Среда для инкубации митохондрий Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 G01N1/28 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при экспериментальном изучении энергетически процессов в клетках тканей миокарда печени, почек и других органов с целью разработки рациональной схемы регуляции биохимических процессов в тканях.

Целью изобретения является усили активации митохондрий за счет того, что среда в качестве стимулирующего препарат.а содержит левамизол, а также ионы кальция.

Среда содержит стимулятор левамизол, хлористый кальций, аденозин- триофосфат (АТФ) и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Левамизол0,8-1,0

Хлористый кальций 0,03-0,05 . Аденозинтрифос- фат0,8-1,0

ВодаОстальное

Левамизол является оС -изомером тетрамизола -2,3,5,6-тетрагидро-6- фенилимидазол-(1,1-&)тиазола, проявляет свойства антигельминтного препарата и представляет собой белый порошок, без запаха, хорошо растворяется в воде. В сочетании с другими компонентами, входящими в состав среды, левамизол приобретает новое свойство,-благодаря которому предлагаемая композиция становится активным стимулятором функции митохондрий, .

Оптимальной концентрацией левам зола является 0,6-1,0 мМ, она спо11 ,8+0,5

33,6±1,8

13,6±0,96 14,6+1 ,1

33,7±1,8 35,8±2,7

5

собна вызывать физиологически благо- приятную активацию дыхания и юсфори-, лирование митохондрий. При концент- рации левамизоЛа выше 1 t снижается

дыхательный контроль и коэффициент эффективности окислительного фосфори- лирования АДФ/0. Используемые концентрации левамизола в предлагаемой среде не вызывают неблагоприятных

0 изменений митохондрий типа разобщения оксилительного фосфорилирования.

Для того, чтобы усилить благоприятное действие левамизола на дыхание и фосфорилирование митохондри й используют АТФ, сопрягающее действие которого на митохондрии известно, и кальций, как модулятор ряда биологически активных веществ на митохондрии.

Б отдельности ни кальций, ни АТФ в пределах минимально действующей 1 мМ концентрации левамизола существенно не влияют на функцию митохондрий. Действие резко меняется при включении в состав всех трех компонентов: 1 ммоль левамизола, 50 мкмоль кальция и 1 мМ АТФ.

Из табл.1 видно, что при воздейст- 0 ВИИ на митохондрии всех трех компонентов значительно активируется дыхание во всех метаболических состояниях, увеличивается скорость фосфорилирования , повышается коэффициент 5 АДФ/0, т.е. работа митохондрий становится физиологическ более эффектив- чой .,

Таблица I

0

5

20,2±1 ,7

A3,6+2,4

V (скорость контролируемого дыхания)

Vip (скорость фосфорилирова- ния, ммкАО/мнн

VP (скорость разобщенного ди нитрофенолом дыхания)

Дыхательный контроль

Коэффициент эффективности окислит, фос- форилирования (АДФ/0)

В стандартную общепринятую среду 21р р дрлжение табл.2

инкубации (0,1 М сахароза, 50 i

1,5.мМ тр с-буфер, 3 мМ , би- 30 Компоненты Содержание компонен- дистиллированная вода 100 мл, рН 7,5)тов,мас.%, в соетян в вносят титрованные растворы кальция,

левамизола в сочетании с общеприня-Ij

той физиологической концентрацией 1 L

АТФ. Далее регистрируют дыхание и 35 AfieHolHTrrpHфосфорилирование митохондрий поля- фосфат08 09 10

рографически по известной схе- о

-ВодаОс- Ос- 0сталь- таль- таль- Примеры составов приведены в ° ° °

табл.2.Г

Формула изобретения

Среда для инкубации митохондрий. Таблица 2содержащая стимулятор, соли кальция,

45 аденозинтрифосфат п воду, о т л и - чающаяся тем, что, с целью

КомпонентыСодержание компонен- усиления активации митохондрий,

тов, мас.%, в соста- среда в качестве стимулятора содер- вежит левамизол, а в качестве солей

150 кальция - хлористый кальций при сле22дующих соотношениях компонентов,

мае.%:

,Левамизол0,8-1,0

Хлористый Левамизол 0,8 0,9 1,0 55 кальций0,03-0,05

АденозинтриХлористыйфосфат0,8-1,0

кальций 0,03 0,04 0,05 ВодаОстальное

I

Продолжение табл.1 415

Г

26,5+1,5 17,8+1,2

28,1 + 1 .3

28,2±1,5 25,6+2,3

43,7±3,5

43,2±1,5 51,6+3,9

65,1+3,4

1,27+0,02 2,1+0,06

I ,6+0,04

0,85±0,01 0,70±0,03

1,0±0,04

Изобретение относится к медицине. Цель изобретения - усиление активации митохондрий. В стандартную среду дпя инкубации митохондрий вносят титрованные растворы кальция, левамизола и аденазинтрифосфат, Затем регистрируют дыхание и фосфори- лирование митохондрий полярографи- чески по известной схеме. 2 табл. (Л С