Способ получения модифицированного капсида аденоассоциированного вируса Российский патент 2024 года по МПК C12N15/864 

Описание патента на изобретение RU2831732C1

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящая заявка относится к области генной терапии и молекулярной биологии. Более конкретно, настоящее изобретение относится к способу получения модифицированного капсида аденоассоциированного вируса (AAV) и модифицированному капсиду AAV, полученному данным способом, а также к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей данный модифицированный капсид, и вектору на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса для доставки субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который включает данный модифицированный капсид.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Аденоассоциированный вирус (AAV) представляет собой небольшой (25 нм), неспособный к самостоятельной репликации, безоболочечный вирус. У человека и приматов описано множество различных серотипов AAV. Геном аденоассоциированного вируса содержит (+ или -) одноцепочечную ДНК (ssDNA) длиной около 4,7 тысяч нуклеотидов. На концах молекулы геномной ДНК располагаются инвертированные концевые повторы (англ. inverted terminal repeats, ITRs). Геном содержит две открытые рамки считывания (англ. ORF): Rep и Сар, содержащие в себе несколько альтернативных рамок считывания, кодирующих различные белковые продукты. Продукты Rep имеют важное значение для репликации AAV, при этом ген Сар, помимо других альтернативных продуктов, кодирует 3 капсидных белка (VP1, VP2 и VP3). Белки VP1, VP2 и VP3 находятся в соотношении 1:1:10, образуя икосаэдрический капсид (Xie Q. et al. The atomic structure of adeno-associated virus (AAV-2), a vector for human gene therapy. Proc Natl Acad Sci USA, 2002; 99:10405-10410). При образовании рекомбинантного вектора AAV (rAAV) кассета экспрессии, фланкированная ITR, упаковывается в капсид AAV. Гены, необходимые для репликации AAV, не входят в кассету. Рекомбинантный AAV считается самым безопасным и одним из наиболее широко используемых вирусных векторов для переноса генов in vivo. Векторы могут инфицировать клетки множества типов тканей, обеспечивая эффективную и устойчивую экспрессию трансгена. Они также являются непатогенными и имеют низкий профиль иммуногенности (High KA et al., «rAAV human trial experiences Methods Mol Biol. 2011; 807:429-57).

Одной из насущных целей исследований в области разработки эффективной генотерапии является оптимизация векторов для улучшения тех или иных свойств данных векторов.

Известно, что различные серотипы AAV характеризуются сродством к различным рецепторам на поверхности клеток-хозяев, к которым они обладают тропизмом. Так основным известным рецептором для AAV2 является гепарансульфат-протеогликан, корецепторами выступают интегриновый гетеродимер aVβ5, рецептор фактора роста фибробластов первого типа и рецептор фактора роста гепатоцитов, с-Met. AAV12 связывается с гепарансульфат-протеогликанами и сиаловой кислотой. AAV4 и AAV5 связываются с N- и О-связанными сиаловыми кислотами соответственно. AAV5 задействует рецептор фактора роста тромбоцитов. При этом установлена связь между аминокислотной последовательностью белков капсида AAV с процессом его сборки, инкапсидирования генома и сродством к различным типам рецепторов, репрезентированных на поверхности клеток-хозяев (Govindasamy L. et. al. Structural insights into adeno-associated virus serotype 5. J Virol. 2013 Oct; 87(20):11187-99).

В международной заявке WO 2012145601 описаны вирионы аденоассоциированного вируса (AAV) с вариантным капсидным белком, где вирионы AAV демонстрируют большую инфекционность ретинальных клеток, когда вводятся интравитреальной инъекцией, по сравнению с AAV дикого типа.

В международной заявке WO 2013158879 описан вектор на основе аденоассоциированного вируса (AAV) для доставки субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей капсидный белок VP1, который содержит одну или несколько замен лизина, где одна замена лизина представляет K137R, где упомянутая замена лизина является эффективной для ингибирования убиквитинилирования упомянутого капсидного белка, и тем самым увеличивается трансдукция упомянутого вектора AAV в клетке-мишени.

На данный момент существует потребность в AAV с улучшенными свойствами по сравнению с AAV дикого типа, например, которые обладают увеличенной трансдуцирующей способностью, большей специфичной способностью трансдуцировать клетки целевых органов и тканей, увеличенной емкостью капсида, увеличенной эффективностью упаковки вирусных геномов AAV, а также увеличенной эффективностью наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Авторами изобретения было установлено, что способ получения модифицированного капсида аденоассоциированного вируса (AAV) по изобретению позволяет неожиданно получить модифицированный капсид AAV, который обладает одним или несколькими улучшенными свойствами по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций (дикого типа), которые выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

Краткое описание изобретения

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу получения модифицированного капсида AAV, который включает:

а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона, как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены,

где под капсидом-шаблоном понимают схожий по строению капсид вируса, выбранного из семейства парвовирусов (Parvoviridae), который не является AAV;

в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

г) выбор позиций для мутагенеза, при этом аминокислотные остатки для мутагенеза находятся в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV и имеют структурное различие между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

д) выбор аминокислотного остатка для мутагенеза в позиции, выбранной на стадии г), с использованием одного из следующих принципов:

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет больший объем, за исключением цистеина и метионина;

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет увеличенное или уменьшенное число полярных контактов между капсомерами, за исключением цистеина и метионина;

е) введение одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных на стадиях г)-д), в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV.

В некоторых вариантах осуществления изобретения способ получения модифицированного капсида AAV дополнительно включает проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV с одной или несколькими аминокислотными заменами на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

В некоторых вариантах осуществления изобретения способ получения модифицированного капсида AAV дополнительно включает проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций и отбор модифицированных капсидов AAV, которые имеют одно или несколько улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей: AAV человека, AAV обезьян или AAV птиц.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей следующие серотипы AAV: AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 или AAV16.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV схожий по строению капсид-шаблон, выбирают из группы, которая включает: парвовирус В19, человеческий бокавирус 1 (HBoV1), парвовирус крупного рогатого скота (BVP).

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к модифицированному капсиду AAV для получения вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса, который получен способом, включающим:

а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона, как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены,

где под капсидом-шаблоном понимают схожий по строению капсид вируса, выбранного из семейства парвовирусов (Parvoviridae), который не является AAV;

в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

г) выбор позиций для мутагенеза, при этом аминокислотные остатки для мутагенеза находятся в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV и имеют структурное различие между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

д) выбор аминокислотного остатка для мутагенеза в позиции, выбранной на стадии г), с использованием одного из следующих принципов:

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет больший объем, за исключением цистеина и метионина;

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет увеличенное или уменьшенное число полярных контактов между капсомерами, за исключением цистеина и метионина;

е) введение одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных на стадиях г)-д), в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV;

а также, при необходимости, дополнительно включает

ж) проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций и отбор модифицированных капсидов AAV, которые имеют одно или несколько улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей: AAV человека, AAV обезьян или AAV птиц.

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей следующие серотипы AAV: AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 или AAV16.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к модифицированному капсиду AAV для получения вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса, который включает модифицированный белок VP1 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 14, 20, 26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает:

а) модифицированный белок VP1 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 14, 20, 26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368;

б) соответствующий своему белку VP1 модифицированный белок VP2 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 16, 22, 28, 34, 40, 46, 52, 58, 64, 70, 76, 82, 88, 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184, 190, 196, 202, 208, 214, 220, 226, 232, 238, 244, 250, 256, 262, 268, 274, 280, 286, 292, 298, 304, 310, 316, 322, 328, 334, 340, 346, 352, 358, 364 или 370;

в) соответствующий своему белку VP1 модифицированный белок VP3 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 198, 204, 210, 216, 222, 228, 234, 240, 246, 252, 258, 264, 270, 276, 282, 288, 294, 300, 306, 312, 318, 324, 330, 336, 342, 348, 354, 360, 366 или 372.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, которая кодирует любой из вышеуказанных модифицированных капсидов.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к вектору на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса для доставки субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который включает:

1) любой из вышеуказанных модифицированных капсидов, и

2) гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую регуляторные последовательности, которые обеспечивают экспрессию продукта, кодируемого гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, в целевых клетках.

В некоторых вариантах осуществления изобретения вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса имеет продукт экспрессии гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который представляет собой терапевтический полипептид или репортерный полипептид.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1 представляет собой кольцевую схему плазмиды pAAV-linker, которая предназначена для клонирования библиотек случайных вариантов гена капсида AAV.

GFP - последовательность, кодирующая зеленый флуоресцентный белок,

PolyA - сигнал полиаденилирования,

ITR - инвертированный концевой повтор аденоассоциированного вируса,

Т2А - последовательность, кодирующая пептид способный к самовырезанию из полипептидной цепи получен от вируса thosea asigna,

HBG intron - интрон бета-глобина человека,

CMVpromoter - промотор цитомегаловируса человека,

AmpR - последовательность гена бета-лактамазы обеспечивающая устойчивость E. coli к ампициллину,

pUC origin - высококопийный ориджин репликации бактерий,

EcoRI - сайт узнавания эндонуклеазой рестрикции EcoRI,

AscI - сайт узнавания эндонуклеазой рестрикции AscI.

Фиг. 2 представляет собой кольцевую схему плазмиды pAAV-Rep, которая предназначена для наработки рекомбинантных вирусных препаратов дикого типа AAV из библиотеки случайных вариантов.

AmpR - последовательность гена бета-лактамазы обеспечивающая устойчивость Е.coli к ампициллину,

pUC origin - высококопийный ориджин репликации бактерий,

AAV Rep genes - последовательность, кодирующая белки Rep, необходимые для жизненного цикла вируса,

SwaI - сайт узнавания эндонуклеазой рестрикции SwaI,

NotI - сайт узнавания эндонуклеазой рестрикции NotI.

Фиг. 3 представляет собой кольцевую схему плазмиды pHelper, которая предназначена для наработки рекомбинантных вирусных препаратов дикого типа AAV из библиотеки случайных вариантов.

AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину,

Ori - ориджин репликации в бактериях,

Adeno Е2А - последовательность гена хелперного аденовируса, участвующая в репликации вирусной ДНК,

Adeno Е4 - последовательность гена хелперного аденовируса, участвующая в репликации вирусной ДНК,

Adeno VARNA - последовательность гена хелперного аденовируса, отвечающая за стимуляцию трансляции как ранних, так и поздних вирусных генов.

Фиг. 4 представляет собой кольцевую схему плазмиды pAAV-RC5, которая предназначена для наработки рекомбинантных вирусных препаратов AAV 5 серотипа.

AmpR - последовательность гена бета-лактамазы обеспечивающая устойчивость E. coli к ампициллину,

pUC origin - высококопийный ориджин репликации прокариот,

AAV Rep genes - последовательность, кодирующая белки Rep, необходимые для жизненного цикла аденоассоциированного вируса,

AAV5 Cap genes -последовательность, кодирующая перекрывающиеся нуклеотидные последовательности белков капсида аденоассоциированного вируса пятого серотипа: VP1, VP2 и VP3.

Фиг. 5 представляет собой кольцевую схему плазмиды pAAV-RC9, которая предназначена для наработки рекомбинантных вирусных препаратов AAV 9 серотипа.

AmpR - последовательность гена бета-лактамазы обеспечивающая устойчивость E. coli к ампициллину,

pUC origin - высококопийный ориджин репликации прокариот,

AAV Rep genes - последовательность, кодирующая белки Rep, необходимые для жизненного цикла аденоассоциированного вируса,

AAV9 Cap genes - последовательность, кодирующая перекрывающиеся нуклеотидные последовательности белков капсида аденоассоциированного вируса девятого серотипа: VP1, VP2 и VP3.

Фиг. 6 представляет собой график, который показывает эффективность наработки векторов на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5).

Vg/ml кж обозначает количество вирусных геномов на миллилитр культуральной жидкости.

AAV5-NullMut-GFP обозначает вектор на основе rAAV5 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV5-01Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A и T711S.

AAV5-02Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, G226A и T711S.

AAV5-03Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, D286E и T711S.

AAV5-04Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, L341Y и T7HS.

AAV5-05Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, C387V и T711S.

AAV5-06Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Q421H и T711S.

AAV5-07Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Р466Т и T711S.

AAV5-08Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S594Q и T711S.

AAV5-09Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, T614L и T711S.

AAV5-10Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, N679K и T711S.

AAV5-llMut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, P723V и T711S.

AAV5-12Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP 1 капсида AAV5 с мутациями S2A, V431Y и T711S.

AAV5-13Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, A616D и T711S.

AAV5-14Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, W683R и T711S.

AAV5-15Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S222A и T711S.

AAV5-16Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, R285L и T711S.

AAV5-17Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Q340A и T711S.

AAV5-18Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S420F и T711S.

AAV5-19Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S680A и T711S.

AAV5-20Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, T721V и T711S.

Фиг. 7 представляет собой график, который показывает эффективность наработки векторов на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5).

Vg/ml кж обозначает количество вирусных геномов на миллилитр культуральной жидкости.

AAV5-NullMut-GFP обозначает вектор на основе rAAV5 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV5-01Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A и T711S.

AAV5-21Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией G226A.

AAV5-22Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией D286E.

AAV5-23Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией L341Y.

AAV5-24Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией C387V.

AAV5-25Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Q421H.

AAV5-26Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Р466Т.

AAV5-27Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S594Q.

AAV5-28Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией T614L.

AAV5-29Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией N679K.

AAV5-30Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией P723V.

AAV5-31Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией V431Y.

AAV5-32Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией A616D.

AAV5-33Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией W683R.

AAV5-34Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S222A.

AAV5-35Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией R285L.

AAV5-36Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Q340A.

AAV5-37Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S420F.

AAV5-38Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S680A.

AAV5-39Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией T721V.

Фиг. 8 представляет собой график, который показывает эффективность наработки векторов на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9).

Vg/ml кж обозначает количество вирусных геномов на миллилитр культуральной жидкости.

AAV9-NullMut-GFP обозначает вектор на основе rAAV9 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV9-01Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией S232T.

AAV9-02Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией D297E.

AAV9-03Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351K.

AAV9-04Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351R.

AAV9-05Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией C396V.

AAV9-06Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией D433Y.

AAV9-07Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией L444R.

AAV9-08Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Y478F.

AAV9-09Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией G604N.

AAV9-10Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией G627K.

AAV9-llMut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T625L

AAV9-12Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T625V.

AAV9-13Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией S692T.

AAV9-14Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T733V.

AAV9-15Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией A427R.

AAV9-16Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией M635D.

AAV9-17Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией W695R.

AAV9-18Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией R296L.

AAV9-19Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351A.

AAV9-20Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Y395F.

AAV9-21Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией R434L.

AAV9-22Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией N691 А.

Фиг. 9 представляет собой график, который показывает эффективность трансдукции клеток препаратами на основе rAAV5, содержащими точечные мутации в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S.

AAV5-NullMut-GFP обозначает вектор на основе rAAV5 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV5-01Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A и T711S.

AAV5-02Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, G226A и T711S.

AAV5-03Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, D286E и T711S.

AAV5-04Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, L341Y и T711S.

AAV5-05Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, C387V и T711S.

AAV5-06Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Q421H и T711S.

AAV5-07Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Р466Т и T711S.

AAV5-08Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S594Q и T711S.

AAV5-09Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, T614L и T711S.

AAV5-10Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, N679K и T711S.

AAV5-llMut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, P723V и T711S.

AAV5-12Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, V431Y и T711S.

AAV5-13Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, A616D и T711S.

AAV5-14Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, W683R и T711S.

AAV5-15Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S222A и T711S.

AAV5-16Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, R285L и T711S.

AAV5-17Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Q340A и T711S.

AAV5-18Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S420F и T711S.

AAV5-19Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S680A и T711S.

AAV5-20Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, T721V и T711S.

Фиг. 10 представляет собой график, который показывает эффективность трансдукции клеток препаратами на основе rAAV5, содержащими точечные мутации в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа.

AAV5-NullMut-GFP обозначает вектор на основе rAAV5 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV5-01Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A и T711S.

AAV5-21Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией G226A.

AAV5-22Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией D286E.

AAV5-23Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией L341Y.

AAV5-24Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией C387V.

AAV5-25Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Q421H.

AAV5-26Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP 1 капсида AAV5 с мутацией Р466Т.

AAV5-27Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S594Q.

AAV5-28Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VPt капсида AAV5 с мутацией T614L.

AAV5-29Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией N679K.

AAV5-30Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией P723V.

AAV5-31Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией V431Y.

AAV5-32Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией A616D.

AAV5-33Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией W683R.

AAV5-34Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S222A.

AAV5-35Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией R285L.

AAV5-36Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP 1 капсида AAV5 с мутацией Q340A.

AAV5-37Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S420F.

AAV5-38Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S680A.

AAV5-39Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией T721V.

Фиг. 11 представляет собой график, который показывает эффективность трансдукции клеток препаратами на основе rAAV9, содержащими точечные мутации в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа.

AAV9-NullMut-GFP обозначает вектор на основе rAAV9 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV9-01Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией S232T.

AAV9-02Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией D297E.

AAV9-03Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351K.

AAV9-04Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351R.

AAV9-05Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией C396V.

AAV9-06Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией D433Y.

AAV9-07Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP 1 капсида AAV9 с мутацией L444R.

AAV9-08Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Y478F.

AAV9-09Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией G604N.

AAV9-10Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP 1 капсида AAV9 с мутацией G627K.

AAV9-llMut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T625L.

AAV9-12Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T625V.

AAV9-13Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией S692T.

AAV9-14Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T733V.

AAV9-15Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией A427R.

AAV9-16Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией M635D.

AAV9-17Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией W695R.

AAV9-18Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией R296L.

AAV9-19Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351A.

AAV9-20Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Y395F.

AAV9-21Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией R434L.

AAV9-22Mut-GFP обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией N691 А.

Фиг. 12 представляет собой график, который показывает эффективность продукции целевого белка, кодируемого трансгеном, после трансдукции клеток препаратами на основе rAAV5, содержащими единичные мутации в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S.

AAV5-NullMut-FIX обозначает вектор на основе rAAV5 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV5-01Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A и T711S.

AAV5-02Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, G226A и T711S.

AAV5-03Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, D286E и T711S.

AAV5-04Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, L341Y и T711S.

AAV5-05Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, C387V и T711S.

AAV5-06Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Q421H и T711S.

AAV5-07Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Р466Т и T711S.

AAV5-08Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S594Q и T711S.

AAV5-09Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP 1 капсида AAV5 с мутациями S2A, T614L и T711S.

AAV5-10Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, N679K и T711S.

AAV5-llMut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, P723V и T711S.

AAV5-12Mut-FFX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, V431Y и T711S.

AAV5-13Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, A616D и T711S.

AAV5-14Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, W683R и T711S.

AAV5-15Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S222A и T711S.

AAV5-16Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, R285L и T711S.

AAV5-17Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, Q340A и T711S.

AAV5-18Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S420F и T711S

AAV5-19Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, S680A и T711S.

AAV5-20Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A, T721V и T711S.

Фиг. 13 представляет собой график, который показывает эффективность продукции целевого белка, кодируемого трансгеном, после трансдукции клеток препаратами на основе rAAV5, содержащими единичные мутации в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа.

AAV5-NullMut-FIX обозначает вектор на основе rAAV5 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV5-01Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутациями S2A и T711S.

AAV5-21Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией G226A.

AAV5-22Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией D286E.

AAV5-23Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией L341Y.

AAV5-24Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией C387V.

AAV5-25Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Q421H.

AAV5-26Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Р466Т.

AAV5-27Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S594Q.

AAV5-28Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией T614L.

AAV5-29Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией N679K.

AAV5-30Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией P723V.

AAV5-31Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией V431Y.

AAV5-32Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией A616D.

AAV5-33Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией W683R.

AAV5-34Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S222A.

AAV5-35Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией R285L.

AAV5-36Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией Q340A.

AAV5-37Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S420F.

AAV5-38Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией S680A.

AAV5-39Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV5 с мутацией T721V.

Фиг. 14 представляет собой график, который показывает эффективность продукции целевого белка, кодируемого трансгеном, после трансдукции клеток препаратами на основе rAAV9, содержащими мутации в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа.

AAV9-NullMut-FIX обозначает вектор на основе rAAV9 с белком VP1 капсида дикого типа.

AAV9-01Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией S232T.

AAV9-02Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией D297E.

AAV9-03Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351K.

AAV9-04Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351R.

AAV9-05Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией C396V.

AAV9-06Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией D433Y.

AAV9-07Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией L444R.

AAV9-08Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Y478F.

AAV9-09Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией G604N.

AAV9-10Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией G627K.

AAV9-llMut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T625L.

AAV9-12Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T625V.

AAV9-13Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией S692T.

AAV9-14Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией T733V.

AAV9-15Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией A427R.

AAV9-16Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией M635D.

AAV9-17Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией W695R.

AAV9-18Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией R296L.

AAV9-19Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Q351A.

AAV9-20Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией Y395F.

AAV9-21Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией R434L.

AAV9-22Mut-FIX обозначает вектор на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9), включающего модифицированный белок VP1 капсида AAV9 с мутацией N691A.

Определения и общие мотоды

Если иное не определено в настоящем документе, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, будут иметь значения, которые обычно понятны специалистам в данной области.

Кроме того, если по контексту не требуется иное, термины в единственном числе включают в себя термины во множественном числе, и термины во множественном числе включают в себя термины в единственном числе. Как правило, используемая классификация и методы культивирования клеток, молекулярной биологии, иммунологии, микробиологии, генетики, аналитической химии, химии органического синтеза, медицинской и фармацевтической химии, а также гибридизации и химии белка и нуклеиновых кислот, описанные в настоящем документе, хорошо известны специалистам и широко применяются в данной области. Ферментативные реакции и способы очистки осуществляют в соответствии с инструкциями производителя, как это обычно осуществляется в данной области, или как описано в настоящем документе.

Определения «встречающийся в природе», «нативный» или «дикого типа» используют для описания объекта, который можно обнаружить в природе как отличающийся от получаемого искусственно. Например, белок или нуклеотидная последовательность, присутствующие в организме (включая вирус), которые можно изолировать из источника в природе, и которые не модифицированы умышленно специалистом в лаборатории, являются встречающимися в природе.

В настоящем описании и в последующей формуле изобретения, если контекстом не предусмотрено иное, слова «включать» и «содержать» или их вариации, такие как «включает», «включающий», «содержит» или «содержащий», следует понимать как включение указанного целого или группы целых, но не исключение любого другого целого или группы целых.

Аденоассоциированный вирус (AAV)

Вирусы семейства Parvoviridae представляют собой небольшие ДНК-содержащие вирусы животных. Семейство Parvoviridae может быть разделено на два подсемейства: Parvovirinae, представители которого инфицируют позвоночных животных, и Densovirinae, представители которого инфицируют насекомых. К 2006 году были описаны 11 серотипов аденоассоциированного вируса (Mori, S. ET AL., 2004, «Two novel adeno-associated viruses from cynomolgus monkey: pseudotyping characterization of capsid protein», Virology, T. 330 (2): 375-83). В 2008 году был описан 12 серотип аденоассоциированного вируса (Michael Schmidt ET AL., Adeno-associated virus type 12 (AAV 12): a novel AAV serotype with sialic acid- and heparan sulfate proteoglycan-independent transduction activity, J Virol. 2008 Feb; 82(3):1399-406. doi: 10.1128/JVI.02012-07). Все известные серотипы могут инфицировать клетки многих видов тканей. Тканевая специфичность определяется серотипом белков капсида, поэтому векторы на основе аденоассоциированного вируса конструируют, задавая необходимый серотип.Дополнительная информация по парвовирусам и другим представителям Parvoviridae описана в литературе (Kenneth I. Berns, «Parvoviridae: The Viruses and Their Replication», Chapter 69 in Fields Virology (3d Ed. 1996)).

Геномная организация всех известных серотипов AAV очень сходна. Геном AAV представляет собой линейную одноцепочечную молекулу ДНК, которая содержит менее чем примерно 5000 нуклеотидов (нт) в длину. Инвертированные концевые повторы (ITR) фланкируют уникальные кодирующие нуклеотидные последовательности белков (Rep), необходимых для обеспечения жизненного цикла вируса, а также последовательности перекрывающихся белков капсида (Сар). Ген Сар кодирует белки VP (VP1, VP2 и VP3), которые образуют капсид, а также белки ААР (белок, активирующий сборку аденоассоциированного вируса (AAV) Sonntag F, Köther K, Schmidt K, et al. The assembly-activating protein promotes capsid assembly of different adeno-associated virus serotypes. J Virol. 2011; 85(23):12686-12697. doi:10.1128/JVI.05359-11) и МААР (вспомогательный белок связывания с мембраной Ogden PJ, Kelsic ED, Sinai S, Church GM. Comprehensive AAV capsid Htness landscape reveals a viral gene and enables machine-guided design. Science. 2019; 366(6469):1139-1143. doi:10.1126/science.aaw2900). Фланкирующие последовательности генома AAV длиной в 145 нуклеотидов являются самокомплементарными и организованы таким образом, что может быть сформирован энергетически стабильный внутримолекулярный дуплекс, образующий Т-образную шпилечную структуру. Такие шпилечные структуры функционируют как точки начала репликации ДНК вируса, являясь праймерами для клеточного ДНК-полимеразного комплекса. После инфекции клеток млекопитающих AAV дикого типа (wtAAV) гены Rep (например, Rep78 и Rep52) экспрессируются с помощью Р5 промотора и Р19 промотора, соответственно, и оба белка Rep выполняют определенную функцию в репликации генома вируса. Сплайсинг в открытой рамке считывания Rep (Rep ORF) приводит к экспрессии фактически четырех белков Rep (например, Rep78, Rep68, Rep52 и Rep40). Однако было показано, что несплайсированная мРНК, кодирующая белки Rep78 и Rep52, является достаточной для продукции вектора AAV в клетках млекопитающих.

Вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV)

Термин «вектор» при использовании в настоящем документе означает молекулу нуклеиновой кислоты, способную транспортировать другую нуклеиновую кислоту, с которой она соединена. Кроме того, термин «вектор» в данном настоящем документе означает вирусную частицу, способную транспортировать нуклеиновую кислоту.

Как применяют в настоящем описании, термин «экспрессия» определяют как транскрипцию и/или трансляцию конкретной нуклеотидной последовательности, запускаемую ее промотором.

Применение

«Доставка субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты» представляет собой вставку генов в клетки и/или ткани субъекта.

Термин «субъект», «пациент», «индивидуум» и т.п. используют в настоящем описании взаимозаменяемо, и они относятся к любому животному, которое поддается воздействию способами, представленными в настоящем описании. В конкретных неограничивающих вариантах осуществления субъект, пациент или индивидуум является человеком. Вышеупомянутый субъект может быть мужского или женского пола любого возраста.

