СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ ПУТЕМ ВВЕДЕНИЯ ИНИБИТОРА PD-1 Российский патент 2025 года по МПК C07K16/28 A61K39/395 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение в целом относится к способам лечения или ингибирования роста опухоли или улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, включающим отбор пациентки с раком шейки матки, нуждающейся в этом, и введение пациентке терапевтически эффективного количества ингибитора белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1).

Предшествующий уровень техники настоящего изобретения

Рак шейки матки является четвертым наиболее часто диагностируемым раком и четвертой по значимости причиной смерти от рака у женщин во всем мире, примерно 570000 случаев в год и примерно 311000 связанных с ним смертей в 2018 году (Bray et al., СА Cancer J Clin, 68 (2018) 394-424). Приблизительно 95% случаев рака шейки матки связаны с хронической инфекцией папилломавирусом человека (HPV). (Burk et al., Nature 543 (2017) 378-384). Приблизительно 80% случаев рака шейки матки классифицируются как плоскоклеточная карцинома (возникающая из клеток, выстилающих дно шейки матки), а остальные случаи в основном представляют собой аденокарциномы (возникающие из железистых клеток в верхней части шейки матки). Хотя прогнозируется, что вакцинация против штаммов HPV высокого риска постепенно снизит глобальную заболеваемость раком шейки матки в следующие 15 лет, бремя этого заболевания остается тяжелым (Bray et al., Lancet Oncol, 2012; 13:790-801).

Рак шейки матки часто излечим при раннем обнаружении и эффективном лечении, но варианты лечения более ограничены на поздних стадиях. В Соединенных Штатах примерно у трети пациенток с раком шейки матки возникают рецидивы или метастазы, и они получают химиотерапию в качестве терапии первой линии. Однако по меньшей мере две трети из этих пациенток в конечном итоге прекратят химиотерапию первой линии из-за прогрессирования заболевания, токсичности или смерти.

Для пациенток с местнораспространенным заболеванием направленное на излечение вмешательство представляет собой радикальную лучевую терапия с одновременным приемом цисплатина. Пациенткам с рецидивирующим или метастатическим заболеванием назначают химиотерапию в сочетании с бевацизумабом по показаниям. (Marth et al., Ann Oncol, 28 (2017) iv72-iv83). Терапия первой линии у этих пациенток комбинацией цисплатина, паклитаксела и бевацизумаба ассоциирована с увеличением общей выживаемости (OS, 17,0 против 13,3 месяцев) и более высокой частотой ответа (48% против 36%), по сравнению с комбинацией только цисплатина и паклитаксела. (Tewari et al., N Engl J Med, 370 (2014) 734-743). Однако не существует стандарта лечения после прогрессирования на фоне химиотерапии первой линии на основе платины-таксана по поводу рецидивирующего или метастатического заболевания. Следовательно, варианты лечения ограничены для пациенток после прогрессирования их опухолей по этим схемам, и медиана выживаемости составляет всего около 7 месяцев в условиях второй или последующих линий. (Marth et al., Ann Oncol 28 (2017) iv72-iv83; Lorusso et al., Ann Oncol 21 (2010) 61-66; Miller et al., Gynecol Oncol 110 (2008) 65-70). Пембролизумаб получил ускоренное одобрение Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов для лечения пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии (чьи опухоли экспрессируют лиганд белка запрограммированной гибели клеток 1 на основании частоты объективных ответов и продолжительности ответов) (Lorusso et al., Ann Oncol 21 (2010) 61-66). Тем не менее, ни один препарат не продемонстрировал улучшение общей выживаемости после химиотерапии первой линии при метастатическом раке шейки матки. Необходимо разработать варианты лечения для пациенток с рецидивирующей или метастатической карциномой шейки матки после прогрессирования на фоне стандартной химиотерапии первой линии на основе таксана-платины с бевацизумабом или без него.

Экспрессия лиганда белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-L1), являющегося контрольной точкой иммунного ответа, представляет собой стратегию уклонения от иммунной системы, наблюдаемой как в опухолевых клетках, так и в инфицированных вирусом клетках. Экспрессия PD-L1 была обнаружена в большинстве случаев плоскоклеточного рака шейки матки с помощью иммуногистохимического анализа опухолевых клеток и окружающей стромы (Heeren et al., Cancer Immunol Res 3 (2015) 48-58). Все еще сохраняется потребность в безопасных и эффективных методах лечения рака шейки матки.

Краткое описание изобретения

В одном аспекте раскрытая технология относится к способу лечения или ингибирования роста опухоли или улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, включающему: отбор пациентки с раком шейки матки; и введение пациентке терапевтически эффективного количества ингибитора белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1). В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки выбирают из группы, состоящей из плоскоклеточной карциномы, аденокарциномы и аденосквамозной карциномы. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному шейки матки. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки является распространенным, рецидивирующим, персистирующим и/или метастатическим. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки является рецидивирующим или метастатическим. В некоторых вариантах осуществления у пациентки наблюдается прогрессирование заболевания на фоне или после химиотерапии. В некоторых вариантах осуществления у пациентки имеется рецидивирующий или метастатический рак шейки матки с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии. В некоторых вариантах осуществления у пациентки имеется рак шейки матки с гистологическим вариантом плоскоклеточной карциномы. В некоторых вариантах осуществления у пациентки имеется рак шейки матки, для которого не существует варианта лечения, направленного на излечение (например, оперативное вмешательство или лучевая терапия с химиотерапией или без нее). В некоторых таких вариантах осуществления пациентка не является кандидатом на радикальное оперативное вмешательство или радикальную лучевую терапию. В некоторых вариантах осуществления пациентка получала предшествующее лечение, такое как химиотерапия (например, паклитаксел) или анти-VEGF терапия (например, бевацизумаб). В некоторых таких вариантах осуществления пациентка является резистентной или рефраторной к предшествующей терапии. В некоторых вариантах осуществления пациентка получала предшествующую противораковую терапию, которая была прекращена из-за прогрессирования заболевания и/или токсичности. В некоторых вариантах осуществления предшествующая противораковая терапия (например, химиотерапия или бевацизумаб) не подходит для пациентки с раком шейки матки.

В некоторых вариантах осуществления пациентка получала предшествующую противораковую терапию. В некоторых вариантах осуществления пациентка является резистентной к предшествующему лечению с применением противораковой терапии или рак шейки матки прогрессировал после него. В некоторых вариантах осуществления предшествующая противораковая терапия включает одно или несколько из химиотерапии, оперативного вмешательства, лучевой терапии и/или анти-VEGF терапии. В некоторых вариантах осуществления предшествующая противораковая терапия включает химиотерапию на основе платины, выбранной из пеметрекседа, топотекана, иринотекана, гемцитабина и винорелбина. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки характеризуется повышенной экспрессией PD-L1. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки характеризуется повышенной экспрессией белка PD-L1. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки характеризуется повышенной экспрессией мРНК PD-L1. В некоторых вариантах осуществления пациентка имеет положительный результат теста на папилломавирус человека (HPV). В некоторых вариантах осуществления пациентка имеет отрицательный результат теста на папилломавирус человека (HPV).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в виде монотерапии. В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора PD-1 способствует регрессии опухоли, снижает нагрузку опухолевых клеток, уменьшает массу опухоли и/или предупреждает рецидив опухоли у пациентки. В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора PD-1 приводит по меньшей мере к одному улучшению, выбранному из увеличения общей выживаемости, выживаемости без прогрессирования, частоты общего ответа, полного ответа, частичного ответа и стабилизации заболевания, по сравнению с пациентками, получавшими химиотерапию. В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора PD-1 приводит к увеличению общей выживаемости по сравнению с пациентками, получающими химиотерапию. В некоторых вариантах осуществления любое из перечисленных выше улучшений происходит независимо от экспрессии PD-L1 в опухоли.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в комбинации со вторым терапевтическим агентом или терапией. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 выбран из антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента, антитела против PD-L1 или его антигенсвязывающего фрагмента, и антитела против PD-L2 или его антигенсвязывающего фрагмента. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 выбран из антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент, которое содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую три области, определяющие комплементарность тяжелых цепей (CDR) (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), и вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую три CDR легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где: HCDR1 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; HCDR2 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; HCDR3 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; LCDR1 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; LCDR2 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и LCDR3 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8. В некоторых вариантах осуществления HCVR содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления LCVR содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит парную аминокислотную последовательность HCVR/LCVR SEQ ID NO: 1/2. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, где тяжелая цепь имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, где легкая цепь имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, где тяжелая цепь имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и легкая цепь имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее HCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее LCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее HCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1, и LCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой цемиплимаб или его биоэквивалент.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-1, выбранное из группы, состоящей из цемиплимаба, ниволумаба, пембролизумаба, пидилизумаба, MEDI0608, BI 754091, PF-06801591, спартализумаба, камрелизумаба, JNJ-63723283 и MCLA-134. В других вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-L1, выбранное из группы, состоящей из REGN3504, авелумаба, атезолизумаба, дурвалумаба, MDX-1105, LY3300054, FAZ053, STI-1014, СХ-072, KN035 и СК-301. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в дозе от 5 мг до 1500 мг. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в дозе 200 мг, 250 мг, 350 мг, 400 мг, 500 мг, 600 мг, 700 мг, 750 мг, 800 мг, 1000 мг, 1050 мг или 1200 мг. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в дозе от 1 мг/кг до 20 мг/кг массы тела пациентки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в дозе 1 мг/кг, 3 мг/кг или 10 мг/кг массы тела пациентки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят в виде одной или нескольких доз, при этом каждую дозу вводят каждую неделю, каждые две недели, три недели, четыре недели, пять недель или шесть недель. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 вводят внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно.

В другом аспекте раскрытая технология относится к ингибитору белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1) для применения в способе лечения или ингибирования роста опухоли или улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, при этом способ включает: (а) отбор пациентки с раком шейки матки; и (b) введение пациентке терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой рецидивирующий или метастатический рак шейки матки с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии, или для которого химиотерапия не подходит.

В другом аспекте раскрытая технология относится к набору, включающему ингибитор белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1) в сочетании с письменными инструкциями по применению терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 для лечения или ингибирования роста опухоли или улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки.

Краткое описание фигур

Фигура 1 представляет собой блочную диаграмму экспрессии мРНК PD-L1 при раке шейки матки с использованием Атласа генома рака (The Cancer Genome Atlas, TCGA) по гистологическому варианту, как описано в примере 1.

Фигура 2 представляет собой блок-схему исследования, описанного в примере 2.

Фигура 3 представляет собой график, показывающий среднее изменение от исходного уровня по шкале Общего статуса здоровья / Качества жизни (Global Health Status / Quality of Life), оценки при помощи модели со смешанными эффектами для повторных измерений в общей популяции пациенток, описанных в примере 4.

Фигура 4 представляет собой кривую Каплана-Мейера общей выживаемости в общей популяции (полная выборка для анализа) пациенток с гистологическим вариантом плоскоклеточной карциномы (SCC) и не-SCC в исследовании, описанном в примере 4.

Фигура 5 представляет собой кривую Каплана-Мейера общей выживаемости у пациенток с SCC (полная выборка для анализа) среди пациенток с гистологическим вариантом SCC в исследовании, описанном в примере 4.

Фигура 6 представляет собой кривую Каплана-Мейера общей выживаемости у пациенток с аденокарциномой (полная выборка для анализа) среди пациенток с гистологическим вариантом аденокарциномы/аденосквамозной карциномы в исследовании, описанном в примере 4.

Фигура 7 представляет собой кривую Каплана-Мейера выживаемости без прогрессирования в общей популяции (полная выборка для анализа) среди пациенток с гистологическим вариантом плоскоклеточной карциномы (SCC) и не-SCC в исследовании, описанном в примере 4.

Фигура 8 представляет собой кривую Каплана-Мейера выживаемости без прогрессирования у пациенток с SCC (полная выборка для анализа) среди пациенток с гистологическим вариантом SCC в исследовании, описанном в примере 4.

Фигура 9 представляет собой кривую Каплана-Мейера выживаемости без прогрессирования у пациенток с аденокарциномой (полная выборка для анализа) среди пациенток с гистологическим вариантом аденокарциномы/аденосквамозной карциномы в исследовании, описанном в примере 4.

Подробное описание изобретения

Следует понимать, что настоящее изобретение не ограничено описанными конкретными способами и экспериментальными условиями, поскольку такие способы и условия могут варьироваться. Также следует понимать, что используемая в настоящем документе терминология предназначена только для целей описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения, и что объем настоящего раскрытия будет ограничен только прилагаемой формулой изобретения. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в области техники, к которой относится данное изобретение. Хотя любые способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным в настоящем документе, могут быть использованы при практическом применении или тестировании настоящего изобретения, теперь описаны предпочтительные способы и материалы. Все публикации, упомянутые в настоящем документе, включены в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте, если не указано иное.

Способы лечения или ингибирования роста злокачественной опухоли шейки матки

Настоящее изобретение включает способы лечения или ингибирования роста опухоли или улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, включающие отбор пациентки с раком шейки матки и введение пациентке, нуждающейся в этом, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с PD-1, PD-L1 и/или PD-L2, или любого другого «ингибитора PD-1», как описано в настоящем документе. В настоящем изобретении ссылки на конкретные антитела против PD-1 представлены для иллюстрации репрезентативного ингибитора PD-1 и не ограничивают объем изобретения.

В некоторых вариантах осуществления раскрытые способы обеспечивают неожиданно эффективную иммунотерапию, которая улучшает общую выживаемость пациенток с раком шейки матки по сравнению с пациентками с раком шейки матки, получающими химиотерапию. В некоторых вариантах осуществления введение пациентке с раком шейки матки терапевтически эффективного количества антитела против PD-1 (например, цемиплимаба или его биоэквивалента) приводит к улучшению общей выживаемости по сравнению с пациенткой с раком шейки матки, получавшей химиотерапию или другое антитело против PD-1 (например, пембролизумаб или ниволумаб). В некоторых вариантах осуществления введение пациентке с раком шейки матки терапевтически эффективного количества антитела против PD-1 (например, цемиплимаба или его биоэквивалента) обеспечивает улучшенный профиль безопасности и приводит к более низкой частоте нежелательных явлений по сравнению с пациенткой с раком шейки матки, получавшей химиотерапию. В некоторых вариантах осуществления введение пациентке с раком шейки матки терапевтически эффективного количества антитела против PD-1 (например, цемиплимаба или его биоэквивалента) приводит к улучшению общего среднего изменения от исходного уровня по шкале Quality of Life пациентки по сравнению с пациенткой с раком шейки матки, получавшей химиотерапию.

Способы по настоящему изобретению обеспечивают неожиданно эффективное лечение среди популяций пациенток с раком шейки матки, включая пациенток с плоскоклеточной карциномой, аденокарциномой и аденосквамозной карциномой, независимо от экспрессии PD-L1 в опухоли. Таким образом, раскрытые способы обеспечивают значительное преимущество, состоящее в их эффективности не только против плоскоклеточных форм рака шейки матки, но также аденокарциномы, которая особенно трудно поддается лечению. Способы по настоящему изобретению также обеспечивают неожиданно эффективную терапию второй линии в качестве лечения пациенток с раком шейки матки, которые ранее подвергались лечению и/или у которых рак шейки матки прогрессировал на фоне химиотерапии (например, химиотерапии на основе платины, такой как пеметрексед, топотекан, иринотекан, гемцитабин или винорелбин), или которым химиотерапия противопоказана.

В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению не требуют, чтобы пациентка с раком шейки матки проходила тестирование на PD-L1 перед лечением ингибитором PD-1, таким как антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент (например, цемиплимаб или его биоэквивалент). В этом аспекте раскрытые способы включают введение терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 пациентке с раком шейки матки, которая не демонстрирует и не обязательно должна демонстрировать пороговую экспрессию PD-L1. В других вариантах осуществления экспрессия PD-L1 у пациентки с раком шейки матки составляет около 1%, около 2%, около 5%, около 10%, около 20%, около 30%, около 40%, около 50% или более в раковой ткани и/или опухоль-инфильтрирующих иммунных клетках.

Используемые в настоящем документе термины «лечение», «лечить» и т.п. означают облегчение или снижение тяжести по меньшей мере одного симптома или признака, устранение причины симптомов либо на временной, либо на постоянной основе, для задержки или ингибирования роста опухоли, для уменьшения нагрузки опухолевых клеток или массы опухоли, для стимуляции регрессии опухоли, для уменьшения размера опухоли, некроза и/или исчезновения опухоли, для предотвращения рецидива опухоли, для предотвращения или ингибирования метастазирования, для ингибирования роста метастатической опухоли, для устранения необходимости в облучении или оперативном вмешательстве и/или увеличения продолжительности выживания субъекта. Во многих вариантах осуществления термины «опухоль», «поражение», «опухолевое поражение», «рак» и «злокачественное новообразование» используются взаимозаменяемо и относятся к одному или нескольким злокачественным новообразованиям.

В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой рецидивирующий, персистирующий и/или метастатический рак шейки матки. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой распространенный рак шейки матки. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой плоскоклеточную карциному (SCC) шейки матки. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой аденокарциному. В некоторых вариантах осуществления рак шейки матки представляет собой аденосквамозную карциному. В некоторых вариантах осуществления у пациентки имеется рак шейки матки, для которого не существует варианта лечения, направленного на излечение (например, оперативное вмешательство или лучевая терапия с химиотерапией или без нее). В некоторых вариантах осуществления у пациентки с раком шейки матки наблюдается повышенный уровень экспрессии PD-L1 в опухолевой ткани, при этом опухолевая ткань содержит опухолевые клетки и инфильтрирующие опухоль иммунные клетки.

Используемый в настоящем документе термин «рецидивирующий» относится к частому или неоднократному диагнозу рака шейки матки у пациентки или к частому или неоднократному возникновению отдельных опухолей, таких как первичные опухоли и/или новые опухоли, которые могут представлять рецидив предшествующей опухоли. В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора PD-1 ингибирует рецидив злокачественной опухоли шейки матки у пациентки.

Используемое в настоящем документе выражение «субъект, нуждающийся в этом» означает человека или млекопитающего, отличного от человека, у которого проявляется один или несколько симптомов или признаков рака шейки матки, и/или у которого был диагностирован рак шейки матки и которому требуется лечение. Во многих вариантах осуществления термины «субъект» и «пациент» используются взаимозаменяемо. Выражение включает субъектов с первичными, установившимися, рецидивирующими или метастатическими опухолями (злокачественными новообразованиями на поздних стадиях). В конкретных вариантах осуществления экспрессия включает субъектов-людей, которые проходят и/или нуждаются в лечении рецидивирующего и/или метастатического рака шейки матки. Выражение также включает субъектов с персистирующим раком шейки матки (заболевание, для которого не существует полного излечения после химиолучевой терапии). В некоторых вариантах осуществления экспрессия включает пациенток с раком шейки матки, который является резистентным или рефракторным, или неадекватно контролируется предшествующей терапией (например, оперативным вмешательством или химиотерапией, такой как карбоплатин или доцетаксел). В некоторых вариантах осуществления выражение включает субъектов с раком шейки матки, которые не являются кандидатами на излечивающее оперативное вмешательство или излечивающую лучевую терапию, или для которых обычная противораковая терапия не рекомендуется, например, из-за токсических побочных эффектов. В некоторых вариантах осуществления выражение включает пациенток с раком шейки матки, которые ранее получали химиотерапию или любую другую противораковую терапию, прогрессировали на фоне такого лечения или были непригодны (или не подходили) для такого лечения (например, пациентки, которые ранее получали паклитаксел и/или предшествующий бевацизумаб, или которые считались непригодными для такого лечения). В некоторых вариантах осуществления выражение включает пациенток с раком шейки матки, которые получали лечение платиной, паклитакселом и/или бевацизумабом, и у которых наблюдалось прогрессирование заболевания. В одном варианте осуществления экспрессия включает пациенток с резистентным к платине раком шейки матки.

