ШТАММ БАКТЕРИЙ, ПРИНАДЛЕЖАЩИЙ К РОДУ BACILLUS, И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО БОРЬБЫ НА ОСНОВЕ УКАЗАННОГО ШТАММА БАКТЕРИЙ Российский патент 2025 года по МПК C12N1/20 A01N63/22 C12R1/07 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к средству для борьбы с передающимися через почву болезнями растений, которое распыляют на надземную часть растения для эффективной борьбы с бактериальным увяданием (бактериальным вилтом) и другими болезнями растений, вызываемыми заражением корня, и/или к штамму бактерий рода Bacillus, который можно культивировать за более короткий период времени, чем традиционные штаммы.

Предпосылки создания изобретения

Борьба с болезнями сельскохозяйственных культур (болезнями растений), вызываемыми патогенными бактериями, является очень важной проблемой для фермеров во всем мире. Культуральный контроль и применение противомикробных средств являются традиционными подходами к борьбе с болезнями растений. Однако с некоторыми бактериальными болезнями растений трудно бороться традиционными методами, включая культуральный контроль и противомикробные средства.

Примером таких болезней растений является бактериальное увядание, представляющее собой передаваемую через почву болезнь, вызываемую комплексом видов почвенных бактерий Ralstonia solanacearum. Когда растения, такие как томаты, баклажаны и картофель, заражаются патогенами бактериального увядания, они быстро увядают, что приводит к значительной потере урожая. Ralstonia solanacearum представляет собой широко распространенный патоген, главным образом, в регионах мира с тропическим, субтропическим и умеренным климатом, заражая более 200 видов растений, прежде всего растений сем. Solanaceae, и нанося ущерб посевам. Фактически бактериальное увядание является одной из серьезных и важных проблем для сельского хозяйства.

К настоящему времени предложено большое количество методов борьбы с бактериальным увяданием. Примеры таких методов, применяемых в настоящее время, включают использование химических пестицидов, дезинфекцию почвы, такую как солнечная дезинфекция или восстановительная дезинфекция, и выращивание или селекцию устойчивых сортов саженцев. Бактерии, вызывающие бактериальное увядание, могут выживать в почве в течение длительных периодов времени (на глубине примерно от 50 см до 1 м от поверхности), даже, когда поверхность почвы успешно продезинфицирована с помощью, например, обеззараживания почвы. В настоящее время отсутствует дезинфицирующее средство для почвы, которое могло бы проникать в почву столь глубоко, и полное удаление бактерий из почвы остается действительно трудной задачей. Резистентность устойчивых сортов также не является совершенной и не может обеспечивать достаточное действие в зависимости от условий окружающей среды. К настоящему времени предложен другой тип пестицида, такой, например, как индуктор устойчивости к бактериальному увяданию (PTL 1). Однако эффективность таких пестицидов также является недостаточной.

В качестве контрмеры предложен способ борьбы, в котором используют биопестицид для подавления развития болезней растений посредством антагонистического действия против патогенов, присутствующих в почве. Борьба с бактериями, возбудителями бактериального увядания, с помощью микробиологических пестицидов изучена с использованием штаммов бактерий, таких как бактериальные штаммы Pseudomonas и Bacillus (NPL 1). Однако борьба с помощью таких биопестицидов пока не является достаточно эффективной. Предпринимались попытки борьбы с бактериальным увяданием с помощью подкормки компостом, содержащим различные микроорганизмы. Однако эффективность этого метода осталась неясной, и многие из предыдущих попыток потерпели неудачу. Поскольку вышеописанные методы обладают эффективностью при обработке почвы, требуется колонизировать антагонистические микроорганизмы в почве, ризосфере и растении. Однако часто сложно получать последовательное стабильное действие в существенно изменяющихся условиях почвы. Другая сложность состоит в том, что трудно обеспечивать колонизацию и размножение штаммов, не являющихся патогенными для растения. Фактически это является одной из причин предыдущей неудачи в разработке метода борьбы с использованием биопестицидов.

Учитывая указанные известные из существующего уровня техники предпосылки, промышленность нуждается в разработке и коммерциализации средства для борьбы с болезнями, передаваемыми через почву, в котором применяют обладающий способностью к колонизации и размножению в почве или растении микроорганизм, не являющийся патогенным для растения, но который обладает достаточными уровнями требуемой активности и который можно безопасно применять в качестве пестицида, обладающего действием, достаточным с позиции практики и стабильности для борьбы с бактериальным увяданием и другими передаваемыми через почву болезнями растений, с которыми трудно бороться с помощью традиционного подхода.

Перечень процитированных документов

Патентная литература

PTL 1: JP-A-2012-211124

Непатентная литература

NPL 1: Chemistry and Biology, Kagaku to Seibutsu, т.51, №8, 2013, cc. 541-547.

Краткое изложение сущности изобретения

Задача, положенная в основе настоящего изобретения

Целью настоящего изобретения является, среди прочего, создание непатогенного для растений штамма, который стабильно может обеспечивать борьбу с передаваемой через почву болезнью растений в месте фактического возделывания сельскохозяйственной культуры, и который можно безопасно применять в качестве биопестицида для растений, и создание средства для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений с использованием указанного штамма.

Поскольку бактериальное увядание представляет собой болезнь, вызываемую почвообитающими бактериями, часто проводят обработку почвы от бактериального увядания, например, путем орошения или фумигации. Однако обработка почвы имеет ряд вышеуказанных недостатков.

Таким образом, другой целью настоящего изобретения является разработка нового и эффективного способа обработки и новых и эффективных компонентов, которые позволяют преодолевать указанные недостатки.

Решение задачи

Для достижения указанных целей при создании настоящего изобретения были изучены вышеуказанные проблемы с различных точек зрения, и среди различных вариантов обработки было обращено внимание на микробиологическую обработку. После дополнительных обширных исследований было установлено, что ранее неописанный штамм рода Bacillus, несмотря на то, что бактериальное увядание представляет собой почвенную болезнь, может существенно и эффективно бороться с этой передаваемой через почву болезнью не только при обработке почвы, но и путем непрямого нанесения на надземные структуры сельскохозяйственного растения, например, стебли и листья, в сочетании с обработкой почвы или без обработки почвы.

Иными словами, обширные исследования, проведенные при создании настоящего изобретения для достижения вышеуказанных целей, привели к обнаружению, того, что не описанный ранее новый штамм рода Bacillus может оказывать практические действия, такие как борьба с передаваемыми через почву болезнями растений, путем распыления на стебли и листья растения без непосредственного контакта с почвой. Установлено, что новый штамм Bacillus является безопасными при применении в месте фактического возделывания сельскохозяйственной культуры. Было установлено также, что для нового штамма требуется более короткая продолжительность культивирования по сравнению со средствами для борьбы с болезнями растений, содержащими традиционные бактерии Bacillus, и это позволяет быстро получить средство для борьбы, содержащее новый штамм в качестве действующего вещества. Эти результаты положены в основе настоящего изобретения.

В частности, вариантами осуществления настоящего изобретения являются следующие варианты.

(1) Новый штамм бактерий Bacillus sp. G4L1 (NITE ВР-03204).

(2) Новый штамм бактерий Bacillus timonensis G5S1 (NITE ВР-03206).

(3) Новый штамм бактерий Fictibacillus solisalsi G5L2 (NITE ВР-03205).

(4) Штамм, указанный в одном из пунктов (1)-(3), где штамм обладает способностью бороться с болезнью растений при обработке по меньшей мере одного из таких объектов, как семя растения, корень растения, стеблевая и листовая часть растения, опора для растения, питательный раствор и почва.

(5) Штамм, указанный в одном из пунктов (1)-(3), где штамм обладает высокой скоростью роста.

(6) Средство для борьбы с болезнями растений, содержащее один или несколько штаммов, указанных в одном из пунктов (1)-(3), или их культуру в качестве действующего вещества.

(7) Средство, указанное в пункте (6), где средство обладает способностью бороться с болезнями растений при нанесении по меньшей мере на один из следующих участков: семя растения, корень растения, стеблевая и листовая часть растения, опора для растения, питательный раствор и почва.

(8) Средство, указанное в пункте (6) или (7), где средство обладает способностью бороться с болезнями растений, выбранных по меньшей мере из одного из представителей овощных растений, фруктовых деревьев и злаков.

(9) Средство, указанное в одном из пунктов (6)-(8), где средство обладает способностью бороться с болезнями растений семейства Solanaceae и/или Brassica.

(10) Средство, указанное в одном из пунктов (7)-(9), где средство обладает способностью бороться с передаваемой через почву болезнью растений при нанесении на стебли и листья растения.

(11) Средство, указанное в пункте (10), где средство обладает способностью бороться с бактериальным увяданием овощных культур и/или бактериальных мокрых (мягких) гнилей овощных культур.

(12) Способ борьбы с болезнями растений, включающий приведение в контакт или смешение жизнеспособных бактерий одного или нескольких штаммов, указанных в пунктах (1)-(3), или их культуры, содержащей указанные жизнеспособные бактерии, с семенем растения, корнем растения, надземной частью растения, опорой, применяемой при культивировании растения, питательным раствором или почвой.

(13) Способ, указанный в пункте (12), который представляет собой способ борьбы с болезнями растений, выбранных по меньшей мере из одного из представителей овощных растений, фруктовых деревьев и злаков.

(14) Способ, указанный в пункте (12) или (13), который представляет собой способ борьбы с болезнями растений семейства Solanaceae и/или Brassica.

(15) Способ, указанный в одном из пунктов (12)-(14), который представляет собой способ борьбы с передаваемыми через почву болезнями растений при нанесении на стебли и листья растения.

(16) Способ, указанный в одном из пунктов (12)-(15), который представляет собой способ борьбы с бактериальным увяданием овощных культур и/или бактериальных мокрых (мягких) гнилей культур.

Ниже представлены другие варианты осуществления настоящего изобретения.

(17) Новый штамм бактерий Bacillus sp. G4L1 (NITE ВР-03204).

(18) Новый штамм бактерий Bacillus timonensis G5S1 (NITE ВР-03206).

(19) Новый штамм бактерий Fictibacillus solisalsi G5L2 (NITE ВР-03205).

(20) Штамм, указанный в одном из пунктов (17)-(19), где штамм обладает способностью бороться с передаваемыми через почву болезнями растений при нанесении на стебли и листья растения и обладает высокой скоростью роста.

(21) Средство для борьбы с болезнями растений, содержащее один или несколько штаммов, указанных в одном из пунктов (17)-(20), или их культуру в качестве действующего вещества.

(22) Средство, указанное в пункте (21), представляющее собой средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

(23) Средство, указанное в пункте (22), представляющее собой средство для борьбы с увяданием овощных культур.

(24) Средство, указанное в одном из пунктов (21)-(22), представляющее собой средство для борьбы с болезнями растений семейства Solanaceae.

(25) Способ борьбы с болезнями растений, включающий приведение в контакт жизнеспособных бактерий одного или нескольких штаммов, указанных в пунктах (17)-(20), или их культуры, содержащей указанные жизнеспособные бактерии, с растением и/или почвой (в частности, с ризосферой).

(26) Способ, указанный в пункте (25), который представляет собой способ борьбы с передаваемыми через почву болезнями растений.

(27) Способ, указанный в пункте (26), который представляет собой способ борьбы с бактериальным увяданием овощных культур.

(28) Способ, указанный в одном из пунктов (25)-(27), который представляет собой способ борьбы с болезнью растений семейства Solanaceae.

(29) Способ борьбы с бактериальным увяданием овощных культур, передаваемой через почву болезнью растений, где способ обеспечивает контролирующее действие только при опрыскивании средства для борьбы с увяданием овощных культур, указанного в пункте (23), надземной части растения.

(30) Штамм, указанный в одном из пунктов (17)-(20), где штамм обладает высокой скоростью роста и вырастает за короткий промежуток времени, составляющий около 10 ч, который представляет собой период культивирования, необходимый для достижения измеренной величины абсорбции, составляющей при 600 нм от 3,00 до 3,50, в отличие от по меньшей мере около 15 ч, требуемых для традиционных бактерий Bacillus.

(31) Штамм, указанный в пункте (30), где штамму требуется период культивирования, составляющий от 9 до 12 ч, конкретно от 9 до 11 ч, более конкретно от 9 до 10 ч, для достижения измеренной величины абсорбции, составляющей при 600 нм от 3,00 до 3,50, в отличие от периода, составляющего от 14 до 16 ч, который требуется для традиционных бактерий Bacillus.

