 73

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 73

Asn Thr Lys

1

<210> 74

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 74

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 75

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 75

Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile

35 40 45

Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 76

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 76

gcgatccgca tgacccagag cccgttctcc ctgtccgcgt ccgtggggga ccgcgtgact

60

atcacgtgtc gggcctccgg gaacatccac aactacctcg catggtacca gcagaagccg

120

gccaaggccc ctaagttgtt catctacaac accaagactc ttgccgacgg agtgccgtcc

180

cggtttagcg gaagcggttc cggcaccgac tacaccctga ctatctcgag cctgcaacca

240

gaagatttcg ccacttacta ctgccagcac ttctggtcgt ccccttggac attcggcggc

300

ggcaccaagg tcgagattaa g

321

<210> 77

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 77

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 78

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 78

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ile

130 135 140

Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

165 170 175

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn

180 185 190

Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp

210 215 220

Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr Phe

225 230 235 240

Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 79

<211> 747

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 79

caagtccaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac ccggagcttc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctccggtta cacctttacg aactactgga tgcattgggt gcgccaggcc

120

ccgggacagg ggctggaatg gatgggcttc attaccccca ccaccggata ccccgagtac

180

aatcagaagt tcaaggaccg ggtcaccatg accgccgaca agtcaacctc tactgcttac

240

atggagctgt ccagcctgcg gtcggaagat accgccgtgt attactgcgc gagaaggaaa

300

gtcggaaagg gagtgtacta tgccctggac tactggggac aggggaccac tgtgactgtg

360

tcaagcggag gcggaggctc ggggggcgga ggttcgggcg gaggaggatc agggggcggc

420

ggttccgcga tccgcatgac ccagagcccg ttctccctgt ccgcgtccgt gggggaccgc

480

gtgactatca cgtgtcgggc ctccgggaac atccacaact acctcgcatg gtaccagcag

540

aagccggcca aggcccctaa gttgttcatc tacaacacca agactcttgc cgacggagtg

600

ccgtcccggt ttagcggaag cggttccggc accgactaca ccctgactat ctcgagcctg

660

caaccagaag atttcgccac ttactactgc cagcacttct ggtcgtcccc ttggacattc

720

ggcggcggca ccaaggtcga gattaag

747

<210> 80

<211> 493

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 80

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr

115 120 125

Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile

180 185 190

His Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys

195 200 205

Leu Phe Ile Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg

210 215 220

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser

225 230 235 240

Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser

245 250 255

Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln

275 280 285

Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala

290 295 300

Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala

305 310 315 320

Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr

325 330 335

Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln

340 345 350

Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser

355 360 365

Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys

370 375 380

Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln

385 390 395 400

Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu

405 410 415

Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg

420 425 430

Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met

435 440 445

Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly

450 455 460

Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp

465 470 475 480

Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 81

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 81

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga aacccggagc ttccgtgaaa

120

gtgtcctgca aagcctccgg ttacaccttt acgaactact ggatgcattg ggtgcgccag

180

gccccgggac aggggctgga atggatgggc ttcattaccc ccaccaccgg ataccccgag

240

tacaatcaga agttcaagga ccgggtcacc atgaccgccg acaagtcaac ctctactgct

300

tacatggagc tgtccagcct gcggtcggaa gataccgccg tgtattactg cgcgagaagg

360

aaagtcggaa agggagtgta ctatgccctg gactactggg gacaggggac cactgtgact

420

gtgtcaagcg gaggcggagg ctcggggggc ggaggttcgg gcggaggagg atcagggggc

480

ggcggttccg cgatccgcat gacccagagc ccgttctccc tgtccgcgtc cgtgggggac

540

cgcgtgacta tcacgtgtcg ggcctccggg aacatccaca actacctcgc atggtaccag

600

cagaagccgg ccaaggcccc taagttgttc atctacaaca ccaagactct tgccgacgga

660

gtgccgtccc ggtttagcgg aagcggttcc ggcaccgact acaccctgac tatctcgagc

720

ctgcaaccag aagatttcgc cacttactac tgccagcact tctggtcgtc cccttggaca

780

ttcggcggcg gcaccaaggt cgagattaag accactaccc cagcaccgag gccacccacc

840

ccggctccta ccatcgcctc ccagcctctg tccctgcgtc cggaggcatg tagacccgca

900

gctggtgggg ccgtgcatac ccggggtctt gacttcgcct gcgatatcta catttgggcc

960

cctctggctg gtacttgcgg ggtcctgctg ctttcactcg tgatcactct ttactgtaag

1020

cgcggtcgga agaagctgct gtacatcttt aagcaaccct tcatgaggcc tgtgcagact

1080

actcaagagg aggacggctg ttcatgccgg ttcccagagg aggaggaagg cggctgcgaa

1140

ctgcgcgtga aattcagccg cagcgcagat gctccagcct accagcaggg gcagaaccag

1200

ctctacaacg aactcaatct tggtcggaga gaggagtacg acgtgctgga caagcggaga

1260

ggacgggacc cagaaatggg cgggaagccg cgcagaaaga atccccaaga gggcctgtac

1320

aacgagctcc aaaaggataa gatggcagaa gcctatagcg agattggtat gaaaggggaa

1380

cgcagaagag gcaaaggcca cgacggactg taccagggac tcagcaccgc caccaaggac

1440

acctatgacg ctcttcacat gcaggccctg ccgcctcgg

1479

<210> 82

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 82

Asn Tyr Trp Met His

1 5

<210> 83

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 83

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 84

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 84

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 85

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 85

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 86

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 86

Thr Pro Thr Thr Gly Tyr

1 5

<210> 87

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 87

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 88

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 88

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp

1 5

<210> 89

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 89

Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro

1 5

<210> 90

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 90

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 91

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 91

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 92

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 92

caagtccaac tcgtccaaag cggtgcagaa gtcaagaagc ccggttcctc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcgggcta caccttcact aattactgga tgcattgggt ccgccaggcg

120

cccggacagg gattggaatg gatggggttc atcacgccga ccaccggata cccggagtac

180

aaccagaagt tcaaggacag agtgaccatt accgccgata agtccacctc caccgcttac

240

atggagctct cctcactgcg gtccgaagat acagccgtgt actattgtgc tcgccggaaa

300

gtcggaaagg gagtgtacta cgccctggac tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg

360

tcctcg

366

<210> 93

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 93

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 94

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 94

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 95

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 95

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 96

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 96

Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 97

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 97

Asn Thr Lys

1

<210> 98

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 98

Phe Trp Ser Ser Pro Trp

1 5

<210> 99

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 99

Gly Asn Ile His Asn Tyr

1 5

<210> 100

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 100

Asn Thr Lys

1

<210> 101

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 101

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 102

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 102

Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile

35 40 45

Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 103

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 103

gccattagga tgactcagtc ccctttctcc ctctccgcga gcgtgggcga ccgcgtgacg

60

atcacttgcc gggcctcggg gaacattcac aactacctgg cctggtacca gcagaagccg

120

gccaaggccc ctaagctgtt catctacaac accaagaccc ttgcggacgg agtgccatcg

180

agattttccg gctcgggctc tgggaccgat tacactctga ctatctcaag cctgcaacct

240

gaggacttcg ccacttacta ctgccagcac ttctggagca gcccctggac tttcggtggc

300

gggaccaagg tcgaaatcaa g

321

<210> 104

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 104

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 105

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 105

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ile

130 135 140

Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

165 170 175

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn

180 185 190

Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp

210 215 220

Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr Phe

225 230 235 240

Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 106

<211> 747

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 106

caagtccaac tcgtccaaag cggtgcagaa gtcaagaagc ccggttcctc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcgggcta caccttcact aattactgga tgcattgggt ccgccaggcg

120

cccggacagg gattggaatg gatggggttc atcacgccga ccaccggata cccggagtac

180

aaccagaagt tcaaggacag agtgaccatt accgccgata agtccacctc caccgcttac

240

atggagctct cctcactgcg gtccgaagat acagccgtgt actattgtgc tcgccggaaa

300

gtcggaaagg gagtgtacta cgccctggac tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg

360

tcctcgggag gagggggttc gggcggaggc ggctccggtg gaggcggaag cggagggggc

420

ggatcagcca ttaggatgac tcagtcccct ttctccctct ccgcgagcgt gggcgaccgc

480

gtgacgatca cttgccgggc ctcggggaac attcacaact acctggcctg gtaccagcag

540

aagccggcca aggcccctaa gctgttcatc tacaacacca agacccttgc ggacggagtg

600

ccatcgagat tttccggctc gggctctggg accgattaca ctctgactat ctcaagcctg

660

caacctgagg acttcgccac ttactactgc cagcacttct ggagcagccc ctggactttc

720

ggtggcggga ccaaggtcga aatcaag

747

<210> 107

<211> 493

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 107

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr

115 120 125

Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile

180 185 190

His Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys

195 200 205

Leu Phe Ile Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg

210 215 220

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser

225 230 235 240

Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser

245 250 255

Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln

275 280 285

Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala

290 295 300

Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala

305 310 315 320

Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr

325 330 335

Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln

340 345 350

Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser

355 360 365

Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys

370 375 380

Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln

385 390 395 400

Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu

405 410 415

Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg

420 425 430

Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met

435 440 445

Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly

450 455 460

Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp

465 470 475 480

Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 108

<211> 1479

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 108

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca aagcggtgca gaagtcaaga agcccggttc ctccgtgaaa

120

gtgtcctgca aagcctcggg ctacaccttc actaattact ggatgcattg ggtccgccag

180

gcgcccggac agggattgga atggatgggg ttcatcacgc cgaccaccgg atacccggag

240

tacaaccaga agttcaagga cagagtgacc attaccgccg ataagtccac ctccaccgct

300

tacatggagc tctcctcact gcggtccgaa gatacagccg tgtactattg tgctcgccgg

360

aaagtcggaa agggagtgta ctacgccctg gactattggg gccagggcac caccgtgacc

420

gtgtcctcgg gaggaggggg ttcgggcgga ggcggctccg gtggaggcgg aagcggaggg

480

ggcggatcag ccattaggat gactcagtcc cctttctccc tctccgcgag cgtgggcgac

540

cgcgtgacga tcacttgccg ggcctcgggg aacattcaca actacctggc ctggtaccag

600

cagaagccgg ccaaggcccc taagctgttc atctacaaca ccaagaccct tgcggacgga

660

gtgccatcga gattttccgg ctcgggctct gggaccgatt acactctgac tatctcaagc

720

ctgcaacctg aggacttcgc cacttactac tgccagcact tctggagcag cccctggact

780

ttcggtggcg ggaccaaggt cgaaatcaag accactaccc cagcaccgag gccacccacc

840

ccggctccta ccatcgcctc ccagcctctg tccctgcgtc cggaggcatg tagacccgca

900

gctggtgggg ccgtgcatac ccggggtctt gacttcgcct gcgatatcta catttgggcc

960

cctctggctg gtacttgcgg ggtcctgctg ctttcactcg tgatcactct ttactgtaag

1020

cgcggtcgga agaagctgct gtacatcttt aagcaaccct tcatgaggcc tgtgcagact

1080

actcaagagg aggacggctg ttcatgccgg ttcccagagg aggaggaagg cggctgcgaa

1140

ctgcgcgtga aattcagccg cagcgcagat gctccagcct accagcaggg gcagaaccag

1200

ctctacaacg aactcaatct tggtcggaga gaggagtacg acgtgctgga caagcggaga

1260

ggacgggacc cagaaatggg cgggaagccg cgcagaaaga atccccaaga gggcctgtac

1320

aacgagctcc aaaaggataa gatggcagaa gcctatagcg agattggtat gaaaggggaa

1380

cgcagaagag gcaaaggcca cgacggactg taccagggac tcagcaccgc caccaaggac

1440

acctatgacg ctcttcacat gcaggccctg ccgcctcgg

1479

<210> 109

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 109

Asn Tyr Asn Leu His

1 5

<210> 110

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 110

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 111

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 111

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 112

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 112

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 113

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 113

Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp

1 5

<210> 114

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 114

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 115

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 115

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn

1 5

<210> 116

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 116

Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr

1 5

<210> 117

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 117

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 118

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 118

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 119

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 119

caagtccaac tcgtccaatc cggtgcagaa gtcaagaaac ccggtgcatc cgtgaaagtg

60

tcatgcaaag cctccgggta caccttcact aactacaacc tccactgggt ccgccaggcc

120

ccgggacagg gactggagtg gatgggggcc atctacccgg gaaactacga cacttcatac

180

aaccagaagt tcaagggcag agtgaccatg actgccgaca agagcacatc gaccgcctac

240

atggaactca gctccctgcg ctccgaggat actgccgtct actactgtgc ccgggtggac

300

ttcggccact cccggtattg gtatttcgat gtctggggac agggaaccac cgtgactgtg

360

tccagc

366

<210> 120

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 120

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 121

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 121

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 122

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 122

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 123

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 123

Thr Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 124

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 124

Ala Thr Ser

1

<210> 125

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 125

Trp Thr Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 126

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 126

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 127

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 127

Ala Thr Ser

1

<210> 128

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 128

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 129

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 129

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile His

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 130

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 130

gaaatcgtgc tgacccagtc ccctgcgact ctgagcctga gccctgggga acgcgccact

60

ttgtcatgcc gggccacctc ctccgtgtcc tccatgaact ggtaccagca gaagcccgga

120

caggctccgc ggccgctgat ccatgccacc tccaacctgg ccagcggcat tcccgcgagg

180

ttttccggct cgggctctgg taccgactac accctgacca tctcgagcct tgagccagaa

240

gatgctgcgg tgtactactg ccaacagtgg accttcaatc cgcctacgtt cggacagggg

300

accaagctgg agattaag

318

<210> 131

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 131

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 132

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 132

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg

145 150 155 160

Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile His Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Ala

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 133

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 133

caagtccaac tcgtccaatc cggtgcagaa gtcaagaaac ccggtgcatc cgtgaaagtg

60

tcatgcaaag cctccgggta caccttcact aactacaacc tccactgggt ccgccaggcc

120

ccgggacagg gactggagtg gatgggggcc atctacccgg gaaactacga cacttcatac

180

aaccagaagt tcaagggcag agtgaccatg actgccgaca agagcacatc gaccgcctac

240

atggaactca gctccctgcg ctccgaggat actgccgtct actactgtgc ccgggtggac

300

ttcggccact cccggtattg gtatttcgat gtctggggac agggaaccac cgtgactgtg

360

tccagcgggg gcggaggatc gggtggcgga ggttcggggg gaggaggatc aggcggcggc

420

ggatcggaaa tcgtgctgac ccagtcccct gcgactctga gcctgagccc tggggaacgc

480

gccactttgt catgccgggc cacctcctcc gtgtcctcca tgaactggta ccagcagaag

540

cccggacagg ctccgcggcc gctgatccat gccacctcca acctggccag cggcattccc

600

gcgaggtttt ccggctcggg ctctggtacc gactacaccc tgaccatctc gagccttgag

660

ccagaagatg ctgcggtgta ctactgccaa cagtggacct tcaatccgcc tacgttcgga

720

caggggacca agctggagat taag

744

<210> 134

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 134

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu

165 170 175

Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro

195 200 205

Leu Ile His Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Glu Pro Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 135

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 135

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca atccggtgca gaagtcaaga aacccggtgc atccgtgaaa

120

gtgtcatgca aagcctccgg gtacaccttc actaactaca acctccactg ggtccgccag

180

gccccgggac agggactgga gtggatgggg gccatctacc cgggaaacta cgacacttca

240

tacaaccaga agttcaaggg cagagtgacc atgactgccg acaagagcac atcgaccgcc

300

tacatggaac tcagctccct gcgctccgag gatactgccg tctactactg tgcccgggtg

360

gacttcggcc actcccggta ttggtatttc gatgtctggg gacagggaac caccgtgact

420

gtgtccagcg ggggcggagg atcgggtggc ggaggttcgg ggggaggagg atcaggcggc

480

ggcggatcgg aaatcgtgct gacccagtcc cctgcgactc tgagcctgag ccctggggaa

540

cgcgccactt tgtcatgccg ggccacctcc tccgtgtcct ccatgaactg gtaccagcag

600

aagcccggac aggctccgcg gccgctgatc catgccacct ccaacctggc cagcggcatt

660

cccgcgaggt tttccggctc gggctctggt accgactaca ccctgaccat ctcgagcctt

720

gagccagaag atgctgcggt gtactactgc caacagtgga ccttcaatcc gcctacgttc

780

ggacagggga ccaagctgga gattaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 136

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 136

Asn Tyr Asn Leu His

1 5

<210> 137

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 137

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 138

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 138

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 139

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 139

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 140

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 140

Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp

1 5

<210> 141

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 141

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 142

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 142

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn

1 5

<210> 143

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 143

Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr

1 5

<210> 144

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 144

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 145

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 145

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 146

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 146

caagtccaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac ctggagcatc cgtgaaagtg

60

tcttgcaaag cctccggcta caccttcacc aactacaacc tccattgggt cagacaggcc

120

cccggacaag gactcgaatg gatgggagcg atctacccgg gaaactacga caccagctac

180

aaccagaagt tcaagggccg cgtgactatg accgccgata agagcacctc caccgcctac

240

atggaactgt cctcgctgag gtccgaggac actgcggtgt actactgcgc ccgcgtggac

300

ttcggacact cacggtattg gtacttcgac gtctggggac agggcactac cgtgaccgtg

360

tcgagc

366

<210> 147

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 147

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 148

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 148

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 149

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 149

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 150

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 150

Thr Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 151

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 151

Ala Thr Ser

1

<210> 152

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 152

Trp Thr Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 153

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 153

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 154

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 154

Ala Thr Ser

1

<210> 155

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 155

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 156

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 156

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile His

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 157

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 157

gatatccagc tgactcagtc cccgtcattc ctgtccgcct ccgtgggaga cagagtgacc

60

atcacctgtc gggccacttc ctccgtgtca agcatgaact ggtatcagca gaagcccggg

120

aaggccccaa agccgctgat tcacgcgacg tccaacctgg cttccggcgt gccgagccgg

180

ttctccggct cggggagcgg gactgagtac accctgacta tttcctcgct tcaacccgag

240

gactttgcta cctactactg ccaacagtgg accttcaatc ctccgacatt cggacagggt

300

accaagttgg aaatcaag

318

<210> 158

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 158

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 159

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 159

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile His Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 160

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 160

caagtccaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac ctggagcatc cgtgaaagtg

60

tcttgcaaag cctccggcta caccttcacc aactacaacc tccattgggt cagacaggcc

120

cccggacaag gactcgaatg gatgggagcg atctacccgg gaaactacga caccagctac

180

aaccagaagt tcaagggccg cgtgactatg accgccgata agagcacctc caccgcctac

240

atggaactgt cctcgctgag gtccgaggac actgcggtgt actactgcgc ccgcgtggac

300

ttcggacact cacggtattg gtacttcgac gtctggggac agggcactac cgtgaccgtg

360

tcgagcggcg gaggaggttc gggagggggc ggatcagggg gcggcggcag cggtggaggg

420

ggctcggata tccagctgac tcagtccccg tcattcctgt ccgcctccgt gggagacaga

480

gtgaccatca cctgtcgggc cacttcctcc gtgtcaagca tgaactggta tcagcagaag

540

cccgggaagg ccccaaagcc gctgattcac gcgacgtcca acctggcttc cggcgtgccg

600

agccggttct ccggctcggg gagcgggact gagtacaccc tgactatttc ctcgcttcaa

660

cccgaggact ttgctaccta ctactgccaa cagtggacct tcaatcctcc gacattcgga

720

cagggtacca agttggaaat caag

744

<210> 161

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 161

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile His Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 162

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 162

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga aacctggagc atccgtgaaa

120

gtgtcttgca aagcctccgg ctacaccttc accaactaca acctccattg ggtcagacag

180

gcccccggac aaggactcga atggatggga gcgatctacc cgggaaacta cgacaccagc

240

tacaaccaga agttcaaggg ccgcgtgact atgaccgccg ataagagcac ctccaccgcc

300

tacatggaac tgtcctcgct gaggtccgag gacactgcgg tgtactactg cgcccgcgtg

360

gacttcggac actcacggta ttggtacttc gacgtctggg gacagggcac taccgtgacc

420

gtgtcgagcg gcggaggagg ttcgggaggg ggcggatcag ggggcggcgg cagcggtgga

480

gggggctcgg atatccagct gactcagtcc ccgtcattcc tgtccgcctc cgtgggagac

540

agagtgacca tcacctgtcg ggccacttcc tccgtgtcaa gcatgaactg gtatcagcag

600

aagcccggga aggccccaaa gccgctgatt cacgcgacgt ccaacctggc ttccggcgtg

660

ccgagccggt tctccggctc ggggagcggg actgagtaca ccctgactat ttcctcgctt

720

caacccgagg actttgctac ctactactgc caacagtgga ccttcaatcc tccgacattc

780

ggacagggta ccaagttgga aatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 163

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 163

Asn Tyr Asn Leu His

1 5

<210> 164

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 164

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 165

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 165

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 166

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 166

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 167

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 167

Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp

1 5

<210> 168

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 168

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 169

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 169

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn

1 5

<210> 170

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 170

Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr

1 5

<210> 171

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 171

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 172

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 172

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 173

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 173

caagtccaac tcgtccagtc gggagcagaa gtcaagaagc ccggatcatc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcaggcta cacctttacc aactacaact tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagg gcctggagtg gatgggcgcc atctaccccg gaaactatga cacctcgtac

180

aaccagaagt tcaagggtcg cgtgactatc acggctgaca agtccactag caccgcgtac

240

atggaacttt cctcactgcg gtccgaggat actgcggtgt actactgcgc ccgggtggac

300

ttcggacact cgagatattg gtacttcgat gtctggggac aggggaccac cgtgactgtg

360

tcctcc

366

<210> 174

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 174

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 175

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 175

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 176

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 176

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 177

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 177

Thr Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 178

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 178

Ala Thr Ser

1

<210> 179

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 179

Trp Thr Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 180

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 180

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 181

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 181

Ala Thr Ser

1

<210> 182

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 182

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 183

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 183

Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile

35 40 45

Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 184

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 184

gaaattgtgc tgacccagtc tcccgcaacc ctgtccctga gccctggaga gcgcgccacc

60

ctgtcctgcc gggccacatc ctccgtgtcg tccatgaact ggtaccagca gaagcccggc

120

caagccccga ggcctctgat tcatgctacc tcaaatctgg ccagcggaat cccggcgcgc

180

ttctccggct cgggcagcgg tactgactac actctcacca tctcgtccct cgaaccggag

240

gacgccgccg tctactactg tcagcagtgg accttcaacc cacctacttt cggacaaggg

300

accaagctgg agatcaag

318

<210> 185

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 185

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

1 5 10 15

Gly Gly Ser

<210> 186

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 186

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Ile

130 135 140

Arg Met Thr Gln Ser Pro Phe Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

165 170 175

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Ala Lys Ala Pro Lys Leu Phe Ile Tyr Asn

180 185 190

Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp

210 215 220

Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr Phe

225 230 235 240

Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 187

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 187

caagtccaac tcgtccagtc gggagcagaa gtcaagaagc ccggatcatc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcaggcta cacctttacc aactacaact tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagg gcctggagtg gatgggcgcc atctaccccg gaaactatga cacctcgtac

180

aaccagaagt tcaagggtcg cgtgactatc acggctgaca agtccactag caccgcgtac

240

atggaacttt cctcactgcg gtccgaggat actgcggtgt actactgcgc ccgggtggac

300

ttcggacact cgagatattg gtacttcgat gtctggggac aggggaccac cgtgactgtg

360

tcctccgggg gcggtggcag cgggggaggc ggaagcggcg gagggggttc cgggggtgga

420

ggaagcgaaa ttgtgctgac ccagtctccc gcaaccctgt ccctgagccc tggagagcgc

480

gccaccctgt cctgccgggc cacatcctcc gtgtcgtcca tgaactggta ccagcagaag

540

cccggccaag ccccgaggcc tctgattcat gctacctcaa atctggccag cggaatcccg

600

gcgcgcttct ccggctcggg cagcggtact gactacactc tcaccatctc gtccctcgaa

660

ccggaggacg ccgccgtcta ctactgtcag cagtggacct tcaacccacc tactttcgga

720

caagggacca agctggagat caag

744

<210> 188

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 188

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu

165 170 175

Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro

195 200 205

Leu Ile His Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Glu Pro Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 189

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 189

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca gtcgggagca gaagtcaaga agcccggatc atccgtgaaa

120

gtgtcctgca aagcctcagg ctacaccttt accaactaca acttgcactg ggtcagacag

180

gccccgggac agggcctgga gtggatgggc gccatctacc ccggaaacta tgacacctcg

240

tacaaccaga agttcaaggg tcgcgtgact atcacggctg acaagtccac tagcaccgcg

300

tacatggaac tttcctcact gcggtccgag gatactgcgg tgtactactg cgcccgggtg

360

gacttcggac actcgagata ttggtacttc gatgtctggg gacaggggac caccgtgact

420

gtgtcctccg ggggcggtgg cagcggggga ggcggaagcg gcggaggggg ttccgggggt

480

ggaggaagcg aaattgtgct gacccagtct cccgcaaccc tgtccctgag ccctggagag

540

cgcgccaccc tgtcctgccg ggccacatcc tccgtgtcgt ccatgaactg gtaccagcag

600

aagcccggcc aagccccgag gcctctgatt catgctacct caaatctggc cagcggaatc

660

ccggcgcgct tctccggctc gggcagcggt actgactaca ctctcaccat ctcgtccctc

720

gaaccggagg acgccgccgt ctactactgt cagcagtgga ccttcaaccc acctactttc

780

ggacaaggga ccaagctgga gatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 190

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 190

Asn Tyr Asn Leu His

1 5

<210> 191

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 191

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 192

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 192

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 193

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 193

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 194

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 194

Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp

1 5

<210> 195

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 195

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 196

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 196

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn

1 5

<210> 197

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 197

Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr

1 5

<210> 198

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 198

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 199

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 199

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 200

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 200

caagtccaac tcgtccagtc gggagcagaa gtcaagaagc ccggatcatc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcaggcta cacctttacc aactacaact tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagg gcctggagtg gatgggcgcc atctaccccg gaaactatga cacctcgtac

180

aaccagaagt tcaagggtcg cgtgactatc acggctgaca agtccactag caccgcgtac

240

atggaacttt cctcactgcg gtccgaggat actgcggtgt actactgcgc ccgggtggac

300

ttcggacact cgagatattg gtacttcgat gtctggggac aggggaccac cgtgactgtg

360

tcctcc

366

<210> 201

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 201

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 202

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 202

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 203

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 203

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 204

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 204

Thr Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 205

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 205

Ala Thr Ser

1

<210> 206

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 206

Trp Thr Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 207

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 207

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 208

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 208

Ala Thr Ser

1

<210> 209

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 209

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 210

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 210

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile His

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 211

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 211

gaaattgtgc tgacccagtc tcccgcaacc ctgtccctga gccctggaga gcgcgccacc

60

ctgtcctgcc gggccacatc ctccgtgtcg tccatgaact ggtaccagca gaagcccggc

120

caagccccga ggcctctgat tcatgctacc tcaaatctgg ccagcggaat cccggcgcgc

180

ttctccggct cgggcagcgg tactgactac actctcacca tctcgtccct cgaaccggag

240

gacgccgccg tctactactg tcagcagtgg accttcaacc cacctacttt cggacaaggg

300

accaagctgg agatcaag

318

<210> 212

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 212

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 213

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 213

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg

145 150 155 160

Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile His Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Ala

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 214

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 214

caagtccaac tcgtccaatc cggcgcagaa gtcaagaaac caggatcgtc cgtgaaagtg

60

tcctgcaagg cgtccgggta caccttcact aattacaacc tccactgggt cagacaggcc

120

ccaggacagg gcctggaatg gatgggcgcc atctaccctg gaaactacga tacctcgtac

180

aaccagaagt tcaagggccg cgtgactatt accgccgaca agagcacctc caccgcctat

240

atggaactgt cgtccctgcg gtccgaggac actgccgtgt actactgtgc aagggtggac

300

ttcggtcact cccggtattg gtacttcgac gtctggggac aggggaccac tgtgaccgtg

360

tcgtcgggag gcggtggaag cggcggtggc ggaagcggag gcggcggatc agggggcgga

420

ggaagcgaca ttcagcttac ccagtcaccg tccttcctga gcgcctccgt gggagatcgc

480

gtgaccatca catgccgcgc cacttcctcg gtgtcctcca tgaactggta ccagcagaag

540

cccggaaagg ctcctaagcc tctgatccat gcgacctcca acttggcttc cggggtgccg

600

tcacggttca gcggcagcgg ttcaggaact gagtacaccc tgactattag ctctctccaa

660

cccgaggact tcgccaccta ctactgccag cagtggacct tcaacccgcc cacgtttggg

720

cagggtacca agctggagat caag

744

<210> 215

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 215

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile His Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 216

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 216

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca atccggcgca gaagtcaaga aaccaggatc gtccgtgaaa

120

gtgtcctgca aggcgtccgg gtacaccttc actaattaca acctccactg ggtcagacag

180

gccccaggac agggcctgga atggatgggc gccatctacc ctggaaacta cgatacctcg

240

tacaaccaga agttcaaggg ccgcgtgact attaccgccg acaagagcac ctccaccgcc

300

tatatggaac tgtcgtccct gcggtccgag gacactgccg tgtactactg tgcaagggtg

360

gacttcggtc actcccggta ttggtacttc gacgtctggg gacaggggac cactgtgacc

420

gtgtcgtcgg gaggcggtgg aagcggcggt ggcggaagcg gaggcggcgg atcagggggc

480

ggaggaagcg acattcagct tacccagtca ccgtccttcc tgagcgcctc cgtgggagat

540

cgcgtgacca tcacatgccg cgccacttcc tcggtgtcct ccatgaactg gtaccagcag

600

aagcccggaa aggctcctaa gcctctgatc catgcgacct ccaacttggc ttccggggtg

660

ccgtcacggt tcagcggcag cggttcagga actgagtaca ccctgactat tagctctctc

720

caacccgagg acttcgccac ctactactgc cagcagtgga ccttcaaccc gcccacgttt

780

gggcagggta ccaagctgga gatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 217