Подробное описание изобретения

Способ получения модифицированного капсида аденоассоциированного вируса

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к способу получения модифицированного капсида AAV, который включает:

а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона, как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены,

где под капсидом-шаблоном понимают схожий по строению капсид вируса, выбранного из семейства парвовирусов (Parvoviridae), который не является AAV;

в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

г) выбор позиций для мутагенеза, при этом аминокислотные остатки для мутагенеза находятся в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV и имеют структурное различие между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

д) выбор аминокислотного остатка для мутагенеза в позиции, выбранной на стадии

г), с использованием одного из следующих принципов:

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет больший объем, за исключением цистеина и метионина;

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет увеличенное или уменьшенное число полярных контактов между капсомерами, за исключением цистеина и метионина;

е) введение одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных на стадиях г)-д), в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV.

Под интерфейсом (или поверхностью) взаимодействия понимается набор фрагментов полипептидной цепи белка-капсомера, взаимодействующих с аминокислотами соседней пентамерной субъединицы, где под пентамерной субъединицей понимается структурный элемент капсида в форме правильного пятиугольника, состоящий из 5 белков-капсомеров, расположенных вокруг центральной поры (L.М. Drouin and М. Agbandje-McKenna. Adeno-associated virus structural biology as a tool in vector development. Future Virol., vol. 8, no. 12, pp. 1183-1199, 2013).

Под интерфейсом взаимодействия для данной субъединицы мы понимаем все аминокислоты, хотя бы один атом которых находится на расстоянии, не превышающем 5 Å от какого-либо атома из соседних пентамерных субъединиц.

Для AAV5 мы производили расчет по структуре капсида PDB ID: 6JCT.

В ней, согласно расчету, к интерфейсу взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами AAV5 относятся следующие диапазоны остатков белка VP1 капсида AAV5: 220 - 226, 283 - 293, 339 - 342, 385 - 392, 412 - 435, 462 - 466, 590 - 598, 611 - 626, 677 - 685, 721 - 724.

Для AAV9 аналогичный расчет был сделан по структуре PDB ID: 3UX1.

В ней, согласно расчету, к интерфейсу взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами AAV9 относятся следующие диапазоны остатков белка VP1 капсида AAV9: 230 - 236, 294 - 304, 350 - 353, 394 - 401, 421 - 444, 476 - 480, 601 - 609, 622 - 637, 689 - 697, 733 - 736.

Под «одной или несколькими аминокислотными заменами» подразумеваются одна, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять или десять аминокислотных замен. Например, от 1 до 10 аминокислотных замен, от 1 до 9 аминокислотных замен, от 1 до 8 аминокислотных замен, от 1 до 7 аминокислотных замен, от 1 до 6 аминокислотных замен, от 1 до 5 аминокислотных замен, от 1 до 4 аминокислотных замен, от 1 до 3 аминокислотных замен или от 1 до 2 аминокислотных замен.

В некоторых вариантах осуществления изобретения способ получения модифицированного капсида AAV дополнительно включает проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV с одной или несколькими аминокислотными заменами на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

В некоторых вариантах осуществления изобретения способ получения модифицированного капсида AAV дополнительно включает проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций и отбор модифицированных капсидов AAV, которые имеют одно или несколько улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей: AAV человека, AAV обезьян или AAV птиц.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей следующие серотипы AAV: AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15, AAV16, rAAV.rh8, rAAV.rhlO, rAAV.rh20, rAAV.rh39, rAAV.Rh74, rAAV.RHM4-1, AAV.hu37, rAAV.Anc80, rAAV.Anc80L65, rAAV.7m8, rAAV.PHP.B, rAAV2.5, rAAV2tYF, rAAV3B, rAAV.LK03, AAV.HSC1, AAV.HSC2, AAV.HSC3, AAV.HSC4, AAV.HSC5, AAV.HSC6, AAV.HSC7, AAV.HSC8, AAV.HSC9, AAV.HSC10, AAV.HSC11, AAV.HSC12, AAV.HSC13, AAV.HSC14, AAV.HSC15 или AAV.HSC16.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV дикого типа или капсид AAV, который включает одну или несколько аминокислотных замен в белках VP1, VP2 и/или VP3.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV5 дикого типа или капсид AAV5, который включает одну или несколько аминокислотных замен в белках VP1, VP2 и/или VP3.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV5, который включает аминокислотные замены S2A и T711S в белке VP1.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV9 дикого типа или капсид AAV9, который включает одну или несколько аминокислотных замен в белках VP1, VP2 и/или VP3.

В некоторых вариантах осуществления способа получения капсида AAV схожий по строению капсид-шаблон, выбирают из группы, которая включает: парвовирус В19, человеческий бокавирус 1 (HBoV1), парвовирус крупного рогатого скота (BVP).

Модифицированный капсид AAV по изобретению

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к модифицированному капсиду AAV для получения вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса, который получен способом, включающим:

а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона, как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены,

где под капсидом-шаблоном понимают схожий по строению капсид вируса, выбранного из семейства парвовирусов (Parvoviridae), который не является AAV;

в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

г) выбор позиций для мутагенеза, при этом аминокислотные остатки для мутагенеза находятся в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV и имеют структурное различие между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

д) выбор аминокислотного остатка для мутагенеза в позиции, выбранной на стадии г), с использованием одного из следующих принципов:

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет больший объем, за исключением цистеина и метионина;

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет увеличенное или уменьшенное число полярных контактов между капсомерами, за исключением цистеина и метионина;

е) введение одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных на стадиях г)-д), в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV;

а также, при необходимости, дополнительно включает

ж) проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций и отбор модифицированных капсидов AAV, которые имеют одно или несколько улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей: AAV человека, AAV обезьян или AAV птиц.

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей следующие серотипы AAV: AAV: AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15, AAV16, rAAV.rh8, rAAV.rhlO, rAAV.rh20, rAAV.rh39, rAAV.Rh74, rAAV.RHM4-1, AAV.hu37, rAAV.Anc80, rAAV.Anc80L65, rAAV.7m8, rAAV.PHP.B, rAAV2.5, rAAV2tYF, rAAV3B, rAAV.LK03, AAV.HSC1, AAV.HSC2, AAV.HSC3, AAV.HSC4, AAV.HSC5, AAV.HSC6, AAV.HSC7, AAV.HSC8, AAV.HSC9, AAV.HSC10, AAV.HSC11, AAV.HSC12, AAV.HSC13, AAV.HSC14, AAV.HSC15 или AAV.HSC16.

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV дикого типа или капсид AAV, который включает одну или несколько аминокислотных замен в белках VP1, VP2 и/или VP3.

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV5 дикого типа или капсид AAV5, который включает одну или несколько аминокислотных замен в белках VP1, VP2 и/или VP3.

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV5, который включает аминокислотные замены S2A и T711S в белке VP1.

В некоторых вариантах осуществления модифицированного капсида AAV капсид модифицируемого AAV может представлять капсид AAV9 дикого типа или капсид AAV9, который включает одну или несколько аминокислотных замен в белках VP1, VP2 и/или VP3.

«Правая часть» (+)-цепи геномной ДНК аденоассоциированного вируса содержит перекрывающиеся последовательности, кодирующие три белка капсида - VP1, VP2 и VP3. Транскрипция этих генов начинается с одного промотора, р40. Молекулярная масса соответствующих белков составляет 87, 72 и 62 кДа, соответственно. Все три белка транслируются с одной мРНК. После транскрипции пре-мРНК может подвергаться сплайсингу двумя разными способами, при этом вырезается более длинный или более короткий интрон и образуются мРНК длиной 2300 или 2600 нуклеотидов.

Таким образом, введение мутаций в ген Cap будет влиять не только на белок VP1 капсида AAV, но и на белки VP2 и VP3 капсида AAV.

Ниже приведены положения структурных белков капсида AAV5 в последовательности гена Cap AAV5:

1-725 ак - VP1,

137-725 ак - VP2,

193-725 ак - VP2.

Ниже приведены положения структурных белков капсида AAV9 в последовательности гена Cap AAV9:

1-737 ак - VP1,

138-737 ак - VP2,

203-737 ак - VP3.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 14, 20,26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 16, 22, 28, 34, 40, 46, 52, 58, 64, 70, 76, 82, 88, 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184, 190, 196, 202, 208, 214, 220, 226, 232, 238, 244, 250, 256, 262, 268, 274, 280, 286, 292, 298, 304, 310, 316, 322, 328, 334, 340, 346, 352, 358, 364 или 370.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 18, 24, 30, 36,42,48, 54, 60, 66, 72,78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 198, 204, 210, 216, 222, 228, 234, 240, 246, 252, 258, 264, 270, 276, 282, 288, 294, 300, 306, 312, 318, 324, 330, 336, 342, 348, 354, 360, 366 или 372.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает:

а) модифицированный белок VP1 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 14, 20, 26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368;

б) соответствующий своему белку VP1 модифицированный белок VP2 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 16, 22, 28, 34, 40, 46, 52, 58, 64, 70, 76, 82, 88, 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184, 190, 196, 202, 208, 214, 220, 226, 232, 238, 244, 250, 256, 262, 268, 274, 280, 286, 292, 298, 304, 310, 316, 322, 328, 334, 340, 346, 352, 358, 364 или 370;

в) соответствующий своему белку VP1 модифицированный белок VP3 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 198, 204, 210, 216, 222, 228, 234, 240, 246, 252, 258, 264, 270, 276, 282, 288, 294, 300, 306, 312, 318, 324, 330, 336, 342, 348, 354, 360, 366 или 372.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену G226A (AAV5 Capsid VP1 G226A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 14.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену G90A (AAV5 Capsid VP2 G90A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 16.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену G34A (AAV5 Capsid VP3 G34A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 18

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, G226A и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, G226A и T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 20.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены G90A и T575S (AAV5 Capsid VP2 G90A и T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 22.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены G34A T519S (AAV5 Capsid VP3 G34A T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 24.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену D286E (AAV5 Capsid VP1 D286E) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 26.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену D150E (AAV5 Capsid VP2 D150E) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 28.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену D94E (AAV5 Capsid VP3 D94E) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 30.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, D286E и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, D286E и T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 32.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены D150E и T575S (AAV5 Capsid VP2 D150E и T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 34

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены D94E и T519S (AAV5 Capsid VP3 D94E и T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 36.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену L341Y (AAV5 Capsid VP1 L34IY) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 38.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену L205Y (AAV5 Capsid VP2 L205Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 40.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену L149Y (AAV5 Capsid VP3 L149Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 42.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, L341Y, T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, L341Y, T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 44.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены L205Y, T575S (AAV5 Capsid VP2 L205Y, T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 46.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены L149Y, T519S (AAV5 Capsid VP3 L149Y, T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 48.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену C387V (AAV5 Capsid VP1 C387V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 50.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену C251V (AAV5 Capsid VP2 C251V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 52.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену C195V (AAV5 Capsid VP3 C195V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 54.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, C387V, T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, C387V, T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 56.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены C251V, T575S (AAV5 Capsid VP2 C251V, T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 58.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены C195V, T519S (AAV5 Capsid VP3 C195V, T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 60.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену Q421H (AAV5 Capsid VP1 Q421H) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 62.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену Q285H (AAV5 Capsid VP2 Q285H) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 64.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену Q229H (AAV5 Capsid VP3 Q229H) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 66.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A Q421H T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Q421H T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 68.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены Q285H T575S (AAV5 Capsid VP2 Q285H T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 70.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены Q229H T519S (AAV5 Capsid VP3 Q229H T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 72.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену Р466Т (AAV5 Capsid VP1 Р466Т) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 74.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену Р330Т (AAV5 Capsid VP2 Р330Т) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 76.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену Р274Т (AAV5 Capsid VP3 Р274Т) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 78.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A Р466Т T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Р466Т T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 80.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены Р330Т T575S (AAV5 Capsid VP2 Р330Т T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 82.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены Р274Т T519S (AAV5 Capsid VP3 Р274Т T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 84.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S594Q (AAV5 Capsid VP1 S594Q) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 86.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S458Q (AAV5 Capsid VP2 S458Q) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 88.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S402Q (AAV5 Capsid VP3 S402Q) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 90.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S594Q T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S594Q T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 92.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S458Q T575S (AAV5 Capsid VP2 S458Q T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 94.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S402Q T519S (AAV5 Capsid VP3 S402Q T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 96.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены T614L (AAV5 Capsid VP1 T614L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 98.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены T478L (AAV5 Capsid VP2 T478L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 100.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены T422L (AAV5 Capsid VP3 T422L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 102.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A T614L T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T614L T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 104.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены T478L T575S (AAV5 Capsid VP2 T478L T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 106.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены (AAV5 Capsid VP3 T422L T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 108.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену N679K (AAV5 Capsid VP1 N679K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 110.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену N543K (AAV5 Capsid VP2 N543K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 112.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену N487K (AAV5 Capsid VP3 N487K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 114.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A N679K T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A N679K T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 116.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены N543K T575S (AAV5 Capsid VP2 N543K T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 118.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены N487K T519S (AAV5 Capsid VP3 N487K T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 120.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену P723V (AAV5 Capsid VP1 P723V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 122.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену P587V (AAV5 Capsid VP2 P587V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 124.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену P531V (AAV5 Capsid VP3 P531V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 126.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены P723V T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A P723V T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 128.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены P587V T575S (AAV5 Capsid VP2 P587V T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 130.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены P531V T519S (AAV5 Capsid VP3 P531V T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 132.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену V431Y (AAV5 Capsid VP1 V431Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 134.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену V295Y (AAV5 Capsid VP2 V295Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 136.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену V239Y (AAV5 Capsid VP3 V239Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 138.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A V431Y T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A V431Y T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 140.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены V295Y T575S (AAV5 Capsid VP2 V295Y T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 142.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены V239Y T519S (AAV5 Capsid VP3 V239Y T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 144.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену A616D (AAV5 Capsid VP1 A616D) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 146.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену A480D (AAV5 Capsid VP2 A480D) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 148.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену A424D (AAV5 Capsid VP3 A424D) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 150.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A A616D T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A A616D T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 152.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены A480D T575S (AAV5 Capsid VP2 A480D T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 154.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены A424D T519S (AAV5 Capsid VP3 A424D T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 156.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену W683R (AAV5 Capsid VP1 W683R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 158.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену W547R (AAV5 Capsid VP2 W547R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 160.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену W491R (AAV5 Capsid VP3 W491R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 162.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A W683R T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A W683R T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 164.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены W547R T575S (AAV5 Capsid VP2 W547R T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 166.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены W491R T519S (AAV5 Capsid VP3 W491R T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 168.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S222A (AAV5 Capsid VP1 S222A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 170.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S86A (AAV5 Capsid VP2 S86A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 172.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S30A (AAV5 Capsid VP3 S30A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 174.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S222A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S222A T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 176.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S86A T575S (AAV5 Capsid VP2 S86A T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 178.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S30A T519S (AAV5 Capsid VP3 S30A T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 180.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену R285L (AAV5 Capsid VP1 R285L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 182.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену R149L (AAV5 Capsid VP2 R149L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 184.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену R93L (AAV5 Capsid VP3 R93L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 186.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A R285L T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A R285L T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 188.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены R149L T575S (AAV5 Capsid VP2 R149L T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 190.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены R93L T519S (AAV5 Capsid VP3 R93L T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 192.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену Q340A (AAV5 Capsid VP1 Q340A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 194.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену (AAV5 Capsid VP2 Q204A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 196.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену Q148A (AAV5 Capsid VP3 Q148A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 198.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A Q340A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Q340A T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 200.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены Q204A T575S (AAV5 Capsid VP2 Q204A T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 202.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены Q148A T519S (AAV5 Capsid VP3 Q148A T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 204.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S420F (AAV5 Capsid VP1 S420F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 206.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S284F (AAV5 Capsid VP2 S284F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 208.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S228F (AAV5 Capsid VP3 S228F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 210.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S420F T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S420F T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 212.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S284F T575S (AAV5 Capsid VP2 S284F T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 214.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S228F T519S (AAV5 Capsid VP3 S228F T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 216.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S680A (AAV5 Capsid VP1 S680A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 218.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S544A (AAV5 Capsid VP2 S544A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 220.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S488A (AAV5 Capsid VP3 S488A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 222.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S680A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S680A T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 224.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S544A T575S (AAV5 Capsid VP2 S544A T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 226.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S488A T519S (AAV5 Capsid VP3 S488A T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 228.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену T721V (AAV5 Capsid VP1 T721V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 230.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену T585V (AAV5 Capsid VP2 T585V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 232.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену T529V (AAV5 Capsid VP3 T529V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 234.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A T721V T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T721V T711S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 236.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены T585V T575S (AAV5 Capsid VP2 T585V T575S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 238.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены T529V T519S (AAV5 Capsid VP3 T529V T519S) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 240.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Q351K (AAV9 Capsid VP1 Q351K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 242.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Q214K (AAV9 Capsid VP2 Q214K.) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 244.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Q149K (AAV9 Capsid VP3 Q149K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 246.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Q351R (AAV9 Capsid VP1 Q351R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 248.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Q214R (AAV9 Capsid VP2 Q214R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 250.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Q149R (AAV9 Capsid VP3 Q149R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 252.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену S232T (AAV9 Capsid VP1 S232T) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 254.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену S95T (AAV9 Capsid VP2 S95T) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 256.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену S3 ОТ (AAV9 Capsid VP3 S30T) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 258.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену D297E (AAV9 Capsid VP1 D297E) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 260.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену D160E (AAV9 Capsid VP2 DI60E) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 262.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену D95E (AAV9 Capsid VP3 D95E) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 264.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену S692T (AAV9 Capsid VP1 S692T) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 266.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену S555T (AAV9 Capsid VP2 S555T) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 268.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену S490T (AAV9 Capsid VP3 S490T) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 270.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену D433Y (AAV9 Capsid VP1 D433Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 272.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену D296Y (AAV9 Capsid VP2 D296Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 274.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену D231Y (AAV9 Capsid VP3 D231Y) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 276.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену T625L (AAV9 Capsid VP1 T625L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 278.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену T488L (AAV9 Capsid VP2 T488L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 280.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену T423L (AAV9 Capsid VP3 T423L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 282.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену T625V (AAV9 Capsid VP1 T625V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 284.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену T488V (AAV9 Capsid VP2 T488V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 286.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену T423V (AAV9 Capsid VP3 T423V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 288.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену N691A (AAV9 Capsid VP1 N691 А) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 290.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену N554A (AAV9 Capsid VP2 N554A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 292.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену N489A (AAV9 Capsid VP3 N489A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 294.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену C396V (AAV9 Capsid VP1 C396V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 296.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену C259V (AAV9 Capsid VP2 C259V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 298.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену C194V (AAV9 Capsid VP3 C194V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 300.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Y478F (AAV9 Capsid VP1 Y478F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 302.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Y341F (AAV9 Capsid VP2 Y34IF) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 304.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Y276F (AAV9 Capsid VP3 Y276F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 306.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену R296L (AAV9 Capsid VP1 R296L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 308.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену R159L (AAV9 Capsid VP2 Rl 59L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 310.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену R94L (AAV9 Capsid VP3 R94L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 312.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену T733V (AAV9 Capsid VP1 T733V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 314.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену T596V (AAV9 Capsid VP2 T596V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 316.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену T531V (AAV9 Capsid VP3 T531V) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 318.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену A427R (AAV9 Capsid VP1 A427R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 320.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену A290R (AAV9 Capsid VP2 A290R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 322.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену A225R (AAV9 Capsid VP3 A225R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 324.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену M635D (AAV9 Capsid VP1 M635D) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 326.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену M498D (AAV9 Capsid VP2 M498D) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 328.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену M433D (AAV9 Capsid VP3 M433D) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 330.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену L444R (AAV9 Capsid VP1 L444R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 332.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену L307R (AAV9 Capsid VP2 L307R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 334.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену L242R (AAV9 Capsid VP3 L242R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 336.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену G604N (AAV9 Capsid VP1 G604N) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 338.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену G467N (AAV9 Capsid VP2 G467N) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 340.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену G402N (AAV9 Capsid VP3 G402N) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 342.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену G627K (AAV9 Capsid VP1 G627K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 344.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену G490K (AAV9 Capsid VP2 G490K) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 346.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену G425K (AAV9 Capsid VP3 G425K.) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 348.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену W695R (AAV9 Capsid VP1 W695R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 350.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену W558R (AAV9 Capsid VP2 W558R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 352.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену W493R (AAV9 Capsid VP3 W493R) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 354.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Q351A (AAV9 Capsid VP1 Q351A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 356.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Q214A (AAV9 Capsid VP2 Q214A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 358.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену QI49A (AAV9 Capsid VP3 Q149A) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 360.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Y395F (AAV9 Capsid VP1 Y395F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 362.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Y258F (AAV9 Capsid VP2 Y258F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 364.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Y193F (AAV9 Capsid VP3 Y193F) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 366.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену R434L (AAV9 Capsid VP1 R434L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 368.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену R297L (AAV9 Capsid VP2 R297L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 370.

В некоторых вариантах осуществления изобретения модифицированный капсид AAV включает модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену (AAV9 Capsid VP3 R232L) и имеет аминокислотную последовательность SEQ ID No: 372.

Все вышеуказанные одна или несколько замен модифицированном капсиде AAV рассчитываются относительно соответствующего капсида дикого типа.

Природная последовательность белка VP1 капсида AAV5 дикого типа (AAV5 Capsid VP1 WT) представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID No: 2, природная последовательность белка VP2 капсида AAV5 дикого типа (AAV5 Capsid VP2 WT) представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID No: 4, природная последовательность белка VP3 капсида AAV5 дикого типа (AAV5 Capsid VP3 WT) представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID No: 6.

Природная последовательность белка VP1 капсида AAV9 дикого типа (AAV9 Capsid VP1 WT) представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID No: 373, природная последовательность белка VP2 капсида AAV9 дикого типа (AAV9 Capsid VP2 WT) представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID No: 375, природная последовательность белка VP3 капсида AAV9 дикого типа (AAV9 Capsid VP3 WT) представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID No: 377.

Авторами изобретения было установлено, что вышеуказанные модифицированные капсиды AAV обладают одним или несколькими улучшенными свойствами по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций (дикого типа), которые выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный капсид по изобретению

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к нуклеиновой кислоте, которая кодирует любой из вышеуказанных модифицированных капсидов.

В любом варианте осуществления изобретения молекула нуклеиновой кислоты может быть выделенной.

Термины «нуклеиновая кислота», «нуклеиновая последовательность» или «нуклеиновокислотная последовательность», «полинуклеотид», «олигонуклеотид», «полинуклеотидная последовательность» и «нуклеотидная последовательность», которые используются равнозначно в данном описании, обозначают четкую последовательность нуклеотидов, модифицированных или не модифицированных, определяющую фрагмент или участок нуклеиновой кислоты, содержащую или не содержащую неприродные нуклеотиды и являющуюся либо двухцепочечной ДНК или РНК, либо одноцепочечной ДНК или РНК, либо продуктами транскрипции указанных ДНК.

Как применяют в настоящем описании, полинуклеотиды включают, в качестве неограничивающих примеров, все последовательности нуклеиновой кислоты, получаемые любыми способами, доступными в этой области, включая, в качестве неограничивающих примеров, рекомбинантные способы, т.е. клонирование последовательностей нуклеиновой кислоты из рекомбинантной библиотеки или генома клетки, использование обычной технологии клонирования и ПЦР и т.п., и способами синтеза.

Здесь также следует упомянуть, что данное изобретение не относится к нуклеотидным последовательностям в их природной хромосомной среде, т.е. в природном состоянии. Последовательности данного изобретения были выделены и/или очищены, т.е. были взяты прямо или косвенно, например, путем копирования. Таким образом, также здесь следует подразумевать изолированные нуклеиновые кислоты, полученные путем генетической рекомбинации, например, с помощью принимающих клеток (клеток-хозяев), или полученные путем химического синтеза.

Ссылка на нуклеотидную последовательность охватывает его комплемент, если не указано иное. Таким образом, ссылка на нуклеиновую кислоту, имеющую определенную последовательность следует понимать как охватывающие ее комплементарную цепь с ее комплементарной последовательностью.

