Среда для разбавления и замораживания спермы животных Советский патент 1985 года по МПК A61D7/02 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, например овец.

Целью изобретения является повышение эффективности среды.

Предлагаемая среда содержит дисахарид-лактозу, желток куриного яйца, глицерин, трис-(оксиметил)аминометан, двунатриевую двуводную соль этилендиаминтетрауксусную кис лоту, декстрин и воду при следующем соотношении компонентов, мас.% Дисахарид-лактоза 6,0-10,0 Трис-(оксиметил) аминометан 0,05-0,10 Днунатриевая двувод- , ная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты 0,06-0,12 Декстрин3,0-5,0

Желток куриного

яйца13,0-14,0

Глицерин8,0-9,0

Вода дистиллированнаяОстальноеПричем днунатриевую двуводную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты и трис-(оксиметил)аминометан взяты в молярном отношении 1:2,5. Примеры составов используемой среды приведены в табл. 1.

Каждый состав среды испытьюался в лабораторных условиях на подвижность и выживаемость сперматозоидов после оттаивания спермы (число пробэякулятов 10)..

Полученные результаты представлены в табл. 2ч

Пример приготовления среды. В чистую.химическую колбу вносят по рецепту лактозу, трис-(оксиметил)амнометан, двунатриевую двуводную сопь этилендиаминтетрауксусной кислоты, декстрин, заливают прокипяченной горячей дистиллированной водой (ЗО-ЭО С). Колбу помещают в водную баню с кипящей водой до полного растворения всех компонентов. Раствор охлаждают до 35-40 С и вносят желток куриного и глицерин.

Свежеприготовленная среда перед разбавлением спермы должна быть исследована по внешнему виду, цвету запаху и периодически по показателю водородных ионов и осмотическому давлению.Предлагаемая синтетическа среда по физико-химическим свойствам должна отвечать следуюпцв требованиям: внешний вид - однородная

76602

эмульсия без осадка и механических примесей, цвет - светло-желтый, без запаха, рН 6,7±0,1, осмотичес кое давление при 0°С в атмосфере

5 (без глицерина) 9,OtO,5.

Приготовленную среду используют для разбавления спермы в течение не более 6 ч. Хранят при температуре 4-18 С, перед употреблением

10 нагревают до необходимой температуры. При использовании испытуемой среды сперму .вначале 1:1 (в 2 раза) разбавляют рецептом, в состав которого не входит глицерин, а затем вновь

tS 1 раза - средой с глицерином

24t 2 С. Разбавление производят медленно, среды (особенно с глицерином) добавляют небольшими порциямипо стенке при постоянном помешивании.

20 В табл. 3 представлены результатьг обоснования состава предлагаемой синтетической среды.

Если содержание ингредиентов выходит за границу крайних нижних

jj1 или верхних значений предлагаемой среды, то это дает худгаие результаты и не приводит к достижению поставленной цели (табл. 3).

Оптимальный (второй) вариант предлагаемой среды, мас.%: лактоза 8,0, трис(оксиметил)аминометан 0,07; двунатриевая двуводная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты 0,09; декстрин 3,3; желток куриного яйца 13,3i глицерин 8,8; вода

3S дистиллированная до 100, имеет более высокие криозащитные свойства в сравнении с другими вариантами и Тконтролем. Подвижность после оттаивания составляет 4,5 ±0,06 баллов,

абсолютный показатель вьпсиваемости 22.1 ± 17,3 усл. ед.

Результаты испытания приведены в табл. 4.

Испытания показали, что предлагаемая среда обладает лучшими холодозащитными свойствами при более высоких степенях разбавления, в результате чего повьппается оплодотворяющая способность спермы, разбавленной в 4 раза (1:3), на 12% по сравнению с контролем. Эффективность использования спермы повышается в 1,3 раза, так как оплодотворяющая способность спермы, замороженной

55 в предлагаемой среде при разбавлеНШ1 1:3, не уступает сперме, замороженной в контрольной среде и раз- бавленной всего лишь 1:2.

Компоненты

Лактоза

Трие-(оксиметип)аминометан

Двунатриевая двуводная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты

Декстрин

Желток куриного яйца

Вода дистшшированная

Таблица 1

Составы 2-ой

I

Г 3-ий 10,0

8,0

0,1 0,07

0,t2

0,09 5.0 3,3 8,8 9,0 До 100 До 100

СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И ЗАМОРАЖИВАНИЯ СПЕРМЫ ЖИВОТНЫХ, содержащая дисахарид-лактозу, желток куриного яйца, глицерин,трис-(оксиметил) аминометан и воду, о т л ичающаяся тем, что, с целью повышения выживаемости и оплодотворяющей способности спермиев после замораживания, она дополнительно содержит :двунатриевзяо двуводную соль этилендиаминтетрауксуснуго кислоту и декстрин при следующем соотношении компонентов, мас.%: 6,0-10,0 Дисахарид-лактоза Трис-(оксиметил) 0,05-0,10 аминометан Двунатриевая двуводная соль этилендиамйнтетра0,06-0,12 уксусной кислоты 3.0-5,0 Декстрин Желток куриного 13,0-14,0 яйца § 8,0-9,0 . Глицерин Вода дистиллиро(Л Остальное. ванная с 2. Среда по п. 1, отличающ а я с я тем, что двунатриевая двуводная соль этилендиаминтетрауксусной кислоты и трис-(оксиметил)аминометан взяты в молярном соотношении 1:2,5. ф о: Од

Состав среды (вариант) Первый вариант Второй вариант Третий вариант Контроль (ЛЖГТЦГ среда) Ингредиенты среды и качес показатели оттаянной спер .

Лактоза

Трис-(оксиметил)аминометан

Двунатриевая двуводная соль

этилендиаминтетрауксусной кислоты

о ,

Декстрин

10,2 0,11

0,14 5,2 Подвижность спермато-Абсолютный показатель зоидов после оттаива-вьокиваемости в оттаяинй й НИН спермы в баллахсперме (в условных едини(5 параллельных об-цах при 2-4С. раэцов в каяадой пробе, М t m .. т.е. 5-10 50 проб) 4,2± 0,08219±11,1 4,5 ±0,06221 ± 17,3 4,,05220t 15,1 4,0 ±0,08174 ±16,3 енные Качественные, показатели отта нной спермы при следующем содержании ингредиентов, .мас.% Таблица 2 М i га Т а б л и ц а 3 2

Абсолютны показатель выживаемости (И ± в) :

Продолжение табл.3

108 ±12,4

128 ±9,8