3-ОКСИЭСТРА-1,3,5-ТРИЕН-17-ГИДРАЗОН, ОБЛАДАЮЩИЙ ГОРМОНАЛЬНОЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07J31/00 A61K31/565 

Изобретение относится к новому химическому соединению - 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразону формулы 1

проявляющему гормональную и противоопухолевую активность.

Соединение 1 является представителем новой группы стероидных соединений, не содержащих заместителей у N₂ атома гидразонового фрагмента молекулы.

Цель изобретения получение новых производных стероидных соединений ряда эстрана, обладающих преимуществами в фармакологической активности по сравнению с известными структурными аналогами подобного действия.

П р и м е р 1. К раствору 3 г (0,01 моль) эстрона в 300 мл этанола добавляют 87 мл (0,50 мл) 30%-ного раствора гидразингидрата и выдерживают в течение 5 ч при кипении. При добавлении воды в охлажденную до комнатной температуры реакционную массу 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон (I) выпадает в осадок. Осадок отфильтровывают и промывают водой. Продукт 1 очищают переосаждением из этанола водой. Выход 3,2 г (94,8%), т.пл. 254^oC.

Найдено, C 71,6; H 8,6; N 9,7.

C₁₈H₂₄N₂O
Вычислено, C 71,3; H 8,8; N 9,4.

R_f 1 (н-бутанол:уксусная кислота:вода 4:1:1) 0,57.

R_f 2 (хлороформ:этанол 3:1) 0,90.

R_f 3 (н-пропанол: 0,2 н. аммиак 3:1) 0,92.

Эстрогенную активность предлагаемого соединения I определяют по длительности экстральной реакции у половозрелых кастрированных крыс по сравнению с кастрированными контрольными животными (в днях). Об антиандрогенном действии судят по влиянию соединения I на массу органов-мышей для андрогенов у крыс-самцов (изменение массы яичек, вентральной простаты, семенных пузырьков в процентах по отношению к контролю).

Для изучения противоопухолевой активности используют перевиваемые опухоли мышей и крыс, обладающие различной степенью чувствительности к стероидным гормонам и их цитостатическим производным: аденокарциному молочной железы Са-755, меланому В-16, высокометастазирующий в печень рак молочной железы мышей ВМР-П, опухоль яичника мышей ОЯМ, альвеоральный рак молочной железы крыс РМК-1, рак молочной железы F₂₄ крыс линии Fixher. Критериями оценки противоопухолевого эффекта служат процент торможения роста опухолей и процент извлеченных животных. Статистически значимым считают торможение роста опухолей на ≥ 50% при определенном, вычисленном для каждой модели опухолей числе животных в подопытных и контрольных группах. Для опытов используют линейных мышей и их гибриды первого поколения: C₅₇Bl/6; BDF, A/S-, а также крыс беспородных и Fixher.

Биологические свойства соединения I изучают в сравнении с его структурным аналогом эстроном (II), а также синэстролом (III) препаратом, используемым для лечения рака представительной железы. Вещества вводят подкожно в 10% -ном спирте, в смеси 15% спирта с маслом и в оливковом масле. При изучении противоопухолевых свойств вещества начинают вводить через 48 ч после перевивки опухолей мышей и через 96 120 ч после перевивки опухолей крыс. При изучении эстрогенных свойств соединения вводят через 14 дней после кастрации. Результаты изучения биологической активности 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразона (I) представлены в табл. 1 4.

Как видно из табл. 1, предлагаемое соединение I обладает примерно в 2 раза более длительным эстрогенным действием, чем его структурный аналог природного происхождения эстрон (II) при введении обоих соединений в эквимолярных дозах.

3-Оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон (I) также проявляет выраженное и длительное антиандрогенное действие. Соединение I вызывает у крыс уменьшение и атрофию органов-мишеней для андрогенов: вентральной простаты, семенных пузырьков и яичек (табл. 2). Наиболее длительное угнетающее влияние оказывает предлагаемое соединение I на семенные пузырьки, масса которых и через 83 дня после окончания курса остается ниже контрольной.

Изучение противоопухолевой активности 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразона (I) показало, что предлагаемое соединение проявляет противоопухолевую активность в отношении ряда штаммов опухолей мышей, в частности вызывает торможение роста опухоли яичка мышей на 59% меланомы В-16 на 82% Отсроченное пороговое противоопухолевое действие наблюдалось на модели ВМР-П торможение роста на 48% В то же время молекулярные компоненты препарата эстрон и гидразин, как явствует из табл. 3, не проявляют противоопухолевой активности.

Более сильное противоопухолевое действие 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон (I) оказывает на опухоли крыс.

Из табл. 4 видно, что соединение I проявляет длительное противоопухолевое действие в отношении раков молочной железы РМК-1 и F-24. При этом противоопухолевый эффект, равный после курса 63 70% торможения роста опухолей, сохраняется и после прекращения лечения в течение последующих одной-двух недель вплоть до рассасывания опухолей F-24 у 28% животных. Известный эстроген синэстрол (III), применяющийся в клинике в качестве противоопухолевого препарата (базовый объект) менее активен. Так, он вызывает торможение только при длительном курсе введения до 14 дней (РМК-1) и не проявляет активности в отношении модели F-24. Приведенные в табл. 4 данные показывают, что противоопухолевое действие 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразона (I) не обусловлено противоопухолевой активностью его молекулярных компонентов: эстрона и гидразина. Комбинация последних на указанных моделях опухолей не обладает противоопухолевым действием.

Изучение токсичности соединения I показало, что 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон (I) не оказывает токсического действия на организм животных даже в дозах значительно выше терапевтических (300 мг/кг при пятикратном введении), что свидетельствует о его малой токсичности.

Таким образом, 3-оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон (I) обладает преимуществом в гормональной и противоопухолевой активности по сравнению с препаратом синэстролом, а также более широким спектром действия на опухоли. Соединение I проявляет также сильное антиандрогенное действие, что, по-видимому, определяет его противоопухолевую активность в отношении опухолей, исходящих из тканей-мишеней для андрогенов.

3-Оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон формулы

обладающий гормональной и противоопухолевой активностью.

3-Оксиэстра-1,3,5-триен-17-гидразон формулы

обладающий гормональной и противоопухолевой активностью.