Способ определения токсичности сыворотки крови Советский патент 1983 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине; в частности оно применимо для определения токсичности сыворотки крови. Известен способ опредесгхения токсичности сьшоротки крови путем постановки парамецийной реакции, включающий определение времени гибели парамеций под действием токсического фактора, находящегося в сыворотке крбви 1. Однако данный способ не обладает достаточной точностью. Наиболее близким пЪ технической сущности является способ определения :Токсичности сыворотки путем пос т новки и количественной оценки парамецийной реакции 2. Однако и звестный способ не имеет критериев точной количественной оценки, так как время гибели отдель ных особей парамеций различно. Это существенно снижает точность исследования.. :. ; . . . . Йёльй) йзобрё те:ния является повы шение точности способа. Указанная цель достигается тем, что согласно способу определения тoкQичнocти сыворотки крови путем постановки и количественной оценки парамецийной реакции сыворотку диализируют, далее определяют подЁйжНость парамеций, а токсичность определяют по уменьшению относительной степени подвижности парамеций. Определение токсичности сыворотки крови путем постановки и количес венной оценки парамецийной реакции проводилось следующим образом. У больного из катетера, стоящего в одной из вентральных вен, беру 5,0 крови, которую центрифугируют 30 мин со скоростью 1500 об/мин. Отделяют 2,0 сыворотки и переносят в химический стаканчик с диаметром горловины 3-4 , см. Стаканчик Покрывают целлофановой пленкой/ которая ,укрепляется резинкой. Затем стаканчик опрокидывшот и подвешивают над емкостью с дистиллированной водой (3л) так,, чтобы мембрана (целлофановая пленка) полностью соприкасалась с поверхностью воды. Через 6 ч берут 1,0 мл диализата, смешивают в отдельной посуде с 0,5 мл отвара сена, содержащего культуру парамеций. Каплю смеси помещают в счетную камеру, которая применяется для подсчета микросгустков в крови Счетную камеру помещают на Термостолик, расположенный на предметном столике микроскопа. Термостолик представляет собой плоскую полую камеру из оргстекла с двумя патруб ками, которые присоединяются резиновыми трубками к насосу ультра термостата типа И-10. Регулируя температуру протекающей через столик жидкости, устанавливаютнеобходимый температурный режим на его поверхности , который контролируется контактным электротермометром. Исследование проводят под малым увёгличением микроскопа при постоянной температуре поверхнрсти счетной камеры 2 б С. С помощью секундомера учитывают время, за которое одна из особей парамеций 10 раз пересечет граййцу квадрата сетки счетной камеры (1x1 мм). Исследование проводят несколько раз, затем рассчитывают среднее время. Для контроля параллельно проводят расчет среднего времени в сыворотке крови здоровых лиц или пациентов с заболеваниями, не сопровождающимися интонсикациейд обработанной аналогичным способом. Затем вычисляют индекс $океичности(ИТ) по формуле X 100%, --у- где X - среднее время опытного исследования, с; Т - среднее контрсшьного исследования, с. Так перед постановкой парамецийной реакции были приготовлены даалит заты сывороток крови следующих больных , . . больной в, история болезни № 9850, диагноз: состояние после резекции 2/3 желудка, .послеоперационный панкреатитJ больной Ш, история болезни 10007, диагноз: состояние после панкрёато-дуоден альной резекции, послеоперационный панкреатит; больной С, история болезни. № 11214, диагноз: неосложненное варикозное расвирение вен нижнизс конечностей - до операции (контрольное исследование) . При постановке парамецийной реакции были получены следующие результаты:. в капле смеси диализата сыворот-. ки крови больного В с культурой парамеций: 32, 35, 31, 29,„48 44, 30, 35 - среднее - 12.9 время 33,1, ИТ - 127§ X 100% 157%; в капле смеси диализата сыворотки крови больного Ш с культурой парамеций: 60, 60, 60, 45, 24, 60 - среднее время 51,5 51 Ч - 12 Ч щ 2iz2-.--i 2 -x-iOO% « 299%J в капле смеси диализата сыворотки крови больного С, с культурой парамеций: 12, 13, 14, 13, 12,

15, 12, 14% 14, 10 - среднее контрольное время 12,9.

. Вывод: у больного Ш степень интоксикации организма выражена значительнее, чем у больного В, с аналогичным послеоперационным осложнением. Т.е., во втором случае требуется проводить более интенсивную дезинтоксикационную терапию. .

.При испытании способа при различной патологии быши выделены

группы больных с различной степенью интоксикации с неосложненным и осложнённым течением послеоперационного периода (развитие перитонита, несостоятельности анастомозов, абсцедирования брнншюй полости, печеночно-йочёчной, недостаточности) .

; Характер изменений ИТ сыворотки крови в этих группах больных предСтавлей в таблице.,

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ СЫВОРОТКИ КРОВИ ItjWeM постановки и количественной оценки парамецийной реакции, отличающийся тем, что с целью повышения точности способа, сыворотку диализируют, далее определяют подвижность парамеций, а токсичность определяют по уменьшению относительной степени подвижности парамеций. О) С

НеосложненРак желчевыводящих ный путей, механическая желтуха, Желчеотводящиё операции

Осложнен5618-112 230 .201 107 104-300 108-281 37-199