ПРИМЕНЕНИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ И СОСТОЯНИЙ, СОПРОВОЖДАЮЩИХСЯ ОКСИДАТИВНЫМ СТРЕССОМ Российский патент 2025 года по МПК A61K33/00 A61K33/14 A61K31/282 A61K31/194 A61K31/191 A61K36/738 A61K47/26 C01B3/00 C01B21/24 A61P1/00 A61P9/00 A61P11/00 A61P13/00 A61P17/00 A61P19/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, и предназначено для лечения заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом.

Уровень техники

Термин «окислительный стресс» (он же оксидативный стресс) впервые был введен в научную терминологию Х. Зисом в 1985 г. Он дал определение окислительного стресса как «нарушения баланса между окислителями и антиоксидантами в пользу первых» (Jones DP, Radi R. Redox Pioneer: Professor Helmut Sies. Antioxidants & Redox signaling. 2014;21(18):2459-2468. doi: 10.1089/ars.2014.6037). За последние годы произошли открытия, свидетельствующие о значительной роли активных форм кислорода (АФК) в развитии различных патологий. Вследствие этого претерпела изменение и концепция «окислительного стресса». Его стали определять как «ситуацию, когда временно или хронически увеличенная установившаяся концентрация АФК нарушает работу клеточного метаболизма и его регуляцию, а в дальнейшем вызывает повреждение клеточных компонентов» (Lushchak VI. Environmentally induced oxidative stress in aquatic animals. Aquatic Toxicology. 2011;101(1):13-30. doi: 10.1016/j.aquatox.2010.10.006). Знание механизма образования АФК и функционирования систем, отвечающих за их ликвидацию, является необходимой предпосылкой для понимания этого определения. Образование АФК происходит в результате реакций Фентона, функционирования ферментативных систем, таких как цитохром Р-450, ксантиноксидазы или дыхательной цепи. Проводившиеся с начала XX века исследования функций ферментов, таких как каталаза и пероксидаза [3, 4], и открытие супероксиддисмутазы (СОД) Дж. Маккордом и М. Фридовичем в 1969 г. привели к пониманию, что клетки имеют специализированные системы для преобразования АФК в менее реакционноспособные соединения. Сегодня в литературе можно найти упоминание о роли окислительного стресса почти при всех известных заболеваниях. Наиболее важна его роль в развитии сердечно-сосудистых и нейродегенеративных заболеваний, а также диабета, онкологических и инфекционных заболеваний, которые отнимают миллионы жизней людей каждый год.

В простейшем случае патологический процесс развивается в результате одновременно происходящих преобразований свободных радикалов как в ходе их образования, так и в процессе их элиминации. В обоих случаях наиболее перспективным является применение антиоксидантной терапии.

В настоящее время известно не только об опасных свойствах, но и о важной роли, которую играют некоторые АФК в передаче сигналов (Thannickal VJ, Fanburg BL. Reactive oxygen species in cell signaling. American Journal of Physiology. 2000;279(6):1005-1028. doi: 10.1007/978-3-642-00390-5_5; röge W. Free radicals in the physiological control of cell function. Physiological Reviews. 2002;82(1):47-95. doi: 10.1152/physrev.00018.2001). Так, АФК, в частности перекись водорода, способны регулировать c-Jun-N-концевые киназы, инициацию апоптоза, подавление опухолевого роста посредством влияния на белок р53, ионные каналы и G-белки рецепторов (Ushio-Fukai M. Vascular signaling through G protein coupled receptors — new concepts. Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 2009;18(2):153-159. doi: 10.1097/mnh.0b013e3283252efe; Ferreri C, Kratzsch S, Landi L, Brede O. Thiyl radicals in biosystems: effects on lipid structures and metabolisms. Cellular & Molecular Life Sciences. 2005;62(7-8):834-847. doi: 10.1007/s00018-005-4475-y).

Сам термин «активные формы кислорода» не отражает полноты всей проблемы. Во многих современных исследованиях АФК рассматриваются наряду с активными формами азота (АФА), реактивными формами углерода (РФУ), хлора (РФХ) и серы (РФС) (Hermes-Lima M. Oxygen in biology and biochemistry: role of free radicals. In: Functional Metabolism: Regulation and Adaptation. Kenneth B. Storey. New York, NY: Wiley-Liss; 2004:319-368; Hermes-Lima M. Oxidative stress and medical sciences. In: Functional Metabolism: Regulation and Adaptation. Kenneth B. Storey. New York, NY: Wiley-Liss; 2004; 369-382).