(32) Способ быстрого получения средства для борьбы, указанного в пункте (21) или (22), включающий культивирование быстро растущего штамма, указанного в одном из пунктов (17)-(20), (30) и (31), для получения штамма и/или его культуры, и получение средства для борьбы, содержащего штамм или культуру, в котором и то, и другое осуществляют в течение короткого периода времени.

Преимущество изобретения

Согласно настоящему изобретению можно получать средство для борьбы с болезнями, передаваемыми через почву, которое можно безопасно применять в месте фактического возделывания сельскохозяйственной культуры путем опрыскивания надземной части растения с получением заметных с позиции практики и стабильности действий, для борьбы с бактериальным увяданием и другими передаваемыми через почву болезнями растений, с которыми трудно бороться с помощью традиционного подхода.

Другое преимущество заключается в том, что для средства для борьбы с передаваемыми через почву болезнями растений, предлагаемого в настоящем изобретении, требуется более короткий период культивирования по сравнению со средствами для борьбы с передаваемыми через почву болезнями растений, содержащими традиционные бактерии Bacillus.

Краткое описание чертежей

На чертежах показано:

на фиг. 1 - изображение обработанной штаммом G4L1 группы через 14 дней после инокуляции бактерией, вызывающей бактериальное увядание томатов, в описанном в примере 1 опыте, который проводили для подтверждения эффективности борьбы с бактериальным увяданием томатов. Опыт проводили в пяти горшках для сравнения индивидуальных различий;

на фиг. 2 - изображение необработанной группы через 14 дней после инокуляции бактерией, вызывающей бактериальное увядание томатов, в описанном в примере 1 опыте, который проводили для подтверждения эффективности борьбы с бактериальным увяданием томатов;

на фиг. 3 - иллюстрация метода, применяемого для инокуляции, описанной в примере 2;

на фиг. 4 - кривые роста четырех штаммов бактерий Bacillus, включая штамм G4L1.

Описание вариантов осуществления изобретения

Разнообразные исследования, проведенные авторами настоящего изобретения для достижения вышеуказанных целей, привлекли внимание к микробиологической обработке, и был проведен поиск среди ряда микроорганизмов. Исследования продемонстрировали, что бактериальные штаммы, успешно выделенные при создании настоящего изобретения, являются новыми штаммами, которые не были известны в прошлом, и что новые штаммы обладают новым и полезным действием против микроорганизмов, вызывающих бактериальное увядание. После изучения метода нанесения весьма неожиданно было установлено, что новые штаммы позволяют бороться с почвенными вызывающими увядание бактериями не только при обработке почвы, но и при непрямом нанесении на надземные структуры растения, такие, например, как стебли и листья.

Таким образом, при создании настоящего изобретения было установлено, что с бактериальным увяданием можно бороться с использованием вновь выделенных штаммов бактерий не только путем обработки почвы, но и путем опрыскивания стеблей и листьев. Эти результаты систематически объединяли, и настоящее изобретение было завершено после дополнительных исследований, основанных на этой информации.

В настоящем изобретении штамм, принадлежащий к роду Bacillus или Fictibacillus, используют в качестве действующего вещества, например, средства для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений. В контексте настоящего описания понятие «передаваемая через почву болезнь растений» относится к повреждению, вызываемому патогеном, инфицирующим подземную часть культурного растения. Согласно настоящему описанию повреждение вызывается главным образом патогенами, обитающими в почве; однако «передаваемая через почву болезнь растений» не ограничена повреждением, вызываемым такими патогенами.

Хотя настоящее описание главным образом относится к борьбе с бактериальным увяданием, средство, предлагаемое в настоящее изобретении, обладает такой же эффективностью в отношении других «передаваемых через почву болезней растений», таких как бактериальные мокрые гнили.

Предпочтительно штаммы, применяемые в настоящем изобретении, представляют собой штамм G4L1 рода Bacillus, штамм G5S1 Bacillus timonensis или штамм G5L2 Fictibacillus solisalsi или мутантный штамм любого из указанных штаммов, или штамм, сохраняющий свойства, сходные со свойствами этих штаммов. Согласно настоящему описанию штамм G4L1 рода Bacillus, штамм G5S1 Bacillus timonensis или штамм G5L2 Fictibacillus solisalsi представляют собой штаммы, выделенные из листьев томатов в кампусе Университета Гифу (1-1, Yanagido, Гифу, Япония), и они идентифицированы как непатогенные для растений новые штаммы бактерий Bacillus и Fictibacillus после изучения бактериологических свойств и филогенетических исследований геномной последовательности гена 16S-pPHK. Установлено, что штаммы G4L1, G5S1 и G5L2 имеют следующие бактериологические свойства по результатам опытов, проведенных с помощью набора API20NE (доступен от фирмы Sysmex bioMerieux Co., Ltd.).

Штамм G4L1

Штамм G4L1 обладает следующими бактериологическими свойствами.

(A) Морфологические свойства

Морфология: палочковидный (стержнеобразный). Размер: от 0,9 до 1,0 мкм × от 2,0 до 8,0 мкм. Подвижность: отсутствует.

(Б) Свойства культуры

Цвет колонии: от бледно-желтого до бледного зеленовато-желтого. Морфология колонии: неправильной формы; профиль: плоский; край: волнистый.

(B) Физиологические свойства

Окрашивание по Граму: положительное.

рН для оптимального роста: нейтральный диапазон (рН от 6,5 до 8,0).

Температура для оптимального роста: 35°С.

Редукция нитратов: +.

Производство индола (триптофан): -.

Ферментация глюкозы: -.

Аргининдигидролаза:+.

Уреаза: -.

Гидролиз (β-глюкозидаза): +.

Гидролиз (протеаза): +.

Ассимиляция (глюкоза): +.

Ассимиляция (арабиноза): +.

Ассимиляция (манноза): +.

Ассимиляция (маннит): +.

Ассимиляция (N-ацетилглюкозамин): +.

Ассимиляция (мальтоза): +.

Ассимиляция (глюконат калия): +.

Ассимиляция (каприновая кислота): -.

Ассимиляция (адипиновая кислота): +.

Ассимиляция (малеат): +.

Ассимиляция (тринатрийцитрат): +.

Ассимиляция (фенилацетат): +.

Уникальность штамма G4L1 состоит в том, что этот штамм помимо его требуемого действия, заключающегося в борьбе с бактериальным увяданием, позволяет бороться с передаваемой через почву болезнью растений, в частности, с бактериальным увяданием и бактериальными мокрыми гнилями, просто при обработке надземной части растения.

Для видовой идентификации штамм G4L1 анализировали с помощью геномного анализа следующим образом.

Создавали шрих-код ДНК из ДНК длиной 400 оснований, экстрагированной из штамма G4L1. После создания библиотеки с использованием Ion PGM® Hi-Q® View OT2 Kit-400 (фирма Thermo Fisher SCIENTIFIC) получали матрицу с применением системы Ion OneTouch® 2 (фирма Thermo Fisher SCIENTIFIC), устройства предварительной обработки для секвенсора следующего поколения. Матрицу секвенировали с использованием секвенсора следующего поколения Ion PGM® с помощью набора Ion PGM Sequencing Hi-Q View (фирма Thermo Fisher SCIENTIFIC) и версии 2 чипа Ion 318 Chip V (фирма Thermo Fisher SCIENTIFIC). После проверки качества последовательности оснований адаптер удаляли и геном секвенировали путем сборки de novo, применяя для анализа программное обеспечение CLC Genomics Workbench, версия 12 (фирма QIAGEN). Для идентификации видов последовательность анализировали с помощью ANI (средний нуклеотидный идентификатор)-анализа, осуществляя сравнение полного генома с геномом родственных видов с применением системы TrueBac ID System, версия 1.92 (фирма Chunlab).

Последовательность анализировали путем гибридизации ДНК-ДНК с родственными эталонными штаммами и стандартными штаммами для расчета значений, полученных методом сравнения генома с геномом (GGDC) (формула 2), используя метод BLAST+(Camacho и др., 2009) с помощью веб-сервера с калькулятором расстояния от генома до генома (Genome-to-Genome Distance Calculator), версия 2.1 (фирма Leibniz Institute DSMZ).

В табл. 1 представлены результаты геномного анализа. Значение ANI составляло 95% или менее по отношению ко всем родственным эталонным штаммам и стандартным штаммам, GGDC (значение, полученное с помощью формулы 2) составляло от 27,3 до 56,3% по отношению к родственным эталонным штаммам и стандартным штаммам. Известно, что штамм можно классифицировать как новый вид, когда значение ANI составляет 95% или менее (применяемый в качестве ссылки документ 1: Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 106(45), 10 ноября, 2009 г., сс 19126-19131), и когда GGDC (значение, полученное с помощью формулы 2) составляет 70% или менее (применяемый в качестве ссылки документ 2: Stand Genomic Sci February 28, 2(1), 2010, сс.117-134; применяемый в качестве ссылки документ 3: Int J Syst Evol Microbiol January 1, 57(1), 2007, cc. 81-91). Штамм G4L1, удовлетворяющий указанным величинами, следует классифицировать как новый вид.

Штамм G5S1

Штамм G5S1 обладает следующими бактериологическими свойствами.

(А) Морфологические свойства

Морфология: палочковидный.

Размер: от 0,8 до 1,3 мкм × от 2,5 до 5,5 мкм.

Подвижность: присутствует.

(Б) Свойства культуры

Цвет колонии: от бледного красновато-желтого до бледно-желтого (полупрозрачный).

Морфология колонии: округлая; профиль: выпуклый; край: сплошной.

В) Физиологические свойства

Окрашивание по Граму: положительное.

рН для оптимального роста: нейтральный диапазон (рН от 6,5 до 7,5).

Температура для оптимального роста: 40°С.

Редукция нитратов: +.

Производство индола (триптофан): -.

Ферментация глюкозы: -.

Аргининдигидролаза: -

Уреаза: -.

Гидролиз (β-глюкозидаза): +.

Гидролиз (протеаза): -.

Ассимиляция (глюкоза): +.

Ассимиляция (арабиноза): -.

Ассимиляция (манноза): -.

Ассимиляция (маннит): -.

Ассимиляция (N-ацетилглюкозамин): +.

Ассимиляция (мальтоза): +.

Ассимиляция (глюконат калия): -.

Ассимиляция (каприновая кислота): -.

Ассимиляция (адипиновая кислота): -

Ассимиляция (малеат): -

Ассимиляция (тринатрийцират): -.

Ассимиляция (фенилацетат): -.

Уникальность штамма G5S1 состоит в том, что этот штамм помимо его требуемого действия, заключающегося в борьбе с бактериальным увяданием, позволяет бороться с передаваемой через почву болезнью растений, в частности, с бактериальным увяданием и бактериальными мокрыми гнилями, просто при обработке надземной части растения.

Штамм G5L2

Штамм G5L2 обладает следующими бактериологическими свойствами.

(А) Морфологические свойства

Морфология: палочковидный.

Размер: от: 0,8 до 1,3 мкм х от 3,4 до 9,0 мкм.

Подвижность: присутствует

(Б) Свойства культуры

Цвет колонии: бледно-зеленовато-желтый.

Морфология колонии: округлая; профиль: умбонатный; край: сплошной.

В) Физиологические свойства

Окрашивание по Граму: положительное.

рН для оптимального роста: нейтральный диапазон (примерно рН 6,5).

Температура для оптимального роста: 40°С.

Редукция нитратов: -.

Производство индола (триптофан): -.

Ферментация глюкозы: -.

Аргининдигидролаза: -.

Уреаза: -.

Гидролиз (β-глюкозидаза): +.

Гидролиз (протеаза): +.

Ассимиляция (глюкоза): +.

Ассимиляция (арабиноза): +.

Ассимиляция (манноза): +.

Ассимиляция (маннит): +.

Ассимиляция (N-ацетилглюкозамин): +.

Ассимиляция (мальтоза): +.

Ассимиляция (глюконат натрия): +.

Ассимиляция (каприновая кислота): -.

Ассимиляция (адипиновая кислота): +.

Ассимиляция (малеат): +.

Ассимиляция (тринатрийцитрат): -.

Ассимиляция (фенилацетат): +.