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 217

Ser Tyr Asn Met His

1 5

<210> 218

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 218

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 219

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 219

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 220

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 220

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 221

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 221

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 222

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 222

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 223

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 223

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn

1 5

<210> 224

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 224

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 225

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 225

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 226

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 226

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 227

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 227

caagtgcagc tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac ccggtgcttc agtgaaagtg

60

tcctgcaagg cctccggtta caccttcacc tcctacaaca tgcactgggt ccgccaagcc

120

ccgggccagg gactcgaatg gatgggagcc atctaccctg gcaacgggga cacctcatac

180

aaccctaagt tcaagggcag agtgaccatg actgcggaca agtccactag aacagcgtac

240

atggagctga gcagcctgcg gtccgaggat actgccgtgt actactgcgc ccgctcctac

300

ttctacggaa gctcgtcgtg gtacttcgat gtctggggac agggcaccac tgtgactgtg

360

tcctcc

366

<210> 228

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 228

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 229

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 229

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 230

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 230

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 231

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 231

Ser Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 232

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 232

Ala Thr Ser

1

<210> 233

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 233

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 234

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 234

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 235

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 235

Ala Thr Ser

1

<210> 236

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 236

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 237

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 237

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile Phe

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 238

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 238

gaaattgtgc tgactcagag ccccgccacc ctgagcttgt cccccgggga aagggcaacg

60

ctgtcatgcc gcgcctcgtc atccgtgtcc tccatgcatt ggtaccagca gaagccggga

120

caggcccctc ggccgctgat cttcgccacc tccaatctcg cttccggcat tccggcccgg

180

ttctcgggaa gcgggtcggg gaccgactat accctgacca tctctagcct tgaacctgag

240

gacgccgcgg tgtactattg tcaacagtgg atctttaacc ccccaacctt cggtggaggc

300

accaaagtgg agattaag

318

<210> 239

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 239

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 240

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 240

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg

145 150 155 160

Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile Phe Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Ala

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 241

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 241

caagtgcagc tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac ccggtgcttc agtgaaagtg

60

tcctgcaagg cctccggtta caccttcacc tcctacaaca tgcactgggt ccgccaagcc

120

ccgggccagg gactcgaatg gatgggagcc atctaccctg gcaacgggga cacctcatac

180

aaccctaagt tcaagggcag agtgaccatg actgcggaca agtccactag aacagcgtac

240

atggagctga gcagcctgcg gtccgaggat actgccgtgt actactgcgc ccgctcctac

300

ttctacggaa gctcgtcgtg gtacttcgat gtctggggac agggcaccac tgtgactgtg

360

tcctccggtg gcggaggctc gggcggaggc ggaagcggcg gcgggggatc gggaggagga

420

gggtccgaaa ttgtgctgac tcagagcccc gccaccctga gcttgtcccc cggggaaagg

480

gcaacgctgt catgccgcgc ctcgtcatcc gtgtcctcca tgcattggta ccagcagaag

540

ccgggacagg cccctcggcc gctgatcttc gccacctcca atctcgcttc cggcattccg

600

gcccggttct cgggaagcgg gtcggggacc gactataccc tgaccatctc tagccttgaa

660

cctgaggacg ccgcggtgta ctattgtcaa cagtggatct ttaacccccc aaccttcggt

720

ggaggcacca aagtggagat taag

744

<210> 242

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 242

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Pro Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Arg Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu

165 170 175

Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro

195 200 205

Leu Ile Phe Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Glu Pro Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 243

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 243

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtgc agctcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga aacccggtgc ttcagtgaaa

120

gtgtcctgca aggcctccgg ttacaccttc acctcctaca acatgcactg ggtccgccaa

180

gccccgggcc agggactcga atggatggga gccatctacc ctggcaacgg ggacacctca

240

tacaacccta agttcaaggg cagagtgacc atgactgcgg acaagtccac tagaacagcg

300

tacatggagc tgagcagcct gcggtccgag gatactgccg tgtactactg cgcccgctcc

360

tacttctacg gaagctcgtc gtggtacttc gatgtctggg gacagggcac cactgtgact

420

gtgtcctccg gtggcggagg ctcgggcgga ggcggaagcg gcggcggggg atcgggagga

480

ggagggtccg aaattgtgct gactcagagc cccgccaccc tgagcttgtc ccccggggaa

540

agggcaacgc tgtcatgccg cgcctcgtca tccgtgtcct ccatgcattg gtaccagcag

600

aagccgggac aggcccctcg gccgctgatc ttcgccacct ccaatctcgc ttccggcatt

660

ccggcccggt tctcgggaag cgggtcgggg accgactata ccctgaccat ctctagcctt

720

gaacctgagg acgccgcggt gtactattgt caacagtgga tctttaaccc cccaaccttc

780

ggtggaggca ccaaagtgga gattaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 244

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 244

Ser Tyr Asn Met His

1 5

<210> 245

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 245

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 246

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 246

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 247

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 247

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 248

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 248

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 249

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 249

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 250

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 250

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn

1 5

<210> 251

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 251

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 252

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 252

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 253

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 253

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 254

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 254

caagtccaac tcgtccagtc aggagcagaa gtcaagaaac ctggagcttc cgtgaaagtg

60

tcgtgcaagg cctccggcta caccttcacc tcttacaaca tgcactgggt cagacaggcc

120

cctggtcaag gactggaatg gatgggagcg atctacccgg gcaacggaga cacttcgtac

180

aaccccaagt tcaagggacg ggtcactatg accgccgata agagcacgcg caccgcgtac

240

atggaactga gcagcctgcg ctccgaggac actgccgtgt attactgcgc gaggagctac

300

ttctacggat catcgtcgtg gtacttcgac gtctggggcc agggcaccac cgtgaccgtg

360

tcatcc

366

<210> 255

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 255

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 256

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 256

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 257

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 257

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 258

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 258

Ser Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 259

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 259

Ala Thr Ser

1

<210> 260

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 260

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 261

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 261

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 262

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 262

Ala Thr Ser

1

<210> 263

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 263

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 264

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 264

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Phe

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 265

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 265

gatattcagc tgacccagag cccgtcattc ctgtccgcct ccgtgggaga cagagtgacc

60

atcacttgtc gggccagctc ctcggtgtcc tccatgcatt ggtatcagca gaagcctggg

120

aaggctccca agcccctcat cttcgccaca tcaaatcttg cctccggggt gccaagccgg

180

ttctccggga gcggctccgg tactgagtac actctgacca tttcctcctt gcaacccgag

240

gactttgcca cctactactg ccagcagtgg atctttaacc cgccgacctt cggaggagga

300

accaaagtgg agatcaag

318

<210> 266

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 266

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 267

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 267

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Phe Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 268

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 268

caagtccaac tcgtccagtc aggagcagaa gtcaagaaac ctggagcttc cgtgaaagtg

60

tcgtgcaagg cctccggcta caccttcacc tcttacaaca tgcactgggt cagacaggcc

120

cctggtcaag gactggaatg gatgggagcg atctacccgg gcaacggaga cacttcgtac

180

aaccccaagt tcaagggacg ggtcactatg accgccgata agagcacgcg caccgcgtac

240

atggaactga gcagcctgcg ctccgaggac actgccgtgt attactgcgc gaggagctac

300

ttctacggat catcgtcgtg gtacttcgac gtctggggcc agggcaccac cgtgaccgtg

360

tcatccggtg gcggaggatc ggggggcgga ggaagcggcg gggggggctc cggcggtgga

420

ggctcggata ttcagctgac ccagagcccg tcattcctgt ccgcctccgt gggagacaga

480

gtgaccatca cttgtcgggc cagctcctcg gtgtcctcca tgcattggta tcagcagaag

540

cctgggaagg ctcccaagcc cctcatcttc gccacatcaa atcttgcctc cggggtgcca

600

agccggttct ccgggagcgg ctccggtact gagtacactc tgaccatttc ctccttgcaa

660

cccgaggact ttgccaccta ctactgccag cagtggatct ttaacccgcc gaccttcgga

720

ggaggaacca aagtggagat caag

744

<210> 269

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 269

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Pro Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Arg Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile Phe Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 270

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 270

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca gtcaggagca gaagtcaaga aacctggagc ttccgtgaaa

120

gtgtcgtgca aggcctccgg ctacaccttc acctcttaca acatgcactg ggtcagacag

180

gcccctggtc aaggactgga atggatggga gcgatctacc cgggcaacgg agacacttcg

240

tacaacccca agttcaaggg acgggtcact atgaccgccg ataagagcac gcgcaccgcg

300

tacatggaac tgagcagcct gcgctccgag gacactgccg tgtattactg cgcgaggagc

360

tacttctacg gatcatcgtc gtggtacttc gacgtctggg gccagggcac caccgtgacc

420

gtgtcatccg gtggcggagg atcggggggc ggaggaagcg gcgggggggg ctccggcggt

480

ggaggctcgg atattcagct gacccagagc ccgtcattcc tgtccgcctc cgtgggagac

540

agagtgacca tcacttgtcg ggccagctcc tcggtgtcct ccatgcattg gtatcagcag

600

aagcctggga aggctcccaa gcccctcatc ttcgccacat caaatcttgc ctccggggtg

660

ccaagccggt tctccgggag cggctccggt actgagtaca ctctgaccat ttcctccttg

720

caacccgagg actttgccac ctactactgc cagcagtgga tctttaaccc gccgaccttc

780

ggaggaggaa ccaaagtgga gatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 271

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 271

Ser Tyr Asn Met His

1 5

<210> 272

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 272

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 273

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 273

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 274

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 274

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 275

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 275

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 276

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 276

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 277

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 277

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn

1 5

<210> 278

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 278

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 279

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 279

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 280

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 280

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 281

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 281

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaagc ctggttcatc ggtgaaagtg

60

tcctgcaaag cgtcgggcta caccttcacc tcgtacaaca tgcactgggt ccgccaggcc

120

cccggacaag gactggaatg gatgggtgct atctaccccg gaaacggaga taccagctac

180

aaccccaagt tcaagggacg cgtgaccatt actgccgaca agtccacaag aaccgcctac

240

atggaactgt ccagcctgag atccgaggac actgcggtgt actactgtgc gaggtcctac

300

ttctacgggt cctcctcttg gtacttcgac gtctggggac agggcactac tgtgaccgtg

360

tccagc

366

<210> 282

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 282

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 283

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 283

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 284

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 284

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 285

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 285

Ser Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 286

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 286

Ala Thr Ser

1

<210> 287

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 287

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 288

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 288

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 289

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 289

Ala Thr Ser

1

<210> 290

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 290

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 291

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 291

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile Phe

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 292

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 292

gagatcgtgc tgacgcagtc gccggccacc ctgagccttt caccgggaga acgcgccact

60

ctgtcatgcc gggccagcag ctccgtgtcc tccatgcatt ggtaccagca gaagccgggg

120

caggccccgc ggcctctcat cttcgccacc tccaatctgg cctccggcat ccctgctcgg

180

tttagcggaa gcggcagcgg aactgactat accttgacca tctcctcgct ggaaccagag

240

gatgcagccg tgtactattg ccagcagtgg atcttcaacc cgccaacctt cggcggcggc

300

accaaggtcg agattaag

318

<210> 293

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 293

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 294

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 294

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg

145 150 155 160

Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro Leu Ile Phe Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Ala

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 295

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 295

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaagc ctggttcatc ggtgaaagtg

60

tcctgcaaag cgtcgggcta caccttcacc tcgtacaaca tgcactgggt ccgccaggcc

120

cccggacaag gactggaatg gatgggtgct atctaccccg gaaacggaga taccagctac

180

aaccccaagt tcaagggacg cgtgaccatt actgccgaca agtccacaag aaccgcctac

240

atggaactgt ccagcctgag atccgaggac actgcggtgt actactgtgc gaggtcctac

300

ttctacgggt cctcctcttg gtacttcgac gtctggggac agggcactac tgtgaccgtg

360

tccagcgggg gaggcggtag cggggggggt ggatcgggcg gcggcggatc aggaggagga

420

gggtccgaga tcgtgctgac gcagtcgccg gccaccctga gcctttcacc gggagaacgc

480

gccactctgt catgccgggc cagcagctcc gtgtcctcca tgcattggta ccagcagaag

540

ccggggcagg ccccgcggcc tctcatcttc gccacctcca atctggcctc cggcatccct

600

gctcggttta gcggaagcgg cagcggaact gactatacct tgaccatctc ctcgctggaa

660

ccagaggatg cagccgtgta ctattgccag cagtggatct tcaacccgcc aaccttcggc

720

ggcggcacca aggtcgagat taag

744

<210> 296

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 296

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Pro Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Arg Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu

165 170 175

Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Pro

195 200 205

Leu Ile Phe Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Glu Pro Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 297

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 297

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtgc aactcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga agcctggttc atcggtgaaa

120

gtgtcctgca aagcgtcggg ctacaccttc acctcgtaca acatgcactg ggtccgccag

180

gcccccggac aaggactgga atggatgggt gctatctacc ccggaaacgg agataccagc

240

tacaacccca agttcaaggg acgcgtgacc attactgccg acaagtccac aagaaccgcc

300

tacatggaac tgtccagcct gagatccgag gacactgcgg tgtactactg tgcgaggtcc

360

tacttctacg ggtcctcctc ttggtacttc gacgtctggg gacagggcac tactgtgacc

420

gtgtccagcg ggggaggcgg tagcgggggg ggtggatcgg gcggcggcgg atcaggagga

480

ggagggtccg agatcgtgct gacgcagtcg ccggccaccc tgagcctttc accgggagaa

540

cgcgccactc tgtcatgccg ggccagcagc tccgtgtcct ccatgcattg gtaccagcag

600

aagccggggc aggccccgcg gcctctcatc ttcgccacct ccaatctggc ctccggcatc

660

cctgctcggt ttagcggaag cggcagcgga actgactata ccttgaccat ctcctcgctg

720

gaaccagagg atgcagccgt gtactattgc cagcagtgga tcttcaaccc gccaaccttc

780

ggcggcggca ccaaggtcga gattaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 298

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 298

Ser Tyr Asn Met His

1 5

<210> 299

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 299

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 300

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 300

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 301

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 301

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 302

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 302

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 303

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 303

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 304

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 304

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn

1 5

<210> 305

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 305

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 306

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 306

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 307

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 307

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 308

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 308

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaagc caggttcctc ggtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcgggtta caccttcacc tcgtacaata tgcactgggt ccgccaagct

120

ccgggacaag gcctggaatg gatgggagcg atctaccccg gaaacggcga cacgtcctac

180

aacccgaagt tcaagggaag agtgaccatc accgccgaca agtccacccg caccgcgtac

240

atggagctta gcagcctgcg gagcgaggac actgccgtgt attactgcgc ccggtcctac

300

ttctatggat catcctcgtg gtacttcgat gtctggggcc aggggaccac cgtgaccgtg

360

tccagc

366

<210> 309

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 309

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 310

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 310

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 311

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 311

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 312

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 312

Ser Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 313

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 313

Ala Thr Ser

1

<210> 314

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 314

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 315

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 315

Ser Ser Val Ser Ser

1 5

<210> 316

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 316

Ala Thr Ser

1

<210> 317

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 317

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 318

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 318

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Phe

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 319

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 319

gatatccagc tgacccagag cccttccttc ctgtccgctt ccgtgggaga cagagtcact

60

attacttgtc gggcctcctc atccgtgtca tccatgcact ggtaccagca gaagccggga

120

aaggccccaa agcccttgat ctttgccact tccaacctgg catccggcgt gccctcgagg

180

ttctccggga gcggttcagg gaccgagtac actctgacca ttagcagcct ccagcctgag

240

gactttgcca cctactactg ccagcagtgg attttcaacc cgcctacatt cggagggggc

300

actaaggtcg aaatcaag

318

<210> 320

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 320

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 321

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 321

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Phe Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

245

<210> 322

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 322

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaagc caggttcctc ggtgaaagtg

60

tcctgcaaag cctcgggtta caccttcacc tcgtacaata tgcactgggt ccgccaagct

120

ccgggacaag gcctggaatg gatgggagcg atctaccccg gaaacggcga cacgtcctac

180

aacccgaagt tcaagggaag agtgaccatc accgccgaca agtccacccg caccgcgtac

240

atggagctta gcagcctgcg gagcgaggac actgccgtgt attactgcgc ccggtcctac

300

ttctatggat catcctcgtg gtacttcgat gtctggggcc aggggaccac cgtgaccgtg

360

tccagcggtg gcggaggcag cggcggagga gggtctggag gaggcggctc ggggggaggg

420

ggctcggata tccagctgac ccagagccct tccttcctgt ccgcttccgt gggagacaga

480

gtcactatta cttgtcgggc ctcctcatcc gtgtcatcca tgcactggta ccagcagaag

540

ccgggaaagg ccccaaagcc cttgatcttt gccacttcca acctggcatc cggcgtgccc

600

tcgaggttct ccgggagcgg ttcagggacc gagtacactc tgaccattag cagcctccag

660

cctgaggact ttgccaccta ctactgccag cagtggattt tcaacccgcc tacattcgga

720

gggggcacta aggtcgaaat caag

744

<210> 323

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 323

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Asn Pro Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Arg Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Ser Ser Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile Phe Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 324

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 324

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtgc aactcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga agccaggttc ctcggtgaaa

120

gtgtcctgca aagcctcggg ttacaccttc acctcgtaca atatgcactg ggtccgccaa

180

gctccgggac aaggcctgga atggatggga gcgatctacc ccggaaacgg cgacacgtcc

240

tacaacccga agttcaaggg aagagtgacc atcaccgccg acaagtccac ccgcaccgcg

300

tacatggagc ttagcagcct gcggagcgag gacactgccg tgtattactg cgcccggtcc

360

tacttctatg gatcatcctc gtggtacttc gatgtctggg gccaggggac caccgtgacc

420

gtgtccagcg gtggcggagg cagcggcgga ggagggtctg gaggaggcgg ctcgggggga

480

gggggctcgg atatccagct gacccagagc ccttccttcc tgtccgcttc cgtgggagac

540

agagtcacta ttacttgtcg ggcctcctca tccgtgtcat ccatgcactg gtaccagcag

600

aagccgggaa aggccccaaa gcccttgatc tttgccactt ccaacctggc atccggcgtg

660

ccctcgaggt tctccgggag cggttcaggg accgagtaca ctctgaccat tagcagcctc

720

cagcctgagg actttgccac ctactactgc cagcagtgga ttttcaaccc gcctacattc

780

ggagggggca ctaaggtcga aatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 325

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 325

Arg Tyr Asn Met His

1 5

<210> 326

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 326

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 327

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 327

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 328

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 328

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

1 5

<210> 329

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 329

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 330

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 330

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 331

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 331

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn

1 5

<210> 332

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 332

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 333

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 333

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 334

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 334

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 335

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 335

caagtccaac tcgtccagtc aggagcagaa gtcaagaaac caggagcatc cgtgaaagtg

60

tcgtgcaaag cctctggcta caccttcacc cggtacaaca tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagc ggctcgagtg gatgggtgcc atctaccccg gcaacgggga cacctcctac

180

tcccaaaagt tcaagggtcg cgtgaccatc acggcggata agtcggccag cactgcgtac

240

atggaattgt catccctgcg ctccgaggat accgccgtgt attactgcgc gcggtccttc

300

ttctacggct cctccgattg gtacttcgac gtctggggac agggaactac cgtgaccgtg

360

tcctcc

366

<210> 336

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 336

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 337

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 337

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 338

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 338

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 339

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 339

Ser Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 340

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 340

Ala Thr Ser

1

<210> 341

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 341

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 342

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 342

Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 343

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 343

Ala Thr Ser

1

<210> 344

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 344

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 345

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 345

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 346

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 346

gaaatcgtgc tgactcagtc gccggacttc caaagcgtga ccccaaagga gaaggtcacc

60

atcacctgta gagcctcatc gtccgtgaac aatatgcact ggtaccagca gaagccggac

120

cagtccccta agcccctgat ctacgccact tccaacctgg cctccggcgt gccgtcgagg

180

ttcagcggct cgggcagcgg gaccgactac accctgacca tcaacagcct tgaagctgag

240

gacgccgcta cctactactg ccagcagtgg attttcaacc ctcccacatt tggacagggc

300

actaagctgg agattaag

318

<210> 347

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 347

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 348

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 348

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys Glu Lys

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 349

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 349

caagtccaac tcgtccagtc aggagcagaa gtcaagaaac caggagcatc cgtgaaagtg

60

tcgtgcaaag cctctggcta caccttcacc cggtacaaca tgcactgggt cagacaggcc

120

ccgggacagc ggctcgagtg gatgggtgcc atctaccccg gcaacgggga cacctcctac

180

tcccaaaagt tcaagggtcg cgtgaccatc acggcggata agtcggccag cactgcgtac

240

atggaattgt catccctgcg ctccgaggat accgccgtgt attactgcgc gcggtccttc

300

ttctacggct cctccgattg gtacttcgac gtctggggac agggaactac cgtgaccgtg

360

tcctccgggg gtggcgggag cggagggggc ggaagcgggg gtggaggatc aggaggcgga

420

ggctccgaaa tcgtgctgac tcagtcgccg gacttccaaa gcgtgacccc aaaggagaag

480

gtcaccatca cctgtagagc ctcatcgtcc gtgaacaata tgcactggta ccagcagaag

540

ccggaccagt cccctaagcc cctgatctac gccacttcca acctggcctc cggcgtgccg

600

tcgaggttca gcggctcggg cagcgggacc gactacaccc tgaccatcaa cagccttgaa

660

gctgaggacg ccgctaccta ctactgccag cagtggattt tcaaccctcc cacatttgga

720

cagggcacta agctggagat taag

744

<210> 350

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 350

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Arg Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Ser Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Ala Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val

165 170 175

Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Asn Asn Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu

225 230 235 240

Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 351

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 351

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca gtcaggagca gaagtcaaga aaccaggagc atccgtgaaa

120

gtgtcgtgca aagcctctgg ctacaccttc acccggtaca acatgcactg ggtcagacag

180

gccccgggac agcggctcga gtggatgggt gccatctacc ccggcaacgg ggacacctcc

240

tactcccaaa agttcaaggg tcgcgtgacc atcacggcgg ataagtcggc cagcactgcg

300

tacatggaat tgtcatccct gcgctccgag gataccgccg tgtattactg cgcgcggtcc

360

ttcttctacg gctcctccga ttggtacttc gacgtctggg gacagggaac taccgtgacc

420

gtgtcctccg ggggtggcgg gagcggaggg ggcggaagcg ggggtggagg atcaggaggc

480

ggaggctccg aaatcgtgct gactcagtcg ccggacttcc aaagcgtgac cccaaaggag

540

aaggtcacca tcacctgtag agcctcatcg tccgtgaaca atatgcactg gtaccagcag

600

aagccggacc agtcccctaa gcccctgatc tacgccactt ccaacctggc ctccggcgtg

660

ccgtcgaggt tcagcggctc gggcagcggg accgactaca ccctgaccat caacagcctt

720

gaagctgagg acgccgctac ctactactgc cagcagtgga ttttcaaccc tcccacattt

780

ggacagggca ctaagctgga gattaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 352

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 352

Arg Tyr Asn Met His

1 5

<210> 353

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 353

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 354

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 354

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 355

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 355

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

1 5

<210> 356

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 356

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 357

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 357

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 358

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 358

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn

1 5

<210> 359

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 359

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 360

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 360

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 361

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 361

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 362

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 362

caagtgcaac tcgtccaatc cggcgcggaa gtcaaaaagc ctggagcctc cgtcaaagtg

60

tcctgcaagg cctccggtta cactttcact cgctacaaca tgcattgggt gcggcaggcc

120

ccgggacagc gcctggaatg gatgggcgca atctaccccg gcaacggaga cacctcctat

180

tcccaaaagt tcaagggaag ggtcacaatc acggccgaca agagcgcctc aactgcctac

240

atggagctga gcagcctcag atccgaagat accgcggtgt actactgcgc ccggagcttc

300

ttctacggtt cgtctgattg gtactttgac gtctggggcc agggaaccac cgtgaccgtg

360

tcgtcc

366

<210> 363

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 363

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 364

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 364

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 365

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 365

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 366

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 366

Ser Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 367

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 367

Ala Thr Ser

1

<210> 368

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 368

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 369

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 369

Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 370

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 370

Ala Thr Ser

1

<210> 371

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 371

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 372

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 372

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 373

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 373

gacatccagc ttacccagtc gccatcattc ctgtccgcat cagtgggtga tcgcgtgacc

60

attacctgtc gggcgtcctc ctccgtgaac aacatgcact ggtaccagca gaagccgggg

120

aaggctccca agcctctgat ctacgccact agcaatttgg ccagcggcgt gccttcgaga

180

ttctcggggt cgggctcagg aaccgagtat accctgacca tttcctccct ccaaccggag

240

gactttgcta cttactactg ccagcagtgg attttcaacc ccccgacttt cggacagggc

300

accaagctgg aaatcaag

318

<210> 374

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 374

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 375

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 375

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 376

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 376

caagtgcaac tcgtccaatc cggcgcggaa gtcaaaaagc ctggagcctc cgtcaaagtg

60

tcctgcaagg cctccggtta cactttcact cgctacaaca tgcattgggt gcggcaggcc

120

ccgggacagc gcctggaatg gatgggcgca atctaccccg gcaacggaga cacctcctat

180

tcccaaaagt tcaagggaag ggtcacaatc acggccgaca agagcgcctc aactgcctac

240

atggagctga gcagcctcag atccgaagat accgcggtgt actactgcgc ccggagcttc

300

ttctacggtt cgtctgattg gtactttgac gtctggggcc agggaaccac cgtgaccgtg

360

tcgtccggtg gcggagggag cggtggagga ggctccgggg gaggaggcag cggcggggga

420

ggcagcgaca tccagcttac ccagtcgcca tcattcctgt ccgcatcagt gggtgatcgc

480

gtgaccatta cctgtcgggc gtcctcctcc gtgaacaaca tgcactggta ccagcagaag

540

ccggggaagg ctcccaagcc tctgatctac gccactagca atttggccag cggcgtgcct

600

tcgagattct cggggtcggg ctcaggaacc gagtataccc tgaccatttc ctccctccaa

660

ccggaggact ttgctactta ctactgccag cagtggattt tcaacccccc gactttcgga

720

cagggcacca agctggaaat caag

744

<210> 377

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 377

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Arg Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Ser Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Ala Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Asn Asn Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 378

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 378

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtgc aactcgtcca atccggcgcg gaagtcaaaa agcctggagc ctccgtcaaa

120

gtgtcctgca aggcctccgg ttacactttc actcgctaca acatgcattg ggtgcggcag

180

gccccgggac agcgcctgga atggatgggc gcaatctacc ccggcaacgg agacacctcc

240

tattcccaaa agttcaaggg aagggtcaca atcacggccg acaagagcgc ctcaactgcc

300

tacatggagc tgagcagcct cagatccgaa gataccgcgg tgtactactg cgcccggagc

360

ttcttctacg gttcgtctga ttggtacttt gacgtctggg gccagggaac caccgtgacc

420

gtgtcgtccg gtggcggagg gagcggtgga ggaggctccg ggggaggagg cagcggcggg

480

ggaggcagcg acatccagct tacccagtcg ccatcattcc tgtccgcatc agtgggtgat

540

cgcgtgacca ttacctgtcg ggcgtcctcc tccgtgaaca acatgcactg gtaccagcag

600

aagccgggga aggctcccaa gcctctgatc tacgccacta gcaatttggc cagcggcgtg

660

ccttcgagat tctcggggtc gggctcagga accgagtata ccctgaccat ttcctccctc

720

caaccggagg actttgctac ttactactgc cagcagtgga ttttcaaccc cccgactttc

780

ggacagggca ccaagctgga aatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 379

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 379

Arg Tyr Asn Met His

1 5

<210> 380

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 380

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 381

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 381

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 382

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 382

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

1 5

<210> 383

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 383

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 384

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 384

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 385

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 385

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn

1 5

<210> 386

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 386

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 387

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 387

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 388

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 388

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 389

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 389

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaagc ctggttcctc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cgtctggcta caccttcacc cggtacaata tgcactgggt cagacaggcg

120

cccggacagg gcctggagtg gatgggggcc atctaccctg ggaacggcga cactagctac

180

tcccaaaagt tcaagggccg cgtgacgatt accgccgaca agtcaaccag cactgcctat

240

atggagctga gctcgcttcg gagcgaagat accgccgtgt actactgcgc tcggagcttc

300

ttctacgggt cctcggattg gtacttcgac gtctggggcc aggggactac tgtgaccgtg

360

tcctcc

366

<210> 390

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 390

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 391

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 391

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 392

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 392

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 393

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 393

Ser Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 394

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 394

Ala Thr Ser

1

<210> 395

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 395

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 396

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 396

Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 397

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 397

Ala Thr Ser

1

<210> 398

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 398

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 399

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 399

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 400

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 400

gaaatcgtgc tgacccagtc cccggacttt cagtcagtga ctcccaagga gaaggtcacc

60

attacttgtc gcgcctcctc ctcggtgaac aacatgcact ggtaccagca gaagccggac

120

cagtccccga agcccctgat ctatgctacc tccaacttgg cgtccggcgt gccgtcaagg

180

ttcagcggat cgggttccgg gacagactac accctgacta ttaactcact cgaggccgag

240

gatgccgcca cctactactg ccagcagtgg atcttcaacc ctccaacctt cggacaagga

300

accaagctgg aaatcaag

318

<210> 401

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 401

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 402

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 402

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys Glu Lys

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 403

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 403

caagtgcaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaagc ctggttcctc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cgtctggcta caccttcacc cggtacaata tgcactgggt cagacaggcg

