Способ определения сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов Советский патент 1984 года по МПК G01N31/08 

л

00 ОС

О

00

Изобретение относится к аналитической Химии, в частности к способам определения сопряженных диеновых алиатических спиртов и ацетатов,и может использоваться для опре еления изомерного состава эткх соединений.

Известен способ определения сопряженных диеновых сшифатических спиртов и ацетатов путем хроматографического разделения анализируемой пробы, прошедшей предварительную « очистку методом тонкослойной препаративной хроматографии, на капиллярной колонке с неподвижной жидкой фазой диэтиленгликольсукцинат til.

Недостатком Данного способа является его сложность, многостадийность и недостаточно высокая селективность разделения изомеров ацетатов (степень разделения не превышает величину Г и (1 ).

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту к изобретению является способ опредеения сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов путем экстрагирования этих соединений из анализируемой пробы гексаном, упаривания экстракта с последующим хроматографическйм разделением его на колонке с твердым носителем хроматон N-AW-BWCa, содержащим 5% нитрилсилоксанового (ХЕ-60 ) или диметилсилоксанового.(SE - 30J каучука 2j.

Недостатком известного способа яв ляется невысокая селективность разделения изомеров (степень разделения не превышает величину 1,05 и низкая точность определения как качественного, так и количественного состава анализиру,емых образцов.

Целью изобретения является повышение селективности разделения и точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов путем экстрагирования их из анализируемой пробы гексаном, упаривания экстракта с последующим хроматографическим разделением его на колонке с твердым носителем, содержащим неподвижную жидкую фазу,в качестве неподвижной жидкой фазы используют жидкие кристаллы об1Цей формулы

где ) N-; Y -t-0-;

3

15 R, -CH3i-C Hj; R, -.oCH;-OC,Hy;

или X Y -t-0-; R

-ow,. . :

Определение сопряженных диеновых алифатических спиртов и ацетатов npo водят следующим образом.

Образец, содержащий от 60 до 1300 мкг анализируемого соединения, подвергают трехкратной экстракции гексаном (3x10 мл / в течение 15 мин, затем объединенные зкстра кти упаривают в токе азота до объема 1 мл, из которого отбирают микрошприцем аликвотную часть (2-3 мкл ) и анализируют ее на стеклянной колонке (3м X 2 мм), заполненной сорбентом: 5 Jec.%. жидкокристаллич.еской неподвижной жидкой фазы на хроматоне N-AW-DMCS, зернением 0,125-0,160 мм.

Температуру колонки изменяют в пределах 100-170 0, детектирование разделенных компонентов осуществляют пламенно-ионизационным детектором. Разделение проводят на колонках с неподвижными жидкими фазами. Характеристика используемых в способе хроматографических колонок с твердым носителем хроматон представлены в табл. 1.

Т а б л и ц а 1

СПеХ:ОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОПРЯЖЕННЫХ ДИЕНОВЫХ.АЛИФАТИЧЕСКИХ СПИРТОВ И АЦЕТАТОВ путем экстрагирования их из анализируемой пробы гексаном, упаривания экстракта с последукхцим хроматографическим разделением его на колонке с твердым носителе#«1, содержащем неподвижную жидкую фазу, отличающийся тем, что, с цепью повынения селективности разделения и точности способа, в качестве неподвижной жидкой фазы используют жидкие кристаллы общей формулы i (Л .о или -; , Р., ,,

