НОВЫЕ СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ БОТУЛИНИЧЕСКОГО НЕЙРОТОКСИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ТРЕМОРА Российский патент 2024 года по МПК A61K38/16 A61K39/08 A61P21/02 A61P25/14 

[1] Настоящее изобретение относится к новым способам применения ботулинических нейротоксинов для лечения тремора, в частности, к применению ботулинического нейротоксина для лечения тремора верхних конечностей у взрослых или детей с эссенциальным тремором или по любой другой причине, когда уменьшение тремора приносит пользу субъекту.

[2] Clostridium представляет собой род анаэробных грамположительных бактерий, относящихся к Firmicutes. Clostridium состоит из около 100 видов, которые включают распространенные свободноживущие бактерии, а также важные патогены, такие как Clostridium botulinum и Clostridium tetani. Оба вида продуцируют нейротоксины, ботулотоксин и столбнячный токсин, соответственно. Данные нейротоксины являются мощными ингибиторами кальцийзависимой секреции нейромедиаторов нейронов и являются одними из самых сильных токсинов, известных человеку. Смертельная доза для людей составляет от 0,1 нг до 1 нг на кг массы тела.

[3] Пероральный прием ботулотоксина с загрязненной пищей или образование ботулотоксина в ранах может вызывать ботулизм, который характеризуется параличом различных мышц. Паралич дыхательных мышц может привести к смерти больного.

[4] Несмотря на то, что и ботулинический нейротоксин (BoNT), и столбнячный нейротоксин (TxNT) функционируют посредством сходного начального физиологического механизма действия, подавляя высвобождение нейромедиатора из аксона пораженного нейрона в синапс, они различаются по своему клиническому ответу. В то время как ботулотоксин действует на нервно-мышечные соединения и другие холинергические синапсы в периферической нервной системе, ингибируя высвобождение нейромедиатора ацетилхолина и тем самым вызывая атонический паралич, столбнячный токсин, трансцитоз которого осуществляется в центральные нейроны, действует в основном в центральной нервной системе, предотвращая высвобождение ингибирующих нейромедиаторов ГАМК (гамма-аминомасляная кислота) и глицина, разрушая белок синаптобревин. Последующая гиперактивность двигательных нейронов спинного мозга вызывает общие сокращения мышц-агонистов и мышц-антагонистов, называемые тетаническим спазмом (ригидный паралич).

[5] В то время как столбнячный нейротоксин существует в одном иммунологически отличающемся типе, ботулинические нейротоксины, как известно, встречаются в семи различных иммуногенных серотипах, называемых BoNT/А-BoNT/G со следующими подтипами. Большинство штаммов Clostridium botulinum вырабатывают один тип нейротоксина, но также были описаны штаммы, вырабатывающие несколько токсинов.

[6] Ботулинический и столбнячный нейротоксины имеют высоко гомологичные аминокислотные остатки и демонстрируют подобную доменную структуру. Их биологически активная форма содержит две пептидные цепи, легкая цепь около 50 кДа и тяжелая цепь около 100 кДа, соединенные дисульфидной цепью. Линкер или петлевая область, длина которой варьирует в зависимости от клостридиальных токсинов, расположена между двумя остатками цистеина, образующими дисульфидную связь. Данная петлевая область протеолитически отщепляется неизвестной эндопротеазой клостридий с получением биологически активного токсина.

[7] Молекулярный механизм интоксикации посредством TxNT и BoNT, по-видимому, также является подобным: проникновение в целевой нейрон опосредовано связыванием C-концевой части тяжелой цепи с конкретным рецептором клеточной поверхности; затем токсин поглощается рецептор-опосредованным эндоцитозом. Низкий pH в образованной таким образом эндосоме затем запускает конформационное изменение клостридиального токсина, которое позволяет ему внедряться в эндосомальную мембрану и перемещаться через эндосомальную мембрану в цитоплазму, где дисульфидная связь, соединяющая тяжелую и легкую цепи, является уменьшенной. Затем легкая цепь может селективно отщеплять так называемые SNARE-белки, которые являются основными для различных стадий высвобождения нейромедиаторов в синаптическую щель, например, распознавание, соединение и слияние содержащих нейромедиаторы везикул плазматической мембраны. TxNT, BoNT/B, BoNT/D, BoNT/F и BoNT/G вызывают протеолитическое отщепление синаптобревина или VAMP (везикуло-ассоциированного мембранного белка), BoNT/А и BoNT/Е отщепляют связанные с плазматической мембраной белок SNAP-25, и BoNT/С отщепляет интегральный белок плазматической мембраны синтаксин и SNAP-25.

[8] В Clostridium botulinum ботулотоксин образуется в виде белкового комплекса, содержащего нейротоксичный компонент и нетоксичные белки. Акцессорные белки встраивают нейротоксичный компонент, защищая его от разложения расщепляющими ферментами в желудочно-кишечном тракте. Таким образом, ботулинические нейротоксины большинства серотипов являются токсичными при пероральном приеме. Комплексы, например, с 450 кДа или с 900 кДа получают из культур Clostridium botulinum.

[9] В последние годы ботулинические нейротоксины применяли в качестве терапевтических средств, например, при лечении дистоний и спазмов, и дополнительно применяли в косметических целях, таких как лечение мелких морщин. Препараты, содержащие комплексы ботулотоксина, коммерчески доступны, например, от компаний Ipsen Ltd (Dysport®) или Allergan Inc. (Botox®). Нейротоксичный компонент высокой чистоты, не содержащий каких-либо комплексообразующих белков, например, доступен от компании Merz Pharmaceuticals GmbH, Frankfurt (Xeomin®).

[10] Нейротоксины клостридий обычно вводят в пораженную мышечную ткань, приводя средство в контакт с нейромышечной конечной пластинкой, т.е. в контакт с клеточным рецептором, опосредующим его поглощение нервной клеткой, контролирующей указанную пораженную мышцу. Наблюдались различные степени распространения нейротоксина. Считается, что распространение нейротоксина зависит от введенного количества и конкретного получения нейротоксина. Это может привести к нежелательным побочным эффектам, таким как паралич близлежащей мышечной ткани, чего можно в значительной степени избежать, снизив вводимые дозы до терапевтически релевантного уровня. Передозировка также может вызвать выработку иммунной системой нейтрализующих антител, которые инактивируют нейротоксин, не позволяя ему ослабить непроизвольную мышечную активность. Иммунологическая толерантность к ботулотоксину коррелирует с кумулятивными дозами.

[11] Нейротоксины клостридий проявляют различную продолжительность действия, зависящую от серотипа. Клинический терапевтический эффект BoNT/A длится приблизительно 3 месяца при нервно-мышечных расстройствах и от 6 до 12 месяцев при гипергидрозе. С другой стороны, эффект BoNT/E длятся около 4 недель. Одним из возможных объяснений различий в продолжительности действия может быть различная субклеточная локализация серотипов BoNT. Протеазный домен легкой цепи BoNT/А точечно локализуется в плазматической мембране нейронов, совместно локализуясь с ее субстратом SNAP-25. Напротив, краткосрочный серотип BoNT/Е является цитоплазматическим. Мембранная ассоциация может защищать BoNT/А от механизмов цитозольного разложения, позволяя BoNT/A длительное время персистировать в нейронной клетке.

[12] Более продолжительный терапевтический эффект BoNT/A делает его предпочтительным для определенных клинических применений и, в частности, для определенных косметических применений по сравнению с другими серотипами, например серотипами B, C, D, E, F, G.

[13] Тремор представляет собой наиболее распространенное двигательное расстройство. Его неудовлетворенная медицинская потребность представлена широким разнообразием клинических состояний, которые приводят к появлению симптомов тремора в различных частях тела. Данные симптомы включают, например, прерывистые, ритмичные движения головы, рук, кистей рук, пальцев, ног, стоп, торса, голосовых связок или их непроизвольные дополнительные движения. В результате, возникают функциональное нарушение пораженной части тела и снижение качества жизни у испытуемых. По определению тремор представляет собой непроизвольное колебательное движение мышц, которое может происходить в состоянии покоя или во время действия. Тремор может влиять на положение части тела при произвольном движении (кинетический тремор) в зависимости от движения. Клиническая феноменология четко не разграничивает соответствующие основные заболевания и симптомы и синдромы тремора. Консенсус в отношении синдромов тремора был выявлен недавно (Bhatia et al. Movement Disorders, Vol. 33, No. 1,2018), но последовательное применение предложенной терминологии пока не реализовано. Вследствие неясной причины в некоторых случаях (например, эссенциальный тремор) и патомеханизма основных состояний ожидается, что данный консенсус потребует изменений в будущем.

[14] Причины тремора могут быть различными и могут быть связаны с физиологическими функциями (физиологический тремор, индуцированный холодом), патологическим происхождением (дискинетический тремор), тремор Паркинсона, тремор Холмса, эссенциальный тремор, побочные эффекты, связанные с наркотиками, симптомы отмены алкоголя или наркотиков (алкогольный делирий) или функциональный тремор (также называемый психогенным тремором). Сосуществование данных факторов затрудняет четкое разделение причин. Идентификаторы, такие как диагнозы или симптомы, перечисленные выше, применяют в соответствии с клиническими диагностическими критериями Целевой группы по тремору Международного общества болезни Паркинсона и двигательных расстройств (IPMDS) [Bhatia et al. Movement Disorders, Vol. 33, No. 1, 2018] и ранее опубликованными консенсусными заявлениями.

[15] Эссенциальный тремор (ET) представляет собой наиболее распространенное двигательное расстройство у взрослых [Hess et al. Tremor Other Hyperkinet Mov 2012;2:], [Jankovic et al. Movement Disorders Vol. 11, No. 3, 1996, pp. 250-256]. Диагноз ET закодирован в МКБ-10 (2018) кодом G250 (G25.0), однозначно описывая только данную нозологическую единицу. Самая последняя оценка распространенности [Louis et al. Tremor and Other Hyperkinetic Movements 2014] насчитывает приблизительно 7 миллионов жителей США с ET (включая проявления в руках, голове и нёбе). Существующие способы лечения имеют несколько недостатков и не обеспечивают достаточного лечения всего населения. Препараты для перорального применения (пропранолол, единственный одобренный FDA препарат для лечения ET и примидон, не по назначению) применялись с 1970-х годов, но с недостаточной эффективностью. Кроме того, данные способы лечения связаны с высокой частотой системных нежелательных явлений (например, гипотония, седативный эффект, тошнота, атаксия или спутанность сознания). Бета-адреноблокаторы, такие как пропранолол, недавно стали предметом споров, поскольку они играют причинную роль в развитии болезни Паркинсона [Mittal et al., Science 357, 891-898 (2017), тем самым представляя сомнительный терапевтический подход. Глубокая стимуляция головного мозга (DBS) представляет собой мощный, но инвазивный вариант лечения, а высокочастотная ультразвуковая таламотомия под контролем МРТ (MRg HIFU) эффективна, но вызывает необратимые поражения головного мозга. Оба они доступны только в узкоспециализированных центрах нейрохирургии для пациентов, чей тремор приводит к их серьезной инвалидизации.

[16] Варианты лечения тремора в целом сосредоточены на консервативных мерах (медикаментозная терапия), однако бессознательные механизмы тремора вряд ли можно адекватно лечить у пациентов с прогрессирующими неврологическими заболеваниями, как при болезни Паркинсона. Следовательно, лечение тремора было направлено на уменьшение амплитуды колебаний. В самых ранних подходах применяли этанол (хорошо известное рекреационное вещество, ингибирующее глутаматергические тормозные нервы), поскольку данное преимущественно рекреационное вещество применяли в качестве допинга в спорте, требующем спокойных рук (например, в олимпийских дисциплинах по стрельбе). Позже в качестве антиреморного средства применяли, среди прочего, антигипертензивный и антиаритмический препарат пропранолол (блокатор бета-адренорецепторов). Несколько производных бета-адреноблокаторов из группы антигипертензивных средств испытывали и применяли не по назначению в данном показании.

[17] Варианты нейрохирургического лечения обеспечивают разрушительные решения для мозговых центров таламуса, которые, как известно, участвуют в цепях тремора, при этом современными решениями являются разрушение посредством таламотомии, высокочастотной ультразвуковой терапии с магнитным резонансом. Сообщается также, что глубокая стимуляция определенных областей головного мозга эффективна для лечения тремора у ограниченного числа пациентов.

[18] Другой альтернативой лечения является ботулотоксин А, который применяют при широком спектре различных заболеваний и медицинских состояний, включая цервикальную дистонию, спастичность, недержание мочи, мигрень и т.д. Ботулотоксин А также применяли, например, при лечении дистонического тремора, специфического тремора, тремора Паркинсона и эссенциального тремора. Внутримышечная инъекция ботулотоксина А снижает мышечный тонус обработанных мышц и, таким образом, уменьшает амплитуду тремора, вызывая локальную частичную слабость задействованных мышц.

[19] Местная терапия тремора посредством инъекций ботулинического нейротоксина в подверженные тремору мышцы всегда является сложной задачей, поскольку тремор может воздействовать на всю руку или только на ее части, вызывая широкий спектр клинических явлений, в зависимости от основного заболевания и характера тремора. Тремор верхней конечности, обработанной посредством введения ботулинического нейротоксина в фиксированной дозе/подходе с фиксированной мышцей к нескольким мышцам запястья и предплечья (в первую очередь в сгибатели и разгибатели запястья), продемонстрировал высокую эффективность, но также и ослабляющие побочные эффекты. Побочные эффекты в основном заключались в слабости руки, запястья и опускающихся пальцев. Их можно частично снизить за счет снижения дозы при последующем лечении, путем изменения выбора вводимых мышц или путем переключения стратегии на низкие исходные начальные дозы с последующим медленным повышением дозы или бустерными инъекциями. С другой стороны, данные изменения могут привести к снижению эффективности. Любая низкая начальная доза требует раннего последующего лечения (бустерные инъекции) для противодействия недостаточному начальному лечению тремора. Модификация выбора мышц для проведения инъекции, предназначенных для изменения картины слабости конечности, может вызвать дальнейшую слабость других мышц, тем самым делая лечение пациентов менее переносимым.

[20] Выбор мышц в зависимости от диапазона движений во время тремора также затруднен, так как в идеале это должно решаться на основе точного анализа функции мышц и их суммарного количества. Визуальная клиническая оценка направления движения и амплитуды колебаний неточна и ограничена плохой способностью экзаменатора различать в отношении неясных компонентов сложного движения. Тем не менее, не имея более точных и надежных альтернатив, визуальную оценку все еще регулярно применяют для распределения мышц и доз, тем самым фокусируя внимание на очевидных движениях запястья (чаще всего сгибании и разгибании). Следовательно, в ранних подходах применяли фиксированные дозы для заранее выбранного набора мышц предплечья (в первую очередь сгибателей и разгибателей запястья). Это могло привести к неожиданно высокой частоте мышечной слабости запястья в ранних исследованиях. Тем не менее треморное движение руки может быть результатом тремора других мышц руки (мышцы локтя и плеча). Диапазон движений данных суставов увеличивает тремор запястья, что в результате вызывает общий эффект. Кроме того, другие части тела также могут иметь тремор, например нижние конечности, голова, туловище, что может вызвать нестабильность тела с колебательными волнами, передаваемыми на отдаленные части тела, такие как запястье. При треморе верхних конечностей рук треморное движение может воздействовать на проксимальную и дистальную группы мышц (мышцы, двигающие запястье и мышцы плеча) параллельно, не создавая характерной формы колебаний. Отдельные компоненты (тремор отдельных мышц или даже групп мышц) визуально обнаруживаемого входящего тремора трудно отличить только при визуальном наблюдении со стороны клинициста.

[21] Существуют технические средства измерения вклада группы мышц в тремор, такие как кинематические измерения или электромиография ЭМГ. Тем не менее данные методики для анализа тремора не получили широкого распространения в клинической практике. В частности, ЭМГ с иглой не подходит для исследования большого количества мышц, поскольку она представляет собой болезненную процедуру. Еще одна проблема заключается в том, что обучение лиц, выполняющих инъекцию, не установлено, и нет общепринятых руководящих принципов для мышц и стратегий выбора дозы для лечения тремора с использованием ботулотоксина А. Выбор подходящих мышц и правильная доза на мышцу имеет решающее значение для эффективности лечения и безопасности лечения тремора верхних и нижних конечностей, головы и шеи и голосовых связок. В настоящее время не существует определенного указателя терапевтических доз в целом или на мышцу, который позволяет оптимальное лечение с соответствующей эффективностью и переносимостью. В частности, возможная слабость мышц, обработанных ботулиническим нейротоксином, является следствием общего механизма действия ботулинических нейротоксинов, т.е. необходимо учитывать паралич мышц.

[22] В WO2015039244 представлена методика лечения тремора, в которой применяются адаптивная и обычная система для определения мышечной активности посредством кинематического анализа верхней конечности (в основном амплитуда тремора) и расчета индивидуальной дозировки, вводимой в отдельные мышцы. В Jog et al. Показана применимость данного гибкого определения дозы в клиническом испытании с использованием ботулинического нейротоксина A Xeomin® у 19 пациентов (Jog et al. Poster Presented at TOXINS 2017, Madrid, Spain, 18-21 January 2017).

[23] Существует большой спрос на дальнейшее улучшение терапевтических возможностей для лечения тремора. В частности, желательным является эффективное лечение тремора верхней конечности у пациентов с эссенциальным тремором, болезнью Паркинсона и любыми другими треморами верхней конечности без побочных эффектов.

ЦЕЛИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[24] Целью настоящего изобретения было улучшение лечения тремора, в частности, обеспечение лечения любого симптома тремора верхней конечности. Кроме того, целью настоящего изобретения было предоставление безопасной и эффективной схемы лечения тремора верхней конечности, которую легко вводить пациенту без подробного анализа тремора и комплексной декомпозиции тремора. Конкретной целью настоящего изобретения была разработка системы дозирования для введения ботулинического нейротоксина с целью применения в лечении тремора верхних конечностей, которая позволяет адаптивное и индивидуальное введение в мышцы запястья и предплечья в сочетании с удобным для применения фиксированным введением в мышцы локтя и плеча.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[25] Неожиданно было обнаружено, что ботулинический нейротоксин можно эффективно применять для получения лечения тремора верхней конечности, если ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis ECR), M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator, в дозировке в диапазоне от 2 до 6 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[26] Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение относится к ботулиническому нейротоксину для применения в лечении тремора верхней конечности, включающем введение ботулинического нейротоксина по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке в диапазоне от 2 до 6 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[27] В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности, включающем введение ботулинического нейротоксина по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator 'm, в дозировке в диапазоне от 2 до 6 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[28] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, связанного с тремором верхней конечности, включающему введение ботулинического нейротоксина по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке в диапазоне от 2 до 6 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[29] Настоящее изобретение легче понять со ссылкой на нижеприведенное подробное описание изобретения и включенные в него примеры.

[30] В одном аспекте данное изобретение относится к ботулиническому нейротоксину для применения в лечении тремора верхней конечности, включающем введение ботулинического нейротоксина по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке в диапазоне от около 2 до 6 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[31] В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке в диапазоне от около 2,5 до 5 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[32] В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке в диапазоне от около 2,5 Ед., и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[33] В одном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке в диапазоне от около 2 до 6 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу запястья/предплечья, выбранную из группы M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), в дозировке в диапазоне от 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[34] В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в дозировке около 2.5 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу запястья/предплечья, выбранную из группы M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), в дозировке около 10 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[35] В одном аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ), M.supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR) и M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, в диапазоне от около 2 до 6 Ед., и дозировка, вводимая в M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[36] В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 5 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi radialis (ECR), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi radialis (ECR)) и M. supinator, находится в диапазоне от около 2 до 6 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[37] В дополнительном аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR) и M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator находится в диапазоне от около 2 до 6 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT) находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем ботулинический нейротоксин не вводят в M. externsor digitorium communis (EDC), M. biceps brachii, дельтовидную мышцу и M. teres major.

[38] В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 5 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi radialis (ECR), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi radialis (ECR) и M. supinator, находится в диапазоне от около 2 до 6 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT) находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем ботулинический нейротоксин не вводят в M. externsor digitorium communis (EDC), M. biceps brachii, дельтовидную мышцу и M. teres major.

[39] В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ), M.supinator, M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, находится в диапазоне от около 2,5 до 5 Ед., и дозировка, вводимая в M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), находится в диапазоне от около 5 до 15 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[40] В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 5 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi radialis (ECR), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi radialis (ECR)) и M. supinator, находится в диапазоне от около 2 до 5 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[41] В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR) и M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator находится в диапазоне от около 2,5 до 5 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT) находится в диапазоне от около 5 до 15 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем ботулинический нейротоксин не вводят в M. externsor digitorium communis (EDC), M. biceps brachii, дельтовидную мышцу и M. teres major.

[42] В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 5 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi radialis (ECR), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi radialis (ECR) и M. supinator, находится в диапазоне от около 2 до 5 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT) находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем ботулинический нейротоксин не вводят в M. externsor digitorium communis (EDC), M. biceps brachii, дельтовидную мышцу и M. teres major.

[43] В конкретном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU), M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR) и M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator находится в диапазоне от около 2,5 до 5 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT) находится в диапазоне от около 5 до 15 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимого в мышцы предплечья/запястья не превышает 65 Ед.

[44] В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 5 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi radialis (ECR), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi radialis (ECR) и M. supinator, находится в диапазоне от около 2 до 5 Ед., и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), находится в диапазоне от около 4 до 16 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимая в мышцы предплечья/запястья, не превышает 65 Ед.

[45] В другом аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ), M.supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, составляет около 2,5 Ед. и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), составляет около 10 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[46] В дополнительном аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ), M. supinator, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator составляет около 2.5 Ед. и дозировка, вводимая в M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), составляет около 10 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем ботулинический нейротоксин не вводят в M. externsor digitorium communis (EDC), M. biceps brachii, дельтовидную мышцу и M. teres major.

[47] В конкретном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ), M.supinator, M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), и причем дозировка, вводимая в M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, составляет около 2.5 Ед., и дозировка, вводимая в M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU) и M.pronator teres (PT), составляет около 10 Ед. на мышцу, и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед., и причем общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимая в мышцы предплечья/запястья, не превышает 40 Ед.

[48] В контексте настоящего изобретения тремор верхней конечности может представлять собой тремор у пациентов с эссенциальным тремором, тремором вследствие нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Паркинсона, дистоническим тремором, мозжечковым тремором, и любыми другими видами тремора верхней конечности (например, тремор музыканта, тремор Холмса, нейропатический тремор, тремор, связанный с определенной задачей или положением, тремор в состоянии покоя, тремор действия и т.д.).

[49] Кроме того, симптомы и синдромы тремора в детстве и юности входят в объем настоящего изобретения. У таких пациентов дозировка препарата должна быть ориентирована на массу тела ребенка, проходящего лечение. Адаптированные дозы находятся в диапазоне 1-8 Ед./кг МТ (максимум 140 Ед.) на верхнюю конечность.

[50] В целом, в соответствии с настоящим изобретением предусмотрено, что ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья в общей дозировке в диапазоне от 30 Ед. до 65 Ед. В более конкретном варианте осуществления предусмотрено, что ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья в общей дозировке в диапазоне от 40 Ед. до 65 Ед. В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья в общей дозировке, которая не превышает 65 Ед. В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья в общей дозировке, которая не превышает 40 Ед. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы-сгибатели и разгибатели запястья/предплечья в дозировке с соотношением в диапазоне от 1:2 до 1:6.

[51] В целом, в соответствии с настоящим изобретением предусмотрено, чтобы ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу каждого предплечья/запястья, локтя и плеча.

[52] В дополнительном аспекте настоящего изобретения M. extensor carpi radialis (ECR) может быть разделен на M. extensor carpi radialis longus и M. extensor carpi radialis brevis.