Во многих случаях образование АФК сопровождает течение заболевания, но не является его причиной. В настоящее время уставлена связь между окислительным стрессом и нейродегенеративными расстройствами, а также сахарным диабетом, развитие которых обусловлено АФК. Как показали исследования, такие заболевания, как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона, связаны с нарушения митохондриальной функции в β-клетках поджелудочной железы, что зачастую приводит к усилению образования АФК. Ключевые белки, играющие важную роль в патогенезе этих заболеваний и являющиеся одними из основных компонентов образования и отложения в тканях специфического белково-полисахаридного комплекса, оказались способными продуцировать АФК (Atwood CS, Obrenovich ME, Liu T, Chan H, Perry G, Smith MA, Martins RA. Amyloid-β: a chameleon walking in two worlds: a review of the trophic and toxic properties of amyloid-β. Brain Research Reviews. 2003;43(1):1-16; Wang C, Liu L, Zhang L, Peng Y, Zhou F. Redox reactions of the α-synuclein-Cu2+ complex and their effects on neuronal cell viability. Biochemistry. 2010;49(37):8134-8142. doi: 10.1016/s0165-0173(03)00174-7).

Поиск оптимального антиоксидантного средства, несмотря на более чем 30-летнюю историю изучения роли радикальных процессов в патогенезе различных заболеваний, продолжается. С точки зрения механизма антиоксидантного действия наиболее эффективным является препарат, предотвращающий образование или непосредственно взаимодействующий с активными метаболитами, связывающий катализаторы и снижающий интенсивность свободнорадикальных процессов, взаимодействующий с гидроперекисями липидов и ингибирующий терминальные этапы перекисного окисления липидов (ПОЛ), способствующий синтезу и образованию эндогенных антиоксидантов. Вместе с тем, при выборе препарата для проведения антиоксидантной терапии, нужно учитывать, что универсального соединения, блокирующего все пути генерации АФК и способного обрывать все виды реакций ПОЛ, не существует. Исходя из своей химической структуры и механизма действия, каждый антиоксидант более или менее эффективно влияет на отдельные звенья свободнорадикальных процессов, не являясь при этом универсальным средством.

Из уровня техники известно использование в лечении заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом, жирорастворимого низкомолекулярного антиоксиданта α-токоферола (Суслина З.А., ФедороваТ.Н., Максимова М.Ю., Рясина Т.В., Стволинский С.Л., Храпова Е.В., Болдырев А.А. Антиоксидантная терапия при ишемическом инсульте. Журнал неврологии и психиатрии имени С.С. Корсакова. 2000;100(190):34-38. 40; Скворцова В.И. Нейропротективная стратегия ишемического инсульта. Врач. 2004;6:26), обладающего выраженным противоишемическим действием в частности. При всех своих неоспоримых преимуществах жирорастворимые антиоксиданты имеют существенный недостаток, связанный с отсроченным периодом действия (после встраивания в структуру мембран через 24 ч после введения).

В последние годы пристальное внимание фармакологов и клиницистов в качестве перспективных лекарственных средств, эффективно регулирующих процессы окисления и перооксидации, привлекли соединения гетероароматических фенолов, в частности производные 3-оксипиридина (3-ОП), которые относятся к простейшим гетероциклическим аналогам ароматических фенолов и в этой связи проявляют антиоксидантные и антирадикальные свойства, являясь структурными аналогами соединений группы витамина В6. Их эффективность основана на способности проникать через гематоэнцефалический барьер. Всесторонние исследования биологических свойств производных 3-ОП позволили установить, что данные вещества могут выступать в качестве потенциальных защитных агентов при воздействии на организм различных повреждающих факторов и в этой связи могут быть использованы в качестве универсальных средств антиоксидантной фармакотерапии. Отечественными учеными на основе 3-ОП разработаны и внедрены в клиническую практику лекарственные препараты эмоксипин и мексидол.

