Октадекан-7-спиро-2-/ @ -оксил-4,5, 5-триметил- @ -имидазолин/-триметиламмония метансульфонат в качестве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов Советский патент 1985 года по МПК C07D233/26 

Изобретение относится к новым производным имидазолина, а именно к oKTefleKaH-y-cniipo-Z-(N-oкcил4,5,5 -триметил- Л -имидазолин).-трнметиламмония метансульфонату формул НзС СНз VY. CHjSO СНзСС1()да(СНг)е- N- (СНз)з в качестве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов. Цель изобретения - поиск новых соединений в ряду имидазола, обладающих гидрофобными /свойствами и чувствительностью -к изменению поверхностного заряда липопротеидов, что позволяет их использовать в ка честве нитроксильного зонда для оценки изменения заряда липопротеидов. На чертеже изображена кривая спектра ЭПР предлагаемого соединени Соединение формулы (I) получают взаимодействием мезилата октадекан.7-СПИРО-2-(К-оксил-4,5,3 -триметил 4 -имидазолин)ола с триметиламином при 120С. Пример. В ампулу, содержащу 145 мг мезилата в 10 мл сухого тетрагидрофурана при охлаждении до -25°С пропускают сухой газообразный триметиламин до накопления 2-3 мл. Ампулу замораживают, запаивают и нагревают в течение 3 ч при 120С. Ампулу охлаждают, снова замораживают, вскрывают, избытку триметиламина дают испариться, смесь упаривают досуха, остаток растворяют в четыреххлористом углероде, добавляю сухой эфир для высаживания соли. Ос док отделяют обратным фильтрованием растворяют в хлористом метилене и хроматографируют на колонке с силикагелем. Смесью хлороформ:метанол 3:1 злюируют целевое соединение. По лучают 96 мг (60,3%) соли в виде светло-желтого воскообразного вещества. ИК-спектр, см: 1210-1180 (SOj), 1650 ). ЭПР-спектр ( раствор в спиоте ): о( 1 ,46 мТ, 5,8 спин/моль. 92 Вычислено, %: С 60,67J Н 10,48,N 7,86. .NjSOy Найдено, %: С 60,12; Н 10,95; N 7,47. В качестве объекта изучения использовали ЛПНИ и ЛПВП, выделенные из плазмы крови здоровых доноров и больных ишемической болезнью сердца (ИБО. Липопротеиды выделяют из плазмы крови здоровых доноров и больных ИБС методом ультрацентрифугирования в солевых растворах различной плотности. Полученные препараты ЛНПН ( о/ 1,065-1,125 г/см.)и ЛПВП ( JT 1,21 г/см) диализуют при 4С против раствора 5 мМ трйо-НСЕ-буфера рН 7,3 в течение 18 ч. Методика приготовления образцов для регистрации ЭПР-спектров заключается в следующем. К 100 мкл суспензии ЛП (содержащей 1 мг фосфолиПР1ДОВ на 1 мл ) добавляют 1 мкл раствора зонда в этаноле. Конечная концентрация зонда 8,7-10 М, этанола 1 об.%. Смесь инкубируют 5 мин, помещают в плоскую кварцевую ампулу и регистрируют спектр ЭПР в режиме: микроволновая мощность 10 мВт, амплитуда модуляции 1-1,6 Гс, развертка магнитного поля 25 Гс/мин при постоянной времени 1 с. Спектр ЭПР предлагаемого соединения представляет собой суперпозицию двух сигналов (фиг.1): от зондов, встроившихся в ЛП (сигнал А, и от зондов, растворенных в водном окружении (сигнал В). Для характеристики степени связывания соединения формулы ( I ) с ЛП из спектров ЭПР определяют параметр 11/11-, где /h - интенсивность низкопольного сигнала спектра ЭПР от зондов, связанных с ЛП, интенсивность высокопольной компоненты спектра ЭПР от зонда, растворенного в воде. Распределение заряженных соединений между мембраной и ее окружением зависит от поверхностного заряда мембраны, поэтому изменения измеряемого спектрального параметра } / 2 отражают изменение поверхностного заряда мембраны ЛП. Для сравнения с предлагаемым соединением ( зонд Т ) определяют изменение параметра 1i / незаряженного структурного аналога (зонд П1). Обследовано 10 больных ИБС и 10 здоровых доноров, полученные данные усреднены . Значения параметра распределения исследуемых зондов у здоровых доноров и больных ИБС представлены в таблице (ошибка измерений 10%). Из данных таблицы следует, что изменения параметра . зонда 1Г1 незначительны и находятся в предела ошибки опыта. В то же время рас29. 4 пределение предлагаемого зонда .Г и ЛП больных значительно отличается от его распределения в ЛП здоровых доноров: на 32,5% для ЛПНП и на 30,9% для ЛПВП. Таким образом, предлагаемое соединение является чувствительным к изменениям заряда ли- попротеидов и может быть испоЛьзовано в медицине для контроля за состоянием липопротеидов при различных типах патологии.

Октадекан-7-спиро-2 (N-OKCHji4,5,5-триметил- Л имидазолин) -три. метиламмония метансульфонат формулы СН, VY,СНзЗО/, е NYK-O ® СНз(СН2)ш (СН2)б--К-(СНз)з S в качестве нитроксильного зонда.для оценки изменения заряда липопротеи(Л ДОВ.

0,65 100 1,81 100 0,38 58,5 2,02 109,6