[53] В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. pronator quadratus (PQ), M. extensor carpi radialis longus, M. extensor carpi radialis brevis и M. supinator и причем ботулинический нейротоксин вводят to M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator, в дозировке в диапазоне от около 2,5 до 6 Ед., в M. extensor carpi radialis longus в дозировке в диапазоне от 1,25 Ед. и 3 Ед. и в M. extensor carpi radialis brevis в дозировке в диапазоне от 1,25 Ед. и 3 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу запястья/предплечья, выбранную из группы M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), в дозировке в диапазоне от 4 до 16 Ед. на мышцу и причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[54] В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. pronator quadratus (PQ), M. extensor carpi radialis longus, M. extensor carpi radialis brevis и M. supinator и, причем ботулинический нейротоксин вводят to M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator, в дозировке в диапазоне от около 2,5 до 5 Ед., в M. extensor carpi radialis longus в дозировке 1,25 Ед. и в M. extensor carpi radialis brevis в дозировке 1,25 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу запястья/предплечья, выбранную из группы M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), в дозировке в диапазоне от 4 до 16 Ед. на мышцу и, причем ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя в дозировке около 20 Ед. и по меньшей мере в одну мышцу плеча в дозировке около 15 Ед.

[55] В соответствии с настоящим изобретением ботулинический нейротоксин для применения не вводят в мышцы предплечья/запястья, выбранные из группы M. flexor digitorum superficialis и profundus, M. palmaris longus, M. flexor pollicis longus, M. extensor pollicis brevis и longus, M. abductor pollicis, M. opponens pollicis, M. abductor pollicis brevis, M. flexor pollicis brevis. M. adductor pollicis. M. interossei dorsales, M. lumbricales, M. opponens digit! minimi, M. abductor digiti minimi и M. flexor digiti minimi brevis. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения не вводят в M. externsor digitorium communis.

[56] В дополнительных вариантах осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя, выбранную из группы M. brachialis и M. triceps brachii. В предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу локтя, выбранную из группы M. brachialis и M. triceps brachii в дозировке около 20 Ед. на мышцу. В конкретном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы локтя в общей дозировке, которая не превышает 40 Ед.

[57] В контексте настоящего изобретения, ботулинический нейротоксин для применения не вводят в мышцы локтя, выбранные из M. brachioradialis, и M. anconeus. В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения не вводят в M. biceps brachii.

[58] В дополнительных вариантах осуществления настоящего изобретения ботулотоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу плеча, выбранную из группы M. latissimus dorsi, M. pectoralis major, M. supraspinatus и M. infraspinatus. В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения ботулотоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу плеча, выбранную из группы M. latissimus dorsi, M. pectoralis major, M. supraspinatus и M. infraspinatus в дозировке около 15 Ед. на мышцу. В дополнительных вариантах осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы плеча, причем общая дозировка не превышает 60 Ед.

[59] В контексте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения не вводят в мышцу плеча, выбранную из группы M. coracobrachialis, M. pectoralis minor, M. subclavius, M. subscapularis, M. serratus anterior, M. levator scapulae, M. rhomboid minor и major и M. trapezius. В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения не вводят в M. deltoideus и в M. teres major muscle.

[60] В целом, в соответствии с настоящим изобретением предусмотрено, что ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке в диапазоне от 130 Ед. до 165 Ед. В более конкретном варианте осуществления предусмотрено, что ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке в диапазоне от 140 Ед. до 165 Ед. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке, которая не превышает 165 Ед. В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке, которая не превышает 140 Ед. Если ботулинический нейротоксин для применения вводят с двух сторон, соответствующие дозировки регулирую соответственно и удваивают по сравнению с односторонним лечением. В целом, в соответствии с настоящим изобретением предусмотрено, что ботулинический нейротоксин для применения вводят с двух сторон в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке в диапазоне от 260 Ед. до 330 Ед. В более конкретном варианте осуществления предусмотрено, что ботулинический нейротоксин для применения вводят с двух сторон в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке в диапазоне от 280 Ед. до 330 Ед. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят с двух сторон в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке, которая не превышает 330 Ед. В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят с двух сторон в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча в общей дозировке, которая не превышает 280 Ед.

[61] В предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, по меньшей мере одну мышцу локтя и по меньшей мере одну мышцу плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.

[62] В конкретном предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.

[63] В конкретном предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят в 5 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus около 2,5 - 5,0 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.

[64] В дополнительном предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, по меньшей мере одну мышцу локтя и по меньшей мере одну мышцу плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.

[65] В конкретном предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят в 7 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.

[66] В альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, по меньшей мере в одну мышцу локтя и по меньшей мере одну мышцу плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus
M. deltoideus около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 10-15 Ед.

[67] В дополнительном альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus
M. deltoideus около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 10-15 Ед.

[68] В дополнительном альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в 5 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus
M. deltoideus около 2,5 - 5,0 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 5-15 Ед.
около 2,5 - 5,0 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 10-15 Ед.

[69] В дополнительном альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, по меньшей мере в одну мышцу локтя и по меньшей мере одну мышцу плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus
M. deltoideus около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 10-15 Ед.

[70] В дополнительном альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в 7 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 5 мышцы плеча в соответствии со схемой дозирования:

M. extensor carpi ulnaris (ECU)
M. extensor carpi radialis (ECR)
M. flexor carpi radialis (FCR)
M. flexor carpi ulnaris (FCU)
M. pronator teres (PT)
M. pronator quadratus (PQ)
M. supinator
M. brachialis
M. triceps brachii
M. latissimus dorsi
M. pectoralis major
M. supraspinatus
M. infraspinatus
M. deltoideus около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 10 Ед.
около 2,5 Ед.
около 2,5 Ед.
около 20 Ед.
около 20 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 15 Ед.
около 10-15 Ед.

[71] В контексте настоящего изобретения, ботулинический нейротоксин для применения можно вводить с одной стороны или с двух сторон. В предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят с двух сторон.

[72] В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы запястья/предплечья, локтя и плеча в виде водного ресуспендированного раствора с концентрацией в диапазоне от 20 до 80 Ед./мл. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы запястья/предплечья, локтя и плеча в виде водного раствора с концентрацией в диапазоне от 25 до 60 Ед./мл. В конкретном предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы запястья/предплечья, локтя и плеча в виде водного раствора с концентрацией 25 Ед./мл. В целом, следует понимать, что ботулинический нейротоксин может быть получен в виде лиофилизата, содержащего активное средство вместе с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом. Перед применением, лиофилизат ресуспендируют посредством добавления подходящего количества физиологического раствора или другой подходящей среды для ресуспендирования с получением ресуспендированного раствора ботулинического нейротоксина в предусмотренной концентрации. В качестве альтернативы, ботулинический нейротоксин для применения может быть представлен в виде предварительно заполненного шприца, как раскрыто, например, в WO2016/102068, WO 2016/124213 или WO2017/220553. Последняя форма для применения позволяет избежать любой стадии ресуспендирования и позволяет производить и предоставлять ботулинический нейротоксин, уже концентрированный надлежащим образом.

[73] В контексте настоящего изобретения, ботулинический нейротоксин для применения вводят в мышцы запястья/предплечья, локтя и плеча руки в общем объеме не более 6,6 мл на руку. В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения вводят в отдельные мышцы в дозировке 0,1-0,8 мл на мышцу.

[74] В целом, ботулинический нейротоксин для применения вводят в отдельные мышцы в отношении анатомии мышц. Специалисту в данной области известны способы введения ботулинического нейротоксина в анатомическое расположение двигательных единиц. В зависимости от анатомического размера, формы, физиологической силы и функции мышц, расположения и степени нейромоторных конечных пластинок, на которые воздействует ботулинический нейротин, количество точек инъекции на мышцу варьирует. Анатомические атласы предназначены для определения места и объема инъекций в отдельные мышцы. Инъекции ботулинического нейротоксина для применения также можно направлять с использованием средств ЭМГ, ультразвука или электрической стимуляции соответствующих мышц.

[75] Количество мест инъекции обычно определяют в соответствии с размером соответствующей мышцы, и специалист в данной области знает, как вводить ботулинический нейротоксин в конкретную мышцу. В контексте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин вводят в мышцы запястья/предплечья, выбранные из группы M.extensor carpi ulnaris (ECU), M.extensor carpi radialis (ECR), M.flexor carpi radialis (FCR), M.flexor carpi ulnaris (FCU), M.pronator teres (PT), M.pronator quadratus (PQ) и M.supinator, посредством применения одного места инъекции для каждой мышцы. Ботулинический нейротоксин вводят в мышцы локтя, выбранные из M. brachialis и M. triceps brachii, посредством применения двух мест для каждой мышцы. Ботулинический нейротоксин вводят в мышцы плеча, выбранные из M. latissimus dorsi и M. pectoralis major, посредством применения двух мест для каждой мышцы. Ботулинический нейротоксин вводят в мышцы плеча, выбранные из M. supraspinatus и M. infraspinatus, посредством применения трех мест для каждой мышцы.

[76] Тяжесть тремор оценивают в соответствии с настоящим изобретением посредством применения шкалы для оценки эссенциального тремора (TETRAS). В данной оценке применяется утвержденная клиническая шкала, разработанная специально для оценки степени тяжести ET. Ее оценивают от 0 до 4 с интервалом в полбалла за голову, лицо, включая челюсть, голос, верхнюю конечность, сторону нижней конечности в худшем состоянии, стоя. Шкала ориентирована на оценку тремора верхней конечности во время действия с использованием следующих подкатегорий: почерк только на доминирующей стороне; раздельная оценка с обеих сторон для следующих условий: осанка с вытянутыми вперед руками и положение «взмаха крыльями», кинетический тест с использованием движения пальца к носу, рисование спиралей Архимеда и соединение точек, при котором ручка держится как можно ближе к точке на листе бумаги, не касаясь ее. Система TETRAS имеет точки отсчета, которые охватывают более широкий диапазон амплитуд тремора (более 20 см = 4 степень), что делает ее пригодной для оценки пациентов с тяжелым ET. Суммарный балл по всем пунктам TETRAS оценивают для характеристики степени тяжести тремора. Дополнительная оценка двигательной способности верхней конечности оценивается опытным врачом на основе задач, выполняемых испытуемыми (под руководством исследователя). Подшкала способности обеспечивает повышение оценки на 0,5 балла. Повышения на 0,5 балла в рейтинге «тремора верхней конечности» определяются конкретными диапазонами амплитуды тремора. Минимальное обнаруживаемое изменение шкалы производительности TETRAS составляет 8,9% от базового показателя [Voller et al. Mov Disord. 2015].

[77] В контексте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения смягчает тяжесть тремора в соответствии с подшкалой для оценки двигательной способности верхней конечности TETRAS, оцениваемой исследователем, по меньшей мере на 9,0%. В предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения смягчает тяжесть тремора в соответствии с подшкалой для оценки двигательной способности верхней конечности TETRAS, оцениваемой исследователем, по меньшей мере на 15%. В более предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения смягчает тяжесть тремора в соответствии с подшкалой для оценки двигательной способности верхней конечности TETRAS, оцениваемой исследователем, по меньшей мере на 25%. В наиболее предпочтительном варианте осуществления ботулинический нейротоксин для применения смягчает тяжесть тремора в соответствии с подшкалой для оценки двигательной способности верхней конечности TETRAS, оцениваемой исследователем, по меньшей мере на 40%.

[78] В качестве альтернативы, тяжесть тремор можно оценивать в соответствии с настоящим изобретением посредством применения стандартизированного компьютеризированного кинематического анализа тремора. В данном анализе оценивается интенсивность тремора посредством измерения амплитуды углового тремора по отношению к функциональным группам мышц плеча (сгибание/разгибание, приведение/отведение), локтя (сгибание/разгибание) и запястья/предплечья уровня (сгибание/разгибание, радиальное отклонение/локтевое отклонение, пронация/супинация) для серии из 3 анализов для каждой из следующих задач: I. Положение 1: плечи согнуты на 90° с предплечьями, вытянутыми вперед и пронированными; II. Положение 2: плечи согнуты на 90° с предплечьями, вытянутыми вперед в нейтральном положении; III. Положение 3: плечи согнуты на 90°, локти также согнуты, руки расположены около рта; IV. Нагрузка 1: Удерживание пустого пластикового стаканчика (33 г); V. Нагрузка 2: Удерживание того же пластикового стаканчика, наполненного весом 1 фунт (банка содовой на 355 мл); VI. Нагрузка 3: Удерживание мобильного телефона (это может имитировать удерживание другого объекта). Оценку всех трех нагрузок проводят в позе с согнутыми на 90° плечами и с вытянутыми вперед предплечьями.

[79] В контексте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения снижает максимальную логарифмически трансформированную измеренную методом акселерометрии амплитуду тремора руки по сравнению с исходным уровнем по сравнению с плацебо на 4 неделе по меньшей мере на -0,10 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения снижает максимальную логарифмически трансформированную измеренную методом акселерометрии амплитуду тремора руки по сравнению с исходным уровнем по сравнению с плацебо на 4 неделе по меньшей мере на -0,10 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]), и на 6 неделе по меньшей мере на -0,10 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения снижает максимальную логарифмически трансформированную измеренную методом акселерометрии амплитуду тремора руки по сравнению с исходным уровнем по сравнению с плацебо на 4 неделе по меньшей мере на -0,10 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]), на 6 неделе по меньшей мере на -0,10 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]) и на 8 неделе по меньшей мере на -0,10 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В предпочтительном аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения снижает максимальную логарифмически трансформированную измеренную методом акселерометрии амплитуду тремора руки по сравнению с исходным уровнем по сравнению с плацебо на 4 неделе по меньшей мере на -0,20 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения снижает максимальную логарифмически трансформированную измеренную методом акселерометрии амплитуду тремора руки по сравнению с исходным уровнем по сравнению с плацебо на 4 неделе по меньшей мере на -0,20 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]), и на 6 неделе по меньшей мере на -0,20 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения снижает максимальную логарифмически трансформированную измеренную методом акселерометрии амплитуду тремора руки по сравнению с исходным уровнем по сравнению с плацебо на 4 неделе по меньшей мере на -0,20 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]), и на 6 неделе по меньшей мере на -0,20 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]) и на 8 неделе по меньшей мере на -0,20 м/с² (маргинальное [LS] среднее различие [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В дополнительном аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения уменьшает максимальную амплитуду углового тремора запястья от исходного уровня по сравнению с плацебо на 4 неделе на -0,7 градусов (различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения уменьшает максимальную амплитуду углового тремора запястья от исходного уровня по сравнению с плацебо на 4 неделе на -0,7 градусов (различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]) и на 6 неделе на -0,7 градусов ((различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения уменьшает максимальную амплитуду углового тремора запястья от исходного уровня по сравнению с плацебо на 4 неделе на -0,7 градусов (различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]), на 6 неделе на -0,7 градусов ((различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]) и на 8 неделе на -0,7 градусов ((различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В дополнительном предпочтительном аспекте настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения уменьшает максимальную амплитуду углового тремора запястья от исходного уровня по сравнению с плацебо на 4 неделе на -0,14 градусов (различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения уменьшает максимальную амплитуду углового тремора запястья от исходного уровня по сравнению с плацебо на 4 неделе на -0,14 градусов (различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]) и на 6 неделе на -0,14 градусов ((различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]). В более предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения уменьшает максимальную амплитуду углового тремора запястья от исходного уровня по сравнению с плацебо на 4 неделе на -0,14 градусов (различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]), на 6 неделе на -0,14 градусов ((различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]) и на 8 неделе на -0,14 градусов ((различие средних значений, определенных посредством способа наименьших квадратов [ботулинический нейротоксин A по сравнению с плацебо]).

[80] Анализы in vivo для оценки биологической активности ботулинического нейротоксина включают анализ LD50 на мышах и анализ гемидиафрагмы ex vivo на мышах, как описано у Pearce et al. (Pearce 1994, Toxicol. Appl. Pharmacol. 128: 69-77) и Dressier et al. (Dressier 2005, Mov. Disord. 20:1617-1619, Keller 2006, Neuroscience 139: 629-637) или клеточный анализ, описанный в W02009/114748, WO2014/207109 или WO 2013/049508. Биологическая активность обычно выражается в мышиных единицах (Ед.). Применяемая в данном документе 1 Ед. представляет собой количество нейротоксичного компонента ботулинического нейротоксина, который уничтожает 50% указанной популяции мышей после внутрибрюшинного введения, т.е. LD50 при в.б. введении мыши. Особо пригодный способ определения биологической активности ботулинического нейротоксина представляет собой клеточный анализ, раскрытый, например, в W02009/114748, WO 2013/049508 или WO 2014/207109. Результаты активности, полученные посредством таких клеточных анализов, соответствуют значениям активности, полученным в анализе LD50 при в.б. введении мыши. Результаты активности, полученные для составов ботулина серотипа А, подобных коммерчески доступному инкоботулинумтоксину А (ботулиническому токсину серотипа А без комплексообразующего белка, Xeomin®, Merz Pharmaceuticals GmbH)) или онаботулинумтоксин А (ботулиническому токсину серотипа А с комплексообразующим белком, Botox®, Allergan Inc.) могут быть преобразованы в значения для других токсинов с использованием коэффициентов преобразования, известных специалисту в данной области. Например, необходимая доза абоботулинумтоксина А (ботулинумтоксина серотипа А с комплексообразующим белком, Dysport®, Ipsen Biopharm Limited) может быть определена посредством умножения дозы инкоботулинумтоксина А или онаботулинтоксина А с коэффициентом от 2,5 до 5. Дозу римаботулинтоксина В (ботулинумтоксина серотипа B, Myobloc®, Solstice Neurosciences/US WorldMeds LLC) можно рассчитать, умножив дозу инкоботулинумтоксина A или онаботулинтоксина A на коэффициент от 20 до 40.

[81] В контексте настоящего изобретения, термин «ботулинический нейротоксин» относится к природному нейротоксину, получаемому из бактерий Clostridium botulinum, или к нейротоксину, получаемому из альтернативных источников, в том числе посредством рекомбинантных методик или посредством генетической или химической модификации. В частности, ботулинические нейротоксины обладают эндопептидазной активностью. В контексте настоящего изобретения термин «ботулотоксин» и «ботулинический нейротоксин» применяются синонимично и взаимозаменяемо.

[82] В конкретных вариантах осуществления ботулинический нейротоксин по настоящему изобретению представляет собой комплекс ботулинического нейротоксина.

[83] В контексте настоящего изобретения термины «комплекс токсина» или «комплекс ботулотоксина» или «комплекс ботулинического нейротоксина» являются взаимозаменяемыми и относятся к высокомолекулярному комплексу, содержащему нейротоксичный компонент примерно 150 кДа и, кроме того, нетоксичных белков Clostridium botulinum, включая гемагглютининовый и негемагглютининовый белки (Sakaguchi 1983; Sugiyama 1980). Ботулотоксины, при высвобождении из лизированных культур рода Clostridium обычно связываются с другими бактериальными белками, которые вместе образуют комплекс токсина. Данный комплекс обычно содержит дополнительные, так называемые «нетоксичные» белки, которые будут называться в данном документе «комплексообразующим белком» или «бактериальными белками». Комплекс нейротоксичного компонента и бактериальных белков называется «комплексом ботулотоксина рода Clostridium» или «комплексом ботулотоксина». Молекулярная масса данного комплекса может варьировать от около 300000 до около 900000 Да. Он коммерчески доступен как белковый комплекс ботулотоксина А, например, под торговым названием BOTOX (Allergan Inc) или под торговым названием DYSPORT (Ipsen Ltd).

[84] В контексте настоящего изобретения термины «нейротоксичный компонент» или «компонент нейротоксина», применяемые в данной заявке, относится к субъединице комплекса ботулотоксина, который обладает нейротоксичной активностью, и который имеет молекулярную массу примерно 150 кДа в серотипе А. В отличие от комплекса токсина, нейротоксичный компонент в его выделенной и очищенной форме, т.е. лишенный каких-либо комплексообразующих белков рода Clostridium, кислото-неустойчив и не противостоит агрессивной среде желудочно-кишечного тракта. Способ очистки и производства нейротоксичного компонента ботулинического нейротоксина продемонстрирован в США 8,398,998. Нейротоксичный компонент высокой чистоты, не содержащий каких-либо комплексообразующих белков, например, доступен от компании Merz Pharmaceuticals GmbH, Frankfurt (Xeomin®).

[85] Термин «нейротоксичный компонент» также включает функциональные гомологи, обнаруженные в других серотипах Clostridium botulinum.

[86] В конкретных вариантах осуществления ботулинический нейротоксин по настоящему изобретению представляет собой нейротоксичный компонент комплекса ботулинического нейротоксина, причем указанный нейротоксичный компонент лишен другого белкового компонента комплекса ботулинического нейротоксина рода Clostridium.

[87] В контексте настоящего изобретения термин «лишенный другого белкового компонента комплекса ботулинического нейротоксина рода Clostridium» означает отсутствие каких-либо нетоксичных белков Clostridium botulinum, например, гемагглютининовых белков.

[88] В конкретных вариантах осуществления ботулинический нейротоксин по настоящему изобретению выбран из группы других серотипов, включающей серотип A ботулинического нейротоксина (BoNT/A), серотип В ботулинического нейротоксина (BoNT/B), серотип C1 ботулинического нейротоксина (BoNT/C1), серотип D ботулинического нейротоксина (BoNT/D), серотип E ботулинического нейротоксина (BoNT/E), серотип F ботулинического нейротоксина (BoNT/F) или серотип G ботулинического нейротоксина (BoNT/G). Ботулинический нейротоксин и, в частности, его легкая цепь и тяжелая цепь можно получить из одного из антигенно различных серотипов ботулинического нейротоксина, указанных выше. В одном аспекте указанная легкая и тяжелая цепь ботулинического нейротоксина представляют собой легкую и тяжелую цепь ботулинического нейротоксина, выбранного из группы, включающей: BoNT/A, BoNT/B, BoNT/C1, BoNT/D, BoNT/E, BoNT/F или BoNT/G. В другом аспекте полинуклеотид, кодирующий указанный ботулинический нейротоксин по настоящему раскрытию, содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 1 (BoNT/A), SEQ ID NO: 3 (BoNT/B), SEQ ID NO: 5 (BoNT/C1), SEQ ID NO: 7 (BoNT/D), SEQ ID NO: 9 (BoNT/E), SEQ ID NO: 11 (BoNT/F), или SEQ ID NO: 13 (BoNT/G). Кроме того, в одном аспекте охватывается полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, показанную в любой из SEQ ID NO: 2 (BoNT/A), SEQ ID NO: 4 (BoNT/B), SEQ ID NO: 6 (BoNT/C1), SEQ ID NO: 8 (BoNT/D), SEQ ID NO: 10 (BoNT/E), SEQ ID NO: 12 (BoNT/F), или SEQ ID NO: 14 (BoNT/G). Также в одном аспекте охватываются средства и способы по настоящему раскрытию для получения ботулинического нейротоксина, содержащего или состоящего из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, включающей: SEQ ID NO: 2 (BoNT/A), SEQ ID NO: 4 (BoNT/B), SEQ ID NO: 6 (BoNT/C1), SEQ ID NO: 8 (BoNT/D), SEQ ID NO: 10 (BoNT/E), SEQ ID NO: 12 (BoNT/F), и SEQ ID NO: 14 (BoNT/G).

