Штамм микроскопического гриба @ @ - @ - @ -продуцент ксиланазы для поверхностного культивирования Советский патент 1985 года по МПК C12N9/42 C12N1/14 C12R1/665 

1 Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к штаммам-продуцентам фермент ных препаратов. Целью изобретения является получение активного штамма-продуцента ксиланазы. Штамм продуцирует систему фермен тов, действующих на ксиланы различного строения и происхождения и состоящую из эндо-1,4-j8-ксиланазы, экзо-1-,4- 3-ксилозидазы и X--h-apaбинофуранозидазы. Наряду с этими ферментами штамм продуцирует эндо-1,4- маннаназу, расщепляющую маннаны, лихеназу, ламинариназу, расщепляющие J}-глюкaны а тайже ферменты, входящие в состав целлюлазного комплекса, эндо-1,4-/i-глюканазу, С-( -экзим, целлобиазу. Штамм обладает арил -глюкозидаз ной активностью, продуцирует гидролитические ферменты пектолитическог комплекса, обладает протеолитическо и осахаривающей- активностями. Штамм получен в результате селек ции исходного штамма Asp. Foetidus ,М-45 с применением нитрозогуанидина (концентрация 1%, экспозиция 30 мин : Штамм имеет следующие характери стики. Морфология. Мицелий сильно разветвленный, из вилистый, имеет вид тонких сепариро ванных гиф. Стенки клеток мицелия плотные. Ширина клеток мицелия от 3-6 мкм. Длина клетрк колеблется в пределах 14-18 мкм. КонидиенЬсцы длинные, прямые, без перегородок, ш рина конидиеносцев 4,5-9,0 мкм. Диаметр головки конидиеносцев 1120,0 мкм. Конидии круглые, равные, диаметр 3-5 мкм. Культурально-физиологические при знаки. Среда сусло-агар. Колония кругла с ровными краями, с глубокой радиал ной складчатостью, белого цвета. Ко нидии образуются в центре колоний. Диаметр гигантской колонии 6-8 см. Нижняя поверхность колоний харак теризуется радиапьной извилистой складчатостью. Среда Чапека. Колония плотная, 6 лого цвета, круглая, слегка приподнята в центральной части. Конидиеобразование незначительно. Диаметр 3 2 лонии 4,5-5,5 см. На нижней стороне колонии сильная глубокая складчатость. Картофельный агар. Колония белого цвета с ровными краями, складчатость радиальная. Диаметр колонии см. На нижней стороне колонии заметная складчатость. Морковный агар. Колония белого цвета с ровными краями, с сильно радиальной складчатостью на обеих сторонах. Диаметр колонии 4-5 см. Синтетическая агаризированная среда. Небольшая колония белого цвета. Диаметр колонии 2-3 см. Складчатость отсутствует. Нитраты восстанавливает. Температурные границы раз вития: при рост замедленный, при рост хороший, при рост слабый, при рост очень слабый. Физиологические свойства. Рост на молоке. Нолоко не свертывает и не пептонизируе. Желатину разжижает. Рост на лолетиках картофеля хороший, С мощной складчатой пленкой, конидиеобразование довольно слабое. Декстрины, крахмалы, сахарозу, мальтозу, маннит, лактозу, глюкозу, глицерин потребляет, но при этом происходит подкисление рреды. Пример. Для получения,ферментного препарата ксилофоетидина П10Х используют штамм Asp. foetidus D-73 при культивировании его в поверхностных условиях. Вьфаш 1вание поверхностной культуры проводят в растительных камерах на среде, состоящей из пшеничных отрубей 60%, биошрота из культуры Asp. foetidus 26-30%, пшеничной соломы 5%, листьевой массы томатов 5% и с начальной влажностью, равной 58-60%. Посевной материал для засева растительных камер готовят следующим способом. Колбу на 750 мл с пшеничными отрубями и влажностью 30% засевают кониДиальной суспензией. Посевной материал выращивают в термостате при до обильного спороношения. Для засева одной растильной камеры используют 15-20 таких колб из расчета на 300 кг питательной среды. Культивируют гриб в растительной камере при 28-30°С 48-52 ч. Выращенную культуру /дробят и подвергают экстрагированию при 30 С. Отношение, абсолютно сухого веса культуры гриба к воде на стадии 3 1 1599 экстракции составляет 1:7. Время экстракции 40 мин, температура смеси 30 С. Содержание сухих веществ в экстракторе колеблется от 6 до 7%. Затем экстракт сепарируют для5 удаления взвешенных частиц и снижения обсемененности препарата. Осветление экстракта проводят 1,5 ч на сепара.торе, Осаждение препарата проводят спиртом на установке непрерывного действия при концентрации его в смеси 75%. JO 534 Перед осаждением спирт и экгт к1Кс грибной культуры охлаждают до Ос. Температура смеси спирта и экстракта не превышает 10 С. Ферментный осадок отделяют от водно-спиртовой смеси в кларификаторе. . Влажность сырого препарата составляет 60%. Сушку препарата осуществляют в вакуум-сублимационной сушилке КСЗО 12-14 ч. Влажность сухого препарата составляет 13%. Препарат представляет собой порошок светло-серого цвета, Активность препарата по ксиланазе составляет 4000 ед/г.

Штамм микроскопического гриба Aspergillus foetidus D-73 Хколлекция Центрального музея промьшшенных микроорганизмов института ВНИИгенетика, коллекционный номер ЦМПМР-222) продуцент ксиланазы для поверхностного культивирования.