Способ окрашивания органов мочевыделительной системы при гистотопографических исследованиях Советский патент 1985 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

&0

;о

« Изобретение относится к способам дифференциальной окраски тканей, а именно мьппечной и соединительной, и может быть использовано при макромикроскопическом препарировании и фотографировании мьшечных структур органов в анатомии, гистологии и топографической анато 1ии. Известен способ окраски мышечных и соединительнотканных структур различньми минеральными и органическими красителйми, в растворах которых проводят окраску тонких (до 10 микрон) срезов органов и тканей tl3. Наиболее близким к предлагаемому является способ окраски мышечной и соединительной ткани по Ван-Гизону насьпценным раствором пикриновой кислоты и 1%-ным раствором фуксина, состоящий в том, что небольшие кусочки фиксированных в растворе формалина органов подвергают обезвожива цию, заключают в парафин или целлоидин, затем на микротоме тотовят тонкие гистологические срезы, депарафинируют их в хлороформе и окрашивают ядра гематоксилином Вейгерта, мьш1ечную ткань - раствором пикриновой кислоты, соединительную ткань - раст вором фуксина. Окрашенные срезы рросветляют в карболксилоле и заклю чают в канадский бальзам или другие прозрачные среды между предметным и покровным стеклами Сз}. Известные способы позволяют дифференцировать мьшечные и соединител но-тканные элементы нормальных и па тологически измененных органов и тканей при гистологических исследованиях, т.е. на тонких срезах, полученных из небольших кусочков орга нов, однако непригодны для оценки . структуры мьшгечных слоев целых орга нов методом препаровки. Цель изобретения - дифференцированное выявление мьш1ечной и соединительной ткани. Поставленная цель достигается те что согласно способу окрашивания мо чевыделительной системы при гистотопографических исследованиях, вклю чающему обработку растворами фуксин и пикриновой кислоты, органы перед обработкой выдерживают в 0,2-0,3%ном спиртовом растворе карболовой кислоты, а фуксин берут в виде 0,3 ного раствора на фосфатном или цитр ном буфере при рН 7,2-8,0, обработк пикриновой кислотой ведут в присутствии глицерина в соотношении 1:1. Мьш1ечная ткань при нанесении краг сителей на орган в щелочной,среде окрашивается в золотисто-желтый цвет, а соединительная - в красный. При использовании более концентрированного 0,5-1%-ного раствора карболовой кислоты окрашивается соединительная ткань органов мочевыделения, но не дифференцируется мьш1ечная ткань (она как и соединительная окрашивается в красный цвет). При фиксации органов в 40-50 градусном спирте ипи спиртовом растворе карболовой кислоты в концентрации 0,1% и ниже не окрашивается соединительная ткань, недостаточно окрашивается мьшечная ткань Четко дифференцируются соединительная и мьш ечная ткани мочевыделительных органов при обработке 0,2-0,3%ным спиртовьм раствором карболовой кислоты. I Устойчивая цветовая дифференциация мьштечной и соединительной ткани органов мочевыделительной системы при окраске их пикриновой кислотой и фуксином происходит в фосфатной ипи цитратной буферной среде при рН 7,28,0. При подкислении среды не дифференцируется мьш1ечная ткань, а при рН среды более 8 снижается устойчивость окраски, т.е. ткань быстро выцветает. Кроме того, среда мут неет, что затрудняет фотографирование объекта. Приме р. Орган или комплекс органов мочевыделительной системы промывают в проточной воде в течение 3-4 ч, затем фиксируют их в течение 1-3 дн. 0,2%-ным спиртовым (40-50) раствором карболовой кислоты. Окраску мьш1ечной и соединительной тканей производят во время гистотопографического исследования и препарирования под микроскопом №С-1 при увеличении от 4-6 до 50 раз. Для этого органы помещают в фосфатный или цитратный буфферный раствор рН 7,2-8. Насьш1енный раствор пикриновой кислоты смешивают в равных частях с безводным глицерином. На препарируемый орган тампоном поочередно наносят 1%-ный раствор фуксина и насьш;енный раствор пикриновой кислоты с глицерином. Соединительная ткань

311397044

окрашивается в розовый шш красньА Предлагаемый способ позволяет прецвет, а мьшечная - в золотисто-жел-парировать, рассматривать и фотогратый цвет. Окраска сохраняется в те-фировать структуры органа в отраженчение нескольких часов и может бытьном свете. Окраска мышечной и соедиусилена или возобновлена повторным 5нительной тканей четкая, что позволянанесением красителей.ет изучать структуру органа.

СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ ОРГАНОВ МОЧЕВЫДЕЛИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ГИСТОТОПОГРАФИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ,включающий обработку растворами фуксина и пикриновой кислоты, отличающийся тем, что, с целью дифференцированного выявления мышечной и соединительной ткани, органы перед обработкой выдерживают в 0,2-0,3%ном спиртовом растворе карболовой кислоты, а фуксин берут в виде 0,3%ного раствора на фосфатном или цитратном буфере при рН 7,2-8,0, обработку пикриновой кислотой ведут в присутствии глицерина в соотношении 1:1.