Однако и их использование не лишено недостатков: так, известно, что антиоксидантные свойства эмоксипина проявляются преимущественно в условиях гипоксии (см., например, RU 2475262 C1, 20.02.2013), а имеющаяся у эмоксипина способность снижать свертываемость крови (WO 95/21616, 1995) приводит к необходимости осуществлять лечение данным препаратом под строгим контролем свертывающей системы крови. Кроме того, и эмоксипин и мексидол обладают слабовыраженной антиоксидантной активностью и не имеют адаптогенного воздействия (см., например, Барышникова Е.И. и др., Изучение спектра биологической активности эмоксипина, Ученые записки Брянского государственного университета, 2016(1), https://cyberleninka.ru/article/n/izuchenie-spektra-biologicheskoy-aktivnosti-emoksipina; Катунина Н.П. Изучение антигипоксической активности новых производных 3-оксипиридина, бензимидазола, оксиникотиновой кислоты и меркаптобензимидазола: Автореф. дисс. ...канд. биол. наук.- Смоленск, 2002).

В связи с изложенным, в последнее время производные 3-ОП используются, как правило, в составе композиций, например композиции, обладающей нейропротекторной, антиоксидантной активностью, содержащей 100-250 мг 3-ОП, 100-400 мг холина альфосцерата, 400-500 мг фармацевтически приемлемого производного магния, 10-50 мг пиридоксина, 10-50 мг никотинамида, 15-30 мг идебенона, 15-30 мг убихинона, 5-40 мг фармацевтически приемлемого производного цинка (RU2385722 C1, 10.04.2010). Применение данной фармацевтической композиции для лечения заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом, выбрано нами в качестве прототипа предлагаемого изобретения. Основным недостатком применения указанной композиции является ее низкая эффективность, возможно связанная с изобилием компонентов композиции, каждый из которых в отдельности работает в эксперименте на уменьшение оксидативного стресса, однако в совокупности не только не обладают синергетическим эффектом, а напротив снижают эффективность каждого из компонентов.

Раскрытие сущности изобретения

Технической проблемой, решаемой изобретением, является устранение недостатков прототипа.

Техническим результатом изобретения является повышение эффективности влияния композиции на уменьшение процессов оксидативного стресса.

Повышение эффективности влияния композиции на уменьшение процессов оксидативного стресса объективно проявляется в снижении биохимических маркеров оксидативного стресса.

Указанный технический результат обеспечивает применение фармацевтической композиции, содержащей 18 мл водорода, 0,05-2,0 мл окиси азота и 1-20 мл платимикса на 1 л 0,9% стерильного раствора хлорида натрия путем ее введения в организм человека.

В частности, применение вышеуказанной композиции путем ее введения в организм человека перорально или путем подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции.

В частности, применение вышеуказанной композиции, которую перед введением смешивают с аутологичной плазмой, обогащенной тромбоцитами, в количестве 1:1.

В частности, применение композиции, смешанной с аутологичной плазмой, путем подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции.

Механизм действия композиции и механизм повышения эффективности влияния композиции на уменьшение процессов оксидативного стресса

Водород, в том числе молекулярный водород Н₂, представляет собой уникальный антиоксидант. Благодаря размеру молекулы, он способен легко проникать через клеточные мембраны, а также через мембраны ядер. Доказано, что введение молекулярного водорода снижает активность и численность маркёров окислительного стресса. Кроме того, он обладает избирательным свойствами, а именно нейтрализует цитотоксические OH* и ONOO-, оставляя физиологически необходимые свободные радикалы. Именно цитотоксические OH* и ONOO- вызывают повреждение клеток, реагируя с липидами и белками мембран, ДНК и других клеточных структур. Кроме того, молекулярный водород имеет способность активировать биологические антиоксидантные ферменты (каталаза, супероксиддисмутаза и др.), запуская собственную защитную функцию организма.

