Низкотоксичные аминофосфониевые соли, обладающие противоопухолевой активностью, и способ их получения Российский патент 2025 года по МПК C07F9/54 A61K31/66 A61P31/04 A61P35/00 

Группа изобретений относится к области органической химии и фармакологии, в частности к новым соединениям – аминофосфониевым солям, способу их получения и применению в фармакологии, медицине и ветеринарии в качестве антибактериальных и противоопухолевых средств в отношении глиобластомы, аденокарциномы предстательной железы, аденокарциномы яичников, аденокарциномы молочной железы, аденокарциномы шейки матки, аденокарциномы легкого, аденокарциномы печени, аденокарциномы поджелудочной железы и аденокарциномы двенадцатиперстной кишки человека.

На сегодняшний день сердечно-сосудистые, нейродегенеративные, опухолевые заболевания, а также хронические воспаления являются основной причиной смертности людей во всем мире. Возникновение данных патологий и их прогрессирование во многом связывают с митохондриальной дисфункцией [J.Pourahmad, A.Salimi, E.Seydi. Mitochondrial targeting for drug development. In Toxicology Studies - Cells, Drugs and Environment; In Tech, 2015;T.Alqahtani, S.L.Deore, A.A.Kide, B.A.Shende, R.Sharma, R.DadaraoChakole, L.S.Nemade, N.KishorKale, S.Borah, S.ShrikantDeokaretal. Mitochondrion, 2023, Vol. 71, P. 83–92; M.G.Danieli, E.Antonelli, M.A.Piga, M.F.Cozzi, A.Allegra, S.Gangemi. Autoimmun. Rev.2023, Vol. 22, 103308]. Митохондрии играют ключевую роль во многих метаболических процессах, таких как цикл трикарбоновых кислот, окислительное декарбоксилирование пирувата комплексом пируватдегидрогеназы [L. Shi, B.P. Tu. Curr. Opin. CellBiol.2015, Vol. 33, P. 125-131] и др. Учитывая ключевую роль митохондрий в регуляции жизни и гибели клеток, в последние десятилетия интенсивно исследуется митохондриально-ориентированный подход в терапии метаболических и дегенеративных заболеваний, заключающийся в использовании соединений, способных избирательно накапливаться в митохондриях [L.F. Yousif, K.M. Stewart, S.O. Kelley. ChemBioChem.2009, Vol. 10, P. 1939-1950]. Особенно эффективными здесь являются делокализованные липофильные катионы трифенилфосфония (TФФ), которые были использованы для доставки в митохондрии широкого спектра лекарственных, диагностических грузов и аналитических зондов [J.Zielonka, J.Joseph, A.Sikora, M.Hardy, O.Ouari, J.Vasquez-Vivar, G.Cheng, M.Lopez, B.Kalyanaraman. Chem. Rev.2017, Vol. 117, P. 10043-10120]. Проникновение таких катионов через гидрофобный слой липидной мембраны зачастую является лимитирующей стадией процесса их накопления в клетках и митохондриях. Разница в трансмембранных митохондриальных потенциалах в опухолевых и нормальных клетках (Δ_Ψ около 60 мВ) приводит к многократному (до 1×10³ раз) накоплению липофильных катионов в опухолевых клетках, тем самым придавая свойство селективности [S. Zaib, A. Hayyat, N. Ali, A. Gul, M. Naveed, I. Khan. Anticancer. AgentsMed. Chem.2022, Vol. 22, P. 2048-2062]. Известно также, что некоторые липофильные катионы вызывают сильное разобщение дыхания и окислительного фосфорилирования, деполяризуя митохондрии опухолевых клеток и тем самым инициируя апоптоз [L.S. Khailova, P.A. Nazarov, N.V. Sumbatyan, G.A. Korshunova, T.I. Rokitskaya, V.I. Dedukhova, Y.N. Antonenko, V.P. Skulachev. Biochem.2015, Vol. 80, P. 1589-1597].

Известны фосфониевые соли, имеющие при атоме фосфора протяженные алифатические фрагменты (от C₁₀ до C₁₈), обладающие антимикробной активностью в отношении 11 типичных штаммов микроорганизмов, включая метициллин-резистентный Staphylococcusaureus (MRSA) [A. Kanazava, T. Ikeda, T. Endo. Synthesis and antimicrobial activity of dimethyl- andtrimethyl-substituted phosphonium salts with alkylchains of various lengths // Antimicrobial agents and chemotherapy.1994. V. 38. № 5. P. 945–952]. В солях алкилтриметилфосфония бактерицидная активность в отношении S. aureus и Escherichiacoli возрастала с увеличением длины алкильной цепи, а соединение с самой длинной алкильной цепью (С₁₈) убивало все бактериальные клетки (около 107 клеток на мл) в течение 30 мин в концентрациях 2.8 и 28 мкМ соответственно. Напротив, бактерицидная активность солей диалкилдиметилфосфония снижается с увеличением длины цепи заместителей. Существенно, что фосфониевая соль, содержащая две децильные группы, проявляла самый широкий спектр активности в отношении протестированных микроорганизмов и наибольшую бактериостатическую активность в отношении MRSA (МИК 0.78 мкг/мл). Так, хлориды тетрадецилтриметил- и дидецилдиметилфосфония уничтожали все микроорганизмы S. aureus (около 107 клеток на мл) в течение 60 и 30 мин воздействия при концентрациях 28 и 2.8 мкМ соответственно.

Соли триарилфосфония – Ar₃P⁺–R – обнаруживают высокую эффективность в адресной доставке в опухолевые клетки, однако зачастую показывают высокую токсичность в экспериментах invitro по отношению к нормальным клеткам и не подвергаются биодеградации, что может стать проблемой для выведения подобных веществ из организма, в связи с чем поиск эффективных фосфорсодержащих векторых систем продолжается.

Таким образом, из представленного выше следует, что применение фосфониевых фрагментов в качестве векторных функций является предпочтительным в дизайне митохондриально-направленных агентов, но для их успешного применения в медицине необходимо снизить токсичность путем направленной химической модификации их структуры.

Известен ряд алкилтрифенилфосфониевых солей и их функциональных производных, обладающих противоопухолевой активностью, которые могут быть рассмотрены в качестве аналогов предлагаемого изобретения с общими признаками.

Известны фосфониевые соли общей формулы А1 [R.J. Dubois, C.-C.L. Lin. J. Med. Chem. 1978,Vol. 21(3), Р. 303-306], где Х=Br, OCH₃, показавшие умеренную противовопухолевую активность in vivo в отношении лимфоцитарной лейкемии со значениями Т/С [T/C = (выживаемость животных после лечения)/(выживаемость в контрольной группе) × 100] 127% и 123% соответственно. Поскольку значение Т/С равное 125% считается пограничным, меньше которого вещества считаются малоактивными, активность данных фосфониевых солей можно считать недостаточно высокой. Данные о цитотоксичности в отношении клеточных моделей авторами не приводятся.

Известна фосфониевая соль, содержащая метоксикарбонилундецильный фрагмент формулы А2 [D. Dhanya, P. Giuseppe, C.A. Rita, M. Annaluisa, S.M. Stefania, G. Francesca, D.V. Vitale, R. Anna, A. Claudio, L. Pasquale, S. Carmela. Anti-CancerAgentsMed.Chem., 2017, Vol. 17, P. 1796-1804], показавшая снижение жизнеспособности раковых клеток дозозависимым образом со значениями IC₅₀ в отношении MCF-7 и HeLa 3.71 и 3.59 мкМ (МТТ-тест, 72 ч) соответственно. Однако данная соль показала худшую цитотоксическую активность в сравнении с препаратом сравнения – фторурацилом.

Известны фосфониевые соли формулы А3 [B. Bachowska, J. Kazmierczak-Baranska, M. Cieslak, B. Nawrot, D. Szczesna, J. Skalik, P. Bałczewski. Chemistry Open.2012, Vol. 1, P. 33–38], где R = CH₃, C₅H₁₁, показавшие цитотоксическую активность в отношении раковых клеток К562 (IC₅₀ 6-10 мкМ, 48 ч), будучи при этом неактивными в отношении клеток HeLa.

Известна фосфониевая соль, содержащая пропенильный фрагмент формулы А4 [M. Millard, D. Pathania, Y. Shabaik, L. Taheri, J. Deng, N. Neamati. PLoS ONE, 2010, Vol. 5(10), p. 13131], продемонстрировавшая цитотоксичность в отношении раковых линий клеток человека (MDAMB435, MDAMB361, MDAMB231, PC3, DU145, BT474, T47D, CAMA1, MCF7, NCIADRRES, HCT116 p53 +/+, HCT116 p53 –/–, HOP92) с IC₅₀ 0.4-12 мкМ. Данная фосфониевая соль останавливала клеточный цикл во всех клеточных линиях, начиная с 24-часовой обработки. Фосфониевая соль А4 уменьшала количество пролиферирующих клеток и индуцировала расщепление каспазы-3 в ксенотрансплантатах опухоли. Данные оцитотоксичности фосфониевой соли формулы А4 в отношении условно-нормальных клеток человека авторы не приводят, что не дает возможности сделать выводы о селективности цитотоксического действия данных соединений.