Уникальность штамма G5L2 штамм состоит в том, что этот штамм помимо его требуемого действия, заключающегося в борьбе с бактериальным увяданием, позволяет бороться с передаваемой через почву болезнью растений, в частности, с бактериальным увяданием и бактериальными мокрыми гнилями, просто при обработки надземной части растения.

Штаммы G4L1, G5S1 и G5L2 депонированы в международном депозитарии запатентованных организмов в Национальном институте технологии и оценки (NITE) (The National Institute of Technology and Evaluation, NITE Patent Organism Depositary (2-5-8, Kazusa-Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, 292-0818, Япония; 20 апреля 2020 г.) под регистрационными номерами NITE ВР-03204, NITE ВР-03206 и NITE ВР-03205 соответственно.

Для культивирования штаммов, принадлежащих к роду Bacillus или Fictibacillus, можно применять любую среду, при условии, что она позволяет штаммам расти. Примеры включают обычные среды, такие как среда в виде бульона и среды, содержащие глюкозу, пептон и дрожжевой экстракт. Среда может представлять собой жидкую среду или твердую среду, такую как дополненную агаром скошенную или пластинчатую среду.

В качестве источника углерода среды можно использовать любой источник, который может ассимилироваться штаммами, принадлежащими к роду Bacillus или Fictibacillus. Конкретные примеры включают различные синтетические и природные источники углерода, которые могут использовать штаммы рода Bacillus, такие как глюкоза, арабиноза, манноза, гидролизат крахмала и патока. Источник азота в среде можно выбирать из различных синтетических и природных продуктов, включая, например, органические содержащие азот продукты, такие как пептон, мясной экстракт, дрожжевой экстракт и соевая мука. Кроме того, при необходимости можно добавлять следовые количества источников питательных веществ в соответствии с обычным методом культивирования микроорганизмов. Примеры таких источников питательных веществ включают неорганические соли, такие как обычная соль и фосфаты; соли металлов, такие как соли кальция, магния и железа; витамины, аминокислоты и субстанции, родственные нуклеиновым кислотам. Кроме того, при необходимости можно применять также добавку, такую как пеногаситель.

Штаммы, принадлежащие к роду Bacillus или Fictibacillus, можно культивировать в аэробных условиях, таких, например, как встряхиваемая культура или аэрируемая культура. Условия культивирования не ограничены указанными условиями, и штаммы культивируют в течение от 0,5 до 2 дней, предпочтительно от 1 до 1,5 дня при температуре от 20 до 45°С, предпочтительно от 30 до 40°С, при рН 5-8, предпочтительно 6-7.

Другой важной характерной особенностью штаммов G4L1, G5S1 и G5L2 является их высокая скорость роста. Указанная выше продолжительность культивирования, а именно 0,5 дня (12 ч) или более, дает просто приблизительное представление о продолжительности культивирования, при которой концентрация клеток достигает достаточного уровня, и требуемую для практических целей концентрацию клеток можно получать даже при более короткой продолжительности культивирования, например, примерно через 7-10 ч, хотя это зависит от таких факторов как масштаб культивирования. Таким образом, условия культивирования не исключают столь короткой продолжительности культивирования.

Требование меньшего времени для культивирования микроорганизмов, представляющих собой действующее вещество, означает более короткое время получения микробиологического средства борьбы, предлагаемого в настоящем изобретении. Это делает настоящее изобретение ценным для быстрого получения микробиологического средства борьбы. Риск заражения во время культивирования также может быть значительно снижен.

После культивирования описанным выше методом штаммы, принадлежащие к роду Bacillus и/или Fictibacillus, можно применять в качестве действующего вещества, например, средства для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений, в форме культуры, содержащей жизнеспособных бактерий указанных штаммов, без отделения штаммов от культуры. В альтернативном варианте жизнеспособные бактерии можно отделять от культуры с помощью общепринятого метода, такого, пример, как мембранная сепарация или центрифугирование, и выделенные бактерии после необязательной промывки можно непосредственно применять в качестве действующего вещества или применять их после обработки (например, в виде смеси с другими компонентами). Можно применять также бактериальную культуру или выделенные жизнеспособные бактерии в форме высушенного продукта, полученного с использованием такой технологии, как сублимационная сушка или распылительная сушка, или в форме разведенного продукта, полученного разведением жидких или твердых бактерий в культуре или выделенных бактерий. Бактерии в культуре или выделенные бактерии можно применять также в форме различных препаратов, полученных путем смешения различных добавок с использованием традиционных методов приготовления препаративных форм пестицидов. Примеры таких препаратов включают гранулированные формы, эмульсии, смачивающиеся порошки и текучие формы.

Концентрация жизнеспособных бактерий, входящих в средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений, предлагаемое в настоящем изобретении, не ограничена конкретной концентрацией, если средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений может обеспечивать требуемое действие. Однако, поскольку слишком низкая концентрация бактерий часто не дает требуемых результатов, а слишком высокая концентрация бактерий обычно является слишком затратной для борьбы с бактериями, то концентрацию бактерий соответствующим образом регулируют в диапазоне от 1×10⁵ до 1×10¹¹ КОЕ/мл, предпочтительно от 1×10⁶ до 1×10¹⁰ КОЕ/мл, в случае, например, жидкого препарата. В контексте настоящего описания «КОЕ» обозначает колониеобразующую единицу. При применении культуры можно соответствующим образом создавать культуру с находящейся в указанных пределах концентрацией жизнеспособных бактерий. Вместо КОЕ концентрацию бактерий можно описывать с помощью величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) Например, величина ОП₆₀₀, равная 1,0, при культивировании при 30°С, 200 об/мин в условиях 24-часовой встряхиваемой культуры в NB-среде соответствует примерно 2,3×10⁷ КОЕ/мл в случае штамма Bacillus sp. G4L1, 1,4×10⁷ КОЕ/мл в случае штамма Bacillus timonensis G5S1 и 1,6×10 КОЕ/мл в случае штамма Fictibacillus solisalsi G5L2. Однако указанные величины зависят от состояния штаммов и условий культивирования, и измеренная величина не обязательно соответствует указанным значениям.

Настоящее изобретение позволяет бороться с болезнью растений, например бактериальным увяданием растений сем. Solanaceae (овощными культурами сем. Solanaceae, такими как баклажан, томаты, зеленый перец, паприка и картофель) и сем. Cucurbitaceae (овощными культурами сем. Cucurbitaceae, такими как огурец и горькая тыква), вызываемым патогенным для растений комплексом видов бактерий Ralstonia solanacearum. Применяемое в настоящем описании понятие «борьба (контроль)» означает предотвращение этих и других болезней растений путем предупреждения, например, заражения полезных растений бактериями, которые вызывают передаваемые через почву болезни растений.

Средство для борьбы с болезнями растений, предлагаемое в настоящем изобретении, можно применять в нативном виде или после разбавления, например, водой. Применение средства для борьбы с болезнями растений в виде пестицидной препаративной формы не ограничено конкретным применением, и, например, средство для борьбы с болезнями растений можно наносить непосредственно на сельскохозяйственные культуры и семена путем опрыскивания сельскохозяйственных культур и семян или путем замачивания сельскохозяйственных культур или семян в средстве для борьбы с болезнями растений. В качестве другого примера средством для борьбы с болезнями растений можно опрыскивать почву или можно добавлять в воду или удобрения, которыми обрабатывают сельскохозяйственные культуры и почву. В следующем примере средство для борьбы с болезнями растений можно применять в сельскохозяйственном оборудовании. Предпочтительно средство для борьбы с болезнями растений непосредственно распыляют на сельскохозяйственные культуры. Это означает, что бактериальное средство для борьбы с болезнями растений, предлагаемое в настоящем изобретении, ингибирует различные передаваемые через почву болезни растений, присутствуя на растении, например, на корне, стеблях, листьях или семенах растений или в почве, применяемой для культивирования.

Уникальная особенность настоящего изобретения состоит в том, что настоящее изобретение позволяет бороться с почвенными бактериями путем опрыскивания не почвы, а стеблей и листьев, т.е. путем обработки надземной части сельскохозяйственных культур. Обработка почвы является трудоемкой процедурой, включающей орошение, и она требует большого количества пестицидной препаративной формы, что создает экологический риск загрязнения воды и окружающей среды. Настоящее изобретение, которое позволяет осуществлять борьбу путем опрыскивания стеблей и листьев, может существенно снижать указанный риск, и это является крайне желательным.

Поскольку бактериальное увядание вызывается почвенными бактериями, то естественной представляется борьба с болезнью путем обработки почвы. Вопреки такому принятому пониманию в данной области, настоящее изобретение позволяет осуществлять борьбу с помощью менее трудоемкого метода обработки только надземной части растения, достигая при этом достаточного контролирующего бактериальное увядание действия. Это делает настоящее изобретение очень ценным с позиции технологии, и при применении настоящего изобретения в полной мере можно ожидать большой экономической отдачи.

Пестицидную препаративную форму, предлагаемую в настоящем изобретении, применяют в количествах, которые зависят от таких факторов, как тип представляющей интерес сельскохозяйственной культуры, тип болезни, подлежащей контролю, метод обработки, схемы возникновения заболевания, степень повреждения, условия окружающей среды и вид препаративной формы. Таким образом, никакие конкретные количества не являются заранее заданными, и пестицидную препаративную форму предпочтительно применяют в соответствующим образом скорректированных количествах. Так, например, в случае жидкой препаративной формы пестицидную препаративную форму применяют в количестве от 30 мл до 1 л, предпочтительно от 50 мл до 1 л на саженец сельскохозяйственного растения. Время применения пестицидной препаративной формы завит также от таких факторов как тип заболевания, подлежащего контролю, и вид пестицидной препаративной формы. Предпочтительно пестицидную препаративную форму наносят в момент времени, находящийся в пределах 2 недель после посева. В настоящем изобретении не рассматривает вопрос о развитии устойчивости бактерий, и микробиологический пестицид, предлагаемый в настоящем изобретении, можно продолжать применять в течение нескольких дней или его можно применять также для монокультуры.

Настоящее изобретение, включая средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений, предлагаемое в настоящем изобретении, при необходимости можно применять с другими удобрениями или агрохимическими средствами, такими, например, как бактерициды, противовирусные средства, инсектициды, митициды, нематоциды, синергисты, аттрактанты, гербициды и регуляторы роста растений. В этом случае средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений можно вносить после смешения с указанными дополнительными компонентами в условиях, которые оказывают лишь незначительное влияние на штамм, представляющий собой действующее вещество, или их можно применять в одно и тоже время или в различные моменты времени.