В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения пациенток с раком шейки матки, у которых наблюдаются повышенные уровни одного или нескольких связанных с раком биомаркеров, например, лиганда белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-L1), онкогенов HPV Е6 или Е7. В одном варианте осуществления способы по настоящему изобретению включают введение терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) пациентке с повышенным уровнем PD-L1 в опухолевой ткани. В другом варианте осуществления способы применяют у пациенток с раком шейки матки, отобранных по экспрессии PD-L1 в раковой ткани. В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению применяют для лечения пациенток с раком шейки матки, которых отбирают по экспрессии PD-L1 в раковой ткани и/или инфильтрирующих опухоль иммунных клетках, составляющей по меньшей мере 1%, по меньшей мере 2%, по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40% или по меньшей мере 50%. Способы определения экспрессии PD-L1 в раковой ткани и/или иммунных клетках известны в данной области. В некоторых вариантах осуществления экспрессию PD-L1 в опухолевой ткани определяют с помощью любого анализа, известного в данной области, например, с помощью анализа ELISA или иммуногистохимического анализа (IHC), как описано, например, в WO 2016124558, WO 2016191751 или US 20160305947. В некоторых вариантах осуществления экспрессию PD-L1 определяют путем количественной оценки экспрессии РНК, например, путем гибридизации in situ или с помощью RT-PCR. В некоторых вариантах осуществления экспрессию PD-L1 определяют путем визуализации с помощью меченого антитела против PD-L1, например, с помощью иммуно-позитронно-эмиссионной томографии или iPET. См., например, The Oncologist, 12: 1379 (2007); Journal of Nuclear Medicine, 52(8): 1171 (2011); US 20180161464.

В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения пациенток с раком шейки матки, которые имеют положительный результат теста на HPV. В других вариантах осуществления способы по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения пациенток с раком шейки матки, у которых тест на HPV отрицательный.

В некоторых вариантах осуществления раскрытые способы включают введение терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) в сочетании с противоопухолевой терапией. Противоопухолевая терапия включает, но без ограничения, стандартную противоопухолевую терапию, такую как химиотерапия, облучение, оперативное вмешательство или другие способы, описанные в настоящем документе.

Способы по настоящему изобретению в соответствии с некоторыми вариантами осуществления включают введение субъекту терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) в сочетании со вторым терапевтическим агентом или терапией. Второй терапевтический агент или терапию можно вводить для повышения противоопухолевой эффективности, для уменьшения токсических эффектов одного или нескольких видов терапии и/или для снижения дозировки одной или нескольких видов терапий. В различных вариантах осуществления второй терапевтический агент или терапия могут включать одно или несколько из следующего: облучение, оперативное вмешательство, противораковую вакцину, имиквимод, противовирусный агент (например, цидофовир), фотодинамическую терапию, ингибитор лиганда белка запрограммированной гибели клеток 1 (PD-L1) (например, антитело против PD-L1), ингибитор гена 3 активации лимфоцитов (LAG3) (например, антитело против LAG3), ингибитор белка 4, ассоциированного с цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTLA-4) (например, ипилимумаб), агонист рецептора фактора некроза опухоли, индуцированного глюкокортикоидами (GITR) (например, антитело против GITR), ингибитор Т-клеточного иммуноглобулина и муцин-домена, содержащего-3 (TIM3), ингибитор аттенюатора В- и Т-лимфоцитов (BTLA), ингибитор Т-клеточного иммунорецептора с доменами Ig и ITIM (TIGIT), ингибитор CD38, ингибитор CD47, ингибитор индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO), активатор CD28, антагонист фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) [например, «VEGF-ловушка», такая как афлиберцепт, или антитело к VEGF или его антигенсвязывающий фрагмент (например, вацизумаб или ранибизумаб) или ингибитор низкомолекулярных рецепторов киназы VEGF (например, сунитиниб, сорафениб или пазопаниб)], ингибитор ангиопоэтина-2 (Ang2), ингибитор трансформирующего фактора роста бета (TGFβ), ингибитор рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), антитело к опухолеспецифическому антигену [например, СА9, СА125, меланома-ассоциированный антиген 3 (MAGE3), карциноэмбриональный антиген (СЕА), виментин, Tu-М2-PK, простатспецифический антиген (PSA), муцин-1, MART-1 и СА19-9], вакцину (например, Bacillus Calmette-Guerin), гранулоцитарно-макрофагальный колоннестимулирующий фактор, онколитический вирус, цитотоксин, химиотерапевтический агент (например, пеметрексед, дакарбазин, темозоломид, циклофосфамид, доцетаксел, доксорубицин, даунорубицин, цисплатин, карбоплатин, гемцитабин, метотрексат, митоксантрон, оксалиплатин, паклитаксел, топотекан, иринотекан, винорелбин и винкристин), ингибитор IL-6R, ингибитор IL-4R, ингибитор IL-10, цитокин, такой как IL-2, IL-7, IL-12, IL-21 и IL-15, конъюгат антитело-лекарственное средство, противовоспалительное лекарственное средство, такое как кортикостероид, нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (NSAID), криотерапию, терапию против HPV, лазерную терапию, электрохирургическое иссечение клеток с HPV и пищевую добавку, такую как антиоксидант.

В некоторых вариантах осуществления введение субъекту с раком шейки матки терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) приводит к повышенному ингибированию роста опухоли, например, большей регрессии опухоли у получавшего лечение субъекта. В некоторых вариантах осуществления введение субъекту с раком шейки матки терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (такого как антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент) приводит к усилению регрессии опухоли, уменьшению размера опухоли и/или ее исчезновению. В некоторых вариантах осуществления введение ингибитора PD-1 приводит к задержке роста и развития опухоли, например, рост опухоли может быть задержан примерно на 3 дня, более чем на 3 дня, примерно на 7 дней, более чем на 7 дней, более чем на 15 дней, дней, более чем на 1 месяц, более чем на 3 месяца, более чем на 6 месяцев, более чем на 1 год, более чем на 2 года или более чем на 3 года у получающего лечение субъекта по сравнению с не получавшим лечение субъектом или субъектом, получавшим химиотерапию на основе платины или другую терапию SOC, такую как описанные в настоящем документе. В одном варианте осуществления повышенное ингибирование роста опухоли происходит независимо от экспрессии PD-L1 в опухоли.

В некоторых вариантах осуществления введение субъекту с раком шейки матки терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) предотвращает рецидив опухоли и/или увеличивает продолжительность выживания субъекта, например, увеличивает продолжительность выживания более чем на 15 дней, более чем на 1 месяц, более чем на 3 месяца, более чем на 6 месяцев, более чем на 12 месяцев, более чем на 18 месяцев, более чем на 24 месяца, более чем на 36 месяцев или более чем на 48 месяцев по сравнению с не получавшим лечение субъектом или субъектом, получавшим химиотерапию на основе платины или другую терапию «стандартного лечения» (SOC), такую как раскрытые в настоящем документе. В одном варианте осуществления предотвращение рецидива опухоли и увеличение продолжительности выживания происходит независимо от экспрессии PD-L1 в опухоли.

В некоторых вариантах осуществления введение субъекту с раком шейки матки терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) приводит к увеличению общей выживаемости (OS) или выживаемости без прогрессирования (PFS) субъекта по сравнению с субъектом, который получал терапию SOC. Неограничивающие примеры стандартного лечения включают химиотерапию на основе платины (например, химиотерапия на основе платины-таксана), антифолаты (например, пеметрексед), ингибиторы топоизомеразы 1 (например, топотекан или иринотекан), аналоги нуклеозидов (например, гемцитабин), алкалоид барвинка (например, винорелбин), оперативное вмешательство, лучевую терапию и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления PFS увеличивается по меньшей мере на один месяц, по меньшей мере на 2 месяца, по меньшей мере на 3 месяца, по меньшей мере на 4 месяца, по меньшей мере на 5 месяцев, по меньшей мере на 6 месяцев, по меньшей мере на 7 месяцев, по меньшей мере на 8 месяцев, по меньшей мере на 9 месяцев, по меньшей мере на 10 месяцев, по меньшей мере на 11 месяцев, по меньшей мере на 1 год, по меньшей мере на 2 года или по меньшей мере на 3 года по сравнению с субъектом, который получал любую одну или несколько видов терапий SOC. В некоторых вариантах осуществления OS увеличивается по меньшей мере на один месяц, по меньшей мере на 2 месяца, по меньшей мере на 3 месяца, по меньшей мере на 4 месяца, по меньшей мере на 5 месяцев, по меньшей мере на 6 месяцев, по меньшей мере на 7 месяцев, по меньшей мере на 8 месяцев, при по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 10 месяцев, по меньшей мере 11 месяцев, по меньшей мере 1 год, по меньшей мере 2 года или по меньшей мере 3 года по сравнению с субъектом, который получал любую одну или несколько видов терапий SOC (например, химиотерапию на основе платины).

Ингибиторы PD-1

Способы, раскрытые в настоящем документе, включают введение терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1. Используемый в настоящем документе термин «ингибитор PD-1» относится к любой молекуле, способной ингибировать, блокировать, отменять или препятствовать активности или экспрессии PD-1. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 может представлять собой антитело, низкомолекулярное соединение, нуклеиновую кислоту, полипептид или их функциональный фрагмент или вариант. Неограничивающие примеры подходящих антител-ингибиторов PD-1 включают антитела против PD-1 и их антигенсвязывающие фрагменты, антитела против PD-L1 и их антигенсвязывающие фрагменты, и антитела против PD-L2 и их антигенсвязывающие фрагменты. Другие неограничивающие примеры подходящих ингибиторов PD-1 включают молекулы RNAi, такие как молекулы RNAi против PD-1, RNAi против PD-L1 и RNAi против PD-L2, антисмысловые молекулы, такие как антисмысловая РНК против PD-1, антисмысловая РНК против PD-L1 и антисмысловая РНК против PD-L2, и доминантно-негативные белки, такие как доминантно-негативный белок PD-1, доминантно-негативный белок PD-L1 и доминантно-негативный белок PD-L2. Некоторые примеры вышеупомянутых ингибиторов PD-1 описаны, например, в US 9308236, US 10011656 и US 20170290808, части которых, идентифицирующие ингибиторы PD-1, включены в настоящее описание посредством ссылки.

Используемый в настоящем документе термин «антитело» предназначен для обозначения молекул иммуноглобулина, состоящих из четырех полипептидных цепей, двух тяжелых (Н) цепей и двух легких (L) цепей, взаимосвязанных дисульфидными связями (т.е. «молекул целого антитела»), а также его мультимеров (например, IgM) или его антигенсвязывающих фрагментов. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи («HCVR» или «V_H») и константной области тяжелой цепи (состоит из доменов C_H1, C_H2 и C_H3). Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи («LCVR или «V_L») и константной области легкой цепи (C_L). Области V_H и V_L могут дополнительно подразделяться на области гипервариабельности, которые называются определяющими комплементарность областями (CDR), перемежающимися с более консервативными областями, называемыми каркасными областями (FR). Каждая V_H и V_L состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. В некоторых вариантах осуществления FR антитела (или его антигенсвязывающего фрагмента) могут быть идентичными с человеческими последовательностям зародышевой линии или могут быть модифицированы естественным или искусственным путем. Аминокислотная консенсусная последовательность может быть определена на основе анализа расположенных параллельно двух или более CDR. Используемый в настоящем документе термин «антитело» также включает антигенсвязывающие фрагменты молекул целого антитела.

Используемые в настоящем документе термины «антигенсвязывающий фрагмент» антитела, «антигенсвязывающая часть» антитела и т.п. включают любой встречающийся в природе, получаемый ферментативным путем, синтетический или генетически сконструированный полипептид или гликопротеин, который специфически связывается с антигеном с образованием комплекса. Антигенсвязывающие фрагменты антитела могут быть получены, например, из молекул целых антител с применением любых подходящих стандартных методик, таких как протеолитическое расщепление или рекомбинантные методы генетической инженерии, предусматривающие манипуляцию и экспрессию ДНК, кодирующей вариабельные и необязательно константные домены антитела. Такая ДНК известна и/или легкодоступна, например, из коммерческих источников, библиотек ДНК (включая, например, библиотеки фагов-антител) или может быть синтезирована. ДНК можно секвенировать и с ней можно проводить манипуляции химическими способами или при помощи методов молекулярной биологии, например, для организации одного или нескольких вариабельных и/или константных доменов в подходящую конфигурацию или введения кодонов, создания цистеиновых остатков, модификации, добавления или удаления аминокислот и т.д.

Неограничивающие примеры антигенсвязывающих фрагментов включают: (i) фрагменты Fab; (ii) фрагменты F(ab')₂; (iii) фрагменты Fd; (iv) фрагменты Fv; (v) одноцепочечные молекулы Fv (scFv); (vi) фрагменты dAb; и (vii) минимальные единицы распознавания, состоящие из аминокислотных остатков, которые имитируют гипервариабельную область антитела (например, выделенную определяющую комплементарность область (CDR), такую как пептид CDR3), или ограниченный пептид FR3-CDR3-FR4. Также используемым в настоящем документе выражением «антигенсвязывающий фрагмент» охвачены другие сконструированные молекулы, такие как домен-специфические антитела, однодоменные антитела, антитела с удаленным доменом, химерные антитела, антитела с привитыми CDR, диатела, триотела, тетратела, минитела, нанотела (например, моновалентные нанотела, двухвалентные нанотела и т.д.), иммунопрепараты на основе модульного белка с малым размером молекул (SMIP) и вариабельные домены IgNAR акулы.

Антигенсвязывающий фрагмент антитела, как правило, содержит по меньшей мере один вариабельный домен. Вариабельный домен может иметь любой размер или любой аминокислотный состав и, как правило, будет содержать по меньшей мере одну CDR, которая является смежной с одной или несколькими каркасными последовательностям или находится в рамке считывания. В антигенсвязывающих фрагментах, имеющих домен V_H, связанный с доменом V_L, домены V_H и V_L могут быть расположены относительно друг друга в любом подходящем порядке. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры V_H-V_H, V_H-V_L или V_L-V_L. Альтернативно, антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен V_H или V_L.

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать по меньшей мере один вариабельный домен, ковалентно связанный по меньшей мере с одним константным доменом. Неограничивающие примеры конфигураций вариабельных и константных доменов, которые могут быть обнаружены в антигенсвязывающем фрагменте антитела по настоящему изобретению, включают: (i) V_H-C_H1; (ii) V_H-C_H2; (iii) V_H-C_H3; (iv) V_H-C_H1-C_H2; (v) V_H-C_H1-C_H2-C_H3; (vi) V_H-C_H2-C_H3; (vii) V_H-C_L; (viii) V_L-C_H1; (ix) V_L-C_H2; (x) V_L-C_H3; (xi) V_L-C_H1-C_H2; (xii) V_L-C_H1-C_H2-C_H3; (xiii) V_L-C_H2-C_H3; и (xiv) V_L-C_L. В любой конфигурации вариабельных и константных доменов, включая любые из перечисленных выше иллюстративных конфигураций, вариабельные и константные домены могут быть либо непосредственно соединены друг с другом, либо могут быть соединены при помощи полного или частичного шарнирного или линкерного участка. Шарнирный участок может состоять по меньшей мере из 2 (например, 5, 10, 15, 20, 40, 60 или более) аминокислот, что в результате дает гибкую или полугибкую связи между смежными вариабельными и/или константными доменами в отдельной полипептидной молекуле. Кроме того, антигенсвязывающий фрагмент антитела по настоящему изобретению может содержать гомодимер или гетеродимер (или другой мультимер) в любой из перечисленных выше конфигураций вариабельных и константных доменов в нековалентной связи друг с другом и/или с одним или несколькими мономерными доменами V_H или V_L (например, посредством дисульфидной связи(ей)).

Антитела, используемые в способах, раскрытых в настоящем документе, могут представлять собой человеческие антитела. Используемый в настоящем документе термин «человеческое антитело» относится к антителам, имеющим вариабельные и константные области, полученные из иммуноглобулиновых последовательностей зародышевой линии человека. Человеческие антитела по настоящему изобретению, тем не менее, могут включать аминокислотные остатки, не кодируемые иммуноглобулиновыми последовательностями зародышевой линии человека (например, мутации, введенные в результате случайного или сайт-специфического мутагенеза in vitro или соматической мутации in vivo), например, в CDR и, в частности, в CDR3. Тем не менее, используемый в настоящем документе термин «человеческое антитело» не предназначен для включения антител, в которых последовательности CDR, полученные из зародышевой линии других видов млекопитающих, таких как мышь, были привиты на человеческие каркасные последовательности.

Антитела, используемые в способах, раскрытых в настоящем документе, могут представлять собой рекомбинантные человеческие антитела. Используемый в настоящем документе термин «рекомбинантное человеческое антитело» включает все человеческие антитела, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены рекомбинантными способами, такие как антитела, экспрессированные с использованием рекомбинантного вектора экспрессии, трансфицированного в клетку-хозяина (описано далее ниже), антитела, выделенные из рекомбинантной, комбинаторной библиотеки антител человека (описано ниже), антитела, выделенных из животного (например, мыши), которое является трансгенным в отношении генов иммуноглобулина человека (см., например, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295), или антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любым другим способом, который включает сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулина человека с другими ДНК-последовательностями. Такие рекомбинантные антитела человека имеют вариабельные и константные области, происходящие из последовательностей иммуноглобулина зародышевой линии человека. Однако в некоторых вариантах осуществления такие рекомбинантные антитела человека подвергают мутагенезу in vitro (или, когда используют животных, трансгенных в отношении последовательностей Ig человека, соматическому мутагенезу in vivo), и, следовательно, аминокислотные последовательности VH- и VL-областей этих рекомбинантных антител являются последовательностями, которые, хотя они и получены из последовательностей VH и VL зародышевой линии человека и являются родственными указанным последовательностям, могут не существовать в природе в репертуаре антител зародышевой линии человека in vivo.

Антитела против PD-1 и их антигенсвязывающие фрагменты

В некоторых вариантах осуществления ингибиторы PD-1, используемые в способах, раскрытых в настоящем документе, представляют собой антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с PD-1. Термин «специфически связывается» и т.п. означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, который является относительно стабильным в физиологических условиях. Способы определения того, связывается ли антитело специфически с антигеном, хорошо известны в данной области и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и т.п. Например, антитело, которое «специфически связывается» с PD-1, как используется в контексте настоящего изобретения, включает антитела, которые связываются с PD-1 или его частью с K_D менее около 500 нМ, менее чем около 300 нМ, менее чем около 200 нМ, менее чем около 100 нМ, менее чем около 90 нМ, менее чем около 80 нМ, менее чем около 70 нМ, менее чем около 60 нМ, менее чем около 50 нМ, менее чем около 40 нМ, менее чем около 30 нМ, менее чем около 20 нМ, менее чем около 10 нМ, менее чем около 5 нМ, менее чем около 4 нМ, менее чем около 3 нМ, менее чем около 2 нМ, менее чем около 1 нМ или менее чем около 0,5 нМ согласно измерениям в анализе методом поверхностного плазмонного резонанса. Выделенное антитело, которое специфически связывается с человеческим PD-1, может, однако, иметь перекрестную реактивность с другими антигенами, такими как молекулы PD-1 от других (отличных от человека) видов.