Из исследованного заявителем уровня техники не выявлены фосфониевые соли, содержащие диэтиламиногруппу при атоме фосфора, обладающие противопухолевой и антимикробной активностью, в связи с чем в качестве прототипа выбраны алкилтрифенилфосфониевые соли формулы А5 [U. Sanyal, R.S. Chatterjee, S.К. Das, S.К. Chakraborti. Neoplasma, 1984, Vol. 31(2), P. 149-155], где R = CH₃(a), CH₂(CH₂)₃CH₃(b), CH₂(CH₂)₄CH₃(c), CH₂(CH₂)₅CH₃(d), CH₂(CH₂)₁₂CH₃(e), CH₂(CH₂)₁₄CH₃(f), CH₂(CH₂)₁₆CH₃(g), а Х = I или Br, наиболее близкие по структуре и назначению заявленному техническому решению.

Исследования, проведенные в отношении асцитной карциномы Эрлиха и лимфоидной лейкемии L1210, показали, что соли А5b-g не обладают противоопухолевой активностью in vivo. Соединение А5a показало слабую активность со значениями Т/С 102-109% в дозах 1.5-12 мг/кг. В более высоких дозах соединения А5 становились токсичными.

Общим недостатком аналогов является невысокое цитотоксическое действие в отношении опухолевых клеток, что ограничивает их практическое применение. Таким образом, анализ предшествующего уровня техники показывает, что недостатки аналогов связаны с низким проникновением приведенных выше веществ в опухолевые клетки.

Преимуществом прототипа по сравнению с приведенными выше аналогами является большая синтетическая доступность, что обеспечивается использованием алкилгалогенидов и трифенилфосфина в качестве исходных реагентов.

Недостатком прототипа является невысокие значения цитотоксичности соединений А5, которые, возможно, связаны с несбалансированностью гидрофильно-липофильных характеристик указанных соединений и отсутствием в их структуре гетероатомов, способных к нековалентному связыванию с биологическими мишенями.

Техническая проблема, на решение которой направлено заявляемое изобретение, состоит в расширении ассортимента противоопухолевых средств на основе аминофосфониевых солей и способов их получения, обладающих большей цитотоксичностью в отношении раковых клеток по сравнению с известными аналогами.

Техническим результатом являются новые противоопухолевые средства –аминофосфониевые соли, преодолевающие вышеуказанные недостатки прототипа, расширяющие арсенал средств указанного назначения и способов их получения, обеспечивающие адресную доставку соединений в опухолевые клетки, способные эффективно приводить к апоптозу по внутреннему митохондриальному пути, тем самым подавляя рост раковых клеток.

Указанная техническая проблема решается, и технический результат достигается новыми соединениями – заявляемыми аминофосфониевыми солями формулы I:

Техническая проблема также решается, и технический результат достигается применением заявляемых аминофосфониевых солей формулы I в качестве соединений, обладающих активностью в отношении грамположительных бактерий, и противоопухолевой активностью в отношении глиобластомы T98G, аденокарциномы шейки матки M-HeLa, аденокарциномы печени HepG2, аденокарциномы поджелудочной железы PANC-1, аденокарциномы двенадцатиперстной кишки человека HuTu80, аденокарциномы молочной железы MCF7, аденокарциномы легкого А549, аденокарциномы яичника SK-OV-3, аденокарциномы предстательной железы PC3 и аденокарциномы предстательной железы DU-145.

Кроме того, техническая проблема решается, и технический результат достигается заявляемым способом получения аминофосфониевых солей формулы I, включающим взаимодействие в ацетонитриле в инертной среде в эквимольном соотношении аминофосфиновформулы II, где R¹ и R² = NEt₂ или Ph, с 1-йодалканами – 1-йодгексаном, 1-йодоктаном, 1-йоднонаном или 1-йоддеканом.

Изобретения реализуются следующим образом.

При получении и выделении заявляемых соединений используют коммерчески доступные реагенты и вспомогательные средства: ацетонитрил (ООО «ТатХимПродукт», Казань, Россия, чистота >99%), диэтиловый эфир (ООО «Кузбассоргхим», г. Кемерово, Россия, чистота >98%), 1-йодгексан (Thermo Scientific ChemicalsCAS: 638-45-9), 1-йодоктан (Thermo Scientific ChemicalsCAS: 629-27-6), 1-йоднонан (Thermo Scientific ChemicalsCAS: 4282-42-2), 1-йоддекан (Thermo Scientific ChemicalsCAS: 2050-77-3), этилацетат (Компания «ТатХимПродукт», Казань, Россия, чистота >99%), петролейный эфир (Компания «ТатХимПродукт», Казань, Россия, чистота >95%), пластины Sorbfil (ООО «ИМИД», Москва, Россия), ДМСО (хч, Химпром), фосфатный буфер (PBS)(ПанЭко, Россия),

и оборудование: ЯМР-спектрометр Bruker Avance-400, ИК-спектрометр BrukerVector 22, Масс-спектрометр Bruker MALDI-TOF Ultraflex III (BrukerDaltonik, Бремен, Германия), автоматическом элементном анализаторе EuroVector EA3000 CHNS (Euro-Vector, Италия), УФ-лампа (VilberLourmat, Франция), проточной цитометр (GuavaeasyCyte, MERCK, США).

Синтез заявляемых соединений осуществляют по следующей схеме:

В качестве производных P(III) – аминофосфина (соединение II), применяют трис(диэтиламино)фосфин, фенил-бис(диэтиламино)фосфин и дифенил(диэтиламино)-фосфин, полученные в соответствии с с данными [C. Stuebe, H.P. Lankelma. Preparation of Some Hexaalkyl-phosphorous, Phosphoric and Phosphorothioic Triamides. J. Am. Chem. Soc. 1956, Vol. 78(5), P. 976].

В качестве 1-йодалкана используют 1-йодгексан, 1-йодоктан, 1-йоднонан и 1-йоддекан.

В качестве растворителя используют ацетонитрил.

Синтез проводят при комнатной температуре в инертной среде, например, аргона или азота.

Контроль за временем прохождения реакции осуществляют спектроскопией ЯМР ³¹Р по исчезновению в спектрах ЯМР ³¹Р сигнала атома фосфорааминофосфина(соединение II), а также – методом ТСХ.

Спектры ЯМР регистрируют при 25°С на ЯМР-спектрометре Bruker Avance-400 (400.0 МГц, ¹Н; 100.6 МГц, ¹³С; 162 МГц, ³¹Р) в CDCl₃. Химические сдвиги представлены в м.д. (шкала δ), значения константы связи (J) даны в Гц. ИК спектры регистрируют на спектрометре BrukerVector 22 для образцов в таблетках KBr. Масс-спектры MALDI – на спектрометре Bruker MALDI-TOF Ultraflex III (BrukerDaltonik, Бремен, Германия). В качестве матрицы используют 2,5-дигидроксибензойную кислоту (5 мг/мл в метаноле). Элементный анализ проводят на автоматическом элементном анализаторе EuroVector EA3000 CHNS (Euro-Vector, Италия). Ход реакций и чистоту продуктов контролируют методом ТСХ на пластинах Sorbfil (ООО ИМИД, РФ). Пластины для ТСХ проявляют в УФ свете. Растворители очищают и сушат по стандартным протоколам.

Общая методика синтеза производных аминофосфониевых солей. Смешивают эквимольные количества (4.0 ммоль) производных P(III) – аминофосфина (соединение II) и 1-йодалкана (4.0 ммоль) в 5 мл безводного ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере сухого аргона или азота до исчезновения в спектрах ЯМР ³¹Р сигнала атома фосфора(III), которую контролируют методом ТСХ (элюент смесь из этилацетата и петролейного эфира). Растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток промывают сухим диэтиловым эфиром (5 × 5 мл) и высушивают при пониженном давлении (0.01 мм рт. ст.) при температуре 40-50°С в течение 1-2 часов.

Йодид гексил-трис(диэтиламино)фосфония (Ia), светло-желтое масло, выход 1.80 г (98 %). Найдено: C, 47.36; H, 9.71; N, 8.92; P, 6.93 %, вычислено для C₁₈H₄₃N₃IP: C, 47.06; H, 9.43; N, 9.15; P, 6.74 %. Спектр ESI-MS, m/z: 332.29 [M – I]⁺; рассчитано для C₁₈H₄₃N₃P⁺: 332.32. СпектрЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 3.18 д.к. (NCH₂, 12H, ³J_PNCH 10.6, ³J_HH 7.1), 2.55 м (C¹H₂, 2H), 1.56 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.32-1.33 м (C⁴H₂, C⁵H₂, 4H), 1.24 т (NCCH₃, 18H, ³J_HH 7.1), 0.90 т (C⁶H₃, 3H, ³J_HH 7.0). СпектрЯМР¹³C-{¹H} (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 39.43 д (NCH₂, ²J_PNC 3.8), 30.99 с (C⁴), 30.27 д (C², ²J_PCC 18.0), 25.74 д (C¹, ¹J_PC 104.6), 22.21 д (C³, ³J_PCCC 4.3), 22.03 с (C⁵), 13.71 с (C⁶), 13.24 д (NCCH₃, 3H, ³J_PNCC 2.8). СпектрЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 59.2 м.д.