Приведенные ниже соединения являются не ограничивающими объем изобретения примерами известных бактерицидов (бактерицидные действующие вещества), и средства для борьбы с болезнями можно применять в виде смеси или комбинации с предлагаемым в настоящем изобретении средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

Бактерицидные действующие вещества и средства для борьбы с болезнями:

Agrobacterim radiobacter, азаконазол, ацибензол-S-метил, азоксистробин, анилазин, амисульбром, аминопирифен, аметоктрадин, альдиморф, изотианил, изопиразам, изофетамид, изофлуципрам, изопротиолан, ипконазол, ипфлуфеноквин, ипфентрифлюконазол, ипродион, ипроваликарб, ипробенфос, имазалил, иминоктадин-альбесилат, иминоктадин-триацетат, имибенконазол, инпирфлуксам, имприматин А, имприматин В, эдифенфос, этаконазол, этабоксам, этиримол, этоксикин, этридиазол, энестробурин, эноксастробин, эпоксиконазол, органические масла, оксадиксил, оксазинилазол, оксатиапипролин, оксикарбоксин, оксин-медь, окситетрациклин, окспоконазол-фумарат, оксолиновая кислота, диоктаноат меди, октилинон, офурас, орисастробин, о-фенол, касугамицин, каптафол, карпропамид, карбендазим, карбоксин, карвон, Candida oleophila, Candida saitoana, хиноксифен, хинофумелин, хинометионат, каптан, хинконазол, квинтозен, гуазатин, куфранеб, куметоксистробин, кумоксистробин, Gliocradium catenulatum, Cryptococcus albidus, крезоксим-метил, клозилакон, Clonostachys rosea, хлозолинат, хлороинконазид, хлорталонил, хлоронеб, Chaetomium cupreum, Coniothyrium minitans, циазофамид, диэтофенкарб, диклоцимет, дихлофлуанид, дихлобентиазокс, дикломезин, диклоран, дихлорфен, дитианон, диниконазол, диниконазол-М, цинеб, динокап, дипиметитрон, дифениламин, дифеноконазол, цифлуфенамид, дифлуметорим, ципроконазол, ципродинил, симеконазол, диметиримол, диметилдисульфид, диметоморф, цимоксанил, димоксистробин, Pseudozyma flocculosa, Pseudomonas aureofaciens, Pseudomonas chlororaphis, Pseudomonas syringae, Pseudomonas flurorescens, Pseudomonas rhodesiae, зирам, силтиофам, вирус желтой мозаики цуккини-WK, стрептомицин, Streptomyces griseoviridis, Streptomyces lygicus, спироксамин, седаксан, себоктиламин, зоксамид, солатенол, дазомет, Talaromyces flavus, тиадинил, тиабендазол, тирам, тиофанат, тиофанат-метил, тифлузамид, тирам, текназен, теклофталам, тетраконазол, дебакарб, тебуконазол, тебуфлохин, тербинафин, додин, додеморф, триадименол, триадимефон, триазоксид, трихламид, триклопирикарб, Trichoderma asperellum, Trichoderma atroviride, Trichoderma gamsii, Trichoderma stromaticum, Trichoderma harzianum, Trichoderma viride, Trichoderma virens, Trichodermapolysporum, Trichoderma lignorum, трициклазол, тритиконазол, тридеморф, трифлумизол, трифлоксистробин, трифорин, толилфлуанид, толлофос-метил, толнифанид, толпрокарб, набам, натамицин, нафтифин, нитрапирин, нитрот-изопропил, нуаримол, нонилфенолсульфонат меди, Paenibacillus polymyxa, Barkholderia cepacia, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus simplex, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus, Bacillus licheniformis, белок гарпин, Variovorax paradoxus, валидамицин, валифеналат, Pantoea agglomerans, пикарбутразокс, биксафен, пикоксистробин, Pythium oligandrum, пидифлюметофен, битертанол, бинапакрил, хинокитиол, непатогенный штамм Erwinia carotovora, непатогенный штамм Rhizobium vitis, бифенил, пипералин, гимексазол, пираоксистробин, пираклостробин, пиразифлюмид, пиразофос, пирапропойн, пираметостробин, пирифенон, пирисоксазол, пиридахлометил, пирифенокс, пирибутикарб, пирибенкарб, пириметанил, пироквилон, винклозолин, фербам, фамоксадон, феназин-оксид, фенамидон, фенаминстробин, фенаримол, феноксанил, феримзон, фенпиклонил, фенпикоксамид, фенпиразамин, фенбуконазол, фенфурам, фенпропидин, фенпропиморф, фенгексамид, фолпет, фталид, Fusarium oxysporum, бупиримат, фуберидазол, бластицидин-С, фураметпир, фуралаксил, фуранкарбоновая кислота, флуазинам, флуиндапир, флуоксастробин, флуоксапипролин, флуокситиоконазол, флуопиколид, флуопимомид, флуопирам, фторимид, флюксапироксад, флюквинконазол, фурконазол, фурконазол-цис, флудиоксонил, флусилазол, флусульфамид, флутианил, флутоланил, флутриафол, флуфеноксадиазам, флуфеноксистробин, флубенетерам, флуметилсульфорим, флуметовер, флуморф, Phlebiopsis gigantea, проквиназид, прохлораз, процимидон, протиокарб, протиоконазол, бронопол, пропамокарб-гидрохлорид, пропиконазол, пропинеб, пробеназол, бромуконазол, флометоквин, флорилпикоксамид, гексаконазол, беналаксил, беналаксил-М, беноданил, беномил, пефуразоат, пенконазол, пенцикурон, бензовиндифлупир, бентиазол, бентиаваликарб-изопропил, пентиопирад, пенфлуфен, боскалид, фосэтил (включая соли, такие как соли албминия, кальция и натрия), полиоксин, поликарбамат, бордоская смесь, манкоппер, манкозеб, мандипропамид, мандестробин, манеб, миклобутанил, Mitsuaria chitosanitabida, минеральные масла, милдиомицин, метасульфокарб, метам, металаксил, металаксил-М, метарилпикоксамид, метирам, метилтетрапрол, метконазол, метоминостробин, метрафенон, мепанипирим, мефентрифлюконазол, мептилдинокап, мепернил, йодокарбонат, ламинарии, фосфорная кислота и соли, оксихлорид меди, серебро, ацетат меди(П), оксид меди, гидроксид меди, бикарбонат калия, бикарбонат натрия, сера, оксихинолинсульфат, сульфат меди, (3,4-дихлоризотиазол-5-ил)метил-4-(трет-бутил)бензоат (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1231214-23-5), UK-2A (кодовое название), комплексная соль додецилбензолсульфоновой кислоты и бисэтилендиамина меди [II] (DBEDC), ацетат трифенилолова (ТРТА), хлорид трифенилолова (ТРТС), гидроксид трифенилолова (ТРТН).

Приведенные ниже соединения являются не ограничивающими объем изобретения примерами известных инсектицидов (инсектицидные действующие вещества), митицидов (митицидные действующие вещества), нематоцидов (нематоцидные действующие вещества) и синергистов (синергетические действующие вещества), которые можно применять в виде смеси или комбинации с предлагаемым в настоящем изобретении средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

Инсектицидные действующие вещества, митицидные действующие вещества, нематоцидные действующие вещества и синергетические действующие вещества:

Акринатрин, азадирахтин, азаметифос, ацинонапир, азинфос-этил, азинфос-метил, ацеквиноцил, ацетамиприд, ацетопрол, ацефат, азоциклотин, абамектин, афидопиропен, афоксоланер, амидофлумет, амитраз, аланикарб, альдикарб, альдоксикарб, аллетрин [включая d-цис-транс-форму и d-транс-форму], изазофос, изамидофос, изокарбофос, изоксатион, изоциклозерам, изофенфос-метил, изопрокарб, эпсилон-метофлутрин, эпсилон-момфтортрин, ивермектин, имициафос, имидаклоприд, имипротрин, индоксакарб, эсфенвалерат, этиофенкарб, этион, этипрол, этилендибромид, этоксазол, этофенпрокс, этопрофос, этримфос, эмамектин, эмамектина бензоат, эндосульфан, эмпентрин, оксазосульфил, оксамил, оксидеметонметил, оксидепрофос, ометоат, вирус ядерного полиэдроза, кадусафос, каппа-тефлутрин, каппа-бифентрин, каранджин, картап, вирус гранулеза, карбарил, карбосульфан, карбофуран, гамма-ВНС, ксилилкарб, хинальфос, кинопрен, хинометионат, энтеровирус, кумафос, криолит, клотианидин, клофентезин, хромафенозид, хлорантранилипрол, хлорэтоксифос, хлорпикрин, хлорпирифос, хлорпирифос-метил, хлорфенапир, хлорфенвинфос, хлорфлуазурон, хлормефос, хлоропраллетрин, энтомопоксвирус, иридовирус, циазипир, цианофос, диафентиурон, диамидафос, циантранилипрол, циетпирафен, диенохлор, циенопирафен, диоксабензофос, диофенолан, сигма-вирус, цикланилипрол, циклоксаприд, дикротофос, дихлофентион, циклобутрифлурам, циклопротрин, дихлорвос, диклоромезотиаз, дикофол, дицикланил, дисульфотон, динотефуран, динобутон, цигалодиамид, цигалотрин [включая гамма-форму и лямбда-форму], цифенотрин [включая (1R)-транс-форму], цифлутрин [включая бета-форму], дифлубензурон, цифлуметофен, дифловидазин,ципрофланилид, цигексатин, циперметрин [включая альфа-форму, бета-форму, тета-форму и зета-форму], димпропиридаз, диметил-2,2,2-трихлор-1-гидроксиэтилфосфонат (DEP),диметилвинфос, диметоат, димефлутрин, жасмон, цис-жасмон, жасмоновая кислота, метилжасмонат, силафлуофен, циромазин, Steinernema carpocapsae, Steinernema kushidai, Steinernema glaseri, спидоксамат, спинеторам, спиносад, спиродиклофен, спиротетрамат, спиропидион, спиромезифен, сулькофурон-натрий, сульфурамид, сульфоксафлор,сульфотеп, диазинон, тиаклоприд, тиаметоксам, тиоксазафен, тиодикарб, тиоциклам, тиосультап, тионазин, тиофанокс, тиометон, тиклопиразофлор, тетрахлорантранилипрол, тетрахлорвинфос, тетрадифон, тетранилипрол, тетраметилфлутрин, тетраметрин, тебупиримфос, тебуфенозид, тебуфенпирад, тефлутрин, тефлубензурон, деметон-S-метил, темефос, дельтаметрин, тербуфос, тралометрин, трансфлутрин, триазамат, триазофос, трихлорфон, Trichoderma asperellum, Trichoderma harzianum, трифлумурон, трифлумзопирим, триметакарб, толфенпирад, налед, никотин, никофлупрол, нитенпирам, немадектин, денсовирус, новалурон, новифлумурон, Paecilomyces lilacinus, Burkholderia cepacia, Burkholderia rinojensis, Verticillium lecanii, hydroprene, Pasteuria nishizawae, Pasteuria penetrans, Bacillus thuringiensis, энтомотоксины, продуцируемые Bacillus thuringiensis, Bacillus thuringiensis subsp.Aizawai, Bacillus thuringiensis subsp.Israelensis, Bacillus thuringiensis subsp.Kurstaki, Bacillus thuringiensis subsp.Tenebrionis, Bacillus popilliae, Bacillus licheniformis, вамидотион, паратион, паратион-метил, халфенокс, халфенозид, биоаллетрин, биоаллетрин S-циклопентенил, биорезметрин, бис(2-хлор-1-метилэтил)эфир (DCIP), бистрифлурон, гидраметилнон, бифеназат, бифентрин, пифлубумид, пиперонилбутоксид, пиметрозин, пираклофос, пирафлупрол, пиридафентион, пиридабен, пиридалил, пирифлюкиназон, пирипрол, пирипроксифен, пиримикарб, пиримидифен, пириминостробин, пиримифос-метил, пиретрин, фамфур, фипронил, феназахин, фенамифос, фенитротион, феноксикарб, фенотиокарб, фенотрин [включая (1R)-транс-форму], фенобукарб, фентион, фентоат, фенвалерат, фенпироксимат, фенбутатин оксид, фенпропатрин, фонофос, сульфурилфторид, бутокарбоксим, бутоксикарбоксим, бупрофезин, фуратиокарб, праллетрин, флуакрипирим, флуазаиндолизин, флуазурон, флуэнсульфон, флуопирам, фторацетат натрия, флюксаметамид, флуциклоксурон, флуцитринат, флусульфамид, флутрин, флувалинат [включая тау-форму], флупирадифурон, флупиразофос, флупиримин, флуфипрол, флуфенерим, флуфеноксистробин, флуфеноксурон, флугексафон, флубендиамид, флупентиофенокс, флуметрин, флураланер, флуримфен, протиофос, протрифенбут, флоникамид, пропафос, пропаргит, прогидроясмон, профенофос, брофланилид, профлутрин, пропетамфос, пропоксур, флометоквин, бромпропилат, гекситиазокс, гексафлумурон, Paecilomyces tenuipes, Paecilomyces fumosoroceus, Paecilomyces lilacinus, гептафлутрин, гептенофос, перметрин, бенклотиаз, бензпиримоксан, бенсултап, бензоксимат, бендиокарб, бенфуракарб, Pochonia chlamydosporia, Beauveria tenella, Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii, фоксим, фосалон, фостиазат, фостиэтан, фосфамидон, фосмет, полинактины, форметанат, форат, машинное масло, малатион, мильбемектин, мекарбам, месульфенфос, метомил, метальдегид, метафлумизон, метамидофос, метам, метиокарб, метидатион, метилизотиоцианат, бромистый метил, метоксихлор, метоксифенозид, метотрин, метофлутрин, метопрен, метолкарб, мевинфос, меперфлутрин, Monacrosporium phymatophagum, Monacrosporium phymatophagum, монокротофос, момфтортрин, Trichoderma harzianum, литлур-А, литлур-В, фосфид алюминия, фосфид цинка, фосфин, луфенурон, рескалуран, лепимектин, ротенон, вирус цитоплазматического полиэдроза, фенбутин оксид, цианид кальция, оловоорганические соединения,никотинсульфат, (Z)-11-тетрадеценилацетат, (Z)-11-гексадеценал, (Z)-11-гексадеценилацетат, (Z)-9,12-тетрадекадиенилацетат, (Z)-9-тетрадецен-1 -ол, (Z,E)-9,11 -тетрадекадиенилацетат, (Z,E)-9,12- тетрадекадиенилацетат, 1,1,1 -трихлор-2,2-бис(4-хлорфенил)этан (DDT), 1,3-дихлорпропен, 2,4-дихлор-5-{2-[4-(трифторметил)фенил]этокси}фенил-2,2,2-трифторэтилсульфоксид (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1472052-11-1), 2,4-диметил-5-[6-(трифторметилтио)гексилокси]фенил-2,2,2-трифторэтилсульфоксид (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1472050-34-2), 2-{2-фтор-4-метил-5-[(2,2,2-ттрифторэтил)сульфинил]фенокси}-5-(трифторметил)пиридин (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1448758-62-0), 3-хлор-2-{2-фтор-4-метил-5-[(2,2,2-трифторэтил)сульфинил]фенокси}-5-(трифторметил)пиридин (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1448761-28-1), 4,6-динитро-о-крезол (DNOC), 4-фтор-2-метил-5-(5,5-диметилгексилокси]фенил 2,2,2-трифторэтилсульфоксид (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1472047-71-4), Bt-белки (Cry1Ab, Cry1Ac, Cry1Fa, Cry2Ab, mCry3A, Cry3Ab, Cry3 Bb, Cry34/35Ab1), метилэвгенол, 4-(р-ацетоксифенил)-2-бутанон, (Z)-10-тетрадеценилацетат, (E,Z)-4,10-тетрадекадиенилацетат, (Z)-8-додеценилацетат, (Z)-11-тетрадеценилацетат, (Z)-13-эйкозен-10-он, 14-метил-1-октадецен, AKD-1193 (кодовый номер), BCS-AA10147 (кодовый номер), CL900167 (кодовый номер), O,O-диэтил-O-[4-(диметилсульфамоил)фенил]-фосфоротионат (DSP), О-этил-O-4-(нитрофенил)фенилфосфонотиоат (EPN), RU15525 (кодовый номер), ХМС, Z-13-эйкозен-10-он, ZXI8901 (кодовый номер), F4260 (кодовый номер).