«Выделенная» молекула нуклеиновой кислоты представляет собой молекулу нуклеиновой кислоты, которая идентифицирована и отделена от по меньшей мере одной молекулы нуклеиновой кислоты-примеси, с которой она обычно связана в естественном источнике нуклеиновой кислоты антитела. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты отличается от той формы или набора, в которых она находится в естественных условиях. Таким образом, выделенная молекула нуклеиновой кислоты отличается от молекулы нуклеиновой кислоты, существующей в клетках в естественных условиях.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену G226A (AAV5 Capsid VP1 G226A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 13 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену G90A (AAV5 Capsid VP2 G90A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 15 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену G34A (AAV5 Capsid VP3 G34A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 17 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, G226A и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, G226A и T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 19 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены G90A и T575S (AAV5 Capsid VP2 G90A и T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 21 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены G34A T519S (AAV5 Capsid VP3 G34A T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 23 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену D286E (AAV5 Capsid VP1 D286E), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 25 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену D150E (AAV5 Capsid VP2 D150E), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 27 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену D94E (AAV5 Capsid VP3 D94E), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 29 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, D286E и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, D286E и Т71 IS), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 31 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены D150E и T575S (AAV5 Capsid VP2 D150E и T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 33 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены D94E и T519S (AAV5 Capsid VP3 D94E и T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 35 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену L341Y (AAV5 Capsid VP1 L341Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 37 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену L205Y (AAV5 Capsid VP2 L205Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 39 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену L149Y (AAV5 Capsid VP3 L149Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 41 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, L341Y, T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, L341Y, T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 43 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены L205Y, T575S (AAV5 Capsid VP2 L205Y, T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 45 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены L149Y, T519S (AAV5 Capsid VP3 L149Y, T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 47 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену C387V (AAV5 Capsid VP1 C387V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 49 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену C251V (AAV5 Capsid VP2 C251V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 51 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену C195V (AAV5 (Capsid VP3 C195V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 53 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A, C387V, T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, C387V, T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 55 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены C251V, T575S (AAV5 Capsid VP2 C251V, T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 57 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены C195V, T519S (AAV5 Capsid VP3 C195V, T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 59 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену Q421H (AAV5 Capsid VP1 Q421H), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 61 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену Q285H (AAV5 Capsid VP2 Q285H), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 63 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену Q229H (AAV5 Capsid VP3 Q229H), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 65 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A Q421H T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Q421H T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 67 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены Q285H T575S (AAV5 Capsid VP2 Q285H T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 69 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены Q229H T519S (AAV5 Capsid VP3 Q229H T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 71 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену Р466Т (AAV5 Capsid VP1 Р466Т), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 73 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену РЗЗОТ (AAV5 Capsid VP2 Р330Т), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 75 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену Р274Т (AAV5 Capsid VP3 Р274Т), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 77 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A Р466Т T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Р466Т T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 79 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены Р330Т T575S (AAV5 Capsid VP2 РЗЗОТ T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 81 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены Р274Т T519S (AAV5 Capsid VP3 Р274Т T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 83 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S594Q (AAV5 Capsid VP1 S594Q), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 85 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S458Q (AAV5 Capsid VP2 S458Q), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 87 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S402Q (AAV5 Capsid VP3 S402Q), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 89 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S594Q T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S594Q T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 91 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S458Q T575S (AAV5 Capsid VP2 S458Q T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 93 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S402Q T519S (AAV5 Capsid VP3 S402Q T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 95 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены T614L (AAV5 Capsid VP1 T614L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 97 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены T478L (AAV5 Capsid VP2 T478L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 99 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены T422L (AAV5 Capsid VP3 T422L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 101 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A T614L T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T614L T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 103 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены T478L T575S (AAV5 Capsid VP2 T478L T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 105 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены (AAV5 Capsid VP3 T422L T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 107 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замен N679K (AAV5 Capsid VP1 N679K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 109 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену N543K (AAV5 Capsid VP2 N543K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 111 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену N487K (AAV5 Capsid VP3 N487K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 113 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A N679K T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A N679K T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 115 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены N543K T575S (AAV5 Capsid VP2 N543K T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 117 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены N487K T519S (AAV5 Capsid VP3 N487K T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 119 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену P723V (AAV5 Capsid VP1 P723V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 121 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену P587V (AAV5 Capsid VP2 P587V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 123 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену P531V (AAV5 Capsid VP3 P531V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 125 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены P723V T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A P723V T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 127 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены P587V T575S (AAV5 Capsid VP2 P587V T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 129 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены P531V T519S (AAV5 Capsid VP3 P531V T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 131 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену V431Y (AAV5 Capsid VP1 V431Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 133 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену V295Y (AAV5 Capsid VP2 V295Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 135 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену V239Y (AAV5 Capsid VP3 V239Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 137 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A V431Y T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A V431Y T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 139 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены V295Y T575S (AAV5 Capsid VP2 V295Y T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 141 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены V239Y T519S (AAV5 Capsid VP3 V239Y T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 143 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену A616D (AAV5 Capsid VP1 A616D), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 145 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену A480D (AAV5 Capsid VP2 A480D), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 147 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену A424D (AAV5 Capsid VP3 A424D), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 149 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP! капсида AAV5, который включает замены S2A A616D T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A A616D T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 151 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены A480D T575S (AAV5 Capsid VP2 A480D T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 153 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены A424D T519S (AAV5 Capsid VP3 A424D T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 155 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену W683R (AAV5 Capsid VP1 W683R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 157 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену W547R (AAV5 Capsid VP2 W547R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 159 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену W491R (AAV5 Capsid VP3 W491R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 161 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A W683R T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A W683R T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 163 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены W547R T575S (AAV5 Capsid VP2 W547R T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 165 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены W491R T519S (AAV5 Capsid VP3 W491R T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 167 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S222A (AAV5 Capsid VP1 S222A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 169 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S86A (AAV5 Capsid VP2 S86A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 171 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S30A (AAV5 Capsid VP3 S30A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 173 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S222A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S222A T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 175 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S86A T575S (AAV5 Capsid VP2 S86A T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 177 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S30A T519S (AAV5 Capsid VP3 S30A T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 179 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену R285L (AAV5 Capsid VP1 R285L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 181 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену R149L (AAV5 Capsid VP2 R149L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 183 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену R93L (AAV5 Capsid VP3 R93L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 185 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A R285L T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A R285L T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 187 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены R149L T575S (AAV5 Capsid VP2 R149L T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 189 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены R93L T519S (AAV5 Capsid VP3 R93L T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 191 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену Q340A (AAV5 Capsid VP1 Q340A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 193 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену (AAV5 Capsid VP2 Q204A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 195 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену Q148A (AAV5 Capsid VP3 Q148A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 197 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A Q340A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Q340A T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 199 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены Q204A T575S (AAV5 Capsid VP2 Q204A T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 201 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены Q148A T519S (AAV5 Capsid VP3 Q148A T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 203 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S420F (AAV5 Capsid VP1 S420F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 205 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S284F (AAV5 Capsid VP2 S284F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 207 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S228F (AAV5 Capsid VP3 S228F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 209 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S420F T7HS (AAV5 Capsid VP1 S2A S420F T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 211 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S284F T575S (AAV5 Capsid VP2 S284F T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 213 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S228F T519S (AAV5 Capsid VP3 S228F T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 215 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену S680A (AAV5 Capsid VP1 S680A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 217 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену S544A (AAV5 Capsid VP2 S544A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 219 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену S488A (AAV5 Capsid VP3 S488A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 221 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A S680A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S680A T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 223 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены S544A T575S (AAV5 Capsid VP2 S544A T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 225 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены S488A T519S (AAV5 Capsid VP3 S488A T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 227 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замену T721V (AAV5 Capsid VP1 T721V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 229 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замену T585V (AAV5 Capsid VP2 T585V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 231 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замену T529V (AAV5 Capsid VP3 T529V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 233 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который включает замены S2A T721V T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T721V T711S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 235 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который включает замены T585V T575S (AAV5 Capsid VP2 T585V T575S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 237 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который включает замены T529V T519S (AAV5 Capsid VP3 T529V T519S), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 239 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Q351K (AAV9 Capsid VP1 Q351K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 241 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Q214K (AAV9 Capsid VP2 Q214K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 243 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Q149K (AAV9 Capsid VP3 Q149K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 245 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Q351R (AAV9 Capsid VP1 Q351R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 247 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Q214R (AAV9 Capsid VP2 Q214R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 249 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Q149R (AAV9 Capsid VP3 Q149R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 251 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену S232T (AAV9 Capsid VP1 S232T), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 253 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену S95T (AAV9 Capsid VP2 S95T), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 255 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену S30T (AAV9 Capsid VP3 S30T), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 257 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену D297E (AAV9 Capsid VP1 D297E), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 259 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену D160E (AAV9 Capsid VP2 D160E), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 261 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену D95E (AAV9 Capsid VP3 D95E), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 263 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену S692T (AAV9 Capsid VP1 S692T), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 265 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену S555T (AAV9 Capsid VP2 S555T), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 267 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену S490T (AAV9 Capsid VP3 S490T), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 269 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену D433Y (AAV9 Capsid VP1 D433Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 271 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену D296Y (AAV9 Capsid VP2 D296Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 273 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену D231Y (AAV9 Capsid VP3 D231Y), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 275 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену T625L (AAV9 Capsid VP1 T625L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 277 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену T488L (AAV9 Capsid VP2 T488L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 279 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену T423L (AAV9 Capsid VP3 T423L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 281 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену T625V (AAV9 Capsid VP1 T625V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 283 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену T488V (AAV9 Capsid VP2 T488V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 285 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену T423V (AAV9 Capsid VP3 T423V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 287 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену N691A (AAV9 Capsid VP1 N691 А), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 289 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену N554A (AAV9 Capsid VP2 N554A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 291 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену N489A (AAV9 Capsid VP3 N489A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 293 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену C396V (AAV9 Capsid VP1 C396V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 295 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену C259V (AAV9 Capsid VP2 C259V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 297 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену C194V (AAV9 Capsid VP3 C194V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 299 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Y478F (AAV9 Capsid VP1 Y478F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 301 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Y341F (AAV9 Capsid VP2 Y341F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 303 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Y276F (AAV9 Capsid VP3 Y276F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 305 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену R296L (AAV9 Capsid VP1 R296L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 307 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену R159L (AAV9 Capsid VP2 R159L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 309 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену R94L (AAV9 Capsid VP3 R94L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 311 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену T733V (AAV9 Capsid VP1 T733V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 313 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену T596V (AAV9 Capsid VP2 T596V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 315 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену T531V (AAV9 Capsid VP3 T531V), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 317 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену A427R (AAV9 Capsid VP1 A427R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 319 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену A290R (AAV9 Capsid VP2 A290R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 321 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену A225R (AAV9 Capsid VP3 A225R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 323 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену M635D (AAV9 Capsid VP1 M635D), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 325 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену M498D (AAV9 Capsid VP2 M498D), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 327 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену M433D (AAV9 Capsid VP3 M433D), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 329 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену L444R (AAV9 Capsid VP1 L444R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 331 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену L307R (AAV9 Capsid VP2 L307R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 333 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену L242R (AAV9 Capsid VP3 L242R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 335 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену G604N (AAV9 Capsid VP1 G604N), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 337 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену G467N (AAV9 Capsid VP2 G467N), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 339 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену G402N (AAV9 Capsid VP3 G402N), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 341 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену G627K (AAV9 Capsid VP1 G627K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 343 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену G490K (AAV9 Capsid VP2 G490K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 345 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену G425K (AAV9 Capsid VP3 G425K), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 347 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену W695R (AAV9 Capsid VP1 W695R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 349 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену W558R (AAV9 Capsid VP2 W558R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 351 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену W493R (AAV9 Capsid VP3 W493R), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 353 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Q351A (AAV9 Capsid VP1 Q351A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 355 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Q214A (AAV9 Capsid VP2 Q214A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 357 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Q149A (AAV9 Capsid VP3 Q149A), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 359 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену Y395F (AAV9 Capsid VP1 Y395F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 361 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену Y258F (AAV9 Capsid VP2 Y258F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 363 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену Y193F (AAV9 Capsid VP3 Y193F), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 365 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который включает замену R434L (AAV9 Capsid VP1 R434L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: SEQ ID No: 367 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который включает замену R297L (AAV9 Capsid VP2 R297L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 369 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

В некоторых вариантах осуществления изобретения выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует модифицированный капсид, включает нуклеиновую, кислоту, кодирующую модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который включает замену (AAV9 Capsid VP3 R232L), которая имеет нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 371 или любую другую нуклеотидную последовательность, кодирующую соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка.

Под «любой другой нуклеотидной последовательность, кодирующей соответствующую аминокислотную последовательность данного модифицированного белка» подразумевается нуклеиновая последовательность, которая альтернативна указанного нуклеиновой последовательности, так как с учетом вырожденности генетического кода широкий ряд различных ДНК-последовательностей может кодировать одну и ту же аминокислотную последовательность. Специалистам в данной области хорошо известно получение таких альтернативных ДНК-последовательностей, кодирующих одни и те же аминокислотные последовательности. Такие вариантные ДНК-последовательности находятся в объеме настоящего изобретения.

В некоторых вариантах выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует любой из вышеуказанных модифицированных капсидов, включает любую из вышеуказанных последовательностей нуклеиновых кислот или их комбинации.

Вектор но основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к вектору на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса для доставки субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который включает:

1) любой из вышеуказанных модифицированных капсидов, и

2) гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую регуляторные последовательности, которые обеспечивают экспрессию продукта, кодируемого гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, в целевых клетках.

Термины «вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вирусам, «рекомбинантный вирус на основе AAV», «вирусоподобная частица на основе AAV», «рекомбинантный вирусный штамм AAV», «рекомбинантный вектор AAV» или «вектор на основе rAAV» в контексте настоящего описания имеют одинаковое значение.

В некоторых вариантах осуществления изобретения вектор на основе rAAV включает гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую регуляторные последовательности, которые обеспечивают экспрессию продукта, где продукт экспрессии гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты представляет собой терапевтический полипептид или репортерный полипептид.

Вектор на основе rAAV по изобретению не содержит нуклеотидные последовательности генов, кодирующих последовательности белков (Rep), необходимых для обеспечения жизненного цикла вируса, а также последовательности перекрывающихся белков капсида (Сар).

Характеристика капсида подробно описана в вышеуказанном разделе описания.

Под «регуляторными последовательностями, которые обеспечивают экспрессию продукта, кодируемого гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, в целевых клетках» подразумевается в рамках данного изобретения полинуклеотидные последовательности, которые необходимы для воздействия на экспрессию и процессинг кодирующих последовательностей, к которым они клонированы. Регулирующие экспрессию последовательности включают соответствующие последовательности инициации транскрипции, терминации, промотора и энхансера; эффективные сигналы процессинга РНК, такие как сплайсинг и сигналы полиаденилирования; последовательности, которые стабилизируют цитоплазматическую мРНК; последовательности, которые повышают эффективность трансляции (т.е. консенсусная последовательность Козака); последовательности, которые повышают стабильность белка; и, при желании, последовательности, которые усиливают секрецию белка. Характер таких регулирующих последовательностей различается в зависимости от организма-хозяина; в прокариотах такие контролирующие последовательности, как правило, включают промотор, сайт связывания рибосомы, а также последовательности терминации транскрипции; в эукариотах, как правило, такие контролирующие последовательности включают промоторы и последовательности терминации транскрипции. Термин «регуляторные последовательности» включает, как минимум, все компоненты, наличие которых имеет важное значение для экспрессии и процессинга, и может также включать дополнительные компоненты, чье присутствие является полезным, например, последовательности лидерных пептидов.

В контексте настоящего описания термин «промотор» относится к фрагменту нуклеиновой кислоты, который контролирует транскрипцию одной или нескольких кодирующих последовательностей, а также который структурно идентифицируется по наличию сайта связывания для ДНК-зависимой РНК-полимеразы, сайтов инициации транскрипции и других последовательностей ДНК, включающих, без ограничения, сайты связывания фактора транскрипции, сайты связывания репрессора и активатора белка, а также любые другие последовательности нуклеотидов, известные специалистам в данной области, которые непосредственно или опосредованно регулируют уровень транскрипции с данным промотором. «Конститутивный» промотор представляет собой такой промотор, который активен в большинстве тканей в обычных физиологических условиях и условиях развития. «Индуцибельный» промотор представляет собой промотор, который подвергается физиологической регуляции или регуляции в ходе развития, например, при воздействии химического индуктора. «Тканеспецифичный» промотор активен только в конкретных типах тканей или клеток.

Промоторы, которые используются для продукции высокого уровня полипептидов в эукариотических клетках и, в частности, в клетках млекопитающих, должны быть сильными и, предпочтительно, должны быть активными в широком диапазоне типов клеток. Сильные конститутивные промоторы, которые способны запускать экспрессию во многих типах клеток, хорошо известны в данной области и, поэтому, нет необходимости в их подробном описании в данном документе. В соответствии с идеей настоящего изобретения предпочтительно использовать промотор цитомегаловируса (CMV). Промотор или промотор/энхансер, полученные из немедленной ранней (IE) области цитомегаловируса (hCMV) человека, в особенности подходят в качестве промотора для вектора на основе rAAV5 по настоящему изобретению. Немедленная ранняя (IE) область цитомегаловируса (hCMV) человека и полученные из нее функциональные запускающие экспрессию фрагменты и/или функциональные усиливающие экспрессию фрагменты, например, описаны в ЕР0173177 и ЕР0323997, а также хорошо известны в данной области. Таким образом, несколько фрагментов немедленной ранней (IE) области hCMV могут использоваться в качестве промотора и/или промотора/энхансера.

Термины «энхансеры» или «энхансер», используемые в изобретении, могут относиться к последовательности ДНК, которая расположена как смежная с последовательностью ДНК, кодирующей рекомбинантный продукт. Энхансерные элементы обычно расположены в 5'-направлении от промоторного элемента или могут быть расположены ниже или в пределах кодирующей последовательности ДНК (например, последовательности ДНК, транскрибированной или транслированной в рекомбинантный продукт или продукты). Таким образом, энхансерный элемент может быть расположен на расстоянии 100 пар оснований, 200 пар оснований или 300 или больше пар оснований перед последовательностью ДНК, которая кодирует рекомбинантный продукт, или после этой последовательности. Энхансерные элементы могут увеличивать количество экспрессируемого рекомбинантного продукта от последовательности ДНК, превышая экспрессию, обусловленную одиночным промоторным элементом. Специалистам в данной области техники доступно множество энхансерных элементов.

В некоторых вариантах осуществления изобретения гетерологичная последовательность нуклеиновой кислоты, содержащая регуляторные последовательности, которые обеспечивают экспрессию продукта, кодируемого гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, в целевых клетках может включать следующие элементы в направлении от 5'-конца к 3'-концу:

левый (первый) ITR (инвертированные концевые повторы);

CMV (цитомегаловирусный) энхансер;

CMV (цитомегаловирусный) промотер;

интрон гена hBG1 (ген субъединицы гемоглобина гамма-1);

нуклеиновая кислота, кодирующая продукт;

сигнал полиаденилирования hGH1 (сигнал полиаденилирования гена гормона роста человека);

правый (второй) ITR.

В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота, кодирующая продукт (трансген) представляет собой по меньшей мере один ген, кодирующий белок. В некоторых вариантах реализации трансген кодирует по меньшей мере одну небольшую нуклеиновую кислоту-ингибитор. В некоторых вариантах реализации трансген кодирует по меньшей мере одну репортерную молекулу. В некоторых вариантах реализации малая ингибирующая нуклеиновая кислота представляет собой miRNA. В некоторых вариантах реализации малая ингибирующая нуклеиновая кислота представляет собой sponge miRNA или TuD-RNA, которая ингибирует активность по меньшей мере одной miRNA у животного. В некоторых вариантах реализации miRNA экспрессируется в клетке ткани-мишени. В некоторых вариантах реализации ткань-мишень представляет собой ткань печени, центральной нервной системы (ЦНС), глаз, желудочно-кишечного тракта, дыхательных путей, молочной железы, поджелудочной железы, мочевыводящих путей или ткани матки.

В некоторых вариантах вектор на основе rAAV имеет продукт экспрессии гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который представляет собой терапевтический полипептид или репортерный полипептид.

В некоторых вариантах вектор на основе rAAV содержит гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей продукт, который представляет собой терапевтический полипептид, где терапевтический полипептид представляет собой фактор свертывания крови, выбираемый из группы, состоящей из фактора VIII, фактора IX или их функционального варианта.

В некоторых вариантах вектор на основе rAAV содержит гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей продукт, который представляет собой фактор VIII или его функциональный вариант.

В некоторых вариантах вектор на основе rAAV содержит гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей продукт, который представляет собой фактор IX или его функциональный вариант.

В некоторых вариантах вектор на основе rAAV содержит гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей продукт, который представляет собой белок SMN1 (белок выживаемости моторных (двигательных) нейронов)

В некоторых вариантах вектор на основе rAAV содержит гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей продукт, который представляет собой полипептид RBD-S (рекомбинантный рецептор-связывающий домен гликопротеина S) вируса SARS-cov2 (коронавирус 2 типа, вызывающий тяжелый острый респираторный синдром).

Примеры

Для наилучшего понимания изобретения приводятся следующие примеры. Эти примеры приведены только в иллюстративных целях и не должны толковаться как ограничивающие сферу применения изобретения в любой форме.

Все публикации, патенты и патентные заявки, указанные в этой спецификации включены в данный документ путем отсылки. Хотя вышеупомянутое изобретение было довольно подробно описано путем иллюстрации и примера в целях исключения двусмысленного толкования, специалистам в данной области на основе идей, раскрытых в данном изобретении, будет вполне понятно, что могут быть внесены определенные изменения и модификации без отклонения от сущности и объема прилагаемых вариантов осуществления изобретения.

Материалы и общие методы

Методы рекомбинантной ДНК

Для манипуляций с ДНК использовали стандартные методы, описанные у Sambrook J. и др., Molecular cloning: A laboratory manual; Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 2012. Реагенты для молекулярной биологии использовали согласно инструкциям производителей.

Синтез генов

Требуемые сегменты генов получали из олигонуклеотидов, созданных путем химического синтеза. Генные сегменты длиной от 300 до 4000 п. н., которые фланкированы уникальными сайтами рестрикции, собирали путем отжига и лигирования олигонуклеотидов, включая ПЦР-амплификацию и последующее клонирование через указанные сайты рестрикции. Последовательности ДНК субклонированных генных фрагментов подтверждали путем секвенирования ДНК.

Определение последовательностей ДНК

Последовательности ДНК определяли путем секвенирования по Сенгеру.

Анализ последовательностей ДНК и белков и обработка данных о последовательностях

Применяли пакет программ Infomax's Vector NTI Advance suite, версия 8.0 и SnapGene версии 5.1.4.1 для создания, картирования, анализа, аннотирования и иллюстрации последовательностей.

Статистический анализ данных

Результаты представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение (SD), для сравнения результатов теста и контроля использовали дисперсионный анализ (ANOVA), и они были определены как статистически значимые.

Пример 1. Выбор вариантов мутаций в капсиде AAV5 на основе структурного сходства капсидов семейства парвовирусов

Дизайн мутаций капсида AAV5 основан на высокой степени структурного сходства белков капсида внутри семейства парвовирусов (Parvoviridae), в том числе вирусов, не относящихся к AAV. Подбор замены состоит из трех этапов и включает в себя:

1) Определение аминокислот белка-капсомера AAV5, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

2) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV5 с капсидом одного из парвовирусов, не являющихся AAV (далее «капсид-шаблон»);

3) попарное сравнение остатков аминокислот капсида AAV5 и капсида-шаблона.

Предварительно проводится преподготовка структур трехмерных моделей AAV5 и капсида-шаблона, которая заключается в достраивании отсутствующих атомов в структуре с помощью утилиты Prepwizard из пакета Schrodinger Suite.

В пункте 1 под интерфейсом взаимодействия понимается набор фрагментов полипептидной цепи белка-капсомера, взаимодействующих с аминокислотами соседней пентамерной субъединицы, где под пентамерной субъединицей понимается структурный элемент капсида в форме правильного пятиугольника, состоящий из 5 белков-капсомеров, расположенных вокруг центральной поры (L.М. Drouin and М. Agbandje-McKenna. Adeno-associated virus structural biology as a tool in vector development. Future Virol., vol. 8, no. 12, pp. 1183-1199, 2013.).

На втором этапе проводится структурное выравнивание капсида AAV5 и капсида-шаблона с помощью утилиты Structure Alignment пакета Schrodinger Suite. По итогам выравнивания для каждой аминокислоты AAV5 из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц определяется ближайшая к ней аминокислота капсида-шаблона (структурный аналог исходной аминокислоты), которая рассматривается в качестве потенциальной замены. Структурный аналог исходной аминокислоты отсутствует, если в окрестности ближайшей к ней аминокислоты капсида-шаблона расположена другая аминокислота AAV5, расстояние до которой меньше, чем до исходной аминокислоты. Здесь подразумевается, что расстояние между аминокислотами оценивается по расстоянию между альфа-атомами углерода.

После того, как для всех аминокислот интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц определены структурные аналоги, решение о замене принимается в соответствии с Примерами 2, 3 и 4.

Пример 2. Дизайн мутаций по принципу увеличения объема остатка аминокислоты

По итогам структурного выравнивания капсида AAV5 и капсида-шаблона имеем попарное структурное соответствие между их аминокислотными остатками. В одном из случаев решение о замене исходной аминокислоты на соответствующую аминокислоту капсида-шаблона принимается по итогам сравнения объемов Ван-дер-Ваальса боковых заместителей аминокислот (N.J. Darby, S.S.N.J. Darby, and Т. E. Creighton, Protein Structure. IRL Press at Oxford University Press, 1993; таблица 1). Мутация вносится при соблюдении следующих условий:

1. Объем бокового заместителя аминокислоты из капсида-шаблона больше, чем объем бокового заместителя исходной аминокислоты

2. Аминокислота из капсида шаблона не является цистеином или метионином.

Исключение цистеина и метионина из числа аминокислот для потенциальной замены обусловлено их значительной реакционной способностью, в частности способностью к окислению.

Результаты применения описываемого способа дизайна мутаций в капсиде AAV5 с использованием трех капсидов-шаблонов: HBoV1 (PDBid 5urf), В19 (PDBid 1s58), BPV (PDBid 4qc8) приведены в таблице 2. В первой колонке указаны аминокислоты из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида AAV5, в остальных колонках приведены аминокислоты, полученные по итогам попарного структурного выравнивания AAV5 на каждый из капсидов HBoV1, В19 и BPV. Звездочкой отмечены аминокислоты, пригодные для замены в соответствии с критерием размера бокового заместителя и запретом замены на цистеин и метионин.

Под интерфейсом взаимодействия для данной субъединицы мы понимаем все аминокислоты, хотя бы один атом которых находится на расстоянии, не превышающем 5 от какого-либо атома из соседних пентамерных субъединиц.

Для AAV5 мы производили расчет по структуре капсида PDB ID: 6JCT.

В ней, согласно расчету, к интерфейсу взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами AAV5 относятся следующие диапазоны остатков белка VP1 капсида AAV5: 220 - 226, 283 - 293, 339 - 342, 385 - 392, 412 - 435, 462 - 466, 590 - 598, 611 - 626, 677 - 685, 721-724.

