Диагностикум для выявления антигена гепатита В Советский патент 1984 года по МПК A61K39/42 

QD

00 4 Изобретение относится к медицине и касается диагностического состава для выявления гепатита В. Известен диагностикум для выявления антигена гепатита В, содержащий частицы полистирола с сорбированны -4и на них специфическими антителами и с левой раствор 1 1, Однако известный диагностикум не обладает достаточно высокой чувствительностью. Целью изобретения является повышение чувствительности диагностикума Эта цель достигается тем,, что диагноетикум для выявления антигена гепатита В, содержащий частицы полистирола размером 052-0,23 мкм с сор(бированными на них специфическими ан тителами при концентрации последних 0,05% и солевой раствор, дополнитель но содержит нормальную сыЕ.оротку мор ских свиноКз в качестве солевого ра вора он содержит физиологический ра вор при следующем количественном со отношении компонентов, мас,%: Част11цы полистирола размером 0,2-0523 мкм ,с сорбированными на них специфическими антителами при концентрации последних 0,05%0,5-0,8 Нормальная сьшоротка морских свинок2-5 Физиологическю раствор Остально Диагностикум для выявления антиге на гепатита В содержит водную суспен зию мелко раздробленных частиц синте тической смолы, покрытых очищенным антителом, специфическим для поверх ностного антигена гепатита В. Эти частицы представляют собой сферические полистироловые частицы, имеющие диаметр примерно 0,23 мкм, но подходят также частицы полистирола или других синтетических смол, например .акриловых, имеющие одинаковые размеры 0,05-25О мкм. Антитела, специфические для поверхностного антигена гепатита В, предпочтительно получают от млекопитающих, например.людейj овец, коз, кроликов или морских сви-HoKj или из птичьих источников, таких как куры или индейки, которые содержат антитела, или были иммунизированы в , высшей степени очищенньп-i поверхностным ; антигеном гепатита В,. полученным из крови человека. Морских свинок или других животь:ых, таких как кролики, козы, иммунизируют поверхностнымантигеном гепатита В по известному методу. Первичная иммунизация антигеном в полном вспомогательном лекарственном веществе Фреунда в подушечки лап сопровож,цается повторяемыми внутрибрюшинными внутримышечньЕми, подкожными или внутривенными прививками антигена с использованием или без использования вспомогательного лекарственного вещества. После смешивания сывороток, собранных от иммунизиро- ванньо; животных, остаточное антитело для протеинов сыворотрси человека, если оно присутствует, удаляется посредством контактирования антисыБоротки с нррмальной сьшороткой человека. Затем гамма-глобулин может изолироваться посредством преципитации 14%-ным BonHbM сульфатом натрия, диализироваться против буферированного фосфатом водного физиологического раствора поваренной соли и, предпочтительно до 56 С в течение примерно 30 мин, чтобы разрушить комплемент. Далее антитела очищают по общим известным методам. Специфические поверхностные антитела гепатита В очищают от абсорбированных сывороток лшвотного (предпочтительно сывороток морской свинки) посредством смешивания этих сывороток.:, в оптимальных пропорциях с сыворотками человека, со.цержащими поверхностньш антиген гепатита В, инкубирования при 37°С в чение часа, а затем в течение ночи при i С, Образованный таким образом преципитат (осадок) антиген-антитела дважды промывают в холодном буферит рованном фосфатом физиологическом растворе поваренной соли, чтобы удалить большинство остаточных неспецифических протеинов. Затем этот преципитат амтиген-антР1тела растворяют в холодзюй 0,2 М уксусной кислоте (2% сахгрозь:S рН 2,3) или различных т-- ольиь1х концентраций хаотропических ионов, например 2,0 М тиоцианата натрия, рН 6,6. Могут использоваться другие соотватств пощие буферные смеси,, чтобы диссоциировать комплексы антиген-антитело. Эти диссоциированны.е антигены и антитела разделяют центрифугированием при 25000-28000 оборо1ов в минуту в течение 12-15 ч или при 30000 оборотов в минуту в 31 течение 4 ч на непрерывном градиенте сахарозы порядка 10-40% в зональном роторе Бекмана типа Т1-15. Ротор раз гружают накачиванием в него 50% сахарозы. Чтобы смешать градиент, 20 м фракции проверя на ультрафиолетовое поглощение в 1 см ячейке при 280т(Ь-,, пиковые фракции смешивают и получают очищенную фракцию специфи ческого антитела и очищенную фракцию антигена. Затем обе фракции нейтрали зуют применением 0,1 н. NaOH. Фракци антитела концентрируют до объема исходной сыворотки и диализируют в течение ночи против буферированного глицином физиологического раствора поваренной соли. Затем очищенное антитело титрируют и стандартизируют. 0,1% азида натрия можно добавлять в качестве противокоагулирующего средства для использования в приготовлении диагностического реагента. Антитела разбавляют путем приготовления небольших дозировок диагностического реагента с различными разбав лениями антитела и испытания их с рядом сывороток человека, содержащих поверхностный антиген гепатита В. Разбавление, дающее лучшие показатели в сравнении с этим рядом, когда оно покрывает частицы смолы, выбирают для приготовления диагностическог реагента. Разбавленные антитела смешивают с имеющими диаметр 0,2 мкм латексными зернами полистирола. После смешивания в течение одного или двух часов эти зерна трижды промываются буферированным глицином физиологическим раствором поваренной соли. Водная суспензия содержит примерно 0,5 вес.%/объем частиц смолы, но может содержать и 0,1-3 вес.%/объем частиц смолы. Для приготовления диаг ностикума эта суспензия предпочтительно содержит примерно 0,05 вес.