В соответствии с некоторыми иллюстративными вариантами осуществления, антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), вариабельную область легкой цепи (LCVR) и/или определяющие комплементарность области (CDR), содержащие аминокислотные последовательности любого из антител против PD-1, указанных в US 9987500, который полностью включен в настоящий документ посредством ссылки. В некоторых иллюстративных вариантах осуществления антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент, которое можно использовать в контексте настоящего изобретения, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит три HCDR (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) и три LCDR (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8. В других вариантах осуществления антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, содержащую SEQ ID NO: 1, и LCVR, содержащую SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению включают применение антитела против PD-1, где указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. Иллюстративное антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислоту последовательность SEQ ID NO: 2, представляет собой полностью человеческое антитело против PD-1, известное как цемиплимаб (также известное как REGN2810; LIBTAYO®).

В соответствии с некоторыми иллюстративными вариантами осуществления способы по настоящему изобретению включают применение цемиплимаба или его биоэквивалента. Используемый в настоящем документе термин «биоэквивалент» относится к антителам против PD-1 или PD-1-связывающим белкам или их фрагментам, которые являются фармацевтическими эквивалентами или фармацевтическими альтернативами, скорость и/или степень абсорбции которых не показывает значительных отличий от эталонного антитела (например, цемиплимаба) при введении в той же молярной дозе в аналогичных экспериментальных условиях, в однократной или многократной дозе. В контексте настоящего изобретения термин «биоэквивалент» включает антигенсвязывающие белки, которые связываются с PD-1 и не имеют клинически значимых отличий от цемиплимаба в отношении безопасности, чистоты и/или активности.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, имеющую 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR, имеющую 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, имеющую не более 5 аминокислотных замен. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, имеющую не более 2 аминокислотных замен.

Идентичность последовательности можно измерить способами, известными в данной области (например, GAP, BESTFIT и BLAST).

Настоящее изобретение также включает применение антител против PD-1 или их антигенсвязывающих фрагментов в способах лечения рака шейки матки, где антитела против PD-1 или их антигенсвязывающие фрагменты содержат варианты любой из аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, раскрытых в настоящем документе, имеющие одну или несколько консервативных аминокислотных замен. Например, настоящее изобретение включает использование антител против PD-1 или их антигенсвязывающих фрагментов, имеющих аминокислотные последовательности HCVR, LCVR и/или CDR с, например, 10 или менее, 8 или менее, 6 или менее, 4 или менее и т.д. консервативными аминокислотными заменами по сравнению с любой из аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, описанных в настоящем документе.

Другие антитела против PD-1 или их антигенсвязывающие фрагменты, которые можно использовать в контексте способов по настоящему изобретению, включают, например, антитела, упоминаемые и известные в данной области как ниволумаб, пембролизумаб, MEDI0608, пидилизумаб, BI 754091, спартализумаб (также известный как PDR001), камрелизумаб (также известный как SHR-1210), JNJ-63723283, MCLA-134 или любое из антител против PD-1, указанных в патентах США 6808710, 7488802, 8008449, 8168757, 8354509, 8609089, 8686119, 8779105, 8900587 и 9987500, а также в патентных публикациях WO 2006/121168, WO 2009/114335. Части всех вышеупомянутых публикаций, которые идентифицируют антитела против PD-1, настоящим включены в качестве ссылки.

Антитела против PD-1, используемые в контексте способов по настоящему изобретению, могут иметь рН-зависимые характеристики связывания. Например, антитело против PD-1 для применения в способах по настоящему изобретению может проявлять сниженное связывание с PD-1 при кислом рН по сравнению с нейтральным рН. Альтернативно, антитело против PD-1 по изобретению может проявлять усиленное связывание со своим антигеном при кислом рН по сравнению с нейтральным рН. Выражение «кислый рН» включает значения рН менее чем около 6,2, например, около 6,0, 5,95, 5,9, 5,85, 5,8, 5,75, 5,7, 5,65, 5,6, 5,55, 5,5, 5,45, 5,4, 5,35, 5,3, 5,25, 5,2, 5,15, 5,1, 5,05, 5,0 или менее. Используемое в настоящем документе выражение «нейтральный рН» означает рН от около 7,0 до около 7,4. Выражение «нейтральный рН» включает значения рН около 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35 и 7,4.

В некоторых случаях «сниженное связывание с PD-1 при кислом рН по сравнению с нейтральным рН» выражается в терминах отношения значения K_D связывания антитела с PD-1 при кислом рН, к значению K_D связывания антитела с PD-1 при нейтральном рН (или наоборот). Например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент можно рассматривать как проявляющее «сниженное связывание с PD-1 при кислом рН по сравнению с нейтральным рН» для целей настоящего изобретения, если антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет отношение K_D кислое /нейтральное около 3,0 или выше. В некоторых иллюстративных вариантах осуществления отношение K_D кислое/нейтральное для антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему изобретению может составлять около 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 5,5, 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0, 8,5, 9,0, 9,5, 10,0, 10,5, 11,0, 11,5, 12,0, 12,5, 13,0, 13,5, 14,0, 14,5, 15,0, 20,0, 25,0, 30,0, 40,0, 50,0, 60,0, 70,0, 100,0 или выше.

Антитела с рН-зависимыми характеристиками связывания могут быть получены, например, путем скрининга популяции антител на сниженное (или повышенное) связывание с определенным антигеном при кислом рН по сравнению с нейтральным рН. Кроме того, модификации антигенсвязывающего домена на аминокислотном уровне могут давать антитела с рН-зависимыми характеристиками. Например, путем замены одной или нескольких аминокислот антигенсвязывающего домена (например, в пределах CDR) на остаток гистидина можно получить антитело с уменьшенным связыванием антигена при кислом рН относительно нейтрального рН. Используемое в настоящем документе выражение «кислый рН» означает рН 6,0 или менее.

Антитела против PD-L1 и их антигенсвязывающие фрагменты

В некоторых вариантах осуществления ингибиторы PD-1, используемые в раскрытых в настоящем документе способах, представляют собой антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с PD-L1. Например, антитело, которое «специфически связывается с» PD-L1, используемое в контексте настоящего изобретения, включает антитела, которые связываются с PD-L1 или его частью с K_D около 1×10^-8 M или менее (например, меньшее значение K_D означает более плотное связывание). Антитело против PD-L1 с «высокой аффинностью» относится к таким mAb, которые имеют аффинность связывания с PD-L1, выраженную в K_D, по меньшей мере, 10^-8 М, такую как 10^-9 M, 10^-10 M, 10^-11 M или 10^-12 M согласно измерениям методом поверхностного плазмонного резонанса, например, BIACORETM или ELISA с определением аффинности в растворе. Выделенное антитело, которое специфически связывается с человеческим PD-L1, может, однако, иметь перекрестную реактивность с другими антигенами, такими как молекулы PD-L1 из других (не относящихся к человеку) видов.

В соответствии с некоторыми иллюстративными вариантами осуществления, антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), вариабельную область легкой цепи (LCVR) и/или определяющие комплементарность области (CDR), содержащие аминокислотные последовательности любого из антител против PD-L1, представленных в US 9938345, который полностью включен в настоящий документ посредством ссылки. В некоторых иллюстративных вариантах осуществления антитело против PD-L1 или его антигенсвязывающий фрагмент, которые можно применять в контексте настоящего изобретения, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащей SEQ ID NO: 11, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащей SEQ ID NO: 12. Иллюстративное антитело против PD-L1, содержащее HCVR SEQ ID NO: 11 и LCVR SEQ ID NO: 12, представляет собой REGN3504.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-L1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, имеющую 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 11. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-L1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR, имеющую 90%, 95%, 97% или 98% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 12.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-L1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, имеющую не более 5 аминокислотных замен. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело против PD-L1 человека или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, имеющую не более 2 аминокислотных замен.

Идентичность последовательности можно измерить с помощью способов, известных в данной области (например, GAP, BESTFIT и BLAST).

Настоящее изобретение также включает применение антител против PD-L1 в способах лечения рака шейки матки, где антитела против PD-L1 содержат варианты любой из раскрытых в настоящем документе аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, имеющих одну или несколько консервативных аминокислотных замен. Например, настоящее изобретение включает применение антител против PD-L1, имеющих аминокислотные последовательности HCVR, LCVR и/или CDR, например, с 10 или менее, 8 или менее, 6 или менее, 4 или менее и т.д. кислотными заменами относительно любой из аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, описанных в настоящем документе.

Другие антитела против PD-L1, которые можно применять в контексте способов по настоящему изобретению, включают, например, антитела, упоминаемые и известные в данной области как MDX-1105, атезолизумаб (TECENTRIQ™), дурвалумаб (IMFINZI™), авелумаб (BAVENCIO™), LY3300054, FAZ053, STL1014, СХ-072, KN035 (Zhang et al., Cell Discovery, 3, 170004 (March 2017)), CK-301 (Gorelik et al., American Association for Cancer Research Annual Meeting (AACR), 2016-04-04 Abstract 4606), или любые другие антитела против PD-L1, указанные в патентных публикациях US 7943743, US 8217149, US 9402899, US 9624298, US 9938345, WO 2007/005874, WO 2010/077634, WO 2013/181452, WO 2013/181634, WO 2016/149201, WO 2017/034916 или EP 3177649. Части всех вышеупомянутых публикаций, которые идентифицируют антитела против PD-L1, настоящим включены в качестве ссылки.

Фармацевтические композиции и введение

Настоящее изобретение относится к терапевтическим фармацевтическим композициям, содержащим раскрытые в настоящем документе ингибиторы PD-1. Такие фармацевтические композиции могут быть составлены с подходящими фармацевтически приемлемыми носителями, вспомогательными веществами, буферами и другими агентами, которые обеспечивают улучшенный перенос, доставку, переносимость и т.п. Множество подходящих составов можно найти в формуляре, известном всем химикам-фармацевтам: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Такие составы включают, например, порошки, пасты, мази, желе, воски, масла, липиды, содержащие липид (катионный или анионный) везикулы (такие как LIPOFECTIN™), ДНК-конъюгаты, безводные абсорбирующие пасты, эмульсии типа масло в воде и вода в масле, Carbowax в виде эмульсий (полиэтиленгликоли различной молекулярной массы), полутвердые гели и полутвердые смеси, содержащие Carbowax. См. также Powell et al., "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA, J Pharm Sci Technol 52:238-311 (1998).

Доза ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) может варьироваться в зависимости от возраста и размера субъекта, которому его будут вводить, целевого заболевания, состояния, пути введения и т.п. Когда ингибитор PD-1 по настоящему изобретению применяют для лечения или ингибирования роста рака шейки матки или улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, целесообразно вводить ингибитор PD-1 в виде однократной дозы, составляющей от около 0,1 до около 100 мг/кг массы тела. В зависимости от тяжести состояния можно корректировать частоту и продолжительность лечения. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 по настоящему изобретению можно вводить в виде начальной дозы, составляющей по меньшей мере от примерно 0,1 мг до примерно 1500 мг, от примерно 1 до примерно 1000 мг, от примерно 3 до примерно 800 мг, от примерно 5 до примерно 500 мг или от примерно 10 до примерно 400 мг. В некоторых вариантах осуществления за начальной дозой может следовать введение второй или множества последующих доз ингибитора PD-1 в количестве, которое может быть примерно таким же или меньшим, чем количество начальной дозы, где введение последующих доз разделено промежутком времени, составляющим от по меньшей мере 1 дня до 3 дней; по меньшей мере одну неделю, по меньшей мере 2 недели; по меньшей мере 3 недели; по меньшей мере 4 недели; по меньшей мере 5 недель; по меньшей мере 6 недель; по меньшей мере 7 недель; по меньшей мере 8 недель; по меньшей мере 9 недель; по меньшей мере 10 недель; по меньшей мере 12 недель; или по меньшей мере 14 недель.

Известны различные системы доставки, которые могут быть использованы для введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению, например, включение в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы, рекомбинантные клетки, способные экспрессировать мутантные вирусы, опосредованный рецепторами эндоцитоз (см., например, Wu et al. (1987) J. Biol. Chem. 262:4429-4432). Способы введения включают, но без ограничения, внутрикожный, трансдермальный, внутримышечный, внутрибрюшинный, внутривенный, подкожный, интраназальный, эпидуральный и пероральный пути введения. Композицию можно вводить любым подходящим путем, например путем инфузии или болюсной инъекции, за счет абсорбции через эпителиальные или кожно-слизистые оболочки (например, слизистую оболочку полости рта, слизистую оболочку прямой кишки и тонкой кишки и т.д.), и может быть введена вместе с другими биологически активными агентами. Фармацевтическая композиция также может быть доставлена в составе везикулы, в частности, липосомы (см., например, Langer (1990) Science 249:1527-1533).

В настоящем документе также рассматривается использование наночастиц для доставки ингибитора PD-1 по настоящему изобретению. Наночастицы, конъюгированные с антителами, можно использовать как в терапевтических, так и в диагностических целях. Наночастицы, конъюгированные с антителами, и способы получения и применения подробно описаны Arruebo et al., 2009, "Antibody-conjugated nanoparticles for biomedical applications," J. Nanomat., Vol. 2009, Article ID 439389, 24 pages. Наночастицы могут быть разработаны и конъюгированы с антителами, содержащимися в фармацевтических композициях, для нацеливания на клетки. Наночастицы для доставки лекарственных средств также описаны, например, в US 8257740 или US 8246995.

В определенных ситуациях фармацевтическая композиция может быть доставлена в системе с контролируемым высвобождением. В одном варианте осуществления можно применять помпу. В другом варианте можно применять полимерные материалы. В еще одном варианте осуществления система с контролируемым высвобождением может быть размещена вблизи мишени композиции, благодаря чему требуется лишь часть системной дозы.

Инъекционные препараты могут включать лекарственные формы для внутривенных, подкожных, внутричерепных, внутрибрюшинных и внутримышечных инъекций, капельных вливаний и т.д. Эти инъекционные препараты могут быть изготовлены общеизвестными способами.

Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить подкожно или внутривенно с помощью стандартной иглы и шприца. Кроме того, что касается подкожной доставки, для доставки фармацевтической композиции по настоящему изобретению без труда можно использовать шприц-ручку. Такое устройство для доставки в виде шприц-ручки может быть многоразовым или одноразовым. В многоразовом устройстве для доставки в виде шприц-ручки обычно используется сменный картридж, содержащий фармацевтическую композицию. После того, как вся фармацевтическая композиция из картриджа была введена и картридж оказался пустым, пустой картридж без труда можно выбросить и заменить на новый картридж, который содержит фармацевтическую композицию. После этого устройство доставки в виде шприц-ручки можно использовать повторно. В одноразовом устройстве для доставки в виде шприц-ручки нет сменного картриджа. Вместо этого одноразовое устройство для доставки в виде шприц-ручки выпускается предварительно заполненным фармацевтической композицией, содержащейся в резервуаре внутри устройства. После того как в резервуаре исчерпывается фармацевтическая композиция, все устройство выбрасывается.

Преимущественно описанные выше фармацевтические композиции для перорального или парентерального применения составляют в лекарственные формы со стандартной дозой, соответствующей дозе активных ингредиентов. Такие лекарственные формы со стандартной дозой включают, например, таблетки, пилюли, капсулы, инъекции (ампулы), суппозитории и т.д. Количество содержащегося антитела обычно составляет от около 5 до около 1500 мг на лекарственную форму со стандартной дозой.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию или состав, содержащий терапевтическое количество ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) и фармацевтически приемлемый носитель. Неограничивающие примеры фармацевтических композиций, содержащих антитело против PD-1, которые можно использовать в контексте настоящего изобретения, раскрыты в US 2019/0040137.

Настоящее изобретение также обеспечивает наборы, содержащие ингибитор PD-1 (например, антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент) для терапевтического применения, как описано в настоящем документе. Наборы обычно включают этикетку с указанием предполагаемого применения содержимого набора и инструкции по применению. Используемый в настоящем документе термин «этикетка» включает любой написанный или записанный материал, поставляемый на наборе, внутри набора или вместе с набором, или иным образом прилагаемый к набору. Соответственно, в настоящем изобретении обеспечен набор для лечения пациентки, страдающей раком шейки матки, содержащий: (а) терапевтически эффективную дозу ингибитора PD-1 (например, антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент); и (b) инструкции по применению ингибитора PD-1 в любом из описанных в настоящем документе способов.

Режимы введения

В некоторых вариантах осуществления способы, раскрытые в настоящем документе, включают введение в опухоль субъекта, нуждающегося в этом, терапевтически эффективного количества ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) в виде многократных доз, например, как часть определенного терапевтического режима дозирования. Например, терапевтический режим дозирования может включать введение субъекту одной или нескольких доз ингибитора PD-1 с частотой примерно один раз в день, один раз каждые два дня, один раз каждые три дня, один раз каждые четыре дня, один раз каждые пять дней, один раз каждые шесть дней, один раз в неделю, один раз каждые две недели, один раз каждые три недели, один раз каждые четыре недели, один раз каждые пять недель, один раз каждые шесть недель, один раз каждые восемь недель, один раз каждые двенадцать недель, один раз в месяц, один раз каждые два месяца, один раз каждые три месяца, один раз каждые четыре месяца, два раза в день, два раза каждые два дня, два раза каждые три дня, два раза каждые четыре дня, два раза каждые пять дней, два раза каждые шесть дней, два раза в неделю, два раза каждые две недели, два раза каждые три недели, два раза каждые четыре недели, два раза каждые пять недель, два раза каждые шесть недель, два раза каждые восемь недель, два раза каждые двенадцать недель, два раза в месяц, два раза каждые два месяца, два раза каждые три месяца, два раза каждые четыре месяца, три раза в день, три раза каждые два дня, три раза каждые три дня, три раза каждые четыре дня, три раза каждые пять дней, три раза каждые шесть дней, три раза в неделю, три раза каждые две недели, три раза каждые три недели, три раза каждые четыре недели, три раза каждые пять недель, три раза каждые шесть недель, три раза каждые восемь недель, три раза каждые двенадцать недель, три раза в месяц, три раза каждые два месяца, три раза каждые три месяца, три раза каждые четыре месяца или реже или по мере необходимости, пока не будет достигнут терапевтический ответ. В одном варианте осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят один раз каждые три недели. В одном варианте осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят один раз каждые шесть недель. В одном варианте осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят один раз каждые три недели, а затем одну или несколько доз вводят один раз каждые шесть недель.

В некоторых вариантах осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента, такого как цемиплимаб или его биоэквивалент), вводят в доза 350 мг один раз каждые 3 недели. В некоторых вариантах осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят в дозе 600 мг один раз каждые четыре недели. В некоторых вариантах осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят в дозе 600 мг один раз каждые шесть недель. В некоторых вариантах осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят в дозе 700 мг один раз каждые шесть недель. В некоторых вариантах осуществления одну или несколько доз ингибитора PD-1, как указано в настоящем документе, вводят в дозе 1050 мг один раз каждые шесть недель.

В некоторых вариантах осуществления одну или несколько доз вводят по меньшей мере в одном курсе лечения. Способы в соответствии с этим аспектом включают назначение субъекту, нуждающемуся в этом, по меньшей мере одного курса лечения, включающего введение 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более доз ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента). В одном варианте осуществления курс лечения включает 12 доз ингибитора PD-1. В одном варианте осуществления курс лечения включает 24 дозы ингибитора PD-1.

