РЕЖИМ ВВЕДЕНИЯ АНТИТЕЛА К TIGIT ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА Российский патент 2025 года по МПК A61K39/395 A61P35/00 

Родственные заявки

Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на патент США №62/755805, поданной 5 ноября 2018 г., которая включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

Область техники, к которой относится настоящее изобретение

Настоящее изобретение относится к режимам введения антитела к TIGIT, пригодным для лечения рака. В частности, настоящее изобретение относится к режиму введения в комбинированной терапии, который включает введение антитела, направленного против белка запрограммированной клеточной смерти 1 (PD-1) или лиганда белка запрограммированной клеточной смерти 1 (PD-L1), и антитела к TIGIT (Т-клеточному иммунорецептору с доменами Ig и ITIM).

Предшествующий уровень техники настоящего изобретения

PD-1 признают в качестве важного фактора в регуляции иммунной системы и поддержании периферической толерантности. PD-1 умеренно экспрессируется на наивных Т-, В- и NKT-клетках и активируется с помощью передачи сигналов с участием Т/В-клеточных рецепторов на лимфоцитах, моноцитах и миелоидных клетках (1).

Два известных лиганда PD-1, PD-L1 (В7-Н1) и PD-L2 (B7-DC), экспрессируются при различных видах рака человека, возникающих в различных тканях. В больших выборках, например, при раке яичников, почек, толстой кишки, поджелудочной железы, печени и меланоме было показано, что экспрессия PD-L1 коррелирует с неблагоприятным прогнозом и снижает общую выживаемость независимо от последующего лечения (2-13). Аналогичным образом было обнаружено, что экспрессия PD-1 на лимфоцитах, инфильтрирующих опухоль, маркирует дисфункциональные Т-клетки при раке молочной железы и меланоме (14-15) и коррелирует с неблагоприятным прогнозом при раке почек (16). Таким образом, было высказано предположение, что опухолевые клетки, экспрессирующие PD-L1, взаимодействуют с экспрессирующими PD-1 Т-клетками для ослабления Т-клеточной активации и ускользания от иммунного надзора, тем самым способствуя нарушенному иммунному ответу против опухоли. Несколько моноклональных антител, которые ингибируют взаимодействие между PD-1 и одним или обоими его лигандами PD-L1 и PD-L2, были одобрены для лечения рака. Пембролизумаб представляет собой высокоактивное гуманизированное mAb на основе иммуноглобулина G4 (IgG4) с высокой специфичностью связывания с рецептором белка запрограммированной клеточной смерти 1 (PD 1), тем самым ингибируя его взаимодействие с лигандом белка запрограммированной клеточной смерти 1 (PD-L1) и лигандом белка запрограммированной клеточной смерти 2 (PD-L2). Основываясь на доклинических данных in vitro, пембролизумаб обладает высокой аффинностью и высокой активностью в отношении блокирования рецепторов к PD-1. Keytruda® (пембролизумаб) показана для лечения пациентов по ряду показаний.

TIGIT (Т-клеточный иммунорецептор с доменами Ig и ITIM) представляет собой иммуномодулирующий рецептор, экспрессируемый в основном на активированных Т-клетках и NK-клетках. TIGIT также известен как VSIG9; VSTM3; и WUCAM. Его структура характеризуется одним внеклеточным доменом иммуноглобулина, трансмембранной областью 1 типа и двумя мотивами ITIM. TIGIT представляет собой часть костимуляторной сети, которая состоит из положительных (CD226) и отрицательных (TIGIT) иммуно модулирующих рецепторов на Т-клетках и лигандов, экспрессируемых на АРС (CD155 и CD112). Важной особенностью структуры TIGIT является наличие иммунорецепторного тирозинового ингибирующего мотива (ITIM) в его цитоплазматическом хвостовом домене. Как и в случае с PD-1 и CTLA-4, домен ITIM в цитоплазматической области TIGIT, как предполагается, рекрутирует тирозинфосфатазы, такие как SHP-1 и SHP-2, с последующим дефосфорилированием остатков тирозина с помощью иммунорецепторных тирозиновых активирующих мотивов (ITAM) на субъединицах Т-клеточного рецептора (TCR). Следовательно, лигирование TIGIT рецепторными лигандами CD155 и CD112, экспрессируемыми опухолевыми клетками или TAMS, может способствовать подавлению передачи сигналов с участием TCR и активации Т-клеток, что важно для создания эффективного противоопухолевого иммунитета. Таким образом, антагонистическое антитело, специфическое в отношении TIGIT, может ингибировать индуцированное CD155 и CD112 подавление Т-клеточных ответов и усиливать противоопухолевый иммунитет. Антитела к TIGIT описаны в WO 2016/028656 и WO 2017/030823.

Выбор режима введения для монотерапии антителом к TIGIT или комбинированной терапии с использованием терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 зависит от нескольких факторов, включая скорость обновления сыворотки или ткани субъекта, уровень симптомов, иммуногенность структуры, конечных точек антител к лекарственным средствам и доступность целевых клеток, ткани или органа у индивидуума, подвергающегося лечению, а также безопасность. Образование антител к лекарственным средствам может потенциально затруднять воздействие лекарственных средств в терапевтических дозах и вызывать последующие токсические эффекты, связанные с инфузией. Кроме того, лечение антителом к TIGIT и/или антителом к PD-1/антителом к PD-L1 может приводить к иммунной стимуляции и потенциальному высвобождению цитокинов, что влияет на безопасность.

Сущность настоящего изобретения

В настоящем изобретении предусмотрен способ лечения рака у пациента, включающий введение 2,1 мг 700 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с одним вариантом осуществления способ необязательно предусматривает совместное введение антитела к PD-1 или антитела к PD-L1. В соответствии с одним вариантом осуществления антитело к TIGIT и антитело к PD-1 составляют совместно. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления опухолевые клетки индивидуума являются положительными по экспрессии PD-L1. В соответствии с одним вариантом осуществления антитело к PD-1 блокирует связывание PD-1 с PD-L1 и PD-L2. В настоящем изобретении также предусмотрена фармацевтическая композиция, содержащая 2,1 мг - 700 мг антитела 31С6 к TIGIT или варианта 31С6 и 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба.

В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предусмотрен способ лечения рака у пациента, предусматривающий введение пациенту от 2,1 мг до 700 мг антитела к TIGIT, содержащего тяжелую цепь и легкую цепь, при этом легкая цепь содержит CDR легкой цепи SEQ ID NO: 26, 27 и 28, а тяжелая цепь содержит CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT вводят с помощью внутривенной инфузии.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят от приблизительно 2,1 мг до приблизительно 700 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 2,1 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 7 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 21 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 70 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 200 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 210 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят приблизительно 700 мг антитела к TIGIT.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 2Д мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 7 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 21 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 70 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 200 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 210 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят 700 мг антитела к TIGIT.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа пациенту вводят антитело к TIGIT в день 1, а затем раз в три недели после этого. Например, продолжительность лечения составляет несколько недель или более месяцев.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT представляет собой вариант 31С6.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 25. В соответствии с различными вариантами осуществления способа вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 24. В соответствии с различными вариантами осуществления способа вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 23. В соответствии с различными вариантами осуществления способа вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и легкая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 22. В соответствии с различными вариантами осуществления способа вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 23, а легкая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 22.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT вводят совместно с антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 или их антигенсвязывающим фрагментом.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к TIGIT составляют совместно с антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 или их антигенсвязывающим фрагментом.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с PD-1 человека и блокирует связывание PD-L1 человека с PD-1 человека.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент также блокирует связывание PD-L2 человека с PD-1 человека.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 представляет собой вариант 31С6, который содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5. Например, антитело к PD-1 представляет собой пембролизумаб. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 представляет собой вариант пембролизумаба. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-L1 представляет собой атезолизумаб, дурвалумаб или авелумаб.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого. В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 представляет собой гуманизированное антитело к PD-1, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 6, 7 и 8, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 1, 2 и 3; и антитело к TIGIT представляет собой гуманизированное антитело к TIGIT, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 26, 27 и 28.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 22.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1 раз в три недели.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 700 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 700 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1 раз в три недели.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 2,1 мг - 700 мг антитела к TIGIT. Например, 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 200 мг антитела к TIGIT.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с количеством антитела к TIGIT, описанным в Примерах. В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 7 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 21 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 70 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 200 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 210 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления способа 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 700 мг антитела к TIGIT.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа рак выбирают из рака, раскрываемого в Части А или Части В, описанных в Примерах. В соответствии с различными вариантами осуществления способа рак представляет собой по меньшей мере одно из группы, состоящей из: НМРЛ, колоректального рака, рака шейки матки, рака желудка, рака молочной железы, рака яичников, рака эпителия, рака маточной трубы или первичной перитонеальной карциномы. Например, рак представляет собой НМРЛ. В соответствии с различными вариантами осуществления субъект или пациент страдает раком и экспрессирует по меньшей мере один ген рака молочной железы (например, BRCA). В соответствии с различными вариантами осуществления обнаружено, что рак или образец от субъекта имеют уровень по меньшей мере одного гена рака молочной железы (BRCA) или экспрессируют его. В соответствии с различными вариантами осуществления по меньшей мере один ген BRCA представляет собой BRCA1 или BRCA2. В соответствии с одним вариантом осуществления рак является отрицательным по BRCA. Например, рак (например, рак молочной железы и рак яичников) представляет собой рак, отрицательный по BRCA. В соответствии с одним вариантом осуществления рак является положительным по BRCA.

В соответствии с различными вариантами осуществления способ дополнительно предусматривает введение комбинации (i) карбоплатина и пеметрекседа (5-замещенного пирроло[2,3-d]пиримидина) или (ii) карбоплатина и паклитаксела.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа индивидуум ранее не получал терапию антителом PD-1 или антителом к PD-L1, или подтверждено прогрессирующее течение при получении предшествующей терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1.

Один аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит от приблизительно 2,1 мг до приблизительно 700 мг антитела 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело 31С6 содержит 2,1 мг - 700 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6.

В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 2,1 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 7 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 21 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 70 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления способа фармацевтическая композиция содержит 210 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления способа фармацевтическая композиция содержит 700 мг антитела к TIGIT 31С6 или антигенсвязывающего фрагмента или варианта 31С6.

Один аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 200 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

В соответствии с различными вариантами осуществления способа антитело 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления антитело 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22.

В соответствии с различными вариантами осуществления антитело 31С6 представляет собой вариант 31С6.

В соответствии с различными вариантами осуществления вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 25. В соответствии с различными вариантами осуществления вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 24. В соответствии с различными вариантами осуществления вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 23. В соответствии с различными вариантами осуществления вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и легкая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 22. В соответствии с различными вариантами осуществления вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 23, а легкая цепь имеет 80%, 85%, 90%, 95% или 99% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 22.

В соответствии с различными вариантами осуществления антитело к TIGIT составляют для совместного введения с пембролизумабом или вариантом пембролизумаба.

В соответствии с различными вариантами осуществления антитело к TIGIT составляют совместно с пембролизумабом или вариантом пембролизумаба.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело к PD-1 представляет собой вариант 31С6, который содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5. Например, антитело к PD-1 представляет собой пембролизумаб. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело к PD-1 представляет собой вариант пембролизумаба. В соответствии с различными вариантами осуществления антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба составляют для внутривенной инфузии.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 6, 7 и 8, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 1, 2 и 3; и антитело 31С6 представляет собой гуманизированное антитело к TIGIT, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 26, 27 и 28.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4; и антитело 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления пембролизумаб или вариант пембролизумаба содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 22.

Один аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 2,1-700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Один аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 2,1-700 мг антитела 31С6 или варианта а31С6 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 2,1 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 7 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 21 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 70 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 210 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтическая композиция содержит 700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6.

В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтической композиции антитело 31С6 или вариант 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, при этом легкая цепь содержит CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 26, 27 и 28, а тяжелая цепь содержит CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31.

В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтической композиции антитело к 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

В соответствии с различными вариантами осуществления фармацевтической композиции антитело к 31С6 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22.

В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предусмотрен набор для лечения рака, содержащий любую из фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе. В соответствии с различными вариантами осуществления композиция дополнительно содержит инструкции по применению.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1. График, полученный путем объединения данных фармакокинетики антитела к TIGIT 31С6 как для групп монотерапии, так и для групп комбинированной терапии. Среднеарифметические концентрации нанесены на график с использованием номинального времени отбора образцов.

Фиг. 2А и 2В. На каждой из них изображен каскадный график субъектов с наилучшим процентным изменением по сравнению с исходным уровнем в целевых поражениях на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1 (оценивается у пациентов с поддающимся измерению заболеванием на исходном уровне и ≥1 поддающейся оценке оценки после исходной визуализации (n=25 для монотерапии 31С6 и n=41 для комбинированной терапии 31С6 с пембролизумабом)). Каждая полоса представляет собой отдельного субъекта. Данные по комбинированной терапии включают 32 пациента, первоначально отнесенных к комбинированной терапии, и 9 пациентов, перешедших с монотерапии. В случае монотерапии 31С6 25% продемонстрировали какое-либо снижение, а 4% продемонстрировали снижение ≥-30%. В случае комбинированной терапии 31С6 и пембролизумабом 32% продемонстрировали какое-либо снижение, а 24% продемонстрировали снижение ≥-30%.

Фиг. 3А и 3В. На каждой из них изображен график субъектов, показывающий продолжительность лечения и ответ на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1. Длина линии представляет время до последней дозы исследуемого лекарственного средства. Время до наилучшего ответа и последующее PD или смерть, в зависимости от того, что произошло раньше, показаны для каждого пациента. Включены только те пациенты, у которых было ≥1 оценки после исходной визуализации. * Представляют тех пациентов, которые перешли с монотерапии на комбинированную терапию. Комбинированная терапия включает 32 пациента, которые первоначально были отнесены к комбинированной терапии, и 9 пациентов, перешедших с монотерапии 31С6.

На Фиг. 4 изображен график пациентов с НМРЛ, ранее не получавших PD-1, с указанием продолжительности лечения и ответа на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1.

На Фиг. 5А и 5В изображены графики пациентов с НМРЛ, резистентным к PD-1, показывающие продолжительность лечения и ответ на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1. Пациентам назначали либо монотерапию антителом 31С6 в дозе 200 мг (Фиг. 5А), либо комбинированную терапию 200 мг антитела 31С6 и 200 мг пембролизумаба (Фиг. 5В), как описано в Примере 2.

На Фиг. 6 изображен график пациентов с рефрактерным раком яичников с указанием продолжительности лечения и ответа на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1. Данные объединяют результаты лечения, как описано в Части А (монотерапия 31С6) и Части В (в случае комбинированной терапии 31С6 с пембролизумабом) Примера 1.

На Фиг. 7 изображен график пациентов с раком молочной железы, ранее не получавших PD-1, с указанием продолжительности лечения и ответа на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1. Пациенты получали комбинированную терапию 200 мг 31С6 с пембролизумабом (200 мг), как описано в Примере 2.

На Фиг. 8 изображен график пациентов с CRC и раком молочной железы, ранее не получавших PD-1, с указанием продолжительности лечения и ответа на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1. Пациенты получали комбинированную терапию 200 мг 31С6 с пембролизумабом (200 мг), как описано в Примере 2.

На Фиг. 9А и 9В изображены графики пациентов с раком шейки матки, резистентным к PD-1, показывающие продолжительность лечения и ответ на основе оценки исследователя в соответствии с RECIST v1.1. Пациентам вводили 200 мг (Фиг. 9А) или 700 мг (Фиг. 9В) антитела 31С6 в комбинированной терапии с 200 мг пембролизумаба, как описано в Примере 2.

Подробное раскрытие настоящего изобретения

Сокращения. Во всем подробном описании и примерах настоящего изобретения будут использоваться следующие сокращения:

ADA Антитело к лекарственному средству

АЕ Нежелательное явление

ALT Аланинаминотрансфераза

ANC Абсолютное количество нейтрофилов

аРТТ Активированное частичное тромбопластиновое время

ASaT Все субъекты, получавшие лечение

ASCO Американское общество клинической онкологии

AST Аспартатаминотрансфераза

AUC Площадь под кривой

BCG Бацилла Кальмета-Герена

β-hCG β-хорионический гонадотропин человека

BOR Наилучший общий ответ

BID Одна доза два раза в день

CBR Частота клинической эффективности

CDR Область, определяющая комплементарность

СНО Яичник китайского хомячка

Cmax Максимальная концентрация

Cmin Минимальная концентрация

ЦНС Центральная нервная система

CR Полный ответ

CRF Индивидуальная регистрационная карта

CSF Колониестимулирующий фактор

CSR Отчет о клиническом исследовании

СТ Компьютерная томография

СТСАЕ Общие терминологические критерии нежелательных явлений

CTLA-4 Цитотоксический Т-лимфоцит-ассоциированный антиген 4

D Перейти к следующей более низкой дозе

DCR Частота контроля заболевания

DFS Выживаемость без признаков заболевания

DILI Поражение печени, вызванное лекарственными средствами

DLT Дозолимитирующая токсичность

ДНК Дезоксирибонуклеиновая кислота

DOR Продолжительность ответа

DSDR Частота пациентов с устойчивой стабилизацией заболевания

DU Неприемлемо токсичная доза

ЭЭГ Электрокардиограмма

ECI Нежелательное (нежелательные) явление (явления), представляющее (представляющие) клинический интерес

ECOG Восточная кооперативная онкологическая группа

eCRF Электронная индивидуальная регистрационная карта

ЕМА Европейское агентство по лекарственным средствам

FAS Полный набор анализов

ELISA Иммуноферментный анализ

FBR Future biomedical research

FFPE Фиксированный формалином, залитый парафином

FR Каркасная область

FSH Фолликулостимулирующий гормон

G3 СТСАЕ (шкала оценки нежелательных явлений), 3 степень

GCP Надлежащая клиническая практика

GFR Скорость клубочковой фильтрации

GGT Гамма-глутамилтрансфераза

HBsAg Поверхностный антиген вируса гепатита

HCV Вирус гепатита С

HIV Вирус иммунодефицита человека

HRT Гормональная заместительная терапия

IB Брошюра исследователя

ICF Форма информированного согласия

ICH Международная конференция по гармонизации

iCPD Подтвержденное iRECIST прогрессирующее заболевание

IEC Независимый этический комитет

Ig Иммуноглобулин

IgG Иммуноглобулин G

IHC Иммуногистохимия или иммуногистохимический

IL Интерлейкин

IM Внутримышечный

INR Международное нормализованное соотношение

IO Иммуноонкологическое средство

irAE Иммуноопосредованное нежелательное явление

IRB Институциональный наблюдательный совет

iRECIST Модифицированные RECIST 1.1 для иммунотерапевтических средств

irRC Иммуноопосредованные критерии ответа

iSD Стабильное заболевание в соответствии с iRECIST

iUPD Неподтвержденное iRECIST прогрессирующее заболевание

IV Внутривенный

IVRS Система с интерактивным голосовым ответом

IWRS Интегрированная система веб-связи

LDH Лактатдегидрогеназа

LFT Функциональные печеночные пробы

mAb Моноклональное антитело

MASCC Международная ассоциация специалистов в области симптоматической терапии злокачественных новообразований

MRI Магнитно-резонансная томография

mRNA Матричная рибонуклеиновая кислота

MSD Merck Sharp & Dohme Corp., дочерняя компания Merck & Co., Inc.

