ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ Советский патент 1995 года по МПК C12N7/00 A61K39/17 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к составам вакцин против ньюкаслской болезни птиц.

Профилактическая обработка вакцинами птиц на крупных птицеводческих комплексах очень трудоемкая операция, дорогостоящая, поэтому вакцины, позволяющие проводить аэрозольную вакцинацию, являются перспективными.

Известно применение для аэрозольной вакцинации птиц против ньюкаслской болезни жидких вакцин. Однако жидкие вакцины существенно инактивируются в процессе аэрозольного применения. Кроме того, вследствие малой устойчивости жидких вакцин в процессе хранения их готовят в сухом виде и ресуспендируют перед применением.

Известна пылевая вакцина для аэрозольной вакцинации птиц против ньюкаслской болезни, включающая сухой вируссодержащий материал аттенуированного вируса ньюкаслской болезни и неорганический дисперсный порошок, в состав которого входит аскангель, тальк, бентонит. Это техническое решение является наиболее близким к предлагаемому по составу и достигаемому техническому эффекту.

Однако такие вакцины недостаточно эффективны, так как при использовании их наблюдаются трудности в получении гомогенной пылевой массы, т.е. они расслаиваются в процессе получения аэрозоля и не обеспечивают прочного формирования иммунитета. Кроме того, они не могут длительно храниться, так как при хранении слеживаются, что затрудняет перевод препарата в аэрозоль и снижает эффективность вакцинации.

Целью изобретения является увеличение срока хранения вакцины, а также повышение ее эффективности.

Для достижения цели в вакцине против ньюкаслской болезни птиц, включающей сухой вируссодержащий материал аттенуированного вируса ньюкаслской болезни и неорганический дисперсный порошок, в качестве последнего используют аэросил, модифицированный моноэтаноламином с удельной поверхностью 100-400 м²/г и рН 7,2-8,5 при следующем соотношении компонентов, мас.

Аэросил, модифициро-
ванный моноэтаноламином 10-30
Сухой вируссодержащий
материал 70-90
Получают вакцину следующим образом. В приготовленный биоматериал, включающий в равных объемах экстраэмбриональную жидкость с вакцинным штаммом вируса ньюкаслской болезни птиц активностью 10^8,0-10^9,0 ЭИД₅₀/мл и стабилизирующую среду стерильное обезжиренное коровье молоко, содержащее по 200 ед/мл пенициллина и стрептомицина, вводят сухой аминоорганоаэросил, тщательно перемешивают и лиофилизируют общепринятым методом в течение 26-29 ч. Для приготовления вируссодержащего материала используют экстраэмбриональную жидкость 10-11-дневных куриных эмбрионов, инкубируемых при температуре 37 ± 05^оС в течение 72-75 ч.

П р и м е р 1. К 100 мл экстраэмбриональной жидкости, содержащей вакцинный штамм вируса ньюкаслской болезни птиц активностью 10^8,0-10^9,0 ЭИД₅₀/мл, добавляют при перемешивании 100 мл стерильного обезжиренного молока и по 200 ед/мл пенициллина и стрептомицина. В 200 мл жидкой смеси вводят 1,1 г стерильного аэросила S_уд 100 м²/г, рН 7,2 (из расчета 10%-ного содержания аэросила в конечном продукте). Полученную дисперсию перемешивают металлической мешалкой при скорости вращения 400 об/мин в течение 10 мин, расфасовывают по 150 мл в стеклянные флаконы емкостью 500 мл и замораживают при температуре -50 ± 0,5^оС в течение 4 ч. Флаконы с замороженным материалом загружают в сублимационную установку для лиофильного высушивания. Общая продолжительность сушки материала составляет 29 ч. Контроль за процессом сушки проводят по температурным показателям и давлению в сушильной камере. После окончания сушки флаконы закрывают резиновыми пробками и парафинируют.

П р и м е р 2. 100 мл экстраэмбриональной жидкости, содержащей вакцинный штамм вируса ньюкаслской болезни птиц активностью 10^8,0 10^9,0 ЭИД₅₀/мл, смешивают при перемешивании со 100 мл стерилизованного обезжиренного молока, содержащего по 200 ед/мл пенициллина и стрептомицина. К 200 мл смеси добавляют 3,3 г стерильного аэросила, рН 8,5, S_уд 400 м²/г (из расчета 30%-ного содержания аэросила в сухом продукте). Полученную дисперсию перемешивают металлической мешалкой при скорости вращения 400 об/мин в течение 20 мин. Общая продолжительность сушки 29 ч. Дальнейшие операции получения пылевой вакцины аналогичны приведенным в примере 1.

П р и м е р 3. К 100 мл эстраэмбриональной жидкости, содержащей вакцинный штамм вируса ньюкаслской болезни птиц активностью 10^8,0 10^9,0 ЭИД₅₀/мл, добавляют при перемешивании 100 мл стерильного обезжиренного молока и по 200 ед/мл пенициллина и стрептомицина. В 200 мл жидкой смеси вводят 2,2 г стерильного аэросила, S_уд 280 м²/г, рН 7, 8 (из расчета 20%-ного содержания аэросила в конечном продукте). Полученную дисперсию перемешивают металлической мешалкой при скорости вращения 400 об/мин в течение 15 мин. Дальнейшие операции получения пылевой вакцины аналогичны приведенным в примере 1.

Общая продолжительность сушки 28 ч.

П р и м е р 4. К 100 мл экстраэмбриональной жидкости, содержащей вакцинный штамм вируса ньюкаслской болезни птиц активностью 10^8,0 10^9,0 ЭИД₅₀/мл, добавляют при перемешивании 100 мл стерильного обезжиренного молока и по 200 ед/мл пенициллина и стрептомицина. В 200 мл жидкой смеси вводят 1,1 г стерильного аэросила, S_уд 100 м²/г, рН 8,0 (из расчета 10%-ного содержания аэросила в конечном продукте). Полученную дисперсию перемешивают металлической мешалкой при скорости вращения 400 об/мин в течение 10 мин. Дальнейшие операции получения пылевой вакцины аналогичны приведенным в примере 1. Общая продолжительность сушки 26 ч.

П р и м е р 5. 100 мл экстраэмбриональной жидкости, содержащей вакцинный штамм вируса ньюкаслской болезни птиц активностью 10^8,0 10^9,0 ЭИД₅₀/мл, смешивают при перемешивании со 100 мл стерилизованного обезжиренного молока, содержащего по 200 ед/мл пенициллина и стрептомицина. К 200 мл смеси добавляют 3,3 г стерильного аэросила, S_уд 100 м²/г, рН 9,0 (из расчета 30%-ного содержания аэросила в сухом продукте). Дальнейшие операции получения пылевой вакцины аналогичны приведенным в примере 1. Общая продолжительность сушки 29 ч.

Полученные порошки вакцин распыляли с помощью установки центробежного распылителя пылевых вакцин ЦРПВ-1, определяли конкретное время экспонирования, объем аспирации. Определяли слеживаемость, длительность сохранения эффективности вакцины в сравнении с прототипом и применяемой в настоящее время жидкой вакциной, влияние рН аэросила на эффективность. Данные исследований приведены в таблице.

Высокая химическая чистота, большая удельная поверхность, исключительно малый размер частиц аминоорганоаэросила, а также введение его в жидкий биоматериал перед лиофилизацией обеспечивают получение гомогенной пылевой вакцины и образование стабильного аэрозоля при распылении. Для аэрозольной вакцинации птиц вакцина распыляется с помощью установки ЦРПВ-1, при этом в процессе экспонирования птица аспирирует от 400 до 1400 ЭИД₅₀, время вакцинации 10-20 мин. Установка ЦРПВ-1 обеспечивает распыление вакцины с образованием высокоэффективного аэрозоля в любых помещениях.

Данные таблицы показывают, что введение аминоорганоаэросила не только обеспечивает возможность образования стабильного аэрозоля благодаря размеру частиц, неслеживаемость препарата, но и позволяет длительное время сохранять эффективность препарата. Применение предлагаемого пылевидного препарата, взамен применяемого в настоящее время, позволит значительно сократить трудоемкость процесса, количество специалистов, проводящих вакцинацию.

ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ, включающая сухой вируссодержащий материал аттенуированного вируса ньюкаслской болезни и неорганический дисперсный порошок, отличающаяся тем, что, с целью увеличения срока хранения вакцины и повышения ее эффективности, в качестве неорганического дисперсного порошка используют аэросил, модифицированный моноэтаноламином, с удельной поверхностью 100 400 м²/г и рН 7,2 8,5 при следующем соотношении компонентов, мас.

Аэросил, модифицированный моноэтаноламином 10 30
Сухой вируссодержащий материал 70 90