%/ /объем антитела, абсорбированного на частицах смолы, но этот состав может меняться в соответствии с концентрацией частиц. Процентное содержание антитела должно быть достаточным, чтобы предупреждать аутоагрегацию частиц резины. Для шарообразных частиц полистирола порядка 0,23 мкм в диаметре это составляет примерно одну десятую веса частиц. Суспензия предпочтительно содержит стабилизатор дисперсии (антикоа 44 лятор), добавляемый после абсорбирования антитела на частицах, например инертный протеин, такой как сывороточньш альбумин при концентрации, например, 0,1 Бес.%/объем. Диагностикум также содержит нормальную сыворотку (т.е сыворотку, не содержащую ни антитело, специфическое для поверхностного антигена гепатита В, ни сам антиген), полученную от той же разновидности животных, что и та, от которой получена сыворотка, содержащая, антитела. Присутствие этой нормальной сыворотки существенно снижает процентный состав ложно положительных результатов, когда используют диагностикум для выявления поверхностного антигена гепатита В в пробах крови. Предпочтительно около одной части нормальной сыворотки содержится на 20-50 частей (по объему) водной суспензии частиц смолы, покрытых антителом. Если нормальная сыворотка от той же разновидности животных, что и та, от которой была получена содержащая антитела сыворотка, не содержится в диагностикуме примерно 10% сывороток человека, не содержащих поверхностного антигена гепатита В, будут агглютинировать частицы смолы. Это происходит благодаря присутствию такого рода веществ в сыворотках человека, которые реагируют с другими материалами, происходящими от антисыворотки животных, из которой получен поверхностный антиген гепатита В. Однако, если содерукится нормальная сыворотка животного, только примерно 1-3% сывороток человека будут агглютинировать частицы смолы при отсутствии в этих сыворотках поверхностного антигена гепатита В. Это может иметь место при наличии в нормальной сыворотке животного, которые способны реагировать с этими веществами в сыворотках человека и таким образом предупреждать их от вызывания агглютинации частиц смолы. Обеспечивается контроль нормальной сыворотки человека, которая получается из неразбавленной нормальной сыворотки человека; она является отрицательной в отношении поверхностного антигена гепатита В при испытании латексным реагентом и методом радиоактивных изотопов. Сыворотку положительного контроля ппиготавливают из имеющейся известной поло}кительной на поверхност}1ый анти ген гепатита В сыворотки человека. Эту сыворотку подвергают термообработке при 60 С в течение 10 Ч; а затем дважды последовательно разбавляют в нормальной сыворотке человека, РазбавлениеS используемое для этого продукта 5 представляет собой разбавление, дающее определенную реакцию латексным реагентом. Диагностикум состоит из следуюш,их компонентов. АО Система отсеивающего испытания 1,Связанные с гепатитом антитела абсорбированные на латекснык зернах (бусинках, шариках), 2,Сыворотка положительного контроля. 3,Сыворотка отрицательного контроля. В Система подтверждающего испытания . 1. Связанные с гепатитом антитела (человека), 2„ Контроль нормальной сыворотки человека (отрицательный для поверхностного антигена гепати та В) , 3, Реагент поглощения ревматоидного фактора, 4 о Разбавитель подтверлщающего испытания. Связанные с гепатитом антитела (человека) получают из плазмы челов ка, которая содерлшт антитела для п верхностного антигена гепатита В, Эту плазму принимают из различных плазмофорезисных (плазмоприготовительных) центров, ее титрируют гель диффузией и преобразуют в сыворотку путем добавления хлорида кальция и бычьего тромбина. Затем из этой сыворотки приготавливают гамма-глобул путем преципитаттии 16%-ным сульфато 5атрия После промывания преципитат (осадка) в 14%-ном сульфате натрия состав диализируют в течение всей н чи против низкой молярности фосфат-него буфера и пропускают через целлюлозу типа ДЕАЕ, уравновешенную тем же буфером. Очищенный гамма-гло булин затем стандартизируют по концентрации и диализируют против буфег рированного фосфатом физиологическо го раствора поваренной соли, Реагент абсорбента ревматоидного фактора состоит из латексных зерен (бусинок, шариков),, покрытых нормал гамма-глобулином человека. Он образуется посредством приготовления стЕидартного раствора очищенного гамма-глобулина в буферированном | 1;1цином физиологическом растворе 110}1аренной соли с добавлением сус-чснзии из 0,2 мкм полистироловых зерен и путем нагревания при 57°С R течение 5 мин. Затем эту суспензию разбавляют в буферированном глицином физиологическом равтворе поваренной Разбавитель подтверждающего испытания приготавливают путем разбавления раствора 30%-ного альбумина бычьей сыворотки буферированньгм фосфатом физиологического раствора поваpt-EiHOK соли до 5%-ной концентрации проте:ина. Испытания проводят следующим образом, Приготавливают пробы крови. Сыгюротка является предпочтительной формой пробы (образца) крови. Если ггроверяемая проба представляет собой цельную кровь ее необходимо сначала обработать, чтобы растворить в ней клетки и предупредить коагуляцию. Для этой цели ее обрабатывают зодньм разбавителем5 содержащим безионное поверхностно-активное вещество тика полиоксиэтилированного алкилфенолЯз нап)эимер изооктилфенокси-полиоксиэтилзтанол и лимонно-кислый натЕсли проверяемая проба представляет собой сьпзоротку крови,, она должна, содержать антикоагуляптъц такие как лимонно кислый натрий. Преимущественно ее также обрабатывают тем же cat4bJM водным разбавителем,, содержащим без- ионное поверхностно-активное вещество, как и для цельно.й кровИ; чтобь растзорять любые остаточные клетки, прис у тс т 3 утащи в в не.й. Специфичность реагента определяют путем сравнен.ия гго с цель1м рядом положительных и отрицательных сывороток, постав.пяемых Бюро Биологических наук, а также с рядом из 100 отрицате.пьных сывороток, собранных от нормальных до бровольцев. Ре;г..кцион;гу1о способность определяют путем суспендирования данного реагента энергичны:м перемешиванием, для этого в одно из испытательных углублений на пластмассовых лабораторных аластинах наливают 3 капли сыворотки