MSI Микросателлитная нестабильность

MTD Максимальная переносимая доза

mTPI Модифицированный интервал вероятности токсичности

NCBI Национальный центр биотехнологической информации

NCI Национальный институт рака

NK Естественный киллер

NOAEL Доза, не вызывающая наблюдаемых нежелательных явлений

NSAID Нестероидное противовоспалительное средство

НМРЛ Немелкоклеточный рак легкого

ORR Частота объективного ответа

OS Общая выживаемость

ОТС Безрецептурный

РВМС Мононуклеарная клетка периферической крови

PD Прогрессирование заболевания

PD-1 Белок запрограммированной клеточной смерти 1

PD-L1 Лиганд 1 белка запрограммированной клеточной смерти 1

PD-L2 Лиганд 2 белка запрограммированной клеточной смерти 1

PFS Выживаемость без прогрессирования заболевания

РК Фармакокинетический (фармакокинетика)

PNA Пневмония

РР В соответствии с протоколом

PR Частичный ответ

РТ Протромбиновое время

РТТ Частичное тромбопластиновое время

Q2W Одна доза раз в две недели

Q3W Одна доза раз в три недели

QD Одна доза раз в сутки

RECIST Критерии оценки объективного ответа при солидных опухолях

RECIST Критерии оценки объективного ответа при солидных опухолях, версия 1.1 1.1

РНК Рибонуклеиновая кислота

RP2D Рекомендуемая доза для 2 фазы

SAE Серьезное нежелательное явление

SAP План статистического анализа

SD Стабильное заболевание

SGOT Сывороточная глутаматоксалоацетаттрансаминаза

SGPT Сывороточная глутаматпируваттрансаминаза

SNP Однонуклеотидный полиморфизм

SoA График мероприятий

sSAP Дополнительный план статистического анализа

TCR Т-клеточный рецептор

TIGIT Т-клеточный иммунорецептор с доменами Ig и ITIM

TNBC Трижды негативный рак молочной железы

TNF Фактор некроза опухоли

TSH Тиреостимулирующий гормон

ULN Верхний предел нормы

VH Вариабельная область тяжелой цепи иммуноглобулина

VK Вариабельная область легкой цепи каппа иммуноглобулина

WOCBP Женщина детородного возраста

I. Определения

Для того, чтобы можно было легче понять настоящее изобретение, определенные технические и научные термины явно определены ниже. Если явно не определено где-либо в данном документе, все другие технические и научные термины, применяемые в данном документе, имеют значение, обычно понимаемое специалистом в данной области техники, к которой относится настоящее изобретение.

Как применяется в настоящем документе, в том числе прилагаемой формуле изобретения, формы слов единственного числа включают ссылки на их соответствующую форму множественного числа, если в контексте четко не указано иное.

Используемый в настоящем документе термин «вариант 31С6» означает моноклональное антитело, которое содержит последовательности тяжелой цепи и легкой цепи, которые по сути идентичны последовательностям в 31С6 (как описано ниже и в WO 2016/028656, включенном посредством ссылки в полном объеме), за исключением того, что три, две или одна консервативная аминокислотная замена в положениях, которые расположены за пределами CDR легкой цепи, и шесть, пять, четыре, три, две или одна консервативная аминокислотная замена, которые расположены вне CDR тяжелой цепи, например, положениях варианта, расположены в FR областях или константной области и необязательно имеют делецию С-концевого остатка лизина тяжелой цепи. Другими словами, 31С6 и вариант 31С6 содержат идентичные последовательности CDR, но отличаются друг от друга в результате наличия консервативной аминокислотной замены не более чем в трех или шести других положениях в их полно размерных последовательностях легкой и тяжелой цепей соответственно. Вариант 31С6 по сути аналогичен 31С6 в отношении следующих свойств: аффинности связывания с TIGIT человека и способности блокировать связывание TIGIT человека с CD155 человека и CD112 человека.

«Введение» применительно к животному, человеку, экспериментальному субъекту, клетке, ткани, органу или биологической жидкости относится к контакту экзогенного фармацевтического, терапевтического, диагностического средства или композиции с животным, человеком, субъектом, клеткой, тканью, органом или биологической жидкостью. Обработка клетки включает контакт реагента с клеткой, а также контакт реагента с жидкостью, при этом жидкость контактирует с клеткой. Термин «субъект» включает любой организм, предпочтительно животное, более предпочтительно млекопитающее (например, крысу, мышь, собаку, кошку, кролик) и наиболее предпочтительно человека.

Используемый в настоящем документе термин «антитело» относится к любой форме антитела, которая проявляет необходимую биологическую или связывающую активность. Таким образом, он используется в самом широком смысле и конкретно охватывает без ограничения моноклональные антитела (включая полно размерные моноклональные антитела), поликлональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела), гуманизированные, полностью человеческие антитела, химерные антитела и камелизиро ванные однодоменные антитела. «Родительские антитела» представляют собой антитела, полученные путем воздействия на иммунную систему антигена перед модификацией антител для предполагаемого использования, такого как гуманизация антитела для использования в качестве терапевтического средства для применения у человека.

Обычно основная структурная единица антитела содержит тетрамер. Каждый тетрамер содержит две идентичные пары полипептидных цепей, при этом каждая пара имеет одну «легкую» (приблизительно 25 кДа) и одну «тяжелую» цепь (приблизительно 50-70 кДа). Аминокоцевой участок каждой цепи содержит вариабельный домен из приблизительно 100-110 или более аминокислот, главным образом отвечающих за распознавание антигена. Карбоксиконцевой участок тяжелой цепи может определять константную область, в первую очередь отвечающую за эффекторную функцию. Обычно легкие цепи человека классифицируются как легкие цепи каппа и лямбда. Кроме того, тяжелые цепи человека обычно классифицируют в виде мю, дельта, гамма, альфа или эпсилон, и определяют изотип антитела как IgM, IgD, IgG, IgA и IgE соответственно. В легких и тяжелых цепях вариабельные и константные домены обычно соединены с помощью «J» участка, составляющего от приблизительно 12 или более аминокислот, при этом тяжелая цепь также содержит «D» участок, составляющий от приблизительно 10 или более аминокислот. См. в целом Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W, ed., 2^nd ed. Raven Press, N.Y. (1989).

Вариабельные области каждой пары легкой/тяжелой цепи образуют антителосвязывающий участок. Таким образом, как правило, интактное антитело имеет два сайта связывания. За исключением бифункциональных или биспецифических антител, два сайта связывания, как правило, одинаковы.

Обычно вариабельные домены как тяжелой, так и легкой цепей содержат три гипервариабельные области, также называемые областями, определяющими комплементарность (CDR), которые расположены внутри относительно консервативных каркасных областей (FR). CDR обычно выравниваются по каркасным областям, что позволяет связываться со специфическим эпитопом. Как правило, от N-конца до С-конца вариабельные домены как легкой, так и тяжелой цепей содержат FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. Отнесение аминокислот к каждому домену, как правило, соответствует определениям из Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat, et al.; National Institutes of Health, Bethesda, Md.; 5^th ed.; NIH Publ. No. 91-3242 (1991); Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1-75; Kabat, et al., (1977) J. Biol. Chem. 252:6609-6616; Chothia, et al., (1987) J Mol. Biol. 196:901-917, или Chothia, et al., (1989) Nature 342:878-883.

Используемый в настоящем документе, если не указано иное, термин «фрагмент антитела» или «антигенсвязывающий фрагмент» относится к антигенсвязывающим фрагментам антител, т.е., фрагментам антител, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном, связанным с полно размерным антителом, например, фрагментам, которые сохраняют одну или более областей CDR. Примеры антителосвязывающих фрагментов включают без ограничения Fab-, Fab'-, F(ab')₂- и Fv-фрагменты; диатела; линейные антитела; молекулы одноцепочечных антител, например sc-Fv; нанотела и мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител.

Антитело, которое «специфически связывается с» определенным целевым белком, представляет собой антитело, которое проявляет предпочтительное связывание с этой мишенью по сравнению с другими белками, но эта специфичность не требует абсолютной специфичности связывания. Антитело считается «специфическим» для предполагаемой цели, если его связывание определяет присутствие целевого белка в образце, например, без получения нежелательных результатов, таких как ложноположительные результаты. Антитела или их связывающие фрагменты, применимые в настоящем изобретении, будут связываться с целевым белком с аффинностью, которая по меньшей мере в два раза больше, предпочтительно по меньшей мере в десять раз больше, более предпочтительно по меньшей мере в 20 раз больше и наиболее предпочтительно по меньшей мере в 100 раз больше, чем аффинность в отношении нецелевых белков. Считается, что используемое в настоящем антитело специфически связывается с полипептидом, содержащим данную аминокислотную последовательность, например, аминокислотную последовательность зрелой молекулы PD-1 человека или PD-L1 человека, если оно связывается с полипептидами, содержащими эту последовательность, но не связывается с белками, не имеющими этой последовательности.

Используемый в настоящем документе термин «карбоплатин» относится к соединению платины второго поколения с широким спектром противоопухолевых свойств. См. патенты США №№10421770, 8377888 и 6770653. Карбоплатин содержит атом платины в комплексе с двумя аммиачными группами и циклобутандикарбоксильный остаток. Это средство активируется внутриклеточно с образованием реактивных комплексов платины, которые связываются с нуклеофильными группами, такими как GC-богатые сайты в ДНК, тем самым вызывая внутрицепочечные и межцепочечные перекрестные связи ДНК, а также перекрестные связи ДНК-белок. Эти индуцированные карбоплатином эффекты ДНК и белков приводят к апоптозу и ингибированию клеточного роста. Это средство обладает противоопухолевой активностью, аналогичной его исходному соединению, цисплатину, но более стабилен и менее токсичен. Аналоги карбоплатина также можно вводить для лечения рака. См. патент США №6548541B1.

«Химерное антитело» относится к антителу, в котором часть тяжелой и/или легкой цепи идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителе, происходящем от определенного вида (например, человека) или принадлежащем к конкретному классу или подклассу антител, в то время как остальная часть цепи (цепей) идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителе, происходящем от другого вида (например, мыши) или принадлежащем к другому классу или подклассу антител, а также фрагментам таких антител, при условии, что они проявляют необходимую биологическую активность.

«Совместное введение», используемое в настоящем документе для средств, таких как антагонист PD-1 или антагонист TIGIT, означает, что средства вводятся таким образом, чтобы иметь перекрывающиеся терапевтические активности, и не обязательно средства вводятся субъекту одновременно. Перед введением средства могут находиться, а могут и не находиться в физической комбинации. В соответствии с одним вариантом осуществления средства вводятся субъекту одновременно или приблизительно в одно и то же время. Например, лекарственные продукты на основе антитела к PD-1 и антитела к TIGIT, содержащиеся в отдельных флаконах, когда они находятся в жидком растворе, можно смешивать в одном пакете для внутривенной инфузии или инъекционном устройстве и вводить пациенту одновременно.

Термин «совместно составленный», или «совместный состав», или «состав, составленный совместно», или «составленный совместно», используемый в настоящем документе, относится по меньшей мере к двум различным антителам или их антигенсвязывающим фрагментам, которые составлены вместе и хранятся как комбинированный продукт в одном флаконе или сосуде (например, устройство для инъекций) вместо того, чтобы составлять и хранить индивидуально, а затем смешивать перед введением или вводить отдельно. В соответствии с одним вариантом осуществления совместный состав содержит два разных антитела или их антигеневязывающие фрагменты.

Фармакокинетическое «устойчивое состояние» представляет собой период времени, в течение которого любое накопление концентраций лекарственного средства в результате нескольких доз было максимальным, и системное воздействие лекарственного средства считается однородным после введения каждой последующей дозы; в конкретном случае пембролизумаба стабильное состояние достигается через ~16 недель после введения.

AUCss, Cavg,ss и Cmin,ss являются фармакокинетическими показателями системного воздействия лекарственного средства (например, пембролизумаба) на человека после его введения и обычно считаются факторами эффективности лекарственного средства. AUC,ss и Cavg,ss представляют собой среднее воздействие за интервал введения, но различаются в единицах измерения. «Cmin,ss» представляет собой минимальную или самую низкую (минимальную) концентрацию лекарственного средства, наблюдаемую в конце интервала введения, непосредственно перед введением следующей дозы.

«Cmax,ss» представляет собой максимальную или самую высокую (пиковую) концентрацию лекарственного средства, наблюдаемую вскоре после его введения. В конкретном случае пембролизумаба, который вводится в виде внутривенной инфузии, максимальная концентрация наблюдается сразу после окончания инфузии. Cmax,ss представляет собой показатель, который обычно считается фактором безопасности.

«Человеческое антитело» относится к антителу, которое содержит только белковые последовательности иммуноглобулина человека. Человеческое антитело может содержать мышиные углеводные цепи, если оно продуцируется у мыши, в клетке мыши или в гибридоме, полученной из клетки мыши. Аналогично, «мышиное антитело» или «крысиное антитело» относится к антителу, которое содержит только последовательности иммуноглобулина мыши или крысы соответственно.

«Гуманизированное антитело» относится к формам антител, которые содержат последовательности из отличных от человеческих (например, мышиных) антител, а также человеческих антител. Такие антитела содержат минимальную последовательность, полученную из отличного от человеческого иммуноглобулина. В общем, гуманизированное антитело будет содержать по сути все из, по меньшей мере, одного, а обычно двух вариабельных доменов, в которых все или по сути все гипервариабельные петли соответствуют петлям отличного от человеческого иммуноглобулина и все или по сути все FR областям представляют собой последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело необязательно также будет содержать по меньшей мере часть константной области иммуноглобулина (Fc), в типичном случае такового иммуноглобулина человека. Префикс «hum», «hu» или «h» добавляется к обозначениям клонов антител, когда необходимо отличить гуманизированные антитела от родительских антител грызунов. Гуманизированные формы антител грызунов обычно содержат те же последовательности CDR родительских антител грызунов, хотя могут быть включены определенные аминокислотные замены для повышения аффинности, повышения стабильности гуманизированного антитела или по другим причинам.

«Противоопухолевый ответ» применительно к пациенту с раком, получавшему терапевтический режим, такой как описанная в настоящем документе комбинированная терапия, означает по меньшей мере один положительный терапевтический эффект, такой как, например, уменьшение количества раковых клеток, уменьшение размера опухоли, уменьшение скорости инфильтрации раковых клеток в периферические органы, снижение скорости метастазирования опухоли или опухолевого роста или выживаемость без прогрессирования заболевания. Положительные терапевтические эффекты при раке можно измерить несколькими способами (см. W.A. Weber, J. Null. Med. 50:1S-10S (2009); Eisenhauer et al., выше). В соответствии с некоторыми вариантами осуществления противоопухолевый ответ на описанную в настоящем документе комбинированную терапию оценивают с использованием критериев RECIST 1.1, двумерного irRC или одномерного irRC. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления противоопухолевый ответ представляет собой любой из SD, PR, CR, PFS или DFS. «Двумерный irRC» относится к набору критериев, описанных в Wolchok JD, et al. Guidelines for the evaluation of immune therapy activity in solid tumors: immune-related response criteria. Clin Cancer Res. 2009; 15(23):7412-7420. Эти критерии используют двумерные измерения опухоли целевых очагов поражения, которые получают путем умножения самого длинного диаметра на самый длинный перпендикулярный диаметр (см²) каждого очага поражения. «Биотерапевтическое средство» означает биологическую молекулу, такую как антитело или слитый белок, которая блокирует передачу сигналов с участием лиганда/рецептора в любом биологическом пути, который поддерживает сохранение и/или рост опухоли или подавляет противоопухолевый иммунный ответ. Классы биотерапевтических средств включают без ограничения антитела к VEGF, EGFR, Her2/neu, рецепторам других факторов роста, CD20, CD40, CD-40L, CTLA-4, ОХ-40, 4-1 ВВ и ICOS.

«CBR» или «частота клинической пользы» означает CR+PR+ устойчивое SD.

Термин «CDR» в отношении единственного или множественного числа, используемый в настоящем документе, означает область (области), определяющую (определяющие) комплементарность, в вариабельной области иммуноглобулина, определенные с использованием системы нумерации Kabat, если не указано иное.

«Химиотерапевтическое средство» представляет собой химическое соединение, используемое в лечении рака. Классы химиотерапевтических средств включают без ограничения алкилирующие средства, антиметаболиты, ингибиторы киназ, алкалоиды растений, ядовитые в отношении веретена деления, цитотоксические/противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топизомеразы, фотосенсибилизаторы, антиэстрогены и селективные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), антипрогестероны, супрессоры эстрогеновых рецепторов (ERD), антагонисты эстрогеновых рецепторов, агонисты лютеинизирующего гормона-рилизинг-гормона, антиандрогены, ингибиторы ароматазы, ингибиторы EGFR, ингибиторы VEGF и антисмысловые олигонуклеотиды, которые ингибируют экспрессию генов, участвующих в аномальной пролиферации клеток или опухолевом росте. Химиотерапевтические средства, пригодные в способах лечения по настоящему изобретению, включают цитостатические и/или цитотоксические средства. Термин «Chothia», используемый в настоящем документе, означает систему нумерации антител, описанную в Al-Lazikani etal, JMB 273:927-948 (1997).

Термин «состоит из» или варианты, такие как «содержат», «содержит» или «состоит из», используются во всем описании и формуле изобретения во включительном смысле, т.е., для указания наличия указанных признаков, но не для исключения наличия или добавления дополнительных характеристик, которые могут существенно улучшить работу или пригодность любого из вариантов осуществления настоящего изобретения, если контекст не требует иного вследствие выражения в виде формулировки или необходимого значения.