Пример 3. Дизайн мутаций по принципу увеличения числа полярных контактов между капсомерами

В соответствие с Примером 1 по итогам структурного выравнивания капсида AAV5 и капсида-шаблона имеем попарное структурное соответствие между их аминокислотными остатками. В одном из случаев решение о замене исходной аминокислоты на соответствующую аминокислоту капсида-шаблона принимается на основе анализа микроокружениия и для исходной аминокислоты, и для ее структурного аналога. В частности, положительное решение о замене принимается, если в паре соответствующих аминокислот в капсиде-шаблоне расположена аминокислота с полярным боковым заместителем, а в AAV5 - с неполярным, при этом обе аминокислоты имеют хотя бы один полярный контакт с соседней пентамерной субъединицей капсида. Считаем, что произвольная аминокислота имеет полярный контакт, если на расстоянии не более 5 Å от любого атома бокового заместителя отличного от водорода расположен хотя бы один атом полярной группы бокового заместителя другой аминокислоты другого капсомера (таблица 3). По аналогии с Примером 2 замены на цистеин и метионин также не допускаются.

Результаты применения описываемого способа дизайна мутаций в капсиде AAV5 с использованием трех капсидов-шаблонов: HBoV1 (PDBid 5urf), В19 (PDBid 1s58), BPV (4qc8) приведены в таблице 4. В первой колонке указаны аминокислоты из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида AAV5, для которых найдены подходящие варианты замены в одном из трех капсидов HBoV1, В19 и BPV. В остальных колонках приведены аминокислоты, полученные по итогам попарного структурного выравнивания AAV5 на каждый из капсидов. Звездочкой отмечены аминокислоты, пригодные для замены в соответствии с критерием увеличения числа полярных контактов и запретом замены на цистеин и метионин.

Пример 4. Дизайн мутаций по принципу уменьшения числа полярных контактов между капсомерами

В соответствие с Примером 1 по итогам структурного выравнивания капсида AAV5 и капсида-шаблона имеем попарное структурное соответствие между их аминокислотными остатками. В одном из случаев решение о замене исходной аминокислоты на соответствующую аминокислоту капсида-шаблона принимается на основе анализа микроокружениия и для исходной аминокислоты, и для ее структурного аналога. В частности, положительное решение о замене принимается, если в паре соответствующих аминокислот в капсиде AAV5 находится остаток полярной аминокислоты, образующий хотя бы один полярный контакт с соседней пентамерной субъединицей, в то время как в капсиде-шаблоне расположен остаток неполярной аминокислоты. При этом по аналогии с Примером 2 в качестве замены не рассматриваются остатки цистеина или метионина.

Результаты применения описываемого способа дизайна мутаций в капсиде AAV5 с использованием трех капсидов-шаблонов: HBoV1 (PDBid 5urf), В19 (PDBid 1s58), BPV (4qc8) приведены в таблице 5. В первой колонке указаны аминокислоты из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида AAV5, для которых найдены подходящие варианты замены в одном из трех капсидов HBoV1, В19 и BPV. В остальных колонках приведены аминокислоты, полученные по итогам попарного структурного выравнивания AAV5 на каждый из капсидов-шаблонов. Звездочкой отмечены аминокислоты, пригодные для замены в соответствии с критерием увеличения числа полярных контактов и запретом замены на цистеин и метионин.

Пример 5. Выбор вариантов мутаций в капсиде AAV9 на основе структурного сходства капсидов семейства парвовирусов

Дизайн мутаций капсида AAV9 основан на высокой степени структурного сходства белков капсида внутри семейства парвовирусов (Parvoviridae), в том числе вирусов, не относящихся к AAV. Подбор замены состоит из трех этапов и включает в себя:

1) определение аминокислот белка-капсомера AAV9, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

2) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV9 с капсидом одного из парвовирусов, не являющихся AAV (далее "капсид-шаблон");

3) попарное сравнение остатков аминокислот капсида AAV9 и капсида-шаблона. Предварительно проводится преподготовка структур трехмерных моделей AAV9 и

капсида-шаблона, которая заключается в достраивании отсутствующих атомов в структуре с помощью утилиты Prepwizard из пакета Schrodinger Suite.

В пункте 1 под интерфейсом взаимодействия понимается набор фрагментов полипептидной цепи белка-капсомера, взаимодействующих с аминокислотами соседней пентамерной субъединицы, где под пентамерной субъединицей понимается структурный элемент капсида в форме правильного пятиугольника, состоящий из 5 белков-капсомеров, расположенных вокруг центральной поры (L.М. Drouin and М. Agbandje-McKenna. Adeno-associated virus structural bioiogy as a tool in vector development. Future Virol., vol. 8, no. 12, pp. 1183-1199, 2013.).

На втором этапе проводится структурное выравнивание капсида AAV9 и капсида-шаблона с помощью утилиты Strucutre Alignment пакета Schrodinger Suite. По итогам выравнивания для каждой аминокислоты AAV9 из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц определяется ближайшая к ней аминокислота капсида-шаблона (структурный аналог исходной аминокислоты), которая рассматривается в качестве потенциальной замены. Структурный аналог исходной аминокислоты отсутствует, если в окрестности ближайшей к ней аминокислоты капсида-шаблона расположена другая аминокислота AAV9, расстояние до которой меньше, чем до исходной аминокислоты. Здесь подразумевается, что расстояние между аминокислотами оценивается по расстоянию между альфа-атомами углерода.

После того, как для всех аминокислот интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц определены структурные аналоги, решение о замене принимается в соответствии с Примерами 6, 7 и 8.

Пример 6. Дизайн мутаций по принципу увеличения объема остатка аминокислоты

По итогам структурного выравнивания капсида AAV9 и капсида-шаблона имеем попарное структурное соответствие между их аминокислотными остатками. В одном из случаев решение о замене исходной аминокислоты на соответствующую аминокислоту капсида-шаблона принимается по итогам сравнения объемов Ван-дер-Ваальса боковых заместителей аминокислот (N.J. Darby, S.S.N.J. Darby, and Т. E. Creighton, Protein Structure. IRL Press at Oxford University Press, 1993; таблица 1). Мутация вносится при соблюдении следующих условий:

1. Объем бокового заместителя аминокислоты из капсида-шаблона больше, чем объем бокового заместителя исходной аминокислоты

2. Аминокислота из капсида шаблона не является цисте ином или метионином.

Исключение цистеина и метионина из числа аминокислот для потенциальной замены обусловлено их значительной реакционной способностью, в частности способностью к окислению.

Результаты применения описываемого способа дизайна мутаций в каписде AAV9 с использованием трех капсидов-шаблонов: HBoV1 (PDBid 5urf), В19 (PDBid 1s58), BPV (PDBid 4qc8) приведены в таблице 6. В первой колонке указаны аминокислоты из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида AAV9, в остальных колонках приведены аминокислоты, полученные по итогам попарного структурного выравнивания AAV9 на каждый из капсидов HBoV1, В19 и BPV. Звездочкой отмечены аминокислоты, пригодные для замены в соответствии с критерием размера бокового заместителя и запретом замены на цистеин и метионин.

Под интерфейсом взаимодействия для данной субъединицы мы понимаем все аминокислоты, хотя бы один атом которых находится на расстоянии, не превышающем 5 Å от какого-либо атома из соседних пентамерных субъединиц.

Для AAV9 расчет был сделан по структуре PDB ID: 3UX1.

В ней, согласно расчету, к интерфейсу взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами AAV9 относятся следующие диапазоны остатков белка VP1 капсида AAV9: 230 - 236, 294 - 304, 350 - 353, 394 - 401, 421 - 444, 476 - 480, 601 - 609, 622-637, 689-697, 733-736.

Пример 7. Дизайн мутаций по принципу увеличения числа полярных контактов между капсомерами

В соответствие с Примером 5 по итогам структурного выравнивания капсида AAV9 и капсида-шаблона имеем попарное структурное соответствие между их аминокислотными остатками. В одном из случаев решение о замене исходной аминокислоты на соответствующую аминокислоту капсида-шаблона принимается на основе анализа микроокружениия и для исходной аминокислоты, и для ее структурного аналога. В частности, положительное решение о замене принимается, если в паре соответствующих аминокислот в капсиде-шаблоне расположена аминокислота с полярным боковым заместителем, а в AAV9 - с неполярным, при этом обе аминокислоты имеют хотя бы один полярный контакт с соседней пентамерной субъединицей капсида. Считаем, что произвольная аминокислота имеет полярный контакт, если на расстоянии не более 5 от любого атома бокового заместителя отличного от водорода расположен хотя бы один атом полярной группы бокового заместителя другой аминокислоты другого капсомера (таблица 3). По аналогии с Примером 6 замены на цистеин и метионин также не допускаются.

Результаты применения описываемого способа дизайна мутаций в каписде AAV9 с использованием трех капсидов-шаблонов: HBoV1 (PDBid 5urf), В19 (PDBid 1s58), BPV (4qc8) приведены в таблице 7. В первой колонке указаны аминокислоты из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида AAV9, для которых найдены подходящие варианты замены в одном из трех капсидов HBoV1, В19 и BPV. В остальных колонках приведены аминокислоты, полученные по итогам попарного структурного выравнивания AAV9 на каждый из капсидов. Звездочкой отмечены аминокислоты, пригодные для замены в соответствии с критерием увеличения числа полярных контактов и запретом замены на цистеин и метионин.

Пример 8. Дизайн мутаций по принципу уменьшения числа полярных контактов между капсомерами

В соответствие с Примером 5 по итогам структурного выравнивания капсида AAV9 и капсида-шаблона имеем попарное структурное соответствие между их аминокислотными остатками. В одном из случаев решение о замене исходной аминокислоты на соответствующую аминокислоту капсида-шаблона принимается на основе анализа микроокружениия и для исходной аминокислоты, и для ее структурного аналога. В частности, положительное решение о замене принимается, если в паре соответствующих аминокислот в капсиде AAV9 находится остаток полярной аминокислоты, образующий хотя бы один полярный контакт с соседней пентамерной субъединицей, в то время как в капсиде-шаблоне расположен остаток неполярной аминокислоты. При этом по аналогии с Примером 6 в качестве замены не рассматриваются остатки цистеина или метионина.

Результаты применения описываемого способа дизайна мутаций в каписде AAV9 с использованием трех капсидов-шаблонов: HBoV1 (PDBid 5urf), В19 (PDBid 1s58), BPV (4qc8) приведены в таблице 8. В первой колонке указаны аминокислоты из интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида AAV9, для которых найдены подходящие варианты замены в одном из трех капсидов HBoV1, В19 и BPV. В остальных колонках приведены аминокислоты, полученные по итогам попарного структурного выравнивания AAV9 на каждый из капсидов-шаблонов. Звездочкой отмечены аминокислоты, пригодные для замены в соответствии с критерием увеличения числа полярных контактов и запретом замены на цистеин и метионин.

Пример 9. Получение библиотек вариантов капсидов AAV5

Получение библиотек вариантов капсидов AAV5 производили методом случайного мутагенеза последовательности гена Cap (Davidsson М. et al., 2016). Вкратце, последовательность дикого типа гена Сар пятого серотипа (GenBank ID AF085716.1) была собрана de novo, после чего синтезированный геном капсида AAV5 дикого типа фрагментировали с использованием урацил-ДНК-гликозилазы, полученные фрагменты собирали в полноразмерный ген Сар с помощью ДНК-полимеразы, не обладающей корректирующей активностью (в результате в последовательности возникали случайные мутации). Полноразмерные мутантные варианты клонировали в плазмиду-носитель pAAV-linker (Фиг. 1) по сайтам рестрикции AscI/EcoRI в общую рамку считывания с зеленым флуоресцентным белком (GFP), продуцируя многообразную случайную библиотеку капсидов AAV5, которую затем использовали для отбора вариантов капсидов с повышенной трансдуцирующей активностью.

Положительный отбор вирусных частиц с повышенной трансдуцирующей активностью проводили in vitro на клетках линии CHO-K1-S. При этом для трансдукции использовали частицы, очищенные с помощью УЦФ в градиенте йодиксанола. Спустя 48 часов клетки Собирали и выделяли геномную ДНК для последующей амплификации последовательностей геномов вирусов, способных к эффективной трансдукции. Полученные последовательности затем переклонировали и повторно нарабатывали для последующих итераций отбора с целью обогащения библиотеки вариантами с наибольшей эффективностью трансдукции. После 5 раундов отбора капсидные гены 30 клонов просеквенировали для определения наиболее успешных мутаций и их сочетаний. По результатам секвенирования преобладающими сочетаниями мутаций оказались S2A, T711S в VP1 AAV5 и варианты капсидов содержащие S2A, Т71 IS, S651A в VP1 AAV5 - порядка 20% клонов. Также были отобраны варианты капсидов, содержащие мутацию S651A в VP1 AAV5. Данные варианты капсидов клонировали в вектора для наработки вирусных частиц и в дальнейшем использовали для визуализации и сравнения профилей трансдукции относительно AAV5 дикого типа.

Пример 10. Наработка и последующий отбор рекомбинантных вирусных частиц из полученной библиотеки последовательностей

Для наработки и последующего отбора рекомбинантных вирусных частиц из полученной библиотеки последовательностей была разработана серия плазмид: плазмида-носитель, плазмида, содержащая последовательность гена Rep, а также конструкция, содержащая аденовирусные гены, необходимые для репликации вирусных частиц.

Плазмида-носитель pAAV-linker (Фиг. 1), предназначенная для клонирования библиотек случайных вариантов гена капсида AAV пятого серотипа в одну рамку считывания с репортерным белком, была получена путем замены последовательности модифицированного зеленого флуоресцентного белка в исходной конструкции pAAV-GFP, с помощью рестриктазно-лигазного метода клонирования по сайтам Hindlll/EcoRI, на последовательность T2A-GFP, синтезированную de novo с добавлением сайтов рестрикции EcoRI с 5'-конца и HindIII с 3'-конца.

Плазмида pAAV-Rep, содержащая последовательность гена Rep (Фиг. 2), полученную путем клонирования novo синтезированной последовательности гена Rep AAV второго серотипа (GenBank ID AF043303.1) с добавлением сайта рестрикции Pcil на 5' конец и сайта рестикции Psil на 3' конце, в плазмиду pGem-T Easy (Promega, США) так же обработанную рестриктазами PciI/PsiI (New England Biolabs, США).

В качестве источника аденовирусных генов для наработки рекомбинантных вирусных частиц была использована конструкция pHelper (Фиг. 3), содержащая AmpR - ген бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампициллину, Ori - ориджин репликации в бактериях, Adeno Е2А - последовательность гена хелперного аденовируса, участвующая в репликации вирусной ДНК, Adeno Е4 - последовательность гена хелперного аденовируса, участвующая в репликации вирусной ДНК, Adeno VARNA -последовательность гена хелперного аденовируса отвечающая за стимуляцию трансляции как ранних, так и поздних вирусных генов.

Пример 11. Получение мутантных вариантов капсидов AAV5 и AAV9

Последовательности генов капсида дикого типа AAV пятого серотипа (GenBank ID AF085716.1) и капсида дикого типа AAV девятого серотипа (GenBank ID AY530579.1) были синтезированы de novo с включением сайта SwaI с 5' конца и сайта NotI с 3' конца в каждую из синтезированных последовательностей соответственно, после обработки эндонуклеазами рестрикции SwaI/NotI (New England Biolabs, США) каждая из последовательностей была клонирована в плазмидный вектор pAAV-Rep (Фиг. 2) так же предварительно обработанный рестриктазами SwaI/NotI (New England Biolabs, США), в результате чего были получены плазмиды: pAAV-RC5 (Фиг. 4), содержащая последовательность капсида AAV пятого серотипа дикого типа, а также содержащая последовательность гена Rep AAV, и pAAV-RC9 (Фиг. 5), содержащая последовательность капсида AAV девятого серотипа дикого типа, а также содержащая последовательность гена Rep AAV.

Внесение мутаций в последовательность капсида AAV дикого типа производили с использованием коммерческого набора QuikChange II Site-directed mutagenesis kit (Agilent, USA) согласно инструкции производителя. Праймеры для ПЦР были разработаны с помощью программы QuikChange Primer Design (Agilent, USA) (Таблица 9, таблица 10). Вкратце, процедуру, основанную на сайт-направленном мутагенезе, проводили с использованием в качестве матрицы плазмиды pAAV-RC5 или pAAV-RC9 соответственно. Для внесения мутаций, на первом этапе проводили реакцию ПЦР в отдельных пробирках для каждого мутанта и контрольного образца с добавлением соответствующих олигонуклеотидов. На втором этапе проводили обработку рестриктазой Dpnl согласно протоколу производителя для удаления матричной плазмидной ДНК, полученной смесью трансформировали компетентные клетки Е.coli XL-1 Blue. Полученные клоны анализировали с использованием ПЦР на специфичные участки целевой плазмиды, отобранные мутанты подвергались секвенированию перед использованием.

Кодоны, несущие замену, выделены жирным шрифтом.

Аналогичным способом мутации были внесены в лидерный вариант капсида AAV пятого серотипа одновременно содержащий мутации S2A и T711S, полученный способом направленной эволюции описанном в Примерах 9 и 10.

Кодоны, несущие замену, выделены жирным шрифтом.

Пример 11. Эффективность наработки векторов на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 5 серотипа (rAAV5)

Для получения частиц rAAV с модифицированным капсидом 5 серотипа, клетки-продуценты НЕК293 трансфецировали с использованием полиэтиленимина (PEI, linear, MW 25000, Polyscinces, Inc.) одновременно 3 плазмидами:

1) Плазмидой, содержащей нуклеотидные последовательности аденовируса, кодирующие белки и РНК, необходимые для сборки частиц rAAV (хелперная плазмида);

2) Плазмидой, содержащей нуклеотидную природную последовательность гена Rep аденоассоциированного вируса, а также последовательность модифицированного гена Сар, которую выбирают из группы: нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 7, 13, 19, 25, 31, 37, 43, 49, 55, 61, 67, 73, 79, 85, 91, 97, 103, 109, 115, 121, 127, 133, 139, 145, 151, 157, 163, 169, 175, 181, 187, 193, 199, 205, 211, 217, 223, 229, 235 или любая другая нуклеотидная последовательность, кодирующая белок VP1 с аминокислотными последовательностями SEQ ID No: 8, 14, 20, 26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230 или 236 и белки VP2 и VP3 с альтернативных рамок считывания используемой нуклеотидной последовательности, где

VP2 может иметь любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID No: 10, 16, 22, 28, 34, 40, 46, 52, 58, 64, 70, 76, 82, 88, 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184, 190, 196, 202, 208, 214, 220, 226, 232 или 238;

a VP3 может иметь любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID No: 12, 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 198, 204, 210, 216, 222, 228, 234 или 240;

3) Плазмидой, содержащей гетерологичный геном частицы rAAV, кодирующий целевой ген, предназначенный для доставки в клетки пациента.

Данный набор генов обеспечивает сборку вирусных частиц rAAV и инкапсидирование в них целевого генома в течение 72 часов. Через 72 часа после трансфекции клетки-продуценты подвергали лизису (TAKARA BIO INC, Japan) с высвобождением частиц rAAV, полученные вектора обрабатывали ДНКазой I (Invitrogen, USA) в течение 2 часов при 37°С, затем еще 2 часа протеиназой К (Invitrogen, USA) при 56°С. Титр полученных частиц rAAV проверяли с помощью количественной ПЦР (TaqMan, Applied Biosystems, USA) с использованием сета олигонуклеотидов состоящего из прямого праймера 5'-ACCACATGAAGCAGCACGAC-3', обратного праймера 5'-TCAGCTCGATGCGGTTCAC-3', и зонда 5'-HEX-CATGCCCGAAGGCTACGTCCAG-BHQ1-3' специфичного к последовательности GFP.

Авторами изобретения было неожиданно установлено, что наличие одной или нескольких мутаций, которые выбраны из группы G226A, D286E, L341Y, C387V, Q421H, Р466Т, S594Q, T614L, N679K, P723V, V431Y, A616D, W683R, S222A, R285L, Q340A, S420F, S680A, T721V в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S, приводило к статистически достоверному увеличению эффективности упаковки трансгена векторами на основе rAAV с указанными выше мутациями. К примеру, при помощи метода количественной ПЦР удалось выявить изменение количества копий упакованного гетерологичного генома частицы rAAV, кодирующего целевой ген GFP (Фиг. 6, Фиг. 7).

При одновременном наличии мутаций S2A и T711S (AAV5-01Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 7,1 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,78Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, G226A и T711S (AAV5-02Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,4 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,36Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, D286E и T711S (AAV5-03Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,5 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 8,79Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, L341Y и T711S (AAV5-04Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,8 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,46Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, C387V и T711S (AAV5-05Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,8 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,21Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, Q421H и T711S (AAV5-06Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,1 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 5,27Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, Р466Т и T711S (AAV5-07Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 6,2 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,56Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S594Q и T711S (AAV5-08Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,9 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,48Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, T614L и T711S (AAV5-09Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 6,8 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,71Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, N679K и T711S (AAV5-10Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,3 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 8,28Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, P723V и T711S (AAV5-11Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,0 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,26Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, V431Y и T711S (AAV5-12Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,4 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 6,03Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, A616D и T711S (AAV5-13Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,6 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 9,04Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, W683R и T711S (AAV5-14Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,6 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,15Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S222A и T711S (AAV5-15Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,5 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 3,77Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMui-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, R285L и T711S (AAV5-16Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,5 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 6,28Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, Q340A и T711S (AAV5-17Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,8 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 4,52Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S420F и T711S (AAV5-18Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,4 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,10Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S680A и T711S (AAV5-19Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,0 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 7,53Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, T721V и T711S (AAV5-20Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,2 раза с 2,51Е+09 вг/мл до 1,31Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации G226A (AAV5-21Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,9 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 1,07Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации D286E (AAV5-22Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,4 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 6,58Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации L341Y (AAV5-23Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,7 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 7,40Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации C387V (AAV5-24Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,8 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 1,32Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации Q421H (AAV5-25Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,2 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 8,77Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации Р466Т (AAV5-26Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,7 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 4,66Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S594Q (AAV5-27Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,1 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 8,50Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации T614L (AAV5-28Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,5 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 4,11Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации N679K (AAV5-29Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,5 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 6,85Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации P723V (AAV5-30Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,2 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 8,77Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации V431Y (AAV5-31Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,4 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 6,58Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации A616D (AAV5-32Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,6 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 4,39Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации W683R (AAV5-33Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,3 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 3,56Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S222A (AAV5-34Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,8 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 4,93Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации R285L (AAV5-35Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,1 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 5,76Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации Q340A (AAV5-36Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,4 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 3,84Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S420F (AAV5-37Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,5 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 9,59Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S680A (AAV5-38Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,2 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 6,03Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации T721V (AAV5-39Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,1 раза с 2,74Е+09 вг/мл до 1,40Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

Пример 12. Эффективность наработки векторов на основе модифицированного аденоассоциированного вируса 9 серотипа (rAAV9)

Для получения частиц rAAV с модифицированным капсидом 9 серотипа, клетки-продуценты НЕК293 трансфецировали с использованием полиэтиленимина (PEI, linear, MW 25000, Polyscinces, Inc.) одновременно 3 плазмидами:

1) Плазмидой, содержащей нуклеотидные последовательности аденовируса, кодирующие белки и РНК, необходимые для сборки частиц rAAV (хелперная плазмида);

2) Плазмидой, содержащей нуклеотидную природную последовательность гена Rep аденоассоциированного вируса, а также последовательность модифицированного гена Сар, которую выбирают из группы: нуклеотидная последовательность SEQ ID NO: 241, 247, 253, 259, 265, 271, 277, 283, 289, 295, 301, 307, 313, 319, 325, 331, 337, 343, 349, 355, 361 или 367 или любая другая нуклеотидная последовательность, кодирующая белок VP1 с аминокислотными последовательностями SEQ ID No: 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368 и белки VP2 и VP3 с альтернативных рамок считывания используемой нуклеотидной последовательности, где VP2 может иметь любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID No: 244, 250, 256, 262, 268, 274, 280,286, 292, 298, 304, 310, 316, 322, 328, 334, 340, 346, 352, 358, 364 или 370;

a VP3 может иметь любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID No: 246, 252, 258, 264, 270, 276, 282, 288, 294, 300, 306, 312, 318, 324, 330, 336, 342, 348, 354, 360, 366 или 372;

3) Плазмидой, содержащей гетерологичный геном частицы rAAV, кодирующий целевой ген, предназначенный для доставки в клетки пациента.

Данный набор генов обеспечивает сборку вирусных частиц rAAV и инкапсидирование в них целевого генома в течение 72 часов. Через 72 часа после трансфекции клетки-продуценты подвергали лизису (TAKARA BIO INC, Japanese) с высвобождением частиц rAAV, полученные вектора обрабатывали ДНКазой I (Invitrogen, USA) в течение 2 часов при 37°С, затем еще 2 часа протеиназой К (Invitrogen, USA) при 56°С. Титр полученных частиц rAAV проверяли с помощью количественной ПЦР (TaqMan, Applied Biosystems, USA) с использованием сета олигонуклеотидов состоящего из прямого праймера 5'-ACCACATGAAGCAGCACGAC-3', обратного праймера 5'-TCAGCTCGATGCGGTTCAC-3', и зонда 5'-HEX-CATGCCCGAAGGCTACGTCCAG-BHQ1-3' специфичного к последовательности GFP.

Авторами изобретения было неожиданно установлено, что наличие одной или нескольких мутаций, которые выбраны из группы которые выбраны из группы S232T, D297E, Q351K, Q351R, C396V, D433Y, L444R, Y478F, G604N, G627K, T625L, T625V, S692T, T733V, A427R, M635D, W695R, R296L, Q351A, Y395F, R434L, N691A в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа, приводило к существенному увеличению эффективности упаковки трансгена векторами на основе rAAV с указанными выше мутациями. К примеру, при помощи метода количественной ПЦР удалось выявить изменение количества копий упакованного гетерологичного генома частицы rAAV, кодирующего целевой ген GFP (Фиг. 8).

При наличии мутации S232T (AAV9-01Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,9 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,19Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации D297E (AAV9-02Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,2 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 2,03Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Q351K (AAV9-03Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,5 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 9,30Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Q351R (AAV9-04Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,5 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,60Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации C396V (AAV9-05Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,9 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,17Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации D433Y (AAV9-06Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,9 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,85Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации L444R (AAV9-07Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,9 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,23Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Y478F (AAV9-08Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,0 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 3,14Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации G604N (AAV9-09Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,5 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,61Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации G627K (AAV9-10Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,8 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,14Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации T625L (AAV9-llMut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,6 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 2,91Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации T625V (AAV9-12Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 5,7 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 3,62Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации S692T (AAV9-13Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,1 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,32Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации T733V (AAV9-14Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,0 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,89Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации A427R (AAV9-15Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,6 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 9,86Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации M635D (AAV9-16Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,9 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,21Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации W695R (AAV9-17Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 1,5 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 9,41Е+09 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации R296L (AAV9-18Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 3,0 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,93Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Q351A (AAV9-19Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 2,0 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 1,29Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Y395F (AAV9-20Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,6 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 2,91Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации R434L (AAV9-21Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,0 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 2,50Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации N691A (AAV9-22Mut-GFP) количество упакованных вирусных геномов, увеличивалось в 4,5 раза с 6,32Е+09 вг/мл до 2,85Е+10 вг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

Пример 13. Увеличение эффективности трансдукции клеток препаратами на основе rAAV5, содержащими точечные мутации в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S

Дизайн эксперимента:

В лунки 12-луночных планшетов были посеяны клетки линии SK-Hepl. Посев проводили в ростовую среду: ЕМЕМ с глутамином, 10% сыворотки крупного рогатого скота. Плотность посадки клеток составила 10000 клеток/см2. При постановке трансдукции подготовленные заранее клетки были трансдуцированы при MOI 1250 вг/клетка. Все образцы были поставлены в трипликатах. Для негативного контроля были использованы интактные клетки.

Анализ эффективности трансдукции проводили по интенсивности сигнала репортерного белка GFP с помощью проточного цитометра Guava EasyCyte и программного обеспечения GuavaSoft.

Авторами изобретения было неожиданно установлено, что наличие одной или нескольких мутаций, которые выбраны из группы G226A, D286E, L341Y, C387V, Q421H, Р466Т, S594Q, T614L, N679K, P723V, V431Y, A616D, W683R, S222A, R285L, Q340A, S420F, S680A, T721V в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S, приводило к статистически значимому увеличению эффективности доставки трансгена векторами на основе rAAV с указанными выше мутациями. К примеру, при помощи метода проточной цитометрии удалось выявить изменение количества GFP позитивных клеток спустя 48 часов после трансдукции линии SK-Hepl препаратами на основе rAAV с белком VP1 капсида AAV5 дикого типа или белком VP1 капсида AAV5 дикого типа, несущим одну или несколько мутаций, которые выбраны из группы: G226A, D286E, L341Y, C387V, Q421H, Р466Т, S594Q, T614L, N679K, P723V, V431Y, A616D, W683R, S222A, R285L, Q340A, S420F, S680A, T721V в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S (Фиг. 9, Фиг. 10).

При одновременном наличии мутаций S2A и Т71 IS (AAV5-01Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,16 раза с 20,11% до 43,44% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, G226A и T711S (AAV5-02Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,02 раза с 20,11% до 40,69% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, D286E и T711S (AAV5-03Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,90 раза с 20,11% до 38,17% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, L341Y и T711S (AAV5-04Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,75 раза с 20,11% до 35,27% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, C387V и T711S (AAV5-05Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,10 раза с 20,11% до 42,22% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, Q421H и T711S (AAV5-06Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,64 раза с 20,11% до 32,97% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, Р466Т и T711S (AAV5-07Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,41 раза с 20,11% до 28,35% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S594Q и T711S (AAV5-08Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,08 раза с 20,11% до 41,82% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, T614L и T711S (AAV5-09Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,36 раза с 20,11% до 47,50% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, N679K и T711S (AAV5-10Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,67 раза с 20,11% до 33,55% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, P723V и T711S (AAV5-11Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,87 раза с 20,11% до 37,60% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, V431Y и T711S (AAV5-12Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,27 раза с 20,11% до 25,54% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, A616D и T711S (AAV5-13Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,12 раза с 20,11% до 42,63% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, W683R и T711S (AAV5-14Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,26 раза с 20,11% до 25,33% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S222A и T711S (AAV5-15Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,57 раза с 20,11% до 31,57% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, R285L и T711S (AAV5-16Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,38 раза с 20,11% до 27,75% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, Q340A и T711S (AAV5-17Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,45 раза с 20,11% до 29,15% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S420F и T711S (AAV5-18Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,57 раза с 20,11% до 31,57% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, S680A и T711S (AAV5-19Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,68 раза с 20,11% до 33,78% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При одновременном наличии мутаций S2A, T721V и T711S (AAV5-20Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,01 раза с 20,11% до 40,41% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации G226A (AAV5-21Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,29 раза с 20,11% до 34,10% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации D286E (AAV5-22Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,27 раза с 20,11% до 33,57% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации L341Y (AAV5-23Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,41 раза с 20,11% до 37,08% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации C387V (AAV5-24Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,85 раза с 20,11% до 48,62% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации Q421H (AAV5-25Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,52 раза с 20,11% до 40,05% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации Р466Т (AAV5-26Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,33 раза с 20,11% до 34,94% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S594Q (AAV5-27Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,60 раза с 20,11% до 42,26% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации T614L (AAV5-28Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,26 раза с 20,11% до 33,16% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации N679K (AAV5-29Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,24 раза с 20,11% до 32,78% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации P723V (AAV5-30Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,58 раза с 20,11% до 41,67% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации V431Y (AAV5-31Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,27 раза с 20,11% до 33,46% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации A616D (AAV5-32Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,46 раза с 20,11% до 38,47% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации W683R (AAV5-33Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,52 раза с 20,11% до 40,05% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S222A (AAV5-34Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,34 раза с 20,11% до 35,31% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации R285L (AAV5-35Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,55 раза с 20,11% до 40,84% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации Q340A (AAV5-36Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,44 раза с 20,11% до 37,94% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S420F (AAV5-37Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,63 раза с 20,11% до 42,95% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации S680A (AAV5-38Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,71 раза с 20,11% до 45,06% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

При наличии единичной мутации T721V (AAV5-39Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 2,06 раза с 20,11% до 54,40% по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-GFP).

Пример 14. Увеличение эффективности трансдукции клеток препаратами на основе rAAV9, содержащими точечные мутации в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа

Дизайн эксперимента:

В лунки 12-луночных планшетов были посеяны клетки линии HeLa. Посев проводили в ростовую среду: ЕМЕМ с глутамином, 10% сыворотки крупного рогатого скота. Плотность посадки клеток составила 10000 клеток/см2. При постановке трансдукции подготовленные заранее клетки были трансдуцированы при MOI 100000 вг/клетка. Все образцы были поставлены в трипликатах. Для негативного контроля были использованы интактные клетки.

Анализ эффективности трансдукции проводили по интенсивности сигнала репортерного белка GFP с помощью проточного цитометра Guava EasyCyte и программного обеспечения GuavaSoft.

Авторами изобретения было неожиданно установлено, что наличие одной или нескольких мутаций, которые выбраны из группы S232T, D297E, Q351K, Q351R, C396V, D433Y, L444R, Y478F, G604N, G627K, T625L, T625V, S692T, T733V, A427R, M635D, W695R, R296L, Q351A, Y395F, R434L, N691A в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа, приводило к существенному увеличению эффективности доставки трансгена векторами на основе rAAV с указанными выше мутациями. К примеру, при помощи метода проточной цитометрии удалось выявить изменение количества GFP позитивных клеток спустя 48 часов после трансдукции линии HeLa препаратами на основе rAAV с белком VP 1 капсида AAV9 дикого типа или белком VP1 капсида AAV9 дикого типа, несущим одну или несколько мутаций, которые выбраны из группы: S232T, D297E, Q351K, Q351R, C396V, D433Y, L444R, Y478F, G604N, G627K, T625L, T625V, S692T, T733V, A427R, M635D, W695R, R296L, Q351A, Y395F, R434L, N691A в белке VP1 капсида rAAV9 дикого (Фиг. 11).

При наличии мутации S232T (AAV9-01Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,21 раза с 27,53% до 33,31% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации D297E (AAV9-02Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,25 раза с 27,53% до 34,41% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Q351K (AAV9-03Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,30 раза с 27,53% до 35,87% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Q351R (AAV9-04Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,16 раза с 27,53% до 31,93% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации C396V (AAV9-05Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,37 раза с 27,53% до 37,74% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации D433Y (AAV9-06Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,10 раза с 27,53% до 30,28% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации L444R (AAV9-07Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,40 раза с 27,53% до 38,45% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Y478F (AAV9-08Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,56 раза с 27,53% до 42,95% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации G604N (AAV9-09Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,25 раза с 27,53% до 34,32% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации G627K (AAV9-10Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,24 раза с 27,53% до 34,14% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации T625L (AAV9-llMut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,45 раза с 27,53% до 39,92% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации T625V (AAV9-12Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,49 раза с 27,53% до 41,02% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации S692T (AAV9-13Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,38 раза с 27,53% до 37,99% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации T733V (AAV9-14Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,44 раза с 27,53% до 39,73% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации A427R (AAV9-15Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,23 раза с 27,53% до 33,86% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации M635D (AAV9-16Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,22 раза с 27,53% до 33,59% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации W695R (AAV9-17Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,47 раза с 27,53% до 40,47% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации R296L (AAV9-18Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,26 раза с 27,53% до 34,69% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Q351A (AAV9-19Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,35 раза с 27,53% до 37,17% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации Y395F (AAV9-20Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,48 раза с 27,53% до 40,74% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации R434L (AAV9-21Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,67 раза с 27,53% до 45,91% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

При наличии мутации N691A (AAV9-22Mut-GFP) количество клеток, экспрессировавших GFP, увеличивалось в 1,72 раза с 27,53% до 47,47% по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut-GFP).

Пример 15. Увеличение продукции целевого белка, кодируемого трансгеном, после трансдукции клеток препаратами на основе rAAV5, содержащими единичные мутации в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S

Дизайн эксперимента:

В лунки 12-луночных планшетов были посеяны клетки линии SK-Hepl. Посев проводили в ростовую среду: ЕМЕМ с глутамином, 10% сыворотки крупного рогатого скота. Плотность посадки клеток составила 10000 клеток/см2. При постановке трансдукции подготовленные заранее клетки были трансдуцированы при MOI 10000 вг/клетка. Все образцы были поставлены в трипликатах. Для негативного контроля были использованы интактные клетки.

Анализ количества белка FIX в культуральной жидкости 7 дней спустя после трансдукции оценивался при помощи набора ИФА Human Factor IX ELISA Kit. Использованное разведение образцов - 1:50. Процедура была проведена согласно инструкции производителя.

Авторами изобретения было неожиданно установлено, что наличие одной или нескольких мутаций, которые выбраны из группы: G226A, D286E, L341Y, C387V, Q421H, Р466Т, S594Q, T614L, N679K, P723V, V431Y, A616D, W683R, S222A, R285L, Q340A, S420F, S680A, T721V в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S, приводило к существенному увеличению продукции белка FIX после трансдукции клеток линии SK-Hepl векторами на основе rAAV5 с указанными выше мутациями. К примеру, метод иммуноферментного анализа (ИФА) позволил выявить повышение количества белка FIX в среде культивирования спустя 7 дней после трансдукции клеток линии SK-Hepl препаратами на основе rAAV с белком VP1 капсида AAV5 дикого типа или белком VP1 капсида AAV5 дикого типа, несущим одну или несколько мутаций, которые выбраны из группы: G226A, D286E, L341Y, C387V, Q421H, Р466Т, S594Q, T614L, N679K, P723V, V431Y, A616D, W683R, S222A, R285L, Q340A, S420F, S680A, T721V в белке VP1 капсида rAAV5 дикого типа или в белке VP1 капсида rAAV5, который уже содержит мутации S2A и T711S (Фиг. 12, Фиг. 13).

При одновременном наличии мутаций S2A, T711S (AAV5-01Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,76 раза с 628,67 нг/мл до 1736,67 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, G226A и T711S (AAV5-02Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,85 раза с 628,67 нг/мл до 1161,83 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, D286E и T711S (AAV5-03Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,71 раза с 628,67 нг/мл до 1075,02 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, L341Y и T711S (AAV5-04Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,65 раза с 628,67 нг/мл до 1037,30 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, C387V и T711S (AAV5-05Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,28 раза с 628,67 нг/мл до 1433,36 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, Q421H и T711S (AAV5-06Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,67 раза с 628,67 нг/мл до 1049,87 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, Р466Т и T711S (AAV5-07Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,21 раза с 628,67 нг/мл до 763,33 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, S594Q и T711S (AAV5-08Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,26 раза с 628,67 нг/мл до 792,12 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, T614L и T711S (AAV5-09Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,17 раза с 628,67 нг/мл до 1362,67 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, N679K и T711S (AAV5-10Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,98 раза с 628,67 нг/мл до 1244,76 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, P723V и T711S (AAV5-llMut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,69 раза с 628,67 нг/мл до 1062,45 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, V431Y и T711S (AAV5-12Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,12 раза с 628,67 нг/мл до 704,11 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, A616D и T711S (AAV5-13Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,15 раза с 628,67 нг/мл до 1351,63 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, W683R и T711S (AAV5-14Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,08 раза с 628,67 нг/мл до 678,96 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, S222A и T711S (AAV5-15Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,30 раза с 628,67 нг/мл до 817,27 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, R285L и T711S (AAV5-16Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,16 раза с 628,67 нг/мл до 729,25 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, Q340A и T711S (AAV5-17Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,36 раза с 628,67 нг/мл до 854,99 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, S420F и T711S (AAV5-18Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,19 раза с 628,67 нг/мл до 745,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, S680A и T711S (AAV5-19Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,52 раза с 628,67 нг/мл до 955,57 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut-FIX).

При одновременном наличии мутаций S2A, T721V и T711S (AAV5-20Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,79 раза с 628,67 нг/мл до 1125,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации G226A (AAV5-21Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,56 раза с 653,19 нг/мл до 1020,59 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации D286E (AAV5-22Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,63 раза с 653,19 нг/мл до 1063,78 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NuIlMut- FIX).

При наличии единичной мутации L341Y (AAV5-23Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,95 раза с 653,19 нг/мл до 1271,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации C387V (AAV5-24Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,81 раза с 653,19 нг/мл до 1184,04 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации Q421H (AAV5-25Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,92 раза с 653,19 нг/мл до 1254,12 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации Р466Т (AAV5-26Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,73 раза с 653,19 нг/мл до 1130,02 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации S594Q (AAV5-27Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,88 раза с 653,19 нг/мл до 1228,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации T614L (AAV5-28Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,40 раза с 653,19 нг/мл до 915,81 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации N679K (AAV5-29Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,21 раза с 653,19 нг/мл до 790,36 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации P723V (AAV5-30Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,35 раза с 653,19 нг/мл до 881,81 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации V431Y (AAV5-31Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,34 раза с 653,19 нг/мл до 875,27 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации A616D (AAV5-32Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,11 раза с 653,19 нг/мл до 727,75 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации W683R (AAV5-33Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,57 раза с 653,19 нг/мл до 1025,51 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации S222A (AAV5-34Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,78 раза с 653,19 нг/мл до 1162,68 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации R285L (AAV5-35Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,47 раза с 653,19 нг/мл до 960,19 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации Q340A (AAV5-36Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,64 раза с 653,19 нг/мл до 1071,23 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации S420F (AAV5-37Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,24 раза с 653,19 нг/мл до 809,96 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации S680A (AAV5-38Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,37 раза с 653,19 нг/мл до '894,87 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

При наличии единичной мутации T721V (AAV5-39Mut-FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,96 раза с 653,19 нг/мл до 1280,25 нг/мл по сравнению с контрольным AAV5 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV5-NullMut- FIX).

Пример 16. Увеличение продукции целевого белка, кодируемого трансгеном, после трансдукции клеток препаратами на основе rAAV9, содержащими мутации в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа

Дизайн эксперимента:

В лунки 12-луночных планшетов были посеяны клетки линии CHO-K1-S. Посев проводили в ростовую среду: ДМЕМ/F12 с глутамином, содержание глюкозы 4,5 г/л, 5% сыворотки крупного рогатого скота. Плотность посадки клеток составила 10000 клеток/см2. При постановке трансдукции подготовленные заранее клетки были трансдуцированы при MOI 200000 вг/клетка. Все образцы были поставлены в трипликатах. Для негативного контроля были использованы интактные клетки.

Анализ количества белка FIX в культуральной жидкости 7 дней спустя после трансдукции оценивался при помощи набора ИФА Human Factor IX ELISA Kit. Использованное разведение образцов - 1:25. Процедура была проведена согласно инструкции производителя.

Авторами изобретения было неожиданно установлено, что наличие одной или нескольких мутаций, которые выбраны из группы: группы S232T, D297E, Q351K, Q351R, C396V, D433Y, L444R, Y478F, G604N, G627K, T625L, T625V, S692T, T733V, A427R, M635D, W695R, R296L, Q351A, Y395F, R434L, N691A в белке VP1 капсида rAAV9 дикого типа, приводило к существенному увеличению продукции белка FIX после трансдукции клеток линии CHO-K1-S векторами на основе rAAV с указанными выше мутациями. К примеру, метод иммуноферментного анализа (ИФА) позволил выявить повышение количества белка FIX в среде культивирования спустя 7 дней после трансдукции клеток линии CHO-K1-S препаратами на основе rAAV с белком VP1 капсида AAV9 дикого типа несущим одну или несколько мутаций, которые выбраны из группы: S232T, D297E, Q351K, Q351R, C396V, D433Y, L444R, Y478F, G604N, G627K, T625L, T625V, S692T, T733V, A427R, M635D, W695R, R296L, Q351A, Y395F, R434L, N691A (Фиг. 14).

При наличии мутации S232T (AAV9-01Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,18 раза с 947,5 нг/мл до 1118,05 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации D297E (AAV9-02Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,20 раза с 947,5 нг/мл до 1137,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации Q35 IK (AAV9-03Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,26 раза с 947,5 нг/мл до 1195,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации Q351R (AAV9-04Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,22 раза с 947,5 нг/мл до 1157,17 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации C396V (AAV9-05Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,64 раза с 947,5 нг/мл до 1554,17 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации D433 Y (AAV9-06Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,17 раза с 947,5 нг/мл до 1110,50 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации L444R (AAV9-07Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,20 раза с 947,5 нг/мл до 1141,50 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации Y478F (AAV9-08Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,01 раза с 947,5 нг/мл до 1908,50 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации G604N (AAV9-09Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,26 раза с 947,5 нг/мл до 1197,67 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации G627K (AAV9-10Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,23 раза с 947,5 нг/мл до 1166,67 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации T625L (AAV9-1 lMut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,77 раза с 947,5 нг/мл до 1677,50 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации T625V (AAV9-12Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,83 раза с 947,5 нг/мл до 1736,67 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации S692T (AAV9-13Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,55 раза с 947,5 нг/мл до 1464,83 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации T733V (AAV9-14Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,55 раза с 947,5 нг/мл до 1469,50 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации A427R (AAV9-15Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,65 раза с 947,5 нг/мл до 1563,38 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации M635D (AAV9-16Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,70 раза с 947,5 нг/мл до 1607,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации W695R (AAV9-17Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,32 раза с 947,5 нг/мл до 2201,67 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации R296L (AAV9-18Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,23 раза с 947,5 нг/мл до 1161,83 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NuIlMut- FIX).

При наличии мутации Q351A (AAV9-19Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,48 раза с 947,5 нг/мл до 1402,30 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации Y395F (AAV9-20Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,21 раза с 947,5 нг/мл до 1145,00 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации R434L (AAV9-21Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 1,54 раза с 947,5 нг/мл до 1456,83 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

При наличии мутации N691A (AAV9-22Mut- FIX) количество продуцируемого белка увеличивалось в 2,33 раза с 947,5 нг/мл до 2203,33 нг/мл по сравнению с контрольным AAV9 с белком VP1 капсида дикого типа (AAV9-NullMut- FIX).

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ООО "АНАБИОН"

<120> Способ получения модифицированного капсида аденоассоциированного вируса

<160> 378

<170> BiSSAP 1.3.6

<210> 1

<211> 2175

<212> DNA

<213> Природная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая природную последовательность

белка VP1 капсида AAV5 дикого типа (AAV5 Capsid VP1 WT)

<400> 1

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 2

<211> 724

<212> PRT

<213> Природная последовательность

<220>

<223> природная последовательность белка VP1 капсида AAV5 дикого типа

(AAV5 Capsid VP1 WT)

<400> 2

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 3

<211> 1767

<212> DNA

<213> Природная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая природную последовательность

белка VP2 капсида AAV5 дикого типа (AAV5 Capsid VP2 WT)

<400> 3

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 4

<211> 588

<212> PRT

<213> Природная последовательность

<220>

<223> природная последовательность белка VP2 капсида AAV5 дикого типа

(AAV5 Capsid VP2 WT)

<400> 4

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 5

<211> 1599

<212> DNA

<213> Природная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая природную последовательность

белка VP3 капсида AAV5 дикого типа (AAV5 Capsid VP3 WT)

<400> 5

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 6

<211> 532

<212> PRT

<213> Природная последовательность

<220>

<223> природная последовательность белка VP3 капсида AAV5 дикого типа

(AAV5 Capsid VP3 WT)

<400> 6

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 7

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A и T711S (AAV5 Capsid

VP1 S2A T711S)

<400> 7

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 8

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T711S)

<400> 8

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 9

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену T575S (AAV5 Capsid VP2

T575S)

<400> 9

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 10

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену T575S (AAV5 Capsid VP2 T575S)

<400> 10

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 11

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену T519S (AAV5 Capsid VP3

T519S)

<400> 11

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 12

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену T519S (AAV5 Capsid VP3 T519S)

<400> 12

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 13

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену G226A (AAV5 Capsid VP1

G226A)

<400> 13

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggccga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 14

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену G226A (AAV5 Capsid VP1 G226A)

<400> 14

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Ala Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 15

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену G90A (AAV5 Capsid VP2 G90A)

<400> 15

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatggcc gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 16

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену G90A (AAV5 Capsid VP2 G90A)

<400> 16

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Ala Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 17

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену G34A (AAV5 Capsid VP3 G34A)

<400> 17

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg ccgacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 18

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену G34A (AAV5 Capsid VP3 G34A)

<400> 18

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Ala Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 19

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A, G226A и T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A, G226A и T711S)

<400> 19

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggccga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 20

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A, G226A и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, G226A и

T711S)

<400> 20

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Ala Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 21

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены G90A и T575S (AAV5 Capsid

VP2 G90A и T575S)

<400> 21

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatggcc gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 22

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены G90A и T575S (AAV5 Capsid VP2 G90A и T575S)

<400> 22

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Ala Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 23

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены G34A T519S (AAV5 Capsid VP3

G34A T519S)

<400> 23

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg ccgacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 24

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены

<400> 24

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Ala Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 25

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену D286E (AAV5 Capsid VP1

D286E)

<400> 25

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagagtg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 26

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену D286E (AAV5 Capsid VP1 D286E)

<400> 26

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Glu Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 27

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену D150E (AAV5 Capsid VP2

D150E)

<400> 27

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagag tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 28

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену D150E (AAV5 Capsid VP2 D150E)

<400> 28

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Glu Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 29

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену D94E (AAV5 Capsid VP3 D94E)

<400> 29

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag agtggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 30

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену D94E (AAV5 Capsid VP3 D94E)

<400> 30

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Glu Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 31

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A, D286E и T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A, D286E и T711S)

<400> 31

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagagtg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 32

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A, D286E и T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, D286E и

T711S)

<400> 32

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Glu Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 33

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены D150E и T575S (AAV5 Capsid

VP2 D150E и T575S)

<400> 33

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagag tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 34

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены D150E и T575S (AAV5 Capsid VP2 D150E и T575S)

<400> 34

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Glu Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 35

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены D94E и T519S (AAV5 Capsid

VP3 D94E и T519S)

<400> 35

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag agtggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 36

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены D94E и T519S (AAV5 Capsid VP3 D94E и T519S)

<400> 36

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Glu Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 37

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену L341Y (AAV5 Capsid VP1

L341Y)

<400> 37

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

tacccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 38

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену L341Y (AAV5 Capsid VP1 L341Y)

<400> 38

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Tyr Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 39

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену L205Y (AAV5 Capsid VP2

L205Y)

<400> 39

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agtatcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 40

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену L205Y (AAV5 Capsid VP2 L205Y)

<400> 40

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Tyr Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 41

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену L149Y (AAV5 Capsid VP3

L149Y)

<400> 41

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagtatccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 42

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену L149Y (AAV5 Capsid VP3 L149Y)

<400> 42

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Tyr Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 43

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A, L341Y, T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A, L341Y, T711S)

<400> 43

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

tatccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 44

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A, L341Y, T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, L341Y,

T711S)

<400> 44

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Tyr Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 45

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены L205Y, T575S (AAV5 Capsid

VP2 L205Y, T575S)

<400> 45

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agtatcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 46

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены L205Y, T575S (AAV5 Capsid VP2 L205Y, T575S)

<400> 46

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Tyr Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 47

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены L149Y, T519S (AAV5 Capsid

VP3 L149Y, T519S)

<400> 47

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagtatccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 48

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены L149Y, T519S (AAV5 Capsid VP3 L149Y, T519S)

<400> 48

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Tyr Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 49

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену С387V (AAV5 Capsid VP1

С387V)

<400> 49

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttcgt cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 50

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену С387V (AAV5 Capsid VP1 С387V)

<400> 50

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Val Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 51

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену С251V (AAV5 Capsid VP2

С251V)

<400> 51

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc gtcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 52

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену С251V (AAV5 Capsid VP2 С251V)

<400> 52

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Val Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 53

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену С195V (AAV5 Capsid VP3

С195V)

<400> 53

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tcgtcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 54

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену С195V (AAV5 Capsid VP3 С195V)

<400> 54

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Val Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 55

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A, С387V, T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A, С387V, T711S)

<400> 55

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttcgt cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 56

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A, С387V, T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A, С387V,

T711S)

<400> 56

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Val Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 57

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены С251V, T575S (AAV5 Capsid

VP2 С251V, T575S)

<400> 57

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc gtcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 58

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены С251V, T575S (AAV5 Capsid VP2 С251V, T575S)

<400> 58

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Val Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 59

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены С195V, T519S (AAV5 Capsid

VP3 С195V, T519S)

<400> 59

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tcgtcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 60

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены С195V, T519S (AAV5 Capsid VP3 С195V, T519S)

<400> 60

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Val Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 61

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену Q421H (AAV5 Capsid VP1

Q421H)

<400> 61

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cacaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 62

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену Q421H (AAV5 Capsid VP1 Q421H)

<400> 62

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser His Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 63

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену Q285H (AAV5 Capsid VP2

Q285H)

<400> 63

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcacaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 64

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену Q285H (AAV5 Capsid VP2 Q285H)

<400> 64

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser His Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 65

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену Q229H (AAV5 Capsid VP3

Q229H)

<400> 65

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcacaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 66