Йодидоктил-трис(диэтиламино)фосфония (Ib), светло-желтоемасло, выход 1.87 г (96 %). Найдено: C, 49.52; H, 9.81; N, 8.55; P, 6.73 %, вычислено для C₂₀H₄₇N₃IP: C, 49.28; H, 9.72; N, 8.62; P, 6.35 %. Спектр ESI-MS, m/z: 360.34 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₀H₄₇N₃P⁺: 360.35. Спектр ЯМР ¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δ м.д., J Гц): 3.19 д.к. (NCH₂, 12H, ³J_PNCH 10.5, ³J_HH 7.1), 2.57 м (C¹H₂, 2H), 1.56 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.29 м (C⁴H₂, C⁵H₂, C⁶H₂, C⁷H₂, 8H), 1.25 т (NCCH₃, 18H, ³J_HH 7.1), 0.89 т (C⁸H₃, 3H, ³J_HH 7.1). СпектрЯМР¹³C-{¹H} (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 30.70 д (NCH₂, ²J_PNC 3.7), 31.64 с (C⁶), 30.87 д (C², ²J_PCC 18.0), 29.13 д (C⁴, ⁴J_PCCCC 1.7), 28.90 с (C⁵), 26.02 д (C¹, ¹J_PC 104.5), 22.54 с (C⁷), 14.04 с (C⁸), 13.50 д (NCCH₃, ³J_PNCC 2.9). Спектр ЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 58.9 м.д.

Йодиднонил-трис(диэтиламино)фосфония(Ic), светло-желтое масло, выход 1.94 г (97 %). Найдено: C, 50.08; H, 9.57; N, 8.54; P, 6.39 %, вычислено для C₂₁H₄₉N₃IP: C, 50.30; H, 9.78; N, 8.38; P, 6.18 %. Спектр ESI-MS, m/z: 374.37 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₁H₄₉N₃P⁺: 374.37. Спектр ЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 2.93 м (NCH₂, 12H, ³J_PNCH 10.6, ³J_HH 7.1), 2.67 м (C¹H₂, 2H), 1.31 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 0.99-1.03 м (C⁴H₂, C⁵H₂, C⁶H₂, C⁷H₂, C⁸H₂, 10H, NCCH₃, 18H, ³J_HH 7.1), 0.63 т (C⁹H₃, 3H, ³J_HH 7.0). Спектр ЯМР¹³C-{¹H} (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 39.65 д (NCH₂, ²J_PNC 3.3), 31.68 с (C⁷), 30.81 д (C², ²J_PCC 18.0), 29.13 с (C⁵, C⁶), 22.06 уш.с (C⁴), 25.96 д (C¹, ¹J_PC 104.6), 22.71 с (C⁸), 14.04 с (C⁸), 22.48 д (C³, ³J_PCCC 4.4), 14.0 с (C⁹), 13.44 д (NCCH₃, ³J_PNCC 2.4). СпектрЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 58.8 м.д.

Йодиддецил-трис(диэтиламино)фосфония (Id), светло-желтое масло, выход 1.96 г (95 %). Найдено: C, 50.93; H, 9.67; N, 7.92; P, 6.25 %, вычислено для C₂₂H₅₁N₃IP: C, 51.25; H, 9.97; N, 8.15; P, 6.01 %. Спектр ESI-MS, m/z: 388.37 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₁H₄₉N₃P⁺: 388.38. Спектр ЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 3.16 д.к (NCH₂, 12H, ³J_PNCH 10.6, ³J_HH 7.1), 2.52 м (C¹H₂, 2H), 1.52 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.22-1.24 м (C⁴H₂, C⁵H₂, C⁶H₂, C⁷H₂, C⁸H₂, C⁹H₂, 12H), 1.22 т (NCCH₃, 18H, ³J_HH 7.1), 0.86 т (C¹⁰H₃, 3H, ³J_HH 7.1). Спектр ЯМР¹³C-{¹H} (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 39.48 д (NCH₂, ²J_PNC 3.4), 31.58 с (C⁸), 30.67 д (C², ²J_PCC 17.9), 22.37 д (C³, ³J_PCCC 3.7), 29.22 с (C⁵), 29.04 си 29.00 с (C⁶, C⁷), 28.97 уш.с (C⁴), 25.80 д (C¹, ¹J_PC 104.5), 22.31 с (C⁹), 13.90 с (C¹⁰), 13.30 д (NCCH₃, ³J_PNCC 2.3). Спектр ЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 58.7 м.д.

Йодидгексил-фенил-бис(диэтиламино)фосфония (Iе), светло-желтое масло, выход 1.80 г (97 %). Найдено: C, 51.93; H, 7.90; N, 5.89; P, 6.45 %, вычислено для C₂₀H₃₈N₂IP: C, 51.72; H, 8.25; N, 6.03; P, 6.67 %. Спектр ESI-MS, m/z: 337.17 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₀H₃₈N₂P⁺: 337.28. Спектр ЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.39-7.42 м (H^o, H^m, H^p, 5H), 2.92 м(NCH₂, 8H, ³J_PNCH 10.3, ³J_HH 7.1), 2.45 м (C¹H₂, 2H), 1.11 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 0.87-0.88 м, 0.87 и 0.88 т (C⁴H₂, C⁵H₂, NCCH₃, 16H, ³J_HH 7.1), 0.46 уш.м (C⁶H₃, 3H). Спектр ЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.45 д.т.д (т) (C^p, ¹J_HC 162.6, ³J_HCCC 7.0, ⁴J_PCCCC 2.8), 132.11 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 162.9, ²J_PCC 10.5, ³J_HCCC 6.6-6.8, ³J_HCCC 6.6), 129.93 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.8, ³J_PCCC 13.1, ³J_HCCC 6.6), 120.72 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 122.9, ³J_HCCC 7.3), 40.20 т.к.д (д) (NCH₂, ¹J_HC 137.9, ²J_HCC 3.7, ²J_PNC 2.6), 30.63 т.м (с) (C⁴, ¹J_HC 122.0-124.0),29.58 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 125.0-126.0, ²J_PCC 17.1), 24.54 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 129.8, ¹J_PC 81.9, ³J_HCCC 3.6-3.7, ²J_HCC 3.6-3.7), 21.81 т.м (д) (C³, ¹J_HC 126.0-128.0, ²J_HCC 3.7-4.0, ³J_PCCC 3.4), 21.69 т.м (с) (C⁵, ¹J_HC 126.0-127.0), 13.44 к.м (с) (C⁶, ¹J_HC 124.0-125.0), 13.38 к.д.т (д) (NCCH₃, ¹J_HC 126.9, ³J_PNCC 3.0, ²J_HCC 2.8-3.0). Спектр ЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 58.9 м.д.

Йодидоктил-фенил-бис(диэтиламино)фосфония (If), светло-желтое масло, выход 1.87 г (95 %). Найдено C, 53.93; H, 8.70; P, 6.55 %, вычислено для C₂₂H₄₂N₂IP: C, 53.66; H, 8.60; N, 5.69; P, 6.29 %. Спектр ESI-MS, m/z: 365.28 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₂H₄₂N₂P⁺: 365.31. СпектрЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.54-7.60 м (H^o, H^m, H^p, 5H), 3.10 м (NCH₂, 8H, ³J_PNCH 10.5, ³J_HH 7.1), 2.63 м (C¹H₂, 2H), 1.20-1.29 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.06-1.01 уш.м (NCCH₃, 12H, ³J_HH 7.1, C⁴H₂-C⁷H₂, 8H), 0.63 т (C⁸H₃, 3H, ³J_HH 7.0). СпектрЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.44 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 164.2, ³J_HCCC 7.0, ⁴J_PCCCC 2.9), 132.15 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 162.7, ²J_PCC 10.5, ³J_HCCC 7.3, ³J_HCCC 7.1), 129.94 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.6, ³J_PCCC13.1, ³J_HCCC 7.1), 120.88 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 122.5, ³J_HCCC 6.6), 40.32 т.к.д (д) (NCH₂, ¹J_HC 138.0, ²J_HCC 4.0, ²J_PNC 2.9), 31.07 т.м (с) (C⁶, ¹J_HC 126.5), 29.92 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 125.0-126.0, ²J_PCC 16.9), 28.47 т.м (д) (C⁴, ¹J_HC 122.0, ¹J_HC 126.0, ⁴J_PCCCC 1.3, ³J_HCCC 3.4, ²J_HCC 3.4), 28.28 т.м (с) (C⁵, ¹J_HC 126.3), 24.69 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 129.8, ¹J_PC 81.7, ³J_HCCC 4.0-4.1, ²J_HCC 3.4-3.7,), 21.99 т.м (с) (C⁷, ¹J_HC 124.4), 21.92 т.м (д) (C³, ¹J_HC 126.0-128.0, ³J_PCCC 3.6), 13.51 к.м (с) (C⁸, ¹J_HC 124.4, 128.0, ³J_HCCC 2.8-2.9, ²J_HCC 2.8-2.9), 13.41 к.д.т (д) (NCCH₃, ¹J_HC 127.0, ³J_PNCC 3.0, ²J_HCC 2.9-3.0). СпектрЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 59.4 м.д.

