Способ получения рацемического 8-изоэстрадиола Советский патент 1984 года по МПК C07J1/00 A61K31/565 C07J15/00 

1 1

Изобретение относится к синтезу биологически активных стероидов, конкретно к получению рацемического 8-изоэстрадиола (П, обладающего эстрогенной активностью.

Известен способ рацемического получения 8 изоэстрадиола путем гидрирования З-метокси-1,3,5(10),8,14-эстрапентаен-1 7/Ь-ол (II) водородом в присутствии Pd/CaCOg., при комнатной температуре продукт реакции обра92158

батывают при высокой температуре гидрохлоридом пиридина. Целевое соединение выделяют после хроматографии

на колонне, обпщй выход 36,5% Cl 1. 5

Однако данный способ получения характеризуется недостаточно высоким выходом целевого стероида и необходимостью применения хроматографии для его очистки, что неудобно при клиномасштабном синтезе. Целью изобретения является повышение выхода рацемического 8-изоэстрадиола . Поставленная цель достигается тем что согласно способу получения рацемического 8-изоэстрадиола, в качестве производного ряда эстрана исполь-е зуют З-окси-1,3,5(10 ) ,8,14-эстрапентаен-17-он 17-кетогруппу которого восстанавливают алюмогидридом лития в тетрагидрофуране, продукт реакции ацетилируют уксусным ангидридом в пи ридине с образованием 3,17 диацетата О .О - - ) (V) Пример. К раствору 10 г 3-окси-1,3,5(10),8,14-эстрапентаен-17- -она (IV) (здесь и далее все соединения рацемические ) в 350 мл тетрагидрофурана добавляют при перемешивании 80 мл 1М раствора алюмогидрида лития в тетрагидрофуране, реакционную смесь кипятят в течение 2 ч. После обычной обработки продукт восстановления растворяют в 400 мл пири дина, добавляют 250 мл уксусного ангидрида и оставляют на сутки. После обычной обработки диацетат 1,3,5(10 8,14-эстрапентаен-З,17р-ола кристаллизуют из метилового спирта. Получают 10,2 г соединения (V) с т.пл. 120-121,5с, выход 77%. 50 г стероида (V) растворяют в 1 л бензола, добавляют 15 г никеля 1 ,3,5(10 ,8,14-эстрапентаен-3, 1 7/3-дила, гидрированием системы сопряженых двойных связей полученного промеуточного продукта водородом в беноле в присутствии никеля Ренея при и давлении 80-100 атм до погош1ения 20-30-ти кратного избытка воорода по сравнению с теоретически ассчитанным и удалением ацетильных рупп щелочным гидролизом. Выход целевого продукта составляет 46%. co w) Ренея, гидрирование проводят при 50-70 С и давлении 80-100 атм. Реакцию прекращают, когда поглощается 150-200 атм. водорода. Катализатор отфильтровывают, растворитель удаляют в вакууме, остаток кристаллизуют из метанола. Получают 34-35 г стероида (VI) с т.пл. 158-161 С, выход 67,2-69,2%.Спектр ПМР,Г, м.д.: 0,86(3H,c,CHj при С-13), 1,93 и 2,18 (по ЗН,с, ацетильные группы при С-17 и С-3) 2,52,9 (м, протоны при С-6 и С-9),4,63 (1Н, т,протон при С-17), 7,09(1Н,д, -f 9 Гц-протон при С-1 1. Гидролиз диацетата (VI) в обычных условиях в смеси бензол-метанол под действием едкого натра после обьмной обработки и кристаллизации 31 из метанола с кодой дает целевое соединение (I) с т.пл. 188,5-190 С (выход на ctaдии 89%J. Найдено,%: С 79,44; Н 9,06, SB 2402 Вычислено,/;: С 79,37; Н 8,88, Таким образом, использование пре ложенного синтеза приводит к повышению выхода 8-изоэстрадиола пример но с 36 до 46%, при его очистке не требуется хроматография, что упроща ет синтез. Более высокий выход рацемического 8-изоэстрадиола обеспечивается большей стереоселектив- ч ностью восстановления кетогруппы пр С-17 и использованием сопряженного восстановления системы двойных связей (при восстановлении на никеле в мягких условиях происходит также и гидрирование