СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2005 года по МПК A61K38/08 A61P35/00 

Описание патента на изобретение RU2254139C1

Изобретение относится к фармацевтической химии, в частности к созданию лекарственных средств пептидной природы, обладающих противоопухолевым действием, и может быть использовано для лечения опухолей, в том числе эндокринных и гормонозависимых.

В современной практике противоопухолевой химиотерапии используется весьма широкий арсенал лекарственных средств, таких как алкилирующие вещества, антиметаболиты, противоопухолевые антибиотики, гормональные препараты и их антагонисты, ферменты. Широко применяют цитостатики сарколизин, циклофосфан, миелосан, производные нитрозометилмочевины, из антиметаболитов - метотрексат, меркаптопурин, фторурацил, фторафур, среди противоопухолевых антибиотиков - дактиномицин, рубомицин, доксорубицин, карминомицин и другие.

Для лечения гормонозависимых опухолей часто используют гормональные препараты, в частности андрогены, эстрогены, кортикостероиды, и антагонисты гормонов. Так, для лечения рака предстательной железы применяют эстрогены, так как в этом случае показано подавление действия в организме андрогенов или усиление активности эстрогенов. Андрогены используют, когда показано повышение активности андрогенов или уменьшение активности эстрогенов, например при раке молочной железы.

Для лечения злокачественных лимфом и острых лейкозов используют глюкокортикоиды.

В современной медицинской онкологической практике для лечения гормонозависимых опухолей используют такие препараты, как анастрозол, мегестрол, медроксипрогестерон, тамоксифен, флутамид и другие (РЛС Россия, Энциклопедия лекарств, выпуск 9, 2002 год). Однако упомянутые лекарственные средства, помимо серьезных побочных явлений, имеют и абсолютные противопоказания, такие как нарушение функции печени и почек, тромбофлебит, заболевания щитовидной железы и сердца, детский возраст, беременность.

В последние десятилетия ведется активный поиск противоопухолевых лекарственных средств пептидной природы, проявляющих высокую специфическую активность и в то же время не имеющих серьезных противопоказаний.

Известна фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевым действием, содержащая β-гептилгликозид-N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглутамина в липосомальной форме для перорального и внутривенного введения (патент RU 2121363, 1997 г.), композиция обладает низкой токсичностью.

Известно противоопухолевое средство, представляющее собой комплексный препарат производных гематопорфирина и фактора некроза опухоли альфа в определенном молярном соотношении (Патент RU 2136278, 1998), средство обладает невысокой токсичностью.

Известен пентапептид, обладающий противоопухолевой активностью в форме гидрохлорида M2Val-Val-MVal-Pro-Pro-NH-Bzl НСl, где М - металл, Bzl - бензил (патент RU 2153504, 1995).

Известно противоопухолевое средство, представляющее собой нетоксичный гексапептид формулы Leu-Val-Val-Tyr-Pro-Trp (патент RU 2067870, 1993).

Известен фармацевтический состав на основе пептидов, обладающий антипролиферативным действием в отношении опухолей (патент RU 2156774, 1995).

Все более широкое применение в клинической терапии опухолей, особенно эндокринных опухолей, находит сандостатин, препарат на основе циклического октапептида, выпускаемый фирмой «Сандос» (Н.Ф.Орел и др., ж. «Современная онкология», т.2, №1, 2000).

По фармакологическому спектру действия и специфической противоопухолевой активности сандостатин является наиболее близким к заявляемому средству, поэтому выбран заявителем в качестве прототипа.

Задачей настоящего изобретения является создание отечественного противоопухолевого средства, обладающего высоким терапевтическим эффектом, широким спектром противоопухолевого действия и низкой токсичностью.

Поставленная задача решается тем, что предложено средство, обладающее противоопухолевым действием, представляющее собой пептид общей формулы:

, где

R - трет-бутилоксикарбонил, R1 - тетрагидропиранил, R2-Nε - бензилоксикарбонил, R3, - метил (I);

R-Н, R1 - тетрагидропиранил, R2-Nε - бензилоксикарбонил, R3 - метил (II);

R-Н, R1-H, R2-Н, R3 - метил (III);

R - трет-бутилоксикарбонил, R1 - тетрагидропиранил, R2-Nε - бензилоксикарбонил, R3-S - тетрагидропиранилцистеина метиловый эфир (IY).

Технический результат, получаемый при использовании изобретения, выражается в расширении арсенала противоопухолевых средств, снижении токсичности, повышении терапевтического эффекта.

Синтез заявляемого средства проводили классическими методами пептидной химии. Для блокирования боковой цепи лизина применяли карбобензилокси (Z) группу, цистеина - тетрагидропиранильную (Thp), a для временной защиты Nα-функций трет-бутилоксикарбонильную (Воc) группы.