120

cccggacagg gcctggagtg gatgggggcc atctaccctg ggaacggcga cactagctac

180

tcccaaaagt tcaagggccg cgtgacgatt accgccgaca agtcaaccag cactgcctat

240

atggagctga gctcgcttcg gagcgaagat accgccgtgt actactgcgc tcggagcttc

300

ttctacgggt cctcggattg gtacttcgac gtctggggcc aggggactac tgtgaccgtg

360

tcctccgggg gaggaggatc gggcggaggc ggttcgggag gcggcggaag cggaggcgga

420

ggttcagaaa tcgtgctgac ccagtccccg gactttcagt cagtgactcc caaggagaag

480

gtcaccatta cttgtcgcgc ctcctcctcg gtgaacaaca tgcactggta ccagcagaag

540

ccggaccagt ccccgaagcc cctgatctat gctacctcca acttggcgtc cggcgtgccg

600

tcaaggttca gcggatcggg ttccgggaca gactacaccc tgactattaa ctcactcgag

660

gccgaggatg ccgccaccta ctactgccag cagtggatct tcaaccctcc aaccttcgga

720

caaggaacca agctggaaat caag

744

<210> 404

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 404

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Ser Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val

165 170 175

Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Asn Asn Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu

225 230 235 240

Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 405

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 405

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtgc aactcgtcca gtccggtgca gaagtcaaga agcctggttc ctccgtgaaa

120

gtgtcctgca aagcgtctgg ctacaccttc acccggtaca atatgcactg ggtcagacag

180

gcgcccggac agggcctgga gtggatgggg gccatctacc ctgggaacgg cgacactagc

240

tactcccaaa agttcaaggg ccgcgtgacg attaccgccg acaagtcaac cagcactgcc

300

tatatggagc tgagctcgct tcggagcgaa gataccgccg tgtactactg cgctcggagc

360

ttcttctacg ggtcctcgga ttggtacttc gacgtctggg gccaggggac tactgtgacc

420

gtgtcctccg ggggaggagg atcgggcgga ggcggttcgg gaggcggcgg aagcggaggc

480

ggaggttcag aaatcgtgct gacccagtcc ccggactttc agtcagtgac tcccaaggag

540

aaggtcacca ttacttgtcg cgcctcctcc tcggtgaaca acatgcactg gtaccagcag

600

aagccggacc agtccccgaa gcccctgatc tatgctacct ccaacttggc gtccggcgtg

660

ccgtcaaggt tcagcggatc gggttccggg acagactaca ccctgactat taactcactc

720

gaggccgagg atgccgccac ctactactgc cagcagtgga tcttcaaccc tccaaccttc

780

ggacaaggaa ccaagctgga aatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 406

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 406

Arg Tyr Asn Met His

1 5

<210> 407

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 407

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 408

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 408

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 409

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 409

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

1 5

<210> 410

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 410

Tyr Pro Gly Asn Gly Asp

1 5

<210> 411

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 411

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 412

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 412

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn

1 5

<210> 413

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 413

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 414

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 414

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 415

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 415

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 416

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 416

caagtccaac tcgtccagtc tggcgcagaa gtcaagaagc ccggaagctc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cgtcgggtta cactttcacc cggtacaaca tgcactgggt cagacaggcc

120

cctggacaag gactggagtg gatgggtgcc atctaccctg gaaacggaga tacctcctac

180

tcccaaaagt tcaaggggag agtgaccatt accgccgaca agtcaacttc caccgcttac

240

atggagctca gctccctgcg gtccgaagat actgcggtgt actattgcgc tcgctcattt

300

ttctacggct catcggattg gtacttcgac gtctggggac agggaactac cgtgaccgtg

360

tcctcg

366

<210> 417

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 417

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 418

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 418

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 419

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 419

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 420

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 420

Ser Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 421

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 421

Ala Thr Ser

1

<210> 422

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 422

Trp Ile Phe Asn Pro Pro

1 5

<210> 423

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 423

Ser Ser Val Asn Asn

1 5

<210> 424

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 424

Ala Thr Ser

1

<210> 425

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 425

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 426

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 426

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 427

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 427

gacatccagc tgactcagtc cccgtccttc ctgtccgcct ccgtggggga ccgcgtgacg

60

attacttgtc gggcctcctc atccgtgaac aacatgcatt ggtaccagca gaagccagga

120

aaggcaccga agccgcttat ctatgccacc tcgaatctgg ccagcggagt gccttcgagg

180

tttagcggct ccggctccgg caccgagtac actttgacca ttagcagcct ccagccggag

240

gacttcgcca catactactg ccagcagtgg atcttcaacc cccccacctt cggccaagga

300

accaagctgg aaatcaag

318

<210> 428

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 428

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 429

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 429

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile

130 135 140

Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg

145 150 155 160

Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ala Thr

180 185 190

Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

195 200 205

Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

210 215 220

Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr Phe Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 430

<211> 744

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 430

caagtccaac tcgtccagtc tggcgcagaa gtcaagaagc ccggaagctc cgtgaaagtg

60

tcctgcaaag cgtcgggtta cactttcacc cggtacaaca tgcactgggt cagacaggcc

120

cctggacaag gactggagtg gatgggtgcc atctaccctg gaaacggaga tacctcctac

180

tcccaaaagt tcaaggggag agtgaccatt accgccgaca agtcaacttc caccgcttac

240

atggagctca gctccctgcg gtccgaagat actgcggtgt actattgcgc tcgctcattt

300

ttctacggct catcggattg gtacttcgac gtctggggac agggaactac cgtgaccgtg

360

tcctcggggg gaggaggatc gggcggaggc ggttcgggag gcggcggaag cggaggcgga

420

ggttcagaca tccagctgac tcagtccccg tccttcctgt ccgcctccgt gggggaccgc

480

gtgacgatta cttgtcgggc ctcctcatcc gtgaacaaca tgcattggta ccagcagaag

540

ccaggaaagg caccgaagcc gcttatctat gccacctcga atctggccag cggagtgcct

600

tcgaggttta gcggctccgg ctccggcacc gagtacactt tgaccattag cagcctccag

660

ccggaggact tcgccacata ctactgccag cagtggatct tcaacccccc caccttcggc

720

caaggaacca agctggaaat caag

744

<210> 431

<211> 492

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 431

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

20 25 30

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

35 40 45

Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser

65 70 75 80

Tyr Ser Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

85 90 95

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

100 105 110

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp

115 120 125

Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala

165 170 175

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val

180 185 190

Asn Asn Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro

195 200 205

Leu Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

210 215 220

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

225 230 235 240

Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn

245 250 255

Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr

260 265 270

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

275 280 285

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

290 295 300

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

305 310 315 320

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

325 330 335

Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro

340 345 350

Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys

355 360 365

Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe

370 375 380

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

385 390 395 400

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

405 410 415

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

420 425 430

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

435 440 445

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

450 455 460

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

465 470 475 480

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 432

<211> 1476

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 432

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccaagtcc aactcgtcca gtctggcgca gaagtcaaga agcccggaag ctccgtgaaa

120

gtgtcctgca aagcgtcggg ttacactttc acccggtaca acatgcactg ggtcagacag

180

gcccctggac aaggactgga gtggatgggt gccatctacc ctggaaacgg agatacctcc

240

tactcccaaa agttcaaggg gagagtgacc attaccgccg acaagtcaac ttccaccgct

300

tacatggagc tcagctccct gcggtccgaa gatactgcgg tgtactattg cgctcgctca

360

tttttctacg gctcatcgga ttggtacttc gacgtctggg gacagggaac taccgtgacc

420

gtgtcctcgg ggggaggggg gagcggcgga gggggctcgg gcggtggagg aagcggaggc

480

ggcggttcgg acatccagct gactcagtcc ccgtccttcc tgtccgcctc cgtgggggac

540

cgcgtgacga ttacttgtcg ggcctcctca tccgtgaaca acatgcattg gtaccagcag

600

aagccaggaa aggcaccgaa gccgcttatc tatgccacct cgaatctggc cagcggagtg

660

ccttcgaggt ttagcggctc cggctccggc accgagtaca ctttgaccat tagcagcctc

720

cagccggagg acttcgccac atactactgc cagcagtgga tcttcaaccc ccccaccttc

780

ggccaaggaa ccaagctgga aatcaagacc actaccccag caccgaggcc acccaccccg

840

gctcctacca tcgcctccca gcctctgtcc ctgcgtccgg aggcatgtag acccgcagct

900

ggtggggccg tgcatacccg gggtcttgac ttcgcctgcg atatctacat ttgggcccct

960

ctggctggta cttgcggggt cctgctgctt tcactcgtga tcactcttta ctgtaagcgc

1020

ggtcggaaga agctgctgta catctttaag caacccttca tgaggcctgt gcagactact

1080

caagaggagg acggctgttc atgccggttc ccagaggagg aggaaggcgg ctgcgaactg

1140

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

1200

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

1260

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

1320

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

1380

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

1440

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

1476

<210> 433

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 433

Gln Val His Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 434

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 434

caagtgcatc tgcagcagtc gggggccgaa ctggcaaagc caggcgccag cgtgaagatg

60

agctgcaagg cctccgggta caccttcacc aactactgga tgcactgggt caagcagcgc

120

ccgggccagg gactcgagtg gatcgggttc atcacgccga ctaccggcta cccggagtat

180

aaccagaagt tcaaggacaa ggccactctg actgccgaca agtcctcgtc taccgcgtac

240

atgcaactgt cctcactgac ttcggaggat tccgctgtgt actactgcgc gcggaggaaa

300

gtcggaaagg gagtgtacta tgccctggac tactggggcc agggtaccag cgtcactgtg

360

tcctcc

366

<210> 435

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 435

Asp Ile Leu Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Asn Ser Pro Gln Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Thr

65 70 75 80

Glu Asp Phe Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 436

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 436

gacattctga tgacccagtc ccctgcatca ctctccgcgt ccgtgggaga aaccgtgacc

60

atcacgtgta gagcctccgg caacatccac aactacctgg cctggtacca gcagaagcag

120

ggaaactcgc cccaactgct tgtgtacaac accaagacct tggctgacgg agtgccttcc

180

cggttctcgg gttcgggatc aggcacacag tactccctga aaatcaatag cctccagacc

240

gaagattttg gaacctacta ctgccaacac ttctggagct ccccctggac tttcggaggc

300

ggtaccaagc tcgagattaa g

321

<210> 437

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 437

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Asn Leu His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Leu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 438

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 438

caagtgcagc tgcagcagcc tggtgccgag ctcgtgaagc cgggagcgtc cgtgaagatg

60

agctgcaaag cctcgggcta caccttcacc aattacaact tgcattgggt caagcagacc

120

ccgggccagg gcctcgaatg gatcggagcg atctaccccg ggaactacga tactagctac

180

aaccagaagt tcaagggaaa ggccaccctg accgccgata agtcctcatc caccgcctac

240

atgctgctgt cctcgctgac ttccgaggac tccgctgtgt acttctgcgc ccgcgtggac

300

ttcggacaca gcagatattg gtattttgac gtctggggcg ccgggactac cgtgactgtg

360

tcgtcc

366

<210> 439

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 439

Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Phe Pro Arg Pro Trp Ile His

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Ala Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 440

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 440

caaattgtcc tgagccagag cccggctatc ctgtccgcct caccgggcga aaaggtcacc

60

atgacttgtc gggccacttc ctccgtgtca tccatgaact ggtaccagca gaagcctggc

120

agcttccctc ggccatggat tcacgccacg tcaaacctgg catcgggagt gcccgcaagg

180

ttctccgggt ccggcagcgg aacatcctac tccctcacca tctcgcgcgt ggaagcggag

240

gacgctgcca cctactactg ccaacagtgg accttcaacc cccccacctt tggagcggga

300

gccaagctgg aacttaag

318

<210> 441

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 441

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Ile His Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Val Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 442

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 442

caagtgcagc tgcagcagcc gggagcagag ctcgtgaagc ctggagcctc agtgaagatg

60

agctgcaagg cctccggtta caccttcacc tcctacaaca tgcactgggt caagcagacc

120

cccggacaag gcctggaatg gatcggcgcc atctacccgg gaaacgggga cacctcctat

180

aaccccaagt tcaagggaaa agcaaccctg accgcggaca agtccagcag aactgcctac

240

atccatcttt cctcgctgac gtccgaggat tccgtggtgt actactgtgc ccgctcctac

300

ttctacgggt catcctcgtg gtacttcgat gtctggggcg ctggaaccac cgtgactgtg

360

tcctcc

366

<210> 443

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 443

Gln Ile Ile Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Phe

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Thr Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Ser Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 444

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 444

cagatcattc tgagccagag cccggccatt ctgtctgcct cgcctggaga aaaagtcacc

60

ctcacttgcc gggccagctc ctccgtgtcc tcaatgcact ggtaccagca gaagcctggc

120

tcaagcccga agccctggat cttcgccacc tccaatctgg cgtcaggagt gcccgcgagg

180

ttcactggat cggggtccgg cacatcgtat tcgctcacca tttcccgggt ggaggccgag

240

gacgccgcta cttactactg ccaacagtgg atcttcaacc caccgacctt tggcggaggg

300

acttccttgg aaatcaag

318

<210> 445

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 445

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser His

20 25 30

Gly Ile Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Arg Lys Gly Leu Lys Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Gly Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Gly Asn Tyr Glu Glu Pro Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 446

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 446

caaattcagc tggtgcagtc gggacctgag ctcaagaagc ccggagaaac cgtgaagatc

60

tcctgcaaga cttccgggta cacttttact tcccacggca tcaactgggt caagcaggca

120

ccaaggaagg ggcttaagtg gatgggctgg attaacacct acaccggcga acccacctat

180

ggcgatgact tcaaaggacg gttcgcgttc tccctcgaaa cctcagcaag aaccgcgtat

240

ttgcaaatca acaacctgaa gaacgaggac accgccacct acttctgcgc ccgctacgga

300

aattacgagg aaccttacgc tatggactac tggggccagg gcacttccgt gactgtgtcg

360

tcc

363

<210> 447

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 447

Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met

20 25 30

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Phe Pro Arg Pro Trp Ile His

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Ala Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 448

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 448

cagatcgtgc tgagccagag ccccgccatc ctgagcgctt ccccgggaga aaaggtcacc

60

atgacttgcc gggccactag cagcgtgtcc tccatgaact ggtaccagca gaagccgggc

120

tccttccctc gcccctggat tcatgccacc tcaaacctgg ccagcggagt gccagccaga

180

ttctcgggat ctggatcggg gacgtcctac tccctcacca tctcgcgggt ggaggccgaa

240

gatgccgcca catactactg tcaacagtgg accttcaacc cgccgacctt tggagcgggg

300

gccaagctgg agctgaaa

318

<210> 449

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 449

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Ile His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Thr Thr Ala Phe

65 70 75 80

Ile His Phe Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Val Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Asp Ser Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 450

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 450

caagtgcagc ttcagcagcc tggggccgaa ctcgtgaagc caggagcctc cgtgaagatg

60

tcatgcaaag cctccggcta cacttttacc tcctacaaca ttcattgggt caagcagaca

120

cctggccagg gcctggaatg gattggtgca atctacccgg gcaacggaga cacctcgtac

180

aaccagaagt ttaaggggaa ggccaccctg accgcggaca agtcaagcac taccgcgttc

240

attcacttct cgtccttgac ctccgaggat agcgtggtgt actactgcgc ccgctcctat

300

ttctacggct ccgattcgtg gtacttcgac gtctggggag ccggaactac cgtgaccgtg

360

tcctcc

366

<210> 451

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 451

Gln Ile Ile Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Ser Gly Val Pro Ser Leu

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Phe

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Ser Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 452

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 452

caaatcatcc tgagccagag cccggccatc ctgtcggctt cacccgggga aaaggtcacg

60

ctgacttgcc gggcctcctc cggcgtgcca agcctccact ggtaccagca aaagcctggc

120

tcgtccccca aaccctggat tttcgccacc tccaacctgg ctagcggagt gccggccaga

180

ttctcgggtt ccgggtccgg caccagctat tctctcacca tctcccgggt cgaggcggag

240

gacgcagcga cttactactg tcaacagtgg atcttcaatc cgcccacctt cggcggagga

300

acttccctgg aaatcaag

318

<210> 453

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 453

Gln Val Gln Leu Leu Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Ala Gly Thr Thr Val Ser Val Ser Ser

115 120

<210> 454

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 454

caagtgcagc tgctgcagcc cggagccgaa ctcgtgaagc cgggcgcatc cgtgaaaatg

60

agctgcaagg cgtccggtta caccttcact cgctacaaca tgcactgggt caagcagacc

120

cctggacaag gcctggagtg gattggtgct atctacccgg gaaacggaga cactagctac

180

tcgcagaaat tcaagggaaa ggccacgctg accgccgata agtcctcctc cactgcctac

240

atgcaactca gctcactgac ctcagaggac tcggccgtgt actactgcgc gaggtccttc

300

ttctacgggt cctcggattg gtacttcgac gtctggggcg ccggtaccac cgtgtccgtg

360

tcatcc

366

<210> 455

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 455

Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Thr Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Leu Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 456

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 456

cagatcgtgc tgagccagtc cccggcgatt ctgtccacct cgcctgggga aaaggtcacc

60

ctgacatgta gagcctcctc ctccgtgaac aatatgcatt ggtatcagca gaagccagga

120

tcaagcccca agccctggat ctatgccact tcgaaccttg cctctggagt gccctcacgg

180

ttctccggct cgggatcggg gaccagctac agcttgacta tctcccgggt ggaggctgag

240

gacgccgcaa cctactactg ccagcaatgg atcttcaacc ctccgacttt tggggccgga

300

accaagctgg aactcaag

318

<210> 457

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 457

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val

115

<210> 458

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 458

caagtgcagt tggtggaatc aggaggaggt gtcgtgcaac caggaagatc attgaggctc

60

tcatgcgccg ccagcggatt cacctttcgg gattactaca tggcctgggt ccgccaggcc

120

ccggggaagg gactggaatg ggtggcatcc atctcgtacg aagggaaccc ctactatggg

180

gactccgtga agggacggtt caccatctcc cgggacaacg ccaagtccac cctgtacctt

240

caaatgtcct cgctgagggc ggaggatact gctgtctact actgtgcccg ccacgaccat

300

aacaacgtgg actggttcgc ctactggggc cagggaaccc tcgtcaccgt gtcctcg

357

<210> 459

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 459

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Gln Pro Val Ser Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Glu Asn Lys Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ser Pro Gln Leu Leu Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys

65 70 75 80

Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Asn Phe Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 460

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 460

gacattgtga tgacgcagac tcccctgtcg ctctccgtga cccctggcca gcccgtgtcg

60

atgtcgtgca agagctccca gtccctgctg tattccgaga acaagaagaa ttaccttgcg

120

tggtacctcc agaagccggg gcagagcccg cagctgctga ttttctgggc gtccactaga

180

gagtctggag tgcctgaccg gtttagcgga agcggctccg gtactgattt caccctgaaa

240

atctcgcgcg tggaagctga ggacgtgggc gtgtactact gccagcagta ctacaacttc

300

cctactttcg gacaaggaac caagctggaa atcaag

336

<210> 461

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 461

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 462

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 462

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr

130 135 140

Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly Gln Pro Val Ser Met

145 150 155 160

Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Glu Asn Lys Lys Asn

165 170 175

Tyr Leu Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu

180 185 190

Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

195 200 205

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu

210 215 220

Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Phe Pro

225 230 235 240

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245 250

<210> 463

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 463

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ser Ala Ser Thr Leu Tyr Met

65 70 75 80

Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 464

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 464

caagtccaac tcgtccagtc cggtgcagaa gtcaagaaac caggagcttc cgtgaaagtg

60

tcgtgcaaag cttcaggctt caccttccgc gactattaca tggcctgggt ccgccaagcg

120

cccggacagc ggctggagtg gatggggtcc atttcctacg aggggaaccc ctactatgga

180

gattccgtga agggcagagt gacgatcact cgggataact ccgcctccac tctctacatg

240

gaactgtcct cgcttcggag cgaagatacc gcggtgtact actgcgcccg ccacgaccat

300

aacaacgtgg actggttcgc ctactgggga caggggaccc tcgtgaccgt gtcctct

357

<210> 465

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 465

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Glu Asn Lys Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys

35 40 45

Val Pro Lys Leu Leu Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Asn Phe Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 466

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 466

gacattcaga tgacccagtc cccgagctcg ctgtccgcct ccgtgggaga cagagtgaca

60

atcacttgca agagcagcca gtcactgttg tactccgaga acaagaagaa ctacctcgcc

120

tggtaccagc agaagccggg aaaggtccct aagctgctga tcttctgggc cagcactagg

180

gagtcgggag tgccgtcacg gttcagcgga tcgggatcgg gtaccgactt caccctgact

240

atctcctccc tgcaacctga ggacgtggcc acctactact gtcagcagta ctacaatttt

300

cccaccttcg gccagggtac caagctggaa atcaag

336

<210> 467

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 467

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 468

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 468

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ser Ala Ser Thr Leu Tyr Met

65 70 75 80

Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr

130 135 140

Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile

145 150 155 160

Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Glu Asn Lys Lys Asn

165 170 175

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu

180 185 190

Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser

195 200 205

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

210 215 220

Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Phe Pro

225 230 235 240

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245 250

<210> 469

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 469

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Gln Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Ile Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 470

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 470

gaagtccaac tggtgcagtc aggagcagaa gtcaaaaaac caggagaaag cctcaagatc

60

agctgcaagg gctcgggttt caccttccgg gactactata tggcctgggt cagacagatg

120

ccgggaaagg gactggaatg gatggggtca atcagctacg agggcaaccc ctactacgga

180

gactccgtga agggacaggt cacaatctcc cgggacaact cgatttccac tctgtatctg

240

caatggagct ccctcaaggc ctccgacact gcgatgtact actgtgcgcg gcatgaccac

300

aacaatgtgg attggttcgc ctactgggga cagggaaccc tcgtgaccgt gtccagc

357

<210> 471

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 471

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Glu Asn Lys Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys

35 40 45

Val Pro Lys Leu Leu Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Asn Phe Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 472

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 472

gatatccaaa tgacccagtc gccctcctca ctctccgcct ccgtgggaga tcgcgtgacc

60

attacttgca agagctcgca gtccctgctg tactccgaga acaagaagaa ctacttggcc

120

tggtaccagc agaagcccgg caaagtgccg aagctgctta tcttttgggc ctcgaccagg

180

gaaagcggag tgccgtcacg cttctccggc tccgggtctg gcaccgactt cactctgact

240

atttcctccc tgcaacctga ggacgtggct acctactact gccagcagta ctacaacttc

300

cctaccttcg gccaagggac gaagctggag atcaag

336

<210> 473

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 473

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 474

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 474

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Gln Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Ile Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr

130 135 140

Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile

145 150 155 160

Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Glu Asn Lys Lys Asn

165 170 175

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu

180 185 190

Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser

195 200 205

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

210 215 220

Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Phe Pro

225 230 235 240

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245 250

<210> 475

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 475

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Gln Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Ile Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 476

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 476

gaagtgcagt tggtccaatc aggcgcagaa gtgaagaaac ccggagaatc attgaagatt

60

tcgtgcaaag gaagcgggtt cacattccgc gattactaca tggcgtgggt cagacagatg

120

ccgggaaagg gactcgagtg gatggggtcc atcagctacg aaggaaaccc ttactacggg

180

gactccgtga agggccaggt caccatctcc cgcgacaact caatctccac tctgtatctg

240

caatggtcga gcctcaaggc ctctgatact gcgatgtact actgcgctcg gcatgaccac

300

aacaacgtgg actggttcgc ttactgggga cagggtaccc ttgtgaccgt gtcctcc

357

<210> 477

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 477

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Glu Asn Lys Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Ile

50 55 60

Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Asn Phe Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 478

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 478

gagatcgtga tgactcagtc ccctgccacc ctctcgctgt cccccgggga gagggccacg

60

ctgtcctgca agagctccca gtcactgctg tattccgaaa acaagaagaa ctacctcgcc

120

tggtaccaac agaagccggg acaggccccg cggcttctga tcttctgggc ctccactcgg

180

gagtccggca ttccggcccg cttctccggc tcggggagcg gaactgactt caccctgacc

240

atcagcagcc tgcagccaga ggacctcgca gtgtactact gtcaacagta ctacaatttc

300

cccacctttg gccagggtac caagctggag attaag

336

<210> 479

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 479

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 480

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 480

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Gln Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Ile Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr

130 135 140

Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu

145 150 155 160

Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Glu Asn Lys Lys Asn

165 170 175

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

180 185 190

Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

195 200 205

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

210 215 220

Pro Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Phe Pro

225 230 235 240

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245 250

<210> 481

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 481

Asp Tyr Ala Met His

1 5

<210> 482

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 482

Thr Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 483

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 483

Asp Ile Gln Tyr Gly Asn Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10

<210> 484

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 484

Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr

1 5

<210> 485

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 485

Ser Trp Asn Ser Gly Ser

1 5

<210> 486

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 486

Asp Ile Gln Tyr Gly Asn Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10

<210> 487

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 487

Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr Ala

1 5

<210> 488

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 488

Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile

1 5

<210> 489

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 489

Ala Lys Asp Ile Gln Tyr Gly Asn Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val

1 5 10 15

<210> 490

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 490

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr

20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Ile Gln Tyr Gly Asn Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 491

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 491

gaggtgcagc tggtcgagtc ggggggagga ttggtgcagc cgggcagaag cctgcggctc

60

tcatgtgccg cctccggctt cacctttaac gactacgcaa tgcactgggt cagacaggct

120

cctgggaagg gcctggaatg ggtgtccacc atttcctgga actccgggag catcggctac

180

gctgactccg tgaagggccg cttcacgatt agccgcgata acgcgaaaaa gagcctgtac

240

ctccaaatga actccctgcg ggccgaagat accgcccttt actactgcgc gaaggacatt

300

cagtatggaa actactacta cggaatggac gtctggggac aggggaccac agtgaccgtg

360

tcaagc

366

<210> 492

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 492

Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 493

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 493

Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr

1 5

<210> 494

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 494

Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr

1 5

<210> 495

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 495

Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

1 5

<210> 496

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 496

Asp Ala Ser

1

<210> 497

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 497

Arg Ser Asn Trp Pro Ile

1 5

<210> 498

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 498

Gln Ser Val Ser Ser Tyr

1 5

<210> 499

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 499

Asp Ala Ser

1

<210> 500

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 500

Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr

1 5

<210> 501

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 501

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 502

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 502

gaaatcgtgc tgacccagag cccagccact ttgtcactgt cccccggcga aagagccact

60

ctgtcctgcc gggcatcgca gtccgtgtcg tcctacctgg cctggtacca gcaaaagccc

120

ggacaagccc ctcgccttct catctacgac gcctccaatc gcgcgaccgg aatcccggcc

180

aggttctccg ggagcggttc aggcactgac ttcaccctga ccatctcgtc cctggagccg

240

gaggatttcg ccgtgtatta ctgccagcag cggtccaact ggcccatcac cttcggccaa

300

gggactcggc tcgaaatcaa g

321

<210> 503

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 503

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 504

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 504

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asp Tyr

20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Thr Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Ile Gln Tyr Gly Asn Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile

130 135 140

Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg

145 150 155 160

Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala

165 170 175

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp

180 185 190

Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp

210 215 220

Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Ile Thr Phe

225 230 235 240

Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys

245

<210> 505

<211> 747

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 505

gaggtgcagc tggtcgagtc ggggggagga ttggtgcagc cgggcagaag cctgcggctc

60

tcatgtgccg cctccggctt cacctttaac gactacgcaa tgcactgggt cagacaggct

120

cctgggaagg gcctggaatg ggtgtccacc atttcctgga actccgggag catcggctac

180

gctgactccg tgaagggccg cttcacgatt agccgcgata acgcgaaaaa gagcctgtac

240

ctccaaatga actccctgcg ggccgaagat accgcccttt actactgcgc gaaggacatt

300

cagtatggaa actactacta cggaatggac gtctggggac aggggaccac agtgaccgtg

360

tcaagcggcg gtggaggatc tggcggagga ggttccggtg gcggtggatc gggaggggga

420

ggatcggaaa tcgtgctgac ccagagccca gccactttgt cactgtcccc cggcgaaaga

480

gccactctgt cctgccgggc atcgcagtcc gtgtcgtcct acctggcctg gtaccagcaa

540

aagcccggac aagcccctcg ccttctcatc tacgacgcct ccaatcgcgc gaccggaatc

600

ccggccaggt tctccgggag cggttcaggc actgacttca ccctgaccat ctcgtccctg

660

gagccggagg atttcgccgt gtattactgc cagcagcggt ccaactggcc catcaccttc

720

ggccaaggga ctcggctcga aatcaag

747

<210> 506

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 506

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 507

<400> 507

000

<210> 508

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 508

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Gln Ala Val Ser Ala Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Glu Asn Lys Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ser Pro Lys Leu Leu Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ile Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln

85 90 95

Tyr Tyr Asn Phe Pro Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 509

<400> 509

000

<210> 510

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 510

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 511

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 511

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Lys Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Ser Ile Ser Tyr Glu Gly Asn Pro Tyr Tyr Gly Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Lys Ser Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg His Asp His Asn Asn Val Asp Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Val Met Thr

130 135 140

Gln Thr Pro Ser Ser Gln Ala Val Ser Ala Gly Glu Lys Val Thr Met

145 150 155 160

Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Glu Asn Lys Lys Asn

165 170 175

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu

180 185 190

Ile Phe Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ile

195 200 205

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln

210 215 220

Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Asn Phe Pro

225 230 235 240

Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245 250

<210> 512

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 512

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Asp Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Asn Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Trp Phe Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 513

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 513

gaggtgcaac tgcagcagtc aggagcagaa ctggtcaagc cgggcgcatc cgtcaagatg

60

agctgcaagg cctcaggata caccttcact tcatacaaca tgcactgggt caagcagacg

120

cctgggcagg ggctggagtg gatcggtgcc atctaccccg gaaacggcga cacctcctac

180

aaccagaagt tcaagggaaa ggccaccctc accgctgata agtccagcag caccgcctac

240

atgcaactgt cgtccctgac ttcggaggac agcgctgact actattgcgc ccgctctaat

300

tactacggtt cctcctactg gttcttcgac gtgtggggcg cgggtaccac tgtgactgtc

360

tccagc

366

<210> 514

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 514

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Tyr Met

20 25 30

Asp Trp Tyr Gln Lys Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 515

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 515

gacatcgtgc tcactcagtc gcccgccatt ctgagcgcta gccccggcga aaaggtcacc

60

atgacctgta gagcgtcatc ctcggtgaac tacatggact ggtaccagaa gaagccggga

120

tcgagcccta agccatggat ctacgccaca tccaatctgg cgtccggcgt gccggcccgg

180

ttcagcggga gcggctcagg cacctcctat tccctcacca tctcgagagt ggaggctgag

240

gatgcagcca cgtactactg tcagcagtgg tcgttcaacc ccccaacctt tggtggtgga

300

accaagctgg aaatcaag

318

<210> 516

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 516

Gly Ser Thr Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

1 5 10 15

Ser Ser

<210> 517

<211> 246

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 517

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Tyr Met

20 25 30

Asp Trp Tyr Gln Lys Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Ser Thr Ser Gly Gly