Прюдолжение табл. 1

е,йисг При м е р 1.1 мг искусственной смеси изомеров 8,1б-дояекадиен-1-ола сояержащей 75% транс,трайс-,5 цис, цис-и 8% дис, транс-изомеров, растворяют в 1 мл гексана, отбирают мик.рошприцем 3 мкл полученного раство(ра и определяют в интервале темпе- ( ратур 100 - относительные времена удерживания геометрических изо.меров 8,10-додекадие|Г-1-ола по цис, транс-изомеру на колонках с пндкш4и кристаллами структуры J- IV (табл. 1) Полученные данные приведены в табл.2 П р.и м е р 2. 1 мг искусственной смеси изомеров 8, Ю-додекадиеи1-ол ацетата, содержащей 54% транс, транс-, 15% ций,цис-, 23% транс,циси 8% цис, транс-изомеров, растворя1)т в 1 мл гексана и определяют на ко- ; лоиках с жидкими кристаллами структуры I-VH относительные времена удерживания изомеров по цисутрансизомеру. Результаты предоставлены в табл.2. Примерз. 1 мг искусственной смеси изомеров 6,8-декадиен-1-ола, содержащей -60% транс,транс-, 10% цис ЦИС-, 15% цис,транс- и 15% транс,цисизомеров, растворяют в 1 МП гексана и определяют аа колонках с жидкими кристаллами 1- (табл.1| относительные времена удерживания по цис,транс.изомеру в интервале температур100ITO c. Результаты определения селективйости жидких кристаллов ( по отношению к этим соединенияп представлены в табл. 2.. Пример4.2мг искусственной . смеси изомеров 9., 11-тетрадекадиен-1ол ацетата, содержащей 50% цис,транс15% транс,ЦИС-, 8% цис,цис-, 27% транс,транс-изомеров, растворяют в . 1 мл гексана и определяют на колонках с жидкими кристаллами l-yi табл. 1/ при различных температурах относительные удерживания анализируемых соединений по цис, транс-изомеру. Результаты представлены в табл. 2. При мер 5. 1мг искусственной смеси изомеров 7,9-дояекадиен-1-ол ацетата, содержащей 30% транс,транс-, 8% цис,цис-, 54% транс,цис- и 8% цис,транс-изомеров, растворяют в 1 мл гексана и определяют на колонках с различными жидкими кристаллами при разных температурах относительные времена удерживания анализируемых соединений по цис,транс-изомеру. Влияние температуры колонки и струк- туры жидкокристаллической неподвижной фазы на удержание йзс 1еров диеНовых спиртов и ацетатов предстсш; ал в табл. 2.

8,10-додекаяиен-1ол ацетат

170

1,121,201,25 160

Таблиц а 2

1,10 1,14 1,18

1,18 1,23 1,16 1,21 1,29

1,17 1,21

8

Продолжение табл. 2

Продолжение табл. 2Температура к6 лонок,

: 8, 1Ь-д щекадиен- 1г.ал

транс,

цяс, транс цнс

1,10 1,15 1,23

1,12 1,17 1,26 1,10 1,16 1,24

8-10-додекадиен-1-ол ацетат

6,8-декадиен-1-ол

170 160 150

140 135

Продолжение табл. 2

транс,

транс,

цис,

транс,

транс,

цис, цнс транс транс цис цис

цис

1,09 1,12 1,16

1,121,16

1,13 1,19 1,25 1,12 1,16 1,20

1,141,18

1,161,20

1,181,22

1,161,20

1,08 1,11 1,14 1,10 1,15 1,20 Относительное аремя удерживания на колонках с непЬлаижными кидхокристаллическими фазами (табл.1) изомеров дхиеновых спиртов и ацетатов ЧЛилтрл тура ко- лЬнок,:;

IV

: 8,10-доцекадиен-1г.ол 1,08 1,12 1,17 1,09 1,13 1,19 1,131,18 1,161,24 1,151,22 1,151.,22

9-11-тетрадекадиен-1г.ол-ацетат 1,07 1,10 1,13 1,08 1,12 1,15 1,09 1,12 1,15 1,11 1,15 1,19 1,09 1,11 1,15

7,9-додекадиен-1-ол ацетат

Продолжение табл. 2

г.

VI

транс транс 1,13 1,17 1,23 1,11 1,15 1,21 1,11 1,15 1,21 1.091,13 1,16 1,12 1,16 1,20 1.101,14 1,18