бензола, конкуренция между этими процессами дает в конечном итоге повышение выхода требу мого стереоизомера ), Рацемический 8-изоэстрадиол (I) исследуют по следующим тестам: контрацептивному (посткоитальному ), ва гинотропному, антигонадотропному, утеротропному. Контрацептивный (посткоитальный ) эффект. Опыты выполняют на половозрелых самках-крысах, которым подсаживают самдов и после обнаружения спермы во влагалищных мазках ежедневно в течение 7 дней вводят п/к масляные растворы исследуемых эстро генов в различных дозах (диапазон и пользованных доз для эстрадиола 0,00025-0,002 мг/кг в день, для 8-изоэстрадиола 0,001-0,01 мг/кг в день ), Контрацептивный эффект определяют на 19-20 день после обнаружения спермь. Результаты эксперимента обрабатывают методом Litelefield Wilcoxon (1949) с вычислением ЕДд дозы, вызвавшей 30%-ньш контрацептив ный эффект, Эффект вызывания.течки (вагинотропный эффект ), 01:ыты выполняют на половозрелых крысах-самках, которых подвергают овариэктомии. После установления стойкого диэструса эстрО 84 гены вводят подкожно в течение 5 . дней в различных дозах в объеме 0,1 мл подсолнечного масла (диапазон использованных доз для эстрадиола 0,001-0,02 мкг/ж1шотное в день, для 8-изоэстрадиола 0,001-0,1 мкг/животное в день), Oднoвpe oннo следят за состоянием вагинальных мазков, которые берут дважды в течение рабочего дня. Картину вагинальных мазков оценивают по методу Bigger, daringbold (1954), Зависимость между величиной дозы и частотой возникновения течки оценивают как в предыдущем опыте, определяют ЕД., т,е, поро.говую дозу, которая вызьгоает учиты- . ваемую реакцию у 50% животных, I Антигонадотропный эффект. Опыты проводят на неполовозрелых самцахкрысах линии Вистар модифицированным методом Beyer, Potts (1957), Результаты обрабатывают методом регрессионного анализа. Диапазон используемых доз для эстрадиола составляет 1-5-10-20 мкг/животное, (cyM{ ai3HO. за 5 дней ) и цпя 8-изоэстрадиола 2,5-5-10-20 мкг/животное (суммарно за 5 дней }, Утеротропный эффект. Опыты проводят на неполовозрелых мышах-самках линии SNR, которым и течение 3 дней вводят подкожно масляные растворы эстрогенов в различных дозах в объеме 0,1 мл,.Диапазон доз для эстрадиол 1 составляет 0,02-0,08 мк1/животное (суммарно за 3 дня ), для 8-изоэстрадиола - 0,8-8 мкг/животное (суммггрно за 3 дня ). На 4 день мышей забивают, взвешивают матку, С помощью регрессионного анализа для обоих вен(еств ЕД,,.- дозу, вызываю. к щую увеличение веса матки в два раза. Данные экспериментов показьшают, что дозы, вь зывающие течку, не достаточны для стимуляции роста матки, это позволяет рассматривать эффект течки как вагинотропный. Сравнение контрацептивного (К ), вагинотропного (ВТ ), антигонаДотропного (АГ) и утеротропного (У) эффектов эстрадиола и 8-изоэстрадиола представлено в таблице,

Таким образом Э-изоэстрадиол имеет значительное преимущество перед широко используемым в медицине зстрадиолом при этом предлагаемьй

способ егополучения позволя15 ет достичьболее высокого выхода, чемпо известному способу „

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РАЦЕМИЧЕСКОГО 8-ИЗОЭСТРАДИОЛА из производиого ряда эстрана, включающий каталитическое восстановление системы сопряженных двойных связей, отличающийся тем, что, с целью повыщения выхода целевого продукта, в качестве производного ряда эстрана используют З-окси-1,3,5llO ), 8,14-эст- рапентаен-17-он, I7-кетогруппу которого восстанавливают алюмогидридом лития в тетрагидрофуранё с последующим ацетилированием уксусным ангидридом в пиридине с образованием 3,17-диацетата 1,3,5