ПРЕПАРАТ С ХОНДРОПРОТЕКТОРНЫМ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ ЭФФЕКТОМ Российский патент 2024 года по МПК A61K35/60 A61K31/375 A61K38/00 A61K9/08 A61P19/02 A61P29/00 

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и медицины, конкретно к препаратам с хондропротекторным и противовоспалительным действием, которые могут быть полезны при суставной патологии, например, при остеоартрозе, остеохондрозе или спондилезе.

Заболевания суставов и околосуставных тканей - это одна из самых частых причин ограничения трудоспособности и подвижности вплоть до инвалидизации человека. От заболеваний суставов страдает до 80% населения. Для большинства заболеваний характерно хроническое прогрессирующее течение и усугубление проявлений со временем.

Среди болезней костно-мышечной системы в структуре первичной инвалидности первое место занимает остеоартроз, при этом заболевание все больше затрагивает трудоспособное население до 44 лет. Остеоартроз поражает все ткани синовиальных суставов. Заболевание проявляется морфологическими, биохимическими, молекулярными и биомеханическими изменениями в клетках и матриксе, которые приводят к размягчению, разволокнению, изъязвлению и уменьшению толщины суставного хряща, а также к остеосклерозу с резким утолщением и уплотнением кортикального слоя субхондральной кости, формированию остеофитов и развитию субхондральных кист. С этой точки зрения остеоартроз представляет собой нарушение равновесия между катаболическими и анаболическими процессами в гиалиновом хряще. С одной стороны артроз развивается в нормальном хряще при избыточной нагрузке, с другой - может развиться при нормальной нагрузке в уже измененном хряще. К дегенерации суставного хряща приводят недостаточный синтез хондроцитами протеогликанов и фрагментация протеогликановых агрегатов. Однако в этом процессе активно задействована и первично измененная субхондральная кость. В дальнейшем формируется персистирующее вторичное воспаление, что ведет к оправданному термину остеоартрит. Противоспалительные медиаторы приводят к деструкции хряща, нарушению ремоделирования тканей сустава и активизации свертывающей системы крови, что способствует образованию микротромбов, очаговой гипоксии и ишемии кости.

Препараты, используемые для лечения артрологических заболеваний, достаточно многообразны и входят в различные группы лекарственных веществ, включая нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП), миорелаксанты, раздражающие и отвлекающие средства местного применения. Однако препараты симптоматического лечения лишь маскируют болезнь и не влияют на основную причину - дегенеративные изменения в хрящевой ткани суставов. Тем самым не сдерживают прогрессирование заболевания, которое затем проявляется более частыми и выраженными обострениями.

Одним из принципиальных назначений больным указанной группы заболеваний являются Хондропротекторы. Однако доказана в рандомизированных исследованиях эффективность только некоторых из них, таких как комбинация хондроитина сульфата и глюкозамина.

Из уровня техники известен патент РФ 2290922, опубл. 10.01.2007, который относится к области химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию средств, используемых при лечении болезней суставов. Средство представляет собой лиофилизат, содержащий глюкозамина соль, хондроитинсульфат и трисамин при определенном соотношении компонентов.

Известен патент РФ 2275190, опубл. 27.04.2006, который относится к области фармацевтики, а именно к средствам для лечения болезней суставов в виде инъекционных растворов. Средство содержит хондроитин сульфат (0,5÷20,0 мас. %) и глюкозамина соль (1,0÷25,0 мас. %), консервант (0,1÷2,0 мас. %), неионогенное поверхностно-активное вещество, в частности моноэфир олеиновой кислоты и полиоксиэтилированного сорбитана, (1,0÷5,0 мас. %) и воду (остальное).