1,05 1,16 1,25 Этяосительно «peiM удерживания на колонках с неподвижшми кидкокриоталличвскими фааами I-Y) (абл.1) мэомероя диеновых спиртов и ацетатов 1,09 1,13 1,17 1,09 1,13 1,17 1.091,131,16 1.101,141,18 1.121,161,20 1.131,171,20 1.111,151,18 Из данных табл, 2 следует, что жидкокристаллические неподвижные жидкие фазы I. YJ обладают высокой селективностью по отношению к геометрическим изомерам диеновых алифа ти 1еских спиртов и ацетатов, причем максимальная селективность наблюгдается в твердокристаллическс сос тоянии (фазе ) жидкого кристалла, а именно при температурах на 2-2Q°C ниже текшературы перехода используе мого жидкого кристалла из твердокрис таллической в нематическую фазу. П р и м е р 6. Искусственну смесь изомеров, имеющую состав аналогичный примеру 1, разделяют при на колонке с жидким кристаллом структуры Y (табл.и в качестве . неподвижно(Г жидкой фазы. В колонку хроматографа микрснапри цем вводив 3 мкл раствора изомеров 8,10-додекадиен-1-ола в гексане, проводят четыре параллельных опреде ления и рассчитывают, применяя мето внутренней нормализации, содержание компонентов в исследуемой смеси по фсэрмуле Xt- к 100 . где Х| - процентное содержание i-ro компонента в смеси; lif - высота пика i-ro компонента 1с - число компонентов в смеси. Результаты представлены в табл.3.

Продолжение табл. 2 П р и ме р 7. Определение про.центного содержания изомеров 8,10додекадиен-1-ал ацетата в искусственной смеси, име}аи(ей состав аналогичный примеру 2, проводят .методом внутренней нормализации, аналогично примеру 6. Хроматографический анализ проводят при на колонке с жидким кристгшлом структуры || (табл.1 в качестве неподвижной жидкой фазы. Результаты представлены в табл.3. П р и м е р 8. Количественное определение процентного содержания компонентов искусственной смеси изомеров 6,8-декадиен-1-ола, имепщеП составу аналогичный примеру 3, проводят при 140С на колонке с жидким кристалле .(табл.1 в качестве неподвижной жидкой фазы. Расчеты проводят по методу внутренней нормализации, аналогично примеру 6. Результаты представлены в табл. 3.. Пример 9. Определение процентного содержания изомеров 9,11тетрадекадиен-1-ол ацетата в искусственной смеси, аналогичной примеру 4, проводят при 145С на колонке с жидким кристаллом структуры Щ табл.11 в качестве неподвижной зкид-кой фазы. Расчеты проводят по методу внутренней нормализации, аналогично примеру 6. Результаты представлены В табл. 3. П р и м е р 10. Определение процентногр содержания геометрических изомеров 7,9-,додекад)ген- 1-ол ацетата в искусственной смеси/ имеющей соетав аналогичный примеру 5, проводят при . на колонке с жидким кристаллом структуры (таблЛ в качестве неподвижной жидкой фазы. Расг