Приведенные ниже соединения являются не ограничивающими объем изобретения примерами известных гербицидов, гербицидных действующих веществ и регуляторов роста растений, которые можно применять в виде смеси или комбинации с предлагаемым в настоящем изобретении средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

Гербицидные соединения и гербицидные действующие вещества:

Иоксинил (включая соли, такие как литиевая соль, натриевая соль и октаноат), аклонифен, акролеин, азафенидин, ацифлуорфен (включая соли, такие как натриевая соль), азимсульфурон, асулам, ацетохлор, атразин, анизифлупурин, анилофос, амикарбазон, амидосульфурон, амитрол, аминоциклопирахлор, аминопиралид, амипрофос-метил, аметрин, вирус мозаики арауджии, алахлор, Alternaria destruens, аллоксидим (включая соли, такие как натриевая соль), анцимидол, изоурон, изоксахлортол, изоксафлутол, изоксабен, этоксилат изодецилового спирта, изопротурон, ипфенкарбазон, имазаквин, имазапик (включая соли, такие как аминовая соль), имазапир (включая соли, такие как изопропиламиновая соль), имазаметабенз, имазаметабенз-метил, имазамокс, имазетапир, имазосульфурон, индазифлам, инданофан, эглиназин-этил,эспрокарб, этаметсульфурон-метил, эталфлуралин, этидимурон, этоксисульфурон, этоксифен, этоксифен-этил, этофумезат, этобензанид, эпирифенацил, эндотал-динатрий, оксадиазон, оксадиаргил, оксазикломефон, оксасульфурон, оксифторфен, оризалин, вирус перца Обуда, ортосульфамурон, орбанкарб, олеиновая кислота, кафенстрол, каприловая кислота, каприновая кислота, карфентразон-этил, карбутилат, карбетамид, квизалофоп, квизалофоп-этил, квизалофоп-Р-этил, квизалофоп-Р-тефурил, Xanthomonas campestris, хинокламин, квинклорак, квинмерак, лимонная кислота, кумилурон, клацифос, глифосат (включая соли, такие как натриевая соль, калиевая соль, аминовая соль, пропиламиновая соль, изопропиламиновая соль, аммониевая соль, изопропиламмониевая соль, гуанидиновая соль, моноэтаноламиновая соль, холиновая соль, соль ВАРМА (N,N-бис(аминопропил)метиламин), диметиламиновая соль и соль тримезия), глуфосинат (включая соли, такие как аминовая соль и натриевая соль), глуфосинат-Р, глюфосинат-Р-натрий, клетодим, клодинафоп, клодинафоп-пропаргил, клопиралид (включая соли, такие как моноэтаноламиновая соль), кломазон, хлометоксифен, кломепроп, клорансулам-метил, хлорамбен, хлоридазон, хлоримурон, хлоримурон-этил, хлорсульфурон, хлортал-диметил, хлортиамид, хлорфталим, хлорфторенол-метил, хлорпрофам, хлорбромурон, хлороксурон, хлортолурон, кетоспирадокс (включая соли, такие как натриевая соль, кальциевая соль и аммониевая соль), Colletotrichum orbiculare, Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum truncatum, Chondrostercum purpureum, сафлуфенацил, сарментин, цианазин, цианамид, диурон, диэтатилэтил, диоксопиритрион, дикамба (включая соли, такие как аминовая соль, диэтиламиновая соль, изопропиламиновая соль, дигликоламиновая соль, диметиламмониевая соль, диоламиновая соль, изопропиламмониевая соль, аураминовая соль, калиевая соль, троламиновая соль, соль ВАРМА (N,N-бис(аминопропил)метиламин), соль холина, натриевая соль и литиевая соль; и сложные эфиры, например, такие как метиловый эфир), циклоат, циклоксидим, диклосулам, циклосульфамурон, циклопиранил, циклопириморат, дихлобенил, диклофоп, диклофоп-Р-метил, диклофоп-метил, дихлорпроп, дихлорпроп-Р (включая соли, такие как диметиламмониевая соль, калиевая соль, натриевая соль и соль холина; и сложные эфиры, например, такие как бутотиловый эфир, 2-этилгексиловый эфир, изоктиловый эфир и метиловый эфир), дикват, дибромид диквата, дитиопир, сидурон, динитрамин, цинидон-этил, циносульфурон, диносеб (включая ацетат), динотерб, цигалофоп, цигалофоп-бутил, ципирафлуон, дифенамид, дифензокват, дифлуфеникан, дифлуфензопир, симазин, димесульфазет, диметахлор, диметаметрин, диметенамид, диметенамид-Р, симетрин, димепиперат, димефурон, Pseudomonas fluorescens, цинметилин, свел, сулькотрион, сульфентразон, сульфосат, сульфосульфурон, сульфометурон-метил, сетоксидим, Scelerothinia minor, тербацил, даймурон, такстомин А, тобамовирус легкой зеленой мозаики табака, вирус табачной погремушки, далапон, тиазопир, тиафенацил, тиенкарбазон (включая, например, натриевую соль и метиловый эфир), тиокарбазил, тиобенкарб, тидиазимин, тидиазурон, тифенсульфурон, тифенсульфурон-метил, десмедифам, десметрин, тетфлупиролимет, тенилхлор, тебутам, тебутиурон, тепралоксидим, тефурилтрион, тербутилазин, тербутрин, тербуметон, темботрион, топрамезон, тралкоксидим, триазифлам, триасульфурон, триафамон, триаллат, триэтазин, триклопир, триклопир-бутотил, триклопир-триэтиламмоний, тритосульфурон, трипирасульфон, трифлудимоксазин, трифлусульфурон-метил, трифлуралин, трифлоксисульфурон (включая соли, такие как натриевая соль), трибенурон-метил, толпиралат, нафталам (включая соли, такие как натриевая соль), напроанилид, напропамид, напропамид-М, никосульфурон, молочная кислота, небурон, норфлуразон, Burkholderia rinojensis, вернолат, паракват, дихлорид параквата, галауксифен, галауксифен-бензил, галауксифен-метил, галоксифоп, галоксифоп-Р, галоксифоп-этотил, галоксифоп-Р-метил, галосафен, галосульфурон-метил, бикслозон, пиклорам (включая соли, такие как дихлораммониевая соль и троламиновая соль), пиколинафен, бициклопирон, биспирибак натрия, пиноксаден, бипиразон, бифенокс, пиперофос, пираклонил, пирасульфотол, пиразоксифен, пиразосульфурон-этил, пиразолинат, биланафос, пирафлуфен, пирафлуфен-этил, пиридафол, пиритиобак натрия, пиридат, пирифталид, пирибутикарб, пирибензоксим, пиримисульфан, пириминобак-метил, пироксасульфон, пироксулам, Phytophthora palmivora, фенизофам, фенурон, феноксасульфон, феноксапроп (включая, например, метилэтиловые и изопропиловые эфиры), феноксапроп-П (включая, например, метилэтиловые и изопропиловые эфиры), фенхинотрион, фентиапроп-этил, фентразамид, фенпиразон, фенмедифам, Phoma chenopodicola, Phoma herbarum, Phoma macrostoma, бутахлор, бутафенацил, бутамифос, бутилат, Puccinia canaliculata, Puccinia thlaspeos, бутенахлор, бутралин, бутроксидим, флазасульфурон, флампроп (включая, например, метилэтиловые и изопропиловые эфиры), флампроп-М (включая, например, метилэтиловые и изопропиловые эфиры), примисульфурон, примисульфурон-метил, флуазифоп-бутил, флуазифоп-Р, флуазифоп-Р-бутил, флуазолат, флуометурон, фторогликофен-этил, флукарбазон натрия, флухлоралин, флуцетосульфурон, флутиацет-метил, флупирсульфурон-метил (включая соли, такие как натриевая соль, кальциевая соль и аммиачная соль), флуфенацет, флуфенпир-этил, флупропанат (включая натриевую соль), флупоксам, флумиоксазин, флумиклорак-пентил, флуметсулам, флуридон, флуртамон, флуроксипир (включая сложноэфирные формы, например, такие как бутометиловый эфир и мептиловый эфир, и соли, например, такие как натриевая соль, кальциевая соль и аммиачная соль), флурохлоридон, претилахлор, прокарбазон (включая соли, такие как натриевая соль), продиамин, просульфурон, просульфокарб, пропаквизафоп, пропахлор, пропазин, пропанил, пропизамид, пропизохлор, пропирисульфурон, профам, профлуазол, прогексадион кальция, пропоксикарбазон, пропоксикарбазон натрия, профоксидим, бромацил, бромпиразон, прометрин, прометон, бромоксинил (включая сложноэфирные формы, например, такие как эфир масляной кислоты, эфир октановой кислоты и эфир гептановой кислоты), бромфеноксим, бромбутид, флорасулам, флорбирауксифен, флорбирауксифен-бензил, гексазинон, петоксамид, беназолин, беназолин-этил, пеноксулам, вирус мозаики Пепино, гептамалоксилоглюкан, бефлубутамид, бефлубутамид-М, пебулат, пеларгоновая кислота, бенкарбазон, бенквитрион, бензфендизон, бенсулид, бенсульфурон, бенсульфурон-метил, бензобициклон, бензофенап, бентазон, пентанохлор, пендиметалин, пентоксазон, бенфлуралин, бенфурезат, фосамин, фомесафен, форамсульфурон, форхлорфенурон, мекопроп (включая соли, такие как натриевая соль, калиевая соль, изопропиламиновая соль, триэтаноламиновая соль, диметиламиновая соль, диоламиновая соль, троламиновая соль и холиновая соль; и сложные эфиры,например, такие как этадиловый эфир, 2-этилгексиловый эфир, изооктиловый эфир и метиловый эфир), мекопроп-Р-калий, мезосульфурон (включая сложные эфиры, например, такие как метиловый эфир), мезотрион, метазахлор, метазосульфурон, метабензтиазурон, метамитрон, метамифоп, метам (включая соли, такие как натриевая соль), динатрийметиларсонат (DSMA), метиозолин, метилдимурон, метоксурон, метосулам, метсульфурон-метил, метобромурон, метобензурон, метолахлор, метрибузин, мепикват хлорид, мефенацет, моносульфурон (включая метиловый эфир, этиловый эфир и изопропиловый эфир),монолинурон, молинат, йодосульфурон, йодосульфурон-метил-натрий, тифенсульфурон, тифенсульфурон-натрий, лактофен, ланкотрион, линурон, римизоксафен, римсульфурон, ленацил, 2,2,2-трихлоруксусная кислота (ТСА) (включая соли, такие как натриевая соль, кальциевая соль и аммиачная соль), 2,3,6-трихлорбензойная кислота (2,3,6-ТВА), 2,4,5-трихлорфеноксиуксусная кислота (2,4,5-Т), 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4-D) (включая соли, такие как аминовая соль, диэтиламиновая соль, триэтаноламиновая соль, изопропиламин соль, диметиламмониевая соль, диоламиновая соль, додециламмониевая соль, гептиламмониевая соль, тетрадециламмониевая соль, триэтиламмониевая соль, трис(2-гидроксипропил)аммониевая соль, троламиновая соль, холиновая соль, натриевая соль и литиевая соль; и сложные эфиры, например, такие как бутотиловый эфир, 2-бутоксипропиловый эфир, 2-этилгексиловый эфир, метиловый эфир, этиловый эфир, бутиловый эфир, изобутиловый эфир, октиловый эфир, пентиловый эфир, пропиловый эфир, изооктиловый эфир, изопропиловый эфир, мептиловый эфир и тефуриловый эфир), 2,4-дихлорфеноксимасляная кислота (2,4-DB) (включая соли, такие как аминовая соль, диэтиламиновая соль, триэтаноламиновая соль, изопропиламиновая соль, диметиламмониевая соль, холиновая соль, натриевая соль и литиевая соль; и сложные эфиры, например, такие как изооктиловый эфир), 2-амино-3-хлор-1,4-нафтохинон (ACN), 2-метил-4-хлорфеноксиуксусная кислота (МСРА) (включая соли, такие как натриевая соль, диметиламмониевая соль и холиновая соль; и сложные эфиры, например, такие как 2-этилгексиловый эфир, изооктиловый эфир и этиловый эфир), 2-метил-4-хлорфеноксимасляная кислота (МСРВ) (включая, например, натриевую соли и этиловый эфир), 4-(2,4-дихлорфеноксид)масляная кислота (2,4-DB), 4,6-динитро-О-крезол (DNOC) (включая соли, такие как аминовая соль и натриевая соль), (5S)-3-(3,5-дифторфенил)-N-[рел-(3R,5R)-5-(трифторметилсульфонилкарбамоил)тетрагидрофуран-3-ил]-5-винил-4Н-изоксазол-5-карбоксиамид) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 2266183-40-6; WO 2018/228986, WO 2020/114934), N4-(2,6-дифторфенил)-6-(1-фтор-1-метил-этил)-1,3,5-триазин-2,4-диамин) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1606999-43-2; WO 2014/064094, WO 2015/162164), (5S)-3-(3,5-дифторфенил)-N-[(3R)-5-(метилсульфонилкарбамоил)-2,3-дигидрофуран-3-ил]-5-винил-4Н-изоксазол-5-карбоксиамид) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 2266190-06-9; WO 2018/228986, WO 2020/114934), (5R)-3-(3,5-дифторфенил)-5-метил-N-[рел-(3R,5R)-5-(метилсульфонилкарбамоил)тетрагидрофуран-3-ил-4Н-изоксазол-5-карбоксиамид) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 2266164-36-5; WO 2018/228986, WO 2020/114934), (5R)-3-(3,5-дифторфенил)-N-[(3R)-5-(метоксикарбамоил)-2,3-дигидрофуран-3-ил]-5-метил-4Н-изоксазол-5-карбоксиамид) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 2266170-31-2; WO 2018/228986, WO 2020/114934), 2-[2-(3,4-диметоксифенил)-6-метил-3-оксо-пиридазин-4-карбонил]циклогексан-1,3-дион) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 2138855-12-4; WO 2017/178582, WO 2018/015476), 4-гидрокси-1-метил-3-[4-(трифторметил)-2-пиридил]имидазолидин-2-он) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1708087-22-2; WO 2015/059262, WO 2018/015476), 6-(1-фторциклопентенил)-N4-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-1,3,5-триазин-2,4-диамин) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1820807-75-7; WO 2015/162164), 6-(1-фтор-1-метилэтил)-N4-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-1,3,5-триазин-2,4-диамин) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1606999-21-6; WO 2014/064094, WO 2015/162164), (5S)-3-(3-фтор-5-метилфенил)-N-[рел-(3R,5R)-5-(метоксикарбамоил)тетрагидрофуран-3-ил]-5-винил-4Н-изоксазол-5-карбоксиамид) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 2266292-43-5; WO 2018/228986, WO 2020/114934), 6-(1-метилциклобутил)-N4-(2,3,5,6-тетрафторфенил)-1,3,5-триазин-4,4-диамин) (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1607001-97-7; WO 2014/064094, WO 2015/162164), AE-F-150944 (кодовый номер), F9960 (кодовый номер), IR-6396 (кодовый номер), МСРА-тиоэтил, NC-656 (кодовый номер), SYP-298 (кодовый номер), SYP-300 (кодовый номер), S-этилдипропилтиокарбамат (ЕРТС), S-метолахлор, S-9750 (кодовый номер), MSMA, HW-02 (кодовый номер), S-523 (кодовый номер) и SL-1201 (кодовый номер).