положительного контроля. Во второе прилежащее углубление наливают 3 капли сыворотки отрицательного контроля

К каждой пробе добавляют по одной капле реагента. Перемешивают полность используя отдельный миксер для каждого углубления. Вращают пластину на механическом ротаторе в течение 10 ми со скоростью вращения 150 оборотов в минуту. Проверяют смеси через освещаемый отраженным или рассеянным светом просмотровый прибор.

Отчетливо положительная, слабая (1) реакци должна наблюдаться при пробе сыворотки положительного контроля. Никакой реакции не должно наблюдаться с пробой сыворотки отрицательного контроля.

Реакционную способность сыворотки положительного контроля испытываю латексным реагентом, чтобы гарантировать реакционную способность порядка 1 ,

Сыворотку отрицательного контроля испытывают латексным реагентом, чтобы гарантировать отрицательную реакцию.

Контроль нормальной сыворотки человека.

Проверку на специфичность проводя для того, чтобы убедиться, что она не реагирует с латексным реагентом и что она не подавляет положительные .сыворотки в отношении поверхностного антигена гепатита В,

Связанные с гепатитом антитела (человека).

Реакционную способность проверяют путем гель-диффузионного титрования посредством использования стандартного поверхностного антигена гепатита В.

Испытания на специфичность проводят, чтобы определить, будет ли эта сыворотка специфически подавлять положительные пробы поверхностного антигена гепатита Б,

Реагент поглощения.