Термин «консервативно модифицированные варианты» или «консервативная замена» относится к аминокислотным заменам в белке другими аминокислотами, имеющими аналогичные характеристики (например, заряд, размер боковой цепи, гидрофобность/гидрофильность, конформацию и жесткость основной цепи и т.д.), так что изменения часто могут быть выполнены без изменения биологической активности или другого необходимого свойства белка, такого как аффинность и/или специфичность в отношении антигена. Специалисты в данной области техники признают, что, как правило, отдельные аминокислотные замены в несущественных областях полипептида существенно не изменяют биологическую активность (см., например, Watson et al. (1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p.224 (4th Ed.)). Кроме того, замены структурно или функционально схожих аминокислот с меньшей вероятностью нарушат биологическую активность. Иллюстративные консервативные замены представлены в Табл. 1 ниже.

Термины «по сути состоит из» и варианты, такие как «по сути состоят из» или «по сути состоящие из», используемые на протяжении всего описания и формулы настоящего изобретения, указывают на включение любых перечисленных элементов или групп элементов и необязательное включение других элементов по природе аналогичных или отличной от перечисленных элементов, которые существенным образом не изменяют основные или новые свойства указанного режима введения, способа или композиции. В качестве неограничивающего примера антагонист PD-1, который состоит по сути из указанной аминокислотной последовательности, может также содержать одну или более аминокислот, включая замены одного или более аминокислотных остатков, которые существенно не влияют на свойства связывающего соединения.

«DCR» или «частота контроля заболевания» означает CR+PR+SD.

«Диагностическое моноклональное антитело к PD-L» означает mAb, которое специфически связывается со зрелой формой обозначенного PD-L (PD-L1 или PDL2), которая экспрессируется на поверхности определенных клеток млекопитающих. В зрелом PD-L отсутствует пресекреторная лидерная последовательность, также называемая лидерным пептидом. Термины «PD-L» и «зрелый PD-L» используются в настоящем документе взаимозаменяемо и должны пониматься как означающие одну и ту же молекулу, если не указано иное или явно очевидно из контекста.

Используемые в настоящем документе диагностические mAb к PD-L1 человека или mAb к hPD-L1 относятся к моноклональным антителам, которые специфически связываются со зрелым PD-L1 человека. Молекула зрелого PD-L1 человека состоит из аминокислот 19-290 следующей последовательности:

Конкретными примерами диагностических mAb к PD-L1 человека, используемых в качестве диагностических mAb для иммуногистохимического (IHC) обнаружения экспрессии PD-L1 в фиксированных формалином, залитых парафином (FFPE) срезах опухолевой ткани, являются антитело 20С3 и антитело 22С3, которые описаны в WO 2014/100079. В Табл. 2 ниже представлены характеристики антитела 22С3. Другое mAb к PD-L1 человека, которое, как сообщается, можно использовать для IHC детекции экспрессии PD-L1 в срезах ткани FFPE (Chen, B.J. et al., Clin Cancer Res 19: 3462-3473 (2013)), представляет собой кроличье mAb к PD-L1 человека, общедоступное от Sino Biological, Inc. (Пекин, КНР; номер в каталоге 10084-R015).

Экспрессия «PD-L1» или «PD-L2», используемая в настоящем документе, означает любой детектируемый уровень экспрессии указанного белка PD-L на поверхности клетки или указанной mRNA PD-L в клетке или ткани. Экспрессия белка PD-L может быть обнаружена с помощью диагностического антитела к PD-L в IHC анализе среза опухолевой ткани или с помощью проточной цитометрии.

Альтернативно, экспрессия белка PD-L опухолевыми клетками может быть обнаружена с помощью РЕТ-визуализации с использованием связывающего средства (например, фрагмента антитела, аффитела и т.п.), который специфически связывается с необходимой мишенью PD-L, например, PD-L1 или PD-L2. Методики обнаружения и измерения экспрессии mRNA PD-L включают RT-PCR-ПЦР, количественную RT-PCR в реальном времени, RNAseq и платформу Nanostring (J. Clin. Invest. 2017; 127(8):2930-2940).

Было описано несколько подходов для количественной оценки экспрессии белка PD-L1 в IHC анализах срезов опухолевой ткани. См., например, Thompson, R.Н., et al., PNAS 101 (49); 17174-17179 (2004); Thompson, R.H. et al., Cancer Res. 66:3381-3385 (2006); Gadiot, J., et al., Cancer 117:2192-2201 (2011); Taube, J.M. et al., Sci TranslMed 4, 127ra37 (2012); и Toplian, S. L. et al., New Eng. J Med 366 (26): 2443-2454 (2012). См. US 20170285037, в котором описано окрашивание гематоксилином и эозином, используемое патологом.

Один подход использует простую бинарную конечную точку, положительную или отрицательную в отношении экспрессии PD-L1, с положительным результатом, определяемым в терминах процента опухолевых клеток, которые демонстрируют гистологические доказательства окрашивания мембран клеточной поверхности. Срез опухолевой ткани считается положительным по экспрессии PD-L1, если он составляет по меньшей мере 1% от общего количества опухолевых клеток.

В другом подходе экспрессия PD-L1 в срезе опухолевой ткани количественно оценивается в опухолевых клетках, а также в инфильтрирующих иммунных клетках, которые преимущественно включают лимфоциты. Процент опухолевых клеток и инфильтрирующих иммунных клеток, которые проявляют окрашивание мембран, количественно определяют отдельно как <5%, от 5 до 9%, а затем с шагом 10% до 100%. Экспрессия PD-L1 в иммунном инфильтрате определяется как полуколичественное измерение, называемое скорректированной оценкой воспаления (AIS), которое определяется умножением процента окрашивающих мембрану клеток на интенсивность инфильтрата, которая оценивается как отсутствие (0), легкая (1 балл, редкие лимфоциты), средняя (2 балла, очаговая инфильтрация опухоли лимфогистиоцитарными агрегатами) или тяжелая (3 балла, диффузная инфильтрация). Срез опухолевой ткани считается положительным по экспрессии PD-L1 иммунными инфильтратами, если AIS≥5.

Уровень экспрессии mRNA PD-L можно сравнить с уровнями экспрессии mRNA одного или более референтых генов, которые часто используются в количественной RT-PCR.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления уровень экспрессии PD-L1 (белка и/или mRNA) злокачественными клетками и/или инфильтрирующими иммунными клетками в опухоли определяется как «сверхэкспрессируемый» или «повышенный» на основании сравнения с уровнем экспрессии PD-L1 (белка и/или mRNA) с помощью соответствующего контроля. Например, контрольный уровень экспрессии белка PD-L1 или mRNA может представлять собой уровень, количественно определяемый в доброкачественных клетках того же типа или в срезе сопоставимой нормальной ткани. В соответствии с некоторыми предпочтительными вариантами осуществления экспрессия PD-L1 в образце опухоли определяется как повышенная, если содержание белка PD-L1 (и/или mRNA PD-L1) в образце на по меньшей мере 10%, 20% или 30% больше, чем в контроле.

«Балл пропорции опухоли (TPS)» относится к проценту опухолевых клеток, экспрессирующих PD-L1 на клеточной мембране с любой интенсивностью (слабой, умеренной или сильной). Линейное частичное или полное окрашивание клеточной мембраны интерпретируется как положительное по PD-L1.

«Балл плотности мононуклеарного воспаления (MIDS)» относится к соотношению количества PD-L1, экспрессирующих мононуклеарные воспалительные клетки (MIC), инфильтрирующие опухоль или прилегающих к ней (малые и большие лимфоциты, моноциты и макрофаги в гнездах опухоли и прилегающих поддерживающей строме) по сравнению с общим количеством опухолевых клеток. MIDS фиксируется по шкале от 0 до 4, где 0 = нет; 1 = присутствует, но менее одной MIC на каждые 100 опухолевых клеток (<1%); 2 = по меньшей мере одна MIC на каждые 100 опухолевых клеток, но менее одной MIC на 10 опухолевых клеток (1-9%); 3 = по меньшей мере одна MIC на каждые 10 опухолевых клеток, но меньше MIC, чем у опухолевых клеток (10-99%); 4 = по меньшей мере столько же MIC, сколько опухолевых клеток (≥100%).

«Комбинированная положительная оценка (CPS)» относится к соотношению количества PD-L1-положительных опухолевых клеток и PD-L1-положительных мононуклеарных воспалительных клеток (MIC) в опухолевых гнездах и прилегающей поддерживающей строме (числитель) по сравнению с общим количеством опухолевых клеток (знаменатель; т.е., количеством PD-L1-положительных и PD-L1-отрицательных опухолевых клеток). Экспрессия PD-L1 любой интенсивности считается положительной, т.е., слабой (1+), умеренной (2+) или сильной (3+).

«Положительная экспрессия PD-L1» относится к баллу пропорции опухоли, баллу плотности мононуклеарного воспаления или комбинированному положительному баллу по меньшей мере 1%; AIS≥5; или повышенному уровню экспрессии PD-L1 (белка и/или mRNA) злокачественными клетками и/или инфильтрирующими иммунными клетками в опухоли по сравнению с соответствующим контролем.

«DSDR» или «частота пациентов с устойчивой стабилизацией заболевания» означает SD в течение ≥23 недель.

«Каркасная область» или «FR», используемые в настоящем документе, означают вариабельные области иммуноглобулина, за исключением областей CDR.

Термин «Kabat», используемый в настоящем документе, означает систему выравнивания и нумерации иммуноглобулинов, впервые разработанную Элвином А. Кабатом ((1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.).

«Антитело к TIGIT» означает моноклональное антитело, которое специфически связывается с TIGIT человека. TIGIT человека содержит аминокислотную последовательность:

см. также аминокислотные остатки 25-244 под номером доступа в Genbank NP_776160.2 (SEQ ID NO: 33) (аминокислотные остатки 1-24 SEQ ID NO: 33 соответствуют лидерному пептиду).

«Микросателлитная нестабильность (MSI)» относится к форме нестабильности генома, ассоциированной с дефектной репарацией ошибочно спаренных оснований ДНК в опухолях. См. Boland et al., CancerResearch 58, 5258-5257, 1998. В соответствии с одним вариантом осуществления MSI-анализ может быть проведен с использованием пяти микросателлитных маркеров, рекомендованных Национальным институтом рака (NCI): BAT25 (номер доступа в GenBank 9834508), ВАТ26 (номер доступа в GenBank 9834505), D5S346 (номер доступа в GenBank 181171), D2S123 (номер доступа в GenBank 187953), D17S250 (номер доступа в GenBank 177030). Могут использоваться дополнительные маркеры, например, ВАТ40, ВАТ34С4, TGF-β-RII и АСТС. Коммерчески доступные наборы для анализа MSI включают, например, мультиплексной ПЦР-анализ Promega MSI.

«Высокочастотная микросателлитная нестабильность» или «микросателлитная нестабильность - высокая (MSI-H)» относится к случаям, когда два или более из пяти маркеров NCI демонстрируют нестабильность или ≥30-40% от общего числа маркеров демонстрируют нестабильность (т.е., имеют инсерционные/делеционные мутации).

«Низкочастотная микросателлитная нестабильность» или «микросателлитная нестабильность низкая (MSI-L)» относится к тем случаям, когда один из пяти маркеров NCI демонстрирует нестабильность или <30-40% всех маркеров демонстрируют нестабильность (т.е., имеют инсерционные/делеционные мутации).

Термин «отличный от MSI-H колоректальный рак», используемый в настоящем документе, относится к микросателлитно-стабильному (MSS) и низкочастотному MSI (MSI-L) колоректальному раку.

«Микросателлитная стабильность (MSS)» означает, что ни один из пяти маркеров NCI не демонстрирует нестабильность (т.е., имеют инсерционные/делеционные мутации).

«Колоректальный рак с достаточной репарацией ошибочно спаренных оснований (pMMR)» относится к нормальной экспрессии белков MMR (MLH1, PMS2, MSH2 и MSH6) в образце опухоли CRC с помощью IHC. Коммерчески доступные наборы для анализа MMR включают IHC анализ Ventana MMR.

«Колоректальный рак с недостаточностью репарации ошибочно спаренных оснований (dMMR)» относится к низкой экспрессии одного или более белков MMR (MLH1, PMS2, MSH2 и MSH6) в образце опухоли CRC с помощью IHC.

Термин «моноклональное антитело», или «mAb», или «Mab», используемый в настоящем документе, относится к популяции по сути гомогенных антител, т.е., молекул антител, составляющих популяцию, идентичных по аминокислотной последовательности, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. В отличие от этого, обычные (поликлональные) препараты антител обычно включают множество различных антител, имеющих разные аминокислотные последовательности в их вариабельных доменах, особенно в их CDR, которые часто специфичны для разных эпитопов. Определение «моноклональный» указывает на свойство антитела быть полученным из по сути однородной популяции антител и не должно истолковываться как требующее получения антитела с помощью какого-либо определенного способа. Например, моноклональные антитела, используемые в соответствии с настоящим изобретением, могут быть получены гибридомным методом, впервые описанным Kohler et al. (1975) Nature 256: 495, или могут быть созданы с помощью методов рекомбинантной ДНК (см., например, патент США №4816567). «Моноклональные антитела» также могут быть выделены из библиотек фаговых антител с использованием методик, описанных в работах Clackson et al. (1991) Nature 352: 624-628, и Marks et al. (1991) J. Mol. Biol. 222: 581-597. См. также Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116:731.

«Пациент, не отвечающий на лечение», когда относится к специфическому противоопухолевому ответу на лечение описанной в настоящем документе комбинированной терапией, означает, что у пациента не проявлялся противоопухолевый ответ.

«ORR» или «частота объективного ответа» в соответствии с некоторыми вариантами осуществления относится к CR+PR, a ORR_{(неделя 24)} относится к CR и PR, измеренным с помощью irRECIST у каждого пациента в когорте через 24 недели после противоракового лечения. «Пациент» или «субъект» относится к любому отдельному субъекту, для которого желательна терапия, или который участвует в клиническом испытании, эпидемиологическом исследовании или используется в качестве контроля, включая людей и ветеринарных пациентов-млекопитающих, таких как крупный рогатый скот, лошади, собаки и кошки.

«Антагонист PD-1» означает любое химическое соединение или биологическую молекулу, которая блокирует связывание PD-L1, экспрессированного на раковой клетке, с PD-1, экспрессируемым на иммунной клетке (Т-клетке, В-клетке или NKT-клетке), и предпочтительно также блокирует связывание PD-L2, экспрессируемого на раковой клетке с PD-1, экспрессируемым иммунной клеткой. Альтернативные названия или синонимы PD-1 и его лигандов включают: PDCD1, PD1, CD279 и SLEB2 в случае PD-1; PDCD1L1, PDL1, В7Н1, В7-4, CD274 и В7-Н в случае PD-L1; и PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc и CD273 в случае PD-L2. В любом способе лечения, лекарственных препаратах и путях применения настоящего изобретения, в которых лечат индивидуума-человека, антагонист PD-1 блокирует связывание PD-L1 человека с PD-1 человека и предпочтительно блокирует связывание как PD-L1, так и PD-L2 человека с PD-1 человека. Аминокислотные последовательности PD-1 человека можно найти в локусе №в NCBI: NP_005009. Аминокислотные последовательности PD-L1 и PD-L2 человека можно найти в локусе №в NCBI: NP_054862 и NP_079515 соответственно.

Используемый в настоящем документе термин «вариант пембролизумаба» означает моноклональное антитело, которое содержит последовательности тяжелой цепи и легкой цепи, которые по сути идентичны последовательностям пембролизумаба, за исключением того, что три, две или одна консервативная аминокислотная замена в положениях, которые расположены за пределами CDR легкой цепи, и шесть, пять, четыре, три, две или одна консервативная аминокислотная замена, которые расположены вне CDR тяжелой цепи, например, положениях варианта, расположены в FR областях или константной области и необязательно имеют делецию С-концевого остатка лизина тяжелой цепи. Другими словами, пембролизумаб и вариант пембролизумаба содержат идентичные последовательности CDR, но отличаются друг от друга в результате наличия консервативной аминокислотной замены не более чем в трех или шести других положениях в их полноразмерных последовательностях легкой и тяжелой цепей соответственно. Вариант пембролизумаба по сути аналогичен пембролизумабу в отношении следующих свойств: аффинности связывания с PD-1 и способности блокировать связывание каждого из PD-L1 и PD-L2 с PD-1.

Используемый в настоящем документе термин «пеметрексед» относится к соединению, называемому 5-замещенным пирроло[2,3-d]пиримидином. В частности, этот термин относится к многонаправленному антифолату, который проявляет противораковые эффекты против различных видов рака, включая немелкоклеточный рак легкого и злокачественную мезотелиому плевры. Пеметрексед проявляет противоопухолевые эффекты против различных видов рака, включая немелкоклеточный рак легкого и злокачественную мезотелиому плевры, путем ингибирования активности метаболитов, участвующих в метаболизме фолиевой кислоты. Также могут использоваться аналоги и варианты пеметрекседа. См. публикацию РСТ № WO 2014084651A1.

Термин «критерии ответа RECIST 1.1», используемый в настоящем документе, означает определения, изложенные в работе Eisenhauer et al., Е.А. et al., Eur. J Cancer 45:228-247 (2009), для целевых поражений или нецелевых поражений, в зависимости от контекста, в котором измеряется ответ.

«Пациент, отвечающий на лечение», когда относится к специфическому противоопухолевому ответу на лечение описанной в настоящем документе комбинированной терапией, означает, что у пациента проявлялся противоопухолевый ответ.

Термин «устойчивый ответ» означает устойчивый терапевтический эффект после прекращения лечения терапевтическим средством или комбинированной терапией, описанными в настоящем документе. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления устойчивый ответ имеет продолжительность, по меньшей мере такую же, как продолжительность лечения, или по меньшей мере в 1,5, 2,0, 2,5 или 3 раза больше, чем продолжительность лечения.

