Способ тестирования химических соединений на кардиотропную активность Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 

Описание патента на изобретение SU1244593A1

1

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биофизике и может быть использовано для скрининга биологически активных веществ на кардиотропную активность.

Цель изобретения - повышение точности тестирования за счет дополнительного .определения авторитмической активности и нервной регуляции сердца.

Способ осуществляют следующим образом. V,

Тестирование проводится на развернутых препаратах предсердий сердец осенне-зимних лягушек Rana tempo- raria с сохраненным синусовым узлом, парасимпатическими нервами. Для этого лягушек обездвиживают разрушением спинного и головного мозга и закрепляют на парафиновой основе брюшной стороной вверх, вскрывают грудо-брюшную полость, обнару;ш- вают веточки парасимпатических нервов и освобождают их от окружающих тканей. Пзолцруют сердце и помещают его в чашку Петри, где отсекают .,желудочек и приготавливают пред- и синусовый узел к работе. Приготовленный препарат фрагмента сердца с парасимпатическим стволом помещают в проточно перфузируемый биоблок.. Препарат закрепляется на крепежные крючки с помощью микровинта, растягивается примерно на 1/3 первоначальной длины. Парасимпатический ствол помещают на хлор- серебряные электроды и раздражают сериями импульсов длительностью 0,5 МО, силой 10 В и с частотой 10 Гц различной продолжительности от 5 до 50.стимулов в пачке. Фраг- мент миокарда врабатывают в течение 60 мин до установлен1 л стабильного уровня авторитмической активности, амплитуды сокращений и длительности парасимпатической остановки. После этого записывают эти показатели и через 3-20 мин после стимулирования нерва проверяют еще раз стабильность остановки, после чего в перфу- зионный раствор добавляют испытуемое вещество и снимают те же характеристики, причем длительность парасимпатической остановки определяют по формуле

12А4593а

где Вц длительность парасимпатической остановки в нормеi DB-B - длительность парасимпатической остановки при действии тестируемого

5 химического соединения, п - количество стимулов в пачке.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Оценка действия

10 известных кардиотропных средств.Выделяют предсердие с сохраненньы синусовым узлом и параси1 1патическими нервами и помещают в перфузируемую раствором Рингера биоблок. Раздража15 ют парасимпатический невный ствол фрагмента миокарда лягушки сериями импульсов от 5 до 50 стимулов в пачке и добиваются стабильной по длительности остановки. До 5 стимулов

20 парасимпатической остановки не

наблюдается, а свыше 50 сердце лягушки полностью останавливается. Раздражают парасимпатический нервный ствол препарата 5 ст1-1мула25 ми в пачке и добиваются стабильной по длительности остановки.Регист- амплитуду сокращений, частоту авторитмической активности и длительность остановки авторитмичес30 кой активности предсердия. Вводят известное вещество блокатор холино- рецепторов-атропин в концентратдии 10 М. Через 3 мин измеряют те же параметры. При действии вещества

,, изменилась частота и длительность

парасифшатической остановки, ампли- туда сокращений не изменилась.

Частота спонтанных сокращений при действии атропина возрастает

Q на 20%, в то время как продолжительность парасимпатической остановки уменьшается с 6 с до нуля, амплитуда сокращений не изменяется и равняется 320 мг.

50

4 .

Аналогично производят оценку

действия известного вещества, ган- глиоблокатора, бензогексония. Для получения стабильной остановки сердца применяют стимуляцию парасимпатического нерва 50 стимулов в пачке . Б норме остановка в течение 3-20 мин. Однако стабильное мень- шение парасж-шатической остановки при раздражении нерва наблюдается только после 20 мин воздействия этого вещества на препарат предсердия. Дальнейшая выдержка вещества не влияет на длительность парасимпати

0(4

Dft-B .п

100%

.

Аналогично производят оценку

действия известного вещества, ган- глиоблокатора, бензогексония. Для получения стабильной остановки сердца применяют стимуляцию парасимпатического нерва 50 стимулов в пачке . Б норме остановка в течение 3-20 мин. Однако стабильное мень- шение парасж-шатической остановки при раздражении нерва наблюдается только после 20 мин воздействия этого вещества на препарат предсердия. Дальнейшая выдержка вещества не влияет на длительность парасимпати ческой остаиопки. Беизогексоний в концентрации 10 М влияет на длительность парасданштической остановки, не оказывая какого-либо влияния на-амплитуду сокращения,частоту авторитмичсской активности. Для количественного сравнения действия различных химических соединений на длительность парасимпатической ос- тановки следует пользоваться формулой (1). Расчет показывает, что длительность парасимпатической остановки снижается с 8,2 до 5,2 с. Амплитуда сокращений и частота авторитмической активности не изменяется и составляет соответственно 290 мг и 0,4 Гц.

Пример 2. Оценка кардиотроп- ого действия продигиозанд.