Реакционную способность определяю путем испытания реагента с сыворотка ми, содержащими ревматоидный фактор, чтобы гарантировать его реакцию с этим фактором и частичное поглощение его из сывороток.

Разбавитель подтверждающего испытания.

Испытания на специфичность проводят с использованием этого разбави-

теля, чтобы убедиться, что он не реагирует с латексным реагентом и что он не подавляет положительные сывороки поверхностного антигена гепатита В.

Испытание проб сыворотки (отсеивающее испытание) проводят путем отделения 120|О-Е сыворотки в углубление на пластмассовой пластине.

Добавляют одну каплю латексного реягента.

Полностью смешивают, используя отдельньш находящийся в пользовании миксер для каждой пробы (образца).

Вращают пластину на механическом роторе в течение 10 мин со скоростью 150 оборотов в минуту.

Проверяют смеси через совмещаемьй отраженным или рассеянным светом просмотровый прибор.

Реакции подсчитывают по баллам на шкале от 1 до 4, соответствующей увеличению интенсивности агглютинации.

Подтверждающая процедура нейтрализации.

Помечают одну пробирку объемом 10 X 75 мм идентификационным номером пробы и индексом А, Помечают втору-о пробирку идентификационным номером пробы и индексом В.

Добавляют две капли (примерно ) связанного с. гепатитом антитела (человека) в пробирку, снабженной индексом А.

Добавляют две капли нормальной сыворотки человека отрицательного контроля в пробирку, снабженную ийдексом В,

Добавляют 240jU.6 испытательной пробы в каждую из пробирок, отмеченных индексами А и В,