Кроме того, водород усиливает антиоксидантный путь Nrf2. Nrf2, является редокс-чувствительным транскрипционным геном, который регулирует антиоксиданты для защиты от окислительного стресса, вызванного повреждением и воспалением. Активация пути Nrf2 инициирует антиоксидантную защиту, которая влияет на гомеостаз АФК через несколько механизмов, включая индукцию катаболизма супероксидов и пероксидов через СОД, регенерацию окисленных кофакторов и белков, увеличение окислительно-восстановительного транспорта. В исследованиях, где изучался механизм молекулярного водорода, путь Nrf2 активировался при окислительном стрессе, и дальнейшее улучшение было обнаружено после обработки водородом. Эти исследования включают повреждение холангиоцитов при гипоксии, повреждение легких при гипероксии, стабилизацию атеросклеротической бляшки, вызванное химиотерапией повреждение яичников, повреждение головного мозга при сепсисе и неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП).

Помимо антиоксидантных свойств молекулярный водород проявляет противовоспалительные эффекты, которые в основном представлены: снижением высвобождения противовоспалительных цитокинов, включая TNF-α, IL-1β, IL-6 и HMGB1, и повышением уровня противовоспалительного цитокина IL-10; снижение высвобождения хемокинов, таких как воспалительный белок макрофагов MIP1 и MIP2; уменьшением агрегации и инфильтрации нейтрофилов и макрофагов; снижением повреждения эндотелия сосудов, за счет уменьшения продукции молекул адгезии.

Эти противовоспалительные эффекты молекулярного водорода могут быть связаны со следующими путями: Н₂ играет защитную роль, ингибируя активацию пути NF-κB (универсальный фактор транскрипции, контролирующий экспрессию генов иммунного ответа, апоптоза и клеточного цикла), что может быть достигнуто путем ингибирования фосфорилирования IκBα ( белка для ингибирования транскрипционного фактора NF-κB) или подавления перекисного окисления и связанных с ним сигнальных путей; Н2 снижает липополисахарид-индуцированную агрегацию нейтрофилов путем ингибирования активации путей p38 MAPK и JNK.

Окись азота также как и водород обладает антиоксидантным действием. Так, в отношении окиси азота доказана возможность ослаблять химический процесс окисления, опосредуемый активными формами кислорода, такими как H2O2 и O2, который происходит при физиологических уровнях NO. В сочетании с молекулярным водородом, окись азота защищает клетки от гибели, опосредованной H2O2, алкилгидропероксидами и ксантиноксидазой. Ослабление окислительной активности пероксида, а также перекисного окисления липидов, по-видимому, являются основными химическими механизмами, с помощью которых NO может ограничить окислительное повреждение клеток млекопитающих. При этом экспериментально нами показана возможность не простого суммарного эффекта водорода и окиси азота, а кратного увеличения антиоксидантной активности, что будет продемонстрировано в экспериментальных данных, приведенных ниже. В дополнение к этим химическим и биохимическим свойствам, окись азота может модулировать клеточные и физиологические процессы, например адгезию лейкоцитов. С этим также связан дополнительный эффект предложенной композиции.

Платимикс представляет собой препарат (https://akademiyadolgoletiya.ru/product/платимикс/), содержащий экстракт плодов шиповника, лимонную кислоту, аскорбиновую кислоту, сахар, и комплекс металлов платиновой группы в хелатной форме, в отношении которого производитель указывает на возможность при насыщении платимикса молекулярным водородом перехода водорода в атомарную форму и удержания им препарата в высоких концентрациях. При этом водород обеспечивает «доставку» молекул препарата туда, куда сам препарат не смог бы попасть. Не ставя перед собой задачу доказать или опровергнуть справедливость утверждений производителя, мы обнаружили повышение эффективности действия физиологического раствора с водородом, оксидом азота и платимиксом по сравнению с физиологическим раствором с водородом и оксидом азота, а также установили те концентрации всех трех веществ, использование которых ведет к наиболее выраженному антиоксидантному эффекту.

Добавление предложенной композиции в соотношении 1:1 к аутологичной плазме расширяет спектр ее действия, так как сообщает дополнительно к проявляемым свойствам эффекты, проявляемые в организме аутологичной плазмой, а именно: аутологичная плазма снижает интенсивность перекисного окисления липидов, тем самым защищая клетки от окислительного стресса. Происходит это вследствие высвобождения из тромбоцитов плазмы таких факторов, как трансформирующий фактор роста-бета (TGF-β), фактор роста эндотелия сосудов (VGFF) и эпидермальный фактор роста (EGF), которые играют ключевую роль в пролиферации, дифференцировке, апоптозе клеток, ангиогенезе, снижая окислительный стресс, защищает клетки от апоптоза, индуцированного липополисахаридами.