Регуляторы роста растений:

1-Нафтилацетамид, 1-метилциклопропен, 1,3-дифенилмочевина, 2,3,5-трийодобензойная кислота, 2-метил-4-хлорофеноксибутирическая кислота (МСРВ) [включая, например, натриевую соли и этиловый эфир], 2-(нафталин-1-ил)ацетамид, 2,6-диизопропилнафталин, 3-[(6-хлор-4-фенилхиназолин-2-ил)амино]пропан-1-ол, 4-оксо-4-(2-фенилэтил)аминомасляная кислота (название по IUPAC, регистрационный номер CAS: 1083-55-2), 4-хлорфеноксиуксусная кислота (4-СРА), гидрохлорид 5-аминолевулиновой кислоты, метил-5-(трифторметил)бензо[b]тиофен-2-карбоксилат, AVG (аминоэтоксивинилглицин), n-дециловый спирт (n-деканол), анизифлупурин, авиглицин, анкимидол, абсцизовая кислота, изопротиолан, инабенфид, индольная уксусная кислота, индольная масляная кислота, униконазол, униконазол-Р, эколист, этихлозат, этефон, эпохолеон, хлорид кальция, хлорид холина, оксинсульфат, опабактин, кинетин, пероксид кальция, карвон, хинабактин, формиат кальция, клоксифонак, клоксифонак-калий, клопроп, хлормекват, хлормекват-хлорид, хлорпрофам, холин, цитокинины, окисленный глутатион, цианамид, цианат натрия, цикланилид, дихлорпроп (включая соли, такие как диметиламмониевая соль, калиевая соль, натриевая соль и холиновая соль; и сложные эфиры, например, такие как бутотиловый эфир, 2-этилгексиловый эфир, изоктиловый эфир и метиловый эфир), дихлорпроп-Р (включая соли, такие как натриевая соль, калиевая соль и диметиламмониевая соль; и 2-этилгексиловый эфир), дикват, дибромид диквата, дикегулак, гиббереллиновая кислота, гиббереллин А4, гиббереллин А7, диметипин, синтофен, жасмон, цис-жасмон, жасмоновая кислота, метилжасмонат, стрептомицин, полисульфид кальция, даминозид, карбонат кальция, тидиазурон, декан-1-ол, триаконтанол, триапентенол, тринексапак-этил, трибуфос, паклобутразол, парафин, биспирибак-натрий, гимексазол, бутралин, флутиацет-метил, пирафлуфен-этил, флуметралин, флурпримидол, флуренол, пронитридин, прогидрожасмон, прогексадион-кальций, гептамалоксилоглюкан, 6-бензиламинопурин, пендиметалин, форхлорфенурон, формононетин, гидразид малеиновой кислоты, мепикват хлорид, мефлуидид, липохитоолигосахариды (например, липохитоолигосахариды SP104) и сульфат кальция.

Ниже приведены не ограничивающие объем изобретения примеры известных защитных веществ, которые можно применять в виде смеси или комбинации с предлагаемым в настоящем изобретении средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

Защитные соединения:

Изоксадифен, изоксадифен-этил, оксабетринил, октан-1,8-диамин, клоквинтоцет, клоквинцет-мексил, диэтолат, циометринил, дихлормид, дициклонон, ципросульфамид, даймурон, 1,8-нафталиновый ангидрид, фенхлоразол, фенхлоразол-О-этил, фенклорим, фурилазол, флуксофеним, флуразол, беноксакор, меткамифен, мефенат, мефенпир, мефенпир-этил, мефенпир-диэтиловый, фенхлоразол-О-этил, фенклорим, фурилазол, флуксофеним, флуразол, меткамифен, мефенат, мефенпир-этил, мефенпир-диэтил, замещенная (низш.)алкилом бензойная кислота, 2,2-дихлор-N-(1,3-диоксолан-2-илметил)-N-(2-пропенил)ацетамид (PPG-1292), 2-дихлорметил-2-метил-1,3 -диоксан (MG-191), 3-дихлорацетил-2,2,5-триметил-1,3-оксазолидин (R-29148), 4-дихлорацетил-1-оха-4-азаспиро[4.5]декан (AD-67), 4-карбокси-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран-4-уксусная кислота (CL-304415, кодовый номер), MON4660 (кодовый номер), меткамифен, N1,N2-диаллил-N2-дихлорацетилглицинамид (DKA-24, кодовый номер), 1-бром-4-[(хлорметил)сульфонил]бензол (CSB), 2-пропенил-1-окса-4-азаспиро[4,5]декан-4-карбодитиоат (MG-838, кодовый номер), 3-(дихлорацетил)-2,2-диметил-1,3-оксазолидин (R-28725, кодовый номер), R-29148 (кодовый номер) и 1 -(дихлорацетил)азепан (TI-35, кодовый номер).

Ниже приведены не ограничивающие объем изобретения примеры известных биопестицидов, которые можно применять в виде смеси или комбинации с предлагаемым в настоящем изобретении средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

Биопестициды:

Haplothrips brevitubus, Franklinothrips vespiformis, Diglyphus isaea, Encarsia formosa, Amblyseius cucumeris, Pseudaphycus malinus, Amblyseius womersleyi, Aphidius colemani, Eretmocerus eremicus, Aphidoletes aphidimyza, Amblyseius swirskii, Orius strigicollis, Phytoseiulus persimilis, Amblyseius degenerans, Phytoseiulus persimilis, Orius sauteri, Dacnusa sibirica, Amblyseius californicus, Chrysoperla nipponensis и Anicetus beneficus.

Ниже приведены не ограничивающие объем изобретения примеры известных применяемых в сельском хозяйстве материалов, которые можно применять в виде смеси или комбинации с предлагаемым в настоящем изобретении средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений.

Применяемые в сельском хозяйстве материалы:

Этилен, раствор хлорноватистой кислоты (только полученный электролизом соляной кислоты или водного раствора хлорида калия), пищевая сода, уксус, перегной, гуминовая кислота, фульвокислота, экстракты морских водорослей, полисахариды, аминокислоты, микробные продукты, функциональные компоненты, полученные из животных и растений, микробные метаболиты, микробные активные продукты, растекающиеся в почве агенты, почвенные системные регуляторы, удерживающие воду в почве материалы и биостимуляторы.

Ниже приведены не ограничивающие объем изобретения примеры известных сельскохозяйственных удобрений, которые можно применять в виде смеси или комбинации со средством для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений, предлагаемым в настоящем изобретении.

Удобрения включают неорганические удобрения и органические удобрения. Примеры включают хлорид аммония, сульфат аммония, нитрат аммония, дигидрогенфосфат аммония, аммиачную селитру, мочевину, нитролим, нитрат калия, суперфосфат, двойной суперфосфат, дигидрогенфосфат калия, хлорид калия, сульфат калия, карбонат калия, силикат калия, масляную муку, рыбную муку, рисовые отруби, гуано летучих мышей и ферментированный куриный помет.

