Способ определения иммуноглобулин-антител в биологических объектах Советский патент 1985 года по МПК A61K39/00 

со

о:

СП

Изобретение относится к биологии и медицине, в частности иммунологии.

Целью изобретения является повышение точности и упрощение способа.

Способ осуплествляют следующим об)азом.

Создают три пробы. Первая проба содержит три части биологического объекта и одну часть антигена (опыт). Вторая проба содержит три части биологического объекта и одну часть изотонического раствора хлорида натрия (контроль 1). Третья проба содержит одну часть антигена и три части изотоническо 0 раствора хлорида натрия (контроль 2).

Пробы инкубируют при 37°С в течение одного часа. Затем центрифугируют при 2000 об/мин 20 мин. В

надосадка.х опредеА, G, М и др.

,1Я1()Т ИМ. НОГ.:|Об ЛИНЫ

С в я 3 ы в а н ие и м м у но гл об y;i и но в - а н т и тел с антигеном определяют по разнице между су.ммарпы.м количеством иммуноглобулинов н биологическом и антигене, инкубированных раздельно, и количеством иммуноглобулинов биологического объекта и анти1-ена, инкубированных вместе, приче.м указанное определение проводят для каждо1о K.-iacca иммунсл.юбулнпов.

Пример. В две пробирки (опытную и контроль 1), наливают по 0,15 мл биологнческогО , например сыворотки крови здоровых людей или больных, например, инфаркто.м миокарда, ревматизмом и др., а в третью пробирку (контроль 2), такое же ко.1нчество изотонического раствора хлорнда натрия. Антиген в объеме 0,05 мл

добавляют в опытную пробирку и контроль 2, а в контроль 1 - такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Разведения антигена подбирают таким образо.м, чтобы в нем проявились лишь начальные антикомплементарные свойства, если они имеются.

Содержимое пробирок смешивают, инкубируют в течение одного часа при 37°С, центрифугируют при 2000 об/мин 20 мин. После осаждения центрифугирование.м образовавшихся комплексов антиген-антитело определяют связавшиеся с антигеном иммуноглобулин-антитела по разнице .между суммарным количеством иммуноглобулинов в биологическом объекте (сыворотке) и антигене, инкубированны.х раздельно, и количеством им.муноглобулинов биологического объекта (сыворотки) и антигена, инкубированных в.месте, причем указанное определение проводят для каждого класса иммуноглобулинов.

Пример расчета в мг.%: agG IgA

Опыт (ОП)

100 1000 170 Контроль 1 (К1) 120 1200200

Контроль 2 (К2)10 60 20

Значения и.ммуноглобулин-антител

-(К1 + К2)ОП.

Для 3gM - антитела (120+10J -100

30 мг% мк.моль/л.

agG - антитела( 1200+60) -1000

260мг% 4420 мкмоль/л. IgA - антитела (200-20) -170

50 850 мкмоль/л.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИН-АНТИТЕЛ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ, включающий совместную инкубацию исследуемого объекта с антителом, отличащийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, одновременно осуществляют инкубацию отдельно исследуемого материала п антигена, далее высчитывают для каждого класса иммуноглобулинов их содержание и определяют количество иммуноглобулинантител по разнице между суммарным количеством иммуноглобулинов, содержащихся в каждой пробирке с исследуемым материалом и антигеном, и количеством иммуноглобулинов, содержащихся при совместном инкубировании исследуемого материала и антигена.