Таксол представляет собой ценное химиотерапевтическое средство против рака, используемое для лечения многих типов рака, включая карциномы яичников, молочной железы и легких. Таксол представляет собой натуральный продукт, полученный из коры Taxus brevafolio (тис тихоокеанский). Таксол ингибирует эполимеризацию микротрубочек во время митоза и приводит к последующей гибели клеток. Таксол проявляет широкий спектр противоопухолевой активности, в том числе против рака молочной железы, яичников и легкого (McGuire et al., 1996, N. Engld. J. Med. 334:1-6; и Johnson et al., 1996, J. Clin. Ocol. 14:2054-2060). Хотя таксол часто эффективен при лечении этих злокачественных новообразований, он обычно не оказывает излечивающего эффекта вследствие возможного развития устойчивости к таксолу. Клеточная устойчивость к таксолу может включать такие механизмы, как повышенная экспрессия Р-гликопротеина и изменения в структуре тубулина за счет генных мутаций в бета-цепи или изменения соотношения изомеров тубулина в полимеризованной микротрубочке (Wahl et al., 1996, Nature Medicine 2:72-79; Horwitz et al., 1993, Natl. Cancer Inst. 15:55-61; Haber et al., 1995, J. Biol. Chem. 270:31269-31275; и Giannakakou et al., 1997, J. Biol. Chem. 272:17118-17125). Некоторые опухоли приобретают устойчивость к таксолу в результате неизвестных механизмов.

«Срез ткани» относится к отдельной части или участку образца ткани, например, тонкому срезу ткани, вырезанному из образца нормальной ткани или опухоли.

Термин «лечить» рак или «лечение» рака, используемый в настоящем документе, означает введение терапевтических средство по настоящему изобретению субъекту, страдающему раком или которому поставлен диагноз рака, для достижения по меньшей мере одного положительного терапевтического эффекта, такого как, например, уменьшение количества раковых клеток, уменьшение размера опухоли, снижение скорости инфильтрации раковых клеток в периферические органы или снижение скорости метастазирования опухоли или опухолевого роста. Положительные терапевтические эффекты при раке можно измерить несколькими способами (см. W.А. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S (2009)). Например, касательно ингибирования опухолевого роста, в соответствии со стандартами NCI, Т/С является минимальным уровнем противоопухолевой активности. Т/С<10% считается высоким уровнем противоопухолевой активности, где Т/С (%)=средний объем обработанной опухоли/средний объем опухоли контроля × 100. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления ответ на описанную в настоящем документе комбинированную терапию оценивают с использованием критериев RECIST 1.1 или irRC (двумерного или одномерного), и лечение, достигаемое с помощью комбинации по настоящему изобретению, представляет собой любое из PR, CR, OR, PFS, DFS и OS. PFS, также называемое «время до прогрессирования опухоли», указывает на продолжительность времени во время и после лечения, в течение которого рак не растет, и включает время, в течение которого пациенты испытывали CR или PR, а также время, в течение которого пациенты испытывали SD. DFS относится к промежутку времени во время и после лечения, в течение которого пациент не имеет признаков заболевания. ОС относится к увеличению продолжительности жизни по сравнению с наивными или не получавшими лечения индивидуумами или пациентами. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления ответ на комбинацию по настоящему изобретению представляет собой любой из PR, CR, PFS, DFS, OR и OS, который оценивается с использованием критериев ответа RECIST 1.1. Режим лечения для комбинации по настоящему изобретения, которая эффективна для лечения больного раком, может варьироваться в зависимости от таких факторов, как состояние заболевания, возраст и вес пациента, а также способность терапии вызывать противораковый ответ у субъекта.

Хотя вариант осуществления любого из аспектов настоящего изобретения может быть неэффективным для достижения положительного терапевтического эффекта у каждого субъекта, он должен действовать в отношении статистически значимого числа субъектов, определяемого любым статистическим критерием, известным в данной области техники, таким как t-критерий Стьюдента, критерий хи², U-критерий Манна и Уитни, критерий Крускала-Уоллиса (Н-критерий), критерий Джонкхира-Терпстра и критерий Вилкоксона.

Термины «режим лечения», «протокол введения» и «режим введения» используются взаимозаменяемо для обозначения дозы и времени введения каждого терапевтического средства в комбинации по настоящему изобретению.

«Опухоль» применительно к субъекту, у которого диагностирован или подозревается рак, относится к злокачественному или потенциально злокачественному новообразованию или тканевой массе любого размера и включает первичные опухоли и вторичные новообразования. Солидная опухоль представляет собой аномальный рост или массу ткани, которая обычно не содержит кист или жидких участков. Различные типы солидных опухолей названы по типу клеток, которые их образуют. Примерами солидных опухолей являются саркомы, карциномы и лимфомы. Лейкозы (различные виды рака крови) обычно не образуют солидных опухолей (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).

«Опухолевая нагрузка», также называемая «опухолевым грузом», относится к общему количеству опухолевого материала, распределенного по всему телу. Под опухолевой нагрузкой понимается общее количество раковых клеток или общий размер опухоли (опухолей) по всему телу, включая лимфатические узлы и костный мозг. Опухолевую нагрузку можно определить различными способами, известными в данной области техники, такими как, например, путем измерения размеров опухоли (опухолей) при удалении от субъекта, например, с помощью штангенциркуля, или во время нахождения в теле с использованием методов визуализации, например, ультразвукового сканирования, сканирования костей, компьютерной томографии (СТ) или сканирования с помощью магнитно-резонансной томографии (MRI).

Термин «размер опухоли» относится к общему размеру опухоли, который можно измерить как длину и ширину опухоли. Размер опухоли может быть определен различными способами, известными в данной области техники, такими как, например, путем измерения размеров опухоли (опухолей) при удалении от субъекта, например, с помощью штангенциркуля, или во время нахождения в теле с использованием методик визуализации, например сканирования костей, ультразвука, СТ или MRI.

«Одномерный irRC» относится к набору критериев, описанных в работе Nishino М, Giobbie-Hurder A, Gargano М, Suda М, RamaiyaNH, Hodi FS. Developing a Common Language for Tumor Response to Immunotherapy: Immune-related Response Criteria using Unidimensional measurements. Clin Cancer Res. 2013; 19(14):3936-3943). В этих критериях используется наибольший диаметр (см) каждого поражения.

«Вариабельные области» или «V-область», используемся в настоящем документе, означают сегмент цепей IgG, последовательность которых варьируется между различными антителами. Она продолжается до остатка по Kabat 109 в легкой цепи и 113 в тяжелой цепи.

Антагонисты PD-1 и антитела к TIGIT

Антагонисты PD-1, используемые в способе лечения, лекарственных средствах и путях применения по настоящему изобретению, включают моноклональное антитело (mAb) или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-1 или PD-L1 и предпочтительно специфически связывается с PD-1 человека или PD-L1 человека. MAb может представлять собой человеческое антитело, гуманизированное антитело или химерное антитело и может содержать человеческую константную область. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления человеческую константную область выбирают из группы, состоящей из константных областей IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, и в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления человеческая константная область представляет собой константную область IgG1 или IgG4. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления антигенсвязывающий фрагмент выбирают из группы, состоящей из Fab-, Fab'-SH-, F(ab')₂-, scFv- и Fv-фрагментов. Антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно получать в клетках СНО с использованием общепринятой клеточной культуры и технологий выделения/о чистки.

Примеры mAb, которые связываются с PD-1 человека и могут быть использованы в способе лечения, лекарственных средствах и путях применения по настоящему изобретению, описаны в US 7488802, US 7521051, US 8008449, US 8354509, US 8168757, WO 2004/004771, WO 2004/072286, WO 2004/056875 и US 2011/0271358. Специфические моноклональные антитела к PD-1 человека, используемые в качестве антагониста PD-1 в способе лечения, лекарственных средствах и путях применения по настоящему изобретению, включают: пембролизумаб (также известный как МК-3475), гуманизированное mAb IgG4 со структурой, описанной в WHO Drug Information, Vol.27, No. 2, pages 161-162 (2013), и которое содержит аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей, показанные в Табл. 3; ниволумаб (BMS-936558), mAb на основе IgG4 человека, структура которого описана в WHO Drug Information, Vol.27, No. 1, pages 68-69 (2013), и которое содержит аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей, показанные в Табл. 3; гуманизированные антитела h409A11, h409A16 и h409A17, которые описаны в WO 2008/156712, и АМР-514, разрабатываемый Medlmmune.

Примеры mAb, которые связываются с PD-L1 человека и могут быть использованы в способе лечения, лекарственных средствах и путях применения по настоящему изобретению, описаны в публикациях РСТ под номерами WO 2013/019906 и WO 2010/077634 А1 и в патенте США №8383796. Специфические mAb к PD-L1 человека, пригодные в качестве антагониста PD-1 в способе лечения, лекарственных средствах и путях применениях по настоящему изобретению, включают MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C и антитело, которое содержит вариабельные области тяжелой цепи и легкой цепи под SEQ ID NO: 24 и SEQ ID NO: 21 соответственно, из WO 2013/019906.

Другие антагонисты PD-1, пригодные в способе лечения, лекарственных средствах и путях применениях по настоящему изобретению, включают иммуноадгезин, который специфически связывается с PD-1 или PD-L1 и предпочтительно специфически связывается с PD-1 человека или PD-L1 человека, например, слитый белок, содержащий внеклеточный или связывающий PD-1 участок PD-L1 или PD-L2, слитый с константной областью, такой как Fc-область молекулы иммуноглобулина. Примеры молекул иммуноадгезии, которые специфически связываются с PD-1, описаны в WO 2010/027827 и WO 2011/066342. Специфические слитые белки, пригодные в качестве антагониста PD-1 в способе лечения, лекарственных средствах и путях применения по настоящему изобретению, включают АМР-224 (также известный как B7-DCIg), который представляет собой слитый белок PD-L2-FC и связывается с PD-1 человека.

В соответствии с некоторыми предпочтительными вариантами осуществления способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антагонист PD-1 представляет собой моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8.

В соответствии с другими предпочтительными вариантами осуществления способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антагонист PD-1 представляет собой моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-1 человека и содержит (а) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9 или ее вариант, и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4 или ее вариант. Вариант последовательности вариабельной области тяжелой цепи идентичен референтной последовательности, за исключением наличия до 17 консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е., вне CDR), и предпочтительно имеет менее десяти, девяти, восьми, семи, шести или пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области. Вариант последовательности вариабельной области легкой цепи идентичен референтной последовательности, за исключением наличия до пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е., вне CDR), и предпочтительно имеет менее четырех, трех или двух консервативных аминокислотных замен в каркасной области.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антагонист PD-1 представляет собой моноклональное антитело, которое специфически связывается с PD-1 человека и содержит (а) тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 10, и (b) легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 5.

В соответствии с еще одним предпочтительным вариантом способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антагонист PD-1 представляет собой моноклональное антитело, которое специфически связывается с PD-1 человека и содержит (а) тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 12, и (b) легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 11.

В соответствии со всеми вышеупомянутыми способами лечения, лекарственными средствами и путями применения антагонист PD-1 ингибирует связывание PD-L1 с PD-1, а также предпочтительно ингибирует связывание PD-L2 с PD-1. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления вышеуказанного способа лечения, лекарственных средств и путей применения антагонист PD-1 представляет собой моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-1 или с PD-L1 и блокирует связывание с PD-L1 с PD-1. В соответствии с одним вариантом осуществления антагонист PD-1 представляет собой антитело к PD-1, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая и легкая цепи содержат аминокислотные последовательности в SEQ ID NO: 10 и SEQ ID NO: 5 соответственно.

В Табл. 3 ниже представлен список аминокислотных последовательностей иллюстративных mAb к PD-1 для применения в способе лечения, лекарственных средствах и путях применения по настоящему изобретению.

Антитело к TIGIT, используемое в заявленном изобретении, может представлять собой человеческое антитело, гуманизированное антитело или химерное антитело и может содержать человеческую константную область. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления человеческую константную область выбирают из группы, состоящей из константных областей IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, и в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления человеческая константная область представляет собой константную область IgG1 или IgG4.

В соответствии с одним вариантом осуществления антитело к TIGIT представляет собой 31С6. В соответствии с другим вариантом осуществления антитело к TIGIT представляет собой вариант 31С6. Антитело 31С6 представляет собой моноклональное антитело, которое содержит две тяжелые цепи и две легкие цепи, при этом каждая тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23; и каждая легкая цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 22.

31С6: легкая цепь иммуноглобулина. содержащая аминокислотную последовательность:

и тяжелая цепь иммуноглобулина, содержащая аминокислотную последовательность:

или вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность:

NO: 24 (без учета CDR)); и вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность:

(без учета CDR)); или содержащий CDR:

CDR-L1: RASEHIYSYLS (SEQ ID NO: 26); CDR-L2: NAKTLAE (SEQ ID NO:27);

CDR-L3: QHHFGSPLT (SEQ ID NO: 28);

CDR-H1: SYVMH (SEQ ID NO: 29);

CDR-H2: YI DP YNDG AKY AQKFQG (SEQ ID NO: 30); и CDR-H3: GGPYGWYFDV (SEQ ID NO: 31)

В соответствии с некоторыми предпочтительными вариантами осуществления способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антитело к TIGIT содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 26,30, 27 и 28, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 29, 30 и 31.

В соответствии с другими предпочтительными вариантами осуществления способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антитело к TIGIT содержит (а) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25 или ее вариант, и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24 или ее вариант.Вариант последовательности вариабельной области тяжелой цепи идентичен референтной последовательности, за исключением наличия до 17 консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е., вне CDR), и предпочтительно имеет менее десяти, девяти, восьми, семи, шести или пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области. Вариант последовательности вариабельной области легкой цепи идентичен референтной последовательности, за исключением наличия до пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е., вне CDR), и предпочтительно имеет менее четырех, трех или двух консервативных аминокислотных замен в каркасной области. Примеры таких вариантов изложены в международной патентной публикации № WO 2016/028656 (см., например, SEQ ID NO: 124-133 и 149-150 международной патентной публикации № WO 2016/028656.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом осуществления способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антитело к TIGIT содержит (а) тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 23, и (b) легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 22. В соответствии с другим предпочтительным вариантом осуществления способа лечения, лекарственных средств и путей применения по настоящему изобретению антитело к TIGIT содержит (а) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

В соответствии с одним вариантом осуществления антитело к PD-1 или к TIGIT или антигенсвязывающий фрагмент содержит константную область тяжелой цепи, например, человеческую константную область, такую как γ1, γ2, γ3 или γ4 человеческую константную область тяжелой цепи или ее вариант. В соответствии с другим вариантом осуществления антитело к PD-1 или антитело к TIGIT или антигенсвязывающий фрагмент содержит константную область легкой цепи, например, человеческую константную область легкой цепи, такую как человеческую область легкой цепи лямбда или каппа или ее вариант. В качестве примера, но не ограничения, человеческая константная область тяжелой цепи может представлять собой γ1, а человеческая константная область легкой цепи может представлять собой каппа. В соответствии с другим вариантом осуществления человеческая константная область тяжелой цепи может представлять собой γ4, а человеческая константная область легкой цепи может представлять собой каппа. В соответствии с альтернативным вариантом осуществления Fc-область антитела представляет собой γ4 с мутацией Ser228Pro (Schuurman, J et. al.,Mol. Immunol. 38: 1-8, 2001).

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления различные константные домены могут быть добавлены к гуманизированным V_L- и V_H-областям, полученным из CDR, предусмотренных в настоящем документе. Например, если конкретное предполагаемое использование антитела (или фрагмента) по настоящему изобретению должно было вызвать измененные эффекторные функции, можно использовать константный домен тяжелой цепи, отличный от человеческого IgG1, или можно использовать гибрид IgG1/IgG4. Например, можно использовать, например, константный домен IgG4 человека. Настоящее изобретение включает применение антител к PD-1 или антител к TIGIT и их антигенсвязывающих фрагментов, которые содержат константный домен IgG4. В соответствии с одним вариантом осуществления константный домен IgG4 может отличаться от нативного константного домена IgG4 человека (номер доступа в Swiss-Prot Р01861.1) в положении, соответствующем положению 228 в системе ЕС и положению 241 в системе KАВАТ, где нативный Ser108 заменен на Pro, чтобы предупредить потенциальную межцепочечную дисульфидную связь между Cys106 и Cys109 (что соответствует положениям Cys 226 и Cys 229 в системе ЕС и положениям Cys 239 и Cys 242 в системе KАВАТ), которые могут нарушать соответствующее образование внутрицепочечных дисульфидных связей. См. Angal etal. (1993)Mol. Imunol.30:105.

Способы, пути применения и лекарственные средства

В соответствии с одним аспектом в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения рака у пациента, включающий введение антитела к TIGIT в дозе 2,1 мг 700 мг, при этом антитело к TIGIT содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 26, 27 и 28, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 29, 30 и 31. В соответствии с одним аспектом антитело к TIGIT вводят с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения рака у пациента, включающий введение антитела к TIGIT в дозе 2,1 мг - 700 мг, с антителом к PD-1 или к PD-L1, при этом антитело к TIGIT содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 26, 27 и 28, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 29, 30 и 31. В соответствии с одним вариантом осуществления антитело к PD-1 блокирует связывание PD-1 с PD-L1 и PD-L2. В соответствии с одним вариантом осуществления вводят 2,1 мг - 700 мг антитела к TIGIT. В соответствии с различными вариантами осуществления вводят 2,1 мг, 7 мг, 21 мг, 70 мг, 200 мг, 210 мг или 700 мг антитела к TIGIT. В соответствии с другим вариантом осуществления вводят 200-700 мг антитела к TIGIT. В соответствии с другим вариантом осуществления вводят 200-700 мг антитела к TIGIT. В соответствии с другим вариантом осуществления вводят 200 мг или 210 мг антитела к TIGIT. В соответствии с одним аспектом антитело к TIGIT вводят с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с одним аспектом антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 вводят с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления как антитело к TIGIT, так и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 вводят с помощью внутривенной инфузии.

В соответствии с дополнительным аспектом в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения рака у пациента, включающий введение индивидууму с помощью внутривенной инфузии композиции, содержащей 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31 Сб. В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предусмотрен способ лечения рака у пациента, включающий введение индивидууму с помощью внутривенной инфузии композиции, содержащей 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 210 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с одним вариантом осуществления композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200-700 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с одним вариантом осуществления композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 700 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31С6.

