Среда для разбавления и криоконсервации семени сельскохозяйственных животных Советский патент 1992 года по МПК A61D19/02 

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных.

Известна среда для замораживания и хранения спермы баранов, содержащая дистиллированную воду 100 мл, сахарозу 10 г, желток куриного яйца 20 мл, глицерин 4 мл, двунатриевую соль этилендиаминтетраук- сусной кислоты (хелатон-3, трилон Б) 0,08 г, фосфорнокислый однозамещенный калий 0,10 г, альфа-токоферол-ацетат, 10%-ный масляный раствор витамина Е 2 мл, левоми- цетин 25-50 тыс.ЕД., полимиксин 25-50 тыс.ЕД.

Известна сложная многокомпонентная среда для разбавления и замораживания спермы животных, содержащая дистиллированную воду 100 мл, лактозу 14,5 г, гуммиарабик (порошок) 6 г, трис(оксиметил)- аминометан 0,6 г, лимонную кислоту по ГОСТу 0,27 г, желток диетического куриного

яйца 20 мл, глицерин 17 мл, спермосан-ППК 25-100 тыс.ЕД.

Однако указанные среды недостаточно эффективны, содержат в своем составе большое количество желтка куриного яйца, что приводит к накоплению вредных перекисей в семени, затрудняет микроскопическую оценку состояния акросом сперматозоидов, не улучшая их сохранности, и связано с потреблением большого количества ценного продукта питания людей - куриных яиц. Кроме того, они содержат избыточное количество трехатомного спирта-глицерина, оказывающего токсическое действие на сперматозоиды в период выдержки перед замораживанием и период оттаивания семени.

Наиболее близкой по технической сущности и достигаемому результату является среда, содержащая сахарозу в количестве 9.0-10.0 г, 2,4-ди-трет-бутил-1,4-крезол 0,015-0,050 г, кальциевый комплекс динатVJ

О

о о о

со

риевой соли ЭДТА 0,8-0,9 г. глицерин 4,0- 6,0 мл, желток куриного яйца 3,0-5,0 мл, дистиллированную воду до 100 мл.

Однако эта среда не способна защитить сперматозоиды в процессе подготовки к замораживанию и во время оттаивания от пе- рекисного окисления их мембран, что снижает биологическую полноценность сперматозоидов.

Целью изобретения является повышение биологической полноценности сперматозоидов.

Среда для разбавления и криоконсерва- ции спермы сельскохозяйственных животных, включающая сахар, комплексную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, желток куриного лица, глицерин и воду, допол- нительно содержит ксантофилл и хлорофилл при следующем соотношении ингредиентов:

Сахар, г9,9-10,1

Комплексная соль

этилендиамин

тетрауксусной

кислоты, г0,69-0,71

Желток куриного

яйца, мл5,0-7,0

Глицерин, мл1,9-2,1

Ксантофилл, г0,0001-0,0005

Хлорофилл, г0,0003-0,0005

Дистиллированная

вода, млДо 100

Выделение и очистку ксантофилла и хлорофилла проводят по методике T.W. Godwin (Chemistry and biochemistry of plant pigments. - London N.Y.: Academic press, 1965).

Пример 1. Оттаянное семя разбавляли в три раза средой, содержащей ингредиент и дистиллированную воду, доведенную до 100 мл,

Результаты подбора оптимального соотношения ингредиентов среды представлены в табл.1-6.

Оптимальное содержание желтка куриного яйца в среде составляет 5,0-7,0 мл.

Оптимальное содержание глицерина в среде составляет 1,9-2,1 мл.

Оптимальное содержание ЭДТА в среде составляет 0,69-0,71 г.

Оптимальное содержание ксантофила в среде составляет 0,0001-0,0005 г.

Оптимальное содержание хлорофилла в среде составляет 0,0003-0,0005 г.

Оптимальное содержание сахара в среде составляет 9,9-10,1 г.

Пример 2. Сравнивают качество оттаянного семени, разбавленного предлагаемой и известной средами.

Результаты представлены в табл.2.

Предлагаемая среда улучшает биологическую полноценность оттаянного семени.

Пример 3. В совхозе на двух группах

овец кавказской породы в возрасте двух лет

средней упитанности изучали влияние

предлагаемой среды по сравнению с известной на выход ягнят в расчете на 100 овцематок. Осеменение овец проведено в период 1-15 августа 1987 г. Овец осеменяли утром в 7 ч и вечером в 17 ч в групповом станке. Использовали оттаиватель конструкции И.И. Соколовской, влагалищный расширитель и шприц-катетер конструкции Ю.Н. Трофимова. Доза осеменения за один прием 0,2 мл с концентрацией 60-80 млн. сперматозоидов.

Результаты опыта представлены в табл.8.

Среда с добавлением ксантофилла и хлорофилла способствует повышению доли объягнившихся овец от числа осемененных

на 17,1% и увеличению выхода ягнят в расчете на 100 осемененных овцематок на 19,2 головы.

35

Формула изобретения

Среда для разбавления и криоконсерва- ции семени сельскохозяйственных животных, включающая сахар, комплексную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, жел- ток куриного яйца, глицерин и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения биологической полноценности сперматозоидов, среда дополнительно содержит ксантофилл и хлорофилл при следующем со- отношении ингредиентов:

Сахар, г9,9-10,1

Комплексная соль

этилендиамин

тетрауксусной кислоты, г0,69-0.71

Желток куриного

яйца, мл5-7

Глицерин, мл 1,9-2,1

Ксантофилл, г0,0001-0,0005 Хлорофилл, г 0,0003-0,0005

Дистиллированная

вода, млДо 100

Таблица 1

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, преимущественно баранов. Цель изобретения - повышение биологической полноценности сперматозоидов. Среда содержит сахар 9,9-10,1 г. комплексную соль ЭДТА 0,69-0.71 г, желток куриного яйца 5,0- 7,0 мл, хлорофилл 0,0003-0.0005 г, воду до 100 мл. Среда повышает выживаемость при 37°Сдо 10,0-0,72 ч, сохранность акросом до 70,0-3% и абсолютный показатель живучести до 3,1-0,20. 8 табл.

Таблица 2

Таблица 3

Таблиц а 4

Таблица 5

Таблица 6

р 0,05.

Таблица 7

Таблица 8