Йодиднонил-фенил-бис(диэтиламино)фосфония (Ig), светло-желтое масло, выход 1.94 г (96 %). Найдено: C, 54.79; H, 8.90; P, 5.85 %, вычислено для C₂₃H₄₄N₂IP: C, 54.54; H, 8.70; N, 5.53; P, 6.12 %. Спектр ESI-MS, m/z: 379.30 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₃H₄₄N₂P⁺: 379.32. СпектрЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.68-7.78 м (H^o, H^m, H^p, 5H), 3.27 м (NCH₂, 8H, ³J_PNCH 10.5, ³J_HH 7.2), 2.84 м (C¹H₂, 2H), 1.37-1.46 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.23 и 1.18 двам. (C⁴H₂-C⁸H₂, 10H), 1.23 т (NCCH₃, 12H, ³J_HH 7.2), 0.82 т (C⁹H₃, 3H, ³J_HH 7.1). СпектрЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.33 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 163.7, ³J_HCCC 7.3, ⁴J_PCCCC 2.9), 132.07 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 162.8, ²J_PCC 10.5, ³J_HCCC 7.1, ³J_HCCC 6.8), 129.85 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.2, ³J_PCCC 13.1, ³J_HCCC 7.0), 120.78 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 122.5, ³J_HCCC 7.7), 40.23 т.д.к (д) (NCH₂, ¹J_HC 137.8, ²J_HCC 4.0, ²J_PNC 2.8), 31.10 т.м (с) (C⁷, ¹J_HC 126.8), 29.82 т.д.м (д) (C³, ¹J_HC 125.0-126.0, ³J_PCCC 16.9), 28.49 т.м (уш.с) (C⁴, ¹J_HC 122.0-124.0), 28.44 т.м (с) (C⁵, C⁶, ¹J_HC 124.0-125.0), 24.0 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 130.0, ¹J_PC 81.7), 21.92 т.м (с) (C⁸, ¹J_HC 124.0), 21.87 т.м (д) (C³, ¹J_HC 126.0-128.0, ³J_PCCC 3.3), 13.45 т.м (с) (C⁹, ¹J_HC 124.7, ³J_HCCC 3.0, ²J_HCC 3.0), 13.33 к.д.т (д) (NCCH₃, ¹J_HC 127.2, ³J_PNCC 3.1, ²J_HCC 2.8). СпектрЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 59.4 м.д.

Йодиддецил-фенил-бис(диэтиламино)фосфония (Ih), светло-желтое масло, выход 1.98 г (95 %). Найдено: C, 55.65; H, 8.99; N, 5.02; P, 6.24 %, вычислено для C₂₄H₄₆N₂IP: C, 55.38; H, 8.91; N, 5.38; P, 5.95 %. Спектр ESI-MS, m/z: 393.31 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₄H₄₆N₂P⁺: 393.34. СпектрЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.59-7.65 м (H^o, H^m, H^p, 5H), 3.15 м, (NCH₂, 8H, ³J_PNCH 10.8, ³J_HH 7.1), 2.70 м (C¹H₂, 2H), 1.29-1.32 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.11 т (NCCH₃, 12H, ³J_HH 7.1), 1.11 и 1.06 двам. (C⁴H₂-C⁹H₂, 12H), 0.71 т (C²H₂и 1.18 двауш.м (C⁴H₂-C⁸H₂, 10H), 1.23 т (NCH₃, 12H, ³J_HH 7.2), 0.71 т (C¹⁰H₃, 3H, ³J_HH 7.0). СпектрЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.48 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 163.4, ³J_HCCC 6.3, ⁴J_PCCCC 2.9), 132.20 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 162.1, ²J_PCC 10.6, ³J_HCCC 7.2, ³J_HCCC 7.1), 129.98 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.4, ³J_PCCC 13.1, ³J_HCCC 7.0), 120.93 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 122.5, ³J_HCCC 7.5), 40.37 т.к.д (д) (NCH₂, ¹J_HC 127.9, ²J_HCC 4.0, ²J_PNC 2.9), 31.29 т.м (с) (C⁸, ¹J_HC 124.4, ³J_HCCC 3.2-3.5, ²J_HCC 3.5-4.0), 29.97 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 126.0-127.0, ²J_PCC 16.8), 28.89 т.м (с) (C⁵, ¹J_HC 126.0-127.0), 28.68 (C⁶, C⁷, ¹J_HC 127.0-1280), 28.38 т.м (д) (C⁴, ¹J_HC 127.0-128.0, ⁴J_PCCCC 1.2), 24.75 т.м (д) (C¹, ¹J_HC 129.2, ¹J_PC 81.7), 22.10 т.м (с) (C⁹, ¹J_HC 124.4, ³J_HCCC 3.7, ²J_HCC 3.7), 21.98 т.д.м (д) (C³, ¹J_HC 128.0, ³J_PCCC 3.5), 13.60 к.м (C¹⁰, ¹J_HC 124.3, ³J_HCCC 3.3-3.4, ²J_HCC 3.5-4.0), 13.45 к.д.т (NCCH₃, ¹J_HC 127.1, ³J_PNCC 3.0, ²J_HCC 3.0). Спектр ЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 59.2 м.д.

Йодидгексил-дифенил-(диэтиламино)фосфония (Ii), бесцветные кристаллы, выход 1.84 г (98 %), т.пл. 91-93°C. Найдено: C, 56.55; H, 6.89; N, 3.21; P, 6.44 %, вычислено для C₂₂H₃₃NIP: C, 56.29; H, 7.09; N, 2.98; P, 6.60 %. Спектр ESI-MS, m/z: 342.13 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₂H₃₃NP⁺: 342.24. Спектр ЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.85 ми 7.81 м (H^o, H^p, 6H, ³J_PCCHo 12.4, ³J_HoHm 7.7, ³J_HmHp 7.7, ⁵J_PCCCCHp 1.5, ⁴J_HmCCCHp 1.4), 7.73 м (H^m, 4H, ³J_HpHm 7.7, ³J_HoHm 7.7, ⁴J_PCCCHm 3.5), 3.31 д.ки 3.30 м (NCH₂, C¹H₂, 6H), 1.50-1.54 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.21-1.23 м (C⁴H₂, C⁵H₂, 4H), 1.14 т (NCCH₃, 6H), 0.81 уш.т (C⁶H₃, 3H, ³J_HH 7.1). СпектрЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.33 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 163.3, ³J_HCCC 7.4, ⁴J_PCCCC 2.6), 132.14 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 163.5, ³J_HCCC 7.4, ²J_PCC 10.4), 129.61 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.6, ³J_PCCC 12.6, ³J_HCCC 7.3), 119.40 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 96.4, ³J_HCCC 7.4), 40.95 т.к.д (д) (NCH₂, ¹J_HC 138.3, ²J_HCC 4.1, ²J_PNC 2.3), 30.24 т.м (с) (C⁴, ¹J_HC 124.7),29.22 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 127.0-128.0, ²J_PCC 16.0), 23.71 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 130.6, ¹J_PC 63.1, ³J_HCCC 3.0-4.0, ²J_HCC 3.0-4.0), 21.47 т.м (д) (C³, ¹J_HC 124.3, ²J_HCC 3.7-4.0, ³J_HCCC 3.7-4.0, ³J_PCCC 3.5), 21.31 т.м (с) (C⁵, ¹J_HC 125.3), 13.12 к.д.т (д) (NCCH₃, ¹J_HC 127.1, ³J_PNCC 2.4, ²J_HCC 2.7), 13.08 к.м (с) (C⁶, ¹J_HC 124.5, ³J_HCCC 3.7-4.0, ²J_HCC 3.7-4.0). Спектр ЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 52.0 м.д.

Йодидоктил-дифенил-(диэтиламино)фосфония (Ij), светло-желтое масло, выход 1.91 г (96 %). Найдено: C, 58.35; H, 7.19; N, 3.03; P, 6.44 %, вычислено для C₂₄H₃₇NIP: C, 57.95; H, 7.50; N, 2.82; P, 6.24 %. Спектр ESI-MS, m/z: 370.22 [M – I]⁺. Рассчитано для C₂₄H₃₇NP⁺: 370.27. Спектр ЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.78-7.83 и 7.79 двам (H^o, H^p, 6H, ³J_PCCHo 12.4, ³J_HoHm 7.7, ³J_HmHp 7.7, ⁵J_PCCCCHp 1.5, ⁴J_HmCCCHp 1.4), 7.70 м (H^m, 4H, ³J_HpHm 7.7,³J_HoHm 7.7, ⁴J_PCCCHm 3.5), 3.27 д.ки 3.23 м (NCH₂, C¹H₂, 6H, ³J_PNCH 11.3, ³J_HH 7.1), 1.45-1.48 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.14-1.18 ми 1.10 т (C⁴H₂, C⁵H₂, C⁶H₂, C⁷H₂, NCCH₃, 14H, ³J_HH 7.1), 0.77 т (C⁸H₃, 3H, ³J_HH 7.1). Спектр ЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.68 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 163.3, ³J_HCCC 7.1, ⁴J_PCCCC 2.8), 132.48 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 163.6, ³J_HCCC 7.0, ²J_PCC 10.4), 129.96 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.8, ³J_PCCC 12.6, ³J_HCCC 7.4), 119.77 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 96.4, ³J_HCCC 7.2), 41.31 т.д.к (д) (NCH₂, ¹J_HC 138.5, ²J_HCC 4.2, ²J_PNC 2.3), 31.07 т.м (с) (C⁶, ¹J_HC 126.5), 29.92 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 125.0-126.0, ²J_PCC 16.0), 28.46 т.м (уш.с) (C⁴, ¹J_HC 124.0-126.0), 28.25 т.м (с) (C⁶, ¹J_HC 126.4), 24.09 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 131.2, ¹J_PC 63.0, ³J_HCCC 3.0-4.0, ²J_HCC 3.0-4.0), 21.98 т.м (с) (C⁷, ¹J_HC 124.5), 21.87 т.м (д) (C³, ¹J_HC 126.0-128.0, ³J_PCCC 3.5), 13.51 к.м (с) (C⁸, ¹J_HC 124.4, ³J_HCCC 3.1-3.6, ²J_HCC 3.1-3.6), 13.44 к.д.м (д) (NCCH₃, ¹J_HC 127.3, ³J_PNCC 2.6, ²J_HCC 2.8). СпектрЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 51.9 м.д.