Вьщеление и измерение параметров тест-объекта проводятся так же, как и в примере 1,

Тестируемое вещество, продигио- зан обладает рядом неспецифических терапевтических эффектов,связаннь1хв первую очередь с их действием на центральные механизмы терморегуляции и иммунологической реактивности организма, на метаболизм медиаторов и проницаемость клеточных мембран. Для данного тест-объекта выбрана оптимальная по длительности остановка, вызванная стимуляцией парасимпатического ствола 30 стимулами в пачке. Испытуемое вещество вводят в концентрации . пмл и измеряют -частоту, амплитуду сокращений и длительность парасимпатической остановки через 10 и 20 мин. Проди- гиозан вызывает через 10 мин не- / большое увеш1чение амгшитуды сокращений, а в течение последующих 20 мин. Продигиозан тзызырает через 10 мин небольшое yвeJШчeниe ампли- , туды сокращений, а в тече11ие последующих 20 мин амплитуда сокращений уменьшается до исходных значений. Стимуляция вагосимпзтического нервного ствола вызывает кратковременную остановку сократительной рктявности.. В среднем в 25 экспериментах длительность остановки составляла 7,4 с. В большинстве экспериментов стимз ляция нерва через 20 мин перфузии продигиозаном при

прочих равных условиях вызывала увеличение продолжительности паузы в среднем на 56j7±10,0% (п 12). , Эффект продигиозана на нервную регу:}яц1по сердца не появляется ранес, чем через 10 мин после начала дер1ствия вещества. Максимально выраженный и постоянный эффект продигиозана наблюдается спустя 20 мин, в течение которых раздражение нерва

не производят. Повторную .длитель- остановку сократительной активности можно получить при стимуля- ции нервов с периодом 10-20 мин.При повторной стимуляции через 3 мин парасимпатическое торможение незначг - тельно - соответствует парасимпатической остановке в отсутствие препарата (7с). .

Для уточнения действия вещества вводили микрозлектрод в клетку фрагмента миокарда. Наблюдали изменение длительности потенциала действия при действии продигиозана, во время ,

максимума положительного инотропного эффекта потенциал дер1ствия укорачивался на 13±3,5% (п 7). Этот факт согласуется с предположением о том, что продигиозан усиливает выброс ацетилхолина из пресинаптических

терминалеи.

Из полученньк данных можно сде- лать вывод, что липополисахарид бактериального происхождения продигио зап обладает кардиотропной активностью: усиливает парасимпатическое торможение, увеличивает амплитуду сокращения и не влияет на частоту сердечных сокращений. Наиболее вероятным механизмом действия липополи сахарида, является увеличение высвобождения медиатора (ацетилхолина) из пресинаптических нервных окончаний для стимуляции парас11мпатичес50 кого ствола.

45

Похожие патенты SU1244593A1

название год авторы номер документа
Способ определения индивидуальной чувствительности к кардиотропному препарату 1985
  • Мукумов Марат Рахимович
  • Истарова Любовь Глебовна
  • Исаева Светлана Александровна
  • Авруцкий Марк Яковлевич
  • Смольянникова Татьяна Владимировна
SU1301414A1
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРОКСИЗМАЛЬНОЙ АРИТМИИ СЕРДЦА 1997
  • Канорский С.Г.
  • Шейх-Заде Ю.Р.
  • Скибицкий В.В.
  • Кудряшов Е.А.
RU2147382C1
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ АТРИОВЕНТРИКУЛЯРНОЙ ДИССОЦИАЦИИ 1995
  • Осадчий О.Е.
  • Покровский В.М.
RU2128468C1
СПОСОБ ДОКЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ КАРДИОТРОПНЫХ АНТИАРИТМИЧЕСКИХ СРЕДСТВ 2013
  • Кузьмин Владислав Стефанович
  • Розенштраух Леонид Валентинович
  • Егоров Юрий Владимирович
  • Левицкая Елена Леонидовна
RU2542433C1
СРЕДСТВО, ПРОЯВЛЯЮЩЕЕ АНТИАРИТМИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ 1992
  • Тренин Д.С.
  • Шкляр Т.Ф.
RU2054938C1
Способ оценки эффективности денервации сердца при кардионейроаблации 2023
  • Рзаев Фархад Хан Усейн Оглы
  • Сергеева Ольга Андреевна
  • Горев Максим Васильевич
RU2810946C1
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМБИНАЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ВЕГЕТАТИВНОЙ РЕГУЛЯЦИИ РИТМА СЕРДЦА И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ С ПОМОЩЬЮ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМБИНАЦИИ 2012
  • Школьникова Мария Александровна
  • Круглый Борис Игоревич
  • Березницкая Вера Васильевна
RU2493836C1
СПОСОБ ОЦЕНКИ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА 2001
  • Шейх-Заде Ю.Р.
  • Шейх-Заде К.Ю.
  • Зузик Ю.А.
  • Кудряшов Е.А.
  • Сухомлинов В.В.
  • Жукова Е.В.
  • Каблов Р.Н.
  • Чередник И.Л.
RU2185090C1
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СОСТОЯНИЙ 1994
  • Пятакович Ф.А.
  • Пронин В.Т.
  • Якунченко Т.И.
RU2127135C1
Способ определения кардиотонической активности соединений 1985
  • Мукумов Марат Рахимович
  • Исаева Светлана Александровна
  • Истарова Любовь Глебовна
  • Баум Петр Борисович
SU1320744A1

Реферат патента 1986 года Способ тестирования химических соединений на кардиотропную активность

Формула изобретения SU 1 244 593 A1

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1986 года SU1244593A1

Штрасгейм Е.И., Дмитриева Н.В
Сравнительная селективность мио- кардиальной ткани к разным общим анестатикам
В
сб
Теоретические и методические проблемы молекулярной кардиологии
- Тезисы докл
Чугунный экономайзер с вертикально-расположенными трубами с поперечными ребрами 1911
  • Р.К. Каблиц
SU1978A1
Разборное приспособление для накатки на рельсы сошедших с них колес подвижного состава 1920
  • Манаров М.М.
SU65A1

SU 1 244 593 A1

Авторы

Мукумов Марат Рахимович

Афанасьева Наталия Марковна

Даты

1986-07-15Публикация

1985-01-11Подача