Настоящее изобретение, включая средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений, предлагаемое в настоящем изобретении, можно применять для растений, которые приобрели такие свойства, как устойчивость к вредителям, устойчивость к болезням и устойчивость к гербицидам, с использованием таких технологий, как новые методы селекции (например, генетическая рекомбинация, редактирование генома) и искусственное скрещивание.

Как описано выше, жизнеспособные бактерии штаммов рода Bacillus, например, штамм Bacillus G4L1, штамм Bacillus timonensis G5S1 и/или штамм Fictibacillus solisalsi G5L2, или культуру указанных жизнеспособных бактерий можно применять в качестве действующего вещества, используемого в пестицидной препаративной форме, которая обладает выраженным действием в отношении контроля передаваемой через почву болезнью растений, такой как бактериальное увядание овощных культур, являясь безопасным в месте фактического возделывания сельскохозяйственной культуры.

Ниже настоящее изобретение описано с помощью примеров. Следует отметить, что настоящее изобретение не ограничено приведенными ниже примерами, и возможны различные модификации в рамках технической концепции настоящего изобретения.

Пример 1

Тест для подтверждения контролирующего действия в отношении бактериального увядания томатов

Томаты (сорт: Ponderosa) выращивали до четвертой стадии сложных листьев в горшке (9 см × 9 см), заполненном садовой почвой. Затем растения обрабатывали суспензией штамма Bacillus sp.G4L1, суспензией штамма Bacillus timonensis G5S1 и суспензией штамма Fictibacillus solisalsi G5L2 путем опрыскивания указанными суспензиями (по 50 мл каждой) стеблей и листьев растения с помощью ручного распылителя. После выдерживания в теплице при 35°С в течение 7 дней растения томатов инокулировали 50 мл суспензии бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, путем подачи снизу воды с бактериальной суспензией. Для сравнения некоторые кусты томатов обрабатывали только суспензией бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, путем подачи снизу воды с использованием такой же процедуры (необработанная группа). Суспензии штамма G4L1, штамма G5S1 и штамма G5L2 приготавливали путем выращивания указанных бактериальных штаммов в виде встряхиваемой культуры в NB-среде (0,5% мясного экстракта, 1,5% пептона, 0,5% хлорида натрия, 0,5% дикалийфосфата, рН 7,0) при 30°С, 200 об/мин в течение 24 ч. Клетки собирали после центрифугирования (4500 × g, 15 мин) и суспендировали в стерильной воде и вновь центрифугировали. Указанную процедуру повторяли дважды и суспензии применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 1,0. Суспензию бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, получали путем выращивания культуры бактериальных клеток при встряхивании в YP-среде (0,5% дрожжей, 1,0% пептона, рН от 6,8 до 7,2) в течение 24 ч. После центрифугирования собранные клетки разводили дистиллированной водой и применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 0,02 (9,2×10⁶ КОЕ/мл).

Степень бактериального увядания томатов оценивали через 20 дней после инокуляции бактериями, вызывающими бактериальное увядания томатов, используя следующие индексные критерии. Результаты использовали для расчета заболеваемости (частота заболевания) и эффективности контроля. Получали фотографию для пяти кустов из каждой группы. Результаты представленные на фиг. 1 и 2, являются фотографиями, представленными в виде рисунка.

Индекс болезни

0: Отсутствие болезни.

1: Увядание затрагивает несколько листочков (сложного листа).

2: Увядание затрагивает менее половины сложных листьев.

3: Увядание затрагивает по меньшей мере половину сложных листьев.

4: Засыхание и гибель.

Заболеваемость и эффективность контроля

Заболеваемость=Σ(индекс болезни × количество кустов с соответствующим индексом)/(количество оцененных кустов × 4)×100.

Эффективность контроля=100-(заболеваемость обработанной группы/заболеваемость необработанной группы)×100.

Результаты опыта представлены в табл. 2 и на фиг.1 (фотография в качестве рисунка). В отличие от необработанной группы, в которой у 2/3 листьев развилось бактериальное увядание томатов, в группах, обработанных штаммов G4L1, штаммом G5S1 и штаммом G5L2, обнаружен существенно меньший процент больных листьев, и средняя заболеваемость оказалась значительно ниже по сравнению с необработанной группой. Эти данные в совокупности с высокой эффективностью контроля, подтвердили, что указанные штаммы обладали сильным контролирующим действием в отношении бактериального увядания томатов. Результаты для необработанной группы, приведенные на фиг.2, представляют собой фотографии, приведенные в качестве рисунка.

Пример 2

Сравнительный тест контролирующего действия в отношении бактериального увядания томатов с использованием известных средств на основе Bacillus

Томаты (сорт: Ponderosa) выращивали до четвертой стадии сложных листьев в горшке (9 см × 9 см), заполненном садовой почвой. Затем растения обрабатывали суспензией штамма Bacillus sp. G4L1, суспензией штамма Bacillus timonensis G5S1 и суспензией штамма Fictibacillus solisalsi G5L2 путем опрыскивания указанными суспензиями (по 50 мл каждой) стеблей и листьев растения с помощью ручного распылителя. Растение обрабатывали также известными средствами на основе Bacillus Clear® (производство фирмы SDS Biotec K.K.), смачивающимся порошком Agrocare wettable powder® (производство фирмы Nippon Soda Co., Ltd.), Ecoshot® (производство фирмы Kumiai Chemical Industry Co., Ltd.) и жидкой препаративной формой Validacin liquid formulation 5® (антибиотическое средство производства фирмы Chemical Co., Ltd.) путем аналогичного опрыскивания указанными применяемыми для сравнения средствами. После выдерживания в теплице при 35°С в течение 7 дней растения томатов инокулировали 50 мл суспензии бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, путем подачи снизу воды с бактериальной суспензией. Для сравнения некоторые кусты томатов обрабатывали только суспензией бактерий, вызывающих бактериальное увядание томатов, путем подачи снизу воды, используя такую же процедуру (необработанная группа). Суспензии штамма G4L1, штамма G5S1 и штамма G5L2 приготавливали путем выращивания указанных бактериальных штаммов в виде встряхиваемой культуры в NB-среде (0,5% мясного экстракта, 1,5% пептона, 0,5% хлорида натрия, 0,5% дикалийфосфата, рН 7,0) при 30°С, 200 об/мин в течение 24 ч. Клетки собирали после центрифугирования (4500 × g, 15 мин), и суспендировали в стерильной воде и вновь центрифугировали. Указанную процедуру повторяли дважды и суспензии применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 1,0. Как продемонстрировано ниже в табл. 3, количество жизнеспособных бактерий в суспензии соответствовало 2,3×10⁷ КОЕ/мл для суспензии штамма G4L1, 1,6×10⁸ КОЕ/мл для суспензии штамма G5S1 и 1,4×10⁷ КОЕ/мл для суспензии штамма G5L2.

Суспензию бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, получали путем выращивания культуры бактериальных клеток при встряхивании в YP-среде (0,5% дрожжей, 1,0% пептона, рН от 6,8 до 7,2) в течение 24 ч. После центрифугирования собранные клетки разводили дистиллированной водой и суспензию применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 0,02 (9,2×10⁶ КОЕ/мл).

Количество жизнеспособных бактерий в применяемых для сравнения средствах доводили до 1,6×10⁸ КОЕ/мл для Impression Clear, 1.6×10⁸ КОЕ/мл для смачивающегося порошка Agrocare и 1,6×10⁸ КОЕ/мл для Ecoshot. Жидкую препаративную форму Validacin 5 применяли в опыте после приготовления раствора, разведенного в соотношении 1:800.

Степень бактериального увядания томатов оценивали через 11 дней после инокуляции бактериями, вызывающими бактериальное увядание томатов, используя индекс болезни, указанный в примере 1, и рассчитывали заболеваемость и эффективность контроля.

Действующими веществами поступающих в продажу средствах контроля являются следующие вещества.

(A) Impression Clear: Bacillus amyloliquefaciens AT-332 (продукт фирмы SDS Biotec K.K.).

(Б) Смачивающийся порошок Agrocare: Bacillus subtilis HAI-0404 (продукт фирмы Nippon Soda Co., Ltd.)

(B) Ecoshot: штамм Bacillus subtilis D747 (продукт фирмы Kumiai Chemical Industry Co., Ltd.).

(Г) Жидкая препаративная форма Validacin 5: валидамицин А (продукт фирмы Sumitomo Chemical Co., Ltd.).

Результаты опыта представлены ниже в табл. 3. В группах, обработанных суспензией штамма Bacillus sp. G4L1, суспензией штамма Bacillus timonensis G5S1 и суспензией штамма Fictibacillus solisalsi G5L2, обнаружено четкое повышенное контролирующее действие в отношении бактериального увядания томатов относительно применяемых для сравнения групп, обработанных известными средствами на основе Bacillus, такими как Impression Clear, смачивающийся порошок Agrocare и Ecoshot, даже при таком же или меньшем количестве жизнеспособных бактерий. Действие также оказалось четко более высоким по сравнению с действием, оказываемым жидкой препаративной формой Validacin 5, которая содержит антибиотик, для которого известно действие в отношении бактериального увядания томатов при опрыскивании стеблей и листьев.

Пример 3

Тест для подтверждения контролирующего действия в отношении бактериального увядания томатов при обработке только надземной части

Для подтверждения эффективности штаммов в отношении бактериального увядания при непосредственном нанесении на стебли и листья с помощью опрыскивания томаты (сорт Momotaro 8) выращивали до четвертой стадии сложных листьев аналогично описанному в примере 1, и почву полностью покрывали алюминиевой фольгой для предотвращения попадания штаммов в почву (фиг. 3). После опрыскивания с использованием 50 мл суспензии штамма Bacillus sp.G4L1 стеблей и листьев с помощью ручного распылителя растения полностью высушивали на воздухе и алюминиевую фольгу удаляли. Затем растения выдерживали в теплице при 35°С в течение 7 дней. Для инокуляции растения обрабатывали 50 мл суспензии бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, путем подачи снизу воды с суспензией. Для сравнения суспензию бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, подавали снизу с водой без обработки растения штаммом Bacillus sp. G4L1 (необработанная группа). Суспензию штамма G4L1 приготавливали путем выращивания указанного бактериального штамма в виде встряхиваемой культуры в NB-среде (0,5% мясного экстракта, 1,5% пептона, 0,5% хлорида натрия, 0,5% дикалийфосфата, рН 7,0) при 30°С, 200 об/мин в течение 24 ч. Клетки собирали после центрифугирования (4500 × g, 15 мин) и суспендировали в стерильной воде и вновь центрифугировали. Указанную процедуру повторяли дважды и суспензии применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 1,0. Суспензию бактерий, вызывающих бактериальное увядания томатов, выращивали культуры бактериальных клеток при встряхивании в YP-среде в течение 24 ч. После центрифугирования собранные клетки разводили дистиллированной водой и суспензию применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 0,02 (9,2×10⁶ КОЕ/мл).

Используя по десять кустов томатов в каждой обработанной группе, степень бактериального увядания томатов оценивали через 13 дней после инокуляции бактериями, вызывающими бактериальное увядание томатов, используя индекс болезни, указанный в примере 1, и рассчитывали заболеваемость и эффективность контроля.

Результаты опыта представлены в табл. 4. В отличие от необработанной группы, в которой 60% листьев было поражено бактериальным увяданием томатов, заболеваемость оказалось четко более низкой в группе, обработанной штаммом G4L1, что демонстрирует высокую эффективность этого штамма в отношении борьбы с передаваемым через почву бактериальным увяданием томатов даже при непрямой обработке стеблей и листьев путем опрыскивания.

Пример 4

Получение раствора эндоспор бактерий Bacillus sp. G4L1 Бактериями Bacillus sp. G4L1 инокулировали NA-среду и культивировали при 30°С в течение 24 ч. Образовавшиеся колонии выращивали в NB-среде при 200 об/мин при 35°С в течение 4 дней и давали выстаиваться при 4°С в течение 2 дней для усиления бактериолизиса. В процессе культивирования при необходимости добавляли пеногаситель Silicone KS-66® (производство фирмы Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.).