Для повышения устойчивости к тканевым ферментам в состав пептидов введена неприродная аминокислота D-триптофан.

Полученные пептиды были охарактеризованы углом оптического вращения и данными элементного анализа, тонкослойной хроматографией, высокоэффективной жидкостной хроматографией, данными ЯМР-спектроскопии и аминокислотного анализа.

Изобретение поясняется следующими примерами

Пример 1

В качестве примера приводится синтез гидрохлорида метилового эфира S-тетрагидропиранилцистеинилфенилаланил-D-триптофил-Nε-карбобензоксилизилтреонина

HCl·H-Cys(Thp)-Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-OMe (II)

Пентапептид (II) получали удалением Вос-защитной группы с пентапептида (I) 3,4 N НСl в этилацетате при комнатной температуре в течение 20 минут. В этих условиях не наблюдалась побочная реакция отщепления Z-группы с Nε-функции лизина. Выход (II) составил 98%.

Пример 2

Пептид, полученный по описанному способу, был испытан на адекватных моделях: аденокарциноме предстательной железы Даннинга крыс Copenhagen и раке молочной железы РМ-1 на бестимусных мышах. В эксперименте на крысах препарат вводили в дозе 100 мкг/кг в течение 30 дней, на мышах также в дозе 100 мкг/кг в течение 21 дня.

Как показали экспериментальные данные, пептид проявляет равный противоопухолевый эффект на аденокарциноме предстательной железы Даннинга R3327-H крыс и раке молочной железы РМ-1 бестимусных мышей. Пептид тормозит рост этих опухолей на 63-65%.

Экспериментально было установлено, что заявляемое средство обладает широким спектром противоопухолевого действия, а именно эффективно на перевиваемых опухолях: аденокарцинома молочной железы Са-755, меланома В-16, аденокарцинома легкого Льюис LLC, аденокарцинома предстательной железы Даннинга R-3327-H, рак молочной железы РМ-1 бестимусных мышей и ДМБА - индуцированных опухолях молочной железы.

Были проведены испытания заявленного средства.

1. Изучение токсичности.

2. Изучение специфической противоопухолевой активности.

1. Исследование токсичности заявляемого средства соединений I, II, III, IY проводили на мышах-гибридах BDF1 и беспородных крысах-самках. Все соединения не проявляют токсического действия на мышах в разовых дозах 60-80 мг/кг (суммарная доза 300-400 мг/кг). При пересчете на человека ежедневная доза составляет 300000-400000 мкг, что в 50-65 раз превышает применяемые при неоперабельном раке поджелудочной железы высокие дозы сандостатина (6000 мкг/сут). На беспородных крысах все соединения также не проявляют токсического действия при курсовой дозе 6000 мкг/кг.

Представленные данные показывают, что заявляемое средство не проявляет токсичность при использовании даже в высоких дозах.

2. Изучение противоопухолевой активности проводили на адекватных моделях. Критерием эффективности лечения служило торможение роста опухоли (ТРО). Противоопухолевую активность изучали на аденокарциноме предстательной железы Даннинга 3327-Н крыс Copenhagen. Данные представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1, соединения I, III, IY на аденокарциноме предстательной железы Даннинга R3327-H крыс проявляют противоопухолевое действие: соединение I тормозит рост опухоли на 55%, соединение III - на 66%, соединение IY - на 46%.

Противоопухолевую активность заявляемого средства изучали на ДМБА-индуцированных опухолях молочной железы крыс в сравнении с сандостатином. Изучаемые препараты вводили подкожно в дозе 100 мкг/кг в течение 30 дней. Данные представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, все соединения проявляют высокий противоопухолевый эффект. Терапевтический эффект соединения I составляет 91% ТРО. У соединения III максимальный терапевтический эффект равен 75% ТРО, у соединения IY - 79% ТРО, а у сандостатина - 68% ТРО.

Противоопухолевую активность заявляемого средства изучали также на бестимусных мышах с подкожно перевитым раком молочной железы РМ-1 в сравнении с сандостатином. Соединение вводили подкожно в дозе 100 мкг/кг в течение 21 дня. Данные представлены в таблице 3. Как видно из данных таблицы 3, на фоне введения соединений максимальный терапевтический эффект составил для соединения I - 47% ТРО, для соединения II - 63% ТРО и превышал противоопухолевое действие сандостатина (39% ТРО). Непосредственно после окончания лечения терапевтический эффект сохранялся и составил для соединения I - 45% ТРО, для соединения II - 55% ТРО, для сандостатина - 40% ТРО.

В эксперименте показан статистически достоверный противоопухолевый эффект заявляемого средства на перевиваемых гормононезависимых опухолях: аденокарциноме молочной железы Са-755, аденокарциноме легкого Льюис LLC и меланоме В-16

Изучаемые препараты вводили в дозах 60-80 мг/кг подкожно в течение 5 дней.