Йодиднонил-дифенил-(диэтиламино)фосфония (Ik), светло-желтое масло, выход 1.94 г (95 %). Найдено: C, 58.45; H, 7.89; N, 2.96; P, 5.84 %, вычислено для C₂₅H₃₉NIP: C, 58.71; H, 7.69; N, 2.74; P, 6.07 %. Спектр ESI-MS, m/z: 384.18 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₅H₃₉NP⁺: 384.28. СпектрЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.70 и 7.68 двам (H^o, H^p, 6H, ³J_PCCHo 12.4, ³J_HoHm 7.7, ³J_HmHp 7.7, ⁵J_PCCCCHp 1.5, ⁴J_HmCCCHp 1.4), 7.60 м (H^m, 4H, ³J_HpHm 7.7, ³J_HoHm 7.7, ⁴J_PCCCHm 3.5), 3.16 д.к (NCH₂, 4H, ³J_PNCH 11.3, ³J_HH 7.1), 3.10 м (C¹H₂, 2H), 1.35-1.38 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.05-1.08 ми 1.04 уш.м (C⁴H₂, C⁵H₂, C⁶H₂, C⁷H₂, C⁸H₂, 10H), 1.0 т (NCCH₃, 6H, ³J_HH 7.1), 0.67 т (C⁹H₃, 3H, ³J_HH 7.1). Спектр ЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 134.79 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 164.2, ³J_HCCC 7.1, ⁴J_PCCCC 2.9), 132.59 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 163.6, ³J_HCCC 7.4, ²J_PCC 10.6,), 130.07 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.8, ³J_PCCC 12.6, ³J_HCCC 7.3), 119.88 д.т (d) (Cⁱ, ¹J_PC 96.4, ³J_HCCC 8.4), 41.42 т.к.д (д) (NCH₂, ¹J_HC 138.4, ²J_HCC 4.0, ²J_PNC 3.0), 31.31 т.м (с) (C⁷, ¹J_HC 125.0-126.0),30.04 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 125.0-126.0, ²J_PCC 16.0), 28.68 и 28.66 дват.м (двас) (C⁵, C⁶, ¹J_HC 124.0-125.0), 28.64 т.м (уш.с) (C⁴, ¹J_HC 122.0-124.0), 24.23 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 131.1, ¹J_PC 63.0), 22.14 т.м (с) (C⁸, ¹J_HC 124.2), 21.99 т.м (д) (C³, ¹J_HC 126.0-128.0, ³J_PCCC 3.7), 13.66 к.м (с) (C⁹, ¹J_HC 124.5, ³J_HCCC 3.5-4.0, ²J_HCC 3.5-4.0), 13.55 к.д.т (д) (NCCH₃, ¹J_HC 127.3, ³J_PNCC 2.6, ²J_HCC 2.7). Спектр ЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 52.0 м.д.

Йодид децил-дифенил-(диэтиламино)фосфония (Il), светло-желтоемасло, выход 1.97 г (94 %). Найдено: C, 59.65; H, 8.18; N, 2.83; P, 6.14 %, вычислено для C₂₆H₄₁NIP: C, 59.43; H, 7.86; N, 2.67; P, 5.90 %. Спектр ESI-MS, m/z: 398.27 [M – I]⁺; рассчитано для C₂₆H₄₁NP⁺: 398.30. СпектрЯМР¹H (400.0 МГц, CDCl₃, δм.д., J Гц): 7.79 и 7.76 два м (H^o, H^p, 6H, ³J_PCCHo12.4, ³J_HoHm 7.7, ³J_HmHp 7.7, ⁵J_PCCCCHp 1.4, ⁴J_HmCCCHp 1.3), 7.68 м (H^m, 4H, ³J_HpHm 7.7, ³J_HoHm 7.7, ⁴J_PCCCHm 3.5), 3.25 д.к (NCH₂, 4H, ³J_PNCH 11.3, ³J_HH 7.1), 3.20 м (C¹H₂, 2H), 1.44-1.48 м (C²H₂, C³H₂, 4H), 1.15-1.17 ми 1.12 уш.м (C⁴H₂, C⁵H₂, C⁶H₂, C⁷H₂, C⁸H₂, C⁹H₂, 12H), 1.08 т (NCCH₃, 6H, ³J_HH 7.1), 0.77 т (C¹⁰H₃, 3H, ³J_HH 7.1). СпектрЯМР¹³C (100.6 МГц, CDCl₃, δ_C м.д., J Гц): 135.07 д.т.д (д) (C^p, ¹J_HC 163.3, ³J_HCCC 7.3, ⁴J_PCCCC 2.9), 132.90 д.д.д.д (д) (C^o, ¹J_HC 163.5, ³J_HCCC 7.1, ²J_PCC 10.5), 130.34 д.д.д (д) (C^m, ¹J_HC 165.8, ³J_PCCC 12.6, ³J_HCCC 7.4), 120.33 д.т (д) (Cⁱ, ¹J_PC 96.6, ³J_HCCC 7.4), 41.73 т.к.д (д) (NCH₂, ¹J_HC 139.5, ²J_HCC 4.2, ²J_PNC 2.7), 31.67 т.м (с) (C⁸, ¹J_HC 126.0-127.0), 30.36 т.д.м (д) (C², ¹J_HC 125.0-126.0, ²J_PCC 16.0), 29.28 т.м (с) (C⁷, ¹J_HC 127.1), 29.07 и 29.04 дват .м (двас) (C⁵, C⁶, ¹J_HC 124.0-125.0), 28.97 т.м (уш.с) (C⁴, ¹J_HC 122.0-124.0), 24.55 т.д.м (д) (C¹, ¹J_HC 132.1, ¹J_PC 62.9), 22.48 т.м (с) (C⁹, ¹J_HC 124.0-125.0), 22.31 т.м (д) (C³, ¹J_HC 126.0-128.0, ³J_PCCC 3.5), 13.96 к.м (с) (C¹⁰, ¹J_HC 125.1), 13.82 к.д.т (д) (NCCH₃, ¹J_HC 127.4, ³J_PNCC 2.6, ²J_HCC 2.8). СпектрЯМР³¹P-{¹H} (162.0 МГц, CDCl₃): δ_P 51.1 м.д.

Цитотоксическое действие заявляемых соединений определяют в отношении условно-нормальных клеток печени человека (Changliver) из коллекции НИИ вирусологии РАМН (Москва) и эмбриональных клеток легкого человека WI38 (VA 13 сублиния 2RA) из коллекции Института цитологии РАН (Санкт-Петербург), а также в отношении раковых клеточных линий человека M-HeLa клон 11 (эпителиоидная карцинома шейки матки, сублиния HeLa, клон M-HeLa), T98G – глиобластома; HepG2 карцинома печени; PANC-1 – аденокарцинома поджелудочной железы; HuTu80 – аденокарцинома двенадцатиперстной кишки; MCF7 – аденокарцинома молочной железы (плевральная жидкость); А549 – карцинома легкого; PC3 –аденокарцинома простаты из ATCC (American Type Cell Collection, США; CRL 1435); SK-OV-3 – аденокарцинома яичника; DU-145 – карцинома простаты из коллекции CLSCellLinesService.

Цитотоксическое действие заявляемых соединений на клетки определяют с помощью колориметрического метода клеточной пролиферации – МТТ-теста. Клетки высевают на 96-луночный планшет Nunc в концентрации 5×10³ клеток на лунку в объеме 100 мкл среды и культивируют в СО₂-инкубаторе при 37°С до образования монослоя. Затем питательную среду удаляют и в лунки добавляют по 100 мкл растворов заявляемых соединений в заданных разведениях, приготовленные непосредственно в питательной среде с добавлением ДМСО (5% по объему) для улучшения растворимости. После 48-часовой инкубации клеток с заявляемыми соединениями питательную среду удаляют и добавляют 100 мкл питательной среды без сыворотки, содержащей МТТ в концентрации 0.5 мг/мл, и инкубируют 4 ч при 37°С. В каждую лунку к кристаллам формазана добавляют по 100 мкл ДМСО. Поглощение регистрируют при длине волны 540 нм на микропланшетном ридере Invitrologic (Россия). Эксперименты для всех соединений повторяют трижды.

