112
Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в области приготовления противовирусных вакцин.
Целью изобретения является штамм А/Ф/59/1 вируса гриппа, предназначенный для получения противогриппозных инактивированных вакцин.
Для этого эталонный штамм А/Фи. - липпины/2/82,непригодный для производства вакцин вследствие низкой активности репродукции в куриных эмбрионах (инфекционный титр не превышает 7,0 Ig ЭИД50/0,2 мл и гемаг- глютинирующий титр в пределах 1:64-1:128), рекомбинируют с лабораторным штаммом - донором свойств, высокой репродуктивности в куриных эмбрионах A/PR/8/59/ 1 Лабораторный штамм A/PR/8/59/1 является холодо- адаптированным вариантом известного штамма A/PR/8/34 и характеризуется высокими показателями репродукции в куриных эмбрионах при 34-36 С (ин- фекционньш титр 10,0 Ig ЭЙД 50/0,2 мл
и титр накопления гемагглютинина
1:20А8)5 температурочувствительностью репродукции (при 40 б инфекцион- ньй титр снилсен на 8,0 Ig ЭИД50) и пониженным уровнем патогенности для
куриных эмбрионов
. Технология получения рекомбинант- ного вакционного штамма включает
совместное культивирование в куриных эмбрионах эпидемического и лабораторного штаммов, приводящее к обмену генетической .информации между ними, В результате клонирования
Т1редельнь)ш разведениями вьщелен. клон А/Ф/59/1, обладающий комбинацией полезных признаков, а именно антигенными свойствами современного
возбудителя А/Филиппины/2/82 и репродукционной активностью лабораторного штамма.
Репродукционная активность штамма А Ф/59/1 в куриных эмбрионах после их инкубации при 35 С в течение 48 ч характеризуется инфекхщонным титром вируса 9,5 - 10,5 Ig ЭИД50/0,2 мл и гемагглютинирующим титром 1:1024.
Рекомбинантный клон А/Ф/59/1 унас- ледовал также от лабораторного штамма высокий уровень температуро- чувствительности и низкий уровень
0
0
5
96442
патогенности для куриных эмбрионов (4,0 Ig ДЦ50).
Антигенная структура - Н3№2, В перекрестной РТГА штамм взаимодей- ствует с антисывороткой к вирусу А/Филиппины/2/82 до гомологичного титра, сыворотка к штамму А/Ф/59/1 также реагирует с эпидемическим штаммом А/Филиппины/2/82 до гомологичного титра, В реакции подавления нейраминидазной активности со штаммом взаимодействует имунная сыворотка СДС-18 (Не( № 2) до титра 1:128 и не взаимодействует антисы- 5 воротка к штамму A/PR/8/59/1,
Штамм А/Ф /59/1 чувствителен к |5-ингибиторам нормальной кроличьей сыворотки, ингибирующей вирус до титра 1 г 640,
Морфология штамма А/Ф/59/1, Полиморфная структура, типичная для вируса гриппа.
Штамм проявляет стабильность основных генетических свойств на про- тялсении пяти пассажей на куриных эмбрионах.
Пример Группе из десяти куриных эмбрионов вводят в аллантоис- ную полость вирус А/Ф/59/1, взятый Б объеме 0,2 мл при концентрации 1 ЭЙД 50„ Эмбрионы инкубируют при 34 С в течение 48 ч, В аллантоисной жидкоети, отобранной от каждого куриного эмбриона раздельно, гема г- глютинин выявлен в разведении 1:2048 в трех пробах, 1:1024 в пяти пробах и 1;;512 в двух пробах. Инфекционный титр вируса в трех пробах достигает 10,5 Ig ЭВД50/0,2 мл, в пяти пробах 10,0 Ig ЭНЦ50/0,2 мл и в двух пробах 9,5 Ig ЭИД50/0,2 мл.
Равноценной группе куриных эмбрионов в той же дозе и обьеме вводят родитешьский вирус А/Филиппины/2/82, Из десяти проверенных проб аллантоисной жидкости в трех геммагглютинин содеряснтся в титре 1-:128, в шести пробах - в титре 1:64 и в одной - в титре 1:32, Инфекционный титр вируса во всех пробах не превьшал 7,0 Ig ЭЙД50/0,2 мл.
Штамм соответствует по антигенной структуре актуальным эпидемическим вирусам, что позволяет создать более эффективную защиту против современного гриппа А при использовании штамма в качестве инактивирован- ной вакцины.
0
5
0
Штамм А/Ф/59/1 вируса гриппа ГКВ № 1872 (Государственная коллекция вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского), используемый для получения противогриппозной ин- активированной вакцины. (Л С со О5 4 1
| Авторское свидетельство СССР № 1056636, кл | |||
| Способ гальванического снятия позолоты с серебряных изделий без заметного изменения их формы | 1923 |
|
SU12A1 |