Данные представлены в таблице 4. Как следует из данных таблицы 4, максимальное ТРО на аденокарциноме молочной железы Са-755 составляет 91%, на аденокарциноме легкого Льюис - 97% и на меланоме В-16 - 85%.

Таким образом, заявленное средство обладает высоким противоопухолевым эффектом на широком спектре опухолей, в том числе гормонозависимых, и низкой токсичностью, что позволит ему занять достойное место в онкологической практике.

Таблица 1
Противоопухолевая активность соединений I, III, IV на аденокарциноме предстательной железы Даннинга 3327 Н крыс Copenhagen
ПрепаратДоза (м кг/кг) *Максимальное ТРО, % **I10055III10066IV10046Примечания: * - соединения вводили ежедневно в течение 30 дней,
** - р<0,05

Таблица 2
Противоопухолевая активность соединений I, III, IV на ДМБА-индуцированных опухолях молочной железы крыс в сравнении с сандостатином
ПрепаратДоза (мкг/кг)*Максимальное ТРО, % **I10091III10075IV10079Сандостатин10068Примечания: * - соединения вводили ежедневно в течение 30 дней,
** - р<0,05

Индукция опухолей осуществлялась четырехкратным еженедельным внутривенным введением ДМБА (диметилбензантрацен) в водно-жировой эмульсии в суммарной дозе 8 мг на крысу.

Таблица 4
Противоопухолевая активность соединений I, III, IV на перевиваемых опухолях мышей
МодельДоза (мг/кг) *Максимальное ТРО, % **Са-7558091LLC7097В-166085Примечания: * - соединения вводили ежедневно в течение 5 дней,
** - р<0,05

ЛИТЕРАТУРА

1. Romy Lea Topper, Pharm D.Ocreotide: Drug review and clinical indications. The cancer bulletin, 1989, 41, 5, 334-335.

2. Гарин А.М. Принципы и возможности современной эндокринной терапии опухолей. М., 2000, 82-85.

3. Agthony L.B., Krozely M.G., Jonhson D.H., Shaff M.I., Hande K.R., Oates J.A.Somatuline is antitumor efficacy and phase I trial in neuroendocrine tumors. Proc. Annu Meet Am Soc Clin Oncol, 1992, 11:А484.

4. Jean-Christophe Souget. Long-acting somatostatin analogues in pancreatic islet cell carcinoma. Horm. Res., 1989, 32, 74-76.

5. Weckbecker G., Raulf F., Stolz В., Bruns С. Somatostatin analogs for diagnosis and treatment of cancer. Pharm. Ther. Vol. 60, p. 245-264, 1993.

6. Cavanac et al. Somatostatin analogue composition and in treating beastm cancer U.S.P.

7. Н.Ф.Орел, Т.Н.Лопаткина. Возможности применения сандостатина у онкологических больных. Современная онкология, 2, 1, 2000.

