11-Дезокси-17 @ -окси-21- @ п-ди(2-хлорэтил)аминофенилацетат @ кортикостерон,проявляющий противоопухолевую активность Советский патент 1986 года по МПК C07J5/00 A61K31/56 

проявляющий противоопухолевую актив- ность.

1 . . .1249022 2 .

Изобретение относится к химическим -дезокси-17-д -окси-21- |1-ди(2-хлорэтил)aминoфeнилaцeтaт J-кортикостеро- ну формулы

соединениям, проявляющим противоопухолевую активность, а именно к 11-дезокси-17-д -окси-21- |1-ди(2-хлорэтил)aминoфeнилaцeтaт J-кортикостеро- ну формулы

.

CH2-ocoCH2- 7-if

€ 0

-он

.

СЯ.

7-if

CHgCHgCl

11-Дeзoкcи-17(i-oкcи-21- м-ди(2-. -хлорэтил)аминофенилацетат -кортикостерон формулы сн,-ососн -он CH CHjCl (Л CHgCHjCl

Известны сложные эфиры 11-ди(2-хлор- этил)аминофенилуксусной кислоты (хлор- фенацила) и стеринов l , стероидных гормонов 2, или их синтетических аналогов Гз1 .

Некоторые соединения из группы гормбноцитостатиков, такие как эстра- цит fэстра-1,3,5(10)-триен-3,17 -диол- ,-3-Ы-|бис(2-;шорэтил)карбамат -1 7т -динатрий фосфат и преднимустин (прегна-1,4-диен-З,20-дион, 11, 17,21-триокси-21- (2-хлорэтил) аминофенил -бутиратJ имеют применение в онкологической 4J .

СН2-ОСОСН2- У К

СНз 0

-он.

Экспериментальные данные показывают, что соединения такого типа проявляют как противоопухолевую, так и гормональную активность, Сохраняя специфическое действие именно того гормона, которьш входит в их молекулу .

Цель изобретения - изыскание новых химических соединений, обладающих противоопухолевой активностью.

Поставленная цель достигается химическим, соединением 11-дезокси 17- -о -окси-21- Ги-ди(2-хлорэтил)аминоЛе-1 L

нилацетат -кортикостероном формулы

СНзСНзС

CHgCHgCl

О

Синтезированньй химическим путем 11 -дезокси-17- Kl-окси-. 1 - h -ди (2-хлорэтил) аминофенилацетат -кортикосте- рон (фенкорон) -представляет собой белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок с 103-105°С. Препарат практически нерастворим в воде, эфире, мало растворим в спирте растворим в хлороформе, легко растворим в бензоле и этилацетате. Фенкорон не гигроскопичен, при длительном хранении на свету приобретает желтую окраску.

Структура фенкорона подтверждена данными микроанализа, идентичностью препарата, полученного тремй разны

ми методами, а также данными ИК-, УФ- и ЯМР-спектров,

Фенкорон проявляет в экспериментальных условиях высокую противоопухолевую активность на ряде моделей опухолей,, в том числе и на гормоно- чувствительных опухолях.

Предлагаемое соединение можно поучить различными методами - хлор- ангидридным, ангидридным, а также методом смешанных ангидридов.

Выход продукта (фенкорона) в зависимости от метода его получения приведен в табл. 1,

Таблица 1

11,4-23,0 10,0-19,2 48,4-62,5 23,0-29,6

38,7-43,8 33,0-36,5

Лучшие результаты в расчете на хлорфенацил дает метод смешанных ангидридов, основанный на реакции аци- дирования стероидного оксисоединения смешанным ангидридом хлорфенацила и изовалериановой кислоты.

Получение смешанного ангидрида проводят в среде апрртонного растворителя, например бензола, при 5 С в присутствий молярного количества триэтиламина. Смешанньй ангидрид вводят в реакцию ацилирования окси- группы в боковой цепи 11-дeзoкcи-17- -(lt-oкcикopтикocтepoнa .