100 105 110

Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Glu Val Gln Leu

115 120 125

Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Met

130 135 140

Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His Trp

145 150 155 160

Val Lys Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ala Ile Tyr

165 170 175

Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala

180 185 190

Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser

195 200 205

Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Asn

210 215 220

Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Trp Phe Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr

225 230 235 240

Thr Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 518

<211> 738

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 518

gacatcgtgc tcactcagtc gcccgccatt ctgagcgcta gccccggcga aaaggtcacc

60

atgacctgta gagcgtcatc ctcggtgaac tacatggact ggtaccagaa gaagccggga

120

tcgagcccta agccatggat ctacgccaca tccaatctgg cgtccggcgt gccggcccgg

180

ttcagcggga gcggctcagg cacctcctat tccctcacca tctcgagagt ggaggctgag

240

gatgcagcca cgtactactg tcagcagtgg tcgttcaacc ccccaacctt tggtggtgga

300

accaagctgg aaatcaaggg aagcacctcc ggcggaggtt ccggaggagg gtccggaggc

360

ggaggcagct ccgaggtgca actgcagcag tcaggagcag aactggtcaa gccgggcgca

420

tccgtcaaga tgagctgcaa ggcctcagga tacaccttca cttcatacaa catgcactgg

480

gtcaagcaga cgcctgggca ggggctggag tggatcggtg ccatctaccc cggaaacggc

540

gacacctcct acaaccagaa gttcaaggga aaggccaccc tcaccgctga taagtccagc

600

agcaccgcct acatgcaact gtcgtccctg acttcggagg acagcgctga ctactattgc

660

gcccgctcta attactacgg ttcctcctac tggttcttcg acgtgtgggg cgcgggtacc

720

actgtgactg tctccagc

738

<210> 519

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 519

Asn Asn Asn Ala Ala Trp Asn

1 5

<210> 520

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 520

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asn Asp Tyr Val Gly Ser Val

1 5 10 15

Lys Ser

<210> 521

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 521

Glu Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Gly Ala Phe Asp Ile

1 5 10

<210> 522

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 522

Gly Asp Ser Val Ser Asn Asn Asn Ala

1 5

<210> 523

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 523

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 524

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 524

Glu Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Gly Ala Phe Asp Ile

1 5 10

<210> 525

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 525

Gly Asp Ser Val Ser Asn Asn Asn Ala Ala

1 5 10

<210> 526

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 526

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asn

1 5

<210> 527

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 527

Ala Arg Glu Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Gly Ala Phe Asp Ile

1 5 10

<210> 528

<211> 124

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 528

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Asn Asn

20 25 30

Asn Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asn Asp Tyr Val

50 55 60

Gly Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Gly Ala Phe Asp

100 105 110

Ile Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 529

<211> 372

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 529

gaagtccaat tgcaacaatc aggtcccgga ctcgtgaaac cttcccaaac cctctccctc

60

acttgcgcga tcagcggaga ctccgtgtcc aacaacaatg ctgcctggaa ctggattagg

120

cagagccctt caagaggact ggaatggctg ggacggactt accaccgctc cacctggtac

180

aacgattacg tggggtccgt caagtcccgg atcaccatta acccggacac ttccaagaat

240

cagttcagcc tgcaacttaa cagcgtgact cccgaggata ccgccgtgta ctactgtgcc

300

cgggaaaccg actacgggga ttacggagcc ttcgacatct ggggacaggg aaccaccgtg

360

accgtgtcct cg

372

<210> 530

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 530

Thr Gly Ser Arg Asn Asp Ile Gly Ala Tyr Glu Ser Val Ser

1 5 10

<210> 531

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 531

Gly Val Asn Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 532

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 532

Ser Ser His Thr Thr Thr Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 533

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 533

Ser Arg Asn Asp Ile Gly Ala Tyr Glu Ser

1 5 10

<210> 534

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 534

Gly Val Asn

1

<210> 535

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 535

His Thr Thr Thr Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 536

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 536

Arg Asn Asp Ile Gly Ala Tyr Glu Ser

1 5

<210> 537

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 537

Gly Val Asn

1

<210> 538

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 538

Ser Ser His Thr Thr Thr Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 539

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 539

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Arg Asn Asp Ile Gly Ala Tyr

20 25 30

Glu Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Asn Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Ile Ile His Gly Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Phe Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Val Ser Gln Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser His Thr Thr Thr

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 540

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 540

cagtcggccc tgactcagcc ggcctccgtg tccggaagcc cgggccagtc catcaccatt

60

tcgtgcactg ggtcgcgcaa cgacatcggc gcctacgaat ccgtgtcgtg gtaccagcag

120

caccccggca acgccccgaa gctgatcatc catggcgtca acaacagacc atccggagtg

180

ttcgaccggt tcagcgtgtc ccagtcggga aacaccgcat ccctgaccat tagcggcctg

240

caggcggagg acgaggctga ctattactgc tcctcacaca ccaccacctc tacgctctat

300

gtgtttggga ctggcaccaa ggtcacagtg ctggga

336

<210> 541

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 541

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 542

<211> 250

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 542

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Asn Asn

20 25 30

Asn Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asn Asp Tyr Val

50 55 60

Gly Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Gly Ala Phe Asp

100 105 110

Ile Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr

130 135 140

Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile Thr Ile Ser

145 150 155 160

Cys Thr Gly Ser Arg Asn Asp Ile Gly Ala Tyr Glu Ser Val Ser Trp

165 170 175

Tyr Gln Gln His Pro Gly Asn Ala Pro Lys Leu Ile Ile His Gly Val

180 185 190

Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Phe Asp Arg Phe Ser Val Ser Gln Ser

195 200 205

Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu

210 215 220

Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser His Thr Thr Thr Ser Thr Leu Tyr Val

225 230 235 240

Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

245 250

<210> 543

<211> 753

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 543

gaagtccaat tgcaacaatc aggtcccgga ctcgtgaaac cttcccaaac cctctccctc

60

acttgcgcga tcagcggaga ctccgtgtcc aacaacaatg ctgcctggaa ctggattagg

120

cagagccctt caagaggact ggaatggctg ggacggactt accaccgctc cacctggtac

180

aacgattacg tggggtccgt caagtcccgg atcaccatta acccggacac ttccaagaat

240

cagttcagcc tgcaacttaa cagcgtgact cccgaggata ccgccgtgta ctactgtgcc

300

cgggaaaccg actacgggga ttacggagcc ttcgacatct ggggacaggg aaccaccgtg

360

accgtgtcct cgggcggtgg tggttcgggc ggcgggggat cagggggcgg aggaagccag

420

tcggccctga ctcagccggc ctccgtgtcc ggaagcccgg gccagtccat caccatttcg

480

tgcactgggt cgcgcaacga catcggcgcc tacgaatccg tgtcgtggta ccagcagcac

540

cccggcaacg ccccgaagct gatcatccat ggcgtcaaca acagaccatc cggagtgttc

600

gaccggttca gcgtgtccca gtcgggaaac accgcatccc tgaccattag cggcctgcag

660

gcggaggacg aggctgacta ttactgctcc tcacacacca ccacctctac gctctatgtg

720

tttgggactg gcaccaaggt cacagtgctg gga

753

<210> 544

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 544

Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn

1 5

<210> 545

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 545

Arg Thr Phe Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala Val Ser Val

1 5 10 15

Lys Gly

<210> 546

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 546

Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val

1 5

<210> 547

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 547

Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala

1 5

<210> 548

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 548

Phe Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr

1 5

<210> 549

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 549

Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val

1 5

<210> 550

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 550

Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala

1 5 10

<210> 551

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 551

Thr Phe Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn

1 5

<210> 552

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 552

Ala Gly Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val

1 5 10

<210> 553

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 553

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Asn Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Ile Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Phe Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala

50 55 60

Val Ser Val Lys Gly Arg Ile Thr Ile Ser Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 554

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 554

gaagtccagt tgcaacagtc aggtcccggc ctcgtcaacc catcccaaac cctttccatt

60

acctgtgcca ttagcgggga cagcgtgtcc tccaactcgg ccgcttggaa ctggatcaga

120

cagagcccca gccggggtct ggagtggctg ggacggacct tctaccgctc aaagtggtac

180

aacgactacg cggtgtccgt gaagggaagg attaccatct ccccggatac atcgaagaat

240

cagttctccc tgcaactgaa ctctgtgacc cctgaggata ccgccgtgta ctactgcgcg

300

ggaggagact actactatgg gctggacgtc tggggccagg gaaccaccgt gactgtgtca

360

agc

363

<210> 555

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 555

Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser Val Ser

1 5 10

<210> 556

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 556

Glu Val Ile Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 557

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 557

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Tyr Val

1 5 10

<210> 558

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 558

Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser

1 5 10

<210> 559

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 559

Glu Val Ile

1

<210> 560

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 560

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Tyr

1 5

<210> 561

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 561

Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser

1 5

<210> 562

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 562

Glu Val Ile

1

<210> 563

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 563

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Tyr Val

1 5 10

<210> 564

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 564

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ile Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser His Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 565

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 565

cagagcgccc tgacccagcc ggccagcgtg tccgggtcgc cgggccagtc gatcaccatc

60

agctgcactg ggtcatcctc cgacgtggga ggctacaact ccgtgtcgtg gtaccagcag

120

cacccgggga aggctcctaa gctgatgatc tacgaagtga tcaaccggcc ctccggagtc

180

tcgcatcgct tttccggttc aaagtccgga aacacggcct ccctgaccat ctccggactc

240

caagccgagg atgaagcaga ctattactgc tcctcgtaca ctagctcatc cacttacgtg

300

ttcggaactg gcaccaaagt cactgtgctc

330

<210> 566

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 566

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 567

<211> 246

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 567

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Asn Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Ile Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Phe Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala

50 55 60

Val Ser Val Lys Gly Arg Ile Thr Ile Ser Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala

130 135 140

Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly

145 150 155 160

Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln

165 170 175

His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Val Ile Asn Arg

180 185 190

Pro Ser Gly Val Ser His Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr

195 200 205

Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr

210 215 220

Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Tyr Val Phe Gly Thr Gly

225 230 235 240

Thr Lys Val Thr Val Leu

245

<210> 568

<211> 738

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 568

gaagtccagt tgcaacagtc aggtcccggc ctcgtcaacc catcccaaac cctttccatt

60

acctgtgcca ttagcgggga cagcgtgtcc tccaactcgg ccgcttggaa ctggatcaga

120

cagagcccca gccggggtct ggagtggctg ggacggacct tctaccgctc aaagtggtac

180

aacgactacg cggtgtccgt gaagggaagg attaccatct ccccggatac atcgaagaat

240

cagttctccc tgcaactgaa ctctgtgacc cctgaggata ccgccgtgta ctactgcgcg

300

ggaggagact actactatgg gctggacgtc tggggccagg gaaccaccgt gactgtgtca

360

agcggagggg gcggctccgg tggaggaggc tcgggtggcg gcggaagcca gagcgccctg

420

acccagccgg ccagcgtgtc cgggtcgccg ggccagtcga tcaccatcag ctgcactggg

480

tcatcctccg acgtgggagg ctacaactcc gtgtcgtggt accagcagca cccggggaag

540

gctcctaagc tgatgatcta cgaagtgatc aaccggccct ccggagtctc gcatcgcttt

600

tccggttcaa agtccggaaa cacggcctcc ctgaccatct ccggactcca agccgaggat

660

gaagcagact attactgctc ctcgtacact agctcatcca cttacgtgtt cggaactggc

720

accaaagtca ctgtgctc

738

<210> 569

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 569

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 570

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 570

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 571

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 571

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 572

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 572

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 573

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 573

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 574

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 574

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 575

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 575

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 576

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 576

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 577

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 577

Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 578

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 578

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 579

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 579

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag c

381

<210> 580

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 580

Thr Gly Ser Ser Ser Asp Ile Gly Gly Phe Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 581

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 581

Glu Val Thr Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 582

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 582

Ser Ser Tyr Ala Ser Gly Ser Pro Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 583

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 583

Ser Ser Ser Asp Ile Gly Gly Phe Asn Tyr

1 5 10

<210> 584

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 584

Glu Val Thr

1

<210> 585

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 585

Tyr Ala Ser Gly Ser Pro Leu Tyr

1 5

<210> 586

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 586

Ser Ser Asp Ile Gly Gly Phe Asn Tyr

1 5

<210> 587

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 587

Glu Val Thr

1

<210> 588

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 588

Ser Ser Tyr Ala Ser Gly Ser Pro Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 589

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 589

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Ile Gly Gly Phe

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Ala Gly Glu Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Ser Gly

85 90 95

Ser Pro Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 590

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 590

cagtccgcgc tgacccagcc cgcctctgtg tccggatcac cgggacagtc gatcacgatc

60

tcctgcactg gctcatcgtc cgacattgga ggttttaact acgtgtcgtg gtaccagcag

120

catgcaggag aagccccgaa gctcatgatc tacgaagtga ccaaccggcc ttcgggggtg

180

tcagacagat tctcgggctc caagtccgac aataccgcat ccctgaccat tagcggcctg

240

caggcggagg acgaagccga ctactattgc tcctcgtacg cttcgggctc ccctctgtac

300

gtgttcggca ctgggaccaa agtcaccgtg ctc

333

<210> 591

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 591

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 592

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 592

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asp Ile Gly Gly Phe Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Ala Gly Glu Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Glu Val Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Ser Gly Ser Pro

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

245 250

<210> 593

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 593

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag cggggggggc ggatcaggcg gcggtggctc cggaggaggg

420

ggttcccagt ccgcgctgac ccagcccgcc tctgtgtccg gatcaccggg acagtcgatc

480

acgatctcct gcactggctc atcgtccgac attggaggtt ttaactacgt gtcgtggtac

540

cagcagcatg caggagaagc cccgaagctc atgatctacg aagtgaccaa ccggccttcg

600

ggggtgtcag acagattctc gggctccaag tccgacaata ccgcatccct gaccattagc

660

ggcctgcagg cggaggacga agccgactac tattgctcct cgtacgcttc gggctcccct

720

ctgtacgtgt tcggcactgg gaccaaagtc accgtgctc

759

<210> 594

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 594

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 595

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 595

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 596

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 596

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 597

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 597

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 598

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 598

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 599

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 599

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 600

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 600

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 601

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 601

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 602

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 602

Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 603

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 603

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 604

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 604

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag c

381

<210> 605

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 605

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 606

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 606

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 607

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 607

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 608

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 608

Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 609

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 609

Glu Val Ser

1

<210> 610

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 610

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 611

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 611

Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5

<210> 612

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 612

Glu Val Ser

1

<210> 613

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 613

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 614

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 614

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Phe Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Thr Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 615

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 615

cagtccgcgc tgacccagcc cgcctctgtg tccggatcac cgggacagtc gatcacgttt

60

tcctgcactg gcacctcgtc cgacatcgga ggttacaact acgtgtcgtg gtaccagcag

120

catccaggaa aggccccgaa gctcatgatc tacgaagtgt caaaccggcc ttcgggggtg

180

tcaaacagat tctcgggcac caagtccgga aataccgcat ccctgaccat tagcggcctg

240

caggcggagg acgaagccga ctactattgc tcctcgtaca cctcgagctc cactctgtac

300

gtgttcggca ctgggaccaa acttaccgtg ctc

333

<210> 616

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 616

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 617

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 617

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile

145 150 155 160

Thr Phe Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Thr Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

245 250

<210> 618

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 618

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag cggggggggc ggatcaggcg gcggtggctc cggatcgggg

420

ggttcccagt ccgcgctgac ccagcccgcc tctgtgtccg gatcaccggg acagtcgatc

480

acgttttcct gcactggcac ctcgtccgac atcggaggtt acaactacgt gtcgtggtac

540

cagcagcatc caggaaaggc cccgaagctc atgatctacg aagtgtcaaa ccggccttcg

600

ggggtgtcaa acagattctc gggcaccaag tccggaaata ccgcatccct gaccattagc

660

ggcctgcagg cggaggacga agccgactac tattgctcct cgtacacctc gagctccact

720

ctgtacgtgt tcggcactgg gaccaaactt accgtgctc

759

<210> 619

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 619

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 620

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 620

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 621

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 621

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 622

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 622

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 623

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 623

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 624

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 624

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 625

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 625

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 626

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 626

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 627

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 627

Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 628

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 628

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 629

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 629

caagtccaat tgcaagaatc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag c

381

<210> 630

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 630

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 631

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 631

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 632

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 632

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 633

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 633

Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 634

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 634

Glu Val Ser

1

<210> 635

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 635

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 636

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 636

Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5

<210> 637

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 637

Glu Val Ser

1

<210> 638

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 638

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 639

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 639

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 640

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 640

cagtccgcgc tgacccagcc cgcctctgtg tccggatcac cgggacagtc gatcacgatc

60

tcctgcactg gcacctcgtc cgacgtggga ggttacaact acgtgtcgtg gtaccagcag

120

catccaggaa aggccccgaa gctcatgatc tacgaagtgt caaaccggcc ttcgggggtg

180

tcaaacagat tctcgggctc caagtccgga aataccgcat ccctgaccat tagcggcctg

240

caggcggagg acgaagccga ctactattgc tcctcgtaca cctcgagctc cactctgtac

300

gtgttcggca ctgggaccaa agtcaccgtg ctc

333

<210> 641

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 641

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 642

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 642

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

245 250

<210> 643

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 643

caagtccaat tgcaagaatc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag cggggggggc ggatcaggcg gcggtggctc cggatcgggg

420

ggttcccagt ccgcgctgac ccagcccgcc tctgtgtccg gatcaccggg acagtcgatc

480

acgatctcct gcactggcac ctcgtccgac gtgggaggtt acaactacgt gtcgtggtac

540

cagcagcatc caggaaaggc cccgaagctc atgatctacg aagtgtcaaa ccggccttcg

600

ggggtgtcaa acagattctc gggctccaag tccggaaata ccgcatccct gaccattagc

660

ggcctgcagg cggaggacga agccgactac tattgctcct cgtacacctc gagctccact

720

ctgtacgtgt tcggcactgg gaccaaagtc accgtgctc

759

<210> 644

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 644

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 645

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 645

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 646

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 646

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 647

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 647

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 648

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 648

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 649

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 649

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 650

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 650

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 651

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 651

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 652

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 652

Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 653

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 653

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 654

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 654

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag c

381

<210> 655

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 655

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 656

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 656

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 657

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 657

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 658

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 658

Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 659

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 659

Asp Val Ser

1

<210> 660

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 660

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 661

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 661

Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5

<210> 662

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 662

Asp Val Ser

1

<210> 663

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 663

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 664

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 664

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 665

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 665

cagtccgcgc tgacccagcc cgcctctgtg tccggatcac cgggacagtc gatcacgatc

60

tcctgcactg gcacctcgtc cgacgtggga ggttacaact acgtgtcgtg gtaccagcag

120

catccaggaa aggccccgaa gctcatgatc tacgacgtgt caaaccggcc ttcgggggtg

180

tcaaacagat tctcgggctc caagtccgga aataccgcat ccctgaccat tagcggcctg

240

caggcggagg acgaagccga ctactattgc tcctcgtaca cctcgagctc cactctgtac

300

gtgttcggca ctgggaccaa agtcaccgtg ctc

333

<210> 666

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 666

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 667

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 667

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

245 250

<210> 668

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 668

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag cggggggggc ggatcaggcg gcggtggctc cggaggaggg

420

ggttcccagt ccgcgctgac ccagcccgcc tctgtgtccg gatcaccggg acagtcgatc

480

acgatctcct gcactggcac ctcgtccgac gtgggaggtt acaactacgt gtcgtggtac

540

cagcagcatc caggaaaggc cccgaagctc atgatctacg acgtgtcaaa ccggccttcg

600

ggggtgtcaa acagattctc gggctccaag tccggaaata ccgcatccct gaccattagc

660

ggcctgcagg cggaggacga agccgactac tattgctcct cgtacacctc gagctccact

720

ctgtacgtgt tcggcactgg gaccaaagtc accgtgctc

759

<210> 669

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 669

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 670

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 670

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 671

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 671

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 672

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 672

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 673

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 673

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 674

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 674

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 675

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 675

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 676

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 676

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 677

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 677

Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 678

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 678

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 679

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 679

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag c

381

<210> 680

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 680

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 681

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 681

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 682

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 682

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Ile

1 5 10

<210> 683

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 683

Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 684

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 684

Glu Val Ser

1

<210> 685

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 685

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 686

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 686

Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5

<210> 687

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 687

Glu Val Ser

1

<210> 688

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 688

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Ile

1 5 10

<210> 689

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 689

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Ile Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

100 105 110

<210> 690

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 690

cagtccgcgc tgacccagcc cgcctctgtg tccggatcac cgggacagtc gatcacgatc

60

tcctgcactg gcacctcgtc cgacgtggga ggttacaact acgtgtcgtg gtaccagcag

120

catccaggaa aggccccgaa gctcatgatc tacgaagtgt caaaccggcc ttcgggggtg

180

tcaaacagat tctcgggctc caagtccgga aataccgcat ccctgaccat tagcggcctg

240

caggcggagg acgaagccga ctactattgc tcctcgtaca cctcgagctc cactctgtac

300

attttcggca ctgggaccaa agtcaccgtg ctc

333

<210> 691

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 691

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 692

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 692

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Ile Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu

245 250

<210> 693

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 693

gaagtccaat tgcaacagtc cggtcctggc ctcgtcaagc cctcccaaac cctctccctg

60

acttgcgcca tctccgggga ttccgtgctg agcaactccg acacctggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggcct ggagtggctg ggcaggacct accaccggag cacttggtac

180

gacgactacg ccagctccgt gcgcggacgc gtgtcaatca atgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcaacttaa cgctgtgact cccgaggata ctggagtgta ctattgtgcc

300

cgcgaccggc tgcaggatgg aaacagctgg tccgatgcct tcgatgtctg gggacagggt

360

accatggtca cagtgtccag cggggggggc ggatcaggcg gcggtggctc cggaggaggg

420

ggttcccagt ccgcgctgac ccagcccgcc tctgtgtccg gatcaccggg acagtcgatc

480

acgatctcct gcactggcac ctcgtccgac gtgggaggtt acaactacgt gtcgtggtac

540

cagcagcatc caggaaaggc cccgaagctc atgatctacg aagtgtcaaa ccggccttcg

600

ggggtgtcaa acagattctc gggctccaag tccggaaata ccgcatccct gaccattagc

660

ggcctgcagg cggaggacga agccgactac tattgctcct cgtacacctc gagctccact

720

ctgtacattt tcggcactgg gaccaaagtc accgtgctc

759

<210> 694

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 694

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 695

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 695

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 696

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 696

Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 697

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 697

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 698

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 698

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 699

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 699

Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 700

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 700

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 701

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 701

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 702

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 702

Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 703

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 703

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Pro Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 704

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 704

gaagtgcagc ttcaacaatc aggacccgga ctcgtcaaac catcgcagac cctccctctc

60

acttgcgcca tctccgggga ctccgtgctg tccaactccg acacttggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggatt ggaatggctg ggaaggacct atcaccggtc cacttggtac

180

gacgattacg cctcgtccgt gcgcggtcgg gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac

240

cagtactccc tgcaactgaa cgccgtgacc cctgaggaca ctggggtgta ctactgtgcg

300

agagtgcggc tgcaggatgg gaactcttgg tccgacgcct tcgatgtctg gggccagggc

360

accatggtca ctgtgtcatc c

381

<210> 705

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 705

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 706

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 706

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 707

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 707

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 708

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 708

Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 709

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 709

Asp Val Ser

1

<210> 710

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 710

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 711

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 711

Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5

<210> 712

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 712

Asp Val Ser

1

<210> 713

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 713

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 714

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 714

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 715

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 715

cagtcggcac tgacccagcc tgcctcagcc tccgggagcc cgggacagtc cgtgaccatt

60

tcctgcaccg ggacctcctc cgacgtggga ggctacaact acgtgtcatg gtaccagcag

120

caccccggaa aggcaccgaa gctgatgatc tacgacgtgt ccaaccgccc gagcggggtg

180

tcaaatcgct tctcgggctc gaagtcggga aacacagcga gcctgacgat ctcgggactg

240

caagccgaag atgaggctga ctactactgc tcgtcctaca ctagctccag caccctctac

300

gtgttcggta ctggtaccca gctgaccgtc ctg

333

<210> 716

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 716

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Pro

1 5 10 15

<210> 717

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 717

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Pro Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Pro Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

245 250

<210> 718

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 718

gaagtgcagc ttcaacaatc aggacccgga ctcgtcaaac catcgcagac cctccctctc

60

acttgcgcca tctccgggga ctccgtgctg tccaactccg acacttggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggatt ggaatggctg ggaaggacct atcaccggtc cacttggtac

180

gacgattacg cctcgtccgt gcgcggtcgg gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac

240

cagtactccc tgcaactgaa cgccgtgacc cctgaggaca ctggggtgta ctactgtgcg

300

agagtgcggc tgcaggatgg gaactcttgg tccgacgcct tcgatgtctg gggccagggc

360

accatggtca ctgtgtcatc cggcggtggt ggcagcggcg gaggcggcag cggaggcgga

420

ggaccccagt cggcactgac ccagcctgcc tcagcctccg ggagcccggg acagtccgtg

480

accatttcct gcaccgggac ctcctccgac gtgggaggct acaactacgt gtcatggtac

540

cagcagcacc ccggaaaggc accgaagctg atgatctacg acgtgtccaa ccgcccgagc

600

ggggtgtcaa atcgcttctc gggctcgaag tcgggaaaca cagcgagcct gacgatctcg

660

ggactgcaag ccgaagatga ggctgactac tactgctcgt cctacactag ctccagcacc

720

ctctacgtgt tcggtactgg tacccagctg accgtcctg

759

<210> 719

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 719

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5

<210> 720

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 720

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 721

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 721

Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 722

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 722

Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp

1 5

<210> 723

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 723

Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

1 5

<210> 724

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 724

Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 725

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 725

Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr

1 5 10

<210> 726

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 726

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

1 5

<210> 727

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 727

Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp

1 5 10 15

Val

<210> 728

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 728

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 729

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 729

gaagtgcagc ttcaacaatc aggacccgga ctcgtcaaac catcgcagac cctcagcctc

60

acttgcgcca tctccgggga ctccatgctg tccaactccg acacttggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggatt ggaatggctg ggaaggacct atcaccggtc cacttggtac

180

gacgattacg cctcgtccgt gcgcggtcgg gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac

240

cagtactccc tgcaactgaa cgccgtgacc cctgaggaca ctggggtgta ctactgtgcg

300

agagtgcggc tgcaggatgg gaactcttgg tccgacgcct tcgatgtctg gggccagggc

360

accatggtca ctgtgtcatc c

381

<210> 730

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 730

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 731

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 731

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 732

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 732

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 733

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 733

Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 734

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 734

Asp Val Ser

1

<210> 735

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 735

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

1 5

<210> 736

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 736

Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5

<210> 737

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 737

Asp Val Ser

1

<210> 738

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 738

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 739

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 739

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 740

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 740

cagtcggcac tgacccagcc tgcctcagcc tccgggagcc cgggacagtc cgtgaccatt

60

tcctgcaccg ggacctcctc cgacgtggga ggctacaact acgtgtcatg gtaccagcag

120

caccccggaa aggcaccgaa gctgatgatc tacgacgtgt ccaaccgccc gagcggggtg

180

tcaaatcgct tctcgggctc gaagtcggga aacacagcga gcctgacgat ctcgggactg

240

caagccgaag atgaggctga ctactactgc tcgtcctaca ctagctccag caccctctac

300

gtgttcggta ctggtaccca gctgaccgtc ctg

333

<210> 741

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 741

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 742

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 742

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

245 250

<210> 743

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 743

gaagtgcagc ttcaacaatc aggacccgga ctcgtcaaac catcgcagac cctcagcctc

60

acttgcgcca tctccgggga ctccatgctg tccaactccg acacttggaa ctggattcgg

120

cagagcccgt ccagaggatt ggaatggctg ggaaggacct atcaccggtc cacttggtac

180

gacgattacg cctcgtccgt gcgcggtcgg gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac

240

cagtactccc tgcaactgaa cgccgtgacc cctgaggaca ctggggtgta ctactgtgcg

300

agagtgcggc tgcaggatgg gaactcttgg tccgacgcct tcgatgtctg gggccagggc

360

accatggtca ctgtgtcatc cggcggtggt ggcagcggcg gaggcggcag cggaggcgga

420

ggaagccagt cggcactgac ccagcctgcc tcagcctccg ggagcccggg acagtccgtg

480

accatttcct gcaccgggac ctcctccgac gtgggaggct acaactacgt gtcatggtac

540

cagcagcacc ccggaaaggc accgaagctg atgatctacg acgtgtccaa ccgcccgagc

600

ggggtgtcaa atcgcttctc gggctcgaag tcgggaaaca cagcgagcct gacgatctcg

660

ggactgcaag ccgaagatga ggctgactac tactgctcgt cctacactag ctccagcacc

720

ctctacgtgt tcggtactgg tacccagctg accgtcctg

759

<210> 744

<211> 497

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 744

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp

35 40 45

Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro

50 55 60

Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp

65 70 75 80

Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val

85 90 95

Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro

100 105 110

Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly

115 120 125

Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

130 135 140

Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser

165 170 175

Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val

180 185 190

Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala

195 200 205

Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser

210 215 220

Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile

225 230 235 240

Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr

245 250 255

Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr

260 265 270

Val Leu Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr

275 280 285

Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala

290 295 300

Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile

305 310 315 320

Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser

325 330 335

Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr

340 345 350

Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu

355 360 365

Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu

370 375 380

Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln

385 390 395 400

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

405 410 415

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

420 425 430

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

435 440 445

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

450 455 460

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

465 470 475 480

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

485 490 495

Arg

<210> 745

<211> 1491

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 745

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaagtgc agcttcaaca atcaggaccc ggactcgtca aaccatcgca gaccctcagc