Дозировка

Количество ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента), вводимого субъекту в соответствии со способами, раскрытыми в настоящем документе, как правило, представляет собой терапевтически эффективное количество. Используемый в настоящем документе термин «терапевтически эффективное количество» означает количество ингибитора PD-1, которое приводит к одному или нескольким из следующего: (а) снижению тяжести или продолжительности симптома или признака рака шейки матки, например, опухолевого очага; (b) ингибированию роста опухоли или увеличению некроза опухоли, уменьшению размера опухоли и/или исчезновению опухоли; с) задержке роста и развития опухоли; (d) ингибированию метастазирования опухоли; (е) предотвращению рецидива роста опухоли; (f) увеличению выживаемости субъекта с раком; и/или (g) уменьшению применения или необходимости в общепринятой противораковой терапии (например, устранению необходимости в оперативном вмешательстве или уменьшению или устранению применения химиотерапевтических или цитотоксических агентов) по сравнению с не подвергнутым лечению субъектом или субъектом, получавшим химиотерапию на основе платины или другую терапию SOC, такую как раскрытые в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество ингибитора PD-1 (например, антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента, такого как цемиплимаб или его биоэквивалент) может составлять от примерно 0,05 мг до примерно 1500 мг, от примерно 1 мг до примерно 800 мг, от примерно 5 мг до примерно 600 мг, от примерно 10 мг до примерно 550 мг, от примерно 50 мг до примерно 400 мг, от примерно 75 мг до примерно 350 мг или от примерно 100 мг до примерно 300 мг антитела. Например, в различных вариантах осуществления количество ингибитора PD-1 составляет примерно 0,05 мг, примерно 0,1 мг, примерно 1,0 мг, примерно 1,5 мг, примерно 2,0 мг, примерно 5 мг, примерно 10 мг, примерно 15 мг, примерно 20 мг, примерно 30 мг, примерно 40 мг, примерно 50 мг, примерно 60 мг, примерно 70 мг, примерно 80 мг, примерно 90 мг, примерно 100 мг, примерно 110 мг, примерно 120 мг, примерно 130 мг, примерно 140 мг, примерно 150 мг, примерно 160 мг, примерно 170 мг, примерно 180 мг, примерно 190 мг, примерно 200 мг, примерно 210 мг, примерно 220 мг, примерно 230 мг, примерно 240 мг, примерно 250 мг, примерно 260 мг, примерно 270 мг, примерно 280 мг, примерно 290 мг, примерно 300 мг, примерно 310 мг, примерно 320 мг, примерно 330 мг, примерно 340 мг, примерно 350 мг, примерно 360 мг, примерно 370 мг, примерно 380 мг, примерно 390 мг, примерно 400 мг, примерно 410 мг, примерно 420 мг, примерно 430 мг, примерно 440 мг, примерно 450 мг, примерно 460 мг, примерно 470 мг, примерно 480 мг, примерно 490 мг, примерно 500 мг, примерно 510 мг, примерно 520 мг, примерно 530 мг, примерно 540 мг, примерно 550 мг, примерно 560 мг, примерно 570 мг, примерно 580 мг, примерно 590 мг, примерно 600 мг, примерно 610 мг, примерно 620 мг, примерно 630 мг, примерно 640 мг, примерно 650 мг, примерно 660 мг, примерно 670 мг, примерно 680 мг, примерно 690 мг, примерно 700 мг, примерно 710 мг, примерно 720 мг, примерно 730 мг, примерно 740 мг, примерно 750 мг, примерно 760 мг, примерно 770 мг, примерно 780 мг, примерно 790 мг, примерно 800 мг, примерно 810 мг, примерно 820 мг, примерно 830 мг, примерно 840 мг, примерно 850 мг, примерно 860 мг, примерно 870 мг, примерно 880 мг, примерно 890 мг, примерно 900 мг, примерно 910 мг, примерно 920 мг, примерно 930 мг, примерно 940 мг, примерно 950 мг, примерно 960 мг, примерно 970 мг, примерно 980 мг, примерно 990 мг, примерно 1000 мг, примерно 1010 мг, примерно 1020 мг, примерно 1030 мг, примерно 1040 мг, примерно 1050 мг, примерно 1060 мг, примерно 1070 мг, примерно 1080 мг, примерно 1090 мг, примерно 1200 мг, примерно 1210 мг, примерно 1220 мг, примерно 1230 мг, примерно 1240 мг, примерно 1250 мг, примерно 1260 мг, примерно 1270 мг, примерно 1280 мг, примерно 1290 мг, примерно 1300 мг, примерно 1310 мг, примерно 1320 мг, примерно 1330 мг, примерно 1340 мг, примерно 1350 мг, примерно 1360 мг, примерно 1370 мг, примерно 1380 мг, примерно 1390 мг, примерно 1400 мг, примерно 1410 мг, примерно 1420 мг, примерно 1430 мг, примерно 1440 мг, примерно 1450 мг, примерно 1460 мг, примерно 1470 мг, примерно 1480 мг, примерно 1490 мг или примерно 1500 мг.

Количество ингибитора PD-1, содержащегося в индивидуальной дозе, может быть выражено в миллиграммах антитела на килограмм массы тела субъекта (т.е. мг/кг). В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1, применяемый в раскрытых в настоящем документе способах, можно вводить субъекту в дозе от примерно 0,0001 до примерно 100 мг/кг массы тела субъекта. В некоторых вариантах осуществления антитело к PD-1 можно вводить в дозе от примерно 0,1 мг/кг до примерно 20 мг/кг массы тела пациентки. В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению включают введение ингибитора PD-1 (например, антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента) в дозе от примерно 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 5 мг/кг, от 1 мг/кг до 10 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 5 мг/кг или 10 мг/кг массы тела пациентки.

В некоторых вариантах осуществления количество индивидуальной дозы ингибитора PD-1 (например, антитела против PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента), вводимой пациентке, может быть меньше терапевтически эффективного количества, т.е. субтерапевтической дозой. Например, если терапевтически эффективное количество ингибитора PD-1 составляет 3 мг/кг, субтерапевтическая доза составляет менее 3 мг/кг, например, 2 мг/кг, 1,5 мг/кг, 1 мг/кг, 0,5 мг/кг или 0,3 мг/кг. Как определено в настоящем документе, «субтерапевтическая доза» относится к количеству ингибитора PD-1, которое само по себе не приводит к терапевтическому эффекту. Однако в некоторых вариантах осуществления множественные субтерапевтические дозы ингибитора PD-1 вводят для совокупного достижения терапевтического эффекта у субъекта.

В некоторых вариантах осуществления каждая доза составляет 0,1-10 мг/кг (например, 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг или 10 мг/кг) массы тела субъекта. В некоторых других вариантах осуществления каждая доза содержит от 5 до 1500 мг ингибитора PD-1 (такого как антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент), например, 5 мг, 10 мг, 15 мг, 20 мг, 25 мг, 30 мг, 40 мг, 45 мг, 50 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 450 мг, 500 мг, 550 мг, 600 мг, 650 мг, 700 мг, 750 мг, 800 мг, 850 мг, 900 мг, 950 мг, 1000 мг, 1050 мг, 1100 мг, 1150 мг, 1200 мг, 1550 мг, 1300 мг, 1350 мг, 1400 мг, 1450 мг или 1500 мг ингибитора PD-1.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 (например, антитело против PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент) вводят в сочетании с лучевой терапией, проводимой в одной или нескольких дозах 2-100 Грей (Гр). В некоторых вариантах осуществления лучевая терапия включает 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 15, 20, 23, 25, 27, 30, 35, 40 или 45 Гр. В некоторых других вариантах осуществления лучевая терапия включает 50-100, 60-90 или 70-80 Гр. В некоторых вариантах осуществления лучевую терапию проводят фракциями (гипофракционированная лучевая терапия). Гипофракционированная лучевая терапия (hfRT) относится к лучевой терапии, при которой доза облучения состоит из 2 или более фракций. В различных вариантах осуществления каждая фракция содержит 2-20 Гр. Например, доза облучения 50 Гр может быть разделена на 10 фракций по 5 Гр каждая. В некоторых вариантах осуществления 2 или более фракций вводят в последующие или последовательные дни. В некоторых других вариантах осуществления 2 или более фракций вводят в течение периода времени, включающего один раз в 2 дня, один раз в 3 дня, один раз в 4 дня, один раз в 5 дней, один раз в 6 дней, один раз в 7 дней, два раза в 3 дня, два раза в неделю, три раза в неделю или их комбинацию.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры приведены для того, чтобы предоставить специалистам в данной области полное раскрытие и описание того, как создавать и применять способы и композиции по настоящему изобретению, и не подразумевается, что они ограничивают объем того, что авторы считают своим изобретением. Аналогично, изобретение не ограничивается какими-либо конкретными предпочтительными вариантами осуществления, описанными в настоящем документе. Действительно, модификации и вариации вариантов осуществления могут быть очевидны специалистам в данной области техники после прочтения этого описания и могут быть выполнены без отклонения от его сущности и объема. Были предприняты усилия для обеспечения точности по отношению к применяемым числам (например, количества, температура и т.д.), но некоторые экспериментальные ошибки и отклонения должны быть приняты в расчет. Если не указано иное, части являются целыми частями по массе, молекулярная масса является средней молекулярной массой, температура выражена в градусах по Цельсию, комнатная температура составляет около 25°С, и давление является или близко к атмосферному.

ПРИМЕР 1: Клиническое исследование антитела против PD-1 у пациенток с раком шейки матки

Данное исследование представляло собой открытое многоцентровое исследование фазы I антитела против PD-1 (цемиплимаб) у пациенток с распространенными солидными опухолями. Цемиплимаб представляет собой высокоаффинное человеческое моноклональное антитело IgG4 со стабилизированным шарниром к рецептору PD-1, которое эффективно блокирует взаимодействия PD-1 с PD-L1 и PD-L2. Цемиплимаб содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10; парную аминокислотную последовательность HCVR/LCVR, содержащую SEQ ID NO: 1/2; и последовательности CDR тяжелой и легкой цепей, содержащие SEQ ID NO: 3-8, как описано в настоящем документе. См. также US 9987500. В исследование включены пациентки в возрасте ≥18 лет с гистологически или цитологически подтвержденным рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки, которые были резистентны или не переносили двойную химиотерапию препаратами платины и таксана.

Одна группа пациенток [когорта монотерапии, для которой гипофракционированная лучевая терапия (hfRT) не планировалась] получала цемиплимаб 3 мг/кг внутривенно (IV) каждые 2 недели (Q2W) на протяжении 48 недель. Вторая группа пациенток (когорта комбинированной терапии, для которой была запланирована паллиативная лучевая терапия) получала цемиплимаб 3 мг/кг IV Q2W на протяжении 48 недель плюс hfRT (9 Гр × 3 раза в течение 1 недели на один очаг, начиная через 1 неделю после 1-го дня введения цемиплимаба, то есть с 8-го дня по 12-й день 14-дневного цикла). В когорту комбинированной терапии были включены пациентки, для которых была запланирована паллиативная hfRT для очага, который вызывал некоторые признаки или симптомы. Облученный очаг не рассматривался как целевой очаг для оценки ответа. Цемиплимаб поставлялся в концентрации 25 или 50 мг/мл. Инфузию цемиплимаба проводили в течение 30 минут ±10 минут.

Дополнительные критерии отбора включали оценку 0 или 1 общего состояния по шкале, разработанной Восточной объединенной онкологической группой (Eastern Cooperative Oncology Group) и приемлемое состояние функций внутренних органов. Пациентки должны были иметь по меньшей мере один измеряемый очаг в соответствии с Критериями оценки ответа солидных опухолей на лечение (Response Evaluation Criteria in Solid Tumors, RECIST), версия 1.1. (Eisenhauer et al., Eur J Cancer 45 (2009) 228-47). В когорте комбинированной терапии измеряемый очаг(и) были в дополнение к облученным очагам.

Ключевые критерии исключения включали текущее или недавнее (в пределах 5 лет) аутоиммунное заболевание, требующее системной иммуносупрессии, предшествующее лечение агентом, блокирующим путь PD-1/PD-L1, трансплантацию паренхиматозных органов в анамнезе, сопутствующий рак (за исключением индолентного или не угрожающего жизни) или гематологическую злокачественную опухоль.

Цели исследования: Одной из целей данного исследования являлась характеристика безопасности и переносимости цемиплимаба в качестве монотерапии или в комбинации с hfRT у пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки. Еще одной целью являлось определение противоопухолевой активности цемиплимаба в качестве монотерапии или в комбинации с hfRT у этих пациенток.

Оценки: Гистологию опухоли оценивали согласно местным отчетам о патологии образцов опухоли, полученным в любое время до включения в исследование. Тяжесть нежелательных явлений, возникших в ходе лечения (ТЕАЕ), оценивали в соответствии с Общими терминологическими критериями нежелательных явлений Национального института онкологии (National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events) (версия 4.03). Обширные оценки безопасности проводили во время скрининга и на день 1 каждого последующего цикла лечения на протяжении всего исследования. Стандартные оценки безопасности проводили при каждом визите для введения цемиплимаба. Исследователи проводили оценки ответа опухоли в соответствии с RECIST 1.1 в конце каждого 8-недельного цикла лечения. В когортах комбинированной терапии очаги, отобранные для hfRT, не были включены в оценки RECIST 1.1.

Статистический анализ клинических данных: Обобщения и анализы безопасности выполняли на выборке для анализа безопасности. Данные обобщали с использованием описательной статистики, а также двустороннего 95% доверительного интервала (CI) по когортам по величине дозы. Непрерывные переменные были суммированы как среднее значение, медиана, стандартное отклонение, минимум и максимум. Категориальные переменные были суммированы как частота и проценты. Анализ Каплана-Мейера выполняли для выживаемости без прогрессирования (PFS) и OS.

Анализ экспрессии белка и мРНК PD-L1 в независимых образцах рака шейки матки: В общей сложности 155 коммерчески доступных блоков опухолей оценивали на наличие инфильтрирующих опухоль иммунных клеток и экспрессию белка PD-L1 как в опухолевых, так и в иммунных клетках; 43 блока представляли собой аденокарциному и 112 блоков представляли собой опухоли плоскоклеточной карциномы. Эти блоки тканей получали от 12 различных частных врачей. Количество блоков от пяти ведущих частных врачей было следующим: 58, 37, 36, 17 и 8. Ни один частный врач не предоставил более 35% блоков. Имелось недостаточно оцениваемого опухолевого материала для подтверждения анализа корреляции биомаркера PD-L1 у пациенток, включенных в расширенные когорты с раком шейки матки исследования фазы I. Среди 20 пациенток в расширенных когортах с раком шейки матки не были предоставлены образцы до лечения для шести пациенток, а для одной пациентки в образце до лечения имелось недостаточное количество опухолевых клеток. В таблице 1 приведены результаты анализа PD-L1 IHC и статус наилучшего общего ответа для остальных 13 пациенток.

Иммуногистохимическое окрашивание PD-L1 проводили с помощью кроличьего моноклонального первичного антитела Ventana PD-L1 (SP263) (Roche Diagnostics; AZ) в соответствии с инструкциями по применению производителя. Оценку PD-L1 представляли в виде процента опухолевых клеток с любым окрашиванием мембран выше фона (ТС %) или процента опухоль-ассоциированных иммунных клеток с окрашиванием любой интенсивности выше фона (IC %). Любая опухоль-ассоциированная иммунная клетка в смешанных воспалительных условиях и не являющаяся частью некроза была включена в расчет процента площади опухоли, занятой опухоль-ассоциированными иммунными клетками (Immune Cells Present, ICP). Чтобы облегчить анализ и интерпретацию, пороговые значения экспрессии PD-L1 и наличия иммунных клеток по группам определяли путем организации распределения на дискретные единицы.

Экспрессию мРНК PD-L1 наносили на график для плоскоклеточных и неплоскоклеточных опухолей рака шейки матки в рамках проекта Атлас ракового генома (The Cancer Genome Atlas, TCGA). Транскрипты на миллион (ТРМ) опухолей шейки матки наносили на график с использованием программного обеспечения OmicSoft ArrayStudio, версия 10.0.1.50. Результаты экспрессии мРНК PD-L1 в целом основаны на данных, полученных Исследовательской сетью TCGA (https://www.cancer.gov/tcga).

Результаты

Пациентки - В каждую расширенную когорту включали десять пациенток. Медиана возраста составила 55,0 лет (диапазон 31,0-76,0) и 51,5 года (диапазон 29,0-65,0) в когортах монотерапии и комбинированной терапии, соответственно. Исходные характеристики были схожими для двух когорт и представлены в обобщенном виде в таблице 2. Десять пациенток имели плоскоклеточную гистологию, восемь пациенток имели аденокарциному, одна пациентка имела аденосквамозную гистологию, и одна пациентка имела гистологический вариант муцинозной карциномы. На момент прекращения сбора данных среди пациенток, получавших монотерапию цемиплимабом, одна пациентка завершила запланированное лечение (48 недель) и девять пациенток прекратили лечение, главным образом по причине прогрессирования или рецидива заболевания (n=8). У пациенток, получавших цемиплимаб + hfRT, все 10 пациенток прекратили лечение, главным образом по причине прогрессирования или рецидива заболевания (n=8).

Для пациенток, получающих монотерапию цемиплимабом, медиана количества введенных доз цемиплимаба составила 4 (диапазон 2,0-23,0), при этом медиана продолжительности воздействия составила 8,1 неделю (диапазон 4,0-48,4), и медиана продолжительности последующего наблюдения составила 5,6 месяцев (диапазон 0,8-16,2). Для пациенток, получавших цемиплимаб + hfRT, медиана количества введенных доз цемиплимаба составила 8 (диапазон 1,0-17,0), медиана продолжительности воздействия составила 16,0 недель (диапазон 2,0-34,1) с медианой продолжительности последующего наблюдения 3,76 месяцев (диапазон 0,7-8,1).

Эффективность - Одна пациентка в каждой когорте (10%) испытала частичный ответ продолжительностью 11,2 месяца для пациенток, ответивших на лечение, из когорты монотерапии и 6,4 месяца для пациенток, ответивших на лечение, из когорты комбинированной терапии. Обе пациентки, ответившие на лечение, имели плоскоклеточную гистологию. Облученные очаги не были включены в оценки ответов. Восемь пациенток достигли наилучшего ответа стабилизации заболевания (SD): три пациентки (30%) в когорте монотерапии и пять пациенток (50%) в когорте комбинированной терапии (таблица 3). Из этих восьми пациенток с наилучшим ответом SD четыре имели плоскоклеточную гистологию. Продолжительный контроль заболевания, определяемый как доля пациенток без прогрессирования заболевания в течение ≥105 дней, составил 20,0% (95% CI: 2,5-55,6) у пациенток, получавших монотерапию цемиплимабом, и 30,0% (95% CI: 6,7-65,2) у пациенток, получавших цемиплимаб + hfRT. Другие результаты клинической активности, касающиеся статуса ответа опухоли, представлены в обобщенном виде в таблице 3. Частичный ответ (PR) определяется, если размеры целевых очагов и новых очагов уменьшаются на ≤30% от исходного уровня. Прогрессирование заболевания (PD) определяется, если размеры целевых очагов и новых очагов увеличиваются на ≥20% от наименьших размеров.

Оценка Каплана-Мейера медианы PFS составила 1,9 (95% CI: 1,0-9,0) месяцев у пациенток, получавших монотерапию цемиплимабом, и 3,6 (95% CI: 0,6-5,7) месяцев у пациенток, получавших цемиплимаб + hfRT. Оценка Каплана-Мейера медианы OS составила 10,3 (95% CI: 2,1 - не подлежит оценке [NE]) месяцев у пациенток, получавших монотерапию цемиплимабом, и 8,0 (95% CI: 1,7-NE) месяцев у пациенток, получавших цемиплимаб + hfRT.

Безопасность - ТЕАЕ любой степени были зарегистрированы у 9 и 10 пациенток в когортах монотерапии и комбинированной терапии, соответственно, независимо от назначения лечения. Наиболее распространенными ТЕАЕ были диарея у 35% (7/20), утомляемость у 25% (5/20) и гипокалиемия у 25% (5/20) пациенток, включенных в обе объединенные когорты. Из пациенток, получавших монотерапию цемиплимабом, у четырех (40,0%) пациенток развились ТЕАЕ ≥3 степени. Из пациенток, получавших цемиплимаб + hfRT, у четырех (40,0%) пациенток развились ТЕАЕ ≥3 степени. Ни одна пациентка ни в одной когорте не прекратила лечение по причине ТЕАЕ.