Осуществление изобретения

Предложенную композицию получают следующим образом: в физраствор подаются два газа - водород и окись азота, при этом окиси азота в поток водорода подается от 0,005% до 0,2%. Контроль насыщения физраствора газами ведется прежде всего по содержанию окиси азота. В среднем для эффективного насыщения достаточно осуществлять барботаж (пробулькивание пузырьками) раствора газом в течение 2 минут.

В полученную композицию, содержащую 18 мл водорода и 0,05-2 мл окиси азота на литр стерильного физраствора, добавляют 1-20 мл платимикса.

Полученная композиция может быть использована путем перорального приема, а также инъекционного (подкожного, внутримышечного, внутривенного) введения в организм человека.

Кроме того, предложенная композиция может быть смешена в соотношении 1:1 с аутологичной плазмой и введена в виде подкожных, внутримышечных и внутривенных инъекций.

Способ применения композиции: в результате многолетних исследований нами были разработаны различные схемы введения предложенной композиции для лечения заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом.

Так, за период наблюдения с 2019 по 2023г в общей сложности предложенная композиция была применена у 261 пациента, из них:

- у 87 с заболеваниями сердечно-сосудистой системы, включая хроническую сердечную недостаточность (ЗССС);

- у 44 пациентов с нейродегенеративными заболеваниями (НДЗ);

- у 23 паллиативных пациентов с онкологическими заболеваниями (ОЗ);

- у 31 пациента с заболеваниями бронхолегочной системы (ХОБЛ, эмфизема) (ЗБЛС);

- у 28 пациентов с дегенеративными заболеваниями опорно-двигательного аппарата (ЗОДА);

- у 10 человек с заболеваниями желудочно-кишечного тракта (ЗЖКТ);

- у 12 человек с заболеваниями мочевыделительной системы (ЗМВС);

- у 26 человек с кожными заболеваниями (псориаз, экзема) (КЗ).

Каждая группа была поделена на 2 подгруппы, при этом в подгруппе 1 традиционные методы лечения сочетали с использованием композиции по способу-прототипу. Подгруппа 2 была разделена на три примерно равные по количеству участников группы: у 2А применяли предложенную композицию путем ее перорального введения, у 2Б применяли предложенную композицию путем ее инъекционного введения, у 2В применяли предложенную композицию смешанной 1:1 с аутологичной обогащенной тромбоцитами плазмой путем инъекционного введения. Способ инъекционного введения выбирали в зависимости от патологии: при кожных заболеваниях чаще использовали подкожное введение, при заболеваниях опорно-двигательного аппарата - внутримышечное введение, при заболеваниях и состояниях, сопровождающихся оксидативным стрессом и связанным с внутренними органами или системным поражением – внутривенное введение.

Мы не раскрываем здесь схемы лечения каждой патологии с помощью известной и предлагаемой композиций, так как схемы лечения с помощью предлагаемой композиции являются объектом для других заявок на патент, однако и при использовании предложенной и при использовании заявленной композиции способы дозирования и частота приема базировались на известных принципах, а именно: эффект антиоксидантов является дозозависимым, биохимические проявления эффекта наступают раньше клинических, для полноценной оценки эффекта от начала лечения требуется не меньше 1 месяца.

Эффективность проводимого лечения оценивали по биохимическим показателям.

К биохимическим маркерам оксидативного стресса относятся в соответствии уровни малонового диальдегида, 8-ОН-дезоксигуанозина. В таблице 1 приведены средние значения этих биохимических маркеров до и через 1 месяц после применения композиций по группам:

