СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПРОГРЕССИРУЮЩЕГО ТЕЧЕНИЯ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА У ДЕТЕЙ Российский патент 2025 года по МПК G01N33/50 C12Q1/6827 C12Q1/686 C12Q1/6883 

Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии, и может быть использовано в клинической нефрологии.

Наиболее близким аналогом предлагаемого способа является определение эндотелина-1, как фактора ускоренного падения функции почек при хроническом гломерулонефрите (Литовкина О.Н. Анализ ассоциаций полиморфизма генов вазоактивных гормонов с формированием хронического гломерулонефрита. Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Белгород, 2011). Авторы исследования установили предикторами снижение функции почек - полиморфизм генов параоксоназы-2, эндотелина-1, в2-адренорецепторов и рецепторов 2 типа ангиотензина.

Недостатком прототипа является использование для прогнозирования почечной выживаемости у больных хроническим гломерулонефритом лишь данных о полиморфизме генов вазоактивных факторов (параоксоназы-2, эндотелина-1, в2-адренорецепторов и рецепторов 2 типа ангиотензина).

Сущность предлагаемого нами способа заключается в том, что у пациентов определяют однонуклеотидный полиморфизм генов эндотелина-1, интерлейкина-4 и фактора некроза опухоли. Полиморфизм генов определяет активность эндотелина-1, интерлейкина-4 и фактора некроза опухоли, что ассоциировано с иммунным воспалением у пациентов при разных вариантах гломерулонефрита и прогрессирующим течением заболевания.

Предлагаемый нами способ позволяет прогнозировать прогрессирующее течение гломерулонефрита у детей в дебюте заболевания до манифестации клинико-параклинических признаков нефросклероза, обладает большой диагностической значимостью, доступный, не инвазивный, не требует повторного проведения, позволяет оптимизировать лечение с использованием эфферентных методов лечения, индивидуальных схем патогенетической терапии и ранним использованием нефропротективных препаратов.

Целью настоящего изобретения является создание информативного и точного способа прогнозирования прогрессирующего течения ГН у детей, включающего данные о полиморфизме ключевых генов вазоактивной системы (эндотелин-1) и цитокинов (интерлейкин-4 и фактор некроза опухоли) и позволяющего своевременно осуществлять патогенетическую терапию и превентивные мероприятия.

Эта цель достигается тем, что определяют в клетках периферической крови однонуклеотидный полиморфизм генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A) и при выявлении аллеля 198Asn гена эндотелина-1, аллеля -589T гена интерлейкина-4 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли прогнозируют прогрессирующее течение ГН у детей.

Технический результат заключается в том, что способ позволяет с высокой достоверностью прогнозировать прогрессирующее течение гломерулонефрита у детей на основании раннего выявления генетических предикторов - однонуклеотидных полиморфизмов генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A) и при выявлении аллеля 198Asn гена эндотелина-1, аллеля -589T гена интерлейкина-4 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли.

Лечение ГН включает патогенетическую и нефропротективную терапию, направленную на купирование иммунно-воспалительного процесса и предупреждение прогрессирующего снижения функции почек с исходом в хроническую почечную недостаточность. Известно, что прогрессирование хронических заболеваний почек может начинаться достаточно рано в условиях функциональной компенсации и даже при сохранной массе действующих нефронов, и продолжается на всем протяжении заболевания. Поэтому раннее определение вышеуказанных генетических предикторов позволит своевременно проводить адекватную патогенетическую и нефропротективную терапию, что будет способствовать замедлению прогрессирования болезни. Решение данного вопроса обоснует раннее назначение патогенетических и нефропротективных препаратов, эфферентных методов элиминации иммунных комплексов, что позволит замедлить темпы снижения почечных функций и снизить количество детей-инвалидов, а также позволит улучшить качество жизни больных. Кроме того, данное направление при условии его повсеместной реализации приведет к сокращению бюджетных средств, необходимых для проведения заместительной терапии у детей с терминальной хронической почечной недостаточностью.

Способ реализуется следующим образом. У ребенка с подозрением на прогрессирующее течение ГН забирают кровь из периферической вены и проводят идентификацию однонуклеотидных полиморфизмов генов с помощью метода аллель-специфичной полимеразной цепной реакции [1] согласно протоколам производителей («СибЭнзим», Россия; «Fermentas», Латвия). Оценивают полученные значения генных однонуклеотидных полиморфизмов и сопоставляют их с клинико-параклиническими признаками нефропатии. По выявлению хотя бы одного из однонуклеотидных полиморфизмов вышеуказанных генов - прогнозируют прогрессирующее течение ГН у детей и при его наличии индивидуально корригируют схему патогенетической терапии, кроме этого, назначают нефропротективные препараты (ингибиторы АПФ). При отсутствии в генотипе однонуклеотидных полиморфизмов генов, определяющих прогрессирующее течение заболевания, патогенетическая терапия назначается в обычном режиме, и дополнительная нефропротективная терапия не требуется, в этом случае планируется динамическое наблюдение пациента.

Способ испытан на базе регионального детского нефрологического центра - нефрологического отделения ГБУЗ СОКБ имени В.Д. Середавина, лабораторные исследования выполнены в генетической лаборатории ГБУЗ СО «МСЧ №2» (заведующий лабораторией Шавкунов С.А.).