120

ctcacttgcg ccatctccgg ggactccatg ctgtccaact ccgacacttg gaactggatt

180

cggcagagcc cgtccagagg attggaatgg ctgggaagga cctatcaccg gtccacttgg

240

tacgacgatt acgcctcgtc cgtgcgcggt cgggtgtcca tcaacgtgga cacctccaag

300

aaccagtact ccctgcaact gaacgccgtg acccctgagg acactggggt gtactactgt

360

gcgagagtgc ggctgcagga tgggaactct tggtccgacg ccttcgatgt ctggggccag

420

ggcaccatgg tcactgtgtc atccggcggt ggtggcagcg gcggaggcgg cagcggaggc

480

ggaggaagcc agtcggcact gacccagcct gcctcagcct ccgggagccc gggacagtcc

540

gtgaccattt cctgcaccgg gacctcctcc gacgtgggag gctacaacta cgtgtcatgg

600

taccagcagc accccggaaa ggcaccgaag ctgatgatct acgacgtgtc caaccgcccg

660

agcggggtgt caaatcgctt ctcgggctcg aagtcgggaa acacagcgag cctgacgatc

720

tcgggactgc aagccgaaga tgaggctgac tactactgct cgtcctacac tagctccagc

780

accctctacg tgttcggtac tggtacccag ctgaccgtcc tgaccactac cccagcaccg

840

aggccaccca ccccggctcc taccatcgcc tcccagcctc tgtccctgcg tccggaggca

900

tgtagacccg cagctggtgg ggccgtgcat acccggggtc ttgacttcgc ctgcgatatc

960

tacatttggg cccctctggc tggtacttgc ggggtcctgc tgctttcact cgtgatcact

1020

ctttactgta agcgcggtcg gaagaagctg ctgtacatct ttaagcaacc cttcatgagg

1080

cctgtgcaga ctactcaaga ggaggacggc tgttcatgcc ggttcccaga ggaggaggaa

1140

ggcggctgcg aactgcgcgt gaaattcagc cgcagcgcag atgctccagc ctacaagcag

1200

gggcagaacc agctctacaa cgaactcaat cttggtcgga gagaggagta cgacgtgctg

1260

gacaagcgga gaggacggga cccagaaatg ggcgggaagc cgcgcagaaa gaatccccaa

1320

gagggcctgt acaacgagct ccaaaaggat aagatggcag aagcctatag cgagattggt

1380

atgaaagggg aacgcagaag aggcaaaggc cacgacggac tgtaccaggg actcagcacc

1440

gccaccaagg acacctatga cgctcttcac atgcaggccc tgccgcctcg g

1491

<210> 746

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 746

Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn

1 5

<210> 747

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 747

Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Ser Asp Tyr Ala Val Ser Val

1 5 10 15

Lys Ser

<210> 748

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 748

Asp Pro Tyr Asp Phe Trp Ser Gly Tyr Pro Asp Ala Phe Asp Ile

1 5 10 15

<210> 749

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 749

Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala

1 5

<210> 750

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 750

Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr

1 5

<210> 751

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 751

Asp Pro Tyr Asp Phe Trp Ser Gly Tyr Pro Asp Ala Phe Asp Ile

1 5 10 15

<210> 752

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 752

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Ser Asp Tyr Ala

50 55 60

Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Pro Tyr Asp Phe Trp Ser Gly Tyr Pro Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 753

<211> 381

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 753

gaggtacagc tgcagcagtc aggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc

60

acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg

120

cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat

180

agtgattatg cagtatctgt gaaaagtcga ataaccatca acccagacac atccaagaac

240

cagttctccc tgcagctgaa ctctgtgact cccgaggaca cggctgtgta ttactgtgca

300

agagatcctt acgatttttg gagtggttat cctgatgctt ttgatatctg gggccaaggg

360

acaatggtca ccgtctcttc a

381

<210> 754

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 754

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 755

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 755

Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 756

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 756

Ser Ser Tyr Thr Ser Gly Arg Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 757

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 757

Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 758

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 758

Glu Val Asn

1

<210> 759

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 759

Tyr Thr Ser Gly Arg Thr Leu Tyr

1 5

<210> 760

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 760

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val

35 40 45

Ile Ile Ser Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser His Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Gly

85 90 95

Arg Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Ser Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 761

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 761

cagtctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc

60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttacaact atgtctcctg gtaccaacag

120

cacccaggca aagcccccaa ggtcataatt tctgaggtca ataatcggcc ctcaggggtt

180

tctcatcgct tctctgggtc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc

240

caggctgagg acgaggctga ttatttctgc agctcatata caagtggcag gactctttat

300

gtcttcggaa ctgggagcaa ggtcaccgtc ctaggt

336

<210> 762

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 762

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 763

<211> 254

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 763

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Ser Asp Tyr Ala

50 55 60

Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Pro Tyr Asp Phe Trp Ser Gly Tyr Pro Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Val Ile Ile

180 185 190

Ser Glu Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser His Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Gly Arg Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Ser Lys Val Thr Val Leu Gly

245 250

<210> 764

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 764

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu

130 135 140

Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys

210 215 220

Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 765

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 765

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln

195 200 205

Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 766

<211> 244

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 766

Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Thr Ile Ser Ser Val Val Asp Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Lys

130 135 140

Phe Met Ser Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ser Ala Thr Tyr Arg Asn Ser Gly

180 185 190

Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Tyr Asn Arg Tyr Pro Tyr Thr Ser Phe Phe Phe Thr Lys Leu Glu Ile

225 230 235 240

Lys Arg Arg Ser

<210> 767

<211> 464

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 767

Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Thr Ile Ser Ser Val Val Asp Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Lys

130 135 140

Phe Met Ser Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile Tyr Ser Ala Thr Tyr Arg Asn Ser Gly

180 185 190

Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Tyr Asn Arg Tyr Pro Tyr Thr Ser Phe Phe Phe Thr Lys Leu Glu Ile

225 230 235 240

Lys Arg Arg Ser Lys Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp

245 250 255

Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu

260 265 270

Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu

275 280 285

Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val

290 295 300

Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His

305 310 315 320

Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys

325 330 335

His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser

340 345 350

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

355 360 365

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

370 375 380

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

385 390 395 400

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

405 410 415

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

420 425 430

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

435 440 445

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

450 455 460

<210> 768

<211> 246

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 768

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Ser Thr Ser Gly

100 105 110

Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val Lys

115 120 125

Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser

130 135 140

Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

145 150 155 160

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile

165 170 175

Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn

195 200 205

Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr

210 215 220

Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser

225 230 235 240

Val Thr Val Ser Ser Glu

245

<210> 769

<211> 439

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 769

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Ser Thr Ser Gly

100 105 110

Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val Lys

115 120 125

Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser

130 135 140

Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

145 150 155 160

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile

165 170 175

Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn

195 200 205

Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr

210 215 220

Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser

225 230 235 240

Val Thr Val Ser Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys

245 250 255

Pro Met Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr

260 265 270

Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Lys Arg Gly

275 280 285

Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val

290 295 300

Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Glu Glu Glu

305 310 315 320

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

325 330 335

Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

340 345 350

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

355 360 365

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

370 375 380

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

385 390 395 400

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

405 410 415

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

420 425 430

Gln Ala Leu Pro Pro Arg Leu

435

<210> 770

<211> 819

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 770

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Ser Thr Ser Gly

100 105 110

Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val Lys

115 120 125

Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser

130 135 140

Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

145 150 155 160

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile

165 170 175

Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn

195 200 205

Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr

210 215 220

Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser

225 230 235 240

Val Thr Val Ser Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys

245 250 255

Pro Met Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr

260 265 270

Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Lys Arg Gly

275 280 285

Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val

290 295 300

Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Glu Glu Glu

305 310 315 320

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

325 330 335

Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

340 345 350

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

355 360 365

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

370 375 380

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

385 390 395 400

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

405 410 415

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

420 425 430

Gln Ala Leu Pro Pro Arg Leu Glu Gly Gly Gly Glu Gly Arg Gly Ser

435 440 445

Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Arg Met Leu

450 455 460

Leu Leu Val Thr Ser Leu Leu Leu Cys Glu Leu Pro His Pro Ala Phe

465 470 475 480

Leu Leu Ile Pro Arg Lys Val Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe

485 490 495

Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn

500 505 510

Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg

515 520 525

Gly Asp Ser Phe Thr His Thr Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp

530 535 540

Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala

545 550 555 560

Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile

565 570 575

Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val

580 585 590

Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser

595 600 605

Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn

610 615 620

Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys

625 630 635 640

Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val

645 650 655

Cys His Ala Leu Cys Ser Pro Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg

660 665 670

Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp

675 680 685

Lys Cys Asn Leu Leu Glu Gly Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser

690 695 700

Glu Cys Ile Gln Cys His Pro Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile

705 710 715 720

Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr

725 730 735

Ile Asp Gly Pro His Cys Val Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly

740 745 750

Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys

755 760 765

His Leu Cys His Pro Asn Cys Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu

770 775 780

Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr Gly

785 790 795 800

Met Val Gly Ala Leu Leu Leu Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile Gly

805 810 815

Leu Phe Met

<210> 771

<211> 245

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 771

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Ser Thr Ser Gly

100 105 110

Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val Lys

115 120 125

Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser

130 135 140

Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

145 150 155 160

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile

165 170 175

Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn

195 200 205

Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr

210 215 220

Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser

225 230 235 240

Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 772

<211> 467

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 772

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Ser Thr Ser Gly

100 105 110

Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Val Lys

115 120 125

Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser

130 135 140

Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

145 150 155 160

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile

165 170 175

Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn

195 200 205

Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr

210 215 220

Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser

225 230 235 240

Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro

245 250 255

Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly

260 265 270

Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe

275 280 285

Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu

290 295 300

Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg

305 310 315 320

Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro

325 330 335

Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala

340 345 350

Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

355 360 365

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

370 375 380

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

385 390 395 400

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

405 410 415

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

420 425 430

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

435 440 445

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

450 455 460

Pro Pro Arg

465

<210> 773

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 773

Asp Tyr Gly Val Ser

1 5

<210> 774

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 774

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 775

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 775

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 776

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 776

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 777

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 777

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 778

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 778

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 779

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 779

Asp Tyr Gly Val Ser

1 5

<210> 780

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 780

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 781

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 781

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 782

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 782

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 783

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 783

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 784

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 784

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 785

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 785

Asp Tyr Gly Val Ser

1 5

<210> 786

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 786

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 787

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 787

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 788

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 788

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 789

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 789

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 790

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 790

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 791

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 791

Asp Tyr Gly Val Ser

1 5

<210> 792

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 792

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 793

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 793

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 794

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 794

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 795

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 795

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 796

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 796

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 797

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 797

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro

20

<210> 798

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 798

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccc

63

<210> 799

<211> 45

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 799

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp

35 40 45

<210> 800

<211> 135

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 800

accacgacgc cagcgccgcg accaccaaca ccggcgccca ccatcgcgtc gcagcccctg

60

tccctgcgcc cagaggcgtg ccggccagcg gcggggggcg cagtgcacac gagggggctg

120

gacttcgcct gtgat

135

<210> 801

<211> 24

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 801

Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu

1 5 10 15

Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

20

<210> 802

<211> 72

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 802

atctacattt gggcccctct ggctggtact tgcggggtcc tgctgctttc actcgtgatc

60

actctttact gt

72

<210> 803

<211> 42

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 803

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

1 5 10 15

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

20 25 30

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

35 40

<210> 804

<211> 126

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 804

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

60

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

120

gaactg

126

<210> 805

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 805

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly

1 5 10 15

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

20 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

35 40 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

50 55 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

65 70 75 80

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

85 90 95

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105 110

<210> 806

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 806

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctaca agcaggggca gaaccagctc

60

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

120

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

180

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

240

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

300

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcgg

336

<210> 807

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 807

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

1 5 10 15

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

20 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

35 40 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

50 55 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

65 70 75 80

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

85 90 95

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105 110

<210> 808

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 808

agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc

60

tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc

120

cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat

180

gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc

240

cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc

300

tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc

336

<210> 809

<211> 41

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 809

Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr

1 5 10 15

Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro

20 25 30

Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser

35 40

<210> 810

<211> 123

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 810

aggagtaaga ggagcaggct cctgcacagt gactacatga acatgactcc ccgccgcccc

60

gggcccaccc gcaagcatta ccagccctat gccccaccac gcgacttcgc agcctatcgc

120

tcc

123

<210> 811

<211> 35

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 811

Thr Lys Lys Lys Tyr Ser Ser Ser Val His Asp Pro Asn Gly Glu Tyr

1 5 10 15

Met Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser Arg Leu Thr Asp

20 25 30

Val Thr Leu

35

<210> 812

<211> 105

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 812

acaaaaaaga agtattcatc cagtgtgcac gaccctaacg gtgaatacat gttcatgaga

60

gcagtgaaca cagccaaaaa atccagactc acagatgtga cccta

105

<210> 813

<211> 35

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 813

Thr Lys Lys Lys Tyr Ser Ser Ser Val His Asp Pro Asn Gly Glu Phe

1 5 10 15

Met Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser Arg Leu Thr Asp

20 25 30

Val Thr Leu

35

<210> 814

<211> 230

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 814

Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe

1 5 10 15

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

20 25 30

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

35 40 45

Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

50 55 60

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

65 70 75 80

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

85 90 95

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser

100 105 110

Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

115 120 125

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

130 135 140

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

145 150 155 160

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

165 170 175

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu

180 185 190

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

195 200 205

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

210 215 220

Leu Ser Leu Gly Lys Met

225 230

<210> 815

<211> 690

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 815

gagagcaagt acggccctcc ctgcccccct tgccctgccc ccgagttcct gggcggaccc

60

agcgtgttcc tgttcccccc caagcccaag gacaccctga tgatcagccg gacccccgag

120

gtgacctgtg tggtggtgga cgtgtcccag gaggaccccg aggtccagtt caactggtac

180

gtggacggcg tggaggtgca caacgccaag accaagcccc gggaggagca gttcaatagc

240

acctaccggg tggtgtccgt gctgaccgtg ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggaa

300

tacaagtgta aggtgtccaa caagggcctg cccagcagca tcgagaaaac catcagcaag

360

gccaagggcc agcctcggga gccccaggtg tacaccctgc cccctagcca agaggagatg

420

accaagaacc aggtgtccct gacctgcctg gtgaagggct tctaccccag cgacatcgcc

480

gtggagtggg agagcaacgg ccagcccgag aacaactaca agaccacccc ccctgtgctg

540

gacagcgacg gcagcttctt cctgtacagc cggctgaccg tggacaagag ccggtggcag

600

gagggcaacg tctttagctg ctccgtgatg cacgaggccc tgcacaacca ctacacccag

660

aagagcctga gcctgtccct gggcaagatg

690

<210> 816

<211> 282

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 816

Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro Thr Ala

1 5 10 15

Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala Pro Ala

20 25 30

Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys Glu Lys

35 40 45

Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro Glu Cys Pro

50 55 60

Ser His Thr Gln Pro Leu Gly Val Tyr Leu Leu Thr Pro Ala Val Gln

65 70 75 80

Asp Leu Trp Leu Arg Asp Lys Ala Thr Phe Thr Cys Phe Val Val Gly

85 90 95

Ser Asp Leu Lys Asp Ala His Leu Thr Trp Glu Val Ala Gly Lys Val

100 105 110

Pro Thr Gly Gly Val Glu Glu Gly Leu Leu Glu Arg His Ser Asn Gly

115 120 125

Ser Gln Ser Gln His Ser Arg Leu Thr Leu Pro Arg Ser Leu Trp Asn

130 135 140

Ala Gly Thr Ser Val Thr Cys Thr Leu Asn His Pro Ser Leu Pro Pro

145 150 155 160

Gln Arg Leu Met Ala Leu Arg Glu Pro Ala Ala Gln Ala Pro Val Lys

165 170 175

Leu Ser Leu Asn Leu Leu Ala Ser Ser Asp Pro Pro Glu Ala Ala Ser

180 185 190

Trp Leu Leu Cys Glu Val Ser Gly Phe Ser Pro Pro Asn Ile Leu Leu

195 200 205

Met Trp Leu Glu Asp Gln Arg Glu Val Asn Thr Ser Gly Phe Ala Pro

210 215 220

Ala Arg Pro Pro Pro Gln Pro Gly Ser Thr Thr Phe Trp Ala Trp Ser

225 230 235 240

Val Leu Arg Val Pro Ala Pro Pro Ser Pro Gln Pro Ala Thr Tyr Thr

245 250 255

Cys Val Val Ser His Glu Asp Ser Arg Thr Leu Leu Asn Ala Ser Arg

260 265 270

Ser Leu Glu Val Ser Tyr Val Thr Asp His

275 280

<210> 817

<211> 847

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 817

aggtggcccg aaagtcccaa ggcccaggca tctagtgttc ctactgcaca gccccaggca

60

gaaggcagcc tagccaaagc tactactgca cctgccacta cgcgcaatac tggccgtggc

120

ggggaggaga agaaaaagga gaaagagaaa gaagaacagg aagagaggga gaccaagacc

180

cctgaatgtc catcccatac ccagccgctg ggcgtctatc tcttgactcc cgcagtacag

240

gacttgtggc ttagagataa ggccaccttt acatgtttcg tcgtgggctc tgacctgaag

300

gatgcccatt tgacttggga ggttgccgga aaggtaccca cagggggggt tgaggaaggg

360

ttgctggagc gccattccaa tggctctcag agccagcact caagactcac ccttccgaga

420

tccctgtgga acgccgggac ctctgtcaca tgtactctaa atcatcctag cctgccccca

480

cagcgtctga tggcccttag agagccagcc gcccaggcac cagttaagct tagcctgaat

540

ctgctcgcca gtagtgatcc cccagaggcc gccagctggc tcttatgcga agtgtccggc

600

tttagcccgc ccaacatctt gctcatgtgg ctggaggacc agcgagaagt gaacaccagc

660

ggcttcgctc cagcccggcc cccaccccag ccgggttcta ccacattctg ggcctggagt

720

gtcttaaggg tcccagcacc acctagcccc cagccagcca catacacctg tgttgtgtcc

780

catgaagata gcaggaccct gctaaatgct tctaggagtc tggaggtttc ctacgtgact

840

gaccatt

847

<210> 818

<211> 48

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 818

Gln Arg Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser Pro Val Glu Pro

1 5 10 15

Ala Glu Pro Cys Arg Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu Glu Gly Ser Thr

20 25 30

Ile Pro Ile Gln Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro Ala Cys Ser Pro

35 40 45

<210> 819

<211> 123

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 819

aggagtaaga ggagcaggct cctgcacagt gactacatga acatgactcc ccgccgcccc

60

gggcccaccc gcaagcatta ccagccctat gccccaccac gcgacttcgc agcctatcgc

120

tcc

123

<210> 820

<211> 150

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 820

Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr

1 5 10 15

Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe

20 25 30

Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr

35 40 45

Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu

50 55 60

Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu

65 70 75 80

Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn

85 90 95

Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala

100 105 110

Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg

115 120 125

Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly

130 135 140

Gln Phe Gln Thr Leu Val

145 150

<210> 821

<211> 450

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 821

cccggatggt ttctggactc tccggatcgc ccgtggaatc ccccaacctt ctcaccggca

60

ctcttggttg tgactgaggg cgataatgcg accttcacgt gctcgttctc caacacctcc

120

gaatcattcg tgctgaactg gtaccgcatg agcccgtcaa accagaccga caagctcgcc

180

gcgtttccgg aagatcggtc gcaaccggga caggattgtc ggttccgcgt gactcaactg

240

ccgaatggca gagacttcca catgagcgtg gtccgcgcta ggcgaaacga ctccgggacc

300

tacctgtgcg gagccatctc gctggcgcct aaggcccaaa tcaaagagag cttgagggcc

360

gaactgagag tgaccgagcg cagagctgag gtgccaactg cacatccatc cccatcgcct

420

cggcctgcgg ggcagtttca gaccctggtc

450

<210> 822

<211> 373

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 822

Pro Gly Trp Phe Leu Asp Ser Pro Asp Arg Pro Trp Asn Pro Pro Thr

1 5 10 15

Phe Ser Pro Ala Leu Leu Val Val Thr Glu Gly Asp Asn Ala Thr Phe

20 25 30

Thr Cys Ser Phe Ser Asn Thr Ser Glu Ser Phe Val Leu Asn Trp Tyr

35 40 45

Arg Met Ser Pro Ser Asn Gln Thr Asp Lys Leu Ala Ala Phe Pro Glu

50 55 60

Asp Arg Ser Gln Pro Gly Gln Asp Cys Arg Phe Arg Val Thr Gln Leu

65 70 75 80

Pro Asn Gly Arg Asp Phe His Met Ser Val Val Arg Ala Arg Arg Asn

85 90 95

Asp Ser Gly Thr Tyr Leu Cys Gly Ala Ile Ser Leu Ala Pro Lys Ala

100 105 110

Gln Ile Lys Glu Ser Leu Arg Ala Glu Leu Arg Val Thr Glu Arg Arg

115 120 125

Ala Glu Val Pro Thr Ala His Pro Ser Pro Ser Pro Arg Pro Ala Gly

130 135 140

Gln Phe Gln Thr Leu Val Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr

145 150 155 160

Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala

165 170 175

Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe

180 185 190

Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val

195 200 205

Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys

210 215 220

Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr

225 230 235 240

Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu

245 250 255

Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro

260 265 270

Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly

275 280 285

Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro

290 295 300

Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr

305 310 315 320

Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly

325 330 335

Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln

340 345 350

Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln

355 360 365

Ala Leu Pro Pro Arg

370

<210> 823

<211> 1119

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 823

cccggatggt ttctggactc tccggatcgc ccgtggaatc ccccaacctt ctcaccggca

60

ctcttggttg tgactgaggg cgataatgcg accttcacgt gctcgttctc caacacctcc

120

gaatcattcg tgctgaactg gtaccgcatg agcccgtcaa accagaccga caagctcgcc

180

gcgtttccgg aagatcggtc gcaaccggga caggattgtc ggttccgcgt gactcaactg

240

ccgaatggca gagacttcca catgagcgtg gtccgcgcta ggcgaaacga ctccgggacc

300

tacctgtgcg gagccatctc gctggcgcct aaggcccaaa tcaaagagag cttgagggcc

360

gaactgagag tgaccgagcg cagagctgag gtgccaactg cacatccatc cccatcgcct

420

cggcctgcgg ggcagtttca gaccctggtc acgaccactc cggcgccgcg cccaccgact

480

ccggccccaa ctatcgcgag ccagcccctg tcgctgaggc cggaagcatg ccgccctgcc

540

gccggaggtg ctgtgcatac ccggggattg gacttcgcat gcgacatcta catttgggct

600

cctctcgccg gaacttgtgg cgtgctcctt ctgtccctgg tcatcaccct gtactgcaag

660

cggggtcgga aaaagcttct gtacattttc aagcagccct tcatgaggcc cgtgcaaacc

720

acccaggagg aggacggttg ctcctgccgg ttccccgaag aggaagaagg aggttgcgag

780

ctgcgcgtga agttctcccg gagcgccgac gcccccgcct ataagcaggg ccagaaccag

840

ctgtacaacg aactgaacct gggacggcgg gaagagtacg atgtgctgga caagcggcgc

900

ggccgggacc ccgaaatggg cgggaagcct agaagaaaga accctcagga aggcctgtat

960

aacgagctgc agaaggacaa gatggccgag gcctactccg aaattgggat gaagggagag

1020

cggcggaggg gaaaggggca cgacggcctg taccaaggac tgtccaccgc caccaaggac

1080

acatacgatg ccctgcacat gcaggccctt ccccctcgc

1119

<210> 824

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 824

Asp Val Pro Asp Tyr Ala Ser Leu Gly Gly Pro Ser Ser Pro Lys Lys

1 5 10 15

Lys Arg Lys Val Ser Arg Gly Val Gln Val Glu Thr Ile Ser Pro Gly

20 25 30

Asp Gly Arg Thr Phe Pro Lys Arg Gly Gln Thr Cys Val Val His Tyr

35 40 45

Thr Gly Met Leu Glu Asp Gly Lys Lys Phe Asp Ser Ser Arg Asp Arg

50 55 60

Asn Lys Pro Phe Lys Phe Met Leu Gly Lys Gln Glu Val Ile Arg Gly

65 70 75 80

Trp Glu Glu Gly Val Ala Gln Met Ser Val Gly Gln Arg Ala Lys Leu

85 90 95

Thr Ile Ser Pro Asp Tyr Ala Tyr Gly Ala Thr Gly His Pro Gly Ile

100 105 110

Ile Pro Pro His Ala Thr Leu Val Phe Asp Val Glu Leu Leu Lys Leu

115 120 125

Glu Thr Ser Tyr

130

<210> 825

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 825

Val Gln Val Glu Thr Ile Ser Pro Gly Asp Gly Arg Thr Phe Pro Lys

1 5 10 15

Arg Gly Gln Thr Cys Val Val His Tyr Thr Gly Met Leu Glu Asp Gly

20 25 30

Lys Lys Phe Asp Ser Ser Arg Asp Arg Asn Lys Pro Phe Lys Phe Met

35 40 45

Leu Gly Lys Gln Glu Val Ile Arg Gly Trp Glu Glu Gly Val Ala Gln

50 55 60

Met Ser Val Gly Gln Arg Ala Lys Leu Thr Ile Ser Pro Asp Tyr Ala

65 70 75 80

Tyr Gly Ala Thr Gly His Pro Gly Ile Ile Pro Pro His Ala Thr Leu

85 90 95

Val Phe Asp Val Glu Leu Leu Lys Leu Glu Thr Ser

100 105

<210> 826

<211> 93

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 826

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Glu Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Thr Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys

85 90

<210> 827

<211> 95

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 827

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Ile Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Thr Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys Thr Ser

85 90 95

<210> 828

<211> 95

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 828

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Leu Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Thr Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys Thr Ser

85 90 95

<210> 829

<211> 95

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 829

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Glu Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Leu Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys Thr Ser

85 90 95

<210> 830

<211> 95

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<220>

<221> МОДИФИЦИРОВАННЫЙ_ОСТАТОК

<222> (12)..(12)

<223> Любая аминокислота

<220>

<221> МОДИФИЦИРОВАННЫЙ_ОСТАТОК

<222> (78)..(78)

<223> Любая аминокислота

<400> 830

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Xaa Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Xaa Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys Thr Ser

85 90 95

<210> 831

<211> 95

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 831

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Ile Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Leu Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys Thr Ser

85 90 95

<210> 832

<211> 95

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 832

Ile Leu Trp His Glu Met Trp His Glu Gly Leu Leu Glu Ala Ser Arg

1 5 10 15

Leu Tyr Phe Gly Glu Arg Asn Val Lys Gly Met Phe Glu Val Leu Glu

20 25 30

Pro Leu His Ala Met Met Glu Arg Gly Pro Gln Thr Leu Lys Glu Thr

35 40 45

Ser Phe Asn Gln Ala Tyr Gly Arg Asp Leu Met Glu Ala Gln Glu Trp

50 55 60

Cys Arg Lys Tyr Met Lys Ser Gly Asn Val Lys Asp Leu Leu Gln Ala

65 70 75 80

Trp Asp Leu Tyr Tyr His Val Phe Arg Arg Ile Ser Lys Thr Ser

85 90 95

<210> 833

<211> 1184

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 833

cgtgaggctc cggtgcccgt cagtgggcag agcgcacatc gcccacagtc cccgagaagt

60

tggggggagg ggtcggcaat tgaaccggtg cctagagaag gtggcgcggg gtaaactggg

120

aaagtgatgt cgtgtactgg ctccgccttt ttcccgaggg tgggggagaa ccgtatataa

180

gtgcagtagt cgccgtgaac gttctttttc gcaacgggtt tgccgccaga acacaggtaa

240

gtgccgtgtg tggttcccgc gggcctggcc tctttacggg ttatggccct tgcgtgcctt

300

gaattacttc cacctggctg cagtacgtga ttcttgatcc cgagcttcgg gttggaagtg

360

ggtgggagag ttcgaggcct tgcgcttaag gagccccttc gcctcgtgct tgagttgagg

420

cctggcctgg gcgctggggc cgccgcgtgc gaatctggtg gcaccttcgc gcctgtctcg

480

ctgctttcga taagtctcta gccatttaaa atttttgatg acctgctgcg acgctttttt

540

tctggcaaga tagtcttgta aatgcgggcc aagatctgca cactggtatt tcggtttttg

600

gggccgcggg cggcgacggg gcccgtgcgt cccagcgcac atgttcggcg aggcggggcc

660

tgcgagcgcg gccaccgaga atcggacggg ggtagtctca agctggccgg cctgctctgg

720

tgcctggcct cgcgccgccg tgtatcgccc cgccctgggc ggcaaggctg gcccggtcgg

780

caccagttgc gtgagcggaa agatggccgc ttcccggccc tgctgcaggg agctcaaaat

840

ggaggacgcg gcgctcggga gagcgggcgg gtgagtcacc cacacaaagg aaaagggcct

900

ttccgtcctc agccgtcgct tcatgtgact ccacggagta ccgggcgccg tccaggcacc

960

tcgattagtt ctcgagcttt tggagtacgt cgtctttagg ttggggggag gggttttatg

1020

cgatggagtt tccccacact gagtgggtgg agactgaagt taggccagct tggcacttga

1080

tgtaattctc cttggaattt gccctttttg agtttggatc ttggttcatt ctcaagcctc

1140

agacagtggt tcaaagtttt tttcttccat ttcaggtgtc gtga

1184

<210> 834

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 834

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 835

<211> 243

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 835

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly

130 135 140

Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp

145 150 155 160

Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys

165 170 175

Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val

180 185 190

Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr

195 200 205

Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser

210 215 220

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu

225 230 235 240

Thr Val Leu

<210> 836

<211> 238

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 836

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gln

115 120 125

Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser

130 135 140

Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn

145 150 155 160

Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met

165 170 175

Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser

180 185 190

Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln

195 200 205

Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser

210 215 220

Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

225 230 235

<210> 837

<211> 243

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 837

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly

130 135 140

Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp

145 150 155 160

Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Asp His Pro Gly Lys

165 170 175

Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val

180 185 190

Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr

195 200 205

Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser

210 215 220

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu

225 230 235 240

Thr Val Leu

<210> 838

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 838

Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys

1 5

<210> 839

<211> 127

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 839

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 840

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 840

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Asp His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 841

