Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам Советский патент 1993 года по МПК G01N33/53 

ния центрифугированием образовавшихся комплексов антиген-антитело определяют связавшиеся с антигеном иммуноглобулин- антитела по разнице между суммарным количеством, иммуноглобулинов сыворотки крови в цельной желчи либо в отдельной желчной кислоте, инкубированных (сывр- ротка и желчь) раздельно, и количеством иммуноглобулинов сыворотки крови и желчи, либо отдельной желчной кислоты, инкубированных вместе, причем указанное определение проводят для каждого класса .иммуноглобулинов, например, при помощи реакции преципитации в геле методом радиальной иммунодиффузии. Указанное определение проводят для каждого класса иммуноглобулинов. Затем высчитывают показатель процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при его значениях от 3,2 до 9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи устанавливают наличие сенсибилизации организма к соответствующей желчной кислоте или другим компонентам желчи.

Пример. Больной Н., 45 лет. Поступил с жалобами на периодически возникающее чувство тяжести в правом подреберье, сопровождающееся зудом и лихорадкой. При проведении традиционных методов исследования (трехмоментного дуоденального зондирования и внутривенной контрастной холецистографии) патологических изменения со стороны желчного пузыря и желчевы- водящих путей не выявлено. Общий анализ крови: гемоглобин 148 г/л; эритроциты 4,7х хЮ в 1 л; цветной показатель 0,94; тромбоциты 280 109 в 1 л; лейкоциты 6,0 109 в 1 л; п:алочкоядерные нейтрофилы 2%; сег- ментоядерные нейтрофилы 68%; энзино- филы 5%; базофилы 1%; лимфоциты 20%; моноциты 4%; скорость оседания эритроцитов 8 мм/ч. Проведено определение сенсибилизации к желчным кислотам и другим компонентам желчи. Для этого использовали сыворотку и кровь больного. Определяли связавшиеся с антигеном им- муноглобулин-антитела следующим образом: в две пробирки (опытнуюи контроль. I) наливали по 0,15 мл сыворотки крови, а в 3-ю пробирку (контроль II) - такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Антиген в объеме 0,05 мл добавляли в опытную пробирку в контроль II, а в контроль I - такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Разведения антигена, как было указано выше, подбирались таким образом, чтобы в нем .проявлялись лишь начальные антикомплементарные свойства, если они имелись. Содержимое

пробирок смешивали, инкубировали в течение 1 часа при 37°С, затем центрифугировали при 8000 об/мин. После осаждения центрифугированием образовавшихся

комплексов антиген-антител определяли связавшиеся с антигеном иммуноглобулин- антитела по разнице между суммарным количеством иммуноглобулинов в сыворотке крови и антигене, инкубированных раздельно, и количеством иммуноглобулинов сыворотки крови и антигена, инкубированных вместе, причем указанное определение проводили для каждого класса иммуноглобулинов (см.табл.1).

5 в табл.2 представлено количество сывороточных иммуноглобулинов, определенных при помощи реакции преципитации а геле методом радиальной иммунодиффузии (в г/л).

0 Расчет показателя процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам приведен в табл.3.

На оснований полученных данных была

5 определена сенсибилизация организма больного к холевой кислоте, а также к печеночной пузырной желчи в целом, причем к холевой кислоте в большей степени. После проведенного трехнедельного курса

0 специфической гипсосенсибилизирую- щей терапии самочувствие больного нормализовалось.

Эффективность предлагаемого способа по сравнению с прототипом заключается в

5 повышении точности определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам в количественном выражении (в прототипе использован менее точный качественный метод). Предложенный способ в отличие от

0 прототипа, обеспечивает возможность дифференцирован сенсибилизации к отдельным билиарным антигенам.

Формула изобретения Способ определения сенсибилизации

5 организма к билиарным антигенам, включающий инкубацию сыворотки крови с желчью того же лица, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления сенсибилизации к отдель0 ной желчной кислоте определяют количественное содержание иммуноглобулинов классов A, G, М и иммуноглобулин-антитела к ним в цельной желчи и в отдельной желчной кислоте, далее высвечивают показатель

5 процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при значении его 3,2-9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи определяют наличие сенсибилизации организма к билиарным антигенам.

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3