Способ диагностики мастита у коров Советский патент 1985 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам диагностики мастита у коров. Известен способ определения соста ва белков молока путем их электрофоретического разделения, включакиций отбор молока, приготовление крахмаль ного геля, нанесение пробы молока на гелевую пластинку, разгонку белков молока в переменном электрическо поле, окраску и промывку геля l . Однако данный способ не используется для диагностики маститов у коров. Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики маститов у коров, основанный на изменении физико-химических свойств молока у больных коров и включающий использование маститного индикатора, содер жащего растворимые в дистиллированной воде химические вещества 2. Однако этот способ не позволяет точно диагностировать маститы у коро Целью изобретения является повыше ние точности способа. Цель достигается тем, что анализ проб молока проводят путем нанесения на крахмальный гель и последующей разгонки белков молока в геле при рН электролитической среды 8,6, силе тока 120 мА,. напряжении 180200 В, а о наличии мастита судят по появлению и интенсивности окрашивания -фракции белков молока с электр офоретической подвижностью 4,4х В с . На фиг. 1 представлена электрофореграмма белков молока; на фиг. 2 электрофоретическая подвижно9ть белковых фракций молока при ,6. Пример. От каждой коровы в конце дойки доярка берет в пробирку 1-2 мл молока из каждой четверти , вымени. Затем готовят гель из 14,5% взвеси гидролизованного крахмала в трисцитратном буфере, заваривают крахмал в широкогорлой колбе, с помощью вакуум-насоса из горячего геля удаляют пузырьки воздуха. Формирование пластины геля и электрофорез проводят в плексиглазовой ванночке размером 130x200x6 мм. После разливки геля в ванночки его накрывают стеклом и сверху кладут груз в 1-2 кг. Время созревания геля составляет 3-4 ч. На каждую ванночку наносят на хроматографических бумажках размером 7x6 мм одновременно 24 образца молока, затем пластинку накрьшают полиэтиленовой пленкой. Электролит наливают в гнезда размером 235х80х х75 мм. Электрофорез длится 2,5 ч при силе тока 120 мА. После завершения разгонки гелевую пластинку разрезают вдоль на 2 части, нумеруют и окрашивают в 1%-ном растворе нигрозина, затем промывают. Картина фореграммы белков молока из больной и здоровой четвертей вымени одной и той же коровы не совпадает (фиг. 1). В нормальном молоке выявляются следующие типы белков (от -к +) :к-Сп, j3 Сп, уЗ-Lg, LS,-Сп (образцы 1,2,4). При скрытом мастите на форе грамме между к-Сп появляется четко выраженная белковая фракция (У-фракция, образец 3). Кроме того, LS,-Сп-фракция становится более растянутой. При скрытом мастите -фракция просматривается на любой стадии лактации. По четкости и интенсивности ее окрашивания можно судить о степени заболевания маститом. Электрофоретическая подвижность фракции, связанной с мас.титом, определяется путем измерения координаты этой фракции на фотографии и с помощью графика, приведенного на фиг. 2. Значение электрофоретической подвижности данной фракции составляет 4,4 с По сравнению с известными способами предложенный дает возможность надежно выявить наличие фракции, связанной с заболеванием при количественной оценке электрофоретической подвижности этой фракции.

ju больт сек

СПОСОБ ДР1АГНОСТИКИ МАСТИТА У КОРОВ, включающий отбор проб молока и их последующий анализ, отличающийся тем, что, с целью повышения точности анализ проб молока проводят путем нанесения на крахмальный гель и последующей разгонки белков молока в геле при рН электролитической среды 8,6, силе тока 120 мА, напряжении 180-200 В, а о наличии мастита судяТ по появлению и интенсивности окрашивания У -фракции белков молока с электрофоретической подвижностью 4, В с с « (Л «5 uit likL, - П-// ракция

p-LgB

--фракция

-LgA

10

1

i 5 6

Фиг.2 ,