Сообщалось об одной смерти из-за пневмонита у пациентки, получавшей цемиплимаб + hfRT, и это считалось связанным с лечением. Однако другие сопутствующие заболевания, имеющие потенциальное влияние на результат лечения пациентки, включали возможное диффузное злокачественное поражение легких, опухоль перикарда, потенциально влияющую на давление в правом предсердии во время диастолы, и ухудшение общего состояния, а также элементы анамнеза, такие как употребление табака и хроническая обструктивная болезнь легких. Очаг, выбранный для паллиативной лучевой терапии (RT) у этой пациентки, находился на перикарде. На момент смерти от пневмонита общий ответ опухоли пациентки был частичным. Другая пациентка также страдала пневмонитом 3 степени, который разрешился с помощью лечения, которое включало стероиды и эмпирические антибиотики. У одной пациентки с исходной утомляемостью наблюдалась иммунная миалгия 3-й степени и иммунологический гипотиреоз 2-й степени, который был связан с периодической утомляемостью 2-й и 3-й степени. Миалгия разрешилась путем лечения стероидами. Связанные с лечением нежелательные явления (≥3 степени) возникали у 10% (1/10) пациенток в когорте монотерапии и у 30% (3/10) пациенток в когорте комбинированной терапии, как представлено в обобщенном виде в таблице 4.

Экспрессия белка и мРНК PD-L1 при раке шейки матки. Наблюдение того, что у пациенток с плоскоклеточной гистологией возникают ответы, побудило к исследованию потенциальных ассоциаций между экспрессией PD-L1 и гистологией при раке шейки матки. Образцов, полученных от исследуемых пациенток, было недостаточно, поэтому были запрошены архивные образцы рака шейки матки из других источников. Как показано в таблице 5, среди 155 образцов опухолей, проанализированных с помощью иммуногистохимии, экспрессия PD-L1 в опухоли была неопределяемой (<1%) в 69,8% (30/43) образцов аденокарцином и 40% (45/112) образцов плоскоклеточных карцином. Экспрессия PD-L1 в иммунных клетках была неопределяемой (<1%) в 30,2% (13/43) аденокарцином по сравнению с 4,5% (5/112) в плоскоклеточных карциномах. Объединенный анализ обогащения (Combined enrichment analysis) показал, что как наличие иммунных клеток, так и экспрессия PD-L1 в опухолевых клетках и иммунных клетках чаще встречались в плоскоклеточных карциномах, чем в опухолях аденокарциномы.

Потенциальные ассоциации между экспрессией PD-L1 и гистологией опухоли при раке шейки матки также исследовали на уровне мРНК в образцах TCGA. Экспрессия мРНК PD-L1 была выше в образцах плоскоклеточного рака шейки матки по сравнению с не-плоскоклеточным. Медиана и среднее значение ТРМ мРНК PD-L1 для плоскоклеточных опухолей шейки матки (n=253) составили 4,5 и 5,0, соответственно. Медиана и среднее значение для не-плоскоклеточных опухолей шейки матки (n=53) составили 1,3 и 1,2, соответственно. (Фигура 1). Дополнительные анализы TCGA на экспрессию выбранных генов (PD-1, PD-L1, CD8A) показали, что рак шейки матки кластеризуется с другими типами солидных опухолей, для которых анти-PD-1 терапия улучшает общую выживаемость (OS), такими как меланома, немелкоклеточный рак легкого, светлоклеточный рак почки и плоскоклеточный рак головы и шеи.

Обсуждение

Результаты клинической активности этих расширенных когорт демонстрируют, что лечение цемиплимабом вызывает ответы и клиническую пользу у пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки. Это подтверждает сигнал клинической активности, наблюдаемый в когорте эскалации доз в первом исследовании цемиплимаба на людях, в котором две из трех пациенток с раком шейки матки имели устойчивый ответ.(Papadopoulos et al., Clin Cancer Res (Dec 2019) Epub). Общая сумма соответствует 17% частоты объективного ответа среди пациенток с раком шейки матки, включенных в исследование I фазы (4/23 в совокупности; 2/3 ответивших на лечение пациенток в когорте эскалации доз плюс 2/20 в расширенных когортах). Все ответившие на лечение пациентки имели плоскоклеточную гистологию. Наблюдаемые при этом результаты, связанные с безопасностью, согласуются с тем, что наблюдалось в других исследованиях цемиплимаба и других ингибиторов оси PD-1/PD-L1. Не наблюдалось явного улучшения общей частоты ответов (ORR) при добавлении hfRT после начала лечения цемиплимабом. На самом деле, одна из пациенток с плоскоклеточным раком шейки матки, которая имела объективный ответ на цемиплимаб + hfRT в когорте эскалации доз, впоследствии имела рецидив заболевания после завершения запланированного лечения, и имела полный ответ на повторное лечение монотерапией цемиплимабом.

В нашем анализе образцов рака шейки матки, независимо от исследования фазы I, комбинация высокой экспрессии белка PD-L1 и присутствия иммунных клеток была увеличенной в плоскоклеточных карциномах по сравнению с аденокарциномами. Эти результаты подтверждают и расширяют предыдущий отчет, в котором использовалось другое антитело против PD-L1 и была обнаружена более высокая экспрессия в образцах плоскоклеточного рака шейки матки, чем в образцах аденокарциномы (Heeren et al., Cancer Immunol Res 3 (2015) 48-58). Исследование по настоящему примеру подтверждает эти наблюдения, указывая на то, что в образцах рака шейки матки TCGA экспрессия мРНК PD-L1 выше в плоскоклеточных, чем в не-плоскоклеточных образцах. Повышенная экспрессия PD-L1 среди плоскоклеточных опухолей, как на уровне белка, так и на уровне мРНК, указывает на то, что механизмы уклонения от иммунного надзора могут различаться между плоскоклеточным и не-плоскоклеточным раком шейки матки и могут влиять на клинический ответ на иммунотерапию. Уровни экспрессии мРНК PD-L1 в плоскоклеточных и не-плоскоклеточных гистологиях ранее не описывались.

Важность оси PD-1/PD-L1 при плоскоклеточном раке шейки матки также подтверждается исследованиями с использованием других ингибиторов PD-1. В многокогортном исследовании KEYNOTE-158 общая частота ответов (ORR) в когорте пациенток с раком шейки матки составила 12,2% (12/98) на фоне применения пембролизумаба, и 11 из 12 наблюдаемых ответов были у пациенток с плоскоклеточной гистологией. (Papadopoulos et al., Clin Cancer Res (Dec 2019) Epub). В CheckMate 358, исследовании фазы I/II, только для пациенток с плоскоклеточной гистологией частота объективного ответа составила 26,3% (5/19) при раке шейки матки на фоне применения ниволумаба. (Naumann et al., J Clin Oncol 37 (2019) 2825-2834). Еще в одном исследовании, в котором 60% пациенток имели плоскоклеточную гистологии, также сообщалось о частоте ответа 4% на ниволумаб. (Santin et al., Gynecol Oncol 157 (2020) 161-166). Хотя эти наблюдения напрямую согласуются с гипотезой о том, что эффективность блокады PD-1 при раке шейки матки может ограничиваться плоскоклеточной гистологией, невозможно сделать выводы из небольших сравнений перекрестных исследований. Текущие данные и другие исследования, рассмотренные в настоящем документе, не исключают также возможности получения некоторыми пациентками с не-плоскоклеточным раком шейки матки благоприятного эффекта от иммунотерапии.

Хотя у большинства пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки не наблюдается объективных ответов на блокаду PD-1, потенциальная возможность продолжительных ответов (или продолжительной стабилизации заболевания) может привести к значимому улучшению выживаемости. Текущее исследование слишком мало, чтобы дать надежные оценки OS.

Анализ данных экспрессии генов для выбранных генов (PD-1, PD-L1, CD8A) в TCGA демонстрирует, что рак шейки матки объединяется с другими типами солидных опухолей, для которых терапия против PD-1 улучшает общую выживаемость, такими как меланома, немелкоклеточный рак легкого, светлоклеточный рак почки и плоскоклеточный рак головы и шеи. (Trivedi et al., Clin Adv Hematol Oncol 13 (2015) 858-868; Ferris et al., N Engl J Med 375 (2016) 1856-1867; Lee et al., Cancer J 22 (2016) 92-95; Chamoto et al., Int J Clin Oncol (2020); Gellrich et al., J Clin Med 9 (2020) 223; Chae et al., J Immunother Cancer 6 (2018) 39). Кроме того, TCGA-анализ 36 переменных в 21 типе опухолей выявил, что обилие CD8+ Т-клеток, экспрессия гена PD-1 и мутационная нагрузка опухоли были тремя наиболее прогностическими переменными объективного ответа на терапию против PD-1/PD-L1. (Lee et al., JAMA Oncol 5 (2019) 1614-1618). Две из этих переменных (обилие CD8+ Т-клеток, экспрессия гена PD-1) согласуются с TCGA-анализом в текущем отчете, который объединяет рак шейки матки с другими опухолями, чувствительными к иммунотерапии. Третья переменная, мутационная нагрузка опухоли, также может способствовать эффективности блокады PD-1 у некоторых пациенток с раком шейки матки. В исследовательских анализах расширенных когорт в исследовании II фазы пембролизумаба (KEYNOTE-158) плоскоклеточный рак шейки матки был одним из типов опухолей, в которых высокая мутационная нагрузка в опухолевых тканях (определяемая как >10 мутаций/мегабаза) была ассоциирована с повышенной эффективностью. (Marabelle et al., Annals of Oncology 30 (2019) v477-v478). Таким образом, представленные в настоящем документе TCGA-анализы дополнительно подтверждают определение рака шейки матки как типа опухоли, для которого терапия цемиплимабом должна быть полезной.

Рандомизированное исследование фазы III продолжается с использованием терапии второй линии или выше у пациенток с метастатическим раком шейки матки, в котором цемиплимаб сравнивается с химиотерапией по выбору исследователя (NCT03257267). Первичный анализ на OS является иерархическим, сначала для пациенток с плоскоклеточной гистологией, а затем для всех пациенток (плоскоклеточная гистология, аденокарцинома или аденосквамозная гистология). Исследована связь между экспрессией PD-L1, эффективностью и гистологией.

Заключение

Среди пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки, которые были резистентны или не переносили двойную химиотерапию препаратами платины и таксана, цемиплимаб продемонстрировал клиническую пользу и профиль безопасности, сходный с теми, которые наблюдались при применении других ингибиторов PD-1. Результаты исследований с применением цемиплимаба в сочетании с данными, полученными для других агентов против PD-1 позволяют предположить, что эффективность связана с гистологией при раке шейки матки. Кроме того, потенциальная связь между гистологией и эффективностью ингибирования PD-1 косвенно подтверждается анализом образцов рака шейки матки из других источников, в которых экспрессия белка PD-L1 и мРНК является более высокой в плоскоклеточных, чем в не-плоскоклеточных гистологиях. Рандомизированное исследование фазы III цемиплимаба в сравнении с химиотерапией по выбору исследователем продолжается, и первичный иерархический анализ общей выживаемости проводится сначала у пациенток с плоскоклеточной гистологией.

ПРИМЕР 2: Клиническое исследование цемиплимаба по сравнению с химиотерапией при рецидивирующей или метастатической карциноме шейки матки

Это исследование представляет собой открытое рандомизированное исследование 3 фазы цемиплимаба по сравнению с химиотерапией по выбору исследователя (IC) у пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки, который прогрессировал после химиотерапии, содержащей платину.

Цели исследования

Первичная цель исследования состоит в том, чтобы сравнить OS для пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки, которые имеют гистологию плоскоклеточной карциномы (SCC) и которые имеют любую удовлетворяющую критериям гистологию, получавших химиотерапию цемиплимабом или химиотерапию по выбору исследователя (IC). Вторичные цели исследования, проведенного среди пациенток с SCC и среди всех удовлетворяющих критериям гистологий (SCC, аденокарцинома или аденосквамозная карцинома), включают: (1) сравнение выживаемости без прогрессирования (PFS) на фоне применения цемиплимаба по сравнению с химиотерапией IC; (2) сравнение частоты объективных ответов (ORR) (частичный ответ [PR]+CR) на фоне применения цемиплимаба по сравнению с химиотерапией IC в соответствии с Критериями оценки ответа солидных опухолей на лечение (RECIST) 1.1; (3) сравнение продолжительности ответа (DOR) на фоне применения цемиплимаба по сравнению с химиотерапией IC; (4) сравнение профилей безопасности цемиплимаба по сравнению с химиотерапией IC путем описания нежелательных явлений (АЕ); и (5) сравнение качества жизни (QOL) для пациенток, получавших цемиплимаб, по сравнению с химиотерапией IC, с использованием Опросника качества жизни Европейской организации по исследованию и лечению рака - Core 30 (EORTC QLQ-C30).

Исследуемая популяция

В исследование включали женщин ≥18 лет с рецидивирующим, персистирующим и/или метастатическим раком шейки матки, который прогрессировал после химиотерапии, содержащей платину, проводимой для лечения рецидивирующего или метастатического рака шейки матки. Пациентки, которые получали только предшествующую терапию на основе платины одновременно с лучевой терапией локализованного заболевания, не удовлетворяли критериям включения.

Обоснование выбора популяции пациенток: Пациентки в этом исследовании имели рецидивирующий или метастатический рак шейки матки, который прогрессировал после химиотерапии, содержащей платину. В предыдущем исследовании была установлена эффективность терапии первой линии для рецидивирующего или метастатического рака шейки матки по схеме платина + паклитаксел + бевацизумаб. (Tewari et al., N Engl J Med, 370 (2014) 734-743). В условиях второй линии не существует стандартного режима лечения. Агенты, которые могут быть рассмотрены в этой ситуации, являются вариантами IC в этом исследовании: пеметрексед, топотекан, иринотекан, гемцитабин и винорелбин. Несмотря на наличие различных вариантов химиотерапии, медиана выживаемости пациенток, получавших эти препараты по поводу рака шейки матки, составляла приблизительно 7 месяцев.

Концепция «рефракторного к платине» заболевания описана в литературе, касающейся рака шейки матки, и относится к времени, прошедшем после предшествующей терапии препаратами платины. (Nishino et al., Clin Cancer Res., Aug. 2016; McLachlan et al., Clinical Oncology 2016; Tanioka et al., Cancer Chemother Pharmacol (2011) 68:337-342). Однако не типичной клинической практикой является повторное лечение пациенток с раком шейки матки с помощью химиотерапии на основе платины, если они уже получали ее по поводу рецидивирующего или метастатического заболевания. Схемы химиотерапии в контрольной группе этого исследования представляют современные варианты лечения пациенток с раком шейки матки, которые ранее получали препараты платины по поводу рецидивирующего или метастатического заболевания. Независимо от временного интервала между предшествующей терапией препаратами платины (при рецидивирующем или метастатическом раке шейки матки) и последующим прогрессированием, такие пациентки имеют неудовлетворенные медицинские потребности и подходят для рассмотрения в клиническом исследовании. Терапия платиной, назначаемая в других случаях (например, одновременно с лучевой терапией как части направленной на излечение терапии, после лучевой терапии [или химиолучевой терапии] в качестве адъювантного лечения у пациентки без признаков заболевания), не удовлетворяет требованиям пригодности в отношении предшествующей терапии платиной в этом исследовании.

Термин «персистирующее заболевание» иногда используется для обозначения заболевания, для которого никогда не было подтверждено лабораторно-инструментальными методами полное разрешение после химиолучевой терапии. Для таких пациенток терапия первой линии является такой же, как и для пациенток с рецидивирующим или метастатическим заболеванием (т.е. платина + паклитаксел + бевацизумаб). По соглашению в этом исследовании пациентки с персистирующим заболеванием считаются включенными в категорию «рецидивирующего или метастатического» заболевания всякий раз, когда этот термин используется в настоящем документе.

Исследуемая популяция получала предшествующий паклитаксел и бевацизумаб, отказалась от такого лечения или не подходила для такого лечения (или, в случае бевацизумаба, не имела доступа). Для пациенток, которые получали предшествующий паклитаксел и/или предшествующий бевацизумаб, прогрессирование заболевания в любой момент времени после предшествующего паклитаксела и/или бевацизумаба является приемлемой причиной для прекращения применения паклитаксела и/или бевацизумаба.

Дизайн исследования представляет собой рандомизированное сравнение цемиплимаба с химиотерапией по выбору исследователя (IC), при этом конечной точкой является OS. Для популяций пациенток, для которых отсутствует общепринятый стандарт лечения, и для которых рандомизация в группу плацебо или группу наилучшей поддерживающей терапии считается неэтичной или неосуществимой, органы здравоохранения приняли IC в качестве компаратора в исследованиях, что привело к одобрению регулирующими органами на основе конечных точек OS (Donoghue et al., Clin Canc Res, 2012;18:1496-1505; Ferris et al., New Engl J Med, Oct 2016 Epub). Обеспечение анонимности данных является нецелесообразным в текущем исследовании из-за различий в графике и различий в профилях АЕ между цемиплимабом и вариантами IC (т.е. иммунозависимыми нежелательными явлениями [irAE], возникающими на фоне цемиплимаба, и подавлением числа лейкоцитов при химиотерапии).

Общая выживаемость непосредственно оценивает клиническую пользу, не является предвзятой и не является суррогатной конечной точкой. Таким образом, OS была выбрана в качестве первичной конечной точки, и в этом открытом исследовании сравнивается цемиплимаб с химиотерапией IC у пациенток с раком шейки матки, которые прогрессировали после предшествующего лечения с применением содержащей платины схемы, которую применяли в условиях рецидивирующего или метастатического заболевания.

Критерии включения: Для включения в исследование пациентка должна соответствовать следующим критериям:

(1) рецидивирующий, персистирующий и/или метастатический рак шейки матки с плоскоклеточной гистологией, для которого не существует варианта лечения, направленного на излечение (оперативное вмешательство или лучевая терапия с химиотерапией или без нее) (Примечание: пациентки с гистологиями аденокарциномы и аденосквамозной карциномы также были включены в соответствии с первоначальным протоколом);

(2) прогрессирование опухоли или рецидив после лечения препаратами платины (должны применяться для лечения метастатического, персистирующего или рецидивирующего рака шейки матки);

(3) у пациентки должно быть измеряемое проявление заболевания, как определено по RECIST 1.1. Измеряемое проявление заболевания определяется как по меньшей мере один очаг, который может быть точно измерен по меньшей мере в 1 измерении (подлежит регистрации самый длинный размер). Каждый очаг должен быть ≥10 мм при измерении с помощью компьютерной томографии (СТ), магнитно-резонансной томографии (MRI) или измерения штангенциркулем при клиническом обследовании, или должен быть ≥20 мм при измерении с помощью рентгенографии грудной клетки. Лимфатические узлы должны быть >15 мм по короткой оси при измерении с помощью СТ или MRI;

(4) статус общего состояния по шкале Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) ≤1;

(5) возраст ≥18 лет;

(6) функция печени: общий билирубин в ≤1,5 раза выше верхней границы нормы (ULN; при метастазах в печень в ≤3 раза выше ULN); трансаминаза в ≤3 раза выше ULN (или в ≤5,0 раз выше ULN, при метастазах в печень); щелочная фосфатаза в ≤2,5 раз выше ULN (или в ≤5,0 раз выше ULN, при метастазах в печень или кости);

(7) функция почек: креатинин сыворотки в ≤1,5 раза выше ULN или расчетный клиренс креатинина >45 мл/мин;

(8) функция костного мозга: гемоглобин ≥9,0 г/дл; абсолютное количество нейтрофилов (ANC) ≥1,5×10⁹/л; количество тромбоцитов ≥75×10⁹/л;

(9) ожидаемая продолжительность жизни >12 недель;

(10) готовность и способность соблюдать правила посещения клиники и процедуры, связанные с исследованием;

(11) предоставление подписанного информированного согласия;

(12) способность понимать и заполнять анкеты, связанные с исследованием;

(13) пациентки должны соответствовать хотя бы одному из следующих критериев, касающихся предшествующей терапии бевацизумабом:

(a) получали предшествующую бевацизумаб-содержащую терапию, которая была прекращена при причине прогрессирования заболевания;

(b) получали предшествующую бевацизумаб-содержащую терапию, которая была прекращена по причине токсичности;

(c) признаны непригодными для предшествующей терапии бевацизумабом по одной из следующих причин: (i) неприемлемый риск образования свищей, (ii) слабо контролируемая гипертензия, (iii) заболевание «низкого риска» в соответствии с критериями Мура (Tewari et al., Clin Cancer Res 2015; 21(24));

(d) отказались от предшествующей терапии бевацизумабом;

(e) не имели доступа к терапии бевацизумабом по логистическим причинам (например, проживали в регионе, в котором бевацизумаб не был коммерчески доступен для пациенток с раком шейки матки, или не имели страхового покрытия для бевацизумаба);

(14) пациентки должны соответствовать по меньшей мере одному из следующих критериев, касающихся предшествующей терапии паклитакселом:

(a) получали предшествующую паклитаксел-содержащую терапию, которая была прекращена по причине прогрессирования заболевания;

(b) получали предшествующую паклитаксел-содержащую терапию, которая была прекращена по причине токсичности;

(c) признаны непригодными для предшествующей терапии паклитакселом по одной из следующих причин: (i) невропатия; (ii) аллергия на паклитаксел или его компоненты;

(d) отказ от предшествующей терапии паклитакселом.