[89] В другом аспекте указанный полинуклеотид, кодирующий ботулинический нейротоксин по настоящему раскрытию, представляет собой вариант указанных выше полинуклеотидов, содержащих один или более нуклеотидных замещений, делеций и/или добавлений, которые в еще одном аспекте могут обеспечивать полипептид, имеющий одно или более из аминокислотных замещений, делеций и/или добавлений. Кроме того, в другом аспекте полинуклеотид варианта по настоящему изобретению содержит вариант нуклеотидной последовательности, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичной нуклеотидной последовательности показанной в любой из SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 или 15 или вариант нуклеотидной последовательности, который кодирует аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентичную аминокислотной последовательности, показанной в любой из SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 или 16. Применяемый в данном документе термин «идентичный», относится к идентичности последовательности, отличающейся определением количества идентичных аминокислот между двумя нуклеотидными последовательностями или двумя аминокислотными остатками, причем последовательности выровнены таким образом, чтобы получилось совпадение наивысшего порядка Его можно рассчитать с использованием опубликованных методик или способов, кодифицированных в компьютерных программах, таких как, например, BLASTP, BLASTN или FASTA (Altschul 1990, J Mol Biol 215, 403). Значения процента идентичности в одном аспекте рассчитываются по всей аминокислотной последовательности. Квалифицированному специалисту доступен ряд программ, основанных на множестве алгоритмов, для сравнения различных последовательностей. В данном контексте алгоритмы Needleman и Wunsch или Smith и Waterman обеспечивают особенно надежные результаты. Для выполнения последовательного выравнивания можно применять программу PileUp (Higgins 1989, CABIOS 5, 151) или программы Gap и BestFit (Needleman 1970, J Mol Biol 48; 443; Smith 1981, Adv Appl Math 2, 482), которые являются частью пакета программного обеспечения GCG (Genetics Computer Group 1991, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711). Приведенные выше значения идентичности последовательностей в процентах (%) должны быть определены в другом аспекте изобретения с использованием программы GAP для всей области последовательности со следующими настройками: Штраф за открытие гэпа: 50, штраф за продолжение гэпа: 3, среднее совпадение: 10000 и среднее несовпадение: 0,000, которое, если не указано иное, всегда должны использоваться как стандартные настройки для последовательного выравнивания. В одном аспекте каждый из вышеупомянутых вариантов полинуклеотидов кодирует полипептид, сохраняющий один или несколько и, в другом аспекте, все биологические свойства соответствующего ботулинического нейротоксина, т.е. BoNT/A, BoNT/B, BoNT/C1, BoNT/D, BoNT/E, BoNT/F или BoNT/G. Специалистам в данной области будет понятно, что полная биологическая активность сохраняется только после протеолитической активации, даже несмотря на то, что возможно, что необработанный прекурсор может выполнять некоторые биологические функции или быть частично активным. В контексте данного документа «биологические свойства» относятся к (a) связыванию с рецептором, (b) интернализации, (c) транслокация через эндосомальную мембрану в цитозоль и/или (d) эндопротеолитическое отщепление белков, участвующих в слиянии мембран синаптических везикулов. В дополнительном аспекте вариантные полинуклеотиды могут кодировать ботулинические нейротоксины, имеющие улучшенные или измененные биологические свойства, например, они могут содержать сайты расщепления, которые улучшены для распознавания фермента, или могут быть улучшены для связывания с рецептором, или любого другого свойства, указанного выше.

[90] В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения ботулинический нейротоксин для применения в лечении тремора верхней конечности вводят вместе с применением по меньшей мере с одного стандартного лечения, выбранного из пропанолола, пиримидона, любым другим лечением противоэпилептическим препаратом или блокатором кальциевых каналов, или ботулинический нейротоксин применяется параллельно или последовательно с глубокой стимуляцией головного мозга или высокочастотным ультразвуком под контролем магнитного резонанса, местной электростимуляцией, биологической обратной связью, стимуляцией под контролем кинематической оценки, противотреморными устройствами, противотреморными приложениями для смартфонов и т.д. или их комбинациями.

[91] В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей ботулинический нейротоксин по настоящему изобретению, для применения в лечении тремора верхней конечности. Для получения фармацевтического препарата, содержащего ботулинический нейротоксин, нейротоксин может быть составлен посредством различных методик в зависимости от необходимых целей применения, которые известны в данной области. Например, (биологически активный) ботулинический нейротоксин можно применять в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями в качестве фармацевтической композиции. Фармацевтически приемлемый(-ые) носитель(-и) должны быть приемлемыми с точки зрения совместимости с другими ингредиентами состава и не быть вредными для получателя. Применяемый фармацевтический носитель может включать твердое вещество, гель или жидкость. Примерами твердых носителей являются лактоза, сульфат кальция, сахароза, тальк, желатин, агар, пектин, гуммиарабик, стеарат магния, стеариновая кислота и т.п. Примерами жидких носителей являются глицерин, забуференный фосфатом солевой раствор, вода, эмульсии, различные типы смачивающих средств и т.п. Подходящие носители включают носители, упомянутые выше, и другие, хорошо известные в данной области, см., например, в Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Истон, Пенсильвания. В одном аспекте фармацевтическую композицию можно растворять в растворителе перед введением. Растворитель также выбран таким образом, чтобы он не оказывал влияния на биологическую активность продукта на основе ботулинического нейротоксина. Примерами таких растворителей являются дистиллированная вода или физиологический раствор. Кроме того, фармацевтическая композиция или состав также могут включать другие носители или нетоксичные, нетерапевтические неиммуногенные стабилизаторы и т.п. Таким образом, в одном аспекте составленный продукт на основе ботулинического нейротоксина может присутствовать в жидкой или лиофилизированной форме. В одном аспекте он может присутствовать вместе с глицерином, стабилизаторами белка (HSA) или небелковыми стабилизаторами, такими как поливинилпирролидон (PVP), гиалуроновая кислота или свободные аминокислоты, такие как метионин или гистидин. В одном аспекте подходящие небелковые стабилизаторы раскрыты в WO 2005/007185, WO 2006/020208, WO2018/135722, W02006/005910 или WO2012/134240. Подходящий состав для стабилизированного HSA состава, содержащего ботулинический нейротоксин по настоящему раскрытию, раскрыт, например, в US 8,398,998 B2.

[92] В контексте настоящего изобретения термин «содержит» или «содержащий» означает «включающий без ограничения». Термин предназначен для неограниченного использования, чтобы указать наличие любых заявленных функций, элементов, целых чисел, стадий или компонентов, но не исключать наличие или добавление одной или нескольких других их функций, элементов, целых чисел, стадий, компонентов или групп. Таким образом, термин «содержащий» включает более ограничительные термины «состоящий из» и «состоящий по существу из».

[93] В контексте настоящего изобретения термин «около» относится к обычному отклонению дозы ботулинического нейротоксина, фактически введенной в мышцы, от расчетной дозы. Если ботулинический нейротоксин для введения вводят в виде ресуспендированного водного раствора посредством применения шприца, специалистом в данной области обычно считается, что данное отклонение составляет +/- 10% от расчетной дозы.

[94] В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, содержащая ботулинический нейротоксин по настоящему изобретению предназначена для применения в лечении тремора верхних конечностей.

[95] В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения тремора верхних конечностей, причем способ включает введение терапевтически эффективного количества ботулинического нейротоксина по настоящему изобретению.

ПРИМЕР

Пример 1: Общее лечение тремора верхней конечности с использованием NT201

[96] NT 201 (активный ингредиент: NT 101, тип А ботулинического нейротоксина, не содержащего комплексообразующего белка, название, принятое в США - инкоботулинумтоксин А), вспомогательные вещества - сывороточный альбумин человека плюс сахароза) представлен во флаконах для ресуспендирования. Для лечения с одной стороны два флакона с 100 Ед. NT 201 ресуспендируют с использованием 8,0 мл солевого раствора, доводя раствор до концентрации 25 Ед./мл. Для лечения с двух сторон 3 или 4 флакона ресуспендируют с использованием 8,0 или 16,0 мл физиологического раствора, обеспечивая такую же концентрацию. Дополнительного разведения не требуется.

[97] Для начального лечения NT 201 вводят с одной стороны в мышцы запястья/предплечья и обязательно в мышцы локтя и плеча (таблица ниже, схема дозирования А). Данная схема дозирования применима для всех пациентов с тремором верхней конечности любой интенсивности (отмеченной от слабой до умеренной) и любого поражения групп мышц запястья/предплечья/локтя/плеча.

[98] Схема дозирования В может быть введена с одной стороны или с двух сторон вначале опытными лицами, выполняющих инъекцию, или после первоначальной инъекции пациенту по схеме А. Для схемы дозирования В выбор подверженных тремору мышц с гибким числом мышц предплечья/запястья должен быть осуществлен исследователем на основании клинического анализа и может быть подтвержден ЭМГ или любыми другими техническими вспомогательными мерами (например, посредством кинематического анализа).

[99] Общая дозировка в схеме дозирования A составляет 140 Ед. и максимальная допустимая доза в схеме дозирования В составляет 165 Ед. на руку на пациента. Подверженные тремору мышцы предплечья обрабатывают минимум в 4 и максимум в 7 мышц в схеме дозирования B. Все 7 мышц предплечья/запястья обрабатывают в схеме дозирования A.

[100] При лечении с двух сторон общая дозировка в схеме дозирования А составляет 280,0 Ед. и в схеме дозирования В составляет 330,0 Ед. на пациента. Для лечения с двух сторон применяются те же правила дозирования, что и для лечения с одной стороны, только они применяются для обеих обрабатываемых рук параллельно.

[101] Таблица 1

Мышцы Количество точек введения Схема дозирования A (фиксированные мышца предплечья/запястья и дозировка) Схема дозирования В (гибкие мышца предплечья/запястья и дозировка) Мышцы предплечья/запястья Общая дозировка для предплечья:
40,0 Ед. По меньшей мере 4 из следующих должны быть обработаны
Общая дозировка для предплечья:
30,0-60,0 Ед. M. extensor carpi ulnaris (ECU) 1 2,5 Ед. 2,5-5,0 Ед. M. extensor carpi radial is (ECR) 1 2,5 Ед. 2,5-5,0 Ед. M. flexor carpi radialis (FCR) 1 10,0 Ед. 5,0-15,0 Ед. M. flexor carpi ulnaris (FCU) 1 10,0 Ед. 5,0-15,0 Ед. M. pronator teres (PT) 1 10,0 Ед. 5,0-15,0 Ед. M. pronator quadratus (PQ) 1 2,5 Ед. 2,5-5,0 Ед. M. supinator 1 2,5 Ед. 2,5-5,0 Ед. Мышцы локтя Общая дозировка для локтя:
40,0 Ед. Общая дозировка для локтя:
40,0 Ед. M. brachialis 2 20,0 Ед. 20,0 Ед. M. triceps brachii 2 20,0 Ед. 20,0 Ед. Мышцы плеча Общая дозировка для плеча:
60,0 Ед. Общая дозировка для плеча:
60,0 Ед. M. latissimus dorsi 2 15,0 Ед. 15,0 Ед. M. pectoralis major 2 15,0 Ед. 15,0 Ед. M. supraspinatus 3 15,0 Ед. 15,0 Ед. M. infraspinatus 3 15,0 Ед. 15,0 Ед. Общая дозировка: 140,0 Ед. 130,0-165,0 Ед.

[102] Инъекции можно проводить под контролем ЭМГ, ультразвука или электростимуляции мышц по усмотрению лица, проводящего инъекции. Комбинация данных методик управления также может быть применена к одному пациенту, также возможны разные способы для разных мышц.

[103] Иллюстративное лечение отдельного пациента

Пациент мужского пола, имеющий эссенциальный тремор в обеих руках и имеющий оценку TETRAS 3 по кинетическому анализу тремора верхней конечности (амплитуда от 5 до менее 10 см), получает лечение NT201 с использованием следующей фиксированной схемы дозирования:

Мышцы Количество точек введения Схема дозирования A (фиксированные мышца предплечья/запястья и дозировка) Мышцы предплечья/запястья Общая дозировка для предплечья: 40,0 Ед. M. extensor carpi ulnaris (ECU) 1 2,5 Ед. M. extensor carpi radial is (ECR) 1 2,5 Ед. M. flexor carpi radialis (FCR) 1 10,0 Ед. M. flexor carpi ulnaris (FCU) 1 10,0 Ед. M. pronator teres (PT) 1 10,0 Ед. M. pronator quadratus (PQ) 1 2,5 Ед. M. supinator 1 2,5 Ед. Мышцы локтя Общая дозировка для локтя:
40,0 Ед. M. brachialis 2 20,0 Ед. M. triceps brachii 2 20,0 Ед. Мышцы плеча Общая дозировка для плеча: 60,0 Ед. M. latissimus dorsi 2 15,0 Ед. M. pectoralis major 2 15,0 Ед. M. supraspinatus 3 15,0 Ед. M. infraspinatus 3 15,0 Ед. Общая дозировка: 140,0 Ед.

Через 4 недели оценка кинетического тремора правой руки по TETRAS снизилась на 1 балл (-33%). Через 8 недель оценка TETRAS снижается на 0,5 балла (-17%) по сравнению с показателем непосредственно перед инъекцией.

[104] Пациент с полугибким дозированием:

Пациент мужского пола с преобладающим эссенциальным тремором сгибания/разгибания запястья с оценкой TETRAS 2,5 балла в зависимости от положения руки (амплитуда тремора составляет от 3 до менее 5 см) получает лечение NT201 с использованием следующей полугибкой схемы дозирования:

Мышцы Количество точек введения Схема дозирования В (гибкие мышца предплечья/запястья и дозировка) Мышцы предплечья/запястья По меньшей мере 4 из следующих должны быть обработаны
Диапазон общей дозировки для предплечья: 30,0-65,0 Ед. M. extensor carpiulnaris (ECU) 1 2,5 Ед. M. extensor carpi radial is (ECR) 1 2,5 Ед. M. flexor carpi radialis (FCR) 1 15,0 Ед. M. flexor carpi ulnaris (FCU) 1 15,0 Ед. M. pronator teres (PT) 1 0 Ед M. pronator quadratus (PQ) 1 0 Ед M. supinator 1 0 Ед Мышцы локтя Общая дозировка для локтя:
40,0 Ед. M. brachialis 2 20,0 Ед. M. triceps brachii 2 20,0 Ед. Мышцы плеча Общая дозировка для плеча:
60,0 Ед. M. latissimus dorsi 2 15,0 Ед. M. pectoralis major 2 15,0 Ед. M. supraspinatus 3 15,0 Ед. M. infraspinatus 3 15,0 Ед. Общая дозировка: 135,0 Ед.

Через 4 недели оценка TERTAS снизилась на 1 балл (-40%). Через 8 недель оценка TETRAS снизилась на 0,5 балла (-25%) по сравнению с оценкой непосредственно перед инъекцией.

[105] Пациент с полугибким дозированием:

Пациентка с преобладанием эссенциального тремора сгибания/разгибания запястья с вращательным компонентом и с оценкой TETRAS 3 балла в зависимости от положения руки (амплитуда тремора от 5 до менее 10 см) получает лечение NT201 с использованием следующей полугибкой схемы дозирования:

Мышцы Количество точек введения Схема дозирования В (гибкие мышца предплечья/запястья и дозировка) Мышцы предплечья/запястья 5 из следующих должны быть обработаны Общий диапазон дозировки для предплечья: 30,0-65,0 Ед. M. extensor carpi ulnaris (ECU) 1 0 Ед. M. extensor carpi radial is (ECR) 1 2,5 Ед. M. flexor carpi radialis (FCR) 1 15,0 Ед. M. flexor carpi ulnaris (FCU) 1 15,0 Ед. M. pronator teres (PT) 1 5 Ед. M. pronator quadratus (PQ) 1 0 Ед. M. supinator 1 2,5 Ед. Мышцы локтя Общая дозировка для локтя:
40,0 Ед. M. brachialis 2 20,0 Ед. M. triceps brachii 2 20,0 Ед. Мышцы плеча Общая дозировка для плеча:
60,0 Ед. M. latissimus dorsi 2 15,0 Ед. M. pectoralis major 2 15,0 Ед. M. supraspinatus 3 15,0 Ед. M. infraspinatus 3 15,0 Ед. Общая дозировка: 140,0 Ед.

Через 4 недели оценка TERTAS снизилась на 1 балл (-33%). Через 8 недель оценка TETRAS снизилась еще на 1 балла (-33%) по сравнению с оценкой непосредственно перед инъекцией.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Мерц Фарма ГмбХ & Ко. КГаА