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 841

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 842

<400> 842

000

<210> 843

<400> 843

000

<210> 844

<211> 2241

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 844

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagct tggcagaagc cgccgcgaaa gaagtgcagc ttcaacaatc aggaccagga

840

ctcgtcaaac catcacagac cctctccctc acatgtgcca tctccgggga ctccatgttg

900

agcaattccg acacttggaa ttggattaga caaagcccgt cccggggtct ggaatggttg

960

ggacgcacct accaccggtc tacttggtac gacgactacg cgtcatccgt gcggggaaga

1020

gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac cagtacagcc tgcagcttaa tgccgtgact

1080

cctgaggata cgggcgtcta ctactgcgcc cgcgtccgcc tgcaagacgg gaacagctgg

1140

agcgatgcat tcgatgtctg gggccaggga actatggtca ccgtgtcgtc tgggggcggt

1200

ggatcgggtg gcgggggttc ggggggcggc ggctctcagt ccgctcttac ccaaccggcc

1260

tcagcctcgg ggagccccgg ccagagcgtg accatttcct gcaccggcac ttcatccgac

1320

gtgggcggct acaactacgt gtcctggtac caacagcacc cgggaaaggc ccccaagctc

1380

atgatctacg acgtgtccaa caggccctcg ggagtgtcca accggttctc gggttcgaaa

1440

tcgggaaaca cagccagcct gaccatcagc ggactgcagg ctgaagatga agccgactac

1500

tactgctcct cctacacctc gtcatccacg ctctacgtgt tcggcactgg aactcagctg

1560

actgtgctga ccactacccc agcaccgagg ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc

1620

cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc

1680

cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg

1740

gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg

1800

tacatcttta agcaaccctt catgaggcct gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt

1860

tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc

1920

agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg cagaaccagc tctacaacga actcaatctt

1980

ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc

2040

gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag

2100

atggcagaag cctatagcga gattggtatg aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac

2160

gacggactgt accagggact cagcaccgcc accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg

2220

caggccctgc cgcctcggta a

2241

<210> 845

<211> 746

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 845

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Val

260 265 270

Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu

275 280 285

Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp

290 295 300

Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu

305 310 315 320

Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser

325 330 335

Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr

340 345 350

Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr

355 360 365

Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe

370 375 380

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

385 390 395 400

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu

405 410 415

Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile

420 425 430

Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

435 440 445

Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp

450 455 460

Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys

465 470 475 480

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp

485 490 495

Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

500 505 510

Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Thr Thr Thr Pro Ala

515 520 525

Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser

530 535 540

Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr

545 550 555 560

Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

565 570 575

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

580 585 590

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

595 600 605

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

610 615 620

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg

625 630 635 640

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

645 650 655

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

660 665 670

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

675 680 685

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

690 695 700

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

705 710 715 720

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

725 730 735

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740 745

<210> 846

<211> 2235

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 846

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagcg gagggggagg gagtgaagtg cagcttcaac aatcaggacc aggactcgtc

840

aaaccatcac agaccctctc cctcacatgt gccatctccg gggactccat gttgagcaat

900

tccgacactt ggaattggat tagacaaagc ccgtcccggg gtctggaatg gttgggacgc

960

acctaccacc ggtctacttg gtacgacgac tacgcgtcat ccgtgcgggg aagagtgtcc

1020

atcaacgtgg acacctccaa gaaccagtac agcctgcagc ttaatgccgt gactcctgag

1080

gatacgggcg tctactactg cgcccgcgtc cgcctgcaag acgggaacag ctggagcgat

1140

gcattcgatg tctggggcca gggaactatg gtcaccgtgt cgtctggggg cggtggatcg

1200

ggtggcgggg gttcgggggg cggcggctct cagtccgctc ttacccaacc ggcctcagcc

1260

tcggggagcc ccggccagag cgtgaccatt tcctgcaccg gcacttcatc cgacgtgggc

1320

ggctacaact acgtgtcctg gtaccaacag cacccgggaa aggcccccaa gctcatgatc

1380

tacgacgtgt ccaacaggcc ctcgggagtg tccaaccggt tctcgggttc gaaatcggga

1440

aacacagcca gcctgaccat cagcggactg caggctgaag atgaagccga ctactactgc

1500

tcctcctaca cctcgtcatc cacgctctac gtgttcggca ctggaactca gctgactgtg

1560

ctgaccacta ccccagcacc gaggccaccc accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct

1620

ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt

1680

cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg

1740

ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc

1800

tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc

1860

cggttcccag aggaggagga aggcggctgc gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca

1920

gatgctccag cctaccagca ggggcagaac cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg

1980

agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg agaggacggg acccagaaat gggcgggaag

2040

ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg tacaacgagc tccaaaagga taagatggca

2100

gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga

2160

ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag gacacctatg acgctcttca catgcaggcc

2220

ctgccgcctc ggtaa

2235

<210> 847

<211> 744

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 847

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

260 265 270

Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu

275 280 285

Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp

290 295 300

Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg

305 310 315 320

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg

325 330 335

Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu

340 345 350

Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala

355 360 365

Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

370 375 380

Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser

385 390 395 400

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln

405 410 415

Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys

420 425 430

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr

435 440 445

Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser

450 455 460

Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly

465 470 475 480

Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala

485 490 495

Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe

500 505 510

Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

515 520 525

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

530 535 540

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

545 550 555 560

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

565 570 575

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg

580 585 590

Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro

595 600 605

Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu

610 615 620

Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala

625 630 635 640

Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu

645 650 655

Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly

660 665 670

Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu

675 680 685

Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser

690 695 700

Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly

705 710 715 720

Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu

725 730 735

His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740

<210> 848

<211> 2211

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 848

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagct tggcagaagc cgccgcgaaa gaagtgcagc ttcaacaatc aggaccagga

840

ctcgtcaaac catcacagac cctctccctc acatgtgcca tctccgggga ctccatgttg

900

agcaattccg acacttggaa ttggattaga caaagcccgt cccggggtct ggaatggttg

960

ggacgcacct accaccggtc tacttggtac gacgactacg cgtcatccgt gcggggaaga

1020

gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac cagtacagcc tgcagcttaa tgccgtgact

1080

cctgaggata cgggcgtcta ctactgcgcc cgcgtccgcc tgcaagacgg gaacagctgg

1140

agcgatgcat tcgatgtctg gggccaggga actatggtca ccgtgtcgtc tggcggagga

1200

ggctcccagt ccgctcttac ccaaccggcc tcagcctcgg ggagccccgg ccagagcgtg

1260

accatttcct gcaccggcac ttcatccgac gtgggcggct acaactacgt gtcctggtac

1320

caacagcacc cgggaaaggc ccccaagctc atgatctacg acgtgtccaa caggccctcg

1380

ggagtgtcca accggttctc gggttcgaaa tcgggaaaca cagccagcct gaccatcagc

1440

ggactgcagg ctgaagatga agccgactac tactgctcct cctacacctc gtcatccacg

1500

ctctacgtgt tcggcactgg aactcagctg actgtgctga ccactacccc agcaccgagg

1560

ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt

1620

agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac

1680

atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt

1740

tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg tacatcttta agcaaccctt catgaggcct

1800

gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc

1860

ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg

1920

cagaaccagc tctacaacga actcaatctt ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac

1980

aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag

2040

ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag atggcagaag cctatagcga gattggtatg

2100

aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac gacggactgt accagggact cagcaccgcc

2160

accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg caggccctgc cgcctcggta a

2211

<210> 849

<211> 736

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 849

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Val

260 265 270

Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu

275 280 285

Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp

290 295 300

Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu

305 310 315 320

Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser

325 330 335

Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr

340 345 350

Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr

355 360 365

Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe

370 375 380

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

385 390 395 400

Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro

405 410 415

Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly

420 425 430

Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro

435 440 445

Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn

450 455 460

Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser

465 470 475 480

Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr

485 490 495

Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val

500 505 510

Leu Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile

515 520 525

Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala

530 535 540

Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr

545 550 555 560

Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu

565 570 575

Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile

580 585 590

Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp

595 600 605

Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

610 615 620

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

625 630 635 640

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

645 650 655

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

660 665 670

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

675 680 685

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

690 695 700

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

705 710 715 720

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730 735

<210> 850

<211> 2205

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 850

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagcg gagggggagg gagtgaagtg cagcttcaac aatcaggacc aggactcgtc

840

aaaccatcac agaccctctc cctcacatgt gccatctccg gggactccat gttgagcaat

900

tccgacactt ggaattggat tagacaaagc ccgtcccggg gtctggaatg gttgggacgc

960

acctaccacc ggtctacttg gtacgacgac tacgcgtcat ccgtgcgggg aagagtgtcc

1020

atcaacgtgg acacctccaa gaaccagtac agcctgcagc ttaatgccgt gactcctgag

1080

gatacgggcg tctactactg cgcccgcgtc cgcctgcaag acgggaacag ctggagcgat

1140

gcattcgatg tctggggcca gggaactatg gtcaccgtgt cgtctggcgg aggaggctcc

1200

cagtccgctc ttacccaacc ggcctcagcc tcggggagcc ccggccagag cgtgaccatt

1260

tcctgcaccg gcacttcatc cgacgtgggc ggctacaact acgtgtcctg gtaccaacag

1320

cacccgggaa aggcccccaa gctcatgatc tacgacgtgt ccaacaggcc ctcgggagtg

1380

tccaaccggt tctcgggttc gaaatcggga aacacagcca gcctgaccat cagcggactg

1440

caggctgaag atgaagccga ctactactgc tcctcctaca cctcgtcatc cacgctctac

1500

gtgttcggca ctggaactca gctgactgtg ctgaccacta ccccagcacc gaggccaccc

1560

accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc

1620

gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg

1680

gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt

1740

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

1800

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

1860

gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca gatgctccag cctaccagca ggggcagaac

1920

cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg

1980

agaggacggg acccagaaat gggcgggaag ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg

2040

tacaacgagc tccaaaagga taagatggca gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg

2100

gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag

2160

gacacctatg acgctcttca catgcaggcc ctgccgcctc ggtaa

2205

<210> 851

<211> 734

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 851

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

260 265 270

Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu

275 280 285

Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp

290 295 300

Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg

305 310 315 320

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg

325 330 335

Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu

340 345 350

Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala

355 360 365

Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

370 375 380

Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser

385 390 395 400

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

405 410 415

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

420 425 430

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

435 440 445

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

450 455 460

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

465 470 475 480

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

485 490 495

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Thr

500 505 510

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

515 520 525

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

530 535 540

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

545 550 555 560

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

565 570 575

Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys

580 585 590

Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys

595 600 605

Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val

610 615 620

Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn

625 630 635 640

Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val

645 650 655

Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg

660 665 670

Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys

675 680 685

Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg

690 695 700

Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys

705 710 715 720

Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730

<210> 852

<211> 2241

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 852

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagct tggcagaagc cgccgcgaaa cagtccgctc ttacccaacc ggcctcagcc

840

tcggggagcc ccggccagag cgtgaccatt tcctgcaccg gcacttcatc cgacgtgggc

900

ggctacaact acgtgtcctg gtaccaacag cacccgggaa aggcccccaa gctcatgatc

960

tacgacgtgt ccaacaggcc ctcgggagtg tccaaccggt tctcgggttc gaaatcggga

1020

aacacagcca gcctgaccat cagcggactg caggctgaag atgaagccga ctactactgc

1080

tcctcctaca cctcgtcatc cacgctctac gtgttcggca ctggaactca gctgactgtg

1140

ctggggggcg gtggatcggg tggcgggggt tcggggggcg gcggctctga agtgcagctt

1200

caacaatcag gaccaggact cgtcaaacca tcacagaccc tctccctcac atgtgccatc

1260

tccggggact ccatgttgag caattccgac acttggaatt ggattagaca aagcccgtcc

1320

cggggtctgg aatggttggg acgcacctac caccggtcta cttggtacga cgactacgcg

1380

tcatccgtgc ggggaagagt gtccatcaac gtggacacct ccaagaacca gtacagcctg

1440

cagcttaatg ccgtgactcc tgaggatacg ggcgtctact actgcgcccg cgtccgcctg

1500

caagacggga acagctggag cgatgcattc gatgtctggg gccagggaac tatggtcacc

1560

gtgtcgtcta ccactacccc agcaccgagg ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc

1620

cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc

1680

cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg

1740

gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg

1800

tacatcttta agcaaccctt catgaggcct gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt

1860

tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc

1920

agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg cagaaccagc tctacaacga actcaatctt

1980

ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc

2040

gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag

2100

atggcagaag cctatagcga gattggtatg aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac

2160

gacggactgt accagggact cagcaccgcc accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg

2220

caggccctgc cgcctcggta a

2241

<210> 853

<211> 746

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 853

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Gln Ser

260 265 270

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val

275 280 285

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

290 295 300

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

305 310 315 320

Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

325 330 335

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

340 345 350

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

355 360 365

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly

370 375 380

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu

385 390 395 400

Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu

405 410 415

Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp

420 425 430

Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg

435 440 445

Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg

450 455 460

Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu

465 470 475 480

Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala

485 490 495

Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

500 505 510

Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala

515 520 525

Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser

530 535 540

Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr

545 550 555 560

Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

565 570 575

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

580 585 590

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

595 600 605

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

610 615 620

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg

625 630 635 640

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

645 650 655

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

660 665 670

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

675 680 685

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

690 695 700

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

705 710 715 720

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

725 730 735

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740 745

<210> 854

<211> 2235

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 854

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagcg gagggggagg gagtcagtcc gctcttaccc aaccggcctc agcctcgggg

840

agccccggcc agagcgtgac catttcctgc accggcactt catccgacgt gggcggctac

900

aactacgtgt cctggtacca acagcacccg ggaaaggccc ccaagctcat gatctacgac

960

gtgtccaaca ggccctcggg agtgtccaac cggttctcgg gttcgaaatc gggaaacaca

1020

gccagcctga ccatcagcgg actgcaggct gaagatgaag ccgactacta ctgctcctcc

1080

tacacctcgt catccacgct ctacgtgttc ggcactggaa ctcagctgac tgtgctgggg

1140

ggcggtggat cgggtggcgg gggttcgggg ggcggcggct ctgaagtgca gcttcaacaa

1200

tcaggaccag gactcgtcaa accatcacag accctctccc tcacatgtgc catctccggg

1260

gactccatgt tgagcaattc cgacacttgg aattggatta gacaaagccc gtcccggggt

1320

ctggaatggt tgggacgcac ctaccaccgg tctacttggt acgacgacta cgcgtcatcc

1380

gtgcggggaa gagtgtccat caacgtggac acctccaaga accagtacag cctgcagctt

1440

aatgccgtga ctcctgagga tacgggcgtc tactactgcg cccgcgtccg cctgcaagac

1500

gggaacagct ggagcgatgc attcgatgtc tggggccagg gaactatggt caccgtgtcg

1560

tctaccacta ccccagcacc gaggccaccc accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct

1620

ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt

1680

cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg

1740

ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc

1800

tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc

1860

cggttcccag aggaggagga aggcggctgc gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca

1920

gatgctccag cctaccagca ggggcagaac cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg

1980

agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg agaggacggg acccagaaat gggcgggaag

2040

ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg tacaacgagc tccaaaagga taagatggca

2100

gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga

2160

ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag gacacctatg acgctcttca catgcaggcc

2220

ctgccgcctc ggtaa

2235

<210> 855

<211> 744

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 855

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu

260 265 270

Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile

275 280 285

Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

290 295 300

Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp

305 310 315 320

Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys

325 330 335

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp

340 345 350

Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

355 360 365

Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser

370 375 380

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln

385 390 395 400

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys

405 410 415

Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp

420 425 430

Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr

435 440 445

His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg

450 455 460

Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu

465 470 475 480

Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val

485 490 495

Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly

500 505 510

Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

515 520 525

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

530 535 540

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

545 550 555 560

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

565 570 575

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg

580 585 590

Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro

595 600 605

Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu

610 615 620

Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala

625 630 635 640

Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu

645 650 655

Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly

660 665 670

Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu

675 680 685

Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser

690 695 700

Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly

705 710 715 720

Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu

725 730 735

His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740

<210> 856

<211> 2211

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 856

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagct tggcagaagc cgccgcgaaa cagtccgctc ttacccaacc ggcctcagcc

840

tcggggagcc ccggccagag cgtgaccatt tcctgcaccg gcacttcatc cgacgtgggc

900

ggctacaact acgtgtcctg gtaccaacag cacccgggaa aggcccccaa gctcatgatc

960

tacgacgtgt ccaacaggcc ctcgggagtg tccaaccggt tctcgggttc gaaatcggga

1020

aacacagcca gcctgaccat cagcggactg caggctgaag atgaagccga ctactactgc

1080

tcctcctaca cctcgtcatc cacgctctac gtgttcggca ctggaactca gctgactgtg

1140

ctgggcggag gaggctccga agtgcagctt caacaatcag gaccaggact cgtcaaacca

1200

tcacagaccc tctccctcac atgtgccatc tccggggact ccatgttgag caattccgac

1260

acttggaatt ggattagaca aagcccgtcc cggggtctgg aatggttggg acgcacctac

1320

caccggtcta cttggtacga cgactacgcg tcatccgtgc ggggaagagt gtccatcaac

1380

gtggacacct ccaagaacca gtacagcctg cagcttaatg ccgtgactcc tgaggatacg

1440

ggcgtctact actgcgcccg cgtccgcctg caagacggga acagctggag cgatgcattc

1500

gatgtctggg gccagggaac tatggtcacc gtgtcgtcta ccactacccc agcaccgagg

1560

ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt

1620

agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac

1680

atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt

1740

tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg tacatcttta agcaaccctt catgaggcct

1800

gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc

1860

ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg

1920

cagaaccagc tctacaacga actcaatctt ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac

1980

aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag

2040

ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag atggcagaag cctatagcga gattggtatg

2100

aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac gacggactgt accagggact cagcaccgcc

2160

accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg caggccctgc cgcctcggta a

2211

<210> 857

<211> 736

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 857

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Gln Ser

260 265 270

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val

275 280 285

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

290 295 300

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

305 310 315 320

Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

325 330 335

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

340 345 350

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

355 360 365

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly

370 375 380

Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro

385 390 395 400

Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu

405 410 415

Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly

420 425 430

Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp

435 440 445

Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser

450 455 460

Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr

465 470 475 480

Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp

485 490 495

Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser

500 505 510

Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile

515 520 525

Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala

530 535 540

Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr

545 550 555 560

Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu

565 570 575

Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile

580 585 590

Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp

595 600 605

Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

610 615 620

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

625 630 635 640

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

645 650 655

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

660 665 670

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

675 680 685

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

690 695 700

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

705 710 715 720

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730 735

<210> 858

<211> 734

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 858

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu

260 265 270

Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile

275 280 285

Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

290 295 300

Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp

305 310 315 320

Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys

325 330 335

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp

340 345 350

Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr

355 360 365

Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser

370 375 380

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

385 390 395 400

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

405 410 415

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

420 425 430

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

435 440 445

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

450 455 460

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

465 470 475 480

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

485 490 495

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Thr

500 505 510

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

515 520 525

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

530 535 540

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

545 550 555 560

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

565 570 575

Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys

580 585 590

Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys

595 600 605

Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val

610 615 620

Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn

625 630 635 640

Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val

645 650 655

Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg

660 665 670

Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys

675 680 685

Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg

690 695 700

Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys

705 710 715 720

Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730

<210> 859

<211> 2241

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 859

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaagtgc agcttcaaca atcaggacca ggactcgtca aaccatcaca gaccctctcc

120

ctcacatgtg ccatctccgg ggactccatg ttgagcaatt ccgacacttg gaattggatt

180

agacaaagcc cgtcccgggg tctggaatgg ttgggacgca cctaccaccg gtctacttgg

240

tacgacgact acgcgtcatc cgtgcgggga agagtgtcca tcaacgtgga cacctccaag

300

aaccagtaca gcctgcagct taatgccgtg actcctgagg atacgggcgt ctactactgc

360

gcccgcgtcc gcctgcaaga cgggaacagc tggagcgatg cattcgatgt ctggggccag

420

ggaactatgg tcaccgtgtc gtctgggggc ggtggatcgg gtggcggggg ttcggggggc

480

ggcggctctc agtccgctct tacccaaccg gcctcagcct cggggagccc cggccagagc

540

gtgaccattt cctgcaccgg cacttcatcc gacgtgggcg gctacaacta cgtgtcctgg

600

taccaacagc acccgggaaa ggcccccaag ctcatgatct acgacgtgtc caacaggccc

660

tcgggagtgt ccaaccggtt ctcgggttcg aaatcgggaa acacagccag cctgaccatc

720

agcggactgc aggctgaaga tgaagccgac tactactgct cctcctacac ctcgtcatcc

780

acgctctacg tgttcggcac tggaactcag ctgactgtgc tgttggcaga agccgccgcg

840

aaagaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

900

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

960

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

1020

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

1080

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

1140

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

1200

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

1260

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

1320

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

1380

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

1440

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

1500

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

1560

gtgtccagca ccactacccc agcaccgagg ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc

1620

cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc

1680

cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg

1740

gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg

1800

tacatcttta agcaaccctt catgaggcct gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt

1860

tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc

1920

agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg cagaaccagc tctacaacga actcaatctt

1980

ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc

2040

gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag

2100

atggcagaag cctatagcga gattggtatg aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac

2160

gacggactgt accagggact cagcaccgcc accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg

2220

caggccctgc cgcctcggta a

2241

<210> 860

<211> 746

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 860

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp

35 40 45

Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro

50 55 60

Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp

65 70 75 80

Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val

85 90 95

Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro

100 105 110

Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly

115 120 125

Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

130 135 140

Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser

165 170 175

Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val

180 185 190

Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala

195 200 205

Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser

210 215 220

Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile

225 230 235 240

Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr

245 250 255

Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr

260 265 270

Val Leu Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ile Val Met Thr Gln Ser

275 280 285

Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys

290 295 300

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys

305 310 315 320

Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His

325 330 335

Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr

340 345 350

Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe

355 360 365

Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys

370 375 380

Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

385 390 395 400

Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys

405 410 415

Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu

420 425 430

Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu

435 440 445

Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser

450 455 460

Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln

465 470 475 480

Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr

485 490 495

Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

500 505 510

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala

515 520 525

Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser

530 535 540

Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr

545 550 555 560

Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

565 570 575

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

580 585 590

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

595 600 605

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

610 615 620

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg

625 630 635 640

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

645 650 655

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

660 665 670

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

675 680 685

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

690 695 700

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

705 710 715 720

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

725 730 735

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740 745

<210> 861

<211> 2235

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 861

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaagtgc agcttcaaca atcaggacca ggactcgtca aaccatcaca gaccctctcc

120

ctcacatgtg ccatctccgg ggactccatg ttgagcaatt ccgacacttg gaattggatt

180

agacaaagcc cgtcccgggg tctggaatgg ttgggacgca cctaccaccg gtctacttgg

240

tacgacgact acgcgtcatc cgtgcgggga agagtgtcca tcaacgtgga cacctccaag

300

aaccagtaca gcctgcagct taatgccgtg actcctgagg atacgggcgt ctactactgc

360

gcccgcgtcc gcctgcaaga cgggaacagc tggagcgatg cattcgatgt ctggggccag

420

ggaactatgg tcaccgtgtc gtctgggggc ggtggatcgg gtggcggggg ttcggggggc

480

ggcggctctc agtccgctct tacccaaccg gcctcagcct cggggagccc cggccagagc

540

gtgaccattt cctgcaccgg cacttcatcc gacgtgggcg gctacaacta cgtgtcctgg

600

taccaacagc acccgggaaa ggcccccaag ctcatgatct acgacgtgtc caacaggccc

660

tcgggagtgt ccaaccggtt ctcgggttcg aaatcgggaa acacagccag cctgaccatc

720

agcggactgc aggctgaaga tgaagccgac tactactgct cctcctacac ctcgtcatcc

780

acgctctacg tgttcggcac tggaactcag ctgactgtgc tgggaggggg agggagtgaa

840

attgtgatga cccagtcacc cgccactctt agcctttcac ccggtgagcg cgcaaccctg

900

tcttgcagag cctcccaaga catctcaaaa taccttaatt ggtatcaaca gaagcccgga

960

caggctcctc gccttctgat ctaccacacc agccggctcc attctggaat ccctgccagg

1020

ttcagcggta gcggatctgg gaccgactac accctcacta tcagctcact gcagccagag

1080

gacttcgctg tctatttctg tcagcaaggg aacaccctgc cctacacctt tggacagggc

1140

accaagctcg agattaaagg tggaggtggc agcggaggag gtgggtccgg cggtggagga

1200

agccaggtcc aactccaaga aagcggaccg ggtcttgtga agccatcaga aactctttca

1260

ctgacttgta ctgtgagcgg agtgtctctc cccgattacg gggtgtcttg gatcagacag

1320

ccaccgggga agggtctgga atggattgga gtgatttggg gctctgagac tacttactac

1380

caatcatccc tcaagtcacg cgtcaccatc tcaaaggaca actctaagaa tcaggtgtca

1440

ctgaaactgt catctgtgac cgcagccgac accgccgtgt actattgcgc taagcattac

1500

tattatggcg ggagctacgc aatggattac tggggacagg gtactctggt caccgtgtcc

1560

agcaccacta ccccagcacc gaggccaccc accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct

1620

ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt

1680

cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg

1740

ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc

1800

tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc

1860

cggttcccag aggaggagga aggcggctgc gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca

1920

gatgctccag cctaccagca ggggcagaac cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg

1980

agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg agaggacggg acccagaaat gggcgggaag

2040

ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg tacaacgagc tccaaaagga taagatggca

2100

gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga

2160

ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag gacacctatg acgctcttca catgcaggcc

2220

ctgccgcctc ggtaa

2235

<210> 862

<211> 744

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 862

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp

35 40 45

Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro

50 55 60

Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp

65 70 75 80

Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val

85 90 95

Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro

100 105 110

Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly

115 120 125

Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

130 135 140

Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

145 150 155 160

Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser

165 170 175

Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val

180 185 190

Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala

195 200 205

Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser

210 215 220

Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile

225 230 235 240

Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr

245 250 255

Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr

260 265 270

Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

275 280 285

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

290 295 300

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

305 310 315 320

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

325 330 335

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

340 345 350

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

355 360 365

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

370 375 380

Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

385 390 395 400

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

405 410 415

Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

420 425 430

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

435 440 445

Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu

450 455 460

Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser

465 470 475 480

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

485 490 495

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

500 505 510

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

515 520 525

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

530 535 540

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

545 550 555 560

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

565 570 575

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg

580 585 590

Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro

595 600 605

Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu

610 615 620

Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala

625 630 635 640

Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu

645 650 655

Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly

660 665 670

Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu

675 680 685

Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser

690 695 700

Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly

705 710 715 720

Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu

725 730 735

His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740

<210> 863

<211> 2211

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 863

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaagtgc agcttcaaca atcaggacca ggactcgtca aaccatcaca gaccctctcc

120

ctcacatgtg ccatctccgg ggactccatg ttgagcaatt ccgacacttg gaattggatt

180

agacaaagcc cgtcccgggg tctggaatgg ttgggacgca cctaccaccg gtctacttgg

240

tacgacgact acgcgtcatc cgtgcgggga agagtgtcca tcaacgtgga cacctccaag

300

aaccagtaca gcctgcagct taatgccgtg actcctgagg atacgggcgt ctactactgc

360

gcccgcgtcc gcctgcaaga cgggaacagc tggagcgatg cattcgatgt ctggggccag

420

ggaactatgg tcaccgtgtc gtctggcgga ggaggctccc agtccgctct tacccaaccg

480

gcctcagcct cggggagccc cggccagagc gtgaccattt cctgcaccgg cacttcatcc

540

gacgtgggcg gctacaacta cgtgtcctgg taccaacagc acccgggaaa ggcccccaag

600

ctcatgatct acgacgtgtc caacaggccc tcgggagtgt ccaaccggtt ctcgggttcg

660

aaatcgggaa acacagccag cctgaccatc agcggactgc aggctgaaga tgaagccgac

720

tactactgct cctcctacac ctcgtcatcc acgctctacg tgttcggcac tggaactcag

780

ctgactgtgc tgttggcaga agccgccgcg aaagaaattg tgatgaccca gtcacccgcc

840

actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc

900

tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac

960

cacaccagcc ggctccattc tggaatccct gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc

1020

gactacaccc tcactatcag ctcactgcag ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag

1080

caagggaaca ccctgcccta cacctttgga cagggcacca agctcgagat taaaggtgga

1140

ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc

1200

ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg

1260

tctctccccg attacggggt gtcttggatc agacagccac cggggaaggg tctggaatgg

1320

attggagtga tttggggctc tgagactact tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc

1380

accatctcaa aggacaactc taagaatcag gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca

1440

gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag cattactatt atggcgggag ctacgcaatg

1500

gattactggg gacagggtac tctggtcacc gtgtccagca ccactacccc agcaccgagg

1560

ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt

1620

agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac

1680

atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt

1740

tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg tacatcttta agcaaccctt catgaggcct

1800

gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc

1860

ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg

1920

cagaaccagc tctacaacga actcaatctt ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac

1980

aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag

2040

ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag atggcagaag cctatagcga gattggtatg

2100

aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac gacggactgt accagggact cagcaccgcc

2160

accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg caggccctgc cgcctcggta a

2211

<210> 864

<211> 736

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 864

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp

35 40 45

Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro

50 55 60

Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp

65 70 75 80

Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val

85 90 95

Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro

100 105 110

Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly

115 120 125

Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

130 135 140

Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro

145 150 155 160

Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr

165 170 175

Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln

180 185 190

Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn

195 200 205

Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn

210 215 220

Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly

245 250 255

Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu

260 265 270

Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu

275 280 285

Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu

290 295 300

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

305 310 315 320

His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

325 330 335

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

340 345 350

Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

355 360 365

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly

370 375 380

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser

385 390 395 400

Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr

405 410 415

Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln

420 425 430

Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu

435 440 445

Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys

450 455 460

Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala

465 470 475 480

Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly

485 490 495

Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

500 505 510

Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile

515 520 525

Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala

530 535 540

Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr

545 550 555 560

Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu

565 570 575

Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile

580 585 590

Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp

595 600 605

Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

610 615 620

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

625 630 635 640

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

645 650 655

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

660 665 670

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

675 680 685

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

690 695 700

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

705 710 715 720

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730 735

<210> 865

<211> 2205

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 865

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaagtgc agcttcaaca atcaggacca ggactcgtca aaccatcaca gaccctctcc