Критерии исключения: Пациентка, которая соответствует любому из следующих критериев, исключается из исследования:

(1) текущие или недавние (в течение 5 лет) признаки серьезного аутоиммунного заболевания, требующего лечения системными иммуносупрессорными препаратами, что может указывать на повышенный риск развития тяжелых irAE. Не являются исключением следующие: витилиго, детская астма, которая разрешилась, диабет 1 типа, остаточный гипотиреоз, требующий только заместительной гормональной терапии, или псориаз, не требующий системного лечения;

(2) предшествующее лечение агентом, который блокирует путь PD-1/PD-L1;

(3) предшествующее лечение другими системными иммуномодулирующими агентами, которое (а) проводилось в течение менее 4 недель (28 дней) до даты включения в исследование, или (b) связано с irAE любой степени тяжести, возникающими в течение 90 дней до включения в исследование, или (с) связано с токсичностью, которая привела к прекращению приема иммуномодулирующего агента. Примеры иммуномодулирующих агентов включают терапевтические вакцины, лечение цитокинами (отличными от гранулоцитарного колониестимулирующего фактора или эритропоэтина) или агентами, нацеленными на цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген 4 (CTLA-4), 4-1ВВ (CD137), PI 3-K-дельта, LAG3 или ОХ-40;

(4) Известные метастазы в головной мозг в анамнезе, которые можно считать активными (скрининговая визуализация головного мозга не требуется, если нет клинического подозрения на метастазы в головной мозг). Пациентки с подвергнутыми ранее лечению метастазами в головной мозг могут принимать участие в исследовании при условии, что очаги являются стабильными (без признаков прогрессирования в течение по меньшей мере 6 недель на изображении, полученном во время скринингового периода), нет признаков новых или увеличивающихся метастазов в головной мозг, и пациентке не требуются любые иммуносупрессорные дозы системных кортикостероидов для контроля метастазов в головной мозг в течение 4 недель до первой дозы исследуемого препарата (цемиплимаб или химиотерапия IC);

(5) иммуносупрессорные дозы кортикостероидов (>10 мг преднизона в сутки или эквивалент) в течение 4 недель до первой дозы исследуемого лекарственного средства (цемиплимаб или химиотерапия IC);

(6) активная бактериальная, вирусная, грибковая или микобактериальная инфекция, требующая лечения, включая известную инфекцию вирусом иммунодефицита человека (HIV) или активную инфекцию вирусом гепатита В (HBV) или вирусом гепатита С (HCV);

(7) история пневмонита в течение последних 5 лет;

(8) любое противораковое лечение (химиотерапия, таргетная системная терапия, фотодинамическая терапия), исследовательский препарат или стандартное лечение в течение 30 дней до первоначального введения исследуемого лекарственного средства (цемиплимаб или химиотерапия IC), или запланированное во время периода исследования (пациентки, получающие бисфосфонаты или деносумаб не исключаются);

(9) подтвержденные лабораторно-инструментальными методами аллергические реакции или острая реакция гиперчувствительности, связанные с лечением антителами в анамнезе;

(10) сопутствующее злокачественное новообразование, отличное от рака шейки матки, и/или злокачественное новообразование, отличное от рака шейки матки, в анамнезе в течение 3 лет до даты первой запланированной дозы исследуемого лекарственного средства (цемиплимаб или химиотерапия IC), за исключением опухолей с незначительным риском метастазирования или смерти, таких как адекватно пролеченная кожная плоскоклеточная карцинома или базально-клеточная карцинома кожи, или протоковая карцинома in situ молочной железы. Пациентки с гематологическими злокачественными новообразованиями (например, хронический лимфолейкоз) исключаются;

(11) любые острые или хронические психиатрические проблемы, которые, по мнению исследователя, делают пациентку неподходящей для участия в исследовании;

(12) пациентки с трансплантацией паренхиматозных органов в анамнезе (пациентки с трансплантацией роговицы в анамнезе могут быть допущены к участию после обсуждения с медицинским наблюдателем и его одобрения);

(13) любое сопутствующее заболевание, результаты медицинского осмотра, метаболическая дисфункция или клинико-лабораторная аномалия, которые, по мнению исследователя, делают пациентку непригодной для участия в клиническом исследовании из-за высокого риска для безопасности и/или потенциального влияния на интерпретацию результатов исследования;

(14) беременные или кормящие женщины;

(15) женщины детородного возраста, которые не желают практиковать высокоэффективную контрацепцию до первоначального лечения исследуемым препаратом, во время исследования и по меньшей мере в течение 6 месяцев после последней дозы. К высокоэффективным мерам контрацепции относится стабильное применение комбинированных (содержащих эстроген и прогестаген) гормональных контрацептивов (пероральных, интравагинальных, трансдермальных) или только прогестагенных гормональных контрацептивов (пероральных, инъекционных, имплантируемых), связанных с ингибированием овуляции, инициированной за 2 или более менструальных циклов до скрининга; внутриматочная спираль; внутриматочная гормон-рилизинг-система; двусторонняя перевязка маточных труб; вазэктомированный партнер; и/или половое воздержание;

(16) пациентки, помещенные в лечебное учреждение на основании постановления судебной или административной власти, исключаются из этого исследования;

(17) предшествующее лечение иделалисибом;

(18) предшествующее лечение живыми вакцинами в течение 30 дней до первоначального введения исследуемого препарата (цемиплимаб или химиотерапия IC). Пациенток нельзя лечить живыми вакцинами во время исследования и до 5 периодов полувыведения после введения последней дозы исследуемого лекарственного средства;

(19) пациентки с предшествующим лечением в рамках любого клинического исследования в течение 30 дней до первоначального введения исследуемого лекарственного средства. Неинтервенционные и наблюдательные исследования являются допустимыми.

Переменные исследования

Первичной конечной точкой данного исследования является общая выживаемость (OS), определяемая как время от рандомизации до даты смерти. Пациентка, которая не умерла, подвергается цензуре на последнюю известную дату контакта с ней.

Вторичные конечные точки включают выживаемость без прогрессирования (PFS) и общую частоту ответов (ORR). PFS определяется как время от рандомизации до даты первого подтвержденного лабораторно-инструментальными методами прогрессирования опухоли с использованием RECIST 1.1 или смерти по любой причине. ORR определяется как количество пациенток с наилучшим общим ответом, включающим подтвержденный полный ответ (CR) или частичный ответ (PR), деленным на количество пациенток в выборке для анализа эффективности. Наилучший общий ответ определяется как наилучший общий ответ между датой рандомизации и датой первого объективно подтвержденного лабораторно-инструментальными методами прогрессирования или датой последующей противораковой терапии, в зависимости от того, что наступит раньше.

Следующие определения применимы к целевым очагам: полный ответ (CR) определяется как исчезновение всех целевых очагов; любые патологические лимфатические узлы (как целевые, так и нецелевые) должны иметь уменьшение по короткой оси до <10 мм (<1 см). Частичный ответ (PR) определяется как уменьшение суммы диаметров целевых очагов по меньшей мере на 30%, принимая в качестве эталона исходные суммарные диаметры. Прогрессирование заболевания (PD) определяется как увеличение суммы диаметров целевых очагов по меньшей мере на 20%, принимая в качестве эталона наименьшую сумму в исследовании (включая исходную сумму, если она является наименьшей в исследовании). Помимо относительного увеличения на 20%, сумма также должна демонстрировать абсолютное увеличение по меньшей мере на 5 мм (0,5 см). Стабилизация заболевания (SD) определяется как отсутствие достаточного уменьшения, чтобы классифицировать как PR, и достаточного увеличения, чтобы классифицировать на PD, принимая в качестве эталона наименьшую сумму диаметров во время исследования.

Другие вторичные конечные точки исследования включают продолжительность ответа (DOR) и качество жизни (QOL). DOR определяется как время между датой первого ответа (CR или PR) и датой первого подтвержденного лабораторно-инструментальными методами прогрессирования опухоли (согласно RECIST 1.1) или смерти по любой причине. QLQ измеряется EORTC С30. Дополнительные вторичные конечные точки включают безопасность и переносимость цемиплимаба. Для оценки безопасности и переносимости химиотерапии IC цемиплимабом оценивают частоту АЕ, серьезных нежелательных явлений (SAE), летальных исходов и отклонений лабораторных показателей.

Дизайн исследования

В этом исследовании приблизительно 534 пациентки (436 из которых имеют гистологию плоскоклеточной карциномы (SCC)) рандомизировали либо в экспериментальную группу лечения цемиплимабом, либо в контрольную группу лечения химиотерапией IC. Рандомизировали 436 пациенток с SCC 1:1 (218 на группу лечения). В экспериментальной группе цемиплимаб вводили в фиксированной дозе 350 мг каждые 3 недели (Q3W). В контрольной группе варианты химиотерапии IC разделяли на 4 класса: (1) антифолат пеметрексед, (2) ингибитор топоизомеразы 1 - топотекан или иринотекан, (3) аналог нуклеозида - гемцитабин и (4) алкалоид барвинка - винорелбин. Единственными химиотерапевтическими методами лечения, разрешенными в контрольной группе, являются любые из 5 лекарственных средств, перечисленных как варианты IC. Использование других агентов в этих классах в данном исследовании не разрешается. На фигуре 2 представлена схема этого дизайна исследования.

Исследование включает 3 периода: скрининг, лечение и последующее наблюдение. Скрининговый период начинается с момента подписания формы информированного согласия (ICF). Скрининговый период заканчивается после подтверждения, что пациентка полностью подходит для участия в исследовании и рандомизирована, или после подтверждения, что пациентка не соответствует критериям и не прошла скрининг. Период лечения начинается в течение 5 дней после рандомизации в 1 из групп лечения. Продолжительность цикла составляет 6 недель, и визуализацию опухоли планируется проводить на день 42 (±7 дней) циклов 1-4, 6, 8, 10, 12, 14 и 16. Планируемое лечение продолжается до 96 недель. Фаза лечения завершается, когда пациентка прекращает исследуемую терапию. Данное исследование не предусматривает перекрестное исследование. После завершения периода лечения пациентки вступают в период последующего наблюдения. После периода последующего наблюдения пациенток наблюдают в отношении выживаемости. Процедуры закрытия исследования осуществляют после сообщения о 331-м событии OS у пациенток с плоскоклеточным раком.

Пациенткам в ходе исследования проводят лечение в соответствии со схемой, показанной в таблице 6.

Термин «исследовательский препарат» (исследуемое лекарственное средство) включает экспериментальный метод лечения цемиплимабом и химиотерапевтические методы лечения IC. В этом исследовании исследуемыми препаратами являются: цемиплимаб (экспериментальная группа); антифолат: пеметрексед (вариант IC в контрольной группе); ингибитор топоизомеразы: топотекан или иринотекан (варианты IC в контрольной группе); аналог нуклеозида: гемцитабин (вариант IC в контрольной группе); и алкалоид барвинка: винорелбин (вариант IC в контрольной группе). Единственными химиотерапевтическими методами лечения, разрешенными в контрольной группе, являются любые из 5 лекарственных средств, перечисленных выше в качестве вариантов IC. Использование других агентов в этих классах в данном исследовании не разрешается.

Метод лечения в экспериментальной группе (цемиплимаб): Немаскированный цемиплимаб поставляется в виде жидкости в стерильных одноразовых флаконах. Каждый флакон содержит цемиплимаб при концентрации 50 мг/мл. Цемиплимаб вводят в амбулаторных условиях в виде 30-минутной внутривенной (IV) инфузии. Дозу для каждой пациентки вводят в виде фиксированной дозы 350 мг каждые 3 недели (Q3W). Подготовленный инфузионный пакет следует хранить не более 6 часов при комнатной температуре или не более 24 часов при температуре от 2°С до 8°С.

Методы лечения в контрольной группе (по выбору исследователя): Пациентки, отнесенные к контрольной группе, получают один из вариантов химиотерапии по выбору исследователя, а именно: антифолат: пеметрексед, 500 мг/м² IV, каждые 21 день, на протяжении 96 недель лечения. Поддержка витамином В₁₂ и фолиевой кислотой обеспечивается в соответствии со стандартом лечения пеметрекседом; ингибитор топоизомеразы 1: топотекан, 1 мг/м² ежедневно IV в течение 5 дней, каждые 21 день, на протяжении 96 недель лечения; или иринотекан 100 мг/м² IV еженедельно x 4, с последующими 10-14 днями отдыха, на протяжении 96 недель лечения; аналог нуклеозида: гемцитабин, 1000 мг/м² IV на дни 1 и 8 и каждые 21 день, на протяжении 96 недель лечения; алкалоид барвинка: винорелбин 30 мг/м² IV на дни 1 и 8 и каждые 21 день, на протяжении 96 недель лечения. Для вариантов IC дозы основаны на массе тела. Для цикла 1/дня 1 исследователь должен использовать скрининговые данные по росту и массе тела для расчета дозы, но также разрешается использовать данные по массе тела на цикл 1/день 1 по усмотрению исследователя. Массу тела измеряют в начале каждого цикла. При изменении массы тела на ≥10% следует пересчитать дозу химиотерапии IC.

Процедуры и оценки

Визуализацию опухоли (компьютерную томографию [СТ] или магнитно-резонансную томографию [MRI]) проводят для измерения опухолевой нагрузки и характеристики профиля эффективности методов лечения в рамках исследования с использованием критериев ответа. Прилагаются все усилия для сбора данных о выживаемости всех пациенток, включая пациенток, которые по какой-либо причине выбыли из исследования, но не отозвали согласие на сбор информации о выживаемости.

Медицинский осмотр, лабораторные анализы, основные показатели жизнедеятельности, электрокардиограмму (ECG), тест на беременность для женщин детородного возраста и регистрацию нежелательных явлений (АЕ) и сопутствующих лекарственных средств проводят для обеспечения безопасности пациентки и для характеристики профилей безопасности методов лечения в рамках исследования.

Другие оценки включают: образцы крови на фармакокинетику (PK); образцы крови для оценки антител к цемиплимабу; биомаркеры (сыворотка, плазма, опухолевая ткань); мононуклеарные клетки периферической крови; и оценки качества жизни.

Процедуры, выполняемые во время скринингового визита: Следующие процедуры выполняют с единственной целью определения пригодности к исследованию или характеристики исходной популяции: сывороточный β-HCG (результат должен быть ≤72 часов до первой дозы); скрининг на HBV, HCV и HIV: поверхностный антиген гепатита В, положительная РНК гепатита С (положительный тест на антитела к гепатиту С потребует теста на РНК гепатита С, чтобы исключить активную инфекцию), сывороточные антитела к HIV-1 или HIV-2; подтверждение лабораторно-инструментальными методами патологического рака шейки матки (только плоскоклеточная гистология); и патологический материал (фиксированный формалином, залитый парафином блок [FFPE] или 20 слайдов из образца в представленном отчете о патологии).

Процедуры оценки эффективности: Для всех пациенток заболевание оценивают рентгенологически в соответствии с критериями RECIST 1.1. СТ или MRI для оценки опухоли проводят при скрининге, во время лечения и во время последующего наблюдения. В течение периода лечения оценку ответа опухоли проводят в конце циклов с 1 по 4, 6, 8, 10, 12, 14 и 16. Во время последующего наблюдения оценку ответа опухоли проводят во время визитов последующего наблюдения 1 и 2. Выбор метода визуализации с помощью СТ или MRI остается за исследователем. После того, как сделан выбор между СТ или MRI, последующие оценки следует проводить с использованием того же метода, когда это возможно. Визуализацию всего тела (грудной клетки/живот/таз) проводят во время исходной оценки и настоятельно рекомендуется проводить при каждой оценке ответа. СТ или MRI шеи следует проводить у пациенток с метастазами в шею. Как минимум, все поддающиеся радиологическому измерению целевые очаги (RECIST 1.1) должны визуализироваться при каждой оценке ответа. При каждой оценке ответа следует использовать один и тот же метод радиологической визуализации. Визуализация головного мозга - MRI головного мозга с гадолинием (или СТ головного мозга с контрастом, если MRI невозможна) проводят в период скрининга для пациенток с метастазами в головной мозг в анамнезе или у которых есть клиническое подозрение на метастазы в головной мозг. Пациентки с «неактивными» метастазами в головной мозг, включенные в исследование, должны проходить визуализацию головного мозга при каждой оценке ответа или раньше, если есть клиническое подозрение на ухудшение метастазов в головной мозг во время лечения.

Опросники качества жизни: Результаты, сообщаемые пациентками, оценивают с использованием утвержденного опросника EORTC QLQ С30, который пациентка заполняет самостоятельно. Пациенток просят заполнить эти анкеты до проведения каких-либо процедур исследования во время данного исследовательского визита (во время периода исследования/лечения и последующего наблюдения).

Сопутствующие лекарственные средства и процедуры

Любое назначенное лечение, отличное от противораковой терапии, с момента информированного согласия до 90 дней после последнего лечения в рамках исследования считается сопутствующим лечением. Это включает лекарственные препараты и другие виды терапии, для которых введение началось до исследования и продолжается во время исследования, а также любые виды терапии, начатые в период последующего наблюдения для лечения АЕ, связанного с исследуемым лекарственным средством.

Запрещенные лекарственные препараты и процедуры. Во время участия в этом исследовании пациентка не может получать какое-либо противораковое лечение, кроме лечения, назначенного при рандомизации: цемиплимаб или химиотерапия IC. Пациентки не должны получать живые вакцины во время исследования и в течение до 5 периодов полувыведения после последней дозы исследуемого лекарственного средства. Любой другой лекарственный препарат, который считается необходимым для благополучия пациентки, и который, как ожидается, не повлияет на оценку назначенного лечения (цемиплимаб или химиотерапии IC), может быть назначен по усмотрению исследователя. Пациентки, использующие иммуносупрессорные дозы (>10 мг в сутки преднизона или эквивалента) системных кортикостероидов, отличные от заместительной терапии кортикостероидами, не допускаются к участию в исследовании. Для пациенток из группы цемиплимаба рекомендуется не принимать системные кортикостероиды, такие как гидрокортизон, преднизон, преднизолон (Solu-Medrol®) или дексаметазон (Decadron®), в любое время на протяжении исследования, за исключением случаев угрожающей жизни чрезвычайной ситуации и/или для лечения irAE.