П ри м е р 11. Определение трйнс, транс-8,10-додекадиен-1-ола аттрактанта яблочной плодожорки в резиновых препаративных формах проЕГодят, анализируя параллельно 12 препаративных форм (гост 3399-76), в к торые задано по 62,5 мкг (4 пробыв 125 мкг (4пробы) и 1250 мкг (4 прочеты проводят аналогично примеру 6. Количественный анализ искусственных смесей, содержащих изомеры диеновых спиртов и ацетатов представлены в табл.3. Т ,а б л и ц а 3 бы) синтетического препарата, содер жащего 80% транс,транс-, 12% транс, цис- и 8% цис,транс- изомеров 8,ioдодекадиен-1-ола, и одну препаративную форму, не содержащую синтетического препарата, которую использую в качестве контрольного образца. В пересчете на транс,транс-8,10-додек диен-1-ол препаративные формы содер жат по 50, 100 и 1000 мкг этого изомера. Эти 13 препаративных форм экстрагируют гексаном (3x10 мл) в течение 15 мин, затем экстракты объединяют, -уг аривают в токе азота до 1 .мл и анализируют на колонке с жидкокрйсталлическрй неподвижной жидкой фаЗОЙ у (табл.1) при . Времена удерживания цис,транс-, транс,цис-, и транс,транс-изомерой 8,10-додекадиен-1-ола составляют 16,3, 19,0 и 21,3 мин- соответственн Контрольный образец не дает пиков в интервале времен удерживания 14-. ,24 мин. Пара7ШелЬно эти же экстракты анализируют на стеклянной колонке (Зм к 2 мм ), заполненной хроматоном N-AWГ«С5,зернением 0,125 - J),160 MKJ, содержащим 5% ХЕ-60 (согласно известному методу ). Времена удерживания цис,транс-,транс,цис- и транс,трансизомеров 8,10-додекадиен-1-ола на этой колонке при 140°С составляют 12,0; 12,0 и 12,2 мин соответственно Контрольный образец не дает пиков в интервале времени удерживания 1014 мин. Для количественного определения транс,транс-8,10-додекадиен-1-ола в исследуемых пробах хроматографируют исследуемые и стандартные растворы с известной концентрацией транс, транс-8,10-додекадиен-1-ола (например, 50, 100 и IDOb мкг/мл} (метод абсолютной калибровки. В колонку хроматографа вводят 2-3 мкл стан:дартного раствора, проводят 3-4 анализа, и определяют среднюю высоту пика. Аналогично определяют высоты пиков для исследуе1«дх растворов и рассчитывают содержание препарата в образце по соотношению bzVjCjV где ti и ti2 высоты пиков стандарт ного и анализируемого растворов соответствен но, мм; V, . объема стандартного и анализируемого раство- (ров, вводИ№4х в колонку хроматографа, мкл; : С - концентраци стандартного раствора, мкг/мл; V - объем анализируемой пробы, мл. Пример 12. Определение Лранс, цис- 7,9-додекадиен-1-ола ацетата (аттрактанта гроздевой листовертки/ в ре.зиновых препаративных формах проводят, анализируя параллельно 12 препаративных форм (ГОСТ 3399-76/, в которые задано по 100 мкг (4 пробы), 500 мкг (4 пробыли 1000 мкг (4 -робы / синтетического препарата, ее .ержащего 60% транс,цис-, 4% цис,циаи 36% транс,транс-изомеров 7,9-дод«г кадиен-1-ол ацетата и одну препаративную форму, в которую невносят синтетический препарат, используемую в качестве контроль.ного образца. Эти препаративные формы экстрагируют гексаном (3x10 мл) в течение 15 мин, экстракты объединяют и упаривают в токе азота до объема 1 мл и затем анализируют на колонке с жидким кристаллом Ij (табл.1) при . Времена удерживания транс,цис-, цис,цис- и транс,транс-изомеров 7,9додекадиен-1-ол ацетата на этой колонке: 22,6; 25,6 и 27,6 мин соответственно. Контрольный образец не ; дает пиков в интервале времен удерживания 20-30 мин. Параллельно эти же экстракты ана,лизируют при 140°С на стеклянной ко- i лонке (Зх 2 мм ), заполненной хроматоном N-AW-PMCS, зерненнем 0,125- ,. 0,160 мм, с 5% нитрилсиликонового каучука ХЕ-60 (согласно известному методу). Времена удерживания транс, ЦИС-, цис,цис-.и транс,транс-изомеров 7,9-додекадиен-1-ол ацетата: 15,2; 15,5 и 15,7 мин соответственно, контрольный образец не дает пиков в интервале .времен Удерживания 12-18 мин. Для количественного определения транс, цис-7,9-додекадиен-1-ол ацетата хроматбграфируют исследуемые и стандартные растворы транс,,9додекадиен1-ол ацетата с известной . концентрацией (60, 300 и 600 мкг/млЛ В колонку хроматографа вводят 23 мкл стандартного раствора, прово- дят 3-4 параллельны1с определения и определяют среднкяо высоту пика. Аналогично определяют высоты пиков для исследуемого раствора и рассчитывают содержание препарата в образце, аналогично примеру 11. Результаты представлены в табл. 4.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить селективность разделе-шя в среднем не менее чем на 15%, при этом обеспечивается BOS- 45 можность количественного определения изомерных форм диеновых спиртов и ацетатов (величина относительного стандартного отклонения при количеТаблица 4

ственном анализе не превышает величину 1,15).

При этом повышается точность определения биологически активных форм диеновых спиртов и ацетатов средняя относительная погрешность 9%, что превосходит результат достигаемый в известном способе на 15%,