<120> НОВЫЕ ВАРИАНТЫ ПРИМЕНЕНИЯ БОТУЛИНИЧЕСКОГО НЕЙРОТОКСИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ТРЕМОРА

<130> 0918-000-PCT

<150> EP19158541.3

<151> 2019-02-21

<160> 14

<170> BiSSAP 1.3.6

<210> 1

<211> 3891

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<400> 1

atgccatttg ttaataaaca atttaattat aaagatcctg taaatggtgt tgatattgct 60

tatataaaaa ttccaaatgc aggacaaatg caaccagtaa aagcttttaa aattcataat 120

aaaatatggg ttattccaga aagagataca tttacaaatc ctgaagaagg agatttaaat 180

ccaccaccag aagcaaaaca agttccagtt tcatattatg attcaacata tttaagtaca 240

gataatgaaa aagataatta tttaaaggga gttacaaaat tatttgagag aatttattca 300

actgatcttg gaagaatgtt gttaacatca atagtaaggg gaataccatt ttggggtgga 360

agtacaatag atacagaatt aaaagttatt gatactaatt gtattaatgt gatacaacca 420

gatggtagtt atagatcaga agaacttaat ctagtaataa taggaccctc agctgatatt 480

atacagtttg aatgtaaaag ctttggacat gaagttttga atcttacgcg aaatggttat 540

ggctctactc aatacattag atttagccca gattttacat ttggttttga ggagtcactt 600

gaagttgata caaatcctct tttaggtgca ggcaaatttg ctacagatcc agcagtaaca 660

ttagcacatg aacttataca tgctggacat agattatatg gaatagcaat taatccaaat 720

agggttttta aagtaaatac taatgcctat tatgaaatga gtgggttaga agtaagcttt 780

gaggaactta gaacatttgg gggacatgat gcaaagttta tagatagttt acaggaaaac 840

gaatttcgtc tatattatta taataagttt aaagatatag caagtacact taataaagct 900

aaatcaatag taggtactac tgcttcatta cagtatatga aaaatgtttt taaagagaaa 960

tatctcctat ctgaagatac atctggaaaa ttttcggtag ataaattaaa atttgataag 1020

ttatacaaaa tgttaacaga gatttacaca gaggataatt ttgttaagtt ttttaaagta 1080

cttaacagaa aaacatattt gaattttgat aaagccgtat ttaagataaa tatagtacct 1140

aaggtaaatt acacaatata tgatggattt aatttaagaa atacaaattt agcagcaaac 1200

tttaatggtc aaaatacaga aattaataat atgaatttta ctaaactaaa aaattttact 1260

ggattgtttg aattttataa gttgctatgt gtaagaggga taataacttc taaaactaaa 1320

tcattagata aaggatacaa taaggcatta aatgatttat gtatcaaagt taataattgg 1380

gacttgtttt ttagtccttc agaagataat tttactaatg atctaaataa aggagaagaa 1440

attacatctg atactaatat agaagcagca gaagaaaata ttagtttaga tttaatacaa 1500

caatattatt taacctttaa ttttgataat gaacctgaaa atatttcaat agaaaatctt 1560

tcaagtgaca ttataggcca attagaactt atgcctaata tagaaagatt tcctaatgga 1620

aaaaagtatg agttagataa atatactatg ttccattatc ttcgtgctca agaatttgaa 1680

catggtaaat ctaggattgc tttaacaaat tctgttaacg aagcattatt aaatcctagt 1740

cgtgtttata catttttttc ttcagactat gtaaagaaag ttaataaagc tacggaggca 1800

gctatgtttt taggctgggt agaacaatta gtatatgatt ttaccgatga aactagcgaa 1860

gtaagtacta cggataaaat tgcggatata actataatta ttccatatat aggacctgct 1920

ttaaatatag gtaatatgtt atataaagat gattttgtag gtgctttaat attttcagga 1980

gctgttattc tgttagaatt tataccagag attgcaatac ctgtattagg tacttttgca 2040

cttgtatcat atattgcgaa taaggttcta accgttcaaa caatagataa tgctttaagt 2100

aaaagaaatg aaaaatggga tgaggtctat aaatatatag taacaaattg gttagcaaag 2160

gttaatacac agattgatct aataagaaaa aaaatgaaag aagctttaga aaatcaagca 2220

gaagcaacaa aggctataat aaactatcag tataatcaat atactgagga agagaaaaat 2280

aatattaatt ttaatattga tgatttaagt tcgaaactta atgagtctat aaataaagct 2340

atgattaata taaataaatt tttgaatcaa tgctctgttt catatttaat gaattctatg 2400

atcccttatg gtgttaaacg gttagaagat tttgatgcta gtcttaaaga tgcattatta 2460

aagtatatat atgataatag aggaacttta attggtcaag tagatagatt aaaagataaa 2520

gttaataata cacttagtac agatatacct tttcagcttt ccaaatacgt agataatcaa 2580

agattattat ctacatttac tgaatatatt aagaatatta ttaatacttc tatattgaat 2640

ttaagatatg aaagtaatca tttaatagac ttatctaggt atgcatcaaa aataaatatt 2700

ggtagtaaag taaattttga tccaatagat aaaaatcaaa ttcaattatt taatttagaa 2760

agtagtaaaa ttgaggtaat tttaaaaaat gctattgtat ataatagtat gtatgaaaat 2820

tttagtacta gcttttggat aagaattcct aagtatttta acagtataag tctaaataat 2880

gaatatacaa taataaattg tatggaaaat aattcaggat ggaaagtatc acttaattat 2940

ggtgaaataa tctggacttt acaggatact caggaaataa aacaaagagt agtttttaaa 3000

tacagtcaaa tgattaatat atcagattat ataaacagat ggatttttgt aactatcact 3060

aataatagat taaataactc taaaatttat ataaatggaa gattaataga tcaaaaacca 3120

atttcaaatt taggtaatat tcatgctagt aataatataa tgtttaaatt agatggttgt 3180

agagatacac atagatatat ttggataaaa tattttaatc tttttgataa ggaattaaat 3240

gaaaaagaaa tcaaagattt atatgataat caatcaaatt caggtatttt aaaagacttt 3300

tggggtgatt atttacaata tgataaacca tactatatgt taaatttata tgatccaaat 3360

aaatatgtcg atgtaaataa tgtaggtatt agaggttata tgtatcttaa agggcctaga 3420

ggtagcgtaa tgactacaaa catttattta aattcaagtt tgtatagggg gacaaaattt 3480

attataaaaa aatatgcttc tggaaataaa gataatattg ttagaaataa tgatcgtgta 3540

tatattaatg tagtagttaa aaataaagaa tataggttag ctactaatgc atcacaggca 3600

ggcgtagaaa aaatactaag tgcattagaa atacctgatg taggaaatct aagtcaagta 3660

gtagtaatga agtcaaaaaa tgatcaagga ataacaaata aatgcaaaat gaatttacaa 3720

gataataatg ggaatgatat aggctttata ggatttcatc agtttaataa tatagctaaa 3780

ctagtagcaa gtaattggta taatagacaa atagaaagat ctagtaggac tttgggttgc 3840

tcatgggaat ttattcctgt agatgatgga tggggagaaa ggccactgta a 3891

<210> 2

<211> 1296

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<400> 2

Met Pro Phe Val Asn Lys Gln Phe Asn Tyr Lys Asp Pro Val Asn Gly

1 5 10 15

Val Asp Ile Ala Tyr Ile Lys Ile Pro Asn Ala Gly Gln Met Gln Pro

20 25 30

Val Lys Ala Phe Lys Ile His Asn Lys Ile Trp Val Ile Pro Glu Arg

35 40 45

Asp Thr Phe Thr Asn Pro Glu Glu Gly Asp Leu Asn Pro Pro Pro Glu

50 55 60

Ala Lys Gln Val Pro Val Ser Tyr Tyr Asp Ser Thr Tyr Leu Ser Thr

65 70 75 80

Asp Asn Glu Lys Asp Asn Tyr Leu Lys Gly Val Thr Lys Leu Phe Glu

85 90 95

Arg Ile Tyr Ser Thr Asp Leu Gly Arg Met Leu Leu Thr Ser Ile Val

100 105 110

Arg Gly Ile Pro Phe Trp Gly Gly Ser Thr Ile Asp Thr Glu Leu Lys

115 120 125

Val Ile Asp Thr Asn Cys Ile Asn Val Ile Gln Pro Asp Gly Ser Tyr

130 135 140

Arg Ser Glu Glu Leu Asn Leu Val Ile Ile Gly Pro Ser Ala Asp Ile

145 150 155 160

Ile Gln Phe Glu Cys Lys Ser Phe Gly His Glu Val Leu Asn Leu Thr

165 170 175

Arg Asn Gly Tyr Gly Ser Thr Gln Tyr Ile Arg Phe Ser Pro Asp Phe

180 185 190

Thr Phe Gly Phe Glu Glu Ser Leu Glu Val Asp Thr Asn Pro Leu Leu

195 200 205

Gly Ala Gly Lys Phe Ala Thr Asp Pro Ala Val Thr Leu Ala His Glu

210 215 220

Leu Ile His Ala Gly His Arg Leu Tyr Gly Ile Ala Ile Asn Pro Asn

225 230 235 240

Arg Val Phe Lys Val Asn Thr Asn Ala Tyr Tyr Glu Met Ser Gly Leu

245 250 255

Glu Val Ser Phe Glu Glu Leu Arg Thr Phe Gly Gly His Asp Ala Lys

260 265 270

Phe Ile Asp Ser Leu Gln Glu Asn Glu Phe Arg Leu Tyr Tyr Tyr Asn

275 280 285

Lys Phe Lys Asp Ile Ala Ser Thr Leu Asn Lys Ala Lys Ser Ile Val

290 295 300

Gly Thr Thr Ala Ser Leu Gln Tyr Met Lys Asn Val Phe Lys Glu Lys

305 310 315 320

Tyr Leu Leu Ser Glu Asp Thr Ser Gly Lys Phe Ser Val Asp Lys Leu

325 330 335

Lys Phe Asp Lys Leu Tyr Lys Met Leu Thr Glu Ile Tyr Thr Glu Asp

340 345 350

Asn Phe Val Lys Phe Phe Lys Val Leu Asn Arg Lys Thr Tyr Leu Asn

355 360 365

Phe Asp Lys Ala Val Phe Lys Ile Asn Ile Val Pro Lys Val Asn Tyr

370 375 380

Thr Ile Tyr Asp Gly Phe Asn Leu Arg Asn Thr Asn Leu Ala Ala Asn

385 390 395 400

Phe Asn Gly Gln Asn Thr Glu Ile Asn Asn Met Asn Phe Thr Lys Leu

405 410 415

Lys Asn Phe Thr Gly Leu Phe Glu Phe Tyr Lys Leu Leu Cys Val Arg

420 425 430

Gly Ile Ile Thr Ser Lys Thr Lys Ser Leu Asp Lys Gly Tyr Asn Lys

435 440 445

Ala Leu Asn Asp Leu Cys Ile Lys Val Asn Asn Trp Asp Leu Phe Phe

450 455 460

Ser Pro Ser Glu Asp Asn Phe Thr Asn Asp Leu Asn Lys Gly Glu Glu

465 470 475 480

Ile Thr Ser Asp Thr Asn Ile Glu Ala Ala Glu Glu Asn Ile Ser Leu

485 490 495

Asp Leu Ile Gln Gln Tyr Tyr Leu Thr Phe Asn Phe Asp Asn Glu Pro

500 505 510

Glu Asn Ile Ser Ile Glu Asn Leu Ser Ser Asp Ile Ile Gly Gln Leu

515 520 525

Glu Leu Met Pro Asn Ile Glu Arg Phe Pro Asn Gly Lys Lys Tyr Glu

530 535 540

Leu Asp Lys Tyr Thr Met Phe His Tyr Leu Arg Ala Gln Glu Phe Glu

545 550 555 560

His Gly Lys Ser Arg Ile Ala Leu Thr Asn Ser Val Asn Glu Ala Leu

565 570 575

Leu Asn Pro Ser Arg Val Tyr Thr Phe Phe Ser Ser Asp Tyr Val Lys

580 585 590

Lys Val Asn Lys Ala Thr Glu Ala Ala Met Phe Leu Gly Trp Val Glu

595 600 605

Gln Leu Val Tyr Asp Phe Thr Asp Glu Thr Ser Glu Val Ser Thr Thr

610 615 620

Asp Lys Ile Ala Asp Ile Thr Ile Ile Ile Pro Tyr Ile Gly Pro Ala

625 630 635 640

Leu Asn Ile Gly Asn Met Leu Tyr Lys Asp Asp Phe Val Gly Ala Leu

645 650 655

Ile Phe Ser Gly Ala Val Ile Leu Leu Glu Phe Ile Pro Glu Ile Ala

660 665 670

Ile Pro Val Leu Gly Thr Phe Ala Leu Val Ser Tyr Ile Ala Asn Lys

675 680 685

Val Leu Thr Val Gln Thr Ile Asp Asn Ala Leu Ser Lys Arg Asn Glu

690 695 700

Lys Trp Asp Glu Val Tyr Lys Tyr Ile Val Thr Asn Trp Leu Ala Lys

705 710 715 720

Val Asn Thr Gln Ile Asp Leu Ile Arg Lys Lys Met Lys Glu Ala Leu

725 730 735

Glu Asn Gln Ala Glu Ala Thr Lys Ala Ile Ile Asn Tyr Gln Tyr Asn

740 745 750

Gln Tyr Thr Glu Glu Glu Lys Asn Asn Ile Asn Phe Asn Ile Asp Asp

755 760 765

Leu Ser Ser Lys Leu Asn Glu Ser Ile Asn Lys Ala Met Ile Asn Ile

770 775 780

Asn Lys Phe Leu Asn Gln Cys Ser Val Ser Tyr Leu Met Asn Ser Met

785 790 795 800

Ile Pro Tyr Gly Val Lys Arg Leu Glu Asp Phe Asp Ala Ser Leu Lys

805 810 815

Asp Ala Leu Leu Lys Tyr Ile Tyr Asp Asn Arg Gly Thr Leu Ile Gly

820 825 830

Gln Val Asp Arg Leu Lys Asp Lys Val Asn Asn Thr Leu Ser Thr Asp

835 840 845

Ile Pro Phe Gln Leu Ser Lys Tyr Val Asp Asn Gln Arg Leu Leu Ser

850 855 860

Thr Phe Thr Glu Tyr Ile Lys Asn Ile Ile Asn Thr Ser Ile Leu Asn

865 870 875 880

Leu Arg Tyr Glu Ser Asn His Leu Ile Asp Leu Ser Arg Tyr Ala Ser

885 890 895

Lys Ile Asn Ile Gly Ser Lys Val Asn Phe Asp Pro Ile Asp Lys Asn

900 905 910

Gln Ile Gln Leu Phe Asn Leu Glu Ser Ser Lys Ile Glu Val Ile Leu

915 920 925

Lys Asn Ala Ile Val Tyr Asn Ser Met Tyr Glu Asn Phe Ser Thr Ser

930 935 940

Phe Trp Ile Arg Ile Pro Lys Tyr Phe Asn Ser Ile Ser Leu Asn Asn

945 950 955 960

Glu Tyr Thr Ile Ile Asn Cys Met Glu Asn Asn Ser Gly Trp Lys Val

965 970 975

Ser Leu Asn Tyr Gly Glu Ile Ile Trp Thr Leu Gln Asp Thr Gln Glu

980 985 990

Ile Lys Gln Arg Val Val Phe Lys Tyr Ser Gln Met Ile Asn Ile Ser

995 1000 1005

Asp Tyr Ile Asn Arg Trp Ile Phe Val Thr Ile Thr Asn Asn Arg Leu

1010 1015 1020

Asn Asn Ser Lys Ile Tyr Ile Asn Gly Arg Leu Ile Asp Gln Lys Pro

1025 1030 1035 1040

Ile Ser Asn Leu Gly Asn Ile His Ala Ser Asn Asn Ile Met Phe Lys

1045 1050 1055

Leu Asp Gly Cys Arg Asp Thr His Arg Tyr Ile Trp Ile Lys Tyr Phe

1060 1065 1070

Asn Leu Phe Asp Lys Glu Leu Asn Glu Lys Glu Ile Lys Asp Leu Tyr

1075 1080 1085

Asp Asn Gln Ser Asn Ser Gly Ile Leu Lys Asp Phe Trp Gly Asp Tyr

1090 1095 1100

Leu Gln Tyr Asp Lys Pro Tyr Tyr Met Leu Asn Leu Tyr Asp Pro Asn

1105 1110 1115 1120

Lys Tyr Val Asp Val Asn Asn Val Gly Ile Arg Gly Tyr Met Tyr Leu

1125 1130 1135

Lys Gly Pro Arg Gly Ser Val Met Thr Thr Asn Ile Tyr Leu Asn Ser

1140 1145 1150

Ser Leu Tyr Arg Gly Thr Lys Phe Ile Ile Lys Lys Tyr Ala Ser Gly

1155 1160 1165

Asn Lys Asp Asn Ile Val Arg Asn Asn Asp Arg Val Tyr Ile Asn Val

1170 1175 1180

Val Val Lys Asn Lys Glu Tyr Arg Leu Ala Thr Asn Ala Ser Gln Ala

1185 1190 1195 1200

Gly Val Glu Lys Ile Leu Ser Ala Leu Glu Ile Pro Asp Val Gly Asn

1205 1210 1215

Leu Ser Gln Val Val Val Met Lys Ser Lys Asn Asp Gln Gly Ile Thr

1220 1225 1230

Asn Lys Cys Lys Met Asn Leu Gln Asp Asn Asn Gly Asn Asp Ile Gly

1235 1240 1245

Phe Ile Gly Phe His Gln Phe Asn Asn Ile Ala Lys Leu Val Ala Ser

1250 1255 1260

Asn Trp Tyr Asn Arg Gln Ile Glu Arg Ser Ser Arg Thr Leu Gly Cys

1265 1270 1275 1280

Ser Trp Glu Phe Ile Pro Val Asp Asp Gly Trp Gly Glu Arg Pro Leu

1285 1290 1295

<210> 3

<211> 3876

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<400> 3

atgccagtta caataaataa ttttaattat aatgatccta ttgataataa taatattatt 60

atgatggagc ctccatttgc gagaggtacg gggagatatt ataaagcttt taaaatcaca 120

gatcgtattt ggataatacc ggaaagatat acttttggat ataaacctga ggattttaat 180

aaaagttccg gtatttttaa tagagatgtt tgtgaatatt atgatccaga ttacttaaat 240

actaatgata aaaagaatat atttttacaa acaatgatca agttatttaa tagaatcaaa 300

tcaaaaccat tgggtgaaaa gttattagag atgattataa atggtatacc ttatcttgga 360

gatagacgtg ttccactcga agagtttaac acaaacattg ctagtgtaac tgttaataaa 420

ttaatcagta atccaggaga agtggagcga aaaaaaggta ttttcgcaaa tttaataata 480

tttggacctg ggccagtttt aaatgaaaat gagactatag atataggtat acaaaatcat 540

tttgcatcaa gggaaggctt cgggggtata atgcaaatga agttttgccc agaatatgta 600

agcgtattta ataatgttca agaaaacaaa ggcgcaagta tatttaatag acgtggatat 660

ttttcagatc cagccttgat attaatgcat gaacttatac atgttttaca tggattatat 720

ggcattaaag tagatgattt accaattgta ccaaatgaaa aaaaattttt tatgcaatct 780

acagatgcta tacaggcaga agaactatat acatttggag gacaagatcc cagcatcata 840

actccttcta cggataaaag tatctatgat aaagttttgc aaaattttag agggatagtt 900

gatagactta acaaggtttt agtttgcata tcagatccta acattaatat taatatatat 960

aaaaataaat ttaaagataa atataaattc gttgaagatt ctgagggaaa atatagtata 1020

gatgtagaaa gttttgataa attatataaa agcttaatgt ttggttttac agaaactaat 1080

atagcagaaa attataaaat aaaaactaga gcttcttatt ttagtgattc cttaccacca 1140

gtaaaaataa aaaatttatt agataatgaa atctatacta tagaggaagg gtttaatata 1200

tctgataaag atatggaaaa agaatataga ggtcagaata aagctataaa taaacaagct 1260

tatgaagaaa ttagcaagga gcatttggct gtatataaga tacaaatgtg taaaagtgtt 1320

aaagctccag gaatatgtat tgatgttgat aatgaagatt tgttctttat agctgataaa 1380

aatagttttt cagatgattt atctaaaaac gaaagaatag aatataatac acagagtaat 1440

tatatagaaa atgacttccc tataaatgaa ttaattttag atactgattt aataagtaaa 1500

atagaattac caagtgaaaa tacagaatca cttactgatt ttaatgtaga tgttccagta 1560

tatgaaaaac aacccgctat aaaaaaaatt tttacagatg aaaataccat ctttcaatat 1620

ttatactctc agacatttcc tctagatata agagatataa gtttaacatc ttcatttgat 1680

gatgcattat tattttctaa caaagtttat tcattttttt ctatggatta tattaaaact 1740

gctaataaag tggtagaagc aggattattt gcaggttggg tgaaacagat agtaaatgat 1800

tttgtaatcg aagctaataa aagcaatact atggataaaa ttgcagatat atctctaatt 1860

gttccttata taggattagc tttaaatgta ggaaatgaaa cagctaaagg aaattttgaa 1920

aatgcttttg agattgcagg agccagtatt ctactagaat ttataccaga acttttaata 1980

cctgtagttg gagccttttt attagaatca tatattgaca ataaaaataa aattattaaa 2040

acaatagata atgctttaac taaaagaaat gaaaaatgga gtgatatgta cggattaata 2100

gtagcgcaat ggctctcaac agttaatact caattttata caataaaaga gggaatgtat 2160

aaggctttaa attatcaagc acaagcattg gaagaaataa taaaatacag atataatata 2220

tattctgaaa aagaaaagtc aaatattaac atcgatttta atgatataaa ttctaaactt 2280

aatgagggta ttaaccaagc tatagataat ataaataatt ttataaatgg atgttctgta 2340

tcatatttaa tgaaaaaaat gattccatta gctgtagaaa aattactaga ctttgataat 2400

actctcaaaa aaaatttgtt aaattatata gatgaaaata aattatattt gattggaagt 2460

gcagaatatg aaaaatcaaa agtaaataaa tacttgaaaa ccattatgcc gtttgatctt 2520

