Среда для определения активности антибиотиков Советский патент 1984 года по МПК C12Q1/04 

со

CD

Ю

эо

Изобретение относится к медицинской промышленности и касается определения антибиотической активности.

Известна среда для определения активности антибиотиков, содержащая бульон Хоттингера, ,, агарагар l .

Известна также среда для определения активности антибиотиков, содержащая панкреатический гидролизат кильки, хлористый натрий, натрий лоЛорнокислый двузаме 1енный, агар-ага и дистиллированную воду 2.

Однако известные среды не обеспечивают высокой точности определения из-за нестандартности источника азота,

Цель изобретения - повыиюние точности определения.

Эта цель достигается тем, что пи тательная среда для определения активности антибиотиков, содержащая источник азота, натрий фосфорнокислый двузамещенный, агар- агар и дистиллированную воду, в качестве ис точника азота содержит аммоний уксуснокислый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л Аммоний уксуснокислый3,0-5,0 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 2,0-3,0 Агар-агар 15,0-20,0 Дистиллировз.нная вода До 1 л

Пример 1, Для определения биологической активности неомицина и стрептомицина питательную среду следующего состава, г/Л: аммоний уксуснокислый 5, натрий фосфорнокислый двузамещенный 3, агар-агар2 вода дистиллированная до 1 л; рН после стерилизации 7,8-8,0, расплавляют на водяной бане, охлаждают до и вносят„1% глюкозы и 2-10 сп Bacillus sutotilia ATCC 6633 на 1 мл среды. Засеянную питательную среду разливают по 10 мл (один слой) в стерильные чашки .Петри, После застывания питательной среды делают лунки и подсушивают чашки со средой при комнатной температуре 15-20 мин Далее лунки заполняют растворами контрольной (1 мкг/мл) и испытуемой концентрации антибиотиков в фосфатном буфере № 4. Затем чашки помещают в термостат при , После 1820 ч инкубации замеряют диаметры зон задержки роста тест-микроба

и рассчитывают активность испытуемого образца по предварительно построенной стандартной кривой с использованием следующих концентраций неомицина, МКГ/МЛ: 0,5; 0,75; 1,0; 1,2 и 1,5 в фосфатном буфере № 4,

Аналогичным образом определяют активность стрептомицина.

Для построения стандартной кривой стрептомицина берут такие же концентрации, как и для неомицина. Контрольная концентрация неомицина и стрептомицина 1 мкг/мл в фосфатном буфере № 4,

Пример 2, Для определения биологической активности мономицина и канамицина используют среду следующего состава, г/л аммоний уксуснокислый 4 ; натрий фосфорнокислый двузамещенный 2,5} агар-агар 18; вод дистиллированная до 1 л;рН после стерилизации 7,8 - 8,0. Условия проведения анализа те же, что в примере 1 Для построения стандартной кривой мономицина и канамицина используют следующие концентрации этих антибиотиков, МКГ/МЛ: 1,0, 1,5; 2,0/ 3,0 и 4,0 в фосфатном буфере №, 4. Контрольная концентрация мономицина и канамицина 2 мкг/мл.

Пример 3, Для определения биологической активности гентамицина тобрамицина и амикацина используют питательную среду следующего состава, г/л: аммоний уксуснокислый 3; натрий фосфорнокислый двузамещенный 2; агар-агар 15; вода дистиллированная до 1 л; рН посде стерилизации 7,8-8,0. Условия проведения анализа те же, что в примере 1, Для построе,ния стандартной кривой гентамицина, тобрамицина и. амикацина используют следующие концентрации этих антибиотиков мкг/мл: 0,5, 0,75; 1,0, 1,2; 1,5 в фосфатном буфере № 4. Контрольная концентрация гентамицина, тобрамицина и амикацина 1 мкг/мл.

Сравнительные данные по воспроизводимо,сти результатов- и точности определения на примере определения биологической активности неомицина и стрептомицина представлены в таблице .

Использование изобретения позволяет снизить вариабельность результатов анализа, что повьпиает точность определения, исключить из состава среды пищевое сырье, что удешевляет среду и упрощает способ ее приготовления.

310962814

Результаты определения биологической активности аминогликозидов

СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ, содержащая источник азота, натрий фосфорнокислый двузамещенный, агар-агар и дистиллированную воду,о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения точности определения, она в качестве источника азота содержит аммоний уксуснокислый при следующем качественном соотношении компонентов, г/л: Аммоний уксуснокислый3,0-5,0 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 2,0-3,0 Агар-агар 15,0-20,0 i Дистиллированная водаДо 1 л СЛ