В таблице 1 представлены данные о цитотоксичности заявляемых аминофосфониевых солей и препарата сравнения – доксорубицина. Результаты характеризуются значениями концентраций полумаксимального ингибирования IC₅₀, а также данными индекса селективности (SI), приведенного в таблице 1 в скобках под значением цитотоксичности, рассчитанного как соотношение между значением IC₅₀ эмбриональных клеток легкого человека WI38 (обозначенного^а) или условно-нормальными клетками печени человека Changliver (обозначенного^б) и значением IC₅₀ для раковых клеток. При этом в таблице 1 для соединений Ia, Ib, Ic, Id, If, Ig, Ih и доксорубицина приведен индекс селективности (SI), рассчитанный по условно-нормальным клеткам печени человека Changliver(^б), а для соединений Ie, Ii, Ij, Ik и Il– по эмбриональным клеткам легкого человека WI38(^а), поскольку значения IC₅₀ для Ie, Ii, Ij, Ik и Il выше, чем значения IC₅₀ для нормальных клеток печени человека Changliver. Большинство соединений демонстрируют высокую и умеренную активность в отношении всегоуказанного спектра клеточных линий. Цитотоксичность заявляемых соединений в отношении нормальных клеток в ряде случаев ниже цититоксичности в отношении к раковым клеткам. При этом индекс селективности составил SI ≥ 10, что свидетельствует об их высокой селективности [O.Peña-Morán, M.Villarreal, L.Álvarez-Berber, A.Meneses-Acosta, V.Rodríguez-López. Molecules. 2016, Vol. 21, 1013].

Значения концентрации полумаксимального ингибирования (IC₅₀) в отношении нормальных клеток печени Changliver составили для Ia – 17.7 мкM, для Ib – 4.0 мкM, для Ic – 4.8 мкM, для Id – 12.0 мкM, для Ie – 22.6 мкM, для If – 4.0 мкM, для Ig – 4.1 мкM, для Ih – 1.3 мкM, для Ii – 15.2 мкM, для препарата сравнения – доксорубицина – 0.5 мкM. Значения IC₅₀ для соединений Ij, Ik и Il находятся на уровне и ниже значения IC₅₀для препарата сравнения. Данные показывают, что все заявляемые соединения проявляют активность в отношении культуры клеток печени Changliver в значительных концентрациях – в 2.6-45.2 раз выше, по сравнению со значениямидля доксорубицина.

Значения концентрации полумаксимального ингибирования (IC₅₀) в отношении нормальных клеток легкого человека WI38 составили для Ia – 7.6 мкM, для Ib – 0.8 мкM, для Ic – 0.8 мкM, для Id – 0.9 мкM, для Ie – 63.0 мкM, для Ii – 27.7 мкM, для Ij – 16.1 мкM, для Ik – 8.3 мкM, для препарата сравнения доксорубицина – 0.4 мкM. Значения для соединений If, Ig, Ih и Il – на уровне и ниже значений для препарата сравнения. Заявляемые соединения также проявляют активность в отношении культуры клеток легкого человека WI38 в значительных концентрациях, которые в 2.0-157.5 раз выше концентраций доксорубицина.

Большинство заявляемых соединений в целом проявляют высокую цитотоксичность в отношении клеточной линии M-Hela. Так, для соединений Ib-d, If-h, Ij-lIC₅₀ находится в пределах 0.24-1.8 мкМ (SI 1.6-17.0). В то же время по показателю SI выделяются соединения Id (SI 7.1), Ii (SI 4.8) и Ij (SI 17.0), причем лидером является соединение Ij (0.95 мкМ), IC₅₀ которого в два раза ниже, чем у препарата сравнения – доксорубицина (2.1 мкМ).

На линии клеток HuTu80 наблюдается выраженная зависимость SI от катиона аминофосфония: при достаточно низких значениях IC₅₀0.1-11.4 мкM для соединений I (для соединения Ii IC₅₀в 2 раза ниже чем для доксорубицина), показатель селективности возрастает в ряду Ia-d<Ie-h<Ii-l. Так, среди аминофосфониевых соединений максимальное значение SI^а наблюдается для производных аминофосфония Ii (SI 277) и Ie (SI 210).

Аналогичная картина реализуется и для линии клеток РС3, рост которых достаточно избирательно ингибируется соединениями Ij, Ik и Ii с IC₅₀ (мкМ) и (SI): 0.85 (19), 1.0 (8.3) и 4.0 (6.9) соответственно.

Моноаминофосфониевые соединения Ii-k также показали более высокую эффективность в отношении линии клеток Du-145 по сравнению с производными Ia-d и Ie-h со следующими значениями IC₅₀ (мкM) и (SI): Ij – 0.8 (20); Ii – 2.6 (11); Ik – 1.3 (6.4). Среди три- и диаминофосфониевых соединений можно отметить Id и Ig со значениями IC₅₀ (мкM) и (SI): 1.2 (10) и 0.9 (4.6) соответственно.

Обнаруженные тенденции наблюдаются и в отношении клеточной линии PANC-1, наиболее эффективными являются соединения Ij, Id, Ii, Ik, имеющие следующие значения IC₅₀ (мкM) и (SI): Ij – 1.3 (12); Id – 1.6 (7.5); Ik – 1.3 (6.4); Ii – 5.5 (5.0).

Исследуемые соединения также показали умеренную или высокую цитотоксичность в отношении клеточной линии MCF-7. Соединение Id (IC₅₀ 2.1 мкМ) показало высокий индекс селективности (SI 5.7). Замена одной или двух аминогрупп на фенильный заместитель в соединениях If-h, Ik,l не приводит к увеличению цитотоксичности по отношению к клеточной линии MCF-7, которая составляет 0.7-4.2 мкМ.Хорошую цитотоксичноскую активность в отношении клеточной линии MCF-7 проявило соединение Ih (0.7 мкМ), (SI 1.9), однако значение IC₅₀ не превосходит значения IC₅₀ для препарата сравнения доксорубицина (0.4 мкМ).

Данные, иллюстрирующие апоптоз по внутреннему митохондриальному пути, вызываемый заявляемыми соединениями, представлен на примере соединений Ib, If и Ii в отношении HuTu80.На фиг. 1 представлены данные об индукции апоптоза в клетках HuTu80, инкубированных с соединениями Ib, If и Ii. Эксперименты проводят методом проточной цитометрии в концентрациях IC₅₀/2 и IC₅₀. Клетки собирают при 2000 об/мин в течение 5 минут, затем дважды промывают ледяным фосфатным буфером с последующим ресуспендированием в буфере для связывания. Далее образцы инкубируют с 5 мкл аннексина V AlexaFluor 647 (Sigma-Aldrich, США) и 5 мкл йодида пропидия (Thermo Scientific) в течение 15 минут при комнатной температуре в темноте [V.F. Mironov, A.V. Nemtarev, O.V. Tsepaeva, M.N. Dimukhametov, I.A. Litvinov, A.D. Voloshina, T.N. Pashirova, E.A. Titov, A.P. Lyubina, S.K. Amerhanova, A.T. Gubaidullin, D.R. Islamov. Molecules, 2021, Vol. 26, P. 6350]. Клетки анализируют методом проточной цитометрии в течение 1 часа. Эксперименты повторяют трижды.

На фиг.1 показано распределение живых, мертвых, а также клеток в раннем и позднем апоптозе после 48-часовой инкубации с соединениями Ib, If и Ii (в концентрациях 0.05-4 мкМ (средние и правые гистограммы), из расчета концентраций IC₅₀/2 и IC₅₀, с контролем – опухолевые клетки без обработки (левая гистограмма).

Значения представлены как среднее ± стандартное отклонение (3 повторности), L – живые клетки; D – мертвые клетки; Ea – клетки в раннем апоптозе; La – клетки в позднем апоптозе.

Из представленных данных видно, что после 48-часовой инкубации заявляемые соединения вызывают индукцию апоптоза в клетках НuТu 80. Так, после взаимодействия Ib с клетками линии НuТu 80 доля мертвых клеток составляет (L – 95.90%, D – 2.85% в контроле, L – 37.86%, D – 24.62% для концентрации 1.6 мкМ и L – 32.96%, D – 35.73% для концентрации 3.2 мкМ), а также клеток в позднем апоптозе (Ea – 0.17%, La – 1.09% в контроле, Ea – 28.76%, La – 8.72% для концентрации 1.6 мкМ, Ea – 26.48%, La – 4.8% для концентрации 3.2 мкМ).

Для соединения If доля мертвых клеток составляет (L – 40.96%, D – 31.63% для концентрации 2.0 мкМ и L – 33.73%, D – 33.56% для концентрации 4.0 мкМ), а также клеток в позднем апоптозе (Ea – 15.80%, La – 11.61% для концентрации 2.0 мкМ, Ea – 20.62%, La – 12.09% для концентрации 4.0 мкМ).

Для соединения Ii доля мертвых клеток составляет (L – 77.73%, D – 15.83% для концентрации 0.05 мкМ и L – 63.38%, D – 30.59% для концентрации 0.1 мкМ), а также клеток в позднем апоптозе (Ea – 4.64%, La – 1.80% для концентрации 0.5 мкМ, Ea – 3.11%, La – 2.92% для концентрации 0.1 мкМ).