tcaatatata ccaatgatac aatactaata gaaatgttta ataaatataa tagcgaaatt 2580

ttaaataata ttatcttaaa tttaagatat aaggataata atttaataga tttatcagga 2640

tatggggcaa aggtagaggt atatgatgga gtcgagctta atgataaaaa tcaatttaaa 2700

ttaactagtt cagcaaatag taagattaga gtgactcaaa atcagaatat catatttaat 2760

agtgtgttcc ttgattttag cgttagcttt tggataagaa tacctaaata taagaatgat 2820

ggtatacaaa attatattca taatgaatat acaataatta attgtatgaa aaataattcg 2880

ggctggaaaa tatctattag gggtaatagg ataatatgga ctttaattga tataaatgga 2940

aaaaccaaat cggtattttt tgaatataac ataagagaag atatatcaga gtatataaat 3000

agatggtttt ttgtaactat tactaataat ttgaataacg ctaaaattta tattaatggt 3060

aagctagaat caaatacaga tattaaagat ataagagaag ttattgctaa tggtgaaata 3120

atatttaaat tagatggtga tatagataga acacaattta tttggatgaa atatttcagt 3180

atttttaata cggaattaag tcaatcaaat attgaagaaa gatataaaat tcaatcatat 3240

agcgaatatt taaaagattt ttggggaaat cctttaatgt acaataaaga atattatatg 3300

tttaatgcgg ggaataaaaa ttcatatatt aaactaaaga aagattcacc tgtaggtgaa 3360

attttaacac gtagcaaata taatcaaaat tctaaatata taaattatag agatttatat 3420

attggagaaa aatttattat aagaagaaag tcaaattctc aatctataaa tgatgatata 3480

gttagaaaag aagattatat atatctagat ttttttaatt taaatcaaga gtggagagta 3540

tatacctata aatattttaa gaaagaggaa gaaaaattgt ttttagctcc tataagtgat 3600

tctgatgagt tttacaatac tatacaaata aaagaatatg atgaacagcc aacatatagt 3660

tgtcagttgc tttttaaaaa agatgaagaa agtactgatg agataggatt gattggtatt 3720

catcgtttct acgaatctgg aattgtattt gaagagtata aagattattt ttgtataagt 3780

aaatggtact taaaagaggt aaaaaggaaa ccatataatt taaaattggg atgtaattgg 3840

cagtttattc ctaaagatga agggtggact gaataa 3876

<210> 4

<211> 1291

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<400> 4

Met Pro Val Thr Ile Asn Asn Phe Asn Tyr Asn Asp Pro Ile Asp Asn

1 5 10 15

Asn Asn Ile Ile Met Met Glu Pro Pro Phe Ala Arg Gly Thr Gly Arg

20 25 30

Tyr Tyr Lys Ala Phe Lys Ile Thr Asp Arg Ile Trp Ile Ile Pro Glu

35 40 45

Arg Tyr Thr Phe Gly Tyr Lys Pro Glu Asp Phe Asn Lys Ser Ser Gly

50 55 60

Ile Phe Asn Arg Asp Val Cys Glu Tyr Tyr Asp Pro Asp Tyr Leu Asn

65 70 75 80

Thr Asn Asp Lys Lys Asn Ile Phe Leu Gln Thr Met Ile Lys Leu Phe

85 90 95

Asn Arg Ile Lys Ser Lys Pro Leu Gly Glu Lys Leu Leu Glu Met Ile

100 105 110

Ile Asn Gly Ile Pro Tyr Leu Gly Asp Arg Arg Val Pro Leu Glu Glu

115 120 125

Phe Asn Thr Asn Ile Ala Ser Val Thr Val Asn Lys Leu Ile Ser Asn

130 135 140

Pro Gly Glu Val Glu Arg Lys Lys Gly Ile Phe Ala Asn Leu Ile Ile

145 150 155 160

Phe Gly Pro Gly Pro Val Leu Asn Glu Asn Glu Thr Ile Asp Ile Gly

165 170 175

Ile Gln Asn His Phe Ala Ser Arg Glu Gly Phe Gly Gly Ile Met Gln

180 185 190

Met Lys Phe Cys Pro Glu Tyr Val Ser Val Phe Asn Asn Val Gln Glu

195 200 205

Asn Lys Gly Ala Ser Ile Phe Asn Arg Arg Gly Tyr Phe Ser Asp Pro

210 215 220

Ala Leu Ile Leu Met His Glu Leu Ile His Val Leu His Gly Leu Tyr

225 230 235 240

Gly Ile Lys Val Asp Asp Leu Pro Ile Val Pro Asn Glu Lys Lys Phe

245 250 255

Phe Met Gln Ser Thr Asp Ala Ile Gln Ala Glu Glu Leu Tyr Thr Phe

260 265 270

Gly Gly Gln Asp Pro Ser Ile Ile Thr Pro Ser Thr Asp Lys Ser Ile

275 280 285

Tyr Asp Lys Val Leu Gln Asn Phe Arg Gly Ile Val Asp Arg Leu Asn

290 295 300

Lys Val Leu Val Cys Ile Ser Asp Pro Asn Ile Asn Ile Asn Ile Tyr

305 310 315 320

Lys Asn Lys Phe Lys Asp Lys Tyr Lys Phe Val Glu Asp Ser Glu Gly

325 330 335

Lys Tyr Ser Ile Asp Val Glu Ser Phe Asp Lys Leu Tyr Lys Ser Leu

340 345 350

Met Phe Gly Phe Thr Glu Thr Asn Ile Ala Glu Asn Tyr Lys Ile Lys

355 360 365

Thr Arg Ala Ser Tyr Phe Ser Asp Ser Leu Pro Pro Val Lys Ile Lys

370 375 380

Asn Leu Leu Asp Asn Glu Ile Tyr Thr Ile Glu Glu Gly Phe Asn Ile

385 390 395 400

Ser Asp Lys Asp Met Glu Lys Glu Tyr Arg Gly Gln Asn Lys Ala Ile

405 410 415

Asn Lys Gln Ala Tyr Glu Glu Ile Ser Lys Glu His Leu Ala Val Tyr

420 425 430

Lys Ile Gln Met Cys Lys Ser Val Lys Ala Pro Gly Ile Cys Ile Asp

435 440 445

Val Asp Asn Glu Asp Leu Phe Phe Ile Ala Asp Lys Asn Ser Phe Ser

450 455 460

Asp Asp Leu Ser Lys Asn Glu Arg Ile Glu Tyr Asn Thr Gln Ser Asn

465 470 475 480

Tyr Ile Glu Asn Asp Phe Pro Ile Asn Glu Leu Ile Leu Asp Thr Asp

485 490 495

Leu Ile Ser Lys Ile Glu Leu Pro Ser Glu Asn Thr Glu Ser Leu Thr

500 505 510

Asp Phe Asn Val Asp Val Pro Val Tyr Glu Lys Gln Pro Ala Ile Lys

515 520 525

Lys Ile Phe Thr Asp Glu Asn Thr Ile Phe Gln Tyr Leu Tyr Ser Gln

530 535 540

Thr Phe Pro Leu Asp Ile Arg Asp Ile Ser Leu Thr Ser Ser Phe Asp

545 550 555 560

Asp Ala Leu Leu Phe Ser Asn Lys Val Tyr Ser Phe Phe Ser Met Asp

565 570 575

Tyr Ile Lys Thr Ala Asn Lys Val Val Glu Ala Gly Leu Phe Ala Gly

580 585 590

Trp Val Lys Gln Ile Val Asn Asp Phe Val Ile Glu Ala Asn Lys Ser

595 600 605

Asn Thr Met Asp Lys Ile Ala Asp Ile Ser Leu Ile Val Pro Tyr Ile

610 615 620

Gly Leu Ala Leu Asn Val Gly Asn Glu Thr Ala Lys Gly Asn Phe Glu

625 630 635 640

Asn Ala Phe Glu Ile Ala Gly Ala Ser Ile Leu Leu Glu Phe Ile Pro

645 650 655

Glu Leu Leu Ile Pro Val Val Gly Ala Phe Leu Leu Glu Ser Tyr Ile

660 665 670

Asp Asn Lys Asn Lys Ile Ile Lys Thr Ile Asp Asn Ala Leu Thr Lys

675 680 685

Arg Asn Glu Lys Trp Ser Asp Met Tyr Gly Leu Ile Val Ala Gln Trp

690 695 700

Leu Ser Thr Val Asn Thr Gln Phe Tyr Thr Ile Lys Glu Gly Met Tyr

705 710 715 720

Lys Ala Leu Asn Tyr Gln Ala Gln Ala Leu Glu Glu Ile Ile Lys Tyr

725 730 735

Arg Tyr Asn Ile Tyr Ser Glu Lys Glu Lys Ser Asn Ile Asn Ile Asp

740 745 750

Phe Asn Asp Ile Asn Ser Lys Leu Asn Glu Gly Ile Asn Gln Ala Ile

755 760 765

Asp Asn Ile Asn Asn Phe Ile Asn Gly Cys Ser Val Ser Tyr Leu Met

770 775 780

Lys Lys Met Ile Pro Leu Ala Val Glu Lys Leu Leu Asp Phe Asp Asn

785 790 795 800

Thr Leu Lys Lys Asn Leu Leu Asn Tyr Ile Asp Glu Asn Lys Leu Tyr

805 810 815

Leu Ile Gly Ser Ala Glu Tyr Glu Lys Ser Lys Val Asn Lys Tyr Leu

820 825 830

Lys Thr Ile Met Pro Phe Asp Leu Ser Ile Tyr Thr Asn Asp Thr Ile

835 840 845

Leu Ile Glu Met Phe Asn Lys Tyr Asn Ser Glu Ile Leu Asn Asn Ile

850 855 860

Ile Leu Asn Leu Arg Tyr Lys Asp Asn Asn Leu Ile Asp Leu Ser Gly

865 870 875 880

Tyr Gly Ala Lys Val Glu Val Tyr Asp Gly Val Glu Leu Asn Asp Lys

885 890 895

Asn Gln Phe Lys Leu Thr Ser Ser Ala Asn Ser Lys Ile Arg Val Thr

900 905 910

Gln Asn Gln Asn Ile Ile Phe Asn Ser Val Phe Leu Asp Phe Ser Val

915 920 925

Ser Phe Trp Ile Arg Ile Pro Lys Tyr Lys Asn Asp Gly Ile Gln Asn

930 935 940

Tyr Ile His Asn Glu Tyr Thr Ile Ile Asn Cys Met Lys Asn Asn Ser

945 950 955 960

Gly Trp Lys Ile Ser Ile Arg Gly Asn Arg Ile Ile Trp Thr Leu Ile

965 970 975

Asp Ile Asn Gly Lys Thr Lys Ser Val Phe Phe Glu Tyr Asn Ile Arg

980 985 990

Glu Asp Ile Ser Glu Tyr Ile Asn Arg Trp Phe Phe Val Thr Ile Thr

995 1000 1005

Asn Asn Leu Asn Asn Ala Lys Ile Tyr Ile Asn Gly Lys Leu Glu Ser

1010 1015 1020

Asn Thr Asp Ile Lys Asp Ile Arg Glu Val Ile Ala Asn Gly Glu Ile

1025 1030 1035 1040

Ile Phe Lys Leu Asp Gly Asp Ile Asp Arg Thr Gln Phe Ile Trp Met

1045 1050 1055

Lys Tyr Phe Ser Ile Phe Asn Thr Glu Leu Ser Gln Ser Asn Ile Glu

1060 1065 1070

Glu Arg Tyr Lys Ile Gln Ser Tyr Ser Glu Tyr Leu Lys Asp Phe Trp

1075 1080 1085

Gly Asn Pro Leu Met Tyr Asn Lys Glu Tyr Tyr Met Phe Asn Ala Gly

1090 1095 1100

Asn Lys Asn Ser Tyr Ile Lys Leu Lys Lys Asp Ser Pro Val Gly Glu

1105 1110 1115 1120

Ile Leu Thr Arg Ser Lys Tyr Asn Gln Asn Ser Lys Tyr Ile Asn Tyr

1125 1130 1135

Arg Asp Leu Tyr Ile Gly Glu Lys Phe Ile Ile Arg Arg Lys Ser Asn

1140 1145 1150

Ser Gln Ser Ile Asn Asp Asp Ile Val Arg Lys Glu Asp Tyr Ile Tyr

1155 1160 1165

Leu Asp Phe Phe Asn Leu Asn Gln Glu Trp Arg Val Tyr Thr Tyr Lys

1170 1175 1180

Tyr Phe Lys Lys Glu Glu Glu Lys Leu Phe Leu Ala Pro Ile Ser Asp

1185 1190 1195 1200

Ser Asp Glu Phe Tyr Asn Thr Ile Gln Ile Lys Glu Tyr Asp Glu Gln

1205 1210 1215

Pro Thr Tyr Ser Cys Gln Leu Leu Phe Lys Lys Asp Glu Glu Ser Thr

1220 1225 1230

Asp Glu Ile Gly Leu Ile Gly Ile His Arg Phe Tyr Glu Ser Gly Ile

1235 1240 1245

Val Phe Glu Glu Tyr Lys Asp Tyr Phe Cys Ile Ser Lys Trp Tyr Leu

1250 1255 1260

Lys Glu Val Lys Arg Lys Pro Tyr Asn Leu Lys Leu Gly Cys Asn Trp

1265 1270 1275 1280

Gln Phe Ile Pro Lys Asp Glu Gly Trp Thr Glu

1285 1290

<210> 5

<211> 3843

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<400> 5

atgccaataa caattaacaa ctttaattat tcagatcctg ttgataataa aaatatttta 60

tatttagata ctcatttaaa tacattagct aatgagcctg aaaaagcctt tcgcattata 120

gggaatatat gggtaatacc cgatagattt tcaagagatt ctaatccaaa tttaaataaa 180

cctcctcgag ttacaagccc taaaagtggt tattatgatc ctaattattt gagtactgat 240

tctgaaaaag atacattttt aaaagaaatt ataaagttat ttaaaagaat taactctaga 300

gaaataggag aagaattaat atatagactt gcaacagaca taccctttcc tgggaataac 360

aatactccaa ttaatacttt tgattttgat gtagatttta acagtgttga tgttaaaact 420

agacaaggta acaactgggt taaaactggt agtataaatc ctagtgttat aataactgga 480

cctagagaaa acattataga cccagaaact tctacgttta aattaactaa caatactttt 540

gcggcacaag aaggatttgg tgctttatca ataatttcaa tatcacctag atttatgcta 600

acatatagta atgcaactaa taatgtagga gagggtagat tttctaagtc tgaattttgc 660

atggatccaa tactaatttt aatgcatgaa cttaatcatg caatgcataa tttatatgga 720

atagctatac caaatgatca aagaatttca tctgtaacta gtaatatttt ttattctcaa 780

tataaggtga aattagagta tgcagaaata tatgcatttg gaggtccaac tatagacctt 840

attcctaaaa gtgcaaggaa atattttgag gaaaaggcat tggattatta tagatccata 900

gctaaaagac ttaatagtat aactactgca aatccttcaa gctttaataa atatatagga 960

gaatataaac agaaacttat tagaaagtat agattcgtag tagaatcttc aggtgaagtt 1020

gcagtagatc gtaataagtt tgctgagtta tataaagaac ttacacaaat atttacagaa 1080

tttaactacg ctaaaatata taatgtacaa aataggaaaa tatatctttc aaatgtatat 1140

actccggtta cggcaaatat attagacgat aatgtttatg atatacaaaa tggatttaac 1200

atacctaaaa gtaatttaaa tgtactattt atgggtcaaa atttatctcg aaatccagca 1260

ttaagaaaag tcaatcctga aaatatgctt tatttattta caaaattttg ccataaagca 1320

atagatggta gatcattata taataaaaca ttagattgta gagagctttt agttaaaaat 1380

actgacttac cctttatagg tgatattagt gatatcaaaa ctgatatatt tttaagcaaa 1440

gatattaatg aagaaactga agttatagac tatccggaca atgtttcagt ggatcaagtt 1500

attctcagta agaatacctc agaacatgga caactagatt tattataccc tattattgaa 1560

ggtgagagtc aagtattacc gggagagaat caagtctttt atgataatag aactcaaaat 1620

gttgattatt tgaattctta ttattaccta gaatctcaaa aactaagtga taatgttgaa 1680

gattttactt ttacgacatc aattgaggaa gctttggata atagtggaaa agtatatact 1740

tactttccta aactagctga taaagtaaat acgggtgttc aaggtggttt atttttaatg 1800

tgggcaaatg atgtagttga agattttact acaaatattc taagaaaaga tacattagat 1860

aaaatatcag atgtatcagc tattattccc tatataggac ctgcattaaa tataagtaat 1920

tctgtaagaa ggggaaattt tactgaagca tttgcagtta ccggtgtaac tattttatta 1980

gaagcgtttc aagaatttac aatacctgca cttggtgcat ttgtgattta tagtaaggtt 2040

caagaaagaa acgagattat taaaactata gataattgtt tagaacaaag gattaaaaga 2100

tggaaagatt catatgaatg gatgatagga acgtggttat ccaggattac tactcaattt 2160

aataatataa gttatcaaat gtatgattct ttaaattatc aggcagatgc aatcaaagat 2220

aaaatagatt tagaatataa aaaatactca ggaagtgata aagaaaatat aaaaagtcaa 2280

gttgaaaatt taaaaaatag tttagatata aaaatctcgg aagcaatgaa taatataaat 2340

aaatttatac gagaatgttc tgtaacatac ttatttaaaa atatgctccc taaagtaatt 2400

gatgaattaa ataagtttga tttaaaaact aaaacagaat taattaatct tatagatagt 2460

cataatatta ttctagttgg tgaagtagat agattaaaag caaaagtaaa tgagagtttt 2520

gaaaatacaa taccctttaa tattttttca tatactaata attctttatt aaaagatata 2580

attaatgaat atttcaatag tattaatgat tcaaaaattt tgagcttaca aaacaaaaaa 2640

aatgctttag tggatacatc aggatataat gcagaagtga ggctagaagg tgatgttcaa 2700

gttaatacga tatatacaaa tgattttaaa ttaagtagtt caggagataa aattatagta 2760

aatttaaata ataatatttt atatagcgct atttatgaga actctagtgt tagtttttgg 2820

attaagatat ctaaagattt aactaattct cataatgaat atacaataat taatagtata 2880

aaacaaaatt ctgggtggaa attatgtatt aggaatggca atatagaatg gattttacaa 2940

gatattaata gaaagtataa aagtttaatt tttgattata gtgaatcatt aagtcataca 3000

ggatatacaa ataaatggtt ttttgttact ataactaata atataatggg gtatatgaaa 3060

ctttatataa atggagaatt aaagcagagt gaaagaattg aagatttaaa tgaggttaag 3120

ttagataaaa ccatagtatt tggaatagat gagaatatag atgagaatca gatgctttgg 3180

attagagatt ttaatatttt ttctaaagaa ttaagcaatg aagatattaa tattgtatat 3240

gagggacaaa tattaagaaa tgttattaaa gattattggg gaaatccttt gaagtttgat 3300

acagaatatt atattattaa tgataattat atagataggt atatagcacc taaaagtaat 3360

atacttgtac ttgttcagta tccagataga tctaaattat atactggaaa tcctattact 3420

attaaatcag tatctgataa gaatccttat agtagaattt taaatggaga taatataatg 3480

tttcatatgt tatataatag tgggaaatat atgataataa gagatactga tacaatatat 3540

gcaatagaag gaagagagtg ttcaaaaaat tgtgtatatg cattaaaatt acagagtaat 3600

ttaggtaatt atggtatagg tatatttagt ataaaaaata ttgtatctca aaataaatat 3660

tgtagtcaaa ttttctctag ttttatgaaa aatacaatgc ttctagcaga tatatataaa 3720

ccttggagat tttcttttga aaatgcatac acgccagttg cagtaactaa ttatgagaca 3780

aaactattat caacttcatc tttttggaaa tttatttcta gggatccagg atgggtagag 3840

taa 3843

<210> 6

<211> 1280

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<400> 6

Met Pro Ile Thr Ile Asn Asn Phe Asn Tyr Ser Asp Pro Val Asp Asn

1 5 10 15

Lys Asn Ile Leu Tyr Leu Asp Thr His Leu Asn Thr Leu Ala Asn Glu

20 25 30

Pro Glu Lys Ala Phe Arg Ile Ile Gly Asn Ile Trp Val Ile Pro Asp

35 40 45

Arg Phe Ser Arg Asp Ser Asn Pro Asn Leu Asn Lys Pro Pro Arg Val

50 55 60

Thr Ser Pro Lys Ser Gly Tyr Tyr Asp Pro Asn Tyr Leu Ser Thr Asp

65 70 75 80

Ser Glu Lys Asp Thr Phe Leu Lys Glu Ile Ile Lys Leu Phe Lys Arg

85 90 95

Ile Asn Ser Arg Glu Ile Gly Glu Glu Leu Ile Tyr Arg Leu Ala Thr

100 105 110

Asp Ile Pro Phe Pro Gly Asn Asn Asn Thr Pro Ile Asn Thr Phe Asp

115 120 125

Phe Asp Val Asp Phe Asn Ser Val Asp Val Lys Thr Arg Gln Gly Asn

130 135 140

Asn Trp Val Lys Thr Gly Ser Ile Asn Pro Ser Val Ile Ile Thr Gly

145 150 155 160

Pro Arg Glu Asn Ile Ile Asp Pro Glu Thr Ser Thr Phe Lys Leu Thr

165 170 175

Asn Asn Thr Phe Ala Ala Gln Glu Gly Phe Gly Ala Leu Ser Ile Ile

180 185 190

Ser Ile Ser Pro Arg Phe Met Leu Thr Tyr Ser Asn Ala Thr Asn Asn

195 200 205

Val Gly Glu Gly Arg Phe Ser Lys Ser Glu Phe Cys Met Asp Pro Ile

210 215 220

Leu Ile Leu Met His Glu Leu Asn His Ala Met His Asn Leu Tyr Gly

225 230 235 240

Ile Ala Ile Pro Asn Asp Gln Arg Ile Ser Ser Val Thr Ser Asn Ile

245 250 255

Phe Tyr Ser Gln Tyr Lys Val Lys Leu Glu Tyr Ala Glu Ile Tyr Ala

260 265 270

Phe Gly Gly Pro Thr Ile Asp Leu Ile Pro Lys Ser Ala Arg Lys Tyr

275 280 285

Phe Glu Glu Lys Ala Leu Asp Tyr Tyr Arg Ser Ile Ala Lys Arg Leu

290 295 300

Asn Ser Ile Thr Thr Ala Asn Pro Ser Ser Phe Asn Lys Tyr Ile Gly

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Gln Lys Leu Ile Arg Lys Tyr Arg Phe Val Val Glu Ser