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену Q229H (AAV5 Capsid VP3 Q229H)

<400> 66

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser His Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 67

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A Q421H T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A Q421H T711S)

<400> 67

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cacaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 68

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A Q421H T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Q421H T711S)

<400> 68

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser His Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 69

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены Q285H T575S (AAV5 Capsid

VP2 Q285H T575S)

<400> 69

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcacaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 70

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены Q285H T575S (AAV5 Capsid VP2 Q285H T575S)

<400> 70

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser His Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 71

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены Q229H T519S (AAV5 Capsid

VP3 Q229H T519S)

<400> 71

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcacaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 72

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены Q229H T519S (AAV5 Capsid VP3 Q229H T519S)

<400> 72

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser His Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 73

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену P466T (AAV5 Capsid VP1

P466T)

<400> 73

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcaccgg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 74

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену P466T (AAV5 Capsid VP1 P466T)

<400> 74

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Thr Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 75

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену P330T (AAV5 Capsid VP2

P330T)

<400> 75

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcacc gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 76

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену P330T (AAV5 Capsid VP2 P330T)

<400> 76

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Thr Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 77

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену P274T (AAV5 Capsid VP3

P274T)

<400> 77

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttca ccgggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 78

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену P274T (AAV5 Capsid VP3 P274T)

<400> 78

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Thr Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 79

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A P466T T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A P466T T711S)

<400> 79

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcaccgg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 80

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A P466T T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A P466T T711S)

<400> 80

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Thr Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 81

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены P330T T575S (AAV5 Capsid

VP2 P330T T575S)

<400> 81

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcacc gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 82

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены P330T T575S (AAV5 Capsid VP2 P330T T575S)

<400> 82

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Thr Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 83

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены P274T T519S (AAV5 Capsid

VP3 P274T T519S)

<400> 83

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttca ccgggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 84

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены P274T T519S (AAV5 Capsid VP3 P274T T519S)

<400> 84

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Thr Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 85

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену S594Q (AAV5 Capsid VP1

S594Q)

<400> 85

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggcc aggtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 86

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену S594Q (AAV5 Capsid VP1 S594Q)

<400> 86

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Gln Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 87

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену S458Q (AAV5 Capsid VP2

S458Q)

<400> 87

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg ccaggtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 88

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену S458Q (AAV5 Capsid VP2 S458Q)

<400> 88

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Gln Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 89

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену S402Q (AAV5 Capsid VP3

S402Q)

<400> 89

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggccaggtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 90

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену S402Q (AAV5 Capsid VP3 S402Q)

<400> 90

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Gln Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 91

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A S594Q T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A S594Q T711S)

<400> 91

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggcc aggtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 92

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A S594Q T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S594Q T711S)

<400> 92

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Gln Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 93

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены S458Q T575S (AAV5 Capsid

VP2 S458Q T575S)

<400> 93

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg ccaggtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 94

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены S458Q T575S (AAV5 Capsid VP2 S458Q T575S)

<400> 94

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Gln Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 95

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены S402Q T519S (AAV5 Capsid

VP3 S402Q T519S)

<400> 95

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggccaggtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 96

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены S402Q T519S (AAV5 Capsid VP3 S402Q T519S)

<400> 96

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Gln Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 97

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены T614L (AAV5 Capsid VP1

T614L)

<400> 97

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagagc tcggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 98

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены T614L (AAV5 Capsid VP1 T614L)

<400> 98

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Leu Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 99

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены T478L (AAV5 Capsid VP2

T478L)

<400> 99

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gctcggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 100

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены T478L (AAV5 Capsid VP2 T478L)

<400> 100

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Leu Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 101

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены T422L (AAV5 Capsid VP3

T422L)

<400> 101

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagctcgggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 102

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены T422L (AAV5 Capsid VP3 T422L)

<400> 102

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Leu Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 103

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A T614L T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A T614L T711S)

<400> 103

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagagc tcggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 104

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A T614L T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T614L T711S)

<400> 104

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Leu Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 105

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены T478L T575S (AAV5 Capsid

VP2 T478L T575S)

<400> 105

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gctcggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 106

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены T478L T575S (AAV5 Capsid VP2 T478L T575S)

<400> 106

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Leu Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 107

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены (AAV5 Capsid VP3 T422L

T519S)

<400> 107

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagctcgggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 108

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены (AAV5 Capsid VP3 T422L T519S)

<400> 108

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Leu Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 109

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замен N679K (AAV5 Capsid VP1

N679K)

<400> 109

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaagtcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 110

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену N679K (AAV5 Capsid VP1 N679K)

<400> 110

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Lys Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 111

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену N543K (AAV5 Capsid VP2

N543K)

<400> 111

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaagt ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 112

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену N543K (AAV5 Capsid VP2 N543K)

<400> 112

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Lys Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 113

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену N487K (AAV5 Capsid VP3

N487K)

<400> 113

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa gtccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 114

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену N487K (AAV5 Capsid VP3 N487K)

<400> 114

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Lys Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 115

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A N679K T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A N679K T711S)

<400> 115

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaagtcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 116

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A N679K T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A N679K T711S)

<400> 116

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Lys Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 117

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены N543K T575S (AAV5 Capsid

VP2 N543K T575S)

<400> 117

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaagt ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 118

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены N543K T575S (AAV5 Capsid VP2 N543K T575S)

<400> 118

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Lys Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 119

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены N487K T519S (AAV5 Capsid

VP3 N487K T519S)

<400> 119

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa gtccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 120

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены N487K T519S (AAV5 Capsid VP3 N487K T519S)

<400> 120

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Lys Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 121

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену P723V (AAV5 Capsid VP1

P723V)

<400> 121

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgagtgc tttaa 2175

<210> 122

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену P723V (AAV5 Capsid VP1 P723V)

<400> 122

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Val Leu

<210> 123

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену P587V (AAV5 Capsid VP2

P587V)

<400> 123

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgagt gctttaa 1767

<210> 124

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену P587V (AAV5 Capsid VP2 P587V)

<400> 124

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Val Leu

580 585

<210> 125

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену P531V (AAV5 Capsid VP3

P531V)

<400> 125

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga gtgctttaa 1599

<210> 126

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену P531V (AAV5 Capsid VP3 P531V)

<400> 126

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Val Leu

530

<210> 127

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены P723V T711S (AAV5 Capsid

VP1 S2A P723V T711S)

<400> 127

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgagtgc tttaa 2175

<210> 128

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены P723V T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A P723V T711S)

<400> 128

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Val Leu

<210> 129

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены P587V T575S (AAV5 Capsid

VP2 P587V T575S)

<400> 129

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgagt gctttaa 1767

<210> 130

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены P587V T575S (AAV5 Capsid VP2 P587V T575S)

<400> 130

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Val Leu

580 585

<210> 131

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены P531V T519S (AAV5 Capsid

VP3 P531V T519S)

<400> 131

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga gtgctttaa 1599

<210> 132

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены P531V T519S (AAV5 Capsid VP3 P531V T519S)

<400> 132

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Val Leu

530

<210> 133

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену V431Y (AAV5 Capsid VP1

V431Y)

<400> 133

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg tacgaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 134

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену V431Y (AAV5 Capsid VP1 V431Y)

<400> 134

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Tyr Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 135

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену V295Y (AAV5 Capsid VP2

V295Y)

<400> 135

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tgtacgacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 136

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену V295Y (AAV5 Capsid VP2 V295Y)

<400> 136

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Tyr Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 137

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену V239Y (AAV5 Capsid VP3

V239Y)

<400> 137

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctgtacgac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 138

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену V239Y (AAV5 Capsid VP3 V239Y)

<400> 138

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Tyr Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 139

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A V431Y T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A V431Y T711S)

<400> 139

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg tacgaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 140

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A V431Y T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A V431Y T711S)

<400> 140

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Tyr Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 141

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены V295Y T575S (AAV5 Capsid

VP2 V295Y T575S)

<400> 141

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tgtacgacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 142

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены V295Y T575S (AAV5 Capsid VP2 V295Y T575S)

<400> 142

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Tyr Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 143

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены V239Y T519S (AAV5 Capsid

VP3 V239Y T519S)

<400> 143

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctgtacgac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 144

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены V239Y T519S (AAV5 Capsid VP3 V239Y T519S)

<400> 144

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Tyr Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 145

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену A616D (AAV5 Capsid VP1

A616D)

<400> 145

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggacca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 146

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену A616D (AAV5 Capsid VP1 A616D)

<400> 146

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Asp His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 147

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену A480D (AAV5 Capsid VP2

A480D)

<400> 147

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggac 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 148

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену A480D (AAV5 Capsid VP2 A480D)

<400> 148

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Asp

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 149

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену A424D (AAV5 Capsid VP3

A424D)

<400> 149

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg accactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 150

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену A424D (AAV5 Capsid VP3 A424D)

<400> 150

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Asp His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 151

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A A616D T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A A616D T711S)

<400> 151

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggacca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 152

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A A616D T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A A616D T711S)

<400> 152

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Asp His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 153

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены A480D T575S (AAV5 Capsid

VP2 A480D T575S)

<400> 153

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggac 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 154

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены A480D T575S (AAV5 Capsid VP2 A480D T575S)

<400> 154

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Asp

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 155

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены A424D T519S (AAV5 Capsid

VP3 A424D T519S)

<400> 155

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg accactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 156

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены A424D T519S (AAV5 Capsid VP3 A424D T519S)

<400> 156

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Asp His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 157

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену W683R (AAV5 Capsid VP1

W683R)

<400> 157

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggagaa acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 158

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену W683R (AAV5 Capsid VP1 W683R)

<400> 158

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 159

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену W547R (AAV5 Capsid VP2

W547R)

<400> 159

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggag aaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 160

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену W547R (AAV5 Capsid VP2 W547R)

<400> 160

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 161

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену W491R (AAV5 Capsid VP3

W491R)

<400> 161

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg agaaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 162

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену W491R (AAV5 Capsid VP3 W491R)

<400> 162

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 163

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A W683R T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A W683R T711S)

<400> 163

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggagaa acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 164

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A W683R T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A W683R T711S)

<400> 164

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 165

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены W547R T575S (AAV5 Capsid

VP2 W547R T575S)

<400> 165

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggag aaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 166

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены W547R T575S (AAV5 Capsid VP2 W547R T575S)

<400> 166

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 167

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены W491R T519S (AAV5 Capsid

VP3 W491R T519S)

<400> 167

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg agaaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 168

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены W491R T519S (AAV5 Capsid VP3 W491R T519S)

<400> 168

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 169

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену S222A (AAV5 Capsid VP1

S222A

<400> 169

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gatgccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 170

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену S222A (AAV5 Capsid VP1 S222A)

<400> 170

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ala Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 171

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену S86A (AAV5 Capsid VP2 S86A)

<400> 171

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgatgccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 172

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену S86A (AAV5 Capsid VP2 S86A)

<400> 172

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ala Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 173

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену S30A (AAV5 Capsid VP3 S30A)

<400> 173

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgatgcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 174

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену S30A (AAV5 Capsid VP3 S30A)

<400> 174

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ala Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 175

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A S222A T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A S222A T711S)

<400> 175

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gatgccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 176

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A S222A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S222A T711S)

<400> 176

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ala Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 177

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены S86A T575S (AAV5 Capsid VP2

S86A T575S)

<400> 177

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgatgccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 178

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены S86A T575S (AAV5 Capsid VP2 S86A T575S)

<400> 178

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ala Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 179

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены S30A T519S (AAV5 Capsid VP3

S30A T519S)

<400> 179

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgatgcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 180

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены S30A T519S (AAV5 Capsid VP3 S30A T519S)

<400> 180

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ala Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 181

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену R285L (AAV5 Capsid VP1

R285L)

<400> 181

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc ccctggactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 182

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену R285L (AAV5 Capsid VP1 R285L)

<400> 182

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Leu Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 183

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену R149L (AAV5 Capsid VP2

R149L)

<400> 183

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag ccccctggac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 184

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену R149L (AAV5 Capsid VP2 R149L)

<400> 184

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Leu Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 185

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену R93L (AAV5 Capsid VP3 R93L)

<400> 185

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agccccctgg actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 186

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену R93L (AAV5 Capsid VP3 R93L)

<400> 186

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Leu Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 187

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A R285L T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A R285L T711S)

<400> 187

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc ccctggactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 188

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A R285L T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A R285L T711S)

<400> 188

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Leu Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 189

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены R149L T575S (AAV5 Capsid

VP2 R149L T575S)

<400> 189

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag ccccctggac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 190

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены R149L T575S (AAV5 Capsid VP2 R149L T575S)

<400> 190

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Leu Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 191

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены R93L T519S (AAV5 Capsid VP3

R93L T519S)

<400> 191

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agccccctgg actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 192

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены R93L T519S (AAV5 Capsid VP3 R93L T519S)

<400> 192

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Leu Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 193

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену Q340A (AAV5 Capsid VP1

Q340A)

<400> 193

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactacgcc 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 194

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену Q340A (AAV5 Capsid VP1 Q340A)

<400> 194

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 195

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену (AAV5 Capsid VP2 Q204A)

<400> 195

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacg ccctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 196

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену (AAV5 Capsid VP2 Q204A)

<400> 196

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 197

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену Q148A (AAV5 Capsid VP3

Q148A)

<400> 197

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta cgccctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 198

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену Q148A (AAV5 Capsid VP3 Q148A)

<400> 198

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 199

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A Q340A T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A Q340A T711S

<400> 199

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactacgcc 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 200

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A Q340A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A Q340A T711S)

<400> 200

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 201

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены Q204A T575S (AAV5 Capsid

VP2 Q204A T575S)

<400> 201

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacg ccctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 202

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены Q204A T575S (AAV5 Capsid VP2 Q204A T575S)

<400> 202

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 203

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены Q148A T519S (AAV5 Capsid

VP3 Q148A T519S)

<400> 203

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta cgccctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 204

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены Q148A T519S (AAV5 Capsid VP3 Q148A T519S)

<400> 204

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 205

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену S420F (AAV5 Capsid VP1

S420F)

<400> 205

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccttc 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 206

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену S420F (AAV5 Capsid VP1 S420F)

<400> 206

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Phe Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 207

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену S284F (AAV5 Capsid VP2

S284F)

<400> 207

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccct tccagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 208

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену S284F (AAV5 Capsid VP2 S284F)

<400> 208

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Phe Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 209

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену S228F (AAV5 Capsid VP3

S228F)

<400> 209

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cttccagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 210

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену S228F (AAV5 Capsid VP3 S228F)

<400> 210

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Phe Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 211

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A S420F T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A S420F T711S)

<400> 211

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccttc 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 212

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A S420F T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S420F T711S)

<400> 212

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Phe Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 213

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены S284F T575S (AAV5 Capsid

VP2 S284F T575S)

<400> 213

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccct tccagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 214

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены S284F T575S (AAV5 Capsid VP2 S284F T575S)

<400> 214

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Phe Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 215

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены S228F T519S (AAV5 Capsid

VP3 S228F T519S)

<400> 215

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cttccagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 216

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены S228F T519S (AAV5 Capsid VP3 S228F T519S)

<400> 216

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Phe Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 217

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену S680A (AAV5 Capsid VP1

S680A)

<400> 217

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaacgcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 218

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену S680A (AAV5 Capsid VP1 S680A)

<400> 218

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ala

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 219

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену S544A (AAV5 Capsid VP2

S544A)

<400> 219

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaacg ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 220

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену S544A (AAV5 Capsid VP2 S544A)

<400> 220

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ala

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 221

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену S488A (AAV5 Capsid VP3

S488A)

<400> 221

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa cgccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 222

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену S488A (AAV5 Capsid VP3 S488A)

<400> 222

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ala Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 223

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A S680A T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A S680A T711S)

<400> 223

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaacgcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

acccgacccc tttaa 2175

<210> 224

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A S680A T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A S680A T711S)

<400> 224

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ala Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Thr Arg Pro Leu

<210> 225

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены S544A T575S (AAV5 Capsid

VP2 S544A T575S

<400> 225

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaacg ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttacccgacc cctttaa 1767

<210> 226

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены S544A T575S (AAV5 Capsid VP2 S544A T575S)

<400> 226

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ala

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Pro Leu

580 585

<210> 227

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены S488A T519S (AAV5 Capsid

VP3 S488A T519S)

<400> 227

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa cgccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttacccga cccctttaa 1599

<210> 228

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены S488A T519S (AAV5 Capsid VP3 S488A T519S)

<400> 228

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ala Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Thr Arg Pro Leu

530

<210> 229

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замену T721V (AAV5 Capsid VP1

T721V)

<400> 229

atgtcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga accaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

gtgcgacccc tttaa 2175

<210> 230

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замену T721V (AAV5 Capsid VP1 T721V)

<400> 230

Met Ser Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Val Arg Pro Leu

<210> 231

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замену T585V (AAV5 Capsid VP2

T585V)

<400> 231

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaaccaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttgtgcgacc cctttaa 1767

<210> 232

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замену T585V (AAV5 Capsid VP2 T585V)

<400> 232

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Val Arg Pro Leu

580 585

<210> 233

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замену T529V (AAV5 Capsid VP3

T529V)

<400> 233

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaaccacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttgtgcga cccctttaa 1599

<210> 234

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замену T529V (AAV5 Capsid VP3 T529V)

<400> 234

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Thr Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Val Arg Pro Leu

530

<210> 235

<211> 2175

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV5, который включает замены S2A T721V T711S (AAV5

Capsid VP1 S2A T721V T711S)

<400> 235

atggcttttg ttgatcaccc tccagattgg ttggaagaag ttggtgaagg tcttcgcgag 60

tttttgggcc ttgaagcggg cccaccgaaa ccaaaaccca atcagcagca tcaagatcaa 120

gcccgtggtc ttgtgctgcc tggttataac tatctcggac ccggaaacgg tctcgatcga 180

ggagagcctg tcaacagggc agacgaggtc gcgcgagagc acgacatctc gtacaacgag 240

cagcttgagg cgggagacaa cccctacctc aagtacaacc acgcggacgc cgagtttcag 300

gagaagctcg ccgacgacac atccttcggg ggaaacctcg gaaaggcagt ctttcaggcc 360

aagaaaaggg ttctcgaacc ttttggcctg gttgaagagg gtgctaagac ggcccctacc 420

ggaaagcgga tagacgacca ctttccaaaa agaaagaagg ctcggaccga agaggactcc 480

aagccttcca cctcgtcaga cgccgaagct ggacccagcg gatcccagca gctgcaaatc 540

ccagcccaac cagcctcaag tttgggagct gatacaatgt ctgcgggagg tggcggccca 600

ttgggcgaca ataaccaagg tgccgatgga gtgggcaatg cctcgggaga ttggcattgc 660

gattccacgt ggatggggga cagagtcgtc accaagtcca cccgaacctg ggtgctgccc 720

agctacaaca accaccagta ccgagagatc aaaagcggct ccgtcgacgg aagcaacgcc 780

aacgcctact ttggatacag caccccctgg gggtactttg actttaaccg cttccacagc 840

cactggagcc cccgagactg gcaaagactc atcaacaact actggggctt cagaccccgg 900

tccctcagag tcaaaatctt caacattcaa gtcaaagagg tcacggtgca ggactccacc 960

accaccatcg ccaacaacct cacctccacc gtccaagtgt ttacggacga cgactaccag 1020

ctgccctacg tcgtcggcaa cgggaccgag ggatgcctgc cggccttccc tccgcaggtc 1080

tttacgctgc cgcagtacgg ttacgcgacg ctgaaccgcg acaacacaga aaatcccacc 1140

gagaggagca gcttcttctg cctagagtac tttcccagca agatgctgag aacgggcaac 1200

aactttgagt ttacctacaa ctttgaggag gtgcccttcc actccagctt cgctcccagt 1260

cagaacctct tcaagctggc caacccgctg gtggaccagt acttgtaccg cttcgtgagc 1320

acaaataaca ctggcggagt ccagttcaac aagaacctgg ccgggagata cgccaacacc 1380

tacaaaaact ggttcccggg gcccatgggc cgaacccagg gctggaacct gggctccggg 1440

gtcaaccgcg ccagtgtcag cgccttcgcc acgaccaata ggatggagct cgagggcgcg 1500

agttaccagg tgcccccgca gccgaacggc atgaccaaca acctccaggg cagcaacacc 1560

tatgccctgg agaacactat gatcttcaac agccagccgg cgaacccggg caccaccgcc 1620

acgtacctcg agggcaacat gctcatcacc agcgagagcg agacgcagcc ggtgaaccgc 1680

gtggcgtaca acgtcggcgg gcagatggcc accaacaacc agagctccac cactgccccc 1740

gcgaccggca cgtacaacct ccaggaaatc gtgcccggca gcgtgtggat ggagagggac 1800

gtgtacctcc aaggacccat ctgggccaag atcccagaga cgggggcgca ctttcacccc 1860

tctccggcca tgggcggatt cggactcaaa cacccaccgc ccatgatgct catcaagaac 1920

acgcctgtgc ccggaaatat caccagcttc tcggacgtgc ccgtcagcag cttcatcacc 1980

cagtacagca ccgggcaggt caccgtggag atggagtggg agctcaagaa ggaaaactcc 2040

aagaggtgga acccagagat ccagtacaca aacaactaca acgaccccca gtttgtggac 2100

tttgccccgg acagcaccgg ggaatacaga agcaccagac ctatcggaac ccgatacctt 2160

gtgcgacccc tttaa 2175

<210> 236

<211> 724

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV5, который

включает замены S2A T721V T711S (AAV5 Capsid VP1 S2A T721V T711S)

<400> 236

Met Ala Phe Val Asp His Pro Pro Asp Trp Leu Glu Glu Val Gly Glu

1 5 10 15

Gly Leu Arg Glu Phe Leu Gly Leu Glu Ala Gly Pro Pro Lys Pro Lys

20 25 30

Pro Asn Gln Gln His Gln Asp Gln Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro Gly

35 40 45

Tyr Asn Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Arg Gly Glu Pro Val

50 55 60

Asn Arg Ala Asp Glu Val Ala Arg Glu His Asp Ile Ser Tyr Asn Glu

65 70 75 80

Gln Leu Glu Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala Asp

85 90 95

Ala Glu Phe Gln Glu Lys Leu Ala Asp Asp Thr Ser Phe Gly Gly Asn

100 105 110

Leu Gly Lys Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Val Leu Glu Pro Phe

115 120 125

Gly Leu Val Glu Glu Gly Ala Lys Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile

130 135 140

Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser

145 150 155 160

Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln

165 170 175

Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr

180 185 190

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

195 200 205

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

210 215 220

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

225 230 235 240

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

245 250 255

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

260 265 270

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

275 280 285

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

290 295 300

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

305 310 315 320

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

325 330 335

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

340 345 350

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

355 360 365

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

370 375 380

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

385 390 395 400

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

405 410 415

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

420 425 430

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

435 440 445

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

450 455 460

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

465 470 475 480

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

485 490 495

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

500 505 510

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

515 520 525

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

530 535 540

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

545 550 555 560

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

565 570 575

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

580 585 590

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

595 600 605

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

610 615 620

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

625 630 635 640

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

645 650 655

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

660 665 670

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

675 680 685

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

690 695 700

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

705 710 715 720

Val Arg Pro Leu

<210> 237

<211> 1767

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV5, который включает замены T585V T575S (AAV5 Capsid

VP2 T585V T575S)

<400> 237

acggccccta ccggaaagcg gatagacgac cactttccaa aaagaaagaa ggctcggacc 60

gaagaggact ccaagccttc cacctcgtca gacgccgaag ctggacccag cggatcccag 120

cagctgcaaa tcccagccca accagcctca agtttgggag ctgatacaat gtctgcggga 180

ggtggcggcc cattgggcga caataaccaa ggtgccgatg gagtgggcaa tgcctcggga 240

gattggcatt gcgattccac gtggatgggg gacagagtcg tcaccaagtc cacccgaacc 300

tgggtgctgc ccagctacaa caaccaccag taccgagaga tcaaaagcgg ctccgtcgac 360

ggaagcaacg ccaacgccta ctttggatac agcaccccct gggggtactt tgactttaac 420

cgcttccaca gccactggag cccccgagac tggcaaagac tcatcaacaa ctactggggc 480

ttcagacccc ggtccctcag agtcaaaatc ttcaacattc aagtcaaaga ggtcacggtg 540

caggactcca ccaccaccat cgccaacaac ctcacctcca ccgtccaagt gtttacggac 600

gacgactacc agctgcccta cgtcgtcggc aacgggaccg agggatgcct gccggccttc 660

cctccgcagg tctttacgct gccgcagtac ggttacgcga cgctgaaccg cgacaacaca 720

gaaaatccca ccgagaggag cagcttcttc tgcctagagt actttcccag caagatgctg 780

agaacgggca acaactttga gtttacctac aactttgagg aggtgccctt ccactccagc 840

ttcgctccca gtcagaacct cttcaagctg gccaacccgc tggtggacca gtacttgtac 900

cgcttcgtga gcacaaataa cactggcgga gtccagttca acaagaacct ggccgggaga 960

tacgccaaca cctacaaaaa ctggttcccg gggcccatgg gccgaaccca gggctggaac 1020

ctgggctccg gggtcaaccg cgccagtgtc agcgccttcg ccacgaccaa taggatggag 1080

ctcgagggcg cgagttacca ggtgcccccg cagccgaacg gcatgaccaa caacctccag 1140

ggcagcaaca cctatgccct ggagaacact atgatcttca acagccagcc ggcgaacccg 1200

ggcaccaccg ccacgtacct cgagggcaac atgctcatca ccagcgagag cgagacgcag 1260

ccggtgaacc gcgtggcgta caacgtcggc gggcagatgg ccaccaacaa ccagagctcc 1320

accactgccc ccgcgaccgg cacgtacaac ctccaggaaa tcgtgcccgg cagcgtgtgg 1380

atggagaggg acgtgtacct ccaaggaccc atctgggcca agatcccaga gacgggggcg 1440

cactttcacc cctctccggc catgggcgga ttcggactca aacacccacc gcccatgatg 1500

ctcatcaaga acacgcctgt gcccggaaat atcaccagct tctcggacgt gcccgtcagc 1560

agcttcatca cccagtacag caccgggcag gtcaccgtgg agatggagtg ggagctcaag 1620

aaggaaaact ccaagaggtg gaacccagag atccagtaca caaacaacta caacgacccc 1680

cagtttgtgg actttgcccc ggacagcacc ggggaataca gaagcaccag acctatcgga 1740

acccgatacc ttgtgcgacc cctttaa 1767

<210> 238

<211> 588

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV5, который

включает замены T585V T575S (AAV5 Capsid VP2 T585V T575S)