В клетках HuTu80 после 48-часовой инкубации в присутствии соединений Ib и If наблюдают дозозависимый апоптоз с преобладанием апоптотических эффектов на поздней стадии. Для моноаминофосфониевой соли Ii количество некротических клеток преобладало в обеих концентрациях при 0.05 мкМ и 0.1 мкМ. Полученные результаты свидетельствуют о влиянии структурных модификаций солей аминофосфония на процесс апоптоза в клетках HuTu80.

На фиг. 2 и фиг. 3 представлены данные о влиянии соединений Ib, If, Ii на потенциал митохондриальной мембраны. Эксперименты проводят методом проточной цитометрии с использованием флуоресцентного красителя JC-10 из набора Mitochondria Membrane Potential Kit. Клетки собирают при 2000 об/мин в течение 5 минут, затем дважды промывают ледяным PBS с последующим ресуспендированием в JC-10 (10 мкг/мл) и инкубацией при 37°C в течение 10 минут. Затем клетки трижды промывают и суспендируют в PBS, флуоресценцию JC-10 наблюдают методом проточной цитометрии.

После 48-часовой обработки соединениями Ib, If и Ii наблюдают снижение мембранного потенциала митохондрий клеток HuTu80. При этом соединение Ik вызывает более существенное снижение мембранного потенциала митохондрий в клетках HuTu80 по сравнению с Ib и If. Для всех соединений эффект деполяризации мембраны митохондрий заметно усиливается в концентрации IC₅₀.

Как видно на фиг. 2, соединение Ib приводит к медленному снижению митохондриального мембранного потенциала клеток HuTu80, которое в контроле составляет 97.40% (левая гистограмма), для клеток HuTu80, обработанных соединением Ib в концентрации 1.6 мкМ, – 93.79% (средняя гистограмма), и в концентрации 3.2 мкМ – 87.42% (правая гистограмма). При этом интенсивность зеленой флуоресценции составляет 7.53% (при 1.6 мкМ) и 13.53% (при 3.2мкМ), что в 3.1 и 5.7 раз соответственно превышает значения контроля 2.39% (клетки HuTu80).

Соединение If приводит к снижению митохондриального мембранного потенциала клеток HuTu80 при концентрации 2.0 мкМ – 86.51%, (средняя гистограмма) и при концентрации 4.0 мкМ – 81.10% (правая гистограмма). При этом интенсивность зеленой флуоресценции составляет 13.49% (при 2.0 мкМ) и 18.87% (при 4.0мкМ), что в 5.6 и 7.9 раз соответственно превышает значения контроля 2.39% (клетки HuTu80).

Соединение Ii также приводит к снижению митохондриального мембранного потенциала клеток HuTu80 при концентрации 0.05 мкМ – 71.58%, (средняя гистограмма) и при концентрации 0.1 мкМ – 67.28% (правая гистограмма). При этом интенсивность зеленой флуоресценции составляет 28.39% (при 0.05 мкМ) и 31.58% (при 0.1мкМ), что в 11.2 и 13.2 раз соответственно превышает значения контроля 2.39% (клетки HuTu80).

На фиг. 3 визуализировано в виде диаграммыколичественное распределение нормальных клеток HuTu 80 (с красной флуоресценцией JC-10) и апоптотических клеток (с зеленой флуоресценцией JC-10) после обработки соединениями Ib, If и Ii в вышеуказанных концентрациях по сравнению с контролем (необработанные клетки – левая гистограмма).

Полученные результаты позволяют предположить, что в основе механизма цитотоксического действия солей Ib, If и Ii лежит апоптоз по внутреннему митохондриальному пути.

На фиг. 4 представлены данные о генерации внутриклеточных активных формах кислорода (АФК) в клетках HuTu80 под действием соединений Ib, If и Ii. На фиг. 4 под номером: 1) представлено соединение Ib – в концентрации IC₅₀/2 (1.6 мкМ); 2) Ib – при концентрации IC₅₀ (3.2 мкМ); 3) If – при концентрации IC₅₀/2 (2 мкМ); 4) If – при концентрации IC₅₀ (4 мкМ); 5) Ii – в концентрации IC₅₀/2 (0.05 мкМ); 6) Ii – в концентрации IC₅₀ (0.1 мкМ). Данные представлены как среднее ±стандартное отклонение трех независимых экспериментов. Клетки HuTu80 инкубируют с соединениями Ib, If и Ii в концентрациях IC₅₀/2 и IC₅₀ в течение 48 часов. Генерацию АФК определяют с помощью анализа проточной цитометрии и набора для проточной цитометрии CellROX® Deep Red. Для этого клетки HuTu80 собирают при 2000 об/мин в течение 5 минут, затем дважды промывают ледяным PBS с последующим ресуспендированием в 0.1 мл среды без фетальной бычьей сыворотки, к которой добавляют 0.2 мкл CellROX® Deep Red и инкубируют при 37°С в течение 30 минут. После трехкратного промывания клетки суспендируют в фосфатном буфере и сразу же контролируют продукцию клеток АФК, используя проточный цитометр.

После обработки соединениями Ib, If и Ii в концентрациях IC₅₀/2 и IC₅₀ по сравнению с контролем (неокрашенные клетки) происходит увеличение интенсивности флуоресценции CellROX ® Deep Red, что свидетельствует об усилении продукции АФК.

Данные показывают небольшое увеличение интенсивности флуоресценции CellROX® Deep Red для соединений Ib и If. Для соединения Ib при концентрации 1.6 мкМ относительная интенсивность флуоресценции составляет 110 и 140% (при 3.2 мкМ) при этом значение для контроля составляет 47%(клеток HuTu80). Подобную картину наблюдают идля соединения If– при 2.0 мкМ относительная интенсивность флуоресценции составляет 67 и 83% (при 4.0мкМ), что практически совпадает с показателем для контроля (47%). Соединение Ii демонстрирует высокую способность продуцировать АФК в клетках HuTu80 – относительная интенсивность флуоресценции составляет 173%(при 0.05 мкМ) и 417% (при 0.1мкМ), что превышает значение контроля в 3.7 и 8.9раз соответственно. Данные свидетельствуют об увеличении продукции АФК в присутствии указанных соединений.

На фиг. 5 представлены данные о ферментативной активности ключевых маркеров раннего апоптоза – каспазы 9 и каспазы 8. Клетки HuTu80 инкубируют в течение 48 часов с Ib, If и Ii в концентрациях IC₅₀/2 и IC₅₀. Количественное определение каспазы-9 и каспазы-8 invitro проводят с использованием наборов ELISA (набор ELISA для каспазы 9 (CASP9)-HumanCloud-CloneCorp. и набор ELISA для каспазы 8 (CASP8)-Human-Cloud-CloneCorp. (CCC, Ухань)). Анализ проводят согласно инструкции производителя. Образцы стандартизируют по содержанию общего белка (1 мг/мл). Концентрацию белка определяют методом Бредфорд с использованием реагента BredfordDyeReagent (BIO-RAD, США). Поглощение измеряют с использованием устройства для считывания микропланшетов EPOCH (BioTek Instruments Inc., США) при длине волны 450 ± 10 нм. В качестве контроля используют лизаты необработанных клеток HuTu80.

Содержание каспазы 9 в лизатах клеток HuTu80 после обработки соединением Ib в концентрации 1.6 мкМ составляет 0.4 нг/мл и 1.6нг/мл (при 3.2 мкМ), что превышает значение контроля (0.2 нг/мл) в 2 и 8 раз соответственно. Содержания каспазы 9 в лизатах клеток HuTu80 после обработки соединениями If и Ii превышают значения контороля в 2-3 раза. Из представленных данных видно, что концентрация каспазы 9, играющей ключевую роль в митохондриальном сигнальном пути индукции апоптоза, в образцах, обработанных соединениями Ib, If и Ii в концентрациях IC₅₀/2 и IC₅₀, значительно увеличивается по сравнению с контролем. Наименьшая концентрация каспазы 9 наблюдается в случае соединения Ii, что согласуется с данными оценки апоптоза методом проточной цитометрии.

Концентрация каспазы 8, активация которой характеризует внешний (рецептор-зависимый) путь апоптоза, значительно снижается относительно контроля после обработки веществами Ib и If. Содержания каспазы 8 в лизатах клеток HuTu80 после обработки соединениями Ib, If и Ii ниже значения контроля (0.5нг/мл), за исключением соединения Ii при концентрации 0.05 мкМ, для которого данный показатель составил 0.6нг/мл. В то же время в случае Ii ее содержание меняется незначительно по сравнению с контрольными значениями. Таким образом, можно предположить, что изученные соединения обладают цитотоксическим действием за счет индукции апоптоза, протекающего по митохондриальному пути.