325 330 335

Ser Gly Glu Val Ala Val Asp Arg Asn Lys Phe Ala Glu Leu Tyr Lys

340 345 350

Glu Leu Thr Gln Ile Phe Thr Glu Phe Asn Tyr Ala Lys Ile Tyr Asn

355 360 365

Val Gln Asn Arg Lys Ile Tyr Leu Ser Asn Val Tyr Thr Pro Val Thr

370 375 380

Ala Asn Ile Leu Asp Asp Asn Val Tyr Asp Ile Gln Asn Gly Phe Asn

385 390 395 400

Ile Pro Lys Ser Asn Leu Asn Val Leu Phe Met Gly Gln Asn Leu Ser

405 410 415

Arg Asn Pro Ala Leu Arg Lys Val Asn Pro Glu Asn Met Leu Tyr Leu

420 425 430

Phe Thr Lys Phe Cys His Lys Ala Ile Asp Gly Arg Ser Leu Tyr Asn

435 440 445

Lys Thr Leu Asp Cys Arg Glu Leu Leu Val Lys Asn Thr Asp Leu Pro

450 455 460

Phe Ile Gly Asp Ile Ser Asp Ile Lys Thr Asp Ile Phe Leu Ser Lys

465 470 475 480

Asp Ile Asn Glu Glu Thr Glu Val Ile Asp Tyr Pro Asp Asn Val Ser

485 490 495

Val Asp Gln Val Ile Leu Ser Lys Asn Thr Ser Glu His Gly Gln Leu

500 505 510

Asp Leu Leu Tyr Pro Ile Ile Glu Gly Glu Ser Gln Val Leu Pro Gly

515 520 525

Glu Asn Gln Val Phe Tyr Asp Asn Arg Thr Gln Asn Val Asp Tyr Leu

530 535 540

Asn Ser Tyr Tyr Tyr Leu Glu Ser Gln Lys Leu Ser Asp Asn Val Glu

545 550 555 560

Asp Phe Thr Phe Thr Thr Ser Ile Glu Glu Ala Leu Asp Asn Ser Gly

565 570 575

Lys Val Tyr Thr Tyr Phe Pro Lys Leu Ala Asp Lys Val Asn Thr Gly

580 585 590

Val Gln Gly Gly Leu Phe Leu Met Trp Ala Asn Asp Val Val Glu Asp

595 600 605

Phe Thr Thr Asn Ile Leu Arg Lys Asp Thr Leu Asp Lys Ile Ser Asp

610 615 620

Val Ser Ala Ile Ile Pro Tyr Ile Gly Pro Ala Leu Asn Ile Ser Asn

625 630 635 640

Ser Val Arg Arg Gly Asn Phe Thr Glu Ala Phe Ala Val Thr Gly Val

645 650 655

Thr Ile Leu Leu Glu Ala Phe Gln Glu Phe Thr Ile Pro Ala Leu Gly

660 665 670

Ala Phe Val Ile Tyr Ser Lys Val Gln Glu Arg Asn Glu Ile Ile Lys

675 680 685

Thr Ile Asp Asn Cys Leu Glu Gln Arg Ile Lys Arg Trp Lys Asp Ser

690 695 700

Tyr Glu Trp Met Ile Gly Thr Trp Leu Ser Arg Ile Thr Thr Gln Phe

705 710 715 720

Asn Asn Ile Ser Tyr Gln Met Tyr Asp Ser Leu Asn Tyr Gln Ala Asp

725 730 735

Ala Ile Lys Asp Lys Ile Asp Leu Glu Tyr Lys Lys Tyr Ser Gly Ser

740 745 750

Asp Lys Glu Asn Ile Lys Ser Gln Val Glu Asn Leu Lys Asn Ser Leu

755 760 765

Asp Ile Lys Ile Ser Glu Ala Met Asn Asn Ile Asn Lys Phe Ile Arg

770 775 780

Glu Cys Ser Val Thr Tyr Leu Phe Lys Asn Met Leu Pro Lys Val Ile

785 790 795 800

Asp Glu Leu Asn Lys Phe Asp Leu Lys Thr Lys Thr Glu Leu Ile Asn

805 810 815

Leu Ile Asp Ser His Asn Ile Ile Leu Val Gly Glu Val Asp Arg Leu

820 825 830

Lys Ala Lys Val Asn Glu Ser Phe Glu Asn Thr Ile Pro Phe Asn Ile

835 840 845

Phe Ser Tyr Thr Asn Asn Ser Leu Leu Lys Asp Ile Ile Asn Glu Tyr

850 855 860

Phe Asn Ser Ile Asn Asp Ser Lys Ile Leu Ser Leu Gln Asn Lys Lys

865 870 875 880

Asn Ala Leu Val Asp Thr Ser Gly Tyr Asn Ala Glu Val Arg Leu Glu

885 890 895

Gly Asp Val Gln Val Asn Thr Ile Tyr Thr Asn Asp Phe Lys Leu Ser

900 905 910

Ser Ser Gly Asp Lys Ile Ile Val Asn Leu Asn Asn Asn Ile Leu Tyr

915 920 925

Ser Ala Ile Tyr Glu Asn Ser Ser Val Ser Phe Trp Ile Lys Ile Ser

930 935 940

Lys Asp Leu Thr Asn Ser His Asn Glu Tyr Thr Ile Ile Asn Ser Ile

945 950 955 960

Lys Gln Asn Ser Gly Trp Lys Leu Cys Ile Arg Asn Gly Asn Ile Glu

965 970 975

Trp Ile Leu Gln Asp Ile Asn Arg Lys Tyr Lys Ser Leu Ile Phe Asp

980 985 990

Tyr Ser Glu Ser Leu Ser His Thr Gly Tyr Thr Asn Lys Trp Phe Phe

995 1000 1005

Val Thr Ile Thr Asn Asn Ile Met Gly Tyr Met Lys Leu Tyr Ile Asn

1010 1015 1020

Gly Glu Leu Lys Gln Ser Glu Arg Ile Glu Asp Leu Asn Glu Val Lys

1025 1030 1035 1040

Leu Asp Lys Thr Ile Val Phe Gly Ile Asp Glu Asn Ile Asp Glu Asn

1045 1050 1055

Gln Met Leu Trp Ile Arg Asp Phe Asn Ile Phe Ser Lys Glu Leu Ser

1060 1065 1070

Asn Glu Asp Ile Asn Ile Val Tyr Glu Gly Gln Ile Leu Arg Asn Val

1075 1080 1085

Ile Lys Asp Tyr Trp Gly Asn Pro Leu Lys Phe Asp Thr Glu Tyr Tyr

1090 1095 1100

Ile Ile Asn Asp Asn Tyr Ile Asp Arg Tyr Ile Ala Pro Lys Ser Asn

1105 1110 1115 1120

Ile Leu Val Leu Val Gln Tyr Pro Asp Arg Ser Lys Leu Tyr Thr Gly

1125 1130 1135

Asn Pro Ile Thr Ile Lys Ser Val Ser Asp Lys Asn Pro Tyr Ser Arg

1140 1145 1150

Ile Leu Asn Gly Asp Asn Ile Met Phe His Met Leu Tyr Asn Ser Gly

1155 1160 1165

Lys Tyr Met Ile Ile Arg Asp Thr Asp Thr Ile Tyr Ala Ile Glu Gly

1170 1175 1180

Arg Glu Cys Ser Lys Asn Cys Val Tyr Ala Leu Lys Leu Gln Ser Asn

1185 1190 1195 1200

Leu Gly Asn Tyr Gly Ile Gly Ile Phe Ser Ile Lys Asn Ile Val Ser

1205 1210 1215

Gln Asn Lys Tyr Cys Ser Gln Ile Phe Ser Ser Phe Met Lys Asn Thr

1220 1225 1230

Met Leu Leu Ala Asp Ile Tyr Lys Pro Trp Arg Phe Ser Phe Glu Asn

1235 1240 1245

Ala Tyr Thr Pro Val Ala Val Thr Asn Tyr Glu Thr Lys Leu Leu Ser

1250 1255 1260

Thr Ser Ser Phe Trp Lys Phe Ile Ser Arg Asp Pro Gly Trp Val Glu

1265 1270 1275 1280

<210> 7

<211> 3858

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<400> 7

atgacatggc cagtaaaaga ttttaattat agtgatcctg ttaatgacaa tgatatatta 60

tatttaagaa taccacaaaa taagttaatt actacacctg taaaagcttt tatgattact 120

caaaatattt gggtaatacc agaaagattt tcatcagata ctaatccaag tttaagtaaa 180

ccgcctagac ctacttcaaa gtatcaaagt tattatgatc ctagttattt atctactgat 240

gagcaaaaag atacattttt aaaagggatt ataaaattat ttaaaagaat taatgaaaga 300

gatataggaa aaaaattaat aaattattta gtagttggtt caccttttat gggagattca 360

agtacgcctg aagatacatt tgattttaca cgtcatacta ctaatattgc agttgaaaag 420

tttgaaaatg gtagttggaa agtaacaaat attataacac caagtgtatt gatatttgga 480

ccacttccta atatattaga ctatacagca tcccttacat tgcaaggaca acaatcaaat 540

ccatcatttg aagggtttgg aacattatct atactaaaag tagcacctga atttttgtta 600

acatttagtg atgtaacatc taatcaaagt tcagctgtat taggcaaatc tatattttgt 660

atggatccag taatagcttt aatgcatgag ttaacacatt ctttgcatca attgtatgga 720

ataaatatac catctgataa aaggattcgt ccacaagtta gcgagggatt tttttctcaa 780

gatggaccca acgtacaatt tgaggaatta tacacatttg gaggatcaga tgttgaaata 840

atacctcaaa ttgaaagatt acaattaaga gaaaaagcat taggtcacta taaagatata 900

gcgaaaagac ttaataatat taataaaact attccttcta gttggagtag taatatagat 960

aaatataaaa aaatattttc tgaaaagtat aattttgata aagataatac aggaaatttt 1020

gttgtaaata ttgataaatt caatagctta tattcagact tgactaatgt tatgtcagaa 1080

gttgtttatt cttcgcaata taatgttaaa aacaggactc attatttttc aaagcattat 1140

ctacctgtat ttgcaaatat attagatgat aatatttata ctataataaa cggttttaat 1200

ttaacaacta aaggttttaa tatagaaaat tcgggtcaga atatagaaag gaatcctgca 1260

ctacaaaaac ttagttcaga aagtgtagta gatttgttta caaaagtatg tttaagatta 1320

acaagaaata gtagagatga ttcaacatgt attcaagtta aaaataatac attaccttat 1380

gtagctgata aagatagcat ttcacaagaa atatttgaaa gtcaaattat tacagatgag 1440

actaatgtag aaaattattc agataatttt tcattagatg aatctatttt agatgcaaaa 1500

gtccctacta atcctgaagc agtagatcca ctgttaccca atgttaatat ggaaccttta 1560

aatgttccag gtgaagaaga agtattttat gatgatatta ctaaagatgt tgattattta 1620

aactcttatt attatttgga agcccaaaaa ttaagtaata atgttgaaaa tattactctt 1680

acaacttcag ttgaagaagc attaggttat agcaataaga tatacacatt tttacctagc 1740

ttagctgaaa aagtgaataa aggtgttcaa gcaggtttat tcttaaattg ggcgaatgaa 1800

gtagttgagg attttactac aaatattatg aaaaaagata cattggataa aatatcagat 1860

gtatcagcca taattccata tataggacct gccttaaata taggaaattc agcattaagg 1920

ggaaacttta agcaagcatt tgcaacagct ggtgtagctt ttttgttaga aggatttcca 1980

gagtttacaa tacctgcact cggtgtattt accttttata gttctattca agaaagagag 2040

aaaattatta aaactataga aaattgttta gaacaaagag ttaagagatg gaaagattca 2100

tatcaatgga tggtatcaaa ttggttgtca agaattacta ctcgatttaa tcatataagt 2160

tatcaaatgt atgattcttt gagttatcag gcagatgcaa tcaaagctaa aatagattta 2220

gaatataaaa aatactcagg aagtgataaa gaaaatataa aaagtcaagt tgaaaattta 2280

aaaaatagtt tagatgtaaa aatctcggaa gcaatgaata atataaataa atttatacga 2340

gaatgttctg taacatactt atttaaaaat atgctcccta aagtaattga tgaattaaat 2400

aagtttgatt taaaaactaa aacagaatta attaatctta tagatagtca taatattatt 2460

ctagttggtg aagtagatag attaaaagca aaagtaaatg agagttttga aaatacaata 2520

ccctttaata ttttttcata tactaataat tctttattaa aagatatgat taatgaatat 2580

ttcaatagta ttaatgattc aaaaattttg agcttacaaa ataaaaaaaa tactttgatg 2640

gatacatcag gatataacgc agaagtgaga gtagaaggca atgttcagct taatccaata 2700

tttccatttg actttaaatt aggtagttca ggggatgata gaggtaaagt tatagtaacc 2760

cagaatgaaa atattgtata taatgctatg tatgaaagtt ttagtattag tttttggatt 2820

aggataaata aatgggtaag taatttacct ggatatacta taattgatag tgttaaaaat 2880

aactcaggtt ggagtatagg tattattagt aattttttag tgtttacttt aaaacaaaat 2940

gaaaatagtg aacaagatat aaactttagt tatgatatat caaagaatgc tgcgggatat 3000

aataaatggt tttttgtaac tattactacc aatatgatgg gaaatatgat gatttatata 3060

aatggaaaat taatagatac tataaaagtt aaagagttaa ctggaattaa ttttagcaaa 3120

actataacat ttcaaatgaa taaaattcca aatactggct taattacctc agattctgat 3180

aacatcaata tgtggataag ggatttttat atctttgcta aagaattaga tgataaagat 3240

attaatatat tatttaatag cttgcaatat actaatgttg taaaagatta ttggggaaat 3300

gatttaagat atgataaaga atattacatg attaacgtaa attatatgaa tagatatatg 3360

tctaaaaaag gcaatggaat tgtttttaat acacgtaaaa ataataatga cttcaatgaa 3420

ggatataaaa ttataataaa aagaattaga ggaaatacaa atgatactag agtacgagga 3480

gaaaatgtat tatattttaa tactacaatt gataacaaac aatatagttt aggtatgtat 3540

aaaccttcta gaaatctagg gactgattta gttccactag gtgcattgga tcaaccaatg 3600

gatgagatac gtaaatatgg ttcgtttata atacaaccat gcaatacttt tgattactat 3660

gcatcacaat tatttttgtc aagtaatgca acaacaaata ggcttggaat actatcaatt 3720

ggtagttata gtttcaaact tggagatgac tattggttta atcacgaata tttaattcct 3780

gttataaaaa tagagcatta tgcttcatta ttagaatcaa catcaactca ttgggttttt 3840

gtacctgcaa gtgaataa 3858

<210> 8

<211> 1285

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<400> 8

Met Thr Trp Pro Val Lys Asp Phe Asn Tyr Ser Asp Pro Val Asn Asp

1 5 10 15

Asn Asp Ile Leu Tyr Leu Arg Ile Pro Gln Asn Lys Leu Ile Thr Thr

20 25 30

Pro Val Lys Ala Phe Met Ile Thr Gln Asn Ile Trp Val Ile Pro Glu

35 40 45

Arg Phe Ser Ser Asp Thr Asn Pro Ser Leu Ser Lys Pro Pro Arg Pro

50 55 60

Thr Ser Lys Tyr Gln Ser Tyr Tyr Asp Pro Ser Tyr Leu Ser Thr Asp

65 70 75 80

Glu Gln Lys Asp Thr Phe Leu Lys Gly Ile Ile Lys Leu Phe Lys Arg

85 90 95

Ile Asn Glu Arg Asp Ile Gly Lys Lys Leu Ile Asn Tyr Leu Val Val

100 105 110

Gly Ser Pro Phe Met Gly Asp Ser Ser Thr Pro Glu Asp Thr Phe Asp

115 120 125

Phe Thr Arg His Thr Thr Asn Ile Ala Val Glu Lys Phe Glu Asn Gly

130 135 140

Ser Trp Lys Val Thr Asn Ile Ile Thr Pro Ser Val Leu Ile Phe Gly

145 150 155 160

Pro Leu Pro Asn Ile Leu Asp Tyr Thr Ala Ser Leu Thr Leu Gln Gly

165 170 175

Gln Gln Ser Asn Pro Ser Phe Glu Gly Phe Gly Thr Leu Ser Ile Leu

180 185 190

Lys Val Ala Pro Glu Phe Leu Leu Thr Phe Ser Asp Val Thr Ser Asn

195 200 205

Gln Ser Ser Ala Val Leu Gly Lys Ser Ile Phe Cys Met Asp Pro Val

210 215 220

Ile Ala Leu Met His Glu Leu Thr His Ser Leu His Gln Leu Tyr Gly

225 230 235 240

Ile Asn Ile Pro Ser Asp Lys Arg Ile Arg Pro Gln Val Ser Glu Gly

245 250 255

Phe Phe Ser Gln Asp Gly Pro Asn Val Gln Phe Glu Glu Leu Tyr Thr

260 265 270

Phe Gly Gly Ser Asp Val Glu Ile Ile Pro Gln Ile Glu Arg Leu Gln

275 280 285

Leu Arg Glu Lys Ala Leu Gly His Tyr Lys Asp Ile Ala Lys Arg Leu

290 295 300

Asn Asn Ile Asn Lys Thr Ile Pro Ser Ser Trp Ser Ser Asn Ile Asp

305 310 315 320

Lys Tyr Lys Lys Ile Phe Ser Glu Lys Tyr Asn Phe Asp Lys Asp Asn

325 330 335

Thr Gly Asn Phe Val Val Asn Ile Asp Lys Phe Asn Ser Leu Tyr Ser

340 345 350

Asp Leu Thr Asn Val Met Ser Glu Val Val Tyr Ser Ser Gln Tyr Asn

355 360 365

Val Lys Asn Arg Thr His Tyr Phe Ser Lys His Tyr Leu Pro Val Phe

370 375 380

Ala Asn Ile Leu Asp Asp Asn Ile Tyr Thr Ile Ile Asn Gly Phe Asn

385 390 395 400

Leu Thr Thr Lys Gly Phe Asn Ile Glu Asn Ser Gly Gln Asn Ile Glu

405 410 415

Arg Asn Pro Ala Leu Gln Lys Leu Ser Ser Glu Ser Val Val Asp Leu

420 425 430

Phe Thr Lys Val Cys Leu Arg Leu Thr Arg Asn Ser Arg Asp Asp Ser

435 440 445

Thr Cys Ile Gln Val Lys Asn Asn Thr Leu Pro Tyr Val Ala Asp Lys

450 455 460

Asp Ser Ile Ser Gln Glu Ile Phe Glu Ser Gln Ile Ile Thr Asp Glu

465 470 475 480

Thr Asn Val Glu Asn Tyr Ser Asp Asn Phe Ser Leu Asp Glu Ser Ile

485 490 495

Leu Asp Ala Lys Val Pro Thr Asn Pro Glu Ala Val Asp Pro Leu Leu

500 505 510

Pro Asn Val Asn Met Glu Pro Leu Asn Val Pro Gly Glu Glu Glu Val

515 520 525

Phe Tyr Asp Asp Ile Thr Lys Asp Val Asp Tyr Leu Asn Ser Tyr Tyr

530 535 540

Tyr Leu Glu Ala Gln Lys Leu Ser Asn Asn Val Glu Asn Ile Thr Leu

545 550 555 560

Thr Thr Ser Val Glu Glu Ala Leu Gly Tyr Ser Asn Lys Ile Tyr Thr

565 570 575

Phe Leu Pro Ser Leu Ala Glu Lys Val Asn Lys Gly Val Gln Ala Gly

580 585 590

Leu Phe Leu Asn Trp Ala Asn Glu Val Val Glu Asp Phe Thr Thr Asn

595 600 605

Ile Met Lys Lys Asp Thr Leu Asp Lys Ile Ser Asp Val Ser Ala Ile

610 615 620

Ile Pro Tyr Ile Gly Pro Ala Leu Asn Ile Gly Asn Ser Ala Leu Arg

625 630 635 640

Gly Asn Phe Lys Gln Ala Phe Ala Thr Ala Gly Val Ala Phe Leu Leu

645 650 655

Glu Gly Phe Pro Glu Phe Thr Ile Pro Ala Leu Gly Val Phe Thr Phe

660 665 670

Tyr Ser Ser Ile Gln Glu Arg Glu Lys Ile Ile Lys Thr Ile Glu Asn

675 680 685

Cys Leu Glu Gln Arg Val Lys Arg Trp Lys Asp Ser Tyr Gln Trp Met

690 695 700

Val Ser Asn Trp Leu Ser Arg Ile Thr Thr Arg Phe Asn His Ile Ser

705 710 715 720

Tyr Gln Met Tyr Asp Ser Leu Ser Tyr Gln Ala Asp Ala Ile Lys Ala

725 730 735

Lys Ile Asp Leu Glu Tyr Lys Lys Tyr Ser Gly Ser Asp Lys Glu Asn

740 745 750

Ile Lys Ser Gln Val Glu Asn Leu Lys Asn Ser Leu Asp Val Lys Ile

755 760 765

Ser Glu Ala Met Asn Asn Ile Asn Lys Phe Ile Arg Glu Cys Ser Val

770 775 780

Thr Tyr Leu Phe Lys Asn Met Leu Pro Lys Val Ile Asp Glu Leu Asn

785 790 795 800

Lys Phe Asp Leu Lys Thr Lys Thr Glu Leu Ile Asn Leu Ile Asp Ser

805 810 815

His Asn Ile Ile Leu Val Gly Glu Val Asp Arg Leu Lys Ala Lys Val

820 825 830

Asn Glu Ser Phe Glu Asn Thr Ile Pro Phe Asn Ile Phe Ser Tyr Thr

835 840 845

Asn Asn Ser Leu Leu Lys Asp Met Ile Asn Glu Tyr Phe Asn Ser Ile

850 855 860

Asn Asp Ser Lys Ile Leu Ser Leu Gln Asn Lys Lys Asn Thr Leu Met

865 870 875 880

Asp Thr Ser Gly Tyr Asn Ala Glu Val Arg Val Glu Gly Asn Val Gln

885 890 895

Leu Asn Pro Ile Phe Pro Phe Asp Phe Lys Leu Gly Ser Ser Gly Asp

900 905 910

Asp Arg Gly Lys Val Ile Val Thr Gln Asn Glu Asn Ile Val Tyr Asn

915 920 925

Ala Met Tyr Glu Ser Phe Ser Ile Ser Phe Trp Ile Arg Ile Asn Lys

930 935 940

Trp Val Ser Asn Leu Pro Gly Tyr Thr Ile Ile Asp Ser Val Lys Asn

945 950 955 960

Asn Ser Gly Trp Ser Ile Gly Ile Ile Ser Asn Phe Leu Val Phe Thr

965 970 975

Leu Lys Gln Asn Glu Asn Ser Glu Gln Asp Ile Asn Phe Ser Tyr Asp

980 985 990

Ile Ser Lys Asn Ala Ala Gly Tyr Asn Lys Trp Phe Phe Val Thr Ile

995 1000 1005

Thr Thr Asn Met Met Gly Asn Met Met Ile Tyr Ile Asn Gly Lys Leu

1010 1015 1020

Ile Asp Thr Ile Lys Val Lys Glu Leu Thr Gly Ile Asn Phe Ser Lys

1025 1030 1035 1040

Thr Ile Thr Phe Gln Met Asn Lys Ile Pro Asn Thr Gly Leu Ile Thr

1045 1050 1055

Ser Asp Ser Asp Asn Ile Asn Met Trp Ile Arg Asp Phe Tyr Ile Phe

1060 1065 1070

Ala Lys Glu Leu Asp Asp Lys Asp Ile Asn Ile Leu Phe Asn Ser Leu

1075 1080 1085

Gln Tyr Thr Asn Val Val Lys Asp Tyr Trp Gly Asn Asp Leu Arg Tyr

1090 1095 1100

Asp Lys Glu Tyr Tyr Met Ile Asn Val Asn Tyr Met Asn Arg Tyr Met

1105 1110 1115 1120

Ser Lys Lys Gly Asn Gly Ile Val Phe Asn Thr Arg Lys Asn Asn Asn

1125 1130 1135

Asp Phe Asn Glu Gly Tyr Lys Ile Ile Ile Lys Arg Ile Arg Gly Asn

1140 1145 1150

Thr Asn Asp Thr Arg Val Arg Gly Glu Asn Val Leu Tyr Phe Asn Thr

1155 1160 1165

Thr Ile Asp Asn Lys Gln Tyr Ser Leu Gly Met Tyr Lys Pro Ser Arg

1170 1175 1180

Asn Leu Gly Thr Asp Leu Val Pro Leu Gly Ala Leu Asp Gln Pro Met

1185 1190 1195 1200

Asp Glu Ile Arg Lys Tyr Gly Ser Phe Ile Ile Gln Pro Cys Asn Thr

1205 1210 1215

Phe Asp Tyr Tyr Ala Ser Gln Leu Phe Leu Ser Ser Asn Ala Thr Thr

1220 1225 1230

Asn Arg Leu Gly Ile Leu Ser Ile Gly Ser Tyr Ser Phe Lys Leu Gly

1235 1240 1245

Asp Asp Tyr Trp Phe Asn His Glu Tyr Leu Ile Pro Val Ile Lys Ile

1250 1255 1260

Glu His Tyr Ala Ser Leu Leu Glu Ser Thr Ser Thr His Trp Val Phe

1265 1270 1275 1280

Val Pro Ala Ser Glu

1285

<210> 9

<211> 3756

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<400> 9

atgccaaaaa ttaatagttt taattataat gatcctgtta atgatagaac aattttatat 60

attaaaccag gcggttgtca agaattttat aaatcattta atattatgaa aaatatttgg 120

ataattccag agagaaatgt aattggtaca accccccaag attttcatcc gcctacttca 180

ttaaaaaatg gagatagtag ttattatgac cctaattatt tacaaagtga tgaagaaaag 240

gatagatttt taaaaatagt cacaaaaata tttaatagaa taaataataa tctttcagga 300

gggattttat tagaagaact gtcaaaagct aatccatatt tagggaatga taatactcca 360

gataatcaat tccatattgg tgatgcatca gcagttgaga ttaaattctc aaatggtagc 420

caagacatac tattacctaa tgttattata atgggagcag agcctgattt atttgaaact 480

aacagttcca atatttctct aagaaataat tatatgccaa gcaatcaccg ttttggatca 540

atagctatag taacattctc acctgaatat tcttttagat ttaatgataa ttgtatgaat 600

gaatttattc aagatcctgc tcttacatta atgcatgaat taatacattc attacatgga 660

ctatatgggg ctaaagggat tactacaaag tatactataa cacaaaaaca aaatccccta 720

ataacaaata taagaggtac aaatattgaa gaattcttaa cttttggagg tactgattta 780

aacattatta ctagtgctca gtccaatgat atctatacta atcttctagc tgattataaa 840

aaaatagcgt ctaaacttag caaagtacaa gtatctaatc cactacttaa tccttataaa 900

gatgtttttg aagcaaagta tggattagat aaagatgcta gcggaattta ttcggtaaat 960

ataaacaaat ttaatgatat ttttaaaaaa ttatacagct ttacggaatt tgatttacga 1020

actaaatttc aagttaaatg taggcaaact tatattggac agtataaata cttcaaactt 1080

tcaaacttgt taaatgattc tatttataat atatcagaag gctataatat aaataattta 1140

aaggtaaatt ttagaggaca gaatgcaaat ttaaatccta gaattattac accaattaca 1200

ggtagaggac tagtaaaaaa aatcattaga ttttgtaaaa atattgtttc tgtaaaaggc 1260

ataaggaaat caatatgtat cgaaataaat aatggtgagt tattttttgt ggcttccgag 1320

aatagttata atgatgataa tataaatact cctaaagaaa ttgacgatac agtaacttca 1380

aataataatt atgaaaatga tttagatcag gttattttaa attttaatag tgaatcagca 1440

cctggacttt cagatgaaaa attaaattta actatccaaa atgatgctta tataccaaaa 1500

tatgattcta atggaacaag tgatatagaa caacatgatg ttaatgaact taatgtattt 1560

ttctatttag atgcacagaa agtgcccgaa ggtgaaaata atgtcaatct cacctcttca 1620

attgatacag cattattaga acaacctaaa atatatacat ttttttcatc agaatttatt 1680

aataatgtca ataaacctgt gcaagcagca ttatttgtaa gctggataca acaagtgtta 1740