Перемешивают содержимое этих пробирок и подвергают инкубации в течение 30 мин при 37°С в водяной ванне. - Испы.тывают 120|М- из пробирок А и в, используя отсеивающие реагенты и процвдурь. Для большинства относительно мало титрованных положительных проб дифференциация между специфическими и неспецифическими положительными результатами может быть без дальнейшего испытания, поскольку проба А нереагирующая, в то время, как проба В остаемся положительной показывая специфическое подавление антителом человека. Для тех образцов которые являются специфическими, но более сильно титрованными, а также для тех, которые являются неспецифическими, требуется дальнейшее ние. Для каждой пробирки, требующей дальнейшего испытания, помечают дополнительные шесть пробирок с разбавлениями от 1 : 4 до . : 128, а также идентификационным номером пробы и индексами А или В. Добавляют 20014 разбавителя подтверждающего испытания в каждую пробирку, включая пробирки, которые содержат пробу пациента и антисыворотк человека или нормальную сьшоротку человека, т.е. исходные пробирки А и в, делая разбавление в них примерно 1 : 2, Дваж,цы разбавляют переносом 200 используя отдельные микропипетки для калсдой пробирки и хорошо перемешивггют перед удалением проб. Испытывают из калсдой пробирки, используя отсеивающие реагенты и процедуры. Титр, полученньш в ряду В (проба и нормальная сыворотка человека), должен быть в четыре раза (две пробирки) выше, чем в ряду А (проба и нейтрализующее гепатит связанное антитела (человека) для того, чтобы рассматривать пробу (образец) в качестве специфического позитива поверхностного антигена гепатита В, В случае, когда, как титр А, так и титр в является выше, чем 1:128,, разбавление должно производиться далее до тех пор, пока не будет опреде .лена конечная точка. Поскольку целый ряд проб,, содержа щих ревматоидньш фактор, реагирует с латексньм реагентом, необходимо диф ференцировать пробЫз содержшгие как поверхностный антиген гепатита В та и ревматоидный фактор. Присутствие ревматоидного фактора можно определить испытанием сыворотки реагентом поглощения ревматоидног фактора (латекс 5 покрытьш гамма-гло-булином человека) путем смешивания 120 мл пробы и одной капли поглощающего реагента на пластмассовом слай де и вращения в течение пяти минут., Если проба содержит ревматоидный факторJ она может поглощаться посред ством добавления 720|ий пробы в пробирку 10 X 75 и добавления шести капель поглощающего агента в эту пробирку. Хорошо перемешать и инкуОнровать при :: омнатной температуре D течение пяти минут. Выполнить подтверждающую процедуру нейтрализации на абсорбированной пробе. Приготовление очищенного антитела поверхностному антигену гепатита В. Морских свинок иммунизируют поверхностным антигеном гепатита В, очищенньп известным способом. Первичная иммунизация антигеном в полном вспомогательном лекарственном веществе Фреунда в подушечки лап морских свинок сопровождается двумя внутрибрюшинными прививками этого антигена без вспомогательного лекарственного вещества. После объединения сыворотокJ собранных от иммунизированных животных, остаточный протеин, если это необходимо, удаляют посредством контактирования антисыворотки с нормальной сывороткой человека. Гамма-глобулин затем очищают посредством преципитации с 14 вес.%/объём водньм сульфатом натрия, диализируют против буферированного водныг- фосфатом физиологического раствора поваренной соли и предпочтительно нагревают при 56 С в течение примерно 30 мин, чтобы разр тлить комплемент. Очигденную сыворотку смешивают с сь вороткой человека, содержащей поверхностный антиген гепатита В, подвергают инкубации при 4 С. Полученный таким образом приципитат антиген-антитела затем дважды промывают в холодном буферированном фосфатом физиологическом растворе поваренной соли, чтобы удалить большинство остаточных неспецифических протеинов. Затем этот преципитат антиген-антитела растворяют в холодной 0,2 М укс:|сной кислоте (2% сахарозы, рН 2,3 или хаотропических. ионов). Эти диссоциированные антигены и антитела разделяют центрифугированием при 25000-28000 оборотах в минуту в течение 12-15 Чэ или при ЗрООО оборотах в минуту в течение 4 ч на непрерывном 10-40%-ном градиенте сахарозы в зональном роторе Бекмана типа Т1-15, Ротор разгружают посредством нагнетания 50% сахарозы в него, чтобы смешать градиент, а 20 мл фракции проверяют на ультрафиолетовое поглощение в 1 см ячейки ггри 280 мл, а пиковые фракции объединяют,, чтобы давать очищенную. специфическую фракцию антитела, кото рую затем нейтрализуют 0,1 н. NaOH. Фракцию антитела концентрируют до исходного объема сыворотки и диализи руют в течение ночи против буферированного глицином физиологического раствора поваренной соли. Затем очищенные антитела титруют и стандартизируют. Эти антитела оптимально разбавляют путем приготовления малых дозировок диагностикума с различными разбавлениями антитела и испытания их против целого ряда сывороток человека, относительно которых известно, что они содержат поверхностный антиген гепатита В. Разбавление, дающее наилучшее показание против этого ряд когда нанесено на частицы смолы, выбирают для приготовления диагностикума. Диагностикум готовят следующим образом. Пример 1. 30 вес.%/объём водной суспензии 0,23 мкм полистироловых шариков разбавляют до 8 вес.%/ /объём буферированньЕМ глицином физиологическим раствором поваренной соли и диализируют против буферированного глицином физиологического раствора поваренной соли в течение всей ночи. Затем ее немедленно добавляют к 9 объемам очищенной антисыворотки морских свинок,.содержащей антитела поверхностному антигену гепатита В (разбавленному до 0,05 вес.%/объём) и постоянно перемешивают в течение 30 мин. После этого добавляют один объём альбумина бычьей сыворотки (1 вес.