В соответствии с другим вариантом осуществления в настоящем изобретении предусмотрено лекарственное средство, содержащее антитело к TIGIT, для применения в комбинации с антителом к PD-1 или к PD-L1 для лечения рака, при этом антитело к TIGIT вводят в дозах от 2,1 до 700 мг. В соответствии с одним вариантом осуществления антитело к TIGIT вводят с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим вариантом осуществления в настоящем изобретении предусмотрено лекарственное средство, содержащее антитело к TIGIT и антитело к PD-1, для лечения рака. В соответствии с одним вариантом осуществления лекарственное средство содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с другим вариантом осуществления лекарственное средство содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления в настоящем изобретении предусмотрено применение антитела к TIGIT и антитела к PD-1 или к PD-L1 при изготовлении лекарственного средства для лечения рака у индивидуума. В соответствии с одним вариантом осуществления лекарственное средство содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200 мг антитела к TIGIT 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с другим аспектом лекарственное средство содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с еще одним вариантом осуществления в настоящем изобретении предусмотрено применение антитела к TIGIT при изготовлении лекарственного средства для лечения рака у индивидуума, при этом антитело к TIGIT вводят в дозе 2,1 мг совместно с антителом к PD-1 в 200 мг. В соответствии с одним вариантом осуществления каждое из антител к TIGIT и антител к PD-1 вводят с помощью внутривенной инфузии.

В вышеупомянутых способах, лекарственных средствах и путях применения в соответствии с одним вариантом осуществления антитело к PD-1 и антитело к TIGIT составляют совместно. В соответствии с одним вариантом осуществления для внутривенной инфузии используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с одним вариантом осуществления для внутривенной инфузии используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 300 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с одним вариантом осуществления для внутривенной инфузии используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 400 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с другим вариантом осуществления для внутривенной инфузии используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 500 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с другим вариантом осуществления для внутривенной инфузии используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 600 мг антитела 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с другим вариантом осуществления для внутривенной инфузии используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6.

В настоящем изобретении также предусмотрена фармацевтическая композиция, содержащая 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 200 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. В соответствии с одним вариантом осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 300 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. В соответствии с одним вариантом осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 400 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. В соответствии с другим вариантом осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 500 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 600 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления фармацевтическая композиция содержит 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 и один или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.

В вышеупомянутых способах, лекарственных средствах и путях применения в соответствии с другим вариантом осуществления антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 и антитело к TIGIT вводят совместно. В соответствии с одним вариантом осуществления 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят совместно в день 1, а затем раз в три недели после этого с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с одним вариантом осуществления 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 300 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят совместно в день 1, а затем раз в три недели после этого с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с одним вариантом осуществления 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 400 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят совместно в день 1, а затем раз в три недели после этого с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим вариантом осуществления 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 500 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят совместно в день 1, а затем раз в три недели после этого с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим вариантом осуществления 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 600 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят совместно в день 1, а затем раз в три недели после этого с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 700 мг антитела 31С6 и ли варианта 31С6 вводят совместно в день 1, а затем раз в три недели после этого с помощью внутривенной инфузии.

В вышеупомянутых способах, лекарственных средствах и путях применения, в соответствии с одним вариантом осуществления каждое из 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба вводят в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, и 200 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят в день 1, а затем раз в три недели с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с одним вариантом осуществления каждое из 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба вводят в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, и 300 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят в день 1, а затем раз в три недели с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с одним вариантом осуществления каждое из 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба вводят в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, и 400 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят в день 1, а затем раз в три недели с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим вариантом осуществления каждое из 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба вводят в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, и 500 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят в день 1, а затем раз в три недели с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим вариантом осуществления каждое из 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба вводят в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, и 600 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят в день 1, а затем раз в три недели с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с другим вариантом осуществления каждое из 400 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба вводят в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, и 700 мг антитела 31С6 или варианта 31С6 вводят в день 1, а затем раз в три недели с помощью внутривенной инфузии.

Различные виды рака, которые можно лечить с помощью антител, композиций и способов по настоящему изобретению, включают без ограничения: со стороны сердца: саркому (ангиосаркому, фибросаркому, рабдомиосаркому, липосаркому), миксому, рабдомиому, фиброму, липому и тератому; со стороны легких: бронхогенную карциному (плоскоклеточную, недифференцированную мелкоклеточную, недифференцированную крупноклеточную, аденокарциному), альвеолярную (бронхиолярную) карциному, бронхиальную аденому, саркому, лимфому, хондроматозную гамартому, мезотелиому; со стороны желудочно-кишечного тракта: со стороны пищевода (плоско клеточную карциному, аденокарциному, лейомиосаркому, лимфому), со стороны желудка (карциному, лимфому, лейомиосаркому), со стороны поджелудочной железы (протоковую аденокарциному, инсулиному, глюкагоному, гастриному, карциноидные опухоли, випому), со стороны тонкого кишечника (аденокарциному, лимфому, карциноидные опухоли, саркому Капоши, лейомиому, гемангиому, липому, нейрофиброму, фиброму), со стороны толстого кишечника (аденокарциному, тубулярную аденому, ворсинчатую аденому, гамартому, лейомиому), колоректальный рак; со стороны мочеполовых путей: со стороны почек (аденокарциному, опухоль Вильмса [нефробластому], лимфому, лейкоз), со стороны мочевого пузыря и уретры (плоскоклеточную карциному, переходно-клеточную карциному, аденокарциному), со стороны предстательной железы (аденокарциному, саркому), со стороны яичек (семиному, тератому, эмбриональную карциному, тератокарциному, хориокарциному, саркому, интерстициально-клеточную карциному, фиброму, фиброаденому, аденоматоидные опухоли, липому); со стороны печени: гепатому (гепатоцеллюлярную карциному), холангиокарциному, гепатобластому, ангиосаркому, гепатоцеллюлярную аденому, гемангиому; со стороны кости: остеогенную саркому (остеосаркому), фибросаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому, хондросаркому, саркому Юинга, злокачественную лимфому (ретикулярно-клеточную саркому), множественную миелому, злокачественную гигантоклеточную хордому, остеохронфрому (костно-хрящевые экзостозы), доброкачественную хондрому, хондробластому, хондромиксофиброму, остеоид-остеому и гигантоклеточные опухоли; со стороны нервной системы: со стороны черепа (остеому, гемангиому, гранулему, ксантому, деформирующий остит), со стороны мозговых оболочек (менингиому, менингиосаркому, глиоматоз), со стороны головного мозга (астроцитому, медуллобластому, глиому, эпендимому, герминому [пинеалому], мультиформную глиобластому, олигодендроглиому, шванному, ретинобластому, врожденные опухоли), со стороны спинного мозга (нейрофиброму, менингиому, глиому, саркому); гинекологические: со стороны матки (карциному эндометрия), со стороны шейки матки (карциному шейки матки, предопухолевую дисплазию шейки матки), со стороны яичников (карциному яичников [серозную цистаденокарциному, муцинозную цистаденокарциному, неклассифицированную карциному], гранулезно-текальные клеточные опухоли, опухоли из клеток Сертоли-Лейдига, дисгерминому, злокачественную тератому), со стороны вульвы (плоскоклеточную карциному, внутриэпителиальную карциному, аденокарциному, фибросаркому, меланому), со стороны влагалища (светлоклеточную карциному, плоскоклеточную эмбриональную карциному, ботриоидную саркому (эмбриональную рабдомиосаркому), со стороны маточных труб (карциному), рак молочной железы; гематологические: со стороны крови (миелоидный лейкоз [острый и хронический], острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, множественную миелому, миелодиспластический синдром); гемопоэтические опухоли лимфоидной линии, включая лейкоз, острый лимфоцитарный лейкоз, хронический лимфолейкоз, острый лимфобластный лейкоз, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосато-клеточную лимфому, лимфому из мантийных клеток, миелому и лимфому Беркетта; гематопоэтические опухоли миелоидного происхождения, включая острые и хронические миелогенные лейкозы, миелодиспластический синдром и промиелоцитарный лейкоз; опухоли мезенхимального происхождения, включая фибросаркому и рабдомиосаркому; опухоли центральной и периферической нервной системы, включая астроцитому, нейробластому, глиому и шванномы; и другие опухоли, в том числе меланому, рак кожи (немеланомный), мезотелиому (клетки), семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксенодерму, кератоктантому, фолликулярный рак щитовидной железы и саркому Капоши. В соответствии с одним вариантом осуществления вышеуказанные виды рака являются распространенными, неоперабельными или метастатическими. В соответствии с одним вариантом осуществления пациенты рефрактерны к терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1.

В соответствии с одним вариантом осуществления различные виды рака, которые можно лечить с помощью антител, композиций и способов по настоящему изобретению, включают без ограничения: рак легкого, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки, колоректальный рак, миелоидные лейкозы, острый миелогенный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, хронический миеломоноцитарный лейкоз, рак щитовидной железы, миелодиспластический синдром, карциному мочевого пузыря, эпидермальную карциному, меланому, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак головы и шеи, рак яичников, рак голоного мозга, рак мезенхимального происхождения, саркомы, тетракарциномы, нейробластомы, карциномы почек, гепатомы, неходжкинскую лимфому, множественную миелому и анапластическую карциному щитовидной железы.

В соответствии с другим вариантом осуществления различные виды рака, которые можно лечить с помощью антител, композиций и способов по настоящему изобретению, включают без ограничения: плоскоклеточный рак головы и шеи, рак желудка, аденокарциному желудка и/или гастроэзофагеального соединения, почечно-клеточный рак, рак маточных труб, рак эндометрия, рак шейки матки и колоректальный рак. В соответствии с одним вариантом осуществления колоректальный рак, рак желудка, аденокарцинома желудка и/или гастроэзофагеального соединения (GEJ) или рак эндометрия представляют собой рак с немикросателлитной нестабильностью - высокой (не MSI-H) или достаточной репарацией ошибочно спаренных оснований (pMMR). В соответствии с одним вариантом осуществления пациент с плоскоклеточным раком головы и шеи является рефрактерным к лечению антителом к PD-1 или антителом к PD-L1. В соответствии с одним вариантом осуществления колоректальный рак является неоперабельным или метастатическим (стадия IV).

В соответствии с другим вариантом осуществления различные виды рака, которые можно лечить с помощью антител, композиций и способов по настоящему изобретению, включают гематологические злокачественные новообразования, без ограничения: классическую лимфому Ходжкина (cHL), диффузную крупноклеточную В-лимфому (DLBCL), трансформированный DLBCL, лимфому серой зоны, лимфому двойного удара, первичную средостенную В-клеточную лимфому (PMBCL) или вялотекущую неходжкинскую лимфому (iNHL) (например, фолликулярную лимфому, лимфому маргинальной зоны, лимфому, ассоциированную со слизистой оболочкой, или малую лимфоцитарную лимфому). В соответствии с одним вариантом осуществления пациент с лимфомой Ходжкина не поддается лечению антителом к D-1 или антителом к PD-L1.

В соответствии с дополнительным вариантом осуществления различные виды рака, которые можно лечить с помощью антител, композиций и способов по настоящему изобретению, включают различные виды рака, выбранные из группы, состоящей из почечно-клеточной карциномы, уротелиальной карциномы почечной лоханки, мочеточника, мочевого пузыря или уретры, меланомы, аденокарциномы желудка, аденокарцинома GEJ, немелкоклеточного рака легкого и рака мочевого пузыря. В соответствии с одним вариантом осуществления вышеуказанные виды рака являются распространенными, неоперабельными или метастатическими.

В соответствии с одним вариантом осуществления немелкоклеточный рак легкого представляет собой распространенный рак или рак стадии IV. В соответствии с другим вариантом осуществления меланома представляет собой распространенную меланому или меланому стадии III. В соответствии с одним вариантом осуществления пациенты рефрактерны к терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1.

В соответствии с одним вариантом осуществления используют совместно составленный продукт с пембролизумабом или вариантом пембролизумаба и 31С6 или вариантом 31С6. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 200 мг 31С6 или варианта 31С6. В соответствии с другим вариантом осуществления используют совместно составленный продукт с 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба и 700 мг 31С6 или варианта 31С6.

В соответствии с дополнительным вариантом осуществления рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого, и у пациента отсутствует рецептор активирующего опухоль эпидермального фактора роста (EGFR) или В-изоформа мутации стремительно ускоренной фибросаркомы (B-Raf) и отсутствует киназа анапластической лимфомы (ALK) или перестройки гена c-ros онкогена 1 (ROS1). В соответствии с другим вариантом осуществления рак представляет собой немелкоклеточный рак легкого, и опухоль имеет плоскоклеточную гистологию.

Комбинированная терапия может также включать один или более дополнительных терапевтических средств. Дополнительным терапевтическим средством может быть, например, химиотерапевтическое, биотерапевтическое средство, иммуногенное средство (например, аттенуированные раковые клетки, опухолевые антигены, антигенпрезентирующие клетки, такие как дендритные клетки, обработанные антигеном или нуклеиновыми кислотами, полученными из опухоли, иммуностимулирующие цитокины (например, IL-2, IFNα2, GM-CSF), и клетки, трансфицированные генами, кодирующими иммуностимулирующие цитокины, такие как, без ограничения, GM-CSF). Конкретная доза и схема введения дополнительного терапевтического средства могут дополнительно варьироваться, и оптимальная доза, схема введения и путь введения будут определяться на основе конкретного используемого терапевтического средства.

Примеры химиотерапевтических средств включают алкилирующие средства, такие как тиотепа и циклофосфамид; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбохон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метил аме л амины, включая альтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; ацетогенины (особенно буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин; СС-1065 (включая его синтетические аналоги адозелезин, карзелезин и бизелезин); криптофицины (особенно криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги KW-2189 и CBI-TMI); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистрые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мелфалан, новембихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урациловый иприт; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлор оз ото цин, фотемустин, ломустин, нимустин, ранимустин; антибиотики, такие как эндииновые антибиотики (например, калихеамицин, особенно калихеамицин гаммаII и калихеамицин phiIl, см., например, Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994); динемицин, включая динемицин А; бисфосфонаты, такие как клодронат; эсперамицин; а также хромофор неокарзиностатина и родственные хромопротеинендииновые хромофоры-антибиотики), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, каминомицин, карзинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-Е-норлейцин, доксорубицин (в том числе морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин, маринодоксорубицин и дезоксирубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловую кислоту, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, келамицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, дромостанолона пропионат, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; средства, угнетающие функции надпочечников, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; вое полните ль фолиевой кислоты, такой как фролиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; элформитин; эллиптиния ацетат; эпотилон; этоглюцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидамин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопидамол; нитракрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; подофиллиновую кислоту; 2-этилгидразид; прокарбазин; разоксан; ризоксин; сизофуран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2''-трихлортриэтиламин; трихотецены (особенно токсин Т-2, верракурин А, роридин А и ангидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид («Ара-С»); циклофосфамид; тиотепу; таксоиды, например, паклитаксел и доксетаксел; хлорамбуцил; гемцитабин; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платину; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; винорелбин, новантрон; тенипозид; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; кселоду; ибандронат; СРТ-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота; капецитабин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеперечисленного. Также включены антигормональные средства, которые регулируют или ингибируют действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов (SERM), включая, например, тамоксифен, ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон и торемифен (фарестон); ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, регулирующий выработку эстрогена в надпочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглутетимид, мегестрола ацетат, экземестан, форместан, фадрозол, ворозол, летрозол и анастрозол; и антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеперечисленного.

Каждое терапевтическое средство в комбинированной терапии по настоящему изобретению может вводиться либо отдельно, либо в виде лекарственного средства (также называемого в настоящем документе фармацевтической композицией), которое содержит терапевтическое средство и один или более фармацевтически приемлемых носителей, вспомогательных веществ и разбавителей в соответствии со стандартной фармацевтической практикой.

Каждое терапевтическое средство в комбинированной терапии по настоящему изобретению можно вводить одновременно (т.е., в одном и том же лекарственном средстве), совместно (т.е., в отдельных лекарственных средствах, вводимых одно за другим в любом порядке) или последовательно в любом порядке. Последовательное введение особенно полезно, когда терапевтические средства в комбинированной терапии находятся в разных лекарственных формах (одно средство представляет собой таблетку или капсулу, а другое средство представляет собой стерильную жидкость) и/или вводятся по разным схемам введения, например, химиотерапевтическое средство, которое вводится по меньшей мере один раз в день, и биотерапевтическое средство, которое вводится менее часто, например, раз в неделю, раз в две недели или раз в три недели.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления антитело к TIGIT вводят перед введением антитела к PD-1 или антитела к PD-L1, тогда как в соответствии с другими вариантами осуществления антитело к TIGIT вводят после введения антитела к PD-1 или антитела к PD-L1. В соответствии с другим вариантом осуществления антитело к TIGIT вводят одновременно с антителом к PD-15 или антителом к PD-L1.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления по меньшей мере одно из терапевтических средств в комбинированной терапии вводят с использованием того же режима введения (доза, частота и продолжительность лечения), который обычно используется, когда средство используется в качестве монотерапии для лечения того же вида рака. В соответствии с другими вариантами осуществления пациент получает меньшее общее количество по меньшей мере одного из терапевтических средств в комбинированной терапии, чем когда средство используется в качестве монотерапии, например, меньшие дозы, менее частые дозы и/или более короткая продолжительность лечения.

Каждое низкомолекулярное терапевтическое средство в комбинированной терапии по настоящему изобретению можно вводить перорально или парентерально, включая внутривенный, внутримышечный, внутри брюшинный, подкожный, ректальный, местный и трансдермальный пути введения. Комбинированная терапия по настоящему изобретению может использоваться до или после хирургического вмешательства по удалению опухоли и может использоваться до, во время или после лучевой терапии.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления комбинированную терапию по настоящему изобретению вводят пациенту, который ранее не получал лечение биотерапевтическим или химиотерапевтическим средством, т.е., ранее не получал лечение. В соответствии с другими вариантами осуществления комбинированная терапия вводится пациенту, у которого не удалось достичь устойчивого ответа после предыдущей терапии биотерапевтическим или химиотерапевтическим средством, т.е., который получал лечение.