В основу работы положены результаты комплексного клинико-параклинического обследования 19 детей в возрасте от 1 до 17 лет с разными вариантами ГН. Группу контроля составили 20 условно здоровых детей сопоставимых по возрасту и полу. У пациентов, имеющих аллель 198Asn гена эндотелина-1, аллель -589T гена интерлейкина-4 и аллель 308A гена фактора некроза опухоли заболевание начиналось с яркого дебюта и протекало с частыми обострениями. У большинства пациентов этой группы полной клинико-лабораторной ремиссии практически не наблюдалось. Всем детям была проведена нефробиопсия, при гистологическом исследовании выявлены признаки гломеруло- и тубулосклероза разной выраженности. Всем детям проведено полное комплексное нефрологическое и урологическое обследование, анализ истории болезни (форма №003/у) и амбулаторной карты (форма №112)).

Пример 1. Больной С., 4 года, поступил в ГБУЗ СОКБ им. В.Д. Середавина с вторичным гломерулонефритом, развившимся на фоне геморрагического васкулита. У ребенка наблюдался смешанный вариант иммунно-воспалительного заболевания почек с эпизодами повышения артериального давления. Мальчик получал глюкокортикостероиды и пульс-терапию циклофосфаном, в настоящее время принимает иммунодепрессанты. У мальчика забрали кровь из периферической вены и провели исследование на однонуклеотидный полиморфизм генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A), в результате чего обнаружен фактор некроза опухоли (308A), что в соответствии с предлагаемым способом является прогнозом прогрессирующего течения ГН. Назначена более длительная патогенетическая терапия с использованием иммунодепрессантов (циклоспорина А) и включением нефропротективных препаратов (ингибиторов АПФ), курсами проводится плазмаферез. Длительность терапии контролируется состоянием иммунологического статуса и симптомокомплексом заболевания.

Пример 2. Больная К., 10 лет, поступила в ГБУЗ СОКБ им. В.Д. Середавина с вторичным гломерулонефритом, развившимся на фоне системной красной волчанки. У ребенка наблюдался нефротический синдром. Девочка получает глюкокортикостероиды и иммунодепрессанты. На первом году заболевания проведена пульс-терапия циклофосфаном. У девочки забрали кровь из периферической вены и провели исследование на однонуклеотидный полиморфизм генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A), в результате чего обнаружен интерлейкина-4 (-589T) и фактор некроза опухоли (308A), что в соответствии с предлагаемым способом является прогнозом прогрессирующего течения ГН. Девочка получает плазмаферез, патогенетическое лечение глюкокортикостероидами и иммунодепрессантами (микофенолат мофетил) и нефропротективные препараты (ингибиторы АПФ), длительность терапии контролируется состоянием иммунологического статуса и симптомокомплексом заболевания.

Пример 3. Больная Ф., 10 лет, поступила в ГБУЗ СОКБ им. В.Д. Середавина с болезнью тонких мембран и гематурической формой хронического гломерулонефрита. У ребенка регистрируется персистирующая макрогематурия и незначительная протеинурия. У девочки забрали кровь из периферической вены и провели исследование на однонуклеотидный полиморфизм генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A), в результате чего обнаружен эндотелина-1 (198Asn), что в соответствии с предлагаемым способом является прогнозом прогрессирующего течения ГН. Девочка получает плазмаферез, патогенетическое лечение глюкокортикостероидами и нефропротективные препараты (ингибиторы АПФ), длительность терапии контролируется состоянием иммунологического статуса и симптомокомплексом заболевания.

Список литературы:

1. Schumm, James W., et al., "Development of a Nonisotopic Multiplex Amplification Sets for Analysis of Polymorphic STR Loci," Fourth International Symposium on Human Identification (1993), pp. 177-187.

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования прогрессирующего течения гломерулонефрита у детей. В клетках периферической крови определяют однонуклеотидный полиморфизм генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A). При выявлении аллеля 198Asn гена эндотелина-1, аллеля -589T гена интерлейкина-4 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли; аллеля 198Asn гена эндотелина-1 и аллеля -589T гена интерлейкина-4; аллеля 198Asn гена эндотелина-1 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли; аллеля -589T гена интерлейкина-4; аллеля -589T гена интерлейкина-4 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли; аллеля 198Asn гена эндотелина-1 прогнозируют прогрессирующее течение гломерулонефрита у детей. Способ обеспечивает высокую достоверность прогнозирования прогрессирующего течения гломерулонефрита у детей за счет определения однонуклеотидных полиморфизмов генов эндотелина-1 (Lys198Asn), интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A). 3 пр.

Способ прогнозирования прогрессирующего течения гломерулонефрита у детей, включающий определение однонуклеотидного полиморфизма гена эндотелина-1, отличающийся тем, что определяют в клетках периферической крови однонуклеотидный полиморфизм генов интерлейкина-4 (C-589T) и фактора некроза опухоли (G308A) и при выявлении указанных генов: аллеля 198Asn гена эндотелина-1, аллеля -589T гена интерлейкина-4 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли; аллеля 198Asn гена эндотелина-1 и аллеля -589T гена интерлейкина-4; аллеля 198Asn гена эндотелина-1 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли; аллеля -589T гена интерлейкина-4; аллеля -589T гена интерлейкина-4 и аллеля 308A гена фактора некроза опухоли; аллеля 198Asn гена эндотелина-1 - прогнозируют прогрессирующее течение гломерулонефрита у детей.