gtagatttta ctactgaagc taaccaaaaa agtactgttg ataaaattgc agatatttct 1800

atagttgttc catatatagg tcttgcttta aatataggaa atgaagcaca aaaaggaaat 1860

tttaaagatg cacttgaatt attaggagca ggtattttat tagaatttga acccgagctt 1920

ttaattccta caattttagt attcacgata aaatcttttt taggttcatc tgataataaa 1980

aataaagtta ttaaagcaat aaataatgca ttgaaagaaa gagatgaaaa atggaaagaa 2040

gtatatagtt ttatagtatc gaattggatg actaaaatta atacacaatt taataaaaga 2100

aaagaacaaa tgtatcaagc tttacaaaat caagtaaatg caattaaaac aataatagaa 2160

tctaagtata atagttatac tttagaggaa aaaaatgagc ttacaaataa atatgatatt 2220

aagcaaatag aaaatgaact taatcaaaag gtttctatag caatgaataa tatagacagg 2280

ttcttaactg aaagttctat atcctattta atgaaaataa taaatgaagt aaaaattaat 2340

aaattaagag aatatgatga gaatgtcaaa acgtatttat tgaattatat tatacaacat 2400

ggatcaatct tgggagagag tcagcaagaa ctaaattcta tggtaactga taccctaaat 2460

aatagtattc cttttaagct ttcttcttat acagatgata aaattttaat ttcatatttt 2520

aataaattct ttaagagaat taaaagtagt tcagttttaa atatgagata taaaaatgat 2580

aaatacgtag atacttcagg atatgattca aatataaata ttaatggaga tgtatataaa 2640

tatccaacta ataaaaatca atttggaata tataatgata aacttagtga agttaatata 2700

tctcaaaatg attacattat atatgataat aaatataaaa attttagtat tagtttttgg 2760

gtaagaattc ctaactatga taataagata gtaaatgtta ataatgaata cactataata 2820

aattgtatga gagataataa ttcaggatgg aaagtatctc ttaatcataa tgaaataatt 2880

tggacattcg aagataatcg aggaattaat caaaaattag catttaacta tggtaacgca 2940

aatggtattt ctgattatat aaataagtgg atttttgtaa ctataactaa tgatagatta 3000

ggagattcta aactttatat taatggaaat ttaatagatc aaaaatcaat tttaaattta 3060

ggtaatattc atgttagtga caatatatta tttaaaatag ttaattgtag ttatacaaga 3120

tatattggta ttagatattt taatattttt gataaagaat tagatgaaac agaaattcaa 3180

actttatata gcaatgaacc taatacaaat attttgaagg atttttgggg aaattatttg 3240

ctttatgaca aagaatacta tttattaaat gtgttaaaac caaataactt tattgatagg 3300

agaaaagatt ctactttaag cattaataat ataagaagca ctattctttt agctaataga 3360

ttatatagtg gaataaaagt taaaatacaa agagttaata atagtagtac taacgataat 3420

cttgttagaa agaatgatca ggtatatatt aattttgtag ccagcaaaac tcacttattt 3480

ccattatatg ctgatacagc taccacaaat aaagagaaaa caataaaaat atcatcatct 3540

ggcaatagat ttaatcaagt agtagttatg aattcagtag gaaattgtac aatgaatttt 3600

aaaaataata atggaaataa tattgggttg ttaggtttca aggcagatac tgtcgttgct 3660

agtacttggt attatacaca tatgagagat catacaaaca gcaatggatg tttttggaac 3720

tttatttctg aagaacatgg atggcaagaa aaataa 3756

<210> 10

<211> 1251

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<400> 10

Met Pro Lys Ile Asn Ser Phe Asn Tyr Asn Asp Pro Val Asn Asp Arg

1 5 10 15

Thr Ile Leu Tyr Ile Lys Pro Gly Gly Cys Gln Glu Phe Tyr Lys Ser

20 25 30

Phe Asn Ile Met Lys Asn Ile Trp Ile Ile Pro Glu Arg Asn Val Ile

35 40 45

Gly Thr Thr Pro Gln Asp Phe His Pro Pro Thr Ser Leu Lys Asn Gly

50 55 60

Asp Ser Ser Tyr Tyr Asp Pro Asn Tyr Leu Gln Ser Asp Glu Glu Lys

65 70 75 80

Asp Arg Phe Leu Lys Ile Val Thr Lys Ile Phe Asn Arg Ile Asn Asn

85 90 95

Asn Leu Ser Gly Gly Ile Leu Leu Glu Glu Leu Ser Lys Ala Asn Pro

100 105 110

Tyr Leu Gly Asn Asp Asn Thr Pro Asp Asn Gln Phe His Ile Gly Asp

115 120 125

Ala Ser Ala Val Glu Ile Lys Phe Ser Asn Gly Ser Gln Asp Ile Leu

130 135 140

Leu Pro Asn Val Ile Ile Met Gly Ala Glu Pro Asp Leu Phe Glu Thr

145 150 155 160

Asn Ser Ser Asn Ile Ser Leu Arg Asn Asn Tyr Met Pro Ser Asn His

165 170 175

Arg Phe Gly Ser Ile Ala Ile Val Thr Phe Ser Pro Glu Tyr Ser Phe

180 185 190

Arg Phe Asn Asp Asn Cys Met Asn Glu Phe Ile Gln Asp Pro Ala Leu

195 200 205

Thr Leu Met His Glu Leu Ile His Ser Leu His Gly Leu Tyr Gly Ala

210 215 220

Lys Gly Ile Thr Thr Lys Tyr Thr Ile Thr Gln Lys Gln Asn Pro Leu

225 230 235 240

Ile Thr Asn Ile Arg Gly Thr Asn Ile Glu Glu Phe Leu Thr Phe Gly

245 250 255

Gly Thr Asp Leu Asn Ile Ile Thr Ser Ala Gln Ser Asn Asp Ile Tyr

260 265 270

Thr Asn Leu Leu Ala Asp Tyr Lys Lys Ile Ala Ser Lys Leu Ser Lys

275 280 285

Val Gln Val Ser Asn Pro Leu Leu Asn Pro Tyr Lys Asp Val Phe Glu

290 295 300

Ala Lys Tyr Gly Leu Asp Lys Asp Ala Ser Gly Ile Tyr Ser Val Asn

305 310 315 320

Ile Asn Lys Phe Asn Asp Ile Phe Lys Lys Leu Tyr Ser Phe Thr Glu

325 330 335

Phe Asp Leu Arg Thr Lys Phe Gln Val Lys Cys Arg Gln Thr Tyr Ile

340 345 350

Gly Gln Tyr Lys Tyr Phe Lys Leu Ser Asn Leu Leu Asn Asp Ser Ile

355 360 365

Tyr Asn Ile Ser Glu Gly Tyr Asn Ile Asn Asn Leu Lys Val Asn Phe

370 375 380

Arg Gly Gln Asn Ala Asn Leu Asn Pro Arg Ile Ile Thr Pro Ile Thr

385 390 395 400

Gly Arg Gly Leu Val Lys Lys Ile Ile Arg Phe Cys Lys Asn Ile Val

405 410 415

Ser Val Lys Gly Ile Arg Lys Ser Ile Cys Ile Glu Ile Asn Asn Gly

420 425 430

Glu Leu Phe Phe Val Ala Ser Glu Asn Ser Tyr Asn Asp Asp Asn Ile

435 440 445

Asn Thr Pro Lys Glu Ile Asp Asp Thr Val Thr Ser Asn Asn Asn Tyr

450 455 460

Glu Asn Asp Leu Asp Gln Val Ile Leu Asn Phe Asn Ser Glu Ser Ala

465 470 475 480

Pro Gly Leu Ser Asp Glu Lys Leu Asn Leu Thr Ile Gln Asn Asp Ala

485 490 495

Tyr Ile Pro Lys Tyr Asp Ser Asn Gly Thr Ser Asp Ile Glu Gln His

500 505 510

Asp Val Asn Glu Leu Asn Val Phe Phe Tyr Leu Asp Ala Gln Lys Val

515 520 525

Pro Glu Gly Glu Asn Asn Val Asn Leu Thr Ser Ser Ile Asp Thr Ala

530 535 540

Leu Leu Glu Gln Pro Lys Ile Tyr Thr Phe Phe Ser Ser Glu Phe Ile

545 550 555 560

Asn Asn Val Asn Lys Pro Val Gln Ala Ala Leu Phe Val Ser Trp Ile

565 570 575

Gln Gln Val Leu Val Asp Phe Thr Thr Glu Ala Asn Gln Lys Ser Thr

580 585 590

Val Asp Lys Ile Ala Asp Ile Ser Ile Val Val Pro Tyr Ile Gly Leu

595 600 605

Ala Leu Asn Ile Gly Asn Glu Ala Gln Lys Gly Asn Phe Lys Asp Ala

610 615 620

Leu Glu Leu Leu Gly Ala Gly Ile Leu Leu Glu Phe Glu Pro Glu Leu

625 630 635 640

Leu Ile Pro Thr Ile Leu Val Phe Thr Ile Lys Ser Phe Leu Gly Ser

645 650 655

Ser Asp Asn Lys Asn Lys Val Ile Lys Ala Ile Asn Asn Ala Leu Lys

660 665 670

Glu Arg Asp Glu Lys Trp Lys Glu Val Tyr Ser Phe Ile Val Ser Asn

675 680 685

Trp Met Thr Lys Ile Asn Thr Gln Phe Asn Lys Arg Lys Glu Gln Met

690 695 700

Tyr Gln Ala Leu Gln Asn Gln Val Asn Ala Ile Lys Thr Ile Ile Glu

705 710 715 720

Ser Lys Tyr Asn Ser Tyr Thr Leu Glu Glu Lys Asn Glu Leu Thr Asn

725 730 735

Lys Tyr Asp Ile Lys Gln Ile Glu Asn Glu Leu Asn Gln Lys Val Ser

740 745 750

Ile Ala Met Asn Asn Ile Asp Arg Phe Leu Thr Glu Ser Ser Ile Ser

755 760 765

Tyr Leu Met Lys Ile Ile Asn Glu Val Lys Ile Asn Lys Leu Arg Glu

770 775 780

Tyr Asp Glu Asn Val Lys Thr Tyr Leu Leu Asn Tyr Ile Ile Gln His

785 790 795 800

Gly Ser Ile Leu Gly Glu Ser Gln Gln Glu Leu Asn Ser Met Val Thr

805 810 815

Asp Thr Leu Asn Asn Ser Ile Pro Phe Lys Leu Ser Ser Tyr Thr Asp

820 825 830

Asp Lys Ile Leu Ile Ser Tyr Phe Asn Lys Phe Phe Lys Arg Ile Lys

835 840 845

Ser Ser Ser Val Leu Asn Met Arg Tyr Lys Asn Asp Lys Tyr Val Asp

850 855 860

Thr Ser Gly Tyr Asp Ser Asn Ile Asn Ile Asn Gly Asp Val Tyr Lys

865 870 875 880

Tyr Pro Thr Asn Lys Asn Gln Phe Gly Ile Tyr Asn Asp Lys Leu Ser

885 890 895

Glu Val Asn Ile Ser Gln Asn Asp Tyr Ile Ile Tyr Asp Asn Lys Tyr

900 905 910

Lys Asn Phe Ser Ile Ser Phe Trp Val Arg Ile Pro Asn Tyr Asp Asn

915 920 925

Lys Ile Val Asn Val Asn Asn Glu Tyr Thr Ile Ile Asn Cys Met Arg

930 935 940

Asp Asn Asn Ser Gly Trp Lys Val Ser Leu Asn His Asn Glu Ile Ile

945 950 955 960

Trp Thr Phe Glu Asp Asn Arg Gly Ile Asn Gln Lys Leu Ala Phe Asn

965 970 975

Tyr Gly Asn Ala Asn Gly Ile Ser Asp Tyr Ile Asn Lys Trp Ile Phe

980 985 990

Val Thr Ile Thr Asn Asp Arg Leu Gly Asp Ser Lys Leu Tyr Ile Asn

995 1000 1005

Gly Asn Leu Ile Asp Gln Lys Ser Ile Leu Asn Leu Gly Asn Ile His

1010 1015 1020

Val Ser Asp Asn Ile Leu Phe Lys Ile Val Asn Cys Ser Tyr Thr Arg

1025 1030 1035 1040

Tyr Ile Gly Ile Arg Tyr Phe Asn Ile Phe Asp Lys Glu Leu Asp Glu

1045 1050 1055

Thr Glu Ile Gln Thr Leu Tyr Ser Asn Glu Pro Asn Thr Asn Ile Leu

1060 1065 1070

Lys Asp Phe Trp Gly Asn Tyr Leu Leu Tyr Asp Lys Glu Tyr Tyr Leu

1075 1080 1085

Leu Asn Val Leu Lys Pro Asn Asn Phe Ile Asp Arg Arg Lys Asp Ser

1090 1095 1100

Thr Leu Ser Ile Asn Asn Ile Arg Ser Thr Ile Leu Leu Ala Asn Arg

1105 1110 1115 1120

Leu Tyr Ser Gly Ile Lys Val Lys Ile Gln Arg Val Asn Asn Ser Ser

1125 1130 1135

Thr Asn Asp Asn Leu Val Arg Lys Asn Asp Gln Val Tyr Ile Asn Phe

1140 1145 1150

Val Ala Ser Lys Thr His Leu Phe Pro Leu Tyr Ala Asp Thr Ala Thr

1155 1160 1165

Thr Asn Lys Glu Lys Thr Ile Lys Ile Ser Ser Ser Gly Asn Arg Phe

1170 1175 1180

Asn Gln Val Val Val Met Asn Ser Val Gly Asn Cys Thr Met Asn Phe

1185 1190 1195 1200

Lys Asn Asn Asn Gly Asn Asn Ile Gly Leu Leu Gly Phe Lys Ala Asp

1205 1210 1215

Thr Val Val Ala Ser Thr Trp Tyr Tyr Thr His Met Arg Asp His Thr

1220 1225 1230

Asn Ser Asn Gly Cys Phe Trp Asn Phe Ile Ser Glu Glu His Gly Trp

1235 1240 1245

Gln Glu Lys

1250

<210> 11

<211> 3843

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<400> 11

atgccagttg taataaatag ttttaattat aatgaccctg ttaatgatga gacaatttta 60

tacatgcaga aaccatatga agaaagaagt agaaaatatt ataaagcttt tgagattatg 120

cctaatgttt ggataatgcc tgagagagat acaataggaa ctaagcctga tgagtttcag 180

gtgccggatt cattaaagaa cggaagtagt gcttattatg atcctaatta tttaaccact 240

gatgctgaaa aagatagata tttaaaaaca atgataaaat tatttaatag aattaatagt 300

aatcctacag ggaaagtttt gttagaagaa gtatcaaatg ctagaccata tttaggagat 360

gatgacacgc taattaatga attccttcca gttaatgtaa ctacaagtgt taatataaaa 420

ttttcaactg atgttgaaag ttcaataata tcgaatcttc ttgtattggg agcaggacct 480

gatatattta aagcttactg tacccccctt gtaaggttta ataagtcaga taaattaatt 540

gaaccaagta atcatggttt tggatcaatt aatatcttga cattttcacc tgagtatgaa 600

catattttta atgatattag tggagggaat cataatagta cagaatcatt tattgcagat 660

cctgcaattt cactagctca tgaattgata catgcactac atggattata cggggctaag 720

gcagttactc ataaagagtc tctagtagca gagcgaggac ctcttatgat agccgaaaag 780

cccataaggc tagaagaatt tttaactttt ggaggtgagg atttaaatat cattcctagt 840

gctatgaagg aaaaaatata taacgatctt ttagctaact atgaaaaaat agctactaga 900

cttagagaag ttaatacggc tcctcctgga tatgatatta atgaatataa agattatttt 960

caatggaagt atggactaga tagaaatgca gatggaagtt atactgtgaa tagaaataaa 1020

tttaatgaaa tttataaaaa attatatagc tttacagaga ttgacttagc aaataaattt 1080

aaagtaaaat gtagaaatac ttattttatt aaatatggat ttgtaaaagt tccaaatttg 1140

ttagatgatg atatttatac tgtatcagag gggtttaata taggtaattt agcagtaaac 1200

aatcgcggac aaaatataaa tttaaatcct aaaattattg attccattcc agataaaggt 1260

ttagtggaaa agattattaa attttgtaag agcattattc ctagaaaagg tacgaagcag 1320

tcaccgtcac tatgcattag agtaaataat agggagttat tttttgtagc ttcagaaagt 1380

agctataatg aaagtgatat taatacacct aaagaaattg acgatacaac aaatctaaat 1440

aataattata gaaataattt agatgaagtt attttagatt ataatagtga gacaatacct 1500

caaatatcaa atcgaacatt aaatacactt gtacaagaca atagttatgt gccaagatat 1560

gattctaatg gaacaagtga aatagaggaa tatgatgttg ttgactttaa tgtatttttc 1620

tatttacatg cacaaaaagt accagaaggt gaaaccaata taagtttaac ttcttcaatt 1680

gatacagcat tattagaaga atccaaagta tatacatttt tttcttcaga gtttatcgat 1740

actatcaata aacctgtaaa tgcagcacta tttatagatt ggataagcaa agtaataaga 1800

gattttacca ctgaagctac acaaaaaagt actgttgata agattgcaga catatcttta 1860

attgtaccct atgtaggtct tgctttgaat atagttattg aggcagaaaa aggaaatttt 1920

gaggaggcat ttgaattatt aggagcgggt attttattag aatttgtgcc agagcttaca 1980

attcctgtaa ttttagtgtt tacgataaaa tcctatatag attcatatga gaataaaaat 2040

aaagcaatta aagcaataaa taattcatta atcgaaagag aagcaaagtg gaaagaaata 2100

tatagttgga tagtatcaaa ttggcttact agaattaata cgcaatttaa taaaagaaaa 2160

gagcaaatgt atcaggcttt acaaaatcaa gtagatgcaa taaaaacagc aatagaatat 2220

aaatataata attatacttc agatgagaaa aatagacttg aatctaaata taatatcaat 2280

aatatagaag aagaattgaa taaaaaagtt tctttagcaa tgaaaaatat agaaagattt 2340

atgacagaaa gttctatatc ttatttaatg aaattaataa atgaagccga agttggtaaa 2400

ttaaaagaat atgataaaca tgttaagagc gatttattag actatattct ctaccataaa 2460

ttaatcttag gagagcagac aaaggaatta attgatttgg tgactagtac tttgaatagt 2520

agtattccat ttgaactttc ttcatatact aatgataaaa ttctaattat atattttaat 2580

agattatata aaaaaattaa agatagttct attttagata tgcgatatga aaataataaa 2640

tttatagata tctctggata tggttcaaat ataagcatta atggaaacgt atatatttat 2700

tcaacaaata gaaatcaatt tggaatatat agtggtaggc ttagtgaagt taatatagct 2760

caaaataatg atattatata caatagtaga tatcaaaatt ttagtattag tttctgggta 2820

accattccta aacactacag acctatgaat cgtaatcggg aatacactat aataaattgt 2880

atggggaata ataattcggg atggaaaata tcacttagaa ctattagaga ttgtgaaata 2940

atttggactt tacaagatac ttccggaaat aaggaaaaat taatttttag gtatgaagaa 3000

cttgctagta tatctgatta tataaataaa tggatttttg taactattac taataataga 3060

ttaggcaatt ctagaattta catcaatgga aatttaatag ttgaaaaatc aatttcgaat 3120

ttaggtgata ttcatgttag tgataatata ttatttaaaa ttgttggttg tgatgatgaa 3180

acgtatgttg gtataagata ttttaaagtt tttaatacgg aattagataa aacagaaatt 3240

gagactttat atagtaatga gccagatcca agtatcttaa aagactattg gggaaattat 3300

ttgctatata ataaaaaata ttatttattc aatttactaa gaaaagataa gtatattact 3360

cggaattcag gcattttaaa tattaatcaa caaagaggtg ttactggagg catatctgtt 3420

tttttgaact ataaattata tgaaggagta gaagttatta taagaaaaaa tgctcctata 3480

gatatatcta atacagataa ttttgttaga aaaaacgatc tagcatacat taatgtagta 3540

gatcatggtg tagaatatcg gttatatgct gatatatcaa ttacaaaatc agagaaaata 3600

ataaaattaa taagaacatc taatccaaac gatagcttag gtcaaattat agttatggat 3660

tcaataggaa ataattgcac aatgaatttt caaaacaatg atgggagcaa tataggatta 3720

ctaggttttc attcagatga tttggttgct agtagttggt attataacca tatacgaaga 3780

aacactagca gtaatggatg cttttggagt tttatttcta aagagcatgg ttggaaagaa 3840

taa 3843

<210> 12

<211> 1280

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<400> 12

Met Pro Val Val Ile Asn Ser Phe Asn Tyr Asn Asp Pro Val Asn Asp

1 5 10 15

Glu Thr Ile Leu Tyr Met Gln Lys Pro Tyr Glu Glu Arg Ser Arg Lys

20 25 30

Tyr Tyr Lys Ala Phe Glu Ile Met Pro Asn Val Trp Ile Met Pro Glu

35 40 45

Arg Asp Thr Ile Gly Thr Lys Pro Asp Glu Phe Gln Val Pro Asp Ser

50 55 60

Leu Lys Asn Gly Ser Ser Ala Tyr Tyr Asp Pro Asn Tyr Leu Thr Thr

65 70 75 80

Asp Ala Glu Lys Asp Arg Tyr Leu Lys Thr Met Ile Lys Leu Phe Asn

85 90 95

Arg Ile Asn Ser Asn Pro Thr Gly Lys Val Leu Leu Glu Glu Val Ser

100 105 110

Asn Ala Arg Pro Tyr Leu Gly Asp Asp Asp Thr Leu Ile Asn Glu Phe

115 120 125

Leu Pro Val Asn Val Thr Thr Ser Val Asn Ile Lys Phe Ser Thr Asp

130 135 140

Val Glu Ser Ser Ile Ile Ser Asn Leu Leu Val Leu Gly Ala Gly Pro

145 150 155 160

Asp Ile Phe Lys Ala Tyr Cys Thr Pro Leu Val Arg Phe Asn Lys Ser

165 170 175

Asp Lys Leu Ile Glu Pro Ser Asn His Gly Phe Gly Ser Ile Asn Ile

180 185 190

Leu Thr Phe Ser Pro Glu Tyr Glu His Ile Phe Asn Asp Ile Ser Gly

195 200 205

Gly Asn His Asn Ser Thr Glu Ser Phe Ile Ala Asp Pro Ala Ile Ser

210 215 220

Leu Ala His Glu Leu Ile His Ala Leu His Gly Leu Tyr Gly Ala Lys

225 230 235 240

Ala Val Thr His Lys Glu Ser Leu Val Ala Glu Arg Gly Pro Leu Met

245 250 255

Ile Ala Glu Lys Pro Ile Arg Leu Glu Glu Phe Leu Thr Phe Gly Gly

260 265 270

Glu Asp Leu Asn Ile Ile Pro Ser Ala Met Lys Glu Lys Ile Tyr Asn

275 280 285

Asp Leu Leu Ala Asn Tyr Glu Lys Ile Ala Thr Arg Leu Arg Glu Val

290 295 300

Asn Thr Ala Pro Pro Gly Tyr Asp Ile Asn Glu Tyr Lys Asp Tyr Phe

305 310 315 320

Gln Trp Lys Tyr Gly Leu Asp Arg Asn Ala Asp Gly Ser Tyr Thr Val

325 330 335

Asn Arg Asn Lys Phe Asn Glu Ile Tyr Lys Lys Leu Tyr Ser Phe Thr

340 345 350

Glu Ile Asp Leu Ala Asn Lys Phe Lys Val Lys Cys Arg Asn Thr Tyr

355 360 365

Phe Ile Lys Tyr Gly Phe Val Lys Val Pro Asn Leu Leu Asp Asp Asp

370 375 380

Ile Tyr Thr Val Ser Glu Gly Phe Asn Ile Gly Asn Leu Ala Val Asn

385 390 395 400

Asn Arg Gly Gln Asn Ile Asn Leu Asn Pro Lys Ile Ile Asp Ser Ile

405 410 415

Pro Asp Lys Gly Leu Val Glu Lys Ile Ile Lys Phe Cys Lys Ser Ile

420 425 430

Ile Pro Arg Lys Gly Thr Lys Gln Ser Pro Ser Leu Cys Ile Arg Val

435 440 445

Asn Asn Arg Glu Leu Phe Phe Val Ala Ser Glu Ser Ser Tyr Asn Glu

450 455 460

Ser Asp Ile Asn Thr Pro Lys Glu Ile Asp Asp Thr Thr Asn Leu Asn

465 470 475 480

Asn Asn Tyr Arg Asn Asn Leu Asp Glu Val Ile Leu Asp Tyr Asn Ser

485 490 495

Glu Thr Ile Pro Gln Ile Ser Asn Arg Thr Leu Asn Thr Leu Val Gln

500 505 510

Asp Asn Ser Tyr Val Pro Arg Tyr Asp Ser Asn Gly Thr Ser Glu Ile

515 520 525

Glu Glu Tyr Asp Val Val Asp Phe Asn Val Phe Phe Tyr Leu His Ala

530 535 540

Gln Lys Val Pro Glu Gly Glu Thr Asn Ile Ser Leu Thr Ser Ser Ile

545 550 555 560

Asp Thr Ala Leu Leu Glu Glu Ser Lys Val Tyr Thr Phe Phe Ser Ser

565 570 575

Glu Phe Ile Asp Thr Ile Asn Lys Pro Val Asn Ala Ala Leu Phe Ile

580 585 590

Asp Trp Ile Ser Lys Val Ile Arg Asp Phe Thr Thr Glu Ala Thr Gln

595 600 605

Lys Ser Thr Val Asp Lys Ile Ala Asp Ile Ser Leu Ile Val Pro Tyr

610 615 620

Val Gly Leu Ala Leu Asn Ile Val Ile Glu Ala Glu Lys Gly Asn Phe

625 630 635 640

Glu Glu Ala Phe Glu Leu Leu Gly Ala Gly Ile Leu Leu Glu Phe Val

645 650 655

Pro Glu Leu Thr Ile Pro Val Ile Leu Val Phe Thr Ile Lys Ser Tyr

660 665 670

Ile Asp Ser Tyr Glu Asn Lys Asn Lys Ala Ile Lys Ala Ile Asn Asn

675 680 685

Ser Leu Ile Glu Arg Glu Ala Lys Trp Lys Glu Ile Tyr Ser Trp Ile

690 695 700

Val Ser Asn Trp Leu Thr Arg Ile Asn Thr Gln Phe Asn Lys Arg Lys

705 710 715 720

Glu Gln Met Tyr Gln Ala Leu Gln Asn Gln Val Asp Ala Ile Lys Thr

725 730 735

Ala Ile Glu Tyr Lys Tyr Asn Asn Tyr Thr Ser Asp Glu Lys Asn Arg

740 745 750

Leu Glu Ser Lys Tyr Asn Ile Asn Asn Ile Glu Glu Glu Leu Asn Lys

755 760 765

Lys Val Ser Leu Ala Met Lys Asn Ile Glu Arg Phe Met Thr Glu Ser

770 775 780

Ser Ile Ser Tyr Leu Met Lys Leu Ile Asn Glu Ala Glu Val Gly Lys

785 790 795 800

Leu Lys Glu Tyr Asp Lys His Val Lys Ser Asp Leu Leu Asp Tyr Ile

805 810 815

Leu Tyr His Lys Leu Ile Leu Gly Glu Gln Thr Lys Glu Leu Ile Asp

820 825 830

Leu Val Thr Ser Thr Leu Asn Ser Ser Ile Pro Phe Glu Leu Ser Ser

835 840 845

Tyr Thr Asn Asp Lys Ile Leu Ile Ile Tyr Phe Asn Arg Leu Tyr Lys

850 855 860

Lys Ile Lys Asp Ser Ser Ile Leu Asp Met Arg Tyr Glu Asn Asn Lys

865 870 875 880

Phe Ile Asp Ile Ser Gly Tyr Gly Ser Asn Ile Ser Ile Asn Gly Asn

885 890 895

Val Tyr Ile Tyr Ser Thr Asn Arg Asn Gln Phe Gly Ile Tyr Ser Gly

900 905 910

Arg Leu Ser Glu Val Asn Ile Ala Gln Asn Asn Asp Ile Ile Tyr Asn

915 920 925