Разрешенные лекарственные препараты и процедуры: разрешены физиологические заместительные дозы системных кортикостероидов, даже если эквиваленты преднизолона >10 мг/день. Допускается короткий курс кортикостероидов для профилактики (например, аллергия на контрастное вещество) или для лечения неаутоиммунных состояний (например, реакция гиперчувствительности замедленного типа, вызванная контактным аллергеном).

Лучевая терапия не является частью схемы исследования ни в экспериментальной, ни в контрольной группе. Пациентки, которым планируется лучевая терапия, не пригодны для исследования. Если в ходе исследования у пациентки развивается симптоматическое поражение, для которого паллиативная лучевая терапия считается подходящей, это считается PD, и, как правило, пациентку исключают из исследования. Паллиативная лучевая терапия может быть разрешена при определенных обстоятельствах для пациенток, которые принимали участие в исследовании в течение по меньшей мере 24 недель. В этом исследовании паллиативное облучение разрешается только для нецелевого очага.

Полученные результаты

Ожидается, что введение цемиплимаба приводит к усиленной регрессии опухоли у пациенток с раком шейки матки с гистологией SCC. Ожидается, что такие пациентки проявят больший частичный и полный ответ, а также значительно увеличат общую выживаемость и частоту общего ответа. Также ожидается, что такие положительные эффекты будут достигнуты в еще большей степени у пациенток с раком шейки матки с гистологией SCC по сравнению с теми, которые наблюдаются у пациенток с раком шейки матки с гистологией аденокарциномы.

ПРИМЕР 3: Результаты исследования 3 фазы цемиплимаба в качестве терапии ≥ второй линии (2L) рака шейки матки по сравнению с химиотерапией

В этом примере представлены результаты клинического исследования, описанного в примере 2. Исследование, описанное в этом примере, включает в общей сложности 608 пациенток с метастатическим раком шейки матки, резистентных к химиотерапии на основе платины (477 с плоскоклеточной карциномой (SCC); 131 с аденокарциномой (АС)), со статусом общего состояния по шкале Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) 0 или 1. Первичной конечной точкой данного исследования являлась общая выживаемость (OS). Вторичные конечные точки включали выживаемость без прогрессирования (PFS), общую частоту ответов (ORR)/продолжительность ответа (DOR), безопасность и качество жизни.

Пациентки получали либо: (i) цемиплимаб, 350 мг IV Q3W, либо (ii) химиотерапию по выбору исследователя (IC), выбранную из пеметрекседа, гемцитабина, топотекана (или иринотекана) или винорелбина. Мощность исследования составила 90%. Медиана OS составила 12 месяцев для пациенток, получавших цемиплимаб, и 8,5 месяцев для пациенток, получавших химиотерапию. Отношение рисков (HR) по статистическому плану составило 0,70. Минимальное значение HR для статистической значимости при окончательном анализе составило 0,80. Минимальное значение HR для статистической значимости во втором интервале (85% событий) составило 0,77.

Демографические данные были сбалансированы для общей популяции, как обобщено в таблице 7, в которой представлены демографические и исходные характеристики (полный набор анализов) для пациенток с гистологией SCC и не-SCC. Медиана возраста 51,0 год в общей популяции пациенток этого исследования является репрезентативной для реального мира пациенток с раком шейки матки. Разрешалось отбирать пациенток независимо от статуса экспрессии PD-L1.

Продолжительность лечения для всех пациенток составила около 20 недель. Результаты показали существенное преимущество, обеспечиваемое цемиплимабом, по сравнению с химиотерапией (таблицы 8-10), особенно в отношении общей выживаемости (таблица 8) пациенток с раком шейки матки, включая пациенток с гистологией SCC и не-SCC.

Нежелательные явления, возникающие при лечении (ТЕАЕ), соответствовали известному профилю безопасности цемиплимаба и были лучше, чем профиль безопасности химиотерапии, как показано в таблицах 11 и 12 (набор анализов безопасности для пациенток с гистологией SCC и не-SCC). Новых сигналов по безопасности не наблюдалось.

Приведенные выше результаты показывают, что цемиплимаб в качестве терапии второй линии значительно снижает риск смерти у пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки по сравнению с химиотерапией. Это крупнейшее рандомизированное клиническое исследование фазы 3, проведенное в отношении распространенного рака шейки матки. Цемиплимаб является первым лекарственным средством, которое продемонстрировало улучшение общей выживаемости у женщин с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки после прогрессирования на фоне химиотерапии на основе препаратов платины в исследовании фазы 3.

По сравнению с химиотерапией, цемиплимаб снизил риск смерти на 31% (HR=0,69; CI: 0,56-0,84, р=0,003). Медиана выживаемости составила 12 месяцев для пациенток, получавших цемиплимаб (n=304), по сравнению с 8,5 месяцами для пациенток, получавших химиотерапию (n=304). Никаких новых сигналов по безопасности цемиплимаба не наблюдалось.

Рецидивирующий или метастатический рак шейки матки, как известно, плохо поддается лечению и не имеет стандарта лечения после химиотерапии первой линии. Это исследование показало, что цемиплимаб помогает пациенткам с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки жить дольше после неудачной химиотерапии, независимо от их статуса PD-L1.

ПРИМЕР 4: Результаты исследования 3 фазы цемиплимаба по сравнению с химиотерапией при рецидивирующем или метастатическом раке шейки матки

В этом примере представлены обновленные результаты по сравнению с результатами, показанными в примере 3, и они были получены в результате клинического исследования, описанного в примере 2. Исследование, описанное в этом примере, включает в общей сложности 608 женщин с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки, который прогрессировал после химиотерапии первой линии на основе препаратов платины. Пациентки были включены независимо от статуса экспрессии PD-L1 и получали цемиплимаб 350 мг внутривенно каждые 3 недели или химиотерапию по выбору исследователя (IC) до 96 недель. Вариантами химиотерапии IC были пеметрексед, винорелбин, гемцитабин, иринотекан или топотекан. Пациенток стратифицировали по гистологическому признаку (плоскоклеточная карцинома (SCC)/аденокарцинома или аденосквамозная карцинома (АС)). Демографические данные пациенток представлены в таблице 13.

Первичная цель исследования состояла в сравнении общей выживаемости (OS) для популяции пациенток с гистологией плоскоклеточной карциномы (SCC), а затем для общей популяции с любым подходящим гистологическим вариантом (SCC или аденокарциномы/аденосквамозной карциномы [АС]) между цемиплимабом и химиотерапией IC. Вторичные цели исследования, проведенного среди пациенток с SCC и общей популяции (SCC и АС), заключались в сравнении выживаемости без прогрессирования (PFS) при SCC, качества жизни (QoL), частоты объективных ответов (ORR) при SCC, PFS и ORR в общей популяции, и профилей безопасности между цемиплимабом и химиотерапией IC. Промежуточный анализ был запланирован, когда среди пациенток с SCC произошло примерно 85% событий.

Результаты: Рандомизировали 608 пациенток: медиана возраста: 51 год [диапазон 22-87]; гистологический вариант: 477 SCC, 131 АС; статус общего состояния по шкале ECOG: 0 [46,5%], 1 [53,5%]. Медиана воздействия цемиплимаба составила 15 недель (диапазон: 1,4-100,7). При промежуточном анализе медиана OS для цемиплимаба в общей популяции (n=304) по сравнению с химиотерапией IC (n=304) составила 12,0 против 8,5 месяцев, соответственно; отношение рисков (HR) для смерти 0,69; 95% доверительный интервал (CI) 0,56-0,84; р<0,001.

В популяции SCC общая выживаемость (OS) была значительно дольше в группе цемиплимаба, чем в группе химиотерапии. В частности, медиана OS для цемиплимаба (n=239) по сравнению с химиотерапией IC (n=238) составила 11,1 против 8,8 месяцев; отношение рисков (HR) смерти составило 0,73; 95% CI 0,58-0,91; р=0,003. Выживаемость без прогрессирования (PFS) в популяции SCC была значительно выше в группе цемиплимаба, чем в группе химиотерапии: отношение рисков=0,71 (95% CI: 0,58, 0,86); значение р=0,00026 для одностороннего критерия. Предполагаемая медиана выживаемости без прогрессирования (PFS) составила 2,8 месяца в группе цемиплимаба по сравнению с 2,9 месяцами в группе химиотерапии. Общее среднее изменение от исходного уровня по шкале Общего статуса здоровья/Качества жизни (GHS/QoL) при SCC: расчетное различие в среднем изменении от исходного уровня (цемиплимаб - химиотерапия) составило 8,49 (95% CI: 3,77, 13,21); значение р=0,00025 для одностороннего критерия; статистически значимое различие и цемиплимаб имеет преимущество перед химиотерапией. Среднее изменение от исходного уровня по GHS/QoL в общей популяции показано на фигуре 3. В общей популяции наблюдалось номинально значимое различие в пользу цемплимаба по сравнению с химиотерапией. Пациентки, получавшие цемиплимаб, улучшили или сохранили GHS/QoL по сравнению с исходным уровнем. У пациенток, получавших химиотерапию, обычно наблюдалось ухудшение этих показателей.

Общее среднее изменение от исходного уровня физического функционирования при SCC: расчетное различие в среднем изменении от исходного уровня (цемиплимаб - химиотерапия) составило 8,35 (95% CI: 4,08, 12,62); значение р=0,00008 для одностороннего критерия; статистически значимое различие, и цемиплимаб имеет преимущество перед химиотерапией. Общая частота ответов (ORR) при SCC: ORR была значительно выше в группе цемиплимаба, чем в группе химиотерапии: 17,6% (95% CI: 13,0-23,0) против 6,7% (95% CI: 3,9-10,7), значение р=0,00014 для одностороннего критерия.

В популяции с АС медиана общей выживаемости (OS) для цемиплимаба (n=65) по сравнению с химиотерапией IC (n=66) составила 13,3 против 7,0 месяцев; отношение рисков (HR) составило 0,56; 95% CI 0,36-0,85; р<0,005 (номинальное значение р). Выживаемость без прогрессирования (PFS) и общая частота ответов (ORR) в общей популяции и в популяции SCC, а также среднее изменение от исходного уровня QoL при SCC свидетельствовали в пользу цемиплимаба. Выживаемость без прогрессирования (PFS) при АС: отношение рисков (HR)=0,91 (95% CI: 0,62, 1,34). Медиана PFS составила 2,7 месяцев в группе цемиплимаба против 2,8 месяцев в группе химиотерапии. Общая частота ответов (ORR) в группе AC: ORR составила 12,3% (95% CI: 5,5-22,8) в группе цемиплимаба против 4,5% (95% CI: 0,9-12,7) в группе химиотерапии.

Наиболее распространенными возникшими в ходе лечения нежелательными явлениями (АЕ) любой степени тяжести для цемиплимаба по сравнению с химиотерапией IC были анемия (25% против 45%), тошнота (18% против 33%) и рвота (16% против 23%). Прекращение лечения при причине АЕ произошло у 8% пациенток, получавших цемиплимаб, и у 5% пациенток, получавших химиотерапию IC. Сводные данные по безопасности представлены в таблицах 14-15.

Безопасность анализировали у всех рандомизированных пациенток, получавших любое лечение в рамках исследования. АЕ, нежелательные явления

Не было иммуноопосредованных+++ нежелательных явлений (АЕ), которые не описаны достаточно хорошо для класса ингибиторов PD-1/PD-L1.

В общей популяции в отношении общей выживаемости (OS) анализ эффективности включал 304 пациентки в обеих группах лечения. Медиана периода наблюдения (с момента рандомизации до даты прекращения сбора данных) составила 17,9 месяцев в группе цемиплимаба против 18,3 месяцев в группе химиотерапии. Общая выживаемость (OS) была значительно дольше в группе цемиплимаба, чем в группе химиотерапии: отношение рисков=0,69 (95% CI: 0,56, 0,84); значение р=0,00011 для одностороннего критерия. Расчетная медиана OS составила 12,0 месяцев в группе цемиплимаба против 8,5 месяцев в группе химиотерапии. Выживаемость без прогрессирования (PFS) в общей популяции: PFS была значительно выше в группе цемиплимаба по сравнению с группой химиотерапии: отношение рисков=0,75 (95% CI: 0,63, 0,89); значение р=0,00048 для одностороннего критерия. Расчетная медиана PFS составила 2,8 месяцев в группе цемиплимаба против 2,9 месяцев в группе химиотерапии. Общая частота ответов (ORR) в общей популяции: ORR была значительно выше в группе цемиплимаба, чем в группе химиотерапии: 16,4% против 6,3%, значение р=0,00004 для одностороннего критерия.

Статистические методы: Первичную конечную точку OS суммировали с использованием кривых выживаемости Каплана-Мейера и сравнивали две группы лечения с использованием лог-рангового теста, стратифицированного с помощью факторов стратификации рандомизации по географическому региону (Северная Америка против Азии против ROW) при SCC и АС, и по гистологическому варианту (SCC против АС) и географическому региону в общей популяции. Отношение рисков с двусторонним 95% доверительным интервалом получали из стратифицированной модели пропорциональных рисков Кокса с теми же факторами стратификации, которые использовали в стратифицированном лог-ранговом тесте. PFS анализировали с использованием того же статистического метода, который описан для первичного анализа OS в отношении SCC, аденокарциномы и общей популяции. ORR анализировали с применением критерия Кохрана-Мантеля-Хензеля с использованием стратификации по тем же факторами стратификации, которые использовали при анализе OS в отношении SCC, АС и общей популяции. ORR и соответствующий 95% точный CI рассчитывали по методу Клоппера-Пирсона для каждой группы лечения.

Качество жизни QoL: Продольное изменение от исходного уровня при каждой оценке PRO по шкалам GHS/QoL и PF анализировали с использованием модели со смешанными эффектами для повторных измерений (MMRM). Более высокие баллы по этим шкалам указывают на лучшее состояние здоровья/функцию. Попарное сравнение общих скорректированных средних оценок, придающих каждому посещению равный вес, и скорректированные средние оценки в цикле 2 были проведены для цемиплимаба по сравнению с химиотерапией IC. Модель генерировала оценки среднего значения, рассчитанного по методу наименьших квадратов (LS), стандартные ошибки, 95% CI и р-значения (где применимо) для средних изменений от исходного уровня для каждой оценки PRO.

Результаты OS показаны в таблицах 16-19 и фигурах 4-6.

Результаты PFS показаны в таблицах 20-22 и на фигурах 7-9.

Результаты ORR показаны в таблицах 23-25.

Результаты QoL и физического функционирования показаны в таблицах 26-29.

На исходном уровне и в день 1 каждого цикла лечения (до 16) пациентки заполняли опросник EORTC QLQ-C30. Модели со смешанными эффектами для повторных измерений оценивали среднее значение, рассчитанное по методу наименьших квадратов (LS), изменения от исходного уровня по всем шкалам. Анализы респондеров определяли соотношения с клинически значимым (с использованием 10-точечного порога) улучшением или ухудшением или стабильностью по QLQ-C30. Результаты представлены для SCC и общей популяции в соответствии со статистической иерархией; апостериорные (post-hoc) анализы представлены для когорты АС.

Исходные оценки показали функционирование от умеренного до высокого и степень тяжести симптомов от низкой до умеренной с минимальными различиями между группами лечения. Значительные различия в изменениях среднего значения, рассчитанного по методу наименьших квадратов, в пользу цемиплимаба наблюдались для шкал QLQ-C30 GHS/QoL, физического функционирования и других шкал функционирования и симптомов (таблица 30). Предполагаемый эффект лечения в отношении ролевого функционирования, боли и потери аппетита превышал клинически значимый порог. У большего числа пациенток, получавших цемиплимаб, наблюдалось клинически значимое улучшение/сохранение показателей по шкалам GHS/QoL, функционирования и большинства симптомов. У пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки цемиплимаб продемонстрировал значительные преимущества по сравнению с химиотерапией в отношении сохранения/улучшения показателей по шкалам GHS/QoL, физического функционирования и большинства симптомов.

В общей популяции у пациенток, получавших цемиплимаб (n=304), наблюдалось значительное улучшение OS, PFS и ORR по сравнению с химиотерапией (n=304), включая: (i) снижение риска смерти на 31% ([HR: 0,69; 95% CI: 0,56-0,84; р=0,0011 для одностороннего критерия); (ii) снижение риска прогрессирования заболевания на 25% (HR=0,75; 95% CI: 0,63-0,89; р=0,00048 для одностороннего критерия); и (iii) 16% ORR (50 пациенток; 95% CI: 13-21%; р=0,00004 для одностороннего критерия) по сравнению с 6% для химиотерапии (19 пациенток), где медиана продолжительности ответа составила 16 месяцев для цемиплимаба (95% CI: от 12 месяцев до еще не подвергнутой оценке) и 7 месяцев для химиотерапии (95% CI: 5-8 месяцев), согласно оценкам Каплана-Мейера.

В этом исследовании 78% пациенток имели распространенный рак шейки матки, который был классифицирован как SCC. В этой субпопуляции также наблюдались значительные улучшения на фоне цемиплимаба (n=239) по сравнению с химиотерапией (n=238), включая: (i) снижение риска смерти на 27% (HR: 0,73; 95% CI: 0,58-0,91; р=0,00306 для одностороннего критерия); (ii) снижение риска прогрессирования заболевания на 29% (HR=0,71; 95% CI: 0,58-0,86; p=0,00026 для одностороннего критерия); и (iii) 18% ORR (42 пациентки; 95% CI: 13-23%) по сравнению с 7% для химиотерапии (16 пациенток; 95% CI: 6-23%).

Хотя оценка аденокарциномы не была заранее заданной конечной точкой, анализ post-hoc продемонстрировал следующие результаты для пациенток, получавших цемиплимаб (n=65), по сравнению с химиотерапией (n=66), включая: (i) снижения риска смерти на 44% (HR: 0,56; 95% CI: 0,36-0,85; номинальный уровень значимости р<0,005 для одностороннего критерия); (ii) снижение риска прогрессирования заболевания на 9% (HR=0,91; 95% CI: 0,62-1,34); и (iii) 12% ORR (8 пациенток; 95% CI: 6-23%) по сравнению с 5% для химиотерапии (3 пациентки; 95% CI: 1-13%).

Кроме того, пациентки, получавшие цемиплимаб, в целом смогли улучшить или сохранить свой исходный уровень GHS/QOL, в то время как у пациенток, получавших химиотерапию, наблюдалось ухудшение, которое стало клинически значимым к 8 циклу, в соответствии с EORTC QLQ-C30 (результаты полной оценки [стандартная ошибка]: улучшение 1,01 [1,54] для цемиплимаба, ухудшение - 6,81 [2,12] для химиотерапии; разница: 7,81; номинальный уровень значимости Р=0,00040 для одностороннего критерия).