120

ctcacatgtg ccatctccgg ggactccatg ttgagcaatt ccgacacttg gaattggatt

180

agacaaagcc cgtcccgggg tctggaatgg ttgggacgca cctaccaccg gtctacttgg

240

tacgacgact acgcgtcatc cgtgcgggga agagtgtcca tcaacgtgga cacctccaag

300

aaccagtaca gcctgcagct taatgccgtg actcctgagg atacgggcgt ctactactgc

360

gcccgcgtcc gcctgcaaga cgggaacagc tggagcgatg cattcgatgt ctggggccag

420

ggaactatgg tcaccgtgtc gtctggcgga ggaggctccc agtccgctct tacccaaccg

480

gcctcagcct cggggagccc cggccagagc gtgaccattt cctgcaccgg cacttcatcc

540

gacgtgggcg gctacaacta cgtgtcctgg taccaacagc acccgggaaa ggcccccaag

600

ctcatgatct acgacgtgtc caacaggccc tcgggagtgt ccaaccggtt ctcgggttcg

660

aaatcgggaa acacagccag cctgaccatc agcggactgc aggctgaaga tgaagccgac

720

tactactgct cctcctacac ctcgtcatcc acgctctacg tgttcggcac tggaactcag

780

ctgactgtgc tgggaggggg agggagtgaa attgtgatga cccagtcacc cgccactctt

840

agcctttcac ccggtgagcg cgcaaccctg tcttgcagag cctcccaaga catctcaaaa

900

taccttaatt ggtatcaaca gaagcccgga caggctcctc gccttctgat ctaccacacc

960

agccggctcc attctggaat ccctgccagg ttcagcggta gcggatctgg gaccgactac

1020

accctcacta tcagctcact gcagccagag gacttcgctg tctatttctg tcagcaaggg

1080

aacaccctgc cctacacctt tggacagggc accaagctcg agattaaagg tggaggtggc

1140

agcggaggag gtgggtccgg cggtggagga agccaggtcc aactccaaga aagcggaccg

1200

ggtcttgtga agccatcaga aactctttca ctgacttgta ctgtgagcgg agtgtctctc

1260

cccgattacg gggtgtcttg gatcagacag ccaccgggga agggtctgga atggattgga

1320

gtgatttggg gctctgagac tacttactac caatcatccc tcaagtcacg cgtcaccatc

1380

tcaaaggaca actctaagaa tcaggtgtca ctgaaactgt catctgtgac cgcagccgac

1440

accgccgtgt actattgcgc taagcattac tattatggcg ggagctacgc aatggattac

1500

tggggacagg gtactctggt caccgtgtcc agcaccacta ccccagcacc gaggccaccc

1560

accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc

1620

gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg

1680

gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt

1740

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

1800

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

1860

gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca gatgctccag cctaccagca ggggcagaac

1920

cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg

1980

agaggacggg acccagaaat gggcgggaag ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg

2040

tacaacgagc tccaaaagga taagatggca gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg

2100

gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag

2160

gacacctatg acgctcttca catgcaggcc ctgccgcctc ggtaa

2205

<210> 866

<211> 734

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 866

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp

35 40 45

Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro

50 55 60

Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp

65 70 75 80

Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val

85 90 95

Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro

100 105 110

Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly

115 120 125

Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val

130 135 140

Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro

145 150 155 160

Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr

165 170 175

Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln

180 185 190

Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn

195 200 205

Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn

210 215 220

Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly

245 250 255

Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val

260 265 270

Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala

275 280 285

Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp

290 295 300

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr

305 310 315 320

Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

325 330 335

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

340 345 350

Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly

355 360 365

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

370 375 380

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro

385 390 395 400

Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser

405 410 415

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro

420 425 430

Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr

435 440 445

Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn

450 455 460

Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp

465 470 475 480

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr

485 490 495

Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr

500 505 510

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

515 520 525

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

530 535 540

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

545 550 555 560

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

565 570 575

Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys

580 585 590

Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys

595 600 605

Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val

610 615 620

Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn

625 630 635 640

Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val

645 650 655

Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg

660 665 670

Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys

675 680 685

Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg

690 695 700

Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys

705 710 715 720

Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730

<210> 867

<211> 2241

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 867

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccagtccg ctcttaccca accggcctca gcctcgggga gccccggcca gagcgtgacc

120

atttcctgca ccggcacttc atccgacgtg ggcggctaca actacgtgtc ctggtaccaa

180

cagcacccgg gaaaggcccc caagctcatg atctacgacg tgtccaacag gccctcggga

240

gtgtccaacc ggttctcggg ttcgaaatcg ggaaacacag ccagcctgac catcagcgga

300

ctgcaggctg aagatgaagc cgactactac tgctcctcct acacctcgtc atccacgctc

360

tacgtgttcg gcactggaac tcagctgact gtgctggggg gcggtggatc gggtggcggg

420

ggttcggggg gcggcggctc tgaagtgcag cttcaacaat caggaccagg actcgtcaaa

480

ccatcacaga ccctctccct cacatgtgcc atctccgggg actccatgtt gagcaattcc

540

gacacttgga attggattag acaaagcccg tcccggggtc tggaatggtt gggacgcacc

600

taccaccggt ctacttggta cgacgactac gcgtcatccg tgcggggaag agtgtccatc

660

aacgtggaca cctccaagaa ccagtacagc ctgcagctta atgccgtgac tcctgaggat

720

acgggcgtct actactgcgc ccgcgtccgc ctgcaagacg ggaacagctg gagcgatgca

780

ttcgatgtct ggggccaggg aactatggtc accgtgtcgt ctttggcaga agccgccgcg

840

aaagaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

900

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

960

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

1020

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

1080

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

1140

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

1200

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

1260

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

1320

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

1380

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

1440

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

1500

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

1560

gtgtccagca ccactacccc agcaccgagg ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc

1620

cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc

1680

cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg

1740

gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg

1800

tacatcttta agcaaccctt catgaggcct gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt

1860

tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc

1920

agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg cagaaccagc tctacaacga actcaatctt

1980

ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc

2040

gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag

2100

atggcagaag cctatagcga gattggtatg aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac

2160

gacggactgt accagggact cagcaccgcc accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg

2220

caggccctgc cgcctcggta a

2241

<210> 868

<211> 746

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 868

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser

20 25 30

Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser

35 40 45

Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly

50 55 60

Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly

65 70 75 80

Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu

85 90 95

Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser

100 105 110

Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln

115 120 125

Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

130 135 140

Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys

145 150 155 160

Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met

165 170 175

Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg

180 185 190

Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

195 200 205

Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr

210 215 220

Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp

225 230 235 240

Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser

245 250 255

Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val

260 265 270

Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ile Val Met Thr Gln Ser

275 280 285

Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys

290 295 300

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys

305 310 315 320

Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His

325 330 335

Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr

340 345 350

Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe

355 360 365

Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys

370 375 380

Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

385 390 395 400

Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys

405 410 415

Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu

420 425 430

Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu

435 440 445

Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser

450 455 460

Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln

465 470 475 480

Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr

485 490 495

Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

500 505 510

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala

515 520 525

Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser

530 535 540

Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr

545 550 555 560

Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

565 570 575

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

580 585 590

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

595 600 605

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

610 615 620

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg

625 630 635 640

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

645 650 655

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

660 665 670

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

675 680 685

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

690 695 700

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

705 710 715 720

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

725 730 735

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740 745

<210> 869

<211> 2235

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 869

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccagtccg ctcttaccca accggcctca gcctcgggga gccccggcca gagcgtgacc

120

atttcctgca ccggcacttc atccgacgtg ggcggctaca actacgtgtc ctggtaccaa

180

cagcacccgg gaaaggcccc caagctcatg atctacgacg tgtccaacag gccctcggga

240

gtgtccaacc ggttctcggg ttcgaaatcg ggaaacacag ccagcctgac catcagcgga

300

ctgcaggctg aagatgaagc cgactactac tgctcctcct acacctcgtc atccacgctc

360

tacgtgttcg gcactggaac tcagctgact gtgctggggg gcggtggatc gggtggcggg

420

ggttcggggg gcggcggctc tgaagtgcag cttcaacaat caggaccagg actcgtcaaa

480

ccatcacaga ccctctccct cacatgtgcc atctccgggg actccatgtt gagcaattcc

540

gacacttgga attggattag acaaagcccg tcccggggtc tggaatggtt gggacgcacc

600

taccaccggt ctacttggta cgacgactac gcgtcatccg tgcggggaag agtgtccatc

660

aacgtggaca cctccaagaa ccagtacagc ctgcagctta atgccgtgac tcctgaggat

720

acgggcgtct actactgcgc ccgcgtccgc ctgcaagacg ggaacagctg gagcgatgca

780

ttcgatgtct ggggccaggg aactatggtc accgtgtcgt ctggaggggg agggagtgaa

840

attgtgatga cccagtcacc cgccactctt agcctttcac ccggtgagcg cgcaaccctg

900

tcttgcagag cctcccaaga catctcaaaa taccttaatt ggtatcaaca gaagcccgga

960

caggctcctc gccttctgat ctaccacacc agccggctcc attctggaat ccctgccagg

1020

ttcagcggta gcggatctgg gaccgactac accctcacta tcagctcact gcagccagag

1080

gacttcgctg tctatttctg tcagcaaggg aacaccctgc cctacacctt tggacagggc

1140

accaagctcg agattaaagg tggaggtggc agcggaggag gtgggtccgg cggtggagga

1200

agccaggtcc aactccaaga aagcggaccg ggtcttgtga agccatcaga aactctttca

1260

ctgacttgta ctgtgagcgg agtgtctctc cccgattacg gggtgtcttg gatcagacag

1320

ccaccgggga agggtctgga atggattgga gtgatttggg gctctgagac tacttactac

1380

caatcatccc tcaagtcacg cgtcaccatc tcaaaggaca actctaagaa tcaggtgtca

1440

ctgaaactgt catctgtgac cgcagccgac accgccgtgt actattgcgc taagcattac

1500

tattatggcg ggagctacgc aatggattac tggggacagg gtactctggt caccgtgtcc

1560

agcaccacta ccccagcacc gaggccaccc accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct

1620

ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt

1680

cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg

1740

ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc

1800

tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc

1860

cggttcccag aggaggagga aggcggctgc gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca

1920

gatgctccag cctaccagca ggggcagaac cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg

1980

agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg agaggacggg acccagaaat gggcgggaag

2040

ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg tacaacgagc tccaaaagga taagatggca

2100

gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga

2160

ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag gacacctatg acgctcttca catgcaggcc

2220

ctgccgcctc ggtaa

2235

<210> 870

<211> 744

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 870

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser

20 25 30

Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser

35 40 45

Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly

50 55 60

Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly

65 70 75 80

Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu

85 90 95

Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser

100 105 110

Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln

115 120 125

Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

130 135 140

Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys

145 150 155 160

Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met

165 170 175

Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg

180 185 190

Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp

195 200 205

Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr

210 215 220

Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp

225 230 235 240

Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser

245 250 255

Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val

260 265 270

Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

275 280 285

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

290 295 300

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

305 310 315 320

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

325 330 335

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

340 345 350

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

355 360 365

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

370 375 380

Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

385 390 395 400

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

405 410 415

Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

420 425 430

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

435 440 445

Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu

450 455 460

Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser

465 470 475 480

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

485 490 495

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

500 505 510

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

515 520 525

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

530 535 540

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

545 550 555 560

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

565 570 575

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg

580 585 590

Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro

595 600 605

Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu

610 615 620

Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala

625 630 635 640

Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu

645 650 655

Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly

660 665 670

Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu

675 680 685

Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser

690 695 700

Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly

705 710 715 720

Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu

725 730 735

His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

740

<210> 871

<211> 2211

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 871

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccagtccg ctcttaccca accggcctca gcctcgggga gccccggcca gagcgtgacc

120

atttcctgca ccggcacttc atccgacgtg ggcggctaca actacgtgtc ctggtaccaa

180

cagcacccgg gaaaggcccc caagctcatg atctacgacg tgtccaacag gccctcggga

240

gtgtccaacc ggttctcggg ttcgaaatcg ggaaacacag ccagcctgac catcagcgga

300

ctgcaggctg aagatgaagc cgactactac tgctcctcct acacctcgtc atccacgctc

360

tacgtgttcg gcactggaac tcagctgact gtgctgggcg gaggaggctc cgaagtgcag

420

cttcaacaat caggaccagg actcgtcaaa ccatcacaga ccctctccct cacatgtgcc

480

atctccgggg actccatgtt gagcaattcc gacacttgga attggattag acaaagcccg

540

tcccggggtc tggaatggtt gggacgcacc taccaccggt ctacttggta cgacgactac

600

gcgtcatccg tgcggggaag agtgtccatc aacgtggaca cctccaagaa ccagtacagc

660

ctgcagctta atgccgtgac tcctgaggat acgggcgtct actactgcgc ccgcgtccgc

720

ctgcaagacg ggaacagctg gagcgatgca ttcgatgtct ggggccaggg aactatggtc

780

accgtgtcgt ctttggcaga agccgccgcg aaagaaattg tgatgaccca gtcacccgcc

840

actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc

900

tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac

960

cacaccagcc ggctccattc tggaatccct gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc

1020

gactacaccc tcactatcag ctcactgcag ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag

1080

caagggaaca ccctgcccta cacctttgga cagggcacca agctcgagat taaaggtgga

1140

ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc

1200

ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg

1260

tctctccccg attacggggt gtcttggatc agacagccac cggggaaggg tctggaatgg

1320

attggagtga tttggggctc tgagactact tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc

1380

accatctcaa aggacaactc taagaatcag gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca

1440

gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag cattactatt atggcgggag ctacgcaatg

1500

gattactggg gacagggtac tctggtcacc gtgtccagca ccactacccc agcaccgagg

1560

ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt

1620

agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac

1680

atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt

1740

tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg tacatcttta agcaaccctt catgaggcct

1800

gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc

1860

ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc agcgcagatg ctccagccta ccagcagggg

1920

cagaaccagc tctacaacga actcaatctt ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac

1980

aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag

2040

ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag atggcagaag cctatagcga gattggtatg

2100

aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac gacggactgt accagggact cagcaccgcc

2160

accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg caggccctgc cgcctcggta a

2211

<210> 872

<211> 736

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 872

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser

20 25 30

Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser

35 40 45

Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly

50 55 60

Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly

65 70 75 80

Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu

85 90 95

Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser

100 105 110

Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln

115 120 125

Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser

130 135 140

Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala

145 150 155 160

Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile

165 170 175

Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His

180 185 190

Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val

195 200 205

Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn

210 215 220

Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg

225 230 235 240

Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln

245 250 255

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu

260 265 270

Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu

275 280 285

Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu

290 295 300

Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr

305 310 315 320

His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

325 330 335

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

340 345 350

Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

355 360 365

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly

370 375 380

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser

385 390 395 400

Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr

405 410 415

Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln

420 425 430

Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu

435 440 445

Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys

450 455 460

Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala

465 470 475 480

Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly

485 490 495

Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

500 505 510

Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile

515 520 525

Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala

530 535 540

Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr

545 550 555 560

Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu

565 570 575

Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile

580 585 590

Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp

595 600 605

Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

610 615 620

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

625 630 635 640

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

645 650 655

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

660 665 670

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

675 680 685

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

690 695 700

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

705 710 715 720

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730 735

<210> 873

<211> 2205

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 873

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccccagtccg ctcttaccca accggcctca gcctcgggga gccccggcca gagcgtgacc

120

atttcctgca ccggcacttc atccgacgtg ggcggctaca actacgtgtc ctggtaccaa

180

cagcacccgg gaaaggcccc caagctcatg atctacgacg tgtccaacag gccctcggga

240

gtgtccaacc ggttctcggg ttcgaaatcg ggaaacacag ccagcctgac catcagcgga

300

ctgcaggctg aagatgaagc cgactactac tgctcctcct acacctcgtc atccacgctc

360

tacgtgttcg gcactggaac tcagctgact gtgctgggcg gaggaggctc cgaagtgcag

420

cttcaacaat caggaccagg actcgtcaaa ccatcacaga ccctctccct cacatgtgcc

480

atctccgggg actccatgtt gagcaattcc gacacttgga attggattag acaaagcccg

540

tcccggggtc tggaatggtt gggacgcacc taccaccggt ctacttggta cgacgactac

600

gcgtcatccg tgcggggaag agtgtccatc aacgtggaca cctccaagaa ccagtacagc

660

ctgcagctta atgccgtgac tcctgaggat acgggcgtct actactgcgc ccgcgtccgc

720

ctgcaagacg ggaacagctg gagcgatgca ttcgatgtct ggggccaggg aactatggtc

780

accgtgtcgt ctggaggggg agggagtgaa attgtgatga cccagtcacc cgccactctt

840

agcctttcac ccggtgagcg cgcaaccctg tcttgcagag cctcccaaga catctcaaaa

900

taccttaatt ggtatcaaca gaagcccgga caggctcctc gccttctgat ctaccacacc

960

agccggctcc attctggaat ccctgccagg ttcagcggta gcggatctgg gaccgactac

1020

accctcacta tcagctcact gcagccagag gacttcgctg tctatttctg tcagcaaggg

1080

aacaccctgc cctacacctt tggacagggc accaagctcg agattaaagg tggaggtggc

1140

agcggaggag gtgggtccgg cggtggagga agccaggtcc aactccaaga aagcggaccg

1200

ggtcttgtga agccatcaga aactctttca ctgacttgta ctgtgagcgg agtgtctctc

1260

cccgattacg gggtgtcttg gatcagacag ccaccgggga agggtctgga atggattgga

1320

gtgatttggg gctctgagac tacttactac caatcatccc tcaagtcacg cgtcaccatc

1380

tcaaaggaca actctaagaa tcaggtgtca ctgaaactgt catctgtgac cgcagccgac

1440

accgccgtgt actattgcgc taagcattac tattatggcg ggagctacgc aatggattac

1500

tggggacagg gtactctggt caccgtgtcc agcaccacta ccccagcacc gaggccaccc

1560

accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc

1620

gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg

1680

gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt

1740

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

1800

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

1860

gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca gatgctccag cctaccagca ggggcagaac

1920

cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg

1980

agaggacggg acccagaaat gggcgggaag ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg

2040

tacaacgagc tccaaaagga taagatggca gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg

2100

gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag

2160

gacacctatg acgctcttca catgcaggcc ctgccgcctc ggtaa

2205

<210> 874

<211> 734

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 874

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser

20 25 30

Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser

35 40 45

Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly

50 55 60

Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly

65 70 75 80

Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu

85 90 95

Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser

100 105 110

Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln

115 120 125

Leu Thr Val Leu Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser

130 135 140

Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala

145 150 155 160

Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile

165 170 175

Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His

180 185 190

Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val

195 200 205

Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn

210 215 220

Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg

225 230 235 240

Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln

245 250 255

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val

260 265 270

Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala

275 280 285

Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp

290 295 300

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr

305 310 315 320

Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser

325 330 335

Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe

340 345 350

Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly

355 360 365

Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

370 375 380

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro

385 390 395 400

Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser

405 410 415

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro

420 425 430

Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr

435 440 445

Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn

450 455 460

Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp

465 470 475 480

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr

485 490 495

Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr

500 505 510

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

515 520 525

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

530 535 540

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

545 550 555 560

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

565 570 575

Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys

580 585 590

Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys

595 600 605

Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val

610 615 620

Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn

625 630 635 640

Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val

645 650 655

Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg

660 665 670

Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys

675 680 685

Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg

690 695 700

Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys

705 710 715 720

Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

725 730

<210> 875

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 875

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 876

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 876

Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys

1 5

<210> 877

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 877

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccc

63

<210> 878

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 878

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro

20

<210> 879

<211> 726

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 879

gaaattgtga tgacccagtc acccgccact cttagccttt cacccggtga gcgcgcaacc

60

ctgtcttgca gagcctccca agacatctca aaatacctta attggtatca acagaagccc

120

ggacaggctc ctcgccttct gatctaccac accagccggc tccattctgg aatccctgcc

180

aggttcagcg gtagcggatc tgggaccgac tacaccctca ctatcagctc actgcagcca

240

gaggacttcg ctgtctattt ctgtcagcaa gggaacaccc tgccctacac ctttggacag

300

ggcaccaagc tcgagattaa aggtggaggt ggcagcggag gaggtgggtc cggcggtgga

360

ggaagccagg tccaactcca agaaagcgga ccgggtcttg tgaagccatc agaaactctt

420

tcactgactt gtactgtgag cggagtgtct ctccccgatt acggggtgtc ttggatcaga

480

cagccaccgg ggaagggtct ggaatggatt ggagtgattt ggggctctga gactacttac

540

taccaatcat ccctcaagtc acgcgtcacc atctcaaagg acaactctaa gaatcaggtg

600

tcactgaaac tgtcatctgt gaccgcagcc gacaccgccg tgtactattg cgctaagcat

660

tactattatg gcgggagcta cgcaatggat tactggggac agggtactct ggtcaccgtg

720

tccagc

726

<210> 880

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 880

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 881

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 881

gaagtgcagc ttcaacaatc aggaccagga ctcgtcaaac catcacagac cctctccctc

60

acatgtgcca tctccgggga ctccatgttg agcaattccg acacttggaa ttggattaga

120

caaagcccgt cccggggtct ggaatggttg ggacgcacct accaccggtc tacttggtac

180

gacgactacg cgtcatccgt gcggggaaga gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcagcttaa tgccgtgact cctgaggata cgggcgtcta ctactgcgcc

300

cgcgtccgcc tgcaagacgg gaacagctgg agcgatgcat tcgatgtctg gggccaggga

360

actatggtca ccgtgtcgtc tgggggcggt ggatcgggtg gcgggggttc ggggggcggc

420

ggctctcagt ccgctcttac ccaaccggcc tcagcctcgg ggagccccgg ccagagcgtg

480

accatttcct gcaccggcac ttcatccgac gtgggcggct acaactacgt gtcctggtac

540

caacagcacc cgggaaaggc ccccaagctc atgatctacg acgtgtccaa caggccctcg

600

ggagtgtcca accggttctc gggttcgaaa tcgggaaaca cagccagcct gaccatcagc

660

ggactgcagg ctgaagatga agccgactac tactgctcct cctacacctc gtcatccacg

720

ctctacgtgt tcggcactgg aactcagctg actgtgctg

759

<210> 882

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 882

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Ser

130 135 140

Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val

145 150 155 160

Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr

165 170 175

Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile

180 185 190

Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly

195 200 205

Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala

210 215 220

Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu

245 250

<210> 883

<211> 729

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 883

gaagtgcagc ttcaacaatc aggaccagga ctcgtcaaac catcacagac cctctccctc

60

acatgtgcca tctccgggga ctccatgttg agcaattccg acacttggaa ttggattaga

120

caaagcccgt cccggggtct ggaatggttg ggacgcacct accaccggtc tacttggtac

180

gacgactacg cgtcatccgt gcggggaaga gtgtccatca acgtggacac ctccaagaac

240

cagtacagcc tgcagcttaa tgccgtgact cctgaggata cgggcgtcta ctactgcgcc

300

cgcgtccgcc tgcaagacgg gaacagctgg agcgatgcat tcgatgtctg gggccaggga

360

actatggtca ccgtgtcgtc tggcggagga ggctcccagt ccgctcttac ccaaccggcc

420

tcagcctcgg ggagccccgg ccagagcgtg accatttcct gcaccggcac ttcatccgac

480

gtgggcggct acaactacgt gtcctggtac caacagcacc cgggaaaggc ccccaagctc

540

atgatctacg acgtgtccaa caggccctcg ggagtgtcca accggttctc gggttcgaaa

600

tcgggaaaca cagccagcct gaccatcagc ggactgcagg ctgaagatga agccgactac

660

tactgctcct cctacacctc gtcatccacg ctctacgtgt tcggcactgg aactcagctg

720

actgtgctg

729

<210> 884

<211> 243

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 884

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly

130 135 140

Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp

145 150 155 160

Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys

165 170 175

Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val

180 185 190

Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr

195 200 205

Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser

210 215 220

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu

225 230 235 240

Thr Val Leu

<210> 885

<211> 759

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 885

cagtccgctc ttacccaacc ggcctcagcc tcggggagcc ccggccagag cgtgaccatt

60

tcctgcaccg gcacttcatc cgacgtgggc ggctacaact acgtgtcctg gtaccaacag

120

cacccgggaa aggcccccaa gctcatgatc tacgacgtgt ccaacaggcc ctcgggagtg

180

tccaaccggt tctcgggttc gaaatcggga aacacagcca gcctgaccat cagcggactg

240

caggctgaag atgaagccga ctactactgc tcctcctaca cctcgtcatc cacgctctac

300

gtgttcggca ctggaactca gctgactgtg ctggggggcg gtggatcggg tggcgggggt

360

tcggggggcg gcggctctga agtgcagctt caacaatcag gaccaggact cgtcaaacca

420

tcacagaccc tctccctcac atgtgccatc tccggggact ccatgttgag caattccgac

480

acttggaatt ggattagaca aagcccgtcc cggggtctgg aatggttggg acgcacctac

540

caccggtcta cttggtacga cgactacgcg tcatccgtgc ggggaagagt gtccatcaac

600

gtggacacct ccaagaacca gtacagcctg cagcttaatg ccgtgactcc tgaggatacg

660

ggcgtctact actgcgcccg cgtccgcctg caagacggga acagctggag cgatgcattc

720

gatgtctggg gccagggaac tatggtcacc gtgtcgtct

759

<210> 886

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 886

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val

115 120 125

Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu

130 135 140

Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp

145 150 155 160

Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu

165 170 175

Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser

180 185 190

Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr

195 200 205

Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe

225 230 235 240

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 887

<211> 729

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 887

cagtccgctc ttacccaacc ggcctcagcc tcggggagcc ccggccagag cgtgaccatt

60

tcctgcaccg gcacttcatc cgacgtgggc ggctacaact acgtgtcctg gtaccaacag

120

cacccgggaa aggcccccaa gctcatgatc tacgacgtgt ccaacaggcc ctcgggagtg

180

tccaaccggt tctcgggttc gaaatcggga aacacagcca gcctgaccat cagcggactg

240

caggctgaag atgaagccga ctactactgc tcctcctaca cctcgtcatc cacgctctac

300

gtgttcggca ctggaactca gctgactgtg ctgggcggag gaggctccga agtgcagctt

360

caacaatcag gaccaggact cgtcaaacca tcacagaccc tctccctcac atgtgccatc

420

tccggggact ccatgttgag caattccgac acttggaatt ggattagaca aagcccgtcc

480

cggggtctgg aatggttggg acgcacctac caccggtcta cttggtacga cgactacgcg

540

tcatccgtgc ggggaagagt gtccatcaac gtggacacct ccaagaacca gtacagcctg

600

cagcttaatg ccgtgactcc tgaggatacg ggcgtctact actgcgcccg cgtccgcctg

660

caagacggga acagctggag cgatgcattc gatgtctggg gccagggaac tatggtcacc

720

gtgtcgtct

729

<210> 888

<211> 243

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 888

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val

115 120 125

Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser

130 135 140

Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser

145 150 155 160

Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr

165 170 175

Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp

180 185 190

Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu

195 200 205

Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn

210 215 220

Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr

225 230 235 240

Val Ser Ser

<210> 889

<211> 207

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 889

accactaccc cagcaccgag gccacccacc ccggctccta ccatcgcctc ccagcctctg

60

tccctgcgtc cggaggcatg tagacccgca gctggtgggg ccgtgcatac ccggggtctt

120

gacttcgcct gcgatatcta catttgggcc cctctggctg gtacttgcgg ggtcctgctg

180

ctttcactcg tgatcactct ttactgt

207

<210> 890

<211> 69

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 890

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile

35 40 45

Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val

50 55 60

Ile Thr Leu Tyr Cys

65

<210> 891

<211> 126

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 891

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

60

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

120

gaactg

126

<210> 892

<211> 42

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 892

Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met

1 5 10 15

Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe

20 25 30

Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu

35 40

<210> 893

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 893

cgcgtgaaat tcagccgcag cgcagatgct ccagcctacc agcaggggca gaaccagctc

60

tacaacgaac tcaatcttgg tcggagagag gagtacgacg tgctggacaa gcggagagga

120

cgggacccag aaatgggcgg gaagccgcgc agaaagaatc cccaagaggg cctgtacaac

180

gagctccaaa aggataagat ggcagaagcc tatagcgaga ttggtatgaa aggggaacgc

240

agaagaggca aaggccacga cggactgtac cagggactca gcaccgccac caaggacacc

300

tatgacgctc ttcacatgca ggccctgccg cctcggtaa

339

<210> 894

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 894

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

1 5 10 15

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

20 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

35 40 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

50 55 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

65 70 75 80

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

85 90 95

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105 110

<210> 895

<211> 2205

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 895

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagcg gagggggagg gagtcagtcc gctcttaccc aaccggcctc agcctcgggg