В таблице 2 представлены данные об антибактериальной активности заявляемых соединений формулы I. Активность заявляемых аминофосфониевых солей определяют путем серийных микроразведений в 96-луночных планшетах с использованием бульона Мюллера-Хинтона для бактериальной культуры. Аминофосфониевые соли проявляют бактериостатическую активность в отношении следующих культур грамположительных бактерий: Staphylococcus aureus ATCC 6538 PFDA 209P, Bacilluscereus ATCC 10702 NCTC 8035, Enterococcus faecalis ATCC 29212, приобретенныхиз Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур «СКПМ-Оболенск». В бактериологической лаборатории Республиканской клинической больницы (Казань, Россия) от больных хроническим тонзиллитом (MRSA-1) и синуситом (MRSA-2) выделены метициллинрезистентные штаммы S.aureus (MRSA). Эксперименты проводят в трех повторностях.

В отношении Staphylococcus aureus ATCC 6538 PFDA 209P антибактериальную активность проявляют следующие соединения, МИК которых составила для Ic – 3.9 мкМ, для Id –1.9 мкМ, для Ig – 3.9 мкМ, для Ih – 0.9 мкМ, для Ik – 3.9 мкМ, для Il – 0.9 мкМ. Данный показатель известного антибактериального препарата норфлоксацина составил 7.5 мкМ.

В отношении Bacilluscereus ATCC 10702 NCTC 8035 МИКсоставляет: для Ib – 7.8 мкМ, для Ic – 3.9 мкМ, для Id – 0.9 мкМ, для If –7.8 мкМ, для Ig – 3.9 мкМ, для Ih – 0.9 мкМ, для Ij – 3.9 мкМ, для Ik – 1.9 мкМ, для Il – 0.9 мкМ, в то время какданный показатель известного антибактериального препарата норфлоксацина составил 24.4 мкМ.

В отношении Enterococcus faecalis ATCC 29212 МИК составляет для Id – 15.6 мкМ, для Ih – 15.6 мкМ, для Il – 3,9 мкМ, показатель известного антибактериального препарата норфлоксацина составил 24.4 мкМ.

В отношении штаммов S.aureus (MRSA-1) и (MRSA-2) высокую антибактериальную активность проявляют соединения Id, Ig, Ih, Ik и Il, МИК для которых составляет соответственно Id – 0.9 и 1,9 мкМ, Ig – по 3.9 мкМ, Ih – по 0.9 мкМ, Ik – по 3.9 мкМ, Il – по 0.5 мкМ, при этом данный показатель для бактерии штамма (MRSA-2) норфлоксацина составил 7.5 мкМ.

Таким образом, данные таблицы 2 демонстрируют избирательную активность заявляемых соединенийв отношении всех указанных грамположительных бактерий, включая штаммы MRSA. Большинство солей аминофосфония проявляют антибактериальное действие на уровне фторхинолонового антибиотика норфлоксацина, а в ряде случаев их антибактериальная активность даже значительно превосходит активность данного препарата сравнения.

В таблице 3 представлены данные о гемолитическоой активности аминофосфониевых солей Ib, If и Ij. Активностьоцениваютпометодике [CoxG., KotevaK., WrightG.D. An unusual class of anthracyclines potentiate Gram-positive antibiotics in intrinsically resistant Gram-negative bacteria. J. Antimicrob. Chemother. 2014, Vol. 69, P. 1844–1855] путем сравнения оптической плотности раствора, содержащего заявляемое соединение, с оптической плотностью крови при 100% гемолизе. В качестве препарата сравнения использовуют грамицидин С. Эксперименты повторяют трижды и выражают как среднее стандартное отклонение (SD). Из представленных данных видно, что значения гемолитической активности (HC₅₀)тестируемых соединений составляют >100 мкМ, что свидетельствует о высокой селективности последних по отношению к бактериальным клеткам и низкой токсичности по отношению к клеткам крови человека. При воздействии соединений эритроциты сохраняют жизнеспособность, а бактериальные клетки погибают.

В таблице 4 представлены данные об острой токсичности аминофосфониевых солей Ia, Ib, Id, Ie, If и Ij. Данные приведены на самцах аутбредных белых мышей линии CD-1 в возрасте 2-3 месяца массой 20-30 граммов. Животныхсодержатвсоответствиис [EC Committee Guidance on Management and Care of Animals Used for Experiments and Other Research Purposes, 2007/526/ EC, of June 18th 2007; Guide for the Care and Use of Laboratory Animals; National Academies Press: Washington, D.C., 2011; ISBN 978-0-309-15400-0; A guide to preclinical drug research. PartOne; Mironov, A., Ed.; Moscow: GrifandK, 2012] в стандартных условиях в виварии с 12-часовым световым днем и свободным доступом к пище и воде. Животных кормят полноценными кормами, приготовленными согласно Спецификации (белок 22%, клетчатка не более 4%, жир не более 5%, зола не более 9%, влажность не более 13,5%, калорийность 295 ккал/100 г). Исследования проводят при однократном парентеральном – внутрибрюшином (интраперитонеальном) введении, согласно методике [Aguidetopreclinicaldrugresearch. PartOne; Mironov, A., Ed.; Moscow: GrifandK, 2012]. Вещества вводят в виде растворов в 40% ДМСО, разбавленном в стерильном физрастворе. Растворы веществ готовят непосредственно перед введением. Общий объем вводимой жидкости составил 0.1 мл/10 г массы животного. В качестве контроля служит группа мышей, которой вводили в аналогичных условиях эквивалентное количество (0.1 мл/10 г, или 10 мл/кг) растворителя – 40% ДМСО на стерильном физрастворе. Вещества вводят в дозах от 1 до 1000 мг/кг, в каждой группе по 3-6 животных. Для оценки острой токсичности за животными наблюдают 14 дней после введения веществ, оценивая их общее состояние и фиксируя случаи гибели.

Показано, что среди изученных веществ наибольшую токсичность имеет Id (ЛД₅₀ 6.9 мг/кг), который по классификации [I.V. Berezovskaya. Pharm. Chem. J. 2003, Vol. 37, P. 139-141] относится к классу высокотоксичных соединений. Соединения Iа, Ib, Iе, If и Ij в диапазоне от 37.5 до 106.5 мг/кг можно отнести к умеренно токсичным соединениям.

Таким образом, предложены соединения, расширяющие арсенал противоопухолевых средств, – новые аминофосфониевые соли, характеризующиеся повышенным цитотоксическим действием в отношении различных опухолевых клеток, и проявляющие активность в отношении грамположительных бактерий, а также способ получения заявляемых соединений. Механизм действия предлагаемых соединений может быть связан с индукцией апоптоза, протекающего по внутреннему митохондриальному пути, что делает их перспективными в качестве противоопухолевых агентов нового поколения. Адресная доставка соединений в опухолевые клетки подтверждается изменением митохондриального мембранного потенциала и индукцией апоптоза.

Исследование проведено за счет гранта Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках Соглашения о предоставлении из федерального бюджета грантов в форме субсидий в соответствии с пунктом 4 статьи 78.1 Бюджетного кодекса Российской Федерации, г. Москва, 01.10.2020 г. № 075-15-2020-777.

Изобретение относится к низкотоксичным аминофосфониевым солям формулы I. Способ получения аминофосфониевых солей формулы I по изобретению включает взаимодействие в эквимольном количестве соединений формулы II, где R¹ = NEt₂ или Ph, R² = NEt₂ или Ph, с 1-йодалканами – 1-йодгексаном, 1-йодоктаном, 1-йоднонаном или 1-йоддеканом – в ацетонитриле в инертной среде с последующим выделением целевого продукта. Изобретение относится к применению аминофосфониевых солей формулы I в качестве соединений, обладающих противоопухолевой активностью в отношении глиобластомы T98G, аденокарциномы шейки матки M-HeLa, аденокарциномы печени HepG2, аденокарциномы поджелудочной железы PANC-1, аденокарциномы двенадцатиперстной кишки человека HuTu80, аденокарциномы молочной железы MCF7, аденокарциномы легкого А549, аденокарциномы яичника SK-OV-3, аденокарциномы предстательной железы PC3 и аденокарциномы предстательной железы DU-145. Технический результат - аминофосфониевые соли, обладающие цитотоксичностью в отношении раковых клеток, обеспечивающие адресную доставку соединений в опухолевые клетки, способные эффективно приводить к апоптозу по внутреннему митохондриальному пути, тем самым подавляя рост раковых клеток. 3 н.п. ф-лы, 4 табл., 5 ил.

1. Низкотоксичные аминофосфониевые соли формулы I

.

2. Способ получения аминофосфониевых солей формулы I

,

включающий взаимодействие в эквимольном количестве соединений формулы II

где R¹ = NEt₂ или Ph, R² = NEt₂ или Ph,

с 1-йодалканами – 1-йодгексаном, 1-йодоктаном, 1-йоднонаном или 1-йоддеканом – в ацетонитриле в инертной среде с последующим выделением целевого продукта.

3. Применение аминофосфониевых солей формулы I

в качестве соединений, обладающих противоопухолевой активностью в отношении глиобластомы T98G, аденокарциномы шейки матки M-HeLa, аденокарциномы печени HepG2, аденокарциномы поджелудочной железы PANC-1, аденокарциномы двенадцатиперстной кишки человека HuTu80, аденокарциномы молочной железы MCF7, аденокарциномы легкого А549, аденокарциномы яичника SK-OV-3, аденокарциномы предстательной железы PC3 и аденокарциномы предстательной железы DU-145.