Способ консервирования эритроцитов Советский патент 1986 года по МПК A01N1/02 A61K35/18 

Изобретение относится к медицине, а именно к криобиологии, и может быть использовано для длительного низкотемпературного хранения эритроцитов .

Целью изобретения является снижение степени повреждения эритроцитов за счет их затормаживания в консервирующем растворе, содержащем 1,2-про- пандиол (ПД), сахарозу, хлористый натрий, декстран, полиэтиленоксид (ПЭО) и бидистиллированную воду при определенных соотношениях, и суспен- зировании после размораживания в растворе, содержащем сахарозу, хлористый натрий лимоннокислый трехзамещенный и бидистиллированную воду при определенных соотношениях.

Способ осуществляется следующим образом.

Эритроциты замораживают со скоростью 12-и С/мин до 150-170°С после смешивания с консервирующим раствором, содержащим,%: 1,2-11Д 28- 30; декстран с мол. мае. 20000 4-6; ПЭО с мол. мае. 1500 4-6; сахароза 2-4, хлористый натрий 0,5-0,7; вода бидистиллированная остальное, а после размораживания их суспендируют в среде, содержащей, %: сахароза 9- 11; натрий хлористый ,3-1,7; натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,2- 0,4; вода бидистиллированная остальное .

Пример 1.К120МЛ эритро- цитарной массы приливают 180.мл консервирующего раствора, содержащего, %: 1,2-ПД 29; декстран - 2000 5; ПЭО-1500 5; сахароза 3; NaCl 0,6 вода бидистиллированная остальное и перемешивают. Смесь центрифугируют при 4 С (3000 об/мин) в течение 30 мин. Надостаточную жидкость и слой лейкоцитов удаляют, а осадок эритроцитов объемом 100 мл переносят в контейнер и замораживают в течение 15 мин со скоростью 13 с/мин от 25 до -170°С. Затем к ;нтейнер помещают в хранилище с жидким азотом (-196°С). Через 30 дней хранения контейнер извлекают из жидкого азота и помещают в пенопластовый чехол с толщиной стенок

ВНИИПИ

Заказ 4353/4

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

50236

40 мм на 24 мин., что обеспечивает отогрев эритроцитной массы до 100 С со средней скоростью 4°С/мин. Затем контейнер переносят в воду с темпе- 5 ратурой 45 С на 80 с и размораживают клетки от 100 С со скоростью 80°С/мин. К размораживаемой эритроцитной массе при перемешивании в течение 5 мин добавляют 150 мл суспен- 0 дирующей среды, содержащей, %:

сахароза 10; NaCl 1,6; натрий лимоннокислый трехзамещенный 0,3 и вода бидистиллированная остальное.

При этом получают суспензию эрит- 15 роцитов, гемолиз которых в суспендирующей среде составляет 0,56%. При переносе эритроцитов из суспендирующей среды в физиологический раствор NaC гемолиз составил 20 1,34%..

Пример 2. Эритроциты консервировали в соответствии с примером 1, используя консервирующий раствор в следующем составе, %: 25 1,2-ПД 28 Декстран-20000 4 ПЭО-1500 4 Сахароза 2 NaC 0,5 30 Вода бидистиллированная Остальное Гемолиз эритроцитов в суспендирующей среде 0,83%, а в физиологическом растворе NaCl 1,62%. gr П р и м е р 3. Эритроциты консервировали в соответствии с примером 1, за исключением того, что консервирующий раствор использовали в следующем составе,%: 40 1,2-ПД 30 Декстран-20000 6 ПЭО-1500 6 Сахароза 4 NaC -0,7 j Вода бидистиллированная Остальное Гемолиз эритроцитов в суспензирующей среде составил 0,68%, а в физиологическом растворе - 1,74%.

После суточного хранения декон- сервированных эритроцитов в суспендирующей среде показатель гемолиза увеличивается от 0,6-0,9 до 0,9-1,5%, по известному способу степень разрушения составляет более 2%.

50

Тираж 679

Подписное