Также среди хондропротекторов известны препараты на основе биоактивных экстрактов из мелкой морской рыбы. В клиническую практику введены, в частности, препараты Инкормарин®, Элтуфлоп® Био, Алфлутоп, Амбене® Био. Любой из перечисленных препаратов включает в качестве действующего вещества Биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы - 50 ЕД, в качестве вспомогательных веществ препараты включают фенол и воду для инъекций - до 1,0 мл (https://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routingGuid=53825d50-8a31-4a3e-926d-76f9794cc4f0).

Препараты не предназначены для длительного применения - максимальный курс лечения составляет 20 дней по 1 инъекции в день.

Задачей настоящего изобретения является создание нового эффективного средства с хондропротекторным и противовоспалительным действием.

Задача решается новым комбинированным составом фармацевтического препарата в форме раствора для инъекций.

Фармацевтический препарат с хондропротекторным и противовоспалительным действием в форме раствора для инъекций, содержащий в качестве действующего вещества комбинацию из биоактивного экстракта из мелкой морской рыбы и Даларгина, в качестве вспомогательных веществ фенол, аскорбиновую кислоту или аскорбат натрия, нипазол и воду для инъекций при следующем содержании компонентов:

Биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы 30-70 ME Даларгин 0,5-1,5 мг Аскорбиновая кислота или аскорбат натрия 0,1-2,0 мг Фенол 3,0-5,0 мг Нипазол 0,5-1,5 мг Вода для инъекций до 1,0 мл

Технический результат: разработан состав препарата в форме раствора для внутримышечного введения, направленный на улучшение фармакологического действия, снижения побочных эффектов, возможности более длительного приема, и поддержания стабильности в течении всего срока хранения препарата.

Способ получения фармацевтической композиции в форме раствора заключается в том, чтобы обеспечивать их полное растворение в процессе приготовления с образованием истинного раствора, стабильного при хранении. Вначале в воде для инъекций растворяли фенол, аскорбиновую кислоту и нипазол. Затем вводился даларгин и биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы.

Биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы содержит мукополисахариды (гликозаминогликаны), в том числе гиалуроновую кислоту, хондроитина сульфат, дерматан сульфат, кератан сульфат, низкомолекулярные полипептиды, аминокислоты и микроэлементы- ионы натрия, калия, кальция, магния, железа, меди и цинка. Препарат обладает хондропротекторным и противовоспалительным эффектом, регулирует обмен веществ в хрящевой ткани. Его хондропротекторное действие связано с угнетением активности гиалуронидазы и других ферментов, которые принимают участие в разрушении межклеточного матрикса и нормализации биосинтеза гиалуроновой кислоты и коллагена II типа. Биоактивный экстракт получают из мелкой морской рыбы (шпрот европейский (Sprattus sprattus) семейства сельдевых, мерланг черноморский (Odontogadus merlangus euxinus) семейства тресковых, пузанок черноморский (Alosa tanaica) семейства сельдевых, анчоус европейский (Engraulis encrassicholus) семейства анчоусовых), путем экстракции с последующей депротеинизацией и делипидизацией. Экстракт может быть получен любым известным способом, таким как описано в RO 115696, RO 120608 и т.п.

Даларгин - вещество пептидной природы, синтетический гексапептид, эндогенный антагонист опиоидных рецепторов. Существуют данные о том, что опиодные рецепторы обнаружены на остеобластоподобных опухолевых клетках и что образующие кость клеточные структуры, кроме зрелых остеобластов и остеокластов, способны синтезировать опиоиды.

В одном из экспериментов рассматривалось действие самого даларгина на регенерацию костной ткани и костного мозга. Эксперимент проводился на трубчатых костях. Установлено, что даларгин ускорял регенерацию костного мозга и костной ткани, а также увеличивал объем регенерации костного мозга.

Даларгин в концентрации 100 мкг/л, воздействуя через опиоидные 8-рецепторы, стимулировал пролиферацию in vitro в культуре мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, увеличивая их прирост к 3-м суткам на 19-34%. Кроме того, даларгин в оптимальной концентрации 100 мкг/л оказывал выраженное антипролиферативное действие на клетки остеосаркомы линии HOS, уменьшая их прирост к 3-м суткам на 22-34%.

