Способ диагностики степени активности воспалительного процесса Советский патент 1986 года по МПК G01N33/49 A61K39/00 

Изобретение относится к медицине, преимущественно к педиатрии, и может бить использовано в клинической практике для диагностики степени активности воспалительного процесса,

Целью изобретения является повышение точности и упрощение диагностики у детей.

Способ осуществляют следующим образом.

В пробирку размером мм и к 0,2 мл сыворотки крови (полученной из 0,5-0,8 мл периферической крови из пальца после центрифугирования 10 мин при 1500 об/мин.) добавляют 0,4 мл 0,91 М боратный буфер (рН 8,4 Тщательно перемешивают и переносят ПО 0,20 мл в две пробирки,. В одну из них приливают 2 мл 3,85 %-ного раствора полиэтиленгликоля (мол.м,6000) на 0,0 М боратном буфере. (рН 8,4), а в другую - 2 мл 0,01 М боратного буфера (контроль), Тщательно перемешивают и оставляют на 1 ч при комнатной температуре. После инкубации ifa спектрофотометре определяют оптическую плотность раствора, содержащего полиэтиленгликоль, при 450 им в кюветах с длиной оптического пути 1 см против контроля. Вычисляют разность показателей оптической плотности и результат выражают в условных единицах оптической плотности,

При увеличении величины экстинции от 0,045 до 0,095 усл. ед. диагностируют минимальную, от 0,096 до 0,2 усл.ед. - умеренную и более 0,201 усл.ед. - максимальную степень активности воспалительного процесса

Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови здорового человека.

В капилляр набирают из пальца 0,5-0,8 мл периферической крови и переносят в центрифужную пробирку. Отста ивают в течение 1 ч и центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин. Полученную сьгооротку крови в объеме 0,2 мл переносят в сухую пробирку и добавляют 0,4 мл 0,01 М боратного буфера (рН 8,2), Перемешивают и пе- реносят по 0,2 мл в две пробирки. В одну из пробирок приливают 2 мл 3,85%-ного раствора полиэтиленгликоля, в другую - 2 мл 0,01 М боратного буфера. Перемешивают и оставляют на 1 ч при комнатной температуре. Определяют на спектрофотометре оптическую плотность обоих растворов при длине волны 450 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см. Оптическая плотность смеси, содержащей сыворотку крови и раствор

полиэтиленгликоля, оказалась равной 0,012 усл.ед,, что соответствовало содержанию циркулирующих иммунных комплексов у здоровых людей.

Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови у 21 больных в возрасте от 1 мес, до 16 лет с различными заболеваниями воспалительного характера (пневмония, пиелонефрит, ревматизм и др.) позволило установить, что по мере увеличения .степени активности воспалительного процесса наблюдается более выраженное повьщ1ение уровня комплексов антиген-антитело в сыворотке крови.

В табл.1 приведены данные об уровне циркулирующих имунньгх комплексов в сыворотке Крови в зависимости от

степени активности воспалительного процесса.

Из данных табл. следует, что уровень циркулирующих иммунных комплексов более высокий при большей

.степени активности воспалительного процесса.

Коэффициент корреляции, вычисленный на основе полученных данных и отражающий степень взаимосвязи между содержанием циркулирующих иммунных комплексов и степенью активности воспалительного процесса, равен 0,84 (Р 0,001).

Таким образом, установлена зависимость: чем вьш1е содержание циркулирующих иммунных комплексов в сьшо- ротке кровИр тем выше степень активности воспалительного процесса.

Результаты оценки степени активности воспалительного процесса по содержанию циркулирующих иммунных комплексов сравнивали с критериями активности указанных заболеваний, основанных на комплексном клинико- лабораторном обследовании и включающих более 20 различных показателей.

В зависимости от содержания в сыворотке крови циркулирующих иммунных комплексов и степени активности вос

палительного процесса по комплексу показателей больные бьши распределены на 4 группы: в -ю и во 2-ю вошли больные с низким содержанием комплексов (менее 0,045 и в пределах 0,045-0,095 усл.ед.)| в 3-ю со сред нгим (0,096-0,2 усл.ед.) и в 4-ю - с высоким уровнем (выше 0,201 усл. ед.) .

Гистограмма распред ёления больны в зависимости от степени активности воспалительного процесса и уровня циркулирующих иммунных комплексов приведена в табл. 2.

Из данных, представленных в табл.2, следует, что только у 5,6% обследованных больных отмечено расхождение диагноза в определении степени активности воспалительного процесса по комплексу показателей и по уровню циркулирующих иммунных комплексов. Сравнительный анализ показал, что известный способ (определение количества ранних розеткообра зующих нейтрофилов) значительно уступает по точности диагностики предлагаемому способу. Согласно полученных результатов известный способ

у 65,3% обследованных больных не позволил определить Степень активности воспалительного процесса.

В качестве примеров использовани показателя циркулирующих иммунных комплексов для диагностики степени активности воспалительного процесса можно привести следующие наблюдения

Пример J. Ребенок Г-ко Алена, 12 лет, находилась в клинике с диагнозом ревматизма, неактивная фаза. Определение циркулирующих иммунных комплексов - 0,032 ед. эк- стинции, что свидетельствовало об отсутствии активности воспалительного процесса и согласовалось с данными клинико-лабораторного обследования .

П р.и м е р 2. Ребенок П-н Т., 11 лет, находилась в стационаре по поводу острого первичного пиелонефрита, активная стадия, активность 1 степени, без нарушения функции почек, хронического ко1 енсированного тонзиллита.

При исследовании циркулирующих иммунных комплексов показатель эк- стинции равен 0,045 ед., что соотвествовало минимальной степени активности воспалительного процесса. Полученные результаты определения иммунных комплексов согласовались с результатами клинико-лабораторного

обследования - у ребенка диагностирована минимальная степень активности воспалительного процесса.

Пример 3. Ребенок Л-ко Александр, 9 лет, находился в клинике с диагнозом хронического вторичного пиелонефрита, гидронефроз правой почки П-Ш степени. Данные клинико-лабораторного обследования указывали на наличие у ребенка минимальной степени активности воспалительного процесса (показатели СОЭ, острофазовые реакции, результаты анализов биохимических и лабораторных). Содержание циркулирующих иммунных комплексов - 0,078 ед., соответствовало минимальной активности воспалительного процесса.

0

Пример 4, Ребенок С-ва Лена, 10 лет, находилась, в стационаре по поводу ревматизма, активная фаза, миокардит, полиартрит, активность 1 степени, острое течение, Н. Результаты комплексного клннико-ла- бораторного обследования указывали на наличие минимальной ст епени активности воспалительного процесса у ребенка. Величина экстинции составляла 0,095, что соответствовало граничному значению минимальной степени активности воспалительного процесса.

Пример 5. Ребенок Е-ва Еле5 на, 14 лет, находилась в клинике по поводу хронического вторичного пиелонефрита, нефроптоз Ш степени, активная стадия, активность П степени, без нарушения функции почек.

0 в сьшоротке крови содержание циркулирующих иммунных комплексов /0,096 ед.экстинции/ указывало на наличие у больной умеренной степени активности воспалительного процесса. После

5 клиниколабораторного обследования это было подтверждено.

Пример 6. Ребенок Н-в Александр, II мес., находился в клинике по поводу острой очаговой бронхопнев0 монии. Содержание циркулирующих иммунных комплексов - 0,154 ед.экстинции, что свидетельствовало об умеренной степени активности воспаления. Это было подтверждено результатами клинико-лабораторного обследования.

Пример 7. Ребенок Б-а Ирина, 10 лет, находилась в клинике по

поводу хронического первичного пиелонефрита, активная стадия, активность П степени, без нарушения функции почек, хронический глубокий кариес, энтеробиоз. Уровень циркулирующих иммунных комплексов - 0,2 ед.экстин- ции, соответствовал П степени активности воспалительного процесса. Комплексная клинико-лабораторная оценка степени активности воспалительного процесса позволила подтвердить наличие у больной умеренной степени воспаления.

Пример 8. Больная У-а Таня, о 12 лет, находилась в клинике с диагнозом ревматизма, активная фаза, активность Ш степени, экдомиокардит, полиартрит, острое течение, К,, Содержание циркулирующих иммунных ком- пдексов - 0,201 ед,экстинции. По результатам определения иммунных комплексов и данным клинико-лаборатор- ного обследования у ребенка установлена максимальная степень воспалительного процесса.

Пример 9, Ребенок К-ва Таня, 8 лет,- находилась в нефрологическом отделении по поводу хронического об- структивного пиелонефрита, активная

10

15

20

25

дивирующее течение, нарушение функционального состояния почек 11 степени. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (0,214 ед.экст.) указывал на наличие у больной максимальной степени воспалительного процесса и был подтвержден результатами клинико-лабораторного обследования,

Формула изобретения

Способ диагностики степени активности воспалительного процесса путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения диагностики у детей, сыворотку крови обрабатывают 3,5%-ным забуференным раствором полизтиленгликоля с мол. массой 6000 с последующим определением величины экстинции и при ее увеличении по сравнению с исходным значе- нием на 0,045-0,095 усл. ед. диагностируют минимальную степень, при увеличении на 0,096-0,20 усл. ед, - умеренную степень и при увеличении на 0,201 и более уел, ед. - макси-.

мапьную степень активности воспали- ,стадия, активность Ш степени, реци- 30 -тельного процесса.

Таблица 1

П 44 0,033+0,006 0,053-fO,01 Очаговая бронхопневмония

8

П 36

0,027+0,005 0,049+0,008 ,01 0,25+0,08

Острый пиелонефритП 4713

0,038+0,005

Хронический пиело- .нефрит12

П 86

0,041+0,004

дивирующее течение, нарушение функционального состояния почек 11 степени. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (0,214 ед.экст.) указывал на наличие у больной максимальной степени воспалительного процесса и был подтвержден результатами клинико-лабораторного обследования,

Формула изобретения

Способ диагностики степени активности воспалительного процесса путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения диагностики у детей, сыворотку крови обрабатывают 3,5%-ным забуференным раствором полизтиленгликоля с мол. массой 6000 с последующим определением величины экстинции и при ее увеличении по сравнению с исходным значе- нием на 0,045-0,095 усл. ед. диагностируют минимальную степень, при увеличении на 0,096-0,20 усл. ед, - умеренную степень и при увеличении на 0,201 и более уел, ед. - макси-.

0,13+0,02 0,57+0,08

10

12

8 . 1313

0,068+0,,080,16+0,030,26+0,06

352217

0,062+0,010,12+0,0080,24+0,03

Клинико-лаборатор- ная ремиссия

Минимальная

Умеренная

Максимальная

Редактор А.Шандор

Составитель П.Бонарцев Техред и.Попович

6826/40

Тираж 778 ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий П3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

Таблица2

2 53

2

1

2 41

КорректорМ. Максимишинец

Подписное

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для диагностики степени активности воспалительного процесса. Цель изобретения - повышение точности и упрощение диагностики у детей. Для этого к сыворотке, взятой на анализ периферической крови после центрифугации, добавляют 0,01 М боратный буфер (рН 8,4). Перемешивают, переносят в две пробирки. В одну приливают забуференный 3,5%-ный раствор полиэтиленгликоля (рН 8,4)с мол.м.6000, в другую - 0,01 М боратный буфер (контроль). После инкубации на спектрофотометре определяют оптическую плотность раств-ора, содержащего полиэтиленгли- коль, при 450 нм в кюветах с длиной оптического пути 1 см. против контроля. Вычисляют разность показателей оптической плотности и результат выражают в условных единицах. При увеличении экстинции на 0,045 - 0,095 усл.ед. диагностируют минимальную, на 0,096 - 0,2 усл.ед. - умеренную, на 0,201 усл.ед. и более максимальную степень активности воспалительного процесса. 2 табл. S (Л 00