Никаких новых сигналов по безопасности для цемиплимаба не наблюдалось. Безопасность оценивали у пациенток, которые получили хотя бы 1 дозу исследуемого препарата: 300 пациенток в группе цемиплимаба (медиана продолжительности воздействия: 15 недель; диапазон: 1-101 неделя) и 290 пациенток в группе химиотерапии (медиана продолжительности воздействия: 10 недель; диапазон: 1-82 недели). АЕ наблюдались у 88% пациенток, получавших цемиплимаб, и у 91% пациенток, получавших химиотерапию, причем у 15% и более пациенток, получавших цемплимаб, наблюдалась анемия (25% цемиплимаб, 45% химиотерапия), тошнота (18% цемиплимаб, 33% химиотерапия), утомляемость (17% цемиплимаб, 16% химиотерапия), рвота (16% цемиплимаб, 23% химиотерапия), снижение аппетита (15% цемиплимаб, 16% химиотерапия) и запор (15% цемиплимаб, 20% химиотерапия). АЕ степени 3 или выше возникали у 45% пациенток, получавших цемиплимаб, и у 53% пациенток, получавших химиотерапию. Среди АЕ у 15% и более пациенток АЕ степени 3 или выше, которые чаще возникали в группе цемиплимаба, включали астению (2% цемиплимаб, 1% химиотерапия) и пирексию (менее 1% цемиплимаб, 0% химиотерапия). Иммуноопосредованные АЕ наблюдались у 16% пациенток, получавших цемиплимаб, и менее чем у 1% пациенток, получавших химиотерапию, при этом 6% и менее 1% имели степень 3 или выше, соответственно. Прекращение лечения из-за АЕ произошло у 9% пациенток, получавших цемиплимаб, и у 5% пациенток, получавших химиотерапию.

Выводы: Монотерапия цемиплимабом вызывала статистически значимое улучшение OS, PFS и ORR по сравнению с химиотерапией по выбору исследователя в общей популяции, а также в обеих субпопуляциях SCC и АС пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки, который прогрессировал после химиотерапии, содержащей платину, в условиях терапии ≥ 2-й линии. У пациенток с гистологическим вариантом плоскоклеточной карциномы статистически значимое различие в общем среднем изменении от исходного уровня по шкалам Общего состояния здоровья/Качества жизни (Global Health Status / Quality of Life), и Физического функционирования (Physical Functioning) свидетельствует в пользу цемиплимаба по сравнению с химиотерапией по выбору исследователя. Кроме того, общее среднее изменение от исходного уровня GHS/QoL было в пользу цемиплимаба в общей популяции (номинальный уровень значимости Р<0,001) и у пациенток с SCC (Р<0,001). Профиль токсичности цемиплимаба выгодно отличался от профиля токсичности химиотерапии (меньше ТЕАЕ любой степени тяжести и ≥ степени 3) и соответствовал известному профилю безопасности цемиплимаба.

Таким образом, это исследование, в которое были включены пациентки независимо от статуса экспрессии PD-L1, показывает, что цемиплимаб является высокоэффективным лечением второй линии у женщин с распространенным раком шейки матки, которые сталкиваются с неблагоприятным прогнозом и ограниченными вариантами лечения. Цемиплимаб продемонстрировал значительное улучшение OS у женщин с распространенным раком шейки матки после прогрессирования на фоне химиотерапии, снизив риск смерти на 31% по сравнению с химиотерапией в общей популяции. Кроме того, цемиплимаб привел к значительно более длительной OS, чем монохимиотерапия, у пациенток с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки после терапии 1-й линии на основе платины, независимо от статуса PD-L1 или гистологического варианта (SCC, АС); и никаких новых сигналов по безопасности не наблюдалось. Цемиплимаб является первым иммунотерапевтическим средством, демонстрирующим преимущества OS при рецидивирующем или метастатическом раке шейки матки, и обеспечивает новый стандарт лечения для этой группы пациенток с неблагоприятным прогнозом.

ПРИМЕР 5: Результаты фазы 3 исследования рецидивирующего или метастатического рака шейки матки; анализ эффективности цемиплимаба в подгруппах по сравнению с химиотерапией по выбору исследователя

В этом примере представлены результаты клинического исследования, описанного в примере 2, которое представляет собой открытое, рандомизированное (1:1), многоцентровое клиническое исследование фазы 3 цемиплимаба против PD-1 по сравнению с монохимиотерапией по выбору исследователя (IC) при рецидивирующем или метастатическом раке шейки матки, который прогрессировал после терапии 1-й линии на основе платины. Монохимиотерапия, выбранная исследователем, включала гемцитабин, пеметрексед, винорелбин, топотекан или иринотекан. Взрослые женщины (возраст ≥18 лет) были включены в исследование независимо от экспрессии PD-L1 и получали цемиплимаб 350 мг внутривенно каждые 3 недели или химиотерапию IC в течение до 96 недель; и были стратифицированы по гистологическому варианту (плоскоклеточная карцинома [SCC] / аденокарцинома или аденосквамозная карцинома [АС]), географическому региону (Северная Америка/Азия/остальной мир), предшествующему применению бевацизумаба и статусу по ECOG (0/1). Первичной конечной точкой была OS. Дополнительные конечные точки включали выживаемость без прогрессирования (PFS), частоту объективного ответа (ORR), продолжительность ответа, качество жизни и безопасность.

Всего было рандомизировано 608 пациенток: 304 в группу цемиплимаба и 304 в группу химиотерапии IC (гемцитабин, n=121; преметрексед, n=111; винорелбин, n=32; топотекан, n=21; иринотекан, n=19) по географическим регионам и гистологическим вариантам. Медиана продолжительности наблюдения (диапазон) составила 4,8 месяцев (0,0-25,9) для общей популяции. При втором промежуточном анализе исследование останавливали раньше для оценки эффективности. OS, PFS и ORR (таблица 31) показали улучшения на фоне цемиплимаба по сравнению с каждой химиотерапией IC, аналогичные тем, которые наблюдались на фоне цемиплимаба по сравнению с объединенной химиотерапией IC. В целом, улучшения по OS, PFS и ORR на фоне цемиплимаба согласовывались с результатами для общей популяции, независимо от лекарственного средства химиотерапии IC.

Ссылки на использованную литературу

[1] F. Bray, J. Ferlay, L Soerjomataram, R.L. Siegel, L.A. Torre, A. Jemal, Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries, CA Cancer J Clin 68 (2018) 394-424.

[2] R. Burk, Z. Chen, C. Sailer, T.C.G.A.R. Network, Integrated genomic and molecular characterization of cervical cancer, Nature 543 (2017) 378-384.

[3] C. Marth, F. Landoni, S. Mahner, M. McCormack, A. Gonzalez-Martin, N. Colombo, E.G. Committee, Cervical cancer: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up, Ann Oncol 28 (2017) iv72-iv83.

[4] K.S. Tewari, M.W. Sill, H.J. Long III, R.T. Penson, H. Huang, L.M. Ramondetta, L.M. Landrum, A. Oaknin, T.J. Reid, M.M. Leitao, Improved survival with bevacizumab in advanced cervical cancer, N Engl J Med 370 (2014) 734-743.

[5] D. Lorusso, G. Ferrandina, S. Pignata, M. Ludovisi, R. Vigano, S. Scalone, P. Scollo, E. Breda, A. Peitragalla, G. Scambia, Evaluation of pemetrexed (Alimta, LY231514) as second-line chemotherapy in persistent or recurrent carcinoma of the cervix: the CERVIX 1 study of the MITO (Multicentre Italian Trials in Ovarian Cancer and Gynecologic Malignancies) Group, Ann Oncol 21 (2010) 61-66.

[6] D.S. Miller, J.A. Blessing, D.C. Bodurka, A.J. Bonebrake, J.O. Schorge, Evaluation of pemetrexed (Alimta, LY231514) as second line chemotherapy in persistent or recurrent carcinoma of the cervix: a Phase II study of the Gynecologic Oncology Group, Gynecol Oncol 110 (2008)65-70.

[7] A.M. Heeren, B.D. Koster, S. Samuels, D.M. Ferns, D. Chondronasiou, G.G. Kenter, E.S. Jordanova, T.D. de Gruijl, High and interrelated rates of PD-L1+ CD14+ antigen-presenting cells and regulatory T cells mark the microenvironment of metastatic lymph nodes from patients with cervical cancer, Cancer Immunol Res 3 (2015) 48-58.

[8] L. Deng, H. Liang, B. Burnette, M. Beckett, T. Darga, R.R. Weichselbaum, Y.X. Fu, Irradiation and anti-PD-L1 treatment synergistically promote antitumor immunity in mice, J Clin Invest 124 (2014) 687-695.

[9] K.P. Papadopoulos, M.L. Johnson, A.C. Lockhart, K. Moore, G.S. Falchook, S.C. Formenti, A. Naing, R.D. Carvajal, L.S. Rosen, G.J. Weiss, R.S. Leidner, J. Li, A. Paccaly, M. Feng, E. Stankevich, I. Lowy, M.G. Fury, M.R. Crittenden, First-in-human study of cemiplimab alone or in combination with radiotherapy and/or low-dose cyclophosphamide in patients with advanced malignancies, Clin Cancer Res 26 (2020) 1025-1033.

[10] R.W. Naumann, A. Hollebecque, T. Meyer, M.-J. Devlin, A. Oaknin, J. Kerger, J.M. Lopez-Picazo, J.-P. Machiels, J.-P. Delord, T.R.J. Evans, V. Boni, E. Calvo, S.L. Topalian, T. Chen, I. Soumaoro, B. Lin, J. Gu, R. Zwirtes, K.N. Moore, Safety and efficacy of nivolumab monotherapy in recurrent or metastatic cervical, vaginal, or vulvar carcinoma: results from the Phase I/II CheckMate 358 trial, J Clin Oncol 37 (2019) 2825-2834.

[11] A.D. Santin, W. Deng, M. Frumovitz, N. Buza, S. Bellone, W. Huh, S. Khleif, H.A. Lankes, E.S. Ratner, R.E. O'Cearbhaill, A.A. Jazaeri, M. Birrer, Phase II evaluation of nivolumab in the treatment of persistent or recurrent cervical cancer (NCT02257528/NRG-GY002), Gynecol Oncol 157 (2020) 161-166.

[12] M. Trivedi, B. Hoffher, J. Winkelmann, M. Abbott, О Hamid, R.D. Carvajal, Programmed death 1 immune checkpoint inhibitors, Clin Adv Hematol Oncol 13 (2015) 858-868.

[13] R.L. Ferris, G. Blumenschein Jr, J. Fayette, J. Guigay, A.D. Colevas, L. Licitra, K. Harrington, S. Kasper, E.E. Vokes, C. Even, Nivolumab for recurrent squamous-cell carcinoma of the head and neck, N Engl J Med 375 (2016) 1856-1867.

[14] C.H. Lee, R.J. Motzer, Immune checkpoint therapy in renal cell carcinoma, Cancer J 22 (2016) 92-95.

[15] K. Chamoto, R. Hatae, Т. Honjo, Current issues and perspectives in PD-1 blockade cancer immunotherapy, Int J Clin Oncol (2020).

[16] F.F. Gellrich, M. Schmitz, S. Beissert, F. Meier, Anti-PD-1 and novel combinations in the treatment of melanoma-an update, J Clin Med 9 (2020) 223.

[17] Y.K. Chae, A. Arya, W. Iams, M.R. Cruz, S. Chandra, J. Choi, F. Giles, Current landscape and future of dual anti-CTLA4 and PD-1/PD-L1 blockade immunotherapy in cancer; lessons learned from clinical trials with melanoma and non-small cell lung cancer (NSCLC), J Immunother Cancer 6 (2018) 39.

[18] J.S. Lee, E. Ruppin, Multiomics prediction of response rates to therapies to inhibit programmed cell death 1 and programmed cell death 1 ligand 1, JAMA Oncol 5 (2019) 1614-1618.

[19] A. Marabelle, M.G. Fakih, J. Lopez, M. Shah, R. Shapira-Frommer, K. Nakagawa, H.C. Chung, H.L. Kindler, J.A. Lopez-Martin, W. Miller, A. Italiano, S. Kao, S.A. Piha-Paul, J.P. Delord, R.R. McWilliams, D. Aurora-Garg, M. Chen, F. Jin, K. Norwood, Y.J. Bang, 1192O - Association of tumour mutational burden with outcomes in patients with select advanced solid tumours treated with pembrolizumab in KEYNOTE-158, Annals of Oncology 30 (2019) v477-v478.

[20] H. Kim, J.-H. Chung, PD-L1 testing in non-small cell lung cancer: past, present, and future, J Pathol Transl Med 53 (2019) 199-206.

Объем настоящего изобретения не должен ограничиваться конкретными вариантами осуществления, описанными в настоящем документе. Действительно, различные модификации изобретения в дополнение к тем, которые описаны в настоящем документе, станут очевидными для специалистов в данной области техники из приведенного выше описания и прилагаемых фигур. Предполагается, что такие модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc.

Fury, Matthew

Lowy, Israel

Mathias, Melissa Divya

Yama-Dang, Nazumi Alice

Fury, Wen

<120> СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ ПУТЕМ ВВЕДЕНИЯ ИНИБИТОРА

PD-1

<130> 179227.02102; 10797WO01

<160> 12

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 117

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> HCVR

<400> 1

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Val Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe

20 25 30

Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 2

<211> 107

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LCVR

<400> 2

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Ser Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Leu Ser Ile Asn Thr Phe

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu His Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Thr Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Val Val Asp Phe Arg

100 105

<210> 3

<211> 8

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> HCDR1

<400> 3

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe Gly

1 5

<210> 4

<211> 8

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> HCDR2

<400> 4

Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr

1 5

<210> 5

<211> 10

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> HCDR3

<400> 5

Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 6

<211> 6

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LCDR1

<400> 6

Leu Ser Ile Asn Thr Phe

1 5

<210> 7

<211> 3

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LCDR2

<400> 7

Ala Ala Ser

1

<210> 8

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LCDR3

<400> 8

Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Phe Thr

1 5

<210> 9

<211> 444

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> HC 1-117; 118-444

<400> 9

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Val Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe

20 25 30

Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe

260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

275 280 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305 310 315 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln

340 345 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu

405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 10

<211> 214

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LC 1-108; 109-214

<400> 10

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Ser Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Leu Ser Ile Asn Thr Phe

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu His Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Thr Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Val Val Asp Phe Arg Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 11

<211> 120

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> HCVR

<400> 11

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr

20 25 30

Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Gly Ile His Trp His Gly Lys Arg Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Ser Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Gly Glu Asp Thr Ala Leu Tyr His Cys

85 90 95

Val Arg Gly Gly Met Ser Thr Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Ile Val Ser Ser

115 120

<210> 12

<211> 108

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> LCVR

<400> 12

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Asn Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Val Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro

85 90 95

Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys

100 105

<---

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу лечения или ингибирования роста опухоли пациентки с раком шейки матки, включающему отбор пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины и введение пациентке антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с белком 1 запрограммированной гибели клеток (PD-1), в виде монотерапии в дозе 350 мг каждые 3 недели. Также раскрыт способ улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, включающий отбор пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины и введение пациентке антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с белком 1 запрограммированной гибели клеток (PD-1), в виде монотерапии в дозе 350 мг каждые 3 недели. Изобретение эффективно для лечения или ингибирования роста опухоли пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины. 4 н. и 29 з.п. ф-лы, 9 ил., 31 табл., 5 пр.

1. Способ лечения или ингибирования роста опухоли пациентки с раком шейки матки, включающий:

(a) отбор пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины; и

(b) введение пациентке антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с белком 1 запрограммированной гибели клеток (PD-1),

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит три определяющих комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR) и три определяющих комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) вариабельной области легкой цепи (LCVR), где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8;

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в виде монотерапии в дозе 350 мг каждые 3 недели.

2. Способ улучшения общей выживаемости пациентки с раком шейки матки, включающий:

(a) отбор пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины; и

(b) введение пациентке антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с белком 1 запрограммированной гибели клеток (PD-1),

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит три определяющих комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR) и три определяющих комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) вариабельной области легкой цепи (LCVR), где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8;

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в виде монотерапии в дозе 350 мг каждые 3 недели.

3. Способ по п. 1 или 2, в котором рак шейки матки выбирают из группы, состоящей из плоскоклеточной карциномы, аденокарциномы и аденосквамозной карциномы.

4. Способ по любому из пп. 1-3, в котором рак шейки матки является распространенным и/или персистирующим.

5. Способ по любому из пп. 1-4, в котором химиотерапия на основе платины была прекращена вследствие прогрессирования заболевания и/или токсичности.

6. Способ по любому из пп. 1-5, в котором химиотерапия на основе платины выбрана из пеметрекседа, топотекана, иринотекана, гемцитабина и винорелбина.

7. Способ по любому из пп. 1-6, в котором пациентка получала предшествующую анти-VEGF терапию.

8. Способ по п. 7, в котором предшествующая анти-VEGF терапия включает бевацизумаб.

9. Способ по любому из пп. 1-8, в котором рак шейки матки характеризуется повышенной экспрессией PD-L1.

10. Способ по любому из пп. 1-9, в котором рак шейки матки характеризуется повышенной экспрессией белка PD-L1.

11. Способ по любому из пп. 1-10, в котором рак шейки матки характеризуется повышенной экспрессией мРНК PD-L1.

12. Способ по любому из пп. 1-11, в котором у пациентки имеется положительный результат теста на папилломавирус человека (HPV).

13. Способ по любому из пп. 1-11, в котором у пациентки имеется отрицательный результат теста на папилломавирус человека (HPV).

14. Способ по любому из пп. 1-13, в котором введение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента способствует регрессии опухоли, снижает нагрузку опухолевыми клетками, снижает массу опухоли и/или предупреждает рецидив опухоли у пациентки.

15. Способ по любому из пп. 1-14, в котором введение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента приводит по меньшей мере к одному улучшению, выбранному из увеличения общей выживаемости, выживаемости без прогрессирования, частоты общего ответа, полного ответа, частичного ответа и стабилизации заболевания, по сравнению с пациентками, получавшими химиотерапию.

16. Способ по любому из пп. 1-15, в котором введение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента приводит к увеличению общей выживаемости по сравнению с пациентками, получавшими химиотерапию.

17. Способ по любому из пп. 1-16, в котором HCVR содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.

18. Способ по любому из пп. 1-16, в котором LCVR содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.

19. Способ по любому из пп. 1-16, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит парную аминокислотную последовательность HCVR/LCVR SEQ ID NO: 1/2.

20. Способ по любому из пп. 1-19, в котором антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, при этом тяжелая цепь имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9.

21. Способ по любому из пп. 1-19, в котором антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, при этом легкая цепь имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

22. Способ по любому из пп. 1-19, в котором антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, при этом тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 и легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

23. Способ по любому из пп. 1-16, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности в отношении аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1.

24. Способ по любому из пп. 1-16, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности в отношении аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2.

25. Способ по любому из пп. 1-16, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности в отношении аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 1, и LCVR с 90%, 95%, 97% или 98% идентичности в отношении аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2.

26. Способ по любому из пп. 1-22, в котором антитело представляет собой цемиплимаб.

27. Способ по любому из пп. 1-26, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят внутривенно или подкожно.

28. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с белком запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1) для лечения или ингибирования роста опухоли пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины; причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит три определяющих комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR) и три определяющих комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) вариабельной области легкой цепи (LCVR), где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; и

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент предназначено для монотерапии в дозе 350 мг каждые 3 недели.

29. Применение антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое специфически связывается с белком запрограммированной гибели клеток 1 (PD-1) для улучшения общей выживаемости пациентки с рецидивирующим или метастатическим раком шейки матки и с прогрессированием заболевания на фоне или после химиотерапии на основе платины;

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит три определяющих комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR) и три определяющих комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) вариабельной области легкой цепи (LCVR), где HCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; HCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4; HCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; LCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; LCDR2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и LCDR3 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; и

причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент предназначено для монотерапии в дозе 350 мг каждые 3 недели.

30. Применение по п. 28 или 29, в котором рак шейки матки выбирают из группы, состоящей из плоскоклеточной карциномы, аденокарциномы и аденосквамозной карциномы.

31. Применение по любому из пп. 28-30, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит парную аминокислотную последовательность HCVR/LCVR SEQ ID NO: 1/2.

32. Применение по любому из пп. 28-31, в котором антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, при этом тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 и легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

33. Применение по любому из пп. 28-32, в котором антитело представляет собой цемиплимаб.