Ser Arg Tyr Gln Asn Phe Ser Ile Ser Phe Trp Val Thr Ile Pro Lys

930 935 940

His Tyr Arg Pro Met Asn Arg Asn Arg Glu Tyr Thr Ile Ile Asn Cys

945 950 955 960

Met Gly Asn Asn Asn Ser Gly Trp Lys Ile Ser Leu Arg Thr Ile Arg

965 970 975

Asp Cys Glu Ile Ile Trp Thr Leu Gln Asp Thr Ser Gly Asn Lys Glu

980 985 990

Lys Leu Ile Phe Arg Tyr Glu Glu Leu Ala Ser Ile Ser Asp Tyr Ile

995 1000 1005

Asn Lys Trp Ile Phe Val Thr Ile Thr Asn Asn Arg Leu Gly Asn Ser

1010 1015 1020

Arg Ile Tyr Ile Asn Gly Asn Leu Ile Val Glu Lys Ser Ile Ser Asn

1025 1030 1035 1040

Leu Gly Asp Ile His Val Ser Asp Asn Ile Leu Phe Lys Ile Val Gly

1045 1050 1055

Cys Asp Asp Glu Thr Tyr Val Gly Ile Arg Tyr Phe Lys Val Phe Asn

1060 1065 1070

Thr Glu Leu Asp Lys Thr Glu Ile Glu Thr Leu Tyr Ser Asn Glu Pro

1075 1080 1085

Asp Pro Ser Ile Leu Lys Asp Tyr Trp Gly Asn Tyr Leu Leu Tyr Asn

1090 1095 1100

Lys Lys Tyr Tyr Leu Phe Asn Leu Leu Arg Lys Asp Lys Tyr Ile Thr

1105 1110 1115 1120

Arg Asn Ser Gly Ile Leu Asn Ile Asn Gln Gln Arg Gly Val Thr Gly

1125 1130 1135

Gly Ile Ser Val Phe Leu Asn Tyr Lys Leu Tyr Glu Gly Val Glu Val

1140 1145 1150

Ile Ile Arg Lys Asn Ala Pro Ile Asp Ile Ser Asn Thr Asp Asn Phe

1155 1160 1165

Val Arg Lys Asn Asp Leu Ala Tyr Ile Asn Val Val Asp His Gly Val

1170 1175 1180

Glu Tyr Arg Leu Tyr Ala Asp Ile Ser Ile Thr Lys Ser Glu Lys Ile

1185 1190 1195 1200

Ile Lys Leu Ile Arg Thr Ser Asn Pro Asn Asp Ser Leu Gly Gln Ile

1205 1210 1215

Ile Val Met Asp Ser Ile Gly Asn Asn Cys Thr Met Asn Phe Gln Asn

1220 1225 1230

Asn Asp Gly Ser Asn Ile Gly Leu Leu Gly Phe His Ser Asp Asp Leu

1235 1240 1245

Val Ala Ser Ser Trp Tyr Tyr Asn His Ile Arg Arg Asn Thr Ser Ser

1250 1255 1260

Asn Gly Cys Phe Trp Ser Phe Ile Ser Lys Glu His Gly Trp Lys Glu

1265 1270 1275 1280

<210> 13

<211> 3894

<212> ДНК

<213> Clostridium botulinum

<220>

<223> n представляет собой a, c, g или t

<220>

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 13

atgccagtta atataaaaan ctttaattat aatgacccta ttaataatga tgacattatt 60

atgatggaac cattcaatga cccagggcca ggaacatatt ataaagcttt taggattata 120

gatcgtattt ggatagtacc agaaaggttt acttatggat ttcaacctga ccaatttaat 180

gccagtacag gagtttttag taaagatgtc tacgaatatt acgatccaac ttatttaaaa 240

accgatgctg aaaaagataa atttttaaaa acaatgatta aattatttaa tagaattaat 300

tcaaaaccat caggacagag attactggat atgatagtag atgctatacc ttatcttgga 360

aatgcatcta caccgcccga caaatttgca gcaaatgttg caaatgtatc tattaataaa 420

aaaattatcc aacctggagc tgaagatcaa ataaaaggtt taatgacaaa tttaataata 480

tttggaccag gaccagttct aagtgataat tttactgata gtatgattat gaatggccat 540

tccccaatat cagaaggatt tggtgcaaga atgatgataa gattttgtcc tagttgttta 600

aatgtattta ataatgttca ggaaaataaa gatacatcta tatttagtag acgcgcgtat 660

tttgcagatc cagctctaac gttaatgcat gaacttatac atgtgttaca tggattatat 720

ggaattaaga taagtaattt accaattact ccaaatacaa aagaattttt catgcaacat 780

agcgatcctg tacaagcaga agaactatat acattcggag gacatgatcc tagtgttata 840

agtccttcta cggatatgaa tatttataat aaagcgttac aaaattttca agatatagct 900

aataggctta atattgtttc aagtgcccaa gggagtggaa ttgatatttc cttatataaa 960

caaatatata aaaataaata tgattttgtt gaagatccta atggaaaata tagtgtagat 1020

aaggataagt ttgataaatt atataaggcc ttaatgtttg gctttactga aactaatcta 1080

gctggtgaat atggaataaa aactaggtat tcttatttta gtgaatattt gccaccgata 1140

aaaactgaaa aattgttaga caatacaatt tatactcaaa atgaaggctt taacatagct 1200

agtaaaaatc tcaaaacgga atttaatggt cagaataagg cggtaaataa agaggcttat 1260

gaagaaatca gcctagaaca tctcgttata tatagaatag caatgtgcaa gcctgtaatg 1320

tacaaaaata ccggtaaatc tgaacagtgt attattgtta ataatgagga tttatttttc 1380

atagctaata aagatagttt ttcaaaagat ttagctaaag cagaaactat agcatataat 1440

acacaaaata atactataga aaataatttt tctatagatc agttgatttt agataatgat 1500

ttaagcagtg gcatagactt accaaatgaa aacacagaac catttacaaa ttttgacgac 1560

atagatatcc ctgtgtatat taaacaatct gctttaaaaa aaatttttgt ggatggagat 1620

agcctttttg aatatttaca tgctcaaaca tttccttcta atatagaaaa tctacaacta 1680

acgaattcat taaatgatgc tttaagaaat aataataaag tctatacttt tttttctaca 1740

aaccttgttg aaaaagctaa tacagttgta ggtgcttcac tttttgtaaa ctgggtaaaa 1800

ggagtaatag atgattttac atctgaatcc acacaaaaaa gtactataga taaagtttca 1860

gatgtatcca taattattcc ctatatagga cctgctttga atgtaggaaa tgaaacagct 1920

aaagaaaatt ttaaaaatgc ttttgaaata ggtggagccg ctatcttaat ggagtttatt 1980

ccagaactta ttgtacctat agttggattt tttacattag aatcatatgt aggaaataaa 2040

gggcatatta ttatgacgat atccaatgct ttaaagaaaa gggatcaaaa atggacagat 2100

atgtatggtt tgatagtatc gcagtggctc tcaacggtta atactcaatt ttatacaata 2160

aaagaaagaa tgtacaatgc tttaaataat caatcacaag caatagaaaa aataatagaa 2220

gatcaatata atagatatag tgaagaagat aaaatgaata ttaacattga ttttaatgat 2280

atagatttta aacttaatca aagtataaat ttagcaataa acaatataga tgattttata 2340

aaccaatgtt ctatatcata tctaatgaat agaatgattc cattagctgt aaaaaagtta 2400

aaagactttg atgataatct taagagagat ttattggagt atatagatac aaatgaacta 2460

tatttacttg atgaagtaaa tattctaaaa tcaaaagtaa atagacacct aaaagacagt 2520

ataccatttg atctttcact atataccaag gacacaattt taatacaagt ttttaataat 2580

tatattagta atattagtag taatgctatt ttaagtttaa gttatagagg tgggcgttta 2640

atagattcat ctggatatgg tgcaactatg aatgtaggtt cagatgttat ctttaatgat 2700

ataggaaatg gtcaatttaa attaaataat tctgaaaata gtaatattac ggcacatcaa 2760

agtaaattcg ttgtatatga tagtatgttt gataatttta gcattaactt ttgggtaagg 2820

actcctaaat ataataataa tgatatacaa acttatcttc aaaatgagta tacaataatt 2880

agttgtataa aaaatgactc aggatggaaa gtatctatta agggaaatag aataatatgg 2940

acattaatag atgttaatgc aaaatctaaa tcaatatttt tcgaatatag tataaaagat 3000

aatatatcag attatataaa taaatggttt tccataacta ttactaatga tagattaggt 3060

aacgcaaata tttatataaa tggaagtttg aaaaaaagtg aaaaaatttt aaacttagat 3120

agaattaatt ctagtaatga tatagacttc aaattaatta attgtacaga tactactaaa 3180

tttgtttgga ttaaggattt taatattttt ggtagagaat taaatgctac agaagtatct 3240

tcactatatt ggattcaatc atctacaaat actttaaaag atttttgggg gaatccttta 3300

agatacgata cacaatacta tctgtttaat caaggtatgc aaaatatcta tataaagtat 3360

tttagtaaag cttctatggg ggaaactgca ccacgtacaa actttaataa tgcagcaata 3420

aattatcaaa atttatatct tggtttacga tttattataa aaaaagcatc aaattctcgg 3480

aatataaata atgataatat agtcagagaa ggagattata tatatcttaa tattgataat 3540

atttctgatg aatcttacag agtatatgtt ttggtgaatt ctaaagaaat tcaaactcaa 3600

ttatttttag cacccataaa tgatgatcct acgttctatg atgtactaca aataaaaaaa 3660

tattatgaaa aaacaacata taattgtcag atactttgcg aaaaagatac taaaacattt 3720

gggctgtttg gaattggtaa atttgttaaa gattatggat atgtttggga tacctatgat 3780

aattattttt gcataagtca gtggtatctc agaagaatat ctgaaaatat aaataaatta 3840

aggttgggat gtaattggca attcattccc gtggatgaag gatggacaga ataa 3894

<210> 14

<211> 1297

<212> Белок

<213> Clostridium botulinum

<220>

<223> Xaa может быть любой встречающейся в природе аминокислотой

<220>

<223> Xaa может быть любой встречающейся в природе аминокислотой

<400> 14

Met Pro Val Asn Ile Lys Xaa Phe Asn Tyr Asn Asp Pro Ile Asn Asn

1 5 10 15

Asp Asp Ile Ile Met Met Glu Pro Phe Asn Asp Pro Gly Pro Gly Thr

20 25 30

Tyr Tyr Lys Ala Phe Arg Ile Ile Asp Arg Ile Trp Ile Val Pro Glu

35 40 45

Arg Phe Thr Tyr Gly Phe Gln Pro Asp Gln Phe Asn Ala Ser Thr Gly

50 55 60

Val Phe Ser Lys Asp Val Tyr Glu Tyr Tyr Asp Pro Thr Tyr Leu Lys

65 70 75 80

Thr Asp Ala Glu Lys Asp Lys Phe Leu Lys Thr Met Ile Lys Leu Phe

85 90 95

Asn Arg Ile Asn Ser Lys Pro Ser Gly Gln Arg Leu Leu Asp Met Ile

100 105 110

Val Asp Ala Ile Pro Tyr Leu Gly Asn Ala Ser Thr Pro Pro Asp Lys

115 120 125

Phe Ala Ala Asn Val Ala Asn Val Ser Ile Asn Lys Lys Ile Ile Gln

130 135 140

Pro Gly Ala Glu Asp Gln Ile Lys Gly Leu Met Thr Asn Leu Ile Ile

145 150 155 160

Phe Gly Pro Gly Pro Val Leu Ser Asp Asn Phe Thr Asp Ser Met Ile

165 170 175

Met Asn Gly His Ser Pro Ile Ser Glu Gly Phe Gly Ala Arg Met Met

180 185 190

Ile Arg Phe Cys Pro Ser Cys Leu Asn Val Phe Asn Asn Val Gln Glu

195 200 205

Asn Lys Asp Thr Ser Ile Phe Ser Arg Arg Ala Tyr Phe Ala Asp Pro

210 215 220

Ala Leu Thr Leu Met His Glu Leu Ile His Val Leu His Gly Leu Tyr

225 230 235 240

Gly Ile Lys Ile Ser Asn Leu Pro Ile Thr Pro Asn Thr Lys Glu Phe

245 250 255

Phe Met Gln His Ser Asp Pro Val Gln Ala Glu Glu Leu Tyr Thr Phe

260 265 270

Gly Gly His Asp Pro Ser Val Ile Ser Pro Ser Thr Asp Met Asn Ile

275 280 285

Tyr Asn Lys Ala Leu Gln Asn Phe Gln Asp Ile Ala Asn Arg Leu Asn

290 295 300

Ile Val Ser Ser Ala Gln Gly Ser Gly Ile Asp Ile Ser Leu Tyr Lys

305 310 315 320

Gln Ile Tyr Lys Asn Lys Tyr Asp Phe Val Glu Asp Pro Asn Gly Lys

325 330 335

Tyr Ser Val Asp Lys Asp Lys Phe Asp Lys Leu Tyr Lys Ala Leu Met

340 345 350

Phe Gly Phe Thr Glu Thr Asn Leu Ala Gly Glu Tyr Gly Ile Lys Thr

355 360 365

Arg Tyr Ser Tyr Phe Ser Glu Tyr Leu Pro Pro Ile Lys Thr Glu Lys

370 375 380

Leu Leu Asp Asn Thr Ile Tyr Thr Gln Asn Glu Gly Phe Asn Ile Ala

385 390 395 400

Ser Lys Asn Leu Lys Thr Glu Phe Asn Gly Gln Asn Lys Ala Val Asn

405 410 415

Lys Glu Ala Tyr Glu Glu Ile Ser Leu Glu His Leu Val Ile Tyr Arg

420 425 430

Ile Ala Met Cys Lys Pro Val Met Tyr Lys Asn Thr Gly Lys Ser Glu

435 440 445

Gln Cys Ile Ile Val Asn Asn Glu Asp Leu Phe Phe Ile Ala Asn Lys

450 455 460

Asp Ser Phe Ser Lys Asp Leu Ala Lys Ala Glu Thr Ile Ala Tyr Asn

465 470 475 480

Thr Gln Asn Asn Thr Ile Glu Asn Asn Phe Ser Ile Asp Gln Leu Ile

485 490 495

Leu Asp Asn Asp Leu Ser Ser Gly Ile Asp Leu Pro Asn Glu Asn Thr

500 505 510

Glu Pro Phe Thr Asn Phe Asp Asp Ile Asp Ile Pro Val Tyr Ile Lys

515 520 525

Gln Ser Ala Leu Lys Lys Ile Phe Val Asp Gly Asp Ser Leu Phe Glu

530 535 540

Tyr Leu His Ala Gln Thr Phe Pro Ser Asn Ile Glu Asn Leu Gln Leu

545 550 555 560

Thr Asn Ser Leu Asn Asp Ala Leu Arg Asn Asn Asn Lys Val Tyr Thr

565 570 575

Phe Phe Ser Thr Asn Leu Val Glu Lys Ala Asn Thr Val Val Gly Ala

580 585 590

Ser Leu Phe Val Asn Trp Val Lys Gly Val Ile Asp Asp Phe Thr Ser

595 600 605

Glu Ser Thr Gln Lys Ser Thr Ile Asp Lys Val Ser Asp Val Ser Ile

610 615 620

Ile Ile Pro Tyr Ile Gly Pro Ala Leu Asn Val Gly Asn Glu Thr Ala

625 630 635 640

Lys Glu Asn Phe Lys Asn Ala Phe Glu Ile Gly Gly Ala Ala Ile Leu

645 650 655

Met Glu Phe Ile Pro Glu Leu Ile Val Pro Ile Val Gly Phe Phe Thr

660 665 670

Leu Glu Ser Tyr Val Gly Asn Lys Gly His Ile Ile Met Thr Ile Ser

675 680 685

Asn Ala Leu Lys Lys Arg Asp Gln Lys Trp Thr Asp Met Tyr Gly Leu

690 695 700

Ile Val Ser Gln Trp Leu Ser Thr Val Asn Thr Gln Phe Tyr Thr Ile

705 710 715 720

Lys Glu Arg Met Tyr Asn Ala Leu Asn Asn Gln Ser Gln Ala Ile Glu

725 730 735

Lys Ile Ile Glu Asp Gln Tyr Asn Arg Tyr Ser Glu Glu Asp Lys Met

740 745 750

Asn Ile Asn Ile Asp Phe Asn Asp Ile Asp Phe Lys Leu Asn Gln Ser

755 760 765

Ile Asn Leu Ala Ile Asn Asn Ile Asp Asp Phe Ile Asn Gln Cys Ser

770 775 780

Ile Ser Tyr Leu Met Asn Arg Met Ile Pro Leu Ala Val Lys Lys Leu

785 790 795 800

Lys Asp Phe Asp Asp Asn Leu Lys Arg Asp Leu Leu Glu Tyr Ile Asp

805 810 815

Thr Asn Glu Leu Tyr Leu Leu Asp Glu Val Asn Ile Leu Lys Ser Lys

820 825 830

Val Asn Arg His Leu Lys Asp Ser Ile Pro Phe Asp Leu Ser Leu Tyr

835 840 845

Thr Lys Asp Thr Ile Leu Ile Gln Val Phe Asn Asn Tyr Ile Ser Asn

850 855 860

Ile Ser Ser Asn Ala Ile Leu Ser Leu Ser Tyr Arg Gly Gly Arg Leu

865 870 875 880

Ile Asp Ser Ser Gly Tyr Gly Ala Thr Met Asn Val Gly Ser Asp Val

885 890 895

Ile Phe Asn Asp Ile Gly Asn Gly Gln Phe Lys Leu Asn Asn Ser Glu

900 905 910

Asn Ser Asn Ile Thr Ala His Gln Ser Lys Phe Val Val Tyr Asp Ser

915 920 925

Met Phe Asp Asn Phe Ser Ile Asn Phe Trp Val Arg Thr Pro Lys Tyr

930 935 940

Asn Asn Asn Asp Ile Gln Thr Tyr Leu Gln Asn Glu Tyr Thr Ile Ile

945 950 955 960

Ser Cys Ile Lys Asn Asp Ser Gly Trp Lys Val Ser Ile Lys Gly Asn

965 970 975

Arg Ile Ile Trp Thr Leu Ile Asp Val Asn Ala Lys Ser Lys Ser Ile

980 985 990

Phe Phe Glu Tyr Ser Ile Lys Asp Asn Ile Ser Asp Tyr Ile Asn Lys

995 1000 1005

Trp Phe Ser Ile Thr Ile Thr Asn Asp Arg Leu Gly Asn Ala Asn Ile

1010 1015 1020

Tyr Ile Asn Gly Ser Leu Lys Lys Ser Glu Lys Ile Leu Asn Leu Asp

1025 1030 1035 1040

Arg Ile Asn Ser Ser Asn Asp Ile Asp Phe Lys Leu Ile Asn Cys Thr

1045 1050 1055

Asp Thr Thr Lys Phe Val Trp Ile Lys Asp Phe Asn Ile Phe Gly Arg

1060 1065 1070

Glu Leu Asn Ala Thr Glu Val Ser Ser Leu Tyr Trp Ile Gln Ser Ser

1075 1080 1085

Thr Asn Thr Leu Lys Asp Phe Trp Gly Asn Pro Leu Arg Tyr Asp Thr

1090 1095 1100

Gln Tyr Tyr Leu Phe Asn Gln Gly Met Gln Asn Ile Tyr Ile Lys Tyr

1105 1110 1115 1120

Phe Ser Lys Ala Ser Met Gly Glu Thr Ala Pro Arg Thr Asn Phe Asn

1125 1130 1135

Asn Ala Ala Ile Asn Tyr Gln Asn Leu Tyr Leu Gly Leu Arg Phe Ile

1140 1145 1150

Ile Lys Lys Ala Ser Asn Ser Arg Asn Ile Asn Asn Asp Asn Ile Val

1155 1160 1165

Arg Glu Gly Asp Tyr Ile Tyr Leu Asn Ile Asp Asn Ile Ser Asp Glu

1170 1175 1180

Ser Tyr Arg Val Tyr Val Leu Val Asn Ser Lys Glu Ile Gln Thr Gln

1185 1190 1195 1200

Leu Phe Leu Ala Pro Ile Asn Asp Asp Pro Thr Phe Tyr Asp Val Leu

1205 1210 1215

Gln Ile Lys Lys Tyr Tyr Glu Lys Thr Thr Tyr Asn Cys Gln Ile Leu

1220 1225 1230

Cys Glu Lys Asp Thr Lys Thr Phe Gly Leu Phe Gly Ile Gly Lys Phe

1235 1240 1245

Val Lys Asp Tyr Gly Tyr Val Trp Asp Thr Tyr Asp Asn Tyr Phe Cys

1250 1255 1260

Ile Ser Gln Trp Tyr Leu Arg Arg Ile Ser Glu Asn Ile Asn Lys Leu

1265 1270 1275 1280

Arg Leu Gly Cys Asn Trp Gln Phe Ile Pro Val Asp Glu Gly Trp Thr

1285 1290 1295

Glu

<---

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для лечения тремора верхней конечности. Пациенту вводят ботулинический нейротоксин в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, выбранных из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ), M. supinator в дозировке от 2,5 Ед. ±10% до 5 Ед. ±10%, M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU), M. pronator teres (PT) в дозировке от 5 Ед. ±10% до 15 Ед. ±10%, 2 мышцы локтя M. Brachialis и M. triceps brachii в дозировке 20 Ед. ±10% и 4 мышцы плеча M. latissimus dorsi, M. pectoralis major, M. supraspinatus и M. infraspinatus в дозировке 15 Ед. ±10% на каждую мышцу. Способ обеспечивает лечение тремора верхней конечности за счет введения ботулинического нейротоксина в мышцы каждого из предплечья/запястья, локтя и плеча. 13 з.п. ф-лы, 4 табл., 1 пр.

1. Способ лечения тремора верхней конечности, включающий введение ботулинического нейротоксина в мышцы каждого из предплечья/запястья, локтя и плеча, причем ботулинический нейротоксин вводят в 4, 5, 6 или 7 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в дозировке в соответствии со схемой:

M. extensor carpi ulnaris (ECU) от 2,5 Ед. ±10% до 5 Ед. ±10% M. extensor carpi radialis (ECR) от 2,5 Ед. ±10% до 5 Ед. ±10% M. flexor carpi radialis (FCR) от 5 Ед. ±10% до 15 Ед. ±10% M. flexor carpi ulnaris (FCU) от 5 Ед. ±10% до 15 Ед. ±10% M. pronator teres (PT) от 5 Ед. ±10% до 15 Ед. ±10% M. pronator quadratus (PQ) от 2,5 Ед. ±10% до 5 Ед. ±10% M. supinator от 2,5 Ед. ±10% до 5 Ед. ±10% M. brachialis 20 Ед. ±10% M. triceps brachii 20 Ед. ±10% M. latissimus dorsi 15 Ед. ±10% M. pectoralis major 15 Ед. ±10% M. supraspinatus 15 Ед. ±10% M. infraspinatus 15 Ед. ±10%

2. Способ по п. 1, где ботулинический нейротоксин вводят по меньшей мере в одну мышцу предплечья/запястья, выбранную из группы M. extensor carpi ulnaris (ECU), M. extensor carpi radialis (ECR), M. pronator quadratus (PQ) и M. supinator, в дозировке 2,5 Ед ±10%.

3. Способ по п. 2, где ботулинический нейротоксин вводят дополнительно по меньшей мере в одну мышцу запястья/предплечья, выбранную из группы M. flexor carpi radialis (FCR), M. flexor carpi ulnaris (FCU) и M. pronator teres (PT), в дозировке 10 Ед. ±10% на мышцу.

4. Способ по любому из пп. 1-3, где ботулинический нейротоксин не вводят в M. externsor digitorium communis.

5. Способ по любому из пп. 1-4, где общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимая в мышцы предплечья/запястья, не превышает 65 Ед.

6. Способ по любому из пп. 1-5, где ботулинический нейротоксин не вводят в M. biceps brachii.

7. Способ по любому из пп. 1-6, где общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимая в мышцы локтя, не превышает 40 Ед.

8. Способ по любому из пп. 1-7, где ботулинический нейротоксин не вводят в дельтовидную мышцу и большую круглую мышцу.

9. Способ по любому из пп. 1-8, где общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимая в мышцы плеча, не превышает 60 Ед.

10. Способ по любому из пп. 1-9, где общая дозировка ботулинического нейротоксина, вводимая в мышцы предплечья/запястья, локтя и плеча, не превышает 165 Ед.

11. Способ по п. 1, где ботулинический нейротоксин вводят в 7 мышц предплечья/запястья, 2 мышцы локтя и 4 мышцы плеча в дозировке в соответствии со схемой:

M. extensor carpi ulnaris (ECU) 2,5 Ед. ±10% M. extensor carpi radialis (ECR) 2,5 Ед. ±10% M. flexor carpi radialis (FCR) 10 Ед. ±10% M. flexor carpi ulnaris (FCU) 10 Ед. ±10% M. pronator teres (PT) 10 Ед. ±10% M. pronator quadratus (PQ) 2,5 Ед. ±10% M. supinator 2,5 Ед. ±10% M. brachialis 20 Ед. ±10% M. triceps brachii 20 Ед. ±10% M. latissimus dorsi 15 Ед. ±10% M. pectoralis major 15 Ед. ±10% M. supraspinatus 15 Ед. ±10% M. infraspinatus 15 Ед. ±10%

12. Способ по любому из пп. 1-11, где указанный ботулинический нейротоксин представляет собой нейротоксичный компонент комплекса ботулинического нейротоксина, причем указанный нейротоксичный компонент не содержит какой-либо другой белковый компонент комплекса ботулинического нейротоксина рода Clostridium.

13. Способ по любому из пп. 1-12, где указанный ботулинический нейротоксин выбран из группы серотипов, состоящей из A, В и E.

14. Способ по любому из пп. 1-13, где ботулинический нейротоксин вводят вместе с применением по меньшей мере одного лечения, выбранного из другого противоэпилептического препарата или блокатора кальциевых каналов, пропранолола, пиримидона, глубокой стимуляции головного мозга (DBS), высокочастотного ультразвука под контролем магнитного резонанса (MRgHiFUS), местной электростимуляции, биологической обратной связи, стимуляции под контролем кинематической оценки, противотреморного оборудования, противотреморного приложения для смартфона или их комбинации.