Способ прогнозирования течения постгеморрагического периода при кровопотере Советский патент 1986 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки состояния организма после массивной кровопотери.

Цель изобретения - повышение точ- ности способа при прогнозировании постгеморрагического периода при кровопотере.

Поставленная цель достигается путем исследования форменных элементов крови (лейкоцитов) в ранний период после кровопотери (0-2 ч) и определения в них ферментов гликоза: лак- татдегидрогеназы и гексокиназы.

Способ осуществляют следующим образом.

У пациента производят забор крови в центрифужную пробирку с каплей гепарина (5 000 мг/мл), После полу- чения.плазмы путем центрифугировани при 1000 об/мин в течение 20-30 мин выделяют лейкоциты. Для получения осадка лейкоцитов плазму центрифугируют в течение 12 мин при 1000 об/ми и очищают физиологическим раствором от примесей эритроцитов. Трудно отделимые эритроциты разрушагот добавлением раствора хлористого аммония после 5 мин экспозиции. После центрифугирования при 1000 об/мин получают плотный осадок лейкоцитов, надосадок сливают. Полученн: то массу лейкоцитов разводят 1 мл дистиллированной воды для проведения биохимического анализа. Для определения ак- тивности гексокиназы лейкоциты помещают в инкубационную среду, содержащую 0,2 мл НАДФ (1,5 мг/мл), 0,2 мл сернокислого магнита (120 мг/мл), 0,2 мл глюкозы (2,4 мг/мл), 0,4 АТФ/ (1 мг/мл), 1 мл трис-буфера рН 7,5, 0,2 мл лейкоцитов, содержаш 1х 300- -550 мкг белка. Инкубируют 10 мин при 37 град, прекращают реакцию добавлением 1 М щелочи. Спектрофото- метрируют при длине волны 340 нм. Результаты выражают в микромолях НАДФН за минуту на 1 г. Для определения активности лактатдегидрогеназы 0,4 мл лейкоцитов помещают в инку- бационную среду, содержащую лактат натрия 20 мг/мл, НАД. MgSO. Объем пробы 2,5 мл. Инкубируют 1 ч при 37 град с тетразолием синим (1 мг/мл) и фенаэинметасульфатом (2 мг/мл). После инкубации центрифугируют, полученный осадок растворяют в 5 мл ацетона, вьадерживают до развития

5

о 5 0 5

0

стабильного окрашивания и фотометри- руют при 570 нм. Результаты вьфажа- ют в микрограммах на 1 г белка.

Пример 1. Больная В, 1 8 лет , поступила в гинекологическое отделение больницы с дисфункциональным маточным кровотечением. Потеря крови точно не установлена. Больной проведено исследование крови сразу после поступления в отделение, При исследовании крови в этот период получены следующие результаты; содержание гемоглобина 114 г/л, активность гексокиназы лейкоцитов 20 мкмоль/мг, активность лактадегидрогеназы 50мкг/мг. Полученные лабораторные данные указывали на высокую активность ферментов гликолиза, свидетельствующих о формировании гипоксических сдвигов в организме. Таким образом, предполагалось тяжелое течение постгеморрагического периода. Действительно, в течение дня состояние больной утяжелялось, артериальное давление понизилось до 80-55 мм рт.ст. Пульс участился до 15Q ударов в минуту. Через сутки уровень гемоглобина понизился. Общее состояние больной и полученные данные лабораторных исследований указывали на необходимость принятия экстренных мер интенсивной терапии. Последующее капельное введение комплекса глюкозы, витаминов, полиглюкина и дача кислородного коктейля привело к повьшению артериального давления. Однако на протяжении еще недельного срока состояние больной оставалось среднетяжелям. Уровень гемоглобина свидетельствовал о развитии анемии. Только по истечении месяца интенсивной терапии состояние больной стало удовлетворительным.

Пример 2. Больная Т., 47 лет, поступила в гинекологическое отделение больницы с маточным кровотечением. Потеря крови в момент поступления не превышала 200 мл. Больной проведено исследование крови сразу после поступления в отделение. При исследовании крови в этот период получены следующие результаты: содержание гемоглобина 116 г/л, активность гексокиназы в эритноцитах 11 мкмоль/мг белка, активность лактатдегидрогеназы 41,6 мкмоль/кг. Полученные лабораторные данные указывали на повьше- ние активности ферментов гликолиза.

свидетельствующие о накоплении в крови молочной кислоты и увеличении анаэробных процессов в организме,

. Таким образом, несмот ря на оптимальный уровень содержания гемогло- бина и прекращения кровотечения предполагалось тяжелое течение постгеморрагического периода, Действительно , через сутки у больной н ачап резко снижаться гемоглобин, состояни больной утяжелилось. Состояние больной становилось угрожаюпщм и по жизненным показаниям потребовалось проведение хирургических мероприятий. После проведения хирургического лече ния течение постоперационного периода было тяжелым, требовавшем проведение мер интенсивной терапии, реанимационных мероприятий. После выписки из стационара больная пос- тавлена на диспансерный учет.

Пример 3. Больная А. , 25 лет поступила в гинекологическое отделение с маточным кровотечением. Потеря крови не превьшала 200 мл. Больнхэй проведено исследование крови сразу после поступления в отделение. При исследовании крови в этот период получены следующие результаты: со- держание гемоглобина 116 г/л, активность гексокиназы лейкоцитов 9мкмоль

Редактор Н. Рогулич Заказ 4816744

Составитель Н. Хрусталева

Техред Л. Сердюкова Корректор М. Демчик

Тираж 778

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

/мг белка, активность лактатдегидро геназы 8 мкг/мг белка.

Полученные лабораторные данные указывали на снижение активности ферментов гликолиза, свидетельствующие об уменьшении активности процесов , протекающих в анаэробных условиях. Полученные результаты указывали на легкое течение постгеморрагического периода. Действительно, в течение суток после введения глюкозы, комплекса витаминов, раствора хлористого кальция, антибиотиков,, состояние улучшилось и через 48 ч больная была вьтисана.

Формула изобретения

Способ прогнозирования течения постгеморрагического периода при кровопотере путем биохимического анализа крови, отличающий- с я тем, что, с целью повьш1ения тоности способа, в лейкоцитах определяют активность лактатдегидрогеназы и гексокиназы и при снижении этих величин относительно нормы определяют легкое течение постгеморрагического период, а при увеличении показателей относительно нормы прогнозируют тяжелое течение постгеморрагического периода при кровопотере.

Подписное

Изобретение относится к меди- цине. Цель изобретения - повышение точности способа. Из плазмы больного получают осадок лейкоцитов. При центрифугировании 1000 об/мин получают плотный осадок лейкоцитов, надосадок сливают. Полученную массу лейкоцитов разводят дистиллированной водой. Для определения активности гексокиназы лейкоциты помещают в инкубационную среду, затем производят спектрофото- метрию. После этого определяют активность лактатгидрогеназы, для этого лейкоциты инкубируют, центрифугируют. Полученный осадок растворяют в 5 мл ацетона, выдерживают до стабильного окрашивания и фотометрируют. При снижении этих показателей относительно нормы определяют легкое течение постгеморрагического периода при кровопотере. с S (Л