Таблица 1

Заболевание/
уровни МД/
8-ОН-ДГ (нмоль/л) 1 2А 2Б 2В ЗССС/84/0,9 71/0,9 19/0,4 19/0,4 17/0,27 НДЗ/77/0,9 34/0,6 14/0,35 16/0,34 13/0,24 ОЗ/86/1,2 31/0,8 16/0,36 18/0,4 18/0,4 ЗБЛС/64/0,72 42/0,64 11/0,21 11/0,22 10/0,25 ЗОДА/58/0,7 39/0,4 12/0,25 15/0,27 9/0,21 ЗЖКТ/52/0,68 38/0,5 8/0,2 12/0,18 11/0,18 ЗМВС/55/0,65 29/0,51 17/0,3 14/0,3 17/0,31 КЗ/49/0,7 24/0,48 11/0,29 11/0,3 3/0,28

Полученные результаты свидетельствуют о значимом снижении биохимических маркеров оксидативного стресса при заболеваниях и состояниях, сопровождающихся оксидативным стрессом в группах, где использовалось применение предлагаемой фармацевтической композиции.

Кроме того, отдельно на добровольцах, имеющих инкурабельную стадию онкологического заболевания, нами исследовались эффекты, оказываемые композициями, содержащими только молекулярный водород (А), только окись азота (Б), водород и окись азота (В), водород и платимикс (Г), окись азота и платимикс (Д), водород, окись азота и платимикс (Е). Для оценки также использовались уровни малонового диальдегида, 8-ОН-дезоксигуанозина после однократного использования физиологического раствора, обогащенного указанными молекулами и веществами.

Результаты приведены в таблице 2, где первое значение – показатели до применения растворов А,Б,В,Г,Д,Е, второе – через сутки после.

Таблица 2

А Б В Г Д Е Малоновый диальдегид 30/26 31/28 29/17 30/16 29/21 32/9 8-ОН-дезоксигуанозин 0,92/0,69 0,9/0,7 0,91/0,42 0,89/0,39 0,9/0,39 0,88/0,3

Таким образом, именно сочетание физраствора с молекулярным водородом, оксидом азота и платимиксом позволяет значительно снизить уровни маркеров, отражающих уровень оксидативного стресса.

Кроме того, нами проводились исследования дозировок, входящих в состав предложенной для применения композиции, в результате которых было установлено следующее:

Производили исследования влияния содержания в используемых растворах водорода, окиси азота и платимикса на маркеры оксидативного стресса при внутримышечном введении:

В растворе «А» содержание на 1 л стерильного физраствора составило водорода 18 мл, содержание окиси азота 0,05 мл, содержание платимикса 1 мл.

В растворе «Б» - содержание водорода 18 мл, содержание окиси азота 0,2 мл, содержание платимикса 20 мл.

В растворе «В» - содержание водорода 15 мл, содержание окиси азота 0,025 мл, содержание платимикса 0,5 мл.

Все значения содержания компонентов приведены на литр физраствора.

Во всех группах курс внутримышечных инъекций составлял 4 инъекции с частотой один раз в неделю.

Были получены следующие данные (табл. 2) (до слэша значения показателей до лечения, после слэша – после курса лечения)

Таблица 3:

А Б В Малоновый диальдегид 31/11 32/8 30/21 8-ОН-дезоксигуанозин 0,91/0,35 0,90/0,33 0,89/0,66

Таким образом, была продемонстрирована эффективность предложенных к использованию количеств компонентов раствора.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к терапии заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом. Предложено применение фармацевтической композиции, содержащей 18 мл молекулярного водорода, 0,05-2,0 мл окиси азота и 1-20 мл платимикса на 1 л 0,9% стерильного раствора хлорида натрия, путем ее введения в организм человека для лечения заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом. Техническим результатом изобретения является повышение эффективности влияния композиции на уменьшение процессов оксидативного стресса. 3 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. Применение фармацевтической композиции, содержащей 18 мл молекулярного водорода, 0,05-2,0 мл окиси азота и 1-20 мл платимикса на 1 л 0,9% стерильного раствора хлорида натрия, путем ее введения в организм человека для лечения заболеваний и состояний, сопровождающихся оксидативным стрессом.

2. Применение фармацевтической композиции по п. 1, отличающееся тем, что перед введением композицию смешивают с аутологичной плазмой в соотношении 1:1.

3. Применение фармацевтической композиции по п. 1, отличающееся тем, что композицию вводят в организм человека путем ее перорального приема.

4. Применение фармацевтической композиции по любому из пп. 1, 2, отличающееся тем, что композицию вводят путем подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции.