Способ определения диклофенака натрия в биологических жидкостях Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 

1

Изобретение относится к области анализа лекарственных средств, В частности определения диклофенака натрия в плазме и моче. Диклофенак натрия - Натриевая cortb о-(2,6 дихлорфенил)-аминоЗфенил) уксусной кислоты (тортовое название Вольтаре применяется для лечения заболеваний сопровождающихся воспалительным процессом (ревматизм, ревматоидный артрит и т.д.)

Цель изобретения - упрощение способа.

Цель достигается путем однократной экстракции .биологической жидкости гексаном и сокращения времени циклизации при использовании в качестве циклизирующего реагента смеси уксусного ангидрида и муравьиной кислоты.

Способ осуществляется путем экстракции диклофенака из подкисленных образцов биологической жидкости гексаном, упаривания экстрагента, обработки остатка муравьиной кислотой при нагревании на водяной бане до кипения, а затем уксусным ангидридом при соотношении муравьиная кислота - уксусга.ш ангидрид 1:3-4, нагревания 15-20 мин, нейтрализации кислоты насыщенным раствором гидро- карбоната натрия, экстракции образовавшегося летучего производного - индолинона гексаном с последующим газо-хроматографическим определением. .,

Цример 1. В2мл плазмы вводят 1 мкг диклофенака натрия в виде спиртового раствора с концентрацией 1 мкг/МП, подкисляют плазму 1 мл 4%-ной фосфорной кислоты до рН 2,0j экстрагируют 8 мл гексана, .центрифугируют в течение ГО дан при 2000 об./мин, 5 мл органического слоя y apивaют досуха на роторном испарителе, остаток растворяют в мл муравьиной кислоты при нагревании на водяной бане до кипения, через обратный холодильник добавляют 4 мл уксусного ангидрида и .продолжают нагревание в течение 15 мин. После охлаждения добавляют 5 мл насыщенного раствора натрия гидрокарбоната, экстрагируют 10 мл гексана, органи40

45

50

теле, остаток растворяют в 1 мл муравьиной кислоты при нагревании на водяной бане до кипения, через обрат- НЬ1Й холодильник добавляют 3 мл уксусного ангидрида и продолжают нагревать в течение 20 мин. После охлаждения добавляют 5 мл насьщенного раствора натрия гидрокарбоната, экстрагируют 10 мл гексана, органический слой упаривают на роторном испарителе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и 2-3 мкл раствора вводят в газовый хроматограф. Обнаружено 1,49 мкг диклофенака натрия.

Формула изобретения

Способ определения диклофенака натрия в биологических жидкостях путем экстракции органическим растворителем, добавления фосфорной кислоты

ческий слой упаривают на роторном ис- 55 до рН 2, упаривания органической фапарителе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и мкл раствора вводят в газовьш хроматограф.

зы., обработки циклизирующим реагентом, затем раствором гидрокарбоната натрия, экстракции продукта гекса --259190I

Обнаружено 0,98 мкг диклофенака натрия

Пример 2. В2мл мочи вводят 2 мкг диклофенака натрия в виде

5 спиртового раствора с концентрацией 1 мкг/мл, подкисляют мочу Г мл 4%-ной фосфорной кислоты до рН 2,0, экстрагируют 8 мл гексана, центрифугируют в течение 10 мин при 2000 об/мин,,

10 5 МП органического слоя упаривают досуха на роторном испарителе, остаток растворяют в 1 мл муравьиной кислоты при нагревании на водяной бане до кипения, через обратный

ts холодильник добавляют 3,5 мл уксусного ангидрида и продолжают нагревание в течение 17 мин. Цосле охлаждения добавляют 5 мл насьшденного раствора натрия гидрокарбоната, экстраги20 руют 10 мл гексана, органический слой упаривают на роторном испарителе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и 2-3 мкл раствора вводят в.газовьй хроматограф. Обна25 ружено 1,96 мкг диклофенака натрия,

Пример 3. В2 мл плазмы вводят 1,5 мкг диклофенака натрия в виде спиртового раствора с концентрацией 1 мкг/мл, подкисляют плазму

30 1 мл 4%-ной фосфорной кислоты до рН 2,0, экстрагируют 8 мл гексана, центрифугируют в течение 10 мин при 2000 об/мин, 5 мл органического слоя упаривают досуха на роторном испари

теле, остаток растворяют в 1 мл муавьиной кислоты при нагревании на одяной бане до кипения, через обрат- НЬ1Й холодильник добавляют 3 мл уксусного ангидрида и продолжают нагревать в течение 20 мин. После охлажения добавляют 5 мл насьщенного раствора натрия гидрокарбоната, экстрагируют 10 мл гексана, органический слой упаривают на роторном испарителе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и 2-3 мкл раствора вводят в газовый хроматограф. Обнаружено 1,49 мкг диклофенака натрия.

Формула изобретения

Способ определения диклофенака натрия в биологических жидкостях путем экстракции органическим растворителем, добавления фосфорной кислоты

до рН 2, упаривания органической фазы., обработки циклизирующим реагентом, затем раствором гидрокарбоната натрия, экстракции продукта гекса --31259190 .4

ном, упаривания и гидрохроматографи-смесь муравьиной кислоты и уксусного ческого анализа, о тли чаю -ангидрида в соотношении 1:(3-4) по щ и и с я тем, что, с целью упроще-объему, причем вначале к упаренндйу ния способа, в качестве органй еско-экстракту добавляют муравьин5по кислого растворителя на первой стадии . jту, доводят смесь до кипения а затем экстракции используют гексан, в ка-вносят з сусный ангидрид и кипятят честве циклизирующего реагента -15-20 мин.

Изобретение относится к способам ооределения дикдофенака натрия в плазме и моче. Цель изобретения - упрощение способа за счет использования гексана во время экстракции. Производят экстракцию диклофенака гексаном из биологической жидкости, Экстрагент упаривают. Остаток обрабатывают муравьиной кислотой при нагревании до кипения на водяной бане, а затем уксусным ангидридом. Кипятят 15-20 мин.- Соотношение муравьиной кислоты и уксусного ангидрида 1:3-4. Кислота нейтрализуется насьщенным раствором гидрокарбоната йатрия. Производят экстракцию индолинона гексаном. Раствор вводят в газовый хроматограф и определяют количество диклофенака натрия. С S (Л N5 СП СО