%/объём) и затем - азид натрия, чтобы концентрация была порядка 0,1 вес.%/объём в окончательном продукте. Пример 2. 30 вес.%/объём суспензии полистироловых шариков (0,05-2,0 мкм) разбавляют до 8 вес.%/объём буферированным гли-цином физиологичестим раствором поваренной соли и стерилизуют посредством добавления раствора гипохлорита. Затем диализируют против буферированного глицином физиологического раствора поваренной соли, чтобы удалить гипохлорит. Затем этот состав добавляют к 9 объёмам с соответствующим образом разбавленной, очищенной сыворотки морских свинок - антителам поверхностного антигена гепатита В. А12 Полистироловую суспензию добавляют медленно с перемешиванием, которое продолжается в течение одного часа. Полистироловые шарики центрифугируют, дважды промывают на центрифуге буферированным физиологическим раствором поваренной соли и снова суспендируют в исходный объем в буферированном физиологическом растворе поваренной соли. Альбумин бычьей сыворотки добавляют с перемешиванием в течение 30 мин. Одну десятую объёма разбавленной нормальной сыворотки от неиммунизированных морских свинок (разбавленной 1:3,5 буферированным глицином физиологическим раствором поваренной соли) добавляют к этому составу и смесь снова перемешивают в течение 30 мин, и, наконец, эту смесь энергично встряхивают, чтобы диспергировать любые агломерации частиц. Все растворы, которые использовались, стерилизуют посредством фильтрации и содержат в себе 0,1 вес.%/объём азида Натрия в качестве стабилизатора дисперсии (антикоагулятора). Пример 3. Сыворотку положительного контроля готовят из целого ряда известных в качестве положительных на поверхностный антиген гепатита В сывороток человека. Эту сыворотку подвергают тепловой обработке при 60°С в течение примерно 10 ч, а затем дважды последовательно, разбавляют в нормальной сыворотке человека. Используемое разбавление яв- . ляется таким, которое дает (1-4) реакцию с латексным реагентом по примерам 1 и 2. Затем этот состав стерильно фильтруют и помещают в стерильные контейнеры. Пример 4. Сыворотку отрицательного контроля получают из неразбавленной сыворотки человека, которая показала себя отрицательной в отношении поверхностного антигена гепатита В при использовании латексноге реагента по примеру 1 или примеру 2 в применении метода радиоактивных изотопов. Состав стерильно фильтруют и помещают в стерильные контейнеры. Пример 5. Плазму человека, которая содержит антитела поверхностному антигену гепатита В, титруют гельдиффузией и преобразует в сыворотку посредством добавления хлорида кальция и бычьего тромбина. Гамма-глобуЛИН затем приготавливают из этой сыворотки посредством преципитации с 16 вес,%/объём сульфатом натрия. После промывания этого преципитата в 14 вес.%/объём сульфата натрия его диализируют против фосфатного буфера низкой молярности и пропускают через целлюлозу типа ДЕЛЕ, котор а была ранее уравновешена тем же самым буфером. Очищенный гамма-глобулин затем стандартизируют и диализируют против буферированного фосфатом физиологического раствора поваренной соли. Затем этот состав стерильно фильтруют и помещают в стерильные контейнеры. Пример 6. Стандартный раствор очищенного гамма-глобулина человека в буферированном глицином физиологическом растворе поваренной соли добавляют к суспензии 0,2 мкм полистирольного латекса и нагревают при в течение 15 мин. Суспензию, ис пользуемую для абсорбирования ревматоидного фактора в испытываемых сыворотках, разбавляют в буферированно глицином физиологическом растворе по варенной соли и помещают в стерильны контейнеры. Пример 7. Разбавитель подтверждающего испытания приготавлива ют посредством разбавления раствора 30 вес,%/объём раствора альбумина бычьей сыворотки в буферированном фосфатом физиологическом растворе поваренной соли до 5%-ной концентра ции протеина. Этот раствор затем стерильно с ильтруют и помещают в стерильные контейнеры. Пример 8, Относительно концентрации очищенных антител морских свинок; объём суспензии полистирола смешан с таким объёмом очищенной антисыворотки морских свинок, что получаемая в результате суспензия будет иметь концентрацию антител, равную 0,05 процента в/в, т.е. про;укт содерлшт около 0,8 процента в/в сфер полистирола и примерно 0,05 процента в/в антител по отношению к поверхностному антигену гепатита В. Пример 9. Аналогично примеру 1 продукт содержит 0,8 процента сфер полистирола. Кроме того, он содержит одну десятую объёма (10 процентов в/в) разбавленной в отношении 1:3,5 нормальной сыворотки морских свинок. Разбавленная в отношении 1:3,5 сыворотка соответствует раствоipy, которьм содержит примерно 3D процентов в/в сыворотки. Соответственно, конечный продукт содержит около 3 процентов в/в нормальной сыворотки морских свинок. Предлагаемый диагностику обладает высокой чувствительностью для выявления антигена гепатита В за счет того, что используют BbiCOKo очищенные антитела и нормальную сыворотку той же разновидности животных, от которых были получены специфические антитела, что позволяет снизить число ложно положительных результатов,

ДИАГНОСТИКУМ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНА ГЕПАТИТА В, содержащий частицы полистирола размером 0,2-0,23 мкм с сорбированными на них специфическими антителами при концентрации последних 0,05% и солевой раствор, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности диагностикума, он дополнительно содержит нормальную сьшоротку морских свинок, в качестве солевого раствора он содержит физиологический раствор при следующем количественном соотношении компонентов, мас.%: Частицы полистирола размером 0,2-0,23 мкм с сорбированными на них специфическими антителами при концентрации последних 0,05% 0,5-0,8 Нормальная сыворотка морских свинок2-5 Физиологический О) растворОстальное