П р и м е р. 9,6 г (0,035 г/моль) хлорфенацила растворяют в сухом бензоле и прибавляют 3,52 г (4,8 мл, 0,035 г/моль) триэтиламина и 4,28 г (4,3 мл, 0,035. г/моль) хлорангидрида изовалериановой кислоты при 5 С.

Реакционную массу перемешивают при в течение двух часов, после чего прибавляют 100 мп сухого ацето- нитрила .и 10,0 г 11-дезокси-Т7-«6-ок- сикортикостерона (0,028 г/моля). Ре- акц 1онную массу нагревают 11 ч при , прибавляют 100 мл бензола и промывают органический слой последовательно водой, 10%-ным раствором бикарбоната калия и опять водой.

Отделяют органический слой и высушивают безводным сульфатом натрия, отгоняют растворитель в вакууме при температуре не вьше досуха.

Остаток растворяют в бензоле и наносят на колонку, заполненную сили- кагелем. Элюируют смесью бензол - этилацетат (6: 1) . Отбирают фракции, содержащие 11-дезокси-17-й-окси-21- (2-хлорэтил)аминофенилацетат - -кортикостерон с R 0,50 в системе

бензол - этилацетат (3:2) на нах silufoluv 254.

Отгоняют растворитель в вакууме и кристаллизуют конечный продукт из эфира. Выход 3,5 г (41,6% в расчете на исходный гормон или 34,8% в расчете на хлорфенацил, Т„л 103-105 С

10

(с разложением).

Вьгаислено, %: С 65,55, Н 7,16, С1 11,73.

5

Найдено, %: С1 11,56.

,f

С 65,44; Н 7,12,

N0,

УФ-спектр (в спирте) :Лыа« с 256 нм, 5 Е 1%, 1 см 440.

ИК-спектр (вКВг),, см : 1742, 1236 ( С-0 сложный эфир); 1722, 1652 (С-0); 1618, 1519 (); 1155 (С-ОН): 803 ( ); 654, 0 740 ( |С-С1).

ПНР-спектр (в CDCI при 20 с), М.Д.: 7.20, 6,65 (ароматический муль- типлет); 5,71, сингл.ет (), -5,13, 483, дублеты IAB - 17,6 Гц, (С,2Н), 5 3,64/ОН, С22Н; 1,16, 0,69, синглеты

(, ).

Для исследования биологической активности используют мышей линии DBA/2, СВА, BALB/C, Cs,B1, гибридов

0 первого поколения BDF (С В1-DBA/2), а также беспородных крыс. Противоопухолевую активность изучают на лимфо- бластном лейкозе L,,, аденокарциноме толстой- кишки АКАТОЛ, плоскоклеточном раке преджелудка ПРЖ, раке шайки матки РШМ-5, аденокарциноме молочной железы Са-755, саркоме С-37 мьшгей, а также на альвеолярном раке молочной железы РМЖ-1 беспородных крыс. В неQ которых опытах используют спонтанные опухоли молочной железы беспородных машей (SHK), Лечение начинают через 48 ч после перевивки опухрли. Лечение спонтанных-опухолей начинают, когда

5 средний размер опухоли составляет не менее 3000 мм . Препарат вводят в оливковом или косточковом масле подкожно ежедневно в течение 5 дн. После окончания лечения продолжают

0 наблюдение за ростом опухолей и состоянием животных до их гибели. Противоопухолевый эффект оценивают по известной методике.первичного отбора потенциальных противоопухолевых пре5 ,царатов.