840

agccccggcc agagcgtgac catttcctgc accggcactt catccgacgt gggcggctac

900

aactacgtgt cctggtacca acagcacccg ggaaaggccc ccaagctcat gatctacgac

960

gtgtccaaca ggccctcggg agtgtccaac cggttctcgg gttcgaaatc gggaaacaca

1020

gccagcctga ccatcagcgg actgcaggct gaagatgaag ccgactacta ctgctcctcc

1080

tacacctcgt catccacgct ctacgtgttc ggcactggaa ctcagctgac tgtgctgggc

1140

ggaggaggct ccgaagtgca gcttcaacaa tcaggaccag gactcgtcaa accatcacag

1200

accctctccc tcacatgtgc catctccggg gactccatgt tgagcaattc cgacacttgg

1260

aattggatta gacaaagccc gtcccggggt ctggaatggt tgggacgcac ctaccaccgg

1320

tctacttggt acgacgacta cgcgtcatcc gtgcggggaa gagtgtccat caacgtggac

1380

acctccaaga accagtacag cctgcagctt aatgccgtga ctcctgagga tacgggcgtc

1440

tactactgcg cccgcgtccg cctgcaagac gggaacagct ggagcgatgc attcgatgtc

1500

tggggccagg gaactatggt caccgtgtcg tctaccacta ccccagcacc gaggccaccc

1560

accccggctc ctaccatcgc ctcccagcct ctgtccctgc gtccggaggc atgtagaccc

1620

gcagctggtg gggccgtgca tacccggggt cttgacttcg cctgcgatat ctacatttgg

1680

gcccctctgg ctggtacttg cggggtcctg ctgctttcac tcgtgatcac tctttactgt

1740

aagcgcggtc ggaagaagct gctgtacatc tttaagcaac ccttcatgag gcctgtgcag

1800

actactcaag aggaggacgg ctgttcatgc cggttcccag aggaggagga aggcggctgc

1860

gaactgcgcg tgaaattcag ccgcagcgca gatgctccag cctaccagca ggggcagaac

1920

cagctctaca acgaactcaa tcttggtcgg agagaggagt acgacgtgct ggacaagcgg

1980

agaggacggg acccagaaat gggcgggaag ccgcgcagaa agaatcccca agagggcctg

2040

tacaacgagc tccaaaagga taagatggca gaagcctata gcgagattgg tatgaaaggg

2100

gaacgcagaa gaggcaaagg ccacgacgga ctgtaccagg gactcagcac cgccaccaag

2160

gacacctatg acgctcttca catgcaggcc ctgccgcctc ggtaa

2205

<210> 896

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 896

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His

1 5 10

<210> 897

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 897

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 898

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 898

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 899

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 899

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 900

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 900

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 901

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 901

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 902

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 902

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His

1 5 10

<210> 903

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 903

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 904

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 904

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 905

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 905

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 906

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 906

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 907

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 907

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 908

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 908

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His

1 5 10

<210> 909

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 909

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 910

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 910

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 911

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 911

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 912

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 912

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 913

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 913

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 914

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 914

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Met His

1 5 10

<210> 915

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 915

Phe Ile Thr Pro Thr Thr Gly Tyr Pro Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 916

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 916

Arg Lys Val Gly Lys Gly Val Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 917

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 917

Arg Ala Ser Gly Asn Ile His Asn Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 918

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 918

Asn Thr Lys Thr Leu Ala Asp

1 5

<210> 919

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 919

Gln His Phe Trp Ser Ser Pro Trp Thr

1 5

<210> 920

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 920

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His

1 5 10

<210> 921

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 921

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 922

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 922

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 923

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 923

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 924

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 924

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 925

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 925

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 926

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 926

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His

1 5 10

<210> 927

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 927

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 928

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 928

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 929

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 929

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 930

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 930

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 931

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 931

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 932

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 932

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 933

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 933

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 934

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 934

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 935

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 935

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Leu His

1 5 10

<210> 936

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 936

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 937

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 937

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 938

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 938

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 939

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 939

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 940

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 940

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 941

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 941

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 942

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 942

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 943

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 943

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 944

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 944

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 945

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 945

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 946

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 946

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 947

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 947

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 948

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 948

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 949

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 949

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 950

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 950

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 951

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 951

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 952

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 952

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 953

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 953

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 954

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 954

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 955

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 955

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 956

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 956

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 957

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 957

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 958

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 958

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 959

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 959

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Pro Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 960

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 960

Ser Tyr Phe Tyr Gly Ser Ser Ser Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 961

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 961

Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Met His

1 5 10

<210> 962

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 962

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 963

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 963

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 964

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 964

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 965

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 965

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 966

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 966

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 967

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 967

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 968

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 968

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 969

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 969

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 970

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 970

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 971

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 971

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 972

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 972

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 973

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 973

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 974

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 974

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 975

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 975

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 976

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 976

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 977

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 977

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 978

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 978

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 979

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 979

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 980

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 980

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 981

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 981

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 982

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 982

Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Asn Met His

1 5 10

<210> 983

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 983

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Ser Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 984

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 984

Ser Phe Phe Tyr Gly Ser Ser Asp Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 985

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 985

Arg Ala Ser Ser Ser Val Asn Asn Met His

1 5 10

<210> 986

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 986

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 987

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 987

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 988

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 988

Gln Gln Trp Ile Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 989

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 989

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asn Asp Tyr Val Gly Ser Val

1 5 10 15

Lys Ser

<210> 990

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 990

Glu Thr Asp Tyr Gly Asp Tyr Gly Ala Phe Asp Ile

1 5 10

<210> 991

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 991

Thr Gly Ser Arg Asn Asp Ile Gly Ala Tyr Glu Ser Val Ser

1 5 10

<210> 992

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 992

Gly Val Asn Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 993

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 993

Ser Ser His Thr Thr Thr Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 994

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 994

Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn

1 5 10

<210> 995

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 995

Arg Thr Phe Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala Val Ser Val

1 5 10 15

Lys Gly

<210> 996

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 996

Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val

1 5

<210> 997

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 997

Thr Gly Ser Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser Val Ser

1 5 10

<210> 998

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 998

Glu Val Ile Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 999

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 999

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Tyr Val

1 5 10

<210> 1000

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1000

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1001

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1001

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1002

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1002

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1003

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1003

Thr Gly Ser Ser Ser Asp Ile Gly Gly Phe Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1004

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1004

Glu Val Thr Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1005

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1005

Ser Ser Tyr Ala Ser Gly Ser Pro Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 1006

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1006

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1007

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1007

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1008

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1008

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1009

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1009

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Ile Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1010

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1010

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1011

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1011

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 1012

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1012

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1013

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1013

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1014

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1014

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1015

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1015

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1016

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1016

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1017

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1017

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 1018

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1018

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1019

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1019

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1020

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1020

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1021

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1021

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1022

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1022

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1023

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1023

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 1024

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1024

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1025

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1025

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1026

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1026

Asp Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1027

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1027

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1028

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1028

Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1029

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1029

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Ile

1 5 10

<210> 1030

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1030

Gly Asp Ser Val Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1031

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1031

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1032

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1032

Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1033

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1033

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1034

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1034

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1035

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1035

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 1036

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1036

Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn Ser Asp Thr Trp Asn

1 5 10

<210> 1037

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1037

Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala Ser Ser Val

1 5 10 15

Arg Gly

<210> 1038

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1038

Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp Ala Phe Asp Val

1 5 10 15

<210> 1039

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1039

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser

1 5 10

<210> 1040

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1040

Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser

1 5

<210> 1041

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1041

Ser Ser Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val

1 5 10

<210> 1042

<211> 1458

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 1042

atggccttac cagtgaccgc cttgctcctg ccgctggcct tgctgctcca cgccgccagg

60

ccggacatcc agatgacaca gactacatcc tccctgtctg cctctctggg agacagagtc

120

accatcagtt gcagggcaag tcaggacatt agtaaatatt taaattggta tcagcagaaa

180

ccagatggaa ctgttaaact cctgatctac catacatcaa gattacactc aggagtccca

240

tcaaggttca gtggcagtgg gtctggaaca gattattctc tcaccattag caacctggag

300

caagaagata ttgccactta cttttgccaa cagggtaata cgcttccgta cacgttcgga

360

ggggggacca agctggagat cacaggtggc ggtggctcgg gcggtggtgg gtcgggtggc

420

ggcggatctg aggtgaaact gcaggagtca ggacctggcc tggtggcgcc ctcacagagc

480

ctgtccgtca catgcactgt ctcaggggtc tcattacccg actatggtgt aagctggatt

540

cgccagcctc cacgaaaggg tctggagtgg ctgggagtaa tatggggtag tgaaaccaca

600

tactataatt cagctctcaa atccagactg accatcatca aggacaactc caagagccaa

660

gttttcttaa aaatgaacag tctgcaaact gatgacacag ccatttacta ctgtgccaaa

720

cattattact acggtggtag ctatgctatg gactactggg gccaaggaac ctcagtcacc

780

gtctcctcaa ccacgacgcc agcgccgcga ccaccaacac cggcgcccac catcgcgtcg

840

cagcccctgt ccctgcgccc agaggcgtgc cggccagcgg cggggggcgc agtgcacacg

900

agggggctgg acttcgcctg tgatatctac atctgggcgc ccttggccgg gacttgtggg

960

gtccttctcc tgtcactggt tatcaccctt tactgcaaac ggggcagaaa gaaactcctg

1020

tatatattca aacaaccatt tatgagacca gtacaaacta ctcaagagga agatggctgt

1080

agctgccgat ttccagaaga agaagaagga ggatgtgaac tgagagtgaa gttcagcagg

1140

agcgcagacg cccccgcgta caagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta

1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg

1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag

1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac

1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg

1440

caggccctgc cccctcgc

1458

<210> 1043

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1043

Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Gln Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Ser Cys

85 90 95

Ala Arg Lys Thr Ile Ser Ser Val Val Asp Phe Tyr Phe Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr

115

<210> 1044

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1044

Glu Leu Val Leu Thr Gln Ser Pro Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asn

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Pro Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Thr Tyr Arg Asn Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Asn Val Gln Ser

65 70 75 80

Lys Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Tyr Phe Cys Gln Tyr Asn Arg Tyr Pro

85 90 95

Tyr Thr Ser Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Arg Ser

100 105 110

<210> 1045

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1045

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 1046

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1046

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 1047

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1047

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 1048

<211> 813

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 1048

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagcc accaccatca tcaccatcac cat

813

<210> 1049

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1049

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 1050

<211> 1458

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 1050

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

cccgaaattg tgatgaccca gtcacccgcc actcttagcc tttcacccgg tgagcgcgca

120

accctgtctt gcagagcctc ccaagacatc tcaaaatacc ttaattggta tcaacagaag

180

cccggacagg ctcctcgcct tctgatctac cacaccagcc ggctccattc tggaatccct

240

gccaggttca gcggtagcgg atctgggacc gactacaccc tcactatcag ctcactgcag

300

ccagaggact tcgctgtcta tttctgtcag caagggaaca ccctgcccta cacctttgga

360

cagggcacca agctcgagat taaaggtgga ggtggcagcg gaggaggtgg gtccggcggt

420

ggaggaagcc aggtccaact ccaagaaagc ggaccgggtc ttgtgaagcc atcagaaact

480

ctttcactga cttgtactgt gagcggagtg tctctccccg attacggggt gtcttggatc

540

agacagccac cggggaaggg tctggaatgg attggagtga tttggggctc tgagactact

600

tactaccaat catccctcaa gtcacgcgtc accatctcaa aggacaactc taagaatcag

660

gtgtcactga aactgtcatc tgtgaccgca gccgacaccg ccgtgtacta ttgcgctaag

720

cattactatt atggcgggag ctacgcaatg gattactggg gacagggtac tctggtcacc

780

gtgtccagca ccactacccc agcaccgagg ccacccaccc cggctcctac catcgcctcc

840

cagcctctgt ccctgcgtcc ggaggcatgt agacccgcag ctggtggggc cgtgcatacc

900

cggggtcttg acttcgcctg cgatatctac atttgggccc ctctggctgg tacttgcggg

960

gtcctgctgc tttcactcgt gatcactctt tactgtaagc gcggtcggaa gaagctgctg

1020

tacatcttta agcaaccctt catgaggcct gtgcagacta ctcaagagga ggacggctgt

1080

tcatgccggt tcccagagga ggaggaaggc ggctgcgaac tgcgcgtgaa attcagccgc

1140

agcgcagatg ctccagccta caagcagggg cagaaccagc tctacaacga actcaatctt

1200

ggtcggagag aggagtacga cgtgctggac aagcggagag gacgggaccc agaaatgggc

1260

gggaagccgc gcagaaagaa tccccaagag ggcctgtaca acgagctcca aaaggataag

1320

atggcagaag cctatagcga gattggtatg aaaggggaac gcagaagagg caaaggccac

1380

gacggactgt accagggact cagcaccgcc accaaggaca cctatgacgc tcttcacatg

1440

caggccctgc cgcctcgg

1458

<210> 1051

<211> 271

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1051

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser His His His His His His His His

260 265 270

<210> 1052

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1052

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

130 135 140

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

180 185 190

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

225 230 235 240

Ile Lys

<210> 1053

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1053

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Ser Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

145 150 155 160

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

165 170 175

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

180 185 190

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

195 200 205

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

210 215 220

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

225 230 235 240

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

245 250 255

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 1054

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1054

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

130 135 140

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

180 185 190

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

225 230 235 240

Ile Lys

<210> 1055

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1055

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

145 150 155 160

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

165 170 175

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

180 185 190

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

195 200 205

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

210 215 220

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

225 230 235 240

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

245 250 255

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 1056

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1056

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

115 120 125

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

130 135 140

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

145 150 155 160

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

165 170 175

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

180 185 190

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

195 200 205

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

210 215 220

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 1057

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1057

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1058

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1058

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

115 120 125

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

130 135 140

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

145 150 155 160

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

165 170 175

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

180 185 190

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

195 200 205

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

210 215 220

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 1059

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1059

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1060

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1060

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

130 135 140

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

165 170 175

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

180 185 190

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

210 215 220

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 1061

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1061

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Ser Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro

165 170 175

Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

180 185 190

Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

195 200 205

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

210 215 220

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

225 230 235 240

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro

245 250 255

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1062

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1062

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

130 135 140

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

165 170 175

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

180 185 190

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

210 215 220

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 1063

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1063

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro

165 170 175

Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

180 185 190

Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

195 200 205

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

210 215 220

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

225 230 235 240

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro

245 250 255

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1064

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1064

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

115 120 125

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

130 135 140

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

145 150 155 160

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

165 170 175

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

180 185 190

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

195 200 205

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

210 215 220

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 1065

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1065

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1066

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1066

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met

130 135 140

Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr

145 150 155 160

Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr

165 170 175

Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser

180 185 190

Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly

195 200 205

Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala

210 215 220

Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

245

<210> 1067

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1067

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

130 135 140

Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val

145 150 155 160

Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser

165 170 175

Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly

180 185 190

Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn

195 200 205

Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn

210 215 220

Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val

225 230 235 240

Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp

245 250 255

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1068

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1068

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 1069

<211> 491

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1069

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu

20 25 30

Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val

35 40 45

Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys

50 55 60

Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr

65 70 75 80

Asn Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys

85 90 95

Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala

100 105 110

Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly

130 135 140

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro

165 170 175

Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

180 185 190

Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu

195 200 205

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser

210 215 220

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln

225 230 235 240

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro

245 250 255

Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr Thr Thr Pro

260 265 270

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

275 280 285

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

290 295 300

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

305 310 315 320

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

325 330 335

Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe

340 345 350

Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg

355 360 365

Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser

370 375 380

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

385 390 395 400

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

405 410 415

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

420 425 430

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

435 440 445

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

450 455 460

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

465 470 475 480

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490

<210> 1070

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1070

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala

130 135 140

Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala

145 150 155 160

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

165 170 175

Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

180 185 190

Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

195 200 205

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln

210 215 220

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu

225 230 235 240

Ile Lys

<210> 1071

<211> 486

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1071

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu

20 25 30

Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala

50 55 60

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro

65 70 75 80

Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Lys Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 1072

<211> 72

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 1072

atctacatct gggcgccctt ggccgggact tgtggggtcc ttctcctgtc actggttatc

60

accctttact gc

72

<210> 1073

<211> 126

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 1073

aaacggggca gaaagaaact cctgtatata ttcaaacaac catttatgag accagtacaa

60

actactcaag aggaagatgg ctgtagctgc cgatttccag aagaagaaga aggaggatgt

120

gaactg

126

<210> 1074

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 1074

agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtaca agcagggcca gaaccagctc

60

tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc

120

cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat

180

gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc

240

cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc

300

tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc

336

<210> 1075

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Gly"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /замена="Pro"

<220>

<221> ДРУГОЙ_ПРИЗНАК

<222> (1)..(17)

<223> /примечание="Остатки вариантов, приведенные в

последовательности, не имеют предпочтения по отношению к тем, которые

указаны в аннотациях для положений вариантов"

<400> 1075

Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Tyr Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 1076

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (2)..(2)

<223> /замена="Tyr"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Tyr"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Gly"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(8)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ДРУГОЙ_ПРИЗНАК

<222> (1)..(13)

<223> /примечание="Остатки вариантов, приведенные в

последовательности, не имеют предпочтения по отношению к тем, которые

указаны в аннотациях для положений вариантов"

<400> 1076

Val Asp Phe Gly His Ser Arg Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 1077

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /замена="His"

<220>

<221> ДРУГОЙ_ПРИЗНАК

<222> (1)..(10)

<223> /примечание="Остатки вариантов, приведенные в

последовательности, не имеют предпочтения по отношению к тем, которые

указаны в аннотациях для положений вариантов"

<400> 1077

Arg Ala Thr Ser Ser Val Ser Ser Met Asn

1 5 10

<210> 1078

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1078

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 1079

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Ile"

<220>

<221> ДРУГОЙ_ПРИЗНАК

<222> (1)..(9)

<223> /примечание="Остатки вариантов, приведенные в

последовательности, не имеют предпочтения по отношению к тем, которые

указаны в аннотациях для положений вариантов"

<400> 1079

Gln Gln Trp Thr Phe Asn Pro Pro Thr

1 5

<210> 1080

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1080

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro

20

<210> 1081

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический олигонуклеотид"

<400> 1081

atggccctcc ctgtcaccgc cctgctgctt ccgctggctc ttctgctcca cgccgctcgg

60

ccc

63

<210> 1082

<211> 30

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<220>

<221> ДРУГОЙ_ПРИЗНАК

<222> (1)..(30)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 0-6

повторяющихся звеньев "Gly Gly Gly Gly Ser"

<400> 1082

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25 30

<210> 1083

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1083

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 1084

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1084

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 1085

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1085

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 1086

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1086

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 1087

<211> 25

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1087

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25

<210> 1088

<211> 30

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1088

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25 30

<210> 1089

<211> 30

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<220>

<221> ДРУГОЙ_ПРИЗНАК

<222> (1)..(30)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 1-6

повторяющихся звеньев "Gly Gly Gly Gly Ser"

<400> 1089

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25 30

<210> 1090

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1090

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 1091

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1091

Leu Ala Glu Ala Ala Ala Lys

1 5

<210> 1092

<211> 5000

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(5000)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 50-5000

нуклеотидов"

<220>

<221> источник

<223> /примечание="См. поданное описание для подробного описания

замен и предпочтительных вариантов осуществления"

<400> 1092

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

60

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2040

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2100

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2160

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2220

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2280

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2340

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2400

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2460

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2520

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2580

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2640

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2700

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2760

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2820

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2880

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2940

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3000

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3060

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

5000

<210> 1093

<211> 2000

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(2000)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 50-2000

нуклеотидов"

<400> 1093

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

60

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2000

<210> 1094

<211> 100

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<400> 1094

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

60

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

100

<210> 1095

<211> 5000

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(5000)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 50-5000

нуклеотидов"

<400> 1095

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

60

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

120

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

180

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

240

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

300

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

360

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

420

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

480

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

540

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

600

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

660

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

720

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

780

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

840

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

900

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

960

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1020

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1080

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1140

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1200

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1260

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1320

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1380

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1440

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1500

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1560

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1620

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1680

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1740

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1800

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1860

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1920

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

1980

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2040

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2100

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2160

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2220

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2280

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2340

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2400

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2460

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2520

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2580

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2640

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2700

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2760

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2820

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2880

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

2940

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3000

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3060

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3120

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3180

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3240

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3300

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3360

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3420

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3480

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3540

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3600

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3660

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3720

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3780

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3840

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3900

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

3960

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4020

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4080

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4140

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4200

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4260

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4320

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4380

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4440

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4500

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4560

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4620

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4680

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4740

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4800

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4860

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4920

tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt tttttttttt

4980

tttttttttt tttttttttt

5000

<210> 1096

<211> 5000

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полинуклеотид"

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(5000)

<223> /примечание="Эта последовательность может охватывать 100-5000

нуклеотидов"

<400> 1096

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

60

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

1980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2040

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2100

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2160

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2220

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2280

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2340

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2400

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2460

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2520

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2580

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2640

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2700

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2760

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2820

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2880

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

2940

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3000

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3060

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3120

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3180

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3240

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3300

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3420

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3480

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3540

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3660

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3780

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3900

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

3960

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4020

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4080

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4140

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4200

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4260

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4320

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4380

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4500

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4560

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4620

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4680

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4740

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4800

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4860

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4920

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

4980

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa

5000

<210> 1097

<211> 465

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1097

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln

195 200 205

Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr

245 250 255

Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala

260 265 270

Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile

275 280 285

Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser

290 295 300

Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr

305 310 315 320

Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu

325 330 335

Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu

340 345 350

Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln

355 360 365

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

370 375 380

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

385 390 395 400

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

405 410 415

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

420 425 430

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

435 440 445

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

450 455 460

Arg

465

<210> 1098

<211> 465

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1098

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln

195 200 205

Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr

245 250 255

Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala

260 265 270

Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile

275 280 285

Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser

290 295 300

Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr

305 310 315 320

Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu

325 330 335

Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu

340 345 350

Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln

355 360 365

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

370 375 380

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

385 390 395 400

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

405 410 415

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

420 425 430

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

435 440 445

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

450 455 460

Arg

465

<210> 1099

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1099

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 1100

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1100

Gly Asp Ser Val Ser Asn Asn Asn Ala Ala Trp Asn

1 5 10

<210> 1101

<211> 243

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1101

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly

130 135 140

Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp

145 150 155 160

Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Asp His Pro Gly Lys

165 170 175

Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val

180 185 190

Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr

195 200 205

Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser

210 215 220

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu

225 230 235 240

Thr Val Leu

<210> 1102

<211> 243

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1102

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Met Leu Ser Asn

20 25 30

Ser Asp Thr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr His Arg Ser Thr Trp Tyr Asp Asp Tyr Ala

50 55 60

Ser Ser Val Arg Gly Arg Val Ser Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Tyr Ser Leu Gln Leu Asn Ala Val Thr Pro Glu Asp Thr Gly Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Arg Leu Gln Asp Gly Asn Ser Trp Ser Asp

100 105 110

Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly

115 120 125

Gly Gly Gly Ser Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Ala Ser Gly

130 135 140

Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp

145 150 155 160

Val Gly Gly Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys

165 170 175

Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val

180 185 190

Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr

195 200 205

Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser

210 215 220

Tyr Thr Ser Ser Ser Thr Leu Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu

225 230 235 240

Thr Val Leu

<210> 1103

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 1103

Arg Gly Asp Ser

1

<---

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, выделенной полипептидной молекуле для связывания с CD20, а также к CD20-связывающему домену. Также раскрыта полиспецифическая молекула CAR, предусматривающая первую специфичность связывания с CD20 и вторую специфичность связывания с CD22 или с CD19. Изобретение также относится к вектору, клетке и популяции клеток, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR для связывания с CD20. Изобретение эффективно для лечения рака. 16 н. и 35 з.п. ф-лы, 30 ил., 19 табл., 13 пр.

1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где указанный CD20-связывающий домен содержит определяющую комплементарность область 1 легкой цепи (LCDR1), определяющую комплементарность область 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющую комплементарность область 3 легкой цепи (LCDR3), определяющую комплементарность область 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющую комплементарность область 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющую комплементарность область 3 тяжелой цепи (HCDR3), где LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3 содержат:

(i) SEQ ID NO: 147, 148, 149, 136, 137 и 138, соответственно;

(ii) SEQ ID NO: 150, 151, 152, 139, 140 и 141, соответственно;

(iii) SEQ ID NO: 153, 154, 155, 142, 143 и 144, соответственно;

(iv) SEQ ID NO: 929, 930, 931, 926, 927 и 928, соответственно;

(v) SEQ ID NO: 228, 229, 230, 217, 218 и 219, соответственно;

(vi) SEQ ID NO: 231, 232, 233, 220, 221 и 222, соответственно;

(vii) SEQ ID NO: 234, 235, 236, 223, 224 и 225, соответственно; или

(viii) SEQ ID NO: 944, 945, 988, 941, 942 и 943, соответственно.

2. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где кодируемый CAR содержит вариабельную область легкой цепи и вариабельную область тяжелой цепи, где:

(i) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 156, 129, 439, 237, 264, 291, 318 или 443;

(ii) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более чем 30, 20 или 10 модификаций вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 156, 129, 439, 237, 264, 291, 318 или 443;

(iii) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 156, 129, 439, 237, 264, 291, 318 или 443;

(iv) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 145, 118, 437, 226, 253, 280, 307 или 441;

(v) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более чем 30, 20 или 10 модификаций аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 145, 118, 437, 226, 253, 280, 307 или 441;

(vi) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичности с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 145, 118, 437, 226, 253, 280, 307 или 441; или

(vii) вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи содержат:

(a) SEQ ID NO: 156 и 145, соответственно;

(b) SEQ ID NO: 129 и 118, соответственно;

(c) SEQ ID NO: 439 и 437, соответственно;

(d) SEQ ID NO: 237 и 226, соответственно;

(e) SEQ ID NO: 264 и 253, соответственно;

(f) SEQ ID NO: 291 и 280, соответственно;

(g) SEQ ID NO: 318 и 307, соответственно; или

(h) SEQ ID NO: 443 и 441, соответственно.

3. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1 или 2, где:

(i) CD20-связывающий домен представляет собой scFv;

(ii) CD20-связывающий домен содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 159, SEQ ID NO: 240, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 267, SEQ ID NO: 294 или SEQ ID NO: 321, или аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней, или аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций относительно любой из вышеупомянутых аминокислотных последовательностей; или

(iii) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая CD20-связывающий домен, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 160, SEQ ID NO: 241, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 268, SEQ ID NO: 295 или SEQ ID NO: 322 или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней.

4. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-3, где молекула нуклеиновой кислоты содержит:

(i) нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 146, SEQ ID NO: 119, SEQ ID NO: 438, SEQ ID NO: 227, SEQ ID NO: 254, SEQ ID NO: 281, SEQ ID NO: 308, SEQ ID NO: 442, SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 440, SEQ ID NO: 238, SEQ ID NO: 265, SEQ ID NO: 292, SEQ ID NO: 319 или SEQ ID NO: 444 или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней; или

(ii) нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 157 и 146, SEQ ID NO: 130 и 119, SEQ ID NO: 440 и 438, SEQ ID NO: 238 и 227, SEQ ID NO: 265 и 254, SEQ ID NO: 292 и 281, SEQ ID NO: 319 и 308 или SEQ ID NO: 444 и 442.

5. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-4, где:

(i) трансмембранный домен содержит трансмембранный домен белка, выбранного из группы, состоящей из альфа-, бета- или дзета-цепи T-клеточного рецептора, CD28, CD3 эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD123, CD134, CD137 и CD154;

(ii) трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 801, или аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 801;

(iii) трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 801;

(iv) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая трансмембранный домен, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 802 или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичности с ней;

(v) CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом шарнирной областью;

(vi) CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом шарнирной областью, где шарнирная область содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 799 или SEQ ID NO: 814 или аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней; или

(vii) CD20-связывающий домен соединен с трансмембранным доменом шарнирной областью, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая шарнирную область, содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 800 или SEQ ID NO: 815 или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней.

6. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-5, где:

(i) внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен;

(ii) внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, где костимулирующий домен представляет собой функциональный сигнальный домен, полученный из белка, выбранного из группы, состоящей из OX40, CD2, CD27, CD28, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278) и 4-1BB (CD137);

(iii) внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, где костимулирующий домен содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 803, или аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 803;

(iv) внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, где костимулирующий домен содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 803;

(v) внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая костимулирующий домен, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 804 или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней;

(vi) внутриклеточный сигнальный домен содержит первичный сигнальный домен;

(vii) внутриклеточный сигнальный домен содержит первичный сигнальный домен, где первичный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен из CD3-дзета;

(viii) внутриклеточный сигнальный домен содержит первичный сигнальный домен, где первичный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807;

(ix) внутриклеточный сигнальный домен содержит функциональный сигнальный домен из 4-1BB и/или функциональный сигнальный домен из CD3-дзета;

(x) внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 803, и/или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, или аминокислотную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 803, и/или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807;

(xi) внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 803 и/или аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807;

(xii) внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 803 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807;

(xiii) внутриклеточный сигнальный домен содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 803 и аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 805 или SEQ ID NO: 807, где необязательно последовательности, образующие внутриклеточный сигнальный домен, экспрессируются в одной и той же рамке считывания и в виде одной полипептидной цепи; или

(xiv) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая внутриклеточный сигнальный домен, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 804, или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней, и/или нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 893, 808, 806 или 1074, или нуклеотидную последовательность с по меньщей мере 95% идентичностью с ней.

7. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-6, где кодируемый CAR содержит лидерную последовательность.

8. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 7, где лидерная последовательность содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 797.

9. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-8, где:

(i) кодируемый CAR содержит аминокислотную последовательность из SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296 или SEQ ID NO: 323, или аминокислотную последовательность с по меньшей 95% идентичностью с ней, или аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере одну, две или три модификации, но не более 30, 20, 10 или 5 модификаций аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296 или SEQ ID NO: 323, где необязательно CAR не содержит сигнальный пептид, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 797;

(ii) кодируемый CAR содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 269, SEQ ID NO: 296 или SEQ ID NO: 323, где CAR содержит или не содержит сигнальный пептид, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 797;

(iii) молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 297 или SEQ ID NO: 324 или нуклеотидную последовательность с по меньшей мере 95% идентичностью с ней, где молекула нуклеиновой кислоты содержит или не содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 798; или

(iv) молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 243, SEQ ID NO: 135, SEQ ID NO: 270, SEQ ID NO: 297 или SEQ ID NO: 324, где молекула нуклеиновой кислоты содержит или не содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 798.

10. Выделенная полипептидная молекула для связывания с CD20, кодируемая молекулой нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9.

11. Выделенная молекула CAR для связывания с CD20, содержащая CD20-связывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где CD20-связывающий домен содержит определяющую комплементарность область 1 легкой цепи (LCDR1), определяющую комплементарность область 2 легкой цепи (LCDR2) и определяющую комплементарность область 3 легкой цепи (LCDR3), определяющую комплементарность область 1 тяжелой цепи (HCDR1), определяющую комплементарность область 2 тяжелой цепи (HCDR2) и определяющую комплементарность область 3 тяжелой цепи (HCDR3),

где LCDR1, LCDR2, LCDR3, HCDR1, HCDR2 и HCDR3 содержат: