Способ обработки пленочных фильтровальных материалов Советский патент 1985 года по МПК C12N1/00 

ел

ел to Изобретение относится к микробиологии и касается подготовки пленочных материалов для концентрирования и микроскопирования микроорганизмов. Известен способ обработки пленочных фильтровальных материалов лля люминесцентной микроскопии биопрепаратов путем их окрашивания черной тушью с последующим высушиванием 1. Однако известный способ не обеспечивает высокой фильтрующей способности пленочных материалов из-за час тичного забивания микропор фильтра черным пигментом туши, что, в свою очередь,приводит к ухудшению контраст ности фона из-за вымывания красителя Целью изобретения является повышение -фильтрующей способности фильтр вальных материалов при сохранении ко трастности фона. Эта цель достигается тем, что сог ласно способу обработки пленочньгх фи тровальных материалов для люминесцен ной микроскопии биопрепаратов путем их окрашиванияJ окрашивание проводят 0,1-0,5%-ным спиртовым раствором бордо 2с в течение 20-30 мин, а зате фильтровальный материал промывают в дистиллированной воде. Пример .Предварительно готовят раствор дисперсионного красителя Для приготовления 0,5%-ного раствора красителя на 100 г спирта (125 мп отвешивают 0,5 г красителя бордо 2С, смесь перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр. В приготовленный .раствор на 20 мин опускают пленочный фильтровальный материал, например, Владипор. Окраску проводят при комнатной температуре. В результате окраски пленка приобретает темно бордовый цвет. Затем окрашенные фильтры переносят пинцетом в дистиллированную воду на 2-3 минуты для промывки. Промытые фильтры помещают в другую емкость с дистиллированной водой для длительного хранения. При этом окраска фильтров сохраняется. Возможно также длительное хранение окрашенных пленочных фильтров между слоями фильтровальной бумаги в закрытой емкости. .Хранить окрашенные фильтры можно неограниченное время. Исследуют свойства 12 дисперсионных красителей, применяемых в текстильной промышленности. Окрашигзают следуюш:иге фильтры с размерами пор 1 - О,1 мкм: Владипор МФА из ацетилцеллюлозы Хемофил ПВХ на основе поливинилхлорида; Фенилон на, основе Полифениленизофталамида. Готовят 0,5%-ные спиртовые растворы красителей, окраску проводят при комнатной температуре. С окрашенными фильтрами проводят исследования с использованием различных видов бактерий: энтеропатогенных эсшерихий типов ОВ, Coli, 0111, 055, 026, вакцины СТИ и соответствующих им иммунных люминесцентных сывороток. Взвесь бактерий или исследуемый жидкий материал выдерживают 15 мин с иммунной люминесцирующей сывороткой для специфического окрашивания бактерий. Затем фильтруют через окрашенные дисперсионными красителями пленочные фильтры и исследуют в люминесцентном микроскопе. Результаты исследования приведены в табл.1. Все исследуемые дисперсионные красители, за исключением трех, указанных в таблице, окрашивают пленочные материалы, которые сохраняют после окраски хорошую фильтрующую способность. Однако свойство гашения люминесценции пленочньгх фильтровальных материалов выявлено только у красителя бордо 2С, который обеспечил получение хорошего контрастного фона для всех пленочных материалов. В люминесцентном микроскопе наблюдалось яркое контрастное свечение бактерий на однородном черном фоне фильтра. Данные по фильтрующей способности мембранных фильтров Владипор приведены в табл. 2., Окрашенные бордо 2С фильтры можно использовать и для концентрирования микроорганизмов из больших объемов пробы. Использованиё способа позволит улучшить фильтрующие свойства мембран, повысить точность диагностики за счет улучшения контрастности (Ьбна.

Таблица 2

СПОСОБ ОБРАБОТКИ ТШЕНОЧНЫХ ФИЛЬТРОВАЛЬНЫХ МАТЕРИАЛОВ для лк«мннесцентной микроскопии биопрепаратов путем их окрашивания, отличающийся тем, что, с целью повьшения фильтрующей способности фильтровальных материалов при сохранении контрастности фона, окрашивание проводят 0,1-0,5%-ным спиртовым раствором бордо 2С в течение 2030 мин,а затем фильтровальный материал промывают в дистиллированной воде.

Размер пор 0,65-0,75 мкм.