<400> 238

Thr Ala Pro Thr Gly Lys Arg Ile Asp Asp His Phe Pro Lys Arg Lys

1 5 10 15

Lys Ala Arg Thr Glu Glu Asp Ser Lys Pro Ser Thr Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Glu Ala Gly Pro Ser Gly Ser Gln Gln Leu Gln Ile Pro Ala Gln Pro

35 40 45

Ala Ser Ser Leu Gly Ala Asp Thr Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro

50 55 60

Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly

65 70 75 80

Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys

85 90 95

Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg

100 105 110

Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe

115 120 125

Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser

130 135 140

His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly

145 150 155 160

Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys

165 170 175

Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr

180 185 190

Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val

195 200 205

Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val

210 215 220

Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr

225 230 235 240

Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro

245 250 255

Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe

260 265 270

Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe

275 280 285

Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser

290 295 300

Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg

305 310 315 320

Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr

325 330 335

Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala

340 345 350

Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val

355 360 365

Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr

370 375 380

Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro

385 390 395 400

Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu

405 410 415

Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln

420 425 430

Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr

435 440 445

Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp

450 455 460

Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala

465 470 475 480

His Phe His Pro Ser Pro Ala Met Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro

485 490 495

Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr

500 505 510

Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr

515 520 525

Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser

530 535 540

Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro

545 550 555 560

Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr

565 570 575

Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Val Arg Pro Leu

580 585

<210> 239

<211> 1599

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV5, который включает замены T529V T519S (AAV5 Capsid

VP3 T529V T519S)

<400> 239

atgtctgcgg gaggtggcgg cccattgggc gacaataacc aaggtgccga tggagtgggc 60

aatgcctcgg gagattggca ttgcgattcc acgtggatgg gggacagagt cgtcaccaag 120

tccacccgaa cctgggtgct gcccagctac aacaaccacc agtaccgaga gatcaaaagc 180

ggctccgtcg acggaagcaa cgccaacgcc tactttggat acagcacccc ctgggggtac 240

tttgacttta accgcttcca cagccactgg agcccccgag actggcaaag actcatcaac 300

aactactggg gcttcagacc ccggtccctc agagtcaaaa tcttcaacat tcaagtcaaa 360

gaggtcacgg tgcaggactc caccaccacc atcgccaaca acctcacctc caccgtccaa 420

gtgtttacgg acgacgacta ccagctgccc tacgtcgtcg gcaacgggac cgagggatgc 480

ctgccggcct tccctccgca ggtctttacg ctgccgcagt acggttacgc gacgctgaac 540

cgcgacaaca cagaaaatcc caccgagagg agcagcttct tctgcctaga gtactttccc 600

agcaagatgc tgagaacggg caacaacttt gagtttacct acaactttga ggaggtgccc 660

ttccactcca gcttcgctcc cagtcagaac ctcttcaagc tggccaaccc gctggtggac 720

cagtacttgt accgcttcgt gagcacaaat aacactggcg gagtccagtt caacaagaac 780

ctggccggga gatacgccaa cacctacaaa aactggttcc cggggcccat gggccgaacc 840

cagggctgga acctgggctc cggggtcaac cgcgccagtg tcagcgcctt cgccacgacc 900

aataggatgg agctcgaggg cgcgagttac caggtgcccc cgcagccgaa cggcatgacc 960

aacaacctcc agggcagcaa cacctatgcc ctggagaaca ctatgatctt caacagccag 1020

ccggcgaacc cgggcaccac cgccacgtac ctcgagggca acatgctcat caccagcgag 1080

agcgagacgc agccggtgaa ccgcgtggcg tacaacgtcg gcgggcagat ggccaccaac 1140

aaccagagct ccaccactgc ccccgcgacc ggcacgtaca acctccagga aatcgtgccc 1200

ggcagcgtgt ggatggagag ggacgtgtac ctccaaggac ccatctgggc caagatccca 1260

gagacggggg cgcactttca cccctctccg gccatgggcg gattcggact caaacaccca 1320

ccgcccatga tgctcatcaa gaacacgcct gtgcccggaa atatcaccag cttctcggac 1380

gtgcccgtca gcagcttcat cacccagtac agcaccgggc aggtcaccgt ggagatggag 1440

tgggagctca agaaggaaaa ctccaagagg tggaacccag agatccagta cacaaacaac 1500

tacaacgacc cccagtttgt ggactttgcc ccggacagca ccggggaata cagaagcacc 1560

agacctatcg gaacccgata ccttgtgcga cccctttaa 1599

<210> 240

<211> 532

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV5, который

включает замены T529V T519S (AAV5 Capsid VP3 T529V T519S)

<400> 240

Met Ser Ala Gly Gly Gly Gly Pro Leu Gly Asp Asn Asn Gln Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Asn Ala Ser Gly Asp Trp His Cys Asp Ser Thr Trp

20 25 30

Met Gly Asp Arg Val Val Thr Lys Ser Thr Arg Thr Trp Val Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Asn Asn His Gln Tyr Arg Glu Ile Lys Ser Gly Ser Val Asp

50 55 60

Gly Ser Asn Ala Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr

65 70 75 80

Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Ser His Trp Ser Pro Arg Asp Trp Gln

85 90 95

Arg Leu Ile Asn Asn Tyr Trp Gly Phe Arg Pro Arg Ser Leu Arg Val

100 105 110

Lys Ile Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Val Gln Asp Ser Thr

115 120 125

Thr Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp

130 135 140

Asp Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Val Gly Asn Gly Thr Glu Gly Cys

145 150 155 160

Leu Pro Ala Phe Pro Pro Gln Val Phe Thr Leu Pro Gln Tyr Gly Tyr

165 170 175

Ala Thr Leu Asn Arg Asp Asn Thr Glu Asn Pro Thr Glu Arg Ser Ser

180 185 190

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Lys Met Leu Arg Thr Gly Asn

195 200 205

Asn Phe Glu Phe Thr Tyr Asn Phe Glu Glu Val Pro Phe His Ser Ser

210 215 220

Phe Ala Pro Ser Gln Asn Leu Phe Lys Leu Ala Asn Pro Leu Val Asp

225 230 235 240

Gln Tyr Leu Tyr Arg Phe Val Ser Thr Asn Asn Thr Gly Gly Val Gln

245 250 255

Phe Asn Lys Asn Leu Ala Gly Arg Tyr Ala Asn Thr Tyr Lys Asn Trp

260 265 270

Phe Pro Gly Pro Met Gly Arg Thr Gln Gly Trp Asn Leu Gly Ser Gly

275 280 285

Val Asn Arg Ala Ser Val Ser Ala Phe Ala Thr Thr Asn Arg Met Glu

290 295 300

Leu Glu Gly Ala Ser Tyr Gln Val Pro Pro Gln Pro Asn Gly Met Thr

305 310 315 320

Asn Asn Leu Gln Gly Ser Asn Thr Tyr Ala Leu Glu Asn Thr Met Ile

325 330 335

Phe Asn Ser Gln Pro Ala Asn Pro Gly Thr Thr Ala Thr Tyr Leu Glu

340 345 350

Gly Asn Met Leu Ile Thr Ser Glu Ser Glu Thr Gln Pro Val Asn Arg

355 360 365

Val Ala Tyr Asn Val Gly Gly Gln Met Ala Thr Asn Asn Gln Ser Ser

370 375 380

Thr Thr Ala Pro Ala Thr Gly Thr Tyr Asn Leu Gln Glu Ile Val Pro

385 390 395 400

Gly Ser Val Trp Met Glu Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp

405 410 415

Ala Lys Ile Pro Glu Thr Gly Ala His Phe His Pro Ser Pro Ala Met

420 425 430

Gly Gly Phe Gly Leu Lys His Pro Pro Pro Met Met Leu Ile Lys Asn

435 440 445

Thr Pro Val Pro Gly Asn Ile Thr Ser Phe Ser Asp Val Pro Val Ser

450 455 460

Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Thr Val Glu Met Glu

465 470 475 480

Trp Glu Leu Lys Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln

485 490 495

Tyr Thr Asn Asn Tyr Asn Asp Pro Gln Phe Val Asp Phe Ala Pro Asp

500 505 510

Ser Thr Gly Glu Tyr Arg Ser Thr Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu

515 520 525

Val Arg Pro Leu

530

<210> 241

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену Q351K (AAV9 Capsid VP1

Q351K)

<400> 241

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat aagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 242

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену Q351K (AAV9 Capsid VP1 Q351K)

<400> 242

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Lys Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 243

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену Q214K (AAV9 Capsid VP2

Q214K)

<400> 243

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactata agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 244

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену Q214K (AAV9 Capsid VP2 Q214K)

<400> 244

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Lys Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 245

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену Q149K (AAV9 Capsid VP3

Q149K)

<400> 245

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctataagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 246

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену Q149K (AAV9 Capsid VP3 Q149K)

<400> 246

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Lys Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 247

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену Q351R (AAV9 Capsid VP1

Q351R)

<400> 247

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat agactcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 248

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену Q351R (AAV9 Capsid VP1 Q351R)

<400> 248

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Arg Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 249

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену Q214R (AAV9 Capsid VP2

Q214R)

<400> 249

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactata gactcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 250

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену Q214R (AAV9 Capsid VP2 Q214R)

<400> 250

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Arg Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 251

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену Q149R (AAV9 Capsid VP3

Q149R)

<400> 251

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatagactc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 252

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену Q149R (AAV9 Capsid VP3 Q149R)

<400> 252

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Arg Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 253

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену S232T (AAV9 Capsid VP1

S232T)

<400> 253

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gatacccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 254

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену S232T (AAV9 Capsid VP1 S232T)

<400> 254

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Thr Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 255

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену S95T (AAV9 Capsid VP2 S95T)

<400> 255

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg atacccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 256

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену S95T (AAV9 Capsid VP2 S95T)

<400> 256

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Thr Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 257

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену S30T (AAV9 Capsid VP3 S30T)

<400> 257

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgatacc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 258

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену S30T (AAV9 Capsid VP3 S30T)

<400> 258

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Thr Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 259

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену D297E (AAV9 Capsid VP1

D297E)

<400> 259

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga gtggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 260

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену D297E (AAV9 Capsid VP1 D297E)

<400> 260

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Glu Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 261

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену D160E (AAV9 Capsid VP2

D160E)

<400> 261

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgag 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 262

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену D160E (AAV9 Capsid VP2 D160E)

<400> 262

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Glu

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 263

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену D95E (AAV9 Capsid VP3 D95E)

<400> 263

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgagtggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 264

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену D95E (AAV9 Capsid VP3 D95E)

<400> 264

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Glu Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 265

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену S692T (AAV9 Capsid VP1

S692T)

<400> 265

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacactaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 266

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену S692T (AAV9 Capsid VP1 S692T)

<400> 266

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Thr Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 267

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену S555T (AAV9 Capsid VP2

S555T)

<400> 267

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acactaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 268

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену S555T (AAV9 Capsid VP2 S555T)

<400> 268

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Thr Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 269

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену S490T (AAV9 Capsid VP3

S490T)

<400> 269

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacact aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 270

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену S490T (AAV9 Capsid VP3 S490T)

<400> 270

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Thr Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 271

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену D433Y (AAV9 Capsid VP1

D433Y)

<400> 271

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctgtatc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 272

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену D433Y (AAV9 Capsid VP1 D433Y)

<400> 272

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Tyr Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 273

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену D296Y (AAV9 Capsid VP2

D296Y)

<400> 273

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctgtatcg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 274

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену D296Y (AAV9 Capsid VP2 D296Y)

<400> 274

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Tyr Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 275

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену D231Y (AAV9 Capsid VP3

D231Y)

<400> 275

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg tatcgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 276

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену D231Y (AAV9 Capsid VP3 D231Y)

<400> 276

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Tyr Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 277

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену T625L (AAV9 Capsid VP1

T625L)

<400> 277

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acctggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 278

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену T625L (AAV9 Capsid VP1 T625L)

<400> 278

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Leu Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 279

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену T488L (AAV9 Capsid VP2

T488L)

<400> 279

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cctggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 280

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену T488L (AAV9 Capsid VP2 T488L)

<400> 280

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Leu Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 281

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену T423L (AAV9 Capsid VP3

T423L)

<400> 281

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacctgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 282

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену T423L (AAV9 Capsid VP3 T423L)

<400> 282

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Leu Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 283

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену T625V (AAV9 Capsid VP1

T625V)

<400> 283

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acgttgacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 284

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену T625V (AAV9 Capsid VP1 T625V)

<400> 284

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Val Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 285

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену T488V (AAV9 Capsid VP2

T488V)

<400> 285

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cgttgacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 286

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену T488V (AAV9 Capsid VP2 T488V)

<400> 286

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Val Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 287

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену T423V (AAV9 Capsid VP3

T423V)

<400> 287

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacgttg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 288

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену T423V (AAV9 Capsid VP3 T423V)

<400> 288

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Val Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 289

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену N691A (AAV9 Capsid VP1

N691A)

<400> 289

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa gccagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 290

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену N691A (AAV9 Capsid VP1 N691A)

<400> 290

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Ala Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 291

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену N554A (AAV9 Capsid VP2

N554A)

<400> 291

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaag ccagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 292

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену N554A (AAV9 Capsid VP2 N554A)

<400> 292

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Ala Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 293

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену N489A (AAV9 Capsid VP3

N489A)

<400> 293

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaagccagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 294

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену N489A (AAV9 Capsid VP3 N489A)

<400> 294

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Ala Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 295

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену C396V (AAV9 Capsid VP1

C396V)

<400> 295

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttacgtgct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 296

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену C396V (AAV9 Capsid VP1 C396V)

<400> 296

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Val Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 297

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену C259V (AAV9 Capsid VP2

C259V)

<400> 297

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttacgtgctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 298

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену C259V (AAV9 Capsid VP2 C259V)

<400> 298

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Val Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 299

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену C194V (AAV9 Capsid VP3

C194V)

<400> 299

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttacg tgctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 300

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену C194V (AAV9 Capsid VP3 C194V)

<400> 300

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Val Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 301

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену Y478F (AAV9 Capsid VP1

Y478F)

<400> 301

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa cttcatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 302

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену Y478F (AAV9 Capsid VP1 Y478F)

<400> 302

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Phe Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 303

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену Y341F (AAV9 Capsid VP2

Y341F)

<400> 303

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

ttcatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 304

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену Y341F (AAV9 Capsid VP2 Y341F)

<400> 304

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Phe Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 305

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену Y276F (AAV9 Capsid VP3

Y276F)

<400> 305

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaacttcat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 306

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену Y276F (AAV9 Capsid VP3 Y276F)

<400> 306

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Phe Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 307

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену R296L (AAV9 Capsid VP1

R296L)

<400> 307

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacttga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 308

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену R296L (AAV9 Capsid VP1 R296L)

<400> 308

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Leu Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 309

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену R159L (AAV9 Capsid VP2

R159L)

<400> 309

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacttgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 310

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену R159L (AAV9 Capsid VP2 R159L)

<400> 310

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Leu Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 311

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену R94L (AAV9 Capsid VP3 R94L)

<400> 311

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac ttgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 312

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену R94L (AAV9 Capsid VP3 R94L)

<400> 312

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Leu Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 313

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену T733V (AAV9 Capsid VP1

T733V)

<400> 313

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctggtcc gtaatctgta a 2211

<210> 314

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену T733V (AAV9 Capsid VP1 T733V)

<400> 314

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Val Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 315

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену T596V (AAV9 Capsid VP2

T596V)

<400> 315

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctggtccg taatctgtaa 1800

<210> 316

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену T596V (AAV9 Capsid VP2 T596V)

<400> 316

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Val Arg Asn Leu

595

<210> 317

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену T531V (AAV9 Capsid VP3

T531V)

<400> 317

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg gtccgtaatc tgtaa 1605

<210> 318

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену T531V (AAV9 Capsid VP3 T531V)

<400> 318

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Val Arg Asn Leu

530

<210> 319

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену A427R (AAV9 Capsid VP1

A427R)

<400> 319

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacag acacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 320

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену A427R (AAV9 Capsid VP1 A427R)

<400> 320

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Arg His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 321

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену A290R (AAV9 Capsid VP2

A290R)

<400> 321

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacaga cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 322

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену A290R (AAV9 Capsid VP2 A290R)

<400> 322

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Arg His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 323

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену A225R (AAV9 Capsid VP3

A225R)

<400> 323

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acagacacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 324

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену A225R (AAV9 Capsid VP3 A225R)

<400> 324

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Arg His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 325

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену M635D (AAV9 Capsid VP1

M635D)

<400> 325

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tggatggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 326

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену M635D (AAV9 Capsid VP1 M635D)

<400> 326

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Asp Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 327

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену M498D (AAV9 Capsid VP2

M498D)

<400> 327

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct ggatggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 328

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену M498D (AAV9 Capsid VP2 M498D)

<400> 328

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Asp Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 329

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену M433D (AAV9 Capsid VP3

M433D)

<400> 329

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctggatg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 330

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену M433D (AAV9 Capsid VP3 M433D)

<400> 330

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Asp Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 331

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену L444R (AAV9 Capsid VP1

L444R)

<400> 331

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaataca gatactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 332

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену L444R (AAV9 Capsid VP1 L444R)

<400> 332

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Arg Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 333

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену L307R (AAV9 Capsid VP2

L307R)

<400> 333

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatacag atactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 334

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену L307R (AAV9 Capsid VP2 L307R)

<400> 334

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Arg Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 335

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену L242R (AAV9 Capsid VP3

L242R)

<400> 335

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacagatact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 336

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену L242R (AAV9 Capsid VP3 L242R)

<400> 336

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Arg Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 337

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену G604N (AAV9 Capsid VP1

G604N)

<400> 337

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccga atatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 338

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену G604N (AAV9 Capsid VP1 G604N)

<400> 338

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Asn Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 339

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену G467N (AAV9 Capsid VP2

G467N)

<400> 339

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccgaa tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 340

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену G467N (AAV9 Capsid VP2 G467N)

<400> 340

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Asn Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 341

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену G402N (AAV9 Capsid VP3

G402N)

<400> 341

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgaatatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 342

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену G402N (AAV9 Capsid VP3 G402N)

<400> 342

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Asn Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 343

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену G627K (AAV9 Capsid VP1

G627K)

<400> 343

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacaa gaactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 344

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену G627K (AAV9 Capsid VP1 G627K)

<400> 344

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Lys Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 345

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену G490K (AAV9 Capsid VP2

G490K)

<400> 345

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacaag aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 346

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену G490K (AAV9 Capsid VP2 G490K)

<400> 346

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Lys Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 347

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену G425K (AAV9 Capsid VP3

G425K)

<400> 347

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acaagaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 348

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену G425K (AAV9 Capsid VP3 G425K)

<400> 348

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Lys Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 349

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену W695R (AAV9 Capsid VP1

W695R)

<400> 349

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gcagaaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 350

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену W695R (AAV9 Capsid VP1 W695R)

<400> 350

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 351

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену W558R (AAV9 Capsid VP2

W558R)

<400> 351

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg cagaaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 352

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену W558R (AAV9 Capsid VP2 W558R)

<400> 352

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 353

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену W493R (AAV9 Capsid VP3

W493R)

<400> 353

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgcagaa acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 354

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену W493R (AAV9 Capsid VP3 W493R)

<400> 354

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Arg Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 355

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену Q351A (AAV9 Capsid VP1

Q351A)

<400> 355

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat gctctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 356

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену Q351A (AAV9 Capsid VP1 Q351A)

<400> 356

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Ala Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 357

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену Q214A (AAV9 Capsid VP2

Q214A)

<400> 357

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatg ctctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 358

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену Q214A (AAV9 Capsid VP2 Q214A)

<400> 358

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 359

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену Q149A (AAV9 Capsid VP3

Q149A)

<400> 359

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatgctctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 360

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену Q149A (AAV9 Capsid VP3 Q149A)

<400> 360

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Ala Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 361

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену Y395F (AAV9 Capsid VP1

Y395F)

<400> 361

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct ttttctgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 362

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену Y395F (AAV9 Capsid VP1 Y395F)

<400> 362

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 363

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену Y258F (AAV9 Capsid VP2

Y258F)

<400> 363

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt tttctgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 364

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену Y258F (AAV9 Capsid VP2 Y258F)

<400> 364

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 365

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену Y193F (AAV9 Capsid VP3

Y193F)

<400> 365

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tcctttttct gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 366

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену Y193F (AAV9 Capsid VP3 Y193F)

<400> 366

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Phe Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 367

<211> 2211

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP1

капсида AAV9, который включает замену R434L (AAV9 Capsid VP1

R434L)

<400> 367

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc tgctaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 368

<211> 736

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP1 капсида AAV9, который

включает замену R434L (AAV9 Capsid VP1 R434L)

<400> 368

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Leu Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 369

<211> 1800

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP2

капсида AAV9, который включает замену R297L (AAV9 Capsid VP2

R297L)

<400> 369

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggacct gctaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 370

<211> 599

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP2 капсида AAV9, который

включает замену R297L (AAV9 Capsid VP2 R297L)

<400> 370

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Leu Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 371

<211> 1605

<212> DNA

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая модифицированный белок VP3

капсида AAV9, который включает замену (AAV9 Capsid VP3 R232L)

<400> 371

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gacctgctaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<210> 372

<211> 534

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> выделенный модифицированный белок VP3 капсида AAV9, который

включает замену (AAV9 Capsid VP3 R232L)

<400> 372

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Leu Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 373

<211> 736

<212> PRT

<213> Природная последовательность

<220>

<223> Природная последовательность белка VP1 капсида AAV9 дикого типа

(AAV9 Capsid WT VP1)

<400> 373

Met Ala Ala Asp Gly Tyr Leu Pro Asp Trp Leu Glu Asp Asn Leu Ser

1 5 10 15

Glu Gly Ile Arg Glu Trp Trp Ala Leu Lys Pro Gly Ala Pro Gln Pro

20 25 30

Lys Ala Asn Gln Gln His Gln Asp Asn Ala Arg Gly Leu Val Leu Pro

35 40 45

Gly Tyr Lys Tyr Leu Gly Pro Gly Asn Gly Leu Asp Lys Gly Glu Pro

50 55 60

Val Asn Ala Ala Asp Ala Ala Ala Leu Glu His Asp Lys Ala Tyr Asp

65 70 75 80

Gln Gln Leu Lys Ala Gly Asp Asn Pro Tyr Leu Lys Tyr Asn His Ala

85 90 95

Asp Ala Glu Phe Gln Glu Arg Leu Lys Glu Asp Thr Ser Phe Gly Gly

100 105 110

Asn Leu Gly Arg Ala Val Phe Gln Ala Lys Lys Arg Leu Leu Glu Pro

115 120 125

Leu Gly Leu Val Glu Glu Ala Ala Lys Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg

130 135 140

Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly

145 150 155 160

Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr

165 170 175

Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro

180 185 190

Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly

195 200 205

Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser

210 215 220

Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile

225 230 235 240

Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu

245 250 255

Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn

260 265 270

Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg

275 280 285

Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn

290 295 300

Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile

305 310 315 320

Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn

325 330 335

Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu

340 345 350

Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro

355 360 365

Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp

370 375 380

Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe

385 390 395 400

Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu

405 410 415

Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu

420 425 430

Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser

435 440 445

Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser

450 455 460

Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro

465 470 475 480

Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn

485 490 495

Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn

500 505 510

Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro Ala Met Ala Ser His Lys

515 520 525

Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly

530 535 540

Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp Ala Asp Lys Val Met Ile

545 550 555 560

Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser

565 570 575

Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln

580 585 590

Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu Pro Gly Met Val Trp Gln

595 600 605

Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile Trp Ala Lys Ile Pro His

610 615 620

Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu Met Gly Gly Phe Gly Met

625 630 635 640

Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala

645 650 655

Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr

660 665 670

Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln

675 680 685

Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn

690 695 700

Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala Val Asn Thr Glu Gly Val

705 710 715 720

Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

725 730 735

<210> 374

<211> 2211

<212> DNA

<213> Природная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая природную последовательность