Комбинированная терапия по настоящему изобретению обычно используется для лечения опухоли, которая достаточно велика, чтобы ее можно было обнаружить путем пальпации или с помощью методик визуализации, хорошо известных в данной области техники, таких как МРТ, ультразвук или компьютерная томография. Комбинированная терапия по настоящему изобретению может быть введена пациенту-человеку, у которого рак, который имеет положительный результат теста на один или оба из PD-L1 и PD-L2, и предпочтительно имеет положительный результат в отношении экспрессии PD-L1. В соответствии с некоторыми предпочтительными вариантами осуществления экспрессия PD-L1 обнаруживается с использованием диагностического антитела к PD-L1 человека или его антигенсвязывающего фрагмента в ШС анализе на FFPE или замороженном срезе ткани образца опухоли, взятого у пациента. Обычно врач пациента назначает диагностический тест для определения экспрессии PD-L1 в образце опухолевой ткани, взятом у пациента, до начала лечения антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 и антителом к TIGIT, но предполагается, что врач может назначить первые или последующие диагностические тесты в любое время после начала лечения, например, после завершения цикла лечения. В соответствии с одним вариантом осуществления экспрессия PD-L1 измеряется с помощью ШС анализа PD-L1 22С3 pharmDx. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет показатель плотности мононуклеарного воспаления в отношении экспрессии PD-L1≥2. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет показатель плотности мононуклеарного воспаления в отношении экспрессии PD-L1≥3. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет показатель плотности мононуклеарного воспаления в отношении экспрессии PD-L1≥4. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет балл пропорции опухоли в отношении экспрессии PD-L1≥1%. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет балл пропорции опухоли в отношении экспрессии PD-L1≥10%. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет балл пропорции опухоли в отношении экспрессии PD-L1≥20%. В соответствии с другим вариантом осуществления пациент имеет балл пропорции опухоли в отношении экспрессии PD-L1≥30%. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1≥1%. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1 от 1 до 20%. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1≥2%. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1≥5%. В соответствии с еще одним дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1≥10%. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1≥15%. В соответствии с еще одним дополнительным вариантом осуществления пациент имеет комбинированный показательно позитивности в отношении экспрессии PD-L1≥20%.

В соответствии с одним предпочтительным вариантом осуществления антитело к PD-1 в комбинированной терапии представляет собой ниволумаб, который вводят внутривенно в дозе, выбранной из группы, состоящей из: 1 мг/кг 1 р./2 нед., 2 мг/кг 1 р./2 нед., 3 мг/кг 1 р./2 нед., 5 мг/кг 1 р./2 нед., 10 мг 1 р./2 нед., 1 мг/кг 1 р./3 нед., 2 мг/кг 1 р./3 нед., 3 мг/кг 1 р./3 нед., 5 мг/кг 1 р./3 нед. и 10 мг/кг 1 р./3 нед.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения антитело к PD-1 в комбинированной терапии представляет собой пембролизумаб или вариант пембролизумаба, который вводят в жидком лекарственном средстве в дозе, выбранной из группы, состоящей из 1 мг/кг 1 р./2 нед., 2 мг/кг 1 р./2 нед., 3 мг/кг 1 р./2 нед., 5 мг/кг 1 р./2 нед., 10 мг/кг 1 р./2 нед., 1 мг/кг 1 р./3 нед., 2 мг/кг 1 р./3 нед., 3 мг/кг 1 р./3 нед., 5 мг/кг 1 р./3 нед., 10 мг/кг 1 р./3 нед. и эквивалентов фиксированных доз любой из этих доз, например, 200 мг 1 р./3 нед. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления пембролизумаб предусмотрен в виде жидкого лекарственного средства, которое содержит 25 мг/мл пембролизумаба, 7% (масс./об.) сахарозы, 0,02% (масс./об.) полисорбата 80 в 10 мМ гистидиновом буфере, рН 5,5. В соответствии с другими вариантами осуществления пембролизумаб предусмотрен в виде жидкого лекарственного средства, которое содержит от приблизительно 125 до приблизительно 200 мг/мл пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента; приблизительно 10 мМ гистидинового буфера; примерно 10 мМ L-метионина или его фармацевтически приемлемой соли; приблизительно 7% (масс./об.) сахарозы; и приблизительно 0,02% (масс./об.) полисорбата 80.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят пациенту раз в четыре или шесть недель в течение 12 недель или больше. В соответствии с другими вариантами осуществления антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят пациенту раз в шесть недель в течение 16 недель или больше, 18 недель или больше, 20 недель или больше, 24 недель или больше, 28 недель или больше, 30 недель или больше, 32 недель или больше, 36 недель или больше, 40 недель или больше, 42 недель или больше, 44 недель или больше, 48 недель или больше, 52 недель или больше, 54 недель или больше, 56 недель или больше, 60 недель или больше, 64 недель или больше, 66 недель или больше, 68 недель или больше, 72 недель или больше, 76 недель или больше, 78 недель или больше, 80 недель или больше, 84 недель или больше, 88 недель или больше или 90 недель или больше. В соответствии с другими вариантами осуществления антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе 400 мг раз в шесть недель.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления выбранную дозу пембролизумаба вводят с помощью внутривенной инфузии. В соответствии с одним вариантом осуществления выбранная доза пембролизумаба вводится с помощью внутривенной инфузии в течение периода времени от 25 до 40 минут или приблизительно 30 минут.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления пациента лечат комбинированной терапией в течение по меньшей мере 24 недель, например, восьми 3-недельных циклов. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления лечение комбинированной терапией продолжается до тех пор, пока у пациента не появятся признаки PD или CR.

Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества по настоящему изобретению включают, например, растворители, наполнители, буферные средства, средства, регулирующие тоничность, и консерванты (см., например, Pramanick et al., Pharma Times, 45: 65-77, 2013). В соответствии с некоторыми вариантами осуществления фармацевтические композиции могут содержать вспомогательное вещество, которое выступает в качестве одного или более из растворителя, наполнителя, буферного средства и средства, регулирующего тоничность (например, хлорид натрия в физиологическом растворе может служить как водным носителем, так и средством, регулирующем тоничность). Фармацевтические композиции по настоящему раскрытию подходят для парентерального введения.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления фармацевтические композиции содержат водный носитель в качестве растворителя. Подходящие носители включают, например, стерильную воду, физиологический раствор, забуференный фосфатом физиологический раствор и раствор Рингера. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления композиция является изотонической.

Фармацевтические композиции могут содержать объемообразующее средство. Объемообразующие средства особенно полезны, когда фармацевтическую композицию необходимо лиофилизировать перед введением. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления наполнитель представляет собой защитное средство, которое способствует стабилизации и предупреждению разложения активных средств во время сушки замораживанием или распылением и/или во время хранения. Подходящими объемообразующими средствами являются сахара (моно-, ди-и полисахариды), такие как сахароза, лактоза, трегалоза, маннит, сорбит, глюкоза и рафиноза.

Фармацевтические композиции могут содержать буферное средство. Буферные средства регулируют рН, чтобы ингибировать разложение активного средства во время обработки, хранения и, возможно, разбавления. Подходящие буферы включают, например, соли, содержащие ацетат, цитрат, фосфат или сульфат. Другие подходящие буферы включают, например, аминокислоты, такие как аргинин, глицин, гистидин и лизин. Буферное средство может дополнительно содержать соляную кислоту или гидроксид натрия. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления буферное средство поддерживает рН композиции в диапазоне от 4 до 9. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления рН составляет более (нижний предел) 4, 5, 6, 7 или 8. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления рН составляет менее (верхний предел) 9, 8, 7, 6 или 5. Т.е., рН находится в диапазоне от приблизительно 4 до 9, в котором нижний предел меньше верхнего предела.

Фармацевтические композиции могут содержать средство, регулирующее тоничность. Подходящие средства, регулирующие тоничность, включают, например, декстрозу, глицерин, хлорид натрия, глицерин и маннит.

Фармацевтические композиции могут содержать консервант. Подходящие консерванты включают, например, антиоксиданты и антимикробные средства. Однако в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления фармацевтическая композиция приготовлена в стерильных условиях и находится в контейнере для одноразового использования, и, таким образом, не требует включения консерванта.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления лекарственное средство, содержащее антитело к PD-1 в качестве антагониста PD-1, может быть предусмотрено в виде жидкого состава или приготовлено путем разбавления лиофилизированного порошка стерильной водой для инъекций перед применением. В WO 2012/135408 описано приготовление жидких и лиофилизированных лекарственных средств, содержащих пембролизумаб, которые подходят для использования в настоящем изобретении. В соответствии с некоторыми вариантами осуществления лекарственное средство, содержащее пембролизумаб, предусмотрено в стеклянном флаконе, который содержит приблизительно 100 мг пембролизумаба в 4 мл раствора. Каждый 1 мл раствора содержит 25 мг пембролизумаба и составлен в: L-гистидине (1,55 мг), полисорбате 80 (0,2 мг), сахарозе (70 мг) и воде для инъекций, USP. Раствор требует разбавления для в/в инфузии.

В соответствии с некоторыми вариантами осуществления лекарственное средство, содержащее антитело к TIGIT, может быть предусмотрено в виде жидкого состава или приготовлено путем разбавления лиофилизированного порошка стерильной водой для инъекций перед применением. В соответствии с одним вариантом осуществления жидкий состав содержит приблизительно 10-100 мг/мл антитела к TIGIT; приблизительно 7% (масс./об.) сахарозы; приблизительно 0,02% (масс./об.) полисорбата 80; приблизительно 10 мМ L-гистидинового буфера при рН приблизительно 5,8-6,0; и от приблизительно 10 мМ до приблизительно 15 мМ L-метионина.

Лекарственные средства, описанные в настоящем документе, могут быть предусмотрены в виде набора, который содержит первый контейнер, второй контейнер и листок-вкладыш. Первый контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, содержащего антагонист PD-1, второй контейнер содержит 2,1-700 мг лекарственного средства, содержащего антитело к TIGIT, и листок-вкладыш или этикетку, которая содержит инструкции по лечению пациента, больного раком, принимающего лекарственные средства. Первый и второй контейнеры могут иметь одинаковую или разную форму (например, флаконы, шприцы и бутылки) и/или материал (например, пластмассу или стекло). Набор может дополнительно содержать другие материалы, которые могут быть пригодны для введения лекарственных средств, такие как разбавители, фильтры, пакеты и системы, иглы и шприцы для в/в вливаний. В соответствии с некоторыми предпочтительными вариантами осуществления набора антагонист PD-1 представляет собой антитело к PD-1, и в инструкциях указано, что лекарственные средства предназначены для лечения пациента, страдающего раком, который имеет положительный результат в отношении экспрессии PD-L1 на основе IHC анализа.

Эти и другие аспекты настоящего изобретения, включая иллюстративные конкретные варианты осуществления, перечисленные ниже, будут очевидны из идей, содержащихся в настоящем документе.

Иллюстративные конкретные варианты осуществления настоящего изобретения

1. Способ лечения рака у пациента, предусматривающий введение пациенту от 2,1 мг до 700 мг антитела к TIGIT, содержащего тяжелую цепь и легкую цепь, при этом легкая цепь содержит CDR легкой цепи SEQ ID NO: 26, 27 и 28, а тяжелая цепь содержит CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31.

2. Способ по варианту осуществления 1, где антитело к TIGIT вводят с помощью внутривенной инфузии.

3. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 2,1 мг антитела к TIGIT.

4. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 7 мг антитела к TIGIT.

5. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 21 мг антитела к TIGIT.

6. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 70 мг антитела к TIGIT.

7. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 200 мг антитела к TIGIT.

8. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 210 мг антитела к TIGIT.

9. Способ по варианту осуществления 1, где пациенту вводят 700 мг антитела к TIGIT.

10. Способ по любому из вариантов осуществления 1-9, где пациенту вводят антитело к TIGIT в день 1, а затем раз в три недели после этого.

11. Способ по любому из вариантов осуществления 1-10, где тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

12. Способ по любому из вариантов осуществления 1-11, где антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22.

13. Способ по любому из вариантов осуществления 1-10, где антитело к TIGIT представляет собой вариант 31С6.

14. Способ по любому из вариантов осуществления 1-13, где антитело к TIGIT вводят совместно с антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 или их антигенсвязывающим фрагментом.

15. Способ по любому из вариантов осуществления 1-13, где антитело к TIGIT составляют совместно с антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 или их антигенсвязывающим фрагментом.

16. Способ по вариантам осуществления 14 или 15, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с PD-1 человека и блокирует связывание PD-L1 человека с PD-1 человека.

17. Способ по варианту осуществления 16, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент также блокирует связывание PD-L2 человека с PD-1 человека.

18. Способ по варианту осуществления 17, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8.

19. Способ по варианту осуществления 18, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4.

20. Способ по варианту осуществления 19, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5.

21. Способ по варианту осуществления 17, где антитело к PD-1 представляет собой пембролизумаб.

22. Способ по варианту осуществления 17, где антитело к PD-1 представляет собой вариант пембролизумаба.

23. Способ по варианту осуществления 14, где антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.

24. Способ по варианту осуществления 14, где антитело к PD-L1 представляет собой атезолизумаб, дурвалумаб или авелумаб.

25. Способ по любому из вариантов осуществления 18-24, где антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

26. Способ по любому из вариантов осуществления 18-24, где антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого.

27. Способ по вариантам осуществления 14 или 15, где антитело к PD-1 представляет собой гуманизированное антитело к PD-1, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 6, 7 и 8, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 1, 2 и 3; и антитело к TIGIT представляет собой гуманизированное антитело к TIGIT, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 26, 27 и 28.

28. Способ по вариантам осуществления 14 или 15, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

29. Способ по вариантам осуществления 14 или 15, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 22.

30. Способ по любому из вариантов осуществления 27-29, где антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

31. Способ по любому из вариантов осуществления 27-29, где антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1 раз в три недели.

32. Способ по любому из вариантов осуществления 27-29, где 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 200 мг антитела к TIGIT.

33. Способ по любому из вариантов осуществления 1-32, где рак выбирают из группы, состоящей из: НМРЛ, колоректального рака, рака желудка, рака молочной железы, рака шейки матки, рака яичников, рака эпителия, рака маточной трубы или первичной перитонеальной карциномы.

34. Способ по варианту осуществления 33, где рак представляет собой НМРЛ.

35. Способ по варианту осуществления 34, дополнительно предусматривающий введение комбинации (i) карбоплатина и пеметрекседа, или (ii) карбоплатина и паклитаксела.

36. Способ по любому из вариантов осуществления 1-35, где индивидуум ранее не получал терапию антителом PD-1 или антителом к PD-L1, или подтверждено прогрессирующее течение при получении предшествующей терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1.

37. Фармацевтическая композиция, содержащая 200 мг пембролизумаба или варианта пембролизумаба, 200 мг 31С6 или варианта 31С6 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

38. Применение антитела к TIGIT, содержащего тяжелую цепь и легкую цепь, где легкая цепь содержит CDR легкой цепи SEQ ID NO: 26, 27 и 28, а тяжелая цепь содержит CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31 при изготовлении лекарственного средства для лечения рака у субъекта/пациента.

39. Применение по варианту осуществления 38, где антитело к TIGIT составляют для введения и/или вводят с помощью внутривенной инфузии.

40. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 2,1 мг антитела к TIGIT.

41. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 7 мг антитела к TIGIT.

42. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 21 мг антитела к TIGIT.

43. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 70 мг антитела к TIGIT.

44. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 200 мг антитела к TIGIT.

45. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 210 мг антитела к TIGIT.

46. Применение по варианту осуществления 38 или 39, где пациенту вводят 700 мг антитела к TIGIT.

47. Применение по любому из вариантов осуществления 38-46, где пациенту вводят антитело к TIGIT в день 1, а затем раз в три недели после этого.

48. Применение по любому из вариантов осуществления 1-10, где тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

49. Применение по любому из вариантов осуществления 38-48, где антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 22.

50. Применение по любому из вариантов осуществления 38-47, где антитело к TIGIT представляет собой вариант 31С6.

51. Применение по любому из вариантов осуществления 38-50, где антитело к TIGIT вводят совместно с антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 или их антигенсвязывающим фрагментом.

52. Применение по любому из вариантов осуществления 38-50, где антитело к TIGIT составляют совместно с антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 или их антигенсвязывающим фрагментом.

53. Применение по вариантам осуществления 51 или 52, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с PD-1 человека и блокирует связывание PD-L1 человека с PD-1 человека.

54. Применение по варианту осуществления 53, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент также блокирует связывание PD-L2 человека с PD-1 человека.

55. Применение по варианту осуществления 54, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) CDR легкой цепи SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и (b) CDR тяжелой цепи SEQ ID NO: 6, 7 и 8.

56. Применение по варианту осуществления 55, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4.

57. Применение по варианту осуществления 56, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5.

58. Применение по любому из вариантов осуществления 51-54, где антитело к PD-1 представляет собой пембролизумаб.

59. Применение по любому из вариантов осуществления 51-54, где антитело к PD-1 представляет собой вариант пембролизумаба.

60. Применение по вариантам осуществления 51 или 52, где антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.

61. Способ по варианту осуществления 14, где антитело к PD-L1 представляет собой атезолизумаб, дурвалумаб или авелумаб.

62. Применение по любому из вариантов осуществления 55-58, где антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

63. Применение по любому из вариантов осуществления 55-58, где антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого.

64. Применение по вариантам осуществления 51 или 52, где антитело к PD-1 представляет собой гуманизированное антитело к PD-1, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 6, 7 и 8, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 1, 2 и 3; и антитело к TIGIT представляет собой гуманизированное антитело к TIGIT, которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR тяжелой цепи под SEQ ID NO: 29, 30 и 31, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR легкой цепи под SEQ ID NO: 26, 27 и 28.

65. Применение по вариантам осуществления 51 или 52, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 9, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 25, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 24.

66. Применение по вариантам осуществления 51 или 52, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 10, а легкая цепь содержит SEQ ID NO: 5; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь и легкую цепь, и при этом тяжелая цепь содержит SEQ ID NO: 23, а легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 22.

67. Применение по любому из вариантов осуществления 64-66, где антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

68. Применение по любому из вариантов осуществления 64-66, где антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1 раз в три недели.

69. Применение по любому из вариантов осуществления 64-66, где 200 мг антитела к PD-1 составляют совместно с 200 мг антитела к TIGIT.

70. Применение по любому из вариантов осуществления 38-69, где рак выбирают из группы, состоящей из: НМРЛ, колоректального рака, рака желудка, рака молочной железы, рака шейки матки, рака яичников, рака эпителия, рака маточной трубы или первичной перитонеальной карциномы.

71. Применение по варианту осуществления 70, где рак представляет собой НМРЛ.

72. Применение по любому из вариантов осуществления 38-71, дополнительно предусматривающее применение комбинации (i) карбоплатина и пеметрекседа, или (ii) карбоплатина и паклитаксела.