Фенол - простейший представитель класса фенолов. Бесцветные игольчатые кристаллы, розовеющие на воздухе из за окисления, приводящего к образованию окрашенных веществ. Обладают специфическим запахом гуаши. Растворим в воде в растворах щелочей, в спирте, в бензоле, в ацетоне. 5% раствор в воде - антисептик, широко применяемый в медицине.

Аскорбиновая кислота. В структуре кислоты аскорбиновой имеется ендиольная группа с подвижными атомами водорода. При воздействии кислорода она переходит в 2,3-дикетогулоновую кислоту, лишенную С-витаминной активности. Являясь одним из стабилизаторов, она обрывает кинетические цепи, а фенол, входящий в состав разрушает гидроперекиси без образования радикалов, то есть подавляет вырожденное разветвление кинетических цепей. Появление эффекта синергизма при этом объясняется тем, что аскорбиновая кислота уменьшает количество гидропероксидов, которые затем, распадаясь по радикальному механизму, могли бы вызывать разветвление цепи. Второй же компонент фенол разрушает оставшиеся гидропероксиды с образованием продуктов нерадикального характера и тем самым уменьшает скорости реакций, вызванных разветвлением. В результате оба стабилизатора предохраняют друг друга от быстрого разрушения и совместно обеспечивают длительную защиту препарата. Соль аскорбат натрия не смещает рН раствора в кислую сторону и не обладает местно раздражающим действием. В то же время кислотный остаток данной соли проявляет такой же эффект синергизма с фенолом, что и чистая аскорбиновая кислота.

Нипазол обладает антимикробным свойством и эффективно борется с грибами, плесенью, бактериями и вирусами. Это делает его универсальным препаратам для производства различных медицинских и косметических средств. Нипазол считается относительно безопасными для использования в медицине и косметике. Он имеют низкую токсичность и малую вероятность вызывать аллергические реакции у пациентов. Это позволяет широко применять его в различных препаратах без риска для здоровья пользователя.

Возможность осуществления изобретения может быть продемонстрирована следующими примерами:

Пример 1.

Состав препарата (Таблица 1). 1 ампула содержит:

Способ получения фармацевтической композиции заключается в том, что в воде для инъекций растворяют в течении 10-15 минут фенол, аскорбиновую кислоту и нипазол. Затем вводятся биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы и даларгин, и тщательно перемешивают в течение 20 минут. Далее раствор, после доведения полученного раствора водой для нужного объема и перемешивания в течение 15 минут фильтруется через стерилизующий фильтр. Стерильный раствор разливается в ампулы, которые потом запаиваются.

В течение срока хранения по меньшей мере 2 года при комнатной температуре не наблюдалось значительных изменений в составе лекарственного препарата. То есть полученный раствор по примеру 1 стабилен при хранении.

Пример 2.

Состав препарата (Таблица 2). 1 ампула содержит:

Пример 3.

Противовоспалительная активность.

Комплекс даларгина и биоактивного экстракта из мелкой морской рыбы.

Противовоспалительную активность изучали с помощью оценки ингибирования отечности лапы крысы, индуцированной раствором 2% каррагинана. Для настоящего исследования использовали крыс-самцов Wistar 130-150 г. Впоследствии через 30 минут после внутрибрюшинного введения GAG или диклофенака (в качестве положительного контроля) 0,1 мл 2% каррагинанового раствора вводили подкожно в область правой задней лапы.

Результаты, полученные в эксперименте, показывают тот факт, что испытуемый комплекс обладает противовоспалительной активностью (81,4% при 24 ч), действуя аналогично диклофенаку (83,7%). Таким образом, комплекс даларгина и биоактивного экстракта рыб продемонстрировал комплексное действие против воспалительного процесса: препятствует синтезу простагландинов, оказывает антигиалуронидазное действие, уменьшает образование и действие некоторых пептидов (брадикинин).