Похожие патенты RU2254139C1

название год авторы номер документа
Средство для лечения гормонозависимых опухолей и способ его получения 2018
  • Дмитриева Мария Вячеславовна
  • Санарова Екатерина Викторовна
  • Смирнова Людмила Ивановна
  • Оборотова Наталия Александровна
  • Полозкова Алевтина Павловна
  • Орлова Ольга Львовна
  • Шпрах Зоя Сергеевна
  • Устинкина Светлана Витальевна
  • Ланцова Анна Владимировна
  • Борисова Лариса Михайловна
  • Киселева Марина Петровна
  • Николаева Людмила Леонидовна
  • Кульбачевская Наталия Юрьевна
  • Коняева Ольга Ивановна
  • Гусев Дмитрий Васильевич
RU2703533C1
Противоопухолевое лекарственное средство для перорального применения 2020
  • Полозкова Алевтина Павловна
  • Орлова Ольга Львовна
  • Смирнова Людмила Ивановна
  • Устинкина Светлана Витальевна
  • Шпрах Зоя Сергеевна
  • Игнатьева Елена Владимировна
  • Борисова Лариса Михайловна
  • Киселева Марина Петровна
  • Дмитриева Мария Вячеславовна
  • Николаева Людмила Леонидовна
  • Ланцова Анна Владимировна
  • Голубева Ирина Сергеевна
  • Оборотова Наталия Александровна
  • Санарова Екатерина Викторовна
  • Кульбачевская Наталия Юрьевна
  • Коняева Ольга Ивановна
  • Ермакова Надежда Павловна
  • Гусев Дмитрий Васильевич
  • Косоруков Вячеслав Станиславович
RU2748989C1
3-OR-ДИ-(2-ХЛОРЭТИЛ)АМИНОСОДЕРЖАЩИЕ αАЦИЛ(ГИДР)ОКСИСТЕРОИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1998
  • Ржезников В.М.
  • Голубовская Л.Е.
  • Минайлова О.Н.
  • Смирнова З.С.
  • Осетрова И.П.
  • Сушинина Л.П.
  • Титова Т.А.
  • Толкачев В.Н.
RU2139292C1
НОВЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ 2003
  • Фэрклот Глинн Томас
  • Элисес Марьяно
  • Сасак Халина
  • Авилес Марин Пабло Мануэль
  • Куэвас Марчанте Мария Дель Кармен
RU2356908C2
Пептид, обладающий противоопухолевой и антиметастатической активностью, и готовая лекарственная форма на его основе 2018
  • Богачук Анна Пайзеновна
  • Золотарев Юрий Александрович
  • Азев Вячеслав Николаевич
  • Сурина Елена Анатольевна
  • Смирнова Евгения Владимировна
  • Смирнова Ирина Валентиновна
  • Якубовская Раиса Ивановна
  • Немцова Елена Романовна
  • Морозова Наталия Борисовна
  • Воронцова Мария Сергеевна
  • Липкин Валерий Михайлович
RU2682039C1
ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ СРЕДСТВО 1999
  • Оборотова Н.А.
  • Полозкова А.П.
  • Орлова О.Л.
  • Смирнова З.С.
  • Татаренкова Л.А.
RU2144821C1
ПЕПТИД С АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2007
  • Ферранди Эрик
  • Камара И Феррер Хосе-Антонио
  • Марэн Жан-Грегуар
RU2446174C2
ДЕКАПЕПТИД, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1993
  • Власов Г.П.
  • Буров С.В.
  • Семко Т.В.
RU2084458C1
ВЫСОКОЭФФЕКТИВНЫЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ АДРЕСНОГО ДЕЙСТВИЯ ДЛЯ ТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ 2019
  • Никольская Елена Дмитриевна
  • Яббаров Никита Григорьевич
  • Сокол Мария Борисовна
  • Жунина Ольга Александровна
  • Фаустова Мария Романовна
  • Заболотский Артур Игоревич
  • Фомичева Маргарита Викторовна
  • Моллаев Мурад Давлетович
  • Помазкова Татьяна Анатольевна
  • Сапелкин Михаил Александрович
RU2727924C1
СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ РАКА 2006
  • Беспалов Владимир Григорьевич
  • Александров Валерий Анатольевич
  • Миронова Людмила Владимировна
  • Петров Альгерд Сергеевич
RU2328294C1

Реферат патента 2005 года СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ ДЕЙСТВИЕМ

Изобретение относится к фармацевтической химии, в частности к созданию лекарственных средств пептидной природы, обладающих противоопухолевым действием, и может быть использовано для лечения опухолей, в том числе эндокринных и гормонзависимых. Средство представляет собой пептид общей формулы:

Изобретение обеспечивает повышение терапевтического эффекта, снижение токсичности. 2 з.п. ф-лы, 4 табл.

Формула изобретения RU 2 254 139 C1

1. Средство, обладающее противоопухолевым действием, содержащее пептид и физиологически приемлемый растворитель, отличающееся тем, что в качестве пептида оно содержит линейный пептид общей формулы:

, где

R - трет-бутилоксикарбонил или Н,

R1 - тетрагидропиранил или Н,

R2-Nε - бензилоксикарбонил или Н,

R3 - O-метил или S-тетрагидропиранилцистеина метиловый эфир.

2. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно предназначено для парентерального введения и содержит действующее вещество в дозе 0,1-100,0 мг/кг.3. Средство по п.1, отличающееся тем, что оно предназначено для парентерального введения, выполнено в липосомальной форме и содержит действующее вещество в дозе 0,05-100 мг/кг веса.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2005 года RU2254139C1

Н.Ф.Орел и др
Ж
«Современная онкология», т.2, №1, 2000
ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ ПЕПТИДЫ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ 1989
  • Дэвид Х.Кой[Us]
  • Жак-Пьер Моро[Us]
  • Джон Е.Тейлор[Us]
  • Сун Хьюк Ким[Us]
RU2088592C1
ПЕПТИДЫ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 1994
  • Паоло Комолио
  • Карола Понцетто
RU2146262C1
АЛЛОФЕРОНЫ-ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЕ ПЕПТИДЫ 1999
  • Черныш С.И.
  • Ким Су Ин
  • Беккер Герман Петрович
  • Махалдиани Н.Б.
  • Хоффманн Жюль
  • Бюле Филипп
RU2172322C1
DE 10147056, 12.12.2002
US 5741892,.21.04.1998.

RU 2 254 139 C1

Авторы

Смирнова Л.И.

Устинкина С.В.

Смирнова А.П.

Орлова О.Л.

Оборотова Н.А.

Смирнова З.С.

Кубасова И.Ю.

Шпрах З.С.

Даты

2005-06-20Публикация

2003-11-14Подача