73. Применение по любому из вариантов осуществления 38-72, где индивидуум ранее не получал терапию антителом PD-1 или антителом к PD-L1, или подтверждено прогрессирующее течение при получении предшествующей терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1.

Общие методы

Стандартные методы молекулярной биологии описаны в работах Sambrook, Fritsch and Maniatis (1982 & 1989 2^nd Edition, 2001 3^rd Edition) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook and Russell (2001) Molecular Cloning, 3^rd ed, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Wu (1993) Recombinant DNA, Vol.217, Academic Press, San Diego, CA). Стандартные методы также находятся в работе Ausbel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vols. 1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY, которая описывает клонирование в бактериальных клетках и мутагенез ДНК (том 1), клонирование в клетках млекопитающих и дрожжах (том 2), гликоконъюгаты и экспрессию белков (том 3) и биоинформатику (том 4).

Описаны методы очистки белков, включая иммуно преципитацию, хроматографию, электрофорез, центрифугирование и кристаллизацию (Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol.1, John Wiley and Sons, Inc., New York). Описаны химический анализ, химическая модификация, посттрансляционная модификация, получение гибридных белков, гликозилирование белков (см., например, Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol.2, John Wiley and Sons, Inc., New York; Ausubel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vol.3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp.16.0.5-16.22.17; Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis, MO; pp.45-89; Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp. 384-391). Описаны получение, очистка и фрагментация поликлональных и моноклональных антител (Coligan, et al. (2001) Current Protcols in Immunology, Vol.1, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow and Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow and Lane, выше). Доступны стандартные методики для характеристики взаимодействий лиганд/рецептор (см., например, Coligan, et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol.4, John Wiley, Inc., New York). Могут быть получены моноклональные, поликлональные и гуманизированные антитела (см., например, Sheperd and Dean (eds.) (2000)MonoclonalAntibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY; Kontermann and Dubel (eds.) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow and Lane (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, pp.139-243; Carpenter, et al. (2000) J. Immunol. 165:6205; He, et al. (1998) J. Immunol. 160:1029; Tang et al. (1999) J. Biol. Chem. 274:27371-27378; Baca et al. (1997) J. Biol. Chem. 272:10678-10684; Chothia et al. (1989) Nature 342:877-883; Foote and Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487-499; патент США №6329511).

Альтернативой гуманизации является использование библиотек человеческих антител, экспонируемых на фагах, или библиотек человеческих антител у трансгенных мышей (Vaughan et al. (1996) Nature Biotechnol. 14:309- 314; Barbas (1995) Nature Medicine 1:837-839; Mendez etal. (1997) Nature Genetics 15:146-156; Hoogenboom and Chames (2000) Immunol. Today 21:371-377; Barbas et al. (2001) Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York; Kay et al. (1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA; de Bruin et al. (1999)NatureBiotechnol. 17:397-399).

Для создания антител очистка антигена не требуется. Животных можно иммунизировать клетками, несущими антиген, представляющий интерес. Затем спленоциты могут быть выделены от иммунизированных животных, и спленоциты могут сливаться с линией клеток миеломы с образованием гибридомы (см., например, Meyaard et al. (1997) Immunity 7:283-290; Wright et al. (2000) Immunity 13:233-242; Preston et al., выше; Kaithamana et al. (1999) J. Immunol. 163:5157-5164).

Антитела могут быть конъюгированы, например, с небольшими лекарственными молекулами, ферментами, липосомами, полиэтиленгликолем (PEG). Антитела пригодны для терапевтических, диагностических целей, наборов или других целей и включают антитела, связанные, например, с красителями, радиоизотопами, ферментами или металлами, например, коллоидным золотом (см., например, Le Doussal etal. (1991) J. Immunol. 146:169-175; Gibellini et al., (1998) J. Immunol. 160:3891-3898; Hsing and Bishop (1999) J. Immunol. 162:2804-2811; Everts et al. (2002) J. Immunol. 168:883-889).

Доступны методы проточной цитометрии, включая сортировку клеток с активацией флуоресценции (FACS) (см., например, Owens, et al. (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, N J; Givan (2001) Flow Cytometry, 2^nd ed.; Wiley-Liss,Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ). Доступны флуоресцентные реагенты, подходящие для модификации нуклеиновых кислот, включая праймеры и зонды нуклеиновых кислот, полипептиды и антитела, для использования, например, в качестве диагностических реагентов (Molecular Probesy (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, Сент-Луис, Миссури).

Описаны стандартные методы гистологического анализа иммунной системы (см., например, Muller- Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY; Hiatt, et al. (2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA; Louis, et al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY).

Доступны пакеты программного обеспечения и базы данных для определения, например, антигенных фрагментов, лидерных последовательностей, фолдинга белков, функциональных доменов, сайтов гликозилирования и выравнивания последовательностей (см., например, GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, et al. (2000) Bioinformatics 16: 741-742; Menne, et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16:741-742; Wren, et al. (2002) Comput. Methods Programs Biomed 68:177-181; von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133:17-21; von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14:4683-4690).

Примеры

Пример 1: Клинические исследования антитела к TIGIT при распространенных солидных опухолях

Это исследование представляло собой многоцентровое открытое исследование с повышение дозы монотерапии антителом к TIGIT 31С6 (Часть А, группа 1) и 31С6 в комбинации с пембролизумабом (Часть А, группа 2). Часть В исследования представляет собой фазу подтверждения дозы для оценки рекомендуемой дозы для фазы 2 для антитела 31С6 при использовании в качестве монотерапии и в комбинации с пембролизумабом. Противоопухолевую активность антитела 31С6 при использовании в качестве монотерапии и в комбинации с пембролизумабом у участников с распространенными солидными опухолями оценивали в Части В в нерандомизированном исследовании. В части В оценивали 2 дозы антитела 31С6 в комбинации у участников, больных раком, ранее не получавших лечение белком запрограммированной клеточной смерти 1 (PD-1), с использованием рандомизированного исследования 1:1.

Во время исследования в Части А субъектов распределяли в 1 из 2 групп лечения:

Группа 1: 31С6 в качестве монотерапии с повышением доз, составляющих 2,1 мг, 7 мг, 21 мг, 70 мг, 210 мг и 700 мг, раз в 3 недели (1 р./3 нед.) с помощью внутривенной инфузии (в/в).

Группа 2: 31С6 с повышением доз, составляющих 2,1 мг, 7 мг, 21 мг, 70 мг, 210 мг и 700 мг, раз в 3 недели (1 р./3 нед.) внутривенно в комбинации с пембролизумабом (200 мг 1 р./3 нед.) в/в.

Часть А включала взрослых с метастатической солидной опухолью, для которой нет клинически эффективного лечения, у которых было подлежащее измерению заболевание в соответствии с RECIST и ECOG PS 0-1; предыдущее лечение ингибиторами CTLA-4, PD-1 или PD-L1 разрешали, если оно не было прекращено в результате АЕ. Повышение дозы соответствовало схеме модифицированного интервала вероятности токсичности с целевой частотой дозолимитирующей токсичности ~30%. Пембролизумаб вводили по 200 мг 1 р./3 нед. Антитело к TIGIT 31С6 вводили в дозе от 2,1 до 700 мг. Антитело к TIGIT и пембролизумаб вводили в течение 35 циклов или до прогрессирования, непереносимой токсичности или решения исследователя или пациента. Во время повышения дозы на каждую дозу требовалось минимум 3 пациента. Повышение дозы и подтверждение завершали после того, как 14 пациентов прошли лечение при любом уровне дозы. Первичные конечные точки представляют собой безопасность и переносимость антитела к TIGIT 31С6 в качестве монотерапии и в комбинации с пембролизумабом для установления соответствующих рекомендуемых доз для фазы 2 (RP2D). Вторичными конечными точками являются РК антитела к TIGIT 31С6 в качестве монотерапии и в комбинации с пембролизумабом, РК пембролизумаба, вводимого с антителом к TIGIT 31С6, и ORR (RECIST v1.1, обзор исследователя) для антитела к TIGIT 31С6 в качестве монотерапии и с пембролизумабом.

Часть В представляет собой подтверждение дозы 31С6 в комбинации с пембролизумабом. Кроме того, в расширенных когортах оценивали противоопухолевую эффективность 31С6 в качестве монотерапии и в комбинации с пембролизумабом. Включение в расширенную часть исследования было открытым для субъектов со следующими видами рака:

- НМРЛ, резистентный к лечению ингибиторами PD-1/PD-L1,

- НМРЛ, по поводу которого ранее отсутствовало лечение ингибиторами PD-1/PD-L1,

- колоректальный рак,

- рак молочной железы,

- рак эпителия яичников, рак маточной трубы или первичная перитонеальная карцинома.

Характеристики исходного уровня для Части А исследования представлены в следующих таблицах: Характеристики исходного уровня: табл.4 (дата прекращения сбора данных: 16 августа 2018 г.).

Результаты:

В этом первом исследовании на людях антитело к TIGIT 31С6, вводимое в виде монотерапии и в комбинации с пембролизумабом (200 мг), хорошо переносилось и имело контролируемую безопасность во всех испытанных дозах. Подбор дозы завершился без DLT, и летальные исходы, связанные с лечением, отсутствовали. На Фиг. 1 представлены РК данные как для монотерапии, так и для комбинированной терапии. Распределение пациентов в случае монотерапии было следующим: 2 продолжали получать лечение и 32 прекратили прием препарата (27 с прогрессирующим заболеванием, 2 по решению врача и 3 отказа от лечения). Тринадцать (13) пациентов перешли на комбинированную терапию пембролизумабом.

В случае комбинации антитела к TIGIT31C6 и пембролизумаба повышение дозы завершали для каждого заранее заданного уровня дозы. Никаких DLT не наблюдали. Распределение пациентов в случае комбинированной терапии было следующим: 7 продолжали лечение, 27 прекратили лечение (25 с прогрессирующими заболеваниями, 1 по решению врача и 1 отказ от лечения). Краткое описание нежелательных явлений приведено ниже:

Кроме того, перспективную противоопухолевую активность наблюдали в популяции, подвергшейся предварительному лечению, с множественными типами опухолей, особенно при комбинированной терапии. В частности, 3% ORR и 35% DCR наблюдали только в случае монотерапии 31С6, а 19% ORR и 47% DCR наблюдали в случае комбинированной терапии 31С6 и пембролизумабом. Ответы наблюдалии у пациентов, которые перешли с монотерапии на комбинированную терапию. На Фиг. 2А и Фиг. 2В представлено наилучшее процентное изменение целевых поражений по сравнению с исходным уровнем (RECIST v1.1, обзор исследования). На Фиг. 3А и Фиг. 3В представлена диаграмма продолжительности лечения и ответа (RECIST v1.1, обзор исследователя). Краткое описание противоопухолевой активности (RECIST v1.1, обзор исследователя) представлено ниже:

Частичный ответ наблюдали у 75-летней пациентки с раком яичников с BRCA дикого типа. Пациентка получила 4 предыдущих курса химиотерапии и не получала предшествующей терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1. Пациентка получала 2,1 мг монотерапии антителом к TIGIT 31С6 с документом PD в соответствии с RECIST, затем переходила на комбинированную терапию 2,1 мг антитела к TIGIT 31С6 совместно с 200 мг пембролизумаба. Частичный ответ наблюдали через 9 недель после перехода. В частности, наблюдали уменьшение объема опухоли на 85%, уменьшение размеров всех поражений (брыжеечные отложения, лимфатические узлы (парааортальные, подвздошные, шейные)). Ответ продолжался через 13 месяцев. Лечение было прекращено вследствие сыпи.

Пример 2:

Часть В исследования фазы I

Схема части В исследования фазы I, описанная выше в Примере 1, представлена следующим образом:

Кроме того, рассматриваются следующие комбинации:

31С6 + пембролизумаб + карбоплатин и паклитаксел (таксол) при плоскоклеточном НМРЛ, ранее не леченном PD1 31С6 + пембролизумаб + карбоплатин при неплоскоклеточном НМРЛ, ранее не леченном PD1

31С6 + пембролизумаб + карбоплатин и таксол при плоско клеточном НМРЛ, ранее не леченном PD1

Результаты:

Обзор безопасности

По состоянию на сентябрь 2019 года было отмечено, что профиль побочных эффектов 31С6 и пембролизумаба сопоставим с пембролизумабом в отдельности. Частоты побочных эффектов были сходными и при монотерапии 31С6 и комбинированной терапии 31С6 и пембролизумабом. Недостаточность надпочечников и инфузионные реакции возникали с большей частотой, чем рефлекторная симпатическая дистрофия (RSD), вызванная пембролизумабом. См. обзор Табл. 10.

Было замечено, что пациенты, которым вводили дозы, такие как 200 мг, имели линейное значение клиренса, согласующееся с предыдущими наблюдениями по данным Части А (200 мг: CL=0,49 л/день и t1/2=9,9 дней; 700 мг: CL=0,48 л/день и t1/2=9,4 дней). РК вариабельность также была проанализирована и показала последовательные результаты (CV в CL=46%).

Эффективность

Противоопухолевую активность анализировали в различных группах пациентов, исследованных в Части В.НМРЛ, ранее не леченный PD-1

Ответы наблюдали у наивных пациентов с НМРЛ и они показаны на Фиг. 4 и в Табл. 11 (RECIST v1.1, обзор исследователя). Данные ORR показывают, что комбинация 31С6 и пембролизумаба выше, чем в контроле, несмотря на включение пациентов со всеми уровнями PD-L1 и более прогрессивной линией лечения. У пациентов с НМРЛ, включенных в KN-010, которые получали одну или более предыдущих линий терапии и имели TPS≥1%, ORR составляла 18%.

KN-010: 100% пациентов с TPS≥1, 29% пациентов являются 3L+пембролизумаб+31С6: 52% пациентов с TPS≥1, 60% субъектов являются 3L+

Кроме того, были получены данные, показывающие наилучший ответ в соответствии с RECIST1.1, полученный исследователем, у субъектов с рефрактерным к PD-1 НМРЛ, получавших либо монотерапию антителом 31С6 (200 мг), либо комбинированную терапию 31С6 (200 мг) и пембролизумабом (200 мг). См. Табл. 12. Активность монотерапии наблюдали при невыбранном НМРЛ, рефрактерном к PD1, также наблюдали заметный результат ORR. Отмечали ответы на монотерапию, включая полный ответ. Результаты ORR монотерапии для антитела 31С6 (200 мг) были аналогичны результатам для комбинированной терапии.

83% субъектов с НМРЛ, рефрактерным к PD-1, получавших лечение 31С6, имеют 3L+.

Данные о продолжительности ответа у субъектов с НМРЛ, рефрактерным к PD-1, получавших 31С6 в отдельности (200 мг) или комбинированную терапию пембролизумабом (200 мг), показаны в Табл. 13 и на Фиг. 5А и 5В.

Рак яичников

Обзор данных по эффективности для группы пациентов с раком яичников (часть А и часть В) показан на Фиг. 6ив Табл. 14. В группе субъектов с раком яичников, ранее не получавших PD1 (резистентный к терапии платиной), было замечено, что ORR составила 19% (n=27). Дополнительное обогащение наблюдалось в опухолях, положительных по PD-L1 (CPS1, ORR 40%). Среднее время ответа составляло 3,5 +/- 2,3 месяца, а медиана DOR составляла 4,1-11,2 + месяца.

Пембролизумаб +31С6: (74% субъектов являются 3L+); все три подтвержденных субъекта, отвечающих на лечение, являются 3L+отвечающими на лечение, BRCA-отрицательными.

Предварительную эффективность исследовали на когорте пациентов с резистентным к платине раком яичников в Части В (n=20) после наблюдения 2 объективных ответов у субъектов с раком яичников (из 7 в целом) при повышении дозы. У субъектов с раком яичников, получавших комбинированную терапию антителом 31С6 и пембролизумабом (Части А и В), ORR составляла 19% (5/27) с DOR 4,2-11,4 + месяца. Из 27 пациенток с раком яичников данные по PD-L1 были доступны для 14 субъектов. В опухолях, положительных по PD-L1 (CPS1), от пациентов с раком яичников, получавших антитело 31С6, ORR составляла 40% (2/5) по сравнению с 14% у субъектов с PD-L1 + раком яичников, получавших монотерапию пембролизумабом. Примечательно, что все субъекты с раком яичников, отвечавшие на лечение в этом исследовании, были BRCA-отрицательными. Таким образом, на основании эффективности и переносимости, но без ограничения какой-либо конкретной терапией или механизмом, возможно, что монотерапия антителом 31С6 и комбинированная терапия антителом 31С6 и пембролизумабом может представлять собой очень перспективный вариант лечения без химиотерапии в этой популяции с высоким уровнем неудовлетворенной потребности.

Рак молочной железы

В этом исследовании отсутствовали пациенты с терапией первой линии, поэтому в исследование включали всех пациентов 2L+, ранее получавших PD-1/L-1. Среди этих пациентов определяли следующие характеристики: 1 DLT (фебрильная нейтропения) и 7 из 10 пациентов продолжают участие в исследовании. Пациенты, прекратившие лечение, имели следующие характеристики: У 1 пациента было клиническое PD, у 2 пациентов было АЕ [PNA (не связанное) и повышение LFT G3 (связанное с лечением (т.е., антитело 31С6 и пембролизумаб)+пеметрексед)]. В этом исследовании 10 пациентов, участвовавших в исследовании, прошли визуализацию, все из них имели только одну визаализацию (7 SD, 2 PR, 1 PD). Данные этого исследования рака молочной железы показаны на Фиг. 7 и в Табл. 15.

Сопроводительные данные для пациентов с CRC и раком молочной железы представлены на Фиг. 8 и в Табл. 16.

Рак шейки матки

На момент прекращения сбора данных 7 и 8 пациентов продолжают принимать дозу 200 и 700 мг соответственно. Данные представлены на Фиг. 9А и 9 В и в Табл. 17. В этой ранней временной точке значительные различия в эффективности или безопасности между группами комбинированного лечения 31С6 в дозе 200 и 700 мг с пембролизумабом отсутствовали.

В заключение было отмечено, что монотерапия антителом 31С6 хорошо переносилась. Любые побочные эффекты были переносимы, и профиль побочных эффектов, наблюдаемый для антитела 31С6 в комбинации с пембролизумабом, был аналогичен результатам, наблюдаемым при монотерапии пембролизумабом. С точки зрения доз и РК данных наблюдали, что период полужизни антитела 31С6 составлял примерно 10 дней. Наблюдали нормальную РК вариабельность, и наблюдаемая частота ADA составляла 10-20%. Хотя многие из доз показали благоприятные результаты, предварительная RP2D 200 мг остается предпочтительной. Данные показывают, что воздействие лечения антителами сохранялось на протяжении всего интервала введения. Первоначальные данные показывают сопоставимую безопасность/эффективность для 200 мг и 700 мг антитела 31С6 при рандомизированном сравнении доз.