Пример 4.

В еще одном эксперименте изучали хондропротективное и обезболивающее действие комплекса даларгина и экстракта морских рыб (КДЭ) в сравнении с глюкозамином (глюкозамин хлорид). Хондропротективное действие КДЭ изучали на белых нелинейных крысах-самцах массой 250-300 г с экспериментальным OA (ЭОА). ЭОА вызывали путем трехкратного в/м введения дексаметазона в разовой дозе 7 мг/кг.

Животные были разделены на три группы: в 1-й группе крысам ежедневно, начиная с 28 суток, и на протяжении 4 недель, вводили КДЭ в разных дозах (50+50 мкг/мл и 100+150 мкг/кг), во 2-й группе животные получали биологический экстракт морских рыб (БЭМ) (50 и 150 мг/кг), в 3-й группе - изотонический раствор натрия хлорида (контрольная группа).

Было показано, что КДЭ в дозе 50+50 мкг/кг позитивно влиял на структуры хрящевой ткани, что проявлялось исчезновением в микропрепаратах хондроцитов, находящихся на разных этапах клеточной гибели. При увеличении дозы КДЭ до 100+150 мкг/кг в клетках наблюдались ярко выраженные мембраны гранулярной эндоплазматической сети, усеянной рибосомами, что свидетельствует о пике биосинтетической активности, причем это касалось именно синтеза экспортных белков (подтверждено хорошей ультраструктурной организацией хрящевого матрикса в виде упорядоченных коллагеновых фибрилл). Более того, КДЭ в дозах 50+50 мкг/мл и 100+150 мкг/кг по выраженности благоприятного действия на ультраструктуру хрящевой ткани превосходил препарат сравнения (БЭМ в обеих дозах). Основной механизм хондропротективного действия КДЭ заключается в антиапоптозной активности: доля апоптозных клеток снижалась примерно в 7 раз при 50+50 мкг/мл, а под влиянием дозы 150 мг/кг - в 13 раз по сравнению с таковой в контрольной группе, что достоверно превосходило активность БЭМ.

Таким образом, комплекс даларгина и биоактивного экстракта из мелкой морской рыбы взаимно дополняли действие друг друга, и, следовательно, могут быть использованы вместе при дегенеративных заболеваниях суставов.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтическому препарату с хондропротекторным и противовоспалительным действием. Фармацевтический препарат с хондропротекторным и противовоспалительным действием в форме раствора для инъекций характеризуется тем, что содержит биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы, даларгин и вспомогательные вещества, включающие фенол, аскорбиновую кислоту или аскорбат натрия, нипазол и воду для инъекций при следующем содержании компонентов: биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы 30-70 ME; даларгин 0,5-1,5 мг; аскорбиновая кислота или аскорбат натрия 0,1-2,0 мг; фенол 3,0-7,0 мг; нипазол 0,5-1,5 мг, вода для инъекций до 1,0 мл. Состав препарата в форме раствора для внутримышечного введения направлен на улучшение фармакологического действия - хондропротекторного и противовоспалительного действия, снижение побочных эффектов, возможность более длительного приема и поддержания стабильности в течение всего срока хранения препарата. 2 табл., 4 пр.

Фармацевтический препарат с хондропротекторным и противовоспалительным действием в форме раствора для инъекций, характеризующийся тем, что содержит биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы, даларгин и вспомогательные вещества, включающие фенол, аскорбиновую кислоту или аскорбат натрия, нипазол и воду для инъекций при следующем содержании компонентов:

Биоактивный экстракт из мелкой морской рыбы 30-70 ME Даларгин 0,5-1,5 мг Аскорбиновая кислота или аскорбат натрия 0,1-2,0 мг Фенол 3,0-7,0 мг Нипазол 0,5-1,5 мг Вода для инъекций до 1,0 мл