Изучение противоопухолевой активности фенкорона показьгеает, что пре- I парат в разовых дозах 10-50 мг/кг после

5-кратного курса введения оказывает вьР сокое противоопухолевое действие на Са-755, АКАТОЛ, РШМ-5, С-37 (72-98% торможения роста опухоли) и спонтанные опухоли молочной железы мышей (уменьшение размеров на 25% по сравнению с исходным). Фенкорон малоэффективен при лимфолейкозе L и не действует на штамм ПРЖ. Чувствительность опухолей к фенкорону не зависит от их чувствительности к компонентам молекулы препарата: хлорфенацилу и 11-дезокси-17-Л-оксикортикостерону. Оптимальная ежедневная терапевтическая доза фенкорона для мьппей при 5-дневном курсе введения -определена, равна 10-20 мг/кг (в зависимости от вида опухоли).i

Проведено сравнивательное изучение противоопухолевой активности фенкоро- на с гормонодитостатиком дистроном 2J Дистрон является производным гормона дигидротестерона. Фенкорон отличается от дистрона по спектру противоопухолевого действия, сила и длительность противоопухолевого действия у фенкорона превышает активность дистрона (табл. 2). Эти данные получают на штамме CEl-755 и спонтанных опухолях молочной железы мьппей.

При сравнении противоопухолевой активности фенкорона и дистрона на спонтанных опухолях молочной железы мышей обнаружено, что фенкорон активен на этой модели опухоли при применении в двух режимах: 15 мг/кг ежедневно в течение 5 дн. и 20 мг/кг через день в течение 6 дн., а дистрон активен только в одном режиме; 30 мг/к через день в течение 6 дн.

На спонтанных опухолях молочных . желез мышей установлено также, особенностью фенкорона является эффективность при повторном курсе введения (большинство химиотерапевтических препаратов мало эффективны при повторных .введениях),

При изучении гормональных свойств фенкорона обнаружено, что препарат сохраняет специфическое глюкокорти- коидное действие соответственно природе кортикоидного ряда гормонов.При

определенном режиме применения фенкорон увеличивает продолжительность жизни 25-дневных адреналэктомирован- ных крысят (биологический тест на глюкокортикоидную.активность) в той же мере, как и входяш11й в его молекулу 11-дезокси-17-Л-окси-кортикосте- рон (соответственно на 113 и 115%). Другой особенностью гормонального действия фенкорона является возможность его метаболизма по типу стероидов эстрогенного ряда.

Показателем эстрогенной активности фенкорона в терапевтических дрзах является отчетливая 2-Д-дневная течка у кастрированных самок мьш1ей и крыс, наблюдаемая при действии син- эстрола в дозе 0,5 мг/кг. Полученные данные показывают, что фенкорон отличается от гормоноцитостатика дистрона специфичностью гормонального действия.

Побочное действие фенкорона на организм проявляется в уменьшении массы кроветворных органов (тимуса и селезенки) и массы легких у крыс, но эти изменения обратимы и не наблюдаются через месяц после окончания введения препарата.

Для определения МПД и ЛД фенкорон в зтилолеате вводят мьшам-самкам SHK однократно подкожно в дозах 750, 500, 250, 125, 100, 63 и 50 мг/кг. Величины МПД и ДЦрр найдены методом интерполяции по методу Литчфильда и Уилкоксона и определены соответственно равными 45 и 86 мг/кг, для дистрона они составляют 200 . и 433 мг/кг, а для хлорфенацила 15 и 24 мг/кг соответственно. Таким образом, фенкорон обладает в 3 раза меньшей токсичностью, чем хлорфенацил. Данные о том, что МПД при однократном введении в три раза выше, чем разовая курсовая доза, показывают, что фенкорон не обладает кумулятивным действием, чТо является положительньм свойством препарата

Результаты сравнения противоопухо левой активности фенкорона и дистро- на приведены в табл. 2 и 3.

Дистрон

с 7-го дня после перевивки 25/24 X 5 85 38

А

Два курса с 20-дневным интервалом.

Знак (-) означает уменьшение продолжительности жизни.

Таким образом, результаты изученияопухолевого действия, а также длибиологической активности фенкорона.тельностью противоопухолевого дейпозволяют характеризовать его, как .ствия и меньшей токсичностью

активный противоопухолевый препарат,по сравнению с хлорфенациобладающий широким спектром противо-лом.

Таблица 2.

19

23