Среди благоприятных данных об эффективности было отмечено, что имели место значимые сигналы клинической эффективности для лечения пациентов с НМРЛ (ранее не получавших лечение PD-1 и резистентных к PD-1) и пациентов с раком яичников с использованием антитела 31С6 в качестве монотерапии, а также с комбинированной терапией как антителом 31С6, так и пембролизумабом. Что наиболее важно, были доказательства того, что лечение антителом 31С6 (как часть монотерапии, так и комбинированной терапии) имело противоопухолевую активность в каждом из исследованных видов рака. Например, противоопухолевую активностью монотерапии наблюдали у пациентов с НМРЛ, рефрактерных к PD-1. Данные включали CR у пациента, получавшего цепь монотерапии 31С6 и 113 в тяжелой цепи.

Литературные источники

1. Sharpe, А.Н, Wherry, E.J., Ahmed R. and Freeman G.J. The function of programmed cell death 1 and its ligands in regulating autoimmunity and infection. Nature Immunology (2007); 8:239-245.

2. Dong H. et al. Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion. Nat Med. 2002 Aug;8(8):793-800.

3. Yang et al. PD-1 interaction contributes to the functional suppression of T-cell responses to human melanoma cells in vitro. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008 Jun;49(6 (2008): 49: 2518-2525.

4. Ghebeh et al. The B7-H1 (PD-L1) T lymphocyte-inhibitory molecule is expressed in breast cancer patients with infiltrating ductal carcinoma: correlation with important high-risk prognostic factors. Neoplasia (2006) 8: 190-198.

5. Hamanishi J. et al. Programmed cell death 1 ligand 1 and tumor-infiltrating CD8+T lymphocytes are prognostic factors of human ovarian cancer. Proceeding of the National Academy of Sciences (2007): 104: 3360-3365.

6. Thompson R.H. et al. Significance of B7-H1 overexpression in kidney cancer. Clinical genitourin Cancer (2006): 5: 206-211.

7. Nomi, T. Sho, M., Akahori, Т., et al. Clinical significance and therapeutic potential of the programmed death-1 ligand/programmed death-1 pathway in human pancreatic cancer. Clinical Cancer Research (2007); 13:2151-2157.

8. Ohigashi Y. et al. Clinical significance of programmed death-1 ligand-1 and programmed death-1 ligand 2 expression in human esophageal cancer. Clin. Cancer Research (2005): 11: 2947-2953.

9. Inman et al. PD-L1 (B7-H1) expression by urothelial carcinoma of the bladder and BCG- induced granulomata: associations with localized stage progression. Cancer (2007): 109: 1499- 1505.

10. Shimauchi T. et al. Augmented expression of programmed death-1 in both neoplasmatic and nonneoplastic CD4+T-cells in adult T-cell Leukemia/ Lymphoma. Int. J. Cancer (2007): 121:2585-2590.

11. Gao et al. Overexpression of PD-L1 significantly associates with tumor aggressiveness and postoperative recurrence in human hepatocellular carcinoma. Clinical Cancer Research (2009) 15: 971-979.

12. Nakanishi J. Overexpression of B7-H1 (PD-L1) significantly associates with tumor grade and postoperative prognosis in human urothelial cancers. С oncer Immunol Immunother. (2007) 56:1173- 1182.

13. Hino et al. Tumor cell expression of programmed cell death-1 is aprognostic factor for malignant melanoma. Cancer (2010): 00: 1-9.

14. Ghebeh H. Foxp3+tregs and B7-H1+/PD-1+T lymphocytes co-infiltrate the tumor tissues of high-risk breast cancer patients: implication for immunotherapy. BMC Cancer. 2008 Feb 23;8:57.

15. Ahmadzadeh M. et al. Tumor antigen-specific CD8 T cells infiltrating the tumor express high levels of PD-1 and are functionally impaired. Blood (2009) 114: 1537-1544.

16. Thompson R.H. et al. PD-1 is expressed by tumor infiltrating cells and is associated with poor outcome for patients with renal carcinoma. Clinical Cancer Research (2007) 15: 1757-1761.

Все литературные источники, цитируемые в настоящем документе, включены посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация, запись в базе данных (например, последовательности в Genbank или записи в GenelD), патентная заявка или патент были специально и отдельно указаны для включения посредством ссылки. Это заявление о включении посредством ссылки предусмотрено заявителями в соответствии с § 1.57(b)(1) 37 C.F.R., относящемуся к каждой отдельной публикации, записи в базе данных (например, последовательностям в Genbank или записям в GenelD), патентной заявке или патенту, каждое из которых четко идентифицировано в соответствии с § 1.57(b)(2) 37 C.F.R., даже если такое упоминание не находится непосредственно возле специального заявления о включении посредством ссылки. Включение в описание специальных заявлений о включении посредством ссылки, если таковые имеются, никоим образом не ослабляет это общее заявление о включении посредством ссылки. Упоминание литературных источников в настоящем документе не предназначено как признание того, что литературный источник относится к предшествующему уровню техники, и не является признанием в отношении содержания или даты этих публикаций или документов. В той степени, в которой ссылки предусматривает определение заявленного термина, которое противоречит определениям, приведенным в настоящем описании, определения, представленные в настоящем описании, должны использоваться для интерпретации заявленного изобретения.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> МЕРК ШАРП ЭНД ДОУМ КОРП.

ЦАЙ, Минмэй

ЧАРТАШ, Эллиот, К.

ХИЛИ, Джэйн Энн

ЛИ, Томми Руоси

ПРЕДОЮ, Ралука Андрейа

МАЙАУАЛА, Капил

УИЛЛЬЯМС, Сибил, М. Г.

ЦЗЭН, Чжэнь

ЛАЛА, Маллика

<120> РЕЖИМ ВВЕДЕНИЯ АНТИТЕЛА К TIGIT ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА

<130> 24663-US-PCT

<150> 62/755805

<151> 2018-11-05

<160> 33

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 15

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 1

Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Leu His

1 5 10 15

<210> 2

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 2

Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser

1 5

<210> 3

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 3

Gln His Ser Arg Asp Leu Pro Leu Thr

1 5

<210> 4

<211> 111

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 4

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg

85 90 95

Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 5

<211> 218

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 5

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg

85 90 95

Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 6

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 6

Asn Tyr Tyr Met Tyr

1 5

<210> 7

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 7

Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 8

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 8

Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 9

<211> 120

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 9

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 10

<211> 447

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 10

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440 445

<210> 11

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 11

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 12

<211> 440

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 12

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser

115 120 125

Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp

130 135 140

Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr

145 150 155 160

Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr

165 170 175

Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys

180 185 190

Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp

195 200 205

Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala

210 215 220

Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

225 230 235 240

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val

245 250 255

Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val

260 265 270

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln

275 280 285

Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

290 295 300

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly

305 310 315 320

Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro

325 330 335

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr

340 345 350

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

355 360 365

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr

370 375 380

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

385 390 395 400

Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe

405 410 415

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

420 425 430

Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 13

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 13

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Thr Ser Thr Arg Lys Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Ala

<210> 14

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 14

Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 15

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 15

Lys Gln Ser Tyr Asp Val Val Thr

1 5

<210> 16

<211> 112

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 16

Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Thr

20 25 30

Ser Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln

85 90 95

Ser Tyr Asp Val Val Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 17

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 17

Ser Tyr Trp Ile His

1 5

<210> 18

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 18

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Ile His

1 5 10

<210> 19

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 19

Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr His Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Ile

1 5 10 15

Asp

<210> 20

<211> 13

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 20

Ser Gly Trp Leu Ile His Gly Asp Tyr Tyr Phe Asp Phe

1 5 10

<210> 21

<211> 122

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> x=Q или pE (пироглутамат)

<400> 21

Xaa Val His Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Ile His Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Ser Gly Tyr His Glu Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Ile Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Arg Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met His Leu Thr Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gly Trp Leu Ile His Gly Asp Tyr Tyr Phe Asp Phe Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 22

<211> 214

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 22

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu His Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Phe Gly Ser Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 23

<211> 449

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 23

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asp Pro Tyr Asn Asp Gly Ala Lys Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Pro Tyr Gly Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 24

<211> 107

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 24

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu His Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Phe Gly Ser Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 25

<211> 119

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 25

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asp Pro Tyr Asn Asp Gly Ala Lys Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Pro Tyr Gly Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 26

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 26

Arg Ala Ser Glu His Ile Tyr Ser Tyr Leu Ser

1 5 10

<210> 27

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 27

Asn Ala Lys Thr Leu Ala Glu

1 5

<210> 28

<211> 9

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 28

Gln His His Phe Gly Ser Pro Leu Thr

1 5

<210> 29

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 29

Ser Tyr Val Met His

1 5

<210> 30

<211> 17

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 30

Tyr Ile Asp Pro Tyr Asn Asp Gly Ala Lys Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 31

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 31

Gly Gly Pro Tyr Gly Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 32

<211> 290

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 32

Met Arg Ile Phe Ala Val Phe Ile Phe Met Thr Tyr Trp His Leu Leu

1 5 10 15

Asn Ala Phe Thr Val Thr Val Pro Lys Asp Leu Tyr Val Val Glu Tyr

20 25 30

Gly Ser Asn Met Thr Ile Glu Cys Lys Phe Pro Val Glu Lys Gln Leu

35 40 45

Asp Leu Ala Ala Leu Ile Val Tyr Trp Glu Met Glu Asp Lys Asn Ile

50 55 60

Ile Gln Phe Val His Gly Glu Glu Asp Leu Lys Val Gln His Ser Ser

65 70 75 80

Tyr Arg Gln Arg Ala Arg Leu Leu Lys Asp Gln Leu Ser Leu Gly Asn

85 90 95

Ala Ala Leu Gln Ile Thr Asp Val Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Tyr

100 105 110

Arg Cys Met Ile Ser Tyr Gly Gly Ala Asp Tyr Lys Arg Ile Thr Val

115 120 125

Lys Val Asn Ala Pro Tyr Asn Lys Ile Asn Gln Arg Ile Leu Val Val

130 135 140

Asp Pro Val Thr Ser Glu His Glu Leu Thr Cys Gln Ala Glu Gly Tyr

145 150 155 160

Pro Lys Ala Glu Val Ile Trp Thr Ser Ser Asp His Gln Val Leu Ser

165 170 175

Gly Lys Thr Thr Thr Thr Asn Ser Lys Arg Glu Glu Lys Leu Phe Asn

180 185 190

Val Thr Ser Thr Leu Arg Ile Asn Thr Thr Thr Asn Glu Ile Phe Tyr

195 200 205

Cys Thr Phe Arg Arg Leu Asp Pro Glu Glu Asn His Thr Ala Glu Leu

210 215 220

Val Ile Pro Glu Leu Pro Leu Ala His Pro Pro Asn Glu Arg Thr His

225 230 235 240

Leu Val Ile Leu Gly Ala Ile Leu Leu Cys Leu Gly Val Ala Leu Thr

245 250 255

Phe Ile Phe Arg Leu Arg Lys Gly Arg Met Met Asp Val Lys Lys Cys

260 265 270

Gly Ile Gln Asp Thr Asn Ser Lys Lys Gln Ser Asp Thr His Leu Glu

275 280 285

Glu Thr

290

<210> 33

<211> 244

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический полипептид

<400> 33

Met Arg Trp Cys Leu Leu Leu Ile Trp Ala Gln Gly Leu Arg Gln Ala

1 5 10 15

Pro Leu Ala Ser Gly Met Met Thr Gly Thr Ile Glu Thr Thr Gly Asn

20 25 30

Ile Ser Ala Glu Lys Gly Gly Ser Ile Ile Leu Gln Cys His Leu Ser

35 40 45

Ser Thr Thr Ala Gln Val Thr Gln Val Asn Trp Glu Gln Gln Asp Gln

50 55 60

Leu Leu Ala Ile Cys Asn Ala Asp Leu Gly Trp His Ile Ser Pro Ser

65 70 75 80

Phe Lys Asp Arg Val Ala Pro Gly Pro Gly Leu Gly Leu Thr Leu Gln

85 90 95

Ser Leu Thr Val Asn Asp Thr Gly Glu Tyr Phe Cys Ile Tyr His Thr

100 105 110

Tyr Pro Asp Gly Thr Tyr Thr Gly Arg Ile Phe Leu Glu Val Leu Glu

115 120 125

Ser Ser Val Ala Glu His Gly Ala Arg Phe Gln Ile Pro Leu Leu Gly

130 135 140

Ala Met Ala Ala Thr Leu Val Val Ile Cys Thr Ala Val Ile Val Val

145 150 155 160

Val Ala Leu Thr Arg Lys Lys Lys Ala Leu Arg Ile His Ser Val Glu

165 170 175

Gly Asp Leu Arg Arg Lys Ser Ala Gly Gln Glu Glu Trp Ser Pro Ser

180 185 190

Ala Pro Ser Pro Pro Gly Ser Cys Val Gln Ala Glu Ala Ala Pro Ala

195 200 205

Gly Leu Cys Gly Glu Gln Arg Gly Glu Asp Cys Ala Glu Leu His Asp

210 215 220

Tyr Phe Asn Val Leu Ser Tyr Arg Ser Leu Gly Asn Cys Ser Phe Phe

225 230 235 240

Thr Glu Thr Gly

<---

Изобретение относится иммунологии и медицине, в частности к режимам дозирования антитела к TIGIT, пригодным для лечения рака. Изобретение также относится к режиму дозирования в комбинированной терапии, которая включает введение антитела к белку запрограммированной клеточной смерти 1 (PD-1) или лиганду белка запрограммированной смерти 1 (PD-L1) и антитела к TIGIT. Изобретение предлагает способ комбинированной терапии рака с повышенной безопасностью и эффективностью. 30 з.п. ф-лы, 9 ил., 17 табл., 2 пр.

1. Способ лечения рака у пациента, предусматривающий введение пациенту совместного состава, содержащего (i) от 2,1 мг до 700 мг антитела к TIGIT, которое связывается с TIGIT человека, и (ii) антитело к PD-1 или антитело к PD-L1, или их антигенсвязывающий фрагмент, где антитело к TIGIT содержит области CDR легкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности в соответствии с SEQ ID NO: 26, 27 и 28, и области CDR тяжелой цепи, имеющие аминокислотные последовательности в соответствии с SEQ ID NO: 29, 30 и 31, где пациент имеет балл пропорции опухоли в отношении экспрессии PD-L1 ≥1%.

2. Способ по п. 1, где совместный состав вводят с помощью внутривенной инфузии.

3. Способ по п. 1, где пациенту вводят 2,1 мг антитела к TIGIT.

4. Способ по п. 1, где пациенту вводят 7 мг антитела к TIGIT.

5. Способ по п. 1, где пациенту вводят 21 мг антитела к TIGIT.

6. Способ по п. 1, где пациенту вводят 70 мг антитела к TIGIT.

7. Способ по п. 1, где пациенту вводят 200 мг антитела к TIGIT.

8. Способ по п. 1, где пациенту вводят 210 мг антитела к TIGIT.

9. Способ по п. 1, где пациенту вводят 700 мг антитела к TIGIT.

10. Способ по любому из пп. 1-9, где пациенту вводят антитело к TIGIT и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1, или их антигенсвязывающий фрагмент в день 1, а затем раз в три недели после этого.

11. Способ по любому из пп. 1-10, где антитело к TIGIT содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO:25, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 24.

12. Способ по любому из пп. 1-11, где антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 23, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 22.

13. Способ по любому из пп. 1-10, где антитело к TIGIT представляет собой вариант 31C6.

14. Способ по любому из пп. 1-13, где антитело к PD-1 или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой антитело к PD-1, которое специфически связывается с PD-1 человека и блокирует связывание PD-L1 человека с PD-1 человека.

15. Способ по п. 14, где антитело к PD-1 блокирует связывание PD-L2 человека с PD-1 человека.

16. Способ по п. 15, где антитело к PD-1 содержит: области CDR легкой цепи, имеющие аминокислотные последовательности в соответствии с SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и области CDR тяжелой цепи, имеющие аминокислотные последовательности в соответствии с SEQ ID NO: 6, 7 и 8.

17. Способ по п. 16, где антитело к PD-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 4.

18. Способ по п. 16, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 10, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 5.

19. Способ по п. 15, где антитело к PD-1 представляет собой пембролизумаб.

20. Способ по п. 15, где антитело к PD-1 представляет собой вариант пембролизумаба.

21. Способ по любому из пп. 1-13, где антитело к PD-1 представляет собой ниволумаб.

22. Способ по любому из пп. 1-13, где антитело к PD-L1 представляет собой атезолизумаб, дурвалумаб или авелумаб.

23. Способ по любому из пп. 16-22, где антитело к TIGIT и антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

24. Способ по любому из пп. 16-22, где антитело к TIGIT и антитело к PD-1 вводят в дозе 400 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в шесть недель после этого.

25. Способ по любому из пп. 1-13, где антитело к PD-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 4; и антитело к TIGIT содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 25, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 24.

26. Способ по любому из пп. 1-13, где антитело к PD-1 содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 10, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 5; и антитело к TIGIT содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 23, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность в соответствии с SEQ ID NO: 22.

27. Способ по любому из пп. 25, 26, где антитело к PD-1 вводят в дозе 200 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого, а антитело к TIGIT вводят в дозе 700 мг с помощью внутривенной инфузии в день 1, а затем раз в три недели после этого.

28. Способ по любому из пп. 1-27, где рак выбирают из группы, состоящей из: НМРЛ, рака шейки матки, колоректального рака, рака желудка, рака молочной железы, рака яичника, рака эпителия, рака маточной трубы или первичной перитонеальной карциномы.

29. Способ по любому из пп. 1-13, где рак представляет собой НМРЛ.

30. Способ по любому из пп. 1-29, дополнительно предусматривающий введение комбинации (i) карбоплатина и пеметрекседа или (ii) карбоплатина и паклитаксела.

31. Способ по любому из пп. 1-30, где индивидуум ранее не получал терапию антителом PD-1 или антителом к PD-L1, или подтверждено прогрессирующее течение при получении предшествующей терапии антителом к PD-1 или антителом к PD-L1.