Тест для подтверждения контролирующего действия в отношении бактериальной мокрой гнили на капусте Напа

Капусту Напа инокулировали бактериями, вызывающими мокрые гнили капусты (Erwinia carotovora подвид carotovora), и бактериям давали расти при 28°С в течение 48 ч в застекленном помещении с контролируемой влажностью. Отдельно создавали делянку, зараженную бактериальной мокрой гнилью, путем опрыскивания бактериями предпосевной делянки и вспашки почвы за 9 дней до пересадки больных растений капусты Напа. Для пересадки рассаду капусты Напа (сорт: Musoh) выращивали в течение 41 дней в лотке с 36 отверстиями-ячейками, заполненными садовой почвой (Yosaku®, производство фирмы JCAM AGRI Co., Ltd.), и пересаживали в делянку, зараженную мокрой гнилью, с 30-сантиметровыми интервалами между растениями и расстоянием между рядами 40 см. Препарат Bacillus sp. G4L1 (5,7×10⁹ КОЕ/г), полученный после грануляции раствора эндоспор в псевдоожиженном слое, разводили в 250 раз водой и добавляли способствующий распределению агент (Kumiai Kumiten®, производство фирмы Kumiai Chemical Industry Co., Ltd.) в разведенный раствор из расчета 1/5000. Приготовленным таким образом раствором опрыскивали стебли и листья с помощью газового распылителя через 26 дней и 33 дня после пересадки, каждый раз применяя его из расчета 200 л/10 акров. Для сравнения разведенным раствором, содержащим только способствующий распределению агент, но без препарата Bacillus sp. G4L1 опрыскивали стебли и листья (необработанная группа). Для обработки другой группы способствующий распределению агент добавляли в разведенный в соотношении 1:500 раствор средства на основе неорганической меди Z-Bordeaux® в виде смачивающегося порошка, который широко применяют для борьбы с бактериальными мокрыми гнилями овощных культур, и смесью опрыскивали стебли и листья.

Через 41 день после пересадки собирали по 26 растений капусты Напа из каждой группы и оценивали степень повреждения бактериальной мокрой гнилью с использованием следующих критериев. Результаты использовали для расчета заболеваемости и эффективности контроля.

Индекс болезни

0: Отсутствие болезни.

1: Болезнь затрагивает часть наружных листьев.

2: Болезнь затрагивает часть наружных листьев и головных листьев.

3: Болезнь затрагивает большую часть головных листьев или повреждение затрагивает больше частей растений.

Заболеваемость и эффективность контроля

Заболеваемость=Σ(индекс болезни х количество растений с соответствующим индексом)/(количество оцененных растений ×3)×100

Эффективность контроля=100 - (заболеваемость обработанной группы/заболеваемость необработанной группы)×100.

Результаты представлены в табл. 5. У растений капусты Напа, обработанных препаратом G4L1, заболеваемость оказалось ниже, чем в необработанной группе, в которой заболеваемость составляла 23,1, и эффективность контроля оказалась выше, чем в группе, обработанной смачивающимся порошком Z-Bordeaux®. Как продемонстрировано выше, бактерии Bacillus sp. G4L1 обладают высокой эффективностью в отношении контроля бактериальной мокрой гнили капусты Напа.

Действующим веществом поступающего в продажу указанного выше средства борьбы является следующее вещество.

(А) Смачивающийся порошок Z-Bordeaux: основной сульфат меди (фирма Nihon Nohyaku Co., Ltd.)

Пример 5

Тест для подтверждения пролиферативного потенциала

Штаммом G4L1 инокулировали NB-среду (0,5% мясного экстракта, 1,5% пептона, 0,5% хлорида натрия, 1,5% агара, 0,5% дикальцийфосфата, рН 7,0) при 30°С в течение 24 ч. Для сравнения осуществляли инокуляцию поступающими в продажу средствами борьбы с болезнями на основе Bacillus, а именно Impression Clear, смачивающимся порошком Botokiller® и Ecoshot®, в таких же условиях. Собирали единичные колонии, появившиеся через 24 ч, и выращивали в виде встряхиваемой культуры в NB-среде (0,5% мясного экстракта, 1,5% пептона, 0,5%) хлорида натрия, 0,5% дикалийфосфата, рН 7,0) при 30°С, 200 об/мин в течение 24 ч. Клетки собирали после центрифугирования (4500 × g, 15 мин), и суспендировали в стерильной воде и вновь центрифугировали. Указанную процедуру повторяли дважды и суспензии применяли после доведения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀) до 0,1. Затем 100 мкл скорректированной бактериальной суспензии добавляли в пробирку L-образной формы, заполненную 5 мл NB-среды. Для создания кривой роста измеряли абсорбцию в суспензии при 600 нм (ОП₆₀₀) в процессе выращивания бактерий в условиях встряхиваемой культуры при 30°С, 70 об/мин с использованием устройства для мелкомасшабного культивирования культуры при встряхивании.

Действующими веществами поступающих в продажу средствах являются следующие вещества.

(A) Impression Clear: Bacillus amyloliquefaciens AT-332 (производство фирмы SDS Biotech K.K).

(Б) Смачивающийся порошок Botokiller: Bacillus subtilis (производство фирмы Idemitsu Kosan Co., Ltd.).

(B) Ecoshot: штамм Bacillus subtilis D747 (производство фирмы Kumiai Chemical Industry Co., Ltd.).

Результаты культивирования представлены в табл. 6 и на фиг.4 (кривые для четырех культивируемых штаммов). Скорость роста штамма G4L1 оказалась заметно более высокой, чем поступающих в продажу средств борьбы с болезнями на основе Bacillus, и рост достигал стационарной фазы быстрее по сравнению с поступающими в продажу средствами борьбы. Штамм G4L1 имел также более высокую величину абсорбции, чем другие средства борьбы с болезнями на основе Bacillus, что свидетельствует о том, что штамм G4L1 растет быстрее традиционных штаммов и его можно культивировать в течение более короткого промежутка времени.

Как четко продемонстрировано выше, штамм, предлагаемый в настоящем изобретении, характеризуется более быстрым темпом роста, который резко возрастает в период времени между часом 5 и часом 8 и между часом 8 и часом 10 в процессе культивирования, о чем четко свидетельствуют данные об абсорбции. Так на 8-ом часу культивирования штамм, предлагаемый в изобретении, характеризуется абсорбцией, превышающей примерно в два раза или даже еще больше чем (примерно) в два раза абсорбцию штамма, обладающего самой лучшей результативностью среди традиционных штаммов (в представленном примере, штамм, применяемый в качестве действующего вещества в Impression Clear). Абсорбция оказалась очень высокой также после культивирования штамма, предлагаемого в настоящем изобретении в течение 10 ч. В то время как продолжительность культивирования для достижения величины абсорбции при 600 нм (ОП₆₀₀), составляющей от 3,00 до 3,50, составляла 15 ч для штамма, обладающего самой лучшей результативностью среди традиционных штаммов Bacillus (в представленном примере, штамм, применяемый в качестве действующего вещества в Impression Clear), для штамма, предлагаемого в изобретении, указанная абсорбция достигалась всего через 10 ч культивирования, демонстрируя, что штамм, предлагаемый в изобретении, обладает очень высокой скоростью роста.

Более быстрый темп роста означает, что действующее вещество становится доступным за более короткий промежуток времени, что позволяет быстрее получать средство борьбы, предлагаемое в настоящем изобретении. При производстве микробиологических пестицидов культивирование и рост микроорганизма по существу являются стадией химической реакции, ограничивающей скорость, и средство борьбы можно успешно получать за более короткий период времени, когда для завершения этой стадии требуется меньше времени. Это является также ценным для предупреждения загрязнения, помимо выгоды для приготовления препаративных форм.

Настоящее изобретение можно резюмировать следующим образом.

Целью настоящего изобретения, было создание нового не патогенного для растений штамма, который позволяет стабильно осуществлять борьбу с передаваемой через почву болезнью растений в области фактического возделывания сельскохозяйственной культуры и который можно безопасно применять в качестве биопестицида. Настоящее изобретение относится также к получению средства для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений с использованием, среди прочего, указанного нового штамма.

Действующее вещество, применяемое в настоящем изобретении, включает жизнеспособные бактерии новых штаммов Bacillus и Fictibacillus или культуру указанных бактерий, для которых не было известно, что они оказывают контролирующее действие на бактериальную болезнь растений и передаваемую через почву болезнь растений. Это позволяет получать средство для борьбы с передаваемой через почву болезнью растений, например, средство для борьбы с увяданием овощных культур. Особенностью средства для борьбы является то, что его можно наносить (путем опрыскивания) на стебли и листья для борьбы с бактериальным увяданием, вызываемым почвенной бактерией Ralstonia solanacearum, и/или с бактериальными мокрыми гнилями.

Ссылка на депонированный биологический материал

Регистрационные номера микроорганизмов, депонированных для целей настоящего изобретения, следующие.

(1) Штамм Bacillus sp. G4L1 (NITE ВР-03204).

(2) Штамм Bacillus timonensis G5S1 (NITE BP-03206).

(3) Штамм Fictibacillus solisalsi G5L2 (NITE BP-03205).

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены штаммы бактерий Bacillus sp. G4L1 NITE ВР-03204, Bacillus timonensis G5S1 NITE ВР-03206; Fictibacillus solisalsi G5L2 NITE ВР-03205; средство для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, содержащее в качестве действующего вещества один или несколько указанных штаммов или их культуры; применение культуры штаммов и средства для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур; способ борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, включающий приведение в контакт или смешение жизнеспособных бактерий одного или нескольких штаммов или культуры, содержащей указанные жизнеспособные бактерии, с семенем растения, корнем растения, надземной частью растения, опорой для растения, питательным раствором или почвой. Изобретения обеспечивают расширение арсенала средств, применяемых в качестве биопестицида для растений и включающих непатогенные для растений штаммы бактерий, обеспечивающих борьбу с передаваемой через почву болезнью растений в месте фактического возделывания сельскохозяйственной культуры. 6 н. и 9 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл., 5 пр.

1. Штамм бактерий Bacillus sp. G4L1 для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, где штамм имеет регистрационный номер NITE ВР-03204.

2. Штамм бактерий Bacillus timonensis G5S1 для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, где штамм имеет регистрационный номер NITE ВР-03206.

3. Штамм бактерий Fictibacillus solisalsi G5L2 для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, где штамм имеет регистрационный номер NITE ВР-03205.

4. Штамм по одному из пп. 1-3, где штамм обладает способностью бороться с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, при нанесении по меньшей мере на один из следующих объектов: семя растения, корень растения, стеблевая и листовая часть растения, опора, применяемая при культивировании растения, питательный раствор и почва.

5. Штамм по одному из пп. 1-3, где штамм обладает высокой скоростью роста.

6. Средство для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, содержащее в качестве действующего вещества один или несколько штаммов по п.п. 1-3 или их культуры.

7. Средство по п. 6, где средство обладает способностью бороться с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур при нанесении по меньшей мере на один из следующих объектов: семя растения, корень растения, стеблевая и листовая часть растения, опора для растения, питательный раствор и почва.

8. Средство по п. 6 или 7, где средство обладает способностью бороться с болезнью растения семейства Solanaceae (пасленовые) и/или семейства Brassicaceae (капустные).

9. Средство по п. 7 или 8, где средство обладает способностью бороться с болезнью, передаваемой через почву, при нанесении на стебли и листья растения.

10. Средство по п. 9, где средство обладает способностью бороться с бактериальным увяданием овощных культур и/или бактериальными мокрыми гнилями овощных культур.

11. Способ борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур, который включает приведение в контакт или смешение жизнеспособных бактерий одного или нескольких штаммов по пп. 1-3 или культуры, содержащей указанные жизнеспособные бактерии, с семенем растения, корнем растения, надземной частью растения, опорой для растения, питательным раствором или почвой.

12. Способ по п. 11, где способ включает борьбу с болезнью растения семейства Solanaceae и/или растения семейства Brassicaceae.

13. Способ по п. 11 или 12, где способ включает борьбу с болезнью, передаваемой через почву, при нанесении на стебли и листья растения.

14. Способ по одному из пп. 11-13, где способ включает борьбу с бактериальным увяданием овощных культур и/или бактериальными мокрыми гнилями овощных культур.

15. Применение штамма бактерий по одному из пп. 1-3 или средства по п. 6 для борьбы с болезнью по меньшей мере одной из овощных и плодовых культур.