Способ консервирования гемолимфы насекомых Советский патент 1983 года по МПК A01N1/00 

СО

оэ

4 Изобретение относится к-области энтомологии, в частности к исследо ваниям гемолимфы насек6кФ 1х. Известен способ культивирования in vitro гемоцитов Galleria melloiiella L tl. Недостатками данного способа яв ляются его сложность, длительность и трудоемкость процесса. Известен также способ предотвра щения меланиэации гемолимфы насеко мых путем добавления фенилтиомочевины С2. Недостауком этого способа является то, что фенилтиомочевина предотвращает механизацию только в те чение нескольких суток, а также высокая стоимость крнсерванта. Цель изобретения - увеличение ср ка хранения гемолимЗ Цель достигается тем,что в качестве консерванта применяют 0., 02 3 М раствор пятиводного тиосульфат натрия, концентрация которого в ге молимфе составляет 0,01-0,04 М, а хранение осуществляют при температ ре от -20С до .. Приготавливают раствор натрия серноватистокис 7Ого, 5-водного , тиосульфата натрия) от 0,02 М до 3 М в дистиллирбванной воде. Далее из насекомого берут гемолимфу и немедленно помещают в раствор натрия серноватистокислого в таких ; соотношениях, что конечное количество натрия серноватистокислого в смеси с гемолимфой составляло бы от 0,01 М до 0,04 М. П р и М ер 1. Смешивают 0,02 раствор с гемолимфой, получают нижнее граничное разведе1ние консервирующей смеси, содержащей 0,01 М NaiSa.05 5НгО. . Для этого берут 0,03 Мл 0,02 М раствора ..0 и смешивают с каплей гемолимфы (0,03 мл большой пчелиной огневки(Са1lerid mellonella L). Приготовленная смесь хранится без признаков меланизации в течение 14 месяцев с сохранением всех биологических свойств. Хранят консервированную гемолимфу при температура от -20С до . В случае хранения гемолимфы при более высокой температуре появлялись признаки меланизации. Так, при хранении при на 25-е сутки появлялись признаки меланизации. Пример 2. Оптимальнре количество консервирующей смеси составляет 0,025 М. Приготавливают О,05 М раствор ,j, и перемешивают с равным количёствок гемолимфы или берут 1 микролитр ЗМ раствора смешивают с 4 каплями гемолимфы, получая 0,025 М концентрацию в гемолимфе. Консервированная гемолимфа сохраняется без изменений биологических свойств в течение 14 месяцев при температуре от до . При хранении смеси при +8°С на 29-ые сутки появлялись признаки меланизации поверхностного слоя гемолимфы. Пример 3. Максимальное количество t a Si/jiOfSl O в гемолимфе составляет 0,04 М. Берут 1,5 микролитра ЗМ раствора 5Нд,0, добавляют 4 капли гемолимфы, приго-, товленная смесь .сохраняет биологи- ческие свойства до 14 месяцев при температуре от до . Когда хранение осуществляли при +8 С, гемолимфа давала незначительное, выпадение йсадка на 31-е сутки хранения. Нижний предел температуры (-20 С) выбирают как более экономичный по сравнению с другими режимами хранения при более низкой температуре..

СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ГЕМОЛИМ Ш НАСЕКОМЫХ путем.введения в нее консерванта, отличающийся тем, .что, с. целью увеличения срока хранения, в качестве консерванта применяют 0,02-р М раствор пятиводного тиосульфата натрия, концентрация которого в гемолимфе составляет 0,01-0,04 М, а хранение осуществляют при (-20) М+4)С. 9