белка VP1 капсида AAV9 дикого типа (AAV9 Capsid WT VP1

<400> 374

atggctgccg atggttatct tccagattgg ctcgaggaca accttagtga aggaattcgc 60

gagtggtggg ctttgaaacc tggagcccct caacccaagg caaatcaaca acatcaagac 120

aacgctcgag gtcttgtgct tccgggttac aaataccttg gacccggcaa cggactcgac 180

aagggggagc cggtcaacgc agcagacgcg gcggccctcg agcacgacaa ggcctacgac 240

cagcagctca aggccggaga caacccgtac ctcaagtaca accacgccga cgccgagttc 300

caggagcggc tcaaagaaga tacgtctttt gggggcaacc tcgggcgagc agtcttccag 360

gccaaaaaga ggcttcttga acctcttggt ctggttgagg aagcggctaa gacggctcct 420

ggaaagaaga ggcctgtaga gcagtctcct caggaaccgg actcctccgc gggtattggc 480

aaatcgggtg cacagcccgc taaaaagaga ctcaatttcg gtcagactgg cgacacagag 540

tcagtcccag accctcaacc aatcggagaa cctcccgcag ccccctcagg tgtgggatct 600

cttacaatgg cttcaggtgg tggcgcacca gtggcagaca ataacgaagg tgccgatgga 660

gtgggtagtt cctcgggaaa ttggcattgc gattcccaat ggctggggga cagagtcatc 720

accaccagca cccgaacctg ggccctgccc acctacaaca atcacctcta caagcaaatc 780

tccaacagca catctggagg atcttcaaat gacaacgcct acttcggcta cagcaccccc 840

tgggggtatt ttgacttcaa cagattccac tgccacttct caccacgtga ctggcagcga 900

ctcatcaaca acaactgggg attccggcct aagcgactca acttcaagct cttcaacatt 960

caggtcaaag aggttacgga caacaatgga gtcaagacca tcgccaataa ccttaccagc 1020

acggtccagg tcttcacgga ctcagactat cagctcccgt acgtgctcgg gtcggctcac 1080

gagggctgcc tcccgccgtt cccagcggac gttttcatga ttcctcagta cgggtatctg 1140

acgcttaatg atggaagcca ggccgtgggt cgttcgtcct tttactgcct ggaatatttc 1200

ccgtcgcaaa tgctaagaac gggtaacaac ttccagttca gctacgagtt tgagaacgta 1260

cctttccata gcagctacgc tcacagccaa agcctggacc gactaatgaa tccactcatc 1320

gaccaatact tgtactatct ctcaaagact attaacggtt ctggacagaa tcaacaaacg 1380

ctaaaattca gtgtggccgg acccagcaac atggctgtcc agggaagaaa ctacatacct 1440

ggacccagct accgacaaca acgtgtctca accactgtga ctcaaaacaa caacagcgaa 1500

tttgcttggc ctggagcttc ttcttgggct ctcaatggac gtaatagctt gatgaatcct 1560

ggacctgcta tggccagcca caaagaagga gaggaccgtt tctttccttt gtctggatct 1620

ttaatttttg gcaaacaagg aactggaaga gacaacgtgg atgcggacaa agtcatgata 1680

accaacgaag aagaaattaa aactactaac ccggtagcaa cggagtccta tggacaagtg 1740

gccacaaacc accagagtgc ccaagcacag gcgcagaccg gctgggttca aaaccaagga 1800

atacttccgg gtatggtttg gcaggacaga gatgtgtacc tgcaaggacc catttgggcc 1860

aaaattcctc acacggacgg caactttcac ccttctccgc tgatgggagg gtttggaatg 1920

aagcacccgc ctcctcagat cctcatcaaa aacacacctg tacctgcgga tcctccaacg 1980

gccttcaaca aggacaagct gaactctttc atcacccagt attctactgg ccaagtcagc 2040

gtggagatcg agtgggagct gcagaaggaa aacagcaagc gctggaaccc ggagatccag 2100

tacacttcca actattacaa gtctaataat gttgaatttg ctgttaatac tgaaggtgta 2160

tatagtgaac cccgccccat tggcaccaga tacctgactc gtaatctgta a 2211

<210> 375

<211> 599

<212> PRT

<213> Природная последовательность

<220>

<223> Природная последовательность белка VP2 капсида AAV9 дикого типа

(AAV9 Capsid WT VP2)

<400> 375

Thr Ala Pro Gly Lys Lys Arg Pro Val Glu Gln Ser Pro Gln Glu Pro

1 5 10 15

Asp Ser Ser Ala Gly Ile Gly Lys Ser Gly Ala Gln Pro Ala Lys Lys

20 25 30

Arg Leu Asn Phe Gly Gln Thr Gly Asp Thr Glu Ser Val Pro Asp Pro

35 40 45

Gln Pro Ile Gly Glu Pro Pro Ala Ala Pro Ser Gly Val Gly Ser Leu

50 55 60

Thr Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly

65 70 75 80

Ala Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln

85 90 95

Trp Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu

100 105 110

Pro Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser

115 120 125

Gly Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp

130 135 140

Gly Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp

145 150 155 160

Trp Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu

165 170 175

Asn Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn

180 185 190

Gly Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe

195 200 205

Thr Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu

210 215 220

Gly Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr

225 230 235 240

Gly Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser

245 250 255

Phe Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn

260 265 270

Asn Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser

275 280 285

Tyr Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp

290 295 300

Gln Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn

305 310 315 320

Gln Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val

325 330 335

Gln Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val

340 345 350

Ser Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly

355 360 365

Ala Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu

385 390 395 400

Ser Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val

405 410 415

Asp Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr

420 425 430

Asn Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln

435 440 445

Ser Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile

450 455 460

Leu Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro

465 470 475 480

Ile Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro

485 490 495

Leu Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile

500 505 510

Lys Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp

515 520 525

Lys Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val

530 535 540

Glu Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro

545 550 555 560

Glu Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe

565 570 575

Ala Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr

580 585 590

Arg Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

595

<210> 376

<211> 1800

<212> DNA

<213> Природная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая природную последовательность

белка VP2 капсида AAV9 дикого типа (AAV9 Capsid WT VP2

<400> 376

acggctcctg gaaagaagag gcctgtagag cagtctcctc aggaaccgga ctcctccgcg 60

ggtattggca aatcgggtgc acagcccgct aaaaagagac tcaatttcgg tcagactggc 120

gacacagagt cagtcccaga ccctcaacca atcggagaac ctcccgcagc cccctcaggt 180

gtgggatctc ttacaatggc ttcaggtggt ggcgcaccag tggcagacaa taacgaaggt 240

gccgatggag tgggtagttc ctcgggaaat tggcattgcg attcccaatg gctgggggac 300

agagtcatca ccaccagcac ccgaacctgg gccctgccca cctacaacaa tcacctctac 360

aagcaaatct ccaacagcac atctggagga tcttcaaatg acaacgccta cttcggctac 420

agcaccccct gggggtattt tgacttcaac agattccact gccacttctc accacgtgac 480

tggcagcgac tcatcaacaa caactgggga ttccggccta agcgactcaa cttcaagctc 540

ttcaacattc aggtcaaaga ggttacggac aacaatggag tcaagaccat cgccaataac 600

cttaccagca cggtccaggt cttcacggac tcagactatc agctcccgta cgtgctcggg 660

tcggctcacg agggctgcct cccgccgttc ccagcggacg ttttcatgat tcctcagtac 720

gggtatctga cgcttaatga tggaagccag gccgtgggtc gttcgtcctt ttactgcctg 780

gaatatttcc cgtcgcaaat gctaagaacg ggtaacaact tccagttcag ctacgagttt 840

gagaacgtac ctttccatag cagctacgct cacagccaaa gcctggaccg actaatgaat 900

ccactcatcg accaatactt gtactatctc tcaaagacta ttaacggttc tggacagaat 960

caacaaacgc taaaattcag tgtggccgga cccagcaaca tggctgtcca gggaagaaac 1020

tacatacctg gacccagcta ccgacaacaa cgtgtctcaa ccactgtgac tcaaaacaac 1080

aacagcgaat ttgcttggcc tggagcttct tcttgggctc tcaatggacg taatagcttg 1140

atgaatcctg gacctgctat ggccagccac aaagaaggag aggaccgttt ctttcctttg 1200

tctggatctt taatttttgg caaacaagga actggaagag acaacgtgga tgcggacaaa 1260

gtcatgataa ccaacgaaga agaaattaaa actactaacc cggtagcaac ggagtcctat 1320

ggacaagtgg ccacaaacca ccagagtgcc caagcacagg cgcagaccgg ctgggttcaa 1380

aaccaaggaa tacttccggg tatggtttgg caggacagag atgtgtacct gcaaggaccc 1440

atttgggcca aaattcctca cacggacggc aactttcacc cttctccgct gatgggaggg 1500

tttggaatga agcacccgcc tcctcagatc ctcatcaaaa acacacctgt acctgcggat 1560

cctccaacgg ccttcaacaa ggacaagctg aactctttca tcacccagta ttctactggc 1620

caagtcagcg tggagatcga gtgggagctg cagaaggaaa acagcaagcg ctggaacccg 1680

gagatccagt acacttccaa ctattacaag tctaataatg ttgaatttgc tgttaatact 1740

gaaggtgtat atagtgaacc ccgccccatt ggcaccagat acctgactcg taatctgtaa 1800

<210> 377

<211> 534

<212> PRT

<213> Природная последовательность

<220>

<223> Природная последовательность белка VP3 капсида AAV9 дикого типа

(AAV9 Capsid WT VP3)

<400> 377

Met Ala Ser Gly Gly Gly Ala Pro Val Ala Asp Asn Asn Glu Gly Ala

1 5 10 15

Asp Gly Val Gly Ser Ser Ser Gly Asn Trp His Cys Asp Ser Gln Trp

20 25 30

Leu Gly Asp Arg Val Ile Thr Thr Ser Thr Arg Thr Trp Ala Leu Pro

35 40 45

Thr Tyr Asn Asn His Leu Tyr Lys Gln Ile Ser Asn Ser Thr Ser Gly

50 55 60

Gly Ser Ser Asn Asp Asn Ala Tyr Phe Gly Tyr Ser Thr Pro Trp Gly

65 70 75 80

Tyr Phe Asp Phe Asn Arg Phe His Cys His Phe Ser Pro Arg Asp Trp

85 90 95

Gln Arg Leu Ile Asn Asn Asn Trp Gly Phe Arg Pro Lys Arg Leu Asn

100 105 110

Phe Lys Leu Phe Asn Ile Gln Val Lys Glu Val Thr Asp Asn Asn Gly

115 120 125

Val Lys Thr Ile Ala Asn Asn Leu Thr Ser Thr Val Gln Val Phe Thr

130 135 140

Asp Ser Asp Tyr Gln Leu Pro Tyr Val Leu Gly Ser Ala His Glu Gly

145 150 155 160

Cys Leu Pro Pro Phe Pro Ala Asp Val Phe Met Ile Pro Gln Tyr Gly

165 170 175

Tyr Leu Thr Leu Asn Asp Gly Ser Gln Ala Val Gly Arg Ser Ser Phe

180 185 190

Tyr Cys Leu Glu Tyr Phe Pro Ser Gln Met Leu Arg Thr Gly Asn Asn

195 200 205

Phe Gln Phe Ser Tyr Glu Phe Glu Asn Val Pro Phe His Ser Ser Tyr

210 215 220

Ala His Ser Gln Ser Leu Asp Arg Leu Met Asn Pro Leu Ile Asp Gln

225 230 235 240

Tyr Leu Tyr Tyr Leu Ser Lys Thr Ile Asn Gly Ser Gly Gln Asn Gln

245 250 255

Gln Thr Leu Lys Phe Ser Val Ala Gly Pro Ser Asn Met Ala Val Gln

260 265 270

Gly Arg Asn Tyr Ile Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Arg Val Ser

275 280 285

Thr Thr Val Thr Gln Asn Asn Asn Ser Glu Phe Ala Trp Pro Gly Ala

290 295 300

Ser Ser Trp Ala Leu Asn Gly Arg Asn Ser Leu Met Asn Pro Gly Pro

305 310 315 320

Ala Met Ala Ser His Lys Glu Gly Glu Asp Arg Phe Phe Pro Leu Ser

325 330 335

Gly Ser Leu Ile Phe Gly Lys Gln Gly Thr Gly Arg Asp Asn Val Asp

340 345 350

Ala Asp Lys Val Met Ile Thr Asn Glu Glu Glu Ile Lys Thr Thr Asn

355 360 365

Pro Val Ala Thr Glu Ser Tyr Gly Gln Val Ala Thr Asn His Gln Ser

370 375 380

Ala Gln Ala Gln Ala Gln Thr Gly Trp Val Gln Asn Gln Gly Ile Leu

385 390 395 400

Pro Gly Met Val Trp Gln Asp Arg Asp Val Tyr Leu Gln Gly Pro Ile

405 410 415

Trp Ala Lys Ile Pro His Thr Asp Gly Asn Phe His Pro Ser Pro Leu

420 425 430

Met Gly Gly Phe Gly Met Lys His Pro Pro Pro Gln Ile Leu Ile Lys

435 440 445

Asn Thr Pro Val Pro Ala Asp Pro Pro Thr Ala Phe Asn Lys Asp Lys

450 455 460

Leu Asn Ser Phe Ile Thr Gln Tyr Ser Thr Gly Gln Val Ser Val Glu

465 470 475 480

Ile Glu Trp Glu Leu Gln Lys Glu Asn Ser Lys Arg Trp Asn Pro Glu

485 490 495

Ile Gln Tyr Thr Ser Asn Tyr Tyr Lys Ser Asn Asn Val Glu Phe Ala

500 505 510

Val Asn Thr Glu Gly Val Tyr Ser Glu Pro Arg Pro Ile Gly Thr Arg

515 520 525

Tyr Leu Thr Arg Asn Leu

530

<210> 378

<211> 1605

<212> DNA

<213> Природная последовательность

<220>

<223> нуклеиновая кислота, кодирующая природную последовательность

белка VP3 капсида AAV9 дикого типа (AAV9 CAP WT VP3)

<400> 378

atggcttcag gtggtggcgc accagtggca gacaataacg aaggtgccga tggagtgggt 60

agttcctcgg gaaattggca ttgcgattcc caatggctgg gggacagagt catcaccacc 120

agcacccgaa cctgggccct gcccacctac aacaatcacc tctacaagca aatctccaac 180

agcacatctg gaggatcttc aaatgacaac gcctacttcg gctacagcac cccctggggg 240

tattttgact tcaacagatt ccactgccac ttctcaccac gtgactggca gcgactcatc 300

aacaacaact ggggattccg gcctaagcga ctcaacttca agctcttcaa cattcaggtc 360

aaagaggtta cggacaacaa tggagtcaag accatcgcca ataaccttac cagcacggtc 420

caggtcttca cggactcaga ctatcagctc ccgtacgtgc tcgggtcggc tcacgagggc 480

tgcctcccgc cgttcccagc ggacgttttc atgattcctc agtacgggta tctgacgctt 540

aatgatggaa gccaggccgt gggtcgttcg tccttttact gcctggaata tttcccgtcg 600

caaatgctaa gaacgggtaa caacttccag ttcagctacg agtttgagaa cgtacctttc 660

catagcagct acgctcacag ccaaagcctg gaccgactaa tgaatccact catcgaccaa 720

tacttgtact atctctcaaa gactattaac ggttctggac agaatcaaca aacgctaaaa 780

ttcagtgtgg ccggacccag caacatggct gtccagggaa gaaactacat acctggaccc 840

agctaccgac aacaacgtgt ctcaaccact gtgactcaaa acaacaacag cgaatttgct 900

tggcctggag cttcttcttg ggctctcaat ggacgtaata gcttgatgaa tcctggacct 960

gctatggcca gccacaaaga aggagaggac cgtttctttc ctttgtctgg atctttaatt 1020

tttggcaaac aaggaactgg aagagacaac gtggatgcgg acaaagtcat gataaccaac 1080

gaagaagaaa ttaaaactac taacccggta gcaacggagt cctatggaca agtggccaca 1140

aaccaccaga gtgcccaagc acaggcgcag accggctggg ttcaaaacca aggaatactt 1200

ccgggtatgg tttggcagga cagagatgtg tacctgcaag gacccatttg ggccaaaatt 1260

cctcacacgg acggcaactt tcacccttct ccgctgatgg gagggtttgg aatgaagcac 1320

ccgcctcctc agatcctcat caaaaacaca cctgtacctg cggatcctcc aacggccttc 1380

aacaaggaca agctgaactc tttcatcacc cagtattcta ctggccaagt cagcgtggag 1440

atcgagtggg agctgcagaa ggaaaacagc aagcgctgga acccggagat ccagtacact 1500

tccaactatt acaagtctaa taatgttgaa tttgctgtta atactgaagg tgtatatagt 1560

gaaccccgcc ccattggcac cagatacctg actcgtaatc tgtaa 1605

<---

Похожие патенты RU2831732C1

название год авторы номер документа
Выделенный модифицированный белок VPI капсида аденоассоциированного вируса 9 серотипа (AAV9), капсид и вектор на его основе 2021
  • Стрелкова Анна Николаевна
  • Шугаева Татьяна Евгеньевна
  • Гершович Павел Михайлович
  • Яковлев Павел Андреевич
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2825667C2
Выделенный модифицированный белок VP1 капсида аденоассоциированного вируса 5 серотипа (AAV5), капсид и вектор на его основе 2019
  • Стрелкова Анна Николаевна
  • Карабельский Александр Владимирович
  • Мадера Дмитрий Александрович
  • Перепелкина Мария Павловна
  • Юрлова Елена Викторовна
  • Гершович Павел Михайлович
  • Прокофьев Александр Владимирович
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2751592C2
Вакцина на основе AAV5 для индукции специфического иммунитета к вирусу SARS-CoV-2 и/или профилактики коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2 2020
  • Гершович Павел Михайлович
  • Прокофьев Александр Владимирович
  • Стрелкова Анна Николаевна
  • Спирина Наталья Александровна
  • Шугаева Татьяна Евгеньевна
  • Яковлев Павел Андреевич
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2760301C1
Вакцина на основе AAV5 для индукции специфического иммунитета к вирусу SARS-CoV-2 и/или профилактики коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2 2021
  • Прокофьев Александр Владимирович
  • Гершович Павел Михайлович
  • Стрелкова Анна Николаевна
  • Спирина Наталья Александровна
  • Кондинская Диана Александровна
  • Яковлев Павел Андреевич
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2761879C1
Вакцина на основе AAV5 для индукции специфического иммунитета к вирусу SARS-CoV-2 и/или профилактики коронавирусной инфекции, вызванной SARS-CoV-2 2020
  • Прокофьев Александр Владимирович
  • Гершович Павел Михайлович
  • Стрелкова Анна Николаевна
  • Спирина Наталья Александровна
  • Кондинская Диана Александровна
  • Яковлев Павел Андреевич
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2783313C1
Кодон-оптимизированная нуклеиновая кислота, которая кодирует белок фактора свёртывания крови IX, и ее применение 2021
  • Прокофьев Александр Владимирович
  • Гершович Павел Михайлович
  • Стрелкова Анна Николаевна
  • Спирина Наталья Александровна
  • Шугаева Татьяна Евгеньевна
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2831751C2
РЕКОМБИНАНТНЫЕ ВИРУСНЫЕ ВЕКТОРЫ С МОДИФИЦИРОВАННЫМ ТРОПИЗМОМ И ПУТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ НАЦЕЛЕННОГО ВВЕДЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА В КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА 2018
  • Киратсус, Кристос
  • Мерфи, Эндрю Дж.
  • Ванг, Ченг
  • Сабин, Леа
RU2809246C2
Кодон-оптимизированная нуклеиновая кислота, которая кодирует белок SMN1, и ее применение 2020
  • Мадера Дмитрий Александрович
  • Гершович Павел Михайлович
  • Веселова Анна Сергеевна
  • Шугаева Татьяна Евгеньевна
  • Ломунова Мария Андреевна
  • Шкляева Маргарита Александровна
  • Морозов Дмитрий Валентинович
RU2742837C1
СПОСОБЫ ВЫЯВЛЕНИЯ AAV 2017
  • Цзинь, Сяоин
  • О'Риордан, Кэтрин, Р.
  • Лю, Линь
  • Чжан, Кейт
RU2771622C2
РЕКОМБИНАНТНЫЕ ВИРУСНЫЕ ЧАСТИЦЫ С МОДИФИЦИРОВАННЫМ ТРОПИЗМОМ И ПУТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ НАЦЕЛЕННОГО ВВЕДЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА В КЛЕТКИ ЧЕЛОВЕКА 2018
  • Сабин, Леа
  • Шонерр, Кристофер
  • Экономидес, Арис Н.
  • Киратсус, Кристос
  • Мерфи, Эндрю Дж.
RU2811426C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 831 732 C1

Реферат патента 2024 года Способ получения модифицированного капсида аденоассоциированного вируса

Настоящая заявка относится к области генной терапии и молекулярной биологии. Описан способ получения модифицированного капсида AAV, который включает: а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида; б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены; в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида; г) выбор позиций для мутагенеза, при этом аминокислотные остатки для мутагенеза находятся в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV и имеют структурное различие между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида; д) выбор аминокислотного остатка для мутагенеза в позиции, выбранной на стадии г); е) введение одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных на стадиях г) - д), в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV. Раскрыт модифицированный капсид AAV для получения вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса, который включает одну или несколько аминокислотных замен в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV. Также раскрыт вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса для доставки субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который включает: модифицированный капсид AAV и гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую регуляторные последовательности, которые обеспечивают экспрессию продукта, кодируемого гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, в целевых клетках. Изобретение расширяет арсенал средств доставки гетерологичных нуклеиновых кислот. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 14 ил., 10 табл., 15 пр.

Формула изобретения RU 2 831 732 C1

1. Способ получения модифицированного капсида AAV, который включает:

а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодействия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены,

где под капсидом-шаблоном понимают схожий по строению капсид вируса, выбранного из семейства парвовирусов (Parvoviridae), который не является AAV;

в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

г) выбор позиций для мутагенеза, при этом аминокислотные остатки для мутагенеза находятся в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV и имеют структурное различие между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

д) выбор аминокислотного остатка для мутагенеза в позиции, выбранной на стадии г), с использованием одного из следующих принципов:

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет больший объем, за исключением цистеина и метионина;

- замена исходной аминокислоты в белке-капсомере модифицируемого AAV на аминокислоту, которая имеет увеличенное или уменьшенное число полярных контактов между капсомерами, за исключением цистеина и метионина;

е) введение одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных на стадиях г) - д), в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV.

2. Способ получения модифицированного капсида AAV по п. 1, который дополнительно включает проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV с одной или несколькими аминокислотными заменами на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

3. Способ получения модифицированного капсида AAV по п. 1, который дополнительно включает проверку полученных на стадии е) модифицированных капсидов AAV с одной или несколькими аминокислотными заменами на наличие одного или нескольких улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций и отбор модифицированных капсидов AAV, которые имеют одно или несколько улучшенных свойств по сравнению с капсидом AAV без данных модификаций, где одно или несколько улучшенных свойств выбирают из группы:

- увеличение эффективности трансдукции клеток,

- увеличение продукции целевого белка,

- увеличение эффективности наработки за счет высокоэффективной продукции (сборки) инкапсидированных вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV).

4. Способ получения капсида AAV по п. 1, где капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей: AAV человека, AAV обезьян или AAV птиц.

5. Способ получения капсида AAV по п. 1, где капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей следующие серотипы AAV: AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 или AAV16.

6. Способ получения капсида AAV по п. 1, где схожий по строению капсид-шаблон выбирают из группы, которая включает: парвовирус В19, человеческий бокавирус 1 (HBoV1), парвовирус крупного рогатого скота (BVP).

7. Модифицированный капсид AAV для получения вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса, который включает одну или несколько аминокислотных замен в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида модифицируемого AAV,

при этом одна или несколько аминокислотных замен находятся в положениях структурных различий между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида, а аминокислота, на которую делают замену, представляет собой:

1) аминокислоту, которая имеет больший объем по сравнению с исходной аминокислотой, за исключением цистеина и метионина; или

2) аминокислоту, которая имеет увеличенное или уменьшенное число полярных контактов между капсомерами по сравнению с исходной аминокислотой, за исключением цистеина и метионина;

где под капсидом-шаблоном понимают схожий по строению капсид вируса, выбранного из семейства парвовирусов (Parvoviridae), который не является AAV;

положения структурных различий между капсидом модифицируемого AAV и капсидом-шаблоном в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида определяют следующим образом:

а) определение аминокислот белка-капсомера модифицируемого AAV, расположенных в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида;

б) структурное выравнивание модифицируемого капсида AAV с капсидом-шаблоном для определения попарного соответствия между каждой аминокислотой модифицируемого AAV из области интерфейса взаимодейстия между соседними пентамерными субъединицами и ближайшей к ней аминокислотой капсида-шаблона как структурного аналога исходной аминокислоты, которая рассматривается в качестве потенциальной замены,

в) попарное сравнение определенных на стадии б) остатков аминокислот капсида AAV и капсида-шаблона для выявления структурных различий капсида модифицируемого AAV и капсида-шаблона в области интерфейса взаимодействия соседних пентамерных субъединиц капсида.

8. Модифицированный капсид AAV по п. 7, где капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей: AAV человека, AAV обезьян или AAV птиц.

9. Модифицированный капсид AAV по п. 7, где капсид модифицируемого AAV выбирают из группы, включающей следующие серотипы AAV: AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5. AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 AAV11, AAV12, AAV13, AAV14, AAV15 или AAV16.

10. Модифицированный капсид AAV для получения вирусных векторов на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса, который включает модифицированный белок VP1 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 14, 20, 26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368.

11. Модифицированный капсид AAV по п. 10, который включает:

а) модифицированный белок VP1 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 14, 20, 26, 32, 38, 44, 50, 56, 62, 68, 74, 80, 86, 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182, 188, 194, 200, 206, 212, 218, 224, 230, 236, 242, 248, 254, 260, 266, 272, 278, 284, 290, 296, 302, 308, 314, 320, 326, 332, 338, 344, 350, 356, 362 или 368;

б) соответствующий своему белку VP1 модифицированный белок VP2 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 16, 22, 28, 34, 40, 46, 52, 58, 64, 70, 76, 82, 88, 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184, 190, 196, 202, 208, 214, 220, 226, 232, 238, 244, 250, 256, 262, 268, 274, 280, 286, 292, 298, 304, 310, 316, 322, 328, 334, 340, 346, 352, 358, 364 или 370;

в) соответствующий своему белку VP1 модифицированный белок VP3 капсида AAV, который имеет аминокислотную последовательность, которую выбирают из группы: SEQ ID No: 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 60, 66, 72, 78, 84, 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180, 186, 192, 198, 204, 210, 216, 222, 228, 234, 240, 246, 252, 258, 264, 270, 276, 282, 288, 294, 300, 306, 312, 318, 324, 330, 336, 342, 348, 354, 360, 366 или 372.

12. Вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса для доставки субъекту гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты, который включает:

1) модифицированный капсид AAV по любому из пп. 7-11, и

2) гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую регуляторные последовательности, которые обеспечивают экспрессию продукта, кодируемого гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты, в целевых клетках.

13. Вектор на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса по п. 12, где продукт экспрессии гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты представляет собой терапевтический полипептид или репортерный полипептид.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2831732C1

RU 2020101279 A, 27.07.2021
WO 2019006046 A2, 03.01.2019
HILDEGARD BUNING AND ARUN SRIVASTAVA
Capsid Modifications for Targeting and Improving the Efficacy of AAV Vectors, Mol Ther Methods Clin Dev., 2019, 12: 248-265.

RU 2 831 732 C1

Авторы

Стрелкова Анна Николаевна

Легоцкий Сергей Александрович

Шугаева Татьяна Евгеньевна

Гершович Павел Михайлович

Надолинский Александр Анатольевич

Яковлев Павел Андреевич

Морозов Дмитрий Валентинович

Даты

2024-12-12Публикация

2021-08-20Подача